ГРАНУЛИРОВАННЫЙ СЛОЖНЫЙ КЕТОНОВЫЙ ЭФИР ГИНКОБИЛОБА И СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ Российский патент 2022 года по МПК A61K36/16 A61K9/14 A61K9/16 A61K127/00 B01D11/02 

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ

[0001] Изобретение относится к технической области традиционной китайской медицины и, в частности, к гранулированному сложному кетоновому эфиру гинкго билоба и способу его получения.

ПРЕДШЕСТВУЮЩИЙ УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

[0002] По мере старения населения Китая осведомленность людей о профилактике и лечении сердечно-сосудистых и цереброваскулярных заболеваний постепенно растет. Листья Ginkgo biloba (гинкго билоба) представляют собой сухие листья Ginkgo biloba, сладкие, горькие, вяжущие и успокаивающие, и принадлежащие к каналам сердца и легких. Согласно записям «Китайской традиционной медицины», листья гинкго билоба могут «сжимать ци легких, облегчать кашель и астму, а также останавливать образование белых пятен и помутнение». Сложный кетоновый эфир гинкго билоба представляет собой продукт экстракта гинкго билоба, разработанный в Китае. Это экстракт сушеных листьев Ginkgo Biloba L, растения семейства Ginkgo. Сложный кетоновый эфир гинкго билоба включает различные формы препаратов. Среди этих препаратов гранулированный сложный кетоновый эфир гинкго билоба представляет собой светлые коричнево-желтые гранулы, сладкие и слегка горькие. Гранулированный сложный кетоновый эфир гинкго билоба в основном применяется для лечения головокружения, ишемической болезни сердца и стенокардии, вызванных обструкцией грудной клетки по типу застоя крови и легким церебральным артериосклерозом по типу застоя крови, а также для активации и устранения застоя крови, и его лечебный эффект является значительным. Из-за значительного лечебного эффекта гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба фальсификация является серьезной проблемой в процессе производства соответствующих продуктов на рынке. Например, флавоноидные агликоны, такие как кверцетин, искусственно добавляются для значительного увеличения определяемого содержания общих флавонолгликозидов, что на первый взгляд соответствует техническим требованиям, предъявляемым к гранулированному сложному кетоновому эфиру гинкго билоба, но фактически влияет на внутреннее качество лекарственных препаратов. Между тем, содержание гинкголевых кислот в сопутствующих продуктах на рынке эффективно не контролируется. Добавляют сырье с высоким содержанием гинкголевых кислот, что создает определенный риск для безопасности. Однако традиционные способы получения и стандарты качества имеют ограничения, которые затрудняют обеспечение стабильности качества гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба, что приводит тому, что большое количество гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба не отвечает требованиям. Чтобы гарантировать однородность разных партий гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба необходимы дальнейшие исследования и обсуждения, касающиеся гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[0003] В настоящем описании предлагается гранулированный сложный кетоновый эфир гинкго билоба и способ его получения для решения проблемы, заключающейся в том, что традиционный гранулированный сложный кетоновый эфир гинкго билоба является нестабильным и низким по качеству.

[0004] Первый аспект настоящего изобретения относится к гранулированному сложному кетоновому эфиру гинкго билоба, который получают путем смешивания сырья на основе сложного кетонового эфира гинкго билоба и эксципиентов, гранулирования и расфасовки в пакеты. Гранулированный сложный кетоновый эфир гинкго билоба, в расчете на массу загрузки каждого пакета 1 г, удовлетворяет следующим условиям:

[0005] 1) содержание рутина (C₂₇H₃₀O₁₆, номер CAS 153-18-4) меньше или равно 1,60 мг/пакет;

[0006] 2) содержание кверцетина (C₁₅H₁₀O₇, номер CAS 117-39-5) меньше или равно 0,160 мг/пакет;

[0007] 3) содержание билобалида (C₁₅H₁₈O₈, номер CAS 33570-04-6) составляет 1,04-2,08 мг/пакет;

[0008] 4) содержание гинкголида J (C₂₀H₂₄O₁₀, номер CAS 107438-79-9) составляет 0,04-0,20 мг/пакет;

[0009] 5) остаточное содержание этанола меньше или равно 0,2 мг/пакет;

[0010] 6) содержание бифлавоноидов меньше или равно 0,008 мг/пакет, причем указанные бифлавоноиды включают аментофлавон (C₃₀H₁₈O₁₀, номер CAS 1617-53-4), билобетин (C₃₁H₂₀O₁₀, номер CAS: 521-32-4) и гинкгетин (C₃₂H₂₂O₁₀, номер CAS 481-46-9);

[0011] 7) содержание генистина (номер CAS 529-59-9) равно 0, и содержание гинкголида M (номер CAS 15291-78-8) равно 0.

[0012] Предпочтительно содержание рутина меньше или равно 1,28 мг/пакет.

[0013] Предпочтительно содержание кверцетина меньше или равно 0,152 мг/пакет.

[0014] Предпочтительно остаточное содержание этанола меньше или равно 0,08 мг/пакет.

[0015] Предпочтительно содержание билобалида составляет 1,44-1,92 мг/пакет.

[0016] Предпочтительно содержание гинкголида J составляет 0,12-0,20 мг/пакет.

[0017] Предпочтительно содержание бифлавоноидов меньше или равно 0,004 мг/пакет.

[0018] Предпочтительно содержание общих флавоноидов в гранулированном сложном кетоновом эфире гинкго билоба составляет 14,08-26,40 мг/пакет при использовании рутина (C₂₇H₃₀O₁₆) в качестве стандартного образца.

[0019] Более предпочтительно содержание общих флавоноидов в гранулированном сложном кетоновом эфире гинкго билоба составляет 17,6-22 мг/пакет при использовании рутина в качестве стандартного образца.

[0020] Более предпочтительно содержание общих флавоноидов в гранулированном сложном кетоновом эфире гинкго билоба составляет 19,6-22 мг/пакет при использовании рутина в качестве стандартного образца. Содержание общих флавоноидов в гранулированном сложном кетоновом эфире гинкго билоба рассчитывается в соответствии с Общими правилами 0401 Китайской фармакопеи (издание 2015 г.), том IV.

[0021] Предпочтительно содержание терпеновых лактонов в гранулированном сложном кетоновом эфире гинкго билоба составляет 2,4-4,8 мг/пакет, в расчете на общее содержание билобалида (C₁₅H₁₈O₈, номер CAS 33570-04-6), гинкголида A (C₂₀H₂₄O₉, номер CAS 15291-75-5), гинкголида B (C₂₀H₂₄O₁₀, номер CAS 15291-77-7) и гинкголида C (C₂₀H₂₄O₁₁, номер CAS 15291-76-6). Содержание терпеновых лактонов рассчитывается в пересчете на сухие продукты.

[0022] Более предпочтительно содержание терпеновых лактонов в гранулированном сложном кетоновом эфире гинкго билоба составляет 3,6-4,8 мг/пакет, в расчете на общие содержания билобалида, гинкголида A, гинкголида B и гинкголида C.

[0023] Предпочтительно содержание общей гинкголевой кислоты в гранулированном сложном кетоновом эфире гинкго билоба меньше или равно 2 мкг/пакет.

[0024] Более предпочтительно содержание общей гинкголевой кислоты в гранулированном сложном кетоновом эфире гинкго билоба меньше или равно 1 мкг/пакет.

[0025] Более предпочтительно общие гинкголевые кислоты в гранулированном сложном кетоновом эфире гинкго билоба характеризуются общими содержаниями гинкголевой кислоты C13:0 (C₂₀H₃₂O₃, номер CAS 20261-38-5), гинкголевой кислоты C15:1 (C₂₂H₃₄O₃, номер CAS 22910-60-7) и гинкголиевой кислоты C17:1 (C₂₄H₃₈O₃, номер CAS 111047-30-4). Содержание общих гинкголевых кислот рассчитывается в соответствии с Общими правилами 0512 и 0431 Китайской фармакопеи (издание 2015 г.), том IV.

[0026] Предпочтительно содержание общих флавонолгликозидов в гранулированном сложном кетоновом эфире гинкго билоба составляет 9,6-14,0 мг/пакет. Содержание общих флавонолгликозидов рассчитывается в пересчете на сухие продукты.

[0027] Более предпочтительно содержание общих флавонолгликозидов в гранулированном сложном кетоновом эфире гинкго билоба составляет 12,0-14,0 мг/пакет.

[0028] Более предпочтительно общие флавонолгликозиды представляют собой в основном гликозиды, образованные кверцетином, кемпферидом и изорамнетином в виде агликонов, и содержат свободный кверцетин, кемпферид и изорамнетин.

[0029] Более предпочтительно содержание общих флавонолгликозидов рассчитывается по формуле (1): содержание общих флавонолгликозидов = (содержание кверцетина + содержание кемпферида + содержание изорамнетина) × 2,51.

[0030] Предпочтительно отношение площадей хроматографических пиков кверцетина к кемпфериду (C₁₆H₁₂O₆, номер CAS 491-54-3) в гранулированном сложном кетоновом эфире гинкго билоба составляет 0,8-1,2, и отношение площадей хроматографических пиков изорамнетина (C₁₆H₁₂O₇, номер CAS 207-545-5480-19-3) к кверцетину составляет больше 0,15.

[0031] Три агликона (кверцетин, кемпферид и изорамнетин), образующиеся после гидролиза флавоноидов гинкго в гранулированном сложном кетоновом эфире гинкго билоба, имеют определенное пропорциональное соотношение, которое в некоторой степени может отражать то, что сырье и производственные процессы являются нормальными, и могут использоваться для контроля качества продукта. Отношения площадей хроматографических пиков кверцетина к кемпферолу и изорамнетина к кверцетину рассчитывают согласно традиционным методам определения общих флавонолгликозидов.

[0032] Предпочтительно паттерн спектра гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба включает четыре общих характерных пика, как показано на фиг. 1: пик 1 представляет собой характерный пик рутина, пик 6 представляет собой характерный пик кверцетина, пик 7 представляет собой характерный пик кемпферида, и пик 8 представляет собой характерный пик изорамнетина.

[0033] Предпочтительно сходство между паттерном спектра гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба и хроматограммой тестируемого продукта больше или равно 0,90. Сходство между паттернами спектров тестируемых продуктов и гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба рассчитывают и сравнивают в соответствии с «Системой оценки сходства для хроматографических паттернов в традиционной китайской медицине» (версия 2.0).

[0034] Содержания рутина, кверцетина, билобалида, гинкголида J, общих флавонолгликозидов и терпенового лактона, а также паттерн спектра гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба в указанном выше гранулированном сложном кетоновом эфире гинкго билоба определяют с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) согласно Общим правилам 0512 в Китайской фармакопее (издание 2015 г.), том IV. Содержания дифлавоноидов, общих гинкголевых кислот, гинкголида М и генистина определяют с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии - масс-спектрометрии (ВЭЖХ-МС).

[0035] Все указанные выше проценты (%) являются массовыми процентами.

[0036] Согласно второму аспекту настоящего изобретения предложен способ получения гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба. Целевой гранулированный сложный кетоновый эфир гинкго билоба получают путем добавления декстрина, порошка сахарозы, крахмала, низкозамещенной гидроксипропилцеллюлозы и аспартама в сырье на основе сложного кетонового эфира гинкго билоба в соответствии с соотношением в составе, тщательного перемешивания, гранулирования и высушивания.

[0037] Предпочтительно способ получения гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба включает следующие стадии:

[0038] A) смешивание и перемешивание сырья на основе сложного кетонового эфира гинкго билоба, декстрина, порошка сахарозы, крахмала, низкозамещенной гидроксипропилцеллюлозы и аспартама в соответствии с соотношением в составе и добавление в то же время водного раствора этанола с получением мягкого материала;

[0039] B) получение из мягкого материала влажных гранул с последующим высушиванием влажных гранул;

[0040] C) просеивание и выпрямление высушенных гранул, перемешивание, выпуск и расфасовка в пакеты с получением целевого гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба.

