ТЕРАПЕВТИЧЕСКИЕ АГЕНТЫ ДЛЯ НЕЙРОДЕГЕНЕРАТИВНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ Российский патент 2021 года по МПК A61K31/198 A61P25/14 A61P25/16 A61P25/28 

Описание патента на изобретение RU2763425C2

По настоящей заявке испрашивается приоритет для заявки UK 1702551.1, поданной 16 февраля 2017, UK 1705766.2, поданной 10 апреля 2017, UK 1706867.7, поданной 28 апреля 2017, международной заявки № PCT/IB2017/054929, поданной 11 августа 2017, и Предварительной патентной заявки США № 62/574137, поданной 18 октября 2017; все из которых включены в настоящую заявку посредством ссылки во всей полноте.

Нейродегенеративные заболевания - это заболевания, которые поражают нейроны. Дегенеративный процесс может включать прогрессирующую потерю нейрональной структуры, прогрессирующую потерю нейрональной функции или прогрессирующую гибель нейронов. Такая прогрессирующая нейродегенерация часто приводит к инвалидности и умственному нарушению. Многие нейродегенеративные заболевания являются быстро прогрессирующими и необратимыми, и существует немного радикальных методов лечения, если таковые вообще имеются.

Хотя процесс нейродегенерации до конца не изучен, считается, что терапевтические агенты, которые, как показано, являются нейропротективными в общем смысле, в целом применимы к нейродегенеративным заболеваниям. Кроме того, многие нейродегенеративные заболевания связаны с лизосомальной дисфункцией. Это включает как нейродегенеративные лизосомальные болезни накопления (ЛБН), так и многие другие нейродегенеративные заболевания, такие как болезнь Альцгеймера и болезнь Паркинсона, где предполагаются связи с лизосомальными дефектами.

Настоящее изобретение относится к необходимости разработки усовершенствованных и широко применимых способов лечения нейродегенеративных заболеваний. В частности, настоящее изобретение описывает лейцин и ацетил-лейцин для лечения нейродегенеративного заболевания, или одного или нескольких симптомов нейродегенеративного заболевания у субъекта. Нейродегенеративное заболевание может быть связано с лизосомальной дисфункцией, но не обязательно.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение включает лейцин, ацетил-лейцин или их фармацевтически приемлемую соль для применения в способе лечения синдрома беспокойных ног (СБН) у субъекта, страдающего нейродегенеративным заболеванием. В одном варианте осуществления нейродегенеративное заболевание представляет собой паркинсонизм. В одном варианте осуществления нейродегенеративное заболевание представляет собой болезнь двигательных нейронов. В одном варианте осуществления нейродегенеративное заболевание представляет собой болезнь Паркинсона. В одном варианте осуществления нейродегенеративное заболевание связано с дисфункцией дофаминергической системы.

В одном варианте осуществления раскрыт лейцин, ацетил-лейцин или их фармацевтически приемлемая соль для применения в способе лечения синдрома беспокойных ног (СБН) у субъекта, нуждающегося в этом, где СБН представляет собой нейродегенеративное заболевание.

В одном варианте осуществления раскрыт лейцин, ацетил-лейцин или их фармацевтически приемлемая соль для применения в способе лечения нейродегенеративного заболевания, или одного или нескольких симптомов, связанных с нейродегенеративным заболеванием, у субъекта, нуждающегося в этом. В одном варианте осуществления нейродегенеративное заболевание не является мозжечковой атаксией или болезнью Ниманна-Пика типа C.

В одном варианте осуществления настоящего изобретения лейцин, ацетил-лейцин или их фармацевтически приемлемая соль раскрыты для использования в способе лечения нейродегенеративного заболевания у субъекта, нуждающегося в этом, где субъект является бессимптомным.

В другом варианте осуществления раскрыт лейцин, ацетил-лейцин или их фармацевтически приемлемая соль для применения в способе задержки начала нейродегенеративного заболевания, или одного или нескольких симптомов нейродегенеративного заболевания, которые в противном случае могли бы проявиться в соответствии с типичным прогрессированием заболевания.

В дополнительном варианте осуществления настоящее изобретение включает лейцин, ацетил-лейцин или их фармацевтически приемлемую соль для применения в способе лечения нейродегенеративного заболевания или одного или нескольких симптомов, связанных с нейродегенеративным заболеванием, у субъекта, нуждающегося в этом, где способ включает введение терапевтически эффективного количества лейцина, ацетил-лейцина или их фармацевтически приемлемой соли нуждающемуся в этом субъекту в течение периода времени, выбранного из по меньшей мере примерно 3 месяцев, по меньшей мере примерно 6 месяцев, по меньшей мере примерно 1 года, по меньшей мере примерно 2 лет, и по меньшей мере примерно 5 лет.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение описывает лейцин, ацетил-лейцин или их фармацевтически приемлемую соль для применения в способе задержки прогрессирования нейродегенеративного заболевания или одного или нескольких симптомов, связанных с нейродегенеративным заболеванием, с течением времени, по сравнению с типичным прогрессированием заболевания, при котором способ включает введение терапевтически эффективного количества лейцина, ацетил-лейцина или их фармацевтически приемлемой соли нуждающемуся в этом субъекту в течение периода времени, выбранного из по меньшей мере примерно 3 месяцев, по меньшей мере примерно 6 месяцев, по меньшей мере примерно 1 года, по меньшей мере примерно 2 лет, и по меньшей мере примерно 5 лет.

В дополнительном варианте осуществления лейцин, ацетил-лейцин или их фармацевтически приемлемая соль раскрыты для применения в способе регрессии нейродегенеративного заболевания или одного или нескольких симптомов, связанных с нейродегенеративным заболеванием, с течением времени, где способ включает введение терапевтически эффективного количества лейцина, ацетил-лейцина или их фармацевтически приемлемой соли нуждающемуся в этом субъекту в течение периода времени, выбранного из по меньшей мере примерно 3 месяцев, по меньшей мере примерно 6 месяцев, по меньшей мере примерно 1 года, по меньшей мере примерно 2 лет, и по меньшей мере примерно 5 лет.

В другом варианте осуществления раскрыт лейцин, ацетил-лейцин или их фармацевтически приемлемая соль для использования в способе улучшения у субъекта, нуждающегося в этом, биохимического маркера нейродегенеративного заболевания с течением времени, где способ включает введение терапевтически эффективного количество лейцина, ацетил-лейцина или их фармацевтически приемлемой соли нуждающемуся в этом субъекту в течение периода, выбранного из по меньшей мере примерно 3 месяцев, по меньшей мере примерно 6 месяцев, по меньшей мере примерно 1 года, по меньшей мере примерно 2 лет, и по меньшей мере примерно 5 лет.

В другом варианте осуществления настоящее изобретение включает лейцин, ацетил-лейцин или их фармацевтически приемлемую соль для применения в способе уменьшения тяжести нейродегенеративного заболевания, или уменьшения тяжести или устранения одного или нескольких существующих симптомов, связанных с нейродегенеративным заболеванием, у субъекта, нуждающегося в этом. В одном варианте осуществления нейродегенеративное заболевание не является мозжечковой атаксией или болезнью Ниманна-Пика типа C.

В дополнительном варианте осуществления настоящее изобретение включает лейцин, ацетил-лейцин или их фармацевтически приемлемую соль для применения в способе обеспечения нейропротекции у субъекта, у которого предполагается наличие или имеется риск развития нейродегенеративного заболевания, где способ включает введение субъекту терапевтически эффективного количества лейцина, ацетил-лейцина или их фармацевтически приемлемой соли в течение периода времени, выбранного из по меньшей мере примерно 3 месяцев, по меньшей мере примерно 6 месяцев, по меньшей мере примерно 1 года, по меньшей мере примерно 2 лет, и по меньшей мере примерно 5 лет.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение включает лейцин или его фармацевтически приемлемую соль для прямой доставки в центральную нервную систему способом, раскрытым в настоящей заявке, где прямую доставку осуществляют путем введения, выбранного из интраназального введения, интравентрикулярного введения, интратекального введения, интракраниального введения, и введения посредством трансплантации слизистой оболочки носа.

В одном варианте осуществления лейцин или его фармацевтически приемлемая соль раскрыты для прямой доставки в центральную нервную систему способом, раскрытым в настоящей заявке, где прямую доставку осуществляют путем интратекального введения.

Дополнительные варианты осуществления настоящего раскрытия включают лейцин, ацетил-лейцин или их фармацевтически приемлемую соль для применения в способе задержки прогрессирования нейродегенеративного заболевания или лизосомальной болезни накопления (ЛБН) у субъекта. В другом варианте осуществления лейцин, ацетил-лейцин или их фармацевтически приемлемая соль предназначены для применения в способе обеспечения нейропротекции у субъекта, имеющего нейродегенеративное заболевание или ЛБН. В одном варианте осуществления лейцин или ацетил-лейцин находится в форме рацемата, в энантиомерном избытке L-энантиомера или в энантиомерном избытке D-энантиомера. В другом варианте осуществления способы дополнительно включают введение ацетил-лейцина в дозе от 1,5 г до 10 г в сутки. Кроме того, в одном варианте осуществления способы дополнительно включают введение лейцина, ацетил-лейцина или их фармацевтически приемлемой соли в течение периода лечения, составляющего две недели или более. Например, способы включают введение лейцина, ацетил-лейцина или их фармацевтически приемлемой соли до появления симптома заболевания или расстройства, подлежащего лечению. Кроме того, в дополнительном варианте осуществления способы дополнительно включают применение другой терапии или агента, предназначенного для профилактики или лечения заболевания или расстройства, подлежащего лечению. В одном варианте осуществления настоящего изобретения предлагается набор для задержки прогрессирования нейродегенеративного заболевания или ЛБН у субъекта, включающий средства для диагностики или прогнозирования нейродегенеративного заболевания или ЛБН, и лейцин, ацетил-лейцин или их фармацевтически приемлемую соль. Например, набор включает средства для диагностики или прогнозирования нейродегенеративного заболевания или ЛБН, и лейцин, ацетил-лейцин или их фармацевтически приемлемую соль. В дополнительном варианте осуществления настоящее изобретение предусматривает применение лейцина, ацетил-лейцина или их фармацевтически приемлемой соли в качестве нейропротекторного агента у субъекта, страдающего нейродегенеративным заболеванием или ЛБН. В следующем варианте осуществления способов, наборов или применений нейродегенеративное заболевание связано с дефектами лизосомального накопления. В одном из вариантов осуществления способов, наборов или применений нейродегенеративное заболевание представляет собой алкоголизм, болезнь Александера, болезнь Альперса, болезнь Альцгеймера, боковой амиотрофический склероз (БАС), атаксию-телеангиэктазию, нейрональный цероидный липофусциноз, болезнь Баттена, губчатую энцефалопатию крупного рогатого скота (ГЭКРС), болезнь Канавана, церебральный паралич, синдром Коккейна, кортикобазальную дегенерацию, болезнь Крейтцфельда-Якоба, лобно-височную лобарную дегенерацию, болезнь Хантингтона, ВИЧ-ассоциированную деменцию, болезнь Кеннеди, деменцию телец Леви, нейроборрелиоз, болезнь Мачадо-Джозефа, множественную системную атрофию, рассеянный склероз, множественную сульфатазную недостаточность, муколипидозы, нарколепсию, болезнь Ниманна-Пика, болезнь Паркинсона, болезнь Пика, болезнь Помпе, первичный латеральный склероз, прионные болезни, прогрессирующий надъядерный паралич, болезнь Рефсума, болезнь Шильдера, подострую комбинированную дегенерацию спинного мозга, вторичную по отношению к пернициозной анемии, болезнь Шпильмейера-Фогта-Шегрена-Баттена, спиноцеребеллярную атаксию, спинальную мышечную атрофию, болезнь Стила-Ричардсона-Ольшевского или спинную сухотку. В следующем варианте осуществления способов, наборов или применений ЛБН представляет собой болезнь Ниманна-Пика типа C (дефект NPC1 и/или NPC2), синдром Смита-Лемли-Опитца (SLOS), врожденное нарушение синтеза холестерина, болезнь Танжера, болезнь Пелицеуса-Мерцбахера, нейрональный цероидный липофусциноз, первичный гликосфинголипидоз, болезнь Фарбера или множественную сульфатазную недостаточность. Например, в способах, наборах или применениях первичным гликосфинголипидозом является болезнь Гоше, болезнь Фабри, ганглиозидоз GM1, ганглиозидоз GM2, болезнь Краббе или метахроматическая лейкодистрофия (МЛД). Кроме того, например, в способах, наборах или применениях ЛБН представляет собой NPC, болезнь Тея-Сакса, болезнь Сандхоффа, ганглиозидоз GM1, болезнь Фабри, нейродегенеративный мукополисахаридоз, MPS I, MPS IH, MPS IS, MPS II, MPS III, MPS IIIA, MPS IIIB, MPS IIIC, MPS HID, MPS, IV, MPS IV A, MPS IV B, MPS VI, MPS VII, MPS IX, заболевание с вторичным вовлечением лизосом, SLOS или болезнь Танжера. В дополнительном варианте осуществления способов, наборов или применений нейродегенеративное заболевание представляет собой мозжечковую атаксию, болезнь Ниманна-Пика, паркинсонизм, нейронопатическую болезнь Гоше, болезнь Сандхоффа, синдром Луи-Бар, болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, множественную системную атрофию, лобно-височную деменцию или синдром Паркинсона нижней части тела. В следующем варианте осуществления способов, наборов или применений нейродегенеративное заболевание представляет собой болезнь Ниманна-Пика, болезнь Ниманна-Пика типа C, болезнь Ниманна-Пика типа A, болезнь Тея-Сакса, болезнь Сандхоффа, боковой амиотрофический склероз (БАС), мультисистемную атрофию мозжечкового типа (MSA-C), лобно-височную деменцию с паркинсонизмом, кортикобазально-дегенеративный синдром, прогрессирующий надъядерный паралич или мозжечковый бьющий вниз нистагм. В варианте осуществления способов, наборов или применений ЛБН представляет собой болезнь Ниманна-Пика, болезнь Ниманна-Пика типа С, болезнь Ниманна-Пика типа А, болезнь Тея-Сакса, болезнь Сандхоффа или муколипидоз II типа.

Краткое описание чертежей

На фигуре 1 показаны фотографии мышей Npc1-/- в возрасте девяти недель, получавших лечение (Фигура 1А) и не получавших лечения (Фигура 1В).

На фигурах 2А и 2В показаны данные о массе тела мышей Npc1-/- по сравнению с мышами дикого типа (Npc1+/+), получавших лечение и не получавших лечения ацетил-DL-лейцином после отъема.

На фигурах 3A-3G представлены данные анализа походки для мышей Npc1-/- по сравнению с мышами дикого типа (Npc1+/+), получавших лечения и не получавших лечения ацетил-DL-лейцином после отъема. Например, данные диагональной опоры, частоты шагов и последовательности шагов показаны на фиг.3А-3С, соответственно. На фигурах 3D и 3E показаны данные для передней лапы (FP) (среднее значение по стойке и шаговый цикл на панели D; рабочий цикл на панели E). На фигурах 3F и 3G показаны данные для задней лапы (HP) (среднее значение по стойке и шаговый цикл на панели F; рабочий цикл на панели G).

На фигурах 4А-4Н показаны данные анализа двигательной функции мышей Npc1-/- по сравнению с мышами дикого типа (Npc1+/+), получавших или не получавших лечение ацетил-DL-лейцином после отъема. Подъем на задние лапы без опоры на передние, активность, счет движений с подъемом на задние лапы и вперед-назад (FR) показаны на фигурах 4A-4D, соответственно. Активное время, мобильное время, время стойки на задних лапах и общий счет подъемов на задние лапы с опорой на передние показаны на фигурах 4E - 4H, соответственно.

На фигуре 5 показано, что лечение ацетил-DL-лейцином (0,1 г/ кг с 3-недельного возраста) связано с небольшим, но статистически значимым увеличением продолжительности жизни у мышей Npc1-/-.

На фигурах 6А и 6В показано уменьшение объема лизосом в не-нейрональных клетках NPC после обработки ацетил-DL-лейцином. На фигурах 6C-6H показано влияние обработки ацетил-DL-лейцином на лизосомальный объем в фибробластах пациентов с NPA, MLII, MPS IIIB, аспартилглюкозаминурией, MLIIIA и MPS VII, соответственно.

На фигуре 7А показана кривая выживаемости, представляющая смертность у получавших и не получавших лечение ацетил-лейцином мышей дикого типа и мышей с болезнью Сандхоффа. На фигуре 7B показаны результаты теста преодоления планки у не получавших лечение и получавших лечение ацетил-лейцином мышей модели болезни Сандхоффа. На фигуре 7C показано время цикла шага для не получавших лечения и получавших лечение ацетил-лейцином мышей с болезнью Сандхоффа, исследованных в возрасте 12 недель.

Фигуры 8А-8С показывают влияние лечения ацетил-DL-лейцином на уровни гликосфинголипидов (GSL) в фибробластах пациентов с ганглиозидозом GM2 (болезнь Тея-Сакса, болезнь Сандхоффа и вариант AB болезни Тея-Сакса, соответственно).

На Фигуре 9 показана матрица анализа походки для 75-летнего мужчины, у которого диагностирован синдром кортикобазальной дегенерации, до и во время лечения ацетил-лейцином, где меньшее количество розовых областей в матрице указывает на улучшение по сравнению с предшествующим лечением.

На Фигурах 10А и 10В показано влияние лечения ацетил-DL-лейцином с течением времени на общий балл клинической тяжести (CSS) и общий балл по шкале ежегодного повышения степени тяжести (ASIS), соответственно, у десяти пациентов с NPC.

На Фигурах 11A-11J показано влияние лечения ацетил-DL-лейцином с течением времени на отдельные показатели CSS для каждого из десяти пациентов с NPC.

На фигурах 12A и 12B показано влияние лечения мышей NPC1-/- дикого типа ацетил-DL-лейцином на уровни C-концевых фрагментов белка-предшественника амилоида (APP-CTF) и уровни конъюгата ассоциированного с микротрубочками белка 1A/1B - легкой цепи-3 - фосфатидилэтаноламина (LC3-II), соответственно.

Фигуры 13А-13С показывают, что после лечения ацетил-DL-лейцином пациент, у которого был диагностирован синдром бьющего вниз нистагма, мог частично подавлять нистагм путем визуальной фиксации.

На Фигуре 14 показано уменьшение лизосомального объема в клетках NPC яичника китайского хомячка (СНО) после обработки ацетил-DL-лейцином, ацетил-D-лейцином, ацетил-L-лейцином, DL-лейцином, D-лейцином и L-лейцином, соответственно.

Описание изобретения

Ацетил-лейцин в форме рацемата (ацетил-DL-лейцин) и его соли эффективны при лечении головокружения различного происхождения, особенно головокружения Меньера и головокружения воспалительного (вестибулярного неврита) или токсического генеза. Например, ацетил-лейцин выпускается Pierre Fabre Medicament в форме рацемата в качестве лекарственного средства против головокружения под названием Танганил®. Клинические результаты применения Танганила®, о которых сообщают различные авторы, демонстрируют улучшение симптоматики головокружения более чем в 95% случаев, включая исчезновение приступов головокружения.

Ацетил-DL-лейцин используется во Франции для лечения острого головокружения с 1957 года и имеет превосходный профиль безопасности, но его безопасность при долговременном применении не была определена. Несмотря на многочисленные гипотезы, включая стабилизацию мембранного потенциала, его фармакологический и электрофизиологический способы действия остаются неясными. (Vibert et al. (2001) Eur J Neurosci; 13(4): 735-48; Ferber-Viart et al. (2009) Audiol Neurootol; 14(1): 17-25). Исследование ФДГ-µПЭТ на крысиной модели острой односторонней лабиринтэктомии (Zwergal et al. (2016) Brain Struct Funct; 221(1): 159-70) показало значительный эффект L-энантиомера, N-ацетил-L-лейцина, в отношении постуральной компенсации путем активации вестибуло-мозжечка и дезактивации постеролатерального таламуса (Gunther et al. (2015) PLoS One; 10(3): e0120891). Симптоматическое улучшение мозжечковой атаксии с использованием ацетил-DL-лейцина было показано в серии случаев с пациентами с мозжечковыми нарушениями (Strupp et al. (2013) J Neurol; 260(10): 2556-61). В другом ряде случаев не найдено полезных эффектов (Pelz et al. (2015) J Neurol; 262(5): 1373-5). Количественный анализ походки показал, что ацетил-DL-лейцин улучшает временную вариабельность походки у пациентов с мозжечковой атаксией (Schniepp et al. (2015) Cerebellum; 3:8). В одномесячном исследовании с участием 12 пациентов с болезнью Ниманна-Пика типа С (NPC) было показано симптоматическое улучшение атаксии (Bremova et al. (2015) Neurology; 85(16): 1368-75). Кроме того, исследование ПЭТ у пациентов с атаксией, получавших ацетил-DL-лейцин, продемонстрировало усиление метаболизма в среднем и нижнем стволе мозга у пациентов, отвечающих на лечение (Becker-Bense et al. (2015) Abstract EAN).

Однако не было известно о лечении ацетил-лейцином нейродегенеративных заболеваний, которые обычно прогрессируют в течение многих лет или десятилетий. Настоящее изобретение неожиданно показывает, что ацетил-лейцин или его фармацевтически приемлемую соль можно использовать в способе лечения нейродегенеративного заболевания у субъекта, нуждающегося в этом, например, путем задержки начала нейродегенеративного заболевания или одного или нескольких симптомов нейродегенеративного заболевания, которое в противном случае могло бы проявляться в соответствии с типичным прогрессированием заболевания, и/или путем задержки или регрессии нейродегенеративного заболевания или одного или нескольких симптомов нейродегенеративного заболевания, например, в течение длительного времени, по сравнению с типичным прогрессированием заболевания.

Как указано в настоящем изобретении, также было обнаружено, что лейцин или его фармацевтически приемлемую соль можно использовать в способе лечения нейродегенеративного заболевания у субъекта, нуждающегося в этом, например, путем задержки начала нейродегенеративного заболевания или один или несколько симптомов нейродегенеративного заболевания, которые в противном случае могли бы проявиться в соответствии с типичным прогрессированием заболевания, и/или путем задержки или регрессии нейродегенеративного заболевания или одного или нескольких симптомов нейродегенеративного заболевания, например, на более длительный период по сравнению с типичным прогрессированием заболевания.

Эти примерные применения в соответствии с настоящим изобретением, а также другие, описанные в данном документе, были совершенно неожиданными, так как такие преимущества не наблюдались и не могли быть выведены из предшествующего уровня техники. Как подтверждается Примерами, которые демонстрируют эффективность при широком спектре нейродегенеративных заболеваний, авторы изобретения считают, что лейцин и ацетил-лейцин действуют как нейропротекторные агенты и таким образом ингибируют нейродегенерацию, которая в противном случае могла бы проявиться. Кроме того, многие нейродегенеративные заболевания связаны с дефектами лизосомального накопления, и лизосомальная дисфункция, такая как аберрантно высокий уровень лизосомального накопления, может быть причиной нейрональной дисфункции и смерти. Как свидетельствуют примеры, но без желания углубляться в какую-либо конкретную теорию, авторы настоящего изобретения обнаружили, среди прочего, что лейцин и ацетил-лейцин могут улучшать клеточную дисфункцию (например, уменьшая объем лизосом до контрольных значений) и обеспечивать нейропротекцию.

Следовательно, настоящее изобретение относится к лейцину, ацетил-лейцину или их фармацевтически приемлемой соли для применения в способе лечения нейродегенеративного заболевания, или одного или нескольких симптомов нейродегенеративного заболевания у субъекта, нуждающегося в этом.

«Субъект» в данном описании может представлять собой позвоночное, млекопитающее или домашнее животное. Следовательно, композиции согласно настоящему изобретению могут использоваться для лечения любого млекопитающего, например, домашнего скота (например, лошади, коровы, овцы или свиньи), домашних животных (например, кошки, собаки, кролика или морской свинки), лабораторных животных (например, мыши или крысы), или могут быть использованы в других ветеринарных применениях. В одном варианте осуществления субъектом является человек.

«Нейродегенеративное заболевание» в контексте настоящего описания относится к любому нарушению, которое поражает нейроны, и включает прогрессирующую потерю нейрональной структуры, прогрессирующую потерю нейрональной функции или прогрессирующую гибель нейронных клеток.

Как здесь используется в настоящей заявке, формы единственного числа включают множественное число. Термины «приблизительно» и «примерно» означают, что они почти совпадают с указанным числом или значением, включая приемлемую степень ошибки для измеряемой величины с учетом характера или точности измерений.

Используемые в настоящей заявке термины «приблизительно» и «примерно» следует понимать, как охватывающие ±20% от определенного количества, частоты или значения. Числовые величины, приведенные в данном документе, являются приблизительными, если не указано иное, что означает, что термин «примерно» или «приблизительно» может быть выведен, если не указано иное.

Термины «применять», «применение» или «применяемый», используемые в данном документе, относятся к (1) обеспечению, предоставлению, дозировке и/или назначению врачом или его уполномоченным лицом или под его руководством композиции в соответствии с изобретением, и (2) к введению, принятию или употреблению самим пациентом или человеком композиции согласно изобретению.

Ссылки на «лейцин» и «ацетил-лейцин» повсеместно включают их фармацевтически приемлемые соли, даже если это прямо не указано.

Лейцин или ацетил-лейцин могут быть в рацемической форме, что означает, что соединение содержит примерно равные количества энантиомеров. Альтернативно, соединение может присутствовать в энантиомерном избытке либо L-энантиомера, либо D-энантиомера. Лейцин или ацетил-лейцин может находиться в одной энантиомерной форме либо L-энантиомера, либо D-энантиомера. В одном варианте осуществления единственная энантиомерная форма представляет собой L-энантиомер. Рацемические и энантиомерные формы могут быть получены в соответствии с известными в данной области техники процедурами.

«Фармацевтически приемлемая соль», как упоминается в настоящей заявке, представляет собой любой солевой препарат, который подходит для применения в фармацевтической области. Фармацевтически приемлемые соли включают соли амина, такого как N,N'-дибензилэтилендиамин, хлорпрокаин, холин, аммиак, диэтаноламин и другие гидроксиалкиламины, этилендиамин, N-метилглюкамин, прокаин, N-бензилфенэтиламин, 1-пара-хлорбензил-2-пирролидин-1'-илметилбензимидазол, диэтиламин и другие алкиламины, пиперазин, трис-(гидроксиметил)аминометан и т.п.; соли щелочных металлов, таких как литий, калий, натрий и т.п.; соли щелочноземельных металлов, таких как барий, кальций, магний и т.п.; соли переходных металлов, таких как цинк, алюминий и т.п.; соли других металлов, такие как гидрофосфат натрия, динатрийфосфат и т.п.; соли минеральных кислот, такие как гидрохлориды, сульфаты и т.п.; и соли органических кислот, такие как ацетаты, лактаты, малаты, тартраты, цитраты, аскорбаты, сукцинаты, бутираты, валераты, фумараты и тому подобное, но не ограничиваются ими.

