АДЕНОЗИНОВОЕ ПРОИЗВОДНОЕ И ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ, СОДЕРЖАЩАЯ ЕГО Российский патент 2024 года по МПК C07H19/167 C07H19/24 A61K31/7076 A61K9/00 A61P31/18 

ПЕРЕКРЕСТНАЯ ССЫЛКА НА РОДСТВЕННУЮ ЗАЯВКУ

[0001] В данной заявке испрашивается приоритет в соответствии с 35 U.S.C. § 119(e) в соответствии с предварительной заявкой на патент США № 62/879414, поданной 27 июля 2019 г., содержание которой включено в настоящий документ посредством ссылки.

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ

[0002] Данное раскрытие относится к пролекарствам аденозинового производного, которые могут ингибировать обратную транскриптазу. Данное раскрытие также относится к фармацевтическим композициям, содержащим пролекарство аденозинового производного, которое может быть использовано для лечения синдрома приобретенного иммунодефицита (СПИД), ВИЧ-1, ВИЧ-2, ВИЧ с множественной лекарственной резистентностью или их комбинации.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

[0003] Ретровирусы, такие как вирус иммунодефицита человека (ВИЧ), были связаны с иммуносупрессивным заболеванием, известным как синдром приобретенного иммунодефицита (СПИД). Известно, что множественные штаммы ретровируса, такие как ВИЧ 1 типа (ВИЧ-1) и 2 типа (ВИЧ-2), связаны с заболеваниями. Индивидуумы, инфицированные ретровирусом ВИЧ, могут быть сначала бессимптомными, а затем развивается СПИД-ассоциированный комплекс (САК) с последующим СПИДом. Репликация ВИЧ клеткой-хозяином требует интеграции вирусного генома в ДНК клеток-хозяев. Ключевой этап процесса включает транскрипцию вирусного генома РНК в ДНК при помощи фермента, известного как обратная транскриптаза (ОТ).

[0004] Обратная транскриптаза, как правило, может иметь множество ферментативных функций, которые могут действовать (1) как РНК-зависимая ДНК-полимераза, транскрибирующая копию однонитевой ДНК вирусной РНК (первая ДНК), (2) как рибонуклеаза, разрушающая исходную вирусную РНК и освобождающая ДНК, только образованную из исходной РНК, и (3) как ДНК-зависимая ДНК-полимераза, образующая вторую, комплементарную нить ДНК с использованием первой нити ДНК в виде шаблона. Две цепи ДНК затем образуют двунитевую ДНК, которая интегрирована в геном леток-хозяев при помощи фермента интегразы.

[0005] Некоторое число соединений может ингибировать активность обратной транскриптазы (ОТ). Такие соединения могут быть применимы для лечения ВИЧ-инфекции у людей ингибированием репликации ВИЧ в инфицированных клетках или у индивидуумов. Примеры соединений, одобренных для применения при лечении ВИЧ-инфекции и СПИДа, включают нуклеозидные ингибиторы обратной транскриптазы (НИОТ), такие как 3'-азидо-3'-дезокситимидин (AZT, также известный как зидовудин (ZDV), азидотимидин (AZT)), 2',3'-дидезоксиинозин (ddl), 2',3'-дидезоксицитидин (ddC), d4T, 3TC, абакавир, эмтрицитабин и тенофовира дизопроксил фумарат, а также ненуклеозидные ингибиторы обратной транскриптазы (ННИОТ), такие как невирапин, делавирдин, эфавиренз, рилпивирин и доравирин (рекомендации министерства здравоохранения и социального обеспечения: https://aidsinfo.nih.gov/understanding-hiv-aids, Iyidogan & Anderson, Viruses, 6, 4095-4139, 2014, doi:10.3390/v6104095; Hayakawa et al., Antiviral Chem & Chemotherapy, 15:169-187, 2004; Ohrul et al., J. Med. Chem. 43, 4516-4525, 2000; Pauwels, Antiviral Research, 71, 77-89, 2006.).

[0006] Аденозиновое производное EFdA (4’-этинил-2-фтор-2’-дезоксиаденозин, также известное как MK-8591, ислатравир) представляет собой НИОТ длительного действия (ДД), которые, как было показано, обладают анти-ВИЧ активностью путем ингибирования обратной транскриптазы предотвращением транслокации (патенты США №№: 7339053, 7625877, 8039614. Singh et al., Pharmaceuticals, 12, 62, 2019, DOI: 10.3390/ph12020062, каждый из которых полностью включен в данный документ посредством ссылки). Это соединение обладает широкой ингибиторной активностью и эффективностью для различных подтипов и мутаций, включая ВИЧ-1, ВИЧ-2 и штаммы с множественной лекарственной устойчивостью (МЛУ) и дикого типа (ДТ), и вирусов, устойчивых к ингибитору обратной транскриптазы (ОТИ). Некоторые модифицированные EFdA и пролекарства были описаны в публикации патента США № 2018/0002366, полностью включенной в данный документ посредством ссылки.

[0007] Распространенной проблемой, возникающей в результате лечения ВИЧ-инфекции анти-ретровирусными ингибиторными соединениями, является резистентность вирусов к ингибиторам. Такая резистентность обычно является результатом мутаций, которые возникают в сегменте обратной транскриптазы гена pol . Дальнейшее применение противовирусных соединений, таких как ингибиторные соединения, для предупреждения ВИЧ-инфекции будет неизбежно приводить к возникновению новых резистентных штаммов ВИЧ. Таким образом, существует постоянная потребность в новых ингибиторах ОТ, которые являются эффективными по отношению к штаммам ВИЧ, включая штаммы мутантного ВИЧ и ВИЧ с множественной лекарственной резистентностью.

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[0008] Данное раскрытие относится к аденозиновым производным и их композициям, которые могут быть использованы для лечения ретровирусных заболеваний, таких как ВИЧ и СПИД.

[0009] В некоторых вариантах осуществления данное раскрытие относится к аденозиновому производному или его стереоизомеру, фармацевтически приемлемой соли, таутомеру или сольвату, характеризующемуся формулой (1):

(1),

где

R¹, R1’ и R² каждый независимо представляет собой -H, -C(O)N(R³)(R^3’), -C(O)OR⁴, -R⁵, -L¹-R⁵или -Z-L⁴-R⁵, где по меньшей мере один из R¹ и R² не представляет собой -H;

R³, R^3’ и R⁴ каждый независимо представляет собой -H, C1-C10 алкил, C2-C10 алкенил, C3-C10 циклоалкил, 3-10-членный гетероциклоалкил, арил или гетероарил;

R⁵ представляет собой:

;

R⁶ представляет собой -H, C1-C10 алкил, C2-C10 алкенил, C3-C10 циклоалкил, 3-10-членный гетероциклоалкил, арил или гетероарил;

-L¹-R⁵ представляет собой -(C1-C10 алкилен)-N(R⁷)-R⁵, -(C1-C10 алкилен)-O-R⁵, -(C1-C10 алкилен)-S-R⁵, -(C2-C10 алкенилен)-N(R⁷)-R⁵, -(C2-C10 алкенилен)-O-R⁵, -(C2-C10 алкенилен)-S-R⁵, -C(O)O-R⁵, -C(O)O-L²-N(R⁷)-R⁵, -C(O)O-L²-O-R⁵, -C(O)O-L²-S-R⁵, -C(O)O-L²-C(O)O-R⁵, -C(O)O-L²-C(O)N(R⁷)-R⁵, -C(O)O-L²-C(O)N(R⁷)-L³-N(R⁷)-R⁵, -C(O)O-L²-C(O)N(R⁷)-L³-O-R⁵, -C(O)O-L²-C(O)N(R⁷)-L³-S-R⁵, -C(O)N(R⁷)-R⁵, -C(O)N(R⁷)-L²-N(R⁷)-R⁵, -C(O)N(R⁷)-L²-O-R⁵, -C(O)N(R⁷)-L²-S-R⁵, -C(O)N(R⁷)-L²-C(O)O-R⁵, -C(O)N(R⁷)-L²-C(O)N(R⁸)-R⁵-, -C(O)N(R⁷)-L²-C(O)N(R⁸)-L³-N(R⁷)-R⁵, -C(O)O-L²-N(R⁷)C(O)O-R⁵, -C(O)N(R⁸)-L²-N(R⁷)C(O)O-R⁵, -C(O)O-L²-N(R⁷)C(O)N(R⁸)-R⁵, -C(O)N(R⁷)-L²-N(R⁷)C(O)N(R⁸)-R⁵, -C(O)N(R⁷)-L²-C(O)N(R⁸)-L³-O-R⁵ или -C(O)N(R⁷)-L²-C(O)N(R⁸)- L³-S-R⁵;

-Z- представляет собой двухвалентный -C(O)-, -C(O)O- или -C(O)N(R⁷)-;

-L⁴-R⁵ представляет собой -(C1-C10 алкилен)-N(R⁷)-R⁵, -(C1-C10 алкилен)-O-R⁵, -(C1-C10 алкил)-S-R⁵, -(C2-C10 алкенилен)-N(R⁷)-R⁵, -(C2-C10 алкенилен)-O-R⁵ или -(C2-C10 алкенилен)-S-R⁵;

R⁷, R⁸ и R⁹ каждый независимо представляет собой -H, C1-C10 алкил или C2-C10 алкенил;

L² и L³ каждый представляет собой -(C1-C10 алкилен)- или -(C2-C10 алкенилен)-; и

X представляет собой атом галогена.

[00010] В некоторых вариантах осуществления аденозиновое производное выбрано из группы, состоящей из:

формула (2-A):

,

формула (3-A):

,

формула (4-A):

,

формула (5-A):

,

формула (6-A):

,

формула (7-A):

,

формула (8-A):

,

формула (4-C):

,

или его стереоизомера, фармацевтически приемлемой соли, таутомера или сольвата.

[00011] В некоторых вариантах осуществления формулы (1) аденозиновое производное включает R¹, R^1’, R² или структуру, выбранную из формул 9-24:

[00012] Данное раскрытие дополнительно относится к фармацевтической композиции, содержащей одно или более аденозиновых производных, фармацевтически приемлемых солей, стереоизомеров или их комбинацию, раскрытых в данном изобретении, и один или более фармацевтически приемлемых носителей.

[00013] Данное раскрытие также относится к способу лечения заболевания (например, синдрома приобретенного иммунодефицита (СПИД) или вируса иммунодефицита человека (ВИЧ)), способ включает введение нуждающемуся в этом субъекту эффективной дозы фармацевтической композиции, содержащей одно или более аденозиновых производных, раскрытых в данном изобретении.

[00014] Данное раскрытие также относится к способу предупреждения инфекции, способ включает введение нуждающемуся в этом субъекту эффективной дозы фармацевтической композиции, содержащей одно или более аденозиновых производных, раскрытых в данном изобретении.

ВКЛЮЧЕНИЕ ПОСРЕДСТВОМ ССЫЛКИ

[00015] Все публикации, патенты и заявки на патент, упомянутые в данном описании, включены в данный документ посредством ссылки в той же степени, как если бы каждая отдельная публикация, патент или заявка на патент были конкретно и отдельно указаны для включения посредством ссылки.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ

[00016] На фиг. 1A - фиг. 1I показаны иллюстративные химические структуры аденозиновых производных, содержащих атом галогена, с формулами (1) - (8) и 4-B.

[00017] На фиг. 2A - фиг. 2I показаны иллюстративные химические структуры аденозиновых производных, содержащих атом фтора, с формулами (1-A) - (8-A) и 4-C.

[00018] На фиг. 3A - фиг. 3J показаны иллюстративные химические структуры -R⁵, -L¹-R⁵ или -Z-L⁴-R⁵ групп аденозиновых производных с формулами (9) - (18).

[00019] На фиг. 4A - фиг. 4F показаны иллюстративные химические структуры -L¹-R⁵ или -Z-L⁴-R⁵ групп аденозиновых производных с формулами (19) - (24).

[00020] На фиг. 5A - фиг. 5B показаны иллюстративные химические структуры 4’-этинил-2-галоген-2’-дезоксиаденозина (фиг. 5A, формула (T-1)) и 4’-этинил-2-фтор-2’-дезоксиаденозина (EFdA) (фиг. 5B, формула (T-1A)).

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[00021] Далее представлены более подробные описания различных концепций, связанных с, и вариантов осуществления способов и устройств согласно данному раскрытию. Следует понимать, что различные аспекты объекта изобретения, представленные выше и обсуждаемые более подробно ниже, могут быть реализованы любым из множества способов, поскольку объект изобретения не ограничен любым конкретным способом реализации. Примеры конкретных реализаций и применений в первую очередь представлены в иллюстративных целях.

[00022] Используемый в данном изобретении термин «алкил» или «алкильная группа» относится к полностью насыщенной, прямой или разветвленной углеводородной цепи, имеющей от одного до двенадцати атомов углерода, и которая присоединена к остальной части молекулы одинарной связью. Включены алкилы, содержащие любое число атомов углерода от 1 до 12. Алкил, содержащий до 12 атомов углерода, представляет собой С₁-C₁₂ алкил, алкил, содержащий до 10 атомов углерода, представляет собой С₁-C₁₀ алкил, алкил, содержащий до 6 атомов углерода, представляет собой С₁-C₆ алкил, и алкил, содержащий до 5 атомов углерода, представляет собой С₁-C₅ алкил. C₁-C₅ алкил включает C₅ алкилы, C₄ алкилы, C₃ алкилы, C₂ алкилы и C₁ алкил (т. e., метил). C₁-C₆ алкил включает все фрагменты, описанные выше для C₁-C₅ алкилов, но также включает C₆ алкилы. C₁-C₁₀ алкил включает все фрагменты, описанные выше для C₁-C₅ алкилов и C₁-C₆ алкилов, но также включает C₇, C₈, C₉ и C₁₀ алкилы. Аналогично, C₁-C₁₂ алкил включает все вышеуказанные фрагменты, но также включает C₁₁ и C₁₂ алкилы. Неограничивающие примеры C₁-C₁₂ алкила включают метил, этил, н-пропил, изопропил, втор-пропил, н-бутил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил, н-пентил, трет-амил, н-гексил, н-гептил, н-октил, н-нонил, н-децил, н-ундецил и н-додецил. Если в описании специально не указано иное, то алкильная группа может быть необязательно замещенной.

[00023] Используемый в данном изобретении термин «алкилен» или «алкиленовая цепь» относится к полностью насыщенному радикалу с прямой или разветвленной двухвалентной углеводородной цепью и имеющему от одного до двенадцати атомов углерода. Неограничивающие примеры C₁-C₁₂ алкилена включают метилен, этилен, пропилен, н-бутилен и тому подобное. Алкиленовая цепь присоединена к остальной части молекулы посредством одинарной связи и к радикальной группе (например, описанной в данном документе) посредством одинарной связи. Точки присоединения алкиленовой цепи к остальной части молекулы и к радикальной группе могут быть на одном атоме углерода или на любых двух атомах углерода в цепи. Если в описании специально не указано иное, то алкиленовая цепь может быть необязательно замещенной.

[00024] Используемый в данном изобретении термин «алкенил» или «алкенильная группа» относится к алифатическому углеводородному радикалу с линейной или разветвленной цепью, содержащему по меньшей мере одну двойную связь углерод-углерод и имеющему некоторое количество атомов углерода в конкретном диапазоне. Например, «C2-C10 алкенил» (или «C₂-C₁₀ алкенил») относится к любому из алкенила, имеющему от 2 до 10 атомов углерода, который является линейным или разветвленным, или изомерам. В другом примере C2-C6 алкенил может иметь 1-бутенил, 2-бутенил, 3-бутенил, изобутенил, 1-пропенил, 2-пропенил и этенил (или винил). Точки присоединения алкиленовой цепи к остальной части молекулы и к радикальной группе могут быть на одном атоме углерода или на любых двух атомах углерода в цепи. Если в описании специально не указано иное, то алкиленовая цепь может быть необязательно замещенной.

[00025] Используемый в данном изобретении термин «алкенилен» или «алкениленовая цепь» относится к ненасыщенному радикалу с прямой или разветвленной двухвалентной углеводородной цепью, имеющему один или более олефинов и от двух до двенадцати атомов углерода. Неограничивающие примеры C₂-C₁₂ алкенилена включают этенилен, пропенилен, н-бутенилен и тому подобное. Алкениленовая цепь присоединена к остальной части молекулы посредством одинарной связи и к радикальной группе (например, описанным в данном документе) посредством одинарной связи. Точки присоединения алкениленовой цепи к остальной части молекулы и к радикальной группе могут быть на одном атоме углерода или на любых двух атомах углерода в цепи. Если в описании специально не указано иное, то алкениленовая цепь может быть необязательно замещенной.

[00026] Используемый в данном документе термин«циклоалкил» относится к стабильному неароматическому моноциклическому или полициклическому полностью насыщенному углеводороду, состоящему только из атомов углерода и водорода, который может включать конденсированные или мостиковые кольцевые системы, содержащему от трех до двадцати атомов углерода (например, содержащему от трех до десяти атомов углерода), и который присоединен к остальной части молекулы одинарной связью. Моноциклические циклоалкилы включают, например, циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил и циклооктил. Полициклические циклоалкилы включают, например, адамантил, норборнил, декалинил, 7,7-диметилбицикло[2.2.1]гептанил и т. п. В некоторых вариантах осуществления «циклоалкил» относится к любому моноциклическому кольцу алкана, содержащему некоторое число атомов углерода в конкретном диапазоне. Например, «C3-C10 циклоалкил» (или «C₃-C₁₀ циклоалкил») относится к моноциклическому кольцу алкана, содержащему от 3 до 10 атомов углерода, такому как циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил и циклогептил. Если в описании специально не указано иное, то циклоалкильная группа может быть необязательно замещенной.

[00027] Используемый в настоящем описании термин «гетероциклоалкил», «гетероциклическое кольцо» или «гетероцикл» относится к насыщенному или частично насыщенному 3-20-членному кольцу, которое состоит из от двух до девятнадцати атомов углерода и от одного до шести гетероатомов, выбранных из группы, состоящей из азота, кислорода и серы, и которое присоединено к остальной части молекулы одинарной связью. Если в описании специально не указано иное, гетероциклоалкил может быть моноциклической, бициклической, трициклической или тетрациклической кольцевой системой, которая может включать конденсированные или мостиковые кольцевые системы; и атомы азота, углерода или серы в гетероциклоалкиле могут быть необязательно окислены, например, с образованием N-оксида, сульфоксида или сульфона, и/или атом азота может быть необязательно кватернизован, например, с образованием четвертичного аммониевого катиона. Примеры таких гетероциклоалкилов включают, но не ограничиваются этим, диоксоланил, тиенил[1,3]дитианил, декагидроизохинолил, имидазолинил, имидазолидинил, изотиазолидинил, изоксазолидинил, морфолинил, октагидроиндолил, октагидроизоиндолил, 2‑оксопиперазинил, 2‑оксопиперидинил, 2‑оксопирролидинил, оксазолидинил, пиперидинил, пиперазинил, 4‑пиперидонил, пирролидинил, пиразолидинил, хинуклидинил, тиазолидинил, тетрагидрофурил, тритианил, тетрагидропиранил, тиоморфолинил, 1‑оксотиоморфолинил и 1,1‑диоксотиоморфолинил. В некоторых вариантах осуществления «3-10-членный гетероциклоалкил» относится к циклоалкилу, содержащему один или более гетероатомов, выбранных из группы, состоящей из N, O и S. В некоторых вариантах осуществления «гетероциклоалкил», «гетероциклическое кольцо» или «гетероцикл» относится к 3-10-членной кольцевой структуре, содержащей атомы углерода и один или более гетероатомов, выбранных из N, O, S, или их комбинации в виде членов кольцевой структуры. Если в описании специально не указано иное, то гетероциклоалкильная группа может быть необязательно замещенной, и включает насыщенные и/или ненасыщенные кольца.

[00028] Используемый в настоящем описании термин «галоген» (или «гало») относится к фтору, хлору, брому и йоду (альтернативно называемые фтор (-F), хлор (-Cl), бром (-Br) и йод (-I)).

[00029] Используемый в данном документе термин «арил» относится к углеводородной кольцевой системе, содержащей водород, от 6 до 18 атомов углерода и по меньшей мере одно ароматическое кольцо, и которая присоединена к остальной части молекулы одинарной связью. Для целей настоящего раскрытия арил может быть моноциклической, бициклической, трициклической или тетрациклической кольцевой системой, которая может содержать конденсированные или мостиковые кольцевые системы. Арилы включают, но не ограничиваются этим, арилы, полученные из ацеантрилена, аценафтилена, ацефенантрилена, антрацена, азулена, бензола, хризена, флуорантена, флуорена, ассим-индацена, симм-индацена, индана, индена, нафталина, феналена , фенантрена, плеядена, пирена и трифенилена. В некоторых вариантах осуществления «арил» относится к фенилу или одной или более конденсированным циклическим углеводородным кольцевым системам, в которых по меньшей мере одно кольцо является ароматическим. Если в описании специально не указано иное, то «арил» может быть необязательно замещен.

[00030] Используемый в данном документе термин «гетероарил» относится к 5-20-членной кольцевой системе, содержащей атомы водорода, от одного до девятнадцати атомов углерода, от одного до шести гетероатомов, выбранных из группы, состоящей из азота, кислорода и серы, по меньшей мере одного ароматического кольца, и которая присоединена к остальной части молекулы одинарной связью. В целях данного раскрытия, гетероарил может быть моноциклической, бициклической, трициклической или тетрациклической кольцевой системой, которая может включать конденсированные или мостиковые кольцевые системы; и атомы азота, углерода или серы в гетероариле могут быть необязательно окислены, например, с образованием N-оксида, сульфоксида или сульфона, и/или атом азота может быть необязательно кватернизован, например, с образованием четвертичного аммониевого катиона. Неограничивающие примеры гетероарилов могут включать пиридил, пирролил, пиразинил, пиримидинил, пиридазинил, триазинил, тиенил, фуранил, имидазолил, пиразолил, триазолил триазолил (т. e., 1,2,3-триазолил или 1,2,4-триазолил), тетразолил, оксазолил, изоксазолил, оксадиазолил (т. e., 1,2,3-, 1,2,4-, 1,2,5-(фуразанил) или 1,3,4-изомер), оксатриазолил, тиазолил, изотиазолил и тиадиазолил. Подходящие 9- и 10-членные гетеробициклические, конденсированные кольцевые системы включают, например, бензофуранил, индолил, индазолил, нафтиридинил, изобензофуранил, бензопиперидинил, бензизоксазолил, бензоксазолил, хроменил, хинолинил, изохинолинил, циннолинил, хиназолинил, тетрагидрохинолинил, тетрагидроизохинолинил, изоиндолил, бензодиоксолил, бензопиперидинил, бензизоксазолил, бензоксазолил, хроманил, изохроманил, бензотиенил, бензофуранил, имидазо[1,2-a]пиридинил, бензотриазолил, дигидроиндолил, дигидроизоиндолил, индазолил, индолинил, изоиндолинил, хиноксалинил, хиназолинил, 2,3-дигидробензофуранил и 2,3-дигидробензо-1,4-диоксинил. Если в описании специально не указано иное, то гетероарильная группа может быть необязательно замещенной.

[00031] Является понятным, что, если прямо не указано иное в конкретном контексте, любое из различных циклических колец и кольцевых систем, описанных в данном изобретении, может быть присоединено к остальной части соединения при любом кольцевом атоме (т. e., любом атоме углерода или любом гетероатоме), при условии, что присоединение было химически допустимым.

[00032] Используемый в данном описании термин «замещенный» означает любую из групп, описанных в данном изобретении (например, алкильную, алкенильную, алкинильную, алкоксильную, арильную, аралкильную, карбоциклильную, циклоалкильную, циклоалкенильную, циклоалкинильную, галогеналкильную, гетероциклильную и/или гетероарильную), где по меньшей мере один атом водорода заменен связью с неводородными атомами, такими как, помимо прочего: атом галогена, такой как F, Cl, Br и I; атом кислорода в таких группах, как гидроксильные группы, алкоксигруппы и сложноэфирные группы; атом серы в таких группах, как тиольные группы, тиоалкильные группы, сульфоновые группы, сульфонильные группы и сульфоксидные группы; атом азота в группах, таких как амины, амиды, алкиламины, диалкиламины, ариламины, алкилариламины, диариламины, N-оксиды, имиды и енамины; атом кремния в таких группах, как триалкилсилильные группы, диалкиларилсилильные группы, алкилдиарилсилильные группы и триарилсилильные группы; и другие гетероатомы в различных других группах. «Замещенная» означает также любую из представленных выше групп, в которой один или более атомов водорода заменены связью более высокого порядка (например, двойной или тройной связью) с гетероатомом, таким как кислород в оксо, карбонильных, карбоксильных и сложноэфирных группах; и азот в таких группах как имины, оксимы, гидразоны и нитрилы. Например, «замещенный» включает любую из вышеуказанных групп, в которых один или более атомов водорода заменены -NR_gR_h, -NR_gC(=O)R_h, -NR_gC(=O)NR_gR_h, -NR_gC(=O)OR_h, -NR_gSO₂R_h, -OC(=O)NR_gR_h, -OR_g, -SR_g, -SOR_g, -SO₂R_g, -OSO₂R_g, -SO₂OR_g, =NSO₂R_gи -SO₂NR_gR_h. «Замещенный» также означает любую из вышеуказанных групп, в которой один или более атомов водород заменены -C(=O)R_g, -C(=O)OR_g, -C(=O)NR_gR_h, -CH₂SO₂R_g, -CH₂SO₂NR_gR_h. В вышеизложенном R_g и R_h являются одинаковыми или разными и независимо представляют собой водород, алкил, алкенил, алкинил, алкокси, алкиламино, тиоалкил, арил, aралкил, циклоалкил, циклоалкенил, циклоалкинил, циклоалкилалкил, галогеналкил, галогеналкенил, галогеналкинил, гетероциклил, N-гетероциклил, гетероциклилалкил, гетероарил, N-гетероарил и/или гетероарилалкил. «Замещенный» далее означает любую из вышеуказанных групп, в которой один или более атомов водорода заменены связью с амино, циано, гидроксильной, имино, нитро, оксо, тиоксo, галогеновой, алкильной, алкенильной, алкинильной, алкокси, алкиламино, тиоалкильной, арильной, aралкильной, циклоалкильной, циклоалкенильной, циклоалкинильной, циклоалкилалкильной, галогеналкильной, галогеналкенильной, галогеналкинильной, гетероциклильной, N-гетероциклильной, гетероциклилалкильной, гетероарильной, N-гетероарильной и/или гетероарилалкильной группой. Кроме того, каждый из вышеуказанных заместителей также может необязательно замещен одним или более из вышеуказанных заместителей.

[00033] Используемый в настоящем описании термин «изомер» относится к структурному изомеру, такому как группа или атом, расположенному в разных частях молекулы; стереоизомеру, такому как хиральные изомеры, энантиомеры, диастереомеры и цис/транс-изомеры; таутомеру, такому как аминовый изомер, иминовый изомер или их комбинация. В неограничивающих примерах аденозиновое производное по данному раскрытию может иметь аминовый изомер, иминовый изомер или их комбинацию. В другом неограничивающем примере, в случаях, если -OH заместитель допускается на гетероароматическом кольце и кето-енольная таутомерия возможна, является понятным, что заместитель действительно может присутствовать, полностью или частично, в оксо (=O) форме. Смесь изомеров также может быть подходящей. Смесь изомеров может содержать соответствующие изомеры во всех соотношениях. Соль изомера также может быть подходящей. Аденозиновое производное по данному раскрытию может содержать его изомеры, одну или более его солей, один или более сольватов, включая их гидраты, их сольватированные соли или их смесь. Абсолютная стереохимия или конфигурация изомера может быть определена рентгеновской кристаллографией, анализом спектроскопии колебательного кругового дихроизма (VCD) или их комбинацией.

[00034] Аденозиновые производные могут быть идентифицированы названиями на основе номенклатуры, рекомендованной Международным союзом теоретической и прикладной химии (ИЮПАК) или на основе нуклеозидов (номенклатура на основе нуклеозидов). Аденозиновые производные также могут быть идентифицированы изображениями химической структуры. Если прямо не указано иное в конкретном контексте, названия и структуры могут быть использованы взаимозаменяемо.

[00035] Любой из атомов в соединении, раскрытом в данном изобретении, может демонстрировать свои природные изотопные составы, или один или более атомов могут быть искусственно обогащены конкретным изотопом, имеющим тот же самый атомный номер, но атомную массу или массовое число, отличающиеся от атомной массы или массового числа, преимущественно встречающихся в природе. Подразумевается, что данное раскрытие включает в себя все подходящие изотопные вариации соединений, раскрытые в данном изобретении.

[00036] Соединения могут быть введены в форме фармацевтически приемлемых солей или сольватов. Термин «фармацевтически приемлемая соль» относится к соли или сольвату, что не является биологически или иным образом нежелательным (например, не является ни токсичным, ни иным образом нежелательным для его реципиента или субъекта). Смесь соединения, раскрытого в данном изобретении, и одной или более его солей или сольватов также рассматривается в данном изобретении. Иллюстративные примеры фармацевтически приемлемых солей включают, но не ограничиваются этим, сульфаты, пиросульфаты, бисульфаты, сульфиты, бисульфиты, фосфаты, моногидрофосфаты, дигидрофосфаты, метафосфаты, пирофосфаты, хлориды, бромиды, йодиды, ацетаты, пропионаты, деканоаты, каприлаты, акрилаты, формиаты, изобутираты, капроаты, гептаноаты, пропиолаты, оксалаты, малонаты, сукцинаты, субераты, себацаты, фумараты, малеаты, бутин-1,4-диоаты, гексин-1,6-диоаты, бензоаты, хлорбензоаты, метилбензоаты, динитробензоаты, гидроксибензоаты, метоксибензоаты, фталаты, сульфонаты, ксилолсульфонаты, фенилацетаты, фенилпропионаты, фенилбутираты, цитраты, лактаты, y-гидроксибутираты, гликоляты, тартраты, метансульфонаты, пропансульфонаты, нафталин-1-сульфонаты, нафталин-2-сульфонаты и манделаты.

