ПЕПТИДЫ, ИНГИБИРУЮЩИЕ АЦЕТИЛХОЛИНОВЫЕ РЕЦЕПТОРЫ, И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ Российский патент 2023 года по МПК C07K7/06 C07K7/08 A23L33/18 A61K38/08 A61P25/00 A61P21/00 A61Q19/08 

Область техники изобретения

Настоящее изобретение относится к ингибирующим ацетилхолиновые рецепторы пептидам и к их применениям.

Уровень техники изобретения

Ацетилхолин, химическое вещество, присутствующее в нервных тканях животных, секретируется нервным окончанием и служит для передачи стимуляции нервов мышцам. Известно, что трансмиттерами, секретируемыми нервными окончаниями, являются ацетилхолин в двигательных нервах и парасимпатических нервах и эпинефрин (адреналин) в симпатических нервах. Секреция ацетилхолина приводит к физиологическим действиям, таким как снижение артериального давления, подавление сердечного ритма, сокращение кишечника и сокращение скелетных мышц. Для сокращения мышцы нерв посылает команду мышце сокращаться, и, таким образом, мышца сокращается. В ответ на команду нерв секретирует ацетилхолин в том участке, где нерв и мышца встречаются друг с другом (нервно-мышечное соединение), и это вещество связывается с ацетилхолиновым рецептором мышцы, позволяя мышце сокращаться (Vincent, А., 1985; и Lindstrom, J.M., et al., 1976). Блокирование ацетилхолиновых рецепторов на периферическом участке, контролирующем скелетные мышцы бедра, вызывает мышечный паралич, а блокирование ацетилхолиновых рецепторов в гладких и сердечных мышцах, ответственных за дыхание или тепловое движение, вызывает паралич органов дыхания и сердца.

Ацетилхолиновые рецепторы классифицируют на мускариновые ацетилхолиновые рецепторы (mAchR (от англ. - muscarinic acetylcholine receptor)) и никотиновые ацетилхолиновые рецепторы (nAchR (от англ. - nicotinic acetylcholine receptor)). Мускариновые ацетилхолиновые рецепторы представляют собой сопряженные с G-белком рецепторы, которые могут быть активированы мускарином и активируют различные механизмы передачи сигналов в зависимости от подтипа. Мускариновые ацетилхолиновые рецепторы распределены по всему организму, включая центральную нервную систему и периферические органы, и в основном служат для опосредования физиологического действия ацетилхолина, секретируемого постганглионарными волокнами парасимпатической нервной системы.

Никотиновые ацетилхолиновые рецепторы представляют собой рецепторы, которые имитируют фармакологические действия никотина и представляют собой ионные каналы, управляемые нейротрансмиттерами. Никотиновые ацетилхолиновые рецепторы представляют собой неселективные катионные каналы, через которые неселективно проходят ионы натрия, калия, кальция и т.п., открывая и закрывая ионные каналы, и регулируют передачу электрических сигналов между нервными клетками и мышечными клетками. Никотиновые ацетилхолиновые рецепторы можно разделить на мышечный тип и нейронный тип в соответствии с участком экспрессии. Никотиновые ацетилхолиновые рецепторы мышечного типа экспрессируются в нервно-мышечном соединении, где двигательные нейроны и скелетные мышцы встречаются друг с другом, а ацетилхолин, секретируемый двигательными нейронами, способствует индукции потенциала концевой пластинки (ПКП) мембран клеток скелетных мышц. Между тем, нейронные никотиновые ацетилхолиновые рецепторы экспрессируются в периферических ганглиях вегетативной нервной системы (ВНС), и, таким образом, ацетилхолин, секретируемый преганглионарными волокнами, способствует возбуждению постганглионарных волокон.

Весьма успешно используются лекарственные средства, которые тормозят или ингибируют активность ацетилхолина или имитируют поведение ацетилхолина. Агонисты ацетилхолиновых рецепторов используют для лечения миастении гравис и болезни Альцгеймера. Миастения гравис представляет собой аутоиммунное заболевание, при котором в организме продуцируются антитела к никотиновым ацетилхолиновым рецепторам для ингибирования нормальной передачи сигналов ацетилхолина, и миастению гравис можно лечить путем увеличения времени, в течение которого ацетилхолин может взаимодействовать с каждым рецептором до инактивации в синаптической щели между нервом и мышцей через ацетилхолинэстеразу (AChE (от англ. acetylcholine esterase)).

Кроме того, обструкция секреции ацетилхолина подавляет сокращение мышц, вызывая мышечный паралич и разглаживая морщины, для чего используется ботокс. Ботокс блокирует секрецию ацетилхолина, вещества, необходимого для сокращения мышц на окончаниях двигательных нервов. В результате мышцы становятся неподвижными, а морщины, вызванные мышцами, исчезают. Эффект расслабления мышц от ботокса постепенно исчезает через 3-6 недель, и, таким образом, требуется повторное введение.

Соответственно, авторы настоящего изобретения при изучении пептидов, связывающихся с ацетилхолиновыми рецепторами, провели скрининг, обеспечили пептиды с высокой аффинностью связывания с ацетилхолиновыми рецепторами и подтвердили, что эти пептиды связываются с ацетилхолиновыми рецепторами с предотвращением связывания ацетилхолина, тем самым ингибируя действие ацетилхолиновых рецепторов, и, таким образом, авторы настоящего изобретения могли бы завершить настоящее изобретение.

Кроме того, авторы настоящего изобретения идентифицировали предварительно определенный порядок расположения конкретных аминокислот, которые важны для ингибирования действий ацетилхолиновых рецепторов посредством связывания скринированных пептидов и ацетилхолиновых рецепторов, и подтвердили, что библиотеки пептидов, представленных в предварительно определенных формулах, связываются с ацетилхолиновыми рецепторами с ингибированием действия ацетилхолиновых рецепторов, и, таким образом, авторы настоящего изобретения завершили настоящее изобретение.

В патенте Кореи №1216008, который соответствует предшествующему уровню техники, раскрывается пептид, который связывается с ацетилхолиновым рецептором и отбирается с использованием биопэннинга, но не раскрываются пептиды и библиотеки, содержащие аминокислотные последовательности в соответствии с настоящим изобретением. Кроме того, в публикации корейского патентного документа №2018-0028748 раскрывается контролирующий высвобождение нейромедиаторов пептид, содержащий ацетилхолин, и его эффект разглаживания морщин, но не раскрывается аффинность связывания с ацетилхолиновыми рецепторами пептидов, содержащих аминокислотные последовательности в соответствии с настоящим изобретением, и полученное в результате ингибирующее действие на ацетилхолиновые рецепторы. В публикации корейского патентного документа №2014-0139010 раскрывается пептид для обеспечения чрескожного проникновения, структура которого отличается от ингибирующих путем связывания с ацетилхолиновыми рецепторами пептидов в соответствии с настоящим изобретением.

Подробное раскрытие изобретения

Техническая задача

Один аспект настоящего изобретения относится к ингибирующим ацетилхолиновые рецепторы пептидам и содержащим их композициям.

Техническое решение

Настоящее изобретение относится к связывающему ацетилхолиновый рецептор пептиду, содержащему аминокислотную последовательность, представленную в приведенной ниже формуле 1:

в которой каждый X_L, Хм и X_N независимо может представлять собой последовательность, состоящую из одной-восьми произвольных аминокислот, и X может представлять собой последовательность, состоящую из одной произвольной аминокислоты, и предпочтительно каждый X_L, Х_м и X_N независимо может представлять собой одну-четыре произвольных аминокислоты, и X может представлять собой одну произвольную аминокислоту.

Настоящее изобретение относится к связывающему ацетилхолиновый рецептор пептиду, содержащему аминокислотную последовательность, представленную в приведенной ниже формуле 2:

в которой Х_М-1 может представлять собой последовательность, состоящую из одной-трех произвольных аминокислот, X может представлять собой последовательность, состоящую из одной произвольной аминокислоты, и предпочтительно Х_м-1 может представлять собой три произвольных аминокислоты, и X может представлять собой одну произвольную аминокислоту.

Пептид может представлять собой пептид любой последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1-200 (см. таблицу 10).

Настоящее изобретение относится к связывающему ацетилхолиновый рецептор пептиду, содержащему аминокислотную последовательность, представленную в приведенной ниже формуле 3 или 3-1:

в которой каждый X_L и Х_М-1 независимо может представлять собой последовательность, состоящую из одной-трех произвольных аминокислот, X может представлять собой последовательность, состоящую из одной произвольной аминокислоты, и предпочтительно каждый X_L и X_M-1 независимо может представлять собой три произвольных аминокислоты, и X может представлять собой одну произвольную аминокислоту; и

в которой каждый Х_м-1 и X_N независимо может представлять собой последовательность, состоящую из одной-трех произвольных аминокислот, X может представлять собой последовательность, состоящую из одной произвольной аминокислоты, и предпочтительно каждый Х_м-1 и X_N независимо может представлять собой три аминокислоты, и X может представлять собой одну произвольную аминокислоту.

Пептид может представлять собой пептид любой последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 201-400 (см. таблицу 11).

Настоящее изобретение относится к связывающему ацетилхолиновый рецептор пептиду, содержащему аминокислотную последовательность, представленную в приведенной ниже формуле 4:

в которой каждый X_L, Х_М-1 и X_N независимо может представлять собой последовательность, состоящую из одной-трех произвольных аминокислот, X может представлять собой последовательность, состоящую из одной произвольной аминокислоты, и предпочтительно каждый X_L, X_M-1 и Х_м независимо может представлять собой три произвольных аминокислоты, и X может представлять собой одну произвольную аминокислоту.

Пептид может представлять собой пептид любой последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 401-600 (см. таблицу 12).

Пептиды могут состоять из последовательности 8-28 аминокислот. Число аминокислот составляет предпочтительно 8-16, более предпочтительно 8-14, еще более предпочтительно 11-16 и наиболее предпочтительно 14.

В связывающем ацетилхолиновый рецептор пептиде на основе аминокислотной последовательности, изложенной в формуле 1, 1-ая, 3-ья и 8-ая аминокислоты, которые представляют собой K или R, могут быть сайтами, важными в связывании ацетилхолинового рецептора.

В связывающем ацетилхолиновый рецептор пептиде на основе аминокислотной последовательности, изложенной в формуле 2, 1-ая, 3-ья, 4-ая и 8-ая аминокислоты, которые представляют собой K или R, могут быть сайтами, важными в связывании ацетилхолинового рецептора.

Аминокислотные последовательности связывающих ацетилхолиновые рецепторы пептидов исключают аминокислотные последовательности, раскрываемые в патенте Кореи №10-1971092, который соответствует патенту с более ранней датой выдачи относительно настоящего изобретения. Аминокислотные последовательности, раскрываемые в патенте Кореи №10-1971092, включают в себя WTWKGRKSLLR.

Аминокислотные последовательности связывающих ацетилхолиновые рецепторы пептидов исключают аминокислотные последовательности, раскрываемые в публикации корейского патентного документа №10-2014-0139010. Аминокислотные последовательности, раскрываемые в публикации корейского патентного документа №10-2014-0139010, представляют собой пептиды и при этом каждый из индексов р и q независимо представляет собой целое число от 0 до 20; индекс п1 независимо представляет собой целое число от 1 до 8; и индекс п2 независимо представляет собой нечетное число от 7 до 17.

Настоящее изобретение относится к связывающим ацетилхолиновые рецепторы пептидам, полученным путем модификации N-конца или С-конца раскрываемых выше пептидов.

N-конец или С-конец может быть модифицирован путем пальмитоилирования, ацетилирования, амидирования, формилирования или пегилирования или путем связывания по меньшей мере с одним выбранным из группы, состоящей из: 2-меркаптоуксусной кислоты, 3-меркаптопропионовой кислоты, 6-меркаптогексановой кислоты, пироглутаминовой кислоты, сукцинимидной кислоты, цистрамина, цистеамина, сложного метилового эфира, сложного этилового эфира, сложного бензилового эфира, миристиновой кислоты, стеариновой кислоты, пальмитиновой кислоты, холестерина, 6-аминогексановой кислоты и 8-аминооктановой кислоты.

Настоящее изобретение относится к связывающему ацетилхолиновый рецептор пептиду.

Используемый в настоящем документе термин «пептид» относится к полимеру, состоящему из двух или более аминокислот, соединенных вместе амидной связью или пептидной связью.

Используемый в настоящем документе термин «аминокислота» включает в себя все природные аминокислоты и другие аминокислоты, например, L- и D-изомеры природных аминокислот, неприродные аминокислоты, аминокислоты, не кодируемые нуклеотидными последовательностями и т.п., которые используют для получения синтетических пептидов в области пептидов.

Природные аминокислоты могут представлять собой аланин (Ala, А), цистеин (Cys, С), аспарагиновую кислоту (Asp, D), глутаминовую кислоту (Glu, Е), фенилаланин (Phe, F), глицин (Gly, G), гистидин (His, H), изолейцин (Ile, I), лизин (Lys, K), лейцин (Leu, L), метионин (Met, M), аспарагин (Asn, N), пролин (Pro, P), глутамин (Gln, Q), аргинин (Arg, R), серин (Ser, S), треонин (Thr, T), валин (Val, V), триптофан (Trp, W) и тирозин (Тyr, Y).

Другие аминокислоты могут представлять собой 2-аминоадининовую кислоту (2-аминогександиовую кислоту), α-аспарагин, 2-аминобутановую кислоту, 2-аминокаприновую кислоту (2-аминодекановую кислоту), α-глутамин, α-аминоизомасляную кислоту (α-метилаланин), 2-аминопимелиновую кислоту (2-аминогептандновую кислоту), γ^_амино-β-гидроксибензолпентановую кислоту, 2-аминосубериновую кислоту (2-аминооктандиовую кислоту), 2-карбоксиазетидин, β-аланин, β-аспарагиновую кислоту, 3,6-диаминогексановую кислоту (β-лизин), бутановую кислоту, 4-амино-3-гидроксибутановую кислоту, γ-амино-β-гидроксициклогексанпентановую кислоту, 3-циклогексилаланин, N5-аминокарбонилорнитин, 3-сульфоаланин, 2,3-диаминопропановую кислоту, 2,7-диаминосубериновую кислоту (2,7-диаминооктандиовую кислоту), S-этилтиоцистеин, γ-глутаминовую кислоту, γ-карбоксилглутаминовую кислоту, гидроксиуксусную кислоту (гликолевую кислоту), пироглутаминовую кислоту, гомоаргинин, гомоцистеин, гомогистидин, 2-гидроксиизовалериановую кислоту, гомосерин, 2-гидроксипентановую кислоту, 5-гидроксилизин, 4-гидроксипролин, изовалин, 2-гидроксипропановую кислоту (молочную кислоту), меркаптоуксусную кислоту, меркаптобутановую кислоту, 3-гидрокси-4-метилпролин, меркаптопропановую кислоту, 3-нафталиналанин, норлейцин, нортирозин, норвалин, 2-карбоксиоктагидроиндол, орнитин, пеницилламин (3-меркаптовалин), 2-фенилглицин, 2-карбоксипиперидин, саркозин (N-метилглицин), 1-амино-1-карбоксициклопентан, статин (4-амино-3-гидрокси-6-метилгептановую кислоту), 3-тиенилаланин, 3-карбоксиизохинолин, 3-метилвалин, ε-N-триметиллизин, 3-тиазолилаланин, α-амино-2,4-диоксопиримидинпропановую кислоту и т.п.

Пептиды в соответствии с настоящим изобретением могут быть получены способами, широко известными из уровня техники. В частности, пептиды в соответствии с настоящим изобретением могут быть получены с использованием генетической рекомбинации или систем экспрессии белков или могут быть получены способами синтеза in vitro посредством химического синтеза, такого как пептидный синтез, и бесклеточным способом синтеза белка. Более конкретно, пептиды могут быть получены хорошо известными в уровне техники способами, например, с помощью автоматического синтезатора пептидов, и могут быть получены с помощью технологии генетических манипуляций без ограничения. Например, желаемый пептид может быть получен путем получения гена, кодирующего белок слияния, состоящий из партнера слияния и пептида в соответствии с настоящим изобретением, посредством генетической манипуляции; трансформации полученного гена в микроорганизме-хозяине; экспрессии гена в форме белка слияния в микроорганизме-хозяине; отщепления и выделения пептида в соответствии с настоящим изобретением из белка слияния с помощью протеазы или соединений.

Пептиды в соответствии с настоящим изобретением могут присутствовать в форме соли. Солевая форма, применимая в соответствии с настоящим изобретением, может быть получена в ходе окончательного выделения и очистки соединений или с помощью реакции аминогруппы с соответствующей кислотой. Примеры соли присоединения кислоты могут представлять собой ацетаты, адипаты, альгинаты, цитраты, аспартаты, бензоаты, бензолсульфонаты, бисульфаты, бутираты, камфораты, камфорсульфонаты, диглюконаты, глицерофосфаты, гемисульфаты, гептаноаты, гексаноаты, формиаты, фумараты, гидрохлорид, гидробромид, гидройодид, 2-гидроксиэтансульфонат, лактаты, малеаты, мезитиленсульфонат, метансульфонат, нафтиленсульфонат, никотинат, 2-нафталенсульфонат, оксалаты, памоаты, пектинаты, персульфаты, 3-фенилпропионат, пикраты, пивалаты, пропионаты, сукцинаты, тартраты, трихлорацетаты, трифторацетаты, фосфаты, глутаматы, бикарбонаты, пара-толуол сульфонаты и ундеканоаты без ограничения. Также примеры кислот, применимых для образования солей присоединения кислоты, могут включать в себя неорганические кислоты, такие как хлористоводородная кислота, бромистоводородная кислота, серная кислота и фосфорная кислота; а также органические кислоты, такие как щавелевая кислота, малеиновая кислота, янтарная кислота и лимонная кислота без ограничения.

Что касается пептидов, могут быть добавлены нацеливающая последовательность, метка, меченый остаток или аминокислотная последовательность, разработанная с целью повышения стабильности пептидов; могут быть присоединены антитело или его фрагмент, человеческий сывороточный альбумин (ЧСА) и т.п. для усиления нацеливания, повышения эффективности или стабильности; и N-конец или С-конец пептидов может быть модифицирован.

