НОВЫЙ ПЕПТИД И ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЙ СОСТАВ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ГЛАЗНОГО ЗАБОЛЕВАНИЯ, СОДЕРЖАЩИЙ ПЕПТИД В КАЧЕСТВЕ АКТИВНОГО ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОГО ИНГРЕДИЕНТА Российский патент 2022 года по МПК C07K7/06 A61K38/08 A61P27/02 

Область техники

Настоящее изобретение относится к новым пептидам и фармацевтическим композициям для лечения глазных заболеваний, которые содержат их в качестве активного фармацевтического ингредиента.

Уровень техники

Синдром сухого глаза или сухой кератоконъюктивит можно в общем описать как повреждение глазной поверхности из-за нарушений слезной секреции (Joossen C et al., Exp. Eye Res., 146: 172-8, 2016). Синдром сухого глаза, как известно, вызывает нарушение слезной секреции, и повреждение и дискомфорт глазного яблока вследствие комбинации различных факторов. Хотя возникновение синдрома сухого глаза тесно связано с возрастом, его частота увеличивается и в более молодых возрастных группах вследствие длительного воздействия сухой среды, например, использования контактных линз, компьютеров и интеллектуальных устройств (Stern ME et al., Int. Rev. Immunol., 32: 19-41, 2013).

В частности, при синдроме сухого глаза снижается секреция слизи эпителием роговицы и конъюнктивы, а также секреция слизи бокаловидными клетками, что приводит к резкому снижению увлажнения глазного яблока. Кроме того, синдром сухого глаза вызывает повреждение поверхности роговицы, тем самым увеличивая проникновение флуоресцеинового красителя в роговицу. Эти симптомы синдрома сухого глаза можно оценить по изменению секреции слезы в тесте Ширмера, в котором используется бумага с хлоридом кобальта. Кроме того, повреждение роговицы, которое может сопровождать синдром сухого глаза, может быть легко оценено с использованием обычного флуоресцентного красителя и флуорофотометра с щелевой лампой.

Между тем, большинство методов лечения синдрома сухого глаза ограничиваются симптоматической терапией, эффективность лечения которой часто очень низка. В настоящее время искусственная слеза являются средством первого выбора для лечения синдрома сухого глаза. В общем, искусственная слеза в качестве репрезентативной симптоматической терапии просто восполняет недостаточность слезной жидкости; кроме того, недостаток искусственных слез заключается в необходимости их частого введения в глаза (Kim CS et al., Nutrients 8. pii: E750, 2016). Для использования у пациентов, страдающих синдромом сухого глаза, были разработаны капли с гиалуронатом натрия и полученные из аутологичной сыворотки глазные капли. Кроме того, были разработаны и используются такие синтетические соединения, как ребамипид (OPC-127959) и диквафозол натрия, которые способствуют секреции слез и слизи. Однако длительное использование этих препаратов может вызывать различные побочные эффекты, такие как гиперемия глаз и кальцификация роговицы (Bernauer W et al., Br. J. Ophthalmol., 90: 285-8, 2006). Поэтому, существует потребность в разработке безопасного и эффективного терапевтического средства для лечения синдрома сухого глаза.

[Описание изобретения]

Проблема, решаемая изобретением

Вследствие этого, авторы настоящего изобретения попытались разработать безопасные и эффективные терапевтические агенты для лечения заболевания глаз, и в результате завершили настоящее изобретение путем синтеза новых пептидов, введения их в глаза крыс с синдромом сухого глаза и подтверждения эффекта защиты глаз с помощью теста Ширмера и теста накопления флуоресцентного красителя.

Средства для решения проблемы

Для достижения цели настоящего изобретения в одном аспекте настоящего изобретения предложено соединение, представленное формулой 1.

Кроме того, другой аспект настоящего изобретения относится к пептиду, имеющему аминокислотную последовательность, представленную HyP-Gly-Gln-Xaa-Gly-Leu-Ala-Gly-Pro-Lys.

Кроме того, еще один аспект настоящего изобретения относится к пептиду, имеющему аминокислотную последовательность, представленную HyP-Gly-Gln-Asp-Xaa-Leu-Ala-Gly-Pro-Lys.

Кроме того, еще один аспект настоящего изобретения относится к пептиду, имеющему аминокислотную последовательность, представленную HyP-Gly-Gln-Leu-Gly-Leu-Ala-Gly-Pro-Xaa.

Кроме того, еще один аспект настоящего изобретения относится к пептиду, имеющему аминокислотную последовательность, представленную PD-Gly-Gln-Leu-Gly-Leu-Ala-Gly-Pro-Lys.

Кроме того, еще один аспект настоящего изобретения относится к пептиду, имеющему любую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из Ala-Gly-Gln-Leu-Gly-Leu-Ala-Gly-Pro-Lys, Hyp-Gly-Gln-Leu-Gly-Leu-Ala-Gly-Ala-Lys, HyP-Gly-Gln-Leu-Gly-Leu-Ala, HyP-Gly-Gln-Glu-Gly-Leu-Gly, HyP-Gly-Gln-Leu-Gly-Leu, _D-HyP(2R,4S)-Gly-_D-Gln-_D-Leu-Gly-_D-Leu, HyP-Gly-Gln-Leu-Gly, HyP-Gly-Gln-_D-Leu-Gly и _D-HyP(2R,4S)-Gly-Gln-Leu-Gly.

Кроме того, еще один аспект настоящего изобретения относится к соединению, представленному формулой 8.

Кроме того, еще один аспект настоящего изобретения относится к соединению, представленному формулой 10.

Кроме того, еще один аспект настоящего изобретения относится к фармацевтической композиции для лечения заболевания глаз, которая включает соединение или пептид в качестве активного фармацевтического ингредиента.

Кроме того, еще один аспект настоящего изобретения относится к способу лечения заболевания глаз, который включает введение соединения или пептида субъекту.

Эффекты изобретения

Когда новый пептид по настоящему изобретению вводят в глаз, он увеличивает секрецию слезы и способствует восстановлению поврежденной роговицы. Поэтому, их можно эффективно использовать в качестве терапевтических средств для лечения глазных заболеваний.

Краткое описание чертежей

Фиг.1 представляет собой диаграмму, показывающую последовательность и характеристики пептидов, полученных в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения.

Фиг.2 представляет собой диаграмму, показывающую процесс синтеза пептидов, полученных в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения.

Фиг.3 представляет собой диаграмму, показывающую процедуру очистки пептидов, полученных в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения.

Фиг.4 представляет собой диаграмму, подтверждающую чистоту YDE-001, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ВЭЖХ.

Фиг.5 представляет собой диаграмму, подтверждающую чистоту YDE-002, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ВЭЖХ.

Фиг.6 представляет собой диаграмму, подтверждающую чистоту YDE-003, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ВЭЖХ.

Фиг.7 представляет собой диаграмму, подтверждающую чистоту YDE-004, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ВЭЖХ.

Фиг.8 представляет собой диаграмму, подтверждающую чистоту YDE-005, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ВЭЖХ.

Фиг.9 представляет собой диаграмму, подтверждающую чистоту YDE-006, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ВЭЖХ.

Фиг.10 представляет собой диаграмму, подтверждающую чистоту YDE-007, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ВЭЖХ.

Фиг.11 представляет собой диаграмму, подтверждающую чистоту YDE-008, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ВЭЖХ.

Фиг.12 представляет собой диаграмму, подтверждающую чистоту YDE-009, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ВЭЖХ.

Фиг.13 представляет собой диаграмму, подтверждающую чистоту YDE-010, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ВЭЖХ.

Фиг.14 представляет собой диаграмму, подтверждающую чистоту YDE-011, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ВЭЖХ.

Фиг.15 представляет собой диаграмму, подтверждающую чистоту YDE-012, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ВЭЖХ.

Фиг.16 представляет собой диаграмму, подтверждающую чистоту YDE-013, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ВЭЖХ.

Фиг.17 представляет собой диаграмму, подтверждающую чистоту YDE-014, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ВЭЖХ.

Фиг.18 представляет собой диаграмму, подтверждающую чистоту YDE-015, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ВЭЖХ.

Фиг.19 представляет собой диаграмму, подтверждающую чистоту YDE-016, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ВЭЖХ.

Фиг.20 представляет собой диаграмму, подтверждающую чистоту YDE-017, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ВЭЖХ.

Фиг.21 представляет собой диаграмму, подтверждающую чистоту YDE-018, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ВЭЖХ.

Фиг.22 представляет собой диаграмму, подтверждающую чистоту YDE-019, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ВЭЖХ.

Фиг.23 представляет собой диаграмму, подтверждающую чистоту YDE-020, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ВЭЖХ.

Фиг.24 представляет собой диаграмму, подтверждающую чистоту YDE-021, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ВЭЖХ.

Фиг.25 представляет собой диаграмму, подтверждающую чистоту YDE-022, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ВЭЖХ.

Фиг.26 представляет собой диаграмму, подтверждающую чистоту YDE-023, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения посредством ВЭЖХ.

Фиг.27 представляет собой диаграмму, подтверждающую чистоту YDE-024, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ВЭЖХ.

Фиг.28 представляет собой диаграмму, подтверждающую чистоту YDE-025, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ВЭЖХ.

Фиг.29 представляет собой диаграмму, подтверждающую чистоту YDE-026, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ВЭЖХ.

Фиг.30 представляет собой диаграмму, подтверждающую чистоту YDE-027, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ВЭЖХ.

Фиг.31 представляет собой диаграмму, подтверждающую чистоту YDE-028, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ВЭЖХ.

Фиг.32 представляет собой диаграмму, подтверждающую чистоту YDE-029, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ВЭЖХ.

Фиг.33 представляет собой диаграмму, подтверждающую чистоту YDE-030, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ВЭЖХ.

Фиг.34 представляет собой диаграмму, подтверждающую чистоту YDE-031, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения с помощью ВЭЖХ.

Фиг.35 представляет собой диаграмму, подтверждающую чистоту YDE-032, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ВЭЖХ.

Фиг.36 представляет собой диаграмму, подтверждающую чистоту YDE-033, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ВЭЖХ.

Фиг.37 представляет собой диаграмму, подтверждающую чистоту YDE-034, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ВЭЖХ.

Фиг.38 представляет собой диаграмму, подтверждающую чистоту YDE-035, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ВЭЖХ.

Фиг.39 представляет собой диаграмму, подтверждающую чистоту YDE-036, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ВЭЖХ.

Фиг.40 представляет собой диаграмму, подтверждающую чистоту YDE-037, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ВЭЖХ.

Фиг.41 представляет собой диаграмму, подтверждающую чистоту YDE-038, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ВЭЖХ.

Фиг.42 представляет собой диаграмму, подтверждающую чистоту YDE-039, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения с помощью ВЭЖХ.

Фиг.43 представляет собой диаграмму, подтверждающую чистоту YDE-040, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ВЭЖХ.

Фиг.44 представляет собой диаграмму, подтверждающую чистоту YDE-041, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ВЭЖХ.

Фиг.45 представляет собой диаграмму, подтверждающую чистоту YDE-042, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ВЭЖХ.

Фиг.46 представляет собой диаграмму, подтверждающую чистоту YDE-043, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ВЭЖХ.

Фиг.47 представляет собой диаграмму, подтверждающую чистоту YDE-044, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ВЭЖХ.

Фиг.48 представляет собой диаграмму, подтверждающую чистоту YDE-045, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ВЭЖХ.

Фиг.49 представляет собой диаграмму, подтверждающую чистоту YDE-047, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ВЭЖХ.

Фиг.50 представляет собой диаграмму, подтверждающую чистоту YDE-048, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ВЭЖХ.

Фиг.51 представляет собой диаграмму, подтверждающую чистоту YDE-049, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ВЭЖХ.

Фиг.52 представляет собой диаграмму, подтверждающую чистоту YDE-050, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ВЭЖХ.

Фиг.53 представляет собой диаграмму, подтверждающую чистоту YDE-051, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ВЭЖХ.

Фиг.54 представляет собой диаграмму, подтверждающую чистоту YDE-052, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ВЭЖХ.

Фиг.55 представляет собой диаграмму, подтверждающую чистоту YDE-053, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ВЭЖХ.

Фиг.56 представляет собой диаграмму, подтверждающую чистоту YDE-054, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ВЭЖХ.

Фиг.57 представляет собой диаграмму, подтверждающую чистоту YDE-055, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ВЭЖХ.

Фиг.58 представляет собой диаграмму, подтверждающую чистоту YDE-056, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ВЭЖХ.

Фиг.59 представляет собой диаграмму, подтверждающую чистоту YDE-057, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ВЭЖХ.

Фиг.60 представляет собой диаграмму, подтверждающую чистоту YDE-058, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ВЭЖХ.

Фиг.61 представляет собой диаграмму, подтверждающую чистоту YDE-059, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ВЭЖХ.

Фиг.62 представляет собой диаграмму, подтверждающую YDE-060, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ВЭЖХ.

Фиг.63 представляет собой диаграмму, подтверждающую чистоту YDE-064, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ВЭЖХ.

Фиг.64 представляет собой диаграмму, подтверждающую чистоту YDE-066, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ВЭЖХ.

Фиг.65 представляет собой диаграмму, подтверждающую чистоту YDE-072, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ВЭЖХ.

Фиг.66 представляет собой диаграмму, подтверждающую чистоту YDE-073, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ВЭЖХ.

Фиг.67 представляет собой диаграмму, подтверждающую чистоту YDE-074, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ВЭЖХ.

Фиг.68 представляет собой диаграмму, подтверждающую чистоту YDE-075, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ВЭЖХ.

Фиг.69 представляет собой диаграмму, подтверждающую молекулярную массу YDE-001, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ион-масс-спектрометрии.

Фиг.70 представляет собой диаграмму, подтверждающую молекулярную массу YDE-002, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ион-масс-спектрометрии.

Фиг.71 представляет собой диаграмму, подтверждающую молекулярную массу YDE-003, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ион-масс-спектрометрии.

Фиг.72 представляет собой диаграмму, подтверждающую молекулярную массу YDE-004, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ион-масс-спектрометрии.

Фиг.73 представляет собой диаграмму, подтверждающую молекулярную массу YDE-005, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ион-масс-спектрометрии.

Фиг.74 представляет собой диаграмму, подтверждающую молекулярную массу YDE-006, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ион-масс-спектрометрии.

Фиг.75 представляет собой диаграмму, подтверждающую молекулярную массу YDE-007, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ион-масс-спектрометрии.

Фиг.76 представляет собой диаграмму, подтверждающую молекулярную массу YDE-008, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ион-масс-спектрометрии.

Фиг.77 представляет собой диаграмму, подтверждающую молекулярную массу YDE-009, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ион-масс-спектрометрии.

Фиг.78 представляет собой диаграмму, подтверждающую молекулярную массу YDE-010, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ион-масс-спектрометрии.

Фиг.79 представляет собой диаграмму, подтверждающую молекулярную массу YDE-011, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ион-масс-спектрометрии.

Фиг.80 представляет собой диаграмму, подтверждающую молекулярную массу YDE-012, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ион-масс-спектрометрии.

Фиг.81 представляет собой диаграмму, подтверждающую молекулярную массу YDE-013, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ион-масс-спектрометрии.

Фиг.82 представляет собой диаграмму, подтверждающую молекулярную массу YDE-014, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ион-масс-спектрометрии.

Фиг.83 представляет собой диаграмму, подтверждающую молекулярную массу YDE-015, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ион-масс-спектрометрии.

Фиг.84 представляет собой диаграмму, подтверждающую молекулярную массу YDE-016, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ион-масс-спектрометрии.

Фиг.85 представляет собой диаграмму, подтверждающую молекулярную массу YDE-017, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ион-масс-спектрометрии.

Фиг.86 представляет собой диаграмму, подтверждающую молекулярную массу YDE-018, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения посредством ионной массы.

Фиг.87 представляет собой диаграмму, подтверждающую молекулярную массу YDE-019, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ион-масс-спектрометрии.

Фиг.88 представляет собой диаграмму, подтверждающую молекулярную массу YDE-020, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ион-масс-спектрометрии.

Фиг.89 представляет собой диаграмму, подтверждающую молекулярную массу YDE-021, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения посредством ионной массы.

Фиг.90 представляет собой диаграмму, подтверждающую молекулярную массу YDE-022, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ион-масс-спектрометрии.

Фиг.91 представляет собой диаграмму, подтверждающую молекулярную массу YDE-023, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ион-масс-спектрометрии.

Фиг.92 представляет собой диаграмму, подтверждающую молекулярную массу YDE-024, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ион-масс-спектрометрии.

Фиг.93 представляет собой диаграмму, подтверждающую молекулярную массу YDE-025, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ион-масс-спектрометрии.

Фиг.94 представляет собой диаграмму, подтверждающую молекулярную массу YDE-026, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ион-масс-спектрометрии.

Фиг.95 представляет собой диаграмму, подтверждающую молекулярную массу YDE-027, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ион-масс-спектрометрии.

Фиг.96 представляет собой диаграмму, подтверждающую молекулярную массу YDE-028, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ион-масс-спектрометрии.

Фиг.97 представляет собой диаграмму, подтверждающую молекулярную массу YDE-029, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ион-масс-спектрометрии.

Фиг.98 представляет собой диаграмму, подтверждающую молекулярную массу YDE-030, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ион-масс-спектрометрии.

Фиг. 99 представляет собой диаграмму, подтверждающую молекулярную массу YDE-031, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ион-масс-спектрометрии.

Фиг.100 представляет собой диаграмму, подтверждающую молекулярную массу YDE-032, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ион-масс-спектрометрии.

Фиг.101 представляет собой диаграмму, подтверждающую молекулярную массу YDE-033, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ион-масс-спектрометрии.

Фиг.102 представляет собой диаграмму, подтверждающую молекулярную массу YDE-034, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ион-масс-спектрометрии.

Фиг.103 представляет собой диаграмму, подтверждающую молекулярную массу YDE-035, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ион-масс-спектрометрии.

Фиг.104 представляет собой диаграмму, подтверждающую молекулярную массу YDE-036, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ион-масс-спектрометрии.

Фиг.105 представляет собой диаграмму, подтверждающую молекулярную массу YDE-037, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ион-масс-спектрометрии.

Фиг.106 представляет собой диаграмму, подтверждающую молекулярную массу YDE-038, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ион-масс-спектрометрии.