[00037] Кроме того, соединения, раскрытые в данном изобретении, могут существовать в аморфной форме и/или одной или более кристаллических формах или их комбинации.

[00038] Термин «РНК-вирусная инфекция» относится к заболеванию, вызванному вирусом РНК, такому как простуда, грипп, SARS, COVID-19, гепатит C, гепатит E, лихорадка Западного Нила, заболеванию, вызванному вирусом Эбола, бешенству, полиомиелиту и кори.

[00039] Термин «ВИЧ-инфекция» относится к заболеванию, вызванному вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ), таким как ВИЧ-1 и ВИЧ-2. В некоторых случаях ВИЧ-инфекция может быть вызвана ВИЧ-1 дикого типа, устойчивым к НИОТ ВИЧ-1, ВИЧ-2, ВИЧ с мутациями M184V, ВИЧ с K65R или ВИЧ с множественной лекарственной резистентностью. Термин «СПИД» относится к синдрому приобретенного иммунодефицита, который вызван ВИЧ-инфекцией, и является наиболее прогрессирующей формой заболевания.

[00040] Термин «пролекарство» относится к соединению, которое может быть превращено при физиологических условиях или сольволизом в биологически активное соединение, описанное в данном изобретении. Таким образом, термин «пролекарство» относится к прекурсору биологически активного соединения, которое является фармацевтически приемлемым. Пролекарство может быть биологически неактивным или в основном неактивным соединением, которое может быть метаболизировано в организме, т. e., in vivo, с получением лекарственного средства с требуемой активностью. Термин «в основном неактивный» означает, что пролекарство может иметь от приблизительно 1% до приблизительно 10% активности соответствующего лекарственного средства, или после метаболизации in vivo процент на основе массы пролекарства. В некоторых вариантах осуществления термин «в основном неактивный» означает, что пролекарство имеет менее, чем приблизительно 5% активности соответствующего лекарственного средства, или после метаболизации in vivo процент на основе массы пролекарства. Дозы пролекарства и его биологически активного соединения считаются эквивалентными дозами, если они одинаковы по молярному количеству.

[00041] Термин «анти-ВИЧ средство», «антивирусное средство» или грамматический вариант относится к соединению, смеси одного или более соединений, составу, химическому средству или биологическому средству, такому как антитело, белок, пептиды, нуклеотид, другое биологическое соединение или их комбинацию, которые могут быть прямо или косвенно эффективными при ингибировании ВИЧ, лечении или профилактике ВИЧ-инфекции и/или лечении, профилактике или задержке начала или развития СПИДа и/или заболеваний или состояний, возникающих из них или связанных с ними, РНК-вирусной инфекции или их комбинации. Анти-ВИЧ средства могут включать противовирусные средства к ВИЧ, иммуномодуляторы, противоинфекционные препараты, вакцины или их комбинацию, применимые для лечения ВИЧ-инфекции или СПИДа. Примеры противовирусных средств для лечения ВИЧ-инфекции или СПИДа включают, но не ограничиваются этим, под соответствующими торговыми марками или зарегистрированными торговыми марками с соответствующими заказчиками, абакавир (ABC, Ziagen®), абакавир+ламивудин (Epzicom®), абакавир+ламивудин+зидовудин (Trizivir®), ампренавир (Agenerase®), атазанавир (Reyataz®), AZT (зидовудин, азидотимидин или Retrovir®), каправирин, дарунавир (Prezista®), ddC (залцитабин, дидезоксицитидин или Hivid®), ddI (диданозин, дидезоксиинозин или Videx®), ddI (покрытый энтеросолюбильной оболочкой, Videx EC®), делавирдин ( DLV или Rescriptor®), долутегравир (Tivicay®), доравирин (MK-1439), эфавиренз (EFV, Sustiva®, Stocrin®), эфавиренз+эмтрицитабин+тенофовир DF (Atripla®), EFdA (4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозин), элвитегравир, каботегравир, долутегравир, биктегравир, эмтрицитабин (FTC, Emtriva®), эмтрицитабин+тенофовир DF (Truvada®), эмвирин (Coactinon®), энфувиртид (Fuzeon®), покрытый энтеросолюбильной оболочкой диданозин (Videx EC®), этравирин (TMC-125), фозампренавир кальция (Lexiva®), индинавир (Crixivan®, ламивудин (3TC, Epivir®), ламивудин+зидовудин (Combivir®), лопинавир, лопинавир+ритонавир (Kaletra®), маравирок (Selzentry®), нелфинавир (Viracept®), невирапин (NVP, Viramune®), PPL-100 (также известный как PL-462) (Ambrilia), ралтегравир (MK-0518 или Isentress^TM), рилпивирин (Edurant®), ритонавир (Norvir®), саквинавир (Invirase® или Fortovase®), ставудин (d4T, дидегидродезокситимидин или Zerit®), тенофовир DF (DF=дизопроксилфумарат, TDF, Viread®), тенофовир (гексадецилоксипропил (CMX-157), тенофовира алафенамид фумарат(GS-7340), типранавир (Aptivus®) и викривирок. Некоторые из анти-ВИЧ средств, показанных выше, могут быть использованы в солевой форме; например, сульфат абакавира, мезилат делавирдина, сульфат индинавира, сульфат атазанавира, мезилат нелфинавира, мезилат саквинавира или другие соли. Анти-ВИЧ средство может обладать одной или более активностями, такими как ингибитор входа (ИВ), ингибитор слияния (ИС); ингибитор интегразы (ИИ); ингибитор протеазы (ИП); нуклеозидный ингибитор обратной транскриптазы (нИОТ или НИОТ) или ненуклеозидный ингибитор обратной транскриптазы (ннИОТ или ННИОТ). Анти-ВИЧ средство может включать два или более средств, раскрытых в данном изобретении. Аденозиновое производное по данному раскрытию может быть анти-ВИЧ-средством отдельно или в комбинации с другим анти-ВИЧ средством или средствами.

[00042] Если прямо не указано иное, все диапазоны, цитируемые в данном описании, являются включительными. Например, гетероарильное кольцо, описанное как содержащее в диапазоне от «1 до 4 гетероатомов», означает кольцо, которое содержит 1, 2, 3 или 4 гетероатома. Также является понятным, что любой диапазон, цитируемый в данном описании, включает в пределах своего объема все поддиапазоны в пределах такого диапазона. Таким образом, например, предусмотрено, что гетероциклическое кольцо, описанное как содержащее от «1 до 4 гетероатомов», включает в виде его аспектов гетероциклические кольца, содержащие от 2 до 4 гетероатомов, 3 или 4 гетероатома, от 1 до 3 гетероатомов, 2 или 3 гетероатома, 1 или 2 гетероатома, 1 гетероатом, 2 гетероатома, 3 гетероатома или 4 гетероатома. В других примерах C1-C10 алкил означает алкил, содержащий 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 и 10 атомов углерода, включая все поддиапазоны. Таким образом, C1-C10 алкилом может быть метил, этил, C4 алкил, C5 алкил, C6 алкил, C7 алкил, C8 алкил, C9 алкил и C10 алкил, линейный или разветвленный. Двухвалентным C1-C10 алкилом может быть -CH₂-, -C₂H₄-, -C₃H₆-, -C₄H₈-, -C₅H₁₀-, -C₆H₁₂-, -C₇H₁₇-, -C₈H₁₈-, -C₉H₁₈- или -C₁₀H₂₀-, линейный или разветвленный. Подобным образом, C2-C10 алкенил означает алкенил, содержащий 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 и 10 атомов углерода, линейный или разветвленный, включая все поддиапазоны. Подходящим может быть линейный или разветвленный алкенил. C3-C10 циклоалкил означает циклоалкил, содержащий 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 и 10 атомов углерода, линейный или разветвленный.

[00043] Если не указано иное, открытые термины, например, «содержит», «содержащий», «включает», «включающий» и т. п. означает включающий в себя.

[00044] Формы единственного числа, используемые в данном документе, включают отсылки к множественному числу, если иное четко не следует из контекста. Соответственно, если не указано иное, числовые параметры, изложенные в данном описании, являются приблизительными, которые могут варьироваться в зависимости от желаемых свойств, которые стремятся получить с помощью данного раскрытия.

[00045] Термин «приблизительно» и его грамматические эквиваленты по отношению к контрольному числовому значению и его грамматическим эквивалентам, как используется в данном описании, может включать диапазон значений, плюс или минут 10% от значения, например, диапазон значений, плюс или минус 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2% или 1% от такого значения. Например, количество «приблизительно 10» включает количества от 9 до 11.

[00046] Фармацевтическая композиция может быть пригодной для внутривенного, внутримышечного, подкожного, парентерального, спинального или эпидермального введения (например, путем инъекции или вливания). В зависимости от пути введения активный ингредиент может быть покрыт материалом для его защиты от действия кислот и других природных условий, которые могут его инактивировать. Используемое в данном документе выражение «парентеральное введение» означает режимы введения, отличные от энтерального и местного введения, обычно посредством инъекции, и включают, без ограничения, внутривенную, внутримышечную, внутриартериальную, интратекальную, интракапсулярную, интраорбитальную, внутрисердечную, интрадермальную, внутрибрюшинную, транстрахеальную, подкожную, субкутикулярную, внутрисуставную, субкапсулярную, субарахноидальную, интраспинальную, эпидуральную и интрастернальную инъекцию и вливание. Альтернативно, фармацевтическая композиция может быть введена непарентеральным путем, таким как местный, эпидермальный или мукозальный путь введения, например, интраназально, перорально, вагинально, ректально, сублингвально или местно. Фармацевтическая композиция может быть в форме стерильных водных растворов или дисперсий. Фармацевтическая композиция также может быть составлена в виде микроэмульсии, липосомы или другой упорядоченной структуры, подходящей для высокой концентрации лекарственного средства.

[00047] В некоторых вариантах осуществления данное раскрытие относится к аденозиновому производному или его фармацевтически приемлемой соли, таутомеру или сольвату, что характеризуется формулой (1):

,

где

R¹, R1’ и R² каждый независимо представляет собой -H, -C(O)N(R³)(R^3’), -C(O)OR⁴, -R⁵, -L¹-R⁵или -Z-L⁴-R⁵, где по меньшей мере один из R¹ и R² не представляет собой -H;

R³, R^3’ и R⁴ каждый независимо представляет собой -H, C1-C10 алкил, C2-C10 алкенил, C3-C10 циклоалкил, 3-10-членный гетероциклоалкил, арил или гетероарил;

R⁵ представляет собой:

;

R⁶ представляет собой -H, C1-C10 алкил, C2-C10 алкенил, C3-C10 циклоалкил, 3-10-членный гетероциклоалкил, арил или гетероарил;

-L¹-R⁵ представляет собой -(C1-C10 алкилен)-N(R⁷)-R⁵, -(C1-C10 алкилен)-O-R⁵, -(C1-C10 алкилен)-S-R⁵, -(C2-C10 алкенилен)-N(R⁷)-R⁵, -(C2-C10 алкенилен)-O-R⁵, -(C2-C10 алкенилен)-S-R⁵, -C(O)O-R⁵, -C(O)O-L²-N(R⁷)-R⁵, -C(O)O-L²-O-R⁵, -C(O)O-L²-S-R⁵, -C(O)O-L²-C(O)O-R⁵, -C(O)O-L²-C(O)N(R⁷)-R⁵, -C(O)O-L²-C(O)N(R⁷)-L³-N(R⁷)-R⁵, -C(O)O-L²-C(O)N(R⁷)-L³-O-R⁵, -C(O)O-L²-C(O)N(R⁷)-L³-S-R⁵, -C(O)N(R⁷)-R⁵, -C(O)N(R⁷)-L²-N(R⁷)-R⁵, -C(O)N(R⁷)-L²-O-R⁵, -C(O)N(R⁷)-L²-S-R⁵, -C(O)N(R⁷)-L²-C(O)O-R⁵, -C(O)N(R⁷)-L²-C(O)N(R⁸)-R⁵-, -C(O)N(R⁷)-L²-C(O)N(R⁸)-L³-N(R⁷)-R⁵, -C(O)O-L²-N(R⁷)C(O)O-R⁵, -C(O)N(R⁸)-L²-N(R⁷)C(O)O-R⁵, -C(O)O-L²-N(R⁷)C(O)N(R⁸)-R⁵, -C(O)N(R⁷)-L²-N(R⁷)C(O)N(R⁸)-R⁵, -C(O)N(R⁷)-L²-C(O)N(R⁸)-L³-O-R⁵ или -C(O)N(R⁷)-L²-C(O)N(R⁸)- L³-S-R⁵;

-Z- представляет собой двухвалентный -C(O)-, -C(O)O- или -C(O)N(R⁷)-;

-L⁴-R⁵ представляет собой -(C1-C10 алкилен)-N(R⁷)-R⁵, -(C1-C10 алкилен)-O-R⁵, -(C1-C10 алкилен)-S-R⁵, -(C2-C10 алкенилен)-N(R⁷)-R⁵, -(C2-C10 алкенилен)-O-R⁵ или -(C2-C10 алкенилен)-S-R⁵;

R⁷, R⁸ и R⁹ каждый независимо представляет собой -H, C1-C10 алкил или C2-C10 алкенил;

L² и L³ каждый намеренно представляет собой двухвалентный -(C1-C10 алкилен)- или -(C2-C10 алкенилен)-; и

X представляет собой атом галогена.

[00048] Аденозиновое производное по данному раскрытию может быть свободной формой монофосфатной группы, дифосфатной группы, трифосфатной группы или их комбинации. В некоторых вариантах осуществления R¹, R^1’ или R² группа аденозинового производного по данному раскрытию является свободной формой монофосфатной группы, дифосфатной группы, трифосфатной группы или их комбинации. Неограничивающие примеры аденозиновых производных, содержащих атом галогена, показаны в формулах (1) - (8) и (4-B) (фиг. 1A - фиг. 1I).

[00049] В некоторых вариантах осуществления C1-C10 алкил и C2-C10 алкенил формулы (1) является линейным или разветвленным. В некоторых вариантах осуществления соединения формулы (1) содержат комбинацию C1-C10 алкильных, C2-C10 алкенильных, C3-C10 циклоалкильных, 3-10-членных гетероциклоалкильных, арильных и гетероарильных групп.

[00050] В некоторых вариантах осуществления формулы (1) R¹ представляет собой H и R² представляет собой -C(O)N(R³)(R^3’). В некоторых вариантах осуществления R¹ представляет собой -C(O)N(R³)(R^3’) и R² представляет собой H. В некоторых вариантах осуществления R³ представляет собой C1-C5 алкил или C3-C6 циклоалкил и R^3’ представляет собой H. В некоторых вариантах осуществления R³ представляет собой метил, этил или изопропил и R^3’ представляет собой H.

[00051] В некоторых вариантах осуществления формулы (1) R¹ представляет собой H и R² представляет собой -R⁵ или -L¹-R⁵. В некоторых вариантах осуществления R¹ представляет собой -L¹-R⁵ и R² представляет собой H. В некоторых вариантах осуществления -L¹-R⁵ представляет собой -C(O)N(R⁷)-L²-N(R⁷)-R⁵, -C(O)O-L²-OR⁵, -C(O)N(R⁷)-L²-N(R⁷)-C(O)O-R⁵, -C(O)O-L²-N(R⁷)-C(O)O-R^5, -C(O)N(R⁷)-L²-N(R⁸)-C(O)N(R⁸)-R⁵или -C(O)O-L²-N(R⁸)-C(O)N(R⁸)-R⁵. В некоторых вариантах осуществления R⁵ представляет собой . В некоторых вариантах осуществления R⁶ представляет собой C1-C5 алкил. В некоторых вариантах осуществления R⁶ представляет собой метил, этил или изопропил. В некоторых вариантах осуществления R⁶ представляет собой метил. В некоторых вариантах осуществления R⁷ каждый независимо представляет собой H или Me. В некоторых вариантах осуществления R⁹ представляет собой H, F или Me. В некоторых вариантах осуществления R⁹ представляет собой H. В некоторых вариантах осуществления L² представляет собой C2-C5 алкилен. В некоторых вариантах осуществления L² представляет собой этилен или пропилен. В некоторых вариантах осуществления L² представляет собой этилен.

[00052] В некоторых вариантах осуществления формулы (1) R¹ представляет собой -C(O)O-R⁵ или -R⁵ и R² представляет собой H. В некоторых вариантах осуществления R¹ представляет собой H и R² представляет собой -C(O)O-R⁵ или -R⁵. В некоторых вариантах осуществления R⁵ представляет собой . В некоторых вариантах осуществления R⁶ представляет собой C1-C5 алкил. В некоторых вариантах осуществления R⁶ представляет собой метил, этил или изопропил. В некоторых вариантах осуществления R⁶ представляет собой метил. В некоторых вариантах осуществления R⁹ представляет собой H, F или Me. В некоторых вариантах осуществления R⁹ представляет собой H.

[00053] В некоторых вариантах осуществления формулы (1) R¹ представляет собой -L¹-R⁵. В некоторых вариантах осуществления R^1’ представляет собой -H или -L¹-R⁵. В некоторых вариантах осуществления R^1’ представляет собой -H . В некоторых вариантах осуществления R^1’ представляет собой -L¹-R⁵. В некоторых вариантах осуществления R¹ представляет собой -L¹-R⁵ и R^1’ представляет собой H. В некоторых вариантах осуществления R¹ представляет собой -L¹-R⁵ и R^1’ представляет собой -L¹-R⁵. В некоторых вариантах осуществления R¹ представляет собой -L¹-R⁵, R^1’ представляет собой H и R² представляет собой H. В некоторых вариантах осуществления R¹ представляет собой -L¹-R⁵, R^1’ представляет собой -L¹-R⁵и R² представляет собой H. В некоторых вариантах осуществления -L¹-R⁵ выбран из группы, состоящей из -(C1-C10 алкилен)-N(R⁷)-R⁵, -(C1-C10 алкилен)-O-R⁵, -C(O)O-L²-N(R⁷)-R⁵, -C(O)O-L²-O-R⁵, -C(O)O-L²-C(O)O-R⁵, -C(O)O-L²-C(O)N(R⁷)-R⁵, -C(O)N(R⁷)-R⁵, -C(O)N(R⁷)-L²-N(R⁷)-R⁵, -C(O)N(R⁷)-L²-O-R⁵, -C(O)O-L²-N(R⁷)C(O)O-R⁵, -C(O)N(R⁸)-L²-N(R⁷)C(O)O-R⁵, -C(O)O-L²-N(R⁷)C(O)N(R⁸)-R⁵, -C(O)N(R⁷)-L²-N(R⁷)C(O)N(R⁸)-R⁵, -C(O)N(R⁷)-L²-C(O)O-R⁵и -C(O)N(R⁷)-L²-C(O)N(R⁸)-R⁵-. В некоторых вариантах осуществления -L¹-R⁵ выбран из группы, состоящей из -C(O)O-R⁵, -C(O)O-L²-N(R⁷)-R⁵, -C(O)O-L²-N(R⁷)C(O)O-R⁵, -C(O)N(R⁸)-L²-N(R⁷)C(O)O-R⁵, -C(O)O-L²-N(R⁷)C(O)N(R⁸)-R⁵, -C(O)N(R⁷)-L²-N(R⁷)C(O)N(R⁸)-R⁵, -C(O)N(R⁷)-L²-N(R⁷)-R⁵и -C(O)N(R⁷)-L²-C(O)N(R⁸)-R⁵-. В некоторых вариантах осуществления -L¹-R⁵ представляет собой -C(O)O-R⁵. В некоторых вариантах осуществления R² представляет собой H.

[00054] Двухвалентный линкер L¹ также может включать один или повторов той же группы или комбинацию разных групп. В некоторых вариантах осуществления L¹ включает -C(O)O- и C1-C10 алкил. В некоторых вариантах осуществления L¹ включает два или более повторов -C(O)O-. В некоторых вариантах осуществления L¹ включает два или более повторов -C(O)O(CH₂)_n-. В некоторых вариантах осуществления L¹ включает два или более повторов -C(O)N(R⁷)-. В некоторых вариантах осуществления L¹ включает два или более повторов -C(O)N(R⁷)(CH₂)_n-. В некоторых вариантах осуществления L¹ включает комбинацию -C(O)O-, C1-C10 алкила и -C(O)N(R⁷)-. В некоторых вариантах осуществления L¹ включает комбинацию -C(O)O-, -(CH₂)_n- и -C(O)N(R⁷)-. В некоторых вариантах осуществления L¹ включает комбинацию -C(O)N(R⁷)- и C1-C10 алкила. В некоторых вариантах осуществления L¹ включает два или более повторов -C(O)O(CH₂)_n-C(O)N(R⁷)-. В некоторых вариантах осуществления n представляет собой целое число от 0 до 10. В некоторых вариантах осуществления n представляет собой целое число от 1 до 3. Как известно в данной области, вышеуказанная комбинация представляет собой неограничивающие примеры, и другие химически возможные комбинации L¹ также рассматриваются в данном раскрытии.

[00055] Аденозиновое производное по настоящему раскрытию может содержать один или более их изомеров. Изомер может содержать хиральный изомер, также известный как стереоизомер, который содержит один или более хиральных центров, таутомер, который может взаимодействовать путем взаимопревращения протона или другого атома, такого как аминовый изомер, иминовый изомер или их комбинацию. В примерах аденозиновое производное может содержать аминовый изомер, иминовый изомер или их комбинацию. В дополнительных примерах аденозиновое производное может содержать энантиомеры, диастереомеры и цис/транс-изомеры, таутомеры или их комбинацию. Изомер, который может иметь активность ингибитора обратной транскриптазы (ИОТ) in vivo, может быть особым образом предпочтительным.

[00056] В некоторых вариантах осуществления формулы (1) X представляет собой атом галогена, выбранный из группы, состоящей из фтора, хлора, брома и йода (альтернативно называемые фтор (F), хлор (Cl), бром (Br) и йод (I)). В некоторых вариантах осуществления X представляет собой F. В некоторых вариантах осуществления X представляет собой Cl. В некоторых вариантах осуществления X представляет собой Br.

[00057] В некоторых вариантах осуществления данное раскрытие относится к аденозиновому производному или его фармацевтически приемлемой соли, таутомеру или сольвату, что характеризуется формулой (1a):

(1a),

где R¹ и X определены выше для формулы (1).

[00058] В некоторых вариантах осуществления данное раскрытие относится к аденозиновому производному или его фармацевтически приемлемой соли, таутомеру или сольвату, что характеризуется формулой (1b):

(1b),

где R² и X определены выше для формулы (1).

[00059] В некоторых вариантах осуществления аденозиновое производное по данному раскрытию выбрано из группы, состоящей из:

формула (2):

,

формула (3):

,

формула (4):

,

формула (5):

,

формула (6):

,

формула (7):

,

формула (8):

,

формула (4-B):

или его фармацевтически приемлемой соли, таутомера или сольвата.

[00060] В некоторых вариантах осуществления X представляет собой Cl, F или Br. В некоторых вариантах осуществления X представляет собой F.

[00061] В дополнительных вариантах осуществления аденозиновое производное по данному раскрытию выбрано из группы, состоящей из:

формула (2-A):

,

формула (3-A):

,

формула (4-A):

,

формула (5-A):

,

формула (6-A):

,

формула (7-A):

,

формула (8-A):

,

формула (4-C):

,

или его стереоизомера, фармацевтически приемлемой соли, таутомера или сольвата (фиг. 2A-фиг. 2I).

[00062] В некоторых вариантах осуществления аденозиновое соединение по данному раскрытию представляет собой изомер формулы (1)-(8), формулы (1a), формулы (1b) или формулы (1-A)-(8-A). В некоторых вариантах осуществления изомер представляет собой стереоизомер, например, энантиомер или диастереомер. В некоторых вариантах осуществления изомер представляет собой ингибитор обратной транскриптазы с активностью in vivo.

[00063] Раскрытое в данном изобретении аденозиновое производное по данному раскрытию включает ((2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил)метилизопропилкарбамат, изопропил(9-((2R,4S,5R)-5-этинил-4-гидрокси-5-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-2-ил)-2-фтор-9H-пурин-6-ил)карбамат, ((2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил)метил((5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метил)карбонат, ((2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил)метилметилкарбамат, 4-(((9-((2R,4S,5R)-5-этинил-4-гидрокси-5-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-2-ил)-2-фтор-9H-пурин-6-ил)амино)метил)-5-метил-1,3-диоксол-2-он, ((2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил)метил(2-(метил((5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метил)амино)этил)карбамат, [(2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил]метил-4-[метил-[(5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метоксикарбонил]амино]бутаноат или их фармацевтически приемлемую соль.

[00064] В некоторых вариантах осуществления аденозиновое производное по данному раскрытию включает R¹, R^1’или R², каждый независимо содержащий одно или более 5-10-членных гетероциклических колец. R¹, R^1’или R² каждый независимо содержит 5-членное гетероциклическое кольцо в одном варианте осуществления, 6-членное гетероциклическое кольцо в другом варианте осуществления или 6-10-членное гетероциклическое кольцо в еще одном варианте осуществления. Гетероциклическое кольцо по данному раскрытию может иметь один или более заместителей. В некоторых вариантах осуществления 5-членное гетероциклическое кольцо содержит атомы углерода и ряд от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из группы, состоящей из N, O, S. В некоторых вариантах осуществления 5-членное гетероциклическое кольцо содержит от1 до 3 O атомов. В дополнительных вариантах осуществления R¹, R^1’или R² каждый независимо содержит 5-членное гетероциклическое кольцо формул 9-24. Еще в дополнительных вариантах осуществления аденозиновое производное по данному раскрытию содержит R¹, R^1’или R² , каждый из которых независимо содержит вышеупомянутую -R⁵, -L¹-R⁵, -Z-L⁴-R⁵ группу. В некоторых вариантах осуществления -R⁵, -L¹-R⁵, -Z-L⁴-R⁵ выбран из формул 9-24 (фиг. 3A-фиг. 3J и фиг. 4A-фиг. 4F):

[00065] В некоторых вариантах осуществления -R⁵, -L¹-R⁵, -Z-L⁴-R⁵ выбран из группы, состоящей из:

и .

[00066] В некоторых вариантах осуществления аденозиновое производное по данному раскрытию содержит R¹ и R^1’, каждый из которых представляет собой -H, -C(O)N(R³)(R^3’) или -C(O)OR⁴ , и R² , который представляет собой -C(O)N(R³)(R^3’), -C(O)OR⁴ , или одну из формул 9-24.

[00067] В другом варианте осуществления аденозиновое производное по данному раскрытию содержит R¹ и R^1’, каждый из которых представляет собой -C(O)N(R³)(R^3’) или -C(O)OR⁴ , и R² , который представляет собой -H, -C(O)N(R³)(R^3’), -C(O)OR⁴ , или одну из формул 9-24.

[00068] В еще одном варианте осуществления аденозиновое производное по данному раскрытию содержит R², который представляет собой -H, -C(O)N(R³)(R^3’) или -C(O)OR⁴ , и R¹ , который представляет собой -C(O)N(R³)(R^3’) или -C(O)OR⁴ , или одну из формул 9-24.

[00069] В еще одном варианте осуществления аденозиновое производное по данному раскрытию содержит R², который представляет собой -C(O)N(R³)(R^3’) или -C(O)OR⁴ , и R¹ , который представляет собой -H, -C(O)N(R³)(R^3’), -C(O)OR⁴ , или одну из формул 9-24.

[00070] В еще одном варианте осуществления аденозиновое производное по данному раскрытию содержит R¹ и R^1’, каждый из которых представляет собой -H, -C(O)N(R³)(R^3’), -C(O)OR⁴, -R⁵, -L¹-R⁵, -Z-L⁴-R⁵ или одну из формул 9-24, и R² , который представляет собой-C(O)N(R³)(R^3’), -C(O)OR⁴, -R⁵, -L¹-R⁵, -Z-L⁴-R⁵ или одну из формул 9-24.

[00071] В еще одном варианте осуществления аденозиновое производное по данному раскрытию содержит R¹, который представляет собой -C(O)N(R³)(R^3’), -C(O)OR⁴, -R⁵, -L¹-R⁵, -Z-L⁴-R⁵ или одну из формул 9-24, и R² , который представляет собой -H, -C(O)N(R³)(R^3’), -C(O)OR⁴, -R⁵, -L¹-R⁵, -Z-L⁴-R⁵или одну из следующих формул 9-24.

[00072] Еще в дополнительных вариантах осуществления каждый из R¹, R^1’ и R² независимо выбран из одной из формул 9-24.

[00073] Аденозиновое производное по данному раскрытию может подвергаться превращению в заданное лекарственное средство и может включать активность ингибитора обратной транскриптазы in vivo, активность терминатора синтеза цепи обратной транскриптазы in vivo, активность ингибитора транслокации ДНК in vivo или их комбинацию.

[00074] Аденозиновое производное по данному раскрытию может быть пролекарством, которое не имеет или имеет ограниченную активность в своей первоначальной форме, показанной в данном описании, и может быть метаболизированно in vivo для проявления требуемой активности заданного лекарственного средства, включая активность ингибитора обратной транскриптазы, активность терминатора синтеза цепи обратной транскриптазы, активность ингибитора транслокации ДНК или их комбинацию.

[00075] Без необходимости связывания конкретным механизмом или теорией заявители обнаружили, что аденозиновые производные по данному раскрытию могут быть метаболизированы in vivo с получением соединения или смеси соединений, подобных или таких же, что и заданное лекарственное средство 4’-этинил-2-фтор-2’-дезоксиаденозин (EFdA), которое имеет ингибитор обратной транскриптазы и другие противовирусные активности.

