СБОР ЛЕКАРСТВЕННЫХ РАСТЕНИЙ НООТРОПНОГО ДЕЙСТВИЯ Российский патент 2021 года по МПК A61K36/73 A61K36/734 A61K36/16 A61K36/185 A61K36/484 A61P25/28 

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к сбору лекарственных растений ноотропного действия.

В современной фармакологии существует проблема создания эффективных и безопасных лекарственных средств, обладающих ноотропным действием. Для решения этой проблемы наилучшим образом подходят лекарственные средства растительного происхождения.

В частности, известно ноотропное средство, обладающее антигипоксической активностью (патент РФ №2314115), представляющее собой экстракт надземной части лабазника обыкновенного (Filipendula vulgaris Moech).

Известно также применение экстракта надземной части лабазника вязолистного (Filipendula ulmaria (L.) Maxim.) в качестве средства, обладающего ноотропной и адаптогенной активностью (патент РФ №2311193).

Однако, использование экстракта одного вида лекарственного растительного сырья, как правило, менее эффективно по сравнению с растительными композициями, характеризующимися комплексным эффектом воздействия.

Наиболее близким к предлагаемому изобретению является сбор лекарственных растений ноотропного действия (патент РФ №2578453), включающий траву лабазника вязолистного, траву манжетки обыкновенной, побеги черники обыкновенной, зеленые листья бадана толстолистного, при следующем соотношении, %: трава лабазника вязолистного 20-30, трава манжетки обыкновенной 10-20, побеги черники обыкновенной 10-20, зеленые листья бадана толстолистного 40-50.

Однако, препаратом сравнения для данного сбора служит растительный препарат, а именно сухой экстракт корня шлемника байкальского (Scutellaria baicalensis Georgi), являющийся менее изученным и реже применяемым ноотропным препаратом растительного происхождения. В то время как действие заявляемого сбора доказано и сопоставимо с действием пирацетама, давно изученного и широко применяемого синтетического ноотропного препарата с многократно доказанными фармакологическими свойствами. Кроме того, в патенте РФ №2578453 не доказано ноотропное действие сбора на фоне применения препаратов, снижающих когнитивные функции, в отличие от предлагаемого решения, где доказано ноотропное действие разработанного сбора, в том числе на фоне снижения когнитивных функций в условиях моделирования амнезии, вызванной введением атропина.

Технической проблемой, на решение которой направлено изобретение, является создание растительного сбора, обладающего ноотропной активностью, в том числе на фоне приема препаратов, снижающих когнитивные функции.

Техническим результатом является создание сбора на основе лекарственных растений, обладающего ноотропным действием, в т.ч. на фоне приема препаратов, снижающих когнитивные функции, и при этом являющегося безопасным при длительном ежедневном применении в терапевтических дозах.

Технический результат достигается за счет создания сбора лекарственных растений, обладающего ноотропным действием, включающего листья гинкго билоба, листья бадана толстолистного, траву лабазника вязолистного, корни солодки, плоды боярышника, при следующем соотношении компонентов, % по массе:

листья гинкго билоба 30-50

листья бадана толстолистного 20-40

трава лабазника вязолистного 20-40

корни солодки 5-10

плоды боярышника 5-10.

Предлагаемое средство расширяет номенклатуру отечественных лекарственных средств растительного происхождения ноотропного действия. Впервые в качестве сбора лекарственных растений, обладающего ноотропным действием, используют состав, содержащий листья гинкго билоба, листья бадана толстолистного, траву лабазника вязолистного, корни солодки, плоды боярышника.

Сбор содержит различные группы биологически активных веществ, доминирующими из которых являются фенольные соединения. Это обеспечивает комплексное и многостороннее применение данного сбора в качестве ноотропного средства. Компоненты сбора принадлежат к различным морфологическим группам, что существенно облегчает его стандартизацию.

Листья гинкго билоба и препараты на их основе обладают антиоксидантным, мембраностабилизирующим, нейромедиаторным, нейротрофическим, вазотропным (вазорегулирующим и антиагрегантным), нейропротекторным действием, предохраняют клетки мозга от повреждений токсинами, применяются при ослаблении внимания, ухудшения кратковременной памяти, мозговых дисфункциях с симптомами эмоциональной неустойчивости и раздражительности, для устранения последствий черепно-мозговых травм и инсультов, а также при нарушениях познавательных функций, связанных со старением, болезнью Альцгеймера, при нейросенсорных расстройствах (головокружение, шум в ушах, снижение слуха). Листья гинкго содержат тритерпеновые лактоны (гинкголиды, билобалиды), флавоноиды (аментофлавон, гинкгетин и изогинкгетин, кемпферол, кверцетин, изорамнетин, нарциссин, никотифлорин), терпеноиды, дубильные вещества, стероиды (фитостерин), полисахариды, органические кислоты, растительные жиры и жироподобные вещества (воск), эфирные масла, аминокислоты, а также макро- и микроэлементы.