Термин «антитело» относится к молекуле определенного белка, которая направлена на антигенный сайт. Предпочтительно, термин «антитело» относится к антителу, которое специфически связывается с определенным белком или его иммуногенным фрагментом и может включать в себя все из моноклональных антител (mAb (от англ. - monoclonal antibody)), поликлональных антител (pAb (от англ. - polyclonal antibody)) и рекомбинантных антител. Антитело может быть легко получено с использованием широко известной из уровня техники методики.

Антитело может включать в себя полную форму, имеющую две полноразмерные легкие цепи и две полноразмерные тяжелые цепи, а также функциональный фрагмент молекулы антитела. Функциональный фрагмент молекулы антитела относится к фрагменту, сохранившему по меньшей мере антигенсвязывающую функцию, и включает в себя Fab, F(ab'), F(ab')₂, F(ab)₂, Fv и т.п.

Пептиды могут быть инкапсулированы или иммобилизованы в наночастицах, микрочастицах, металлических частицах, керамических частицах, гидрогелях и т.п. для доставки в определенные ткани или для обеспечения стабильности без ограничения.

Наночастицы, микрочастицы, металлические частицы, керамические частицы, гидрогели и т.п. могут быть биосовместимыми и нетоксичными.

Используемый в настоящем документе термин «ацетилхолиновый рецептор (AchR (от англ. - acetylcholine receptor)» относится к рецептору, с которым связывается ацетилхолин, секретируемый из нервных окончаний, и который функционирует путем передачи нервной стимуляции с помощью ацетилхолина. Например, при необходимости мышечного сокращения нерв посылает команду мышце сократиться, нерв обеспечивает секрецию ацетилхолина в участке, где нерв и мышца встречаются друг с другом, и секретируемый ацетилхолин связывается с ацетилхолиновым рецептором в мышце, что обеспечивает сокращение мышцы.

Ацетилхолиновые рецепторы в соответствии с настоящим изобретением классифицируют на мускариновые ацетилхолиновые рецепторы и никотиновые ацетилхолиновые рецепторы, и ацетилхолиновые рецепторы в соответствии с настоящим изобретением предпочтительно представляют собой никотиновые ацетилхолиновые рецепторы.

Связывающие ацетилхолиновые рецепторы пептиды связываются с ацетилхолиновыми рецепторами, предотвращая тем самым связывание ацетилхолина с рецепторами, и таким образом могут ингибировать действия ацетилхолиновых рецепторов. Предпочтительно пептиды могут разглаживать морщины и подавлять аномальное сокращение мышц путем ингибирования сокращения мышц; и в ходе хирургического вмешательства могут обеспечивать удобство хирургического вмешательства путем обеспечения расслабления мышц.

Кроме того, настоящее изобретение относится к полинуклеотиду, кодирующему связывающий ацетилхолиновый рецептор пептид. Полинуклеотид, содержащий нуклеотидную последовательность, гомологичную нуклеотидной последовательности, составляющей полинуклеотид, также может быть включен в объем полинуклеотида, представленного в настоящем изобретении, при условии, что полинуклеотид может кодировать пептид, способный проявлять активность связывания с ацетилхолиновым рецептором. Такой полинуклеотид предпочтительно представляет собой полинуклеотид, содержащий аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 80% гомологией, более предпочтительно полинуклеотид, содержащий аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 90% гомологией, и наиболее предпочтительно полинуклеотид, содержащий аминокислотную последовательность, характеризующуюся по меньшей мере 95% гомологией.

Кроме того, настоящее изобретение относится к косметической композиции для разглаживания морщин, содержащей ингибирующий ацетилхолиновый рецептор пептид.

Связывающий ацетилхолиновый рецептор пептид может разглаживать морщины путем ингибирования действия ацетилхолинового рецептора для предотвращения сокращения мышцы.

Косметическая композиция может дополнительно содержать связывающий ацетилхолиновый рецептор пептид и вспомогательное лекарственное вещество, обычно используемое в области косметических средств, например, гидрофильное или липофильное гелеобразующее средство, гидрофильный или липофильный активатор, консервант, антиоксидант, растворитель, ароматизатор, наполнитель, блокатор, пигмент, дезодорирующее средство или краситель.

Количество вспомогательного лекарственного вещества представляет собой количество, которое обычно используют в данной области, и в любом случае вспомогательное лекарственное вещество и его пропорция могут быть выбраны таким образом, чтобы не оказывать неблагоприятного воздействия на желаемые свойства косметической композиции в соответствии с настоящим изобретением.

Косметическая композиция для разглаживания морщин может быть получена путем дополнительного включения добавки.

Добавка может представлять собой увлажнитель, функциональный сырьевой материал, загуститель, смягчающее средство, эмульгатор, поверхностно-активное вещество, регулятор рН и т.п.

Увлажнитель может включать в себя глицерин, пропиленгликоль, бутиленгликоль, гиалуроновую кислоту, церамидный компонент и т.п. без ограничения.

Загуститель может включать в себя полимер, ксантановую камедь и гуаровую камедь без ограничения.

Смягчающее средство может включать в себя минеральное масло, масло ши или парафин без ограничения.

Эмульгатор может включать в себя диметикон, пчелиный воск и т.п.

Косметическая композиция для разглаживания морщин может быть использована путем смешивания с сырьевым материалом, имеющим эффект разглаживания морщин.

Сырьевой материл, обладающий эффектом разглаживания морщин, может включать в себя витамин А, производное витамина А (ретинилпальмитат, ретинилацетат и т.д.), аденозин и полиэтоксилированный ретинамид без ограничения.

Косметическая композиция может находиться в составе по меньшей мере одного, выбранного из группы, состоящей из: лосьона, смягчающего средства кожи, тонизирующего средства для кожи, вяжущего средства, крема, тонального крема, эссенции, пакета, пакета с маской, мыла, средства для мытья тела, очищающей пены, масла для тела и лосьона для тела без ограничения.

Косметическая композиция может быть использована каждый день, а также может быть использована даже в течение неопределенного периода времени, и предпочтительно применяемое количество, число применений и период применения косметической композиции могут быть скорректированы в соответствии с возрастом пользователя, состоянием кожи или типом кожи.

Кроме того, настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции для предупреждения или лечения ассоциированного с гиперактивностью ацетилхолинового рецептора заболевания, при этом фармацевтическая композиция содержит связывающий ацетилхолиновый рецептор пептид.

Связывающий ацетилхолиновый рецептор пептид может связываться с ацетилхолиновым рецептором с ингибированием активации ацетилхолинового рецептора с предупреждением или лечением тем самым ассоциированного с гиперактивностью ацетилхолинового рецептора заболевания.

Ассоциированное с гиперактивностью ацетилхолинового рецептора заболевание относится к заболеванию, при котором мышца сокращается аномально сильно, и его примерами могут быть цервикальная дистония, дистония конечностей, дистония туловища, блефароспазм, спастичность, гемифациальный спазм, косоглазие, нистагм, тики, хроническая боль, хроническая мигрень, нейрогенный мочевой пузырь, диссинергия детрузора и сфинктера, ахалазия кардии, гипергидроз, сиалорея, детский церебральный паралич, постинсультная мышечная жесткость, боль в спине, аденома предстательной железы, недержание мочи, узелки на голосовых связках и их коррекция, геморрой, нарушение роста зубов и т.п.

Кроме того, фармацевтическую композицию можно использовать для обеспечения удобства хирургического вмешательства путем обеспечения расслабления мышц в ходе хирургического вмешательства и можно использовать в качестве терапевтического средства или вспомогательного лекарственного вещества при заболеваниях, вызванных никотиновой зависимостью, использовать для удаления морщин и использовать для коррекции квадратной челюсти или икр без ограничения.

Фармацевтическая композиция может содержать связывающий ацетилхолиновый рецептор пептид и фармацевтически приемлемое вспомогательное средство.

Фармацевтическая композиция может быть составлена в формах перорального состава, такого как порошок, гранулы, таблетка, капсула, суспензия, эмульсия, сироп или аэрозоль; препарата наружного применения; суппозитория и стерильного инъекционного раствора, согласно традиционным способам, соответственно. Примеры носителя, вспомогательного средства и разбавителя, которые могут содержаться в фармацевтической композиции, могут включать в себя лактозу, декстрозу, сахарозу, сорбит, маннит, ксилит, эритрит, мальтит, крахмал, гуммиарабик, альгинат, желатин, фосфат кальция, силикат кальция, целлюлозу, метил целлюлозу, микрокристаллическую целлюлозу, поливинилпирролидон, воду, метилгидроксибензоат, пропилгидроксибензоат, тальк, стеарат магния и минеральное масло. Фармацевтическая композиция может быть получена с использованием разбавителя или вспомогательного средства, которые обычно используются, такого как наполнитель, экстендер, связующее, увлажнитель, разрыхлитель или поверхностно-активное вещество.

Твердые препараты для перорального введения включают в себя таблетку, пилюлю, порошок, гранулы, капсулу и т.п. Эти твердые препараты могут быть получены путем смешивания связывающего ацетилхолиновый рецептор пептида по меньшей мере с одним вспомогательным средством, например, крахмалом, карбонатом кальция, сахарозой или лактозой, желатином или т.п. Также смазывающее средство, такое как стеарат магния или тальк, может быть использовано в дополнение к простым вспомогательным средствам. Жидкие препараты для перорального введения соответствуют суспензии, жидкости для наружного применения, эмульсии, сиропу и т.п. и могут содержать простые часто используемые разбавители, такие как вода и жидкий парафин, а также некоторые вспомогательные средства, такие как увлажнитель, подсластитель, ароматизатор и консервант. Препараты для парентерального введения включают в себя стерильный водный раствор, неводные растворитель, суспензию, эмульсию, высушенное замораживанием средство и суппозиторий. Примеры неводных растворителя и суспензия могут включать в себя пропиленгликоль, полиэтиленгликоль, растительные масла, такие как оливковое масло, инъекционные сложные эфиры, такие как этилолеат, и т.п. Материал основы для суппозитория может включать в себя витепсол, макрогол, Tween 61, масло какао, лауриновое масло, глицерожелатин и т.п.

Без особенного ограничения в отношении состава фармацевтическая композиция может быть использована в качестве препарата для наружного применения на коже, характеризующегося одним составом, выбранным из средства для мази, средства для лосьона, средства для аэрозоля, средства для пластыря, средства для крема, средства для геля и геля. Фармацевтическая композиция может содержать средство для усиления чрескожной абсорбции, такое как без ограничения диметилсульфоксид, диметилацетамид, диметилформамид, поверхностно-активное вещество, спирт, ацетон, пропиленгликоль или полиэтиленгликоль. Частота применения может значительно варьировать в зависимости от возраста, пола и массы субъекта, подлежащего лечению, конкретного заболевания или патологического состояния, подлежащего лечению, тяжести заболевания или патологического состояния, пути введения и мнения назначающего лечение врача. Частота применения может варьировать от одного раза в месяц до 10 раз в сутки, предпочтительно от одного раза в неделю до 4 раз в сутки, более предпочтительно от трех раз в неделю до трех раз в сутки, еще более предпочтительно один или два раза в сутки.

Фармацевтическая композиция в соответствии с настоящим изобретением может быть введена млекопитающим, таким как крыса, домашний скот и человек, различными путями. Могут быть предусмотрены все способы введения, и, например, введение можно осуществлять перорально, ректально или путем внутривенной, внутримышечной, подкожной, чрескожной, эндометриальной или интрацереброваскулярной инъекции. Предпочтительно введение можно осуществлять чрескожной инъекцией.

Кроме того, настоящее изобретение относится к оздоровительной функциональной пищевой композиции, содержащей связывающий ацетилхолиновый рецептор пептид, для облегчения ассоциированного с гиперактивностью ацетилхолинового рецептора заболевания.

Оздоровительная функциональная пищевая композиция может содержать связывающий ацетилхолиновый рецептор пептид и приемлемую пищевую добавку.

Оздоровительная функциональная пищевая композиция в соответствии с настоящим изобретением включает в себя формы таблетки, капсулы, пилюли, жидкого препарата и т.п., а примеры пищевых продуктов, в которые может быть добавлен связывающий ацетилхолиновый рецептор пептид в соответствии с настоящим изобретением, включают в себя различные виды продуктов, напитки, жевательные резинки, чаи, витаминные комплексы и оздоровительные функциональные пищевые продукты.

Согласно еще одному аспекту настоящего изобретения раскрывается композиция для медицинского устройства, содержащая связывающий ацетилхолиновый рецептор пептид.

Композиция для медицинского устройства может представлять собой наполнитель без ограничения.

Используемый в настоящем документе термин «наполнитель» относится к веществу, которое может дополнять ткани кожи и может быть предназначено для заполнения путем инъекции для восстановления упругого лица, улучшения контура лица и разглаживания морщин.

Композиция для медицинского устройства может разглаживать морщины путем подавления мышечного сокращения и может проявлять эффект улучшения контура благодаря связывающему ацетилхолиновый рецептор пептиду, и микрочастицы, наночастицы и гидрогели, на которых иммобилизован связывающий ацетилхолиновый рецептор пептид, могут быть введены для заполнения ткани.

Полезные эффекты

Настоящее изобретение относится к ингибирующим ацетилхолиновые рецепторы пептидам и их применению, при этом фаги, обладающие высокой аффинностью связывания с рецепторами ацетилхолина, подвергали скринингу с использованием произвольных пептидных рекомбинантных фагов, и связывающие ацетилхолиновые рецепторы пептиды отбирали с помощью фаговой дезоксирибонуклеиновой кислоты ДНК. С использованием отобранных пептидов подтверждали аффинность связывания ацетилхолинового рецептора и ингибирующие ацетилхолиновый рецептор эффекты и посредством модификации пептидов идентифицировали сайты и последовательности пептидов, которые имеют решающее значение для связывания ацетилхолинового рецептора.

Кроме того, идентифицированные аминокислотные последовательности пептидов выражали общими формулами на основании важных пептидных сайтов и последовательностей, конструировали библиотеки пептидов и подтверждали, что сконструированные библиотеки, как правило, были связаны с ацетилхолиновыми рецепторами с ингибированием действия ацетилхолиновых рецепторов.

Следовательно, предполагается, что ингибирующие ацетилхолиновые рецепторы пептиды в соответствии с настоящим изобретением могут быть использованы для разработки косметической композиции для разглаживания морщин, медицинского продукта для предупреждения или лечения ассоциированного с ацетилхолиновым рецептором заболевания и оздоровительного функционального пищевого продукта для облегчения ассоциированного с ацетилхолиновым рецептором заболевания.

Краткое раскрытие графических материалов

На фиг. 1 показаны результаты анализа аффинности связывания ацетилхолиновых рецепторов скринированными и отобранными пептидами (Spep-1 - Spep-11).

На фиг. 2 показаны результаты исследования ингибирующего ацетилхолиновые рецепторы эффекта отобранных пептидов в клетках ТЕ671. На (А) - (С) показан ингибирующий ацетилхолиновые рецепторы эффект ацетилхолина в соответствии с концентрациями пептидов Synake, Spep-1, Spep-2, Spep-4 и Spep-10; и на (D) показан ингибирующий ацетилхолиновые рецепторы эффект никотина.

На фиг. 3 показаны результаты цитотоксичности пептидов Synake, Spep-1 и Spep-2 в клетках ТЕ671. Все демонстрировали отсутствие цитотоксичности даже при высокой концентрации 100 мкМ.

На фиг. 4 показаны результаты исследования аффинности связывания ацетилхолинового рецептора в соответствии с концентрацией Spep-2.

На фиг. 5 показаны результаты исследования сайтов последовательности, которые важны для связывания ацетилхолиновых рецепторов в соответствии с размером пептида, с использованием пептидов с обоими усеченными концами в аминокислотной последовательности Spep-2. На (А) показаны результаты исследования с использованием пептидов с усеченным N-концом (Spep-2-ND1 - -ND5), и на (В) показаны результаты исследования с использованием пептидов с усеченным С-концом (Spep-2-CD1 - -CD5).

На фиг. 6 показаны результаты сравнения аффинности связывания ацетилхолинового рецептора (A) Spep-2-ND3 и (В) Spep-2-ND5. По сравнению с аффинностью связывания Spep-2 (11-мер) аффинность связывания Spep-ND3 (8-мер) не показывала значительных различий, но аффинность связывания Spep-2-ND5 (6-мер) была уменьшена в 48 раз.

На фиг. 7 показаны результаты исследования сайтов, которые важны для связывания ацетилхолиновых рецепторов, с использованием аланинового сканирования на основе аминокислотных последовательностей Spep-1-ND3 (А) и Spep-2-ND3 (В).

На фиг. 8 показаны результаты сравнения аффинности связывания ацетилхолинового рецептора конъюгированных с пальмитоилом Spep-2 и Spep-2. Подтверждено, что конъюгация с пальмитоилом усиливала аффинность связывания.

На фиг. 9 подтверждается, что пальмитоил-5рер-2 образовывал мицеллы.

Pal-Spep-2 образовывал мицеллы и усиливал аффинность связывания за счет эффекта авидности.

На фиг. 10 показаны результаты сравнения эффекта ингибирования AchR для пальмитоил-Spep-2 при разных концентрациях с эффектом Spep-2, Synake, а также Synake и бунгаротоксина. По мере усиления аффинности связывания Pal-Spep-2 ингибиторная способность Pal-Spep-2 также усиливалась в приблизительно 10 раз по сравнению с Spep-2.

На фиг. 11 показаны результаты цитотоксичности конъюгированного с пальмитоилом Spep-2 в клетках ТЕ671. Конъюгированный с пальмитоилом Spep-2 демонстрировал отсутствие цитотоксичности даже при высокой концентрации 10 мкМ.

На фиг. 12 показаны результаты исследования аффинности связывания AchR пептидами, в которых К был заменен на R, a R был заменен на K или N в аминокислотной последовательности Spep-2-ND3 как дикого типа, с помощью того же способа, что и в анализе поверхностного плазмонного резонанса. Активность сохранялась при замене на K или R, но активность существенно снижалась при замене на N.