[00076] Как раскрыто в данном изобретении, аденозиновое производное по данному раскрытию может содержать их изомеры (например, энантиомеры, диастереомеры и/или таутомеры), одну или более их фармацевтически приемлемых солей, один или более сольватов, включая их гидраты, их сольватированные соли или их смесь.

[00077] Данное раскрытие дополнительно относится к фармацевтической композиции, содержащей аденозиновое производное, раскрытое в данном изобретении, и фармацевтически приемлемый носитель. В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция содержит аденозиновое производное, характеризующееся формулой (1):

,

где

R¹, R^1’и R² каждый независимо представляет собой -H, -C(O)N(R³)(R^3’), -C(O)OR⁴, -R⁵, -L¹-R⁵или -Z-L⁴-R⁵, где по меньшей мере один из R¹ и R² не представляет собой -H;

R³, R^3’ и R⁴ каждый независимо представляет собой -H, C1-C10 алкил, C2-C10 алкенил, C3-C10 циклоалкил, 3-10-членный гетероциклоалкил, арил или гетероарил;

R⁵ представляет собой:

;

R⁶ представляет собой -H, C1-C10 алкил, C2-C10 алкенил, C3-C10 циклоалкил, 3-10-членный гетероциклоалкил, арил или гетероарил;

-L¹-R⁵ представляет собой -(C1-C10 алкилен)-N(R⁷)-R⁵, -(C1-C10 алкилен)-O-R⁵, -(C1-C10 алкил)-S-R⁵, -(C2-C10 алкенилен)-N(R⁷)-R⁵, -(C2-C10 алкенилен)-O-R⁵, -(C2-C10 алкенилен)-S-R⁵, -C(O)O-R⁵, -C(O)O-L²-N(R⁷)-R⁵, -C(O)O-L²-O-R⁵, -C(O)O-L²-S-R⁵, -C(O)O-L²-C(O)O-R⁵, -C(O)O-L²-C(O)N(R⁷)-R⁵, -C(O)O-L²-C(O)N(R⁷)-L³-N(R⁷)-R⁵, -C(O)O-L²-C(O)N(R⁷)-L³-O-R⁵, -C(O)O-L²-C(O)N(R⁷)-L³-S-R⁵, -C(O)N(R⁷)-R⁵, -C(O)N(R⁷)-L²-N(R⁷)-R⁵, -C(O)N(R⁷)-L²-O-R⁵, -C(O)N(R⁷)-L²-S-R⁵, -C(O)N(R⁷)-L²-C(O)O-R⁵, -C(O)N(R⁷)-L²-C(O)N(R⁸)-R⁵-, -C(O)N(R⁷)-L²-C(O)N(R⁸)-L³-N(R⁷)-R⁵, -C(O)O-L²-N(R⁷)C(O)O-R⁵, -C(O)N(R⁸)-L²-N(R⁷)C(O)O-R⁵, -C(O)O-L²-N(R⁷)C(O)N(R⁸)-R⁵, -C(O)N(R⁷)-L²-N(R⁷)C(O)N(R⁸)-R⁵, -C(O)N(R⁷)-L²-C(O)N(R⁸)-L³-O-R⁵ или -C(O)N(R⁷)-L²-C(O)N(R⁸)- L³-S-R⁵;

-Z- представляет собой двухвалентный -C(O)-, -C(O)O- или -C(O)N(R⁷)-;

-L⁴-R⁵ представляет собой -(C1-C10 алкилен)-N(R⁷)-R⁵, -(C1-C10 алкилен)-O-R⁵, -(C1-C10 алкилен)-S-R⁵, -(C2-C10 алкенилен)-N(R⁷)-R⁵, -(C2-C10 алкенилен)-O-R⁵ или -(C2-C10 алкенилен)-S-R⁵;

R⁷, R⁸ и R⁹ каждый независимо представляет собой -H, C1-C10 алкил или C2-C10 алкенил;

L² и L³ каждый намеренно представляет собой двухвалентный -(C1-C10 алкилен)- или -(C2-C10 алкенилен)-; и

X представляет собой атом галогена.

[00078] Как раскрыто выше, фармацевтическая композиция по данному раскрытию, содержащая аденозиновое производное, может быть свободной формой монофосфатной группы, дифосфатной группы, трифосфатной группы или их комбинацией. В некоторых вариантах осуществления R¹ и/или R² группа раскрытого в данном изобретении аденозинового производного представляет собой свободную форму монофосфатной группы, дифосфатной группы, трифосфатной группы или их комбинацию.

[00079] В некоторых вариантах осуществления C1-C10 алкил и C2-C10 алкенил являются линейными или разветвленными. В некоторых вариантах осуществления аденозиновое производное фармацевтических композиций включает комбинацию C1-C10 алкила, C2-C10 алкенила, C3-C10 циклоалкила, 3-10-членного гетероциклоалкила, арила и гетероарила.

[00080] В некоторых вариантах осуществления фармацевтической композиции аденозиновое производное включает двухвалентный линкер L¹, который включает один или более повторов той же группы или комбинацию различных групп, как раскрыто в данном изобретении. Неограничивающие примеры линкера L¹ и других химически возможных комбинаций включают в себя такие, которые описаны выше, например, в формуле (1).

[00081] В некоторых вариантах осуществления аденозиновое производное фармацевтической композиции представляет собой изомер формулы (1)-(8), формулы (1a), формулы (1b), формулы (1-A)-(8-A), формулы (4-B) или формулы (4-C). Могут быть пригодными изомеры, описанные выше, такие как таутомеры, энантиомеры, диастереомеры, цис/транс-изомеры или их комбинация. В некоторых вариантах осуществления изомер представляет собой ингибитор обратной транскриптазы с активностью in vivo.

[00082] В некоторых вариантах осуществления X представляет собой атом галогена, выбранный из группы, состоящей из фтора, хлора, брома и йода (альтернативно называемые фтор (F), хлор (Cl), бром (Br) и йод (I)). В одном варианте осуществления X представляет собой F. В другом варианте осуществления X представляет собой Cl. В еще одном варианте осуществления X представляет собой Br. Неограничивающие примеры аденозиновых производных по данному раскрытию показаны на фиг. 1A-фиг. 1I.

[00083] В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция по данному раскрытию содержит аденозиновое производное, характеризующееся формулой, выбранной из группы, состоящей из:

формула (2):

,

формула (3):

,

формула (4):

,

формула (5):

,

формула (6):

,

формула (7):

и

формула (8):

,

формула (4-B):

,

или фармацевтически приемлемую соль, таутомер, сольват или их комбинацию.

[00084] В некоторых вариантах осуществления X представляет собой Cl, F или Br. В некоторых вариантах осуществления X представляет собой F.

[00085] В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция по данному раскрытию содержит аденозиновое производное, характеризующееся формулой, выбранной из группы, состоящей из:

формула (2-A):

,

формула (3-A):

,

формула (4-A):

,

формула (5-A):

,

формула (6-A):

,

формула (7-A):

,

формула (8-A):

,

формула (4-C):

,

его стереоизомер, его фармацевтически приемлемую соль или их комбинацию (фиг. 2A- фиг. 2I).

[00086] В некоторых вариантах осуществления аденозиновое соединение по данному раскрытию представляет собой изомер формулы (1)-(8), формулы (1a), формулы (1b), формулы (1-A)-(8-A), формулы (4-B) или формулы (4-C). В некоторых вариантах осуществления изомер представляет собой стереоизомер, например, энантиомер или диастереомер. В некоторых вариантах осуществления изомер представляет собой ингибитор обратной транскриптазы с активностью in vivo.

[00087] Как раскрыто в данном изобретении, фармацевтическая композиция по данному раскрытию содержит аденозиновое производное, выбранное из группы, состоящей из: ((2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил)метилизопропилкарбамата, изопропил(9-((2R,4S,5R)-5-этинил-4-гидрокси-5-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-2-ил)-2-фтор-9H-пурин-6-ил)карбамата, ((2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил)метил((5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метил)карбоната, ((2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил)метилметилкарбамата, 4-(((9-((2R,4S,5R)-5-этинил-4-гидрокси-5-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-2-ил)-2-фтор-9H-пурин-6-ил)амино)метил)-5-метил-1,3-диоксол-2-она, ((2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил)метил(2-(метил((5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метил)амино)этил)карбамата, [(2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил]метил-4-[метил-[(5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метоксикарбонил]амино]бутаноата и любых их фармацевтически приемлемых солей.

[00088] В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция по данному раскрытию включает аденозиновое производное, содержащее R⁵, -L¹-R⁵ или -Z-L⁴-R⁵, выбранные из формул 9-24:

[00089] В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция по данному раскрытию включает аденозиновое производное, которое содержит R¹ и R^1’, каждый из которых представляет собой -H, -C(O)N(R³)(R^3’) или -C(O)OR⁴ , и R² , который представляет собой -C(O)N(R³)(R^3’), -C(O)OR⁴ , или одну из формул 9-24.

[00090] В другом варианте осуществления фармацевтическая композиция по данному раскрытию включает аденозиновое производное, которое содержит R¹, который представляет собой -C(O)N(R³)(R^3’) или -C(O)OR⁴ , и R² , который представляет собой -H, -C(O)N(R³)(R^3’), -C(O)OR⁴ , или одну из формул 9-24.

[00091] В еще одном варианте осуществления фармацевтическая композиция по данному раскрытию включает аденозиновое производное, которое содержит R², который представляет собой -H, -C(O)N(R³)(R^3’) или -C(O)OR⁴ , и R¹ , который представляет собой -C(O)N(R³)(R^3’) или -C(O)OR⁴ , или одну из формул 9-24.

[00092] В еще одном варианте осуществления фармацевтическая композиция по данному раскрытию включает аденозиновое производное, которое содержит R², который представляет собой -C(O)N(R³)(R^3’) или -C(O)OR⁴ , и R¹ и R¹’ , каждый из которых представляет собой -H, -C(O)N(R³)(R^3’), -C(O)OR⁴ , или одну из формул 9-24.

[00093] В еще одном варианте осуществления фармацевтическая композиция по данному раскрытию включает аденозиновое производное, которое содержит R¹ и R^1’, каждый из которых представляет собой -H, -C(O)N(R³)(R^3’), -C(O)OR⁴, -R⁵, -L¹-R⁵, -Z-L⁴-R⁵ или одну из формул 9-24, и R² , который выбран из -C(O)N(R³)(R^3’), -C(O)OR⁴, -R⁵, -L¹-R⁵, -Z-L⁴-R⁵ или одной из формул 9-24.

[00094] В еще одном варианте осуществления фармацевтическая композиция по данному раскрытию включает аденозиновое производное, которое содержит R¹, которое представляет собой -C(O)N(R³)(R^3’), -C(O)OR⁴, -R⁵, -L¹-R⁵, -Z-L⁴-R⁵ или одну из формул 9-24, и R² , который выбран из -H, -C(O)N(R³)(R^3’), -C(O)OR⁴, -R⁵, -L¹-R⁵, -Z-L⁴-R⁵ или одной из формул 9-24.

[00095] В еще одном варианте осуществления фармацевтическая композиция по данному раскрытию включает аденозиновое производное, которое содержит R¹, R^1’и R², каждый независимо выбран из одной из формул 9-24.

[00096] В некоторых вариантах осуществления R³, R^3’ и R⁴ каждый независимо представляет собой -H, C1-C10 алкил, C2-C10 алкенил или C3-C10 циклоалкил. В некоторых вариантах осуществления R³, R^3’ и R⁴ каждый независимо представляет собой -H, C1-C5 алкил, C2-C5 алкенил или C3-C6 циклоалкил. В некоторых вариантах осуществления R³, R^3’ и R⁴ каждый независимо представляет собой -H или C1-C5 алкил. В некоторых вариантах осуществления C1-C5 алкил представляет собой метил, этил или изопропил. В некоторых вариантах осуществления R³, R^3’ и R⁴ каждый независимо представляет собой -H, метил или изопропил.

[00097] В некоторых вариантах осуществления R⁶ представляет собой -H, C1-C10 алкил, C2-C10 алкенил или C3-C10 циклоалкил. В некоторых вариантах осуществления R⁶ представляет собой -H, C1-C5 алкил, C2-C5 алкенил или C3-C6 циклоалкил. В некоторых вариантах осуществления R⁶ представляет собой -H, C1-C3 алкил или C2-C4 алкенил. В некоторых вариантах осуществления R⁶ выбран из группы, состоящей из -H, метила, этила, изопропила или циклопропила. В некоторых вариантах осуществления R⁶ представляет собой метил.

[00098] В некоторых вариантах осуществления R⁷ и R⁸ каждый независимо представляет собой -H, C1-C10 алкил или C3-C6 циклоалкил. В некоторых вариантах осуществления R⁷ и R⁸ каждый независимо представляет собой -H, C1-C5 алкил или C3-C6 циклоалкил. В некоторых вариантах осуществления R⁷ и R⁸ каждый независимо представляет собой -H, метил, этил, изопропил или циклопропил.

[00099] В некоторых вариантах осуществления R⁹ представляет собой -H, F, C1-C10 алкил или C2-C10 алкенил. В некоторых вариантах осуществления R⁹ представляет собой -H, F, C1-C3 алкил или C2-C4 алкенил. В некоторых вариантах осуществления R⁹ представляет собой -H, F или C1-C3 алкил. В некоторых вариантах осуществления R⁹ представляет собой -H.

[000100] Как описано, фармацевтическая композиция по данному раскрытию содержит фармацевтически приемлемый носитель.

[000101] Неограничивающие примеры фармацевтически приемлемого носителя включают фармацевтические вспомогательные вещества, поверхностно-активное вещество, эмульгатор, наполнитель, носитель, изотонирующую добавку, диспергирующее средство, модификатор вязкости, ресуспендирующее средство, буфер или их комбинацию. Фармацевтические вспомогательные вещества как правило не обладают свойствам медицинского или лекарственного активного ингредиента, также известного как активный фармацевтический ингредиент (АФИ), и как правило используются для оптимизации процесса изготовления или способа упаковки активных ингредиентов или для доставки АФИ пациенту или другому субъекту. Также могут быть подходящими фармацевтически приемлемый носитель, вспомогательные вещества или неактивные ингредиенты из базы данных неактивных ингредиентов, доступных от US FDA (https://www.fda.gov/drugs/drug-approvals-and-databases/inactive-ingredients-database-download). Также могут быть подходящими некоторые из в целом признанных безопасными (GRAS) пищевых продуктов, доступных из базы данных веществ US FDA’s GRAS (SCOGS) (https://www.fda.gov/food/generally-recognized-safe-gras/gras-substances-scogs-database).

[000102] В некоторых вариантах осуществления данного раскрытия фармацевтически приемлемый носитель включает гуммиарабик, животные масла, бензиловый спирт, бензилбензоат, стеарат кальция, карбомеры, цетостеариловый спирт, цетиловый спирт, холестерин, циклодекстрины, декстрозу, диэтаноламин, эмульгирующий воск, этиленгликольпальмитостеарат, глицерин, глицеринмоностеарат, глицеринстеарат, глицерилмоноолеат, глицерилмоностеарат, водный, гистидин, хлористоводородную кислоту, гидроксипропилцеллюлозу, гидроксипропил-β-циклодекстрин (HPBCD), гипромеллозу (гидроксипропилметилцеллюлозу (HPMC)), ланолин, ланолиновые спирты, лецитин, триглицериды со средней длиной цепи, металлсодержащие мыла, метилцеллюлозу, минеральное масло, одноосновный фосфат натрия, моноэтаноламин, олеиновую кислоту, полиэтиленгликоли (PEG 3350, PEG 4000, PEG 6000), сополимер полиоксиэтилена и полиоксипропилена (полоксамер), сложные эфиры полиоксиэтиленалкилов, полиоксиэтиленовое касторовое масло, производные полиоксиэтиленового касторового масла, сложные эфиры полиоксиэтиленсорбитана и жирных кислот, полиоксиэтиленстеараты, полисорбат, полиоксиэтилен (20) сорбитанмонолаурат (Tween 20, полисорбат 20), полиоксиэтилен (20) сорбитанмоноолеат (Tween 80, полисорбат 80), повидон, пропиленгликоля альгинат, соляной раствор, хлорид натрия, цитрат натрия, цитрат натрия дигидрат, гидроксид натрия, лаурилсульфат натрия, одноосновный фосфат натрия, двухосновный фосфат натрия, сложные эфиры сорбита, стеариновую кислоту, стеариловый спирт, подсолнечное масло, трагакант, триэтаноламин, растительные масла, воду, ксантановую камедь или их комбинации.

[000103] В дополнительных вариантах осуществления фармацевтически приемлемый носитель включает декстрозу, глицерин, гистидин, хлористоводородную кислоту, гидроксипропилцеллюлозу, гидроксипропил-β-циклодекстрин (HPBCD), гипромеллозу (гидроксипропилметилцеллюлозу (HPMC)), полиоксиэтилен (20) сорбитанмонолаурат (Tween 20, полисорбат 20), политиленгликоли (PEG 400, PEG 3350, PEG 4000, PEG 6000), сополимер полиоксиэтилена и полиоксипропилена (полоксамер188, полоксамер407), полиоксиэтилен (20) сорбитанмоноолеат (Tween 80, полисорбат 80), соляной раствор, хлорид натрия, цитрат натрия, цитрат натрия дигидрат, лаурилсульфат натрия, одноосновный фосфат натрия, двухосновный фосфат натрия или их комбинацию

[000104] Фармацевтическая композиция по данному раскрытию может дополнительно содержать эффективную дозу одного или более анти-ВИЧ средств (также называемых анти-ВИЧ средство), выбранных из абакавира, сульфата абакавира, ламивудина, ампренавира, атазанавира, сульфата атазанавира, AZT, биктегравира, каботегравира, дарунавира, дидезоксицитидина, дидезоксинозина, долутегравира, доравирина, эфавиренза, эмтрицитабина, тенофовира дизопроксила фумарата, тенофовира алафенамида, 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозина, элвитегравира, этравирина, фосампренавира кальция, индинавира, сульфата индинавира, ламивудина, лопинавира, комбинации лопинавира и ритонавира, дарунавира, комбинации дарунавира и кобицистата, маравирока, нелфинавира, мезилата нелфинавира, невирапина, PPL-100, ралтегравира, рилпивирина, ставудина, типранавира, викривирока или их комбинации.

[000105] В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция по данному раскрытию содержит аденозиновое производное, например, формулы (1)-(8), формулы (1a), формулы (1b) или формулы (1-A)-(8-A), и одно или более анти-ВИЧ средств в одном составе, которые могут быть введены субъекту вместе. Фармацевтическая композиция по данному раскрытию может содержать аденозиновое производное и одно или более анти-ВИЧ средств в отдельных составах, которые могут быть введены субъекту одновременно или последовательно. Фармацевтическая композиция по данному раскрытию также может быть смешана вместе с одним или несколькими анти-ВИЧ средствами в отдельных составах, которые могут быть введены субъекту одновременно.

[000106] Данное раскрытие дополнительно относится к способу лечения заболевания. Способ может включать введение нуждающемуся в этом субъекту эффективной дозы фармацевтической композиции, содержащей аденозиновое производное, характеризующееся формулой (1):

,

где

R¹, R^1’и R² каждый независимо представляет собой -H, -C(O)N(R³)(R^3’), -C(O)OR⁴, -R⁵, -L¹-R⁵или -Z-L⁴-R⁵, где по меньшей мере один из R¹ и R² не представляет собой -H;

R³, R^3’ и R⁴ каждый независимо представляет собой -H, C1-C10 алкил, C2-C10 алкенил, C3-C10 циклоалкил, 3-10-членный гетероциклоалкил, арил или гетероарил;

R⁵ представляет собой:

;

R⁶ представляет собой -H, C1-C10 алкил, C2-C10 алкенил, C3-C10 циклоалкил, 3-10-членный гетероциклоалкил, арил или гетероарил;

-L¹-R⁵ представляет собой -(C1-C10 алкилен)-N(R⁷)-R⁵, -(C1-C10 алкилен)-O-R⁵, -(C1-C10 алкилен)-S-R⁵, -(C2-C10 алкенилен)-N(R⁷)-R⁵, -(C2-C10 алкенилен)-O-R⁵, -(C2-C10 алкенилен)-S-R⁵, -C(O)O-R⁵, -C(O)O-L²-N(R⁷)-R⁵, -C(O)O-L²-O-R⁵, -C(O)O-L²-S-R⁵, -C(O)O-L²-C(O)O-R⁵, -C(O)O-L²-C(O)N(R⁷)-R⁵, -C(O)O-L²-C(O)N(R⁷)-L³-N(R⁷)-R⁵, -C(O)O-L²-C(O)N(R⁷)-L³-O-R⁵, -C(O)O-L²-C(O)N(R⁷)-L³-S-R⁵, -C(O)N(R⁷)-R⁵, -C(O)N(R⁷)-L²-N(R⁷)-R⁵, -C(O)N(R⁷)-L²-O-R⁵, -C(O)N(R⁷)-L²-S-R⁵, -C(O)N(R⁷)-L²-C(O)O-R⁵, -C(O)N(R⁷)-L²-C(O)N(R⁸)-R⁵-, -C(O)N(R⁷)-L²-C(O)N(R⁸)-L³-N(R⁷)-R⁵, -C(O)O-L²-N(R⁷)C(O)O-R⁵, -C(O)N(R⁸)-L²-N(R⁷)C(O)O-R⁵, -C(O)O-L²-N(R⁷)C(O)N(R⁸)-R⁵, -C(O)N(R⁷)-L²-N(R⁷)C(O)N(R⁸)-R⁵, -C(O)N(R⁷)-L²-C(O)N(R⁸)-L³-O-R⁵ или -C(O)N(R⁷)-L²-C(O)N(R⁸)- L³-S-R⁵;

-Z- представляет собой двухвалентный -C(O)-, -C(O)O- или -C(O)N(R⁷)-;

-L⁴-R⁵ представляет собой -(C1-C10 алкилен)-N(R⁷)-R⁵, -(C1-C10 алкилен)-O-R⁵, -(C1-C10 алкилен)-S-R⁵, -(C2-C10 алкенилен)-N(R⁷)-R⁵, -(C2-C10 алкенилен)-O-R⁵ или -(C2-C10 алкенилен)-S-R⁵;

R⁷, R⁸ и R⁹ каждый независимо представляет собой -H, C1-C10 алкил или C2-C10 алкенил;

L² и L³ каждый намеренно представляет собой двухвалентный -(C1-C10 алкил)- или -(C2-C10 алкенил)-; и

X представляет собой атом галогена.

[000107] Любое из вышеупомянутых аденозиновых производных (например, формула (1)-(8), формула (1a), формула (1b) или формула (1-A)-(8-A)) или фармацевтические композиции, содержащие аденозиновые производные, могут быть подходящими. X представляет собой атом галогена и может быть выбран из фтора, хлора, брома и йода (альтернативно называемые фтор (F), хлор (Cl), бром (Br) и йод (I)). В некоторых вариантах осуществления X представляет собой F. В другом варианте осуществления X представляет собой Cl. В еще одном варианте осуществления X представляет собой Br.

[000108] В некоторых вариантах осуществления способа по данному изобретению аденозиновое производное характеризуется формулой, выбранной из группы, состоящей из:

его изомером или его фармацевтически приемлемой солью.

[000109] В некоторых вариантах осуществления X представляет собой Cl, F или Br. В некоторых вариантах осуществления X представляет собой F.

[000110] В некоторых вариантах осуществления способа по данному изобретению аденозиновое производное характеризуется формулой, выбранной из группы, состоящей из:

его изомером или его фармацевтически приемлемой солью.

[000111] Как раскрыто в данном описании, способ по данному изобретению включает введение фармацевтической композиции, содержащей аденозиновое производное, где аденозиновое производное представляет собой ((2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил)метилизопропилкарбамат, изопропил(9-((2R,4S,5R)-5-этинил-4-гидрокси-5-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-2-ил)-2-фтор-9H-пурин-6-ил)карбамат, ((2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил)метил((5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метил)карбонат, ((2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил)метилметилкарбамат, 4-(((9-((2R,4S,5R)-5-этинил-4-гидрокси-5-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-2-ил)-2-фтор-9H-пурин-6-ил)амино)метил)-5-метил-1,3-диоксол-2-он или их любую фармацевтически приемлемую соль.

[000112] В способе по данному раскрытию фармацевтическую композицию вводили субъекту внутримышечной (ВМ) инъекцией, подкожной (ПК) инъекцией, внутривенной (ВВ) инъекцией, пероральным введением, местным нанесением, применением имплантата или их комбинацией. Применение имплантата может включать имплантируемое устройство или пленку, которая содержит фармацевтическую композицию, раскрытую в данном изобретении. Применение имплантата может включать вагинальное кольцо, пленку, мембрану, пластырь, другие устройства или их комбинацию.

[000113] Способ по данному раскрытию может дополнительно включать измерение образца субъекта для определения измеренного уровня заданного лекарственного средства в образце, где заданное лекарственное средство может характеризоваться формулой (T-1):

,

его изомером или его фармацевтически приемлемой солью. В некоторых вариантах осуществления X представляет собой галоген, выбранный из группы, состоящей из F, Cl, Br и I. В некоторых вариантах осуществления X представляет собой I.

[000114] В некоторых вариантах осуществления заданное лекарственное средство может характеризоваться формулой (T-1A):

,

его изомером или его фармацевтически приемлемой солью (фиг. 5A - фиг. 5B).

[000115] В некоторых вариантах осуществления заданным лекарственным средством может быть (2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-2-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-3-ол (также называется 4’-этинил-2-фтор-2’-дезоксиаденозин, EFdA) или его фармацевтически приемлемая соль.

[000116] В некоторых вариантах осуществления заданное лекарственное средство может быть продуктом разложения или метаболизированным продуктом соединения (T-1), (T-1A) или EFdA.

[000117] Образцом может быть образец крови, образец мочи, образец жидкости организма, образец ткани или их комбинация от субъекта, такого как пациент.

[000118] Измеренный уровень заданного лекарственного средства может быть определен аналитическим способом, известным специалисту данной области техники, таким как, но не ограничиваясь этим, HPLC, ГХ, МС, ГХ-МС или их комбинация.

[000119] Способ по данному раскрытию может дополнительно включать регулирование эффективной дозы с получением модифицированной эффективной дозы, если измеренный уровень заданного лекарственного средства отличается от предопределенного заданного уровня заданного лекарственного средства, и введение модифицированной эффективной дозы субъекту.

[000120] В некоторых вариантах осуществления способа по данному изобретению заболевание представляет собой синдром приобретенного иммунодефицита (СПИД), ВИЧ-1 дикого типа, устойчивый к НИОТ ВИЧ-1, ВИЧ-2, ВИЧ с мутациями M184V, ВИЧ с K65R или ВИЧ с множественной лекарственной резистентностью или РНК-вирусную инфекцию.

[000121] В некоторых вариантах осуществления способ по данному раскрытию дополнительно включает введение субъекту эффективной дозы одного или более анти-ВИЧ средств, выбранных из группы, состоящей из абакавира, сульфата абакавира, ламивудина, ампренавира, атазанавира, сульфата атазанавира, AZT, биктегравира, каботегравира, дарунавира, дидезоксицитидина, дидезоксинозина, долутегравира, доравирина, эфавиренза, эмтрицитабина, тенофовира дизопроксила фумарата, тенофовира алафенамида, 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозина, элвитегравира, этравирина, фосампренавира кальция, индинавира, сульфата индинавира, ламивудина, лопинавира, комбинации лопинавира и ритонавира, дарунавира, комбинации дарунавира и кобицистата, маравирока, нелфинавира, мезилата нелфинавира, невирапина, PPL-100, ралтегравира, рилпивирина, ставудина, типранавира и викривирока или их комбинации. Также могут быть подходящими другие анти-ВИЧ средств, идентифицированные или разработанные, или их комбинация.

[000122] Комбинации аденозинового производного по данному раскрытию (например, формулы (1)-(8), формулы (1a), формулы (1b) или формулы (1-A)-(8-A)) и одного или более анти-ВИЧ средств, описанных в данном изобретении, могут быть применимы для лечения или профилактики СПИДа или других связанных с ВИЧ симптомов. Анти-ВИЧ средство может быть использовано в таких комбинациях в своих традиционных диапазонах доз и режимах, как описано в области техники, включая, например, дозы, описанные в Physicians' Desk Reference, Thomson PDR, Thomson PDR, 57th edition (2003), the 58th edition (2004) или the 59th edition (2005) и в текущем Physicians' Desk Reference (68th ed.). (2014), Montvale, N.J.: PDR Network.

[000123] Аденозиновое производное по данному раскрытию и одно или более анти-ВИЧ средств, описанных в данном изобретении, могут быть введены субъекту вместе или отдельно путем перорального введения, парентерального введения или их комбинации. Аденозиновое производное и одно или более анти-ВИЧ средств могут быть введены субъекту с ежедневным, еженедельным, двухнедельным или ежемесячным графиком введения.

[000124] Данное раскрытие дополнительно относится к применению фармацевтической композиции для лечения заболевания у нуждающегося в этом субъекта, где заболевание представляет собой синдром приобретенного иммунодефицита (СПИД), ВИЧ-1 дикого типа, устойчивый к НИОТ ВИЧ-1, ВИЧ-2, ВИЧ с мутациями M184V, ВИЧ с K65R, ВИЧ с множественной лекарственной резистентностью или РНК-вирусную инфекцию. Может быть подходящей любая из вышеупомянутых фармацевтических композиций. Фармацевтическая композиция может быть использована вместе с одним или более анти-ВИЧ средствами для лечения заболевания, упомянутого выше. Аденозиновое производное и одно или более анти-ВИЧ средств могут быть введены субъекту вместе или отдельно путем перорального введения, парентерального введения или их комбинации. Аденозиновое производное и одно или более анти-ВИЧ средств могут быть введены субъекту с ежедневным, еженедельным, двухнедельным или ежемесячным графиком введения.