Листья бадана толстолистного обладают кровоостанавливающим, противовоспалительным, ранозаживляющим, умеренно гипотензивным, спазмолитическим, сосудоукрепляющим, умеренно кардиостимулирующим (увеличивают частоту сердечного ритма), адаптогенным, антистрессовым, антигипоксическим, иммуномодулирующим, ноотропным действием. В листьях содержится много дубильных веществ, относящихся в основном к группе галлотанинов. Содержится фенологликозид арбутин и свободный гидрохинон, присутствуют также галловая и эллаговая кислоты, аскорбиновая кислота, флавоноиды (кверцетин, кемпферол, апигенин, лютеолин, таксифолин, изокверцитрин, рутин), кумарины (бергенин, эскулетин).

Трава таволги вязолистной обладает противовоспалительным, иммуностимулирующим, противоопухолевым, адаптогенным, ноотропным, антиоксидантным и анксиолитическим действием. Она содержит флавоноиды (кверцетин, рутин, кемпферол, апигенин, лютеолин, таксифолин, изокверцитрин, авикулярин, гиперозид, спиреозид), органические кислоты, кумарины, дубильные вещества, фенольные соединения, производные салициловой кислоты (салигенин, салицин, изосалицин), сапонины стероидной природы, аминокислоты.

Корни солодки обладают противовоспалительными, антиоксидантными, антиастматическими, противоопухолевыми, иммуномодуляторными, нейропротективными, кардиопротективными свойствами. В них содержатся сапонины (глицирризиновая и глицерритиновая кислоты), салициловая, феруловая, кофейная кислоты, фенольные соединения (ликвиритин апиозид, ликвиритин, изоликвиритина пиозид, ликвиритогенин, изоликвиритогенин), кумарины, алкалоиды, дубильные вещества, стероиды (например, эстрадиол), витамины С, В, микро- и макроэлементы.

Плоды боярышника известны сердечнососудистым действием, избирательно расширяют коронарные сосуды и сосуды головного мозга, улучшают снабжением кислородом клетки миокарда и нейронов головного мозга. Плоды содержат флавоноиды (гиперозид, кверцетин), дубильные вещества, органические кислоты (лимонная, стеариновая, олеаноловая, кофейная, хлорогеновая и др.), аскорбиновую кислоту, каротиноиды, дубильные вещества, жирные масла, пектиновые вещества, сахара, витамины К, Е.

Предлагаемый сбор получают путем механического смешивания предварительно высушенных и измельченных до частиц размером не более 5 мм листьев гинкго билоба, листьев бадана толстолистного, травы лабазника вязолистного, корней солодки, плодов боярышника. После измельчения сырья пыль отсеивают сквозь сито с диаметром отверстий 0,18-0,2 мм. Из сбора готовят водное или спирто-водное извлечение, используя спирт в различных концентрациях 20-80%, предпочтительно использование 70%. Возможно применение средства в виде водного извлечения (в соотношении сырье:экстрагент 1:10), приготовленного в режиме настоя или отвара по 1-2 столовых ложки 3-4 раза в день, а также в виде спирто-водного экстракта (в соотношении сырье:экстрагент 1:10) по 2-4 мл 3 раза в день, разбавляя водой.

В таблице 1 приведены примеры составов предложенного лекарственного сбора.

Были проведены фармакологические исследования предложенного сбора, выполненные на белых беспородных крысах-самцах с исходной массой тела 170-250 г. Работы в рамках экспериментальных методик выполняли с 9 до 15 ч. Животных содержали в стандартных условиях вивария на обычном рационе кормления (за исключением тех случаев, где иные условия оговариваются особо) в соответствии с правилами, принятыми Европейской Конвенцией по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и научных целей (г. Страсбург, 1986).

Из сбора ноотропного действия с составами 1-5 получали экстракт жидкий экстрагированием сухого сырья 70% спиртом этиловом (соотношение сырье:экстрагент 1:1). Перед экспериментами с целью исключения влияния этанола экстракт деалкоголизировали путем выпаривания на водяной бане до 1/10 от исходного объема. Полученный остаток доводили водой очищенной до заданного объема. Сбор ноотропного действия исследовали в дозе 1 мл/кг, оказывающей наиболее выраженное ноотропное действие. В качестве препарата сравнения использовали ноотропный препарат пирацетам в дозе 400 мг/кг. Во всех экспериментах животные контрольной и интактной групп получали воду очищенную в эквивалентном объеме по аналогичной схеме.