На фиг. 13 показаны результаты исследования аффинности связывания и специфичности фагов в отношении ацетилхолиновых рецепторов, при этом фаги подвергали скринингу в биопэннинге 8-мерного L1 [((K или R)-X-(K или R)(K или R)-XXX-(K или R), X представляет собой последовательность, состоящую из одной произвольной аминокислоты], 11-мерного L2 [ХХХ(K или R)-X-(K или R)(K или R)-XXX-(K или R), X представляет собой последовательность из одной произвольной аминокислоты], 14-мерного L3 [ХХХ(K или R)-X-(K или R)(K или R)-ХХХ-(K или R)XXX, X представляет собой последовательность из одной произвольной аминокислоты] и 18-мерного 1-4[ХХХХХ(K или R)-X-(K или R)(K или R)-XXX-(K или R)XXXXX, X представляет собой последовательность из одной произвольной аминокислоты], которые представляют собой пептидные библиотеки, оптимизированные для ацетилхолиновых рецепторов. Обведенные рамкой части представляют собой первые библиотеки, и подтверждено, что первые библиотеки из всех библиотек L1 (8-мерного), L2 (11-мерного) и L3 (14-мерного) уже продемонстрировали высокую аффинность связывания и специфичность в отношении ацетилхолиновых рецепторов, но библиотека L4 (18-мерного) с пептидом наибольшего размера, не демонстрировала аффинности связывания и специфичности в отношении ацетилхолиновых рецепторов.

На фиг. 14 показаны результаты анализа отношения поглощения ацетилхолинового рецептора к поглощению стрептавидина при скрининге пептидных фагов, специфических в отношении ацетилхолиновых рецепторов, в 4-ом и 5-ом биопэннинге оптимизированных библиотек пептида L1 (8-мерного). Spep-2 также использовали в качестве контроля и подтвердили, что все пептиды обладали более высокой аффинностью связывания и специфичностью, чем Spep-2.

На фиг. 15 показаны результаты анализа отношения поглощения ацетилхолинового рецептора к поглощению стрептавидина при скрининге пептидных фагов, специфических в отношении ацетилхолиновых рецепторов, в 4-ом и 5-ом биопэннинге оптимизированных библиотек пептида L2 (11-мерного). Spep-2 также использовали в качестве контроля и подтвердили, что все пептиды обладали более высокой аффинностью связывания и специфичностью, чем Spep-2.

На фиг. 16 показаны результаты анализа отношения поглощения ацетилхолинового рецептора к поглощению стрептавидина при скрининге пептидных фагов, специфических в отношении ацетилхолиновых рецепторов, в 4-ом и 5-ом биопэннинге оптимизированных библиотек пептида L3 (14-мерного). Spep-2 также использовали в качестве контроля и подтвердили, что все пептиды обладали более высокой аффинностью связывания и специфичностью, чем Spep-2.

На фиг. 17 показаны результаты сравнения аффинности связывания с ацетилхолиновыми рецепторами среди 40 пептидов с превосходной специфичностью, выбранных из оптимизированной библиотеки пептида L1 (8-мерного). Все пептиды обладали более высокой аффинностью связывания и специфичностью, чем Spep-2.

На фиг. 18 показаны результаты сравнения аффинности связывания с ацетилхолиновыми рецепторами среди 40 пептидов с превосходной специфичностью, выбранных из оптимизированной библиотеки пептида L2 (11-мерного). Все пептиды обладали более высокой аффинностью связывания и специфичностью, чем Spep-2.

На фиг. 19 показаны результаты сравнения аффинности связывания с ацетилхолиновыми рецепторами среди 40 пептидов с превосходной специфичностью, выбранных из оптимизированной библиотеки пептида L3 (14-мерного). Все пептиды обладали более высокой аффинностью связывания и специфичностью, чем Spep-2.

На фиг. 20 показаны результаты сравнения ингибирующего ацетилхолиновые рецепторы эффекта у 20 пептидов высшего порядка среди 40 оптимизированных пептидов L1 (8-мерных). Все оптимизированные пептиды демонстрировали более высокую ингибиторную способность, чем Spep-2.

На фиг. 21 показаны результаты сравнения ингибирующего ацетилхолиновые рецепторы эффекта у 20 пептидов высшего порядка среди 40 оптимизированных пептидов L2 (11-мерных). Все оптимизированные пептиды демонстрировали более высокую ингибиторную способность, чем Spep-2.

На фиг. 22 показаны результаты сравнения ингибирующего ацетилхолиновые рецепторы эффекта у 20 пептидов высшего порядка среди 40 оптимизированных пептидов L3 (14-мерных). Все оптимизированные пептиды демонстрировали более высокую ингибиторную способность, чем Spep-2.

На фиг. 23 показаны результаты сравнения аффинности связывания ацетилхолинового рецептора среди репрезентативных пептидов с самой высокой аффинностью среди оптимизированных пептидов L1 (8-мерных), L2 (11-мерных) и L3 (14-мерных).

На фиг. 24 показаны результаты сравнения ингибирования ацетилхолинового рецептора Spep-2 и выбранными репрезентативными пептидами в соответствии с концентрацией.

На фиг. 25 показаны результаты сравнения множественных ингибирующих ацетилхолиновые рецепторы эффектов Spep-2 и выбранных репрезентативных пептидов. Пептид L3-37 обладал ингибиторной способностью, усиленной в 32 раза по сравнению с таковой Spep-2.

На фиг. 26 показаны результаты сравнения аффинности связывания с ацетилхолиновыми рецепторами при различных модификациях конца репрезентативного пептида L3-37.

На фиг. 27 показаны результаты сравнения аффинности связывания с ацетилхолиновыми рецепторами при различных модификациях конца репрезентативного пептида L3-28.

На фиг. 28 показаны результаты сравнения аффинности связывания с ацетилхолиновыми рецепторами при различных модификациях конца репрезентативного пептида L3-27.

На фиг. 29 показаны результаты сравнения аффинности связывания с ацетилхолиновыми рецепторами при различных модификациях конца репрезентативного пептида L2-110.

На фиг. 30 показан результат образования мицелл с помощью Myristic-L3-37 и Stearic-L3-37.

На фиг. 31 показаны результаты сравнения ингибирующего AchR эффекта пальмитоил-L3-37, пальмитоил-L3-28, пальмитоил-L3-27 и пальмитоил-L2-110 при разных концентрациях по сравнению с бунгаротоксином.

На фиг. 32 показаны результаты цитотоксичности пальмитоил-L3-37 в клетках ТЕ671.

На фиг. 33 показаны результаты цитотоксичности пальмитоил-L3-28 в клетках ТЕ671.

На фиг. 34 показаны результаты цитотоксичности пальмитоил-L3-27 в клетках ТЕ671.

На фиг. 35 показаны результаты цитотоксичности пальмитоил-L2-110 в клетках ТЕ671.

На фиг. 36 показаны результаты анализа эффективности у животных для пептида пальмитоил-L3-37 с использованием оборудования Catwalk.

На фиг. 37 показаны результаты использования анализа DAS (от англ. - digit abduction score - показатель пальцевого отведения) для проведения анализа эффективности у животных пептида пальмитоил-L3-37 при различных концентрациях.

На фиг. 38 показаны результаты восстановления эффективности у животных пептида пальмитоил-L3-37 после анализа DAS.

На фиг. 39 показаны результаты анализа острой токсичности для животных пептида пальмитоил-L3-37.

Способы осуществления настоящего изобретения

Далее будут подробно раскрыты предпочтительные репрезентативные варианты осуществления настоящего изобретения. Однако настоящее изобретение не ограничивается репрезентативными вариантами осуществления, раскрываемыми в настоящем документе, и может быть воплощено во многих различных формах. Скорее, эти репрезентативные варианты осуществления представлены для того, чтобы настоящее раскрытие было исчерпывающим и законченным и полностью передавало объем раскрытия специалистам в данной области.

Пример 1. Скрининг связывающего ацетилхолиновый рецептор пептида посредством биопэннинга

Авторы настоящего изобретения получали произвольные рекомбинантные фаги путем получения и трансформации ДНК из библиотеки произвольных пептидов и проводили скрининг связывающих ацетилхолиновые рецепторы (AchR) пептидов посредством биопэннинга согласно способам, раскрытым в патенте с более ранней датой выдачи (патенте Кореи №10-1971092). В таблице 1 показаны результаты секвенирования специфических в отношении AchR пептидов, выбранных из входных фагов, обладающих высокой аффинностью и специфичностью в отношении AchR, в 4-ом и 5-ом циклах биопэннинга.

Пример 2. Исследование аффинности связывания ацетилхолиновых рецепторов пептидами

Синтезировали Spep-1 - Spep-11, отобранные в примере 1, и сравнивали у них аффинность связывания AchR с использованием анализатора поверхностного плазмонного резонанса (ППР) (Biacore3000, Biacore А, Швеция).

Белки ацетилхолинового рецептора иммобилизировали на чипах СМ5, являющихся биосенсорными чипами для анализа поверхностного плазмонного резонанса, с использованием EDC/NHS, а затем выполняли анализ при следующих условиях: подвижный буфер 20 мМ трис (рН 7,0), скорость 30 мкл/минута и 10 мкМ пептидов (Spep-1 - Spep-11). Ассоциацию и диссоциацию наблюдали в течение 500 секунд, и результаты показаны на фиг. 1. Synake, который, как известно, разглаживает морщины за счет связывания AchR, использовали в качестве положительного контроля.

Как показано на фиг. 1, Spep-1, Spep-2, Spep-4 и Spep-10 демонстрировали высокую аффинность связывания AchR по сравнению с Synake, который, как известно, связывается с AchR.

Пример 3. Исследование ингибирования ацетилхолиновых рецепторов пептидами

Для исследования ингибирующих AchR эффектов пептидов, характеризующихся высокой аффинностью связывания ацетилхолиновых рецепторов, в примере 2, использовали надэкспрессирующие AchR клетки ТЕ671. Клетки ТЕ671 культивировали в течение 4 суток с использованием DMEM (от англ. Dulbecco's Modified Eagle Medium - модифицированная по способу Дульбекко среда Игла), содержащей 10% эмбриональной телячьей сыворотки (ЭТС) и 1% пенициллина/стрептомицина. Культивируемые клетки отделяли путем трипсинизации, а затем инокулировали при 2×10⁴ клеток/лунка в 12-луночные планшеты для культивирования клеток с помещенными на них 18-мм покровными стеклами и культивировали в течение 4 суток. Покровные стекла с культивируемыми клетками переносили в новые 12-луночные планшеты и добавляли в них 997 мкл сбалансированного солевого раствора Хэнкса и 3 мкл Fura-2-AM (индикатора внутриклеточных ионов кальция) с последующим культивированием в инкубаторе с 5% CO₂ при 37°С в течение 15 минут. После этого клетки промывали три или четыре раза буфером HBSS (от англ. - Hank's Balanced Salt Solution - сбалансированный солевой раствор Хэнка) для удаления оставшегося Fura-2-AM, а затем к ним добавляли 1 мл буфера HBSS. Покровные стекла с выросшими на них клетками вставляли в камеру для наблюдения под микроскопом, а затем к ним добавляли 500 мкл буфера HBSS. После этого добавляли отобранные в примере 2 пептиды при 0,5, 5 или 50 мкМ, а затем оставляли на приблизительно 3 минуты для связывания с AchR. После этого измеряли интенсивность флуоресценции Fura-2 в клетках путем добавления 125 мкМ никотина или 1 мкМ ацетилхолина для исследования тем самым действия AchR. Synake и бунгаротоксин использовали в качестве положительных контролей. Результаты показаны на фиг. 2.

Как показано на фиг. 2, в отношении обработки ацетилхолином (А - С) Spep-1 демонстрировал ингибирующий AchR эффект 5% при 0,5 мкМ, 90% при 5 мкМ и 100% при 100 мкМ; Spep-2 демонстрировал ингибирующий AchR эффект 90% при 0,5 мкМ и 100% при 5 мкМ; a Spep-4 и Spep-10 демонстрировали ингибирующие AchR эффекты 17% и 47% при 50 мкМ, соответственно. В отношении обработки никотином (D) Spep-1 и Spep-2 по сравнению с Synake демонстрировали превосходные ингибирующие никотиновые ацетилхолиновые рецепторы эффекты.

Таким образом, можно видеть, что Spep-1 и Spep-2 демонстрировали превосходные ингибирующие AchR эффекты, и, в частности, Spep-2 демонстрировал самую высокую аффинность связывания с AchR, что обеспечивало самый высокий ингибирующий AchR эффект.

Пример 4. Измерение цитотоксичности Synake, Spep-1 и Spep-2

Для оценивания токсичности Spep-1 и Spep-2 выполняли анализ с использованием WST (от англ.- Water-soluble Tetrazolium salt, водорастворимая тетразолиевая соль) в клетках ТЕ671. Также оценивали токсичность Synake, и результаты показаны на фиг. 3.

Как показано на фиг. 3, Spep-1, Spep-2 и Synake демонстрировали отсутствие токсичности даже при концентрации обработки 100 мкМ.

Пример 5. Исследование аффинности связывания ацетилхолинового рецептора пептидом Spep-2 с самой высокой аффинностью связывания

Для исследования аффинности связывания AchR Spep-2 с самой высокой аффинностью связывания AchR в примере 2 анализировали константу диссоциации (Kd, от англ. - dissociation constant) с использованием анализатора поверхностного плазмонного резонанса в примере 2 тем же способом, и результаты показаны на фиг. 4. Концентрация обработки для Spep-2 составляла от 0,12 до 1 мкМ, и сравнивали константу диссоциации, при этом Synake использовали в качестве положительного контроля.

Как показано на фиг. 4, кривые ассоциации быстро повышались при обеспечении протекания Spep-2, и кривые ассоциации повышались в зависимости от концентрации обработки Spep-2. После того, как обеспечили полное протекание Spep-2, для диссоциации обеспечивали протекание только подвижного буфера, во время чего повышенные кривые ассоциации не понижались, что указывает на то, что Spep-2 непрерывно связывался с AchR.

Анализируемое значение Kd в отношении AchR для Spep-2 составляло 1,2 мкМ, что указывает на то, что аффинность связывания AchR в приблизительно 2000 раз превосходила таковую у Synake, учитывая, что значение Kd для Synake составляло 2300 мкМ.

Пример 6. Исследование сайта пептидной последовательности, важного для связывания ацетилхолинового рецептора

Пример 6-1. Исследование аффинности связывания ацетилхолинового рецептора путем последовательной делеции аминокислот с конца

Для идентификации сайтов пептида, которые играют важную роль в связывании AchR, проводили модификацию пептида на основе аминокислотной последовательности Spep-2, идентифицированного в примере 1, и модифицированный пептид вносили в анализатор поверхностного плазмонного резонанса в примере 2 для исследования аффинности связывания с AchR.

На основе аминокислотной последовательности Spep-2 аминокислоты с N-конца или С-конца пептида поэтапно делетировали для синтеза пептидов, показанных в приведенной ниже таблице 2, и сравнивали аффинность связывания AchR синтезированными пептидами, и результаты показаны на фиг. 5.

Как показано на фиг. 5, в случаях поэтапной делеции аминокислот с N-конца Spep-2 (A) Spep-2-ND1 - -ND3 демонстрировали снижение аффинности связывания AchR на приблизительно 50% по сравнению с Spep-2, но аффинность связывания с AchR все еще сохранялась, тогда как Spep-2-ND4 и -ND5 демонстрировали значительно пониженную аффинность связывания. В случаях поэтапной делеции аминокислот с С-конца Spep-2 (В) все из Spep-2-CD1 - -CD5 демонстрировали быстрые снижения в связывании AchR.

Таким образом, можно видеть, что 4-ая аминокислота K (Lys) и 11-ая аминокислота R (Arg) в аминокислотной последовательности Spep-2 являются сайтами, важными в связывании AchR.

Пример 6-2. Исследование аффинности связывания ацетилхолинового рецептора модифицированными пептидами

Из модифицированных пептидов Spep-2, идентифицированных в примере 6-1, Spep-2-ND3, у которого идентифицировали минимальную последовательность, необходимую для связывания с AchR, и Spep-2-ND5, который характеризовался размером, меньшим, чем у Spep-2-ND3, вносили в анализатор поверхностного плазмонного резонанса в примере 2 для исследования аффинности связывания с AchR, и результаты показаны на фиг. 6.

Как показано на фиг. 6, Spep-2-ND3 (А) демонстрировал более высокую аффинность связывания с AchR даже при низкой концентрации по сравнению с Spep-2-ND5 (В), и в результате исследования константа диссоциации Spep-2-ND3 составляла 3,1 мкМ, тогда как константа диссоциации Spep-2-ND5 составляла 57 мкМ, что указывает на то, что Spep-2-ND3 характеризовался значительно превосходящей аффинностью связывания с AchR по сравнению с Spep-2-ND5.

Таким образом, можно видеть, что 11-мерный Spep-2 и 8-мерный Spep-2-ND3 не сильно отличались аффинностью связывания с AchR, но 6-мерный Spep-2-ND5 демонстрировал заметное снижение аффинности связывания с AchR. Эти результаты показывают, что три аминокислоты от N-конца Spep-2 не имели существенного значения для аффинности связывания с AchR.

Пример 7. Идентификация сайтов в пептидах, важных для связывания ацетилхолинового рецептора, с использованием аланинового сканирования

С использованием Spep-2-ND3 среди пептидов, идентифицированных в примере 6, и Spep-1-ND3 (KGKGTLNR) стремя аминокислотными делециями с N-конца Spep-1, характеризующегося высоким сходством аминокислотной последовательности с Spep-2, выполняли аланиновое сканирование для идентификации важных сайтов каждого из пептидов.

Spep-1-ND3 и Spep-2-ND3 определяли как дикие типы и синтезировали пептиды в таблице 3, в которых последовательно выполняли замену аланина (Ala) в аминокислотной последовательности каждого пептида, а затем сравнивали по аффинности связывания с AchR тем же способом, что и анализ поверхностного плазмонного резонанса в примере 2. Концентрация обработки каждого пептида составляла 20 мкМ, и результаты показаны на фиг. 7.

Как показано на фиг. 7, пептиды, в которых K в 1-ом сайте, K в 3-ем сайте и R в 8-ом сайте были заменены А в Spep-1-ND3, демонстрировали снижение аффинности связывания с AchR (А); и пептиды, в которых K в 1-ом сайте, R в 3-ем сайте, K в Фом сайте и R в 8-ом сайте были заменены на А в Spep-2-ND3, демонстрировали снижение аффинности связывания с AchR. Таким образом, можно видеть, что сайты K и R в Spep-1-ND3 и Spep-2-ND3 являются важными сайтами в связывании AchR.