Лейцин, ацетил-лейцин или их фармацевтически приемлемая соль могут быть составлены и введены субъекту в соответствии с известными в данной области техники учениями. Например, лейцин, ацетил-лейцин или их фармацевтически приемлемая соль могут быть составлены в виде фармацевтической композиции. Фармацевтическая композиция может содержать лейцин, ацетил-лейцин или их фармацевтически приемлемую соль и фармацевтически приемлемый носитель. Ссылка на фармацевтическую композицию включает активный агент по отдельности (например, лейцин, ацетил-лейцин или их фармацевтически приемлемую соль) или в форме фармацевтической композиции.

Фармацевтическая композиция может принимать любую из множества различных форм в зависимости, в частности, от способа ее применения. Таким образом, например, она может быть в форме порошка, таблетки, капсулы, жидкости, мази, крема, геля, гидрогеля, аэрозоля, спрея, мицеллярного раствора, трансдермального пластыря, суспензии липосом или в любой другой подходящей форме, которую можно вводить человеку или животному, нуждающемуся в лечении.

«Фармацевтически приемлемый носитель», как упомянуто в данном описании, представляет собой любое известное соединение или комбинацию известных соединений, которые, как известно специалистам в данной области техники, полезны при составлении фармацевтических композиций. Следует понимать, что носитель фармацевтической композиции должен переноситься субъектом, которому его назначают.

В одном варианте осуществления фармацевтически приемлемый носитель может быть твердым веществом, и композиция может быть в форме порошка или таблетки. Твердый фармацевтически приемлемый носитель может включать одно или несколько веществ, которые могут также действовать как ароматизаторы, буферы, любриканты, стабилизаторы, солюбилизаторы, суспендирующие агенты, смачивающие агенты, эмульгаторы, красители, наполнители, глиданты, добавки для прессования, инертные связующие агенты, подсластители, консерванты, красители, покрытия или дезинтегранты для таблеток, но не ограничивается этим. Носитель также может представлять собой инкапсулирующий материал. В порошках носитель может представлять собой тонкоизмельченное твердое вещество, которое находится в смеси с тонкоизмельченными активными агентами согласно изобретению. В таблетках активный агент может быть смешан с носителем, обладающим необходимыми свойствами сжатия, в подходящих пропорциях, и спрессован до необходимой формы и размера. Порошки и таблетки могут, например, содержать до 99% активных агентов. Подходящие твердые носители включают, например, фосфат кальция, стеарат магния, тальк, сахара, лактозу, декстрин, крахмал, желатин, целлюлозу, поливинилпирролидин, легкоплавкие воски и ионообменные смолы. В другом варианте осуществления фармацевтически приемлемый носитель может представлять собой гель, и композиция может быть в форме крема или тому подобного.

Носитель может включать один или несколько наполнителей или разбавителей, но не ограничивается ими. Примерами таких наполнителей являются желатин, аравийская камедь, лактоза, микрокристаллическая целлюлоза, крахмал, крахмалгликолят натрия, гидрофосфат кальция, стеарат магния, тальк, коллоидный диоксид кремния и тому подобное.

В другом варианте осуществления фармацевтически приемлемый носитель может представлять собой жидкость. В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция находится в форме раствора. Жидкие носители используются при приготовлении растворов, суспензий, эмульсий, сиропов, эликсиров и композиций под давлением. Лейцин, ацетил-лейцин или их фармацевтически приемлемая соль могут быть растворены или суспендированы в фармацевтически приемлемом жидком носителе, таком как вода, органический растворитель, смесь воды и органического растворителя или фармацевтически приемлемых масел или жиров. Жидкий носитель может содержать другие подходящие фармацевтические добавки, такие как солюбилизаторы, эмульгаторы, буферы, консерванты, подсластители, ароматизаторы, суспендирующие агенты, загустители, красители, регуляторы вязкости, стабилизаторы или осморегуляторы. Подходящие примеры жидких носителей для перорального и парентерального введения включают воду (частично содержащую добавки, как указано выше, например, производные целлюлозы, такие как раствор карбоксиметилцеллюлозы натрия), спирты (включая одноатомные спирты и многоатомные спирты, например, гликоли) и их производные, и масла (например, фракционированное кокосовое масло и арахисовое масло). Для парентерального введения носитель также может представлять собой маслянистый эфир, такой как этилолеат и изопропилмиристат. Стерильные жидкие носители полезны в стерильных жидких композициях для парентерального введения. Жидкий носитель для композиций под давлением может представлять собой галогенированный углеводород или другой фармацевтически приемлемый пропеллент.

Жидкие фармацевтические композиции, которые представляют собой стерильные растворы или суспензии, могут быть введены, например, внутримышечно, интратекально, эпидурально, интраперитонеально, внутривенно и подкожно. Активный агент может быть приготовлен в виде стерильной твердой композиции, которая может быть растворена или суспендирована во время введения с использованием стерильной воды, физиологического раствора или другой подходящей стерильной инъецируемой среды.

Композиции можно вводить перорально в форме стерильного раствора или суспензии, содержащей другие растворенные вещества или суспендирующие агенты (например, достаточное количество физиологического раствора или глюкозы, чтобы сделать раствор изотоническим), желчные солей, камедь акации, желатин, сорбитан моноолеат, полисорбат 80 (олеатные сложные эфиры сорбитола и их ангидриды, сополимеризованные с этиленоксидом) и тому подобное. Композиции также можно вводить перорально либо в жидкой, либо в твердой форме. Композиции, подходящие для перорального введения, включают твердые формы, такие как пилюли, капсулы, гранулы, таблетки и порошки, и жидкие формы, такие как растворы, сиропы, эликсиры и суспензии. Формы, пригодные для парентерального введения, включают стерильные растворы, эмульсии и суспензии.

Композиции могут альтернативно быть введены путем ингаляции (например, интраназально). Композиции также могут быть приготовлены для местного применения. Например, кремы или мази могут быть нанесены на кожу.

Лейцин, ацетил-лейцин или их фармацевтически приемлемая соль могут быть включены в устройство с пролонгированным или отсроченным высвобождением. Такие устройства могут, например, быть вставлены на кожу или под кожу, и лекарственное средство может высвобождаться в течение недель или даже месяцев. Такие устройства могут быть полезны, когда требуется длительное лечение лейцином или ацетил-лейцином, используемым в соответствии с настоящим изобретением, и которое может потребовать частого введения (например, по меньшей мере ежедневного введения).

В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция представляет собой твердую пероральную лекарственную форму, такую как таблетка. В таблетках активный агент может быть смешан с носителем, таким как фармацевтически приемлемый носитель, обладающим необходимыми свойствами сжатия в подходящих пропорциях и спрессован до необходимой формы и размера. Таблетки могут содержать до 99% по массе активных агентов.

Фармацевтические композиции в твердой пероральной лекарственной форме, такие как таблетки, могут быть получены любым способом, известным в области фармацевтики. Фармацевтические композиции обычно готовят путем смешивания активного агента с обычными фармацевтически приемлемыми носителями.

Таблетка может быть приготовлена, как известно в данной области техники. Танганил®, например, включает в качестве вспомогательных веществ пшеничный крахмал, прежелатинизированный кукурузный (маисовый) крахмал, карбонат кальция и стеарат магния. Такие же или подобные вспомогательные вещества, например, могут быть использованы в настоящем изобретении.

Состав каждой таблетки по Танганил® 700 мг является следующим: 500 мг ацетил-DL-лейцина, 88 мг пшеничного крахмала, 88 мг прежелатинизированного кукурузного (маисового) крахмала, 13 мг карбоната кальция и 11 мг стеарата магния. Например, те же самые таблетки могут быть использованы с настоящим изобретением.

Как обсуждалось выше, лейцин, ацетил-лейцин или их фармацевтически приемлемая соль могут быть изготовлены и введены в виде фармацевтической композиции, принимающей любое количество различных форм. Например, лейцин, ацетил-лейцин или их фармацевтически приемлемая соль могут быть составлены в виде фармацевтической композиции для облегчения их доставки через гематоэнцефалический барьер. В качестве дополнительного примера лейцин, ацетил-лейцин или их фармацевтически приемлемая соль могут быть приготовлены в виде фармацевтической композиции для обхода гематоэнцефалического барьера. Составы, которые облегчают доставку через гематоэнцефалический барьер или которые пригодны для введения способом, который обходит гематоэнцефалический барьер, могут быть использованы для приготовления и введения лейцина (не ацетилированного), как описано в настоящей заявке. Как показано в настоящем изобретении, воздействие лейцина на клетки, проявляющие фенотип лизосомального заболевания, улучшало, подобно воздействию ацетил-лейцина, клеточную дисфункцию (например, путем уменьшения объемов накопления лизосом по сравнению с контрольными значениями), демонстрируя тем самым сходную активность лейцина и ацетил-лейцина (см. Фигуру 14).

В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция (например, содержащая лейцин или его соль) приготовлена для нанодоставки, например, коллоидных систем лекарственное средство-носитель. Подходящие примеры включают липосомы, наночастицы (например, полимерные, липидные и неорганические наночастицы), наногели, дендримеры, мицеллы, наноэмульсии, полимерсомы, экзосомы и квантовые точки, но не ограничиваются ими. См., например, Patel et al., «Crossing the Blood-Brain Barrier: Recent Advances in Drug Delivery to the Brain», CNS Drugs 31:109-133 (2017); Kabanov et al., «New Technologies for Drug Delivery across the Blood Brain Barrier», Curr Pharm Des., 10(12):1355-1363 (2004); Cheng et al., «Highly Stabilized Curcumin Nanoparticles Tested in an In Vitro Blood-Brain Barrier Model and in Alzheimer’s Disease Tg2576 Mice», The AAPS Journal, vol. 15, no. 2, pp. 324-336 (2013); Lähde et al. «Production of L-Leucine Nanoparticles under Various Conditions Using an Aerosol Flow Reactor Method», Journal of Nanomaterials, vol. 2008, article ID 680897 (2008).

В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция (например, содержащая лейцин или его соль) составлена для прямой доставки в центральную нервную систему (ЦНС), например, путем инъекции или инфузии. Составы и способы прямой доставки в ЦНС известны в данной области техники. См., например, патент США №9283181. Примеры такого введения включают интраназальное, интравентрикулярное, интратекальное, интракраниальное введение и доставку посредством трансплантата слизистой оболочки носа, но не ограничиваются ими.

В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция составлена для (и вводится посредством) интраназальной доставки. См., например, Hanson et al., «Intranasal delivery bypasses the blood-brain barrier to target therapeutic agents to the central nervous system and treat neurodegenerative disease», BMC Neurosci. 9 (Suppl 3): S5 (2008). В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция приготовлена для (и вводится посредством) доставки через трансплантат слизистой оболочки носа. В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция составлена для (и вводится посредством) интрацеребровентрикулярной инъекции или инфузии. В другом варианте осуществления фармацевтическая композиция составлена для (и вводится посредством) интратекальной интрацистернальной инъекции или инфузии. В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция составлена для (и вводится посредством) интратекальной поясничной инъекции или инфузии. Например, активный агент может быть составлен для интратекального введения и/или введен интратекально таким же или аналогичным образом, как обсуждено Ory et al., «Intrathecal 2-hydroxypropyl-β-cyclodextrin decreases neurological disease progression in Niemann-Pick disease, type C1: a non-randomised, open-label, phase 1-2 trial», Vol. 390, Issue 10104, pp. 1758-1768 (2017).

Могут быть использованы различные методики, включая инъекцию через трепанационное отверстие, цистернальную или поясничную пункцию или тому подобное, как известно в данной области техники, но не ограничиваясь ими. Для доставки могут использоваться различные устройства, будь то внутренние (например, имплантированные) или внешние, такие как насосы, катетеры, резервуары и т.д. В одном варианте осуществления интервал введения составляет один раз каждые две недели.

В одном варианте осуществления интервал введения составляет один раз в месяц. В одном варианте осуществления интервал введения составляет один раз каждые два месяца. В одном варианте осуществления интервал введения составляет два раза в месяц. В одном варианте осуществления интервал введения составляет один раз каждую неделю. В одном варианте осуществления интервал введения составляет два или несколько раз в неделю. В одном варианте осуществления интервал введения составляет один раз в сутки. В одном варианте осуществления введение является непрерывным, таким как непрерывная инфузия.

Лейцин или его фармацевтически приемлемую соль можно вводить в дозе или количестве, эквивалентном тем, которые описаны в настоящей заявке для ацетил-лейцина, с поправкой на его непосредственную доставку в ЦНС или доставку через гематоэнцефалический барьер.

Подобным образом, ацетил-лейцин или его фармацевтически приемлемую соль можно вводить в дозе или количестве, как описано в настоящей заявке; доза может быть скорректирована в соответствии с путем введения (например, прямой доставкой в ЦНС).

Настоящее раскрытие описывает лейцин, ацетил-лейцин и их фармацевтически приемлемые соли, включая композиции и способы, для лечения нейродегенеративного заболевания, или одного или нескольких симптомов нейродегенеративного заболевания у субъекта, нуждающегося в этом. Субъект, нуждающийся в этом, может иметь генетический, биохимический или другой подобный идентифицируемый маркер нейродегенеративного заболевания. Например, маркер нейродегенеративного заболевания может быть клеточным маркером. У субъекта, нуждающегося в этом, может быть диагностировано нейродегенеративное заболевание. Например, у субъекта может быть диагностировано нейродегенеративное заболевание в соответствии с генетическим, биохимическим или другим подобным идентифицируемым маркером. Субъект, нуждающийся в этом, может быть подозреваемым на наличие или подверженным риску развития нейродегенеративного заболевания. Например, субъект может иметь генетическую предрасположенность к нейродегенеративному заболеванию (например, субъект может иметь одного или нескольких членов семьи с нейродегенеративным заболеванием). Субъект, нуждающийся в этом, может быть симптоматическим (то есть иметь один или несколько симптомов, связанных с нейродегенеративным заболеванием). Субъект, нуждающийся в этом, может быть бессимптомным. Следует понимать, что термины «симптоматический» и «бессимптомный» используются применительно к симптомам нейродегенеративного заболевания. Субъекты, у которых есть генетический, биохимический или другой подобный идентифицируемый маркер нейродегенеративного заболевания, такие как субъекты, у которых было диагностировано нейродегенеративное заболевание, основанное на генетическом, биохимическом или другом подобном идентифицируемом маркере, но у которых больше нет симптомов заболевания, включены в объем «бессимптомных» для целей настоящего изобретения.

Используемый в настоящей заявке термин «лечение нейродегенеративного заболевания или одного или нескольких симптомов нейродегенеративного заболевания» и тому подобное относится к задержке наступления нейродегенеративного заболевания или одного или нескольких симптомов нейродегенеративного заболевания, которые в противном случае могли бы проявиться в соответствии с типичным прогрессированием заболевания; к уменьшению тяжести нейродегенеративного заболевания или уменьшению тяжести или устранению одного или нескольких существующих симптомов, связанных с нейродегенеративным заболеванием; к задержке прогрессирования нейродегенеративного заболевания или одного или нескольких симптомов нейродегенеративного заболевания во времени по сравнению с типичным прогрессированием заболевания; и/или к регрессии нейродегенеративного заболевания или одного или нескольких симптомов нейродегенеративного заболевания с течением времени. «Лечение нейродегенеративного заболевания, или одного или нескольких симптомов нейродегенеративного заболевания» также может относиться к улучшению биохимического маркера нейродегенеративного заболевания.

Используемый в настоящей заявке термин «типичное прогрессирование заболевания», «прогрессирование заболевания, которое обычно ожидается» и тому подобное, относится к типичному или ожидаемому прогрессированию нейродегенеративного заболевания, одного или нескольких симптомов, связанных с нейродегенеративным заболеванием, или биохимического маркера нейродегенеративного заболевания, если субъект не получал лечения. Типичное или ожидаемое прогрессирование заболевания может быть основано, например, на известной шкале, показателе, оценке или балле, или другом подходящем тесте для оценки прогрессирования нейродегенеративного заболевания, одного или нескольких симптомов нейродегенеративного заболевания или биохимического маркера нейродегенеративного заболевания, такого как описанные здесь в качестве примеров. Шкала, индекс, оценка, балл или другой подходящий тест могут соответствовать прогрессированию заболевания в целом, или прогрессированию одного или нескольких симптомов, связанных с заболеванием. Например, типичное или ожидаемое прогрессирование заболевания может быть основано на типичном или ожидаемом начале или степени тяжести нейродегенеративного заболевания, или симптоме или совокупности симптомов, связанных с нейродегенеративным заболеванием. Типичное или ожидаемое прогрессирование заболевания может быть определено индивидуально для каждого субъекта или может быть основано на том, что обычно наблюдается или изучено у группы субъектов, пораженных нейродегенеративным заболеванием, такой как популяция или субпопуляция субъектов. Субпопуляции могут включать, например, субпопуляции того же пола, того же или аналогичного возраста, того же или аналогичного времени для появления одного или нескольких симптомов и т.д.

В одном варианте осуществления «лечение нейродегенеративного заболевания, или одного или нескольких симптомов нейродегенеративного заболевания» относится к задержке наступления нейродегенеративного заболевания, или одного или нескольких симптомов нейродегенеративного заболевания, которые в противном случае могли бы проявиться в соответствии с типичным прогрессированием заболевания. Используемый в настоящей заявке термин «задержка начала нейродегенеративного заболевания, или одного или нескольких симптомов нейродегенеративного заболевания» и тому подобное относится к увеличению времени или предотвращению начала нейродегенеративного заболевания, или одного или нескольких симптомов нейродегенеративного заболевания. Например, можно сказать, что начало заболевания отсрочено, когда время до проявления нейродегенеративного заболевания, или одного или нескольких симптомов нейродегенеративного заболевания по меньшей мере на 5% больше, чем время в соответствии с типичным прогрессированием заболевания. Далее, например, отмечается увеличение времени по меньшей мере на 10%, по меньшей мере на 15%, по меньшей мере на 20%, по меньшей мере на 25%, по меньшей мере на 30%, по меньшей мере на 40%, по меньшей мере на 50%, по меньшей мере на 60%, по меньшей мере на 70%, по меньшей мере на 80%, по меньшей мере 90% или по меньшей мере на 100%. В одном варианте осуществления субъект является бессимптомным. Применение лейцина или ацетил-лейцина может быть начато в то время, когда у субъекта нет симптомов, чтобы отсрочить начало нейродегенеративного заболевания, или одного или нескольких симптомов нейродегенеративного заболевания, которые в противном случае могли бы проявиться в соответствии с типичным прогрессированием заболевания. В другом варианте осуществления субъект является симптоматическим. Применение лейцина или ацетил-лейцина может быть начато в тот момент, когда у субъекта есть некоторые симптомы, чтобы отсрочить начало одного или нескольких дополнительных симптомов нейродегенеративного заболевания, которые в противном случае могли бы проявиться в соответствии с типичным прогрессированием заболевания. Субъект, нуждающийся в этом, может продолжать лечение лейцином или ацетил-лейцином в соответствии с продолжительностью, описанной в настоящей заявке. В одном варианте осуществления лечение предотвращает возникновение одного или нескольких симптомов нейродегенеративного заболевания, которые в противном случае могли бы проявиться в соответствии с типичным прогрессированием заболевания.

В одном варианте осуществления «лечение нейродегенеративного заболевания, или одного или нескольких симптомов нейродегенеративного заболевания» относится к снижению тяжести нейродегенеративного заболевания, или к уменьшению тяжести или устранению одного или нескольких существующих симптомов, связанных с нейродегенеративным заболеванием. Тяжесть нейродегенеративного заболевания или имеющегося симптома (симптомов) может быть оценена с использованием известной шкалы, индекса, оценки или балла, таких как те, которые описаны в качестве примеров в данном документе, или другого подходящего теста для оценки степени тяжести. Например, шкала, индекс, оценка, балл или другой подходящий тест могут соответствовать серьезности заболевания в целом, или тяжести одного или нескольких симптомов, связанных с заболеванием. В одном варианте осуществления лечение улучшает такую оценку от значения или степени, характерной для пациента с симптомами, до значения или степени, характерной для пациента без симптомов.

В одном варианте осуществления «лечение нейродегенеративного заболевания или одного или нескольких симптомов нейродегенеративного заболевания» относится к задержке прогрессирования нейродегенеративного заболевания или одного или нескольких симптомов, связанных с нейродегенеративным заболеванием, с течением времени, по сравнению с типичным прогрессированием заболевания, или к регрессии нейродегенеративного заболевания или одного или нескольких симптомов, связанных с нейродегенеративным заболеванием, с течением времени. Время, в течение которого лечение задерживает или отменяет прогрессирование, может совпадать с продолжительностью лечения, как описано в настоящей заявке. Лечение может задерживать или обращать прогрессирование в течение, например, примерно семи дней или более, примерно двух недель или более, примерно трех недель или более, примерно одного месяца или более, примерно шести недель или более, примерно семи недель или более, или примерно двух месяцев или более. Лечение может задерживать или обращать прогрессирование в течение, например, примерно трех месяцев или более, примерно четырех месяцев или более, примерно пяти месяцев или более, или примерно шести месяцев или более. Лечение может задерживать или обращать прогрессирование в течение, например, примерно 1 года или более, примерно 2 лет или более, примерно 3 лет или более, примерно 4 лет или более, примерно 5 лет или более, или примерно 10 лет или более. Лечение может задерживать или обращать прогрессирование нейродегенеративного заболевания или одного или нескольких симптомов, связанных с нейродегенеративным заболеванием, в течение жизни пациента.

В одном варианте осуществления «лечение нейродегенеративного заболевания или одного или нескольких симптомов нейродегенеративного заболевания» относится к задержке прогрессирования нейродегенеративного заболевания или одного или нескольких симптомов нейродегенеративного заболевания в течение времени по сравнению с типичным прогрессированием заболевания. Используемый в настоящей заявке термин «задержка прогрессирования нейродегенеративного заболевания или одного или нескольких симптомов, связанных с нейродегенеративным заболеванием, с течением времени» и тому подобное относится к замедлению и/или остановке прогрессирования заболевания или одного или нескольких симптомов заболевания (например, к замедлению и/или прекращению ухудшения или увеличения тяжести заболевания или одного или нескольких симптомов заболевания) с течением времени. Прогрессирование заболевания может быть определено, например, с использованием известной шкалы, индекса, оценки или балла, таких как те, которые описаны в качестве примеров в данном документе, или другого подходящего теста для оценки прогрессирования. Например, шкала, индекс, оценка, балл или другой подходящий тест могут соответствовать прогрессированию заболевания в целом или прогрессированию одного или нескольких симптомов, связанных с заболеванием. В одном варианте осуществления «задержка прогрессирования нейродегенеративного заболевания или одного или несколько симптомов, связанных с нейродегенеративным заболеванием» означает, что значение тяжести заболевания субъекта (например, общая тяжесть или тяжесть одного или нескольких симптомов), определяемое по известной шкале, индексу, оценке, баллу и т.д., или с помощью другого подходящего теста для оценки степени тяжести, не увеличивается значимо (например, по меньшей мере остается практически постоянным). В одном варианте осуществления «задержка прогрессирования нейродегенеративного заболевания или одного или нескольких симптомов нейродегенеративного заболевания» означает предотвращение достижения субъектом или увеличение времени, необходимого для достижения субъектом (например, уменьшение скорости изменения возрастающей степени тяжести) значения тяжести в соответствии с известной шкалой, индексом, оценкой, баллом и т.д. или другим подходящим тестом для оценки прогрессирования, по сравнению со значением, соответствующим типичному прогрессированию заболевания. Например, можно сказать, что прогрессирование задерживается, когда время достижения значения тяжести занимает по меньшей мере на 5% больше времени, наблюдаемого в соответствии с типичным прогрессированием заболевания. Далее, например, наблюдается увеличение времени по меньшей мере на 10%, по меньшей мере на 15%, по меньшей мере на 20%, по меньшей мере на 25%, по меньшей мере на 30%, по меньшей мере на 40%, по меньшей мере на 50%, по меньшей мере на 60%, по меньшей мере на 70%, по меньшей мере на 80%, по меньшей мере на 90% и по меньшей мере на 100%. Время, в течение которого лечение задерживает прогрессирование нейродегенеративного заболевания или одного или нескольких симптомов нейродегенеративного заболевания, может совпадать с продолжительностью лечения, как описано в настоящей заявке. В одном варианте осуществления лечение задерживает прогрессирование по меньшей мере примерно на три месяца, по меньшей мере примерно на четыре месяца, по меньшей мере примерно на пять месяцев или по меньшей мере примерно на шесть месяцев. Лечение может задерживать прогрессирование по меньшей мере приблизительно на 1 год, по меньшей мере примерно на 2 года, по меньшей мере примерно на 3 года, по меньшей мере примерно на 4 года, по меньшей мере примерно на 5 лет или по меньшей мере примерно на 10 лет. Лечение может задерживать прогрессирование в течение жизни пациента.

В одном варианте осуществления «лечение нейродегенеративного заболевания или одного или нескольких симптомов нейродегенеративного заболевания» относится к регрессии нейродегенеративного заболевания или одного или нескольких симптомов нейродегенеративного заболевания с течением времени. Используемый в настоящей заявке термин «регрессия нейродегенеративного заболевания или одного или нескольких симптомов нейродегенеративного заболевания с течением времени» и тому подобное относится к остановке прогрессирования и снижению тяжести заболевания или одного или нескольких симптомов заболевания с течением времени. Прогрессирование заболевания и тяжесть могут быть определены, например, с использованием известной шкалы, индекса, оценки или балла, таких как те, которые описаны в качестве примеров в данном документе, или другого подходящего теста для оценки прогрессирования и тяжести. Например, шкала, индекс, оценка, балл или другой подходящий тест могут соответствовать прогрессированию и тяжести заболевания в целом или прогрессированию и тяжести одного или нескольких симптомов, связанных с заболеванием. В одном варианте осуществления «регрессия нейродегенеративного заболевания или одного или нескольких симптомов нейродегенеративного заболевания со временем» означает, что значение тяжести заболевания субъекта (например, общая тяжесть или тяжесть одного или нескольких симптомов), определяемое по известной шкале, индексу, оценке, баллу и т.д., или другому подходящему тесту для оценки степени тяжести, улучшается со временем (т.е. демонстрирует снижение тяжести со временем). Время, в течение которого лечение обеспечивает регрессию нейродегенеративного заболевания или одного или нескольких симптомов нейродегенеративного заболевания, может совпадать с продолжительностью лечения, как описано в настоящей заявке. В одном варианте осуществления лечение обеспечивает регрессию в течение по меньшей мере примерно трех месяцев, по меньшей мере примерно четырех месяцев, по меньшей мере примерно пяти месяцев или по меньшей мере примерно шести месяцев. В дополнительном варианте осуществления лечение обеспечивает регрессию в течение по меньшей мере примерно 1 года, по меньшей мере примерно 2 года, по меньшей мере примерно 3 лет, по меньшей мере примерно 4 лет, по меньшей мере примерно 5 лет или по меньшей мере примерно 10 лет. Лечение может обеспечить регрессию в течение жизни пациента.

