Препарат для лечения отитов бактериальной и грибковой этиологии у собак Российский патент 2021 года по МПК A61K31/155 A61K31/4174 A61K33/38 A61K47/10 A61P27/16 

Область техники, к которой относится изобретение

Изобретение относится к ветеринарной медицине, в частности предназначено для лечения отитов бактериальной и грибковой инфекции у собак.

Уровень техники.

Известен препарат на основе коллоидного серебра и катионных ПАВ обладающего антибактериальными свойствами для обработки кожных покровов, содержащее основные вещества, вспомогательные добавки и воду при следующем соотношении компонентов, масс. %: коллоидное серебро 10-5-0,5; катионное поверхностно-активное вещество 0,01-25; вода и вспомогательные добавки до 100 (патентах RU №2419439 опубл. 27.05.2011 г. Бюл. №15.) указано, что препараты, включающие коллоидное серебро и катионные ПАВ, обладают существенно большей антибактериальной активностью, чем соответствующие золи серебра и ПАВ.

Недостатком препарата на основе коллоидного серебра является быстрая агрегация частиц серебра при длительном хранении препарата, при контакте с биологическими жидкостями и тканями организма животного в процессе лечения происходит восстановление ионов серебра, что приводит к инактивации лекарственного средства. Большие концентрации серебра обладают выраженным токсическим эффектом.

В международной заявке РСТ №PCT/RU2013/000343 опубл. 22.04.2013 г. раскрыт антисептический ветеринарный препарат, включающий наноразмерные частицы серебра и хлорид бензилдиметил-[3-(миристоиламино)пропил]-аммония (мирамистин), указано, что такой препарат эффективен при профилактике послеоперационных осложнений, при лечении и профилактике маститов и эндометритов, конъюнктивитов, гингивитов, диарей, ринитов, отитов домашних и сельскохозяйственных животных, в том числе крупного и мелкого рогатого скота, птиц, кошек, собак, а также обладает ранозаживляющим действием, указано, что использование наноразмерных частиц серебра или наноразмерных частиц серебра в сочетании с солями серебра совместно с хлоридом бензилдиметил-[3-(миристоиламино)пропил]-аммония для лечения инфекционных заболеваний животных позволяет сократить сроки терапии и уменьшить частоту возникновения осложнений.

Основным недостатком препаратов на основе коллоидного серебра является агрегация частиц серебра при длительном хранении препарата или при контакте с биологическими жидкостями и тканями организма животного в процессе лечения, что приводит к выпадению осадка металлического серебра и инактивации лекарственного средства. При образовании осадка, состоящего из металлического серебра эффективность препарата резко снижается.

Наиболее близким, принятым за прототип является антисептический препарата широкого спектра действия, и касается средства для обработки раневых поверхностей, воспаленных слизистых оболочек, послеоперационных швов. Ветеринарный препарат включает наноразмерные частицы серебра, хлорид бензилдиметил-[3-(миристоиламино)пропил]-аммония и алкиламидоалкилбетаин (патент RU №2658847, опубл. 25.06.2018 Бюл. №18). Изобретение обеспечивает увеличение стабильности лекарственного препарата за счет стабилизации коллоидных частиц серебра.

Недостатком может служить высокая стоимость получаемого препарата за счет дороговизны использованных веществ в ходе его получения. При несоблюдении правил хранения может образовываться осадок, состоящий из восстановленных ионов серебра при этом эффективность препарата резко снижается.

Раскрытие изобретения

Задачей предлагаемого изобретения является создание высокоэффективного препарата, обладающего выраженным антибактериальным и антигрибковым действием широкого спектра, низкой токсичностью на основе наночастиц серебра.

Технический результат достигается тем, что с помощью предлагаемого изобретения, обеспечивается антибактериальный и антигрибковый эффект широкого спектра, снижается токсичность, повышается эффективность действия и уменьшения дозирования.

Технически результат достигается тем, что препарат для лечения отитов бактериальной и грибковой этиологии, содержит ионы серебра, клотримазол, хлоргексидин, а также дополнительно содержит этиловый спирт и воду в соотношение компонентов в масс. %:

- Ионы серебра (в пересчете на Ag) 0,004-0,006 - Клотримазол 0,9-1,1 - Хлоргексидин 3,0-5,0 - Этиловый спирт 0,9-1,1 - Вода очищенная остальное

Осуществление изобретения

Примеры конкретного применения препарата.