Животные были разделены на 14 групп по 6 животных в каждой. Животным I, II, III, IV, V и Ia, IIa, IIIa, IVa, Va опытных групп вводили внутрижелудочно сбор ноотропного действия, соответствующий составам сбора 1-5 в дозе 1 мл/кг, VI и VIa опытной группы - пирацетам в дозе 400 мг/кг. Крысы интактной и контрольной групп получали воду очищенную в объеме 5 мл/кг по аналогичной схеме. Препараты вводились ежедневно 1 раз в день в течение 6 недель до начала эксперимента и за 1 час до начала проведения испытаний во время каждого из экспериментов (водный лабиринт Морриса, тест распознавания предметов). Влияние ноотропного сбора на когнитивные функции белых крыс изучали в том числе в условиях моделирования амнезии, вызванной однократным внутрибрюшинным введением атропина в дозе 10 мг/кг (т.е. на фоне приема препарата, снижающего когнитивные функции), который вводили опытным группам Ia, IIa, IIIa, IVa, Va,VIa и контролю.

Значимость различий между указанными параметрами среди экспериментальных групп оценивали с помощью непараметрического критерия Манна-Уитни. Различия считались существенными при р≤0,05.

Пример 1. «Водный лабиринт Морриса», предназначенный для исследования пространственной памяти животных, представлял собой цилиндрический бак, диаметром 150 см, с высотой стенок 67 см, в который помещали неподвижную платформу. Близкой визуальной меткой выступала черная геометрическая фигура на внутренней стенке бака, расположенная на 10 см левее от неподвижной платформы. Бак наполняли непрозрачной водой (путем добавления красителя), температурой 23±1°С на уровень 30 см, что на 2 см выше помещаемой платформы. За день перед тестированием каждую крысу помещали в пустой бак на 10 мин для адаптации к условиям эксперимента. Каждый день эксперимента крысе предоставляли попытку по 90 с на нахождение скрытой под водой платформы. Для этого каждое животное сажали в одно и то же место (противоположное от платформы). В первый день животных обучали и после обучения вводили атропин в дозе 10 мг/кг. Испытания повторяли через 1,3, 10, 14 дней после обучения.

Результаты теста со скрытой платформой водного лабиринта Морриса представлены в таблице 2.

Были получены статистически значимые различия между группой интакта и VI группой (получающей пирацетам), а также контрольной группой и группой VIa, что доказывает эффективность выбранной методики для изучения ноотропной активности, в том числе на фоне приема атропина, т.е. на фоне снижения когнитивных функций. Наиболее показательными были результаты 1 и 3 дня. На 10 и 14 сутки значения времени нахождения платформы снижались во всех группах, разница становилось незначительной. Наилучший результат наблюдался в группах, которым вводили состав 2 и 3, при этом результаты были сопоставимы с группами, которым вводили пирацетам. В первый день время, за которое крысы находили платформу, в среднем составляло 32,44 с±19,67 с и 34,67 с±10,82 с для II и III группы по сравнению с VI (32,90 с±21,97 с), что говорит о сопоставимых с пирацетамом значениях. А на фоне снижения когнитивных функций наблюдалось время в первый день испытаний 31,97 с±22,73 с и 32,50 с±24,58 с, что меньше времени группы VIa 34,50 с±28,43 с по результатам первого дня. В третий день время, за которое крысы находили платформу в водном лабиринте в группах II, III и IV, а также во всех исследуемых группах, которым вводили атропин (подгруппы а) меньше, чем в группах VI и VIa, получавших пирацетам.

Таким образом, была доказана ноотропная активность сбора, сопоставимая с действием пирацетама. Наилучшие результаты показал ноотропный сбор с составом 2 и 3.

Пример 2. Тест распознавания предметов. Схема приема препаратов была аналогично первому примеру. Тест распознавания предметов проводили через 40 минут после введения крысам атропина и ноотропного сбора состава 2 и 3 (так как именно эти два состава показали наилучшие результаты в предыдущем тесте). За день перед тестированием каждую крысу помещали в камеру на 10 мин для адаптации к условиям эксперимента. Камера представляла собой пластиковый цилиндр диаметром 1,5 метра. В ходе тестирования каждую крысу сажали в центр камеры перед двумя предметами - A₁ и А₂, расположенными на расстоянии 40 см друг от друга, и позволяли им исследовать предметы в течение 3 мин (1-я фаза эксперимента). Предметами A₁ и А₂ являлись идентичные стеклянные банки высотой 15 см, диаметром 10 см из светлого стекла. Регистрировали время исследования отдельно каждого предмета (A₁ и А₂). За акт исследовательской активности у крыс принимали обнюхивание предмета на расстоянии менее чем 2 см и/или прикосновение к нему носом или лапкой. Перед тестированием каждый раз протирали банки 20% раствором спирта (для устранения запаха крысы). На следующий день проводили аналогичную процедуру тестирования, при этом один предмет (А₂) заменяли новым предметом - Б₁, отличающимся от «знакомого» предмета A₁ и А₂ темным цветом стекла. Отмечали время исследования нового предмета Б₁ и «знакомого» предмета A₁.