[0041] Предпочтительно на стадии A) порошок сахарозы получают путем измельчения сахарозы и просеивания.

[0042] Более предпочтительно номер сита при просеивании составляет 70-90 меш. Более предпочтительно номер сита при просеивании составляет 80 меш.

[0043] Предпочтительно на стадии А) крахмал представляет собой кукурузный крахмал.

[0044] Предпочтительно на стадии A) время смешивания и перемешивания составляет 15-20 минут.

[0045] Предпочтительно на стадии A) водный раствор этанола имеет процентное массовое содержание 69-71%. Указанный 69-71% водный раствор этанола готовят путем медленного добавления 16,00 ± 0,05 кг абсолютного этанола в 8 кг очищенной воды при перемешивании и оставляют на 5 минут.

[0046] Более предпочтительно водный раствор этанола имеет процентное массовое содержание 70%.

[0047] Предпочтительно на стадии А) смешивание и перемешивание проводят в смесителе. Смеситель может быть обычным смесителем, доступным в продаже. В частности, смеситель представляет собой смеситель лоткового типа.

[0048] Предпочтительно на стадии B) влажные гранулы получают в грануляторе. Гранулятор может быть обычным гранулятором, доступным в продаже. В частности, гранулятор представляет собой колеблющийся гранулятор.

[0049] Предпочтительно на стадии B) влажные гранулы получают после просеивания. Более предпочтительно номер сита при просеивании составляет 12-20 меш. Более предпочтительно номер сита при просеивании составляет 16 меш.

[0050] Предпочтительно на стадии B) высушивание проводят в сушилке кипящего слоя. Сушилка кипящего слоя может быть обычной сушилкой кипящего слоя, доступной в продаже.

[0051] Более предпочтительно температура воздуха на входе в сушилку кипящего слоя составляет 80-105°C.

[0052] Более предпочтительно температура воздуха на входе в сушилку кипящего слоя составляет 90°C.

[0053] Предпочтительно на стадии B) время колебания при высушивании составляет 80-100 секунд, и частота составляет 5-8 раз. Более предпочтительно время колебания при высушивании составляет 90 секунд, и частота составляет 6-7 раз.

[0054] Предпочтительно на стадии B) температура прекращения высушивания материала составляет 66-70°C. Более предпочтительно температура прекращения высушивания материала составляет 68°C. Температура прекращения высушивания материала означает прекращение высушивания при достижении заданной температуры материала во время высушивания.

[0055] Предпочтительно на стадии B) время высушивания составляет 15-30 минут.

[0056] Предпочтительно на стадии C) номер сита при просеивании и выпрямлении составляет 12-40 меш.

[0057] Предпочтительно на стадии С) перемешивание проводят в смесителе. Смеситель может быть обычным смесителем, доступным в продаже.

[0058] Более предпочтительно смеситель может быть смесителем с многонаправленным движением.

[0059] Предпочтительно на стадии C) скорость перемешивания составляет 20-25 оборотов в минуту (об/мин).

[0060] Предпочтительно на стадии C) время перемешивания составляет 5-6 минут.

[0061] Предпочтительно соотношение в составе гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба, в массовых частях, включает следующее:

[0062] 35-45 частей сырья на основе сложного кетонового эфира гинкго билоба;

[0063] 450-500 частей декстрина;

[0064] 420-450 частей порошка сахарозы;

[0065] 10-30 частей крахмала;

[0066] 10-30 частей низкозамещенной гидроксипропилцеллюлозы; и

[0067] 5-10 частей аспартама.

[0068] Более предпочтительно соотношение в составе гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба, в массовых частях, включает следующее:

[0069] 40 частей сырья на основе сложного кетонового эфира гинкго билоба;

[0070] 480 частей декстрина;

[0071] 433 части порошка сахарозы;

[0072] 20 частей крахмала;

[0073] 20 частей низкозамещенной гидроксипропилцеллюлозы; и

[0074] 7 частей аспартама.

[0075] Более предпочтительно номер CAS низкозамещенной гидроксипропилцеллюлозы представляет собой 9004-65-3 или 78214-41-2.

[0076] Более предпочтительно сырье на основе сложного кетонового эфира гинкго билоба представляет собой лист гинкго билоба.

[0077] Более предпочтительно листья гинкго билоба представляют собой высушенные листья саженцев гинкго билоба. Листья саженцев гинкго билоба представляют собой листья невзрослых деревьев гинкго, которые высаживают с целью сбора листьев гинкго билоба.

[0078] Еще более предпочтительно условия высушивания являются такими: температура высушивания составляет 140-160°C, и время высушивания составляет 6-15 минут.

[0079] Еще более предпочтительно листья саженцев гинкго билоба отвечают следующим требованиям:

[0080] а) содержание общих флавонолгликозидов больше или равно 0,85%;

[0081] b) содержание терпеновых лактонов больше или равно 0,40%;

[0082] c) общее содержание золы меньше или равно 10,0%;

[0083] d) содержание нерастворимой в кислоте золы меньше или равно 2,0%;

[0084] e) содержание экстракта больше или равно 25,0%;

[0085] f) отношение площадей хроматографических пиков кверцетина к кемпфериду составляет 0,65-1,2, и отношение площадей хроматографических пиков изорамнетина к кверцетину составляет больше 0,15;

[0086] g) содержание примесей меньше или равно 2,0%;

[0087] h) содержание воды меньше или равно 12,0%;

[0088] i) содержание остатка диоксида серы меньше или равно 150 мг/кг.

[0089] Определения общих флавонолгликозидов и терпеновых лактонов в листьях саженцев гинкго билоба такие же, как и для гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба, упомянутого выше. Определение отношения площадей хроматографических пиков флавоноидных агликонов в листьях саженцев гинкго билоба (то есть отношения площадей хроматографических пиков кверцетина, кемпферида и изорамнетина) такое же, как для вышеупомянутого гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба.

[0090] Общее содержание золы и содержание нерастворимой в кислоте золы в листьях саженцев гинкго билоба определяют в соответствии с методом определения золы, описанным в Общих правилах 2302 Китайской фармакопеи (издание 2015 г.), том IV. Содержание экстракта в листьях саженцев гинкго билоба определяют в соответствии с методом определения экстракта, описанным в Общих правилах 2201 Китайской фармакопеи (издание 2015 г.), том IV. Содержание примесей в листьях саженцев гинкго билоба определяют в соответствии с методом определения примесей, описанным в Общих правилах 2301 Китайской фармакопеи (издание 2015 г.), том IV. Содержание воды в листьях саженцев гинкго билоба определяют в соответствии с методом определения воды, описанным в Общих правилах 0832 Китайской фармакопеи (издание 2015 г.), том IV. Содержание остатка диоксида серы в листьях саженцев гинкго билоба определяют в соответствии с методом определения остатка диоксида серы, описанным в Общих правилах 2331 Китайской фармакопеи (издание 2015 г.), том IV.

[0091] Предпочтительно способ получения сырья на основе сложного кетонового эфира гинкго билоба включает следующие стадии:

[0092] 1) добавление водного раствора этанола к измельченным листьям гинкго билоба, нагревание с обратным холодильником для экстракции и затем получение фильтрата фильтрованием;

[0093] 2) концентрирование фильтрата и осуществление водного осаждения, центрифугирование супернатанта с получением центрифужной жидкости;

[0094] 3) загрузка центрифужной жидкости в колонку с макропористой смолой, затем промывание водой и элюирование растворителем с получением первого элюента; причем первый элюент включает первый элюент с низкой концентрацией растворителя и первый элюент с высокой концентрацией растворителя;

[0095] 4) загрузка первого элюента с низкой концентрацией растворителя в полиамидную колонку, затем промывание водой и элюирование этанолом с получением второго элюента;

[0096] 5) объединение и концентрирование второго элюента с первым элюентом с высокой концентрацией растворителя, и затем экстракция, высушивание, измельчение, просеивание и перемешивание с получением целевого сырья на основе сложного кетонового эфира гинкго билоба.

[0097] Более предпочтительно на стадии 1) измельченные листья гинкго билоба получают путем измельчения листьев гинкго билоба.

[0098] Более предпочтительно на стадии 1) получение фильтрата включает следующее:

[0099] А) добавление 60% водного раствора этанола к измельченным листьям гинкго билоба, нагревание с обратным холодильником для экстракции и затем получение первого фильтрата путем фильтрования;

[00100] B) добавление воды к остатку лекарственного средства, оставшемуся после фильтрования на стадии A), нагревание с обратным холодильником для экстракции и затем получение второго фильтрата путем фильтрования;

[00101] C) объединение и концентрирование в густую пасту второго фильтрата со стадии B) и первого фильтрата со стадии A), растворение, оставление для остывания и фильтрование для получения целевого фильтрата.

[00102] Более предпочтительно на стадии А) условия нагревания с обратным холодильником для экстракции следующие: 2-кратная экстракция; 3 ч на каждую экстракцию.

[00103] Более предпочтительно на стадии B) условия нагревания с обратным холодильником для экстракции следующие: 1-кратная экстракция; 0,5 ч на каждую экстракцию.

[00104] Более предпочтительно на стадии B) вода представляет собой очищенную воду.

[00105] Более предпочтительно на стадии C) объединение и концентрирование выбрано из одного из способа концентрирования после объединения или способа объединения после концентрирования. Способ концентрирования после объединения заключается в объединении второго фильтрата с первым фильтратом и последующего концентрирования. Способ объединения после концентрирования заключается в сначала концентрировании первого фильтрата, и затем объединении со вторым фильтратом и продолжении концентрирования.

[00106] Более предпочтительно на стадии C) растворение представляет собой растворение с использованием горячей воды. Горячая вода представляет собой очищенную воду, нагретую до 60-100°C.

[00107] Предпочтительно на стадии 2) фильтрат концентрируют, чтобы он не имел запаха спирта.

[00108] Предпочтительно на стадии 2) относительная плотность концентрированного фильтрата составляет 1,04-1,08.

[00109] Предпочтительно на стадии 2) очищенная вода, добавляемая при водном осаждении, в 1,5-2,5 раза превышает количество порошка гинкго билоба. В частности, то, что добавленная очищенная вода в 1,5-2,5 раза превышает количество порошка гинкго билоба, означает, что на каждый 1 г порошка гинкго билоба добавляют 1,5-2,5 мл очищенной воды.

[00110] Предпочтительно на стадии 2) водное осаждение представляет собой промежуточное охлаждение в охлаждающей воде при 5-7°C в течение 12-24 часов.

[00111] Предпочтительно на стадии 2) условия центрифугирования следующие: скорость центрифугирования составляет 13000-15000 об/мин, и время центрифугирования на 3-5 л супернатанта составляет 0,75-1,25 мин.

[00112] Более предпочтительно, условия центрифугирования следующие: скорость центрифугирования составляет 14000 об/мин, и время центрифугирования на 3-5 л супернатанта составляет 1,00 мин.

[00113] На стадии 2) вышеупомянутые концентрирование, водное осаждение и центрифугирование могут обеспечить оптимизацию условий, обеспечивающих качество сырья на основе сложного кетонового эфира гинкго билоба согласно настоящему изобретению, в результате чего качество гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба будет лучше.

[00114] Предпочтительно на стадии 3) промывание водой представляет собой сначала прямое промывание очищенной водой в течение 1-2 часов, а затем обратное промывание в течение 0,5-1,5 часов. Промывание водой может обеспечить оптимизацию условий качества, таких как гинкголевые кислоты и зольного остатка, в сырье на основе сложного кетонового эфира гинкго билоба согласно настоящему изобретению, в результате чего качество гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба будет лучше.

[00115] Более предпочтительно промывание водой представляет собой сначала прямое промывание очищенной водой в течение 1,5 часов, а затем обратное промывание в течение 1 часа.

[00116] Предпочтительно на стадии 3) элюирование растворителем представляет собой элюирование 18% водным раствором этанола, 30% водным раствором этанола и 50% водным раствором этанола последовательно с получением 18% этанольного элюента, 30% этанольного элюента и 50% этанольного элюента, соответственно.

