ПРИМЕНЕНИЕ КАРБАМАТНОГО ПРОИЗВОДНОГО ДЛЯ ПРЕДОТВРАЩЕНИЯ, ОБЛЕГЧЕНИЯ ИЛИ ЛЕЧЕНИЯ МАЛОГО ЭПИЛЕПТИЧЕСКОГО ПРИПАДКА ИЛИ ЭПИЛЕПСИИ, ПРОЯВЛЯЮЩЕЙ МАЛЫЙ ЭПИЛЕПТИЧЕСКИЙ ПРИПАДОК Российский патент 2023 года по МПК A61K31/41 A61K31/16 A61K31/27 A61P25/10 

[Область техники]

Настоящее изобретение относится к применению карбаматного соединения следующей формулы 1, или его фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата для предотвращения, облегчения или лечения малого эпилептического припадка или эпилепсии, проявляющей малый эпилептический припадок:

[формула 1]

в которой,

R₁, R₂, A₁ и A₂ представляют собой, как определено в настоящем изобретении.

[Уровень техники]

Все симптомы, вызванные временным и нерегулярным аномальным возбуждением нервных клеток в целом, называют эпилептическими припадками. Эпилепсия относится к группе заболеваний, при которых хронические эпилептические припадки возникают даже тогда, когда в организме нет аномалий, которые могут вызвать эпилептические припадки, таких как особый причинный фактор, например, электролитный дисбаланс, кислотно-щелочное нарушение, уремия, отмена алкоголя, тяжелая депривация сна и т.д. Известно, что непрерывное медикаментозное лечение необходимо в случае двух или более эпилептических припадков.

Эпилептический припадок классифицируют, исходя из клинических симптомов и результатов электроэнцефалографии (ЭЭГ). Согласно данной классификации, эпилептические припадки в основном делятся на частичные припадки и генерализованные припадки. Частичные припадки относятся к гиперэксцитативным припадкам нервных клеток, которые начинаются в части коры головного мозга, и генерализованные припадки относятся к припадкам, которые начинаются в широком диапазоне обоих полушарий головного мозга. Типы генерализованных припадков включают генерализованные тонико-клонические припадки, малые эпилептические припадки (небольшие припадки), миоклонические припадки и атонические припадки. Типы частичных припадков включают простые частичные припадки, сложные частичные припадки и вторичные генерализованные припадки, возникающие в результате частичных припадков (источник: корейской общество по эпилепсии).

Из них, малые эпилептические припадки (небольшие припадки) характеризуются симптомами внезапного прекращения действия и тупого взгляда или опусканием головы на 5-10 секунд. Иногда можно наблюдать легкое дрожание глаз или вокруг рта. Данные симптомы обычно появляются при затрудненном дыхании (источник: корейское общество по эпилепсии). Двумя наиболее характерными признаками малых эпилептических припадков являются клинический симптом нарушения сознания и электроэнцефалография (ЭЭГ), показывающая разряд пик-волна (РПВ). Типы эпилепсии с симптомами малых эпилептических припадков включают абсансную эпилепсию у детей, эпилепсию с миоклоническими абсансами, ювенильную абсансную эпилепсию и ювенильную миоклоническую эпилепсию.

Малые эпилептические припадки можно разделить на типичный абсанс и атипичный абсанс. В случае типичного абсанса, припадки обычно заканчиваются в течение 2-10 секунд и редко длятся дольше 30 секунд. Поэтому сами пациенты, а тем более другие, иногда не знают, что у них был припадок. После припадка пациенты возвращаются к нормальной деятельности или ситуации, в которой они находились непосредственно перед припадком, не осознавая, что у них был припадок. Атипичный припадок включает симптомы потери сознания, фиксации взгляда с широко открытыми глазами, мигания век, облизывания губ, жевательного поведения или касания пальцев. Частота данных симптомов может уменьшаться до и после полового созревания, но большинство из них, как правило, перерастает в большой эпилептический припадок.

Существуют ограниченные варианты лечения малых эпилептических припадков. Применяют в основном вальпроевую кислоту или этосуксимид, и ламотригин также можно применять, но известно, что он менее эффективен (Glauser et al. (2010) “Ethosuximide, Valproic Acid, и Lamotrigine in Childhood Absence Epilepsy,” New England Journal of Medicine, 362 (9): 790-9). Однако другие противоэпилептические лекарственные средства, такие как карбамазепин, вигабатрин, тиагабин, окскарбазепин, фенитоин, фенобарбитал, габапентин и прегабалин, могут значительно усугублять малые эпилептические припадки и поэтому противопоказаны пациентам с малыми эпилептическими припадками (“NICE Guidelines” Retrieved November 3, 2014; Knake et al., (August 8, 1999) “Tiagabine-induced absence status in idiopathic generalized epilepsy,” European Journal of Epilepsy 8 (5): 314-317).

Лекарственные средства на основе карбоксамида дибензазепина применяют для лечения частичных приступов, но известно, что лекарственные средства данного класса усугубляют генерализованные приступы, особенно малые эпилептические припадки.