Пример 8. Идентификация аффинности связывания ацетилхолинового рецептора конъюгированным с производным жирной кислоты Spep-2 в соответствии с модификацией пептида

Исследовали изменение аффинности связывания с AchR в соответствии с модификацией пептидов, связывающихся с AchR. В частности, с использованием пептида (пальмитоил-5рер-2), полученного путем конъюгации пальмитоила в качестве производного жирной кислоты с Spep-2, характеризующимся самой высокой аффинностью связывания с AchR среди пептидов, идентифицированных в примере 2, исследовали аффинность связывания с AchR тем же способом, что и в анализе поверхностного плазмонного резонанса в примере 2, и результаты показаны на фиг. 8. Аффинность связывания между Spep-2 и AchR использовали в качестве контроля.

Как показано на фиг. 8, аффинность связывания с AchR пальмитоил-Spep-2 была сильнее, чем у Spep-2. Причина заключается в том, что, как показано на фиг. 9, мицеллярные структуры, внутрь которых собирается жирорастворимый пальмитоил, а водорастворимый Spep-2 подвергается внешнему связыванию с несколькими сайтами AchR, с обеспечением эффекта авидности.

Пример 9. Исследование ингибирования ацетилхолинового рецептора с помощью пальмитоил-5рер-2

Исследовали ингибирующий AchR эффект пальмитоил-Spep-2, который, как подтвердили в примере 8, характеризуется превосходной аффинностью связывания с AchR. Ингибирующий AchR эффект исследовали тем же способом, что и в примере 3, и обработку с помощью пальмитоил-Spep-2 выполняли в соответствии с концентрацией. Для сравнения ингибирующего AchR эффекта выполняли обработку с помощью Spep-2, Synake и бунгаротоксина в качестве контролей в соответствии с концентрацией, и результаты показаны на фиг. 10.

Как показано на фиг. 10, пальмитоил-Spep-2 демонстрировал более высокий ингибирующий эффект в отношении AchR, чем Spep-2. Более конкретно, что касается значения IC₅₀ (от англ. - half-maximal inhibitory concentration -концентрация полумаксимального ингибирования) в отношении AchR для каждого пептида, IC50 Synake составляла 75 мкМ; IC₅₀ Spep-2 составляла 750 нМ; IC₅₀ пальмитоил-Spep-2 составляла 75 нМ; и IC₅₀ бунгаротоксина составляла 7,5 нМ, что указывает на то, что ингибирующий AchR эффект Pal-Spep-2 был в 10 раз выше по сравнению с таковым Spep-2.

Пример 10. Измерение цитотоксичности пальмитоил-Spep-2

Для оценивания цитотоксичности пальмитоил-Sрер-2 выполняли анализ с помощью WST в клетках ТЕ671, и результаты показаны на фиг. 11.

Как показано на фиг. 11, пальмитоил-Spep-2 демонстрировал отсутствие цитотоксичности даже при 10 мкМ.

Пример 11. Исследование изменения аффинности связывания с AchR посредством аминокислотных замен K и R в аминокислотной последовательности Spep-2-ND3

Исследовали, изменялась ли аффинность связывания с AchR, когда из аминокислот K и R в Spep-2-ND3, которые были идентифицированы как важные сайты в связывании AchR в примере 7, K заменяли на R, и R заменяли на K или N.

Spep-2-ND3 определяли как дикий тип и синтезировали пептиды в таблице 4, в которых К заменяли на R, a R заменяли на K или N в аминокислотной последовательности Spep-2-ND3, а затем сравнивали по аффинности связывания с AchR тем же способом, что и в анализе поверхностного плазмонного резонанса в примере 2. Концентрация обработки каждого пептида составляла 20 мкМ, и результаты показаны на фиг. 12.

Как показано на фиг. 12, пептиды, в которых K заменяли на R в Spep-2-ND3, демонстрировали повышение аффинности связывания с AchR, а пептиды, в которых R заменяли на K, демонстрировали небольшое снижение аффинности связывания с AchR, но различие не значительное. Однако пептиды, в которых R заменяли на N, демонстрировали значительное снижение аффинности связывания с AchR. Таким образом, можно видеть, что замена К и R друг на друга в Spep-2-ND3 не приводит к различию в связывании AchR, но замена R на N приводит к отсутствию аффинности связывания с AchR.

Пример 12. Конструирование пептидных библиотек для отбора оптимизированных пептидов с повышенной аффинностью связывания ацетилхолинового рецептора

Пример 12-1. Конструирование и трансформация ДНК произвольной пептидной библиотеки

По результатам, полученным в примерах 6, 7 и 11, последовательность пептида Spep-2-ND3 модифицировали для конструирования произвольной пептидной библиотеки 8-мера; (K/R)X(K/R)(K/R)XXX(K/R), 9-мера; X(K/R)X(K/R)(K/R)XXX(K/R), (K/R)X(K/R)(K/R)XXX(K/R)X, 10-мера; XX(K/R)X(K/R)(K/R)XXX(K/R), (K/R)X(K/R)(K/R)XXX(K/R)XX, X(K/R)X(K/R)(K/R)XXX(K/R)X, 11-мера; XXX(K/R)X(K/R)(K/R)XXX(K/R), (K/R)X(K/R)(K/R)XXX(K/R)XXX, X(K/R)X(K/R)(K/R)XXX(K/R)XX, XX(K/R)X(K/R)(K/R)XXX(K/R)X, 12-мера; X(K/R)X(K/R)(K/R)XXX(K/R)XXX, XX(K/R)X(K/R)(K/R)XXX(K/R)XX, XXX(K/R)X(K/R)(K/R)XXX(K/R)X, 13-мера; XX(K/R)X(K/R)(K/R)XXX(K/R)XXX, XXX(K/R)X(K/R)(K/R)XXX(K/R)XX, 14-мера; XXX(K/R)X(K/R)(K/R)XXX(K/R)XXX и 18-мера; XXXXX(K/R)X(K/R)(K/R)XXX(K/R)XXXXX (где (K/R) представляет собой либо K, либо R, и X представляет собой произвольную аминокислоту), и произвольные пептидные библиотеки исследовали на предмет ингибирующего ацетилхолиновые рецепторы эффекта. Подтверждали, что произвольные библиотеки обладают аффинностью связывания ацетилхолинового рецептора, аналогичной или превосходящей таковую у Spep-2.

Далее раскрывается пример, в котором конструировали произвольные пептидные библиотеки 8-мера; (K/R)X(K/R)(K/R)XXX(K/R), 11-мера; XXX(K/R)X(K/R)(K/R)XXX(K/R), 14-мера; XXX(K/R)X(K/R)(K/R)XXX(K/R)XXX и 18-мера; XXXXX(K/R)X(K/R)(K/R)XXX(K/R)XXXXX (где (K/R) представляет собой либо K, либо R, и X представляет собой произвольную аминокислоту) в качестве репрезентативных пептидов, характеризующихся превосходной аффинностью связывания с ацетилхолиновыми рецепторами, и исследовали ингибирующий ацетилхолиновые рецепторы эффект.

Для конструирования пептидных библиотек 8-мера; (K/R)X(K/R)(K/R)XXX(K/R), 11-мера; XXX(K/R)X(K/R)(K/R)XXX(K/R), 14-мера; XXX(K/R)X(K/R)(K/R)XXX(K/R)XXX и 18-мера; XXXXX(K/R)X(K/R)(K/R)XXX(K/R)XXXXX (где (K/R) представляет собой либо K, либо R, и X представляет собой произвольную аминокислоту), синтезировали библиотеки ДНК из таблицы 5 (Bioneer, Корея). Затем выполняли полимеразную цепную реакцию ПЦР с использованием двух однонитевых праймеров (TTCTATGCGGCCCAG и AACAGTTTCTGCGGC) с синтезированными библиотеками ДНК из таблицы 5 в качестве матриц, с амплифицированием тем самым вставленной ДНК для вставки двойных нитей. Амплифицированную вставленную ДНК и фагмидный вектор pIGT расщепляли фрагментами рестрикции Sfi I и Not I и очищали каждую ДНК. Очищенные вставленную ДНК и pIGT лигировали с помощью ДНК-лигазы Т4, а затем осадки, полученные осаждением этанола, растворяли в буфере трис-ЭДТК (этилендиаминтетрауксусная кислота) (ТЭ) с получением ДНК произвольной пептидной библиотеки.

Полученную ДНК произвольной пептидной библиотеки добавляли к компетентным клеткам, смешивали с ними и трансформировали с использованием электропорации. Трансформированные клетки помещали в жидкую среду Лурия Бертани (LB (от англ. - Luria Bertani)), содержащую 20 мМ глюкозы, переносили в тестовую пробирку, а затем культивировали при 37°С и 200 оборотах в минуту в течение 1 часа. Культивируемые клетки помещали в жидкую среду LB, содержащую 20 мМ глюкозы и 50 мкл/мл ампициллина, и культивировали при 30°С в течение одних суток. После суточного культивирования среду центрифугировали при 4°С и 4000 * g в течение 20 минут для удаления надосадочной жидкости с сохранением тем самым осажденных клеток. Сохраненные клетки суспендировали в жидкой среде LB с последующим добавлением глицерина до конечной концентрации 20% или больше, а затем хранили при -80°С с обеспечением тем самым произвольных пептидных библиотек.

Пример 12-2. Получение оптимизированных пептидных рекомбинантных фагов

Произвольные пептидные библиотеки, обеспеченные в примере 12-1, добавляли в жидкую среду SB (от англ. - Super Broth - супероптимальный бульон) (3% триптона, 2% дрожжевого экстракта, 1% свободной кислоты MOPS (от англ. -3-Morpholinopropane sulfonic acid - 3-морфолинопропансульфоновая кислота) и 2% глюкозы) с последующим культивированием при 37°С и 200 оборотах в минуту в течение 20 минут, а затем добавляли 1×10¹⁰ БОЕ (бляшкообразующих единиц) хелперных фагов и ампициллин с конечной концентрацией 50 мкг/мл с последующим культивированием при тех же условиях в течение 1 часа. Культуру переносили в жидкую среду SB, содержащую 50 мкг/мл ампициллина и 10 мкг/мл канамицина, и культивировали при тех же условиях в течение 16 часов с получением тем самым произвольных пептидных рекомбинантных фагов.

Полученные произвольные пептидные рекомбинантные фаги центрифугировали при 4°С и 5000 оборотах в минуту в течение 10 минут с получением надосадочной жидкости, смешивали надосадочную жидкость и полиэтиленгликоль (ПЭГ)/NaCl (20% ПЭГ, 15% NaCl при 5:1 (об.:об.), оставляли на льду на 1 час и центрифугировали при 4°С и 13000 оборотах в минуту в течение 20 минут для удаления надосадочной жидкости. Осадки суспендировали в 1 мл фосфатно-солевого буфера (ФСБ) для обеспечения произвольных пептидных рекомбинантных фагов.

Пример 13. Скрининг оптимизированных пептидов с повышенной аффинностью связывания с ацетилхолиновыми рецепторами

Пример 13-1. Биопэннинг

Процедура, в которой иммобилизованные антигены обрабатывали библиотекой фагов, экспрессирующих на поверхности антитела, для связывания тем самым антител-кандидатов с антигенами, называется биопэннингом, и биопэннинг состоит из трех стадий связывания/промывания/элюирования. Фаги, имеющие антитела со слабой аффинностью связывания, удаляли в ходе стадии промывания, и в результате оставались только фаги, экспрессирующие антитела с высокой аффинностью связывания. Эту процедуру можно повторить три-четыре раза для обнаружения антител-кандидатов с превосходной аффинностью и специфичностью связывания антигена. Таким образом, биопэннинг использовали для скрининга связывающих ацетилхолиновые рецепторы пептидов с превосходной аффинностью связывания и специфичностью в отношении а цетилхол и новых рецепторов.

В восемь лунок 96-луночного планшета помещали 10 мкг/мл AchR а1 по 50 мкл на лунку, а затем оставляли при 4°С на протяжении ночи. На следующий день лунки один раз промывали с помощью 200 мкл триса (20 мМ, рН 7) с последующим добавлением 200 мкл 2% бычьего сывороточного альбумина (БСА), а затем блокировали при комнатной температуре в течение 2 часов. Затем весь раствор сливали, а лунки три раза промывали с помощью 200 мкл триса (20 мМ, рН 7). После смешивания 400 мкл произвольных пептидных рекомбинантных фагов (входных фагов), суспендированных в ФСБ в примере 12-2, с 400 мкл 2% БСА помещали смесь по 100 мкл на лунку, а затем оставляли при 30°С на 1 час. раствор в лунках полностью удаляли и лунки три раза промывали с помощью триса (20 мМ, рН 7). После этого помещали 0,2 М глицина (рН 2,2) по 100 мкл на лунку и выделяли фаги в течение 20 минут, а затем фаги собирали в одну пробирку и нейтрализовали путем добавления 200 мкл 1 М триса (рН 9,0) (выходные фаги).

Для повторения биопэннинга 500 мкл выделенных фагов смешивали с 5 мл Е. coli с последующим культивированием при 37°С и 200 оборотах в минуту в течение 30 минут, а затем добавляли 1×10¹⁰ БОЕ хелперных фагов и ампициллин до конечной концентрации 50 мкг/мл с последующим дополнительным культивированием в течение 30 минут. Культуру переносили в жидкую среду SB, содержащую 50 мкг/мл ампициллина и 10 мкг/мл канамицина, и культивировали при тех же условиях на протяжении ночи с получением тем самым произвольных пептидных рекомбинантных фагов. Воспроизведенные произвольные пептидные рекомбинантные фаги центрифугировали при 4°С и 5000 оборотах в минуту в течение 10 минут для получения надосадочной жидкости, а затем надосадочную жидкость и ПЭГ/NaCl смешивали при 5:1 (об.:об.), оставляли на льду на 1 час и центрифугировали при 4°С и 13000 оборотах в минуту в течение 20 минут для удаления надосадочной жидкости. Осадки суспендировали в 1 мл фосфатно-солевом буфере (ФСБ) и использовали для второго цикла биопэннинга.

Произвольные рекомбинантные фаги воспроизводили тем же способом, что раскрывается выше, в каждом цикле биопэннинга, который осуществляли тем же способом, что раскрывается выше. На стадиях биопэннинга число промываний с помощью триса (20 мМ, рН 7) составляло 3 или 6 раз, и биопэннинг выполняли 5 раз на AchR.

Для измерения числа входных фагов и выходных фагов для каждого биопэннинга фаги смешивали с Е. coli с поглощением при 600 нм 0,7 (OD600 (от англ. - optical density - оптическая плотность)=0,7) и высевали на чашки с агаром, содержащие ампициллин. Результаты показаны в приведенных ниже таблицах 6-9.

Пример 13-2. Ферментный иммуносорбентный анализ (ELISA (от англ. Enzyme-Linked Immunosorbent Assay)) с использованием входных рекомбинантных фагов произвольной пептидной библиотеки

ELISA выполняли на стрептавидине и AchR с использованием входных фагов для каждого цикла биопэннинга в примере 13-1.

В 96-луночный планшет для ELISA добавляли 10 мкг/мл AchR или стрептавидина по 50 мкл на лунку и оставляли при 4°С на протяжении ночи. На следующий день лунки три раза промывали с помощью триса (20 мМ, рН 7) с последующим добавлением 2% БСА, разбавленного с помощью ФСБ, а затем блокировали при комнатной температуре в течение 2 часов. После сливания раствора лунки три раза промывали с помощью триса (20 мМ, рН 7). После смешивания 800 мкл входных фагов для каждого из 1-ого, 2-ого, 3-его, 4-ого и 5-ого циклов в таблицах 6-9 в примере 13-1 с 200 мкл 10% БСА смесь помещали по 100 мкл на лунку, а затем оставляли при 30°С на 1 час. Раствор в лунках полностью удаляли и лунки три раза промывали с помощью триса (20 мМ, рН 7). Затем добавляли конъюгированное с пероксидазой хрена (HRP (от англ. - horseradish peroxidase) Ab (от англ. - antibody) против М13 (GE Healthcare), разбавленное 1:1000, по 100 мкл на лунку с последующим культивированием при 30°С в течение 1 часа. После трехкратного промывания лунок с помощью триса (20 мМ, рН 7) в каждую лунку добавляли 100 мкл раствора тетраметилбензидина (ТМБ), который является субстратом для HRP, для индуцирования реакции проявления цвета, а затем реакцию останавливали путем добавления 100 мкл 1 М HCl и измеряли поглощение (OD450) при 450 нм. Результаты показаны на фиг. 13.

Как показано на фиг. 13, 8-мерные, 11-мерные и 14-мерные произвольные пептидные библиотеки, полученные из входных фагов биопэннинга, как правило демонстрировали очень высокую специфичность связывания с AchR по сравнению со стрептавидином. То есть библиотека полипептидов, представленных общей формулой (K или R)-X-(K или R)-(K или R)-XXX-(K или R), в которой 1-ая, 3-ья, 4-ая и 8-ая аминокислоты фиксируются как лизин (К) или аргинин (R), а каждая из 2-ой, 5-ой, 6-ой и 7-ой аминокислот представляет собой произвольную аминокислоту, как правило, связана с AchR с высокой специфичностью независимо от типов 2-ой, 5-ой, 6-ой и 7-ой аминокислот (X).

Также, что касается 11-мера, библиотеки полипептидов, представленных общей формулой ХХХ-(K или R)-X-(K или R)-(K или R)-XXX-(K или R), в которой 4-ая, 6-ая, 7-ая и 11-ая аминокислоты представляют собой лизин (К) или аргинин (R), как правило, связаны с AchR с высокой специфичностью, независимо от типа произвольной аминокислоты (1-ой, 2-ой, 3-ой, 5-ой, 8-ой, 9-ой и 10-ой аминокислот), выраженных X.

Также, что касается 14-мера, библиотеки полипептидов, представленных общей формулой ХХХ-(K или R)-X-(K или R)-(K или R)-XXX-(K или R)-XXX, в которой 4-ая, 6-ая, 7-ая и 11 -ая аминокислоты представляют собой лизин (K) или аргинин (R), как правило, связаны с AchR с высокой специфичностью, независимо от типа произвольных аминокислот (1-ой, 2-ой, 3-ой, 5-ой, 8-ой, 9-ой, 10-ой, 12-ой, 13-ой и 14-ой аминокислот), выраженных X.