[00117] Предпочтительно на стадии 3) первый элюент с высокой концентрацией растворителя представляет собой 50% этанольный элюент.

[00118] Предпочтительно на стадии 3) первый элюент с низкой концентрацией растворителя представляет собой объединенный раствор 18% этанольного элюента и 30% этанольного элюента.

[00119] Предпочтительно на стадии 4) промывание водой представляет собой прямое промывание с использованием очищенной воды, в 0,5-2 раза превышающей объем полиамидной колонки. Более предпочтительно промывание водой представляет собой прямое промывание с использованием очищенной воды, в 1 раз превышающей объем полиамидной колонки. Промывание водой позволяет дополнительно удалить примеси, в том числе гинкголевую кислоту, из сложного кетонового эфира гинкго билоба.

[00120] Предпочтительно на стадии 4) первый элюент с низкой концентрацией растворителя концентрируют, чтобы не было запаха спирта, перед загрузкой в полиамидную колонку.

[00121] Предпочтительно на стадии 4) второй элюент представляет собой этанольный элюент.

[00122] Предпочтительно на стадии 5) объединение и концентрирование выбрано из одного из способа концентрирования после объединения или способа объединения после концентрирования. Способ концентрирования после объединения заключается в объединении второго элюента с первым элюентом с высокой концентрацией растворителя и затем концентрированием. Способ объединения после концентрирования заключается в сначала концентрировании первого элюента с высокой концентрацией растворителя, а затем объединения его со вторым элюентом и продолжении концентрирования.

[00123] Предпочтительно на стадии 5) второй элюент и первый элюент с высокой концентрацией растворителя концентрируют, чтобы не было запаха спирта.

[00124] Предпочтительно на стадии 5) экстракцию проводят с использованием циклогексана в качестве растворителя. После экстракции циклогексановый экстракт отбрасывают.

[00125] Предпочтительно на стадии 5) высушивание выбрано из распылительной сушки или вакуумной сушки.

[00126] Более предпочтительно перед вакуумной сушкой концентрированный раствор необходимо сконцентрировать до густой пасты.

[00127] Предпочтительно на стадии 5) просеивание осуществляют через сито 80-100 меш. Более предпочтительно просеивание осуществляют через сито 90-100 меш. Наиболее предпочтительно просеивание осуществляют через сито 100 меш. Просеивание может гарантировать, что размер частиц сырья на основе сложного кетонового эфира гинкго билоба согласно настоящему описанию будет более мелким, в результате чего качество гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба будет лучше.

[00128] Предпочтительно на стадии 5) условия перемешивания следующие: смесительное оборудование представляет собой общий смеситель; скорость перемешивания составляет 10-12 об/мин; время перемешивания 1,5-2,5 часа. Перемешивание может обеспечить лучшую однородность сырья на основе сложного кетонового эфира гинкго билоба согласно настоящему описанию, в результате чего качество гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба будет лучше.

[00129] Более предпочтительно условия перемешивания следующие: смесительное оборудование представляет собой общий смеситель; скорость перемешивания 11 об/мин; время перемешивания 2 часа.

[00130] Третий аспект настоящего изобретения относится к применению способа получения гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба для получения гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба.

[00131] Как упомянуто выше, в настоящем описании предложен гранулированный сложный кетоновый эфир гинкго билоба и способ его получения. Благодаря оптимизированным стадиям и условиям получения можно получить высококачественный гранулированный сложный кетоновый эфир гинкго билоба. По сравнению с гранулированным сложным кетоновым эфиром гинкго билоба, полученным традиционными способами, гранулированный сложный кетоновый эфир гинкго билоба по настоящему изобретению имеет стабильное качество и низкую скорость потери качества. Однородность различных партий гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба является хорошей. В частности, гранулированный сложный кетоновый эфир гинкго билоба можно эффективно контролировать в отношении присутствия гинкголевых кислот путем предотвращения применения сырья с высоким содержанием гинкголиевой кислоты в гранулированном сложном кетоновом эфире гинкго билоба для того, чтобы эффективно повысить безопасность гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба. В то же время гранулированный сложный кетоновый эфир гинкго билоба, полученный способом по настоящему изобретению, обладает превосходным вкусовым ощущением, горечью, стабильностью, стойкостью к высоким температурам, характеристиками при получении и другими характеристиками.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ

[00132] На фиг. 1 показан паттерн спектра гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба согласно настоящему изобретению; в паттерне спектра 1: рутин; 6: кверцетин; 7: кемпферид; 8: изорамнетин.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ПРЕДПОЧТИТЕЛЬНЫХ ВАРИАНТОВ ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[00133] Настоящее раскрытие дополнительно описывается ниже со ссылкой на конкретные варианты осуществления. Следует понимать, что варианты осуществления предназначены только для описания настоящего раскрытия, а не для ограничения объема настоящего раскрытия.

[00134] Варианты осуществления настоящего раскрытия будут описаны ниже. Специалисты в данной области техники могут легко понять другие преимущества и эффекты настоящего раскрытия в соответствии с содержанием, раскрытым в описании. Настоящее раскрытие также может быть реализовано или применено с помощью других различных иллюстративных вариантов осуществления. Различные модификации или изменения также могут быть внесены во все детали описания на основании различных точек зрения и приложений, не выходя за рамки сущности настоящего изобретения.

[00135] Следует отметить, что технологическое оборудование или устройства, специально не указанные в следующих вариантах осуществления, представляют собой обычное оборудование или устройства в этой области техники. Все значения и диапазоны давления относятся к относительным давлениям. Все используемые ниже реагенты являются обычными реагентами в данной области техники. Все инструменты, используемые ниже, являются обычными в данной области техники.

[00136] Кроме того, следует понимать, что одна или более стадий способа, упомянутых в настоящем описании, не исключают других стадий способа, которые могут осуществляться до или после объединенных стадий, или того, что другие стадии способа могут быть вставлены между этими явно указанными стадиями, если не указано иное; также следует понимать, что взаимосвязь объединенного соединения между одним или более оборудованием/устройствами, упомянутыми в настоящем описании, не исключает того, что может быть другое оборудование/устройства до или после объединенного оборудования/устройств или что другое оборудование/устройства может быть вставлено между этим явно указанным оборудованием/устройствами, если не указано иное. Более того, если не указано иное, нумерация каждой стадии способа является только удобным инструментом для идентификации каждой стадии способа и не предназначена для ограничения порядка каждой стадии способа или ограничения объема настоящего описания. Изменение или корректировку относительной взаимосвязи также следует рассматривать как объем, в котором настоящее изобретение может быть реализовано без существенного изменения технического содержания.

Вариант осуществления 1

[00137] Высушенные листья саженцев гинкго билоба измельчают с получением измельченных листьев гинкго билоба. Добавляют 60% водный раствор этанола к измельченным листьям гинкго билоба, проводят экстракцию два раза путем нагревания с обратным холодильником, каждый раз в течение 3 часов, и получают первый путем фильтрования. Затем добавляют воду к отфильтрованному остатку лекарственного средства, оставшемуся после фильтрования, проводят экстракцию за один раз путем нагревания с обратным холодильником со временем экстракции 0,5 часа, и затем получают второй фильтрат путем фильтрования. Объединяют и концентрируют второй фильтрат в густую пасту и первый фильтрат. Объединение и концентрирование можно проводить путем концентрирования после объединения или объединения после концентрирования. Растворяют в очищенной воде, нагретой до 60-100°C, оставляют для охлаждения и фильтруют с получением фильтрата. Концентрируют фильтрат до относительной плотности 1,04-1,08 и без запаха спирта, добавляют очищенную воду, которая в 1,5-2,5 раза превышает количество порошка листьев гинкго билоба, охлаждают в промежуточном слое в охлаждающей воде при 5-7°C в течение 12-24 часов и центрифугируют супернатант со скоростью 14000 об/мин с получением центрифужной жидкости. Загружают центрифужную жидкость в колонку с макропористой смолой, сначала осуществляют прямое промывание очищенной водой в течение 1,5 часов, а затем обратное промывание в течение 1 часа. Проводят последовательное элюирование 18% водным раствором этанола, 30% водным раствором этанола и 50% водным раствором этанола с получением 18% этанольного элюента, 30% этанольного элюента и 50% этанольного элюента, соответственно, которые являются первыми элюентами. В первых элюентах 50% этанольный элюент является первым элюентом с высокой концентрацией растворителя, и объединенный раствор 18% этанольного элюента и 30% этанольного элюента является первым элюентом с низкой концентрацией растворителя. Затем первый элюент с низкой концентрацией растворителя концентрируют, чтобы не было запаха спирта. Загружают первый элюент с низкой концентрацией растворителя в полиамидную колонку, проводят прямое промывание очищенной водой, которая в 1 раз превышает объем полиамидной колонки, а затем элюируют этанолом с получением этанольного элюата, который является вторым элюатом. Объединяют и концентрируют второй элюент и первый элюент с высокой концентрацией растворителя до исчезновения запаха спирта. Объединение и концентрирование можно проводить путем концентрирования после объединения или объединения после концентрирования. После экстракции концентрата циклогексаном циклогексановый экстракт отбрасывают. Затем проводят распылительную сушку концентрированного раствора или концентрирование концентрированного раствора в густую пасту и вакуумную сушку густой пасты. Измельчают высушенные продукты, пропускают через сито 100 меш и перемешивают в общем смесителе со скоростью 11 об/мин в течение 2 часов с получением образца №1 целевого сырья на основе сложного кетонового эфира гинкго билоба.

Контрольный пример 1

[00138] Обычные листья гинкго билоба измельчают с получением измельченных листьев гинкго билоба. Добавляют 60% водный раствор этанола к измельченным листьям гинкго билоба, проводят экстракцию два раза путем нагревания с обратным холодильником, каждый раз в течение 3 часов, и получают первый фильтрат с помощью фильтрования. Затем добавляют воду к отфильтрованному остатку лекарственного средства, оставшемуся после фильтрования, проводят экстракцию за один раз путем нагревания с обратным холодильником со временем экстракции 0,5 часа, и затем получают второй фильтрат путем фильтрования. Объединяют и концентрируют второй фильтрат в густую пасту и первый фильтрат. Объединение и концентрирование можно проводить путем концентрирования после объединения или объединения после концентрирования. Растворяют в очищенной воде, нагретой до 60-100°C, оставляют для охлаждения и фильтруют с получением фильтрата. Загружают фильтрат в колонку с макропористой смолой, последовательно элюируют 18% водным раствором этанола, 30% водным раствором этанола и 50% водным раствором этанола с получением 18% этанольного элюента, 30% этанольного элюента и 50% этанольного элюента, соответственно, которые являются первыми элюентами. В первых элюентах 50% этанольный элюент является первым элюентом с высокой концентрацией растворителя, и объединенный раствор 18% этанольного элюента и 30% этанольного элюента является первым элюентом с низкой концентрацией растворителя. Затем первый элюент с низкой концентрацией растворителя концентрируют, чтобы не было запаха спирта. Загружают первый элюент с низкой концентрацией растворителя в полиамидную колонку, элюируют этанолом с получением этанольного элюата, который является вторым элюатом. Объединяют и концентрируют второй элюент и первый элюент с высокой концентрацией растворителя до исчезновения запаха спирта. Объединение и концентрирование можно проводить путем концентрирования после объединения или объединения после концентрирования. После экстракции концентрата циклогексаном циклогексановый экстракт отбрасывают. Затем проводят распылительную сушку концентрированного раствора или концентрирование концентрированного раствора в густую пасту и вакуумную сушку густой пасты. Измельчают высушенные продукты с получением контрольного образца 1* целевого сырья на основе сложного кетонового эфира гинкго билоба.