В одном варианте осуществления «лечение нейродегенеративного заболевания или одного или нескольких симптомов нейродегенеративного заболевания» относится к улучшению у субъекта биохимического маркера нейродегенеративного заболевания (например, повышенного уровня метаболита (метаболитов) накопления или вторичных биохимических изменений, возникающих в результате первичного хранения). Биохимический маркер является сигналом активности болезни и может обеспечивать постоянные признаки тяжести заболевания и прогрессирования с течением времени. В одном варианте осуществления биохимический маркер улучшается с учетом контрольного значения. В одном варианте осуществления биохимический маркер выбран из увеличенного лизосомального объема, повышенных уровней гликосфинголипида (GSL), повышенных уровней конъюгата ассоциированного с микротрубочками белка 1A/1B - легкой цепи-3 - фосфатидилэтаноламина (LC3-II), и повышенных уровней С-концевого фрагмента белка-предшественника амилоида (APP-CTF). В одном варианте осуществления биохимический маркер является повышенным объемом лизосом, и лечение уменьшает объем лизосом у субъекта. В одном варианте осуществления биохимический маркер представляет собой повышенные уровни гликосфинголипида (GSL), и лечение снижает уровни GSL у субъекта. В одном варианте осуществления биохимический маркер представляет собой повышенные уровни конъюгата ассоциированного с микротрубочками белка 1A/1B - легкой цепи-3 - фосфатидилэтаноламина, и лечение снижает уровни LC3-II у субъекта. В одном варианте осуществления биохимический маркер повышает уровни С-концевого фрагмента белка-предшественника амилоида (APP-CTF), и лечение снижает уровни APP-CTF у субъекта. В одном варианте осуществления лечение со временем улучшает биохимический маркер. Например, в одном варианте осуществления улучшение биохимического маркера со временем означает, что лечение со временем улучшает биохимический маркер до контрольного значения, предотвращает прогрессирование биохимического маркера со временем и/или задерживает прогрессирование биохимического маркера со временем по сравнению с типичным прогрессированием заболевания. Время, в течение которого лечение улучшает биохимический маркер, может совпадать с продолжительностью лечения, как описано в настоящей заявке. В одном варианте осуществления лечение улучшает биохимический маркер в течение по меньшей мере примерно трех месяцев, по меньшей мере примерно четырех месяцев, по меньшей мере примерно пяти месяцев или по меньшей мере примерно шести месяцев. Лечение может улучшать биохимический маркер в течение по меньшей мере примерно 1 года, по меньшей мере примерно 2 лет, по меньшей мере примерно 3 лет, по меньшей мере примерно 4 лет, по меньшей мере примерно 5 лет или по меньшей мере примерно 10 лет. Лечение может улучшить биохимический маркер в течение жизни пациента.

«Симптом» нейродегенеративного заболевания включает любое клиническое или лабораторное проявление, связанное с нейродегенеративным заболеванием, и не ограничивается тем, что субъект может чувствовать или наблюдать. Симптомы, описанные в настоящей заявке, включают неврологические симптомы и психиатрические симптомы, но не ограничиваются ими. Примеры неврологических симптомов включают атаксию, другие двигательные расстройства, такие как гипокинезия, окоченение, тремор или дистония, синдром беспокойных ног (СБН), центральные глазодвигательные расстройства, такие как как вертикальный и горизонтальный надъядерный паралич взгляда/саккада и нейропсихологические нарушения, такие как деменция. В одном варианте осуществления неврологическим симптомом является СБН. В одном варианте осуществления лечение нейродегенеративного заболевания, как описано в настоящей заявке, включает лечение СБН у субъекта, например, снижение тяжести или улучшение СБН, задержку или ингибирование прогрессирования СБН или устранение СБН. Примеры психиатрических симптомов включают депрессию, поведенческие расстройства или психоз. Начало симптомов может варьировать от рождения до взрослой жизни.

Прогрессирование нейродегенеративного заболевания со временем или в процессе лечения можно отслеживать, например, с помощью одного или нескольких известных тестов в два или более временных моментов и сравнения результатов. Прогрессирование и/или тяжесть заболевания можно оценить, например, с использованием шкалы для оценки атаксии (SARA), функционального индекса спиноцеребеллярной атаксии (SCAFI), Международной кооперативной шкалы рейтинга атаксии (ICARS), краткой шкалы оценки атаксии (BARS), модифицированной шкалы оценки инвалидности (mDRS), EuroQol 5Q-5D-5L (EQ-5D-5L), визуально-аналоговой шкалы (VAS), нейропсихологических тестов, таких как пересмотренная шкала интеллекта взрослых Векслера (WAIS-R), шкала интеллекта Векслера для детей-IV (WISC-IV), Монреальская шкала оценки когнитивных функций (MoCA), а также шкал, используемых при двигательных расстройствах, таких как унифицированная шкала оценки болезни Паркинсона (UPRS) или унифицированная шкала оценки множественной системной атрофии (UMSARS), или другие подходящие тесты. Для некоторых ЛБН, таких как NPC, за последние десятилетия были разработаны и подтверждены конкретные шкалы, например, клиническая шкала тяжести заболевания (CSS) и шкала годового ухудшения тяжести (ASIS) (см Yanjanin et al., “Linear Clinical Progression, Independent of Age of Onset, in Niemann-Pick Disease, Type C,” Am J Med Genet Part B 153B:132-140) и модифицированная 6-доменная шкала инвалидности инвалидности при NP-C (шкала mDRS). Например, степень тяжести пациента с NPC может быть количественно определена путем оценки по шкале CSS, определяющей различные параметры заболевания (ходьбу, судороги, движение глаз и т.д.) и назначающей каждому параметру балл из 5. Более высокий балл соответствует большей тяжести. ASIS количественно определяет ежегодную скорость изменения CSS, рассчитанную путем деления CSS на возраст пациента. В связи с этим определенные оценки в этих тестах характерны для пациентов с симптомами нейродегенеративного заболевания и свидетельствуют о прогрессировании и/или степени тяжести заболевания.

Таким образом, «лечение нейродегенеративного заболевания или одного или нескольких симптомов нейродегенеративного заболевания», например, можно приравнять к достижению улучшенной оценки, такой как описанные в настоящей заявке, по шкалам SARA, SCAFI, ICARS, BARS, mDRS, EQ-5D-5L, VAS, WAIS-R, WISC-IV, CSS, UPRS, UMSARS и/или MoCA, или результатам другого теста, подходящего для характеристики нейродегенеративного заболевания пациента. Например, в одном варианте осуществления «уменьшение тяжести нейродегенеративного заболевания или уменьшение тяжести или устранение одного или нескольких существующих симптомов нейродегенеративного заболевания» означает улучшение по шкале SARA, SCAFI, ICARS, BARS, mDRS, EQ-5D-5L, VAS, WAIS-R, WISC-IV, CSS, UPRS, UMSARS и/или MoCA или по результатам другого подходящего теста для оценки степени тяжести, таким как улучшение оценки или результата от значения тяжести, характерного для симптоматического субъекта, до значения, характерного для бессимптомного субъекта. В другом варианте осуществления «задержка прогрессирования нейродегенеративного заболевания или одного или нескольких симптомов нейродегенеративного заболевания» означает, что у пациента показатели по шкале SARA, SCAFI, ICARS, BARS, mDRS, EQ-5D-5L, VAS, WAIS-R, WISC-IV, CSS, UPRS, UMSARS и/или MoCA или результаты другого подходящего теста для оценки прогрессии не увеличиваются значимо (например, по меньшей мере остаются практически постоянными). В дополнительном варианте осуществления «задержка прогрессирования нейродегенеративного заболевания или одного или нескольких симптомов, связанных с нейродегенеративным заболеванием» означает предотвращение достижения или увеличения времени, необходимого для достижения значения по шкале SARA, SCAFI, ICARS, BARS, mDRS, EQ-5D-5L, VAS, WAIS-R, WISC-IV, CSS, UPRS, UMSARS и/или MoCA или результата другого подходящего теста для оценки прогрессии у субъекта, по сравнению с типичным прогрессированием заболевания. В другом варианте осуществления «регрессия нейродегенеративного заболевания или одного или нескольких симптомов нейродегенеративного заболевания с течением времени» означает, что показатели SARA, SCAFI, mDRS, EQ-5D-5L, VAS, WAIS-R, WISC-IV, CSS и/или MoCA, или результат другого подходящего теста для оценки прогрессирования у субъекта улучшаются со временем (то есть показывают снижение тяжести во времени).

Например, для оценки общего неврологического статуса может применяться mDRS, четырехбалльная шкала (ходьба, манипуляция, язык и глотание). Функцию мозжечка можно оценить с помощью SARA, шкалы клинических оценок из восьми пунктов (походка, вертикальное положение, сидение, речь, мелкая моторная функция и упорядоченное движение; диапазон 0-40, где 0 - наилучший неврологический статус, а 40 - наихудший), а также SCAFI, включающей испытание времени ходьбы на 8 м (8MW; выполняемое так, чтобы пациенты проходили в два раза быстрее от одной линии к другой, исключая поворот), тест с доской для вставки 9 штырей (9HPT) и количество повторений «PATA» более 10 с. Субъективные нарушения и качество жизни могут быть оценены с помощью вопросника EQ-5D-5L и VAS. Для оценки глазодвигательной функции можно использовать трехмерную видеоокулографию (EyeSeeCam) для измерения пиковой скорости саккад, усиления плавного преследования, пиковой скорости медленной фазы установочного нистагма (функции удержания взгляда), пиковой скорости медленной фазы оптокинетического нистагма и усиления горизонтального вестибуло-окулярного рефлекса. Для оценки когнитивного статуса можно использовать WAIS-R или WISC-IV и MoCA, оценивающие различные когнитивные домены, включая внимание и концентрацию, исполнительные функции, память, язык, визуально-конструктивные навыки, концептуальное мышление, вычисления и ориентацию, с максимум 30 баллами и с отсечением 26. Специалисту в данной области техники известно, как выполнить эти и другие подобные тесты.

Синдром беспокойных ног (СБН) - это неврологическое состояние, характеризующееся непреодолимым желанием двигаться, обычно возникающее в состоянии покоя и сопровождающееся неприятными или странными ощущениями. Это чаще всего затрагивает ноги, особенно между коленом и лодыжкой, но может затрагивать другие области, такие как руки, туловище или даже фантомные конечности. В одном варианте осуществления настоящего изобретения лейцин, ацетил-лейцин или их фармацевтически приемлемую соль используют в способе лечения СБН у субъекта, страдающего нейродегенеративным заболеванием. Способ включает введение субъекту терапевтически эффективного количества лейцина, ацетил-лейцина или их фармацевтически приемлемой соли. В одном варианте осуществления субъект, страдающий СБН, имеет нейродегенеративное заболевание, выбранное из паркинсонизма (например, такого, как описано в настоящей заявке), спиноцеребеллярной атаксии, болезни Хантингтона, наследственного спастического парапареза, бокового амиотрофического склероза (БАС) и болезни Альцгеймера. В одном варианте осуществления нейродегенеративное заболевание выбрано из лобно-височной деменции, деменции телец Леви, множественной системной атрофии, прогрессирующего надъядерного паралича и кортикобазальной дегенерации. В одном варианте осуществления нейродегенеративное заболевание представляет собой болезнь двигательных нейронов (например, такую, как описано в настоящей заявке). В одном варианте осуществления нейродегенеративное заболевание представляет собой болезнь Паркинсона. В одном варианте осуществления нейродегенеративное заболевание связано с дисфункцией дофаминергической системы, такой как потеря дофаминергических клеток. В одном варианте осуществления СБН является симптомом нейродегенеративного заболевания или может быть иным образом ассоциирован с нейродегенеративным заболеванием или связан с ним. В дополнительном варианте осуществления настоящего изобретения, где СБН характеризуется как нейродегенеративное заболевание, лейцин, ацетил-лейцин или их фармацевтически приемлемую соль используют для лечения СБН у субъекта, нуждающегося в этом.

Лечение СБН, как обсуждено в данном документе, может включать уменьшение тяжести или ослабление, ингибирование или устранение одного или нескольких симптомов СБН. «Симптом» СБН включает любое клиническое или лабораторное проявление, связанное с СБН. Симптомы СБН часто, но не обязательно, являются проявлениями, связанными с заболеванием, которые субъект может чувствовать или наблюдать. Симптомы, связанные с СБН, включают ощущения в области голени, периодические движения конечности во сне (PLMS), неприятные ощущения в ногах, желание двигаться, беспокойство, нарушения сна, чрезмерную дневную сонливость и тому подобное, но не ограничиваются ими. В одном варианте осуществления симптомы, связанные с СБН, которые уменьшены, подавлены или устранены, выбраны из любого ощущения или сочетания ощущений в области голени, периодических движений ног во сне (PLMS), неприятных ощущений в ногах, желания двигаться, беспокойства, чрезмерной дневной сонливости и нарушений сна.

Тяжесть СБН или одного или нескольких симптомов СБН может быть оценена, например, с использованием известной шкалы, индекса, оценки или балла. Например, шкала, индекс, оценка, балл или другой подходящий тест могут соответствовать тяжести СБН в целом, или тяжести одного или нескольких симптомов, связанных с СБН. В одном варианте осуществления лечение, описанное в настоящей заявке, улучшает такую оценку от значения или степени, характерной для симптоматического субъекта, до значения или степени, характерной для бессимптомного субъекта. В одном варианте осуществления лечение, описанное в настоящей заявке, улучшает такую оценку по сравнению с базовым уровнем. Базовым уровнем может быть, например, состояние субъекта до начала какого-либо лечения СБН или до начала лечения СБН лейцином, ацетил-лейцином или его фармацевтически приемлемой солью. Альтернативно, базовым уровнем может быть, например, состояние субъекта после определенного периода времени лечения СБН.

Международная исследовательская группа по синдрому беспокойных ног («IRLSSG») ((http://www.irlssg.org/) разработала широко известную рейтинговую шкалу, известную как Международная рейтинговая шкала для исследования синдрома беспокойных ног («IRLS») (Walters et al., Validation of the International Restless Legs Syndrome Study Group rating scale for restless legs syndrome. Sleep medicine. 2003 Apr 01;4(2):121-32). IRLS представляет собой 10-балльную шкалу с оценками от 0 (без симптомов) до 40. Уровень >30 баллов считается очень тяжелым состоянием, 21-30 баллов - тяжелым состоянием, 11-20 - состоянием умеренной тяжести, и ≤10 - легкой степенью. Использование шкалы является общим для клинической оценки, научных и терапевтических испытаний с СБН. В одном варианте осуществления лечение лейцином, ацетил-лейцином или его фармацевтически приемлемой солью, как описано в настоящей заявке, снижает значение по международной шкале оценки группы по изучению синдрома беспокойных ног («IRLS») по сравнению с базовым уровнем. В одном варианте осуществления показатель IRLS снижается по сравнению с базовым уровнем по меньшей мере на 10%, по меньшей мере на 20%, по меньшей мере на 30%, по меньшей мере на 40% или по меньшей мере на 50%. В одном варианте осуществления IRLS снижается по меньшей мере на 60%, по меньшей мере на 70%, по меньшей мере на 80%, по меньшей мере на 90% или на 100%.

В одном варианте осуществления ацетил-лейцин или его фармацевтически приемлемую соль можно вводить, например, в дозе примерно от 500 мг до 15 г в сутки или примерно от 500 мг до 10 г в сутки, например, в диапазоне примерно от 1,5 г до 10 г в сутки, при необходимости в твердом состоянии перорально или в жидком состоянии перорально. Ацетил-лейцин или его фармацевтически приемлемую соль можно вводить, например, в дозе, соответствующей дозе препаратом Танганил®, который назначают взрослым в дозе от 1,5 до 2 г в сутки, 3- 4 таблетки в двух дозах, утром и вечером.

Если применяют один энантиомер, дозы могут быть соответственно уменьшены. Например, если применяют только ацетил-L-лейцин или если применяют только ацетил-D-лейцин, доза может составлять примерно от 250 мг до 15 г в сутки, примерно от 250 мг до 10 г в сутки или примерно от 250 мг до 5 г в сутки, например, примерно от 0,75 г до 5 г в сутки.

В одном варианте осуществления вводимая доза составляет примерно от 1 г до 15 г в сутки, примерно от 1 г до 10 г в сутки или примерно от 1,5 г до 7 г в сутки. Она может составлять примерно от 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13 или 14 г до примерно 15 г в сутки. Она может составлять примерно от 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 или 9 г до примерно 10 г в сутки. Она может составлять более 1,5 г в сутки, но менее 15, 14, 13, 12, 11, 10, 9, 8, 7, 6 или 5 г в сутки. В одном варианте осуществления доза составляет примерно от 4 г до 6 г в сутки. В одном варианте осуществления доза составляет примерно от 4 г до 5 г в сутки. В одном варианте осуществления доза составляет примерно 4,5 г в сутки. В одном варианте осуществления доза составляет примерно 5 г в сутки. В одном варианте осуществления эти дозы вводят в твердой пероральной лекарственной форме, особенно в таблетках. В другом варианте осуществления эти дозы предназначены для ацетил-лейцина в его рацемической форме. Дозы для ацетил-лейцина, когда присутствует энантиомерный избыток, могут быть ниже, чем указанные здесь, например, приблизительно на 50% ниже. Вышеуказанные диапазоны доз, когда они делятся пополам, таким образом, также явно включены в настоящее раскрытие.

В одном варианте осуществления общая суточная доза может быть распределена между несколькими введениями, то есть введение можно осуществлять два или более раз в сутки для достижения общей суточной дозы. Например, необходимое количество таблеток для обеспечения общей суточной дозы ацетил-лейцина может быть разделено на два приема (например, утром и вечером) или три приема (например, утром, в полдень и вечером). Каждую дозу можно соответственно вводить с пищей или без нее. Например, ацетил-лейцин можно применять примерно за 1 час или примерно 2 часа до еды, например, по меньшей мере примерно за 20 минут, по меньшей мере примерно за 30 минут, по меньшей мере примерно за 40 минут, или по меньшей мере примерно за 1 час до еды, или можно применять примерно через 1 час, примерно через 2 часа или примерно 3 часа после еды, например, выдерживая по меньшей мере примерно 20 минут, по меньшей мере примерно 30 минут, по меньшей мере примерно 1 час, по меньшей мере примерно 1,5 часа, по меньшей мере примерно 2 часа или по меньшей мере примерно 2,5 часа после приема пищи. Например, общую суточную дозу 4,5 г ацетил-DL-лейцина можно применять в виде трех таблеток Танганил® (или эквивалентных им) до, во время, или после завтрака, еще трех таблеток до, во время или после обеда, и еще трех таблеток до, во время или после ужина.

Введение лейцина или ацетил-лейцина в соответствии с настоящим изобретением может быть начато до или после того, как у субъекта обнаружен генетический, биохимический или другой подобный идентифицируемый маркер нейродегенеративного расстройства, такой как, в случае первого, когда есть подозрение на наличие или риск развития у субъекта нейродегенеративного заболевания.

Введение может быть начато во время или близко к тому времени, когда у субъекта обнаружен генетический, биохимический или другой подобный идентифицируемый маркер нейродегенеративного заболевания. Аналогично, введение может быть начато до, во время или близко к тому времени времени, или после того, как субъекту поставлен диагноз нейродегенеративного заболевания, например, до, во время или близко к тому времени, или после того, как у субъекта обнаружен генетический, биохимический или другой подобный идентифицируемый маркер нейродегенеративного заболевания. Введение лейцина или ацетил-лейцина может быть начато, когда субъект является симптоматическим или бессимптомным. В частности, одно из преимуществ лечения лейцином или ацетил-лейцином, согласно настоящему изобретению, заключается в том, что введение может быть начато уже на ранней стадии, после того, как у субъекта обнаруживается генетический и/или биохимический маркер нейродегенеративного заболевания, но до того, как у субъекта проявляются симптомы нейродегенеративного заболевания (иные, чем появление генетического и/или биохимического маркера, то есть у бессимптомного субъекта) или до того, субъект показывает один или несколько симптомов, считающихся признаками заболевания. Лечение может задерживать начало нейродегенеративного заболевания или одного или нескольких симптомов, связанных с нейродегенеративным заболеванием, как описано в настоящей заявке. Лечение также может быть продолжено в течение периода, как описано в настоящей заявке.

Как обсуждалось в настоящей заявке, преимущество лечения лейцином или ацетил-лейцином, согласно настоящему изобретению, заключается в том, что их можно вводить в течение длительного периода времени, например, для задержки или даже регрессии нейродегенеративного заболевания или одного или нескольких симптомов нейродегенеративного заболевания у субъекта по сравнению с типичным прогрессированием заболевания. Продолжительность лечения может составлять, например, примерно семь дней или более, примерно две недели или более, примерно три недели или более, примерно один месяц или более, примерно шесть недель или более, примерно семь недель или более, или примерно два месяца или более. В одном варианте осуществления оно составляет примерно три месяца или более, примерно четыре месяца или более, примерно пять месяцев или более, или примерно шесть месяцев или более. Продолжительность лечения может составлять примерно 1 год или более, примерно 2 года или более, примерно 4 года или более, примерно 5 лет или более, или примерно 10 лет или более. Продолжительность лечения может быть равна продолжительности жизни пациента.

Любые и все комбинации лекарственной формы, количества дозы, схемы дозирования и продолжительности лечения предусматриваются и охватываются изобретением. В одном варианте осуществления доза составляет примерно от 4 г до 10 г в сутки, при применении посредством одного, двух или трех введений в сутки, при продолжительности лечения примерно два месяца или более. В другом варианте осуществления доза составляет более 4 г, но не более 5 г в сутки, при применении посредством одного, двух или трех введений в сутки, при продолжительности лечения примерно шесть месяцев или более. Дозированная форма может представлять собой твердую пероральную лекарственную форму, в частности таблетки.

Фармацевтические композиции, описанные в настоящей заявке, могут быть использованы в качестве монотерапии (например, с использованием одного активного агента) для лечения нейродегенеративного заболевания у субъекта. Альтернативно, фармацевтические композиции могут быть использованы в качестве дополнения или в сочетании с другими известными способами лечения, например, для лечения нейродегенеративного заболевания у субъекта.

Нейродегенеративное заболевание может, но не обязательно, быть связано с лизосомальной дисфункцией (например, дефектом лизосомального накопления). Нейродегенеративные заболевания, согласно настоящему изобретению, не связанные с лизосомальной дисфункцией, включают синдром беспокойных ног (СБН), болезнь Александера, болезнь Альпера, церебральный паралич, синдром Коккейна, кортикобазальную дегенерацию, ВИЧ-ассоциированную деменцию, болезнь Кеннеди, нейроборрелиоз, первичный латеральный склероз, болезнь Рефсума, болезнь Шильдера, подострую комбинированную дегенерацию спинного мозга, вторичную по отношению к пернициозной анемии, наследственную моторную и сенсорную нейропатию с проксимальным доминированием, синдром шатающегося ежа (WHS), прогрессирующую мышечную атрофию (мышечную атрофию Дюшенна-Арана), прогрессирующий бульбарный паралич, псевдобульбарный паралич, ВИЧ-ассоциированные нейрокогнитивные расстройства (HAND), сосудистый паркинсонизм, паркинсонизм нижней части тела, мозжечковый бьющий вниз нистагм, и мозжечковую атаксию, которая включает спиноцеребеллярную атаксию (SCA) 4, спиноцеребеллярную атаксию (5) (атаксию Линкольна), спиноцеребеллярную атаксию (SCA) 8, спиноцеребеллярную атаксию (SCA) 10, спиноцеребеллярную атаксию (SCA) 11, спиноцеребеллярную атаксию (SCA) 12, спиноцеребеллярную атаксию (SCA) 13, спиноцеребеллярную атаксию (SCA) 14, спиноцеребеллярную атаксию (SCA) 15/16, спиноцеребеллярную атаксию (SCA) 18 (сенсорную/моторную нейропатию с атаксией), спиноцеребеллярную атаксию (SCA) 19/22, спиноцеребеллярную атаксию (SCA) 20, спиноцеребеллярную атаксию (SCA) 21, спиноцеребеллярную атаксию (SCA) 23, спиноцеребеллярную атаксию (SCA) 25, спиноцеребеллярную атаксию (SCA) 26, спиноцеребеллярную атаксию (SCA) 27, спиноцеребеллярную атаксию (SCA) 29, спиноцеребеллярную атаксию (SCA) 30, спиноцеребеллярную атаксию (SCA) 31, спиноцеребеллярную атаксию (SCA) 32, спиноцеребеллярную атаксию (SCA) 35, спиноцеребеллярную атаксию (SCA) 36, эпизодическую атаксию (ЕА) 1, эпизодическую атаксию (ЕА) 2, эпизодическую атаксию (ЕА) 3, эпизодическую атаксию (ЕА) 4, эпизодическую атаксию (ЕА) 5, эпизодическую атаксию (ЕА) 6, эпизодическую атаксию (ЕА) 7, спиноцеребеллярную атаксию (SCA) 28, спиноцеребеллярную атаксию (SCA) 24 (спиноцеребеллярную атаксию аутосомно-рецессивного типа 4 (SCAR4); спиноцеребеллярную атаксию с саккадическими нарушениями, спинную сухотку, атаксию с окуломоторной апраксией типа 1 (AOA1), атаксию с окуломоторной апраксией типа 2 (AOA2), атаксию с окуломоторной апраксией 4 (AOA4), спиноцеребеллярную атаксию аутосомно-рецессивного типа 10 (SCAR 10), синдром митохондриальной рецессивной атаксии (MIRAS), синдром миоклонической эпилепсии, миопатии, сенсорной атаксии (MEMSA), сенсорную атаксию с нейропатией, дизартрией и офтальмопарезом (SANDO), инфантильную форму спиноцеребеллярной атаксии, наследственную спастическую параплегию 7 (ген HSP SPG7), синдром митохондриальной миопатии, энцефалопатии с лактоацидозом и инсультоподобными эпизодами (MELAS), миоклоническую эпилепсию с разорванными красными волокнами (MERRF), нейрогенную мышечную слабость, атаксию и пигментный ретинит (NARP), синдром Кирнса-Сейра (KSS), синдром тремора/атаксии, ассоциированный с ломкой Х-хромосомой (FXTAS), синдром Артса, X-сцепленную спиноцеребеллярную атаксию 1, Х-сцепленную спиноцеребеллярную атаксию 2, Х-сцепленную спиноцеребеллярную атаксию 3, Х-сцепленную спиноцеребеллярную атаксию 4 или Х-сцепленную спиноцеребеллярную атаксию 5, Х-сцепленную умственную отсталость типа синдрома Кристиансона, X-сцепленную сидеробластную анемию, идиопатическую позднюю мозжечковую атаксию, спорадическую атаксию неизвестной этиологии у взрослых (SAOA), и синдром церебеллярной атаксии, невропатии и вестибулярной арефлексии (CANVAS), но не ограничиваются ими. В одном варианте осуществления нейродегенеративное заболевание, не связанное с лизосомальной дисфункцией, представляет собой кортикобазальную дегенерацию, SCA 28 и AOA4.