С помощью приведенных выше результатов было подтверждено, что связывающие ацетилхолиновые рецепторы пептиды в соответствии с настоящим изобретением, содержащие аминокислотные последовательности, представленные формулой 1, формулой 2, формулой 3 или формулой 3, связывались с AchR с высокой специфичностью:

(где каждый X_L, Х_м и X_N независимо представляет собой последовательность, состоящую из одной-восьми произвольных аминокислот, а X представляет собой последовательность, состоящую из одной произвольной аминокислоты);

(где Х_М-1 представляет собой последовательность, состоящую из одной-трех произвольных аминокислот, а X представляет собой последовательность, состоящую из одной произвольной аминокислоты);

(где каждый X_L и Х_М-1 независимо представляет собой последовательность, состоящую из одной-трех произвольных аминокислот, а X представляет собой последовательность, состоящую из одной произвольной аминокислоты); и

(где каждый X_L, X_M-1 и Хм независимо представляет собой последовательность, состоящую из одной-трех произвольных аминокислот, а X представляет собой последовательность, состоящую из одной произвольной аминокислоты).

Аминокислотные последовательности были представлены предварительно определенными формулами на основании важных сайтов и последовательностей пептидов, и была сконструирована библиотека пептидов. Подтверждали связывание сконструированной библиотеки с ацетилхолиновыми рецепторами для ингибирования действий ацетилхолиновых рецепторов.

Как показано на фиг. 13, 8-мерные, 11-мерные и 14-мерные произвольные пептидные библиотеки, полученные из входных фагов первого цикла биопэннинга, демонстрировали более высокую специфичность связывания с AchR по сравнению со стрептавидином, тогда как 18-мерная произвольная пептидная библиотека, полученная из входных фагов первого цикла биопэннинга, характеризовалась низкой аффинностью связывания с AchR.

С помощью приведенных выше результатов было подтверждено, что 8-мерные - 14-мерные произвольные пептиды сохраняли аффинность связывания с AchR, но 18-мерные произвольные пептиды характеризовались пониженной аффинностью связывания с AchR. Считается, что это различие в аффинности связывания с AchR обусловлено числом произвольных аминокислот (X).

Пример 13-3. Скрининг оптимизированных пептидов с повышенной аффинностью связывания с ацетилхолиновыми рецепторами

Скрининг проводили для отбора оптимизированных пептидов с повышенной аффинностью связывания с AchR из входных фагов для 4-ого и 5-ого циклов биопэннинга, которые были идентифицированы как характеризующиеся высокой аффинностью связывания и специфичностью в отношении AchR в примерах 13-1 и 13-2.

Выходные фаги для 4-ого и 5-ого циклов биопэннинга в примере 13-1 инокул провал и в Е. coli и высевали на чашки с агаром так, чтобы образовалось 100-200 бляшек на чашку. Бляшки инокулировали в 1 мл жидкой среды SB, содержащей 50 мкг/мл ампициллина, с использованием стерильного наконечника и культивировали при встряхивании при 37°С в течение 5 часов с последующим добавлением 30 мкл хелперных фагов, а затем культивировали при 37°С и 200 оборотах в минуту в течение одних суток. Культуру центрифугировали при 12000 оборотах в минуту в течение 2 минут для сбора надосадочной жидкости, к надосадочной жидкости добавляли 2% БСА и использовали для скрининга фагов.

В 96-луночный планшет для ELISA добавляли 5 мкг/мл AchR или стрептавидина по 50 мкл на лунку и оставляли при 4°С на протяжении ночи. На следующие сутки раствор из каждой лунки сливали с последующим добавлением 2% БСА, а затем блокировали при комнатной температуре в течение 2 часов. После сливания всего раствора лунки три раза промывали с помощью триса (20 мМ, рН 7). Кроме того, 100 мкл каждого из растворов фагов, приготовленных из полученных, как указано выше, бляшек распределяли в лунки и оставляли при 30°С в течение 1 часа. После сливания всего раствора из лунок лунки три раза промывали с помощью триса (20 мМ, рН 7), а затем добавляли конъюгированное с HRP антитело против М13, разбавленное 1:2000, по 100 мкл на лунку с последующим культивированием при 30°С в течение 1 часа. После трехкратного промывания лунок с помощью триса (20 мМ, рН 7) добавляли по 100 мкл тетраметилбензидина в каждую лунку для индуцирования реакции проявления цвета, а затем реакцию останавливали путем добавления 100 мкл 1 М H₂S0₄ и измеряли поглощение при 450 нм (OD450). Измеренное поглощение преобразовывали в отношение поглощения AchR к поглощению стрептавидина (сигнал AchR к сигналу стрептавидина), и результаты показаны на фиг. 14-16.

Как показано на фиг. 14-16, наблюдали, что аффинность связывания с AchR отличается в зависимости от фага, и из них отбирали фаги, характеризующиеся самым высоким отношением сигнала AchR к сигналу стрептавидина. Результаты показаны в таблицах 10-12. Все 8-мерные (L1), 11-мерные (L2) и 14-мерные (L3) оптимизированные пептиды демонстрировали более высокую аффинность связывания и специфичность в отношении AchR, чем Spep-2 в качестве положительного контроля.

Плазмидную ДНК очищали из фагов, отобранных, как указано выше, запрашивали секвенирование пептидов с использованием очищенной плазмидной ДНК и праймера для секвенирования пептидов, состоящего из GATTACGCCAAGCTTTGGAGC, и отбирали оптимизированные пептиды с идентифицированными последовательностями и повышенной аффинностью связывания с AchR.

Для сравнения с пептидами аминокислотных последовательностей, раскрываемых в публикации корейского патентного документа №10-2014-0139010, синтезировали пептиды аминокислотных последовательностей, показанных в таблице 13, и исследовали на предмет специфичности связывания с AchR тем же способом, что раскрывается выше. В результате подтвердили, что синтезированные пептиды характеризуются специфичностью связывания, подобной таковой у Spep-2. Однако последовательности с повторами R или последовательности с повторами G на обоих концах 8-мера демонстрировали низкий уровень специфичности связывания по сравнению со всеми из библиотеки 11-меров или 14-меров. Считают, что это связано с зарядами или конформационными характеристиками пептидов.

Пример 14. Исследование аффинности связывания ацетилхолинового рецептора оптимизированными пептидами

Что касается каждой библиотеки оптимизированных пептидов, характеризующихся превосходной специфичностью связывания с AchR в примере 13-3, отбирали и синтезировали сорок пептидов и сравнивали по аффинности связывания с AchR (резонансная единица: Ru, от англ. - Resonance Unit) с использованием способа анализа поверхностного плазмонного резонанса (ППР) в примере 2. Оптимизированные пептиды тестировали в условиях концентрации 3 мкМ и 10 мкМ, и результаты показаны на фиг. 17-19. Spep-2 использовали в качестве положительного контроля. Все из сорока 8-мерных (L1), 11-мерных (L2) и 14-мерных (L3) оптимизированных пептидов демонстрировали высокую аффинность связывания с AchR по сравнению с положительным контролем Spep-2, и получали 20 пептидов с высокой аффинностью связывания с AchR для каждой библиотеки.

Пример 15. Исследование ингибирования ацетилхолиновых рецепторов соответствующими оптимизированными пептидами (L1, L2, L3)

Для исследования ингибирующего AchR эффекта 8-мерных, 11-мерных и 14-мерных пептидов с превосходной аффинностью связывания с AchR, идентифицированных в примере 14, исследовали ингибирующий AchR эффект тем же способом, что и в примере 3. Выполняли обработку каждым из пептидов при 20 мкМ, а также выполняли обработку с помощью Spep-2 в качестве контроля. Для исследования превосходной ингибиторной способности оптимизированных пептидов в отношении AchR добавляли никотин при высокой концентрации 400 мкМ или 600 мкМ, и результаты показаны на фиг. 20-22.

Как показано на фиг. 20-22, в случаях добавления никотина при высокой концентрации 400 мкМ и обработке каждым пептидом при 20 мкМ степень ингибирования AchR для Spep-2 в качестве контроля составляла приблизительно 10%, что указывает на незначительный эффект, тогда как степени ингибирования AchR для 8-мерных, 11-мерных и 14-мерных пептидов составляли 50% или больше, что указывает на превосходные ингибирующие эффекты по сравнению с Spep-2. Из них 8-мерные L1-13, 11-мерные L2-110 и 14-мерные L3-27, 28 и 37 пептиды демонстрировали ингибирующий эффект, близкий к 100%. Кроме того, подтвердили, что степень ингибирования AchR пептидами в клетках была почти идентична аффинности связывания с AchR каждого из пептидов в примере 14.

Пример 16. Исследование аффинности связывания ацетилхолиновых рецепторов репрезентативными пептидами

Репрезентативные пептиды L1-13, L2-110, L3-27, L3-28 и L3-37, идентифицированные в примере 15, сравнивали по аффинности связывания с AchR (резонансные единицы: Ru) с использованием способа анализа поверхностного плазмонного резонанса (ППР) в примере 2. Пептиды использовали при том же условии концентрации 3 мкМ. Результаты показаны на фиг. 23.

Как показано на фиг. 23, 11-мерные L2-110 и 14-мерные L3-27, 28 и 37 демонстрировали более высокую аффинность связывания с AchR по сравнению с 8-мерными L1-13, а 14-мерные L3-27, 28 и 37 демонстрировали самую высокую аффинность связывания. Тем самым подтвердили, что если пептиды формул в соответствии с настоящим изобретением формировались в виде 8-меров или 11-меров, то такие пептиды также демонстрировали высокую аффинность связывания с AchR, но 14-мерные пептиды характеризовались оптимальной аффинностью связывания.

Пример 17: Исследование ингибирования ацетилхолиновых рецепторов репрезентативными пептидами L2-110 и L3-27, 28 и 37

Для исследования ингибирующего AchR эффекта для пептидов L2-110, L3-27, L3-28 и L3-37, у которых идентифицирована превосходная способность связывания с AchR в примере 16, исследовали ингибирующий AchR эффект тем же способом, что и в примере 3. Проводили обработку каждым из пептидов при разных концентрациях, а также проводили обработку с помощью Spep-2 в качестве контроля. Результаты показаны на фиг. 24.

Как показано на фиг. 24, что касается никотина при высокой концентрации 400 мкМ, Spep-2 ингибировал AchR на 100% при 80 мкМ, но не мог ингибировать при концентрации 70 мкМ. 11-мерный L2-110 и 14-мерный L3-27 ингибировали AchR на 100% при 10 мкМ, но не могли ингибировать при 5 мкМ. 14-мерный L3-28 ингибировал AchR на 100% при 5 мкМ, но не мог ингибировать при 2,5 мкМ. Кроме того, 14-мерный L3-27 ингибировал AchR на 100% при 2,5 мкМ и ингибировал на 50% даже при 1 мкМ.

Исходя из представленных выше результатов, ингибиторная способность в отношении никотиновых ацетилхолиновых рецепторов была выражена в кратных единицах на фиг. 25. По сравнению с Spep-2, L2-110 и L3-27 демонстрировали ингибирующий эффект, улучшенный в 8 раз, L3-28 - в 16 раз, а L3-37 - в 32 раза. Наконец, было подтверждено, что ингибирующие эффекты этих пептидов также были превосходными соразмерно со способностью связывания с ацетилхолиновыми рецепторами в примере 15.

Пример 18. Исследование аффинности связывания с ацетилхолиновыми рецепторами в соответствии с различными модификациями на каждом конце репрезентативных пептидов

Каждый конец пептидов L2-110, L3-27, L3-28 и L3-37, идентифицированных в примере 17, был по-разному модифицирован, и для этого исследовали изменение аффинности связывания с AchR. В частности, пептиды, модифицированные присоединением миристиновой кислоты или стеариновой кислоты в дополнение к пальмитоилу, которые являются производными жирных кислот, тем же способом, что и в примере 8, или путем ацетилирования или пегилирования, сравнивали с основным пептидом без модификации. Результаты показаны на фиг. 26-29.

Как показано на фиг. 26-29, при присоединении производных жирных кислот к концу пептидов в соответствии с настоящим изобретением аффинность связывания всех пептидов повышалась в приблизительно 10 раз (пальмитоил-, Myristic-, Stearic-). Пептиды, модифицированные присоединением пальмитоила, демонстрировали более высокую аффинность связывания, чем пептиды с присоединением других производных жирных кислот.

Аффинность связывания с AchR при ацетилировании конца пептидов в соответствии с настоящим изобретением была подобна таковой, когда конец пептидов не был модифицирован. Аффинность связывания с AchR, при пегилировании конца пептидов в соответствии с настоящим изобретением снижалась на приблизительно 50% по сравнению с таковой, когда концы пептидов не были модифицированы.

Как показано на фиг. 30, присоединение производного жирной миристиновой кислоты или стеариновой кислоты к концу пептидов в соответствии с настоящим изобретением индуцировало образование мицеллярной структуры, подобно присоединению пальмитоила в примере 8.

Пример 19. Исследование ингибирования ацетилхолиновых рецепторов с помощью пальмитоил-L2-110, пальмитоил-L3-27, пальмитоил-L3-28 и пальмитоил-L3-37

Ингибирующие AchR эффекты пептидов пальмитоил-L2-110, пальмитоил-L3-27, пальмитоил-L3-28 и пальмитоил-L3-37 с превосходной аффинностью связывания с AchR в примере 18 исследовали тем же способом, что и в примере 3. Бунгаротоксин также использовали в качестве контроля. Результаты показаны на фиг. 31.

Как показано на фиг. 31, аффинность связывания с AchR была самой высокой у пальмитоил-L3-37, за которым следовал пальмитоил-L3-28, а пальмитоил-L3-27 и пальмитоил-L2-110 демонстрировали подобные уровни.

Пример 20. Исследование цитотоксичности пептидов пальмитоил-L2-110, пальмитоил-L3-27, пальмитоил-L3-28 и пальмитоил-L3-37

Для оценивания цитотоксичности пептидов пальмитоил-L2-110, пальмитоил-L3-27, пальмитоил-L3-28 и пальмитоил-13-37 выполняли анализ с использованием WST в клетках ТЕ671, и результаты показаны на фиг. 32-35.

Как показано на фиг. 32-35, все пептиды демонстрировали отсутствие цитотоксичности, даже при концентрации обработки 10 мкМ.

Пример 21. Анализ in vivo эффективности пальмитоил-13-37

Выполняли анализ эффективности у животных с использованием пальмитоил-13-37, который характеризовался самой высокой аффинностью связывания с ацетилхолиновыми рецепторами в примере 18. Самкам мышей BALB/c возрастом 6 недель вводили инъекцией пальмитоил-13-37 при концентрации 10 мг/кг в мышцу бедра правой задней лапы (IM (от англ. -intramuscularly - внутримышечно)). Сравнивали и анализировали данные CatWalk мышей до инъекции и данные CatWalk мышей через 30 минут после инъекции, и результаты показаны на фиг. 36.

Как показано на фиг. 36, площадь, где подошва правой задней лапы касалась пола, была уменьшена после инъекции пальмитоил-13-37 по сравнению с тем, что было до инъекции (А), а площадь, где подошва мыши касалась пола (В), и среднее значение максимальных значений площади (С) также уменьшились после инъекции пальмитоил-13-37.

Таким образом, можно видеть, что пальмитоил-13-37 связывается с ацетилхолиновыми рецепторами, влияя тем самым на расслабление мышц у животных за счет ингибирования ацетилхолина.

Пример 22. Оценивание эффективности у животных (ED50 (от англ. - half-effective dose - полуэффективная доза)) и токсичности у животных (LD50 (от англ. - half-lethal dose - полулетальная доза)) для пальмитоил-13-37

Анализ эффективности у животных (ED50) выполняли с помощью анализа показателя пальцевого отведения (DAS). Анализ DAS был разработан для измерения эффективности в отношении локального ослабления мышц лекарственным средством, вводимым внутримышечной (IM) инъекцией в скелетную мышцу задней лапы мыши, и тем же способом оценивали ботокс (Aoki, 1999).

В частности, оценивали значения DAS для пальмитоил-13-37 в примере 18. Сорок пять самок мышей BALB/c возрастом 6 недель произвольно делили на 5 групп, обрабатываемых с помощью пальмитоил-13-37 при 0,1 мг/кг, 1 мг/кг, 3 мг/кг, 10 мг/кг, 25 мг/кг, и группу, обрабатываемую солевым раствором (стерилизованным 0,9% NaCl) или 70 мкг/кг бунгаротоксина, в качестве контрольной группы. Затем каждый из пальмитоил-13-37 и солевого раствора или бунгаротоксина при указанной выше концентрации вводили мышам инъекцией по 50 мкл в мышцы бедра задней лапы. После этого каждые сутки наблюдали и регистрировали массу мышей и подошву инъецированной части, и результаты показаны на фиг. 37-39.

Что касается фиг. 37, в результате наблюдения в течение 7 суток после инъекции через 10 минут (сутки 0) после введения каждого образца получавшую введение 1 мг/кг пальмитоил-13-37 группу оценивали как DAS 2; получавшие введение 3 мг/кг, 10 мг/кг и 25 мг/кг пальмитоил-13-37 группы оценивали как DAS 4; и получавшую введение 1 мг/кг пальмитоил-13-37 группу и получавшую введение солевого раствора или бунгаротоксина группу в качестве контроля оценивали как DAS 0. Таким образом, можно видеть, что эффективность (ED50) пальмитоил-13-37 составляла 1 мг/кг в тесте на животных. Кроме того, во время 7-суточного наблюдения значение DAS было снижено и восстановлено в других группах, за исключением поучавшей 25 мг/кг пальмитоил-13-37 группы, но значение DAS4 сохранялось в получавшей 25 мг/кг пальмитоил-13-37 группе.

Что касается фиг. 38, в результате наблюдения получавшей ведение 25 мг/кг пальмитоил-13-37 группы с недельными интервалами до 21-ых суток после введения значение DAS постепенно снижалось через 7 суток в получавшей введение 25 мг/кг пальмитоил-13-37 группе, постепенно снизилось до 1 или меньше и восстановилось через 19 суток после введения пальмитоил-L3-37. Таким образом, можно видеть, что эффективность пальмитоил-13-37 была обратимой.