Контрольный пример 2

[00139] Обычные листья гинкго билоба, кору корня гинкго билоба и плоды Sophorae (Fructus Sophorae) измельчают с получением измельченного гинкго билоба. Добавляют 60% водный раствор этанола к измельченному гинкго билоба, проводят экстракцию два раза путем нагревания с обратным холодильником, каждый раз в течение 3 часов, и получают первый фильтрат с помощью фильтрования. Затем добавляют воду к отфильтрованному остатку лекарственного средства, оставшемуся после фильтрования, проводят экстракцию за один раз путем нагревания с обратным холодильником со временем экстракции 0,5 часа, и затем получают второй фильтрат путем фильтрования. Объединяют и концентрируют второй фильтрат в густую пасту и первый фильтрат. Объединение и концентрирование можно проводить путем концентрирования после объединения или объединения после концентрирования. Растворяют в очищенной воде, нагретой до 60-100°C, оставляют для охлаждения и фильтруют с получением фильтрата. Загружают фильтрат в колонку с макропористой смолой, последовательно элюируют 18% водным раствором этанола, 30% водным раствором этанола и 50% водным раствором этанола с получением 18% этанольного элюента, 30% этанольного элюента и 50% этанольного элюента, соответственно, которые являются первыми элюентами. В первых элюентах 50% этанольный элюент является первым элюентом с высокой концентрацией растворителя, и объединенный раствор 18% этанольного элюента и 30% этанольного элюента является первым элюентом с низкой концентрацией растворителя. Затем первый элюент с низкой концентрацией растворителя концентрируют, чтобы не было запаха спирта. Загружают первый элюент с низкой концентрацией растворителя в полиамидную колонку, элюируют этанолом с получением этанольного элюата, который является вторым элюатом. Объединяют и концентрируют второй элюент и первый элюент с высокой концентрацией растворителя до исчезновения запаха спирта. Объединение и концентрирование можно проводить путем концентрирования после объединения или объединения после концентрирования. После экстракции концентрата циклогексаном циклогексановый экстракт отбрасывают. Затем проводят распылительную сушку концентрированного раствора или концентрирование концентрированного раствора в густую пасту и вакуумную сушку густой пасты. Измельчают высушенные продукты с получением контрольного образца 2* целевого сырья на основе сложного кетонового эфира гинкго билоба.

Вариант осуществления 2

[00140] Брали 3,36 кг образца №1 сырья на основе сложного кетонового эфира гинкго билоба, 38,40 кг декстрина, 34,64 кг порошка сахарозы, 1,60 кг крахмала, 1,60 кг низкозамещенной гидроксипропилцеллюлозы и 0,56 кг аспартама, помещали в смеситель лоткового типа, включали смеситель для смешивания и перемешивания, медленно добавляли 70% этанол во время смешивания, и время смешивания и перемешивания составляло 15-20 минут, с получением мягкого материала. Порошок сахарозы получали путем измельчения сахарозы и пропускания через сито 80 меш. Крахмал представляет собой кукурузный крахмал. Вышеупомянутые подаваемые количества соответствуют стандарту качества WS₃-227(Z-028)-2002(Z) и постановлениям Китайской фармакопеи (издание 2015 г.), том IV, и находятся в пределах соотношения в составе гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба.

[00141] Мягкий материал помещали в колеблющийся гранулятор и пропускали через сито 16 меш с получением влажных гранул. Влажные гранулы помещали в сушилку кипящего слоя, запускали сушилку кипящего слоя, устанавливали температуру воздуха на входе сушилки кипящего слоя на 90°C, сушили в условиях, когда время колебания составляло 90 секунд, а частота колебаний составляла 6-7 раз, устанавливали температуру материала 68°C, сушку прекращали при достижении заданной температуры материала. Общее время высушивания составляло 15-30 минут.

[00142] Высушенные гранулы выпрямляли после просеивания через встряхиваемое сито 12-40 меш и затем помещали в смеситель с многонаправленным движением со скоростью вращения 20-25 об/мин. После перемешивания в течение 5-6 минут, выпускали и расфасовывали в пакеты с получением образца №1 целевого гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба. Масса загрузки каждого пакета образца №1 гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба составляла 1 г.

Вариант осуществления 3

[00143] Брали 4 кг образца №1 сырья на основе сложного кетонового эфира гинкго билоба, 48 кг декстрина, 43,30 кг порошка сахарозы, 2,0 кг крахмала, 2,0 кг низкозамещенной гидроксипропилцеллюлозы и 0,70 кг аспартама, помещали в смеситель лоткового типа, запускали смеситель для смешивания и перемешивания, во время перемешивания медленно добавляли 70% этанол, и время смешивания и перемешивания составляло 15-20 минут, с получением мягкого материала. Порошок сахарозы получали путем измельчения сахарозы и пропускания через сито 80 меш. Крахмал представляет собой кукурузный крахмал. Вышеупомянутые подаваемые количества соответствуют стандарту качества WS₃-227(Z-028)-2002(Z) и постановлениям Китайской фармакопеи (издание 2015 г.), том IV, и находятся в пределах соотношения в составе гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба.

[00144] Мягкий материал помещали в колеблющийся гранулятор и пропускали через сито 16 меш с получением влажных гранул. Влажные гранулы помещали в сушилку кипящего слоя, запускали сушилку кипящего слоя, устанавливали температуру воздуха на входе сушилки кипящего слоя на 90°C, сушили в условиях, когда время колебания составляло 90 секунд, а частота колебаний составляла 6-7 раз, устанавливали температуру материала на 68°C, сушку прекращали при достижении заданной температуры материала. Общее время высушивания составляло 25 минут.

[00145] Высушенные гранулы выпрямляли после просеивания через встряхиваемое сито 12-40 меш и затем помещали в смеситель с многонаправленным движением со скоростью вращения 20-25 об/мин. После перемешивания в течение 5-6 минут, выпускали и расфасовывали в пакеты с получением образца №2 целевого гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба. Масса загрузки каждого пакета образца №2 гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба составляла 1 г.

Контрольный пример 3

[00146] Брали 3,36 кг контрольного образца 1* сырья на основе сложного кетонового эфира гинкго билоба, 38,40 кг декстрина, 34,64 кг порошка сахарозы, 1,60 кг крахмала, 1,60 кг низкозамещенной гидроксипропилцеллюлозы и 0,56 кг аспартама, хорошо перемешивали, гранулировали, сушили и расфасовывали в пакеты в соответствии с обычным способом получения гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба с получением контрольного образца 1* целевого гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба. Масса загрузки каждого пакета контрольного образца 1* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба составляла 1 г. Вышеупомянутые подаваемые количества соответствуют стандарту качества WS₃-227(Z-028)-2002(Z) и постановлениям Китайской фармакопеи (издание 2015 г.), том IV, и находятся в пределах соотношения в составе гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба.

[00147] В то же время, брали 3,36 кг контрольного образца 2* сырья на основе сложного кетонового эфира гинкго билоба, 38,40 кг декстрина, 34,64 кг порошка сахарозы, 1,60 кг крахмала, 1,60 кг низкозамещенной гидроксипропилцеллюлозы и 0,56 кг аспартама, хорошо перемешивали, гранулировали, сушили и расфасовывали в пакеты в соответствии с обычным способом получения гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба с получением контрольного образца 2* целевого гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба. Масса загрузки каждого пакета контрольного образца 2* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба составляла 1 г. Вышеупомянутые подаваемые количества соответствуют стандарту качества WS₃-227(Z-028)-2002(Z) и постановлениям Китайской фармакопеи (издание 2015 г.), том IV, и находятся в пределах соотношения в составе гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба.

Вариант осуществления 4

[00148] Брали 10 пакетов с содержимым в виде образца №1 гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба (полученного в варианте осуществления 2), контрольных образцов 1* и 2* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба (полученного в контрольном примере 3), соответственно, хорошо перемешивали, мелко измельчали и отбирали 2 г порошка. Точно взвешивали порошок, помещали порошок в коническую колбу с пробкой, точно добавляли 10 мл смешанного раствора 70% метанола-70% этанола (1:1) и экстрагировали путем встряхивания (500 раз в минуту) в течение 30 минут. Отбирали раствор для центрифугирования с получением супернатанта (или фильтровали раствор с получением последующих фильтратов) для получения растворов тестируемого продукта A1, A2 и A3.

[00149] В то же время, брали соответствующие количества эталонного вещества рутина и эталонного вещества кверцетина, точно взвешивали указанные эталонные вещества. К эталонным веществам добавляли метанол с получением смешанного раствора, содержащего 250 мкг рутина и 25 мкг кверцетина на 1 мл, для получения эталонного раствора.

[00150] Точно пипетировали 10 мкл из растворов тестируемого продукта А1, А2, А3 и эталонного раствора, соответственно, которые затем анализировали с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) согласно Общим правилам 0512 Китайской Фармакопеи (издание 2015 г.), том IV. Условиями высокоэффективной жидкостной хроматографии являются: химически связанный октадецилсиланом силикагель служит в качестве наполнителя; ацетонитрил служит в качестве подвижной фазы A, и 0,4% раствор фосфорной кислоты служит в качестве подвижной фазы B. Градиентное элюирование выполняли в соответствии с описанием в таблице 1 ниже; длина волны при детекции составляла 400 нм. Количество теоретических тарелок, рассчитанное исходя из пика рутина, составляло не менее 8000.

Таблица 1

Время (минуты) Подвижная фаза А (%) Подвижная фаза В (%) 0~35 15 85 35~80 20 80

[00151] Результат определения показывает, что в образце №1 гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба содержание рутина составляет 1,07 мг/пакет, и это значение меньше или равно 1,28 мг/пакет; содержание кверцетина составляет 0,132 мг/пакет, и это значение меньше или равно 0,152 мг/пакет. В контрольном образце 1* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба содержание рутина составляет 1,42 мг/пакет и это значение меньше или равно 1,60 мг/пакет; содержание кверцетина составляет 0,157 мг/пакет, и это значение меньше или равно 0,160 мг/пакет. В контрольном образце 2* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба содержание рутина составляет 1,82 мг/пакет, и это значение больше 1,60 мг/пакет; содержание кверцетина составляет 0,183 мг/пакет, и это значение больше 0,160 мг/пакет. Из приведенных выше значений содержания видно, что содержание рутина и кверцетина в образце №1 гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба и в контрольном образце 1* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба находится в пределах указанного диапазона значений, что указывает на отсутствие посторонних загрязняющих веществ, нормальное протекание производственного процесса и хорошее качество продукта. Содержания рутина и кверцетина в образце №1 гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба ниже, чем в контрольном образце 1* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба, что указывает на то, что качество продукта образца №1 гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба лучше, чем контрольного образца 1* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба. Содержания рутина и кверцетина в контрольном образце 2* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба превышает указанный диапазон значений, что указывает на возможное присутствие посторонних загрязняющих веществ и низкое качество продукта.

Вариант осуществления 5

[00152] Брали 10 пакетов с содержимым в виде образца №1 гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба (полученного в варианте осуществления 2), контрольных образцов 1* и 2* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба (полученного в контрольном примере 3), соответственно, хорошо перемешивали, мелко измельчали, отбирали 1 г порошка и высушивали его распылением. Высушивали образцы в вакуумной печи при температуре меньше или равной 80°С в течение 2 часов; или концентрировали жидкий экстракт до относительной плотности 1,2 с последующим высушиванием при температуре воздуха на входе 160-165°С и температуре воздуха на выходе 95-100°С.

[00153] Результат определения показывает, что в образце №1 гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба содержание этанольного остатка составляет 0,06 мг/пакет, и это значение меньше или равно 0,08 мг/пакет. В контрольном образце 1* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба содержание этанольного остатка составляет 0,15 мг/пакет, и это значение меньше или равно 0,2 мг/пакет. В контрольном образце 2* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба содержание этанольного остатка составляет 0,18 мг/пакет, и это значение меньше или равно 0,2 мг/пакет. Из приведенных выше содержаний видно, что этанольные остатки в образце №1 гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба и в контрольных образцах 1* и 2* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба все соответствуют контрольным требованиям. Однако образец №1 гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба имеет наименьшее количество остаточного этанола и наилучшее качество. Контрольные образцы 1* и 2* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба имеют почти одинаковое количество остаточного этанола, но количество остаточного этанола выше, чем в образце №1 гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба, поэтому имеет худшее качество.