Как упомянуто выше, многие нейродегенеративные заболевания связаны с лизосомальной дисфункцией, которая включает как нейродегенеративные лизосомальные болезни накопления (ЛБН), так и многие другие нейродегенеративные заболевания, где предполагались связи с лизосомальными дефектами. См., например, Boman et al., Journal of Parkinson’s Disease, vol. 6, no. 2, pp. 307-315 (May 2016); Makioka et al., Neuroreport, 23(5):270-276 (March 2012); Orr et al., Alzheimer’s Research & Therapy, 5:53 (Oct. 2013); Barlow et al., Proc. Nat’l. Acad. Sci. USA, 18;97(2):871-6 (2000).

В одном варианте осуществления нейродегенеративное заболевание связано с лизосомальной дисфункцией (например, лизосомальным дефектом накопления). Нейродегенеративные заболевания, согласно настоящему изобретением, связанные с лизосомальной дисфункцией, включают алкоголизм, болезнь Альцгеймера, боковой амиотрофический склероз (БАС), болезнь Канавана, лобно-височную лобарную дегенерацию, болезнь Хантингтона, деменцию телец Леви, множественную системную атрофию (MSA-P/MSA-C), рассеянный склероз, нарколепсию, болезнь Паркинсона, синдром Смита-Лемли-Опитца (SLOS) (врожденный дефект синтеза холестерина), болезнь Танжера, болезнь Пелицеуса-Мерцбахера, болезнь Пика, лобно-височную деменцию и паркинсонизм, сцепленные с 17-й хромосомой, прионные заболевания, в том числе скрейпи, трансмиссивную энцефалопатию норок, хроническую болезнь истощения, губчатую энцефалопатию крупного рогатого скота, губчатую энцефалопатию кошек, экзотическую энцефалопатию копытных, куру, болезнь Крейцфельдта-Якоба, синдром Герстманна-Штреусслера-Шейнкера, и фатальную семейную бессонницу, прогрессирующий надъядерный паралич, спинальную мышечную атрофию, нейродегенеративные ЛБН и мозжечковую атаксию, включающую спиноцеребеллярную атаксию (SCA) 1, спиноцеребеллярную атаксию (SCA) 2, спиноцеребеллярную атаксию (SCA) 3 (болезнь Мачадо-Джозефа), спиноцеребеллярную атаксию (SCA) 6, спиноцеребеллярную атаксию (SCA) 7, спиноцеребеллярную атаксию (SCA) 17, дентато-рубро-паллидо-льюисову атрофию, аутосомно-рецессивную спастическую атаксию Шарлевуа-Сагенэ (ARSACS), аутосомно-рецессивную мозжечковую атаксию типа 1 (рецессивную атаксию Бёса (RAB), мутация SYNE-1), аутосомно-рецессивную мозжечковую атаксию типа 2 (аутосомно-рецессивную спиноцеребеллярную атаксию 9, SCAR9), атаксию с дефицитом витамина Е (AVED), атаксию-телеангиэктазию (болезнь Луи-Бар), атаксию Фридрейха (FRDA) и атаксию с дефицитом кофермента Q10, но не ограничиваются ими. В одном варианте осуществления нейродегенеративное заболевание, связанное с лизосомальной дисфункцией, выбрано из алкоголизма, болезни Альцгеймера, бокового амиотрофического склероза (БАС), болезни Канавана, лобно-височной лобарной дегенерации, болезни Хантингтона, множественной системной атрофии (MSA-P/MSA-C), рассеянного склероза, нарколепсии, болезни Паркинсона, синдрома Смита-Лемли-Опитца (SLOS) (врожденного дефекта синтеза холестерина), болезни Танжера, болезни Пелицеуса-Мерцбахера, болезни Пика, лобно-височной деменции, лобно-височной деменции с паркинсонизмом, прионных болезней, прогрессирующего надъядерного паралича и спинальной мышечной атрофии. В одном варианте осуществления нейродегенеративное заболевание, связанное с лизосомальной дисфункцией, выбрано из БАС, MSA-P, MSA-C, лобно-височной деменции с паркинсонизмом, прогрессирующего надъядерного паралича, SCA 28, SCA 1 и болезни Альцгеймера.

Нейродегенеративные ЛБН характеризуются накоплением нерасщепленных или частично расщепленных макромолекул, что приводит к клеточной дисфункции и нейродегенерации, которая часто прогрессирует, приводя к инвалидности и/или психическому ухудшению. Они имеют тенденцию проявляться в первые несколько лет жизни, и тяжелое прогрессирование приводит к частой госпитализации. Если их не лечить, пациенты часто умирают в подростковом возрасте. Взрослые пациенты также были описаны. Нейродегенеративные ЛБН, согласно настоящему изобретению, включают нейрональные цероидные липофусцинозы (типы 1-10), болезнь Гоше типа 2/3 (нейронопатическую), болезнь Краббе, множественную сульфатазную недостаточность, муколипидозы, включая муколипидоз I, муколипидоз II и муколипидоз IV, болезнь Ниманна-Пика типа А, болезнь Ниманна-Пика типа В, болезнь Ниманна-Пика типа С, болезнь Помпе с ранним началом, болезнь Помпе с поздним началом, болезнь Тея-Сакса, болезнь Сандхоффа, болезнь Фарбера, галактозиалидоз, болезнь Фабри, болезнь Шиндлера, ганглиозидоз GM1, вариант AB ганглиозидоза GM2, метахроматическую лейкодистрофию (MLD), мукополисахаридозы, включая MPS IH, MPS IS, MPS IH-S, MPS II, MPS IIIA, MPS IIIB, MPS IIIC, MPS IIID и MPS VII, бета-маннозидоз, аспартилглюкозаминурию, фукозидоз, болезнь Салла, болезнь накопления сиаловой кислоты у детей (ISSD) и болезнь Данона, но не ограничиваются ими. В одном варианте осуществления нейродегенеративная ЛБН выбрана из NPC, NPA, муколипидоза II, MPS IIIB, аспартилглюкозаминурии, муколипидоза IIIA, MPS VII, болезни Сандхоффа, болезни Тея-Сакса, варианта AB болезни Тея-Сакса и ганглиозидоза GM1. В одном варианте осуществления нейродегенеративное заболевание не выбрано из нейродегенеративной ЛБН.

В одном варианте осуществления нейродегенеративное заболевание представляет собой болезнь двигательных нейронов. В одном варианте осуществления болезнь двигательных нейронов выбрана из первичного латерального склероза, прогрессирующей мышечной атрофии, прогрессирующего бульбарного паралича, псевдобульбарного паралича, БАС, болезни Альцгеймера, болезни Канавана, лобно-височной лобарной дегенерации, болезни Хантингтона, рассеянного склероза, нарколепсии, болезни Паркинсона, болезни Пелицеуса-Мерцбахера и спинальной мышечной атрофии.

Как обсуждалось выше, в одном варианте осуществления настоящего изобретения лейцин, ацетил-лейцин или их фармацевтически приемлемую соль используют для лечения синдрома беспокойных ног (СБН) у субъекта, страдающего болезнью двигательных нейронов, включая любую из болезней двигательных нейронов, описанных в настоящей заявке, но не ограничиваясь этим.

В одном варианте осуществления нейродегенеративное заболевание представляет собой мозжечковую атаксию. В одном варианте осуществления нейродегенеративное заболевание представляет собой болезнь Ниманна-Пика. В одном варианте осуществления нейродегенеративное заболевание представляет собой болезнь Ниманна-Пика типа С. В одном варианте осуществления нейродегенеративное заболевание представляет собой болезнь Ниманна-Пика типа А. В одном варианте нейродегенеративное заболевание представляет собой паркинсонизм. В одном варианте осуществления нейродегенеративное заболевание представляет собой нейронопатическую болезнь Гоше. В одном варианте осуществления нейродегенеративное заболевание представляет собой болезнь Тея-Сакса. В одном варианте осуществления нейродегенеративное заболевание представляет собой болезнь Сандхоффа. В одном варианте осуществления нейродегенеративное заболевание представляет собой болезнь Фабри. В одном варианте осуществления нейродегенеративное заболевание представляет собой ганглиозидоз GM1. В одном варианте осуществления нейродегенеративное заболевание представляет собой синдром Луи-Бар. В одном варианте осуществления нейродегенеративное заболевание представляет собой болезнь Альцгеймера. В одном варианте осуществления нейродегенеративное заболевание представляет собой болезнь Паркинсона. В одном варианте осуществления нейродегенеративное заболевание представляет собой множественную системную атрофию. В одном варианте осуществления нейродегенеративное заболевание представляет собой множественную системную атрофию типа C (MSA-C). В одном варианте осуществления нейродегенеративное заболевание представляет собой множественную системную атрофию типа P (MSA-P). В одном варианте осуществления нейродегенеративное заболевание представляет собой лобно-височную деменцию. В одном варианте осуществления нейродегенеративное заболевание представляет собой лобно-височную деменцию с паркинсонизмом. В одном варианте осуществления нейродегенеративное заболевание представляет собой синдром Паркинсона нижней части тела. В одном варианте осуществления нейродегенеративное заболевание представляет собой боковой амиотрофический склероз (БАС). В одном варианте осуществления нейродегенеративное заболевание представляет собой кортикобазальный дегенеративный синдром. В одном варианте осуществления нейродегенеративное заболевание представляет собой прогрессирующий надъядерный паралич. В одном варианте осуществления нейродегенеративное заболевание представляет собой мозжечковый бьющий вниз нистагм. В одном варианте осуществления нейродегенеративное заболевание представляет собой SCA 28. В одном варианте осуществления нейродегенеративное заболевание представляет собой атаксию-телеангиэктазию. В одном варианте осуществления нейродегенеративное заболевание представляет собой SCA1. В одном варианте осуществления нейродегенеративное заболевание представляет собой AOA4.

Основные симптомы болезни Паркинсона (БП) включают ригидность, тремор и медленное движение. Есть и другие заболевания, при которых эти симптомы распространены. Эти заболевания и саму БП обозначают общим термином «паркинсонизм». БП можно назвать первичным паркинсонизмом. Другие примеры паркинсонизма включают множественную системную атрофию, прогрессирующий надъядерный паралич, гидроцефалию нормального давления, и сосудистый или атеросклеротический паркинсонизм. Те заболевания, которые могут быть классифицированы как паркинсонизм, но не являются БП, могут также называться «синдромы паркинсонизм-плюс». В отличие от пациентов с БП, люди с синдромом паркинсонизм-плюс не реагируют на L-дофамин. Используемый в настоящей заявке термин «паркинсонизм» может относиться к моторному синдрому, основными симптомами которого являются тремор в покое, скованность, замедление движений и постуральная нестабильность. Паркинсонические синдромы можно разделить на четыре подтипа в зависимости от их происхождения: первичный или идиопатический, вторичный или приобретенный, наследственный паркинсонизм, и синдром паркинсонизм-плюс или множественную системную дегенерацию.

В одном варианте осуществления паркинсонизм представляет собой синдром паркинсонизм-плюс или множественную системную дегенерацию.

В одном варианте осуществления паркинсонизм представляет собой сосудистый (атеросклеротический) паркинсонизм, паркинсонизм нижней части тела, множественную системную атрофию с преобладающим паркинсонизмом (MSA-P), множественную системную атрофию с мозжечковыми признаками (MSA-C; спорадическую оливопонтоцеребеллярную атрофию (OPCA)), синдром Шая-Дрейджера, прогрессирующий супрануклеарный паралич (синдром Стила-Ричардсона-Ольшевского), деменцию телец Леви, болезнь Пика, или лобно-височную деменцию и паркинсонизм, связанные с хромосомой 17.

Как обсуждалось выше, в одном варианте осуществления настоящего изобретения лейцин, ацетил-лейцин или их фармацевтически приемлемую соль используют для лечения синдрома беспокойных ног (СБН) у субъекта, который имеет паркинсонизм, включая любой из паркинсонизмов, описанных в настоящей заявке, но не ограничиваясь этим.

Болезни Ниманна-Пика представляют собой гетерогенную группу аутосомно-рецессивных ЛБН. Общие клеточные особенности включают аномальное хранение сфингомиелина (СМ) в мононуклеарных фагоцитирующих клетках и тканях паренхимы, а также (гепато)спленомегалию. Среди трех основных подгрупп болезни Ниманна-Пика (A-C), NPC (ранее классифицированная как NPC и NPD и теперь оцениваемая как единое заболевание) классифицируется как фатальная нейровисцеральная ЛБН, вызванная накоплением неэтерифицированного холестерина в поздних эндосомных/лизосомальных компартментах, индуцированным аномальным внутриклеточным транспортом холестерина. Вне ЦНС клеточные характеристики NPC включают аномальное накопление неэтерифицированного холестерина и других липидов (например, GSL) в поздних компартментах эндосом/лизосом. И наоборот, нет никакого повышения уровня холестерина в ЦНС (хотя он имеет измененное распределение), но есть высоко повышенные уровни GSL. Прогрессирующая нейродегенерация, в частности, характеризуется последовательной дегенерацией ГАМК-эргических нейронов Пуркинье в мозжечке, которая параллельна возникновению и прогрессированию мозжечковой атаксии, и другим аспектам неврологических дисфункций, наблюдаемых в течение NPC. Генетические исследования показали, что болезнь NPC вызывается мутациями в генах Npc1 или Npc2. Точная механистическая связь между этими двумя генами остается неизвестной, а функциональная роль этих белков остается загадочной. NPC1 кодирует трансмембранный белок пограничной мембраны поздней эндосомы/лизосомы, тогда как NPC2 представляет собой белок лизосомы, связывающий растворимый холестерин. Когда NPC1 инактивируется, сфингозин является первым липидом, который должен быть сохранен, подтверждая, что NPC1 играет роль в транспорте сфингозина из лизосомы, где он обычно генерируется как часть катаболизма сфинголипидов. Повышенный сфингозин, в свою очередь, вызывает дефект проникновения кальция в кислотные запасы, что приводит к значительному снижению высвобождения кальция из этого компартмента. Это в свою очередь предотвращает позднее слияние эндосомы с лизосомой, которое является кальций-зависимым процессом, и вызывает вторичное накопление липидов (холестерина, сфингомиелина и гликосфинголипидов), которые передаются через поздний эндоцитарный путь. Другие вторичные последствия ингибирования функции NPC1 включают дефектный эндоцитоз и неспособность к очистке аутофагических вакуолей. Было показано, что клеточный путь NPC1/NPC2 направляется патогенными микобактериями для стимулирования их выживания в поздних эндосомах.

Мышиная модель NPC имеет ряд патологических признаков, например, болезни Альцгеймера (БА). Ранее сообщалось, что у мышей NPC повышены уровни конъюгата ассоциированного с микротрубочками белка 1A/1B - легкой цепи-3 - фосфатидилэтаноламина (LC3-II). LC3-II является маркером образования аутофагосом, и повышенные уровни LC3-II могут отражать нарушение клиренса аутофагических вакуолей. Аутофагосомы образуются, но не очищаются. Аутофагия нарушена при БА, а в мозге больных с БА наблюдается повышенный уровень LC3-II. Кроме того, белок-предшественник амилоида (APP) является молекулой-предшественником, протеолиз которой генерирует бета-амилоид (Aβ). Бляшки Aβ являются отличительной чертой головного мозга при БА и, как полагают, являются причинным фактором заболевания. С-концевые фрагменты белка-предшественника амилоида (APP-CTF), которые являются промежуточным звеном в протеолизе APP в Aβ, накапливаются в мозге при БА и также постепенно накапливаются в мозге мышей с NPC1.

Болезнь Тея-Сакса является фатальным наследственным нарушением липидного обмена, особенно в ткани ЦНС, из-за дефицита изозима А β-гексозаминидазы. Мутации в гене HEXA, который кодирует α-субъединицу β-гексозаминидазы, вызывают дефицит изозима A. Болезнь Тея-Сакса является прототипом группы заболеваний, ганглиозидозов GM2, характеризующихся дефектом деградации ганглиозида GM2. Ганглиозид GM2 (моносиалилированный ганглиозид 2) накапливается в нейронах уже у плода.

Болезнь Сандхоффа возникает в результате дефицита как А, так и В (основных) изоферментов β-гексозаминидазы. Мутации в гене HEXB, который кодирует β-субъединицу β-гексозаминидазы, вызывают дефицит изозима B.

Ганглиозидоз GM1 вызван дефицитом β-галактозидазы, что приводит к лизосомальному хранению ганглиозида GM1 (моносиалилированного ганглиозида 1).

Болезнь Фабри вызвана дефицитом α-галактозидазы, что приводит к лизосомальному хранению церамида тригексозида.

В одном варианте осуществления нейродегенеративное заболевание не является мозжечковой атаксией. В одном варианте осуществления нейродегенеративное заболевание не является болезнью Ниманна-Пика. В одном варианте осуществления нейродегенеративное заболевание не является болезнью Ниманна-Пика типа C. В одном варианте осуществления нейродегенеративное заболевание не является мозжечковой атаксией или болезнью Ниманна-Пика (например, болезнью Ниманна-Пика типа С).

В одном варианте осуществления лейцин, ацетил-лейцин или их фармацевтически приемлемую соль применяют для лечения потери массы тела, ухудшения походки и/или ухудшения двигательной функции, связанного с болезнью Ниманна-Пика (например, Ниманна-Пика типа С или А) или муколипидозом типа II. Например, лейцин, ацетил-лейцин или их фармацевтически приемлемая соль могут задерживать начало, уменьшать тяжесть, или устранять или задерживать прогрессирование, или вызывать регрессию потери массы тела, ухудшения походки и/или ухудшения двигательной функции, связанного с болезнью Ниманна-Пика (например, Ниманна-Пика типа С или А) или муколипидозом типа II. В одном варианте осуществления потеря массы тела, ухудшение походки и/или ухудшение двигательной функции связаны с болезнью Ниманна-Пика типа A или муколипидозом типа II.

В одном варианте осуществления лейцин, ацетил-лейцин или их фармацевтически приемлемая соль лечит ухудшение походки, ухудшение двигательной функции и/или снижение подвижности, связанное с болезнью Сандхоффа. Например, лейцин, ацетил-лейцин или их фармацевтически приемлемая соль могут задерживать начало, уменьшать тяжесть, или устранять или задерживать прогрессирование, или вызывать регрессию ухудшения походки, ухудшения двигательной функции и/или снижения подвижности, связанного с болезнью Сандхоффа.

В одном варианте осуществления лейцин, ацетил-лейцин или их фармацевтически приемлемая соль лечит сниженную координацию, тремор, сниженную подвижность, когнитивные нарушения и/или ухудшение походки, связанные с болезнью Тея-Сакса. Например, лейцин, ацетил-лейцин или их фармацевтически приемлемая соль могут задерживать начало, снижать тяжесть, или устранять или задерживать прогрессирование, или вызывать регрессию сниженной координации, тремора, сниженной подвижности, когнитивных нарушений и/или ухудшения походки, связанного с болезнью Тея-Сакса.

В одном варианте осуществления лейцин, ацетил-лейцин или их фармацевтически приемлемая соль лечит ухудшение речи (например, беглости речи и/или модуляции голоса), ухудшение походки, снижение подвижности, снижение функций глотания и/или парез, связанный с боковым амиотрофическим склерозом (БАС). Например, лейцин, ацетил-лейцин или их фармацевтически приемлемая соль могут задерживать начало, снижать тяжесть, или устранять или задерживать прогрессирование, или вызывать регрессию ухудшения речи (например, беглости речи и/или модуляции голоса), ухудшения походки, снижения подвижности, снижения функций глотания и/или пареза, связанного с БАС. В другом варианте осуществления лейцин, ацетил-лейцин или их фармацевтически приемлемая соль лечит пониженное качество сна, связанное с БАС. Например, лейцин, ацетил-лейцин или их фармацевтически приемлемая соль могут задерживать начало, снижать тяжесть, или устранять или задерживать прогрессирование, или вызывать регрессию снижения качества сна, связанного с БАС.

В одном варианте осуществления лейцин, ацетил-лейцин или их фармацевтически приемлемая соль лечит ухудшение речи, ухудшение походки и/или повышенную склонность к падениям, связанным с множественной системной атрофией мозжечкового типа (MSA-C). Например, лейцин, ацетил-лейцин или их фармацевтически приемлемая соль могут задерживать начало, уменьшать тяжесть, или устранять или задерживать прогрессирование, или вызывать регрессию ухудшения речи, ухудшения походки и/или повышенной склонности к падениям, связанным с MSA-С.

В одном варианте осуществления лейцин, ацетил-лейцин или их фармацевтически приемлемая соль лечит ухудшение походки, повышенную склонность к падению и/или ухудшение речи, связанное с лобно-височной деменцией с паркинсонизмом. Например, лейцин, ацетил-лейцин или их фармацевтически приемлемая соль могут задерживать начало, уменьшать тяжесть, или устранять или задерживать прогрессирование, или вызывать регрессию ухудшения мышц, повышенной склонности к падению и/или ухудшения речи, связанных с лобно-височной деменцией с паркинсонизмом.

В одном варианте осуществления лейцин, ацетил-лейцин или их фармацевтически приемлемая соль лечит повышенную склонность к падению и/или ухудшение походки, связанные с синдромом кортикобазальной дегенерации. Например, лейцин, ацетил-лейцин или их фармацевтически приемлемая соль позволяет задержать начало, уменьшать тяжесть или устранять, или задерживать прогрессирование, или вызвать регрессию повышенной склонности к падению и/или ухудшение походки, связанных с синдромом кортикобазальной дегенерации.

В одном варианте осуществления лейцин, ацетил-лейцин или их фармацевтически приемлемая соль лечит ухудшение походки, связанное с прогрессирующим надъядерным параличом. Например, лейцин, ацетил-лейцин или их фармацевтически приемлемая соль могут задерживать начало, снижать тяжесть или устранять, или задерживать прогрессирование, или вызывать регрессию ухудшения походки, связанного с прогрессирующим надъядерным параличом.

В одном варианте осуществления лейцин, ацетил-лейцин или их фармацевтически приемлемая соль лечит осциллопсию, ухудшение пространственной ориентации, ухудшение остроты зрения и/или увеличение осаночного колебания, связанного с мозжечковым бьющим вниз нистагмом. Например, лейцин, ацетил-лейцин или их фармацевтически приемлемая соль могут задерживать начало, уменьшать тяжесть или устранять, или задерживать прогрессирование, или вызывать регрессию осциллопсии, ухудшения пространственной ориентации, ухудшения остроты зрения и/или увеличения осаночного колебания, связанного с мозжечковым бьющим вниз нистагмом.

Также предложен способ лечения нейродегенеративного заболевания или одного или нескольких симптомов нейродегенеративного заболевания у субъекта, нуждающегося в этом, причем способ включает введение терапевтически эффективного количества лейцина, ацетил-лейцина или их фармацевтически приемлемой соли субъекту.

«Терапевтически эффективное количество» агента представляет собой любое количество, которое при введении субъекту обеспечивает количество агента, которое требуется для достижения необходимого эффекта, который для настоящего изобретения может быть терапевтическим и/или профилактическим. Доза может быть определена в соответствии с различными параметрами, такими как конкретная форма используемого лейцина или ацетил-лейцина; возраст, масса тела и состояние пациента, подлежащего лечению; тип заболевания; способ применения; и необходимый режим. Врач сможет определить необходимый путь введения и дозировку для любого конкретного пациента. Например, суточная доза может составлять примерно от 10 до 225 мг/кг, примерно от 10 до 150 мг/кг или примерно от 10 до 100 мг/кг массы тела.

Также раскрыт набор для лечения нейродегенеративного заболевания у субъекта, включающий средства для диагностики или прогнозирования заболевания/расстройства и лейцин, ацетил-лейцин или их фармацевтически приемлемую соль.

Средства для диагностики или прогнозирования нейродегенеративного заболевания могут включать специфический связывающий агент, зонд, праймер, пару или комбинацию праймеров, фермент или антитело, включая фрагмент антитела, который позволяет обнаруживать или способствовать обнаружению нейродегенеративного заболевания, как определено в настоящей заявке. Набор может содержать LysoTracker®, который является флуоресцентным маркером и коммерчески доступен как от Invitrogen, так и от Lonza. LysoTracker® может быть синего, сине-белого, желтого, зеленого или красного цвета.

Набор также включает лейцин, ацетил-лейцин или их фармацевтически приемлемую соль, как определено в настоящей заявке. Набор может дополнительно содержать буферы или водные растворы. Набор может дополнительно содержать инструкции по применению лейцина, ацетил-лейцина или их фармацевтически приемлемой соли в способе по изобретению.

В дополнительном варианте осуществления раскрыт лейцин, ацетил-лейцин или их фармацевтически приемлемая соль для использования в способе обеспечения нейропротекции у субъекта, нуждающегося в этом (например, у субъекта, у которого есть подозрение на наличие или риск наличия нейродегенеративного заболевания).

«Нейропротекция» и подобные выражения, как они используются в настоящей заявке, относятся к профилактике, замедлению прогрессирования и/или регрессии нейродегенерации, включая прогрессирующую потерю нейрональной структуры, прогрессирующую потерю нейрональной функции и/или прогрессирующую гибель нейронов, но не ограничиваясь этим. Обеспечение нейропротекции может привести к задержке наступления нейродегенеративного заболевания или одного или нескольких симптомов нейродегенеративного заболевания, которые в противном случае могли бы проявиться в соответствии с типичным прогрессированием заболевания; к уменьшению тяжести нейродегенеративного заболевания или уменьшению тяжести или устранению одного или нескольких существующих симптомов, связанных с нейродегенеративным заболеванием; к задержке прогрессирования нейродегенеративного заболевания или одного или нескольких симптомов нейродегенеративного заболевания с течением времени по сравнению с типичным прогрессированием заболевания; и/или к регрессии нейродегенеративного заболевания или одного или нескольких симптомов нейродегенеративного заболевания в течение времени. Время, в течение которого обеспечивается нейропротекция, может совпадать с продолжительностью лечения, как описано в настоящей заявке. Лечение может обеспечить нейропротекцию в течение, например, примерно семи дней или более, примерно двух недель или более, примерно трех недель или более, примерно одного месяца или более, примерно шести недель или более, примерно семи недель или более, или примерно двух месяцев или более. Лечение может обеспечить нейропротекцию в течение, например, приблизительно трех месяцев или более, приблизительно четырех месяцев или более, приблизительно пяти месяцев или более, или приблизительно шести месяцев или более. Лечение может обеспечивать нейропротекцию в течение, например, приблизительно 1 года или более, примерно 2 лет или более, примерно 3 лет или более, примерно 4 лет или более, примерно 5 лет или более, или примерно 10 лет или более. Лечение может обеспечить нейропротекцию в течение всей жизни пациента.