Наконец, в результате оценивания острой токсичности пальмитоил-13-37 путем измерения массы каждые сутки в течение 7 суток после введения (см. фиг. 39) масса мышей постепенно повышалась в течение 7 суток во всех группах, и токсичность не наблюдали в получавшей введение пальмитоил-13-37 группе, даже при 25 мг/кг, что было самой высокой концентрацией обработки.

--->

ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ

<110> Амикоген

<120> ПЕПТИДЫ, ИНГИБИРУЮЩИЕ АЦЕТИЛХОЛИНОВЫЕ РЕЦЕПТОРЫ, И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ

<130> OPC-19-0027

<150> KR 10-2018-0169425

<151> 2018-12-26

<160> 606

<170> KoPatentIn 3.0

<210> 1

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 1

Lys Ala Lys Lys Ile Arg Gln Arg

1 5

<210> 2

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 2

Lys Lys Arg Lys Gly Ser Ala Lys

1 5

<210> 3

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 3

Arg Gly Lys Arg Gln Leu Gly Arg

1 5

<210> 4

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 4

Lys Leu Lys Lys Phe Pro Val Arg

1 5

<210> 5

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 5

Arg His Lys Lys Ser Pro Trp Lys

1 5

<210> 6

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 6

Arg Pro Arg Arg Thr His Ile Lys

1 5

<210> 7

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 7

Lys His Lys Lys Leu Asn Gln Arg

1 5

<210> 8

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 8

Arg Ala Lys Arg Met Cys Cys Lys

1 5

<210> 9

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 9

Arg Gln Arg Arg Asn Asp Met Lys

1 5

<210> 10

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 10

Lys Arg Lys Lys Asp Trp Trp Arg

1 5

<210> 11

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 11

Arg Ala Arg Lys Asp Ala Phe Lys

1 5

<210> 12

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 12

Lys Trp Arg Arg Glu Gly Phe Lys

1 5

<210> 13

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 13

Arg Phe Arg Arg Gly Val Arg Arg

1 5

<210> 14

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 14

Lys Ala Arg Arg Gln Glu Asp Lys

1 5

<210> 15

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 15

Arg Phe Lys Arg Leu Cys Met Lys

1 5

<210> 16

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 16

Lys Leu Lys Arg Arg Ser Arg Arg

1 5

<210> 17

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 17

Arg Pro Arg Arg Ser Leu Asp Arg

1 5

<210> 18

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 18

Lys His Lys Lys Gln Asn Val Arg

1 5

<210> 19

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 19

Lys Phe Lys Arg Thr Glu Gly Arg

1 5

<210> 20

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 20

Arg Gly Lys Lys Ala Val Arg Lys

1 5

<210> 21

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 21

Lys Phe Lys Lys His Gly Val Lys

1 5

<210> 22

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 22

Lys Thr Lys Lys Ile His Ser Lys

1 5

<210> 23

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 23

Arg Asp Arg Lys Ile His Asp Lys

1 5

<210> 24

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 24

Arg Pro Arg Arg Gly His Gln Lys

1 5

<210> 25

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 25

Lys Thr Lys Lys Leu Tyr Glu Lys

1 5

<210> 26

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 26

Arg Gln Lys Lys Asp Asn Gln Lys

1 5

<210> 27

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 27

Arg Gln Arg Lys Ser Met Gln Arg

1 5

<210> 28

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 28

Arg Gly Arg Arg Trp Phe Val Lys

1 5

<210> 29

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 29

Arg Asn Lys Arg Asp Glu Asn Lys

1 5

<210> 30

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 30

Arg Leu Arg Arg Trp Cys Val Lys

1 5

<210> 31

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 31

Arg Gln Lys Lys Pro Trp Val Lys

1 5

<210> 32

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 32

Arg Trp Lys Arg Ser Glu Gln Arg

1 5

<210> 33

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 33

Arg Leu Lys Arg Ala Pro Gly Arg

1 5

<210> 34

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 34

Lys Met Arg Arg Ala Gln Gly Arg

1 5

<210> 35

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 35

Lys Ile Lys Lys Ala Ala Arg Arg

1 5

<210> 36

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 36

Lys Asn Arg Lys Asn Leu Tyr Arg

1 5

<210> 37

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 37

Lys Cys Lys Lys Met Thr Glu Arg

1 5

<210> 38

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 38

Lys Thr Arg Arg Val Asp Leu Arg

1 5

<210> 39

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 39

Lys Ser Arg Lys Trp Gly Trp Arg

1 5

<210> 40

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 40

Lys Arg Arg Arg Phe Arg Trp Lys

1 5

<210> 41

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 41

Lys Tyr Lys Lys Gln His Thr Lys

1 5

<210> 42

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 42

Arg Gly Arg Lys Lys Cys Gly Lys

1 5

<210> 43

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 43

Lys Leu Arg Lys Gln Lys Leu Arg

1 5

<210> 44

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 44

Arg Asn Arg Lys Ile Pro Leu Lys

1 5

<210> 45

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 45

Arg Leu Arg Arg Arg Tyr Arg Arg

1 5

<210> 46

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 46

Lys Trp Arg Lys Arg Arg Ile Lys

1 5

<210> 47

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 47

Lys Thr Lys Arg Met Leu Ala Lys

1 5

<210> 48

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 48

Lys Glu Lys Arg Ala Val His Lys

1 5

<210> 49

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 49

Arg Val Arg Arg Asp Gly His Arg

1 5

<210> 50

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 50

Arg Ala Lys Lys Cys Tyr His Lys

1 5

<210> 51

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 51

Lys Gly Lys Arg Asp Ser Asn Lys

1 5

<210> 52

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 52

Lys Val Arg Lys Ser Leu Trp Lys

1 5

<210> 53

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 53

Arg Ser Lys Lys Ser Leu Tyr Arg

1 5

<210> 54

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 54

Arg Gly Lys Arg Gly Cys Glu Arg

1 5

<210> 55

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 55

Lys Gln Lys Lys Thr Gly Phe Arg

1 5

<210> 56

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 56

Lys Tyr Arg Arg Asn Leu Val Arg

1 5

<210> 57

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 57

Arg Ile Arg Arg Gly Ser Val Arg

1 5

<210> 58

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 58

Arg Ser Lys Arg Met Asn Gly Lys

1 5

<210> 59

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 59

Arg His Lys Lys Phe Ile Glu Lys

1 5

<210> 60

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 60

Arg Ile Arg Arg Val Ser Gln Arg

1 5

<210> 61

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 61

Arg Pro Lys Lys Trp Met Gln Lys

1 5

<210> 62

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 62

Lys Glu Arg Lys His Glu Ala Lys

1 5

<210> 63

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 63

Lys Glu Arg Lys Ala Ser Ala Lys

1 5

<210> 64

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 64

Lys Met Arg Arg Ile Met Tyr Lys

1 5

<210> 65

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 65

Lys Trp Lys Arg Asn Cys Thr Lys

1 5

<210> 66

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 66

Arg Cys Lys Lys Asn Pro Glu Lys

1 5

<210> 67

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 67

Lys Gln Arg Lys Pro His Gly Arg

1 5

<210> 68

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 68

Lys Ala Lys Arg Gly His Phe Lys

1 5

<210> 69

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 69

Lys Ser Lys Arg His His Glu Lys

1 5

<210> 70

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 70

Lys Ser Arg Lys His Cys Asn Arg

1 5

<210> 71

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 71

Arg Ser Lys Lys Ile Asn Asn Lys

1 5

<210> 72

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 72

Arg Val Arg Arg Ser Trp Ile Arg

1 5

<210> 73

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 73

Lys Ser Arg Arg Ser Ala Gly Lys

1 5

<210> 74

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 74

Lys Met Arg Lys His Asp Val Arg

1 5

<210> 75

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 75

Lys Gly Lys Lys Leu Ser Gln Arg

1 5

<210> 76

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 76

Lys Trp Arg Arg Glu Gln Phe Arg

1 5

<210> 77

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 77

Lys Asp Lys Arg Trp Ala Asn Arg

1 5

<210> 78

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 78

Lys His Lys Arg Thr Ala Gln Arg

1 5

<210> 79

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 79

Lys Pro Lys Arg Glu Met His Lys

1 5

<210> 80

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 80

Arg Trp Lys Lys Asn Ile Asn Lys

1 5

<210> 81

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 81

Lys Trp Lys Lys Met Met Glu Arg

1 5

<210> 82

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 82

Arg Ile Arg Arg Trp Trp Val Arg

1 5

<210> 83

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 83

Arg Ile Arg Arg His Met Tyr Arg

1 5

<210> 84

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 84

Lys Pro Lys Lys Pro Pro Ala Arg

1 5

<210> 85

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 85

Arg Leu Lys Arg Gly Gln Phe Lys

1 5

<210> 86

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 86

Lys Asn Lys Arg Thr Pro Val Lys

1 5

<210> 87

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 87

Lys Trp Arg Arg Ala Phe Gly Arg

1 5

<210> 88

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 88

Lys Asn Lys Lys Cys Val Gly Arg

1 5

<210> 89

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 89

Arg Thr Arg Lys Cys Val Leu Lys

1 5

<210> 90

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 90

Lys Ile Lys Arg Asp Leu Tyr Lys

1 5

<210> 91

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 91

Arg Glu Lys Arg Tyr Met Ala Arg

1 5

<210> 92

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 92

Arg Val Lys Lys Ala Glu Thr Arg

1 5

<210> 93

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 93

Arg Gly Arg Arg Gly Thr Met Arg

1 5

<210> 94

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 94

Arg Thr Lys Arg Trp Gln Leu Lys

1 5

<210> 95

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 95

Arg Leu Arg Lys Ser Leu Gly Lys

1 5

<210> 96

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 96

Arg Pro Lys Arg Asn Trp Ala Lys

1 5

<210> 97

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 97

Lys Asp Arg Lys Val Asn Ser Arg

1 5

<210> 98

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 98

Lys Trp Arg Arg Asn Gly Gln Arg

1 5

<210> 99

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 99

Arg Phe Lys Arg Met Val Trp Arg

1 5

<210> 100

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 100

Lys Glu Arg Lys Gly Ala Val Arg

1 5

<210> 101

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 101

Lys Thr Lys Arg Gly Ser Leu Lys

1 5

<210> 102

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 102

Lys Thr Lys Arg Val Asp Pro Lys

1 5

<210> 103

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 103

Arg Ala Arg Lys Leu His Asn Arg

1 5

<210> 104

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 104

Arg Gly Lys Lys Pro Trp Trp Arg

1 5

<210> 105

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 105

Lys Gly Lys Lys Tyr Tyr Gln Lys

1 5

<210> 106

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 106

Arg Trp Arg Arg Ser Val Ile Lys

1 5

<210> 107

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 107

Arg Gln Lys Lys Asp Phe Leu Lys

1 5

<210> 108

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 108

Arg Gly Arg Lys Pro Ile Trp Lys

1 5

<210> 109

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 109

Lys Pro Arg Arg Pro Asp Thr Arg

1 5

<210> 110

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 110

Lys Val Lys Arg Leu Trp Asn Arg

1 5

<210> 111

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 111

Lys Asp Arg Lys Gly Val Tyr Lys

1 5

<210> 112

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 112

Arg Val Lys Arg Phe Val Pro Lys

1 5

<210> 113

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 113

Lys Pro Lys Arg Asp Gln Ser Arg

1 5

<210> 114

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 114

Lys Asp Lys Lys Gln Trp Gly Arg

1 5

<210> 115

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 115

Arg Phe Arg Lys Met Ile Pro Lys

1 5

<210> 116

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 116

Lys Phe Arg Lys His Val Cys Lys

1 5

<210> 117

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 117

Arg Pro Lys Arg Ser Pro Ser Lys

1 5

<210> 118

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 118

Arg Tyr Lys Lys Val Pro Ala Lys

1 5

<210> 119

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 119

Arg Ser Arg Arg Cys Pro Val Lys

1 5

<210> 120

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 120

Arg Cys Lys Arg Cys Asp Asn Lys

1 5

<210> 121

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 121

Arg Gly Lys Lys Gln Leu Ser Lys

1 5

<210> 122

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 122

Lys Ser Lys Arg Pro Glu Gly Arg

1 5

<210> 123

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 123

Lys Cys Arg Lys Thr Met Gly Arg

1 5

<210> 124

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 124

Arg Asp Arg Lys Asn Pro Val Arg

1 5

<210> 125

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 125

Lys Pro Lys Arg Ser Ala Pro Arg

1 5

<210> 126

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 126

Lys Gly Lys Arg Thr Gly Cys Lys

1 5

<210> 127

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 127

Arg Phe Arg Lys Pro Thr Asp Arg

1 5

<210> 128

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 128

Arg Met Lys Lys Phe His Thr Arg

1 5

<210> 129

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 129

Lys Ile Lys Lys Tyr Tyr Trp Lys

1 5

<210> 130

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 130

Arg Ile Lys Arg Asn Asn Cys Lys

1 5

<210> 131

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 131

Arg His Lys Arg Met Leu Trp Arg

1 5

<210> 132

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 132

Lys Val Arg Arg Val Phe Leu Lys

1 5

<210> 133

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 133

Lys Asp Lys Arg Pro Glu Cys Lys

1 5

<210> 134

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 134

Lys Thr Arg Arg Ser Ala Cys Arg

1 5

<210> 135

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 135

Lys Phe Arg Lys Gly Pro Tyr Arg

1 5

<210> 136

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 136

Lys Phe Lys Lys Ser Ala Pro Arg

1 5

<210> 137

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 137

Lys Pro Arg Lys Ile Gln Gly Arg

1 5

<210> 138

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 138

Lys Met Arg Lys Gly Trp Asp Lys

1 5

<210> 139

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 139

Lys Phe Arg Arg Gln Ser Thr Arg

1 5

<210> 140

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 140

Lys Asn Arg Arg Ala Asp Cys Arg

1 5

<210> 141

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 141

Lys Asn Lys Arg Trp Val Phe Lys

1 5

<210> 142

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 142

Arg Cys Arg Lys Asp Thr Ala Arg

1 5

<210> 143

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 143

Lys Ala Arg Arg Val Gly Thr Lys

1 5

<210> 144

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 144

Lys Val Lys Lys Ile Tyr Tyr Arg

1 5

<210> 145

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 145

Lys Ala Lys Arg Asp Tyr Leu Arg

1 5

<210> 146

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 146

Lys Val Lys Arg Leu Pro Tyr Arg

1 5

<210> 147

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 147

Arg His Arg Arg Ala Asn Phe Arg

1 5

<210> 148

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 148

Lys Pro Lys Lys Gly Gly Trp Lys

1 5

<210> 149

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 149

Lys Glu Lys Arg Leu Tyr Ala Arg

1 5

<210> 150

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 150

Arg Glu Lys Lys Gln Glu Val Lys

1 5

<210> 151

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 151

Lys Ser Arg Arg Ala Val Phe Arg

1 5

<210> 152

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 152

Arg His Arg Lys Tyr Val Asp Lys

1 5

<210> 153

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 153

Arg His Lys Arg Trp Ser Gly Arg

1 5

<210> 154

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 154

Arg Asp Arg Lys Phe Val Gln Lys

1 5

<210> 155

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 155

Arg Tyr Arg Arg Trp Phe Tyr Arg

1 5

<210> 156

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 156

Arg Gln Arg Arg Met Thr Pro Arg

1 5

<210> 157

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 157

Arg Asn Lys Arg Met Asp Gly Lys

1 5

<210> 158

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 158

Arg Pro Lys Lys His Gln Glu Arg

1 5

<210> 159

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 159

Lys Lys Arg Lys Ser Leu Leu Arg

1 5

<210> 160

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 160

Lys Ile Lys Arg Asn Val Phe Lys

1 5

<210> 161

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 161

Lys Tyr Lys Arg Glu Glu Tyr Arg

1 5

<210> 162

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 162

Lys Ile Arg Arg Val Thr Asn Lys

1 5

<210> 163

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 163

Lys Val Lys Arg Val Trp Gly Arg

1 5

<210> 164

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 164

Arg Ile Lys Arg Asp Tyr Cys Lys

1 5

<210> 165

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 165

Arg Ile Arg Arg Ala His Asp Arg

1 5

<210> 166

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 166

Arg Ala Arg Lys Glu Ser His Lys

1 5

<210> 167

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 167

Arg Tyr Lys Lys Gln Gln Tyr Lys

1 5

<210> 168

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 168

Lys Ile Lys Lys Leu Ser Gln Lys

1 5

<210> 169

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 169

Lys Leu Lys Arg Ala Met Leu Lys

1 5

<210> 170

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 170

Lys Ala Arg Lys Asn Ser Ile Arg

1 5

<210> 171

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 171

Lys Glu Arg Lys Leu Trp Trp Lys

1 5

<210> 172

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 172

Lys Thr Arg Lys Gln Asp His Arg

1 5

<210> 173

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 173

Arg Cys Lys Arg Phe Val Gly Lys

1 5

<210> 174

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 174

Lys Glu Lys Lys Leu Val Trp Lys

1 5

<210> 175

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 175

Lys Ala Arg Arg Asn Ser Leu Lys