Вариант осуществления 6

[00154] Брали 10 пакетов с содержимым в виде образца №1 гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба (полученного в варианте осуществления 2), контрольных образцов 1* и 2* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба (полученного в контрольном примере 3), соответственно, хорошо перемешивали, мелко измельчали и отбирали 3 г порошка. Точно взвешивали порошок, помещали порошок в центрифужную пробирку на 50 мл с пробкой, добавляли 15 мл 30% этанола, хорошо встряхивали, добавляли 20 мл диэтилового эфира, хорошо встряхивали, оставляли на некоторое время, осторожно открывали крышку, прижимали крышку после выпуска воздуха, встряхивали (3000 раз в минуту) в течение 1 минуты, центрифугировали (4000 об/мин) в течение 10 минут, отделяли супернатант. Добавляли диэтиловый эфир к остатку, повторяли вышеуказанные операции 3 раза, каждый раз добавляя по 15 мл диэтилового эфира. Объединяли четыре раствора на основе диэтилового эфира, концентрировали при пониженном давлении почти до сухого состояния (не испарение досуха), добавляли надлежащее количество метанола и растворяли с помощью ультразвука, и полностью перемещали в 5 мл мерную колбу. Центрифугировали с получением супернатанта (или пропускали через фильтрующую мембрану 0,45 мкм для получения последующих фильтратов) для получения растворов тестируемого продукта B1, B2 и B3.

[00155] В то же время, брали соответствующие количества эталонного вещества билобалида, эталонного вещества гинкголида A, эталонного вещества гинкголида B, эталонного вещества гинкголида C и эталонного вещества гинкголида J и точно их взвешивали. К эталонным веществам добавляли метанол для приготовления смешанных растворов, каждый из которых содержит 1,0, 0,3, 0,7 и 0,4 мг каждого эталонного вещества на 1 мл, который является эталонным раствором.

[00156] Точно пипетировали 5 мкл и 10 мкл эталонного раствора и 10 мкл растворов тестируемого продукта B1, B2 и B3, соответственно, которые затем исследовали с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) согласно Общим правилам 0512 Китайской Фармакопеи (издание 2015 г.), том IV. Содержания билобалида, гинкголида A, гинкголида B, гинкголида C и гинкголида J рассчитывали с использованием внешнего стандартного двухточечного логарифмического уравнения. Условиями высокоэффективной жидкостной хроматографии являются: химически связанный октадецилсиланом силикагель служит в качестве наполнителя; метанол служит в качестве подвижной фазы A, и вода служит в качестве подвижной фазы B. Градиентное элюирование выполняли в соответствии с описанием в таблице 2 ниже; детекцию осуществляли испарительным детектором светорассеяния. Количество теоретических тарелок, рассчитанное исходя из пика билобалида, составляло не менее 10000.

Таблица 2

Время (минуты) Подвижная фаза А (%) Подвижная фаза В (%) 0~15 30 70 15~30 40 60

[00157] Результаты определения показывают, что содержания терпеновых лактонов в образце №1 гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба и контрольном образце 1* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба рассчитывают в пересчете на сухие продуктов и рассчитывают исходя из общих содержаний билобалида, гинкголида A, гинкголида B и гинкголида C. Содержания терпеновых лактонов в образце №1 гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба и контрольном образце 1* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба составляет 4,4 мг/пакет и 2,9 мг/пакет, соответственно, что находится в пределах указанного диапазона 2,4-4,8 мг/пакет. Содержание терпеновых лактонов в контрольном образце 2* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба рассчитывают в пересчете на сухие продукты и рассчитывают исходя из общих содержаний билобалида, гинкголида А, гинкголида В и гинкголида С. Содержание терпеновых лактонов в контрольном образце 2* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба составляет 1,8 мг/пакет, что ниже указанного диапазона 2,4-4,8 мг/пакет. Терпеновые лактоны, как уникальные компоненты гинкго билоба, являются основными эффективными компонентами гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба для активации и устранения застоя крови, а также при лечении стенокардии, ишемической болезни сердца и церебрального артериосклероза. Следовательно, терпеновые лактоны должны находиться в пределах указанного диапазона данных. Можно заметить, что контрольный образец 2* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба имеет слабый лечебный эффект. Образец №1 гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба и контрольный образец 1* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба обладают хорошими терапевтическими эффектами. Однако содержание терпеновых лактонов в образце №1 гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба выше, что находится в пределах указанного диапазона 3,6-4,8 мг/пакет. По сравнению с контрольным образцом 1* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба, образец №1 гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба имеет лучший терапевтический эффект.

[00158] В то же время, результаты определения показывают, что содержания билобалида в образце №1 гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба и в контрольном образце 1* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба составляет 1,78 мг/пакет и 1,17 мг/пакет, соответственно, что находится в пределах указанного диапазона 1,04-2,08 мг/пакет. Содержание билобалида в контрольном образце 2* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба составляет 0,96 мг/пакет, что ниже указанного диапазона 1,04-2,08 мг/пакет. Билобалид придает гранулированному сложному кетоновому эфиру гинкго билоба анти-PAF (фактор активации тромбоцитов) эффект, а также питает нервы. Следовательно, контрольный образец 2* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба имеет слабый лечебный эффект. Образец №1 гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба и контрольный образец 1* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба обладают хорошими терапевтическими эффектами. Однако содержание билобалида в образце №1 гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба более высокое, что находится в пределах указанного диапазона 1,44-1,92 мг/пакет. По сравнению с контрольным образцом 1* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба, образец №1 гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба имеет лучший терапевтический эффект.

[00159] В то же время, результаты определения показывают, что содержания гинкголида J в образце №1 гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба и в контрольном образце 1* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба составляют 0,15 мг/пакет и 0,10 мг/пакет, соответственно, что находится в пределах указанного диапазона 0,04-0,20 мг/пакет. Содержание гинкголида J в контрольном образце 2* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба составляет 0,02 мг/пакет, что ниже указанного диапазона 0,04-0,20 мг/пакет. Гинкголид J также придает гранулированному сложному кетоновому эфиру гинкго билоба анти-PAF эффект. Следовательно, контрольный образец 2* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба имеет слабый лечебный эффект. Образец №1 гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба и контрольный образец 1* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба обладают хорошими терапевтическими эффектами. Однако содержание гинкголида J в образце №1 гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба выше, что находится в пределах указанного диапазона 0,12-0,20 мг/пакет. По сравнению с контрольным образцом 1* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба, образец №1 гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба имеет лучший терапевтический эффект.

Вариант осуществления 7

[00160] Брали 10 пакетов с содержимым в виде образца №1 гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба (полученного в варианте 2), контрольных образцов 1* и 2* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба (полученного в контрольном примере 3), соответственно, хорошо перемешивали, мелко измельчали и отбирали 0,1 г порошка. Точно взвешивали порошок, экстрагировали с помощью ультразвука 5 мл этанолом в течение 10 минут, центрифугировали при 3000 об/мин в течение 10 минут, а затем отбирали супернатант. Повторяли вышеуказанную ультразвуковую экстракцию 3 раза. Объединяли супернатанты и доводили до объема с помощью мерной колбы на 25 мл с получением растворов тестируемого продукта C1, C2 и C3.

[00161] В то же время, брали соответствующие количества эталонного вещества аментофлавона, эталонного вещества билобетина и эталонного вещества гинкгетина, и точно их взвешивали. К эталонным веществам добавляли этанол для получения смешанного раствора с определенной концентрацией аментофлавона, билобетина и гинкгетина, который является эталонным раствором.

[00162] Точно пипетировали 10 мкл из растворов тестируемого продукта C1, C2, C3 и эталонного раствора, соответственно, затем исследовали методом высокоэффективной жидкостной хроматографии-масс-спектрометрии (ВЭЖХ-МС) согласно Общим правилам 0512 и 0431 Китайской Фармакопеи (издание 2015 г.), том IV. Условиями ВЭЖХ-МС являются: химически связанный с октадецилсиланом силикагель, который служит в качестве наполнителя; раствор метанола и 1% ледяной уксусной кислоты (90:10), который служит в качестве подвижной фазы, элюировали изократически, полностью очищали раствором метанола и 1% ледяной уксусной кислоты (99:1), который по меньшей мере в 10 раз превышает объем колонки, когда все определяемые компоненты достигали пика; тройной квадрупольный масс-спектрометр использовали для мониторинга множественных реакций (MRM) в режиме электрораспылительной ионизации (ESI) с отрицательными ионами.

[00163] Результаты определения показывают, что содержания бифлавоноидов в образце №1 гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба и контрольном образце 1* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба составляет 0,002 мг/пакет и 0,007 мг/пакет, соответственно, то есть все общие содержания аментофлавона, билобетина и гинкгетина в образце №1 гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба и контрольном образце 1* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба меньше или равны 0,008 мг/пакет. Содержание бифлавоноидов в контрольном образце 2* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба составляет 0,013 мг/пакет, то есть общие содержания аментофлавона, билобетина и гинкгетина в контрольном образце 2* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба превышают 0,008 мг/пакет. Содержание бифлавоноидов необходимо контролировать из-за их аллергенности. Содержание бифлавонов в контрольном образце 2* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба превышает предел, что делает пациентов более предрасположенными к аллергии. Содержания бифлавоноидов в образце №1 гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба и контрольном образце 1* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба находится в установленных пределах. Однако образец №1 гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба имеет более низкое содержание бифлавоноидов, которое может достигать 0,004 мг/пакет или менее, и с меньшей вероятностью вызывает сенсибилизацию.

Вариант осуществления 8

[00164] Брали 10 пакетов с содержимым в виде образца №1 гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба (полученного в варианте 2), контрольных образцов 1* и 2* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба (полученного в контрольном примере 3), соответственно, хорошо перемешивали, мелко измельчали и отбирали 0,1 г порошка. Точно взвешивали порошок, экстрагировали с помощью ультразвука 5 мл 50% этанола в течение 10 минут, центрифугировали при 3000 об/мин в течение 10 минут, а затем отбирали супернатант. Повторяли вышеуказанную ультразвуковую экстракцию 3 раза. Объединяли супернатанты и доводили до объема с помощью мерной колбы на 25 мл с получением растворов тестируемого продукта D1, D2 и D3.

[00165] В то же время, брали соответствующие количества эталонного вещества генистина и эталонного вещества гинкголида М, соответственно, и точно взвешивали указанные эталонные вещества. К эталонным веществам добавляли метанол для приготовления смешанного раствора с определенной концентрацией генистина и гинкголида М, который является контрольным раствором.

[00166] Точно пипетировали 10 мкл из растворов тестируемого продукта D1, D2, D3 и эталонного раствора, соответственно, затем исследовали методом высокоэффективной жидкостной хроматографии-масс-спектрометрии (ВЭЖХ-МС) согласно Общим правилам 0512 и 0431 Китайской Фармакопеи (издание 2015 г.), том IV. Условиями ВЭЖХ-МС являются: химически связанный с октадецилсиланом силикагель служит в качестве наполнителя; раствор метанола и 1% ледяной уксусной кислоты (90:10) служит в качестве подвижной фазы, элюировали изократически, полностью очищали раствором метанола и 1% ледяной уксусной кислоты (99:1), который по меньшей мере в 10 раз превышает объем колонки, когда все определяемые компоненты достигали пика; тройной квадрупольный масс-спектрометр использовали для мониторинга множественных реакций (MRM) в режиме электрораспылительной ионизации (ESI) с отрицательными ионами.