[000125] Данное раскрытие дополнительно относится к применению аденозинового производного, необязательно одного или более фармацевтически приемлемых носителей, раскрытых в данном изобретении, для изготовления медикамента для лечения заболевания, где заболевание представляет собой синдром приобретенного иммунодефицита (СПИД), ВИЧ-1 дикого типа, устойчивый к НИОТ ВИЧ-1, ВИЧ-2, ВИЧ с мутациями M184V, ВИЧ с K65R, ВИЧ с множественной лекарственной резистентностью или РНК-вирусную инфекцию. Могут быть подходящими вышеупомянутые аденозиновые производные. Могут быть подходящими вышеупомянутые фармацевтически приемлемые носители.

[000126] Данное раскрытие дополнительно относится к способу предупреждения инфекции у нуждающегося в этом субъекта, при этом способ включает введение субъекту эффективной дозы фармацевтической композиции по способу данного изобретения, раскрытому в данном описании, при котором у субъекта отсутствуют обнаруживаемые симптомы инфекции. В некоторых вариантах осуществления инфекция включает заболевание, выбранное из синдрома приобретенного иммунодефицита (СПИД), инфекции ВИЧ-1 дикого типа, устойчивого к НИОТ ВИЧ-1, ВИЧ-2, ВИЧ с мутациями M184V, ВИЧ с K65R, ВИЧ с множественной лекарственной резистентностью, РНК-вирусной инфекции или их комбинации.

[000127] Обнаруживаемые симптомы включают, но не ограничиваются этим, симптомы синдрома приобретенного иммунодефицита (СПИД), симптомы инфекции вирусов ВИЧ, включая ВИЧ-1 дикого типа, устойчивый к НИОТ ВИЧ-1, ВИЧ-2, ВИЧ с мутациями M184V, ВИЧ с K65R, ВИЧ с множественной лекарственной резистентностью или их комбинацию. Определение вирусов ВИЧ может быть проведено путем ПЦР, обратной ПЦР, иммунологического определения антигена или антитела, связанных со СПИДом или ВИЧ.

[000128] В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция по способу данного изобретения вводили указанному субъекту с ежедневным, еженедельным, двухнедельным или ежемесячным графиком введения.

[000129] В некоторых вариантах осуществления способ по данному раскрытию дополнительно включает введение субъекту эффективной дозы одного или более анти-ВИЧ средств , выбранных из абакавира, сульфата абакавира, ламивудина, ампренавира, атазанавира, сульфата атазанавира, AZT, биктегравира, каботегравира, дарунавира, дидезоксицитидина, дидезоксинозина, долутегравира, доравирина, эфавиренза, эмтрицитабина, тенофовира дизопроксила фумарата, тенофовира алафенамида, 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозина, элвитегравира, этравирина, фосампренавира кальция, индинавира, сульфата индинавира, ламивудина, лопинавира, комбинации лопинавира и ритонавира, дарунавира, комбинации дарунавира и кобицистата, маравирока, нелфинавира, мезилата нелфинавира, невирапина, PPL-100, ралтегравира, рилпивирина, ставудина, типранавира, викривирока или их комбинации. Одно или более анти-ВИЧ средств могут быть введены субъекту вместе с фармацевтической композицией по данному раскрытию или отдельно.

[000130] Не ограничиваясь какой-либо конкретной теорией, преимуществом аденозиновых производных, раскрытых в данном описании (например, формулы (1)-(8), формулы (1a), формулы (1b), формулы (1-A)-(8-A), формулы (4-B) или формулы (4-C)), является быстрое превращение в заданное лекарственное средство. Как описано ниже, более чем приблизительно 60% аденозиновых производных по данному раскрытию удивительно и неожиданно может быть превращено в заданное лекарственное средство в течение приблизительно 30 мин при контакте с плазмой человека.

[000131] Настоящее раскрытие будет проиллюстрировано в следующих неограничивающих примерах.

ПРИМЕРЫ

[000132] Данное изобретение дополнительно определено в следующих примерах. Следует понимать, что эти примеры, хотя в них и указаны предпочтительные варианты осуществления изобретения, приведены исключительно в иллюстративных целях. Из приведенного выше обсуждения и этих примеров специалист в данной области техники может установить важные характеристики этого изобретения и, не выходя за рамки его сущности и объема, может осуществлять различные изменения и модификации изобретения, чтобы адаптировать его под различные варианты применения и условия.

Свойства аденозиновых производных

[000133] Свойства аденозиновых производных перечислены в таблице 1.

Таблица 1. Номенклатура и свойства.

ID формулы Номенклатура ИЮПАК Молекулярная масса T-1A (EFdA) (2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-2-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-3-ол 293,25 2-A ((2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил)метилизопропилкарбамат 378,36 3-A изопропил(9-((2R,4S,5R)-5-этинил-4-гидрокси-5-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-2-ил)-2-фтор-9H-пурин-6-ил)карбамат 379,34 4-A ((2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил)метил((5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метил)карбонат 449,35 5-A ((2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил)метилметилкарбамат 350,31 6-A 4-(((9-((2R,4S,5R)-5-этинил-4-гидрокси-5-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-2-ил)-2-фтор-9H-пурин-6-ил)амино)метил)-5-метил-1,3-диоксол-2-он 405,34 7-A ((2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил)метил(2-(метил((5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метил)амино)этил)карбамат 505,46 8-A ((2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил)метил-4-(метил(((5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метокси)карбонил)амино)бутаноат 548,48 4-C ((2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-3-((((5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метокси)карбонил)окси)тетрагидрофуран-2-ил)метил((5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метил)карбонат 605,44

Синтез пролекарств аденозиновых производных:

[000134] Способы получения, промежуточные соединения и схемы синтеза изложены ниже.

Промежуточное соединение 1:

трет-бутил-N-[9-[(2R,4S,5R)-5-этинил-4-гидрокси-5-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-2-ил]-2-фторпурин-6-ил]карбамат

[000135] Получение трет-бутил-N-(2-фтор-9H-пурин-6-ил)карбамата

[000136] К перемешанной суспензии 2-фтор-9H-пурин-6-амина (5 г, 32,65 ммоль, 1 экв.) и DMAP (399 мг, 3,27 ммоль, 0,1 экв.) в ТГФ (50 мл) при 0°C добавляли (Boc)₂O (24,94 г, 114,29 ммоль, 26,3 мл, 3,5 экв.) в ТГФ (25 мл). Полученную суспензию перемешивали при 10°C в течение 16 ч, разбавляли MTBE (100 мл) и гасили водой (100 мл). Органический слой отделяли, промывали водной лимонной кислотой (10 мас.%, 100 мл), водой (2×100 мл) и насыщенным водным хлоридом натрия (100 мл). Органический слой концентрировали при пониженном давлении с получением трет-бутилN-трет-бутоксикарбонил-N-(2-фтор-9H-пурин-6-ил)карбамата (11,5 г, неочищенный) в виде желтого масла, которое использовали в следующей реакции без дополнительной очистки.

[000137] К смеси трет-бутил- N-трет-бутоксикарбонил-N-(2-фтор-9H-пурин-6-ил)карбамата (11,5 г, 32,55 ммоль, 1 экв.) в EtOH (100 мл) при 20°C добавляли NaOH (2,5 M, 78,1 мл, 6 экв.) в течение 30 мин, и полученную смесь перемешивали в течение 48 ч при 20°C. ЖХМС показала, что был обнаружен один главный пик с требуемым m/z . Смесь обрабатывали и растворители дистиллировали при пониженном давлении, водный раствор охлаждали до 0°C и нейтрализовали хлористоводородной кислоты (1 M, 150 мл) с получением взвеси. Твердое вещество собирали фильтрацией и растворяли в EtOAc (200 мл), промывали водой (2×150 мл) и насыщенным водным хлоридом натрия (150 мл). Полученный раствор концентрировали при пониженном давлении с получением трет-бутил- N-(2-фтор-9H-пурин-6-ил)карбамата (4 г, 15,80 ммоль, 48,5% выход) в виде белого твердого вещества. Неочищенный продукт использовали при следующей реакции без дополнительной очистки. ЖХМС (ESI) m/z, C₁₀H₁₂FN₅O₂: рассчитано 253,1, получено (M+H)⁺: 253,9; (M+Na)⁺: 275,9.

[000138] Получение [(2R,3S)-2-этинил-3-(4-метилбензоил)окси-5-пент-4-енокситетрагидрофуран-2-ил]метил-4-метилбензоата

[000139] К перемешиваемому раствору 4-метилбензолсульфоновой кислоты гидрата (964 мг, 5,07 ммоль, 1 экв.) и пент-4-ен-1-ола (480 мг, 5,58 ммоль, 1,1 экв.) в толуоле (28 мл) при 0°C добавляли раствор [(2R,3S)-2-этинил-5-гидрокси-3-(4-метилбензоил)окситетрагидрофуран-2-ил]метил-4-метилбензоата (2 г, 5,07 ммоль, 1 экв.) в толуоле (32 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 1 ч. Реакцию гасили водой (100 мл). Органический слой отделяли, промывали насыщенным водным бикарбонатом натрия (100 мл), водой (100 мл) и насыщенным водным хлоридом натрия (100 мл). Органический слой концентрировали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ISCO®; 40 g SepaFlash® флэш-колонка с силикагелем, элюент градиента 0~8% этилацетата/петролейного эфира при 40 мл/мин) с получением [(2R,3S)-2-этинил-3-(4-метилбензоил)окси-5-пент-4-енокситетрагидрофуран-2-ил]метил-4-метилбензоата (1,38 г, 58,2% выход) в виде бесцветного масла. ЖХМС (ESI) m/z, C₂₈H₃₀O₆: рассчитано 462,2, получено (M+Na)⁺: 485,1

[000140] Получение [(2R,3S,5R)-5-[6-(трет-бутоксикарбониламино)-2-фторпурин-9-ил]-2-этинил-3-(4-метилбензоил)окситетрагидрофуран-2-ил]метил-4-метилбензоата

[000141] Смесь [(2R,3S)-2-этинил-3-(4-метилбензоил)окси-5-пент-4-енокситетрагидрофуран-2-ил]метил-4-метилбензоата (200 мг, 0,43 ммоль, 1 экв.), трет-бутил- N-(2-фтор-9H-пурин-6-ил)карбамата (131 мг, 0,52 ммоль, 1,2 экв.) и 4Å MS (1 г, 0,32 ммоль) в MeCN (4 мл) охлаждали до -25°C. Добавляли I₂ (351 мг, 1,38 ммоль, 3,2 экв.), и полученную смесь перемешивали в течение 16 ч в атмосфере азота при -25°C. Реакционную смесь затем нагревали до 0°C и перемешивали при 0°C в течение 2 ч. Реакцию гасили водным сульфитом натрия (10 мл), разбавляли водой (10 мл), а затем экстрагировали MTBE (30 мл). Полученные органические слои промывали водным бикарбонатом натрия (10 мл), а затем водным хлоридом натрия (10 мл). Органический слой затем концентрировали при пониженном давлении и очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ISCO®; 4 g SepaFlash® флэш-колонка с силикагелем, элюент градиента 0~50% этилацетата/петролейного эфира при 20 мл/мин) с получением [(2R,3S,5R)-5-[6-(трет-бутоксикарбониламино)-2-фторпурин-9-ил]-2-этинил-3-(4-метилбензоил)окситетрагидрофуран-2-ил]метил-4-метилбензоата (155 мг, 50,0% выход) в виде белого твердого вещества. ЖХМС (ESI) m/z, C₃₅H₃₂FN₅O₇: рассчитано 629,2, получено (M+H)⁺: 630,1

[000142] Получение трет-бутил-N-[9-[(2R,4S,5R)-5-этинил-4-гидрокси-5-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-2-ил]-2-фторпурин-6-ил]карбамата

[000143] К смеси [(2R,3S,5R)-5-[6-(трет-бутоксикарбониламино)-2-фторпурин-9-ил]-2-этинил-3-(4-метилбензоил)окситетрагидрофуран-2-ил]метил-4-метилбензоата (155 мг, 0,246 ммоль, 1 экв.) в ТГФ (1 мл) при -25°C добавляли NaOMe (133 мг, 0,739 ммоль, 30%, 3 экв.) в MeOH (0,5 мл), и полученную смесь перемешивали в течение 6 ч при -25°C. Смесь затем нейтрализовали AcOH (0,2 мл) и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ISCO®; 12 g SepaFlash® флэш-колонка с силикагелем, элюент градиента 0~5% MeOH/ДХМ при 30 мл/мин) с получением трет-бутил- N-[9-[(2R,4S,5R)-5-этинил-4-гидрокси-5-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-2-ил]-2-фторпурин-6-ил]карбамата (82 мг, 85,4% выход) в виде белого твердого вещества. ЖХМС (ESI) m/z, C₁₇H₂₀FN₅O₅: рассчитано 393,1, получено (M+Na)⁺: 416,2.

Промежуточное соединение 2 (способ 1):

(2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-2-этинил-2-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-3-ол

[000144] Получение [(2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-2-этинил-3-(4-метилбензоил)окситетрагидрофуран-2-ил]метил-4-метилбензоата

[000145] К раствору (2R,3S,5R)-5-(6-((трет-бутоксикарбонил)амино)-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-2-(((4-метилбензоил)окси)метил)тетрагидрофуран-3-ил-4-метилбензоата (220 мг, 0,35 ммоль, 1 экв.) в толуоле (2,5 мл) добавляли TFA (0,25 мл) при 10°C. Смесь перемешивали при 10°C в течение 48 ч. Смесь гасили добавлением насыщенного гидрокарбоната натрия (10 мл) и экстрагировали EtOAc (2×10 мл). Органический слой концентрировали. Полученный остаток очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ISCO®; 4 g SepaFlash® флэш-колонка с силикагелем, элюент градиента 0~100% этилацетата/петролейного эфира при 20 мл/мин) с получением (2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-2-(((4-метилбензоил)окси)метил)тетрагидрофуран-3-ил-4-метилбензоата (130 мг, 70% выход) в виде белого твердого вещества. ЖХМС (ESI) m/z для C₂₈H₂₄FN₅O₅: рассчитано 529,5, получено (M+Na)⁺ :552,1.

[000146] Получение (2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-2-этинил-2-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-3-ола

[000147] Смесь (2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-2-(((4-метилбензоил)окси)метил)тетрагидрофуран-3-ил-4-метилбензоата (130 мг, 0,246 ммоль, 1 экв.) в ТГФ (1 мл) охлаждали до -25°C. Затем добавляли NaOMe (133 мг, 0,737 ммоль, 30% чистоты, 3 экв.) в MeOH (0,5 мл), и смесь перемешивали в течение 3 ч при -25°C. Смесь нейтрализовали AcOH (0,2 мл) и смесь концентрировали. Полученный остаток очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ISCO®; 4 g SepaFlash® флэш-колонка с силикагелем, элюент градиента 0~8% MeOH/ДХМ при 20 мл/мин) с получением (2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-2-этинил-2-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-3-ола (46 мг, 64% выход) в виде белого твердого вещества. ЖХМС (ESI) m/z для C₁₂H₁₂FN₅O₃: рассчитано 293,2, получено (M+H)⁺: 294,1. ¹H ЯМР (ДМСО-d6, 400MГц) δ (м.д.) 8,30 (с, 1H), 7,89 (шир. с, 2H), 6,24 (дд, J=7,2, 5,2 Гц, 1H), 5,58 (д, J=5,6 Гц, 1H), 5,30 (т, J=6,4 Гц, 1H), 4,52-4,61 (м, 1H), 3,62-3,68 (м, 1H), 3,55 (дд, J=12,0, 6,8 Гц, 1H), 3,52 (с, 1H), 2,64-2,75 (м, 1H), 2,37-2,47 (м, 1H). ¹⁹F ЯМР (ДМСО-d6, 376MГц) δ (м.д.) -51,98 (шир. с, 1F).

Промежуточное соединение 2 (способ 2):

(2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-2-этинил-2-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-3-ол

[000148] Получение (2R,3S,5R)-2-этинил-5-(2-фтор-6-((триметилсилил)амино)-9H-пурин-9-ил)-2-(((4-метилбензоил)окси)метил)тетрагидрофуран-3-ил-4-метилбензоата

[000149] CaH₂ добавляли к ацетонитрилу и кипятили с обратным холодильником в течение 2 ч, затем отгоняли под защитой азота с получением безводного CH₃CN.

[000150] К раствору 2-фтор-9H-пурин-6-амина (4,39 г, 28,64 ммоль, 1,25 экв.) в безводном CH₃CN (60 мл) добавляли BSA (13,98 г, 68,74 ммоль, 16,99 мл, 3 экв.) при N₂. Смесь перемешивали при 80°C в течение 1 ч. После охлаждения реакционной смеси до 25°C добавляли TMSOTf (6,11 г, 27,49 ммоль, 4,97 мл, 1,2 экв.), и реакционную смесь перемешивали при 25°C в течение 1 ч, затем добавляли [(2R,3S)-5-ацетокси-2-этинил-3-(4-метилбензоил)окситетрагидрофуран-2-ил]метил 4-метилбензоат (10 г, 22,91 ммоль, 1 экв.) в безводном CH₃CN (60 мл) в течение 1 ч при 80°C и смесь перемешивали при 80°C в течение 16 ч при N₂. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры (15°C) и отстаивали в течение 24 ч. Взвесь фильтровали и промывали холодным безводным MeCN (10 мл), смесь сушили в вакууме с получением [(2R,3S,5R)-2-этинил-5-[2-фтор-6-(триметилсилиламино)пурин-9-ил]-3-(4-метилбензоил)окситетрагидрофуран-2-ил]метил-4-метилбензоата (6,58 г, 47,7% выход) в виде белого твердого вещества. ¹H ЯМР (400 MГц, CDCl₃) δ (м.д.) 8,02 (д, J=8,0 Гц, 2H), 7,93 (д, J=8,0 Гц, 2H), 7,86 (с, 1H), 7,29 (д, J=8,0 Гц, 2H), 7,23 (д, J=8,0 Гц, 2H), 6,51 (т, J=12 Гц, 1H), 6,05 (м, 1H), 4,82 (д, J=20 Гц, 1H), 4,67 (д, J=20 Гц, 1H), 3,23-3,19 (м, 1H), 2,90-2,85 (м, 1H), 2,68 (с, 1H), 2,43 (д, J=16 Гц, 6H), 0,49-0,29 (м, 9H). ¹⁹F ЯМР (376MГц, CDCl₃) δ (м.д.) -49,34 (с, 1F).

[000151] Получение (2R, 3S, 5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-2-этинил-2-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-3-ола

[000152] К раствору [(2R,3S,5R)-2-этинил-5-[2-фтор-6-(триметилсилиламино)пурин-9-ил]-3-(4-метилбензоил)окситетрагидрофуран-2-ил]метил-4-метилбензоата (15,5 г, 25,76 ммоль, 1 экв.) в ТГФ (150 мл) медленно добавляли NaOMe (6,96 г, 38,64 ммоль, 30% чистоты, 1,5 экв.) при -25°C, реакционную смесь перемешивали при -25°C в течение 16 ч. Смесь нейтрализовали AcOH (0,5 мл) до pH ~7 и смесь концентрировали. Неочищенный продукт растирали с CH₃CN:H₂O=7:3 (100 мл) при 5°C в течение 16 ч с получением (2R, 3S, 5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-2-этинил-2-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-3-ола (6,76 г, 89%) в виде белого твердого вещества. ЖХМС (ESI) m/z для C₁₂H₁₂FN₅O₃: рассчитано 293,2, получено (M+H)⁺: 294,1. ¹H ЯМР (400 MГц, CD₃CN) δ (м.д.) 7,99 (с, 1H), 6,35 (шир. с, 2H), 6,29 (т, J=12 Гц, 1H), 4,65 (т, J=5,6 Гц, 1H), 4,41 (шир. с, 1H), 3,81-3,78 (м, 1H), 3,71-3,68 (м, 1H), 3,55 (шир. с, 1H), 2,93 (с, 1H), 2,82-2,77 (м, 1H), 2,49-2,45 (м, 1H). ¹⁹F ЯМР (376 MГц, CD₃CN) δ (м.д.) -53,4 (с,1F).

Промежуточное соединение 3:

(2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-4,4-дидейтерио-2-этинил-2-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-3-ол

[000153] Получение трет-бутил-2,2,2-тридейтероацетата

[000154] К смеси 2-метилпропан-2-ола (40 г, 539,66 ммоль, 51,61 мл, 1 экв.) и дейтеро-2,2,2-тридейтероацетата (51,87 г, 809,49 ммоль, 1,5 экв.) в DMF (700 мл) добавляли DCC (167,02 г, 809,49 ммоль, 1,5 экв.) и DMAP (13,19 г, 107,93 ммоль, 0,2 экв.), смесь перемешивали при 25°C в течение 64 ч. Реакционную смесь дистиллировали в вакууме (105°C, 0,1 МПа) с получением трет-бутил-2,2,2-тридейтероацетата (25,3 г, 39,3% выход) в виде бесцветной жидкости. ¹H ЯМР (400MГц, CDCl₃) δ (м.д.) 1,45 (с, 9H).

[000155] Получение (4R)-2,2-диметил-4-(2-триизопропилсилилэтинил)-1,3-диоксолан-4-карбальдегида

[000156] К раствору [(4S)-2,2-диметил-4-(2-триизопропилсилилэтинил)-1,3-диоксолан-4-ил]метанола (40,2 г, 128,63 ммоль, 1 экв.) в MeCN (220 мл) добавляли IBX (108,06 г, 385,90 ммоль, 3 экв.). Смесь перемешивали при 85°C в течение 2 ч. Смесь фильтровали и концентрировали с получением (4R)-2,2-диметил-4-(2-триизопропилсилилэтинил)-1,3-диоксолан-4-карбальдегида (40 г, неочищенный) в виде желтого масла.

[000157] Получение трет-бутил(3S)-2,2-дидейтерио-3-[(4R)-2,2-диметил-4-(2-триизопропилсилилэтинил)-1,3-диоксолан-4-ил]-3-гидроксипропаноата

[000158] LDA (2 M в ТГФ, 24,15 мл, 1,5 экв.) добавляли к раствору ТГФ (45 мл) при -78°C, добавляли трет-бутил-2,2,2-тридейтероацетат (6,14 г, 51,53 ммоль, 1,6 экв.) при -78°C и смесь перемешивали при -78°C в течение 1 ч, добавляли (4R)-2,2-диметил-4-(2-триизопропилсилилэтинил)-1,3-диоксолан-4-карбальдегид (10 г, 32,21 ммоль, 1 экв.) в ТГФ (30 мл) при -78°C, затем смесь перемешивали при -78°C в течение 2 ч. D₂O (20 мл) добавляли, затем смесь экстрагировали этилацетатом (200 мл x 2). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (100 мл), сушили над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Полученный остаток очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ISCO®; 330 g SepaFlash® флэш-колонка с силикагелем, элюировали градиентом 0~70% ДХМ/петролейного эфира при 75 мл/мин) с получением трет-бутил(3S)-2,2-дидейтерио-3-[(4R)-2,2-диметил-4-(2-триизопропилсилилэтинил)-1,3-диоксолан-4-ил]-3-гидроксипропаноата (5,17 г, 37,5% выход) в виде бесцветного масла. ¹H ЯМР (400MГц, CDCl₃) δ(м.д.) 4,22 (д, J=8,8Гц, 1H), 4,11 (д, J=8,4Гц, 1H), 4,01 (д, J=4,8Гц, 1H), 2,71 (д, J=5,2Гц, 1H), 1,60 (с, 3H), 1,48 (с, 9H), 1,42 (с, 3H), 1,08 (с, 21H).

[000159] Получение трет-бутил(3S)-2,2-дидейтерио-3-[(4R)-4-этинил-2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил]-3-гидроксипропаноата

[000160] К раствору трет-бутил(3S)-2,2-дидейтерио-3-[(4R)-2,2-диметил-4-(2-триизопропилсилилэтинил)-1,3-диоксолан-4-ил]-3-гидроксипропаноата (13 г, 30,33 ммоль, 1 экв.) в ТГФ (130 мл) добавляли TBAF (1 M в ТГФ, 30,33 мл, 1 экв.) при 0°C. Смесь перемешивали при 25°C в течение 1 ч. Этилацетат (100 мл) и H₂O (100 мл) добавляли, затем смесь экстрагировали этилацетатом (100 мл x 2). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (100 мл), сушили над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Полученный остаток очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ISCO®; 120 g SepaFlash® флэш-колонка с силикагелем, элюировали градиентом

0~15% этилацетата/петролейного эфира при 60 мл/мин) с получением трет-бутил(3S)-2,2-дидейтерио-3-[(4R)-4-этинил-2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил]-3-гидроксипропаноата (6,7 г, 81,1% выход) в виде светло-желтого масла. ¹H ЯМР (400MГц, CDCl3) δ(м.д.) 4,26 (д, J=8,8Гц, 1H), 4,16 (д, J=8,4Гц, 1H), 3,96 (д, J=4,0Гц, 1H), 3,24-3,20 (м, 1H), 2,55 (с, 1H), 1,62 (с, 3H), 1,50 (с, 9H), 1,42 (с, 3H).

[000161] Получение [(1S)-3-трет-бутокси-2,2-дидейтерио-1-[(4R)-4-этинил-2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил]-3-оксопропил]-4-метилбензоата

[000162] К раствору 4-метилбензоилхлорида (5,71 г, 36,90 ммоль, 4,88 мл, 1.5 экв.) в пиридине (60 мл) добавляли трет-бутил(3S)-2,2-дидейтерио-3-[(4R)-4-этинил-2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил]-3-гидроксипропаноат (6,7 г, 24,60 ммоль, 1 экв.). Смесь перемешивали при 0°C в течение 16 ч. Ледяную воду (15 мл) добавляли, затем смесь перемешивали при 0°C В течение 15 мин. Смесь фильтровали. Полученный остаток очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ISCO®; 80 g SepaFlash® флэш-колонка с силикагелем, элюировали градиентом 0~100% этилацетата/петролейного эфира при 60 мл/мин) с получением [(1S)-3-трет-бутокси-2,2-дидейтерио-1-[(4R)-4-этинил-2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил]-3-оксопропил]-4-метилбензоата (9,2 г, 95,8% выход) в виде бесцветного масла.

[000163] Получение [(2R,3S)-4,4-дидейтерио-2-этинил-2-(гидроксиметил)-5-оксотетрагидрофуран-3-ил]-4-метилбензоата

[000164] К раствору [(1S)-3-трет-бутокси-2,2-дидейтерио-1-[(4R)-4-этинил-2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил]-3-оксопропил]-4-метилбензоата (9,2 г, 23,56 ммоль, 1 экв.) в DME (90 мл) добавляли HCl (конц.) (7,16 г, 70,68 ммоль, 7,02 мл, 36% чистоты, 3 экв.). Смесь перемешивали при 50°C в течение 16 ч. Смесь концентрировали. Полученный остаток очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ISCO®; 25 g SepaFlash® флэш-колонка с силикагелем, элюировали градиентом 0~30% этилацетата/петролейного эфира при 30 мл/мин) с получением [(2R,3S)-4,4-дидейтерио-2-этинил-2-(гидроксиметил)-5-оксотетрагидрофуран-3-ил]-4-метилбензоата (6,4 г, 98,3% выход) в виде бесцветного масла.

[000165] Получение [(2R,3S)-4,4-дидейтерио-2-этинил-3-(4-метилбензоил)окси-5-оксотетрагидрофуран-2-ил]метил-4-метилбензоата

[000166] К смеси [(2R,3S)-4,4-дидейтерио-2-этинил-2-(гидроксиметил)-5-оксотетрагидрофуран-3-ил]-4-метилбензоата (2 г, 7,24 ммоль, 1 экв.) в пиридине (15 мл) добавляли 4-метилбензоилхлорид (1,68 г, 10,86 ммоль, 1,5 экв.). Полученную смесь перемешивали при 0°C в течение 16 ч. Добавляли воду (50 мл) при 0°C, экстрагировали ДХМ (2×100 мл). Объединенные органические слои сушили над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Полученный остаток очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ISCO®; 80 g SepaFlash® флэш-колонка с силикагелем, элюент с градиентом 0~15% этилацетата/петролейного эфира при 60 мл/мин) с получением [(2R,3S)-4,4-дидейтерио-2-этинил-3-(4-метилбензоил)окси-5-оксотетрагидрофуран-2-ил]метил-4-метилбензоата (2,5 г, 87,6% выход) в виде белого твердого вещества.

[000167] Получение [(2R,3S)-4,4-дидейтерио-2-этинил-5-гидрокси-3-(4-метилбензоил)окситетрагидрофуран-2-ил]метил-4-метилбензоата

[000168] К раствору [(2R,3S)-4,4-дидейтерио-2-этинил-3-(4-метилбензоил)окси-5-оксотетрагидрофуран-2-ил]метил-4-метилбензоата (2,5 г, 6,34 ммоль, 1 экв.) в ДХМ (16 мл) и толуоле (36 мл) по каплям добавляли бис(2-метоксиэтокси)алюмогидрид натрия (2,75 г, 9,51 ммоль, 2,64 мл, 70% чистоты, 1,5 экв.) при -78°C. Смесь перемешивали при -78°C в течение 2 ч. Такую реакцию гасили добавлением раствора уксусной кислоты (5 мл) в ДХМ (20 мл) в течение 10 мин. Реакционную смесь разбавляли H₂O (50 мл) и экстрагировали ДХМ (50×3 мл), объединенные органические слои промывали солевым раствором (50 мл), сушили над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением [(2R,3S)-4,4-дидейтерио-2-этинил-5-гидрокси-3-(4-метилбензоил)окситетрагидрофуран-2-ил]метил-4-метилбензоата (2,5 г, 99,5% выход) в виде светло-желтой жидкости.