В другом варианте осуществления способ обеспечения нейропротекции у субъекта, нуждающегося в этом (например, у субъекта с подозрением на нейродегенеративное заболевание или подверженного риску его развития), включает введение терапевтически эффективного количества лейцина, ацетил-лейцина или их фармацевтически приемлемой соли этому субъекту.

Также раскрыт набор для обеспечения нейропротекции у субъекта, нуждающегося в этом (например, субъекта, имеющего подозрение на нейродегенеративное заболевание или подверженного риску его развития), содержащий средства для диагностики или прогнозирования заболевания/расстройства, и лейцин ацетил-лейцин или его фармацевтически приемлемую соль.

Настоящее изобретение дополнительно включает применение лейцина, ацетил-лейцина или их фармацевтически приемлемой соли в качестве нейропротекторного агента у субъекта, нуждающегося в этом (например, у субъекта, имеющего подозрение на наличие или подверженного риску нейродегенеративного заболевания).

Все признаки, описанные в данном документе (включая прилагаемую формулу изобретения, реферат и чертежи) и/или все этапы любого раскрытого таким образом способа, могут быть объединены с любым из вышеуказанных аспектов в любой комбинации, за исключением комбинаций, где по меньшей мере некоторые из таких признаков и/или этапов являются взаимоисключающими.

Примеры

Далее изобретение будет объяснено более подробно в следующих примерах, которые демонстрируют полезность лейцина и ацетил-лейцина для лечения нейродегенеративного заболевания у субъекта и обеспечения нейропротекции у указанного субъекта.

Пример 1

Испытания на мышах in vivo - Методы

Мышиная модель

В этом исследовании использовали аутентичную мышиную модель NPC, мышей Npc1-/- (BALB/cNctr-Npc1m1N/J), которые не имеют белка NPC1 и проявляют все клинические признаки заболевания (Loftus, 1997).

Этот мутантный штамм возник спонтанно и имеет продолжительность жизни в диапазоне 10-14 недель и, следовательно, имеет течение более острое течение болезни, чем у подавляющего большинства пациентов. Мутантных мышей успешно использовали не только для определения онтогенеза заболевания и лежащих в его основе патогенных механизмов, но и для оценки экспериментальной терапии. Анализы с использованием этих мышей были предприняты на уровне всего организма, на клеточном и молекулярном уровнях (Baudry, 2003; Smith, 2009; Cologna, 2014; Cologna, 2012). Это наиболее интенсивно изучаемая животная модель NPC.

До 4-5-недельного возраста у мышей Npc1-/- не было заметных поведенческих признаков заболевания, которые отличали бы их от однопометных особей дикого типа. Первые признаки поведенческого дефицита, такие как тремор и атаксическая походка, появляются к 5-6 неделям; к 7-8 неделям дефекты координации движений становятся более явными, а к 9-10 неделям атаксия усиливается и сопровождается повышенной потерей массы тела и плохим состоянием шерсти, поскольку прием еды и питье затрудняются (применяют гуманную конечную точку) (Smith, 2009).

Однопометники дикого типа (Npc1+/+) были использованы в качестве контроля.

Протокол лечения

В группе мышей Npc1-/- и группе мышей Npc1+/+ применяли 0,1 г/кг ацетил-DL-лейцина, смешанного с кормом мышей, после отъема (возраст трех недель). Отдельные группы мышей Npc1-/- и Npc1+/+ не получали лечения в качестве контроля.

Состояние шерсти

Состояние шерсти мышей Npc1-/- с лечением и без лечения ацетил-DL-лейцином сравнивали путем простого наблюдения за мышами в возрасте девяти недель.

Данные по массе тела

Животных взвешивали два раза в неделю. Значения массы тела усредняли (определяли средние значения) для всех мышей в каждой группе, и сравнивали.

Анализ походки

Анализ походки проводили на мышах в возрасте восьми недель с использованием системы CatWalk® 15.0 в соответствии с инструкциями производителя (Noldus, Ноттингем, Великобритания). Пять сеансов испытания регистрировали на одно животное.

Параметры, оцениваемые с помощью CatWalk®:

1. Среднее значение стойки: средняя продолжительность (с) контакта лап со стеклянной пластиной;

2. Цикл шага: продолжительность (с) между двумя последовательными контактами одной и той же лапы;

3. Рабочий цикл: процент времени, когда лапа находится в контакте с пластиной, по отношению к времени для завершения цикла шага;

4. Последовательность шагов (AB): процент времени, потраченного на ходьбу в чередующемся порядке ЛП-ПЗ-ПП-ЛЗ (ЛП - левая передняя лапа; ПЗ - правая задняя лапа; ПП - правая передняя лапа; ЛЗ - левая задняя лапа);

5. Частота шагов: шаг в секундах в испытании;

6. Диагональная опора: процент времени с одновременным контактом диагональных лап со стеклянной пластиной (ПП & ЛЗ или ПЗ & ЛП).

Анализ двигательных функций

Анализ двигательной функции проводили на мышах в возрасте восьми и девяти недель с использованием монитора активности в открытом поле в соответствии с инструкциями производителя (Linton Instruments, Amlogger Software). Каждую мышь помещали в пластиковую клетку с подложкой и анализировали в течение пяти минут. Число эпизодов, когда животные вставали на задние лапы, подсчитывали вручную.

Измеренные параметры двигательной функции:

1. Вертикальная стойка с удержанием передних лап на весу: стойка мыши на задних лапах без поддержки;

2. Вертикальная стойка: стойка мышей на задних лапах с опорой и без опоры на стенки клетки;

3. Активность: регулярные движения животного, включая горизонтальную двигательную активность;

4. Счет движений вперед-назад (FR): движение животного от передней к задней части клетки;

5. Активное время: продолжительность (с/мин) активности независимо от движения;

6. Мобильное время: продолжительность (с/мин) подвижности;

7. Время стойки на задних лапах: продолжительность любой стойки на задних лапах.

Результаты

Состояние кожи

Фигура 1. B показывает однопометных крыс Npc1-/-, совпадающих по возрасту, не получавших лечения. У мышей Npc1-/- наблюдалось плохое состояние шерсти в возрасте девяти недель, поскольку прием воды и корма становился затруднительным (см. Фигуру 1B).

В отличие от этого, на Фигуре 1А показана мышь Npc1 -/-, получавшая ацетил-DL-лейцин после отъема. У мышей Npc1-/-, получавших лечение ацетил-DL-лейцином, была гладкая и блестящая шерсть, подобная шерсти у однопометных животных дикого типа (Npc1+/+) (см. Фигуру 1А).

Данные по массе тела

Как можно видеть на Фигуре 2А, мыши дикого типа (Npc1+/+) постепенно прибавляют в весе на протяжении всего исследования, то есть в возрасте от трех недель до 10 недель. Кроме того, на Фигуре 2А показана средняя масса тела на группу мышей в каждый момент времени (Npc1-/- без лечения, n = 1; Npc1-/-, ацетил-DL-лейцин 0,1 г/ кг, n = 3; Npc1+/+ без лечения, n = 3; Npc1+/+, ацетил-DL-лейцин 0,1 г/ кг, n = 2).

Лечение ацетил-DL-лейцином не оказывало существенного влияния на увеличение массы тела.

Мыши Npc1-/- первоначально прибавляют в весе, в основном так же, как и контроли Npc1+/+. Однако мыши Npc1-/- затем начали терять вес с шести недель. В конце исследования (возраст 10 недель), мыши весили почти так же мало, как и в возрасте четырех недель.

Лечение ацетил-DL-лейцином замедляло эти симптомы потери массы тела на две недели по сравнению с группой, не получавшей лечение.

Сравнение изменений массы тела у мышей Npc1-/- с лечением и без лечения ацетил-DL-лейцином показано на Фигуре 2B. В частности, на Фигуре 2В показано изменение массы тела (%) на группу мышей в каждый момент времени только для мышей Npc1-/-. Благоприятный эффект от лечения ацетил-DL-лейцином при задержке потери массы тела ясно виден из этой фигуры.

Анализ походки

Результаты анализа походки показаны на Фигуре 3. Диагональная опора, частота и последовательность шагов показаны на Фигурах 3А-3С, соответственно. На Фигурах 3D и 3E показаны данные для передней лапы (ПЛ) (среднее значение для стойки и цикл шага на Фигуре 3D; рабочий цикл на Фигуре 3E). На Фигурах 3F и 3G показаны данные для задней лапы (ЗЛ) (среднее значение для стойки и цикл шага на Фигуре 3F; рабочий цикл на Фигуре 3G). Данные представлены как среднее значение ± SEM. n = 3 для Npc1+/+ без лечения, n = 2 для Npc1 +/+ с лечением, n = 1 для Npc1-/- без лечения (следовательно, статистический анализ не проводился), n = 3 для Npc1-/- с лечением.

Первый столбец на каждом графике показывает свойства походки мышей дикого типа (Npc1+/+).

Второй столбец на каждом графике показывает свойства походки мышей дикого типа (Npc1+/+), получавших ацетил-DL-лейцин. Не было значительного различия в свойствах походки между этими мышами и их не получавшими лечение однопометниками.

Третий столбец на каждом графике показывает свойства походки мыши Npc1-/-. В целом, эта мышь показала плохую походку по сравнению с мышами Npc1+/+. У мыши занимала очень мало времени диагональная опора, если она вообще отмечалась (Фигура 3А) или последовательность шагов (Фигура 3С), и функция задней лапы в среднем значении стойки (Фигура 3F) и в рабочем цикле (рис. 3G) также была сильно затруднена.

Четвертый столбец на каждом графике показывает свойства походки у мышей Npc1-/-, получавших ацетил-DL-лейцин. Эти мыши продемонстрировали значительно улучшенную походку по сравнению с их не получавшими лечения однопометниками. Фактически, они показали сходные свойства походки с мышами Npc1+/+.

Анализ двигательной функции

Анализ в возрасте восьми недель не выявил различий в свойствах двигательной функции у мышей Npc1-/- и мышей дикого типа (Npc1+/+) (данные не представлены).

Однако в возрасте девяти недель дефекты координации движений стали очевидными.

Результаты анализа двигательной функции через девять недель показаны на Фигуре 4. Вертикальная стойка с удержанием передних лап на весу, активность, вертикальная стойка и частота движений вперед-назад (FR) показаны на Фигурах 4A - 4D, соответственно. Активное время, мобильное время, время стойки на задних лапах и общее число вставаний на задние лапы показаны на Фигурах 4E-4H, соответственно. Данные представлены как среднее значение ± SEM. n = 3 для Npc1+/+ без лечения, n = 2 для Npc1+/+ с лечением, n = 1 для Npc1-/- без лечения (следовательно, статистический анализ не проводился), n = 3 для Npc1-/- с лечением.

Первый столбец на каждом графике показывает свойства двигательной функции мышей дикого типа (Npc1+/+).

Второй столбец на каждом графике показывает свойства двигательной функции мышей дикого типа (Npc1+/+), получавших ацетил-DL-лейцин. Не было значительного различия в свойствах двигательной функции между этими мышами и их не получавшими лечения однопометниками.

Третий столбец на каждом графике показывает свойства двигательной функции мыши Npc1-/-. В целом эта мышь показала плохую двигательную функцию по сравнению с мышами Npc1+/+. У мыши отмечалась очень малая продолжительность стойки на задних лапах, если вообще отмечалась (панель H), особенно на задних лапах без опоры (панель A).

Четвертый столбец на каждом графике показывает свойства двигательной функции мышей Npc1-/-, получавших ацетил-DL-лейцин. Эти мыши продемонстрировали значительно улучшенную двигательную функцию по сравнению с их не получавшими лечения однопометниками. Фактически, они показали сходные свойства двигательной функции с мышами Npc1+/+.

Продолжительность жизни

Было также отмечено, что лечение мышей Npc1-/- ацетил-DL-лейцином (0,1 г/кг с 3-недельного возраста) связано со статистически значимым увеличением продолжительности жизни (Фигура 5). Эти данные дополнительно указывают на эффект ацетил-лейцина в задержке начала заболевания.

Заключение

В тех случаях, когда у мышей Npc1-/- были заметные признаки заболевания, которое отличало их от однопометных особей дикого типа в возрасте 5-6 недель, однопометные Npc1-/-, получавшие ацетил-DL-лейцин после отъема, не проявляли таких симптомов спустя две или более недели. Лечение мышей Npc1-/- ацетил-DL-лейцином задержало начало и прогрессирование симптомов NPC и продемонстрировало доказательство нейропротекции.

Разумно ожидать, что ацетил-DL-лейцин обеспечивает общую нейропротекцию, что результаты, наблюдаемые для NPC, будут также наблюдаться при других нейродегенеративных расстройствах, и при тех нейродегенеративных расстройствах, которые связаны с дефектами лизосомального накопления.

Пример 2

Методы

Клеточную линию фибробластов от пациента с NPC обрабатывали в течение 3 дней N-ацетил-DL-лейцином (1 мМ), и относительный объем лизосом определяли количественно с помощью LysoTracker, флуоресцентного красителя, который накапливается в кислых органеллах. Повышенная флуоресценция LysoTracker указывает на увеличение размера и/или количества лизосом и является отличительной чертой клеток NPC.

Кроме того, фибробласты, полученные от пациентов с болезнью Ниманна-Пика типа А (NPA), муколипидозом типа II (MLII), мукополисахаридозом типа IIIB (MPS IIIB), аспартилглюкозаминурией, муколипидозом типа IIIA (MLIIIA) и мукополисахаридозом типа VII (MPS VII), обрабатывали ацетил-DL-лейцином (1 мМ) в течение 6 суток, и объем лизосом определяли количественно с помощью LysoTracker.

Результаты

Обработка фибробластов, полученных от пациента NPC с легкой клинической степенью тяжести, 1 мМ N-ацетил-DL-лейцином, была связана со значительным снижением флуоресценции LysoTracker, что свидетельствует о снижении объема лизосом со временем (Фигура 6А). Эти результаты были воспроизведены в фибробластах, полученных от дополнительных пациентов с NPC различной клинической степени тяжести, которые обрабатывали 1 мМ N-ацетил-DL-лейцином в течение 72 часов (Фигура 6B).

В фибробластах, полученных от пациентов с NPA и MLII, MPS IIIB, аспартилглюкозаминурией, MLIIIA и MPS VII, наблюдались повышенные уровни флуоресценции LysoTracker по сравнению с контрольными фибробластами дикого типа от группы, совпадающей по возрасту (Фигуры 6C-6H). Это свидетельствует о расширенной лизосоме, возникающей в результате накопления липидов по сравнению с фибробластами у здоровых людей. Обработка ацетил-лейцином была связана со статистически значимым снижением флуоресценции LysoTracker к контрольному уровню как в фибробластах NPA, так и в фибробластах MLII и MPS IIIB, по сравнению с необработанными фибробластами NPA и MLII, и MPS IIIB, соответственно (фигуры 6C-6E), и была связана с тенденцией к снижению флуоресценции LysoTracker до контрольного уровня в фибробластах от больных с аспартилглюкозаминурией, MLIIIA и MPS VII, по сравнению с необработанными фибробластами от больных с аспартилглюкозаминурией, MLIIIA и MPS VII, соответственно (фигуры 6F-6H). Снижение флуоресценции LysoTracker свидетельствовало об уменьшении лизосомального объема (Фигуры 6C-6H и 6D). Данные, представленные на Фигурах 6А-6D, показывают результаты после 6 дней обработки 1 мМ ацетил-лейцином для каждой клеточной линии, соответственно, с лизосомальным объемом, выраженным в виде кратности изменения относительно необработанных фибробластов дикого типа. Звездочки (*/****) обозначают значения р (<0,05/0,001) по сравнению с фибробластами, не подвергавшимися обработке.

Заключение

Обработка N-ацетил-DL-лейцином была связана с исправлением нарушенного лизосомального хранения путем уменьшения объема лизосом, и, таким образом, ацетил-лейцин непосредственно исправлял фенотип этих лизосомальных нарушений накопления. Эти заболевания представляют разные классы ЛБН, и, таким образом, эти результаты дополнительно подтверждают полезность действия ацетил-лейцина против широкого спектра лизосомальных нарушений накопления.

Пример 3

Болезнь Сандхоффа - это заболевание, которое может быть результатом аутосомно-рецессивных наследственных мутаций в гене HEXB, который кодирует бета-субъединицу бета-гексозаминидазы. В результате этого ганглиозид GM2 не разрушается и накапливается в лизосомах в клетках периферической и центральной нервной системы (ЦНС).

В этом исследовании использовали мышиную модель болезни Сандхоффа, мышей Hexb-/-, как описано в Jeyakumaret al. (Jeyakumar, M. et al. (1999) Proc. Natl. Acad. Sci. USA96: 6388-6393).

Мышей дикого типа (Hexb+/+) использовали в качестве контроля.

Продолжительность жизни

Лечение ацетил-DL-лейцином было связано со статистически значимым увеличением продолжительности жизни мышей с болезнью Сандхоффа (Фигура 7А). На Фигуре 7А мышам, получавшим ацетил-лейцин, вводили 0,1 г/кг ацетил-лейцина с 3-недельного возраста. Звездочки (*) обозначают значение р<0,05 по сравнению с мышами с болезнью Сандхоффа, не получавшими лечения. Данные являются средним значением в группе мышей с n = 6. Без лечения среднее время выживания мышей с болезнью Сандхоффа составляло 112 дней. Лечение ацетил-лейцином (0,1 г/кг массы тела с 3-недельного возраста) увеличило среднюю продолжительность жизни до 120 дней.

Двигательная функция

Лечение мышей с болезнью Сандхоффа ацетил-лейцином приводило к улучшению двигательной функции, о чем свидетельствуют испытания с преодолением планки и анализ цикла шага.

Испытание с преодолением планки

Испытание с преодолением планки - это метод оценки двигательной функции у мышей, в котором мышь находится подвешенной к центру горизонтальной планки за передние конечности. Мышь дикого типа с нормальной двигательной функцией сможет задействовать задние конечности и, таким образом, переместиться на одну из платформ с любого конца планки, завершив при этом испытание.

Не получавшие лечения мыши с болезнью Сандхоффа способны пройти испытание до возраста примерно 11 недель. После этой точки двигательная функция и подвижность/сцепление задних конечностей ухудшаются до такой степени, что мыши не могут завершить испытание, и падают с планки на мягкую поверхность ниже.

Лечение на мышиной модели болезни Сандхоффа ацетил-DL-лейцином (0,1 г/кг массы тела с 3-недельного возраста) было связано с улучшением двигательной функции и подвижности/сцепления задних конечностей, что оценивали с помощью испытания на преодоление планки (Фигура 7B). На фигуре 7В лечение ацетил-лейцином 0,1 г/кг массы тела проводили с 3-недельного возраста. Получавшие лечение ацетил-лейцином мыши с болезнью Сандхоффа сохраняли способность завершать тест до 13-недельного возраста (включительно). Показанные данные представляют собой среднее значение для 6 мышей на группу. Получавшие лечение мыши с болезнью Сандхоффа сохранили способность завершать испытание до возраста 13 недель (включительно).

Цикл шага

Цикл шага - это продолжительность времени при передвижении конечности от момента, когда конечность отрывается от земли, до следующего момента отрыва от земли.

Время цикла шага оценивали в возрасте 12 недель у не получавших лечения и получавших лечение ацетил-лейцином мышей с моделью болезни Сандхоффа. Лечение ацетил-лейцином составило 0,1 г/кг массы тела ацетил-лейцина с 3-недельного возраста.

Лечение мышей с моделью болезни Сандхоффа ацетил-лейцином было связано со значительно более коротким временем цикла шага передних лап (p <0,05 по сравнению с не получавшим лечения мышами с болезнью Сандхоффа), значительно более быстрым временем цикла шага задних лап (p <0,01 по сравнению с не получавшими лечения мышами с болезнью Сандхоффа) и значительно более быстрым средним циклом шага (р <0,001 по сравнению с не получавшими лечения мышами с болезнью Сандхоффа) (Фигура 7С). На Фигуре 7С лечение ацетил-лейцином 0,1 г/кг массы тела проводили с 3-недельного возраста. Цикл шага передних лап относится к передним конечностям мыши, цикл шага задних лап относится к задним конечностям мыши, а средний цикл шага учитывает все конечности мыши. Звездочки (*/**/***) указывают на значения р <0,05/0,01/0,001 по сравнению с не получавшими лечения мышами с болезнью Сандхоффа. Показанные данные означают среднее значение ± стандартное отклонение.

Таким образом, лечение ацетил-лейцином было связано с более быстрым циклом шага на мышиной модели болезни Сандхоффа, что может указывать на улучшение двигательной функции.

Выводы

Эти исследования демонстрируют, что лечение ацетил-лейцином на мышиной модели болезни Сандхоффа может привести к улучшению двигательной функции, что было оценено в двух независимых экспериментах, а также к значительному увеличению продолжительности жизни.

Пример 4

GM2-ганглиозидозы представляют собой группу лизосомальных нарушений накопления, возникающих из-за дефектов активности β-гексозаминидазы. В эту группу входят болезнь Тея-Сакса, болезнь Сандхоффа и вариант АВ болезни Тея-Сакса.

Фибробласты, полученные от пациентов с GM2 (болезнью Тея-Сакса, болезнью Сандхоффа и вариантом AB болезни Тея-Сакса) и здоровых людей из группы сравнения, обрабатывали ацетил-DL-лейцином (1 мМ в течение 6 суток) до экстракции и количественного определения уровней гликосфинголипида (GSL) с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ).

В отсутствие лечения фибробласты, полученные от всех 3 разновидностей ганглиозидоза GM2, продемонстрировали повышенные уровни GSL по сравнению с необработанными контрольными фибрробластами дикого типа. Во всех 3 случаях обработка ацетил-DL-лейцином (1 мМ в течение 6 суток) была связана со снижением запасов GSL. В случае болезни Тея-Сакса это снижение было статистически значимым (р <0,05). В случае болезни Сандхоффа и варианта АВ болезни Тея-Сакса наблюдалась тенденция к снижению уровней GSL, связанная с обработкой. Данные, представленные на Фигурах 8А-8С, показывают результаты обработки для каждой клеточной линии, соответственно, с уровнями GSL, скорректированными на содержание белка и выраженными в виде кратности изменения относительно уровней в необработанных фибробластах дикого типа.

Пример 5

Пациент 1

Пациентом в этом исследовании было 28-летний мужчина, у которого была генетически диагностирована болезнь Тея-Сакса, и у которого наблюдалась дизартрофония, тремор, статическая и динамическая атаксия, парапарез и атрофия мышц. В частности, пациент не мог стоять или ходить, мог делать одиночные шаги с сильной поддержкой и имел отчетливую постуральную нестабильность, нарушение движения глаз, дисфагию и дизартрию, и легкое нарушение когнитивной функции. Первые симптомы наблюдались в возрасте 16 лет.

Перед началом лечения обследование пациента показало значение по Шкале оценки атаксии (SARA) 15,5/40. Кроме того, результаты анализа функционального индекса спиноцеребеллярной атаксии (SCAFI) пациента были следующими:

Средний показатель испытания на ходьбу на 8 метров (8MW): 21,6 с

Тест с доской для вставки 9 штырей для ведущей руки (9HPTD) (правой): 48,3 с

Тест с доской для вставки 9 штырей для не-ведущей руки (9HPTND): 44,9 с

Словесный тест MW PATA: 20

Оценка по Монреальской шкале оценки когнитивных функций (МоСА): 18/30.

Видеозапись пациента также регистрировали для последующего сравнения.

На следующий день после этого обследования пациент начал лечение ацетил-лейцином в дозе 3 г в сутки в течение первой недели, а затем в дозе 5 г в сутки в течение второй недели.

Через один и четыре месяца, соответственно, пациент был повторно обследован при продолжении лечения. Через месяц у пациента улучшилась мелкая моторика и уменьшился тремор рук, например, во время еды или питья. Ходьба заметно не изменилась. Через четыре месяца пациент находился в стабильном состоянии с немного улучшенной когнитивной функцией, но у него было нарушение вертикального положения, походки и мелкой моторики. Результаты испытаний пациента по шкале SARA и по шкале SCAFI показаны ниже по сравнению с исходным уровнем.

Таблица 1. Параметры оценки пациента Базовый уровень Спустя 1 месяц с ацетил-DL-лейцином Спустя 4 месяца с ацетил-DL-лейцином SARA 15,5/40 15,5/40 17/40 8MWT 21,6 с 7 с 25,49 с 9HPTD 48,3 с 45,9 с 48,67 с 9HPTND 44,9 с 40,1 с 47,09 с PATA 20 22 21 MoCA 18/30 21/30 22/30

В целом, у пациента наблюдалось улучшение симптомов после лечения ацетил-лейцином.

Пациент 2

В данном исследовании пациентом была 32-летняя женщина, у которой была генетически диагностирована болезнь Тея-Сакса, и у которой отмечалась статическая и динамическая атаксия, нарушение мелкой моторики, парапарез нижних конечностей и атрофия мышц. В частности, ходьба была невозможна без поддержки, и пациентка страдала дисфагией и нарушением речи, нарушениями движения глаз и легким нарушением когнитивной функции. Первые симптомы наблюдались в возрасте 7 лет.

Перед началом лечения обследование пациентки показало значение по Шкале оценки атаксии (SARA) 10,5/40. Кроме того, результаты анализа функционального индекса спиноцеребеллярной атаксии (SCAFI) пациентки были следующими:

Средний показатель испытания на ходьбу на 8 метров (8MW): 12,5 с

Тест с доской для вставки 9 штырей для ведущей руки (9HPTD) (правой): 21,5 с

Тест с доской для вставки 9 штырей для не-ведущей руки (9HPTND): 35,5 с

Словесный тест MW PATA: 18

Оценка по Монреальской шкале оценки когнитивных функций (МоСА): 21/30.

Видеозапись пациентки также регистрировали для последующего сравнения.

В день осмотра пациентка начала лечение ацетил-лейцином в дозе 3 г в сутки в течение первой недели, а затем в дозе 5 г в сутки в течение второй недели.

Через месяц пациентка была повторно обследована во время продолжения лечения, и у неё было выявлено улучшение дикции, улучшение постуральной стабильности и улучшение когнитивных функций. Вертикальное положение и походка были возможны без поддержки. Показатель SARA пациентки и результаты анализа SCAFI показаны ниже по сравнению с исходным уровнем.