[Описание настоящего изобретения]

[Проблема, которую будет решать настоящее изобретение]

Настоящее изобретение предназначено для обеспечения способа предотвращения, облегчения или лечения малого эпилептического припадка или эпилепсии, проявляющей малый эпилептический припадок.

Настоящее изобретение также предназначено для обеспечения применения карбаматного соединения следующей формулы 1, или его фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата, для предотвращения, облегчения или лечения малого эпилептического припадка или эпилепсии, проявляющей малый эпилептический припадок:

[формула 1]

в которой,

R₁, R₂, A₁ и A₂ представляют собой, как определено в настоящем изобретении.

[Техническое решение настоящей проблемы]

Настоящее изобретение относится к лекарственному средству для предотвращения, облегчения или лечения малого эпилептического припадка или эпилепсии, проявляющей малый эпилептический припадок, содержащему терапевтически эффективное количество карбаматного соединения следующей формулы 1, или его фармацевтически приемлемую соль, сольват или гидрат:

[формула 1]

в которой,

каждый R₁ и R₂ независимо выбран из группы, состоящей из водорода, галогена, C₁-C₈ алкила, галоген-C₁-C₈ алкила, C₁-C₈ тиоалкокси и C₁-C₈ алкокси; и

один из A₁ и A₂ представляет собой CH, и другой представляет собой N.

Кроме того, настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции для предотвращения, облегчения или лечения малого эпилептического припадка или эпилепсии, проявляющей малый эпилептический припадок, содержащей терапевтически эффективное количество карбаматных соединений формулы 1 выше, или их фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата, и дополнительно один или более фармацевтически приемлемых носителей.

Кроме того, настоящее изобретение относится к способу предотвращения, облегчения или лечения малого эпилептического припадка или эпилепсии, проявляющей малый эпилептический припадок у субъекта, включающему введение субъекту терапевтически эффективного количества карбаматных соединений формулы I выше, или их фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата.

Кроме того, настоящее изобретение относится к применению карбаматных соединений формулы I выше, или их фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата для предотвращения, облегчения или лечения малого эпилептического припадка или эпилепсии, проявляющей малый эпилептический припадок.

В одном варианте осуществления настоящего изобретения в формуле I выше каждый R₁ и R₂ независимо выбран из группы, состоящей из водорода, галогена и C₁-C₈ алкила.

В одном варианте осуществления настоящего изобретения галоген C₁-C₈ алкил представляет собой перфторалкил.

Согласно другому варианту осуществления настоящего изобретения, карбаматное соединение формулы I выше представляет собой (R)-1-(2-хлорфенил)-2-тетразол-2-илэтиловый эфир карбаминовой кислоты следующей формулы 2:

[формула 2]

.

Специалисты в области получения соединений могут легко получить карбаматные соединения формул 1 и 2 выше, применяя известные соединения или соединения, которые легко получить из них. В частности, способы получения соединений формулы I выше описаны подробно в PCT публикациях № WO 2006/112685 A1, WO 2010/150946 A1 и WO 2011/046380 A2, описание которых включено в настоящее изобретение с помощью ссылки. Соединения формулы I выше можно получить химически любым из способов, описанных в документах выше, но способы являются только примерными, и порядок проведения отдельных операций и подобных можно выборочно изменять, при необходимости. Следовательно, вышеупомянутые способы не предназначены для ограничения объема настоящего изобретения.

Карбаматные соединения формулы I выше можно применять для предотвращения, облегчения или лечения малого эпилептического припадка или эпилепсии, проявляющей малый эпилептический припадок.

Согласно одному варианту осуществления настоящего изобретения, малые эпилептические припадки можно в основном разделить на типичный абсанс и атипичный абсанс. В случае типичного абсанса припадки обычно заканчиваются в течение 2-10 секунд и редко длятся дольше 30 секунд. Следовательно, сами пациенты, а тем более другие, иногда не знают, были ли у них припадки. После припадка пациенты возвращаются к нормальной деятельности или ситуации, в которой они находились непосредственно перед припадком, не осознавая, что у них был припадок. Атипичный абсанс включает симптомы потери сознания, фиксации взгляда с широко открытыми глазами, мигания век, облизывания губ, жевательного поведения или касания пальцев. Частота данных симптомов может уменьшаться до и после полового созревания, но большинство из них, как правило, перерастает в большой эпилептический припадок.

Согласно одному варианту осуществления настоящего изобретения, эпилепсия, проявляющая малые эпилептические припадки, может представлять собой одну или более, выбранных из абсансной эпилепсии у детей, эпилепсии с миоклоническими абсансами, ювенильной абсансной эпилепсии, ювенильной миоклонической эпилепсии, синдрома Дживонса (миоклонии век с абсансами), генетической генерализованной эпилепсии с фантомным абсансом и синдрома Леннокса-Гасто.