[000169] Получение [(2R,3S)-5-ацетокси-4,4-дидейтерио-2-этинил-3-(4-метилбензоил)окситетрагидрофуран-2-ил]метил-4-метилбензоата

[000170] К смеси [(2R,3S)-4,4-дидейтерио-2-этинил-5-гидрокси-3-(4-метилбензоил)окситетрагидрофуран-2-ил]метил-4-метилбензоата (2,5 г, 6,31 ммоль, 1 экв.) в толуоле (25 мл) добавляли 4-(диметиламино)пиридин (131 мг, 1,07 ммоль, 0,17 экв.) и ТЭА (747 мг, 7,38 ммоль, 1,03 мл, 1,17 экв.) при 0°C, затем добавляли уксусный ангидрид (644 мг, 6,31 ммоль, 0,60 мл, 1 экв.). Полученную смесь перемешивали при 0°C в течение 2 ч. Реакционную смесь гасили H₂O (10 мл). Полученную смесь нагревали до температуры окружающей среды и последовательно промывали водным раствором лимонной кислоты (10 мас.%, 30 мл), водным раствором бикарбоната натрия (5 мас.%, 30 мл) и водой (30 мл), органический слой концентрировали. Полученный остаток очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ISCO®; 40 g SepaFlash® флэш-колонка с силикагелем, элюент с градиентом 0~20% этилацетата/петролейного эфира при 30 мл/мин) с получением [(2R,3S)-5-ацетокси-4,4-дидейтерио-2-этинил-3-(4-метилбензоил)окситетрагидрофуран-2-ил]метил-4-метилбензоата (2,2 г, 79,6% выход) в виде бесцветного масла.

[000171] Получение [(2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-4,4-дидейтерио-2-этинил-3-(4-метилбензоил)окситетрагидрофуран-2-ил]метил-4-метилбензоата

[000172] К раствору 2-фтор-9H-пурин-6-амина (960 мг, 6,27 ммоль, 1,25 экв.) в MeCN (20 мл) добавляли бис(триметилсилил)ацетамид (3,06 г, 15,05 ммоль, 3 экв.). Смесь перемешивали при 80°C в течение 1 ч. Когда реакционную смесь охлаждали до 25°C, добавляли TMSOTf (1,34 г, 6,02 ммоль, 1,09 мл, 1,2 экв.), и реакционную смесь перемешивали при 25°C в течение 1 ч, затем добавляли [(2R,3S)-5-ацетокси-4,4-дидейтерио-2-этинил-3-(4-метилбензоил)окситетрагидрофуран-2-ил]метил-4-метилбензоат (2,2 г, 5,02 ммоль, 1 экв.) в MeCN (15 мл) в течение 1 ч при 80°C и смесь перемешивали при 80°C в течение 16 ч. Добавляли ДХМ (50 мл) и H₂O (50 мл), затем смесь экстрагировали ДХМ (50×2 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (50 мл), сушили над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Полученный остаток очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ISCO®; 40 g SepaFlash® флэш-колонка с силикагелем, элюент с 0~40% этилацетата/ДХМ при 30 мл/мин) с получением [(2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-4,4-дидейтерио-2-этинил-3-(4-метилбензоил)окситетрагидрофуран-2-ил]метил-4-метилбензоата (1,43 г, 53,6% выход) в виде светло-желтого твердого вещества.

[000173] Получение (2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-4,4-дидейтерио-2-этинил-2-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-3-ола

[000174] К смеси [(2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-4,4-дидейтерио-2-этинил-3-(4-метилбензоил)окситетрагидрофуран-2-ил]метил-4-метилбензоата (1,4 г, 2,63 ммоль, 1 экв.) в ТГФ (16 мл) добавляли NaOMe (1,42 г, 7,90 ммоль, 30% чистоты, 3 экв.) в MeOH (8 мл). Смесь перемешивали при -25°C в течение 3 ч. Смесь нейтрализовали AcOH (0,5 мл) и смесь концентрировали при пониженном давлении с получением остатка. Остаток очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ISCO®; 12 g SepaFlash® флэш-колонка с силикагелем, элюент с градиентом 0~10% метанола/дихлорметана при 30 мл/мин) с получением (2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-4,4-дидейтерио-2-этинил-2-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-3-ола (710 мг, 91,3% выход) в виде белого твердого вещества.

[000175] Очистка (2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-4,4-дидейтерио-2-этинил-2-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-3-ола

[000176] (2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-4,4-дидейтерио-2-этинил-2-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-3-ол (20 мг, 0,068 ммоль, 1 экв.) очищали методом преп.-ТСХ (SiO2, ДХМ:MeOH=10:1) с получением (2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-4,4-дидейтерио-2-этинил-2-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-3-ола (6,2 мг, 31,0% выход) в виде белого твердого вещества. ЖХМС (ESI) m/z, C₁₂H₁₀D₂FN₅O₃: рассчитано 295,10, получено (M+H)⁺: 296,1. ¹H ЯМР (400MГц, CD₃CN) δ м.д. 8,01 (с, 1H), 6,40-6,31 (м, 3H), 4,67 (д, J=4,8Гц, 1H), 4,40-4,37 (м, 1H), 3,84-3,72 (м, 1H), 3,56 (д, J=5,2Гц, 1H), 2,96 (с, 1H). ¹⁹F ЯМР (376MГц, CD3CN) δ м.д. -53,40 (с, 1F).

Промежуточное соединение 4:

(2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-2-(гидроксиметил-d2)тетрагидрофуран-4,4-d2-3-ол

[000177] Получение 9-[(2R,4S,5R)-4-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-[[трет-бутил(диметил)силил]оксиметил]-3,3-дидейтерио-5-этинилтетрагидрофуран-2-ил]-2-фторпурин-6-амина

[000178] К смеси (2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-4,4-дидейтерио-2-этинил-2-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-3-ола (690 мг, 2,34 ммоль, 1 экв.) в DMF (3 мл) добавляли TBSCl (1,41 г, 9,36 ммоль, 1,15 мл, 4 экв.) и 1H-имидазол (956 мг, 14,04 ммоль, 6 экв.). Смесь перемешивали при 25°C в течение 16 ч. Смесь концентрировали, разбавляли H₂O (30 мл) и экстрагировали EtOAc (30×3 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (50 мл), сушили над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ISCO®; 4 g SepaFlash® флэш-колонка с силикагелем, элюент с градиентом 0~10% метанола/дихлорметана при 20 мл/мин) с получением 9-[(2R,4S,5R)-4-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-[[трет-бутил(диметил)силил]оксиметил]-3,3-дидейтерио-5-этинилтетрагидрофуран-2-ил]-2-фторпурин-6-амина (1,1 г, 89,8% выход) в виде белого твердого вещества. ЖХМС (ESI) m/z для C₂₄H₃₈D₂FN₅O₃Si₂: рассчитано 523,3, получено (M+H)⁺: 524,6.

[000179] Получение [(2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-4,4-дидейтерио-2-этинилтетрагидрофуран-2-ил]метанола

[000180] Смесь 9-[(2R,4S,5R)-4-[трет-бутил(диметил)силил]окси-5-[[трет-бутил(диметил)силил]оксиметил]-3,3-дидейтерио-5-этинилтетрагидрофуран-2-ил]-2-фторпурин-6-амина (1,1 г, 2,10 ммоль, 1 экв.) в ТГФ (12 мл), H₂O (3 мл), TFA (3 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 16 ч. Полученную смесь концентрировали. Остаток очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ISCO®; 12 g SepaFlash® флэш-колонка с силикагелем, элюент с 0~10% этилацетатом/петролейным эфиром при 30 мл/мин) с получением [(2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-4,4-дидейтерио-2-этинилтетрагидрофуран-2-ил]метанола (590 мг, 68,6% выход) в виде белого твердого вещества. ЖХМС (ESI) m/z для C₁₈H₂₄D₂FN₅O₃Si: рассчитано 409,19, получено (M+H)⁺: 410,1.

[000181] Получение (2S,3S,5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-4,4-дидейтерио-2-этинилтетрагидрофуран-2-карбоновой кислоты

[000182] К смеси [(2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-4,4-дидейтерио-2-этинилтетрагидрофуран-2-ил]метанола (590 мг, 1,44 ммоль, 1 экв.) в H₂O (0,05 мл) добавляли TEMPO (45 мг, 0,29 ммоль, 0,2 экв.) и PhI(OAc)₂ (557 мг, 1,73 ммоль, 1,2 экв.). Реакционную смесь перемешивали при 25°C в течение 2 ч, затем добавляли ДХМ (10 мл) и CH₃CN (0,05 мл). Полученную смесь перемешивали при 25°C в течение 14 ч. Реакционную смесь фильтровали и осадок промывали петролейным эфиром (5 мл), а затем концентрировали с получением (2S,3S,5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-4,4-дидейтерио-2-этинилтетрагидрофуран-2-карбоновой кислоты (330 мг, 54,1% выход) в виде белого твердого вещества. ¹H ЯМР (400MГц, ДМСО-d₆) δ (м.д.) 8,30 (с, 1H), 7,87 (с, 2H), 6,34 (с, 1H), 4,94 (с, 1H), 3,66 (с, 1H), 0,92 (с, 9H), 0,13-0,12 (д, J=4 Гц, 6H).

[000183] Получение метил(2S,3S,5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-4,4-дидейтерио-2-этинилтетрагидрофуран-2-карбоксилата

[000184] К смеси (2S,3S,5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-4,4-дидейтерио-2-этинилтетрагидрофуран-2-карбоновой кислоты (60 мг, 0,14 ммоль, 1 экв.) в толуоле (4 мл) и MeOH (3,2 мл) добавляли TMSCHN₂ (2,0 M, 0,22 мл, 3 экв.). Реакционную смесь перемешивали при 25°C в течение 2 ч. Реакционную смесь концентрировали. Полученный остаток очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ISCO®; 4 g SepaFlash® флэш-колонка с силикагелем, элюент с градиентом 0~10% метанола/дихлорметана при 20 мл/мин) с получением метил(2S,3S,5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-4,4-дидейтерио-2-этинилтетрагидрофуран-2-карбоксилата (41 мг, 67% выход) в виде белого твердого вещества. ЖХМС (ESI) m/z в течение C₁₉H₂₄D₂FN₅O₄Si: рассчитано 437,54, получено (M+H)⁺: 438,5. ¹H ЯМР (400MГц, CDCl₃) δ (м.д.) 8,20 (с, 1H), 6,52 (с, 1H), 5,81 (с, 2H), 4,88 (с, 1H), 3,86 (с, 3H), 2,70 (с, 1H), 0,96 (с, 9H), 0,18-0,17 (д, J=4 Гц, 6H). ¹⁹F ЯМР (376MГц, CDCl₃) δ (м.д.) -50,588 (с, 1F).

[000185] Получение [(2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-4,4-дидейтерио-2-этинилтетрагидрофуран-2-ил]-дидейтериометанола

[000186] К смеси метил(2S,3S,5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-4,4-дидейтерио-2-этинилтетрагидрофуран-2-карбоксилата (150 мг, 0,34 ммоль, 1 экв.) в изо-PrOH (8 мл) добавляли дейтерированный борогидрид натрия (29 мг, 0,68 ммоль, 2 экв.) при 0°C. Реакционную смесь перемешивали при 25°C в течение 3 ч. Реакционную смесь концентрировали. Полученный остаток очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ISCO®; 4 g SepaFlash® флэш-колонка с силикагелем, элюент с градиентом 0~10% метанола/дихлорметана при 20 мл/мин) с получением [(2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-4,4-дидейтерио-2-этинилтетрагидрофуран-2-ил]-дидейтериометанола (107 мг, 76,4% выход) в виде белого твердого вещества. ¹H ЯМР (400 MГц, CD₃CN) δ (м.д.) 7,98 (с, 1H), 6,38 (с, 2H), 6,27 (с, 1H), 4,78 (с, 1H), 4,28 (с, 1H), 2,86 (с, 1H), 0,94 (с, 9H), 0,15-0,14 (д, J=4 Гц, 6H). ¹⁹F ЯМР (376MГц, CD₃CN) δ (м.д.) -53,40 (с, 1F).

[000187] Получение (2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-4,4-дидейтерио-2-[дидейтерио(гидрокси)метил]-2-этинилтетрагидрофуран-3-ола

[000188] К смеси [(2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-3-[трет-бутил(диметил)силил]окси-4,4-дидейтерио-2-этинилтетрагидрофуран-2-ил]-дидейтериометанола (180 мг, 0,437 ммоль, 1 экв.) в пиридине (2,34 г, 29,28 ммоль, 2,38 мл, 67 экв.) и Et₃N (1,72 г, 17,04 ммоль, 2,37 мл, 39 экв.) добавляли N, N-диэтилэтанамина тригидрофторид (4,68 г, 29,06 ммоль, 4,74 мл, 66,5 экв.) при 0°C. Полученную смесь перемешивали при 25°C в течение 2 ч. Реакционную смесь концентрировали. Полученный остаток очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ISCO®; 4 g SepaFlash® флэш-колонка с силикагелем, элюент с градиентом 0~10% метанола/дихлорметана при 20 мл/мин) с получением (2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-4,4-дидейтерио-2-[дидейтерио(гидрокси)метил]-2-этинилтетрагидрофуран-3-ола (80 мг, 61,5% выход) в виде белого твердого вещества. ЖХМС (ESI) m/z в течение C₁₂H₈D₄FN₅O₃: рассчитано 297,12, получено (M+H)⁺: 298,1. ¹H ЯМР (400MГц, ДМСО-d₆) δ (м.д.) 8,30 (с, 1H), 7,85 (с, 2H), 6,23 (с, 1H), 5,57-5,55 (д, J=8 Гц, 1H), 5,25 (с, 1H), 4,56-4,55 (д, J=4 Гц, 1H), 3,51 (с, 1H). ¹⁹F ЯМР (376MГц, ДМСО-d₆) δ (м.д.) -51,98 (с, 1F).

Пример 1:

((2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил)метилизопропилкарбамат

[000189] Получение [(2R,3S,5R)-5-[6-(трет-бутоксикарбониламино)-2-фторпурин-9-ил]-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил]метил(4-нитрофенил)карбоната

[000190] К раствору трет-бутил- N-[9-[(2R,4S,5R)-5-этинил-4-гидрокси-5-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-2-ил]-2-фторпурин-6-ил]карбамата (80 мг, 0,203 ммоль, 1 экв.) в пиридине (0,8 мл) при 10°C добавляли (4-нитрофенил)карбонохлоргидрат (41 мг, 0,203 ммоль, 1 экв.) при 10°C. Смесь перемешивали при 10°C в течение 16 ч, добавляли воду (10 мл) и экстрагировали EtOAc (10 мл). Органические слои сушили над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта [(2R,3S,5R)-5-[6-(трет-бутоксикарбониламино)-2-фторпурин-9-ил]-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил]метил(4-нитрофенил)карбоната (114 мг, неочищенный) в виде желтого масла, которое использовали в следующей реакции без дополнительной очистки. ЖХМС (ESI) m/z, C₂₄H₂₃FN₆O₉: рассчитано 558,2, измерено (M+H)⁺: 559,1.

[000191] Получение трет-бутил-N-[9-[(2R,4S,5R)-5-этинил-4-гидрокси-5-(изопропилкарбамоилоксиметил)тетрагидрофуран-2-ил]-2-фторпурин-6-ил]карбамата

[000192] К смеси [(2R,3S,5R)-5-[6-(трет-бутоксикарбониламино)-2-фторпурин-9-ил]-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил]метил(4-нитрофенил)карбоната (10 мг, 0,018 ммоль, 1 экв.) и триэтиламина (3,6 мг, 0,035 ммоль, 2 экв.) в ТГФ (0,5 мл) добавляли пропан-2-амин (1,3 мг, 0,021 ммоль, 1,2 экв.). Смесь перемешивали при 15°C в течение 2,5 ч, добавляли воду (5 мл) и экстрагировали EtOAc (2 x10 мл). Органические слои концентрировали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали методом преп.-HPLC (колонка: Waters Xbridge Prep OBD C18 150*30 10u; подвижная фаза: [вода (10 мM NH₄HCO₃)-ACN]; B%: 15%-45%, 11 мин) с получением трет-бутил- N-[9-[(2R,4S,5R)-5-этинил-4-гидрокси-5-(изопропилкарбамоилоксиметил)тетрагидрофуран-2-ил]-2-фторпурин-6-ил]карбамата (3,6 мг, 45,0% выход) в виде белого твердого вещества. ЖХМС (ESI) m/z, C₂₁H₂₇FN₆O₆: рассчитано 478,2, измерено (M+H)⁺: 479,3; (M+Na)⁺: 501,2.

[000193] Получение ((2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил)метилизопропилкарбамата

[000194] К раствору трет-бутил- N-[9-[(2R,4S,5R)-5-этинил-4-гидрокси-5-(изопропилкарбамоилоксиметил)тетрагидрофуран-2-ил]-2-фторпурин-6-ил]карбамата (3,6 мг, 0,0075 ммоль, 1 экв.) в ДХМ (0,5 мл) добавляли TFA (77 мг, 0,68 ммоль, 0,05 мл, 89,8 экв.) при 10°C. Смесь перемешивали при 10°C в течение 40 ч. Смесь концентрировали при пониженном давлении и очищали методом преп.-HPLC (колонка: Agela DuraShell 150ммx25ммx5мкм; подвижная фаза: [вода (0,05% HCl)-ACN]; B%: 10%-40%, 8 мин) с получением ((2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил)метилизопропилкарбамата (1,2 мг, 40,0% выход) в виде белого твердого вещества. ЖХМС (ESI) m/z, C₁₆H₁₉FN₆O₄: рассчитано 378,2, измерено (M+H)⁺: 379,3; (M+Na)⁺: 401,2. ¹H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d6) δ (м.д.) 8,27 (с, 1H), 7,85 (шир. с, 2H), 7,13 (шир. д, J= 4,8 Гц, 1H), 6,24 (дд, J= 7,6, 5,2 Гц, 1H), 4,55 (шир. т, J= 6,8 Гц, 1H), 4,35 (шир. д, J= 11,6 Гц, 1H), 4,00 (шир. д, J= 11,6 Гц, 1H), 3,61 (с, 1H), 2,70-2,79 (м, 1H), 2,40-2,43 (м, 1H), 0,98-1,07 (м, 7H). ¹⁹F ЯМР (376 MГц, ДМСО-d6) δ (м.д.) -51,79 (s).

Пример 2:

((2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил)метилметилкарбамат

Получение ((2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил)метилметилкарбамата

[000195] ((2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил)метилметилкарбамат получали с применением той же процедуры, что и для ((2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил)метилизопропилкарбамата, за исключением замены пропан-2 амина метиламином. ЖХМС (ESI) m/z, C₁₄H₁₅FN₆O₄: рассчитано 350,1, измерено (M+H)⁺: 351,2. ¹H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d6) δ (м.д.) 8,26 (с, 1H), 7,87 (шир. с, 2H), 7,13 (шир. д, J =4,4 Гц, 1H), 6,24 (дд, J =7,6, 5,0 Гц, 1H), 5,76 (шир. д, J =4,4 Гц, 1H), 4,55 (шир. д, J =5,2 Гц, 1H), 4,35 (д, J =11,6 Гц, 1H), 4,03 (д, J =11,6 Гц, 1H), 3,60 (с, 1H), 2,70-2,79 (м, 1H), 2,54 (с, 3H), 2,40-2,45 (м, 1H). ¹⁹F ЯМР (376 MГц, ДМСО-d6) δ (м.д.) -51,75 (s).

Пример 3:

Изопропил(9-((2R,4S,5R)-5-этинил-4-гидрокси-5-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-2-ил)-2-фтор-9H-пурин-6-ил)карбамат

Получение (2R,3S,5R)-5-[6-[бис(изопропоксикарбонил)амино]-2-фтор-9H-пурин-9-ил]-2-этинил-2-(((4-метилбензоил)окси)метил)-тетрагидрофуран-3-ил-4-метилбензоата

[000196] К смеси [(2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-2-этинил-3-(4-метилбензоил)окситетрагидрофуран-2-ил]метил-4-метилбензоата (50 мг, 0,094 ммоль, 1 экв.) и Et₃N (10 мг, 0,094 ммоль, 1 экв.) в ДХМ (1 мл) добавляли изопропилкарбонохлоргидрат (23 мг, 0,19 ммоль, 2 экв.) при 0°C, смесь перемешивали при 15°C в течение 16 ч. Смесь концентрировали при пониженном давлении и добавляли 2 мл воды, экстрагировали EtOAc (10 мл x 2). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (20 мл) и концентрировали при пониженном давлении с получением (2R,3S,5R)-5-(6-(бис(изопропоксикарбонил)амино)-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-2-(((4-метилбензоил)окси)метил)тетрагидрофуран-3-ил-4-метилбензоата в виде неочищенного продукта, который использовали в следующей реакции без дополнительной очистки. ЖХМС (ESI) m/z, C₃₆H₃₆FN₅O₉: рассчитано 701,3, измерено (M+H)⁺: 702,1.

Получение изопропил(9-((2R,4S,5R)-5-этинил-4-гидрокси-5-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-2-ил)-2-фтор-9H-пурин-6-ил)карбамата

[000197] К раствору (2R, 3S, 5R)-5-[6-[бис(изопропоксикарбонил)амино]-2-фтор-9H-пурин-9-ил]-2-этинил-2-(((4-метилбензоил)окси)метил)тетрагидрофуран-3-ил]-4-метилбензоата (66 мг, 0,094 ммоль) в ТГФ (1 мл) при -20°C добавляли NaOMe (34 мг, 0.19 ммоль, 30%, 2 экв.), и полученную смесь перемешивали в течение 16 ч при -20°C. Добавляли дополнительно NaOMe (17 мг, 0,095 ммоль, 30%, 1 экв.), и смесь перемешивали при -20°C еще 40 ч. Смесь нейтрализовали AcOH (0,1 мл), концентрировали при пониженном давлении и очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ISCO®; 4 g SepaFlash® флэш-колонка с силикагелем, элюент градиента 0~8% MeOH/ДХМ при 20 мл/мин) и снова методом преп.-HPLC (колонка: Waters Xbridge Prep OBD C18 150×30 5u; подвижная фаза: [вода (10 мM NH₄HCO₃)-ACN]; B%: 5%-30%, 7 мин) с получением изопропил(9-((2R,4S,5R)-5-этинил-4-гидрокси-5-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-2-ил)-2-фтор-9H-пурин-6-ил)карбамата (3,5 мг, 11% выход) в виде белого твердого вещества. ЖХМС (ESI) m/z, C₁₆H₁₈FN₅O₉: рассчитано 379,1 (измерено (M+Na)⁺: 402,1). ¹H ЯМР (400 MГц, CDCl₃) δ (м.д.) 8,17 (с, 1H), 7,98 (с, 2H), 6,41 (дд, J =8,8, 5,6 Гц, 1H), 5,13 (дт, J =12,4, 6,4 Гц, 1H), 5,04 (дд, J =11,0, 3,0 Гц, 1H), 4,70-4,75 (м, 1H), 4,09 (дд, J =12,4, 2,4 Гц, 1H), 3,84-3,93 (м, 1H), 3,06-3,15 (м, 1H), 2,83 (с, 1H), 2,48-2,56 (м, 2H), 1,36 (д, J =6,0 Гц, 6H). ¹⁹F ЯМР (376 MГц, CDCl₃) δ (м.д.) -46,89 (s).

Пример 4 (способ 1):

((2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил)метил((5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метил)карбонат

Получение S-этил-O-((5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метил)карбонотиоата

[000198] К смеси этантиола (16 г, 257,5 ммоль, 19,1 мл, 1 экв.), триэтиламина (26,1 г, 257,5 ммоль, 35,8 мл, 1 экв.) в ТГФ (1 л) при -15°C добавляли бис(трихлорметил)карбонат (76,4 г, 257,5 ммоль, 1 экв.) в ТГФ (50 мл). Смесь нагревали до 18°C и перемешивали при 18°C в течение 2 ч. Смесь фильтровали и фильтрат концентрировали в вакууме с получением S-этилхлорметантиоата (13 г, неочищенный) в виде желтого масла, которое использовали в следующей реакции сразу без дополнительной очистки.

[000199] К смеси 4-(гидроксиметил)-5-метил-1,3-диоксол-2-она (13 г, 99,9 ммоль, 1 экв.) в Et₂O (800 мл) при 0°C добавляли пиридин (7,90 г, 99,9 ммоль, 8,1 мл, 1 экв.) и S-этилхлорметантиоат (12,45 г, 99,9 ммоль, 1,0 экв.) в Et₂O (200 мл), смесь перемешивали при 0°C в течение 1 ч, нагревали до 18°C и перемешивали при 18°C в течение 16 ч. Смесь фильтровали и концентрировали в вакууме, а затем переносили в ДХМ (150 мл) и промывали нас. водн. NaHCO₃ (150 млx2), водой (150 млx2). Смесь концентрировали при пониженном давлении и очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ISCO®; 120 g SepaFlash® флэш-колонка с силикагелем, элюент градиента 0~15% этилацетата/петролейного эфира при 70 мл/мин) с получением (5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метилэтилсульфанилформиата (9,2 г, 42,2% выход) в виде светло-желтого масла. ¹H ЯМР (400 MГц, CDCl₃) δ 4,95 (s, 2H), 2,89 (q, J =7,2 Гц, 2H), 2,19 (s, 3H), 1,32 (t, J =7,2 Гц, 3H).

Получение (5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метилкарбонохлоргидрата

[000200] К смеси (5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метилэтилсульфанилформиата (500 мг, 2,29 ммоль, 1 экв.) в ДХМ (50 мл) добавляли сульфурилхлорид (618,5 мг, 4,58 ммоль, 0,46 мл, 2 экв.). Полученную смесь перемешивали при 20°C в течение 1 ч. Реакционную смесь промывали водой (50 мл x 2), 5% водн. Na₂CO₃ (50 мл x2), солевым раствором (50 мл), сушили над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением (5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метилкарбонохлоргидрата (350 мг, неочищенный) в виде желтого масла. Продукт растворяли в 10 мл ДХМ и хранили в холодильнике.

Получение трет-бутил(9-((2R,4S,5R)-5-этинил-4-гидрокси-5-(((((5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метокси)карбонил)окси)метил)тетрагидрофуран-2-ил)-2-фтор-9H-пурин-6-ил)карбамата

[000201] К смеси трет-бутил- N-[9-[(2R,4S,5R)-5-этинил-4-гидрокси-5-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-2-ил]-2-фторпурин-6-ил]карбамата (100 мг, 0,25 нмоль, 1 экв.) в пиридине (2 мл) при 20°C добавляли (5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метилкарбонохлоргидрат (140 мг, 0,73 ммоль, 4 мл, 2,86 экв., 35 мг/мл в ДХМ), смесь перемешивали при 20°C в течение 16 ч. Смесь концентрировали при пониженном давлении и очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ISCO®; 4 g SepaFlash® флэш-колонка с силикагелем, элюент градиента 0~5% MeOH/ДХМ при 25 мл/мин) с получением [(2R,3S,5R)-5-[6-(трет-бутоксикарбониламино)-2-фторпурин-9-ил]-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил]метил(5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метилкарбоната (45 мг, 32,2% выход) в виде желтого твердого вещества. ЖХМС (ESI) m/z, C₂₃H₂₄FN₅O₁₀: рассчитано 549,2, измерено (M+H)⁺: 550,1.

Получение ((2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил)метил((5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метил)карбоната

[000202] К смеси [(2R,3S,5R)-5-[6-(трет-бутоксикарбониламино)-2-фторпурин-9-ил]-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил]метил(5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метилкарбоната (45 мг, 0,082 ммоль, 1 экв.) в толуоле (1 мл) при 20°C добавляли TFA (154 мг, 1,35 ммоль, 0,1 мл, 16,5 экв.). Смесь перемешивали при 20°C в течение 16 ч, а затем концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали методом преп.-HPLC (колонка: Boston Green ODS 150×30ммx5мкм; подвижная фаза: [вода (0,2% FA)-ACN]; B%: 13%-43%, 8 мин) с получением ((2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил)метил((5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метил)карбоната (11 мг, 25,4% выход) в виде белого твердого вещества. ЖХМС (ESI) m/z, C₁₈H₁₆FN₅O₆: рассчитано 449,1, измерено (M+H)⁺: 450,1. ¹⁹F ЯМР (376 MГц, CD₃OD) δ (м.д.) -53,00 (s). ¹H ЯМР (400MГц,CD₃CN) 7,92 (с, 1H), 6,41-6,21 (м, 3H), 4,87 (д, J= 5,2 Гц, 2H), 4,77-4,67 (м, 1H), 4,51 (д, J= 11,6 Гц, 1H), 4,30 (д, J= 11,6 Гц, 1H), 3,75 (д, J= 6,4 Гц, 1H), 3,00 (с, 1H), 2,89-2,81 (м, 1H), 2,61-2,52 (м, 1H), 2,10 (с, 3H).

Пример 4 (способ 2):

((2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил)метил((5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метил)карбонат

[000203] Получение ((2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил)метил(4-нитрофенил)карбоната

[000204] К смеси (2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-2-этинил-2-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-3-ола (100 мг, 0,34 ммоль, 1 экв.) в пиридине (5 мл) добавляли (4-нитрофенил)карбонохлоргидрат (82 мг, 0,41 ммоль, 1,2 экв.) , смесь перемешивали при 26°C в течение 16 ч. Добавляли (4-нитрофенил)карбонохлоргидрат (82 мг, 0,41 ммоль, 1,2 экв.) и смесь перемешивали при 26°C в течение 24 ч. Реакционный раствор очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ISCO®; 4 g SepaFlash® флэш-колонка с силикагелем, элюент градиента 0~5% ДХМ/MeOH при 25 мл/мин) с получением [(2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил]метил(4-нитрофенил)карбоната (80 мг, 51,2% выход) в виде белого твердого вещества. ЖХМС (ESI) m/z, C₁₉H₁₅FN₆O₇: рассчитано 458,4, получено (M+H)⁺: 459,1.