Таблица 2. Оценка параметров пациентки Базовый уровень Спустя 1 месяц с ацетил-DL-лейцином SARA 10,5/40 5/40 8MWT 12,5 с 9,55 с 9HPTD 21,5 с 34,97 с 9HPTND 35,5 с 39,34 с PATA 18 17 MoCA 21/30 25/30

Пациент 3

Пациентом в этом исследовании был 8-летний мальчик, у которого была генетически диагностирована болезнь Тея-Сакса, и у него отмечались эпилептические судороги (тонико-клонические, примерно 10 секунд, самоограничивающиеся) почти каждый день перед сном, нарушение движения глаз, анартрия, выраженные нарушения когнитивной функции и концентрации (неврологическое обследование было невозможно), неспособность стоять или ходить самостоятельно, и существенные ограничения в повседневной деятельности (прием пищи, умывание или одевание были невозможны). Первые симптомы наблюдались в возрасте 9 месяцев.

Перед началом лечения обследование пациента показало значение по Шкале оценки атаксии (SARA) 36/40, значение по mRDS 18/24, по визуальной шкале EQ-5D-5L 50 и 8MWT 18,1 (только при сильной поддержке).

Пациент начал лечение ацетил-лейцином в дозе 1,5 г в сутки в течение первой недели, а затем 3 г в сутки в течение второй недели.

Через месяц пациент был повторно обследован во время продолжения лечения и показал увеличение мелкой моторики (был в состоянии захватывать мелкие предметы), повышенную мотивацию (пытался чаще ходить самостоятельно), улучшение постуральной устойчивости, походки и вертикального положения, и мог говорить отдельными словами. Показатели SARA, mRDS, EQ-5D-5L и 8MWT у пациента приведены ниже по сравнению с исходным уровнем.

Таблица 3. Оценка параметров пациента Базовый уровень Спустя 1 месяц с ацетил-DL-лейцином SARA 36/40 33/40 mRDS 18/24 16/24 Визуальная шкала EQ-5D-5L 50 60 8MWT 18,1 с (только с сильной поддержкой) 11,75 с (с поддержкой за руку)

Пример 6

Пациентом в этом исследовании был 13-летний мальчик, у которого был генетически диагностирован ганглиозидоз GM1, и который не мог самостоятельно стоять или ходить, был очень ограничен в повседневной деятельности (самостоятельный прием пищи, умывание, одевание были невозможны), и имел нарушения движения глаз, анартрию и различные нарушения когнитивной функции и концентрации (неврологическое обследование было невозможно). Первые симптомы наблюдались в возрасте 2 лет.

Перед началом лечения обследование пациента показало значение по Шкале оценки атаксии (SARA) 35/40, по mRDS 15 и по визуальной шкале EQ-5D-5L 50.

Пациент начал лечение ацетил-лейцином в дозе 1,5 г в сутки в течение первой недели, а затем 3 г в сутки в течение второй недели.

Через месяц пациент был повторно обследован при продолжении лечения и показал стабильное общее состояние, улучшенную походку (более плавную) и устойчивую позу в естественном положении. Оценки SARA, mRDS и EQ-5D-5L пациента приведены ниже по сравнению с исходным уровнем.

Таблица 4. Оценка параметров пациента Базовый уровень Спустя 1 месяц с ацетил-DL-лейцином SARA 35/40 35/40 mRDS 15 16 Визуальная шкала EQ-5D-5L 50 60

Пример 7

Пациент 1

Пациентом в данном исследовании был 73-летний мужчина, у которого ранее был диагностирован боковой амиотрофический склероз (БАС).

Симптоматология пациента характеризовалась прогрессирующей дизартрией (носовая и невнятная речь) и слабостью правой мышцы - сгибателя стопы с последующим свисанием стопы в течение предыдущих трех лет.

Клинически у пациента наблюдалось бульбарное нарушение речи, 3/5 парез правых мышц - сгибателей стопы и большого пальца ноги, генерализованная гиперерфлексия и повышение спастического тонуса правой нижней конечности. ЭМГ показала спонтанную активность, а кМРТ не выявила никакой патологии.

Пациент начал лечение препаратом Рилузол во время постановки диагноза БАС. Однако клиническая симптоматика осталась без изменений.

Затем пациент начал лечение ацетил-DL-лейцином в дозе 3 г в сутки в течение первой недели, затем в дозе 5 г в сутки в течение второй недели. Результаты регистрировали посредством видео.

После 15 дней лечения был проведен медицинский осмотр, в ходе которого пациент сообщил о значительном улучшении речи. Пациент мог говорить более свободно и мог лучше модулировать свой голос по сравнению состоянием до приема лекарства (что было подтверждено видео).

Еще через 20 дней было проведено дополнительное медицинское обследование, в ходе которого пациент сообщил о дальнейшем улучшении речи. Кроме того, пациент сообщил об улучшении походки. Парез правой мышцы - сгибателя стопы и, следовательно, свисание стопы значительно уменьшилось и было клинически едва обнаружимо. Кроме того, пациент сообщил об улучшении сна: гораздо быстрее засыпал, дольше спал и чувствовал себя явно более отдохнувшим по утрам.

Пациент продолжал лечение в течение еще приблизительно 30 дней. Примерно через 7 дней после того, как пациент прекратил лечение, было проведено медицинское обследование, где пациент сообщил об отсутствии дальнейшего субъективного улучшения речи и пареза правой мышцы - сгибателя стопы. Сон также ухудшился. Примерно через 1-2 недели после прекращения лечения ацетил-лейцином пациент сообщил об ухудшении речи. В то время пациент возобновил лечение и примерно через два месяца сообщил о стабильной симптоматике. По сравнению с тем временем, когда впервые началось лечение ацетил-лейцином, можно было наблюдать небольшое ухудшение речи.

Поскольку у пациента не наблюдалось какого-либо улучшения речи, пациент попросил прекратить прием лекарств. Примерно через 2-3 недели пациент снова сообщил об ухудшении речи после прекращения лечения ацетил-DL-лейцином. Пациент возобновил лечение и сообщил об улучшении симптоматики, в частности речи.

В целом, у пациента наблюдалось улучшение симптомов после лечения ацетил-лейцином.

Пациент 2

Пациентом в этом исследовании был мужчина в возрасте 74 лет, у которого ранее был диагностирован БАС.

Симптоматология пациента характеризовалась прогрессирующей дизартрией (носовой и невнятной речью) и сопутствующей дисфагией, слабостью при ходьбе более года и парезом левой верхней конечности в течение приблизительно четырех месяцев. ЭМГ показала генерализованную полифазную активность и хроническое нейрогенное нарушение в бульбарном, шейном и поясничном сегментах.

Клиническое обследование больного показало тяжелую дизартрию, гипокинезию языка, 2/5-3/5 парез левой руки с нарушением мелкой моторики, генерализованную гиперрефлексию и фасцикуляции. Лечение рилузолом было начато месяцем ранее.

Пациент начал лечение ацетил-DL-лейцином в дозе 3 г в сутки в течение первой недели, затем в дозе 5 г в сутки в течение второй недели.

Примерно через 2 месяца пациент был повторно обследован, и он сообщил о прогрессирующем ухудшении двигательной функции левой руки, но о дискретном улучшении ходьбы. Кроме того, функции глотания оставались стабильными.

Пациент 3

Пациентом в этом случае был мужчина в возрасте 66 лет, у которого ранее был диагностирован БАС.

Симптоматология пациента характеризовалась прогрессирующей слабостью и атрофией проксимальных частей обеих верхних конечностей, легким нарушением мелкой моторики, и генерализованными фасцикуляциями и судорогами. ЭМГ показала патологическую спонтанную активность и хроническое нейрогенное изменение, МРТ головного мозга и шейного отдела позвоночника не выявила никакой патологии. Было начато лечение рилузолом.

Приблизительно через два месяца клиническое обследование показало от 3/5 до 4/5 парез обоих плеч и проксимального отдела рук и замедление мелкой моторики, генерализованные фасцикуляции и нормальные рефлексы. Пациент начал лечение ацетил-DL-лейцином в дозе 3 г в сутки в течение первой недели, затем в дозе 5 г в сутки в течение второй недели.

Через месяц пациент сообщил об отсутствии улучшения симптоматики, без улучшения мышечной силы верхних конечностей. Лечение ацетил-DL-лейцином было приостановлено, и пациенту было предложено сообщить об ухудшении симптоматики.

Пациент 4

Пациентом в этом случае был мужчина в возрасте 66 лет, у которого был диагностирован БАС. Симптоматология пациента характеризовалась прогрессирующей слабостью и атрофией проксимальных отделов обеих верхних конечностей, легким нарушением мелкой моторики, генерализованными фасцикуляциями и судорогами. ЭМГ показала патологическую спонтанную активность и хронические нейрогенные изменения. МРТ головного мозга и шейного отдела позвоночника не выявила никакой патологии. Было начато лечение рилузолом.

Клиническое обследование показало от 3/5 до 4/5 парез плеч и проксимальных отделов верхних конечностей, замедление мелкой моторики, генерализованные фасцикуляции и нормальные рефлексы, а также показания по шкале ALS-FRS 44/48.

Пациент начал лечение ацетил-DL-лейцином в дозе 3 г в сутки в течение первой недели, затем в дозе 5 г в сутки в течение второй недели.

Примерно через месяц пациент сообщил о субъективном улучшении дисфагии и уменьшении гиперсаливации. Его родственники сообщили об улучшенном и более жизненном выражении лица. Слабость конечностей не изменилась. Терапия была приостановлена, и через 10 дней пациент сообщил об ухудшении симптоматики, особенно субъективном ухудшении дисфагии и гиперсаливации. Пациент возобновил непрерывное лечение.

Пациент был повторно обследован приблизительно через 8 недель, и симптоматика оставалась стабильной. Показатель ALS-FRS у пациента составил 43/48. По сравнению с симптоматикой во время постановки диагноза отмечалась лишь незначительная прогрессия слабости походки и верхних конечностей.

Пример 8

Было показано, что лечение ацетил-лейцином приводит к улучшению состояния у 3 пациентов, у которых был диагностирована множественная системная атрофия мозжечкового типа (MSA-C).

Пациент 1

Пациентом 1 в этом случае была женщина в возрасте 50 лет, у которой в течение предыдущих трех лет отмечалась прогрессирующая атаксия с нарушениями речи и походки.

Клиническое обследование пациентки выявило центральные мозжечковые глазодвигательные признаки, умеренную дизартрофонию, легкую атаксию конечностей и умеренную статическую и динамическую атаксию. Кроме того, МРТ пациентки показала атрофию мозжечка и ствола головного мозга, в частности, моста и среднего мозга. Соответственно, пациентке был поставлен диагноз MSA-C.

Пациентка начала лечение ацетил-DL-лейцином в дозе 5 г в сутки (2 г после пробуждения, 1,5 г до обеда и 1,5 г до ужина).

Уже после одной недели лечения пациентка показала значительное улучшение речи.

Пациент 2

В данном случае пациентом был 77-летний мужчина, у которого был диагностирована MSA-C.

Симптоматология пациента характеризовалась прогрессирующими затруднениями при ходьбе и неустойчивой походкой с тенденцией к падению (пациент падал примерно 10 раз в месяц). У пациента отмечались головокружение, гипокинетико-ригидный синдром, саккадированные движения глаз, дисметрия в испытании координации и вегетативная дисфункция, например, эректильная дисфункция, ортостатическая гипотензия и неполное опорожнение мочевого пузыря в течение последних четырех лет.

До начала лечения симптомы пациента оставались неизменными в течение как минимум трехмесячного периода.

Пациент начал лечение ацетил-DL-лейцином в дозе 3 г в сутки в течение первой недели с последующей дозой до 5 г в сутки.

Через 3 недели лечения было проведено дополнительное обследование. Пациент и его жена сообщили о значительном улучшении походки: пациент ходил более устойчиво, и падения полностью прекратились. Кроме того, головокружение, испытываемое пациентом, значительно уменьшилось.

Пациенту было предписано прекратить прием препарата, и через неделю пациент сообщил об ухудшении походки и головокружении. Пациент сообщил, что чувствует себя более неуверенно при ходьбе с сильной тенденцией к падению.

Затем пациенту было предписано возобновить прием препарата, который он продолжал в течение еще 40 дней, а затем снова прекратил. Во время клинического осмотра через 7 дней после прекращения приема препарата пациент подтвердил прогрессирующее ухудшение походки и головокружение через два дня после прекращения лечения и очень сильную тенденцию к падению через 5 дней после прекращения лечения. Впоследствии пациент вернулся к непрерывному лечению.

Пациент 3

В данном случае пациентом был 76-летний мужчина, у которого был диагностирована малосимптомная MSA-C.

Симптоматология пациента характеризовалась прогрессирующими затруднениями при ходьбе и неустойчивой походкой (без падений), а также головокружением.

Клинически у пациента отмечались саккадированные движения глаз и дисметрия в координационных тестах. кМРТ показала атрофию среднего мозга, а ФДГ-ПЭТ (позитронно-эмиссионная томография с применением фтордезоксиглюкозы) головного мозга показала снижение метаболизма полосатого тела и мозжечка. Результаты постурографического теста пациента были патологическими с высокой склонностью к падению.

До начала лечения клиническая симптоматика пациента оставалась неизменной в течение как минимум одного года.

Был проведен анализ походки, который показал атактическую походку, снижение скорости и увеличение ширины шага по сравнению с нормальным диапазоном, а также колебания походки. Затем пациент начал лечение ацетил-DL-лейцином в дозе 3 г в сутки в течение первой недели, а затем в течение 5 недель в дозе 5 г в сутки.

После одного месяца лечения было проведено дополнительное обследование. Анализ походки показал улучшение скорости походки и уменьшение ширины шага и колебаний походки.

Таблица 5. Параметры анализа походки Вскоре после начала лечения Спустя 27 дней лечения Нормальный диапазон (± SD) Скорость (см/с) 72 106 110,81 (18,33) Максимальная скорость (см/сек) 183 208 158,30 (22,66) Частота шагов (шаги/мин) 101 113 109,19 (12,75) Ширина шага (см) 16,8 14,6 9,06 (1,94) Длина цикла шага (см) 87 113 121,81 (11,52) Опора на две ноги (%) 32,5 27,3 20,73 (2,55) Коэффициент вариации (временный) 3,3 3,1 1,94 (0,85) Функциональная оценка походки 21/30 20/30 24,9 (3,6)

Пациенту было предписано прекратить прием лекарства, и он сообщил о прогрессирующем ухудшении походки и головокружении примерно через две-три недели после прекращения приема лекарства.

Впоследствии пациент вернулся к непрерывному лечению, и симптоматика вновь улучшилась. Лечение снова было приостановлено, и пациент был обследован через три недели. Пациент сообщил об ухудшении симптомов, особенно головокружения. Анализ походки показал увеличение ширины шага, сопоставимое с состоянием до терапии.

Таблица 6. Параметры анализа походки Спустя 20 дней после повторного прекращения лечения Скорость (см/с) 106 Максимальная скорость (см/с) 197 Частота шагов (шагов/мин) 112 Ширина шага (см) 17,5 Длина цикла шага (см) 115 Опора на две ноги (%) 27,1 Коэффициент вариации (временный) 2,5 Функциональная оценка походки 22/30

Пример 9

Пациентом в этом исследовании был мужчина 59 лет, у которого прогрессирующее изменение личности характеризовалось апатией, вялостью и безразличием. Кроме того, у пациента отмечался в основном гипокинетико-ригидный левосторонний синдром с нарушением мелкой моторики и снижением резонирования левой руки. Кроме того, у пациента наблюдалась генерализованная брадикинезия и нарушение походки с небольшими шагами и 2-3 падениями в месяц. Пациент также демонстрировал невнятную речь и когнитивные нарушения, связанные с психомоторным замедлением и снижением словесно-семантической беглости речи.

Пациенту был поставлен диагноз лобно-височной деменции с паркинсонизмом, и посредством Datscan было выявлено снижение дофаминовых рецепторов, подтверждающих диагноз. ФДГ-ПЭТ головного мозга показала преимущественно фронтальное снижение метаболизма.

Пациент показал небольшое улучшение во время лечения с L-Допа и ропиниролом.

Пациент начал лечение ацетил-DL-лейцином в дозе 3 г в сутки в течение одной недели, затем в дозе 5 г в сутки в течение 4 недель.

После приблизительно одного месяца применения ацетил-лейцина лечение было прекращено, и пациент был повторно обследован через 13 дней.

Пациент и его жена и дочь сообщили о значительном улучшении походки при терапии ацетил-лейцином, и, кроме того, падения пациента прекратились. Пациент также показал улучшение речи, которая была более внятной, более понятной и субъективно намного более контролируемой. После приостановки лечения симптомы ухудшились.

Пример 10

Пациентом в этом исследовании был мужчина в возрасте 75 лет с прогрессирующим нарушением походки с неустойчивостью и головокружением, приводящим к падению назад. Кроме того, у больного был преимущественно левосторонний гипокинетико-ригидный синдром с апраксией и феноменом чужеродных конечностей.

У больного был диагностирован кортикобазальный синдром. DaTSCAN показал снижение дофаминовых рецепторов, а МРТ показала атрофическую моторную кору правого полушария, подтверждающую диагноз.

Пациент не показал улучшения во время лечения L-Допа.

Пациент начал лечение ацетил-DL-лейцином в дозе 3 г в сутки в течение первой недели, затем 5 г в сутки. Анализ походки проводили до начала лечения.

После 20 дней лечения ацетил-лейцином пациент был повторно обследован. Отмечено улучшение симптомов головокружения и значительное снижение частоты падений.

Таблица 7. Параметры анализа походки До лечения Спустя 20 дней лечения Среднее значение (± SD) Скорость (см/с) 63 92 110,81 (18,33) Максимальная скорость (см/с) 131 152 158,30 (22,66) Частота шагов (шаги/мин) 90 106 109,19 (12,75) Ширина шага (см) 12,1 12,3 9,06 (1,94) Длина цикла шага (см) 84 104 121,81 (11,52) Опора на две ноги (%) 29,8 26,6 20,73 (2,55) Коэффициент вариации (временный) 3,9 3,4 1,94 (0,85) Функциональный анализ походки 13/30 18/30 24,9 (3,6)

Наблюдалось объективное улучшение параметров анализа походки, например, скорости, максимальной скорости, частоты шагов, и снижение стояния на двух ногах (Таблица 2 и Фигура 9).

После 8 недель лечения ацетил-лейцином лечение было прекращено, и пациент был повторно обследован через 6 дней.

Пациент сообщил об усилении симптомов головокружения через два дня после приостановки лечения (ощущение опьянения).

Впоследствии пациент вернулся к непрерывному лечению.

Пример 11

Пациент 1

В данном случае пациентом была 76-летняя женщина с головокружением, которое в основном возникало при ходьбе. О падениях не сообщалось. Пациентка также обнаружила нарушение походки с небольшими шагами и генерализованную брадикинезию и вертикальный паралич взора с ухудшением мелкой моторики.

У больной был диагностирован прогрессирующий надъядерный паралич. Datscan выявил снижение дофаминовых рецепторов, а ФДГ-ПЭТ головного мозга показала в основном фронтальное снижение метаболизма, что подтверждает диагноз.

Пациентка показала небольшое улучшение во время лечения L-Допа.

Пациентка начала лечение ацетил-DL-лейцином в дозе 3 г в сутки в течение одной недели, затем в дозе 5 г в сутки в течение 4 недель. После 27 дней лечения ацетил-лейцином лечение было прекращено, и пациентка была повторно обследована через 60 дней.

Пациентка сообщила о значительном уменьшении головокружения и небольшом улучшении походки при терапии ацетил-лейцином. После приостановки лечения симптомы ухудшились.

Пациентка была повторно обследована примерно через два месяца и сообщила о стабильной симптоматике основного прогрессирующего надъядерного паралича; не было никакого клинического прогрессирования. Показатель по PSPRS оставался стабильным, а головокружение оставалось значительным.

Пациент 2

В данном исследовании пациентом была 66-летняя женщина с симметричным гипокинетико-ригидным синдромом, расстройством походки с неустойчивостью и небольшими шагами (сильная склонность к падению) и параличом вертикального взора с нарушением мелкой моторики. У больной был диагностирован прогрессирующий надъядерный паралич. DaTSCAN выявил снижение дофаминовых рецепторов, а ФДГ-ПЭТ головного мозга показала в основном фронтальное снижение метаболизма, что подтверждает диагноз. Не было никакого ответа на препарат Леводопа.

Пациентка начала лечение ацетил-DL-лейцином в дозе 3 г в сутки в течение первой недели, затем 5 г в сутки. Анализ походки проводили до начала лечения. После 17 дней терапии лечение было прекращено, и пациентка была повторно обследована через 4 дня. Пациентка сообщила об отсутствии существенного улучшения походки или гипокинетико-ригидного синдрома.

Таблица 8. Параметры анализа походки До лечения Спустя 17 дней лечения Нормальные значения (± SD) Скорость (см/с) 51 68 119,12 (17,27) Максимальная скорость (см/с) 123 98 176,78 (19,10) Частота шагов (шаги/мин) 93 99 113,06 (10,38) Ширина шага (см) 10,3 9,3 9,49 (3,56) Длина цикла шага (см) 66 82 126,71 (13,06) Опора на две ноги (%) 34,5 28,6 20,35 (3,21) Коэффициент вариации (временный) 8,5 6,6 1,76 (0,73) Функциональный анализ походки 15/30 15/30 27,1 (2,3)

Пациентка была повторно обследована приблизительно через два месяца и сообщила об отсутствии ухудшения симптомов после прекращения приема лекарств.

Пациент 3

Пациентом в данном случае был 56-летний мужчина с симметричным гипокинетико-ригидным синдромом, с неустойчивостью и падениями в анамнезе и вертикальным параличом взора с нарушением мелкой моторики. У больного был диагностирован прогрессирующий надъядерный паралич. Datscan выявил снижение дофаминовых рецепторов, а ФДГ-ПЭТ головного мозга показала фронто-медиальное и парието-темпоральное снижение метаболизма, подтверждая диагноз. Не было никакого ответа на препарат Леводопа.

Пациент начал лечение ацетил-DL-лейцином в дозе 3 г в сутки в течение первой недели, затем 5 г в сутки. Анализ походки проводили до начала лечения. После 17 дней терапии лечение было прекращено, и пациент был повторно обследован через 4 дня. Пациент сообщил об отсутствии существенного улучшения походки или гипокинетико-ригидного синдрома.

Таблица 9. Анализ параметров походки До лечения Спустя 17 дней лечения Нормальные значения (± SD) Скорость (см/с) 103 120 125,34 (20,66) Максимальная скорость (см/с) 163 194 180,07 (26,57) Частота шагов (шаги/мин) 106 112 115,27 (12,02) Ширина шага (см) 15,5 15,1 9,12 (2,97) Длина цикла шага (см) 118 129 130,34 (13,01) Опора на две ноги (%) 25,8 24,3 19,65 (2,75) Коэффициент вариации (временный) 3,6 3,1 1,77 (1,04) Функциональный анализ походки 28/30 27/30 28,4 (1,6)

Пациент был повторно обследован приблизительно через два месяца и сообщил об отсутствии ухудшения симптомов после прекращения приема лекарства.

Пациент 4

В данном исследовании пациентом был 76-летний мужчина с прогрессирующим расстройством походки, неустойчивыми и небольшими шагами (сильная склонность к падению), камптокормией, медленными и гипометрическими саккадами, блефароспазмом и нарушением мелкой моторики. У больного был диагностирован прогрессирующий надъядерный паралич. МРТ показала скрытую атрофию среднего мозга (признак Микки Мауса). Был небольшой ответ на препарат леводопа.

Пациент начал лечение ацетил-DL-лейцином в дозе 3 г в сутки в течение первой недели, затем 5 г в сутки. Анализ походки проводили до начала лечения. После трех недель терапии лечение было прекращено, и пациент был повторно обследован. Пациент сообщил о походке с повышенной субъективной устойчивостью и сниженной частотой падений. Анализ походки показал улучшение походки с увеличением скорости, максимальной скорости, длины шага и с уменьшением ширины шага, стояния на двух ногах и коэффициента вариации.

Таблица 10. Анализ параметров походки До лечения Спустя 3 недели лечения Нормальные значения (± SD) Скорость (см/с) 39 65 110,81 (18,33) Максимальная скорость (см/с) 70 93 158,30 (22,66) Частота шагов (шаги/мин)) 109 125 109,19 (12,75) Ширина шага (см) 15,4 13,6 9,06 (1,94) Длина цикла шага (см) 43 63 121,81 (11,52) Опора на две ноги (%) 45,4 36 20,73 (2,55) Коэффициент вариации (временный) 8,2 6,8 1,94 (0,85) Функциональный анализ походки 14/30 24,9 (3,6)

После трех месяцев без лекарства пациент сообщил о прогрессировании гипокинетико-ригидного синдрома. Походка ухудшалась, с более частыми падениями.

Пример 12

Пациент 1

Пациент в этом исследовании случая был 42-летним мужчиной-инженером, который страдал от головокружения и постурального дисбаланса в течение почти одного года.

Пациенту был поставлен диагноз бьющего вниз нистагма: у пациента было сильное нарушение в виде размытого зрения (осциллопсии) из-за нистагма, и он испытывал трудности при чтении и письме. Острота зрения пациента составляла: правый глаз 0,75, левый глаз 0,67, бинокулярное зрение 0,83, а бьющий вниз нистагм был зарегистрирован с помощью видеоокулографии. Пациент также продемонстрировал увеличение качательных движений тела, что было подтверждено постурографией.

Лечение 4-аминопиридином (Фампира, 10 мг два раза в сутки) в течение четырех недель не принесло никакой пользы.

Пациент начал лечение ацетил-DL-лейцином в дозе 3 г в сутки (1 г после пробуждения, 1 г до обеда и 1 г до ужина) в течение одной недели, затем в дозе 5 г в сутки (2 г после пробуждения, 1,5 г до обеда и 1,5 г до ужина).

Через 10 дней пациент сообщил о значительном благоприятном эффекте и о том, что эффект развивается медленно. Пациент продолжал лечение этой дозировкой, побочных эффектов не было. Временная приостановка приема препарата привела к значительному ухудшению состояния.

Пациент был повторно обследован приблизительно через 14 недель после начала лечения ацетил-лейцином, во время которого пациент сообщил, что он очень доволен достигнутым эффектом. Чтение и письмо пациента были намного лучше из-за уменьшения осциллопсии: визуальное отображение окружения было стабильным. Пациент смог подавить нистагм путем визуальной фиксации. Кроме того, была улучшена пространственная ориентация пациента.

Клиническое обследование двумя независимыми экспертами выявило уменьшение нистагма, а видеоокулография показала, что пациент мог подавить нистагм путем визуальной фиксации. Острота зрения пациента составила: правый глаз 0,83, левый глаз 1,0, бинокулярное зрение 1.