Согласно одному варианту осуществления настоящего изобретения малые эпилептические припадки могут представлять собой типичный абсанс и атипичный абсанс. Малые эпилептические припадки могут также включать все припадки, имеющие разряд пик-волна (РПВ) в качестве характеристики ЭЭГ.

Карбаматные соединения формулы I выше можно применять при малых эпилептических припадках или эпилепсии, проявляющей малые эпилептические припадки, за счет их способности ингибировать разряд пик-волна (РПВ).

Эффективность карбаматных соединений формулы I выше для малых эпилептических припадков или эпилепсии, проявляющей малые эпилептические припадки, можно подтвердить, применяя известную модель. Например, GAERS (крысы с генетической абсансной эпилепсией от Strasbourg) модель представляет собой тип крыс, которые проявляют спонтанный разряд пик-волна (РПВ) и проявляют поведение малых эпилептических припадков благодаря своим генетическим характеристикам, и, таким образом, она представляет собой экспериментальную модель животного, которую применяют в качестве средства для проверки эффективности агента для лечения малых эпилептических припадков (Depaulis et al., The genetic absence epilepsy rat from Strasbourg as a model to decipher the neuronal and network mechanisms of generalized idiopathic epilepsies. J Neurosci Methods, 2016 Feb 15;260:159-74).

В данной модели заболевания у крыс, РПВ характерно наблюдают по записи ЭЭГ головного мозга, и он длится около 17-25 секунд за один раз и происходит от 45 до 60 раз в час. Данный РПВ также связан с приостановкой активности, поведенческой особенностью малых эпилептических припадков. Известно, что РПВ в модели GAERS крыс также ингибируется вальпроатом, этосуксимидом и подобными, аналогично человеческим пациентам, и известно, что большое количество лекарственных средств не обладает ингибирующим эффектом или некоторые лекарственные средства скорее ухудшают РПВ (Dedeurwaerdere et al., Fluctuating and constant valproate administration gives equivalent seizure control in rats with genetic and acquired epilepsy. Seizure. 2011 Jan;20(1):72-9; Nehlig et al., Cerebral energy metabolism in rats with genetic absence epilepsy is not correlated with the pharmacological increase or suppression of spike-wave discharges. Brain Res. 1993 Jul 30;618(1):1-8; Wallengren et al., Aggravation of absence seizures by carbamazepine in a genetic rat model does not induce neuronal c-Fos activation. Clin Neuropharmacol. 2005 Mar-Apr;28(2):60-5; Gurbanova et al., Effect of systemic and intracortical administration of phenytoin in two genetic models of absence epilepsy. Br J Pharmacol. 2006 Aug;148(8):1076-82; Vartanian et al., Activity profile of pregabalin in rodent models of epilepsy and ataxia. Epilepsy Res. 2006 Mar;68(3):189-205).

Следовательно, данную модель заболевания считают пригодной моделью для предсказания влияния на малые эпилептические припадки (Klitgaard et al., Use of epileptic animals for adverse effect testing. Epilepsy Res. 2002 Jun;50(1-2):55-65; van Luijtelaar EL, Drinkenburg WH, van Rijn CM, Coenen AM. Rat models of genetic absence epilepsy: what do EEG spike-wave discharges tell us about drug effects? Methods Find Exp Clin Pharmacol. 2002;24 Suppl D:65-70).

Доза карбаматных соединений формулы 1 для предотвращения, облегчения или лечения заболеваний выше может обычно изменяться в зависимости от тяжести заболевания, веса тела и метаболического статуса субъекта. “Терапевтически эффективное количество” для отдельного пациента относится к количеству активного соединения, достаточному для достижения вышеуказанного фармакологического эффекта, то есть терапевтического эффекта, как описано выше. Терапевтически эффективное количество соединения формулы 1 составляет 50-500 мг, 50-400 мг, 50-300 мг, 100-400 мг, 100-300 мг, 50-200 мг или 100-200 мг, исходя из свободной формы и однократного введения в день людям.

Соединения настоящего изобретения можно вводить любым общепринятым способом, применяемым для введения терапевтического агента, таким как пероральное, парентеральное, внутривенное, внутримышечное, подкожное или ректальное введение.

Лекарственное средство или фармацевтическая композиция согласно одному варианту осуществления настоящего изобретения может содержать терапевтически эффективное количество соединения, выбранного из группы, состоящей из карбаматных соединений настоящего изобретения, их фармацевтически приемлемых солей, сольватов, гидратов и их комбинаций.

Примеры фармацевтически приемлемых солей карбаматных соединений формулы I выше включают независимо ацетат, бензолсульфонат, бензоат, битартрат, ацетат кальция, камсилат, карбонат, цитрат, эдетат, эдисилат, эстолат, эзилат, фумарат, глюцептат, глюконат, глутамат, гликолоиларсанилат, гексилрезорцинат, гидравамин, гидробромид, гидрохлорид, гидрокарбонат, гидроксинафтоат, йодид, изетионат, лактат, лактобионат, малат, малеат, манделат, мезилат, метилнитрат, метилсульфат, мукат, напсилат, нитрат, памоат (эмбонат), пантотенат, фосфат/дифосфат, полигалактуронат, салицилат, стеарат, субацетат, сукцинат или гемисукцинат, сульфат или гемисульфат, таннат, тартрат, оксалат или гемитартрат, теоклат, триэтиодид, бензатин, хлорпрокаин, холин, диэтаноламин, этилендиамин, меглумин, прокаин, алюминий, аммоний, тетраметиламмоний, кальций, литий, магний, калий, натрий и цинк.