Фиг.107 представляет собой диаграмму, подтверждающую молекулярную массу YDE-039, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ион-масс-спектрометрии.

Фиг.108 представляет собой диаграмму, подтверждающую молекулярную массу YDE-040, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ион-масс-спектрометрии.

Фиг.109 представляет собой диаграмму, подтверждающую молекулярную массу YDE-041, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ион-масс-спектрометрии.

Фиг.110 представляет собой диаграмму, подтверждающую молекулярную массу YDE-042, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ион-масс-спектрометрии.

Фиг.111 представляет собой диаграмму, подтверждающую молекулярную массу YDE-043, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ион-масс-спектрометрии.

Фиг.112 представляет собой диаграмму, подтверждающую молекулярную массу YDE-044, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ион-масс-спектрометрии.

Фиг.113 представляет собой диаграмму, подтверждающую молекулярную массу YDE-045, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ион-масс-спектрометрии.

Фиг.114 представляет собой диаграмму, подтверждающую молекулярную массу YDE-047, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ион-масс-спектрометрии.

Фиг.115 представляет собой диаграмму, подтверждающую молекулярную массу YDE-048, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ион-масс-спектрометрии.

Фиг.116 представляет собой диаграмму, подтверждающую молекулярную массу YDE-049, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ион-масс-спектрометрии.

Фиг.117 представляет собой диаграмму, подтверждающую молекулярную массу YDE-050, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ион-масс-спектрометрии.

Фиг.118 представляет собой диаграмму, подтверждающую молекулярную массу YDE-051, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ион-масс-спектрометрии.

Фиг.119 представляет собой диаграмму, подтверждающую молекулярную массу YDE-052, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ион-масс-спектрометрии.

Фиг.120 представляет собой диаграмму, подтверждающую молекулярную массу YDE-053, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ион-масс-спектрометрии.

Фиг.121 представляет собой диаграмму, подтверждающую молекулярную массу YDE-054, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ион-масс-спектрометрии.

Фиг.122 представляет собой диаграмму, подтверждающую молекулярную массу YDE-055, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ион-масс-спектрометрии.

Фиг.123 представляет собой диаграмму, подтверждающую молекулярную массу YDE-056, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ион-масс-спектрометрии.

Фиг.124 представляет собой диаграмму, подтверждающую молекулярную массу YDE-057, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ион-масс-спектрометрии.

Фиг.125 представляет собой диаграмму, подтверждающую молекулярную массу YDE-058, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ион-масс-спектрометрии.

Фиг.126 представляет собой диаграмму, подтверждающую молекулярную массу YDE-059, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ион-масс-спектрометрии.

Фиг.127 представляет собой диаграмму, подтверждающую молекулярную массу YDE-060, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ион-масс-спектрометрии.

Фиг.128 представляет собой диаграмму, подтверждающую молекулярную массу YDE-064, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ион-масс-спектрометрии.

Фиг.129 представляет собой диаграмму, подтверждающую молекулярную массу YDE-066, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ион-масс-спектрометрии.

Фиг.130 представляет собой диаграмму, подтверждающую молекулярную массу YDE-072, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ион-масс-спектрометрии.

Фиг.131 представляет собой диаграмму, подтверждающую молекулярную массу YDE-073, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ион-масс-спектрометрии.

Фиг.132 представляет собой диаграмму, подтверждающую молекулярную массу YDE-074, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ион-масс-спектрометрии.

Фиг.133 представляет собой диаграмму, подтверждающую молекулярную массу YDE-075, полученного в соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, посредством ион-масс-спектрометрии.

Фиг.134 представляет собой фотографию, показывающую процедуру удаления экстраорбитальной слезной железы.

Фиг.135 представляет собой диаграмму, показывающую изменение массы тела крыс, в глаза которых вводили пептиды YDE-001 - YDE-028.

Фиг.136 представляет собой диаграмму, показывающую изменение массы тела крыс, в глаза которых вводили пептиды YDE-029 - YDE-043.

Фиг.137 представляет собой диаграмму, показывающую процедуру введения агента в глаза крыс.

Фиг.138 представляет собой фотографию, показывающую процедуру измерения количества секретируемой слезы у крыс с использованием бумаги с хлоридом кобальта.

Фиг.139 представляет собой фотографию, показывающую результаты измерения количества секретируемой слезы у крыс, в глаза которых вводили пептиды YDE-001 - YDE-028, с использованием бумаги с хлоридом кобальта.

Фиг.140 представляет собой диаграмму, показывающую изменение объема секретируемой слезы у крыс, в глаза которых вводили пептиды с YDE-001 по YDE-028.

Фиг.141 представляет собой фотографию, показывающую результаты измерения количества секретируемой слезы у крыс, в глаза которых вводили пептиды YDE-029 - YDE-043, с использованием бумаги с хлоридом кобальта.

Фиг.142 представляет собой диаграмму, показывающую изменение объема секретируемой слезы у крыс, в глаза которых вводили пептиды YDE-029 - YDE-043.

Фиг.143 представляет собой фотографию, показывающую процедуру введения флуоресцентного вещества в глаза крыс для подтверждения повреждения их роговицы.

Фиг.144 представляет собой фотографию, показывающую результаты измерения повреждения роговицы у крыс, в глаза которых вводили пептиды YDE-001 - YDE-028, с использованием флуоресцентного вещества.

Фиг.145 представляет собой диаграмму, показывающую проникновение флуоресцентного красителя для подтверждения восстановления повреждения роговицы у крыс, в глаза которых вводили пептиды YDE-001 - YDE-028.

Фиг.146 представляет собой фотографию, показывающую результаты измерения повреждения роговицы у крыс, в глаза которых вводили пептиды YDE-029 - YDE-043, с использованием флуоресцентного вещества.

Фиг.147 представляет собой диаграмму, показывающую проникновению флуоресцентного красителя для подтверждения восстановления повреждения роговицы у крыс, в глаза которых вводили пептиды YDE-029 - YDE-043.

Фиг.148 представляет собой диаграмму, показывающую скорость роста клеток через 48 часов после обработки hEGF эпителиальных клеток роговицы человека из планшета № 1.

Фиг.149 представляет собой диаграмму, показывающую скорость роста клеток через 48 часов после обработки hEGF эпителиальных клеток роговицы человека из планшета № 2.

Фиг.150 представляет собой диаграмму, показывающую скорость роста клеток через 48 часов после обработки hEGF эпителиальных клеток роговицы человека из планшета № 3.

Фиг.151 представляет собой диаграмму, показывающую скорость роста клеток через 48 часов после обработки hEGF эпителиальных клеток роговицы человека из планшета № 4.

Фиг.152 представляет собой диаграмму, показывающую скорость роста клеток через 72 часа после обработки hEGF эпителиальных клеток роговицы человека из планшета № 1.

Фиг.153 представляет собой диаграмму, показывающую скорость роста клеток через 72 часа после обработки hEGF эпителиальных клеток роговицы человека из планшета № 2.

Фиг.154 представляет собой диаграмму, показывающую скорость роста клеток через 72 часа после обработки hEGF эпителиальных клеток роговицы человека из планшета № 3.

Фиг.155 представляет собой диаграмму, показывающую скорость роста клеток через 48 часов после обработки hEGF эпителиальных клеток роговицы человека из планшета № 4.

Фиг.156 представляет собой диаграмму, показывающую скорость роста клеток через (а) 48 часов или (b) 72 часа после обработки YY-101 эпителиальных клеток роговицы человека.

Фиг.157 представляет собой диаграмму, показывающую скорость роста клеток через (а) 48 часов или (b) 72 часа после обработки YY-102 эпителиальных клеток роговицы человека.

Фиг.158 представляет собой диаграмму, показывающую скорость роста клеток через (а) 48 часов или (b) 72 часа после обработки YDE-011 эпителиальных клеток роговицы человека.

Фиг.159 представляет собой диаграмму, показывающую скорость роста клеток через (а) 48 часов или (b) 72 часа после обработки YDE-038 эпителиальных клеток роговицы человека.

Фиг.160 представляет собой диаграмму, показывающую скорость роста клеток через (а) 48 часов или (b) 72 часа после обработки YDE-042 эпителиальных клеток роговицы человека.

Фиг.161 представляет собой диаграмму, показывающую скорость роста клеток через (а) 48 часов или (b) 72 часа после обработки YDE-043 эпителиальных клеток роговицы человека.

Фиг.162 представляет собой диаграмму, показывающую скорость роста клеток через (а) 48 часов или (b) 72 часа после обработки YDE-044 эпителиальных клеток роговицы человека.

Фиг.163 представляет собой диаграмму, показывающую скорость роста клеток через (а) 48 часов или (b) 72 часа после обработки YDE-045 эпителиальных клеток роговицы человека.

Фиг.164 представляет собой диаграмму, показывающую скорость роста клеток через (а) 48 часов или (b) 72 часа после обработки YDE-049 эпителиальных клеток роговицы человека.

Фиг.165 представляет собой диаграмму, показывающую скорость роста клеток через (а) 48 часов или (b) 72 часа после обработки YDE-054 эпителиальных клеток роговицы человека.

Фиг.166 представляет собой диаграмму, показывающую скорость роста клеток через (а) 48 часов или (b) 72 часа после обработки YDE-057 эпителиальных клеток роговицы человека.

Фиг.167 представляет собой диаграмму, показывающую скорость роста клеток через (а) 48 часов или (b) 72 часа после обработки YDE-058 эпителиальных клеток роговицы человека.

Фиг.168 представляет собой диаграмму, показывающую скорость роста клеток через (а) 48 часов или (b) 72 часа после обработки YDE-059 эпителиальных клеток роговицы человека.

Фиг.169 представляет собой диаграмму, показывающую скорость роста клеток через (а) 48 часов или (b) 72 часа после обработки YDE-060 эпителиальных клеток роговицы человека.

Фиг.170 представляет собой диаграмму, показывающую скорость роста клеток через (а) 48 часов или (b) 72 часа после обработки YDE-072 эпителиальных клеток роговицы человека.

Фиг.171 представляет собой диаграмму, показывающую скорость роста клеток через (а) 48 часов или (b) 72 часа после обработки YDE-073 эпителиальных клеток роговицы человека.

Фиг.172 представляет собой диаграмму, показывающую скорость роста клеток через (а) 48 часов или (b) 72 часа после обработки YDE-074 эпителиальных клеток роговицы человека.

Фиг.173 представляет собой диаграмму, показывающую скорость роста клеток через (а) 48 часов или (b) 72 часа после обработки YDE-075 эпителиальных клеток роговицы человека.

Подробное описание изобретения

Далее настоящее изобретение будет описано подробно.

В аспекте настоящего изобретения предложено соединение, представленное формулой 1.

[Формула 1]

В вышеприведенной формуле,

R¹-R³ каждый, независимо друг от друга, представляют собой водород, замещенный или незамещенный C_1-6-алкил, замещенную или незамещенную C_1-10-алкокси-группу, замещенный или незамещенный C_1-10-галогеналкил, замещенный или незамещенный C_2-10-алкенил, замещенный или незамещенный C_2-10-алкинил, замещенную или незамещенную C_1-10-алкиленовую группу, замещенную или незамещенную C_1-10-алкениленовую группу, замещенную или незамещенную C_1-10-алкиниленовую группу, замещенный или незамещенный C_5-12-арил, замещенный или незамещенный C_7-12-арилалкил, замещенный или незамещенный C_5-14-арилалкинил, замещенный или незамещенный C_8-16-арилалкенил, замещенный или незамещенный C_3-10-гетероалкил, замещенный или незамещенный C_3-10-циклоалкил, замещенный или незамещенный C_3-10-гетероциклоалкил или замещенный или незамещенный C_5-12-гетероарил, гетероалкил, гетероциклоалкил или гетероарил, содержащий по меньшей мере один из атомов N, O и S,

причем замещение относится к замене одним или несколькими неводородными заместителями, причем каждый неводородный заместитель выбран из группы, состоящей из -X₁, -R_a, -O^-, =O, -OR_a, -SR_a, -S^-, -N(R_a)₂, -N⁺(R_a)₃, =NR_a, -C(X₁)₃, -CN, -OCN, -SCN, -N=C=O, -NCS, -NO, -NO₂, =N-OH, =N₂, -N₃, -NHC(=O)R_a, -C(=O)R_a, -C(=O)NR_aR_a, -S(=O)₂O^-, -S(=O)₂OH, -S(=O)₂R_a, -OS(=O)₂OR_a, -S(=O)₂NR_a, -S(=O)R_a, -OP(=O)(OR_a)₂, -C(=O)R_a, алкилен-C(=O)R_a, -C(=S)R_a, -C(=O)OR_a, алкилен-C(=O)OR_a, -C(=O)O^-, алкилен-C(=O)O-, -C(=S)OR_a, -C(=O)SR_a, -C(=S)SR_a, -C(=O)NR_aR_a, алкилен-C(=O)NR_aR_a, -C(=S)NR_aR_a и -C(-NR_a)NR_aR_a, каждый X₁ независимо выбран из F, Cl, Br или I, каждый R_a независимо выбран из водорода, C_1-6-алкила, C_5-12-арила, C_7-12-арилалкила или гетероцикла,

R⁴ и R⁵, каждый независимо, представляет собой водород, замещенный или незамещенный C_1-6-алкил, -X₂, -R_b, -O^-, =O, -CH₂OR_b или -OR_b, X₂ представляет собой F, Cl, Br или I, и R_b представляет собой H, замещенный или незамещенный C_1-6-алкил, замещенный или незамещенный C_5-12-арил, замещенный или незамещенный C_7-12-арилалкил или замещенный или незамещенный гетероцикл,

R⁶ представляет собой водород или замещенный или незамещенный C_1-6-алкил, причем заместителем является -C(=O)NH₂,

R⁷ представляет собой водород или C_1-6-алкил, и

R⁸ и R⁹, каждый независимо, представляют собой водород или незамещенный C_1-6-алкил.

В определении R_b замена означает замену неводородным заместителем.

В соответствии с соглашением, используемым в данной области техники, значок в приведенных в настоящем документе формулах используется для обозначения связи, где фрагмент или заместитель присоединен к структуре ядра или остова молекулы.

«Алкил» представляет собой углеводород, имеющий первичные, вторичные, третичные и/или циклические атомы углерода. Например, алкильная группа может иметь от 1 до 20 атомов углерода (например, C₁-C₂₀-алкил), от 1 до 10 атомов углерода (например, C₁-C₁₀-алкил) или от 1 до 6 атомов углерода (например, C₁-C₆-алкил). Примеры подходящей алкильной группы включают метил (Me, -CH₃), этил (Et, -CH₂CH₃), 1-пропил (n-Pr, н-пропил, -CH₂CH₂CH₃), 2-пропил (i-Pr, изо-пропил, -CH(CH₃)₂), 1-бутил (n-Bu, н-бутил, -CH₂CH₂CH₂CH₃), 2-метил-1-пропил (i-Bu, изо-бутил, -CH₂CH(CH₃)₂), 2-бутил (s-Bu, втор-бутил, -CH(CH₃)CH₂CH₃), 2-метил-2-пропил (t-Bu, трет-бутил, -C(CH₃)₃), 1-пентил (н-пентил, -CH₂CH₂CH₂CH₂CH₃), 2-пентил (-CH(CH₃)CH₂CH₂CH₃), 3-пентил (-CH(CH₂CH₃)₂), 2-метил-2-бутил (-C(CH₃)₂CH₂CH₃), 3-метил-2-бутил (-CH(CH₃)CH(CH₃)₂), 3-метил-1-бутил (-CH₂CH₂CH(CH₃)₂), 2-метил-1-бутил (-CH₂CH(CH₃)CH₂CH₃), 1-гексил (-CH₂CH₂CH₂CH₂CH₂CH₃), 2-гексил (-CH(CH₃)CH₂CH₂CH₂CH₃), 3-гексил (-CH(CH₂CH₃)(CH₂CH₂CH₃)), 2-метил-2-пентил (-C(CH₃)₂CH₂CH₂CH₃), 3-метил-2-пентил (-CH(CH₃)CH(CH₃)CH₂CH₃), 4-метил-2-пентил (-CH(CH₃)CH₂CH(CH₃)₂), 3-метил-3-пентил (-C(CH₃)(CH₂CH₃)₂), 2-метил-3-пентил (-CH(CH₂CH₃)CH(CH₃)₂), 2,3-диметил-2-бутил (-C(CH₃)₂CH(CH₃)₂), 3,3-диметил-2-бутил (-CH(CH₃)C(CH₃)₃) и октил (-(CH₂)₇CH₃), но не ограничиваются ими.

«Алкоксигруппа» относится к группе, имеющей формулу -O-алкил, где алкильная группа, описанная выше, присоединена к исходному соединению через атом кислорода. Алкильная часть алкоксигруппы может иметь от 1 до 20 атомов углерода (например, C₁-C₂₀-алкоксигруппа), от 1 до 12 атомов углерода (например, C₁-C₁₂-алкоксигруппа) или от 1 до 6 атомов углерода (например, C₁-C₆-алкоксигруппа). Примеры подходящей алкоксигруппы включают метоксигруппу (-O-CH₃ или -OMe), этоксигруппу (-OCH₂CH₃ или -OEt) и трет-бутоксигруппу (-OC(CH₃)₃ или -O-tBu), но не ограничиваются ими.

«Галогеналкил» представляет собой алкильную группу, в которой по меньшей мере один из атомов водорода алкильной группы, описанной выше, замещен атомом галогена. Алкильная часть галогеналкильной группы может иметь от 1 до 20 атомов углерода (например, C₁-C₂₀-галогеналкил), от 1 до 12 атомов углерода (например, C₁-C₁₂-галогеналкил) или от 1 до 6 атомов углерода (например, C₁-C₆-галогеналкил). Примеры подходящей галогеналкильной группы включают -CF₃, -CHF₂, -CFH₂ и -CH₂CF₃, но не ограничиваются ими.