[00167] Из результатов определения можно выявить, что ни образец №1 гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба, ни контрольный образец 1* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба не содержит генистин и гинкголид М. Однако контрольный образец 2* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба содержит генистин и гинкголид М. Генистин является компонентом, присутствующим в плодах Sophorae, гинкголид М является компонентом, присутствующим в коре корня гинкго билоба, ни один из вышеперечисленных компонентов не присутствует в листьях гинкго билоба. Таким образом, обнаружение указанных выше компонентов в контрольном образце 2* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба означает, что нежелательные посторонние вещества, такие как плоды Sophorae и кора корня гинкго билоба, неправомерно присутствуют в контрольном образце 2* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба. В образце №1 гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба и контрольном образце 1* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба нет нежелательных посторонних веществ, что свидетельствует о хорошем качестве продукта.

Вариант осуществления 9

[00168] Брали 20 мг эталонного вещества рутина, точно его взвешивали, помещали эталонное вещество рутин в мерную колбу на 100 мл, добавляли 70 мл 70% этанола, слегка нагревали на водяной бане для растворения, охлаждали, разбавляли до метки 70% этанолом и хорошо встряхивали для получения эталонного раствора (содержащего 0,2 мг безводного рутина на 1 мл).

[00169] Затем, точно отмеряли 0,2 мл, 0,4 мл, 0,6 мл, 0,8 мл, 1,0 мл и 1,2 мл эталонного раствора, помещали эталонный раствор в мерные колбы на 10 мл, соответственно, добавляли воду до 3 мл, добавляли 2 мл натрий-ацетатного буфера (pH 4,5) и 2 мл 0,1 моль/л раствора хлорида алюминия, хорошо встряхивали, добавляли 70% этанол до метки и хорошо встряхивали. Соответствующий раствор служил пустым раствором. Тесты проводили с помощью спектрофотометрии в ультрафиолетовой и видимой области спектра (Общие правила 0401 Китайской фармакопеи (издание 2015 г.), том IV). Оптическую плотность измеряли при длине волны 270 нм, и стандартную кривую строили с оптической плотностью по оси ординат и концентрацией по оси абсцисс.

[00170] Брали 10 пакетов с содержимым в виде образца №1 гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба (полученного в варианте осуществления 2), контрольных образцов 1* и 2* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба (полученного в контрольном примере 3), соответственно, хорошо перемешивали, мелко измельчали и отбирали 1 г порошка. Точно взвешивали порошок, помещали порошок в экстракторы Сокслета, добавляли 40 мл 70% этанола, нагревали на водяной бане и нагревали с обратным холодильником в течение 4 часов, охлаждали, переносили экстракт в мерные колбы на 50 мл, разбавляли до метки 70% этанолом и хорошо встряхивали. Точно отмеряли 0,5 мл в мерную колбу на 10 мл, добавляли воду до 3 мл, добавляли 2 мл натрий-ацетатного буфера (pH 4,5) и 2 мл 0,1 моль/л раствора хлорида алюминия, хорошо встряхивали, добавляли 70% этанол до метки и хорошо встряхивали. Тесты проводили с помощью спектрофотометрии в ультрафиолетовой и видимой области спектра (Общие правила 0401 Китайской фармакопеи (издание 2015 г.), том IV). Оптическую плотность измеряли при длине волны 270 нм. Эквивалентную массу рутина в растворе тестируемого продукта считывали по стандартной кривой, которая рассчитывается для определения содержания общих флавоноидов.

[00171] Результаты определения показывают, что при использовании рутина (C₂₇H₃₀O₁₆) в качестве стандартного образца содержания общих флавоноидов в образце №1 гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба и контрольном образце 1* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба составляет 21,40 мг/пакет и 15,72 мг/пакет, соответственно, что находится в пределах указанного диапазона 14,08-26,40 мг/пакет. Содержание общих флавоноидов в контрольном образце 2* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба составляет 12,43 мг/пакет при использовании рутина (C₂₇H₃₀O₁₆) в качестве стандартного образца, что ниже указанного диапазона 14,08-26,40 мг/пакет. Общие флавоноиды представляют собой активные вещества, которые помимо общих флавонолгликозидов содержат свободные флавоноиды. Определенное количество общих флавоноидов в гранулированном сложном кетоновом эфире гинкго билоба обеспечивает хороший терапевтический эффект гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба. Следовательно, контрольный образец 2* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба имеет слабый лечебный эффект. Образец №1 гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба и контрольный образец 1* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба обладают хорошими терапевтическими эффектами. Однако содержание общих флавоноидов в образце №1 гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба является более высоким, что находится в пределах указанного диапазона 19,6-22 мг/пакет. По сравнению с контрольным образцом 1* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба, образец №1 гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба имеет лучший терапевтический эффект.

Вариант осуществления 10

[00172] Брали 10 пакетов с содержимым в виде образца №1 гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба (полученного в варианте осуществления 2), контрольных образцов 1* и 2* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба (полученного в контрольном примере 3), соответственно, хорошо перемешивали, мелко измельчали и отбирали 2 г порошка. Точно взвешивали порошок, помещали порошок в коническую колбу с пробкой, точно добавляли 10 мл метанола, взвешивали, обрабатывали ультразвуком (мощность: 180 Вт; частота: 42 кГц) в течение 20 минут, охлаждали, повторно взвешивали, использовали метанол для компенсации потери массы. Фильтровали и отбирали последующий фильтрат для получения растворов тестируемого продукта D1, D2 и D3.

[00173] В то же время, брали соответствующие количества эталонного вещества гинкголиевой кислоты C13:0, эталонного вещества гинкголиевой кислоты C15:1 и эталонного вещества гинкголиевой кислоты C17:1, соответственно, и точно взвешивали эталонные вещества. К эталонным веществам добавляли метанол для приготовления серии смешанных растворов, содержащих соответственно 0 нг/мл, 10 нг/мл, 20 нг/мл, 50 нг/мл, 100 нг/мл и 200 нг/мл каждого эталонного вещества, чтобы получить эталонный раствор.

[00174] Точно пипетировали 1 мкл из растворов тестируемого продукта D1, D2, D3 и эталонных растворов, соответственно, затем исследовали методом высокоэффективной жидкостной хроматографии-масс-спектрометрии (ВЭЖХ-МС) согласно Общим правилам 0512 и 0431 Китайской Фармакопеи (издание 2015 г.), том IV. Условиями ВЭЖХ-МС являются: химически связанный с октадецилсиланом силикагель служит в качестве наполнителя; раствор метанола и 1% ледяной уксусной кислоты (90:10) служит в качестве подвижной фазы, элюировали изократически, полностью очищали раствором метанола и 1% ледяной уксусной кислоты (99:1), который по меньшей мере в 10 раз превышает объем колонки, когда все определяемые компоненты достигали пика; тройной квадрупольный масс-спектрометр использовали для мониторинга множественных реакций (MRM) в режиме электрораспылительной ионизации (ESI) с отрицательными ионами. Ионные пары, которые мониторили, показаны в Таблице 3 ниже. Если в растворе тестируемого продукта обнаружен хроматографический пик с таким же временем удерживания, что и у эталонного вещества, и выбранное относительное содержание ионов и относительное содержание ионов соответствующей концентрации эталонного раствора удовлетворяют требованиям таблицы 4 ниже, компонент может быть определен как присутствующий.

Таблица 3

Название Ион-предшественник Количественная ионная пара Качественная ионная пара Гинкголевая кислота C13:0 319,2 319,2 → 275,2 319,2 → 106,1 Гинкголевая кислота C15:1 345,2 345,2 → 301,2 345,2 → 119,0 Гинкголевая кислота C17:1 373,3 373,3 → 329,3 373,3 → 106,0

Таблица 4

Относительное содержание ионов/% более 50 20~50 10~20 менее 10 Допустимое относительное отклонение/% ± 20 ±25 ±30 ±50

[00175] Результаты определения показывают, что содержание общих гинкголевых кислот в образце №1 гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба и контрольном образце 1* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба составляет 0,7 мкг/пакет и 1,5 мкг/пакет, соответственно, что меньше или равно 2 мкг/пакет. Содержание общих гинкголевых кислот в контрольном образце 2* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба составляет 3,1 мкг/пакет, что превышает 2 мкг/пакет. Гинкголевая кислота обладает сенсибилизирующим действием. Длительный прием препарата гинкго может вызвать накопление гинкголевой кислоты и нанести вред человеческому организму. Следовательно, необходимо контролировать содержание гинкголевых кислот в гранулированном сложном кетоновом эфире гинкго билоба таким образом, чтобы поддерживать низкое содержание гинкголевых кислот в гранулированном сложном кетоновом эфире гинкго билоба, предотвращать использование сырья с высоким содержанием гинкголевой кислоты для гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба и повышать безопасность гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба, что никогда не контролировалось в традиционном гранулированном сложном кетоновом эфире гинкго билоба. Содержание общих гинкголевых кислот в контрольном образце 2* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба превышает указанный предел, что может нанести вред человеческому организму. Содержания общих гинкголевых кислот в образце №1 гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба и контрольном образце 1* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба находятся в установленных пределах. Однако образец №1 гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба имеет более низкое содержание общих гинкголевых кислот, которое может достигать значения меньше или равно 1 мкг/пакет, и с меньшей вероятностью вызовет сенсибилизацию и, следовательно, является более безопасным.

Вариант осуществления 11

[00176] Брали 10 пакетов с содержимым в виде образца №1 гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба (полученного в варианте осуществления 2), контрольных образцов 1* и 2* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба (полученного в контрольном примере 3), соответственно, хорошо перемешивали, мелко измельчали и отбирали 1 г порошка. Точно взвешивали порошок, точно добавляли 50 мл смешанного раствора метанола и 25% раствора соляной кислоты (4:1), взвешивали, помещали на водяную баню 85-90°C и нагревали с обратным холодильником в течение 30 минут, извлекали, быстрое охлаждали до комнатной температуры, снова взвешивали с использованием вышеуказанного смешанного раствора, чтобы восполнить потерю массы, и хорошо встряхивали. Фильтровали и отбирали последующий фильтрат для получения растворов тестируемого продукта E1, E2 и E3 (необходимо протестировать в течение 3 часов).

[00177] В то же время, брали соответствующие количества эталонного вещества кверцетина, эталонного вещества кемпферида и эталонного вещества изорамнетина, точно взвешивали эталонные вещества. К эталонным веществам добавляли метанол для получения смешанных растворов, содержащих соответственно 30 мкг, 30 мкг, 20 мкг каждого эталонного вещества на 1 мл, для получения эталонного раствора.

[00178] Точно пипетировали 10 мкл из растворов тестируемого продукта и эталонного раствора, соответственно, которые затем анализировали с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) согласно Общим правилам 0512 Китайской Фармакопеи (издание 2015 г.), том IV. Условия высокоэффективной жидкостной хроматографии представляют собой: химически связанный октадецилсиланом силикагель в качестве наполнителя; метанол с 0,4% раствором фосфорной кислоты (49:51) служит подвижной фазой; элюировали изократически; длина волны при детекции составляет 368 нм. Количество теоретических тарелок, в расчете на пик кверцетина, составляло не менее 4000. Степень разделения пика кемпферида и пика изорамнетина должна быть больше 1,5.

[00179] Содержание общих флавонолгликозидов в сложном кетоновом эфире гинкго билоба рассчитывают по формуле (1): содержание общих флавонолгликозидов = (содержание кверцетина + содержание кемпферида + содержание изорамнетина) × 2,51.

[00180] Результаты определения показывают, что содержания общих флавонгликозидов в образце №1 гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба и контрольном образце 1* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба составляет 13,2 мг/пакет и 10,3 мг/пакет (в пересчете на сухие продукты), соответственно, что находится в пределах указанного диапазона 9,6-14,0 мг/пакет. Содержание общих флавонолгликозидов в контрольном образце 2* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба составляет 7,6 мг/пакет (в пересчете на сухие продукты), что ниже указанного диапазона 9,6-14,0 мг/пакет. Общие флавонолгликозиды представляют собой активные вещества, содержащие свободные флавоноиды. Определенное количество общих флавонгликозидов в гранулированном сложном кетоновом эфире гинкго билоба обеспечивает хороший терапевтический эффект гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба. Следовательно, контрольный образец 2* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба имеет слабый лечебный эффект. Образец №1 гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба и контрольный образец 1* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба оба обладают хорошими терапевтическими эффектами. Однако содержание общих флавонгликозидов в образце №1 гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба выше, что находится в пределах указанного диапазона 12,0-14,0 мг/пакет. По сравнению с контрольным образцом 1* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба, образец №1 гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба имеет лучший терапевтический эффект.