Лекарственное средство или фармацевтическую композицию согласно одному варианту осуществления настоящего изобретения можно вводить перорально или парентерально. Парентеральное введение может включать внутривенную инъекцию, подкожную инъекцию, внутримышечную инъекцию, интраперитонеальную инъекцию, эндотелиальное введение, местное введение, интраназальное введение, интравагинальное введение, внутрилегочное введение, ректальное введение и подобные. В случае перорального введения, фармацевтическую композицию согласно одному варианту осуществления настоящего изобретения можно формулировать в виде плоской таблетки (таблетка без покрытия) или так, что активный агент покрыт, или он защищен от разрушения в желудке. Кроме того, состав можно вводить любым устройством, способным переносить активное вещество к целевой клетке. Путь введения может изменяться в зависимости от общего состояния и возраста субъекта, которого будут лечить, характера условий лечения и выбранного активного ингредиента.

Подходящая доза лекарственного средства или фармацевтической композиции согласно одному варианту осуществления настоящего изобретения может изменяться в зависимости от факторов, таких как способ формулирования, способ введения, возраст, масса тела и пол пациентов, патологическое состояние, рацион, время введения, способ введения, скорость экскреции и аллергические реакции, и врачи могут легко определить и назначить дозировки, эффективные для требуемого лечения или профилактики. Фармацевтическую композицию согласно одному варианту осуществления можно вводить в виде одной или нескольких доз, например, один-четыри раза в день. Фармацевтическая композиция согласно одному варианту осуществления может содержать соединения формулы 1 в количестве 50-500 мг, 50-400 мг, 50-300 мг, 100-400 мг, 100-300 мг, 50-200 мг, или 100-200 мг, исходя из свободной формы.

Лекарственное средство или фармацевтическая композиция согласно одному варианту осуществления настоящего изобретения можно формулировать, применяя фармацевтически приемлемый носитель и/или вспомогательное вещество в зависимости от способа, который специалист в данной области техники может легко проводить, посредством этого получая их в виде единичной лекарственной формы, или его содержат в контейнере с множеством доз. Состав выше может представлять собой раствор в масляной или водной среде, суспензию или эмульсию (эмульгированный раствор), экстракт, порошок, гранулы, таблетку или капсулу, и может дополнительно содержать диспергирующий или стабилизирующий агент. Кроме того, фармацевтическую композицию можно вводить в виде суппозиториев, спреев, мазей, кремов, гелей, ингалируемых форм или кожных пластырей. Фармацевтическую композицию можно также получить для введения млекопитающим, более предпочтительно для введения людям.

Фармацевтически приемлемые носители могут быть твердыми или жидкими, и могут представлять собой один или более, выбранные из наполнителей, антиоксидантов, буферов, бактериостатических агентов, диспергаторов, адсорбентов, поверхностно-активных агентов, связующих агентов, консервантов, разрыхлителей, подсластителей, ароматизаторов, агентов, способствующих скольжению, агентов, контролирующих высвобождение, смачивающих агентов, стабилизаторов, суспендирующих агентов и смазывающих агентов. Кроме того, фармацевтически приемлемые носители можно выбрать из солевого раствора, стерильной воды, раствора Рингера, забуференного солевого раствора, раствора декстрозы, раствора мальтодекстрина, глицерина, этанола и их смесей.

В одном варианте осуществления, подходяще наполнители включают, но не ограничиваются, сахар (например, декстрозу, сахарозу, мальтозу и лактозу), крахмал (например, кукурузный крахмал), сахарный спирт (например, маннит, сорбит, мальтит, эритрит и ксилит)), гидролизат крахмала (например, декстрин и мальтодекстрин), целлюлозу или производные целлюлозы (например, микрокристаллическую целлюлозу) или их смеси.

В одном варианте осуществления, подходящие связующие агенты включают, но не ограничиваются, повидон, коповидон, метилцеллюлозу, гидроксипропилметилцеллюлозу, гидроксипропилцеллюлозу, гидроксиэтилцеллюлозу, желатин, камедь, сахарозу, крахмал или их смеси.

В одном варианте осуществления, подходящие консерванты включают, но не ограничиваются, бензойную кислоту, бензоат натрия, бензиловый спирт, бутилированный гидроксианизол, бутилированный гидрокситолуол, хлорбутол, галлат, гидроксибензоат, EDTA или их смеси.