«Алкенил» представляет собой углеводород, имеющий первичные, вторичные, третичные и/или циклические атомы углерода и имеющий по меньшей мере одну ненасыщенную область, то есть углерод-углеродную sp²-двойную связь. Например, алкенильная группа может иметь от 2 до 20 атомов углерода (например, C₂-C₂₀-алкенил), от 2 до 12 атомов углерода (например, C₂-C₁₂-алкенил) или от 2 до 6 атомов углерода (например, C₂-C₆-алкенил). Примеры подходящей алкенильной группы включают винил (-CH=CH₂), аллил (-CH₂CH=CH₂), циклопентинил (-C₅H₇) и 5-гексенил (-CH₂CH₂CH₂CH₂CH=CH₂), но не ограничиваются ими.

«Алкинил» представляет собой углеводород, имеющий первичные, вторичные, третичные и/или циклические атомы углерода и имеющий по меньшей мере две ненасыщенные области, то есть одну углерод-углеродную sp³-тройную связь. Например, алкинильная группа может иметь от 2 до 20 атомов углерода (например, C₂-C₂₀-алкинил), от 2 до 12 атомов углерода (например, C₂-C₁₂-алкинил) или от 2 до 6 атомов углерода (например, C₂-C₆-алкинил). Примеры подходящей алкинильной группы включают ацетиленовую группу (-C≡CH) и пропаргил (-CH₂C≡CH), но не ограничиваются ими.

«Алкилен» относится к насыщенной углеводородной группе, которая может быть разветвленной, прямой или циклической и имеет две валентности, полученные путем удаления двух атомов водорода из одного и того же атома углерода или двух разных атомов углерода исходного алкана. Например, алкиленовая группа может иметь от 1 до 20 атомов углерода, от 1 до 10 атомов углерода или от 1 до 6 атомов углерода. Примеры типичного алкиленового радикала включают метилен (-CH₂-), 1,1-этилен (-CH(CH₃)-), 1,2-этилен (-CH₂CH₂-), 1,1-пропилен (-CH(CH₂CH₃)-), 1,2-пропилен (-CH₂CH(CH₃)-), 1,3-пропилен (-CH₂CH₂CH₂-) и 1,4-бутилен (-CH₂CH₂CH₂CH₂-), но не ограничиваются ими.

«Алкенилен» относится к ненасыщенной углеводородной группе, которая может быть разветвленной, прямой и/или циклической и имеет две валентности, полученные путем удаления двух атомов водорода из одного и того же атома углерода или двух разных атомов углерода исходного алкена. Например, алкениленовая группа может иметь от 1 до 20 атомов углерода, от 1 до 10 атомов углерода или от 1 до 6 атомов углерода. Примеры типичной алкениленовой группы включают 1,2-этилен (-CH=CH-), но не ограничиваются ими.

«Алкинилен» относится к ненасыщенной углеводородной группе, которая является разветвленной, прямой и/или циклической и имеет две валентности, полученные путем удаления двух атомов водорода из одного и того же атома углерода или двух разных атомов углерода исходного алкина. Например, алкиниленовая группа может иметь от 1 до 20 атомов углерода, от 1 до 10 атомов углерода или от 1 до 6 атомов углерода. Примеры типичного алкиниленового радикала включают ацетиленилен (-C≡C-), пропаргилен (-CH₂C≡C-) и 4-пентинилен (-CH₂CH₂CH₂C≡C-), но не ограничиваются ими.

«Арил» относится к ароматической углеводородной группе, получаемой удалением одного атома водорода из шести атомов углерода исходной ароматической кольцевой системы. Например, арильная группа может иметь от 6 до 20 атомов углерода, от 6 до 14 атомов углерода или от 6 до 12 атомов углерода. Примеры типичной арильной группы включают радикал, полученный из бензола (например, фенил), замещенного бензола, замещенного или незамещенного нафталина, замещенного или незамещенного антрацена, замещенного или незамещенного бифенила и т.п., но не ограничиваются ими.

«Арилалкил» относится к ациклической алкильной группе, в которой один атом водорода, связанный с атомом углерода, как правило, концевым или другим sp3-атомом углерода, замещен арильной группой. Примеры типичной арилалкильной группы включают бензил, 2-фенилэтан-1-ил, нафтилметил, 2-нафтилэтан-1-ил, нафтобензил, 2-нафтофенилэтан-1-ил и т.п. (каждый из которых является замещенным или незамещенным), но не ограничиваются ими. Арилалкильная группа может иметь от 7 до 20 атомов углерода. Например, ее алкильный фрагмент может содержать от 1 до 6 атомов углерода, а ее арильный фрагмент может содержать от 6 до 14 атомов углерода.

«Арилалкенил» относится к ациклическому алкенильному радикалу, в котором один из атомов водорода, связанных с атомом углерода, как правило, концевым атомом или sp3-атомом углерода, хотя sp2-атом углерода также присутствует, замещен арильным радикалом. Арильная группа арилалкенила может представлять собой, например, любую арильную группу, описанную в настоящем документе, а алкенильная группа арилалкенила может включать, например, любую из алкенильных групп, описанных в настоящем документе. Арилалкенильная группа может иметь от 8 до 20 атомов углерода. Например, ее алкенильный фрагмент может содержать от 2 до 6 атомов углерода, а ее арильный фрагмент может содержать от 6 до 14 атомов углерода.

«Циклоалкил» относится к насыщенному моноциклу или полициклу, который содержит только атомы углерода в кольце. Циклоалкильная группа может иметь от 3 до 7 атомов углерода в моноцикле, от 7 до 12 атомов углерода в бицикле и до примерно 20 атомов углерода в полицикле. Моноциклический циклоалкил имеет от 3 до 6 атомов в кольце, более типично, 5 или 6 кольцевых атомов. Бициклический циклоалкил может иметь от 7 до 12 кольцевых атомов, расположенных в бицикло[4,5], [5,5], [5,6] или [6,6] системе, или от 9 до 10 кольцевых атомов, расположенных в бицикло[5,6] или [6,6] системе или в спиральном кольце. Неограничивающие примеры моноциклического циклоалкила включают циклопропил, циклобутил, циклопентил и циклогексил (каждый из которых может быть замещенным или незамещенным).

«Арилалкинил» относится к ациклической алкинильной группе, в которой один из атомов водорода, связанных с атомом углерода, обычно концевой или другой sp3-атом углерода, хотя также может использоваться sp-атом углерода, замещен арильной группой. Арильная часть арилалкинила может представлять собой, например, любую арильную группу, описанную в настоящем документе, а алкинильная часть арилалкинила может включать, например, любую из алкинильных групп, описанных в настоящем документе. Арилалкинильная группа может иметь от 8 до 20 атомов углерода. Например, ее алкинильный фрагмент может содержать от 2 до 6 атомов углерода, а ее арильный фрагмент может содержать от 6 до 14 атомов углерода.

Термин «замещенный» в отношении алкила, алкилена, арила, арилалкила, гетероциклила и т.п., например, «замещенный алкил», «замещенный алкилен», «замещенный арил», «замещенный арилалкил», «замещенный гетероциклил» и «замещенный карбоциклил (например, замещенный циклоалкил)» означает, что по меньшей мере один водородный атом алкила, алкилена, арила, арилалкила, гетероциклила или карбоциклила (например, циклоалкила), каждый независимо, замещен неводородным заместителем. Примеры типичного заместителя включают -X, -R, -O^-, =O, -OR, -SR, -S^-, -NR₂, -N⁺R₃, =NR, -C(X)₃, -CN, -OCN, -SCN, -N=C=O, -NCS, -NO, -NO₂, =N-OH, =N₂, -N₃, -NHC(=O)R, -C(=O)R, -C(=O)NRR, -S(=O)₂O^-, -S(=O)₂OH, -S(=O)₂R, -OS(=O)₂OR, -S(=O)₂NR, -S(=O)R, -OP(=O)(OR)₂, -C(=O)R, алкилен-C(=O)R, -C(S)R, -C(=O)OR, алкилен-C(=O)OR, -C(=O)O^-, алкилен-C(=O)O-, -C(=S)OR, -C(=O)SR, -C( =S)SR, -C(=O)NRR, алкилен-C(=O)NRR, -C(=S)NRR и -C(-NR)NRR, где каждый X независимо представляет собой галоген, такой как F, Cl, Br или I, а R независимо представляет собой H, алкил, арил, арилалкил или гетероцикл, но не ограничивается ими. Алкиленовые, алкениленовые и алкиниленовые группы также могут быть замещены аналогичным образом.

Для специалистов в данной области будет очевидно, что когда фрагмент, такой как «алкил», «арил», «гетероциклил» и т.п., замещен по меньшей мере одним заместителем, он необязательно может назваться «алкиленом», «ариленом», «гетероциклиленом» и т.п. (то есть, по меньшей мере один атом водорода исходного «алкильного», «арильного» или «гетероциклильного» фрагмента замещен заместителем, описанным в настоящем документе). Если «алкильный», «арильный», «гетероциклильный» фрагмент и т.п. описан в настоящем документе как «замещенный» или изображен на чертежах как замещенный (или необязательно замещенный, например, число заместителей равно 0 или положительному числу), то термин «алкил», «арил», «гетероциклил» и т.п. следует понимать как взаимозаменяемый с «алкиленом», «ариленом», «гетероциклиленом» и т.п.

Специалистам в данной области техники будет очевидно, что заместители и другие фрагменты соединения формулы 1 следует выбирать так, чтобы обеспечить соединение, которое является достаточно стабильным в качестве фармацевтически полезного соединения, которое может быть введено в приемлемо стабильную фармацевтическую композицию. Подразумевается, что соединение формулы 1, имеющее такую стабильность, входит в объем настоящего изобретения.

«Гетероалкил» относится к алкильной группе, в которой по меньшей мере один атом углерода замещен гетероатомом, таким как О, N или S. Например, если атом углерода алкильной группы, присоединенной к исходной молекуле, замещен гетероатомом (например, O, N или S), полученная гетероалкильная группа может представлять собой алкоксигруппу (например, -OCH₃), аминогруппу (например, -NHCH₃, -N(CH₃)₂ и т.п.) или тиоалкильную группу (например, -SCH₃), соответственно. Если неконцевой атом углерода алкильной группы, который не присоединен к исходной молекуле, замещен гетероатомом (например, O, N или S), получающаяся в результате гетероалкильная группа может представлять собой простой алкиловый эфир (например, -CH₂CH₂-O-CH₃ и т.п.), алкиламин (например, -CH₂NHCH₃, -CH₂N(CH₃)₂ и т.п.) или тиоалкиловый эфир (например, -CH₂-S-CH₃) соответственно. Если концевой атом углерода алкильной группы замещен гетероатомом (например, O, N или S), получающаяся в результате гетероалкильная группа может быть гидроксиалкильной группой (например, -CH₂CH₂-OH), аминоалкильной группой (например, -CH₂NH₂) или алкилтиольной группой (например, -CH₂CH₂-SH), соответственно. Например, гетероалкильная группа может иметь от 1 до 20 атомов углерода, от 1 до 10 атомов углерода или от 1 до 6 атомов углерода. С₁-С₆-гетероалкильная группа относится к гетероалкильной группе, имеющей от 1 до 6 атомов углерода.

Термин «гетероцикл» или «гетероциклил», используемый в данном документе, включает описанные в документах, таких как Paquette, Leo A., Principles of Modern Heterocyclic Chemistry (W. A. Benjamin, New York, 1968), в частности в главах 1, 3, 4, 6, 7 и 9; серия монографий «The Chemistry of Heterocyclic Compounds», (John Wiley & Sons, New York, с 1950 г. по настоящее время), в частности, в томах 13, 14, 16, 19 и 28; и J. Am. Chem. Soc. (1960) 82:5566, но не ограничиваются этим. В конкретном варианте осуществления настоящего изобретения «гетероцикл» включает «карбоцикл», описанный в настоящем документе, в котором по меньшей мере один (например, 1, 2, 3 или 4) атом углерода замещен гетероатомом (например, O, N, или S). Термин «гетероцикл» или «гетероциклил» включает насыщенные, частично ненасыщенные и ароматические кольца (то есть гетероароматическое кольцо). Замещенный гетероцикл, например, включает гетероциклическое кольцо, замещенное любым из заместителей, раскрытых в настоящем документе, включая карбонильную группу.

Примеры гетероциклов включают пиридил, дигидропиридил, тетрагидропиридил (пиперидил), тиазолил, тетрагидротиофенил, S-окисленный тетрагидротиофенил, пиримидинил, фуранил, тиенил, пирролил, пиразолил, имидазолил, тетразолил, бензофуранил, тианафталенил, индолил, индоленил, хинолинил, изохинолинил, бензимидазолил, пиперидинил, 4-пиперидинил, пирролидинил, 2-пирролидонил, пирролинил, тетрагидрофуранил, тетрагидрохинолинил, тетрагидроизохинолинил, декагидрохинолинил, октагидроизохинолинил, азоцинил, триазинил, 6Н-1,2,5-тиадиазинил, 2Н,6Н-1,5,2-дитиазинил, тиенил, тиантренил, пиранил, изобензофуранил, хроменил, ксантенил, феноксатинил, 2H-пирролил, изотиазолил, изоксазолил, пиразинил, пиридазинил, индолизинил, изоиндолил, 3H-индолил, 1H-индазинилцингексол, винилхлорид, винилхлорид хиназолинил, циннолинил, фтеридинил, 4aH-карбазолил, карбазолил, β-карболинил, фенантридинил, акридинил, пиримидинил, фенантролинил, феназинил, фенотиазинил, фуразанил, феноксазинил, изохроманил, хроманил, имидазолидинил, имидазолинил, пиразолидинил, пиразолинил, пиперазинил, индолинил, изоиндолинил, хинуклидинил, морфолинил, оксазолидинил, бензотриазолил, бензизоксазолил, оксиндолил, бензоксазолинил, изотиноил и бис-тетрагидрофуранил (каждый из которых может быть замещенным или незамещенным), но не ограничиваются ими.

В качестве примера, связанный с углеродом гетероцикл может быть связан во 2-м, 3-м, 4-м, 5-м или 6-м положении пиразина, в 3-м, 4-м, 5-м или 6-м положении пиридазина, во 2-м, 4-м, 5-м или 6-м положении пиримидина во 2-м, 3-м, 5-м или 6-м положении пиразина, во 2-м, 3-м, 4-м или 5-м положении фурана, тетрагидрофурана, тиофурана, тиофена, пиррола или тетрагидропиррола, во 2-м, 4-м или 5-м положении оксазола, имидазола или тиазола, в 3-м, 4-м или 5-м положении изоксазола, пиразола или изотиазола, во 2-м или 3-м положении азиридина, во 2-м, 3-м или 4-м положении азетидина, во 2-м, 3-м, 4-м, 5-м, 6-м, 7-м или 8-м положении хинолина или в 1-м, 3-м, 4-м, 5-м, 6-м, 7-м или 8-м положении изохинолина, но не ограничивается этим. Более типичные примеры углерод-связанного гетероцикла включают 2-пиридил, 3-пиридил, 4-пиридил, 5-пиридил, 6-пиридил, 3-пиридазинил, 4-пиридазинил, 5-пиридазинил, 6-пиридазинил, 2-пиримидинил, 4-пиримидинил, 5-пиримидинил, 6-пиримидинил, 2-пиразинил, 3-пиразинил, 5-пиразинил, 6-пиразинил, 2-тиазолил, 4-тиазолил и 5-тиазолил (каждый из которых может быть замещенным или незамещенным).

В качестве примера, связанный с азотом гетероцикл может быть связан в 1-м положении азиридина, азетидина, пиррола, пирролидина, 2-пирролина, 3-пирролина, имидазола, имидазолидина, 2-имидазолина, 3-имидазолина, пиразола, пиразолина, 2-пиразолина, 3-пиразолина, пиперидина, пиперазина, индола, индолина или 1H-индазола, во 2-м положении изоиндола или изоиндолина, в 4-м положении морфолина и в 9-м положении карбазола или β-карболина (каждый из которых может быть замещенным или незамещенным), но он не ограничивается этим. Более типичные примеры связанного с азотом гетероцикла включают 1-азиридинил, 1-азетидил, 1-пирролил, 1-имидазолил, 1-пиразолил и 1-пиперидинил (каждый из которых может быть замещенным или незамещенным).

«Гетероциклилалкил» относится к ациклическому алкильному радикалу, в котором один атом водорода, связанный с атомом углерода, обычно концевым или sp3-атомом углерода, замещен гетероциклильным радикалом (то есть гетероциклилалкиленовым фрагментом). Примеры типичной гетероциклилалкильной группы включают гетероциклил-CH₂-, 2-(гетероциклил)этан-1-ил и т.п., но не ограничиваются этим. Используемый в настоящем изобретении «гетероциклильный» фрагмент включает те, что описаны в документе, таком как «Принципы современной гетероциклической химии», и любую гетероциклильную группу, описанную выше. Специалистам в данной области будет очевидно, что если получающаяся группа является химически стабильной, то гетероциклильная группа может быть присоединена к алкильной части гетероциклилалкила через углерод-углеродную связь или углерод-гетероатомную связь. Гетероциклилалкильная группа может иметь от 2 до 20 атомов углерода. Например, алкильная часть гетероциклилалкильной группы может содержать от 1 до 6 атомов углерода, а ее гетероциклильная часть может содержать от 1 до 14 атомов углерода. Примеры гетероциклилалкила включают 5-членный гетероцикл, содержащий серу, кислород и/или азот, такой как тиазолилметил, 2-тиазолилэтан-1-ил, имидазолилметил, оксазолилметил, тиадиазолилметил и т.п.; и 6-членный гетероцикл, содержащий серу, кислород и/или азот, такой как пиперидинилметил, пиперазинилметил, морфолинилметил, пиридинилметил, пиридазилметил, пиримидилметил, пиразинилметил и т.п. (каждый из которых может быть замещенным или незамещенным), но не ограничиваются ими.

«Гетероциклилалкенил» относится к ациклическому алкенильному радикалу, в котором один из атомов водорода, связанных с атомом углерода, обычно концевой или sp3-атом углерода (хотя также может использоваться sp2-атом углерода), замещен гетероциклильным радикалом (то есть гетероциклилалкениленовый фрагмент). Гетероциклильная часть гетероциклилалкенильной группы включает группы, описанные в документе, такие как «Принципы современной гетероциклической химии», и любую гетероциклильную группу, описанную в настоящем документе. Алкенильная часть гетероциклилалкенильной группы включает любую алкенильную группу, описанную в настоящем документе. Специалисты в данной области поймут, что если получающаяся группа является химически стабильной, гетероциклильная группа может быть присоединена к алкенильному фрагменту гетероциклилалкенила через углерод-углеродную связь или углерод-гетероатомную связь. Гетероциклилалкенильная группа может иметь от 3 до 20 атомов углерода. Например, алкенильный фрагмент гетероциклилалкенильной группы может содержать от 2 до 6 атомов углерода, а его гетероциклильный фрагмент может содержать от 1 до 14 атомов углерода.