Постурография продемонстрировала уменьшение качательных движений.

В целом, это исследование демонстрирует улучшение симптомов пациента по этому показанию.

Пациент 2

У пациента в этом случае был диагностирован бьющий вниз нистагм. У пациента был отмечен постуральный дисбаланс и головокружение. Лечение пациента Фампира® не дало положительного эффекта.

Пациент начал принимать ацетил-DL-лейцин (3 г в сутки в течение первой недели; 5 г в сутки после этого) и впоследствии продемонстрировал улучшение походки, с возможностью ходить на гораздо большие расстояния (один час) и улучшенной бдительностью. Бьющий вниз нистагм у пациента также улучшился (документально подтверждено видеоокулографией). Пациент мог частично подавить нистагм путем визуальной фиксации, что оценивали с использованием центра мишени (точки, представленной в центре дисплея в течение 30 секунд, Фигура 13А) и в полной темноте с использованием очков, покрытых специальными стеклами, в течение 45 секунд (Фигура 13В). Результаты (медиана скорости медленной фазы, SPV) были следующими: центр мишени - по горизонтали: -0,02°/с, по вертикали: 2,41°/с; полная темнота - по горизонтали: 0,05°/с, по вертикали: 3,27°/с (Фигура 13С). Пациент смог минимизировать движения глаз во время фиксации, как показано на Фигуре 13А.

Анализ походки показал увеличение собственной скорости с 56 до 85 см/с и максимальной скорости ходьбы с 122 до 155 см/с. Лечение было тогда приостановлено.

Примерно через месяц после прекращения лечения ацетил-DL-лейцином симптомы у пациента ухудшились. Анализ походки показал снижение собственной скорости с 85 до 72 см/с и максимальной скорости ходьбы с 155 до 113 см/с.

Пример 13

Пациент 1

Пациентом в этом исследовании была 70-летняя женщина с преимущественно правосторонним гипокинетико-ригидным синдромом и тремором, антеколлисом, частыми падениями, ортостатической дисфункцией и недержанием мочи.

У пациентки была диагностирована множественная системная атрофия типа Паркинсона (MSA-P). Datscan выявил преимущественно левостороннее снижение дофаминовых рецепторов, а ФДГ-ПЭТ головного мозга показала преимущественно теменно-затылочное снижение метаболизма. Был некоторый ответ на препарат леводопа (100/25 мг 3 раза в сутки).

Пациентка начала принимать ацетил-DL-лейцин (3 г в сутки в течение первой недели; 5 г в сутки после этого). После 3 недель приема ацетил-DL-лейцина пациентка была обследована и сообщила об отсутствии существенного улучшения походки, уменьшения падений или улучшения гипокинетического ригидного синдрома. Прием лекарства был прекращен.

Через 6 недель пациентка не сообщала об ухудшении симптомов после прекращения приема лекарства.

Пациент 2

Пациентом в данном исследовании было 78-летний мужчина с диагнозом множественная системная атрофия типа Паркинсона (MSA-P). Симптоматология пациента характеризовалась прогрессирующим гипокинетико-ригидным синдромом, ортостатической дисфункцией, и последовательным головокружением и нарушением равновесия. Пациент показал саккадическое движение глаз и симметричную скованность обеих верхних конечностей. Балансировка на воображаемом канате была связана с неустойчивостью и потерей равновесия. ФДГ-ПЭТ головного мозга показала снижение метаболизма как теменной, так и затылочной коры, что наводит на мысль о деменции с тельцами Леви.

Пациент начал лечение ацетил-DL-лейцином в дозе 3 г в сутки в течение первой недели, затем 5 г в сутки. Пациент был обследован до начала лечения и показал клиническую симптоматику, описанную выше, с очень выраженной неустойчивой походкой и головокружением.

После одного месяца лечения лечение прекратили и обследовали пациента. Пациент сообщил о субъективном улучшении головокружения, и клиническое обследование показало улучшение балансировки на воображаемом канате, которое пациент выполнил без каких-либо затруднений по сравнению с предыдущим обследованием. Был проведен анализ походки.

Через месяц без приема медикамента пациент сообщил о стабильной симптоматике. Не сообщалось об ухудшении головокружения или неустойчивости походки. Был проведен анализ походки.

После двух месяцев без лекарств был проведен анализ походки, который показал снижение скорости походки, уменьшение длины шага и ухудшение показателя функциональной оценки походки. Пациент сообщил об ухудшении общей симптоматики, включая прогрессирующую слабость ног и повышенную неустойчивость походки.

Таблица 11. Параметры анализа походки Спустя 1 месяц лечения Спустя 1 месяц без лечения Спустя 2 месяца без лечения Нормальные значения (± SD) Скорость (см/с) 109 114 94 110,81 (18,33) Максимальная скорость (см/с) 214 196 177 158,30 (22,66) Частота шагов (шаги/мин) 109 109 106 109,19 (12,75) Ширина шага (см) 3,8 2,3 3,4 9,06 (1,94) Длина цикла шага (см) 120 126 107 121,81 (11,52) Опора на две ноги (%) 25,6 22,5 26,7 20,73 (2,55) Коэффициент вариации (временный) 2,7 1,7 2,1 1,94 (0,85) Функциональный анализ походки 24/30 25/30 22/30 24,9 (3,6)

Пациент 3

Пациентом в данном исследовании было 78-летний мужчина с диагнозом множественная системная атрофия типа Паркинсона (MSA-P). Симптоматология пациента характеризовалась прогрессирующим гипокинетико-ригидным синдромом, недержанием мочи, начинающейся когнитивной дисфункцией и нарушением походки с небольшими шагами и 2-3 падениями в месяц. Когнитивные нарушения характеризовались психомоторным замедлением и перемежающимся умственным расстройством. Datscan выявил снижение дофаминовых рецепторов, что подтвердило диагноз. ФДГ-ПЭТ головного мозга показала снижение метаболизма в основном в полосатом теле. Терапия леводопой была приостановлена из-за побочных эффектов.

Пациент начал лечение ацетил-DL-лейцином в дозе 3 г в сутки в течение первой недели, затем 5 г в сутки. Пациент был обследован через месяц после начала лечения ацетил-DL-лейцином. Жена пациента сообщила о значительном улучшении когнитивной функции. Эпизоды спутанности сознания полностью исчезли. Когнитивная структура пациента казалась намного более четкой и прямой. Не отмечено никакого улучшения функции походки. Жена пациента поддержала продолжение лечения.

Пример 14

В данном случае пациентом был 45-летний мужчина с диагнозом спиноцеребеллярная атаксия 28 (SCA 28). Генетическое тестирование показало известный патогенный вариант в AFG3L2. Симптоматология пациента характеризовалась прогрессирующим мозжечковым синдромом с 30 лет, характеризующимся невнятной речью, нестабильной походкой, нарушением равновесия и головокружением. Отец и бабушка пациента страдали от сходной симптоматики. У больного отмечались саккадические движения глаз и дисметрия в координационных тестах, атаксическая походка, невнятная речь, гиперрефлексия нижних конечностей, спастичность нижних конечностей и положительный рефлекс Бабинского слева. МРТ показала выраженную атрофию мозжечка.

Пациент начал лечение ацетил-DL-лейцином в дозе 5 г в сутки. Анализ походки проводили до начала лечения. Примерно через месяц лечения лечение прекратили и обследовали пациента. Пациент сообщил об улучшении симптоматики, в частности об уменьшении головокружения (почти исчезнувшем) и более стабильной походке. Пациент сообщил, что он больше не ходил как робот, и мог подниматься по лестнице без использования перил. Был проведен анализ походки, который продемонстрировал улучшение параметров.

Таблица 12. Анализ параметров походки До лечения Спустя 1 месяц лечения Стандартные значения (± SD) Самостоятельно выбранная скорость (см/с) 101 118 126,61 (21,43) Максимальная скорость (см/с) 188 201 182,94 (25,37) Частота шагов (шаги/мин) 100 105 115,52 (9,36) Ширина шага (см) 14,5 11,7 9,43 (2,27) Длина цикла шага (см) 122 135 131,55 (17,98) Опора на две ноги (%) 24,9 23,8 18,76 (3,46) Коэффициент вариации (временный) 4,1 2,1 1,88 (0,79) Функциональный анализ походки 24/30 23/30 28,9 (1,5)

Пример 15

Пациенты 1 и 2

Пациентами в этом случае были 2 женщины-сестры, 24 года (Пациентка 1) и 19 лет (Пациентка 2), соответственно. Пациентки страдают атаксией-телеангиэктазией.

У пациентки 1 отмечалась задержка развития. Пациентка не ходила до возраста 2 лет и не имела прогрессирования признаков и симптомов мозжечковой атаксии, судорог, вместе с генерализованной, дистально выраженной гипертонией и телеангиэктазиями на глазах, ушах и груди. Диагноз был установлен в возрасте 9 лет. Двигательная функция глаз пациентки 1 проявлялась в виде бьющего вниз нистагма при взгляде прямо вперед и в левом направлении больше, чем в правом, нистагма при удерживании взгляда вверх, плавного вертикального и горизонтального саккадического преследования и гипометрических саккад по горизонтали и вертикали с ограниченной подвижностью вверх.

Перед началом лечения обследование пациентки 1 показало значение по Шкале оценки атаксии (SARA), равное 22/40. Результаты анализа функционального индекса спиноцеребеллярной атаксии (SCAFI) пациентки были следующими:

Средний показатель испытания на ходьбу на 8 метров (8MW): 21,8 с

Тест с доской для вставки 9 штырей для ведущей руки (9HPTD) (правой): 90,2 с

Тест с доской для вставки 9 штырей для не-ведущей руки (9HPTND): 125,8 с

Словесный тест MW PATA: 12.5

Визуальная аналоговая шкала (по оценке пациенткой): 99

Результаты видеоокулографии были следующими:

Таблица 13. Параметры видеоокулографии Скорость низкой фазы нистагма при удержании взгляда Горизонтально Вертикально В центр 0,54 6,9 Вправо -1,16 6,2 Влево 12,2 12,6 Вниз -0,14 6,9 Вверх -0,39 5,95

Пациентка 1 начала лечение ацетил-DL-лейцином (5 г сутки) после обследования. После одного месяца лечения пациентку повторно обследовали. Опекуны сообщили об улучшении речи и походки. Сама пациентка не видела никаких изменений. Экспертиза показала значение по Шкале оценки атаксии (SARA) 15,5/40. Результаты анализа функционального индекса спиноцеребеллярной атаксии (SCAFI) пациентки были следующими:

Средний показатель испытания на ходьбу на 8 метров (8MW): 18,5 с

Тест с доской для вставки 9 штырей для ведущей руки (9HPTD) (правой): 77,9 с

Тест с доской для вставки 9 штырей для не-ведущей руки (9HPTND): 101,3 с

Словесный тест MW PATA: 13

Визуальная аналоговая шкала (по оценке пациенткой): 85

Результаты видеоокулографии были следующими:

Таблица 14. Параметры видеоокулографии Скорость низкой фазы нистагма при удержании взгляда Горизонтально Вертикально В центр 0,4 4,77 Вправо -0,95 4,83 Влево 8,2 8,85 Вниз -0,44 5,29 Вверх 0,72 2,67

Показатели SARA и SCAFI пациентки 1 улучшились после лечения, и видеоокулография показала значительное улучшение стабильности фиксации и снижение интенсивности направленного вниз нистагма.

У пациентки 2 отмечена задержка развития, судороги в возрасте 1 года, генерализованная гипотония, контрактуры нижних конечностей с билатеральной эквиноварусной деформаций стопы, арефлексия, острый лимфобластный лейкоз в возрасте 3 лет, слегка увеличенная селезенка, гиперхолестеринемия, гипохроматическая микроцитарная анемия, пигментные невусы и витилиго. Первые симптомы были замечены родителями пациентки в возрасте 15 месяцев. Глазодвигательная функция пациентки 2 показала квадратноволновые толчки, нистагм при удерживании взгляда больше в левую сторону, чем в правую, с вертикальным компонентом, бьющий вниз нистагм, саккадическое плавное преследование, паралич вертикального взгляда вверх больше, чем вниз; и нарушение конвергенции.

Перед началом лечения обследование пациентки 2 показало значение по Шкале оценки атаксии (SARA) 28,5/40. Результаты анализа функционального индекса спиноцеребеллярной атаксии (SCAFI) пациентки были следующими:

Средний показатель испытания на ходьбу на 8 метров (8MW): невозможно выполнить без поддержки

Тест с доской для вставки 9 штырей для ведущей руки (9HPTD) (правой): 300 с

Тест с доской для вставки 9 штырей для не-ведущей руки (9HPTND): 299,2 с

Словесный тест MW PATA: 13,5

Визуальная аналоговая шкала (по оценке пациентки): 45

Результаты видеоокулографии были следующими:

Таблица 15. Параметры видеоокулографии Скорость медленной фазы нистагма при фиксации взгляда Горизонтально Вертикально В центр -2 6,18 Вправо -3,97 7,6 Влево -0,24 9,49 Вниз -2,86 5,58 Вверх -1,11 4,97

Пациентка 2 начала лечение ацетил-DL-лейцином (5 г в сутки) после обследования. После одного месяца лечения пациентка был повторно обследована. Опекуны сообщили об улучшении мелкой моторики, дрожания рук и речи. Сама пациентка не видела никакой пользы. Экспертиза показала значение по Шкале оценки атаксии (SARA) 23,5/40. Результаты анализа функционального индекса спиноцеребеллярной атаксии (SCAFI) пациентки были следующими:

Средний показатель испытания на ходьбу на 8 метров (8MW): невозможно выполнить без поддержки

Тест с доской для вставки 9 штырей для ведущей руки (9HPTD) (правой): 300 с

Тест с доской для вставки 9 штырей для не-ведущей руки (9HPTND): 300 с

Словесный тест MW PATA: 14

Визуальная аналоговая шкала (по оценке пациентки): 80

Результаты видеоокулографии были следующими:

Таблица 16. Параметры видеоокулографии Скорость медленной фазы нистагма при фиксации взгляда Горизонтально Вертикально В центр -1,45 5,6 Вправо -3,45 6,56 Влево 3,58 7 Вниз -2,5 4,69 Вверх -0,51 3,15

Видеоокулография показала улучшение стабильности фиксации и значительное улучшение интенсивности бьющего вниз нистагма у пациентки 2.

Пациент 3

Пациентом в данном случае было 19-летняя девушка, страдающая от атаксии-телеангиэктазии с раннего детства, у которой отмечалось следующее:

- Задержка моторного развития, признаки и симптомы мозжечковой атаксии, выраженная центральная гипотония с акральной гипертонией, тяжелые контрактуры стоп с ортопедическими билатеральными деформациями в виде конской стопы с выворотом стопы и, таким образом, необходимость использования инвалидной коляски, дисдиадохокинез, арефлексия нижних конечностей со сниженной проприоцептивной чувствительностью; и

- Неходжкинская лимфома, полиморфизм MTHFR (C677T), лимфангиома нижней губы, холецистолитиаз, дилатационная кардиомиопатия, пигментные невусы, грудно-поясничный кифосколиоз и склеральные телеангиэктазии на обоих глазах.

Глазодвигательная функция пациентки показала нистагм при фиксации взгляда направо и налево, саккадические движения глаз, медленные саккады во всех направлениях, особенно горизонтально, патологический вестибуло-окулярный рефлекс с корректирующими подтягивающими саккадами и патологическое подавление зрительной фиксации вестибуло-окулярного рефлекса.

Перед началом лечения обследование пациентки показало значение по Шкале оценки атаксии (SARA) 23/40. Результаты анализа функционального индекса спиноцеребеллярной атаксии (SCAFI) пациентки были следующими:

Средний показатель испытания на ходьбу на 8 метров (8MW): невозможно выполнить

Тест с доской для вставки 9 штырей для ведущей руки (9HPTD) (правой): 150 с

Тест с доской для вставки 9 штырей для не-ведущей руки (9HPTND): 161,6 с

Словесный тест MW PATA: 14

Визуальная аналоговая шкала (по оценке пациентки): 80

Результаты видеоокулографии были следующими:

Таблица 17. Параметры видеоокулографии Скорость медленной фазы нистагма при фиксации взгляда [°/s] Горизонтально Вертикально В центр 3 -1,5 Вправо -0,4 -1 Влево 7,3 2,5 Вниз 2,4 -0,2

Пациентка начала лечение ацетил-DL-лейцином (5 г в сутки) примерно через шесть месяцев после обследования. После чуть более 7 месяцев лечения пациентка была повторно обследована. Лица, осуществляющие уход, и пациентка сообщили об общем улучшении самочувствия, без более точных указаний Экспертиза показала значение по Шкале оценки атаксии (SARA) 21,5/40. Результаты анализа функционального индекса спиноцеребеллярной атаксии (SCAFI) пациентки были следующими:

Средний показатель испытания на ходьбу на 8 метров (8MW): невозможно выполнить

Тест с доской для вставки 9 штырей для ведущей руки (9HPTD) (правой): 124,5 с

Тест с доской для вставки 9 штырей для не-ведущей руки (9HPTND): 147,5 с

Словесный тест MW PATA: 10

Визуальная аналоговая шкала (по оценке пациентки): 80

Результаты видеоокулографии были следующими:

Таблица 18. Параметры видеоокулографии Скорость медленной фазы нистагма при фиксации взгляда [°/s] Горизонтально Вертикально В центр -0,1 0,4 Вправо -4,2 1,7 Влево 1,7 0,1 Вниз -0,6 1,2

Пациентка продемонстрировала небольшое улучшение показателей SARA и SCAFI 9HPT, а также значительное улучшение стабильности фиксации и снижение интенсивности нистагма при фиксации взгляда во всех положениях.

Пациент 4

Пациентом в этом случае было 15-летняя девочка, страдающая от атаксии-телеангиэктазии с 4-летнего возраста. С 7-летнего возраста у пациентки наблюдались признаки и симптомы тяжелой мозжечковой атаксии, нарушение мелкой моторики, мышечная гипотония с арефлексией, мышечная атрофия и подошвенное сгибание с дискретными контрактурами. Пациентка была прикована к инвалидной коляске, но могла ходить с постоянной поддержкой. Пациентка имела тяжелую гемолитическую анемию, гипогаммаглобулинемию, телеангиэктазии на склерах и груди, и вторичный синдром Кушинга из-за приема кортикостероидов, и подозрение на наличие неходжкинской лимфомы ЦНС.

Глазодвигательная функция пациентки показала медленное отклонение глаз вверх, бьющий влево нистагм в центральном положении, нистагм при фиксации взгляда во всех направлениях, горизонтально с направленным вниз компонентом, вздрагивание с внезапным движением головы.

Перед началом лечения обследование пациентки показало значение по Шкале оценки атаксии (SARA) 23,5/40. Результаты анализа функционального индекса спиноцеребеллярной атаксии (SCAFI) пациентки были следующими:

Средний показатель испытания на ходьбу на 8 метров (8MW): невозможно выполнить

Тест с доской для вставки 9 штырей для ведущей руки (9HPTD) (правой): 124,5 с

Тест с доской для вставки 9 штырей для не-ведущей руки (9HPTND): 52,3 с

Словесный тест MW PATA: 14

Визуальная аналоговая шкала (по оценке пациентки): 70

Результаты видеоокулографии были следующими:

Таблица 19. Параметры видеоокулографии Скорость медленной фазы нистагма при фиксации взгляда [°/s] Горизонтально Вертикально В центр -0,6 1,76 Вправо 3,7 -0,1 Влево -6 0,6 Вниз 5,7 2,7

Пациентка начала лечение ацетил-DL-лейцином (5 г в сутки) после обследования. После чуть более 1 месяца лечения пациентка была повторно обследована. Пациентка и ее мать сообщили об улучшении почерка, особенно из-за уменьшения тремора рук и мелкой моторики. Пациентка также сообщила, что пить стало легче, и она больше не нуждалась в соломинке. Члены семьи рассказали об улучшении походки, с большей стабильностью и меньшей потребностью в поддержке. Экспертиза показала значение по Шкале оценки атаксии (SARA) 18,5/40. Результаты анализа функционального индекса спиноцеребеллярной атаксии (SCAFI) пациентки были следующими:

Средний показатель испытания на ходьбу на 8 метров (8MW): невозможно выполнить

Тест с доской для вставки 9 штырей для ведущей руки (9HPTD) (правой): 93,5 с

Тест с доской для вставки 9 штырей для не-ведущей руки (9HPTND): 101,7 с

Словесный тест MW PATA: 15,5

Визуальная аналоговая шкала (по оценке пациентки): 70

Результаты видеоокулографии были следующими:

Таблица 20. Параметры видеоокулографии Скорость медленной фазы нистагма при фиксации взгляда [°/s] Горизонтально Вертикально В центр -0,2 4,8 Вправо -1 0,3 Влево -0,8 1,9 Вниз -0,7 -2,3

Пациентка продемонстрировала улучшение показателей SARA и SCAFI 9HPT ведущей руки. Видеоокулография показала общее улучшение стабильности фиксации и снижение интенсивности спонтанного нистагма и нистагма при фиксации взгляда во всех положениях.

Пациент 5

Пациентом в этом случае было 10-летний мальчик, страдающий атаксией-телеангиэктазией с раннего детства, у которого отмечались симптомы:

- задержка психомоторного развития, нестабильная ходьба в 14 месяцев с повышенной частотой падений, тяжелые признаки и симптомы мозжечковой атаксии, дизартрия и дислалия, нарушения мелкой моторики, редкий тремор головы, медленный психомоторный темп, гипотония с мышечной атрофией и гипорефлексией, антефлексия головы с кифозом в грудной области, выворот стоп, крыловидные лопатки, парасомния с ночными кошмарами и аутизм; и

- значительная иммуносупрессия, телеангиэктазии на мягком небе, склерах; недержание мочи и астеническая конституция.

Пациент был прикован к инвалидной коляске, но мог выполнять несколько шагов с сильной постоянной поддержкой. Глазнодвигательная функция пациента показала глазодвигательную апраксию с выраженной антефлексией головы, движением головы и глаз «в блоке» при взгляде вправо и влево, паралич вертикального взгляда с медленными вертикальными саккадами и плавным саккадическим преследованием, медленные горизонтальные саккады влево, паралич саккад вправо, ограниченную подвижность глаз, особенно по вертикали, и нестабильность фиксации во всех положениях.

Перед началом лечения обследование пациента показало значение по Шкале оценки атаксии (SARA) 24,5/40. Результаты анализа функционального индекса спиноцеребеллярной атаксии (SCAFI) пациента были следующими:

Средний показатель испытания на ходьбу на 8 метров (8MW): невозможно выполнить без постоянной поддержки

Тест с доской для вставки 9 штырей для ведущей руки (9HPTD) (правой): 102,7 с

Тест с доской для вставки 9 штырей для не-ведущей руки (9HPTND): 116,8 с

Словесный тест MW PATA: 6

Визуальная аналоговая шкала (по оценке пациентки): 90

Результаты видеоокулографии были следующими:

Таблица 21. Параметры видеоокулографии
Скорость медленной фазы нистагма при фиксации взгляда и нистагм при удерживании взгляда, [°/s]
Горизонтально Вертикально В центр 0,96 1,53 Вправо 0,21 2 Влево 2,1 3,64 Вниз 0,71 3,91 Вверх 0,31 1,69

Пациент начал лечение ацетил-DL-лейцином (5 г в сутки) после обследования. Примерно через 1 месяц лечения пациент был повторно обследован. Мать пациента описала значительное улучшение стабильности походки; до начала терапии он постоянно падал назад, и его необходимо было частично «переносить». Во время приема лекарств он мог ходить с поддержкой только за руку.

Улучшились показатели мелкой моторики, интенсивности дрожания рук и удерживания тела. Улучшение мелкой моторики нашло свое отражение в повседневной деятельности, такой как самостоятельное питание и питье. Пациент набрал 1,5 кг и улучшил аппетит. Экспертиза показала значение по Шкале оценки атаксии (SARA) 20,5/40. Результаты анализа функционального индекса спиноцеребеллярной атаксии (SCAFI) пациента были следующими:

Средний показатель испытания на ходьбу на 8 метров (8MW): невозможно выполнить без поддержки

Тест с доской для вставки 9 штырей для ведущей руки (9HPTD) (правой): 103,6 с

Тест с доской для вставки 9 штырей для не-ведущей руки (9HPTND): 88,8 с

Словесный тест MW PATA: 7,5

Визуальная аналоговая шкала (по оценке пациентки): 80

Результаты видеоокулографии были следующими:

Таблица 22. Параметры видеоокулографии
Скорость медленной фазы нистагма при фиксации взгляда и нистагм при удерживании взгляда, [°/s]
Горизонтально Вертикально В центр 0,79 3,54 Вправо 1,17 2,36 Влево 1,22 2,53 Вниз 0,62 1,08 Вверх 0,33 1,71

Спустя почти 7 месяцев лечения пациент был повторно обследован. Мать пациента описала значительно более устойчивую походку; этот результат остается неизменным с момента первой оценки после лечения. У больного улучшились концентрация и речь. Пациент мог вставать самостоятельно и, как правило, был более независимым в повседневной деятельности. Пациент увеличил массу тела еще на 3 кг с улучшенным аппетитом, и показал улучшенную силу.

Экспертиза показала значение по Шкале оценки атаксии (SARA) 17,5/40. Результаты анализа функционального индекса спиноцеребеллярной атаксии (SCAFI) пациента были следующими:

Средний показатель испытания на ходьбу на 8 метров (8MW): 15,3 с (при поддержке за руку)

Тест с доской для вставки 9 штырей для ведущей руки (9HPTD) (правой): 92,4 с

Тест с доской для вставки 9 штырей для не-ведущей руки (9HPTND): 98,3 с

Словесный тест MW PATA: 11

Визуальная аналоговая шкала (по оценке пациента): 100

Результаты видеоокулографии были следующими:

Пациент был повторно обследован спустя немногим более года лечения и показал улучшение социального взаимодействия, активности и ловкости. Родители пациента сообщили об улучшении недержания. У пациента развилась многократная фронтальная локализованная боль с рвотой по утрам. Основываясь на семейном анамнезе, предполагалось, что локализованная боль может быть связана с детской мигренью.

Экспертиза показала значение по Шкале оценки атаксии (SARA) 16,5/40. Результаты анализа функционального индекса спиноцеребеллярной атаксии (SCAFI) пациента были следующими:

Средний показатель испытания на ходьбу на 8 метров (8MW): 13,9 (может ходить сам, держась за руку матери)

Тест с доской для вставки 9 штырей для ведущей руки (9HPTD) (правой): 95,6 с

Тест с доской для вставки 9 штырей для не-ведущей руки (9HPTND): 127,6 с

Словесный тест MW PATA: 14,5

Визуальная аналоговая шкала (по оценке пациента): 95

При лечении ацетил-DL-лейцином пациент показал улучшение показателей SARA и SCAFI, повышение качества жизни, в целом улучшение стабильности фиксации и снижение интенсивности спонтанного нистагма и нистагма при фиксации взгляда, особенно в вертикальной плоскости (через 1 месяц).