[00181] Точно пипетировали 10 мкл растворов тестируемого продукта E1, E2, E3 и эталонного раствора, соответственно, которые затем анализировали с помощью вышеупомянутой высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). Результаты определения показывают, что в образце №1 гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба и контрольном образце 1* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба отношения площадей хроматографических пиков кверцетина к кемпфериду составляют 0,90 и 1,01 соответственно, что находится в пределах указанного диапазона 0,8-1,2; отношения площадей хроматографических пиков изорамнетина к кверцетину составляют 0,20 и 0,21 соответственно, где оба значения больше 0,15. В контрольном образце 2* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба отношение площадей хроматографических пиков кверцетина к кемпфериду составляет 0,59, что ниже указанного диапазона 0,8-1,2; отношение площадей хроматографических пиков изорамнетина к кверцетину составляет 0,12, что ниже 0,15. Из приведенного выше пропорционального соотношения видно, что в образце №1 гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба и контрольном образце 1* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба нет нежелательных посторонних веществ, что указывает на нормальный процесс производства и хорошее качество продукта. Качество контрольного образца 2* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба низкое из-за добавления кверцетина и нежелательных посторонних веществ.

Вариант осуществления 12

[00182] Брали 10 пакетов с содержимым в виде образца №1 гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба (полученного в варианте осуществления 2), контрольных образцов 1* и 2* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба (полученного в контрольном примере 3), соответственно, хорошо перемешивали, мелко измельчали и отбирали 1 г порошка. Точно взвешивали порошок, добавляли 10 мл 75% метанола, обрабатывали ультразвуком (мощность: 300 Вт, частота: 50 кГц) в течение 10 минут, центрифугировали в течение 5 минут (4000 об/мин), отбирали супернатант для получения растворов тестируемого продукта F1, F2 и F3.

[00183] В то же время, брали соответствующие количества эталонного вещества рутина, эталонного вещества кверцетина, эталонного вещества кемпферида и эталонного вещества изорамнетина, точно взвешивали эталонные вещества. К эталонным веществам добавляли 75% метанол для получения раствора, содержащего 30 мкг каждого эталонного вещества на 1 мл, и получали эталонный раствор.

[00184] Точно пипетировали 10 мкл из растворов тестируемого продукта и эталонного раствора, соответственно, которые затем анализировали с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) согласно Общим правилам 0512 Китайской Фармакопеи (издание 2015 г.), том IV. Условия высокоэффективной жидкостной хроматографии представляют собой: химически связанный октадецилсиланом силикагель служит в качестве наполнителя (длина колонки: 15 см; внутренний диаметр: 4,6 мм; размер частиц: 5 мкм); ацетонитрил служит подвижной фазой A, и 0,1% раствор муравьиной кислоты служит подвижной фазой B. Градиентное элюирование выполняли в соответствии со спецификацией в таблице 5 ниже; длина волны при детекции составляет 360 нм; температура колонки 30°C; скорость потока 1,0 мл/мин. Количество теоретических тарелок, рассчитанное исходя из пика рутина, составляет не менее 10000.

Таблица 5

Время (минуты) Подвижная фаза А (%) Подвижная фаза В (%) 0-40 15-30 85-70 40-45 30-40 70-60 45-50 40 60 50-60 40-60 60-40 60-70 60 40

[00185] Сходство между паттернами спектров тестируемых продуктов и гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба рассчитывают и сравнивают в соответствии с «Системой оценки сходства для хроматографических паттернов в традиционной китайской медицине» (версия 2.0). Паттерн спектра гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба включает четыре общих характерных пика, как показано на фиг. 1: пик 1 представляет собой характерный пик рутина, пик 6 представляет собой характерный пик кверцетина, пик 7 представляет собой характерный пик кемпферида, и пик 8 представляет собой характерный пик изорамнетина. Результаты определения показывают, что сходство между паттернами спектров образца №1 гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба и контрольного образца 1* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба и хроматограммой тестируемого продукта составляет 0,97 и 0,91, соответственно, где оба значения больше или равны 0,90. Сходство между паттерном спектра контрольного образца 2* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба и хроматограммой тестируемого продукта составляет 0,31, что ниже 0,90. Из приведенных выше сходств видно, что в образце №1 гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба и контрольном образце 1* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба нет нежелательных посторонних веществ, что указывает на хорошее качество продукта. Качество контрольного образца 2* гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба низкое из-за присутствия нежелательных посторонних веществ.

Вариант осуществления 13

[00186] Листья саженцев гинкго билоба, которые служат в качестве лекарственного сырья в варианте осуществления 1, отбирают и сушат при 140-160°C в течение 6-15 минут, чтобы они служили сырьем образца 1; в то же время обычные листья гинкго билоба, которые служат лекарственным сырьем в контрольном примере 1, выбирают в качестве сырья образца 2.

[00187] Содержания общих флавонолгликозидов и отношения площадей хроматографических пиков флавоноидных агликонов в сырье образца 1 и сырье образца 2 определяют в соответствии со способом, описанным в варианте осуществления 9. Содержания терпенового лактона в сырье образца 1 и сырье образца 2 определяют методом, описанным в варианте осуществления 4. Общее содержание золы и нерастворимой в кислоте золы в сырье образца 1 и сырье образца 2 определяют в соответствии с методом определения золы, описанным в Общих правилах 2302 Китайской Фармакопеи (издание 2015 г.), том IV. Содержания экстракта в сырье образца 1 и сырье образца 2 определяют в соответствии с методом определения экстракта, описанным в Общих правилах 2201 Китайской фармакопеи (издание 2015 г.), том IV. Содержания примесей в сырье образца 1 и сырье образца 2 определяют в соответствии с методом определения примесей, описанным в Общих правилах 2301 Китайской Фармакопеи (издание 2015 г.) Том IV. Содержания воды в сырье образца 1 и сырье образца 2 определяют в соответствии с методом определения воды, описанным в Общих правилах 0832 Китайской фармакопеи (издание 2015 г.), том IV. Содержания остатка диоксида серы в сырье образца 1 и сырье образца 2 определяют в соответствии с методом определения остатка диоксида серы, описанным в Общих правилах 2331 Китайской Фармакопеи (издание 2015 г.), том IV.

[00188] Результаты определения показывают, что содержания общих флавонолгликозидов в сырье образца 1 и сырье образца 2 составляет 1,34% и 0,54% соответственно. Содержание общих флавонолгликозидов в сырье образца 2, хотя и соответствует требованию Фармакопеи о том, что содержание общих флавонолгликозидов составляет больше или равно 0,40%, не соответствует требованию, установленному в настоящем описании, о том, что содержание общих флавонолгликозидов составляет больше или равно 0,85%. Содержание общих флавонолгликозидов в сырье образца 1 не только больше или равно 0,40%, но также больше или равно 0,85%. Сырье образца 1 имеет более высокое содержание общих флавонолгликозидов, поэтому имеет лучшее качество.

[00189] Результаты определения показывают, что содержания терпеновых лактонов в сырье образца 1 и сырье образца 2 составляет 0,62% и 0,33% соответственно. Содержание терпеновых лактонов в сырье образца 2, хотя и соответствует требованию Фармакопеи о том, что содержание терпеновых лактонов составляет больше или равно 0,25%, не отвечает требованию, установленному в настоящем описании, о том, что содержание терпеновых лактонов составляет больше или равно 0,40%. Содержание терпеновых лактонов в сырье образца 1 не только больше или равно 0,25%, но также больше или равно 0,40%. Сырье образца 1 имеет более высокое содержание терпеновых лактонов, поэтому имеет лучшее качество сырья.

[00190] Результаты определения показывают, что отношения площадей хроматографических пиков кверцетина к кемпфериду в сырье образца 1 и сырье образца 2 составляют 0,87 и 0,55, соответственно. Сырье образца 1 соответствует диапазону 0,65-1,2, указанному в настоящем описании, в то время как сырье образца 2 не соответствует диапазону 0,65-1,2, указанному в настоящем описании. Отношение площадей хроматографических пиков изорамнетина к кверцетину в сырье образца 1 и сырье образца 2 составляет 0,21 и 0,14, соответственно. Сырье образца 1 соответствует требованию больше 0,15, указанному в настоящем описании, в то время как сырье образца 2 не удовлетворяет требованию больше 0,15, указанному в настоящем описании. Из приведенного выше пропорционального соотношения видно, что в качестве сырья качество сырья образца 1 лучше, чем качество сырья образца 2.

[00191] Результаты определения показывают, что содержание остатков диоксида серы в сырье образца 1 и сырье образца 2 составляет 11 мг/кг и 88 мг/кг, соответственно, где оба значения меньше или равны 150 мг/кг. Содержания остатков диоксида серы в сырье образца 1 и сырье образца 2 находится в установленных пределах. Таким образом, качество сырье образца 1 и сырье образца 2 соответствует требованиям. Однако сырье образца 1 имеет лучшее качество из-за более низкого содержания остатка диоксида серы.

[00192] В то же время результаты определения показывают, что общее содержание золы в сырье образца 1 и сырье образца 2 составляет 3,8% и 6,9%, соответственно, где оба значения меньше или равны 10,0%. Содержание нерастворимой в кислоте золы в сырье образца 1 и сырье образца 2 составляет 0,68% и 1,54%, соответственно, где оба значения меньше или равны 2,0%. Содержание экстракта в сырье образца 1 и сырье образца 2 составляет 44,1% и 28,2%, соответственно, где оба значения больше или равны 25,0%. Содержание примесей в сырье образца 1 и сырье образца 2 составляет 0,57% и 1,33%, соответственно, где оба значения меньше или равны 2,0%. Содержание воды в сырье образца 1 и сырье образца 2 составляет 5,3% и 10,1%, соответственно, где оба значения меньше или равны 12,0%. Можно заметить, что все вышеупомянутые содержания в сырье образца 1 и сырье образца 2 находятся в пределах указанного диапазона, и качество сырья соответствует требованиям. Однако соответствующие показатели содержания в сырье образца 1 лучше, чем у сырья образца 2. Следовательно, качество сырья образца 1 лучше. Используя сырье образца 1, можно получить образцы сырья на основе сложного кетонового эфира гинкго билоба более высокого качества, таким образом можно получить образцы гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба более высокого качества.

[00193] Как раскрывается выше, в настоящем описании предложен гранулированный сложный кетоновый эфир гинкго билоба и способ его получения. Благодаря оптимизированным стадиям и условиям получения можно получить высококачественный гранулированный сложный кетоновый эфир гинкго билоба. По сравнению с гранулированным сложным кетоновым эфиром гинкго билоба, полученным традиционными способами, гранулированный сложный кетоновый эфир гинкго билоба по настоящему изобретению имеет стабильное качество и низкую скорость потери качества. Однородность различных партий гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба является хорошей. В частности, гранулированный сложный кетоновый эфир гинкго билоба можно эффективно контролировать в отношении гинкголевых кислот, предотвращая применение сырья с высоким содержанием гинкголиевой кислоты в гранулированном сложном кетоновом эфире гинкго билоба, чтобы эффективно повысить безопасность гранулированного сложного кетонового эфира гинкго билоба. В то же время гранулированный сложный кетоновый эфир гинкго билоба, полученный способом по настоящему изобретению, обладает превосходным вкусовым ощущением, горечью, стабильностью, стойкостью к высоким температурам, характеристиками при получении и другими характеристиками. Следовательно, настоящее изобретение эффективно преодолевает различные недостатки существующей технологии и имеет высокую ценность для промышленного применения.