«Гетероциклилалкинил» относится к ациклическому алкинильному радикалу, в котором один из атомов водорода, связанных с атомом углерода, обычно концевой или sp3-атом углерода (хотя также может использоваться sp-атом углерода), замещен гетероциклильным радикалом (т.е. гетероциклил-алкиниленовый фрагмент). Гетероциклильная часть гетероциклилалкинильной группы включает группы, описанные в документе, таком как «Принципы современной гетероциклической химии», и любую гетероциклильную группу, описанную в настоящем документе. Алкинильная часть гетероциклилалкинильной группы включает любую алкинильную группу, описанную в настоящем документе. Специалисты в данной области поймут, что если получающаяся группа является химически стабильной, гетероциклильная группа может быть присоединена к алкинильной части гетероциклилалкинила через углерод-углеродную связь или углерод-гетероатомную связь. Гетероциклилалкинильная группа может иметь от 3 до 20 атомов углерода. Например, алкинильная часть гетероциклилалкинильной группы может содержать от 2 до 6 атомов углерода, а ее гетероциклильная часть может содержать от 1 до 14 атомов углерода.

«Гетероарил» относится к ароматическому гетероциклилу, содержащему по меньшей мере один гетероатом в кольце. Неограничивающие примеры подходящего гетероатома, который может содержаться в ароматическом кольце, включают кислород, серу и азот. Неограничивающие примеры гетероарильного кольца включают все те, которые перечислены в определении «гетероциклил» в данном документе, включая пиридинил, пирролил, оксазолил, индолил, изоиндолил, фуринил, фуранил, тиенил, бензофуранил, бензотиофенил, карбазолил, имидазолил, имидазолил изоксазолил, пиразолил, изотиазолил, хинолил, изохинолил, пиридазил, пиримидил, пиразил и т.п. (каждый из которых может быть замещенным или незамещенным).

«Карбоцикл» или «карбоциклил» относится к насыщенному, частично ненасыщенному или ароматическому кольцу, имеющему от 3 до 7 атомов углерода в моноцикле, от 7 до 12 атомов углерода в бицикле и до примерно 20 атомов углерода в полицикле. Моноциклический карбоцикл имеет от 3 до 6 кольцевых атомов, более типично 5 или 6 кольцевых атомов. Бициклический карбоцикл имеет от 7 до 12 кольцевых атомов, расположенных в бицикло[4.5], [5.5], [5.6] или [6.6] системе, или от 9 до 10 кольцевых атомов, расположенных в бицикло[5.6] или [6.6] системе. Примеры моноциклического или бициклического карбоцикла включают циклопропил, циклобутил, циклопентил, 1-циклопент-1-енил, 1-циклопент-2-енил, 1-циклопент-3-енил, циклогексил, 1-циклогекс-1-енил, 1- циклогекс-2-енил, 1-циклогекс-3-енил, фенил и нафтил (каждый из которых может быть замещенным или незамещенным).

«Ацил» относится к -C(=O)-алкилу, -C(=O)-карбоциклу (который является замещенным или незамещенным) и -C(=O)-гетероциклу (который является замещенным или незамещенным), где описание алкильного, карбоциклического или гетероциклического фрагмента приведены в данном документе. Неограничивающие примеры «ацила» включают -C(=O)CH₃, -C(=O)CH₂CH₃, -C(=O)CH(CH₃)₂, -C(=O)C(CH₃)₃, -C(=O)-фенил (который является замещенным или незамещенным), -C(=O)-циклопропил (который является замещенным или незамещенным), -C(=O)-циклобутил (который является замещенным или незамещенным), -C(=O)-циклопентил (который является замещенным или незамещенным), -C(=O)-циклогексил (который является замещенным или незамещенным) и -C(=O)-пиридил (который является замещенным или незамещенным).

«Арилгетероалкил» относится к гетероалкилу, описанному в данном документе, где атом водорода (который может быть присоединен либо к атому углерода, либо к гетероатому) замещен арильной группой, описанной в данном документе. Если полученная группа является химически стабильной, арильная группа может быть присоединена к атому углерода гетероалкильной группы или гетероатому гетероалкильной группы. Например, арилгетероалкильная группа может иметь формулу -алкилен-O-арил, -алкилен-O-алкилен-арил, алкилен-NH-арил, -алкилен-NH-алкилен-арил, алкилен-S-арил, -алкилен-S-алкилен-арил и т.п. Кроме того, любой алкиленовый фрагмент в приведенных выше формулах может быть дополнительно замещен любым из заместителей, описанных или приведенных в качестве примера в настоящем документе.

«Гетероарилалкил» относится к алкильной группе, описанной в данном документе, где атом водорода замещен гетероарильной группой, описанной в данном документе. Неограничивающие примеры гетероарилалкила включают -CH₂-пиридинил, -CH₂-пирролил, -CH₂-оксазолил, -CH₂-индолил, -CH₂-изоиндолил, -CH₂-фуринил, -CH₂-фуранил, -CH₂-тиенил, -CH₂-бензофуранил, -CH₂-бензотиофенил, -CH₂-карбазолил, -CH₂-имидазолил, -CH₂-тиазолил, -CH₂-изоксазолил, -CH₂-пиразолил, -CH₂-изотиазолил, -CH₂-хинолил, -CH₂-изохинолил, -CH₂-пиридазил, -CH₂-пиримидил, -CH₂-пиразил, -CH(CH₃)-пиридинил, -CH(CH₃)-пирролил, -CH(CH₃)-оксазолил, -CH(CH₃)-индолил, -CH(CH₃) -изоиндолил, -CH(CH₃)-фуринил, -CH(CH₃)-фуранил, -CH(CH₃)-тиенил, -CH(CH₃)-бензофуранил, -CH(CH₃)-бензотиофенил, -CH(CH₃)-карбазолил, -CH(CH₃)-имидазолил, -CH(CH₃)-тиазолил, -CH(CH₃)-изоксазолил, -CH(CH₃)-пиразолил, -CH(CH₃)-изотиазолил, -CH(CH₃)-хинолил, -CH(CH₃)-изохинолил, -CH(CH₃)-пиридазил, -CH(CH₃)-пиримидил, -CH(CH₃)-пиразил и т.п.

«Силилокси» относится к группе -O-SiR₃, где R включает алкил, арил (который является замещенным или незамещенным), гетероарил (который является замещенным или незамещенным) или их комбинацию. Неограничивающие примеры силилоксигрупп включают -O-Si(CH₃)₃, -O-Si(CH₃)₂tBu, -O-Si(tBu)₂CH₃, -O-Si(tBu)₃, -O-Si(CH₃)₂Ph, -O-Si(Ph)₂CH₃ и -O-Si(Ph)₃.

Термин «необязательно замещенный» относится к конкретному фрагменту (например, необязательно замещенной арильной группе) соединения формулы 1, который имеет один, два или более заместителей.

Термин «сложный эфир соединения» относится к любому сложному эфиру соединения, в котором любая функциональная группа -COOH молекулы замещена на функциональную группу -COOR, или любая функциональная группа -OH молекулы замещена на -C(=O)OR. В настоящем документе R-группа сложного эфира может представлять собой любую углеродсодержащую группу, образующую стабильную эфирную группу, которая включает, но не ограничивается ими, алкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, циклоалкилалкил, арил, арилалкил, гетероциклил, гетероциклилалкил и их замещенные производные. Примеры сложного эфира могут также включать сложный эфир, такой как описанный выше, «таутомерного енола», описанного ниже.

В настоящем изобретении соединение, представленное приведенной выше формулой 1, может представлять собой оптический изомер типа L или D.

Соединение, представленное вышеуказанной формулой 1, может быть представлено формулой 1-1, когда R² представляет собой H, R³ представляет собой , R⁴ представляет собой -OH, R⁵ представляет собой H, R⁶ представляет собой , R⁷ представляет собой , R⁸ представляет собой H, и R⁹ представляет собой H. Кроме того, соединение, представленное нижеследующей формулой 1-1, может представлять собой оптический изомер типа L или D.

[Формула 1-1]

R¹ может быть выбран из группы, состоящей из замещенного или незамещенного C_1-6-алкила, , , , , , , , и . В настоящем документе n может быть целым числом от 1 до 10, но не ограничиваться этим. R_a может представлять собой водород или C_1-6-алкил.

В частности, R¹ может быть выбран из группы, состоящей из , , , , , , , , , , , , , , , , и .

Более конкретно, соединение может представлять собой соединение, описанное в таблице 1 ниже.

[Таблица 1]

Соединение, представленное вышеуказанной формулой 1, может быть представлено формулой 1-2, когда R¹ представляет собой , R³ представляет собой , R⁴ представляет собой -OH, R⁵ представляет собой H, R⁶ представляет собой , R⁷ представляет собой , R⁸ представляет собой H, и R⁹ представляет собой H. Кроме того, соединение, представленное нижеследующей формулой 1-2, может представлять собой оптический изомер типа L или D.

[Формула 1-2]

Кроме того, R² может быть выбран из группы, состоящей из водорода, замещенного или незамещенного C_1-6-алкила, , , и . В настоящем документе n может быть целым числом от 1 до 10, но не ограничивается ими. R_a может представлять собой водород или C_1-6-алкил.

В частности, R² может быть выбран из группы, состоящей из , , , , , , , , , и .

Более конкретно, соединение может представлять собой соединение, описанное в таблице 2 ниже.

[Таблица 2]

YDE-015 SEQ ID NO: 21 YDE-016 SEQ ID NO: 22 YDE-017 SEQ ID NO: 23 YDE-018 SEQ ID NO: 24 YDE-019 SEQ ID NO: 25 YDE-020 SEQ ID NO: 26 YDE-021 SEQ ID NO: 27 YDE-022 SEQ ID NO: 28 YDE-023 SEQ ID NO: 29 YDE-024 SEQ ID NO: 30

Соединение, представленное вышеуказанной формулой 1, может быть представлено формулой 1-3, когда R³ представляет собой , R⁴ представляет собой -OH, R⁵ представляет собой H, R⁶ представляет собой , R⁷ представляет собой , R⁸ представляет собой H, и R⁹ представляет собой H. Кроме того, соединение, представленное нижеследующей формулой 1-3, может представлять собой оптический изомер типа L или D.

[Формула 1-3]

R¹ может представлять собой C_1-6-алкил. В частности, R¹ может представлять собой .

R² может представлять собой C_1-6-алкил. В частности, R² может представлять собой .

Более конкретно, соединение может представлять собой соединение, описанное в таблице 3 ниже.

[Таблица 3]

YDE-051 SEQ ID NO: 32

Соединение, представленное вышеуказанной формулой 1, может быть представлено формулой 1-4, когда R¹ представляет собой , R² представляет собой H, R⁴ представляет собой -OH, R⁵ представляет собой H, R⁶ представляет собой , R⁷ представляет собой , R⁸ представляет собой H, и R⁹ представляет собой H. Кроме того, соединение, представленное нижеследующей формулой 1-4, может представлять собой оптический изомер типа L или D.

[Формула 1-4]

R³ может быть выбран из группы, состоящей из замещенного или незамещенного C_1-6-алкила, , , и . В настоящем документе n может быть целым числом от 1 до 10, но не ограничиваться этим. R_a может представлять собой водород или C_1-6-алкил.

Более конкретно, R³ может быть выбран из группы, состоящей из , , , , и .

Более конкретно, соединение может представлять собой соединение, описанное в таблице 4 ниже.

[Таблица 4]

YDE-029 SEQ ID NO: 33 YDE-030 SEQ ID NO: 34 YDE-031 SEQ ID NO: 35 YDE-032 SEQ ID NO: 36 YDE-033 SEQ ID NO: 37 YDE-056 SEQ ID NO: 38 YDE-073 SEQ ID NO: 39

Соединение, представленное вышеуказанной формулой 1, может быть представлено формулой 1-5, когда R¹ представляет собой , R² представляет собой H, R³ представляет собой , R⁶ представляет собой , R⁷ представляет собой , R⁸ представляет собой H, и R⁹ представляет собой H. Кроме того, соединение, представленное нижеследующей формулой 1-5, может представлять собой оптический изомер типа L или D.

[Формула 1-5]

R⁴ и R⁵ могут независимо друг от друга быть выбраны из группы, состоящей из замещенного или незамещенного C_1-6-алкила, -OR_b, =O, -CH₂OR_b и -X₂. В настоящем документе, X₂ может представлять собой независимо галоген, такой F, Cl, Br или I. R_b может представлять собой водород или C_1-6-алкил.

Более конкретно, R⁴ может быть выбран из группы, состоящей из H, -OH, =O, -CH₂OR_b и F; в этом случае, R⁵ может представлять собой H. Кроме того, R⁴ может представлять собой CH₃; в этом случае, R⁵ может представлять собой CH₃.

Более конкретно, соединение может представлять собой соединение, описанное в таблице 5 ниже.

[Таблица 5]

YDE-034 SEQ ID NO: 63 YDE-035 SEQ ID NO: 40 YDE-036 SEQ ID NO: 41 YDE-037 SEQ ID NO: 42 YDE-038 SEQ ID NO: 43 YDE-039 SEQ ID NO: 44 YDE-040 SEQ ID NO: 45 YDE-044 SEQ ID NO: 46 YDE-045 SEQ ID NO: 47

Соединение, представленное вышеуказанной формулой 1, может быть представлено формулой 1-6, когда R² представляет собой H, R³ представляет собой , R⁴ представляет собой -OH, R⁵ представляет собой H, R⁷ представляет собой , R⁸ представляет собой H, и R⁹ представляет собой H. Кроме того, соединение, представленное нижеследующей формулой 1-6, может представлять собой оптический изомер типа L или D.

[Формула 1-6]

R¹ может представлять собой C_1-6-алкил. Более конкретно, R¹ может представлять собой .

R⁶ может представлять собой замещенный или незамещенный C_1-6-алкил, где заместитель может представлять собой -C(=O)NH₂. Более конкретно, R⁶ может представлять собой или .

Более конкретно, соединение может представлять собой соединение, описанное в таблице 6 ниже.

[Таблица 6]

YDE-049 SEQ ID NO: 48

Соединение, представленное вышеуказанной формулой 1, может быть представлено формулой 1-7, когда R² представляет собой H, R³ представляет собой , R⁴ представляет собой -OH, R⁵ представляет собой H, R⁶ представляет собой , R⁸ представляет собой H, и R⁹ представляет собой H. Кроме того, соединение, представленное нижеследующей формулой 1-7, может представлять собой оптический изомер типа L или D.

[Формула 1-7]

R¹ может представлять собой C_1-6-алкил. Более конкретно, R¹ может представлять собой .

R⁷ может представлять собой незамещенный C_1-6-алкил. Более конкретно, R⁷ может представлять собой или .

Более конкретно, соединение может представлять собой соединение, описанное в таблице 7 ниже.

[Таблица 7]

YDE-052 SEQ ID NO: 49

Соединение, представленное вышеуказанной формулой 1, может быть представлено формулой 1-8, когда R² представляет собой H, R³ представляет собой , R⁴ представляет собой -OH, R⁵ представляет собой H, R⁶ представляет собой , R⁷ представляет собой , и R⁹ представляет собой H. Кроме того, соединение, представленное нижеследующей формулой 1-8, может представлять собой оптический изомер типа L или D.

[Формула 1-8]

R¹ может представлять собой C_1-6-алкил. Более конкретно, R¹ может представлять собой .

R⁸ может представлять собой водород или C_1-6-алкил. Более конкретно, R⁸ может представлять собой или .

Более конкретно, соединение может представлять собой соединение, описанное в таблице 8 ниже.

[Таблица 8]

YDE-054 SEQ ID NO: 50

Соединение, представленное вышеуказанной формулой 1, может быть представлено формулой 1-9, когда R² представляет собой H, R³ представляет собой , R⁴ представляет собой -OH, R⁵ представляет собой H, R⁶ представляет собой , R⁷ представляет собой , и R⁸ представляет собой H. Кроме того, соединение, представленное нижеследующей формулой 1-9, может представлять собой оптический изомер типа L или D.

[Формула 1-9]

R¹ может представлять собой C_1-6-алкил. Более конкретно, R¹ может представлять собой .

R⁹ может представлять собой водород или C_1-6-алкил. Более конкретно, R⁹ может представлять собой или .

Более конкретно, соединение может представлять собой соединение, описанное в таблице 9 ниже.

[Таблица 9]

YDE-048 SEQ ID NO: 51 YDE-072 SEQ ID NO: 53

Соединение, представленное вышеуказанной формулой 1, может быть представлено формулой 1-10, когда R² представляет собой H, R⁴ представляет собой -OH, R⁵ представляет собой H, R⁶ представляет собой , R⁷ представляет собой , и R⁸ представляет собой H. Кроме того, соединение, представленное нижеследующей формулой 1-10, может представлять собой оптический изомер типа L или D.

[Формула 1-10]

R¹ может представлять собой C_1-6-алкил. Более конкретно, R¹ может представлять собой .

В этом случае R³ может представлять собой C_1-6-алкил. Более конкретно, R³ может представлять собой .

В этом случае R⁹ может представлять собой C_1-6-алкил. Более конкретно, R⁹ может представлять собой .

Более конкретно, соединение может представлять собой соединение, описанное в таблице 10 ниже.