Пациент 6

В данном исследовании пациентом была 10-летняя девочка, страдающая атаксией-телеангиэктазей, у которой отмечалась атаксическая походка и стационарная атаксия, нарушения мелкой моторики с тремором рук, дисфагией и расстройством речи, нарушением движения глаз и проблемами с когнитивной функцией и концентрацией. Первые симптомы наблюдались в возрасте одного года.

После базового обследования пациентка начала лечение ацетил-DL-лейцином в дозе 1,5 г в сутки в течение первой недели и 3 г в сутки в течение второй недели. Пациентка была обследована после одного месяца и шести месяцев лечения, соответственно. После одного месяца лечения у пациентки отмечалось улучшение мелкой моторики с уменьшением тремора рук, улучшением постуральной устойчивости и походки, улучшением восприятия и повышением уверенности в себе. После шести месяцев лечения у пациентки было стабильное общее состояние, стабильная походка и вертикальное положение, а также улучшился почерк. Пациентка, однако, страдала от тревоги, которая, как ожидается, отрицательно повлияет на реакцию.

Показатели SARA и SCAFI пациентки при каждом обследовании показаны ниже.

Таблица 23. Параметры оценки пациентки Базовый уровень Спустя 1 месяц лечения ацетил-DL-лейцином Спустя 6 месяцев лечения ацетил-DL-лейцином SARA 11/40 8,5/40 11/40 8MWT 8,95 с 8,45 с 7,53 с 9HPTD 85,38 с 81,95 с 136,27 с 9HPTND 71,2 с 70,39 с 80,32 с PATA 14,5 15,5 13

Пример 16

В данном исследовании пациентом была женщина в возрасте 60 лет, у которой была генетически диагностирована спиноцеребеллярная атаксия (SCA) 1. До лечения у пациентки были серьезные проблемы с речью и глотанием, тремор обеих рук, спастичность и умеренная статическая и динамическая атаксия. У пациентки также были проблемы со сном.

Через три недели после приема ацетил-DL-лейцина (5 г в сутки) все симптомы значительно улучшились, что было продемонстрировано клиническим исследованием, включая спастичность и нарушение глазодвигательной функции.

Через три месяца лечение было прекращено. Через две недели интенсивность признаков и симптомов была такой же, как и до начала терапии. Лечение было начато снова, и пациентка продолжила и продолжает лечение более двух лет в той же дозировке без каких-либо побочных эффектов.

Дочь пациентки сообщила о значительном прогрессировании заболевания с течением времени с сохраняющимся симптоматическим эффектом, но, как ни странно, отмечала, что в результате лечения наблюдалась долгосрочная симптоматическая эффективность.

Пример 17

Пациентом в этом случае было 70-летняя женщина с неустойчивой походкой и частыми падениями, зрительными галлюцинациями ночью, расстройством быстрого сна. У пациентки был симметричный гипокинетико-ригидный синдром с нарушением мелкой моторики и колебаниями внимания и осознанности.

У пациентки была диагностирована деменция телец Леви. ФДГ-ПЭТ головного мозга показала синаптическую дисфункцию в теменной и затылочной доле, а DATscan показал дегенерацию пресинаптического переносчика дофамина, подтверждая диагноз. Лечение леводопой 100 мг 4 раза в сутки и кветиапином 25 мг на ночь улучшило симптоматику.

Пациентка начала принимать ацетил-лейцин (3 г в сутки в течение одной недели; 5 г в сутки после этого) и была обследована через четыре недели. Пациентка сообщила об увеличении утомляемости и ухудшении баланса и речи. Медикаментозное лечение было снижено до 3 г сутки, и пациентке было предписано прекратить прием лекарств через две недели.

Пациентка была повторно обследована примерно через месяц после прекращения приема лекарств и сообщила об отсутствии улучшения симптоматики при уменьшении дозы и отсутствии ухудшения симптомов после прекращения приема медикамента.

Таблица 24. Параметры походки Через 1 неделю с ацетил-DL-лейцином Через 4 недели с ацетил-DL-лейцином Нормальные значения (± SD) Самостоятельно выбранная скорость (см/с) 55 56 119,12 (17,27) Максимальная скорость (см/с) 92 74 176,78 (19,10) Частота шагов (шаги/мин)) 81 85 113,06 (10,38) Ширина шага (см) 4,6 6,7 9,49 (3,56) Длина цикла шага (см) 81 79 126,71 (13,06) Опора на две ноги (%) 36,1 38,7 20,35 (3,21) Коэффициент вариации (временный) 9,1 8,8 1,76 (0,73) Функциональный анализ походки 11/30 27,1 (2,3)

Пример 18

В этом исследовании четыре пациента мужского пола (братья) страдали атаксией, с последующим диагностированием глазодвигательной апраксии 4-го типа. Трем старшим братьям было 12, 11 и 10 лет, соответственно, на момент начала заболевания. До начала лечения ацетил-DL-лейцином к 15/16 годам трое старших братьев ходили с вспомогательными средствами, как сообщила мать пациентов. Старшие братья начали лечение ацетил-лейцином в возрасте 25, 23 и 19 лет, соответственно и находились на лечении приблизительно четыре года. Долгосрочных клинических данных для этих трех пациентов не имеется.

Самому младшему брату было 11 лет на момент начала заболевания. Он начал лечение ацетил-DL-лейцином в возрасте 13 лет. Находясь на лечении, младший брат не использовал вспомогательные средства при ходьбе до достижения почти 18-летнего возраста, как сообщила мать пациента. Мать пациента также сообщила, что у младшего брата улучшалась мелкая моторика и улучшалась речь в каждом возрасте по сравнению с его старшими братьями. Долгосрочных клинических данных для младшего брата нет.

Пример 19

Степень тяжести заболевания у пациента с NPC может быть количественно определена путем присвоения балла клинической тяжести (CSS), который оценивает различные параметры заболевания и назначает каждому параметру балл из 5 (более высокий балл = большая тяжесть). См. Yanjanin et al., «Linear Clinical Progression, Independent of Age of Onset, in Niemann-Pick Disease, Type C», Am J Med Genet Part B 153B:132-140. У нелеченного пациента обычно можно предсказать, как CSS изменится с течением времени у индивидуума, так как прогрессирование заболевания выглядит линейным. Например, если пациент А переходит от CSS 8 к CSS 12 между месяцем 0 и 12, можно предсказать, что к 36 месяцу пациент будет иметь CSS 20. Годовой показатель повышения степени тяжести (ASIS) определяет ежегодную скорость изменения CSS, рассчитанную путем деления CSS пациента на возраст пациента. Например, если у не получавшего лечение пациента B в двухлетнем возрасте CSS равнялся 8, ASIS пациента равнялся бы 4. Каждый год пациент должен был прогрессировать на 4 балла CSS, так что в возрасте 4 лет CSS пациента будет равен 16. Если терапевтическое вмешательство замедлит или остановит прогрессирование заболевания, можно ожидать, что пациент получит меньшую оценку по шкале ASIS после такой терапии, чем на исходном уровне.

У десяти пациентов с NPC применяли ацетил-лейцин по 4,5 г в сутки в течение длительного времени. CSS был определен в начале и в разные моменты времени для движения глаз, ходьбы, речи, глотания, мелкой моторики, когнитивных функций, памяти и судорог. Общее значение CSS было рассчитано на исходном уровне и в каждый такой момент времени путем добавления отдельных значений CSS для каждого параметра (движения глаз, ходьбы и т.д.). Количество дней после начала терапии, в которое оценивали CSS, было различным для каждого пациента, как показано в Таблице 25.

Таблица 25. Дни после начала применения ацетил-лейцина, в которые оценивали CSS № пациента Базовый уровень (сутки) Момент времени 2 (сутки) Момент времени 3 (сутки) Момент времени 4 (сутки) 1 0 126 231 2 0 119 200 297 3 0 91 240 4 0 107 196 5 0 78 238 414 6 0 184 238 414 7 0 81 165 8 0 90 217 9 0 400 644 10 0 83

Таблицы 26-34 ниже показывают каждое значение CSS в целом, для движения глаз, ходьбы, речи, глотания, мелкой моторики, когнитивных функций, памяти и судорог, соответственно.

Таблица 26. CSS в целом Шкала клинической тяжести (CSS) № пациента Базовый уровень Момент времени 2 Момент времени 3 Момент времени 4 1 11 11 10 2 33 33 33 33 3 13 12 11 4 13 13 10 5 12 12 12 12 6 21 23 21 21 7 19 19 19 8 13 12 11 9 22 22 21 10 14 11

Таблица 27. CSS движения глаз Шкала клинической тяжести (CSS) № пациента Базовый уровень Момент времени 2 Момент времени 3 Момент времени 4 1 3 3 3 2 3 3 3 3 3 3 3 3 4 2 2 2 5 3 3 3 3 6 3 3 3 3 7 3 3 3 8 3 3 2 9 3 3 3 10 3 3

Таблица 28. CSS ходьбы Шкала клинической тяжести (CSS) № пациента Базовый уровень Момент времени 2 Момент времени 3 Момент времени 4 1 2 2 1 2 5 5 5 5 3 1 1 1 4 2 2 1 5 1 1 1 1 6 2 4 2 2 7 2 2 2 8 1 1 1 9 2 2 2 10 2 2

Таблица 29. CSS речи Шкала клинической тяжести (CSS) № пациента Базовый уровень Момент времени 2 Момент времени 3 Момент времени 4 1 1 1 1 2 2 2 2 2 3 1 1 1 4 2 2 1 5 1 1 1 1 6 2 2 2 2 7 1 1 1 8 1 1 1 9 2 2 2 10 1 1

Таблица 30. CSS глотания Шкала клинической тяжести (CSS) № пациента Базовый уровень Момент времени 2 Момент времени 3 Момент времени 4 1 0 0 0 2 4 4 4 4 3 2 2 2 4 2 2 2 5 2 2 2 2 6 3 3 3 3 7 3 3 3 8 2 2 2 9 3 3 3 10 2 2

Таблица 31. CSS мелкой моторики Шкала клинической тяжести (CSS) № пациента Базовый уровень Момент времени 2 Момент времени 3 Момент времени 4 1 1 1 1 2 5 5 5 5 3 2 1 1 4 1 1 1 5 1 1 1 1 6 4 4 4 4 7 2 2 2 8 2 1 1 9 4 4 4 10 1 1

Таблица 32. CSS когнитивных функций Шкала клинической тяжести (CSS) № пациента Базовый уровень Момент времени 2 Момент времени 3 Момент времени 4 1 3 3 3 2 5 5 5 5 3 3 3 3 4 3 3 3 5 3 3 3 3 6 4 4 4 4 7 4 4 4 8 3 3 3 9 4 4 4 10 3 2

Таблица 33. CSS памяти Шкала клинической тяжести (CSS) № пациента Базовый уровень Момент времени 2 Момент времени 3 Момент времени 4 1 1 1 1 2 4 4 4 4 3 1 1 0 4 1 1 0 5 1 1 1 1 6 3 3 3 3 7 4 4 4 8 1 1 1 9 4 4 3 10 2 0

Таблица 34. CSS судорог Шкала клинической тяжести (CSS) № пациента Базовый уровень Момент времени 2 Момент времени 3 Момент времени 4 1 0 0 0 2 5 5 5 5 3 0 0 0 4 0 0 0 5 0 0 0 0 6 0 0 0 0 7 0 0 0 8 0 0 0 9 0 0 0 10 0 0

ASIS на исходном уровне и каждый момент времени рассчитывали с использованием CSS каждого пациента и возраста на момент оценки. Общее значение ASIS для каждого пациента в каждый момент времени показано ниже в Таблице 35.

Таблица 35. ASIS в целом Шкала годового повышения тяжести заболевания (ASIS) Базовый уровень Момент времени 2 Момент времени 3 Момент времени 4 0,381371618 0,376864272 0,339262493 1,94125463 1,904748736 1,880675612 1,852636028 0,65 0,592617631 0,53250497 0,481909063 0,476731928 0,363469002 0,433188377 0,429874461 0,423232908 0,416160273 0,561964246 0,607297766 0,552333117 0,545420607 0,536675431 0,533334614 0,529913714 0,486750384 0,445200609 0,402903129 0,738624874 0,71243018 0,665646967 0,595597228 0,406038403

Как показано в Таблице 26 и на Фигуре 10А, ни у одного из десяти пациентов не наблюдалось общего увеличения CSS в течение эксперимента. Пациент 6 продемонстрировал увеличение CSS между базовым уровнем и моментом времени 2, но вернулся к базовому уровню на момент времени 3 и оставался там в момент времени 4. У четырех из десяти пациентов (пациентов 2, 5, 6 и 7) отмечено постоянное значение CSS в ходе эксперимента, что свидетельствует о том, что болезнь у этих людей не прогрессировала. Шесть из десяти пациентов (пациенты 1, 3, 4, 8, 9 и 10) показали снижение CSS в ходе эксперимента, что указывает на то, что заболевание не прогрессировало и фактически стало менее тяжелым. Улучшения были замечены в различных параметрах: Пациент 1: ходьба; Пациент 3: мелкая моторика; Пациент 4: ходьба и речь; Пациент 8: движение глаз и мелкая моторика; Пациент 9: память; Пациент 10: когнитивные функции. Данные, представленные на Фигурах 11A-11J, показывают параметры CSS для каждого пациента, соответственно, в форме гистограммы.

Как показано в Таблице 35 и на Фигуре 10B, у всех десяти пациентов во время лечения наблюдалось снижение ASIS относительно ASIS в начале исследования. У пациентов 2, 5, 6 и 7 CSS оставался неизменным, в то время как возраст увеличивался, что приводило к небольшому снижению ASIS. У пациентов 1, 3, 4, 8, 9 и 10 снижение ASIS было выражено больше из-за снижения CSS при увеличении возраста.

Пример 20

Мышиная модель болезни Ниманна-Пика типа C (NPC) разделяет ряд патологических признаков с болезнью Альцгеймера (БА), как описано в настоящей заявке. У мышей NPC1-/- дикого типа применяли ацетил-DL-лейцин (0,1 г/кг массы тела ежедневно) с 3-недельного возраста. Мышей умерщвляли в возрасте 8 недель. Уровни C-концевых фрагментов белка-предшественника амилоида (APP-CTF) оценивали относительно уровней общего белка-предшественника амилоида (APP) в мозжечке для мышей дикого типа, не получавших лечение мышей NPC1-/- дикого типа и получавших лечение ацетил-лейцином мышей NPC1-/- дикого типа. Уровни конъюгата ассоциированного с микротрубочками белка 1A/1B - легкой цепи-3 - фосфатидилэтаноламина (LC3-II) также оценивали относительно уровней контроля нагрузки тубулином для мышей дикого типа, не получавших лечения мышей NPC1-/- дикого типа и получавших лечение ацетил-лейцином мышей NPC1-/- дикого типа.

Данные APP-CTF показаны на Фигуре 12А. Данные воспроизвели ранее отмеченное накопление APP-CTF в мозге мышей NPC1. Лечение ацетил-dl-лейцином было связано со снижением APP-CTF.

Данные LC3-II показаны на Фигуре 12B. Данные воспроизвели ранее отмеченное накопление LC3-II в мозге мышей NPC1. Лечение ацетил-dl-лейцином было связано со снижением LC3-II, что свидетельствует о частичном восстановлении аутофагического потока.

Заключение

Лечение ацетил-лейцином было связано с улучшением патологии БА в мозге мышей NPC1.

Пример 21

Клетки яичника китайского хомячка (СНО) NPC обрабатывали in vitro в течение 72 часов 1 мМ ацетил-DL-лейцином, ацетил-L-лейцином, ацетил-D-лейцином, DL-лейцином, L-лейцином и D-лейцином, соответственно. Относительный лизосомальный объем определяли количественно с помощью LysoTracker.

У СНО клеток NPC наблюдали повышенные уровни флуоресценции LysoTracker по сравнению с контролями дикого типа, что указывает на увеличение лизосомального объема патологического фенотипа.

Обработка СНО клеток NPC каждым из ацетил-DL-лейцина, ацетил-L-лейцина, ацетил-D-лейцина, DL-лейцина, L-лейцина и D-лейцина значительно снижала объем лизосом в клетках. Данные, представленные на Фигуре 14, показывают результаты для каждой обработки, с объемом лизосом, выраженным в виде кратности изменения, по сравнению с необработанными фибробластами дикого типа. Звездочки (**) указывают значение р <0,01 по сравнению с необработанными клетками без NPC1.

Данные показывают, что лейцин и ацетил-лейцин продемонстрировали сходную активность in vitro, и оба были связаны с исправлением нарушенного лизосомального хранения путем уменьшения объема лизосом и, таким образом, непосредственно корректировали фенотип лизосомальных болезней накопления.

Пример 22

Пациент 1

Пациентом в этом исследовании была 55-летняя женщина со слабостью проксимальных отделов нижних конечностей. У нее был парез сгибателей головы, медленно прогрессирующий с 42 лет, и ей был поставлен диагноз (генетически подтвержденный) миотонической дистрофии 2-го типа. После консультации в возрасте 55 лет она не сообщала о сенсорных симптомах, но жаловалась на синдром беспокойных ног ночью и во время отдыха днем, отмеченный в течение последних двух лет. Предварительное лечение агонистом дофамина не дало облегчения симптомов. Активность креатинкиназы в сыворотке была незначительно повышена до 400 МЕ/л. Пациентка была обследована с использованием диагностического индекса СБН (RLS-DI) (см. Walters et al., Sleep Med 2003; 4 (2): 121-132;). Показатель по Международной шкале оценки синдрома беспокойных ног пациентки (IRLS) составил 36, и, таким образом, был диагностирован тяжелый СБН. Пациентка начала лечение ацетил-DL-лейцином в дозе 3 г в сутки в течение первой недели с последующей дозой 5 г в сутки в течение второй недели. В течение 14 дней приема ацетил-DL-лейцина IRLS снизился до 26, а еще через 5 недель IRLS снизился до 9. Прерывание через 4 недели лечения после 12 недель лечения увеличило IRLS до 28. Повторное введение лечения повторно снизило показатель до 8 через 2 недели. Продолжение лечения более 22 недель стабилизировало показатель IRLS на уровне 8.

Пациент 2

Пациентом в этом случае было 72-летняя женщина с проксимальных отделов нижних конечностей. У нее был парез сгибателей головы, медленно прогрессирующий с 48 лет, и ей был поставлен диагноз (генетически подтвержденный) миотонической дистрофии 2 типа 15 лет назад. После консультации в возрасте 72 лет она не сообщила о каких-либо сенсорных симптомах, но жаловалась на синдром беспокойных ног ночью и во время отдыха в течение дня, возникающий в течение последних восьми лет. Предварительное лечение агонистом дофамина, L-допой, прегабалином и опиоидами не дало постоянного ослабления симптомов. Активность креатинкиназы в сыворотке была слегка повышена до 300 МЕ/л. Результаты анализа железа и всех дополнительных лабораторных параметров были нормальными. Пациентка была обследована с использованием RLS-DI, и IRLS пациентки составил 32, и, таким образом, был диагностирован СБН от умеренной до тяжелой степени. Пациентка начала лечение ацетил-DL-лейцином в дозе 3 г в сутки в течение первой недели с последующей дозой 5 г в сутки в течение второй недели. В течение 14 дней приема ацетил-DL-лейцина IRLS снизился до 22, а еще через 5 недель IRLS снизился до 7. Продолжение лечения в течение более 28 недель стабилизировало показатель IRLS на уровне 8.

Пациент 3

В этом исследовании пациентом был 73-летний мужчина, у которого умеренная слабость проксимальных отделов верхних и нижних конечностей медленно прогрессировала с 50 лет. У пациента была диагностирована (генетически подтверждена) миопатия Мак-Ардля примерно 16 лет назад. После консультации в возрасте 73 лет он не сообщал о сенсорных симптомах, но жаловался на сильную усталость и снижение выносливости. Пациент также сообщил о синдроме беспокойных ног ночью и в периоды отдыха в течение дня, возникающих в течение последних 12 лет. Предварительное лечение агонистом дофамина, L-допа, прегабалином не сопровождалась длительным облегчением симптомов. Активность креатинкиназы сыворотки была слегка повышена до 200 МЕ/л; однако у пациента было 5 эпизодов рабдомиолиза в течение последних 20 лет. Повторные результаты анализа железа и всех дополнительных лабораторных исследований были нормальными. Пациент был обследован с использованием RLS-DI, и IRLS пациента составил 34, и, таким образом, был диагностирован тяжелый СБН. Пациент начал лечение ацетил-DL-лейцином в дозе 3 г в сутки в течение первой недели, затем в дозе 5 г в сутки в течение второй недели. В течение 21 дня приема ацетил-DL-лейцина IRLS снизился до 20, а еще через 10 недель IRLS снизился до 10. Продолжение лечения в течение более 30 недель стабилизировало показатель IRLS на уровне 10. Кроме того, у пациента снизилась утомляемость (Шкала тяжести утомляемости: от 9 (минимум) до 63 (максимум)) от 53 до 28.

Похожие патенты RU2763425C2

название год авторы номер документа
ТЕРАПЕВТИЧЕСКИЕ СРЕДСТВА ПРОТИВ НЕЙРОДЕГЕНЕРАТИВНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ 2017
  • Штруп, Михаэль
RU2756519C2
ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ КОМПОЗИЦИИ И ПРИМЕНЕНИЯ ПРОТИВ ЛИЗОСОМНЫХ БОЛЕЗНЕЙ НАКОПЛЕНИЯ 2017
  • Штруп, Михаэль
RU2749515C2
ДЕЙТЕРИРОВАННЫЕ АНАЛОГИ АЦЕТИЛЛЕЙЦИНА 2019
  • Манн, Мичико
RU2810793C2
ЛЕЙЦИН, АЦЕТИЛЛЕЙЦИН И РОДСТВЕННЫЕ АНАЛОГИ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ЗАБОЛЕВАНИЯ 2020
  • Фэктор, Мэллори
  • Филдс, Тейлор
RU2815373C2
ТЕРАПЕВТИЧЕСКИЕ АГЕНТЫ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ СИНДРОМА БЕСПОКОЙНЫХ НОГ 2019
  • Фэктор, Мэллори
  • Штруп, Михаэль
RU2802288C2
АЦЕТИЛ-ЛЕЙЦИН ИЛИ ЕГО ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИ ПРИЕМЛЕМАЯ СОЛЬ ДЛЯ УЛУЧШЕНИЯ ДВИГАТЕЛЬНОЙ ФУНКЦИИ И КОГНИТИВНОЙ ФУНКЦИИ 2017
  • Фэктор, Мэллори
  • Штруп, Михаэль
RU2745912C2
ЛЕЧЕНИЕ МИГРЕНИ 2018
  • Штруп, Михаэль
  • Фэктор, Мэллори
RU2772278C2
КОМБИНАЦИИ АЦЕТИЛЛЕЙЦИНА ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ГОЛОВОКРУЖЕНИЯ 2017
  • Сыров Кирилл Константинович
  • Нестерук Владимир Викторович
  • Замерград Максим Валерьевич
RU2680413C1
ИНГИБИТОРЫ DPP-IV ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ НЕЙРОДЕГЕНЕРАЦИИ И КОГНИТИВНЫХ РАССТРОЙСТВ 2005
  • Хьюз Томас Эдуард
RU2394570C2
СПОСОБЫ ЛЕЧЕНИЯ МИТОХОНДРИАЛЬНЫХ НАРУШЕНИЙ 2000
  • Навиокс Роберт К.
RU2268732C2

Иллюстрации к изобретению RU 2 763 425 C2

Реферат патента 2021 года ТЕРАПЕВТИЧЕСКИЕ АГЕНТЫ ДЛЯ НЕЙРОДЕГЕНЕРАТИВНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ

Изобретение относится к применению лейцина, ацетил-лейцина или их фармацевтически приемлемых солей для лечения синдрома беспокойных ног. 3 н. и 8 з.п. ф-лы, 14 ил., 35 табл., 22 пр.

Формула изобретения RU 2 763 425 C2

1. Применение лейцина, ацетил-лейцина или их фармацевтически приемлемой соли в способе лечения синдрома беспокойных ног (СБН) у субъекта с нейродегенеративным заболеванием.

2. Применение по п.1, где нейродегенеративное заболевание представляет собой паркинсонизм.

3. Применение по п.1, где нейродегенеративное заболевание представляет собой болезнь двигательных нейронов.

4. Применение по п.1, где нейродегенеративное заболевание представляет собой болезнь Паркинсона.

5. Применение по п.1, где нейродегенеративное заболевание связано с дисфункцией дофаминергической системы.

6. Применение по п.1, где нейродегенеративное заболевание связано с лизосомальной дисфункцией.

7. Применение лейцина, ацетил-лейцина или их фармацевтически приемлемой соли в способе лечения синдрома беспокойных ног (СБН) у субъекта, нуждающегося в этом, где СБН представляет собой нейродегенеративное заболевание.

8. Применение по любому из пп.1-7, где лейцин представляет собой DL-лейцин, или ацетил-лейцин представляет собой ацетил-DL-лейцин.

9. Применение по любому из пп.1-7, где лейцин или ацетил-лейцин имеет энантиомерный избыток L-энантиомера или D-энантиомера.

10. Применение по любому из пп.1-9, включающее введение ацетил-лейцина субъекту, нуждающемуся в этом, в терапевтически эффективном количестве примерно от 1 г до 15 г в сутки, примерно от 1 г до 10 г в сутки, примерно от 1,5 г до 7 г в сутки, примерно от 4 г до 6 г в сутки или примерно от 4 г до 5 г в сутки.

11. Применение ацетил-лейцина или его фармацевтически приемлемой соли в способе лечения синдрома беспокойных ног (СБН) у субъекта с нейродегенеративным заболеванием.

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2021 года RU2763425C2

WO 2011151685 A1, 08.12.2011
ЛЕЧЕНИЕ ИЛИ ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ СИНДРОМА БЕСПОКОЙНЫХ НОГ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ПРОЛЕКАРСТВ АНАЛОГОВ ГАМК 2004
  • Баррет Рональд В.
  • Кенафакс Даниель М.
RU2458049C2
ROMAN SCHNIEPP et al., "Acetyl-DL-leucine improves gait variability in patients with cerebellar ataxia-a case series", CEREBELLUM & ATAXIAS, 2016/04/12, vol
Переносная печь для варки пищи и отопления в окопах, походных помещениях и т.п. 1921
  • Богач Б.И.
SU3A1
TATIANA BREMOVA et al., "Acetyl-DL-leucine in Niemann-Pick type C: A case

RU 2 763 425 C2

Авторы

Фэктор, Мэллори

Даты

2021-12-29Публикация

2018-02-15Подача