[00194] Вышеупомянутые варианты осуществления лишь иллюстрируют принцип и эффекты настоящего раскрытия, а не ограничивают настоящее раскрытие. Модификации или вариации описанных выше вариантов осуществления могут быть выполнены специалистами в данной области без отклонения от сущности и объема раскрытия. Следовательно, все эквивалентные модификации или изменения, сделанные специалистами в данной области техники без отклонения от сущности и технической концепции, раскрытых в настоящем раскрытии, должны по-прежнему охватываться формулой настоящего изобретения.

Группа изобретений относится к фармацевтической промышленности, а именно к гранулированному составу из экстракта листьев гинкго билоба, способу его получения и его применению. Способ получения гранулированного состава из экстракта листьев гинкго билоба, включающий следующие стадии: А) смешивание и перемешивание экстракта листьев гинкго билоба, декстрина, порошка сахарозы, крахмала, низкозамещенной гидроксипропилцеллюлозы и аспартама в соответствии с соотношением в составе и добавление в то же время водного раствора этанола с получением мягкого материала; В) получение из мягкого материала влажных гранул с последующим высушиванием влажных гранул; и С) просеивание и выпрямление высушенных гранул, перемешивание, выпуск и расфасовка в пакеты с получением гранулированного состава из экстракта листьев гинкго билоба; где соотношение в составе в массовых частях включает следующее: 35-45 частей экстракта листьев гинкго билоба; 450-500 частей декстрина; 420-450 частей порошка сахарозы; 10-30 частей крахмала; 10-30 частей низкозамещенной гидроксипропилцеллюлозы; и 5-10 частей аспартама; причем экстракция для получения экстракта листьев гинкго билоба включает следующие стадии: а) измельчение листьев гинкго билоба с получением измельченных листьев гинкго билоба; b) добавление водного раствора этанола к измельченным листьям гинкго билоба, проведение двукратной экстракции путем нагревания с обратным холодильником и получение первого фильтрата путем фильтрования; c) добавление воды к отфильтрованному остатку лекарственного средства, оставшемуся после фильтрования, проведение однократной экстракции путем нагревания с обратным холодильником, и затем получение второго фильтрата путем фильтрования; d) объединение и концентрирование второго фильтрата и первого фильтрата в густую пасту, растворение в очищенной воде, охлаждение и фильтрование с получением фильтрата; e) загрузка фильтрата в колонку с макропористой смолой, последовательное элюирование 18% водным раствором этанола, 30% водным раствором этанола и 50% водным раствором этанола с получением 18% этанольного элюента, 30% этанольного элюента и 50% этанольного элюента, соответственно, которые являются первыми элюентами; в первых элюентах 50% этанольный элюент представляет собой первый элюент с высокой концентрацией растворителя, а объединенный раствор 18% этанольного элюента и 30% этанольного элюента представляет собой первый элюент с низкой концентрацией растворителя; f) концентрирование первого элюента с низкой концентрацией растворителя, чтобы не было запаха спирта, загрузка первого элюента с низкой концентрацией растворителя в полиамидную колонку, а затем элюирование этанолом с получением этанольного элюата, который является вторым элюатом; g) объединение и концентрирование второго элюента и первого элюента с высокой концентрацией растворителя до исчезновения запаха спирта; h) экстракция концентрата циклогексаном, отбрасывание циклогексанового экстракта, распылительная сушка концентрированного раствора или концентрирование концентрированного раствора в густую пасту и вакуумная сушка густой пасты; измельчение высушенных продуктов с получением экстракта листьев гинкго билоба; и где гранулированный состав из экстракта листьев гинкго билоба, в расчете на массу загрузки каждого пакета 1 г, удовлетворяет следующим условиям: 1) содержание рутина меньше или равно 1,60 мг/пакет; 2) содержание кверцетина меньше или равно 0,160 мг/пакет; 3) содержание билобалида составляет 1,04-2,08 мг/пакет; 4) содержание гинкголида J составляет 0,04-0,20 мг/пакет; 5) остаточное содержание этанола меньше или равно 0,2 мг/пакет; 6) содержание бифлавоноидов меньше или равно 0,008 мг/пакет, причем указанные бифлавоноиды включают аментофлавон, билобетин и гинкгетин; 7) содержание генистина равно 0, и содержание гинкголида М равно 0; 8) содержание терпеновых лактонов составляет 2,4-4,8 мг/пакет; 9) содержание общих флавоноидов составляет 14,08-26,40 мг/пакет; и 10) содержание общих флавонолгликозидов составляет 9,6-14,0 мг/пакет. Гранулированный состав из экстракта листьев гинкго билоба, обеспечивающий анти-PAF (фактор активации тромбоцитов) эффект и питание нервов, полученный вышеописанным способом, где содержание общих гинкголевых кислот в гранулированном составе из экстракта листьев гинкго билоба меньше или равно 2 мкг/пакет; где общие гинкголевые кислоты в гранулированном составе из экстракта листьев гинкго билоба рассчитывают исходя из общего содержания гинкголевой кислоты C13:0, гинкголевой кислоты C15:1 и гинкголевой кислоты C17:1. Гранулированный состав из экстракта листьев гинкго билоба, обеспечивающий анти-PAF эффект и питание нервов, полученный вышеописанным способом, где отношение площадей хроматографических пиков кверцетина к кемпфериду в гранулированном составе из экстракта листьев гинкго билоба составляет 0,8-1,2, и отношение площадей хроматографических пиков изорамнетина к кверцетину в гранулированном составе из экстракта листьев гинкго билоба больше 0,15. Применение вышеописанного способа для получения гранулированного состава из экстракта листьев гинкго билоба, обеспечивающего анти-PAF эффект и питание нервов. Вышеописанный гранулированный состав обладает высокой лечебной активностью, обеспечивающий анти-PAF эффект и питание нервов, превосходным вкусовым ощущением. 4 н. и 3 з.п. ф-лы, 1 ил., 5 табл., 3 пр.

1. Способ получения гранулированного состава из экстракта листьев гинкго билоба, включающий следующие стадии:

А) смешивание и перемешивание экстракта листьев гинкго билоба, декстрина, порошка сахарозы, крахмала, низкозамещенной гидроксипропилцеллюлозы и аспартама в соответствии с соотношением в составе и добавление в то же время водного раствора этанола с получением мягкого материала;

В) получение из мягкого материала влажных гранул с последующим высушиванием влажных гранул; и

С) просеивание и выпрямление высушенных гранул, перемешивание, выпуск и расфасовка в пакеты с получением гранулированного состава из экстракта листьев гинкго билоба;

где соотношение в составе в массовых частях включает следующее:

35-45 частей экстракта листьев гинкго билоба;

450-500 частей декстрина;

420-450 частей порошка сахарозы;

10-30 частей крахмала;

10-30 частей низкозамещенной гидроксипропилцеллюлозы; и

5-10 частей аспартама;

причем экстракция для получения экстракта листьев гинкго билоба включает следующие стадии:

а) измельчение листьев гинкго билоба с получением измельченных листьев гинкго билоба;

b) добавление водного раствора этанола к измельченным листьям гинкго билоба, проведение двукратной экстракции путем нагревания с обратным холодильником и получение первого фильтрата путем фильтрования;

c) добавление воды к отфильтрованному остатку лекарственного средства, оставшемуся после фильтрования, проведение однократной экстракции путем нагревания с обратным холодильником, и затем получение второго фильтрата путем фильтрования;

d) объединение и концентрирование второго фильтрата и первого фильтрата в густую пасту, растворение в очищенной воде, охлаждение и фильтрование с получением фильтрата;

e) загрузка фильтрата в колонку с макропористой смолой, последовательное элюирование 18% водным раствором этанола, 30% водным раствором этанола и 50% водным раствором этанола с получением 18% этанольного элюента, 30% этанольного элюента и 50% этанольного элюента, соответственно, которые являются первыми элюентами; в первых элюентах 50% этанольный элюент представляет собой первый элюент с высокой концентрацией растворителя, а объединенный раствор 18% этанольного элюента и 30% этанольного элюента представляет собой первый элюент с низкой концентрацией растворителя;

f) концентрирование первого элюента с низкой концентрацией растворителя, чтобы не было запаха спирта, загрузка первого элюента с низкой концентрацией растворителя в полиамидную колонку, а затем элюирование этанолом с получением этанольного элюата, который является вторым элюатом;

g) объединение и концентрирование второго элюента и первого элюента с высокой концентрацией растворителя до исчезновения запаха спирта;

h) экстракция концентрата циклогексаном, отбрасывание циклогексанового экстракта, распылительная сушка концентрированного раствора или концентрирование концентрированного раствора в густую пасту и вакуумная сушка густой пасты; измельчение высушенных продуктов с получением экстракта листьев гинкго билоба; и

где гранулированный состав из экстракта листьев гинкго билоба, в расчете на массу загрузки каждого пакета 1 г, удовлетворяет следующим условиям:

1) содержание рутина меньше или равно 1,60 мг/пакет;

2) содержание кверцетина меньше или равно 0,160 мг/пакет;

3) содержание билобалида составляет 1,04-2,08 мг/пакет;

4) содержание гинкголида J составляет 0,04-0,20 мг/пакет;

5) остаточное содержание этанола меньше или равно 0,2 мг/пакет;

6) содержание бифлавоноидов меньше или равно 0,008 мг/пакет, причем указанные бифлавоноиды включают аментофлавон, билобетин и гинкгетин;

7) содержание генистина равно 0, и содержание гинкголида М равно 0;

8) содержание терпеновых лактонов составляет 2,4-4,8 мг/пакет;

9) содержание общих флавоноидов составляет 14,08-26,40 мг/пакет; и

10) содержание общих флавонолгликозидов составляет 9,6-14,0 мг/пакет.

2. Способ получения гранулированного состава из экстракта листьев гинкго билоба по п. 1, где стадия А) включает одно или более из следующего:

А1) порошок сахарозы получают путем измельчения сахарозы и просеивания;

А2) крахмал представляет собой кукурузный крахмал;

А3) время смешивания и перемешивания составляет 15-20 минут;

А4) водный раствор этанола имеет процентное массовое содержание 69-71%.

3. Способ получения гранулированного состава из экстракта листьев гинкго билоба по п. 1, где стадия В) включает одно или более из следующего:

В1) влажные гранулы получают после просеивания;

В2) время колебания при высушивании составляет 80-100 секунд, и частота составляет 5-8 раз;

В3) температура прекращения высушивания материала составляет 66-70°C;

В4) время высушивания составляет 15-30 минут.

4. Способ получения гранулированного состава из экстракта листьев гинкго билоба по п. 1, где стадия С) включает одно или более из следующего:

С1) номер сита при просеивании и выпрямлении составляет 12-40 меш;

С2) скорость перемешивания составляет 20-25 об/мин;

С3) время перемешивания составляет 5-6 минут.

5. Гранулированный состав из экстракта листьев гинкго билоба, обеспечивающий анти-PAF (фактор активации тромбоцитов) эффект и питание нервов, полученный способом по п. 1, где содержание общих гинкголевых кислот в гранулированном составе из экстракта листьев гинкго билоба меньше или равно 2 мкг/пакет; где общие гинкголевые кислоты в гранулированном составе из экстракта листьев гинкго билоба рассчитывают исходя из общего содержания гинкголевой кислоты C13:0, гинкголевой кислоты C15:1 и гинкголевой кислоты C17:1.

6. Гранулированный состав из экстракта листьев гинкго билоба, обеспечивающий анти-PAF эффект и питание нервов, полученный способом по п. 1, где отношение площадей хроматографических пиков кверцетина к кемпфериду в гранулированном составе из экстракта листьев гинкго билоба составляет 0,8-1,2, и отношение площадей хроматографических пиков изорамнетина к кверцетину в гранулированном составе из экстракта листьев гинкго билоба больше 0,15.

7. Применение способа по любому из пп. 1-4 для получения гранулированного состава из экстракта листьев гинкго билоба, обеспечивающего анти-PAF эффект и питание нервов.