[Таблица 10]

YDE-074 SEQ ID NO: 52

Соединения, представленные приведенными выше формулами с 1-1 по 1-10, могут быть любыми, выбранными из группы, состоящей из HyP-Gly-Gln-Glu-Gly-Leu-Ala-Gly-Pro-Lys, HyP-Gly-Gln-Asn-Gly-Leu-Ala-Gly-Pro-Lys, HyP-Gly-Gln-Gln-Gly-Leu-Ala-Gly-Pro-Lys, HyP-Gly-Gln-His-Gly-Leu-Ala-Gly-Pro-Lys, HyP-Gly-Gln-Lys-Gly-Leu-Ala-Gly-Pro-Lys, HyP-Gly-Gln-Ser-Gly-Leu-Ala-Gly-Pro-Lys, HyP-Gly-Gln-Thr-Gly-Leu-Ala-Gly-Pro-Lys, HyP-Gly-Gln-Ala-Gly-Leu-Ala-Gly-Pro-Lys, HyP-Gly-Gln-Val-Gly-Leu-Ala-Gly-Pro-Lys, HyP-Gly-Gln-Ile-Gly-Leu-Ala-Gly-Pro-Lys, HyP-Gly-Gln-Leu-Gly-Leu-Ala-Gly-Pro-Lys, HyP-Gly-Gln-Phe-Gly-Leu-Ala-Gly-Pro-Lys, HyP-Gly-Gln-Tyr-Gly-Leu-Ala-Gly-Pro-Lys, HyP-Gly-Gln-Trp-Gly-Leu-Ala-Gly-Pro-Lys, HyP-Gly-Gln-Ser(гомо)-Gly-Leu-Ala-Gly-Pro-Lys, HyP-Gly-Gln-Asp(Me)-Gly-Leu-Ala-Gly-Pro-Lys, HyP-Gly-Gln-Asn(Me)-Gly-Leu-Ala-Gly-Pro-Lys, _D-HyP(2R,4S)-Gly-Gln-Leu-Gly-Leu-Ala-Gly-Pro-Lys, _D-Hyp(2R,4S)-Gly-_D-Gln-_D-Leu-Gly-_D-Leu-_D-Ala-Gly-_D-Pro-_D-Lys, _D-Hyp(2R, 4R)-Gly-_D-Gln-_D-Leu-Gly-_D-Leu-_D-Ala-Gly-_D-Pro-_D-Lys,

HyP-Gly-Gln-Asp-Val-Leu-Ala-Gly-Pro-Lys, HyP-Gly-Gln-Asp-Ile-Leu-Ala-Gly-Pro-Lys, HyP-Gly-Gln-Asp-Leu-Leu-Ala-Gly-Pro-Lys, HyP-Gly-Gln-Asp-Ala-Leu-Ala-Gly-Pro-Lys, HyP-Gly-Gln-Asp-Phe-Leu-Ala-Gly-Pro-Lys, HyP-Gly-Gln-Asp-Tyr-Leu-Ala-Gly-Pro-Lys, HyP-Gly-Gln-Asp-Trp-Leu-Ala-Gly-Pro-Lys, HyP-Gly-Gln-Asp-His-Leu-Ala-Gly-Pro-Lys, HyP-Gly-Gln-Asp-Ser-Leu-Ala-Gly-Pro-Lys, HyP-Gly-Gln-Asp-Thr-Leu-Ala-Gly-Pro-Lys, HyP-Gly-Gln-Leu-Ala-Leu-Ala-Gly-Pro-Lys,

HyP-Gly-Gln-Leu-Gly-Leu-Ala-Gly-Pro-Tyr, HyP-Gly-Gln-Leu-Gly-Leu-Ala-Gly-Pro-Leu, HyP-Gly-Gln-Leu-Gly-Leu-Ala-Gly-Pro-Glu, HyP-Gly-Gln-Leu-Gly-Leu-Ala-Gly-Pro-Gln, HyP-Gly-Gln-Leu-Gly-Leu-Ala-Gly-Pro-Nle(6-OH), HyP-Gly-Gln-Leu-Gly-Leu-Ala-Gly-Pro-Ala, _D-HyP(2R,4S)-Gly-Gln-Leu-Gly-Leu-Ala-Gly-Pro-Ala,

Hyp(2S,4S)-Gly-Gln-Leu-Gly-Leu-Ala-Gly-Pro-Lys, (4-оксо)Pro-Gly-Gln-Leu-Gly-Leu-Ala-Gly-Pro-Lys, (5-оксо)Pro-Gly-Gln-Leu-Gly-Leu-Ala-Gly-Pro-Lys, Pro-Gly-Gln-Leu-Gly-Leu-Ala-Gly-Pro-Lys, (4-гидрокси-Me)Pro-Gly-Gln-Leu-Gly-Leu-Ala-Gly-Pro-Lys, (4-фтор)Pro-Gly-Gln-Leu-Gly-Leu-Ala-Gly-Pro-Lys, (4-диметил)Pro-Gly-Gln-Leu-Gly-Leu-Ala-Gly-Pro-Lys, (4-Me)Pro-Gly-Gln-Leu-Gly-Leu-Ala-Gly-Pro-Lys, (5-Me)Pro-Gly-Gln-Leu-Gly-Leu-Ala-Gly-Pro-Lys,

Hyp-Gly-Ala-Leu-Gly-Leu-Ala-Gly-Pro-Lys, Hyp-Gly-Gln-Leu-Gly-Ala-Ala-Gly-Pro-Lys, Hyp-Gly-Gln-Leu-Gly-Leu-Ala-Ala-Pro-Lys, Hyp-Ala-Gln-Leu-Gly-Leu-Ala-Gly-Pro-Lys, _D-Hyp(2R,4S)-Ala-Gln-Leu-Gly-Leu-Ala-Gly-Pro-Lys и _D-Hyp(2R,4S)-Ala-Gln-Leu-Gly-Leu-Ala-Gly-Pro-Ala.

Другой аспект настоящего изобретения относится к пептиду, имеющему аминокислотную последовательность, представленную HyP-Gly-Gln-Xaa-Gly-Leu-Ala-Gly-Pro-Lys. В настоящем документе Xaa может быть выбран из группы, состоящей из Glu, Asn, Gln, His, Lys, Ser, Thr, Ala, Val, Ile, Leu, Phe, Tyr, Trp, гомо-Ser, Asp (Me) и Asn (Me).

Пептид может быть вариантом производного пептида коллагена типа II α1. Коллаген типа II α1 может быть выделен из внеклеточного матрикса, полученного из хондроцитов животных.

Термин «пептид», используемый в настоящем изобретении, относится к соединению, в котором две или большее число аминокислот связаны пептидной связью. Кроме того, в зависимости от количества составляющих аминокислот пептиды подразделяются на дипептиды, трипептиды, тетрапептиды и т.п. Олигопептид имеет около 10 или меньшее число пептидных связей, а полипептид имеет множество пептидных связей. Кроме того, пептид по настоящему изобретению включает мутированный пептид, в котором его аминокислотный остаток является замещенным.

Термин «HyP», используемый в настоящем изобретении, относится к аминокислоте, называемой гидроксипролином, в которой гидроксильная группа (-OH) связана с атомом углерода в положении 4 пролина. HyP имеет структуру C₅H₉NO₃ и может быть представлена нижеследующей формулой 2.

[Формула 2]

HyP может включать все изомеры. Кроме того, HyP может представлять собой изомер со стереохимией «2S,4R», если не указано иное.

Термин «2S,4R» относится к R, S-номенклатуре, с помощью которой указывают стереохимическую конфигурацию хиральной молекулы. Типичная хиральная молекула имеет хиральный центр, такой как асимметричный атом углерода. Поскольку хиральный центр имеет четыре различные группы заместителей (или замещающих атомов), их приоритет определяется заранее определенной процедурой. Как только порядок четырех заместителей определен с помощью цифр (1), (2), (3) и (4), то заместитель самого низкого порядка (4) располагается как можно дальше от наблюдателя, а остальные заместители располагаются от высшего порядка к низшему. Буква R (или прямой на латинском языке, правый) указывает расположение, в котором последовательность (1) - (2) - (3) поворачивает направо. S (или левосторонний, левый) указывает расположение, в котором эта последовательность поворачивается влево.

Термином «гомо-Ser», используемым в настоящем изобретении, обозначается гомосерин и относится к α-аминокислоте, имеющей гидроксильную группу в боковой цепи. Гомо-Ser не является аминокислотой, входящей в состав белок, а представляет собой промежуточное звено в биосинтезе треонина и метионина в микроорганизмах и растениях. Гомо-Ser может иметь следующую Формулу 3.

[Формула 3]

Термин «Asp(Me)», используемый в настоящем изобретении, обозначает аминокислоту, в которой атом водорода гидроксильной группы (OH), связанный с атомом углерода в положении 4 аспарагиновой кислоты, замещен метильной группой (CH₃). Asp(Me) может иметь следующую формулу 4.

[Формула 4]

Термин «Asn(Me)», используемый в настоящем изобретении, обозначает аминокислоту, в которой атом водорода аминогруппы (NH₂), связанный с атомом углерода в положении 4 аспарагина, замещен метильной группой (CH₃), Asn(Me) может иметь следующую Формулу 5.

[Формула 5]

В дополнение, еще один аспект настоящего изобретения относится к пептиду, имеющему аминокислотную последовательность, представленную HyP-Gly-Gln-Asp-Xaa-Leu-Ala-Gly-Pro-Lys. В настоящем документе Xaa может быть выбран из группы, состоящей из Val, Ile, Leu, Ala, Phe, Tyr, Trp, Ser, Thr и (N-Me)Gly.

Термин «(N-Me)Gly», используемый в настоящем изобретении, обозначает аминокислоту, в которой атом водорода аминогруппы (NH₂), связанный с атомом углерода в положении 2 глицина, замещен метильной группой (СН₃). (N-Me)Gly может иметь следующую формулу 6.

[Формула 6]

Еще один аспект настоящего изобретения относится к пептиду, имеющему аминокислотную последовательность, представленную HyP-Gly-Gln-Leu-Gly-Leu-Ala-Gly-Pro-Xaa. В настоящем документе Xaa может быть выбран из группы, состоящей из Tyr, Leu, Glu, Gln, Ala и Nle(6-OH).

Термин «Nle(6-ОН)», используемый в настоящем изобретении, относится к аминокислоте, в которой гидроксильная группа (-ОН) связана с атомом углерода в положении 6 норлейцина. Nle(6-OH) имеет структуру C₅H₁₁NO₃ и может быть представлен следующей формулой 7.

[Формула 7]

Еще один аспект настоящего изобретения относится к пептиду, имеющему аминокислотную последовательность, представленную PD-Gly-Gln-Leu-Gly-Leu-Ala-Gly-Pro-Lys. В настоящем документе PD может быть любым, выбранным из группы, состоящей из следующих формул.

Еще один аспект настоящего изобретения относится к пептиду, имеющему любую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из Ala-Gly-Gln-Leu-Gly-Leu-Ala-Gly-Pro-Lys (SEQ ID NO: 54), Hyp-Gly-Gln-Leu-Gly-Leu-Ala-Gly-Ala-Lys (SEQ ID NO: 55), HyP-Gly-Gln-Leu-Gly-Leu-Ala (SEQ ID NO: 56), HyP-Gly-Gln-Glu-Gly-Leu-Gly (SEQ ID NO: 57), HyP-Gly-Gln-Leu-Gly-Leu (SEQ ID NO: 58), _D-HyP(2R,4S)-Gly-_D-Gln-_D-Leu-Gly-_D-Leu (SEQ ID NO: 59), HyP-Gly-Gln-Leu-Gly (SEQ ID NO: 60), HyP-Gly-Gln-_D-Leu-Gly (SEQ ID NO: 61) и _D-HyP(2R,4S)-Gly-Gln-Leu-Gly (SEQ ID NO: 62).

Еще один аспект настоящего изобретения относится к соединению, представленному формулой 8.

[Формула 8]

Соединение, представленное приведенной выше формулой 8, обозначает соединение, в котором Asp модифицирован до аспартимида реакцией дегидратационной конденсации гидроксильной группы (-OH), связанной с атомом углерода в положении 4 Asp в аминокислотной последовательности, представленной HyP-Gly-Gln-Asp-Gly-Leu-Ala-Gly-Pro-Lys, с пептидной связью Asp-Gly.

Модифицированное соединение может представлять собой соединение, представленное следующей формулой 9.

[Формула 9]

Еще один аспект настоящего изобретения относится к соединению, представленному формулой 10.

[Формула 10]

Соединение, представленное формулой 10, может представлять собой соединение, имеющее аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 31.

Кроме того, настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции для лечения глазного заболевания, которая содержит соединение или пептид в качестве активного фармацевтического ингредиента.

В частности, глазное заболевание может представлять собой заболевание, выбранное из группы, состоящей из ретинопатии, кератита, сухой макулярной дегенерации, влажной макулярной дегенерации, синдрома сухого глаза, поражения кератоконъюнктивального эпителия, пролиферативной витреоретинопатии, пигментной ретинопатии, диабетической ретинопатии, ретинопатии недоношенных, пролиферативной ретинопатии, ишемической ретинопатии, эпидемического кератоконъюнктивита, атопического кератита, верхнего лимбического кератита, сухого кератита при птеригиуме, фликтенулезного кератоконъюнктивита, склерита, отторжения трансплантата роговицы, хориоидальной неоваскуляризации, неоваскулярной глаукомы, ишемической оптической невропатии, ретролентальной фиброплазии, диабетической макулапатии, неоваскулярного изменения радужки, эритроза, миопии, болезни Гиппеля-Линдау, глазного гистоплазмоза, окклюзии центральной вены сетчатки, синдрома Шегрена и синдрома Стивенса-Джонсона. Предпочтительно, чтобы глазное заболевание могло быть заболеванием, выбранным из группы, состоящей из ретинопатии, кератита, макулярной дегенерации, синдрома сухого глаза и поражения кератоконъюнктивального эпителия.

Поражение кератоконъюнктивального эпителия может быть связано с послеоперационной хирургией, лекарственным воздействием, травмой или ношением контактных линз.

В частности, композиция для лечения заболевания глаз, которая включает соединение или пептид в качестве активного фармацевтического ингредиента, может дополнительно содержать по меньшей мере одну добавку, выбранную из группы, состоящей из носителя, вспомогательного вещества, способствующего распадаемости вещества, подсластителя, покрывающего агента, способствующего набуханию агента, смазывающего вещества, способствующего скольжению агент, ароматизатора, антиоксиданта, буфера, бактериостатика, разбавителя, способствующего образованию дисперсии агента, поверхностно-активного вещества и связующего вещества. В частности, состав для парентерального введения может представлять собой стерилизованный водный раствор, неводный раствор, суспензию, эмульсию, лиофилизированный препарат, суппозиторий и т.п.

Еще один аспект настоящего изобретения относится к способу лечения глазного заболевания, который включает введение соединения или пептида субъекту.

Доза соединения или пептида может быть отрегулирована в зависимости от таких различных факторов, как тип заболевания, тяжесть заболевания, вид и количество активных фармацевтических ингредиентов и других ингредиентов, содержащихся в фармацевтической композиции, типа состава, возраста, массы тела, общего состояния здоровья, пола и диеты пациента, времени и пути введения, продолжительности лечения и одновременно принимаемых лекарственных соединений.

Однако для достижения желаемого действия эффективное количество соединения или пептида, содержащегося в фармацевтической композиции, может составлять от 0,0001 мкг/день до 100 мкг/день. В таком случае введение может осуществляться один раз в день или разбиваться на несколько приемов. В частности, концентрация соединения или пептида, содержащегося в фармацевтической композиции, может составлять от 1000 мкМ до 0,001 мкМ. Также концентрация соединения или пептида, содержащегося в фармацевтической композиции, может составлять от 100 мкМ до 0,005 мкМ или от 50 мкМ до 0,02 мкМ.

Кроме того, при необходимости концентрация соединения или пептида, содержащегося в фармацевтической композиции, может составлять от 30 мкМ до 1 мкМ. Кроме того, концентрация соединения или пептида, содержащегося в фармацевтической композиции, может составлять от 0,01 мкМ до 1 мкМ.

Кроме того, субъектом может быть млекопитающее, в частности человек. Специалист в данной области может соответствующим образом выбрать способ введения с учетом способа введения, объема и вязкости жидкости тела, и т.п. В частности, введение может осуществляться любым путем, выбранным из группы, состоящей из нанесения, внутривенного, внутриартериального, внутрибрюшинного, внутримышечного, интрастернального, чрескожного, интраназального, ингаляционного, местного, ректального, орального, внутриглазного и внутрикожного введения. В частности, соединение предпочтительно можно наносить на поверхность глаз в глазных каплях.

Еще один аспект настоящего изобретения относится к применению соединения или пептидов для лечения глазного заболевания.

Еще один аспект настоящего изобретения относится к применению соединения или пептидов для приготовления фармацевтической композиции для лечения глазного заболевания.

Далее настоящее изобретение более подробно поясняется с помощью нижеследующих рабочих примеров. Однако нижеследующие рабочие примеры предназначены для дополнительной иллюстрации настоящего изобретения. Объем настоящего изобретения ими не ограничивается.

Рабочий пример 1: получение производных YDE

Анализ белка внеклеточного матрикса, полученного из хондроцитов животных, проводился в группе Пэка (Baek) Центра биомедицинской масс-спектрометрии (Diatech Korea Co., Ltd., Сеул, Корея). Пролин-GQDGLAGPK (P-GQDGLAGPK), который является частью аминокислотной последовательности белка коллагена типа II α1, был получен с помощью анализа вышеуказанного белка. Пептиды с YDE-001 по YDE-075 были синтезированы в ANYGEN (Кванджу, Корея) путем замены части вышеуказанного пептида (фиг.1 и таблица 11).

Процесс синтеза пептидов YDE-001 - YDE-075 и процедура их очистки, проводимая компанией ANYGEN, изображены на фиг.2 и 3.