Тест распознавания предметов показал, что в первый день эксперимента у всех животных наблюдался интерес к обоим предметам примерно в равной степени. Стоит также отметить, что у интактной и контрольной групп интерес был ниже по сравнению с опытными группами. Среднее число подходов к предметам не превышал значение 1,83, в то время как у всех опытных групп среднее число подходов составило около 4,5. Также время исследования предметов у интактной и контрольной групп было несколько ниже, чем у опытных. Во второй день у группы интакта интерес был значительно выше к новому предмету Bi, в сравнении с группой контроля, что доказывает амнезирующий эффект атропина. В опытных группах время пребывания у нового предмета было значительно больше по сравнению с временем пребывания у уже знакомого предмета. Результаты в группах, которым вводили ноотропный сбор, получились сопоставимые с группами, получающими пирацетам. Эффект наблюдался как в группах I-V, так и в группах Ia-Va, что доказывает ноотропное действие сбора и демонстрирует улучшение когнитивных функций на фоне амнезии, вызванной введением атропина. Результаты представлены в таблице 3.

В ходе эксперимента было проведено хроническое токсикологическое исследование продолжительностью 6 месяцев. Ежедневно животным вводили суточную терапевтическую дозу ноотропного сбора внутрижелудочно, как описано выше. Содержали и кормили контрольных и опытных лабораторных животных одинаково. Через каждые 10 дней животных взвешивали, наблюдали за поведением. В результате установлено, что длительное применение разработанного ноторопного сбора не приводит к изменениям в физиологическом состоянии крыс. Животные всех групп были активны, состояние кожи и волосяного покрова не изменялось. На протяжении всего эксперимента гибели животных ни в одной из групп не было. Наблюдалась положительная динамика массы тела подопытных крыс после длительного применения терапевтических доз сбора. У крыс отклонений в поведении и нарушений в координации движений не наблюдалось. Шерстный покров был гладкий, не потерял своего блеска. Мочеиспускание у всех животных было регулярным, произвольным, безболезненным, в естественной позе. Расстройств пищеварительного тракта не наблюдали. Цвет, запах и внешний вид каловых масс и мочи естественный. В конце эксперимента все животные опытных и контрольных групп были подвергнуты эвтаназии и патологоанатомическому вскрытию, при макроскопическом исследовании органов и тканей, места введения патологических изменений обнаружено не было. Таким образом, можно сделать вывод о безопасности применения нового ноотропного сбора в течение длительного времени (6 месяцев).

Таким образом, было доказано ноотропное действие предлагаемого сбора, включающего листья гинкго билоба, листья бадана толстолистного, траву лабазника вязолистного, корни солодки, плоды боярышника, в том числе на фоне снижения когнитивных функций в условиях моделирования амнезии, вызванной введением атропина.

Созданный ноотропный сбор лекарственных растений повышает когнитивные функции, увеличивает объем и качество выполняемой умственной работы, является безопасным при длительном ежедневном применении в терапевтических дозах. В состав сбора входят виды лекарственных растительных средств, разрешенных к медицинскому применению, а также обладающих значительной сырьевой базой и большим опытом применения в традиционной медицине РФ.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к сбору лекарственных растений ноотропного действия. Сбор лекарственных растений, обладающий ноотропным действием, включает листья гинкго билоба, листья бадана толстолистного, траву лабазника вязолистного, корни солодки, плоды боярышника при определенном соотношении компонентов. Вышеописанный сбор обладает выраженным ноотропным действием, в том числе на фоне приема препаратов, снижающих когнитивные функции, и при этом является безопасным при длительном ежедневном применении в терапевтических дозах. 3 табл., 2 пр.

Сбор лекарственных растений, обладающий ноотропным действием, включающий листья гинкго билоба, листья бадана толстолистного, траву лабазника вязолистного, корни солодки, плоды боярышника при следующем соотношении компонентов, мас.%:

листья гинкго билоба 30-50 листья бадана толстолистного 20-40 трава лабазника вязолистного 20-40 корни солодки 5-10 плоды боярышника 5-10