ПРИМЕР 1. Определение терапевтической эффективности препарата для лечения отитов бактериальной и грибковой этиологии у собак.

Основу терапии наружного отита составляет топикальная (местная) терапия, при этом высокая концентрация препаратов в очаге воспаления позволяет преодолеть порог резистентности возбудителей заболевания [Герке А.Н. Цитологическое исследование материала из слухового канала // VetPharma. 2013. №4. С. 48-55].

Объектом исследования служили собаки, поступающие в клинику ФГБОУ ВО СтГАУ для стационарного и амбулаторного лечения с воспалением наружного слухового прохода.

Всего в эксперименте участвовало 20 собак, разделенных на четыре группы по пять животных. Перед применением препарата слуховой проход и участки пораженной кожи ушной раковины у животных подготавливали путем механической антисептики пораженных тканей.

В первой группе применяли комплексный препарат для лечения собак полученного по схеме: к раствору, содержащему ионы серебра - 0,002% при перемешивании приливали раствор хлоргексидина - 1%. На данном этапе происходит формирование наночастицы серебра обладающих большей активностью по сравнению с ионами. После приливали этиловый спирт -0,7%, а затем добавляли клотримазол -. 0,7%, перемешивали до полного растворения внесенного последнего компонента, остальное составляла вода. Полученный препарат закапывали в ухо по 3-5 капель, один раз в день, в течение 6-10 дней. После нанесения препарата осуществляли массаж основания ушной раковины для улучшения распределения препарата по всей поверхности ушной раковины. Препарат прекращали применять через 3 дня после исчезновения выраженных клинических признаков.

Эффективность применяемого лечения устанавливали путем наблюдения за местным и общим статусом исследуемых животных. С этой целью у животных из каждой группы ежедневно определяли местную температуру и болезненность тканей, наличие гиперемии, размеры и сроки резорбции воспалительных отеков, наличие и характер экссудата, время резорбции воспалительного процесса (табл. 1).

В начале лечения у животных всех групп регистрировали незначительное увеличение общей температуры тела. Заболевание сопровождалось покраснением, зудом и расчесами наружного уха, экссудацией.

У собак первой группы при лечении препаратом гиперемия ушных раковин исчезала в среднем через 4,9±0,84 дня, зуд и расчесы - через 4,5±0,71 дня, экссудация - через 4,8±0,84 дня. Общая температура тела животных всех групп нормализовалась в течение двух дней.

Основываясь на полученных результатах конкретного применения препарата, можно сделать заключение об малой эффективности ветеринарного препарата для лечения отитов бактериальной и грибковой этиологии у собак.

ПРИМЕР 2. Определение терапевтической эффективности препарата для лечения отитов бактериальной и грибковой этиологии у собак.

Получение комплексного препарата для лечения собак полученного аналогично примеру 3 с соотношением компонентов: раствор ионов серебра - 0,004%, раствор хлоргексидина - 3%, этиловый спирт - 0,9%, клотримазол - 0,9%, остальное добавлялась вода.

Во второй группе при лечении препаратом в 0,004% концентрация в пересчете на Ag аналогичные показатели приходили в норму соответственно через 3,5±0,75, 3,0±0,55 и 3,3±0,65 дня.

Эффективность применяемого лечения устанавливали путем наблюдения за местным и общим статусом исследуемых животных. С этой целью у животных из каждой группы ежедневно определяли местную температуру и болезненность тканей, наличие гиперемии, размеры и сроки резорбции воспалительных отеков, наличие и характер экссудата, время резорбции воспалительного процесса (табл. 1).

Основываясь на полученных результатах конкретного применения препарата, можно сделать заключение об хорошей эффективности ветеринарного препарата для лечения отитов бактериальной и грибковой этиологии у собак.

ПРИМЕР 3. Определение терапевтической эффективности препарата для лечения отитов бактериальной и грибковой этиологии у собак.