[Таблица 11]

№№ Структура соединения №№ Структура соединения YY-101 YY-102 YDE-001 YDE-002 YDE-003 YDE-004 YDE-005 YDE-006 YDE-007 YDE-008 YDE-009 YDE-010 YDE-011 YDE-012 YDE-013 YDE-014 YDE-015 YDE-016 YDE-017 YDE-018 YDE-019 YDE-020 YDE-021 YDE-022 YDE-023 YDE-024 YDE-025 YDE-026 YDE-027 YDE-028 YDE-029 YDE-030 YDE-031 YDE-032 YDE-033 YDE-034 YDE-035 YDE-036 YDE-037 YDE-038 YDE-039 YDE-040 YDE-041 YDE-042 YDE-043 YDE-044 YDE-045 YDE-047 YDE-048 YDE-049 YDE-050 YDE-051 YDE-052 YDE-053 YDE-054 YDE-055 YDE-056 YDE-057 YDE-058 YDE-059 YDE-060 YDE-064 YDE-066 YDE-072 YDE-073 YDE-074 YDE-075

Экспериментальный пример 1: анализ производных YDE

Производные YDE, полученные в рабочем примере 1, анализировали с помощью ВЭЖХ. В результате было подтверждено, что чистота синтезированных YDE-001, YDE-002, YDE-003, YDE-004, YDE-005, YDE-006, YDE-007, YDE-008, YDE-009, YDE-010, YDE-011, YDE-012, YDE-013, YDE-014, YDE-015, YDE-016, YDE-017, YDE-018, YDE-019, YDE-020, YDE-021, YDE-022, YDE-023, YDE-024, YDE-025, YDE-026, YDE-027, YDE-028, YDE-029, YDE-030, YDE-031, YDE-032, YDE-033, YDE-034, YDE-035, YDE-036, YDE-037, YDE-038, YDE-039, YDE-040, YDE-041, YDE-042, YDE-043, YDE-044, YDE-045, YDE-047, YDE-048, YDE-049, YDE-050, YDE-051, YDE-052, YDE-053, YDE-054, YDE-055, YDE-056, YDE-057, YDE-058, YDE-059, YDE-060, YDE-064, YDE-066, YDE-072, YDE-073, YDE-074 и YDE-075 составляла 99,7%, 99,7%, 99,7%, 99,7%, 99,5%, 98,9%, 98,0%, 98,8%, 98,1%, 99,0%, 98,3%, 98,9%, 98,7%, 98,5%, 99,1%, 99,4%, 98,0%, 99,6%, 99,6%, 99,2%, 98,1%, 98,3%, 96,1%, 98,9%, 95,1%, 98,6%, 96,9%, 99,5%, 98,0%, 98,1%, 98,8%, 98,2%, 97,2%, 98,6%, 98,8%, 98,7%, 99,2%, 98,7%, 98,1%, 97,5%, 96,5%, 97,4%, 98,7%, 97,8%, 95,5%, 97,5%, 97,2%, 96,9%, 99,3%, 98,0%, 99,4%, 96,4%, 95,1%, 98,6%, 97,4%, 98,8%, 97,4%, 95,8%, 98,9%, 96,9%, 98,8%, 97,7%, 95,0%, 97,9% и 96,3%, соответственно (фиг.4-68).

Кроме того, производные YDE, полученные в рабочем примере 1, анализировали с помощью ион-масс-спектрометрии. В результате было подтверждено, что молекулярные массы синтезированных YDE-001, YDE-002, YDE-003, YDE-004, YDE-005, YDE-006, YDE-007, YDE-008, YDE-009, YDE-010, YDE-011, YDE-012, YDE-013, YDE-014, YDE-015, YDE-016, YDE-017, YDE-018, YDE-019, YDE-020, YDE-021, YDE-022, YDE-023, YDE-024, YDE-025, YDE-026, YDE-027, YDE-028, YDE-029, YDE-030, YDE-031, YDE-032, YDE-033, YDE-034, YDE-035, YDE-036, YDE-037, YDE-038, YDE-039, YDE-040, YDE-041, YDE-042, YDE-043, YDE-044, YDE-045, YDE-047, YDE-048, YDE-049, YDE-050, YDE-051, YDE-052, YDE-053, YDE-054, YDE-055, YDE-056, YDE-057, YDE-058, YDE-059, YDE-060, YDE-064, YDE-066, YDE-072, YDE-073, YDE-074 и YDE-075 составляли 969,6, 954,8, 967,7, 977,1, 968,1, 926,9, 941,1, 910,7, 939,7, 953,0, 953,7, 987,8, 1003,8, 1025,9, 996,7, 1011,0, 1011,4, 968,7, 1044,4, 1061,4, 1084,5, 1035,0, 984,9, 999,1, 969,7, 942,0, 937,6, 967,3, 988,1, 960,6, 954,2, 991,1, 954,4, 990,7, 950,9, 937,6, 968,1, 955,4, 966,0, 709,3, 622,2, 486,8, 951,3, 951,3, 911,4, 967,5, 896,5, 911,0, 967,3, 911,2, 953,2, 967,2, 927,4, 896,4, 952,8, 953,4, 670,1, 953,3, 599,7, 486,5, 966,1, 895,8, 909,1 и 486,4, соответственно (фиг.69-133).

Экспериментальный пример 2: оценка эффекта защиты глаз производными YDE при синдроме сухого глаза

Экспериментальный пример 2.1: создание крыс с синдромом сухого глаза

Чтобы оценить влияние защиты глаз при синдроме сухого глаза пептидами YDE-001 - YDE-028, полученными в рабочем примере 1, в общей сложности 320 самцов крыс типа Sprague-Dawley (OrientBio, Соннам, Корея) были адаптированы в течение 7 дней. После этого синдром сухого глаза индуцировали у 264 подопытных крыс путем удаления экстраорбитальной слезной железы (далее ELGE). 8 контрольных крыс без нарушения зрения были подвергнуты фиктивной операции в качестве контрольной группы.

Крыс подвергали системной анестезии путем вдыхания смешанного газа с 2-3% изофлурана (Hana Pharm. Co., Хвасунг, Корея), 70% N₂O и 28,6% O₂ с использованием аппарата для анестезии грызунов (Surgivet, Вакеша, Висконсин, США) и вентилятора (Model 687, Harvard Apparatus, Кембридж, Великобритания). После этого экстраорбитальную слезную железу, расположенную в подкожной области над мышцей жевательной мышцы и под зрительным нервом, вырезали через поперечный разрез размером 10 мм на передней части козелка левого уха. Кожу ушивали общепринятым способом. Время операции ELGE не превышало 5 минут для каждой крысы. Через 6 дней после операции ELGE было выполнено подтверждение появления синдрома сухого глаза с помощью теста Ширмера путем измерения количества секретируемой слезы. Между тем, каждая крыса в контрольной группе с фиктивной операцией была проверена на наличие и расположение экстраорбитальной слезной железы через разрез кожи, а затем кожу ушивали без ее удаления (фиг.134).

Средний вес крыс из испытуемой группы ELGE, измеренный до операции ELGE, составлял 241,59±13,56 г, а средний вес, измеренный через 6 дней после операции ELGE, составлял 297,38±34,02 г. Средний вес контрольной группы, измеренный до фиктивной операции, составлял 240,13±25,63 г, а средний вес, измеренный через 6 дней после фиктивной операции, составлял 297,38±34,02 г (рис. 135).

Среднее количество секретируемой слезы в контрольной группе составляло 8,34±0,73 мм³, а среднее количество секретируемой слезы в контрольной группе ELGE составляло 3,55±0,70 мм³. На основе среднего количества секретируемой слезы были отобраны всего 32 группы по 8 крыс на группу.

В качестве эталонного препарата использовали 3%-й диквафозол натрия (Santen, Токио, Япония; далее DS), который в настоящее время продается на аптеках.

Настоящие испытания на животных проводились с предварительного одобрения Комитета по этике проведения экспериментов на животных Университета Тэгу Хаани (Номер документа № DHU2017-003 от 12 января 2017 г.). Всех подопытных животных не кормили в течение 18 часов перед операцией ELGE и конечным умерщвлением, но обеспечивали водой.

Данные по 32 группам суммированы в таблице 12.

[Таблица 12]

Классификация группы Всего 32 группы, по 8 крыс в группе Ложная контрольная группа Группа, получающая физиологический раствор после фиктивной операции ELGE-контрольная группа Группа, получающая физиологический раствор после ELGE-операции Эталонная группа Группа, получающая DS после ELGE-операции YY-102 Группа, получающая 0,3%-й раствор YY-102 после ELGE-операции Серия групп YDE Группа, получающая любой из 0,3%-х растворов YDE-01 - YDE-28 (всего 28 групп)

Кроме того, чтобы оценить влияние на защиту глаз при синдроме сухого глаза пептидов YDE-029 - YDE-043, полученных в рабочем примере 1, в общей сложности 200 самцов крыс типа Sprague-Dawley (OrientBio, Seungnam, Корея) были адаптированы в течение 7 дней. Синдром сухого глаза индуцировали у 165 подопытных крыс с помощью ELGE. 8 контрольных крыс без нарушения зрения были подвергнуты фиктивной операции в качестве контрольной группы. ELGE проводили, как описано выше.

Средний вес испытуемых животных в группе ELGE, измеренный до операции ELGE, составлял 264,09±11,53 г, а средний вес, измеренный через 6 дней после операции ELGE, составлял 316,13±15,77 г. Средний вес животных в контрольной группе, измеренный до фиктивной операции, составлял 263,50±9,24 г, а средний вес, измеренный через 6 дней после фиктивной операции, составлял 315,25±10,85 г (фиг.136).

Среднее количество секретируемой слезы в контрольной группе составляло 10,90±1,69 мм³, а среднее количество секретируемой слезы в контрольной группе ELGE составляло 4,83±0,99 мм³. На основе среднего количества секретируемой слезы всего были отобраны 20 групп по 8 крыс на группу.

В качестве препарата сравнения использовали 3%-й раствор DS, который в настоящее время продается в аптеках.

Настоящие испытания на животных проводились с предварительного одобрения Комитета по этике проведения экспериментов на животных Университета Тэгу Хаани (Номер документа № DHU2017-050 от 8 июня 2017 г.). Всех подопытных животных не кормили в течение 18 часов перед операцией ELGE и конечным умерщвлением, но обеспечивали водой.

Данные по 20 группам суммированы в таблице 13.

[Таблица 13]

Классификация группы Всего 20 групп, по 8 крыс в группе Ложная контрольная группа Группа, получающая физиологический раствор после фиктивной операции ELGE-контрольная группа Группа, получающая физиологический раствор после ELGE-операции Эталонная группа Группа, получающая DS после ELGE-операции YY-101 Группа, получающая 0,3%-й раствор YY-101 после ELGE-операции YY-102 Группа, получающая 0,3%-й раствор YY-102 после ELGE-операции Серия групп YDE Группа, получающая любой из 0,3%-х растворов YDE-01 - YDE-28 (всего 28 групп)

Экспериментальный пример 2.2: введение производных YDE

Для YDE-001 - YDE-028, YY-102 и серию из 28 пептидов YDE растворяли в физиологическом растворе в концентрации 3 мг/мл и вводили в дозировке 5 мкл/глаз в 9:30 утра и 3:30 дня ежедневно в течение 14 дней через 7 дней после операции ELGE, то есть в общей сложности 28 раз. DS растворяли в физиологическом растворе в концентрации 30 мг/мл и вводили в дозировке 5 мкл/глаз два раза в день в течение 14 дней через 7 дней после операции ELGE, то есть в общей сложности 28 раз. Для ложной контрольной группы и контрольной группы ELGE применялась та же стимуляция, что и при введении тестируемых соединений. Для предотвращения чрезмерной сухости глаз вместо тестируемых соединений таким же образом наносили равный объем физиологического раствора.

Дополнительно, для YDE-029 - YDE-043, YY-102 и серию из 15 пептидов YDE растворяли в физиологическом растворе в концентрации 3 мг/мл и вводили в дозировке 5 мкл/глаз в 9:30 утра и 3:30 дня ежедневно в течение 14 дней через 7 дней после операции ELGE, в общей сложности 28 раз. DS растворяли в физиологическом растворе в концентрации 30 мг/мл и вводили в дозировке 5 мкл/глаз два раза в день в течение 14 дней через 7 дней после операции ELGE, то есть в общей сложности 28 раз. Для ложной контрольной группы и контрольной группы ELGE применялась та же стимуляция, что и при введении тестируемых соединений. Для предотвращения чрезмерной сухости глаз вместо тестируемых соединений таким же образом наносили равный объем физиологического раствора (фиг.137).

Пример тестирования 2.3: подтверждение изменений количества секретируемой слезы производными YDE

Через 6 дней после операции ELGE изменения в количестве секретируемой слезы измеряли на 7 и 14 день после введения пептидов YDE-001 - YDE-043. Степень изменения секреции слезы измеряли по уменьшению расстояния прохождения слезы, поглощенной бумагой из хлорида кобальта, размером 1×15 мм (Toyo Roshi Kaisha, Япония).

Бумагу из хлорида кобальта помещали во внешний угол глаза крысы на 60 секунд для поглощения слезы (фиг.139). Длину области абсорбции слезы от угла бумаги с хлоридом кобальта, измеряли электронным цифровым штангенциркулем (Mytutoyo, Токио, Япония) (фиг.138).

На фиг.139 показаны результаты теста, где А - данные для ложной контрольной группы, В - данные для контрольной группы ELGE, С - данные для контрольной группы DS, D - данные для группы, которой вводили YY-102, и E-AF - данные для групп, которым вводили YDE-001 по YDE-028 по порядку.

В результате было подтверждено, что количество секретируемой слезы уменьшилось через 6 дней после операции ELGE, на 7 и 14 день после применения физиологического раствора в контрольной группе ELGE по сравнению с ложной контрольной группой. В группах, которым вводили производные YDE, и в контрольной группе DS, количество секретируемой слезы было увеличено по сравнению с контрольной группой ELGE, за исключением групп, которым вводили 0,3%-й раствор YDE-9, YDE-10, YDE-17, YDE-19, YDE-20, YDE-21, YDE-22, YDE-25, YDE-27 и YDE-28, которые не показали каких-либо существенных изменений в объеме секретируемой слезы после их введения в течение 14 дней. В частности, количество секретируемой слезы было увеличено более чем на 20% в группах, получавших 0,3%-й раствор YDE-15, YDE-11, YDE-08, YDE-26, YDE-16, YDE-01, YDE-23 и YY-102, по сравнению с эталонной группой DS.

Конкретные количества секретируемой слезы показаны на фиг.140 и приведены в таблице 14.

[Таблица 14]

№№ Объем слезы (мм³) День 7 День 14 YY-101 7,66±0,61 6,00±0,69 YY-102 4,59±1,43 5,77±1,99 YDE-001 4,88±1,62 5,92±2,19 YDE-002 3,84±1,16 5,01±1,67 YDE-003 4,13±1,76 4,88±1,57 YDE-004 3,42±1,06 5,19±1,84 YDE-005 3,85±0,93 5,08±1,91 YDE-006 3,44±1,69 5,35±1,68 YDE-007 3,91±1,28 5,45±1,26 YDE-008 4,57±1,25 6,10±2,36 YDE-009 3,76±1,21 4,54±1,11 YDE-010 3,42±1,31 4,35±1,36 YDE-011 4,22±1,45 6,16±2,16 YDE-012 3,68±0,99 5,67±1,86 YDE-013 5,27±1,50 5,49±1,92 YDE-014 3,81±1,21 5,62±1,85 YDE-015 4,03±2,19 6,65±2,13 YDE-016 4,59±1,13 5,98±2,27 YDE-017 4,00±1,22 4,89±1,50 YDE-018 3,75±1,54 4,99±1,60 YDE-019 4,84±1,39 4,52±1,07 YDE-020 3,41±1,47 4,20±1,35 YDE-021 4,08±1,33 4,90±1,13 YDE-022 3,19±0,67 4,10±0,95 YDE-023 5,32±2,30 5,78±2,23 YDE-024 3,85±1,30 5,72±1,36 YDE-025 3,21±0,72 4,72±2,19 YDE-026 4,32±1,47 6,01±1,83 YDE-027 2,82±0,86 3,95±1,52 YDE-028 4,04±0,99 4,73±1,18

На фиг.141 показаны результаты теста, где A - данные для ложной контрольной группы, B - данные для контрольной группы ELGE, C - данные для контрольной группы DS, D - данные для группы, которой вводили YY-102, и E-S - данные для групп, которым вводили YDE-029 - YDE-043, по порядку.

В результате было подтверждено, что количество секретируемой слезы уменьшилось через 6 дней после операции ELGE, на 7 и 14 день после применения физиологического раствора в контрольной группе ELGE по сравнению с ложной контрольной группой. В группах, которым вводили производные YDE, и в контрольной группе DS, количество секретируемой слезы было увеличено по сравнению с контрольной группой ELGE, за исключением групп, которым вводили 0,3%-й раствор YDE-029, YDE-030, YDE-032, YDE-033, YDE-034, YDE-036 и YDE-41, которые не показали каких-либо значительных изменений в объеме секретируемой слезы после их введения в течение 14 дней. В частности, количество секретируемой слезы увеличилось более чем на 20% в группах, получавших 0,3%-й раствор YDE-040, YDE-043 и YDE-042, по сравнению с эталонной группой DS.

Конкретные количества секретируемой слезы показаны на фиг.142 и приведены в таблице 15.

[Таблица 15]

№№ Объем слезы (мм³) День 7 День 7 YY-101 5,36±0,68 6,25±0,68 YY-102 5,77±1,01 6,60±0,64 YDE-029 5,33±1,43 6,03±1,71 YDE-030 5,69±1,79 6,65±2,17 YDE-031 5,63±1,97 5,91±0,85 YDE-032 5,58±0,80 5,03±0,93 YDE-033 4,99±1,20 4,54±1,16 YDE-034 6,16±1,01 6,43±1,86 YDE-035 4,96±0,96 6,25±0,79 YDE-036 4,95±1,05 5,13±1,03 YDE-037 4,98±0,66 5,80±0,90 YDE-039 6,04±1,01 6,44±1,96 YDE-040 5,77±1,05 8,63±1,53 YDE-041 5,01±1,26 6,25±2,15 YDE-042 6,30±1,08 7,97±1,48 YDE-043 5,90±1,06 8,16±1,42

Экспериментальный пример 2.4: подтверждение изменений в повреждении роговицы в результате действия производных YDE

После того, как каждый из пептидов YDE-001 - YDE-028 был введен в глаза 14 раз, были проверены изменения в проницаемости роговицы.

Чтобы измерить проницаемость роговицы, внутрибрюшинно вводили Zoleyl 50TM (Virbac Lab., Карро, Франция) в дозировке 25 мг/кг. После этого на глаз наносили физиологический раствор, содержащий 1 об.% флуоресцеина (натриевая соль флуоресцеина, Tokyo Kasei Kogyo Co., Токио, Япония) в дозировке 5 мкл/глаз. Обработанные таким образом глаза были закрыты и зафиксированы скотчем. Через 1 час оставшийся флуоресцентный раствор удаляли с помощью ватного тампона (фиг.142). Через 12-24 часа измеряли проницаемость роговицы с использованием вольфрамовой лампы с синим светом и настольного биомикроскопа с офтальмологической щелевой лампой (Модель SM-70N; Takaci Seiko Co., Накано, Япония) (фиг.143).