[000205] Получение((2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил)метил((5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метил)карбоната

[000206] К смеси [(2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил]метил(4-нитрофенил)карбоната (150 мг, 0,298 ммоль, 1 экв.) и 4-(гидроксиметил)-5-метил-1,3-диоксол-2-она (96 мг, 0,745 ммоль, 2,5 экв.) в ТГФ (3 мл) добавляли DMAP (3,6 мг, 0,023 ммоль, 0,1 экв.), смесь перемешивали при 25°C в течение 2 ч. Реакционный раствор очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ISCO®; 24 g SepaFlash® флэш-колонка с силикагелем, элюент градиента 0~2,5% ДХМ/MeOH при 25 мл/мин) с получением [(2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил]метил(5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метилкарбоната (85 мг, 63,5% выход) в виде белого твердого вещества. ЖХМС (ESI) m/z, C₁₈H₁₆FN₅O₈ рассчитано 449,4, получено 450,1 (M+H)⁺. ¹H ЯМР (400MГц, CD₃CN) δ (м.д.) 7,91 (с, 1H), 6,42-6,16 (м, 3H), 4,93-4,79 (м, 2H), 4,76-4,67 (м, 1H), 4,53-4,46 (м, 1H), 4,34-4,25 (м, 1H), 3,77 -3,69 (м, 1H), 3,00 (с, 1H), 2,90-2,78 (м, 1H), 2,62-2,50 (м, 1H), 2,10 (с, 3H). ¹⁹F ЯМР (376MГц, CD₃CN) δ (м.д.) -52,87 (с, 1F).

Пример 4 (способ 3):

((2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил)метил((5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метил)карбонат

[000207] Получение ((2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил)метил(4-нитрофенил)карбоната

[000208] К смеси (2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-2-этинил-2-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-3-ола (5 г, 17,05 ммоль, 1 экв.) в пиридине (50 мл) по каплям добавляли (5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метилкарбонохлоргидрат (16,42 г, 85,25 ммоль, 5 экв.) в ДХМ (16 мл) при 0°C в течение 2 ч, после чего смесь перемешивали при 16°C в течение 10 мин. Смесь разбавляли ДХМ (200 мл) и промывали водой (150 мл), солевым раствором (150 мл x 2), сушили над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Полученный остаток очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ISCO®; 80 g SepaFlash® флэш-колонка с силикагелем, элюент градиента 0~5% MeOH/ДХМ при 65 мл/мин) с получением [(2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил]метил(5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метилкарбоната (5,10 г, 11,35 ммоль, 66,6% выход) в виде светло-желтого твердого вещества. ЖХМС (ESI) m/z, C₁₈H₁₆FN₅O₈: рассчитано 449,4, получено (M+H)⁺: 450,1. ¹H ЯМР (400MГц, CD₃CN) δ (м.д.) 7,92 (с, 1H), 6,34 (шир. с, 2H), 6,29-6,23 (м, 1H), 4,93-4,81 (м, 2H), 4,77-4,69 (м, 1H), 4,51 (д, J=11,6 Гц, 1H), 4,30 (д, J=11,6 Гц, 1H), 3,74 (д, J=6,4 Гц, 1H), 3,00 (с, 1H), 2,91-2,79 (м, 1H), 2,62-2,51 (м, 1H), 2,10 (с, 3H). ¹⁹F ЯМР (376MГц, CD₃CN) δ (м.д.) -52,84 (с, 1F).

[000209] Перекристаллизация ((2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил)метил(4-нитрофенил)карбоната

[000210] Смесь [(2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил]метил(5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метилкарбоната (9,5 г, 21,14 ммоль, 1 экв.) в MeCN (50 мл) и EtOAc (50 мл) нагревали при 80°C в течение 30 мин и наблюдали растворение твердых веществ. После охлаждения до комнатной температуры (20°C) смесь перемешивали при 20°C в течение 16 ч. Смесь фильтровали и фильтрационный кек сушили в вакууме с получением [(2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил]метил(5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метилкарбоната (8,0 г, 17,80 ммоль, 84,2% выход) в виде белого твердого вещества. ЖХМС (ESI) m/z, C₁₈H₁₆FN₅O₈: рассчитано 449,4, получено (M+H)⁺: 450,1. ¹H ЯМР (400MГц, CD₃CN) δ (м.д.) 7,92 (с, 1H), 6,31 (шир. с, 2H), 6,27-6,24 (м, 1H), 4,92-4,81 (м, 2H), 4,77-4,69 (м, 1H), 4,51 (д, J=11,6 Гц, 1H), 4,30 (д, J=11,6 Гц, 1H), 3,73 (д, J=6,4 Гц, 1H), 3,00 (с, 1H), 2,89-2,81 (м, 1H), 2,62-2,51 (м, 1H), 2,10 (с, 3H). ¹⁹F ЯМР (376MГц, CD₃CN) δ (м.д.) -52,84 (с, 1F).

Пример 5 (способ 1):

4-(((9-((2R,4S,5R)-5-этинил-4-гидрокси-5-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-2-ил)-2-фтор-9H-пурин-6-ил)амино)метил)-5-метил-1,3-диоксол-2-он

Получение трет-бутил(9-((2R,4S,5R)-5-этинил-4-гидрокси-5-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-2-ил)-2-фтор-9H-пурин-6-ил)((5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метил)карбамата

[000211] К смеси трет-бутил-N-[9-[(2R,4S,5R)-5-этинил-4-гидрокси-5-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-2-ил]-2-фторпурин-6-ил]карбамата (100 мг, 0,25 нмоль, 1 экв.) в DMF (5 мл) добавляли K₂CO₃ (70 мг, 0,51 ммоль, 2 экв.) и 4-(бромметил)-5-метил-1,3-диоксол-2-он (147 мг, 0,76 ммоль, 3 экв.). Реакционную смесь затем нагревали при 60°C в течение 12 ч, концентрировали, а затем разбавляли H₂O (30 мл). Полученную смесь экстрагировали EtOAc (30×3 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (50 мл), сушили над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Полученный остаток очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ISCO®; 4 g SepaFlash® флэш-колонка с силикагелем, элюент градиента 0~10% метанола/дихлорметана при 30 мл/мин) с получением трет-бутил-N-[9-[(2R,4S,5R)-5-этинил-4-гидрокси-5-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-2-ил]-2-фторпурин-6-ил]-N-[(5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метил]карбамата (45 мг, 35,0% выход) в виде светло-желтого масла. ¹H ЯМР (400 MГц, CDCl₃) δ (м.д.) 8,02 (с, 1H), 6,40-6,43 (м, 1H), 5,02 (с, 2H), 4,70-4,73 (м, 2H), 4,09 (д, J =12 Гц, 1H), 3,90-3,92 (м, 1H), 3,11-3,14 (м, 1H), 2,85 (с, 1H), 2,50-2,55 (м, 1H), 2,45 (шир, 1H), 2,22 (с, 3H), 1,53(с, 9H).

Получение 4-(((9-((2R,4S,5R)-5-этинил-4-гидрокси-5-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-2-ил)-2-фтор-9H-пурин-6-ил)амино)метил)-5-метил-1,3-диоксол-2-она

[000212] К раствору трет-бутил-N-[9-[(2R,4S,5R)-5-этинил-4-гидрокси-5-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-2-ил]-2-фторпурин-6-ил]-N-[(5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метил]карбамата (40 мг, 0,079 ммоль, 1 экв.) в дихлорметане (ДХМ) (3 мл) при 25°C добавляли TFA (0,5 мл). Смесь перемешивали при 25°C в течение 12 ч. Реакционную смесь концентрировали и очищали методом преп.-HPLC (колонка: Boston Green ODS 150*30мм*5мкм; подвижная фаза: [вода (0,2% FA)-ACN]; B%: 15%-45%, 8 мин) с получением 4-(((9-((2R,4S,5R)-5-этинил-4-гидрокси-5-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-2-ил)-2-фтор-9H-пурин-6-ил)амино)метил)-5-метил-1,3-диоксол-2-она (1,7 мг, 5% выход) в виде белого твердого вещества. ЖХМС (ESI) m/z, C₁₇H₁₆FN₅O₆: рассчитано 405,1, измерено (M+H)⁺: 406,1. (M+Na)⁺: 428,1. ¹H ЯМР (400 MГц, CD₃OD) δ (м.д.) 8,26 (с, 1H), 6,38-6,35 (м, 1H), 4,76-4,72 (м, 1H), 4,51 (с, 1H), 3,87-3,84 (д, J=12 Гц, 1H), 3,78-3,75 (д, J=12 Гц, 1H), 3,09 (с, 2H), 2,80-2,75 (м, 1H), 2,64-2,57 (м, 1H), 2,24 (с, 3H). ¹⁹F ЯМР (376 MГц, CD₃OD) δ (м.д.) -53,00.

Пример 5 (способ 2):

4-(((9-((2R,4S,5R)-5-этинил-4-гидрокси-5-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-2-ил)-2-фтор-9H-пурин-6-ил)амино)метил)-5-метил-1,3-диоксол-2-он

[000213] Получение трет-бутил-N-[9-[(2R,4S,5R)-5-этинил-4-гидрокси-5-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-2-ил]-2-фторпурин-6-ил]-N-[(5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метил]карбамата

[000214] К раствору трет--бутил- N-[9-[(2R,4S,5R)-5-этинил-4-гидрокси-5-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-2-ил]-2-фторпурин-6-ил]карбамата (300 мг, 0,76 ммоль, 1 экв.) в DMF (5 мл) добавляли NaHCO₃ (128 мг, 1,52 ммоль, 2 экв.), затем добавляли 4-(бромметил)-5-метил-1,3-диоксол-2-он (294 мг, 1,52 ммоль, 2 экв.). Смесь перемешивали при 25°C в течение 48 ч. Смесь концентрировали. Полученный остаток очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ISCO®; 4 g SepaFlash® флэш-колонка с силикагелем, элюент с градиентом 0~100% этилацетата/петролейного эфира при 20 мл/мин) с получением трет-бутил N-[9-[(2R,4S, 5R)-5этинил-4-гидрокси-5-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-2-ил]-2-фторпурин-6-ил]-N-[(5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метил]карбамата (200 мг, 52% выход) в виде белого твердого вещества. ¹H ЯМР (400 MГц, CDCl₃) δ (м.д.) 7,98 (с, 1H), 6,45-6,33 (м, 1H), 4,99 (с, 1H), 5,03-4,94 (м, 1H), 4,78 (шир. д, J=11,2 Гц, 1H), 4,71 (шир. с, 1H), 4,16-4,02 (м, 2H), 3,11 (шир. с, 1H), 2,80 (с, 1H), 2,49 (шир. д, J=7,2 Гц, 1H), 2,42 (шир. с, 1H), 2,19 (с, 3H), 1,55 (с, 9H).

[000215] Получение 4-[[[9-[(2R,4S,5R)-5-этинил-4-гидрокси-5-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-2-ил]-2-фторпурин-6-ил]амино]метил]-5-метил-1,3-диоксол-2-она

[000216] К раствору трет-бутил N-[9-[(2R,4S,5R)-5-этинил-4-гидрокси-5-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-2-ил]-2-фторпурин-6-ил]-N-[(5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метил]карбамата (50 мг, 0,10 ммоль, 1 экв.)в CH₃CN (5 мл) добавляли ZnBr₂ (45 мг, 0,20 ммоль, 2 экв.). Смесь перемешивали при 25°C в течение 48 ч. Реакционную смесь фильтровали, а фильтрат концентрировали. Полученный остаток очищали методом преп.-HPLC (FA условие; колонка: 3_Phenomenex Luna C18 75×30ммx3мкм; подвижная фаза: [вода(0,2% FA)-ACN]; B%: 22%-52%, 6 мин) с получением 4-[[[9-[(2R,4S,5R)-5-этинил-4-гидрокси-5-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-2-ил]-2-фторпурин-6-ил]амино]метил]-5-метил-1,3-диоксол-2-она (19,8 мг, 48,8% выход) в виде белого твердого вещества. ЖХМС (ESI) m/z, C₁₇H₁₆FN₅O₆ : рассчитано 405,34, получено (M+H)⁺: 406,1. ¹H ЯМР (400 MГц, CD₃OD) δ (м.д.) 8,26 (с, 1H), 6,38-6,35 (м, 1H), 4,76-4,72 (м, 1H), 4,51 (шир. с, 2H), 3,87-3,84 (д, J=12 Гц, 1H), 3,78-3,75 (д, J=12 Гц, 1H), 3,09 (с, 1H), 2,80-2,75 (м, 1H), 2,64-2,57 (м, 1H), 2,24 (с, 3H). ¹⁹F ЯМР (376 MГц, CD₃OD) δ (м.д.) -52,33.

Пример 6:

((2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил)метил(2-(метил((5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метил)амино)этил)карбамат

Получение трет-бутил(2-(метил((5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метил)амино)этил)карбамата

[000217] К смеси трет-бутил-N-[2-(метиламино)этил]карбамата (451 мг, 2,59 ммоль, 1 экв.) и K₂CO₃ (393,9 мг, 2,85 ммоль, 1,1 экв.) в DMF (15 мл) добавляли 4-(бромметил)-5-метил-1,3-диоксол-2-он (500 мг, 2,59 ммоль, 1 экв.), смесь перемешивали при 20°C в течение 16 ч. Смесь концентрировали при пониженном давлении, очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ISCO®; 12 g SepaFlash® флэш-колонка с силикагелем, элюент градиента 0-20% этилацетата/петролейного эфира при 30 мл/мин) с получением трет-бутил-N-[2-[метил-[(5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метил]амино]этил]карбамата (500 мг, 1,75 ммоль, 67,4% выход) в виде желтого масла. ¹H ЯМР (400 MГц, ДМСО-d6) δ (м.д.) 6,65 (м, 1H), 3,37 (с, 2H), 2,99 (м, 2H), 2,39 (м, 2H), 2,18 (с, 3H), 2,09 (с, 3H), 1,37 (с, 9H).

Получение 4-(((2-аминоэтил)(метил)амино)метил)-5-метил-1,3-диоксол-2-она

[000218] К смеси трет-бутил-N-[2-[метил-[(5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метил]амино]этил]карбамата (200 мг, 0,699 нмоль, 1 экв.) в дихлорметане (2 мл) при 20°C добавляли TFA (1,54 г, 13,51 ммоль, 1 мл, 19,34 экв.), смесь перемешивали при 20°C в течение 16 ч. Смесь концентрировали при пониженном давлении с получением 4-[[2-аминоэтил(метил)амино]метил]-5метил-1,3-диоксол-2-она (120 мг, неочищенный, 3TFA) в виде желтого масла. ЖХМС (ESI) m/z, C₈H₁₄N₂O₃: рассчитано 186,1, измерено (M+H)⁺: 187,2.

Получение трет-бутил(9-((2R,4S,5R)-5-этинил-4-гидрокси-5-((((2-(метил((5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метил)амино)этил)карбамоил)окси)метил)тетрагидрофуран-2-ил)-2-фтор-9H-пурин-6-ил)карбамата

[000219] К смеси [(2R,3S,5R)-5-[6-(трет-бутоксикарбониламино)-2-фторпурин-9-ил]-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил]метил(4-нитрофенил)карбоната (34 мг, 0,060 ммоль, 1 экв.) и триэтиламина (30 мг, 0,30 ммоль, 5 экв.) в дихлорметане (2 мл) при 20°C добавляли 4-[[2-аминоэтил(метил)амино]метил]-5-метил-1,3-диоксол-2-он (38 мг, 0,072 ммоль, 1,2 экв., 3TFA), смесь перемешивали при 20°C в течение 16 ч. Смесь затем концентрировали при пониженном давлении и очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ISCO®; 4 g SepaFlash® флэш-колонка с силикагелем, элюент градиента 0~5% дихлорметана/MeOH при 25 мл/мин) с получением трет-бутил-N-[9-[(2R,4S,5R)-5-этинил-4-гидрокси-5-[2-[метил-[(5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метил]амино]этилкарбамоилоксиметил]тетрагидрофуран-2-ил]-2-фторпурин-6-ил]карбамата (34 мг, 92,1% выход) в виде желтого твердого вещества. ЖХМС (ESI) m/z, C₂₆H₃₂FN₇O₉: рассчитано 605,2, измерено (M+Na)⁺: 628,2.

Получение ((2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил)метил(2-(метил((5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метил)амино)этил)карбамата

[000220] К смеси трет-бутил-N-[9-[(2R,4S,5R)-5-этинил-4-гидрокси-5-[2-[метил-[(5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метил]амино]этилкарбамоилоксиметил]тетрагидрофуран-2-ил]-2-фторпурин-6-ил]карбамата (34 мг, 0,055 ммоль, 1 экв.) в толуоле (1 мл) добавляли TFA (129 мг, 1,13 ммоль, 0,084 мл, 20,45 экв.), смесь перемешивали при 20°C в течение 16 ч. Смесь концентрировали при пониженном давлении и очищали методом преп.-HPLC (колонка: Phenomenex Gemini-NX 150×30ммx5мкм; подвижная фаза: [вода (0,05% HCl)-ACN]; B%: 0%-30%, 7 мин), а затем повторно очищали методом преп.-HPLC (колонка: Welch Xtimate C18 150×25ммx5мкм; подвижная фаза: [вода (0,2% FA)-ACN]; B%: 1%-20%, 8 мин) с получением 4-(((9-((2R,4S,5R)-5-этинил-4-гидрокси-5-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-2-ил)-2-фтор-9H-пурин-6-ил)амино)метил)-5-метил-1,3-диоксол-2-она (2,0 мг, 20,0% выход) в виде белого твердого вещества. ЖХМС (ESI) m/z, C₂₁H₂₄FN₇O₇: рассчитано 505,2, измерено (M+H)⁺: 506,3, (M+Na)⁺: 528,2. ¹H ЯМР (400 MГц, CD₃OD) δ (м.д.) 8,15 (с, 1H), 6,32 (дд, J =8,0, 4,0 Гц, 1H), 4,80 (м, 1H), 4,47 (д, J =11,6 Гц, 1H), 4,24 (д, J =11,6 Гц, 1H), 3,45 (с, 2H), 3,19 (т, J =6,8, 2H), 3,17 (с, 1H), 2,84 (м, 1H), 2,66 (м, 1H), 2,51 (т, J =6,8, 2H), 2,30 (с, 3H), 2,14 (с, 3H). ¹⁹F ЯМР (376 MГц, CD₃OD) δ (м.д.) -52,93 (s).

Пример 7:

((2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил)метил-4-(метил(((5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метокси)карбонил)амино)бутаноат

Получение 4-(метиламино)бутановой кислоты

[000221] Смесь 1-метилпирролидин-2-она (5,0 г, 50,44 ммоль, 4,90 мл, 1 экв.), HCl (51,0 г, 531,53 ммоль, 50 мл, 38% чистоты, 10,54 экв.) перемешивали при 165°C в течение 16 ч. Реакционную смесь концентрировали. Полученный остаток растирали с ацетоном с получением 4-(метиламино)бутановой кислоты (4 г, 51,6% выход, соль HCl) в виде белого твердого вещества.

Получение 4-[метил-[(5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метоксикарбонил]амино]бутановой кислоты

[000222] К раствору 4-(метиламино)бутановой кислоты, соли HCl (1,36 г, 8,83 ммоль, 1 экв.) в H₂O (25 мл) добавляли NaHCO₃ (2,23 г, 26,49 ммоль, 1,03 мл, 3 экв.), а затем (5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метилкарбонохлоргидрат (1,7 г, 8,83 ммоль, 1 экв.) в ТГФ (25 мл). Смесь перемешивали при 20°C в течение 16 ч. Реакционную смесь концентрировали и очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ISCO®; 12 g SepaFlash® флэш-колонка с силикагелем, элюент 0~5% метанола/дихлорметана при 20 мл/мин) с получением 4-[метил-[(5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метоксикарбонил]амино]бутановой кислоты (1,5 г, 62,2% выход) в виде бесцветного масла. ¹H ЯМР (400MГц, ДМСО-d₆) δ (м.д.) 12,07 (шир. с, 1H), 4,89 (с, 2H), 3,22 (шир. т, J=7,2 Гц, 2H), 2,81 (с, 3H), 2,28-2,03 (м, 5H), 1,69 (м, 2H).

Получение (5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метил-N-(4-хлор-4-оксобутил)-N-метилкарбамата

[000223] К раствору 4-[метил-[(5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метоксикарбонил]амино]бутановой кислоты (70 мг, 0,256 ммоль, 1 экв.) в ДХМ (5 мл) при 0°C добавляли DMF (0,2 мг, 0,0026 ммоль, 0,01 экв.) и оксалилхлорид (65 мг, 0,512 ммоль, 0,045 мл, 2 экв.). Смесь перемешивали при 20°C в течение 0,5 ч. Реакцию концентрировали досуха с получением (5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метил-N-(4-хлор-4-оксобутил)-N-метилкарбамата (50 мг, неочищенный) в виде желтого масла, которое использовали в следующей реакции без дополнительной очистки.

Получение [(2R,3S,5R)-5-[6-(трет-бутоксикарбониламино)-2-фторпурин-9-ил]-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил]метил-4-[метил-[(5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метоксикарбонил]амино]бутаноата

[000224] К раствору трет-бутилN-[9-[(2R,4S,5R)-5-этинил-4-гидрокси-5-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-2-ил]-2-фторпурин-6-ил]карбамата (20 мг, 0,0508 ммоль, 1 экв.) в пиридине (2 мл) добавляли (5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метил-(4-хлор-4-оксобутил)-N-метилкарбамат (66 мг, 0,226 ммоль, 4,45 экв.). Смесь перемешивали при 20°C в течение 16 ч. Реакционную смесь концентрировали с получением [(2R,3S,5R)-5-[6-(трет-бутоксикарбониламино)-2-фторпурин-9-ил]-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил]метил-4-[метил-[(5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метоксикарбонил]амино]бутаноата (35 мг, неочищенный) в виде желтого масла, которое использовали в следующей реакции без дополнительной очистки.

Получение ((2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил)метил-4-(метил(((5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метокси)карбонил)амино)бутаноата

[000225] К раствору [(2R,3S,5R)-5-[6-(трет-бутоксикарбониламино)-2-фторпурин-9-ил]-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил]метил-4-[метил-[(5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метоксикарбонил]амино]бутаноата (25 мг, 0,0386 ммоль, 1 экв.) в толуоле (2 мл) добавляли TFA (770 мг, 0,675 ммоль, 0,50 мл, 10%, 17,52 экв.). Смесь перемешивали при 20°C в течение 16 ч, а затем концентрировали досуха. Остаток очищали методом преп.-HPLC (условия TFA; колонка: Boston Green ODS 150*30мм*5мкм; подвижная фаза: [вода (0,075% TFA)-ACN]; B%: 20%-50%,12 мин) с получением ((2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил)метил-4-(метил(((5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метокси)карбонил)амино)бутаноата (1,8 мг, 8,51% выход) в виде светло-желтого твердого вещества. ЖХМС (ESI) m/z, C₂₃H₂₆FN₆O_9, рассчитано 548,2, получено (M+H)⁺: 549,2. ¹H ЯМР (400MГц, CD₃OD) δ (м.д.) 8,14 (с, 1H), 6,29 (м, 1H), 4,88 (с, 2H), 4,44 (т, J=11,2 Гц, 1H), 4,25 (т, J=11,2 Гц, 1H), 3,26-3,13 (м, 3H), 2,96-2,86 (м, 2H), 2,82 (с, 2H), 2,64 (м, 1H), 2,25 (м, 2H), 2,16-2,07 (м, 3H), 1,74 (м, 2H), 1,31 (с, 1H). ¹⁹F ЯМР (376MГц, CD₃OD) δ (м.д.) -52,82 (s).

Пример 8:

N-(9-((2R,4S,5R)-5-этинил-4-гидрокси-5-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-2-ил)-2-фтор-9H-пурин-6-ил)бутирамид

[000226] Получение [(2R,3S,5R)-5-[6-[бутаноил(трет-бутоксикарбонил)амино]-2-фторпурин-9-ил]-2-этинил-3-(4-метилбензоил)окситетрагидрофуран-2-ил]метил-4-метилбензоата

[000227] К раствору [(2R,3S,5R)-5-[6-(трет-бутоксикарбониламино)-2-фторпурин-9-ил]-2-этинил-3-(4-метилбензоил)окситетрагидрофуран-2-ил]метил-4-метилбензоата (74 мг, 0,118 ммоль, 1 экв.) в ДХМ (5 мл) добавляли DMAP (1,5 мг, 0,012 ммоль, 0,1 экв.), ТЭА (36 мг, 0,354 ммоль, 3,0 экв.) и бутаноилхлорид (25 мг, 0,235 ммоль, 2 экв.). Смесь перемешивали при 25°C в течение 16 ч. Смесь концентрировали и разбавляли H₂O (30 мл), затем экстрагировали EtOAc (15×3 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (30 мл), сушили над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Полученный остаток очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ISCO®; 4 g SepaFlash® флэш-колонка с силикагелем, элюент градиента 0~20% этилацетата/петролейного эфира при 18 мл/мин) с получением [(2R,3S,5R)-5-[6-[бутаноил(трет-бутоксикарбонил)амино]-2-фторпурин-9-ил]-2-этинил-3-(4-метилбензоил)окситетрагидрофуран-2-ил]метил-4-метилбензоата (30 мг, 30% выход) в виде светло-желтого масла. ЖХМС (ESI) m/z, C₃₇H₃₈FN₅O₈: рассчитано 700,3, получено (M+H)⁺: 701,3.

[000228] Получение [(2R,3S,5R)-5-[6-(бутаноиламино)-2-фторпурин-9-ил]-2-этинил-3-(4-метилбензоил)окситетрагидрофуран-2-ил]метил-4-метилбензоата

[000229] К раствору [(2R,3S,5R)-5-[6-[бутаноил(трет-бутоксикарбонил)амино]-2-фторпурин-9-ил]-2-этинил-3-(4-метилбензоил)окситетрагидрофуран-2-ил]метил-4-метилбензоата (30 мг, 0,0428 ммоль, 1 экв.) в толуоле (1 мл) добавляли TFA (0,1 мл). Смесь перемешивали при 25°C в течение 16 ч. Смесь разбавляли H₂O (2 мл) и экстрагировали EtOAc (3×3 мл), объединенный органический слой промывали солевым раствором (15×3 мл), сушили над Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Полученный остаток очищали методом преп.-ТСХ (SiO₂, петролейный эфир/этилацетат=1:1) с получением [(2R,3S,5R)-5-[6-(бутаноиламино)-2-фторпурин-9-ил]-2-этинил-3-(4-метилбензоил)окситетрагидрофуран-2-ил]метил-4-метилбензоата (18 мг, 64% выход) в виде светло-желтого масла. ЖХМС (ESI) m/z, C₃₂H₃₀FN₅O₆: рассчитано 600,2, получено (M+H)⁺: 601,3.

[000230] Получение N-[9-[(2R,4S,5R)-5-этинил-4-гидрокси-5-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-2-ил]-2-фторпурин-6-ил]бутанамида

[000231] К раствору [(2R,3S,5R)-5-[6-(бутаноиламино)-2-фторпурин-9-ил]-2-этинил-3-(4-метилбензоил)окситетрагидрофуран-2-ил]метил-4-метилбензоата (18 мг, 0,030 ммоль, 1 экв.) в ТГФ (2 мл) добавляли CH₃ONa (54 мг, 0,30 ммоль, 30% чистоты в MeOH, 10 экв.). Смесь перемешивали при -25°C в течение 4 ч. Смесь подкисляли HOAc до pH=7, затем смесь концентрировали. Полученный остаток очищали методом преп.-HPLC (условие FA; колонка: 3_Phenomenex Luna C18 75×30ммx3мкм; подвижная фаза: [вода (0,2% FA)-ACN]; B%: 15%~45%, 6 мин) с получением N-[9-[(2R,4S,5R)-5-этинил-4-гидрокси-5-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-2-ил]-2-фторпурин-6-ил]бутанамида (4,4 мг, 40% выход) в виде белого твердого вещества. ЖХМС (ESI) m/z, C₁₆H₁₈FN₅O₄: рассчитано 364,1, получено (M+H)⁺: 365,2. ¹H ЯМР (400 MГц, CD₃CN) δ (м.д.) 9,15 (шир, 1H), 8,26 (с, 1H), 6,37-6,34 (м, 1H), 4,70 (т, J=6,4 Гц, 1H), 3,82-3,78 (м, 1H), 3,74-3,69 (м, 1H), 2,96-2,93 (м, 1H), 2,84-2,75 (м, 2H), 2,66 (т, J=7,6 Гц, 2H), 2,59-2,52 (м, 2H), 1,74-1,67 (м, 2H), 0,99 (т, J=7,6 Гц, 3H). ¹⁹F ЯМР (376 MГц, CD₃CN) δ (м.д.) -51,9 (с, 1F).