В одном варианте осуществления, подходящие разрыхлители включают, но не ограничиваются, крахмагликолят натрия, сшитый поливинилпирролидон, сшитую карбоксиметилцеллюлозу, крахмал, микрокристаллическую целлюлозу или их смеси.

В одном варианте осуществления, подходящие подсластители включают, но не ограничиваются, сукралозу, сахарин, сахарин натрия, сахарин калия, сахарин кальция, ацесульфам калия или цикламат натрия, маннит, фруктозу, сахарозу, мальтоза или их смеси.

В одном варианте осуществления, подходящие вещества, способствующие скольжению, включают, но не ограничиваются, оксид кремния, коллоидный диоксид кремния, тальк и подобные.

В одном варианте осуществления, подходящие смазывающие агенты включают, но не ограничиваются, длинноцепочные жирные кислоты и их соли, такие как стеарат магния и стеариновая кислота, тальк, глицеридный воск или их смеси.

Как применяют в настоящем изобретении, термины “предупреждает” и “предупреждение” относятся к снижению или устранению вероятности возникновения заболевания.

Как применяют в настоящем изобретении, термины «облегчает» и «облегчение» относятся к улучшению заболевания и/или сопровождающих его симптомов полностью или частично.

Как применяют в настоящем изобретении, термины “лечить” или и “лечение” относится к устранению заболевания и/или сопровождающих его симптомов полностью или частично.

Как применяют в настоящем изобретении, термин “субъект” относится к животному, которое является объектом терапии, наблюдения или эксперимента, предпочтительно млекопитающему (например, приматам (например, человеку), крупному рогатому скоту, овцам, козам, лошадям, собакам, кошкам, кроликам, крысам, мышам и т.д.), самое предпочтительное человеку.

Как применяют в настоящем изобретении, термин “терапевтически эффективное количеств” относится к количеству активного соединения или фармацевтической композиции, которое вызывает биологическую или медицинскую реакцию в системе, у животного или человека, включая облегчение симптомов заболевания или расстройства, которое лечат, причем указанное количество определяется исследователем, ветеринаром, врачом (лечащим врач) или другим клиницистом.

Как применяют в настоящем изобретении, термин “композиция” включает продукт, который содержит определенное количество конкретного ингредиента, и любой продукт, который прямо или косвенно является результатом комбинации определенных количеств конкретных ингредиентов.

[Эффект настоящего изобретения]

Лекарственное средство и фармацевтическая композиция согласно настоящему изобретению может эффективно лечить или предотвращать малый эпилептический припадок или эпилепсию, проявляющую малый эпилептический припадок.

[Краткое описание чертежей]

Фигура 1 показывает результаты измерений с помощью электроэнцефалографии (ЭЭГ), наблюдаемые при исходных условиях модели GAERS, применяемой в экспериментах. Можно видеть, что возникает спонтанный РПВ.

Фигура 2 показывает результат анализа влияния вальпроата, применяемого в качестве положительного контроля, на число случаев появления РПВ, генерируемых в модели GAERS, с помощью электроэнцефалографии (ЭЭГ). Анализировали эффективность при двух дозах 150 мг/кг и 200 мг/кг. Показано количество случаев РПВ в базовый период 20 минут непосредственно перед введением лекарственного средства и количество случаев РПВ в общей сложности за 80 минут через 10-90 минут после введения лекарственного средства.

Фигура 3 показывает результаты анализ влияния испытуемого соединения на число случаев появления РПВ, генерируемых в модели GAERS, с помощью ЭЭГ анализа. Анализировали эффективность при четырех дозах 5, 10, 20 и 30 мг/кг. Показано количество случаев РПВ в базовый период 20 минут непосредственно перед введением лекарственного средства и количество случаев РПВ в общей сложности за 80 минут через 10-90 минут после введения лекарственного средства.

Фигура 4 показывает число случаев появления РПВ в течение в общем 60 минут через 10-70 минут после введения лекарственного средства или испытуемого соединения. Можно подтвердить различие в действии между группой введения плацебо, группой введения испытуемого соединения и группой введения вальпроата.

Фигура 5 показывает результаты анализ влияния вальпроата, применяемого в качестве положительного контроля, на суммарную продолжительность РПВ, генерируемых в модели GAERS, с течением времени с помощью ЭЭГ анализа. Анализировали эффективность при двух дозах 150 мг/кг и 200 мг/кг. Показаны суммарная продолжительность РПВ в базовый период 20 минут непосредственно перед введением лекарственного средства и суммарная продолжительность РПВ через интервалы в 20 минут через 10-90 минуты после введения лекарственного средства.

Фигура 6 показывает результаты анализ влияния испытуемого соединения на суммарную продолжительность РПВ, генерируемых в модели GAERS, с течением времени с помощью ЭЭГ анализа. Анализировали эффективность при четырех дозах 5, 10, 20 и 30 мг/кг. Показаны суммарная продолжительность РПВ в базовый период 20 минут непосредственно перед введением испытуемого соединения и суммарная продолжительность РПВ через интервалы в 20 минут через 10-90 минуты после введения испытуемого соединения.