На фиг.144 показаны результаты теста, где А - данные для ложной контрольной группы, В - данные для контрольной группы ELGE, С - данные для контрольной группы DS, D - данные для группы, которой вводили YY-102, и E-AF - данные для групп, которым вводили YDE-001 - YDE-028, по порядку.

В результате проникновение флуоресцентного красителя увеличилось в контрольной группе ELGE по сравнению с фиктивной контрольной группой. Проникновение флуоресцентного красителя не снижалось в группах, получавших 0,3%-й раствор YDE-10, YDE-20, YDE-22, YDE-25, YDE-27 и YDE-28 по сравнению с контрольной группой ELGE на 14 день после введения. В группах, которым вводили производные YDE, и в контрольной группе DS, проницаемость роговицы для флуоресцентного красителя была ниже по сравнению с контрольной группой ELGE, за исключением групп, которым вводили 0,3%-й раствор YDE-10, YDE-20, YDE -22, YDE-25, YDE-27 и YDE-28. В частности, проникновение флуоресцентного красителя было снижено более чем на 20% в группах, которым вводили 0,3%-й раствор YDE-15, YDE-11, YDE-08, YDE-26, YDE-16, YDE-01, YDE-23 и YY-102 по сравнению с эталонной группой DS.

Удельное проникновение флуоресцентного красителя показано на фиг.145 и приведено в таблице 16.

[Таблица 16]

№№ Проникновение флуоресцентного красителя (%) YY-101 27,53±5,62 YY-102 27,48±14,37 YDE-001 25,49±11,62 YDE-002 38,26±11,25 YDE-003 40,45±6,46 YDE-004 35,05±11,74 YDE-005 37,98±11,53 YDE-006 33,23±13,26 YDE-007 32,79±10,77 YDE-008 20,32±11,87 YDE-009 41,50±7,86 YDE-010 49,29±12,06 YDE-011 18,11±11,61 YDE-012 31,01±11,38 YDE-013 32,24±7,84 YDE-014 31,15±10,87 YDE-015 15,95±6,48 YDE-016 24,57±10,34 YDE-017 39,76±7,42 YDE-018 38,19±10,96 YDE-019 40,39±12,57 YDE-020 47,84±13,47 YDE-021 37,00±10,49 YDE-022 47,82±10,01 YDE-023 26,51±8,18 YDE-024 30,63±10,41 YDE-025 47,10±11,45 YDE-026 22,63±11,23 YDE-027 50,24±11,94 YDE-028 41,17±10,25

Кроме того, YDE-029 - YDE-043 вводили в глаза по 14 раз, а затем проверяли изменения в проницаемости роговицы. Измерение проницаемости роговицы проводили аналогично описанному выше (фиг.146).

В результате проникновение флуоресцентного красителя увеличилось в контрольной группе ELGE по сравнению с фиктивной контрольной группой. Проникновение флуоресцентного красителя не снижалось в группах, получавших 0,3%-й раствор YDE-29, YDE-32, YDE-33, YDE-36 и YDE-41, по сравнению с контрольной группой ELGE на 14 день после введения. В группах, которым вводили производные YDE, и в контрольной группе DS, проницаемость роговицы для флуоресцентного красителя была ниже по сравнению с контрольной группой ELGE, за исключением групп, которым вводили 0,3%-й раствор YDE-29, YDE-32, YDE-33, YDE-36 и YDE-41. В частности, проникновение флуоресцентного красителя было снижена более чем на 20% в группах, которым вводили 0,3%-й раствор YDE-40, YDE-43 и YDE-42, по сравнению с эталонной группой DS.

Удельное проникновение флуоресцентного красителя показано на фиг.147 и приведено в таблице 17.

[Таблица 17]

№№ Проникновение флуоресцентного красителя (%) YY-101 33,80±11,11 YY-102 27,89±7,10 YDE-029 63,45±11,57 YDE-030 30,60±13,61 YDE-031 33,35±11,01 YDE-032 58,90±19,81 YDE-033 60,55±21,22 YDE-034 32,17±12,94 YDE-035 27,62±6,51 YDE-036 57,87±22,91 YDE-037 36,30±9,75 YDE-039 29,94±11,40 YDE-040 18,33±9,41 YDE-041 46,38±26,65 YDE-042 20,72±11,37 YDE-043 19,04±7,36

Экспериментальный пример 3: оценка стабильности производных YDE

Чтобы подтвердить стабильность каждого испытуемого вещества в водном растворе, 10 мг каждого образца растворяли в 1 мл воды до концентрации 1 мг/мл, раствор затем помещали в стеклянный флакон, закупоривали резиновой крышкой, запечатывали алюминиевой крышкой и хранили в условиях длительного хранения (25°C, при относительной влажности 75%). Стабильность тестируемого вещества оценивали путем измерения количества родственных веществ через одну неделю, две недели, четыре недели, восемь недель и двенадцать недель в условиях длительного хранения.

В результате 66,5% родственных веществ образовалось в растворе YY-101 через две недели. Напротив, от 1,1% до 30,6% родственных веществ образовалось в растворах YDE-001 - YDE-028 через 12 недель. Конкретные количества приведены в таблице 18.

[Таблица 18]

№№ Количество родственных веществ
(%; через 12 недель) YY-101 66,51 (через 2 недели) YDE-001 3,92 YDE-002 4,93 YDE-003 6,86 YDE-004 2,11 YDE-005 2,97 YDE-006 3,67 YDE-007 3,76 YDE-008 4,42 YDE-009 4,71 YDE-010 4,39 YDE-011 3,83 YDE-012 3,57 YDE-013 5,92 YDE-014 6,72 YDE-015 13,05 YDE-016 11,33 YDE-017 11,88 YDE-018 25,39 YDE-019 13,43 YDE-020 21,54 YDE-021 21,33 YDE-022 19,23 YDE-023 30,66 YDE-024 20,59 YDE-025 5,17 YDE-026 10,15 YDE-027 12,74 YDE-028 1,15

Пример тестирования 4: оценка восстановления производными YDE повреждения роговицы

Чтобы подтвердить, могут ли производные YDE восстанавливать повреждение роговицы, была проверена скорость роста первичных эпителиальных клеток роговицы человека.

В частности, первичные эпителиальные клетки роговицы (ATCC, ATCC PCS-700-010) высевали на 96-луночный культуральный планшет (Perkin Elmer, 6005680), содержащий базальную среду для эпителиальных клеток роговицы (Corneal Epithelial Cell Basal Medium, ATCC, ATCC PCS-700-030) в наборе для роста эпителиальных клеток роговицы (Corneal Epithelial Cell Growth Kit, ATCC, ATCC PCS-700-040) в количестве 5×10³ клеток на лунку, которые затем культивировали в течение 24 часов при 37°C и 5% CO₂.

Каждый из пептидов YDE-001 - YDE-075 растворяли в 100%-м ДМСО (Sigma, D2660) до концентрации 10 мМ, которую затем разбавляли 100% ДМСО до концентрации соединения 6, 1,9, 0,6, 0,2, 0,06, 0,02, 0,006 и 0,002 мМ. 20 мкл разбавленного производного YDE добавляли в 96-луночный микропланшет (Greiner Bio-One, 651201), содержащий 380 мкл базальной среды для эпителиальных клеток роговицы, так что концентрация ДМСО разбавлялась до 5%.

Через 24 часа по 20 мкл каждого из производных YDE, разведенных в 96-луночном микропланшете, добавляли в 96-луночный культуральный планшет, содержащий клетки. В качестве контрольной группы, использовали hEGF (Sigma, E9644), добавляемый в той же концентрации, что и производные YDE. Клетки, обработанные производными YDE или hEGF, культивировали в течение 48 часов и 72 часов при 37°C и 5% CO₂ (фиг.148-155).

К культивируемым клеткам добавляли люминесцентный реагент CellTiter-Glo (Promega, G7573) в соответствии с инструкциями производителя, и реакцию проводили в течение 30 минут при комнатной температуре. После этого измеряли флуоресцентный сигнал (или люминесцентный сигнал), используя многоканальный планшетный спектрофотометр Envision 2014. Измеренные значения нормализовали с использованием в качестве контроля носителя (пролиферацию клеток принимали за 100%).

В результате пролиферацию клеток наблюдали при концентрациях 0,3 мкМ или менее для YY-101, YY-102, YDE-011, YDE-038, YDE-042, YDE-043, YDE-044, YDE-045, YDE-049, YDE-054, YDE-057, YDE-058, YDE-059 и YDE-060. В частности, высокая скорость пролиферации клеток была показана для YY-102, YDE-011, YDE-045, YDE-057 и YDE-060 (фиг.156-173).

--->

СПИСОК ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ

<110> YUYU PHARMA, INC.

<120> НОВЫЙ ПЕПТИД И ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЙ СОСТАВ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ГЛАЗНОГО ЗАБОЛЕВАНИЯ, СОДЕРЖАЩИЙ ПЕПТИД В КАЧЕСТВЕ АКТИВНОГО ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОГО ИНГРЕДИЕНТА

<130> YUH-00125

<140> PCT/KR2018/005673

<141> 2018-05-17

<150> KR 10-2017-0061250

<151> 2017-05-17

<160> 63

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: синтетический пептид

<220>

<223> Аминокислотная последовательность YDE-001

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (1)..(1)

<223> 4Hyp

<400> 1

Pro Gly Gln Glu Gly Leu Ala Gly Pro Lys

1 5 10

<210> 2

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: синтетический пептид

<220>

<223> Аминокислотная последовательность YDE-002

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (1)..(1)

<223> 4Hyp

<400> 2

Pro Gly Gln Asn Gly Leu Ala Gly Pro Lys

1 5 10

<210> 3

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: синтетический пептид

<220>

<223> Аминокислотная последовательность YDE-003

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (1)..(1)

<223> 4Hyp

<400> 3

Pro Gly Gln Gln Gly Leu Ala Gly Pro Lys

1 5 10

<210> 4

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: синтетический пептид

<220>

<223> Аминокислотная последовательность YDE-004

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (1)..(1)

<223> 4Hyp

<400> 4

Pro Gly Gln His Gly Leu Ala Gly Pro Lys

1 5 10

<210> 5

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: синтетический пептид

<220>

<223> Аминокислотная последовательность YDE-005

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (1)..(1)

<223> 4Hyp

<400> 5

Pro Gly Gln Lys Gly Leu Ala Gly Pro Lys

1 5 10

<210> 6

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: синтетический пептид

<220>

<223> Аминокислотная последовательность YDE-006

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (1)..(1)

<223> 4Hyp

<400> 6

Pro Gly Gln Ser Gly Leu Ala Gly Pro Lys

1 5 10

<210> 7

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: синтетический пептид

<220>

<223> Аминокислотная последовательность YDE-007

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (1)..(1)

<223> 4Hyp

<400> 7

Pro Gly Gln Thr Gly Leu Ala Gly Pro Lys

1 5 10

<210> 8

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: синтетический пептид

<220>

<223> Аминокислотная последовательность YDE-008

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (1)..(1)

<223> 4Hyp

<400> 8

Pro Gly Gln Ala Gly Leu Ala Gly Pro Lys

1 5 10

<210> 9

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: синтетический пептид

<220>

<223> Аминокислотная последовательность YDE-009

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (1)..(1)

<223> 4Hyp

<400> 9

Pro Gly Gln Val Gly Leu Ala Gly Pro Lys

1 5 10

<210> 10

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: синтетический пептид

<220>

<223> Аминокислотная последовательность YDE-010

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (1)..(1)

<223> 4Hyp

<400> 10

Pro Gly Gln Ile Gly Leu Ala Gly Pro Lys

1 5 10

<210> 11

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: синтетический пептид

<220>

<223> Аминокислотная последовательность YDE-011

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (1)..(1)

<223> 4Hyp

<400> 11

Pro Gly Gln Leu Gly Leu Ala Gly Pro Lys

1 5 10

<210> 12

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: синтетический пептид

<220>

<223> Аминокислотная последовательность YDE-012

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (1)..(1)

<223> 4Hyp

<400> 12

Pro Gly Gln Phe Gly Leu Ala Gly Pro Lys

1 5 10

<210> 13

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: синтетический пептид

<220>

<223> Аминокислотная последовательность YDE-013

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (1)..(1)

<223> 4Hyp

<400> 13

Pro Gly Gln Tyr Gly Leu Ala Gly Pro Lys

1 5 10

<210> 14

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: синтетический пептид

<220>

<223> Аминокислотная последовательность YDE-014

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (1)..(1)

<223> 4Hyp

<400> 14

Pro Gly Gln Trp Gly Leu Ala Gly Pro Lys

1 5 10

<210> 15

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: синтетический пептид

<220>

<223> Аминокислотная последовательность YDE-026

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (1)..(1)

<223> 4Hyp

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (4)..(4)

<223> Гомо-Ser

<400> 15

Pro Gly Gln Ser Gly Leu Ala Gly Pro Lys

1 5 10

<210> 16

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: синтетический пептид

<220>

<223> Аминокислотная последовательность YDE-027

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (1)..(1)

<223> 4Hyp

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (4)..(4)

<223> Метилирование, Asp(Me)

<400> 16

Pro Gly Gln Asp Gly Leu Ala Gly Pro Lys

1 5 10

<210> 17

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: синтетический пептид

<220>

<223> Аминокислотная последовательность YDE-028

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (1)..(1)

<223> 4Hyp

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (4)..(4)

<223> Метилирование, Asn(Me)

<400> 17

Pro Gly Gln Asn Gly Leu Ala Gly Pro Lys

1 5 10

<210> 18

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: синтетический пептид

<220>

<223> Аминокислотная последовательность YDE-057

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (1)..(1)

<223> D-4Hyp(2R, 4S)

<400> 18

Pro Gly Gln Leu Gly Leu Ala Gly Pro Lys

1 5 10

<210> 19

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: синтетический пептид

<220>

<223> Аминокислотная последовательность YDE-058

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (1)..(1)

<223> D-4Hyp(2R, 4S)

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (3)..(3)

<223> D-Gln

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (4)..(4)

<223> D-Leu

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (6)..(6)

<223> D-Leu

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (7)..(7)

<223> D-Ala

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (9)..(9)

<223> D-Pro

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (10)..(10)

<223> D-Lys

<400> 19

Pro Gly Gln Leu Gly Leu Ala Gly Pro Lys

1 5 10

<210> 20

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: синтетический пептид

<220>

<223> Аминокислотная последовательность YDE-060

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (1)..(1)

<223> D-4Hyp(2R, 4R)

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (3)..(3)

<223> D-Gln

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (4)..(4)

<223> D-Leu

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (6)..(6)

<223> D-Leu

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (7)..(7)

<223> D-Ala

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (9)..(9)

<223> D-Pro

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (10)..(10)

<223> D-Lys

<400> 20

Pro Gly Gln Leu Gly Leu Ala Gly Pro Lys

1 5 10

<210> 21

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: синтетический пептид

<220>

<223> Аминокислотная последовательность YDE-015

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (1)..(1)

<223> 4Hyp

<400> 21

Pro Gly Gln Asp Val Leu Ala Gly Pro Lys

1 5 10

<210> 22

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: синтетический пептид

<220>

<223> Аминокислотная последовательность YDE-016

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (1)..(1)

<223> 4Hyp

<400> 22

Pro Gly Gln Asp Ile Leu Ala Gly Pro Lys

1 5 10

<210> 23

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: синтетический пептид

<220>

<223> Аминокислотная последовательность YDE-017

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (1)..(1)

<223> 4Hyp

<400> 23

Pro Gly Gln Asp Leu Leu Ala Gly Pro Lys

1 5 10

<210> 24

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: синтетический пептид

<220>

<223> Аминокислотная последовательность YDE-018

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (1)..(1)

<223> 4Hyp

<400> 24

Pro Gly Gln Asp Ala Leu Ala Gly Pro Lys

1 5 10

<210> 25

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: синтетический пептид

<220>

<223> Аминокислотная последовательность YDE-019

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (1)..(1)

<223> 4Hyp

<400> 25

Pro Gly Gln Asp Phe Leu Ala Gly Pro Lys

1 5 10

<210> 26

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: синтетический пептид

<220>

<223> Аминокислотная последовательность YDE-020

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (1)..(1)

<223> 4Hyp

<400> 26

Pro Gly Gln Asp Tyr Leu Ala Gly Pro Lys

1 5 10

<210> 27

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: синтетический пептид

<220>

<223> Аминокислотная последовательность YDE-021

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (1)..(1)

<223> 4Hyp

<400> 27

Pro Gly Gln Asp Trp Leu Ala Gly Pro Lys

1 5 10

<210> 28

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: синтетический пептид

<220>

<223> Аминокислотная последовательность YDE-022

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (1)..(1)

<223> 4Hyp

<400> 28

Pro Gly Gln Asp His Leu Ala Gly Pro Lys

1 5 10

<210> 29

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: синтетический пептид

<220>

<223> Аминокислотная последовательность YDE-023

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (1)..(1)

<223> 4Hyp

<400> 29

Pro Gly Gln Asp Ser Leu Ala Gly Pro Lys

1 5 10

<210> 30

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: синтетический пептид

<220>

<223> Аминокислотная последовательность YDE-024

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (1)..(1)

<223> 4Hyp

<400> 30

Pro Gly Gln Asp Thr Leu Ala Gly Pro Lys

1 5 10

<210> 31

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: синтетический пептид

<220>

<223> Аминокислотная последовательность YDE-025

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (1)..(1)

<223> 4Hyp

<400> 31

Pro Gly Gln Asp Gly Leu Ala Gly Pro Lys

1 5 10

<210> 32

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: синтетический пептид

<220>

<223> Аминокислотная последовательность YDE-051

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (1)..(1)

<223> 4Hyp

<400> 32

Pro Gly Gln Leu Ala Leu Ala Gly Pro Lys

1 5 10

<210> 33

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: синтетический пептид

<220>

<223> Аминокислотная последовательность YDE-029

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (1)..(1)

<223> 4Hyp

<400> 33

Pro Gly Gln Leu Gly Leu Ala Gly Pro Tyr

1 5 10

<210> 34

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: синтетический пептид

<220>

<223> Аминокислотная последовательность YDE-030

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (1)..(1)