Получение комплексного препарата для лечения собак полученного аналогично примеру 3 с соотношением компонентов: раствор ионов серебра - 0,006%, раствор хлоргексидина - 5%, этиловый спирт - 1,1%, клотримазол - 1,1%, остальное добавлялась вода.

В третей группе при лечении препаратом в 0,006% концентрация в пересчете на Ag аналогичные показатели приходили в норму соответственно через 3,1±0,55, 2,9±0,65 и 2,9±0,59 дня.

Эффективность применяемого лечения устанавливали путем наблюдения за местным и общим статусом исследуемых животных. С этой целью у животных из каждой группы ежедневно определяли местную температуру и болезненность тканей, наличие гиперемии, размеры и сроки резорбции воспалительных отеков, наличие и характер экссудата, время резорбции воспалительного процесса (табл. 1).

Основываясь на полученных результатах конкретного применения препарата, можно сделать заключение об хорошей эффективности ветеринарного препарата для лечения отитов бактериальной и грибковой этиологии у собак.

ПРИМЕР 4. Определение терапевтической эффективности препарата для лечения отитов бактериальной и грибковой этиологии у собак.

Получение комплексного препарата для лечения собак полученного аналогично примеру 3 с соотношением компонентов: раствор ионов серебра - 0,008%, раствор хлоргексидина - 7%, этиловый спирт - 1,3%, клотримазол - 1,3%, остальное добавлялась вода.

В четвертой группе при лечении препаратом в 0,008% концентрация в пересчете на Ag аналогичные показатели приходили в норму соответственно через 2,4±0,63, 5,8±0,55 и 2,0±0,76 дня.

Эффективность применяемого лечения устанавливали путем наблюдения за местным и общим статусом исследуемых животных. С этой целью у животных из каждой группы ежедневно определяли местную температуру и болезненность тканей, наличие гиперемии, размеры и сроки резорбции воспалительных отеков, наличие и характер экссудата, время резорбции воспалительного процесса (табл. 1).

Основываясь на полученных результатах конкретного применения препарата, можно сделать заключение, что данное соотношение компонентов обладает хорошей эффективностью для лечения отитов бактериальной и грибковой этиологии у собак, но имеется ряд негативных факторов, которые не позволяют применять данное соотношение. К ним можно отнести: экссудация прекращалась за короткий промежуток времени, серебро обладает подсушивающим эффектом, что негативно сказывается на поверхностном слое кожи, из-за быстрого подсыхания она начинает растрескиваться, что приводит к повторному появлению зуда и расчесам. Еще один из негативных факторов, это при больших концентрациях серебра наблюдается появление химического ожога поверхностного слоя кожи, приводящего к удлинению временного периода заживления.

ПРИМЕР 5. Определение чувствительности к препарату для лечения отитов у собак грибов рода Malassezia.

Для определения чувствительности к препарату для лечения отитов у собак грибов рода Malassezia использовали луночно-диффузионный метод [МУК 4.2.1890-04. Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам. Клин, микробиол. антимикроб, химиотерап. 2004, т. 6. - №4. - С. 306-359].

В чашку Петри (d=90 мм) вносили 20 мл агаризованной среды. В центре делали лунку на 2/3 толщины слоя агара. После этого газоном засевали клиническим штаммом грибов рода Malassezia (0,1 мл суспензии клеток в концентрации 10⁶ кл/мл), а в лунку вносили 0,1 мл препарата в разных концентрациях.

Каждое определение проводили в трехкратной повторности. Инкубацию производили при 37°С в течение 24 ч, после чего проводили измерение зоны подавления роста грибов. Зоны ингибиции роста грибов измеряли в миллиметрах. Зоной ингибиции роста грибов считали зону полного подавления роста колоний (табл. 2).

Все исследованные композиции на основе коллоидного серебра тормозили рост грибов рода Malassezia. При этом зона ингибиции роста грибов, образующиеся вследствие воздействия препарата в 0,0005%-ной концентрации составила 0,60±0,01 мм, 0,001%-ной - 28,4±1,12 мм, 0,005%-ной-41,6±1,54 мм, 0,01% - 44,7±1,75.

ПРИМЕР 6. Определение чувствительности к препарату для лечения отитов у собак Staphylococcus spp.