1 5

<210> 176

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 176

Lys Met Arg Arg Val Ala Pro Arg

1 5

<210> 177

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 177

Arg Ala Lys Lys Ile Met Phe Arg

1 5

<210> 178

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 178

Lys Thr Lys Lys Ala Ala Glu Arg

1 5

<210> 179

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 179

Arg Gly Lys Arg His Trp His Arg

1 5

<210> 180

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 180

Arg Thr Lys Lys Glu Asn Val Lys

1 5

<210> 181

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 181

Arg Glu Lys Lys Tyr Ala Tyr Lys

1 5

<210> 182

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 182

Lys Trp Arg Arg Glu Leu Pro Arg

1 5

<210> 183

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 183

Lys Ser Arg Arg Met Trp Gly Arg

1 5

<210> 184

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 184

Lys Cys Lys Lys Asp Asn Asp Lys

1 5

<210> 185

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 185

Lys Asp Lys Lys Met Pro Gln Arg

1 5

<210> 186

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 186

Arg His Lys Arg Gln Gln Asp Lys

1 5

<210> 187

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 187

Arg Leu Lys Lys His Cys Gly Lys

1 5

<210> 188

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 188

Lys Ala Arg Lys Gln Glu Val Arg

1 5

<210> 189

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 189

Lys Met Arg Lys Phe Tyr Ser Lys

1 5

<210> 190

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 190

Lys Met Arg Arg Trp Trp Leu Lys

1 5

<210> 191

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 191

Lys Gln Lys Arg Gln Trp Ala Arg

1 5

<210> 192

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 192

Arg Ser Arg Arg Gly Ile Gly Lys

1 5

<210> 193

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 193

Lys Asp Lys Lys Thr Pro Cys Lys

1 5

<210> 194

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 194

Arg Ile Arg Lys Ile Thr Trp Arg

1 5

<210> 195

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 195

Arg His Lys Arg Trp Glu Val Arg

1 5

<210> 196

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 196

Arg Phe Arg Arg Asn Phe His Lys

1 5

<210> 197

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 197

Lys Trp Lys Arg Phe Ser Gln Arg

1 5

<210> 198

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 198

Lys Tyr Lys Lys Ser Phe Thr Lys

1 5

<210> 199

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 199

Lys Thr Arg Lys Ile Val Met Lys

1 5

<210> 200

<211> 8

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 200

Arg Thr Lys Lys Ala Tyr Val Lys

1 5

<210> 201

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 201

Glu Asp Tyr Lys Tyr Arg Arg Gln Asn Tyr Lys

1 5 10

<210> 202

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 202

Gly Ile Trp Lys Phe Arg Arg Asn Gln Cys Lys

1 5 10

<210> 203

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 203

Ser Pro Val Arg Trp Lys Arg Leu Cys Leu Arg

1 5 10

<210> 204

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 204

Glu Cys Tyr Arg Asn Arg Lys Ala Tyr Cys Arg

1 5 10

<210> 205

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 205

Thr Gln Gln Arg Leu Lys Arg Val Met Glu Lys

1 5 10

<210> 206

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 206

Pro Glu Leu Lys Cys Lys Arg Met Ile Gly Arg

1 5 10

<210> 207

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 207

Trp Gln Met Lys Thr Lys Lys Glu Ile Trp Lys

1 5 10

<210> 208

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 208

Phe Gly His Arg Gly Lys Lys Glu Trp Ala Arg

1 5 10

<210> 209

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 209

Ala Thr Cys Lys Pro Lys Arg Pro Trp Tyr Lys

1 5 10

<210> 210

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 210

Thr Ser Gln Lys Val Arg Lys Met Glu Ala Lys

1 5 10

<210> 211

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 211

Gly Ile Pro Lys Tyr Arg Arg Gly Cys Ser Arg

1 5 10

<210> 212

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 212

Ala Tyr Ala Lys Ala Arg Arg Trp Gly Gln Lys

1 5 10

<210> 213

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 213

Gly Gly Leu Lys Ser Lys Arg Leu Thr Thr Arg

1 5 10

<210> 214

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 214

Gly Met Trp Lys Val Arg Lys Thr Val Phe Arg

1 5 10

<210> 215

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 215

His Thr Thr Arg Gly Lys Arg Cys Asp Pro Arg

1 5 10

<210> 216

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 216

Val Asp Val Arg Asn Lys Lys Ser Asn Asn Arg

1 5 10

<210> 217

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 217

Gly Leu Asn Arg Trp Arg Arg Cys His His Lys

1 5 10

<210> 218

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 218

Leu Gln Ser Arg Ser Lys Lys Tyr Ser Val Lys

1 5 10

<210> 219

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 219

Gly Trp Asn Arg Ala Lys Arg Glu Glu Ser Lys

1 5 10

<210> 220

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 220

Ser Trp Gln Lys Cys Lys Lys Ala Glu Val Arg

1 5 10

<210> 221

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 221

Met Val Met Lys Trp Lys Arg Trp Asn Gln Arg

1 5 10

<210> 222

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 222

Met Met Met Arg His Lys Arg Cys Gln Tyr Arg

1 5 10

<210> 223

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 223

Gln Thr Tyr Arg Leu Lys Lys Pro Leu Gln Lys

1 5 10

<210> 224

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 224

Ser Phe Trp Arg Glu Arg Lys Asn Gly Phe Arg

1 5 10

<210> 225

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 225

Arg Leu Glu Arg Pro Arg Arg Glu Leu Thr Lys

1 5 10

<210> 226

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 226

Ala Pro Trp Arg Leu Lys Arg Ala Pro Gln Arg

1 5 10

<210> 227

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 227

Gln Gly Glu Lys Tyr Arg Arg Thr Glu Ser Lys

1 5 10

<210> 228

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 228

Cys Ile Trp Lys Ser Lys Arg Ser Pro Ala Lys

1 5 10

<210> 229

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 229

Ala Ile Leu Lys Gly Lys Arg Ile Pro Asn Lys

1 5 10

<210> 230

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 230

Pro Thr Leu Lys Trp Arg Lys Pro Val Leu Arg

1 5 10

<210> 231

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 231

Asn Asn Ser Arg Ser Lys Arg Phe Met Asn Arg

1 5 10

<210> 232

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 232

Leu Tyr Met Arg Cys Lys Lys Gln Ala Pro Arg

1 5 10

<210> 233

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 233

Ile Asn Tyr Arg Cys Arg Lys Trp Val Asp Lys

1 5 10

<210> 234

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 234

Val Met Asp Arg Asp Arg Lys Trp Trp Trp Arg

1 5 10

<210> 235

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 235

Asn Phe Thr Lys Leu Arg Lys Pro Gly Pro Arg

1 5 10

<210> 236

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 236

Phe Ile Pro Lys Met Arg Lys Cys Ser Pro Arg

1 5 10

<210> 237

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 237

Thr Leu Trp Lys Val Arg Lys Ala Tyr Ser Arg

1 5 10

<210> 238

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 238

Glu Ser Glu Lys Ile Lys Arg Leu Ser Thr Arg

1 5 10

<210> 239

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 239

Leu Met Thr Lys Asn Arg Arg Asn Ser Phe Arg

1 5 10

<210> 240

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 240

Pro Glu Val Lys Val Arg Arg His Ser Met Arg

1 5 10

<210> 241

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 241

Ala Glu Val Lys Asp Lys Lys Ala Tyr Tyr Lys

1 5 10

<210> 242

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 242

Tyr Tyr Ala Lys Ser Lys Lys Tyr Met Val Arg

1 5 10

<210> 243

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 243

Leu Met Asp Arg Thr Arg Arg Asp Met Tyr Lys

1 5 10

<210> 244

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 244

Asn Met Gly Arg His Lys Arg Pro Phe Leu Lys

1 5 10

<210> 245

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 245

Trp Ile Tyr Arg Gly Arg Lys Asp Val Ala Lys

1 5 10

<210> 246

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 246

Cys Tyr Trp Lys Ala Lys Arg Tyr Pro Met Arg

1 5 10

<210> 247

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 247

Ile Glu Asp Lys Gly Arg Arg Ile Asn Pro Arg

1 5 10

<210> 248

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 248

Val Ser Thr Lys Ile Lys Lys Glu Pro Gln Arg

1 5 10

<210> 249

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 249

Tyr Pro Phe Lys Ala Lys Arg Pro Ala Glu Lys

1 5 10

<210> 250

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 250

Ser Ala Asp Arg Asn Lys Arg His Met Thr Arg

1 5 10

<210> 251

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 251

Ser Leu Tyr Arg Gln Lys Arg His Asp Tyr Lys

1 5 10

<210> 252

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 252

Leu Pro Ser Arg Pro Lys Lys Pro Val Pro Lys

1 5 10

<210> 253

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 253

Pro Ala Trp Arg Cys Lys Arg Cys Gln Pro Lys

1 5 10

<210> 254

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 254

His His Trp Arg Phe Lys Arg Glu Met Pro Arg

1 5 10

<210> 255

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 255

Pro Ala Cys Arg Ser Lys Arg Asp Trp Gln Lys

1 5 10

<210> 256

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 256

Phe Ile Cys Lys Ser Arg Lys Phe Tyr Gly Lys

1 5 10

<210> 257

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 257

Leu Glu His Lys Glu Arg Lys Asp Asp Phe Arg

1 5 10

<210> 258

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 258

Ala Asn Pro Lys Asn Arg Lys Asp Asn Leu Arg

1 5 10

<210> 259

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 259

Phe Gly Val Lys Tyr Arg Arg Val Ile Cys Arg

1 5 10

<210> 260

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 260

His Ala Asp Lys Phe Arg Arg Phe Asn Met Arg

1 5 10

<210> 261

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 261

Pro Thr Ile Arg Val Arg Lys Ser Asp Asp Arg

1 5 10

<210> 262

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 262

Asn Leu His Lys Pro Lys Arg Asp Leu Pro Lys

1 5 10

<210> 263

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 263

Ile Asp Gly Lys Trp Arg Lys Ile Cys Thr Arg

1 5 10

<210> 264

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 264

Ser Pro Phe Arg Ala Lys Arg Gln Asp Val Arg

1 5 10

<210> 265

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 265

Pro Leu Trp Lys Thr Arg Lys Ile Glu Pro Arg

1 5 10

<210> 266

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 266

Pro Asn Tyr Lys Trp Arg Lys Ser Arg Arg Arg

1 5 10

<210> 267

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 267

Lys Thr Gly Arg Ser Lys Arg His Arg Trp Arg

1 5 10

<210> 268

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 268

Gly Pro Asp Lys Ser Arg Arg Asn Leu His Arg

1 5 10

<210> 269

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 269

Trp Cys Cys Lys Thr Lys Arg Ala Val Met Lys

1 5 10

<210> 270

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 270

Gln Leu Leu Lys Met Arg Lys Ala Leu Ser Arg

1 5 10

<210> 271

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 271

Pro Tyr Leu Arg Ser Lys Arg Phe Pro Pro Arg

1 5 10

<210> 272

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 272

Ala Pro His Lys Trp Arg Lys Gln Glu Gln Arg

1 5 10

<210> 273

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 273

Pro Pro Phe Lys Phe Arg Lys Pro Leu Gly Arg

1 5 10

<210> 274

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 274

Cys Ile Met Arg Val Lys Arg Met Trp Trp Lys

1 5 10

<210> 275

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 275

Tyr Ile Leu Arg Asp Lys Lys Val Pro Leu Lys

1 5 10

<210> 276

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 276

Pro Trp Val Arg Ile Arg Lys Met Ala Ser Arg

1 5 10

<210> 277

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 277

Val Ala Asp Arg Gln Lys Lys Thr Ala Pro Lys

1 5 10

<210> 278

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 278

His His Asn Arg Met Lys Lys Gln Tyr His Arg

1 5 10

<210> 279

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 279

Glu Gly Ala Lys Tyr Arg Arg Asp Gly Trp Arg

1 5 10

<210> 280

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 280

Phe Trp Asp Arg Val Lys Arg Asn Pro Ser Lys

1 5 10

<210> 281

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 281

Thr Met Trp Arg Gln Arg Lys Met Ser Cys Lys

1 5 10

<210> 282

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 282

Pro Asp Thr Arg Trp Lys Arg Val Leu Phe Lys

1 5 10

<210> 283

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 283

His Gln Gln Lys Cys Lys Lys Thr Thr Thr Lys

1 5 10

<210> 284

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 284

Pro Trp His Lys Gly Lys Arg Asp Phe Asp Arg

1 5 10

<210> 285

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 285

Val Phe Val Lys Trp Arg Arg Gln Met Met Arg

1 5 10

<210> 286

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 286

Ser Gln Trp Lys Ile Arg Lys Arg Leu Ile Arg

1 5 10

<210> 287

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 287

Glu Trp His Lys Val Arg Arg Val Tyr Ala Lys

1 5 10

<210> 288

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 288

Asn Ala Met Arg Thr Lys Arg Met Ser Phe Lys

1 5 10

<210> 289

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 289

Pro Pro Phe Lys Phe Arg Lys Pro Leu Gly Arg

1 5 10

<210> 290

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 290

Thr Ser Val Lys Lys Arg Lys Gln Arg Leu Arg

1 5 10

<210> 291

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 291

Pro Ile Asp Lys Phe Lys Arg Gly Met Val Arg

1 5 10

<210> 292

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 292

Phe Val Gly Arg Trp Lys Arg Glu Tyr Ala Lys

1 5 10

<210> 293

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 293

Phe Asn Pro Lys Met Arg Lys Val Cys Leu Arg

1 5 10

<210> 294

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 294

Asn Pro Gly Lys Thr Lys Arg Trp Leu Gln Arg

1 5 10

<210> 295

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 295

Ile Met Asp Lys Arg Arg Lys Pro Gly Cys Arg

1 5 10

<210> 296

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 296

Ile Ser Asp Lys Ala Lys Arg Gln His Phe Lys

1 5 10

<210> 297

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 297

Asp Val Asn Lys Tyr Arg Lys His Ser His Lys

1 5 10

<210> 298

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 298

Leu Met Leu Arg Gly Lys Arg Leu Thr Thr Lys

1 5 10

<210> 299

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 299

Cys Ser Leu Arg Ala Arg Lys Glu Glu Trp Arg

1 5 10

<210> 300

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 300

Met Asn Tyr Arg Cys Lys Arg Val Gln Glu Arg

1 5 10

<210> 301

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 301

Asn Gly Val Arg Glu Arg Lys Trp Gln Ser Lys

1 5 10

<210> 302

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 302

Tyr Thr Ser Arg Cys Lys Lys Gln Pro Arg Lys

1 5 10

<210> 303

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 303

Gln Tyr Asn Lys Gly Arg Lys Ile His Val Arg

1 5 10

<210> 304

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 304

Pro Glu Asp Arg Gln Arg Lys Thr Trp Phe Lys

1 5 10

<210> 305

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 305

Ile Glu Met Lys Pro Arg Lys Phe Gly Val Lys

1 5 10

<210> 306

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 306

Gln Arg Trp Lys Trp Arg Lys Ser Leu Ala Arg

1 5 10

<210> 307

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 307

Val Lys His Lys Glu Arg Lys Cys Gln Arg Arg

1 5 10

<210> 308

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 308

Gln Gln Asp Arg Pro Lys Arg Asp Ile Pro Lys

1 5 10

<210> 309

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 309

Tyr Pro Thr Lys Gly Lys Arg Cys Met Ile Arg

1 5 10

<210> 310

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 310

Arg Tyr Ala Lys His Arg Lys Arg Gln Thr Arg

1 5 10

<210> 311

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 311

Gly Tyr Phe Arg Pro Arg Lys Glu Thr Cys Lys

1 5 10

<210> 312

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 312

Cys Phe Phe Lys Met Arg Arg Cys Asn Thr Lys

1 5 10

<210> 313

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 313

Gln Asn Asp Lys Asp Arg Lys Leu Ser His Arg

1 5 10

<210> 314

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 314

Gln Val Thr Lys Ser Lys Arg Val Ala Phe Lys

1 5 10

<210> 315

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 315

Val Arg Ala Lys His Arg Lys Ser Ser Leu Arg

1 5 10

<210> 316

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 316

Ser His Ser Arg Gln Arg Lys Thr Pro Leu Arg

1 5 10

<210> 317

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 317

Asp Asn Gly Lys Ile Arg Arg Cys Leu Gly Lys

1 5 10

<210> 318

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 318

Phe Leu Arg Arg Leu Lys Lys Val His Trp Lys

1 5 10

<210> 319

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 319

Phe Cys Arg Arg Ser Lys Lys Ile Gly Arg Arg

1 5 10

<210> 320

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 320

Pro Ala Ala Arg Thr Lys Arg Met Tyr Gly Arg

1 5 10

<210> 321

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 321

His Glu Thr Lys Pro Lys Lys Asp Gly Leu Arg

1 5 10

<210> 322

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 322

Met Gly Asp Arg Pro Arg Lys Trp Asp Ser Arg

1 5 10

<210> 323

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 323

His Asp Thr Lys Cys Lys Lys Met Tyr Ala Lys

1 5 10

<210> 324

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 324

Asn Val Val Arg Gly Arg Arg Leu Glu Cys Arg

1 5 10

<210> 325

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 325

Pro Ala Asp Lys Gly Arg Arg Glu Val Met Lys

1 5 10

<210> 326

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 326

Ala Met Met Lys Tyr Lys Lys Glu Phe Pro Lys

1 5 10

<210> 327

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 327

Tyr Ile Ile Arg Trp Lys Arg Gln Met Thr Arg

1 5 10

<210> 328

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 328

Ser Pro Trp Arg Ile Arg Arg Gln Asn Ile Arg

1 5 10

<210> 329

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 329

Thr Cys Ile Lys Tyr Arg Arg Ala His Thr Lys

1 5 10

<210> 330

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 330

Gly Tyr Asp Arg Ala Arg Lys Gly Thr Leu Arg

1 5 10

<210> 331

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 331

Met Thr Leu Lys His Arg Arg Val Tyr Ile Lys

1 5 10

<210> 332

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 332

Leu Phe Thr Arg Ile Lys Arg Leu Val Cys Lys

1 5 10

<210> 333

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 333

Asp Phe Ser Arg Asp Arg Arg Cys Leu Ser Lys

1 5 10

<210> 334

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 334

Val Trp Asn Lys Val Lys Arg Trp Leu Glu Arg

1 5 10

<210> 335

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 335

Phe Pro Gly Lys Asn Arg Lys Tyr Cys Ser Arg