Пример 9:

[(2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-4,4-дидейтерио-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил]метил(5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метилкарбонат

[000232] Получение [(2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-4,4-дидейтерио-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил]метил(5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метилкарбоната

[000233] К смеси (2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-4,4-дидейтерио-2-этинил-2-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-3-ола (60 мг, 0,203 ммоль, 1 экв.) в пиридине (0.5 мл) по каплям добавляли (5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метилкарбонохлоргидрат (195 мг, 1,02 ммоль, 5 экв.) в ДХМ (0,5 мл). Полученную смесь перемешивали при 25°C в течение 3 ч. Реакционную смесь концентрировали. Полученный остаток очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ISCO®; 4 g SepaFlash® флэш-колонка с силикагелем, элюент с градиентом 0~5% метанола/дихлорметана при 18 мл/мин) с получением [(2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-4,4-дидейтерио-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил]метил(5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метилкарбоната (21 мг, 22,9% выход) в виде белого твердого вещества. ЖХМС (ESI) m/z, C₁₈H₁₄D₂FN₅O₈: рассчитано 451,11 получено (M+H)⁺: 452,1. ¹H ЯМР (400MГц, CD3CN) δ (м.д.) 7,92 (с, 1H), 6,31 (с, 2H), 6,25 (с, 1H), 4,9-4,82 (м, 2H), 4,73-4,71(д, J=8 Гц, 1H), 4,52-4,50 (д, J=8 Гц, 1H), 4,32-4,29 (д, J=12 Гц, 1H), 3,74-3,72 (д, J=8 Гц, 1H), 3,00 (с, 1H), 2,10 (с, 3H). ¹⁹F ЯМР (376MГц, CD3CN) δ (м.д.) -52,84 (с, 1F).

Пример 10:

[[(2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-4,4-дидейтерио-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил]-дидейтериометил](5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метилкарбонат

[000234] Получение [[(2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-4,4-дидейтерио-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил]-дидейтериометил](5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метилкарбоната

[000235] К смеси (2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-4,4-дидейтерио-2-[дидейтерио(гидрокси)метил]-2-этинилтетрагидрофуран-3-ола (50 мг, 0,168 ммоль, 1 экв.) в пиридине (0,5 мл) по каплям добавляли (5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метилкарбонохлоргидрат (162 мг, 0,84 ммоль, 5 экв.) в ДХМ (0,5 мл). Полученную смесь перемешивали при 25°C в течение 3 ч. Реакционную смесь концентрировали. Полученный остаток очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ISCO®; 4 g SepaFlash® флэш-колонка с силикагелем, элюент с градиентом 0~5% метанола/дихлорметана при 18 мл/мин) с получением [[(2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-4,4-дидейтерио-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил]-дидейтерио-метил](5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метилкарбоната (40,6 мг, 53% выход) в виде белого твердого вещества. ЖХМС (ESI) m/z, C₁₈H₁₂D₄FN₅O₈: рассчитано 453,3, получено ( M+H)⁺: 454,2. ¹H ЯМР (400MГц, ДМСО-d₆) δ (м.д.) 7,92 (с, 1H), 6,31 (с, 2H), 6,25 (с, 1H), 4,91-4,82 (м, 2H), 4,72-4,71(д, J=4 Гц, 1H), 3,74-3,72(д, J=8 Гц, 1H), 3,00 (с, 1H), 2,10 (с, 3H). ¹⁹F ЯМР (376MГц, ДМСО-d₆) δ (м.д.) -52,85 (с, 1F).

Пример 11:

((2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил)метилбутилкарбонат

[000236] Получение ((2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил)метилбутилкарбоната

[000237] К раствору (2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-2-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-3-ола (50 мг, 0,17 ммоль, 1 экв.) в пиридине (0,5 мл) медленно добавляли бутилкарбонохлоргидрат (26 мг, 0,187 ммоль, 0,024 мл, 1,1 экв.) при 0°C и перемешивали смесь в течение 2 ч. Реакционную смесь концентрировали, полученный остаток очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ISCO®; 4 g SepaFlash® флэш-колонка с силикагелем, элюировали 0~5% MeOH/ДХМ при 30 мл/мин) с получением соединения ((2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил)метилбутилкарбоната (7,6 мг, 11,3% выход) в виде белого твердого вещества. ЖХМС (ESI) m/z, C₁₇H₂₀FN₅O₅: рассчитано 393,14, получено (M+H)⁺: 394,1. ¹H ЯМР (400MГц, CD₃CN) δ (м.д.): 7,96 (с, 1H), 6,27 (м, 3H), 4,73 (к, J=6,8 Гц, 1H), 4,46 (д, J=11,6 Гц, 1H), 4,31-4,23 (м, 1H), 4,10-3,99 (м, 2H), 3,75-3,66 (м, 1H), 2,99 (с, 1H), 2,85 (м, 1H), 2,57 (м, 1H), 1,61-1,52 (м, 2H), 1,28 (м, 2H), 0,94-0,87 (м, 3H); ¹⁹F ЯМР (376MГц, CD₃CN) δ (м.д.): -52,86 (с, 1F).

Пример 12:

(2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-2-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-3-ил ((5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метил)карбонат

[000238] Получение (2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-(((трет-бутилдиметилсилил)окси)метил)-2-этинилтетрагидрофуран-3-ола

[000239] К раствору (2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-2-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-3-ола (0,5 г, 1,71 ммоль, 1 экв.) в DMF (5 мл) добавляли имидазол (349 мг, 5,13 ммоль, 3 экв.) и TBSCl (386 мг, 2,56 ммоль, 1,5 экв.). Смесь перемешивали при 25°C в течение 16 ч. Реакционную смесь концентрировали. Полученный остаток очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ISCO®; 4 g SepaFlash® флэш-колонка с силикагелем, элюировали 0~5% MeOH/ДХМ при 18 мл/мин) с получением (2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-(((трет-бутилдиметилсилил)окси)метил)-2-этинилтетрагидрофуран-3-ола (331 мг, 47,5% выход) в виде светло-желтого твердого вещества. ¹H ЯМР (400MГц, CD₃CN) δ (м.д.) 8,03 (с, 1H), 6,39-6,17 (м, 3H), 4,71 (к, J=6,8 Гц, 1H), 3,93-3,87 (м, 1H), 3,84-3,76 (м, 1H), 3,49 (д, J=6,4 Гц, 1H), 2,91 (с, 1H), 2,85-2,73 (м, 1H), 2,55 (м, 1H), 2,50 (с, 2H), 0,88-0,82 (м, 9H), 0,02 (д, J=16 Гц, 6H); ¹⁹F ЯМР (376MГц, CD₃CN) δ (м.д.) -53,04 (с, 1F).

[000240] Получение [(2R, 3S, 5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-2-[[трет-бутил(диметил)силил]оксиметил]-2-этинилтетрагидрофуран-3-ил](4-нитрофенил)карбоната

[000241] К раствору (2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-(((трет-бутилдиметилсилил)окси)метил)-2-этинилтетрагидрофуран-3-ола (100 мг, 0,245 ммоль, 1 экв.) в ТГФ (2 мл) добавляли пиридин (0,40 мл, 20 экв.) и (4-нитрофенил)карбонохлоргидрат (494 мг, 2,45 ммоль, 10 экв.). Смесь перемешивали при 25°C в течение 50 ч. Реакционную смесь концентрировали. Полученный остаток очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ISCO®; 4 g SepaFlash® флэш-колонка с силикагелем, элюировали 0~5% MeOH/ДХМ при 18 мл/мин) с получением соединения [(2R, 3S, 5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-2-[[трет-бутил(диметил)силил]оксиметил]-2-этинилтетрагидрофуран-3-ил](4-нитрофенил)карбоната (178 мг, неочищенный) в виде светло-желтого твердого вещества.

[000242] Получение [(2R, 3S, 5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-2-[[трет-бутил(диметил)силил]оксиметил]-2-этинилтетрагидрофуран-3-ил](5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метилкарбоната

[000243] К раствору [(2R, 3S, 5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-2-[[трет-бутил(диметил)силил]оксиметил]-2-этинилтетрагидрофуран-3-ил](4-нитрофенил)карбоната (249 мг, 0,435 ммоль, 1 экв.) в ТГФ (4 мл) добавляли DMAP (5 мг, 0,043 ммоль, 0,1 экв.) и 4-(гидроксиметил)-5-метил-1,3-диоксол-2-он (170 мг, 1,30 ммоль, 3 экв.). Смесь перемешивали при 30°C в течение 2 ч. Реакционную смесь концентрировали. Полученный остаток очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ISCO®; 4 g SepaFlash® флэш-колонка с силикагелем, элюировали 0~5% MeOH/ДХМ при 18 мл/мин) с получением соединения [(2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-2-[[трет-бутил(диметил)силил]оксиметил]-2-этинилтетрагидрофуран-3-ил](5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метилкарбоната (239 мг, 97,6% выход) в виде коричневого твердого вещества. ¹H ЯМР (400MГц, CD₃CN) δ (м.д.): 8,06-7,95 (м, 1H), 6,42-6,26 (м, 3H), 5,61 (м, 1H), 4,97 (м, 2H), 3,98-3,93 (м, 1H), 3,89-3,83 (м, 1H), 3,16-3,03 (м, 1H), 2,95 (с, 1H), 2,70 (м, 1H), 2,15 (с, 3H), 0,86 (с, 9H), 0,04 (д, J=10,3 Гц, 6H); ¹⁹F ЯМР (376MГц, CD₃CN) δ (м.д.): -52,66 (с, 1F).

[000244] Получение (2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-2-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-3-ил((5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метил)карбоната

[000245] К раствору [(2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-2-[[трет-бутил(диметил)силил]оксиметил]-2-этинилтетрагидрофуран-3-ил](5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метилкарбоната (359 мг, 0,637 ммоль, 1 экв.) в пиридине (3,5 мл) и ТЭА (3,5 мл) добавляли N, N-диэтилэтанамина тригидрофторид (3,55 г, 22,02 ммоль, 34,58 экв.) при 0°C, затем смесь перемешивали при 25°C в течение 1 ч. Реакционную смесь концентрировали. Полученный остаток очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ISCO®; 4 g SepaFlash® флэш-колонка с силикагелем, элюировали 0~5% MeOH/ДХМ при 18 мл/мин) с получением (2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-2-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-3-ил((5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метил)карбоната (230 мг, 80% выход) в виде белого твердого вещества. ЖХМС (ESI) m/z, C₁₈H₁₆FN₅O₈: 449,1, получено (M+H)⁺: 450,1. ¹H ЯМР (400MГц, CD₃CN) δ(м.д.): 7,95 (с, 1H), 6,47 (с, 2H), 6,34 (м, 1H), 5,53 (м, 1H), 5,02-4,93 (м, 3H), 3,92-3,70 (м, 2H), 3,07 (м, 1H), 2,95 (с, 1H), 2,61 (м, 1H), 2,15 (с, 3H); ¹⁹F ЯМР (376MГц, CD₃CN) δ (м.д.): -53,27 (с, 1F).

Пример 13:

((2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-3-((((5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метокси)карбонил)окси)тетрагидрофуран-2-ил)метил((5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метил)карбонат

[000246] Получение [(2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-2-этинил-2-[(4-нитрофенокси)карбонилоксиметил]тетрагидрофуран-3-ил](4-нитрофенил)карбоната

[000247] К раствору (2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-2-этинил-2-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-3-ола (100 мг, 0,341 ммоль, 1 экв.) в ДХМ (5 мл) добавляли пиридин (674 мг, 8,53 ммоль, 25 экв.) и (4-нитрофенил)карбонохлоридат (1,03 г, 5,12 ммоль, 15 экв.) при 26°C. Смесь перемешивали при 26°C в течение 4 ч. Смесь гасили H₂O (30 мл). К смеси добавляли ДХМ (30 мл) и промывали H₂O (30 мл), солевым раствором (30 мл). Органический слой сушили над Na₂SO₄ и концентрировали. Остаток очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ISCO®; 4 g SepaFlash® флэш-колонка с силикагелем, элюент градиента 0~6% метанола/дихлорметана при 18 мл/мин) с получением [(2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-2-этинил-2-[(4-нитрофенокси)карбонилоксиметил]тетрагидрофуран-3-ил](4-нитрофенил)карбоната (137 мг, 51% выход, 80% чистоты) в виде белого твердого вещества. ЖХМС (ESI) m/z, C₂₆H₁₈FN₇O₁₁: рассчитано 623,10, получено 624,1 (M+H)⁺.

[000248] Получение [(2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-2-этинил-2-[(5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метоксикарбонилоксиметил]тетрагидрофуран-3-ил](5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метилкарбоната

[000249] К раствору [(2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-2-этинил-2-[(4-нитрофенокси)карбонилоксиметил]тетрагидрофуран-3-ил](4-нитрофенил)карбоната (99 мг, 0,159 ммоль, 1 экв.) в ТГФ (5 мл) добавляли DMAP (1,9 мг, 0,016 ммоль, 0,1 экв.) и 4-(гидроксиметил)-5-метил-1,3-диоксол-2-он (248 мг, 1,91 ммоль, 12 экв.). Смесь перемешивали при 25°C в течение 16 ч. Смесь гасили H₂O (30 мл). К смеси добавляли ДХМ (30 мл). Смесь промывали H₂O (30 мл) и солевым раствором (30 мл). Органический слой сушили над Na₂SO₄ и концентрировали. Полученный остаток очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ISCO®; 4 g SepaFlash® флэш-колонка с силикагелем, элюент градиента 0~10% метанола/дихлорметана при 18 мл/мин) с получением [(2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-2-этинил-2-[(5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метоксикарбонилоксиметил]тетрагидрофуран-3-ил](5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метилкарбоната (89 мг, 56% выход, 60% чистоты). Вещество дополнительно очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле и перекристаллизовали (CH₃CN/Hep) с получением [(2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-2-этинил-2-[(5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метоксикарбонилоксиметил]тетрагидрофуран-3-ил](5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метилкарбоната в виде белого твердого вещества. ЖХМС (ESI) m/z, C₂₄H₂₀FN₅O₁₃: рассчитано 605,10, получено (M+H)⁺: 606,1. ¹H ЯМР (400MГц, ДМСО-d₆) δ (м.д.) 8,30 (с, 1H), 7,89 (шир. с, 2H), 6,38-6,34 (м, 1H), 5,62-5,59 (м, 1H), 5,14-5,06 (м, 2H), 4,99 (с, 2H), 4,53 (д, J=11,6 Гц, 1H), 4,37 (д, J=11,6 Гц, 1H), 3,83 (с, 1H), 3,21-3,17 (м, 1H), 2,73-2,70 (м, 1H), 2,19 (с, 3H), 2,14 (с, 3H). ¹⁹F ЯМР (376MГц, ДМСО-d₆) δ (м.д.) -51,47 (с, 1F).

Пример 14:

Превращение и устойчивость пролекарств аденозинового производного

[000250] Устойчивость пролекарств и превращение пролекарств в исходное EFdA (формула T-1A) измеряли как при анализе плазмы, так и печени S9, и данные показаны в Таблице 2.

Устойчивость плазмы

[000251] Объединенную замороженную плазму размораживали на водяной бане при 37°C перед экспериментом. Плазму центрифугировали при 4000 об/мин в течение 5 мин и комки удаляли, если они возникали. При необходимости pH доводили до 7,4 ± 0,1.

Получение исследуемых соединений и положительного контроля (пропантелина бромида): 1 мM промежуточного раствора готовили разбавлением 10 мкл маточного раствора 90 мкл MeOH; 1 мМ промежуточного положительного контроля пропантелина готовили разбавлением 10 мкл маточного раствора 90 мкл воды сверхвысокой чистоты. 100 мкМ дозирующего раствора готовили разбавлением 20 мкл промежуточного раствора (1 мM) 180 мкл MeOH. 98 мкл контрольной плазмы обогащали 2 мкл дозирующего раствора (100 мкM) с получением 2 мM конечной концентрации в двух экземплярах, и образцы инкубировали при 37°C на водяной бане. В каждой точке времени (0,10, 30, 60 и 120 мин) 400 мкл стоп-раствора (0,1% FA в MeOH, содержащем 200 нг/кг толбутамида и 200 нг/кг лабеталола) добавляли к осевшему белку и тщательно смешивали. Планшеты центрифугировали с образцами при 4000 об/мин в течение 10 мин. Аликвоту супернатанта (100 мкл) переносили из каждой лунки в другие планшеты.

Анализ данных: % оставшегося исследуемого соединения после инкубации в плазме рассчитывали с применением следующего уравнения:

% оставшегося=100 x (PAR при заданном времени инкубации/PAR при времени T0)

где PAR представляет собой соотношение площади пика аналита по отношению к внутреннему стандарту(IS) (условие подвижной фазы ЖХ/МС/МС: 0,1% муравьиной кислоты в воде /0,1% муравьиной кислоты в ацетонитриле. Заданными точками времени инкубации являются T0 (0 мин), Tn (n=0, 10, 30, 60, 120 мин).

Устойчивость печени S9

[000252] Раствор промежуточного соединения: разбавляли 5 мкл соединений или контролей (7-этоксикумарин) из маточного раствора (10 мM) 495 мкл MeOH (Конц.: 100 мкM, 1% ДМСО, 99% MeOH). Стоп-раствор: холодный ACN (включая 100 нг/кг толбутамида и лабеталола в качестве внутреннего стандарта). Ко всем планшетам добавляли 2 мкл исследуемого соединения или контрольного рабочего раствора/лунка (T0, T5, T10, T20, T30, T60, NCF60), за исключением пустой матрицы. Добавляли 600 мкл/лунка стоп-раствор (холодный в 4°C, включая 100 нг/кг толбутамида/100 нг/кг лабеталола) для завершения планшета T0, затем его помещали на лед. Диспергировали 840 мкл/лунка раствор S9 в 96-луночном планшете в качестве резервуара согласно карте планшета. Затем добавляли 100 мкл/лунка в каждый планшет при помощи Apricot. Инкубировали раствор S9 и соединения при 37°C в течение приблизительно 10 мин, за исключением NCF60 и T0. После добавления раствора S9 и 98 мк LPB буфера к NCF60 инкубировали при 37°C без предварительного нагрева, запуск таймера 1. Через 60 мин для завершения реакции добавляли 600 мкл/лунка стоп-раствора. После предварительного нагрева диспергировали 760 мкл/лунка кофакторного раствора в 96-луночном планшете в качестве резервуара согласно карте планшета. Затем добавляли 98 мкл/лунка в каждый планшет при помощи Apricot для начала реакции. Инкубировали при 37°C, запуск таймера 2, добавляли 600 мкл/лунка стоп-раствора (холодного в 4°C, включая100 нг/кг толбутамида и лабеталола) для завершения реакции. Пробы центрифугировали при 4000 об/мин в течение 20 мин. Во время центрифугирования загружали 8×новых 96-луночных планшетов 300 мкл воды для HPLC, затем переносили 100 мкл супернатанта, смешивали с водой для ЖХ/МС/МС, переносили в биоаналитические системы для анализа ХЖ-МС/МС. Применяли уравнение кинетики первого порядка для расчета t_1/2 и CL: Уравнение кинетики первого порядка:

,

Результаты устойчивости приводимых в качестве примера соединений в плазме человека и печени человека S9 изложены в Таблице 2 ниже.

Таблица 2. Данные превращения и периода полужизни.

Формула Устойчивость в плазме человека Устойчивость в печени человека S9 Период полужизни Образование EFdA Период полужизни Образование EFdA 2-A A Нет B Нет 3-A A Нет B Нет 4-A C Да C Да 5-A A Нет B Нет 6-A C Нет C Да 7-A B Нет C Нет 4-C C Да C Да

Диапазоны периода полужизни: A : >200 минут; B: 50-200 минут; C: < 50 минут.

[000253] Данные показывали, что аденозиновое производное 4-A и 4-C может быть превращено в заданное лекарственное средство эффективно при анализах в плазме человека и печени S9, и 6-A может быть превращено в заданное лекарственное средство эффективно при анализе печени S9.

Пример 15:

Воздействия на плазму после перорального введения пролекарств собакам породы бигль

[000254] Фармакокинетику EFdA и пролекарства формулы 4-A изучали на собаках после перорального введения 5 мг-эквивалент/кг дозы EFdA.

[000255] Составы: пролекарства составляли в виде растворов при 1,65 мг/мл в 20% PEG400 водном растворе в течение 0,5 часа перед дозой.

[000256] Введение дозы и отбор образцов: Прижизненную фазу данного испытания проводили в лаборатории Чарльз Ривер (CRL) в Вустере, Массачусетс, в соответствии со стандартными процедурами с животными Комитета по содержанию и использованию лабораторных животных (IACUC) CRL наряду с руководством IACUC, что соответствуют Закону о благополучии животных, Руководство по содержанию и использованию лабораторных животных, и были одобрены комитетом IACUA. Для исследований использовали голодных самцов собак породы бигль (10 +/- 2 кг). Каждое лекарственное средство вводили в виде одной дозы при помощи желудочного зонда (5 мл/кг). Доза пролекарства формулы 4-A (8,25 мг/кг) была эквивалентной дозе 5 мг/кг EFdA. Образцы плазмы собирали при 0 (до введения дозы), через 30 мин, 1, 2, 4, 6, 8, 12 и24 ч после введения дозы. Кровь (приблизительно от 0,1 до 0,2 мл) сразу обрабатывали для плазмы центрифугированием при 3500 об/мин при 5°C в течение 10 мин сразу после сбора. Образцы плазмы замораживали и сохраняли при -70°C до анализа. Для стабилизации пролекарства при сборе образцов и последующих анализах к пробиркам для сбора крови K2ЭДТА на влажном льду перед сбором проб добавляли следующие стабилизирующие реагенты: на каждые 100 мл крови 15 мл предварительно приготовленного коктейля из ингибиторов состоит из 1 мM DFP, 100 мM дихлорвоса, 100 мM 2-гидроксихинолина, 100 мM PCMB, 1 мM параоксона, 100 мM ПМСФ, 100 мM NaF, 30,0 мM ЭДТА и 15 мM лимонной кислоты, 10 мл 0,2 M эзерина и 10 мл 0,2 M растворов BNPP.

[000257] Определение EFdA и пролекарств в плазме: вкратце, плазму (20 мкл) смешивали с 100 мкл ацетонитрила для осаждения белка. В соответствии с процедурой сбора образцов тот же протокол коктейля также добавляли для стабилизации пролекарства в стандартных образцах и образцах контроля качества.

[000258] Биоанализ: трехквадрупольный масс-спектрометр Sciex API-6500, соединенный с HPLC системой Shimadzu (Framingham, MA 01701), использовали для количественного анализа образцов плазмы. Колонкой была колонка Waters HSS T3 (2,1×50 мм, 1,8 мм). Используемой подвижной фазой была: A, 5% аценитрила в 2 мM буфере формиата аммония; B, 95% аценитрила в 2 мM буфере формиата аммония, pH 6,0. Скорость потока составляла 0,6 мл/мин с общим временем анализа 3,0 мин. Градиент HPLC начинался при 98% A/2% B в течение 0,20 мин, с последующим возрастанием линейного градиента до 25% в течение следующих 1,40 мин; градиент подвижной B впоследствии увеличивали до 100% в течение следующей 1,0 мин, а затем выдерживали в течение дополнительных 0,2 мин перед сокращением до 2% подвижной фазы B в пределах следующих 0,2 мин. Обнаружение пролекарства и EFdA достигали с применением режима масс-спектроскопии с положительной ионизации электрораспылением с применением режима единичного разрешения. Режимы множественного отслеживания реакций (MRM) использовали для количественного определения как пролекарства, так и EFdA, например, переход MRM для EFdA составлял 294,0-153,90 Да, а переход для пролекарства 4-A составлял 450,0-153,9 Да. Площади пика интегрировали при помощи Sciex program Analyst®, версия 1.6.3, работающей на компьютере с Windows 7, где концентрации определяли взвешенной (1/x2) линейной регрессией соотношений площади пика (площадь пика EFdA/площадь пика соответствующего IS) по отношению к номинальным концентрациям калибровочным стандартам плазмы. Расчеты проводили на неокругленных числах. В общем, при помощи Analyst® определяли точность и правильность калибровочных стандартов и контрольных образцов.

[000259] Фармакокинетические расчеты: некомпартментный (NCA) анализ индивидуальных данных в плазме «концентрация-время» EFdA и пролекарства проводили с применением модуля WinNonlin на платформе Phoenix PK/PD (версия 8.3.0.5005, Certara Inc., Princeton, NJ 08540). Расчеты проводили перед округлением, и в фармакокинетических анализах использовали номинальное время отбора проб. Воздействия были выражены как площади под кривыми концентрации в плазме от нуля до 24 часов (AUC_{0-24 ч}). Значения AUC рассчитывали с применением линейного правила трапеций.

[000260] Концентрации плазмы: результаты исследований PK показаны в таблицах 3 и 4. Такие данные устанавливают in vivo , что пролекарство формулы 4-A может быть легко доставлено перорально, и может эффективно высвобождать EFdA in vivo с минимальным количеством пролекарства, обнаруживаемого в общем кровообращении. Например, пролекарство формулы 4-A может высвобождать значительно больше EFdA in vivo , чем эквивалентная доза EFdA, т. e., на 91%, 102%, 55%, 79% и 200% больше при 0,25, 0,5, 1, 2 и 4-часовых моментах времени (см. таблицу 3). Кроме того, пролекарство формулы 4-A может давать более высокую AUC и C_max , чем эквивалентная доза EFdA (см. таблицу 4).

Таблица 3: Концентрация EFdA в плазме и пролекарства формулы 4-A после одной пероральной дозы самцам собак породы бигль

Значения концентрации EFdA (нг/кг) в плазме собаки Пролекарство формулы 4-A
PO (8,25 мг/кг) ID животного Моменты времени (часы) 2001 2002 2003 Среднее значение ДН % КВ 0,250 463 533 1040 679 315 46,4% 0,500 593 621 749 654 83,2 12,7% 1,00 585 555 538 559 23,8 4,3% 2,00 369 410 239 339 89,3 26,3% 4,00 33,4 45,4 31,9 36,9 7,40 20,1% 6,00 4,93 5,39 2,45 4,26 1,58 37,1% 8,00 1,30 1,84 1,76 1,63 0,291 17,9% 12,0 BQL BQL BQL НД НД НД 24,0 BQL BQL BQL НД НД НД Значения концентрации пролекарства формулы 4-A (нг/кг) в плазме собаки Пролекарство формулы 4-A
PO (8,25 мг/кг) ID животного Моменты времени (часы) 2001 2002 2003 Среднее значение ДН % КВ 0,250 1,13 1,63 1,09 1,28 0,301 23,5% 0,500 BQL 1,68 BQL 1,68 НД НД 1,00 BQL BQL 1,43 1,43 НД НД 2,00 BQL BQL BQL НД НД НД 4,00 BQL BQL BQL НД НД НД 6,00 BQL BQL BQL НД НД НД 8,00 BQL BQL BQL НД НД НД 12,0 BQL BQL BQL НД НД НД 24,0 BQL BQL BQL НД НД НД Значения концентрации EFdA (нг/кг) в плазме собаки EFdA PO (5 мг/кг) ID животного Моменты времени (часы) 4001 4002 4003 Среднее значение ДН % КВ 0,250 456 333 276 355 92,0 25,9% 0,500 391 299 280 323 59,4 18,4% 1,00 369 353 361 361 8,00 2,2% 2,00 211 212 143 189 39,6 21,0% 4,00 12,6 17,9 6,30 12,3 5,81 47,2% 6,00 BQL BQL BQL НД НД НД 8,00 BQL BQL BQL НД НД НД 12,0 BQL BQL BQL НД НД НД 24,0 BQL BQL BQL НД НД НД

BQL=ниже количественного уровня; НД=нет данных

Таблица 4: Воздействие EFdA в плазме при пероральном введении EFdA и пролекарства формулы 4-A у собак

Соединение Доза (мг/кг) AUC (нг*ч/мл) C_max (нг/мл) EFdA 5 792 392 Пролекарство формулы 4-A 8,25 (~5 мг экв. EFdA) 1432 753

Пронумерованные варианты осуществления изобретения

[000261] Другой объект изобретения, предполагаемый настоящим описанием, представлен в следующих пронумерованных вариантах осуществления:

1. Аденозиновое производное, характеризующееся формулой (1), или его фармацевтически приемлемая соль, стереоизомер, таутомер или сольват:

,

где

R¹, R^1’и R² каждый независимо представляет собой -H, -C(O)N(R³)(R^3’), -C(O)OR⁴, -R⁵, -L¹-R⁵ или -Z-L⁴-R⁵, где по меньшей мере один из R¹ и R² не представляет собой -H;

R³, R^3’ и R⁴ каждый независимо представляет собой -H, C1-C10 алкил, C2-C10 алкенил, C3-C10 циклоалкил, 3-10-членный гетероциклоалкил, арил или гетероарил;

R⁵ представляет собой:

;

R⁶ представляет собой -H, C1-C10 алкил, C2-C10 алкенил, C3-C10 циклоалкил, 3-10-членный гетероциклоалкил, арил или гетероарил;

-L¹-R⁵ представляет собой -(C1-C10 алкил)-N(R⁷)-R⁵, -(C1-C10 алкил)-O-R⁵, -(C1-C10 алкил)-S-R⁵, -(C2-C10 алкенил)-N(R⁷)-R⁵, -(C2-C10 алкенил)-O-R⁵, -(C2-C10 алкенил)-S-R⁵, -C(O)O-R⁵, -C(O)O-L²-N(R⁷)-R⁵, -C(O)O-L²-O-R⁵, -C(O)O-L²-S-R⁵, -C(O)O-L²-C(O)O-R⁵, -C(O)O-L²-C(O)N(R⁷)-R⁵, -C(O)O-L²-C(O)N(R⁷)-L³-N(R⁷)-R⁵, -C(O)O-L²-C(O)N(R⁷)-L³-O-R⁵, -C(O)O-L²-C(O)N(R⁷)-L³-S-R⁵, -C(O)N(R⁷)-R⁵, -C(O)N(R⁷)-L²-N(R⁷)-R⁵, -C(O)N(R⁷)-L²-O-R⁵, -C(O)N(R⁷)-L²-S-R⁵, -C(O)N(R⁷)-L²-C(O)O-R⁵, -C(O)N(R⁷)-L²-C(O)N(R⁸)-R⁵-, -C(O)N(R⁷)-L²-C(O)N(R⁸)-L³-N(R⁷)-R⁵, -C(O)O-L²-N(R⁷)C(O)O-R⁵, -C(O)N(R⁸)-L²-N(R⁷)C(O)O-R⁵, -C(O)O-L²-N(R⁷)C(O)N(R⁸)-R⁵, -C(O)N(R⁷)-L²-N(R⁷)C(O)N(R⁸)-R⁵, -C(O)N(R⁷)-L²-C(O)N(R⁸)-L³-O-R⁵ или -C(O)N(R⁷)-L²-C(O)N(R⁸)- L³-S-R⁵;

-Z- представляет собой двухвалентный -C(O)-, -C(O)O- или -C(O)N(R⁷)-;

-L⁴-R⁵ представляет собой -(C1-C10 алкил)-N(R⁷)-R⁵, -(C1-C10 алкил)-O-R⁵, -(C1-C10 алкил)-S-R⁵, -(C2-C10 алкенил)-N(R⁷)-R⁵, -(C2-C10 алкенил)-O-R⁵ или -(C2-C10 алкенил)-S-R⁵;

R⁷, R⁸ и R⁹ каждый независимо представляет собой -H, C1-C10 алкил или C2-C10 алкенил;

L² и L³ каждый намеренно представляет собой двухвалентный -(C1-C10 алкил)- или -(C2-C10 алкенил)-; и

X представляет собой атом галогена.