Для определения чувствительности к препарату для лечения отитов у собак Staphylococcus spp.использовали диско-диффузионный метод [МУК 4.2.1890-04. Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам. Клин, микробиол. Антимикроб. химиотерап. 2004, т. 6. - №4. - С. 306-359].

Для тестирования чувствительности микроорганизмов диско-диффузионным методом использовать Мюллера-Хинтон агар (МХА).

Бактериальную суспензию готовили либо из бульонной с концентрацией 1,5⋅108 КОЕ/мл. При визуальном контроле устанавливали соответствие стандарту мутности 0,5 по МакФарланду. На поверхность плотной питательной среды, засеянной сплошным газоном культуры Staphylococcus spp., накладывали не более 6 дисков, пропитанных препаратом, на расстоянии не менее 2 см друг от друга. Регистрацию результатов проводили через 24 часа инкубирования в термостате при температуре 35°С по диаметру зоны отсутствия роста вокруг дисков с препаратом. Каждое определение проводили в трехкратной повторности. Зоны ингибиции роста микроорганизмов измеряли в миллиметрах. Зоной ингибиции роста считали зону полного подавления роста колоний (табл. 3).

Все исследованные концентрации на основе коллоидного серебра тормозили рост Staphylococcus spp. При этом зоны ингибиции роста микроорганизмов, образующиеся вследствие воздействия препарата при его содержании в диске 5, 10, 20 и 30 мкг составляли соответственно 18,4±1,05, 26,5±1,22, 27,8±1,45 и 28,1±1,16 мм.

Основываясь на полученных результатах, приведенных в примерах конкретного применения препарата, можно сделать заключение об эффективности ветеринарного препарата для лечения отитов бактериальной и грибковой этиологии у собак для примеров 2 и 3, потому что происходит мягкое, но эффективное действие, процесс выздоровления составляет в среднем три дня. А эффективность против патогенов подтверждается примерами 5 и 6.

Препарат содержит наночастицы серебра, которые способны закрепляться и удерживаться на стенках клеток-патогенов, а хлоргексидин имеет катионное строение и его антибактериальные свойства являются результатом притяжения между положительно заряженным хлоргексидином и отрицательно заряженной поверхностью бактериальной клетки. Хлоргексидин абсорбируется на поверхности клеточной мембраны чувствительных к нему микроорганизмов с сильной адсорбцией к определенным фосфатсодержащим компонентам. Это нарушает целостность мембраны и повышает ее проницаемость.

Противогрибковое действие основано на действии клотримазола и синергетическом воздействии наночастиц серебра, разрушающих стенки клеток, который имеет высокое абсорбирующее сродство к поверхности клеточной мембраны.

Приложение

Терапевтическая эффективность препарата для лечения собак при

наружных отитах

Диаметр (мм) зон ингибиции роста грибов рода Malassezia под воздействием различных концентраций препарата

Диаметр (мм) зон ингибиции роста Staphylococcus spp., под воздействием различных концентраций препарата

Изобретение относится к области ветеринарии и фармацевтики, а именно к препарату для лечения отитов бактериальной и грибковой этиологии у собак, содержащему наночастицы серебра, клотримазол, хлоргексидин, отличающемуся тем, что дополнительно содержит этиловый спирт и воду при соотношении компонентов, мас. %: наночастицы серебра 0,004-0,006; клотримазол 0,9-1,1; хлоргексидин 3,0-5,0; этиловый спирт 0,9-1,1; вода очищенная остальное. Технический результат заключается в антибактериальном и антигрибковом эффекте, снижении токсичности, повышении эффективности действия препарата для лечения отитов бактериальной и грибковой этиологии по изобретению. 3 табл., 6 пр.

Препарат для лечения отитов бактериальной и грибковой этиологии у собак, содержащий наночастицы серебра, клотримазол, хлоргексидин, отличающийся тем, что дополнительно содержит этиловый спирт и воду при соотношении компонентов, мас. %:

наночастицы серебра 0,004-0,006 клотримазол 0,9-1,1 хлоргексидин 3,0-5,0 этиловый спирт 0,9-1,1 вода очищенная остальное