Фигура 7 показывает суммарную продолжительность РПВ через интервалы в 20 минут суммарно 60 минут через 10-70 минут после введения лекарственного средства или испытуемого соединения. Можно подтвердить различие в действии между группой введения плацебо, группой введения испытуемого соединения и группой введения вальпроата.

[Конкретные варианты осуществления для осуществления настоящего изобретения]

Далее, настоящее изобретение будет объяснено более подробно с помощью рабочих примеров. Однако следующие рабочие примеры предназначены только для иллюстрации одного или более вариантов осуществления и не предназначены для ограничения объема настоящего изобретения.

Пример получения: Получение (R)-1-(2-хлорфенил)-2-тетразол-2-илэтилового эфира карбаминовой кислоты

(R)-1-(2-хлорфенил)-2-тетразол-2-илэтиловый эфир карбаминовой кислоты (испытуемое соединение) получали согласно способу, описанному в примере получения 50 PCT публикации No. WO 2010/150946.

Пример: тест на эффективность предотвращения и лечения малых эпилептических припадков, применяя GAERS (крысы из Страсбурга с генетической абсансной эпилепсией) модели

GAERS (крысы из Страсбурга с генетической абсансной эпилепсией) модель представляет собой тип крыс, которые проявляют спонтанные РПВ в результате генетических эффектов. GAERS модель обладает типичными поведенческими, электрофизиологическими и фармакологическими характеристиками малого эпилептического припадка, и, таким образом, ее применяют в качестве модели заболевания для малого эпилептического припадок в течение приблизительно 20 лет (Depaulis et al., The genetic absence epilepsy rat from Strasbourg as a model to decipher the neuronal and network mechanisms of generalized idiopathic epilepsies. J Neurosci Methods. 2016 Feb 15;260:159-74).

Экспериментальные животные

Двенадцать 5-недельных крыс GAERS модели получали из института нейронаук Гренобля, Франция. После получения, крыс разводили при температуре 21±2°С в условиях свободного доступа к пище и воде, а также при контролируемом освещении (освещали с 8 до 20 часов), и данные условия поддерживали в течение 2 месяцев до операции.

Имплантация электрода для ЭЭГ измерения

ЭЭГ электроды имплантировали двенадцати 3-месячным крысам GAERS. Стереотаксическую имплантацию проводили под наркозом изофлураном (концентрация кислорода 2%). Крыс фиксировали в стереотаксической рамке и проводили операцию, наблюдая за температурой тела. Глазной гель применяли для предотвращения высыхания роговицы. После стрижки волос на месте разреза, его дезинфицировали повидоном, а после разреза сверлили четыре отверстия с помощью сверла в положениях фронтальной кортикальной и теменной коры обоих полушарий открытого черепа. Монополярные электроды помещали в данные отверстия, и затем подключали к гнездовому разъему, закрепленному на черепе для записи ЭЭГ. Затем, место разреза сшивали. После операции бупренорфин вводили подкожно в дозе 0,1 мг/кг, анестетик удаляли и наблюдали до возвращения в сознание. После этого, крыс держали в клетке для выздоровления в течение недели.

Скрининг животных для теста на эффективность лекарственного средства

Через неделю после имплантации электродов проводили предварительные измерения ЭЭГ в течение 1 часа на всех 12 животных, и отбирали 10 животных, демонстрирующих достаточное отношение сигнал-шум для обнаружения генерирования РПВ.

Введение лекарственного средства

Испытуемое соединение и лекарственное средство для положительного контроля получали непосредственно перед введением. (R)-1-(2-Хлорфенил)-2-тетразол-2-илэтиловый эфир карбаминовой кислоты, полученный в примере получения выше, применяли в качестве испытуемого соединения, которое растворяли в 30% (объем/объем) PEG300 (81164-14, Sigma-Aldrich), и вальпроат (P4543, Sigma-Aldrich) в качестве положительного контроля растворяли в 0,9% стерильном соляном растворе (Cooper, France). Оба лекарственных средства вводили интраперитонеально при дозе 5 мл/кг. 30% PEG300 применяли для введения плацебо в качестве негативного контроля.

Тест проводился перекрестным способом с минимальным интервалом в 71 час между каждым введением для вымывания лекарственного средства. На первом этапе теста вещества вводили при следующих условиях.

- плацебо (30% PEG300)

- Вальпроат 200 мг/кг

- Испытуемое соединение 5 мг/кг

- Испытуемое соединение 10 мг/кг

- Испытуемое соединение 20 мг/кг

На втором этапе теста вещества вводили при следующих условиях.

- Вальпроат 150 мг/кг

- Испытуемое соединение 30 мг/кг

Запись ЭЭГ

Для записи ЭЭГ, 10 GAERS крыс помещали в камеру для записи, и затем подключали к проводу для записи ЭЭГ. После часа привыкания проводили записи ЭЭГ животных в свободном движении. В качестве базовой фазы 20 минутные записи выполняли до введения лекарственного средства, и 90 минутные записи выполняли после введения лекарственного средства, применяя SystemPlus Evolution (Micromed). Во время записи животных содержали в состоянии спокойного бодрствования.