2. Аденозиновое производное по варианту осуществления 1, причем указанное аденозиновое производное характеризуется

или его фармацевтически приемлемая соль, стереоизомер, таутомер или сольват.

3. Аденозиновое производное по варианту осуществления 1, причем указанное аденозиновое производное характеризуется

или его фармацевтически приемлемая соль, стереоизомер, таутомер или сольват.

4. Аденозиновое производное по варианту осуществления 1, причем указанное аденозиновое производное представляет собой ((2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил)метилизопропилкарбамат.

5. Аденозиновое производное по варианту осуществления 1, причем указанное аденозиновое производное представляет собой изопропил(9-((2R,4S,5R)-5-этинил-4-гидрокси-5-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-2-ил)-2-фтор-9H-пурин-6-ил)карбамат.

6. Аденозиновое производное по варианту осуществления 1, причем указанное аденозиновое производное представляет собой ((2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил)метил((5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метил)карбонат.

7. Аденозиновое производное по варианту осуществления 1, причем указанное аденозиновое производное представляет собой ((2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил)метилметилкарбамат.

8. Аденозиновое производное по варианту осуществления 1, причем указанное аденозиновое производное представляет собой 4-(((9-((2R,4S,5R)-5-этинил-4-гидрокси-5-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-2-ил)-2-фтор-9H-пурин-6-ил)амино)метил)-5-метил-1,3-диоксол-2-он.

9. Аденозиновое производное по варианту осуществления 1, причем указанное аденозиновое производное представляет собой ((2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил)метил(2-(метил((5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метил)амино)этил)карбамат.

10. Аденозиновое производное по варианту осуществления 1, причем указанное аденозиновое производное представляет собой [(2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил]метил-4-[метил-[(5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метоксикарбонил]амино]бутаноат.

11. Аденозиновое производное по варианту осуществления 1, где указанный R⁵, -L¹-R⁵ или -Z-L⁴-R⁵ выбран из формул 9-24:

12. Аденозиновое производное по любому из вариантов осуществления 1-11, причем указанное аденозиновое производное включает активность ингибитора обратной транскриптазы in vivo, активность терминатора синтеза цепи обратной транскриптазы in vivo, активность ингибитора транслокации ДНК in vivo или их комбинацию.

13. Фармацевтическая композиция, содержащая аденозиновое производное, характеризующееся формулой (1):

,

где

R¹, R^1’и R² каждый независимо представляет собой -H, -C(O)N(R³)(R^3’), -C(O)OR⁴, -R⁵, -L¹-R⁵ или -Z-L⁴-R⁵, где по меньшей мере один из R¹ и R² не представляет собой -H;

R³, R^3’ и R⁴ каждый независимо представляет собой -H, C1-C10 алкил, C2-C10 алкенил, C3-C10 циклоалкил, 3-10-членный гетероциклоалкил, арил или гетероарил;

R⁵ представляет собой:

;

R⁶ представляет собой -H, C1-C10 алкил, C2-C10 алкенил, C3-C10 циклоалкил, 3-10-членный гетероциклоалкил, арил или гетероарил;

-L¹-R⁵ представляет собой -(C1-C10 алкил)-N(R⁷)-R⁵, -(C1-C10 алкил)-O-R⁵, -(C1-C10 алкил)-S-R⁵, -(C2-C10 алкенил)-N(R⁷)-R⁵, -(C2-C10 алкенил)-O-R⁵, -(C2-C10 алкенил)-S-R⁵, -C(O)O-R⁵, -C(O)O-L²-N(R⁷)-R⁵, -C(O)O-L²-O-R⁵, -C(O)O-L²-S-R⁵, -C(O)O-L²-C(O)O-R⁵, -C(O)O-L²-C(O)N(R⁷)-R⁵, -C(O)O-L²-C(O)N(R⁷)-L³-N(R⁷)-R⁵, -C(O)O-L²-C(O)N(R⁷)-L³-O-R⁵, -C(O)O-L²-C(O)N(R⁷)-L³-S-R⁵, -C(O)N(R⁷)-R⁵, -C(O)N(R⁷)-L²-N(R⁷)-R⁵, -C(O)N(R⁷)-L²-O-R⁵, -C(O)N(R⁷)-L²-S-R⁵, -C(O)N(R⁷)-L²-C(O)O-R⁵, -C(O)N(R⁷)-L²-C(O)N(R⁸)-R⁵-, -C(O)N(R⁷)-L²-C(O)N(R⁸)-L³-N(R⁷)-R⁵, -C(O)O-L²-N(R⁷)C(O)O-R⁵, -C(O)N(R⁸)-L²-N(R⁷)C(O)O-R⁵, -C(O)O-L²-N(R⁷)C(O)N(R⁸)-R⁵, -C(O)N(R⁷)-L²-N(R⁷)C(O)N(R⁸)-R⁵,-C(O)N(R⁷)-L²-C(O)N(R⁸)-L³-O-R⁵ или -C(O)N(R⁷)-L²-C(O)N(R⁸)- L³-S-R⁵;

-Z- представляет собой двухвалентный -C(O)-, -C(O)O- или -C(O)N(R⁷)-;

-L⁴-R⁵ представляет собой -(C1-C10 алкил)-N(R⁷)-R⁵, -(C1-C10 алкил)-O-R⁵, -(C1-C10 алкил)-S-R⁵, -(C2-C10 алкенил)-N(R⁷)-R⁵, -(C2-C10 алкенил)-O-R⁵ или -(C2-C10 алкенил)-S-R⁵;

R⁷, R⁸ и R⁹ каждый независимо представляет собой -H, C1-C10 алкил или C2-C10 алкенил;

L² и L³ каждый намеренно представляет собой двухвалентный -(C1-C10 алкил)- или -(C2-C10 алкенил)-; и

X представляет собой атом галогена.

14. Фармацевтическая композиция по варианту осуществления 13, в которой указанное аденозиновое производное характеризуется

или его фармацевтически приемлемая соль, стереоизомер, таутомер или сольват.

15. Фармацевтическая композиция по варианту осуществления 13, в которой указанное аденозиновое производное характеризуется

или его фармацевтически приемлемая соль, стереоизомер, таутомер или сольват.

16. Фармацевтическая композиция по варианту осуществления 13, в которой указанное аденозиновое производное включает ((2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил)метилизопропилкарбамат или его фармацевтически приемлемую соль.

17. Фармацевтическая композиция по варианту осуществления 13, в которой указанное аденозиновое производное включает изопропил(9-((2R,4S,5R)-5-этинил-4-гидрокси-5-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-2-ил)-2-фтор-9H-пурин-6-ил)карбамат или его фармацевтически приемлемую соль.

18. Фармацевтическая композиция по варианту осуществления 13, в которой указанное аденозиновое производное включает ((2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил)метил((5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метил)карбонат или его фармацевтически приемлемую соль.

19. Фармацевтическая композиция по варианту осуществления 13, в которой указанное аденозиновое производное включает ((2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил)метилметилкарбамат или его фармацевтически приемлемую соль.

20. Фармацевтическая композиция по варианту осуществления 13, в которой указанное аденозиновое производное включает 4-(((9-((2R,4S,5R)-5-этинил-4-гидрокси-5-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-2-ил)-2-фтор-9H-пурин-6-ил)амино)метил)-5-метил-1,3-диоксол-2-он или его фармацевтически приемлемую соль.

21. Фармацевтическая композиция по варианту осуществления 13, в которой указанное аденозиновое производное представляет собой ((2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил)метил(2-(метил((5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метил)амино)этил)карбамат или его фармацевтически приемлемую соль.

22. Фармацевтическая композиция по варианту осуществления 13, в которой указанное аденозиновое производное представляет собой [(2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил]метил-4-[метил-[(5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метоксикарбонил]амино]бутаноат или его фармацевтически приемлемую соль.

23. Фармацевтическая композиция по варианту осуществления 13, где указанный R⁵, -L¹-R⁵ или -Z-L⁴-R⁵ выбран из формул 9-24:

24. Фармацевтическая композиция по любому из вариантов осуществления 13-23, дополнительно содержащая фармацевтически приемлемый носитель.

25. Фармацевтическая композиция по любому из вариантов осуществления 13-24, дополнительно содержащая эффективную дозу одного или более противовирусных средств к ВИЧ, выбранных из абакавира, сульфата абакавира, ламивудина, ампренавира, атазанавира, сульфата атазанавира, AZT, биктегравира, каботегравира, дарунавира, дидезоксицитидина, дидезоксинозина, долутегравира, доравирина, эфавиренза, эмтрицитабина, тенофовира дизопроксила фумарата, тенофовира алафенамида, 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозина, элвитегравира, этравирина, фосампренавира кальция, индинавира, сульфата индинавира, ламивудина, лопинавира, комбинации лопинавира и ритонавира, дарунавира, комбинации дарунавира и кобицистата, маравирока, нелфинавира, мезилата нелфинавира, невирапина, PPL-100, ралтегравира, рилпивирина, ставудина, типранавира, викривирока или их комбинации.

26. Способ лечения заболевания, указанный способ включает введение нуждающемуся в этом субъекту эффективной дозы фармацевтической композиции, содержащей аденозиновое производное, характеризующееся формулой (1), или его фармацевтически приемлемую соль, стереоизомер, таутомер или сольват:

,

где

R¹, R^1’и R² каждый независимо представляет собой -H, -C(O)N(R³)(R^3’), -C(O)OR⁴, -R⁵, -L¹-R⁵ или -Z-L⁴-R⁵, где по меньшей мере один из R¹ и R² не представляет собой -H;

R³, R^3’ и R⁴ каждый независимо представляет собой -H, C1-C10 алкил, C2-C10 алкенил, C3-C10 циклоалкил, 3-10-членный гетероциклоалкил, арил или гетероарил;

R⁵ представляет собой:

;

R⁶ представляет собой -H, C1-C10 алкил, C2-C10 алкенил, C3-C10 циклоалкил, 3-10-членный гетероциклоалкил, арил или гетероарил;

-L¹-R⁵ представляет собой -(C1-C10 алкил)-N(R⁷)-R⁵, -(C1-C10 алкил)-O-R⁵, -(C1-C10 алкил)-S-R⁵, -(C2-C10 алкенил)-N(R⁷)-R⁵, -(C2-C10 алкенил)-O-R⁵, -(C2-C10 алкенил)-S-R⁵, -C(O)O-R⁵, -C(O)O-L²-N(R⁷)-R⁵, -C(O)O-L²-O-R⁵, -C(O)O-L²-S-R⁵, -C(O)O-L²-C(O)O-R⁵, -C(O)O-L²-C(O)N(R⁷)-R⁵, -C(O)O-L²-C(O)N(R⁷)-L³-N(R⁷)-R⁵, -C(O)O-L²-C(O)N(R⁷)-L³-O-R⁵, -C(O)O-L²-C(O)N(R⁷)-L³-S-R⁵, -C(O)N(R⁷)-R⁵, -C(O)N(R⁷)-L²-N(R⁷)-R⁵, -C(O)N(R⁷)-L²-O-R⁵, -C(O)N(R⁷)-L²-S-R⁵, -C(O)N(R⁷)-L²-C(O)O-R⁵, -C(O)N(R⁷)-L²-C(O)N(R⁸)-R⁵-, -C(O)N(R⁷)-L²-C(O)N(R⁸)-L³-N(R⁷)-R⁵, -C(O)O-L²-N(R⁷)C(O)O-R⁵, -C(O)N(R⁸)-L²-N(R⁷)C(O)O-R⁵, -C(O)O-L²-N(R⁷)C(O)N(R⁸)-R⁵, -C(O)N(R⁷)-L²-N(R⁷)C(O)N(R⁸)-R⁵,-C(O)N(R⁷)-L²-C(O)N(R⁸)-L³-O-R⁵ или -C(O)N(R⁷)-L²-C(O)N(R⁸)- L³-S-R⁵;

-Z- представляет собой двухвалентный -C(O)-, -C(O)O- или -C(O)N(R⁷)-;

-L⁴-R⁵ представляет собой -(C1-C10 алкил)-N(R⁷)-R⁵, -(C1-C10 алкил)-O-R⁵, -(C1-C10 алкил)-S-R⁵, -(C2-C10 алкенил)-N(R⁷)-R⁵, -(C2-C10 алкенил)-O-R⁵ или -(C2-C10 алкенил)-S-R⁵;

R⁷, R⁸ и R⁹ каждый независимо представляет собой -H, C1-C10 алкил или C2-C10 алкенил;

L² и L³ каждый намеренно представляет собой двухвалентный -(C1-C10 алкил)- или -(C2-C10 алкенил)-; и

X представляет собой атом галогена.

27. Способ по варианту осуществления 26, при котором указанное аденозиновое производное характеризуется

или его фармацевтически приемлемая соль, стереоизомер, таутомер или сольват.

28. Способ по варианту осуществления 26, при котором указанное аденозиновое производное характеризуется

или его фармацевтически приемлемая соль, стереоизомер, таутомер или сольват.

29. Способ по варианту осуществления 26, при котором указанное аденозиновое производное включает ((2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил)метилизопропилкарбамат или его фармацевтически приемлемую соль.

30. Способ по варианту осуществления 26, при котором указанное аденозиновое производное включает изопропил(9-((2R,4S,5R)-5-этинил-4-гидрокси-5-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-2-ил)-2-фтор-9H-пурин-6-ил)карбамат или его фармацевтически приемлемую соль.

31. Способ по варианту осуществления 26, при котором указанное аденозиновое производное включает ((2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил)метил((5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метил)карбонат или его фармацевтически приемлемую соль.

32. Способ по варианту осуществления 26, при котором указанное аденозиновое производное включает ((2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил)метилметилкарбамат или его фармацевтически приемлемую соль.

33. Способ по варианту осуществления 26, при котором указанное аденозиновое производное включает 4-(((9-((2R,4S,5R)-5-этинил-4-гидрокси-5-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-2-ил)-2-фтор-9H-пурин-6-ил)амино)метил)-5-метил-1,3-диоксол-2-он или его фармацевтически приемлемую соль.

34. Способ по варианту осуществления 26, при котором указанное аденозиновое производное представляет собой ((2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил)метил(2-(метил((5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метил)амино)этил)карбамат или его фармацевтически приемлемую соль.

35. Способ по варианту осуществления 26, при котором указанное аденозиновое производное представляет собой [(2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фторпурин-9-ил)-2-этинил-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил]метил-4-[метил-[(5-метил-2-оксо-1,3-диоксол-4-ил)метоксикарбонил]амино]бутаноат или его фармацевтически приемлемую соль.

36. Способ по варианту осуществления 26, при котором указанное аденозиновое производное включает указанный R⁵, -L¹-R⁵ или -Z-L⁴-R⁵ , выбранный из формул 9-24:

37. Способ по любому из вариантов осуществления 26-36, при котором указанную фармацевтическую композицию вводили указанному субъекту внутримышечной (ВМ) инъекцией, подкожной (ПК) инъекцией, внутривенной (ВВ) инъекцией, пероральным введением, местным нанесением, применением имплантата или их комбинацией.

38. Способ по любому из вариантов осуществления 26-37, дополнительно включающий измерение образца указанного субъекта для определения измеренного уровня заданного лекарственного средства в указанном образце, при котором заданное лекарственное средство может характеризоваться формулой (T-1):

,

его изомером или его фармацевтически приемлемой солью.

39. Способ по варианту осуществления 38, при котором указанное заданное лекарственное средство характеризуется формулой (T-1A):

,

его изомером или его фармацевтически приемлемой солью.

40. Способ по варианту осуществления 38, при котором указанное заданное лекарственное средство представляет собой (2R,3S,5R)-5-(6-амино-2-фтор-9H-пурин-9-ил)-2-этинил-2-(гидроксиметил)тетрагидрофуран-3-ол или его фармацевтически приемлемую соль.

41. Способ по любому из вариантов осуществления 38-40, дополнительно включающий регулирование указанной эффективной дозы с получением модифицированной эффективной дозы, если указанный измеренный уровень указанного заданного лекарственного средства отличается от предопределенного заданного уровня указанного заданного лекарственного средства, и введение указанной модифицированной эффективной дозы указанному субъекту.

42. Способ по любому из вариантов осуществления 26-41, при котором указанное заболевание представляет собой синдром приобретенного иммунодефицита (СПИД), ВИЧ-1 дикого типа, устойчивый к НИОТ ВИЧ-1, ВИЧ-2, ВИЧ с мутациями M184V, ВИЧ с K65R или ВИЧ с множественной лекарственной резистентностью.

43. Способ по любому из вариантов осуществления 26-42, дополнительно включающий введение указанному субъекту эффективной дозы одного или более анти-ВИЧ средств, выбранных из абакавира, сульфата абакавира, ламивудина, ампренавира, атазанавира, сульфата атазанавира, AZT, биктегравира, каботегравира, дарунавира, дидезоксицитидина, дидезоксинозина, долутегравира, доравирина, эфавиренза, эмтрицитабина, тенофовира дизопроксила фумарата, тенофовира алафенамида, 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозина, элвитегравира, этравирина, фосампренавира кальция, индинавира, сульфата индинавира, ламивудина, лопинавира, комбинации лопинавира и ритонавира, дарунавира, комбинации дарунавира и кобицистата, маравирока, нелфинавира, мезилата нелфинавира, невирапина, PPL-100, ралтегравира, рилпивирина, ставудина, типранавира, викривирока или их комбинации.

44. Способ по варианту осуществления 43, при котором указанное аденозиновое производное и указанное одно или более анти-ВИЧ средств вводили указанному субъекту вместе или отдельно путем перорального введения, парентерального введения или их комбинации.

45. Способ по варианту осуществления 44, при котором указанное аденозиновое производное и указанное одно или более анти-ВИЧ средств вводили указанному субъекту с ежедневным, еженедельным, двухнедельным или ежемесячным графиком введения.

46. Применение фармацевтической композиции по любому из вариантов осуществления 13-25 для лечения заболевания у нуждающегося в этом субъекта, при котором указанное заболевание представляет собой синдром приобретенного иммунодефицита (СПИД), ВИЧ-1 дикого типа, устойчивый к НИОТ ВИЧ-1, ВИЧ-2, ВИЧ с мутациями M184V, ВИЧ с K65R или ВИЧ с множественной лекарственной резистентностью.

47. Применение способа по любому из вариантов осуществления 26-45 для лечения заболевания у нуждающегося в этом субъекта, при котором указанное заболевание представляет собой синдром приобретенного иммунодефицита (СПИД), ВИЧ-1 дикого типа, устойчивый к НИОТ ВИЧ-1, ВИЧ-2, ВИЧ с мутациями M184V, ВИЧ с K65R или ВИЧ с множественной лекарственной резистентностью.

48. Применение аденозинового производного по любому из вариантов осуществления 1-12 для изготовления лекарственного препарата для лечения заболевания, при котором указанное заболевание представляет собой синдром приобретенного иммунодефицита (СПИД), ВИЧ-1 дикого типа, устойчивый к НИОТ ВИЧ-1, ВИЧ-2, ВИЧ с мутациями M184V, ВИЧ с K65R или ВИЧ с множественной лекарственной резистентностью.

49. Способ предупреждения инфекции у нуждающегося в этом субъекта, при этом способ включает введение указанному субъекту эффективной дозы фармацевтической композиции по любому из вариантов осуществления 13-25, при котором у указанного субъекта отсутствуют обнаруживаемые симптомы указанной инфекции.

50. Способ по варианту осуществления 49, при котором указанная инфекция включает заболевание, выбранное из синдрома приобретенного иммунодефицита (СПИД), инфекции ВИЧ-1 дикого типа, устойчивого к НИОТ ВИЧ-1, ВИЧ-2, ВИЧ с мутациями M184V, ВИЧ с K65R или ВИЧ с множественной лекарственной резистентностью или их комбинации.

51. Способ по варианту осуществления 50, при котором указанные обнаруживаемые симптомы включают симптомы синдрома приобретенного иммунодефицита (СПИД), симптомы инфекции вирусов ВИЧ, включая ВИЧ-1 дикого типа, устойчивого к НИОТ ВИЧ-1, ВИЧ-2, ВИЧ с мутациями M184V, ВИЧ с K65R, ВИЧ с множественной лекарственной резистентностью или их комбинации.

52. Способ по варианту осуществления 51, при котором указанную фармацевтическую композицию вводили указанному субъекту с ежедневным, еженедельным, двухнедельным или ежемесячным графиком введения.

53. Способ по варианту осуществления 52, дополнительно включающий введение указанному субъекту эффективной дозы одного или более анти-ВИЧ средств, выбранных из абакавира, сульфата абакавира, ламивудина, ампренавира, атазанавира, сульфата атазанавира, AZT, биктегравира, каботегравира, дарунавира, дидезоксицитидина, дидезоксинозина, долутегравира, доравирина, эфавиренза, эмтрицитабина, тенофовира дизопроксила фумарата, тенофовира алафенамида, 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозина, элвитегравира, этравирина, фосампренавира кальция, индинавира, сульфата индинавира, ламивудина, лопинавира, комбинации лопинавира и ритонавира, дарунавира, комбинации дарунавира и кобицистата, маравирока, нелфинавира, мезилата нелфинавира, невирапина, PPL-100, ралтегравира, рилпивирина, ставудина, типранавира, викривирока или их комбинации.

54. Способ по варианту осуществления 53, при котором указанное одно или более анти-ВИЧ средств вводили указанному субъекту вместе с указанной фармацевтической композицией или отдельно.

55. Способ лечения ВИЧ-инфекции, включающий: введение нуждающемуся в этом субъекту эффективной дозы фармацевтической композиции по любому из вариантов осуществления 1-25.

56. Способ предупреждения ВИЧ-инфекции, включающий: введение нуждающемуся в этом субъекту эффективной дозы фармацевтической композиции по любому из вариантов осуществления 1-25.

57. Способ по варианту осуществления 55 или 56, при котором ВИЧ-инфекция вызвана ВИЧ-1 дикого типа, устойчивым к НИОТ ВИЧ-1, ВИЧ-2, ВИЧ с мутациями M184V, ВИЧ с K65R или ВИЧ с множественной лекарственной резистентностью.

58. Способ по любому из вариантов осуществления 55-57, при котором введение проводят пероральным введением.

59. Способ по любому из вариантов осуществления 55-57, при котором введение проводят парентеральным введением.

60. Способ по варианту осуществления 59, при котором парентеральное введение проводят внутримышечной или подкожной инъекцией.

61. Способ по любому из вариантов осуществления 55-60, при котором введение фармацевтической композиции приводит к более высокой концентрации EFdA в плазме по сравнению с введением эквивалентной дозы EFdA при тех же условиях.

62. Способ по варианту осуществления 61, при котором введение фармацевтической композиции приводит к по меньшей мере на 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 100% или 200% более высокой концентрации EFdA в плазме по сравнению с введением эквивалентной дозы EFdA при тех же условиях.

63. Способ по варианту осуществления 61, при котором введение фармацевтической композиции приводит к на 50%-80%, 50%-100% или 50%-200% более высокой концентрации EFdA в плазме по сравнению с введением эквивалентной дозы EFdA при тех же условиях.

64. Способ по любому из вариантов осуществления 55-63, при котором введение фармацевтической композиции приводит к пролонгированному высвобождению EFdA по сравнению с введением эквивалентной дозы EFdA при тех же условиях.

65. Способ по любому из вариантов осуществления 55-64, при котором введение фармацевтической композиции приводит к более высокой AUC EFdA по сравнению с введением эквивалентной дозы EFdA при тех же условиях.

66. Способ по варианту осуществления 65, при котором введение фармацевтической композиции приводит к по меньшей мере на 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90% или 100% более высокой AUC EFdA по сравнению с введением эквивалентной дозы EFdA при тех же условиях.

67. Способ по варианту осуществления 65, при котором введение фармацевтической композиции приводит к на 50%-200%, 50%-150% или 80%-120% более высокой AUC EFdA по сравнению с введением эквивалентной дозы EFdA при тех же условиях.

68. Способ по любому из вариантов осуществления 55-67, при котором введение фармацевтической композиции приводит к более высокой C_max EFdA по сравнению с введением эквивалентной дозы EFdA при тех же условиях.

69. Способ по варианту осуществления 68, при котором введение фармацевтической композиции приводит к по меньшей мере на 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80% или 90% более высокой C_max EFdA по сравнению с введением эквивалентной дозы EFdA при тех же условиях.

70. Способ по варианту осуществления 68, при котором введение фармацевтической композиции приводит к на 50%-200%, 50%-150% или 80%-100% более высокой C_max EFdA по сравнению с введением эквивалентной дозы EFdA при тех же условиях.

Группа изобретений относится к области химии и фармацевтики, а именно к лечению ВИЧ-инфекции. Раскрывается аденозиновое производное формулы (4-А), которое имеет активность ингибитора обратной транскриптазы in vivo, фармацевтическая композиция для лечения или предупреждения ВИЧ-инфекции на его основе, а также способы лечения и предупреждения ВИЧ-инфекции, включающие введение эффективной дозы аденозинового производного формулы (4-А). Группа изобретений может быть использована для эффективного лечения или предупреждения ВИЧ-инфекции. 5 н. и 14 з.п. ф-лы, 5 ил., 4 табл., 15 пр.

1. Аденозиновое производное формулы (4-А), имеющее структуру

или его фармацевтически приемлемая соль.

2. Аденозиновое производное формулы (4-А), имеющее структуру

3. Фармацевтическая композиция для лечения или предупреждения ВИЧ-инфекции, содержащая эффективное количество аденозинового производного по п. 1 или 2 и фармацевтически приемлемый носитель.

4. Фармацевтическая композиция по п. 3, причем фармацевтическая композиция является подходящей для перорального введения.

5. Фармацевтическая композиция по п. 3 или 4, причем фармацевтическая композиция представляет собой жидкую лекарственную форму.

6. Фармацевтическая композиция по п. 5, в которой жидкая лекарственная форма представляет собой раствор, эмульсию или жидкую суспензию.

7. Фармацевтическая композиция по п. 3 или 4, причем фармацевтическая композиция представляет собой твердую лекарственную форму.

8. Фармацевтическая композиция по п. 7, в которой твердая лекарственная форма представляет собой таблетку, капсулу, гранулу, порошок, саше, восстанавливаемый порошок, ингалируемый сухой порошок или жевательный состав.

9. Способ лечения ВИЧ-инфекции, включающий введение нуждающемуся в этом субъекту эффективной дозы аденозинового производного по п. 1 или 2.

10. Способ предупреждения ВИЧ-инфекции, включающий введение нуждающемуся в этом субъекту эффективной дозы аденозинового производного по п. 1 или 2.

11. Способ по п. 9 или 10, в котором ВИЧ-инфекция вызвана ВИЧ-1 дикого типа, устойчивым к НИОТ ВИЧ-1, ВИЧ-2, ВИЧ с мутациями M184V, ВИЧ с K65R или ВИЧ с множественной лекарственной резистентностью.

12. Способ по любому из пп. 9-11, в котором введение проводят пероральным введением.

13. Способ по любому из пп. 9-12, в котором введение аденозинового производного или его фармацевтически приемлемой соли приводит к более высокой концентрации в плазме EFdA по сравнению с введением эквивалентной дозы EFdA при тех же условиях.

14. Способ по п. 13, в котором введение аденозинового производного или его фармацевтически приемлемой соли приводит к по меньшей мере на 10%, 20%, 30%, 40% или 50% более высокой концентрации EFdA в плазме по сравнению с введением эквивалентной дозы EFdA при тех же условиях.

15. Способ по любому из пп. 9-14, в котором введение аденозинового производного или его фармацевтически приемлемой соли приводит к пролонгированному высвобождению EFdA по сравнению с введением эквивалентной дозы EFdA при тех же условиях.

16. Способ по любому из пп. 9-15, в котором введение аденозинового производного или его фармацевтически приемлемой соли приводит к более высокой AUC EFdA по сравнению с введением эквивалентной дозы EFdA при тех же условиях.

17. Способ по п. 16, в котором введение аденозинового производного или его фармацевтически приемлемой соли приводит к по меньшей мере на 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90% или 100% более высокой AUC EFdA по сравнению с введением эквивалентной дозы EFdA при тех же условиях.

18. Способ по любому из пп. 9-17, в котором введение аденозинового производного или его фармацевтически приемлемой соли приводит к более высокой C_max EFdA по сравнению с введением эквивалентной дозы EFdA при тех же условиях.

19. Способ по п. 18, в котором введение аденозинового производного или его фармацевтически приемлемой соли приводит к по меньшей мере на 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80% или 90% более высокой C_max EFdA по сравнению с введением эквивалентной дозы EFdA при тех же условиях.