<223> 4Hyp

<400> 34

Pro Gly Gln Leu Gly Leu Ala Gly Pro Leu

1 5 10

<210> 35

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: синтетический пептид

<220>

<223> Аминокислотная последовательность YDE-031

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (1)..(1)

<223> 4Hyp

<400> 35

Pro Gly Gln Leu Gly Leu Ala Gly Pro Glu

1 5 10

<210> 36

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: синтетический пептид

<220>

<223> Аминокислотная последовательность YDE-032

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (1)..(1)

<223> 4Hyp

<400> 36

Pro Gly Gln Leu Gly Leu Ala Gly Pro Gln

1 5 10

<210> 37

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: синтетический пептид

<220>

<223> Аминокислотная последовательность YDE-033

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (1)..(1)

<223> 4Hyp

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (10)..(10)

<223> Nle(6-OH)

<400> 37

Pro Gly Gln Leu Gly Leu Ala Gly Pro Xaa

1 5 10

<210> 38

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: синтетический пептид

<220>

<223> Аминокислотная последовательность YDE-056

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (1)..(1)

<223> 4Hyp

<400> 38

Pro Gly Gln Leu Gly Leu Ala Gly Pro Ala

1 5 10

<210> 39

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: синтетический пептид

<220>

<223> Аминокислотная последовательность YDE-073

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (1)..(1)

<223> D-4Hyp(2R, 4S)

<400> 39

Pro Gly Gln Leu Gly Leu Ala Gly Pro Ala

1 5 10

<210> 40

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: синтетический пептид

<220>

<223> Аминокислотная последовательность YDE-035

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (1)..(1)

<223> (4-оксо)Pro

<400> 40

Pro Gly Gln Leu Gly Leu Ala Gly Pro Lys

1 5 10

<210> 41

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: синтетический пептид

<220>

<223> Аминокислотная последовательность YDE-036

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (1)..(1)

<223> (5-оксо)Pro

<400> 41

Pro Gly Gln Leu Gly Leu Ala Gly Pro Lys

1 5 10

<210> 42

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: синтетический пептид

<220>

<223> Аминокислотная последовательность YDE-037

<400> 42

Pro Gly Gln Leu Gly Leu Ala Gly Pro Lys

1 5 10

<210> 43

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: синтетический пептид

<220>

<223> Аминокислотная последовательность YDE-038

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (1)..(1)

<223> (4-гидрокси-Me)Pro

<400> 43

Pro Gly Gln Leu Gly Leu Ala Gly Pro Lys

1 5 10

<210> 44

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: синтетический пептид

<220>

<223> Аминокислотная последовательность YDE-039

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (1)..(1)

<223> (4-фтор)Pro

<400> 44

Pro Gly Gln Leu Gly Leu Ala Gly Pro Lys

1 5 10

<210> 45

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: синтетический пептид

<220>

<223> Аминокислотная последовательность YDE-040

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (1)..(1)

<223> (4-диметил)Pro

<400> 45

Pro Gly Gln Leu Gly Leu Ala Gly Pro Lys

1 5 10

<210> 46

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: синтетический пептид

<220>

<223> Аминокислотная последовательность YDE-044

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (1)..(1)

<223> (4-Me)Pro

<400> 46

Pro Gly Gln Leu Gly Leu Ala Gly Pro Lys

1 5 10

<210> 47

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: синтетический пептид

<220>

<223> Аминокислотная последовательность YDE-045

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (1)..(1)

<223> (5-Me)Pro

<400> 47

Pro Gly Gln Leu Gly Leu Ala Gly Pro Lys

1 5 10

<210> 48

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: синтетический пептид

<220>

<223> Аминокислотная последовательность YDE-049

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (1)..(1)

<223> 4Hyp

<400> 48

Pro Gly Ala Leu Gly Leu Ala Gly Pro Lys

1 5 10

<210> 49

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: синтетический пептид

<220>

<223> Аминокислотная последовательность YDE-052

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (1)..(1)

<223> 4Hyp

<400> 49

Pro Gly Gln Leu Gly Ala Ala Gly Pro Lys

1 5 10

<210> 50

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: синтетический пептид

<220>

<223> Аминокислотная последовательность YDE-054

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (1)..(1)

<223> 4Hyp

<400> 50

Pro Gly Gln Leu Gly Leu Ala Ala Pro Lys

1 5 10

<210> 51

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: синтетический пептид

<220>

<223> Аминокислотная последовательность YDE-048

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (1)..(1)

<223> 4Hyp

<400> 51

Pro Ala Gln Leu Gly Leu Ala Gly Pro Lys

1 5 10

<210> 52

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: синтетический пептид

<220>

<223> Аминокислотная последовательность YDE-074

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (1)..(1)

<223> D-4Hyp(2R, 4S)

<400> 52

Pro Ala Gln Leu Gly Leu Ala Gly Pro Lys

1 5 10

<210> 53

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: синтетический пептид

<220>

<223> Аминокислотная последовательность YDE-072

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (1)..(1)

<223> D-4Hyp(2R, 4S)

<400> 53

Pro Ala Gln Leu Gly Leu Ala Gly Pro Ala

1 5 10

<210> 54

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: синтетический пептид

<220>

<223> Аминокислотная последовательность YDE-047

<400> 54

Ala Gly Gln Leu Gly Leu Ala Gly Pro Lys

1 5 10

<210> 55

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: синтетический пептид

<220>

<223> Аминокислотная последовательность YDE-055

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (1)..(1)

<223> 4Hyp

<400> 55

Pro Gly Gln Leu Gly Leu Ala Gly Ala Lys

1 5 10

<210> 56

<211> 7

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: синтетический пептид

<220>

<223> Аминокислотная последовательность YDE-041

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (1)..(1)

<223> 4Hyp

<400> 56

Pro Gly Gln Leu Gly Leu Ala

1 5

<210> 57

<211> 7

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: синтетический пептид

<220>

<223> Аминокислотная последовательность YDE-059

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (1)..(1)

<223> 4Hyp

<400> 57

Pro Gly Gln Glu Gly Leu Gly

1 5

<210> 58

<211> 6

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: синтетический пептид

<220>

<223> Аминокислотная последовательность YDE-042

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (1)..(1)

<223> 4Hyp

<400> 58

Pro Gly Gln Leu Gly Leu

1 5

<210> 59

<211> 6

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: синтетический пептид

<220>

<223> Аминокислотная последовательность YDE-064

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (1)..(1)

<223> D-4Hyp(2R, 4S)

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (3)..(3)

<223> D-Gln

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (4)..(4)

<223> D-Leu

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (6)..(6)

<223> D-Leu

<400> 59

Pro Gly Gln Leu Gly Leu

1 5

<210> 60

<211> 5

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: синтетический пептид

<220>

<223> Аминокислотная последовательность YDE-043

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (1)..(1)

<223> 4Hyp

<400> 60

Pro Gly Gln Leu Gly

1 5

<210> 61

<211> 5

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: синтетический пептид

<220>

<223> Аминокислотная последовательность YDE-066

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (1)..(1)

<223> 4Hyp

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (4)..(4)

<223> D-Leu

<400> 61

Pro Gly Gln Leu Gly

1 5

<210> 62

<211> 5

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: синтетический пептид

<220>

<223> Аминокислотная последовательность YDE-075

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (1)..(1)

<223> D-4Hyp(2R, 4S)

<400> 62

Pro Gly Gln Leu Gly

1 5

<210> 63

<211> 10

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: синтетический пептид

<220>

<223> Аминокислотная последовательность YDE-034

<220>

<221> Модифицированный остаток

<222> (1)..(1)

<223> 4Hyp(2S, 4S)

<400> 63

Pro Gly Gln Leu Gly Leu Ala Gly Pro Lys

1 5 10

<---

Изобретение относится к новому пептиду и фармацевтической композиции для лечения глазного заболевания, которая включает пептид в качестве активного фармацевтического ингредиента. Когда новый пептид по настоящему изобретению вводят в глаза, он увеличивает количество секретируемой слезы и восстанавливает поврежденную роговицу. Таким образом, его можно эффективно использовать в качестве терапевтического средства для лечения глазного заболевания. 12 н. и 5 з.п. ф-лы, 173 ил., 18 табл., 4 пр.

1. Соединение, представленное формулой 1:

[Формула 1]

где

R¹ выбирают из замещенного или незамещенного C_1-6 алкила, , , , , , , и ;

R² выбирают из водорода, замещенного или незамещенного C_1-6 алкила и ;

R³ выбирают из замещенного или незамещенного C_1-6 алкила, и ;

R⁴ и R⁵, каждый независимо, представляют собой водород, замещенный или незамещенный C_1–6–алкил, –OR_b, –CH₂OR_b или галоген при условии, что по меньшей мере один из R⁴ и R⁵ не является H;

R⁶-R⁹, каждый независимо, представляют собой водород или замещенный или незамещенный C_1–6–алкил, причем заместителем является –C(=O)NH₂; R_a представляет собой водород или C_1–6–алкил;

R_b представляет собой водород или C_1–6–алкил;

n является целым числом от 1 до 10;

кроме того, причем, если не указано иное, когда группа является замещенной, она замещена заместителем, выбранным из –X₁, –R_j, –O^–, =O, –OR_j, –SR_j, –S^–, –N(R_j)₂, –N⁺(R_j)₃, =NR_j, –C(X₁)₃, –CN, –OCN, –SCN, –N=C=O, –NCS, –NO, –NO₂, =N–OH, =N₂, –N₃, –NHC(=O)R_j, –C(=O)R_j, –C(=O)NR_jR_j, –S(=O)₂O^–, –S(=O)₂OH, –S(=O)₂R_j, –OS(=O)₂OR_j, –S(=O)₂NR_j, –S(=O)R_j, –OP(=O)(OR_j)₂, –C(=O)R_j, алкилен–C(=O)R_j, –C(=S)R_j, –C(=O)OR_j, алкилен–C(=O)OR_j, –C(=O)O^–, алкилен–C(=O)O–, –C(=S)OR_j, –C(=O)SR_j, –C(=S)SR_j, –C(=O)NR_jR_j, алкилен–C(=O)NR_jR_j, –C(=S)NR_jR_j и –C(–NR_j)NR_jR_j;

X₁ представляет собой F, Cl, Br или I;

в каждом случае независимо R_j представляет собой водород, C_1–6–алкил, C_5–12–арил, C_7–12–арилалкил или гетероцикл; и

кроме того, где соединение не является HyP-Gly-Gln-Asp-Gly-Leu-Ala-Gly-Pro-Lys, HyP-Gly-Gln-Ile-Gly-Leu-Ala-Gly-Pro-Lys, HyP-Gly-Gln-Leu-Gly-Leu-Ala-Gly-Pro-Gln или HyP-Gly-Gln-Leu-Gly-Leu-Ala-Gly-Pro-Nle(6-OH).

2. Соединение по п.1, где R¹ выбирают из группы, состоящей из , , , , , , , , , , , , , , и .

3. Соединение по п.1, где R² выбирают из группы, состоящей из , , , , , и .

4. Соединение по п.1, где R³ выбирают из группы, состоящей из , , , и .

5. Соединение по п.1, где R⁴ выбирают из группы, состоящей из H, –OH и –CH₃.

6. Соединение, выбранное из группы, состоящей из HyP–Gly–Gln–Glu–Gly–Leu–Ala–Gly–Pro–Lys, HyP–Gly–Gln–Asn–Gly–Leu–Ala–Gly–Pro–Lys, HyP–Gly–Gln–Gln–Gly–Leu–Ala–Gly–Pro–Lys, HyP–Gly–Gln–His–Gly–Leu–Ala–Gly–Pro–Lys, HyP–Gly–Gln–Lys–Gly–Leu–Ala–Gly–Pro–Lys, HyP–Gly–Gln–Ser–Gly–Leu–Ala–Gly–Pro–Lys, HyP–Gly–Gln–Thr–Gly–Leu–Ala–Gly–Pro–Lys, HyP–Gly–Gln–Ala–Gly–Leu–Ala–Gly–Pro–Lys, HyP–Gly–Gln–Val–Gly–Leu–Ala–Gly–Pro–Lys, HyP–Gly–Gln–Leu–Gly–Leu–Ala–Gly–Pro–Lys, HyP–Gly–Gln–Phe–Gly–Leu–Ala–Gly–Pro–Lys, HyP–Gly–Gln–Tyr–Gly–Leu–Ala–Gly–Pro–Lys, HyP–Gly–Gln–Trp–Gly–Leu–Ala–Gly–Pro–Lys, HyP–Gly–Gln–Ser(гомо)–Gly–Leu–Ala–Gly–Pro–Lys, _D–HyP(2R,4S)–Gly–Gln–Leu–Gly–Leu–Ala–Gly–Pro–Lys, _D–Hyp(2R,4S)–Gly–_D–Gln–_D–Leu–Gly–_D–Leu–_D–Ala–Gly–_D–Pro–_D–Lys, _D–Hyp(2R, 4R)–Gly–_D–Gln–_D–Leu–Gly–_D–Leu–_D–Ala–Gly–_D–Pro–_D–Lys,

HyP–Gly–Gln–Asp–Val–Leu–Ala–Gly–Pro–Lys, HyP–Gly–Gln–Asp–Ile–Leu–Ala–Gly–Pro–Lys, HyP–Gly–Gln–Asp–Leu–Leu–Ala–Gly–Pro–Lys, HyP–Gly–Gln–Asp–Ala–Leu–Ala–Gly–Pro–Lys, HyP–Gly–Gln–Asp–Ser–Leu–Ala–Gly–Pro–Lys, HyP–Gly–Gln–Asp–Thr–Leu–Ala–Gly–Pro–Lys, HyP–Gly–Gln–Leu–Ala–Leu–Ala–Gly–Pro–Lys,

HyP–Gly–Gln–Leu–Gly–Leu–Ala–Gly–Pro–Leu, HyP–Gly–Gln–Leu–Gly–Leu–Ala–Gly–Pro–Glu, HyP–Gly–Gln–Leu–Gly–Leu–Ala–Gly–Pro–Ala, _D–HyP(2R,4S)–Gly–Gln–Leu–Gly–Leu–Ala–Gly–Pro–Ala,

Hyp(2S,4S)–Gly–Gln–Leu–Gly–Leu–Ala–Gly–Pro–Lys, (4–гидрокси–Me)Pro–Gly–Gln–Leu–Gly–Leu–Ala–Gly–Pro–Lys, (4–фтор)Pro–Gly–Gln–Leu–Gly–Leu–Ala–Gly–Pro–Lys, (4–диметил)Pro–Gly–Gln–Leu–Gly–Leu–Ala–Gly–Pro–Lys, (4–Me)Pro–Gly–Gln–Leu–Gly–Leu–Ala–Gly–Pro–Lys, (5–Me)Pro–Gly–Gln–Leu–Gly–Leu–Ala–Gly–Pro–Lys,

Hyp–Gly–Ala–Leu–Gly–Leu–Ala–Gly–Pro–Lys, Hyp–Gly–Gln–Leu–Gly–Ala–Ala–Gly–Pro–Lys, Hyp–Gly–Gln–Leu–Gly–Leu–Ala–Ala–Pro–Lys, Hyp–Ala–Gln–Leu–Gly–Leu–Ala–Gly–Pro–Lys, _D–Hyp(2R,4S)–Ala–Gln–Leu–Gly–Leu–Ala–Gly–Pro–Lys и _D–Hyp(2R,4S)–Ala–Gln–Leu–Gly–Leu–Ala–Gly–Pro–Ala.

7. Пептид, имеющий аминокислотную последовательность, представленную HyP–Gly–Gln–Xaa–Gly–Leu–Ala–Gly–Pro–Lys, где Xaa выбирают из группы, состоящей из Glu, Asn, Gln, His, Lys, Ser, Thr, Ala, Val, Leu, Phe, Tyr, Trp и гомо–Ser.

8. Пептид, имеющий аминокислотную последовательность, представленную HyP–Gly–Gln–Asp–Xaa–Leu–Ala–Gly–Pro–Lys, где Xaa выбирают из группы, состоящей из Val, Ile, Leu, Ala, Ser и Thr.

9. Пептид, имеющий аминокислотную последовательность, представленную HyP–Gly–Gln–Leu–Gly–Leu–Ala–Gly–Pro–Xaa, где Xaa выбирают из группы, состоящей из Leu, Glu и Ala.

10. Пептид, имеющий аминокислотную последовательность, представленную PD–Gly–Gln–Leu–Gly–Leu–Ala–Gly–Pro–Lys, где PD представляет собой любое соединение, выбранное из группы, состоящей из следующих формул:

, и

11. Пептид, имеющий аминокислотную последовательность, представленную PD–Gly–Gln–Leu–Gly–Leu–Ala–Gly–Pro–Lys, где PD представляет собой любое соединение, выбранное из группы, состоящей из следующих формул:

, и .

12. Пептид, имеющий любую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из Hyp–Gly–Gln–Leu–Gly–Leu–Ala–Gly–Ala–Lys, Hyp–Gly–Gln–Glu–Gly–Lys–Gly, HyP–Gly–Gln–Leu–Gly–Leu, _D–HyP(2R,4S)–Gly–_D–Gln–_D–Leu–Gly–_D–Leu, HyP–Gly–Gln–Leu–Gly, HyP–Gly–Gln–_D–Leu–Gly и _D–HyP(2R,4S)–Gly–Gln–Leu–Gly.

13. Соединение, представленное формулой 8:

[Формула 8]

14. Соединение, представленное формулой 10:

[Формула 10]

15. Фармацевтическая композиция для лечения глазного заболевания, которая содержит соединение по любому из пп.1–6, 13 и 14 или пептид по любому из пп.7-12 в качестве активного фармацевтического ингредиента.

16. Фармацевтическая композиция по п.15, где глазное заболевание представляет собой заболевание, выбранное из группы, состоящей из ретинопатии, кератита, сухой макулярной дегенерации, влажной макулярной дегенерации, синдрома сухого глаза, сухого кератоконъюнктивита и поражения кератоконъюнктивального эпителия.

17. Способ лечения глазного заболевания, который включает введение субъекту соединения по любому из пп.1–6, 13 и 14 или пептида по любому из пп.7-12.