Анализ данных ЭЭГ

Сгенерированный РПВ анализировали, применяя записанные данные ЭЭГ, и анализ всех данных проводили слепым способом. РПВ анализировали в течение 20-минутной базовой фазы и в течение 80 минутного периода через 10-90 минут после введения лекартсвенного средства. Данные 80 минут анализировали путем деления их на 20-минутные интервалы, и анализировали число случаев появлений РПВ и суммарную продолжительность РПВ (суммарная продолжительность РПВ).

Статистический анализ

Результаты выражали в виде средней величины ± стандартная ошибка и prisma (graphpad) применяли для статистического анализа. Двухфакторный дисперсионный анализ применяли для числа случаев появления РПВ и суммарной продолжительности РПВ с течением времени. Парный способ сравнения Бонферрони применяли для сравнения с базовым периодом, сравнения с отрицательным контролем, в котором вводили плацебо, и сравнения с положительным контролем, в котором вводили вальпроат. Что касается общего эффекта в течение 1 часа после введения лекарственного средства, однофакторный дисперсионный анализ применяли для повторных измерений, парный способ сравнения Бонферрони применяли для сравнения с отрицательным контролем, в котором вводили плацебо, и для сравнения с положительным контролем, в котором вводили вальпроат. Критерий статистической значимости был определен как р <0,05

Результаты теста

У одной из 10 крыс GAERS, применявшихся для записи ЭЭГ, число генерируемых базовых РПВ было низким, что делало ее неподходящей для анализа, и данные для этой крысы исключали из окончательного анализа.

1) Эффект испытуемого соединения на число случаев появления РПВ

Результаты двухфакторного дисперсионного анализа измеренных величин для каждого 20-минутного интервала являются следующими.

- Группа с введением плацебо в качестве негативного контроля не показала отличий по сравнению с исходным значением в любой момент времени.

- Группа с введением вальпроата в качестве положительного контроля показала эффект снижения числа случаев появления РПВ введением вальпроата. Группа с 150 мг/кг введением показала статистически значимое снижение числа случаев появления РПВ по сравнению с группой с введением плацебо в 10-30 минутных и 30-50 минутных интервалах после введения. Кроме того, группа 200 мг/кг введения показала значительное снижение числа случаев появления РПВ по сравнению с негативным контролем в течение всего периода времени (от 10 до 90 минут) после введения.

- Группа с введением испытуемого соединения при дозах 10, 20 и 30 мг/кг показала значительное снижение числа случаев появления РПВ по сравнению с группой с введением плацебо. Доза 10 мг/кг показала значимость в 30-50 минутном интервале после введения, доза 20 мг/кг показала значимость в 30-90 минутном интервале после введения, и доза 30 мг/кг показала значимость в течение всего периода после введения. С точки зрения длительности эффекта, испытуемое соединение показало большую продолжительность, чем вальпроат в качестве положительного контроля.

Что касается суммарного эффекта в течение 1 часа после введения лекарственного средства, результаты однофакторного дисперсионного анализа показали, что группа с введением испытуемого соединения при дозах 20 и 30 мг/кг значительно снижала число случаев появления РПВ по сравнению с группой с введением плацебо и показала эффект, аналогичный эффекту в группе введения вальпроата при дозах 150 и 200 мг/кг.

2) Эффект испытуемого соединения на суммарную продолжительность РПВ

Результаты двухфакторного дисперсионного анализа кумулятивных величин продолжительности РПВ для каждого 20-минутного интервала являются следующими.

- Группа с введением плацебо в качестве негативного контроля не показала отличий по сравнению с исходным значением в любой момент времени.

- Группа с введением вальпроата в качестве положительного контроля показа снижение эффекта суммарной продолжительности РПВ введением вальпроата. Группа с введением 150 мг/кг показала значительное снижение в 10-30 минутных, 30-50 минутных и 50-70 минутных интервалах после введения, и группа с введением 200 мг/кг показала значительное снижение по сравнению с негативным контролем в течение всего периода времени (от 10 до 90 минут) после введения.

- Группа с введением испытуемого соединения при дозах 10, 20 и 30 мг/кг показала значительное снижение суммарной продолжительности РПВ по сравнению с группой с введением плацебо. Доза 10 мг/кг показало значительное снижение эффекта в 30-50 минутном и 50-70 минутном интервалах после введения, доза 20 мг/кг показала значительное снижение эффекта в 30-90 минутном интервале после введения, и доза 30 мг/кг dose показала значительное снижение эффекта в течение всего периода после введения. С точки зрения длительности эффекта, испытуемое соединение показало большую продолжительность, чем вальпроат в качестве положительного контроля.

Что касается суммарного эффекта в течение 1 часа после введения лекарственного средства, результаты однофакторного дисперсионного анализа показали, что группа с введением испытуемого соединения при дозах 20 и 30 мг/кг значительно снижала число суммарную продолжительность РПВ по сравнению с группой с введением плацебо и показала эффект, аналогичный эффекту в группе введения вальпроата при дозах 150 и 200 мг/кг.

Группа изобретений относится к применению карбаматного соединения, представленного химической формулой 1, или его фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата для предупреждения, облегчения или лечения малого эпилептического припадка или эпилепсии, проявляющей малый эпилептический припадок, при этом каждый R1 и R2 независимо выбран из группы, состоящей из водорода, галогена и C1-C8 алкила; и один из A1 и A2 представляет собой CH, и другой представляет собой N. Также, представлен способ предупреждения, облегчения или лечения малого эпилептического припадка или эпилепсии, проявляющей малый эпилептический припадок у нуждающегося субъекта, включающий введение субъекту терапевтически эффективного количества указанного карбаматного соединения или его фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата. Использование группы изобретений обеспечивает эффективное предупреждение, облегчение или лечение малого эпилептического припадка или эпилепсии, проявляющей малый эпилептический припадок. 2 н. и 14 з.п. ф-лы, 7 ил., 2 пр.

[формула 1]

1. Применение карбаматного соединения следующей формулы 1 или его фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата для получения лекарственного средства для предупреждения, облегчения или лечения малого эпилептического припадка или эпилепсии, проявляющей малый эпилептический припадок:

[формула 1]

в которой

каждый R₁ и R₂ независимо выбран из группы, состоящей из водорода, галогена и C₁-C₈ алкила; и

один из A₁ и A₂ представляет собой CH и другой представляет собой N.

2. Применение по п. 1, в котором карбаматное соединение формулы 1 представляет собой (R)-1-(2-хлорфенил)-2-тетразол-2-илэтиловый эфир карбаминовой кислоты следующей формулы 2:

[формула 2]

.

3. Применение по п. 1, в котором субъект, страдающий от малого эпилептического припадка или эпилепсии, проявляющей малый эпилептический припадок, показывает разряд пик-волна (РПВ) по электроэнцефалографии (ЭЭГ).

4. Применение по п. 1, в котором эпилепсия, проявляющая малые эпилептические припадки, выбрана из группы, состоящей из абсансной эпилепсии у детей, эпилепсии с миоклоническими абсансами, ювенильной абсансной эпилепсии, ювенильной миоклонической эпилепсии, синдрома Дживонса (миоклония век с абсансами), генетической генерализованной эпилепсии с фантомным абсансом и синдрома Леннокса-Гасто.

5. Применение по п. 1, в котором малый эпилептический припадок представляет собой типичный малый эпилептический припадок.

6. Применение по п. 1, в котором малый эпилептический припадок представляет собой атипичный малый эпилептический припадок.

7. Применение по любому из пп. 1-6, в котором лекарственное средство предназначено для введения млекопитающему.

8. Применение по любому из пп. 1-6, в котором терапевтически эффективное количество карбаматного соединения формулы 1 составляет 50-500 мг исходя из свободной формы для введения один раз в день.

9. Способ предупреждения, облегчения или лечения малого эпилептического припадка или эпилепсии, проявляющей малый эпилептический припадок, у нуждающегося субъекта, включающий введение субъекту терапевтически эффективного количества карбаматного соединения следующей формулы 1 или его фармацевтически приемлемой соли, сольвата или гидрата:

[формула 1]

в которой

каждый R₁ и R₂ независимо выбран из группы, состоящей из водорода, галогена и C₁-C₈ алкила; и

один из A₁ и A₂ представляет собой CH и другой представляет собой N.

10. Способ по п. 9, в котором карбаматное соединение формулы 1 представляет собой (R)-1-(2-хлорфенил)-2-тетразол-2-илэтиловый эфир карбаминовой кислоты следующей формулы 2:

[формула 2]

.

11. Способ по п. 9, в котором субъект, страдающий от малого эпилептического припадка или эпилепсии, проявляющей малый эпилептический припадок, показывает разряд пик-волна (РПВ) по электроэнцефалографии (ЭЭГ).

12. Способ по п. 9, в котором эпилепсия, проявляющая малые эпилептические припадки, выбрана из группы, состоящей из абсансной эпилепсии у детей, эпилепсии с миоклоническими абсансами, ювенильной абсансной эпилепсии, ювенильной миоклонической эпилепсии, синдрома Дживонса (миоклония век с абсансами), генетической генерализованной эпилепсии с фантомным абсансом и синдрома Леннокса-Гасто.

13. Способ по п. 9, в котором малый эпилептический припадок представляет собой типичный малый эпилептический припадок.

14. Способ по п. 9, в котором малый эпилептический припадок представляет собой атипичный малый эпилептический припадок.

15. Способ по п. 9, в котором субъект для введения представляет собой млекопитающее.

16. Способ по п. 9, в котором терапевтически эффективное количество карбаматного соединения формулы 1 составляет 50-500 мг исходя из свободной формы для введения один раз в день.