1 5 10

<210> 336

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 336

Tyr Thr Ser Lys Asn Lys Arg Gly Cys Pro Arg

1 5 10

<210> 337

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 337

Cys Ala Cys Lys Gln Arg Arg Ala Thr Ser Arg

1 5 10

<210> 338

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 338

Ile Met Glu Arg Gln Arg Lys Ser Gln His Arg

1 5 10

<210> 339

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 339

Ser Val Leu Arg Cys Arg Lys Cys Ser Met Lys

1 5 10

<210> 340

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 340

Tyr Pro Gln Lys Leu Arg Arg Thr Ala Leu Lys

1 5 10

<210> 341

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 341

Ser Ser His Lys Gly Lys Arg Ala Gln Ser Lys

1 5 10

<210> 342

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 342

Asp Asn Pro Arg Phe Arg Lys Thr Ile Leu Lys

1 5 10

<210> 343

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 343

Ala Ile Ile Lys Phe Arg Lys Val Gln Trp Lys

1 5 10

<210> 344

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 344

Pro Tyr Thr Arg Cys Arg Lys Glu Ile Cys Lys

1 5 10

<210> 345

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 345

Met Asn Glu Lys Pro Lys Lys Asn Asp Gln Lys

1 5 10

<210> 346

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 346

Leu Ile Gly Lys Phe Lys Lys Pro Phe Tyr Arg

1 5 10

<210> 347

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 347

Thr Trp Cys Lys His Lys Lys Leu Asp Met Lys

1 5 10

<210> 348

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 348

Asp Ser Asn Lys Val Arg Lys Cys Ser Ser Lys

1 5 10

<210> 349

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 349

Leu Pro Met Lys Gln Arg Lys Cys Glu Phe Arg

1 5 10

<210> 350

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 350

Glu Asp Val Arg Val Lys Arg Gln Thr Cys Arg

1 5 10

<210> 351

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 351

Thr Gln Cys Lys Asp Arg Arg Val Ser Asp Arg

1 5 10

<210> 352

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 352

Ile Ala Leu Lys Pro Lys Arg Val Trp Leu Lys

1 5 10

<210> 353

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 353

Gly His Gln Arg Gly Lys Arg Glu Gly Ser Arg

1 5 10

<210> 354

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 354

Asn Pro Phe Lys Tyr Lys Lys Ile Cys Pro Lys

1 5 10

<210> 355

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 355

Asn Glu Ala Arg Ile Lys Lys Cys Asp Val Lys

1 5 10

<210> 356

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 356

Tyr Gly Leu Arg Met Arg Lys Trp Tyr Met Lys

1 5 10

<210> 357

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 357

Asn Phe Tyr Lys Cys Arg Lys Leu Gln Cys Lys

1 5 10

<210> 358

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 358

Met Met Thr Lys Tyr Lys Lys Thr Cys Cys Lys

1 5 10

<210> 359

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 359

Cys Asn Gln Lys Thr Lys Lys Ile Ala Glu Lys

1 5 10

<210> 360

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 360

Ala Asp Ile Arg Met Lys Lys Trp Tyr Pro Lys

1 5 10

<210> 361

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 361

Ala Trp Phe Arg Val Lys Arg Ser Asn Cys Arg

1 5 10

<210> 362

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 362

Asn Cys Asp Arg Thr Arg Lys His Trp Ala Arg

1 5 10

<210> 363

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 363

Pro His Ala Arg Thr Arg Lys Asn Ile Thr Lys

1 5 10

<210> 364

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 364

Val Pro Thr Lys Met Lys Lys Tyr Glu Thr Lys

1 5 10

<210> 365

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 365

Ala Tyr Pro Lys Phe Arg Lys Thr Phe Asn Arg

1 5 10

<210> 366

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 366

Gln Gln Leu Arg Leu Arg Lys Leu Cys Gly Lys

1 5 10

<210> 367

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 367

Met Phe Met Arg Asn Lys Lys Leu Ala Trp Arg

1 5 10

<210> 368

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 368

Gly Gly Ala Lys Asn Lys Lys Val Val Ser Arg

1 5 10

<210> 369

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 369

His Asp Pro Arg His Lys Lys Thr Pro Thr Lys

1 5 10

<210> 370

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 370

Gln Val His Arg Asn Lys Arg Tyr Thr Asp Arg

1 5 10

<210> 371

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 371

Tyr Gly Thr Arg Pro Lys Lys Tyr Val Ser Lys

1 5 10

<210> 372

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 372

Cys Thr Trp Arg Gly Arg Arg Pro His Asp Lys

1 5 10

<210> 373

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 373

Ser Trp Ala Lys Ala Arg Lys Leu Val His Arg

1 5 10

<210> 374

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 374

Pro Leu Phe Lys Ser Arg Arg Ala Tyr Val Arg

1 5 10

<210> 375

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 375

Cys Val Met Arg Cys Arg Arg Ser Glu Asp Lys

1 5 10

<210> 376

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 376

Trp Trp His Lys His Arg Arg Ala Gln Ser Lys

1 5 10

<210> 377

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 377

Leu Asn Ser Lys Pro Arg Arg Val Glu Phe Lys

1 5 10

<210> 378

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 378

Val Pro Tyr Arg His Arg Arg Met Gln Phe Lys

1 5 10

<210> 379

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 379

Gly Ile Ala Lys Ser Lys Arg Asn Ala Gly Arg

1 5 10

<210> 380

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 380

Asp Pro Glu Lys Trp Arg Lys Phe Tyr Asp Arg

1 5 10

<210> 381

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 381

Pro Gly Ala Arg Cys Arg Lys Gln Asp Val Lys

1 5 10

<210> 382

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 382

His Glu Gln Arg Pro Lys Lys Gly Gln Gln Lys

1 5 10

<210> 383

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 383

Thr Cys Asp Arg Ala Arg Lys Glu Ser Phe Arg

1 5 10

<210> 384

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 384

Met His Gln Arg Glu Arg Arg Asn Phe Val Lys

1 5 10

<210> 385

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 385

Phe Ile Thr Arg Phe Arg Lys Met Gly Glu Lys

1 5 10

<210> 386

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 386

Pro Asn Trp Lys Val Arg Arg Phe Gly Asp Lys

1 5 10

<210> 387

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 387

Thr Ala Ala Lys Trp Lys Lys Ile Ile Met Lys

1 5 10

<210> 388

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 388

Cys Leu Trp Arg Leu Arg Lys Asp Asn Gly Arg

1 5 10

<210> 389

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 389

Ala His Ile Lys Ser Arg Lys Val Trp Ser Arg

1 5 10

<210> 390

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 390

Asn Leu Val Lys Ser Lys Lys Val Glu Glu Lys

1 5 10

<210> 391

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 391

Pro Asp Ser Arg Leu Lys Lys His Glu Ala Lys

1 5 10

<210> 392

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 392

Glu His Val Lys Leu Lys Arg Leu Asp Phe Arg

1 5 10

<210> 393

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 393

Pro Ala Leu Arg Met Arg Arg Trp Cys Gln Lys

1 5 10

<210> 394

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 394

His Leu Glu Lys His Arg Arg Cys Glu Phe Lys

1 5 10

<210> 395

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 395

Cys Gln Ala Lys Thr Arg Lys Ala Glu Asp Arg

1 5 10

<210> 396

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 396

Gln Asn Met Arg Met Lys Arg Phe Ile Gln Arg

1 5 10

<210> 397

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 397

Cys Pro Tyr Arg Ile Arg Arg Gly Pro Gly Lys

1 5 10

<210> 398

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 398

Asp Ile Tyr Lys Gly Lys Arg Thr Leu Val Lys

1 5 10

<210> 399

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 399

Glu Ile Cys Lys Asn Arg Lys Pro Ala Asn Arg

1 5 10

<210> 400

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 400

Gln Gly Met Lys Leu Lys Arg Ile Trp Ser Lys

1 5 10

<210> 401

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 401

Ala Leu Gly Arg Thr Lys Arg Leu His Met Arg Val His Val

1 5 10

<210> 402

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 402

Ser Phe Tyr Lys Glu Arg Lys Cys Gln Phe Arg Ser Gly Leu

1 5 10

<210> 403

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 403

Ser Gly Val Arg Tyr Arg Lys Trp Trp Ile Arg Ser Val Val

1 5 10

<210> 404

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 404

Met Pro Gln Lys Leu Lys Lys Leu Asp Ile Arg Asn His Asn

1 5 10

<210> 405

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 405

Asn Glu Asp Arg Gly Lys Arg Pro His Ile Arg Val Leu Gly

1 5 10

<210> 406

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 406

Glu Phe Val Lys Leu Arg Lys Ala Arg Leu Arg Gly Pro Gln

1 5 10

<210> 407

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 407

Glu Gly Asp Lys Phe Arg Arg His Asp Ile Lys Tyr Asn Phe

1 5 10

<210> 408

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 408

Pro Ile Cys Arg Trp Lys Arg Ala Pro Phe Lys Trp Tyr Phe

1 5 10

<210> 409

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 409

Asn Cys Asn Arg Phe Arg Arg Thr Ile Val Arg His Cys His

1 5 10

<210> 410

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 410

Ala His Gly Lys Asp Arg Arg Tyr Val Glu Lys Leu Glu Val

1 5 10

<210> 411

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 411

Phe Met Gln Lys Cys Lys Lys Trp Trp Asp Arg Ala Val Phe

1 5 10

<210> 412

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 412

Asp Pro Pro Lys Lys Arg Lys Ser Leu Leu Arg Arg Val Ser

1 5 10

<210> 413

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 413

Tyr Cys Thr Arg Ile Arg Arg Glu Gly Met Lys Gly Ser Glu

1 5 10

<210> 414

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 414

Phe Pro Gly Lys Ser Lys Lys Gln Trp His Arg Leu Trp Pro

1 5 10

<210> 415

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 415

Tyr Glu Pro Arg Phe Lys Arg Pro Tyr Gly Lys Trp Cys His

1 5 10

<210> 416

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 416

Asp Tyr Leu Arg Ser Arg Lys Met Glu Glu Arg Phe Gln Glu

1 5 10

<210> 417

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 417

Val Gly Pro Lys Phe Arg Lys Asn His Arg Arg Gln Asn Arg

1 5 10

<210> 418

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 418

Glu Tyr Gln Lys Cys Lys Lys Pro Ser Phe Arg Leu Thr Met

1 5 10

<210> 419

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 419

Tyr Met Lys Lys Lys Arg Lys Ser Leu Leu Arg Thr Ser Leu

1 5 10

<210> 420

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 420

Cys Cys Phe Lys Leu Lys Lys Ala Tyr Asn Lys Gly Pro Phe

1 5 10

<210> 421

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 421

Asn Pro Met Lys Leu Arg Lys Ala Glu Thr Lys His Asn Val

1 5 10

<210> 422

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 422

His Ser Leu Lys Thr Arg Lys Ser Ala Phe Lys Ser Asn Thr

1 5 10

<210> 423

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 423

Gln Tyr His Lys Val Arg Lys Leu Trp Phe Arg Val Glu Pro

1 5 10

<210> 424

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 424

Phe Val Arg Lys Lys Arg Lys Ser Leu Leu Arg Asp Thr Arg

1 5 10

<210> 425

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 425

Cys Phe Gln Arg Lys Arg Lys Ser Leu Leu Arg Val Leu Arg

1 5 10

<210> 426

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 426

Val Pro Met Lys Tyr Arg Arg Cys Gly Asn Arg Gln Ser Asn

1 5 10

<210> 427

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 427

Arg Ala Arg Lys Lys Arg Lys Ser Leu Leu Arg Arg Gln Val

1 5 10

<210> 428

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 428

Pro Asn Gly Lys Val Arg Lys Arg Ile Arg Arg Arg Tyr Phe

1 5 10

<210> 429

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 429

Cys Ala Ser Lys Pro Arg Arg Thr Tyr Leu Arg Ala Ala Asn

1 5 10

<210> 430

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 430

Trp Ala His Lys Cys Lys Lys Pro Gly Gln Arg Ile Pro Pro

1 5 10

<210> 431

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 431

Leu Ser Asp Lys Lys Arg Lys Ser Leu Leu Arg Tyr Asp Tyr

1 5 10

<210> 432

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 432

Cys Ala Thr Arg Gly Lys Lys Val Phe Ser Lys Arg Thr Met

1 5 10

<210> 433

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 433

Leu Arg Gln Arg Ser Lys Arg Val Leu Glu Lys Leu Arg Pro

1 5 10

<210> 434

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 434

Leu Gly Trp Lys Lys Arg Lys Ser Leu Leu Arg Arg His Val

1 5 10

<210> 435

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 435

Leu Gln Cys Lys Tyr Arg Arg Gly Ser Asp Lys Gln Pro Gln

1 5 10

<210> 436

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 436

Ala Phe Ser Arg Ile Lys Arg Gly Val Leu Lys Leu Leu Ser

1 5 10

<210> 437

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 437

Ser Asn Val Lys Arg Lys Arg Gly Arg Cys Lys Pro Tyr Arg

1 5 10

<210> 438

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 438

Thr Val Val Lys Ser Arg Lys Cys Ser Val Arg Tyr Asn Trp

1 5 10

<210> 439

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 439

Asp Asp Val Lys Gln Arg Lys Lys His Pro Arg Val Gln Thr

1 5 10

<210> 440

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 440

Ala Ser Pro Lys Gly Arg Arg Pro Thr Phe Arg Pro Gln His

1 5 10

<210> 441

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 441

Gly Trp Leu Lys Ala Lys Arg Phe Pro Ser Arg Pro Pro Thr

1 5 10

<210> 442

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 442

Glu Thr Asn Arg Thr Arg Lys Gln Cys Tyr Lys Thr Thr Phe

1 5 10

<210> 443

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 443

Phe Thr His Lys Asn Arg Arg Asp Ser Leu Arg Val Trp Met

1 5 10

<210> 444

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 444

Pro Pro Phe Arg Leu Arg Lys Pro Leu Trp Arg Pro Gln Arg

1 5 10

<210> 445

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 445

Pro Gly Asn Arg Met Lys Lys Tyr Gln Asn Arg Val His Gly

1 5 10

<210> 446

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 446

Ser Ala His Lys Lys Arg Lys Gln Thr Leu Arg Cys Ser Glu

1 5 10

<210> 447

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 447

Leu Tyr Glu Lys Tyr Lys Lys His Asn Asn Arg Glu Asp Asp

1 5 10

<210> 448

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 448

Pro His Cys Arg Gln Lys Lys Phe Trp Ile Arg Cys Gly Thr

1 5 10

<210> 449

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 449

Val Ala Phe Lys Thr Arg Arg Arg Val Gln Arg Gln Ser Gly

1 5 10

<210> 450

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 450

Val Phe Asp Lys Phe Arg Lys Thr Glu Asn Arg Gly Val Ile

1 5 10

<210> 451

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 451

Asn His His Lys Thr Lys Arg Cys Ser Val Arg Phe Asn Ile

1 5 10

<210> 452

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 452

Gly Thr Phe Lys Trp Arg Lys Ser Gly Ala Arg Gln Tyr Leu

1 5 10

<210> 453

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 453

His Cys Leu Arg Thr Lys Lys Leu Ile Asn Lys Ile Cys Ser

1 5 10

<210> 454

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 454

Phe Phe Leu Arg Cys Arg Arg Leu Leu Gly Lys Val Gln Val

1 5 10

<210> 455

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 455

His Phe Pro Arg Ala Arg Arg Phe Glu His Arg Cys Met Leu

1 5 10

<210> 456

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 456

Gln Ile Ser Lys Leu Lys Arg Pro Ser Tyr Arg Gly Asp Asp

1 5 10

<210> 457

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 457

Glu Glu Ile Lys Gln Lys Lys Leu His Leu Arg Val Trp Phe

1 5 10

<210> 458

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 458

Ser Leu Pro Lys Trp Arg Lys Gly Gly Asp Arg Val Phe Thr

1 5 10

<210> 459

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 459

His Val Tyr Lys Asn Arg Arg Val Trp Gly Lys Gly Trp Pro

1 5 10

<210> 460

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 460

Glu Asp Leu Arg Cys Lys Lys Leu Glu Leu Arg Ser Val Ile

1 5 10

<210> 461

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 461

Thr His Asp Lys Cys Lys Lys His Asn Asp Lys Gln Ala His

1 5 10

<210> 462

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 462

Tyr Pro Glu Arg Pro Arg Lys Leu Gln Asp Lys Ser Tyr Ser

1 5 10

<210> 463

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 463

Cys Pro Trp Arg Asn Arg Lys Ala Met Ile Lys Gly Ile Ile

1 5 10

<210> 464

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 464

His Glu Ile Lys Gln Lys Lys Tyr Phe His Arg Gly His Asp

1 5 10

<210> 465

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 465

Cys Leu Glu Lys Leu Arg Lys Ala Val His Arg Gln Arg Arg

1 5 10

<210> 466

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 466

Tyr Ile Ser Lys Ser Lys Lys Thr Ala Gly Arg Trp Phe Trp

1 5 10

<210> 467

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 467

Val Thr Trp Lys Phe Arg Lys Ala Glu Lys Arg Trp Gly Tyr

1 5 10

<210> 468

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 468

Tyr Ser Ser Lys Ser Arg Lys Leu Ser Pro Arg Thr Pro Arg

1 5 10

<210> 469

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 469

Cys Val Asn Arg Val Lys Lys Ser Asp Ser Lys Gly Thr Trp

1 5 10

<210> 470

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 470

Asp His Glu Arg Glu Arg Arg Leu Trp Ser Arg Phe Pro Phe

1 5 10

<210> 471

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 471

Pro Leu Ile Lys Val Lys Arg Gly Val Gly Lys Leu Trp Asn

1 5 10

<210> 472

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 472

Thr Gly Cys Arg Cys Lys Arg Ser Met Tyr Lys Asn Leu His

1 5 10

<210> 473

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 473

Trp Thr Cys Arg Met Arg Lys Tyr Gln Leu Arg Thr Ser Glu

1 5 10

<210> 474

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 474

Ile Ala Ile Arg Pro Arg Lys Met Thr Leu Lys Ile His Pro

1 5 10

<210> 475

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 475

Gln Ile Pro Lys Gln Lys Lys Gln Glu Gln Arg Ala Ile Ser

1 5 10

<210> 476

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 476

Gln Met Gly Lys Phe Lys Lys Ile Ser Leu Lys Asn Thr Phe

1 5 10

<210> 477

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 477

Val Leu Ile Lys Gln Arg Lys Trp Gln Asp Arg Ser Cys Ser

1 5 10

<210> 478

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 478

Phe Ile Thr Lys Ser Arg Arg Gln Gln Phe Arg Asn Gln Gly

1 5 10

<210> 479

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 479

Gln Gln Phe Lys Tyr Arg Arg Glu Cys Val Lys Tyr Gly Ser

1 5 10

<210> 480

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 480

Met Glu Gly Arg Glu Lys Lys Ser Tyr Asn Lys Gly Glu Asn

1 5 10

<210> 481

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 481

Pro Thr Trp Arg His Arg Arg Tyr Cys Ala Lys Asp Ile Gly

1 5 10

<210> 482

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 482

His Met Cys Arg Ser Lys Arg Val Ala Trp Lys Asn Leu Ile

1 5 10

<210> 483

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 483

Ser Tyr Leu Lys Cys Lys Arg Ser Asp Tyr Lys Glu Val Pro

1 5 10

<210> 484

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 484

His Thr Phe Lys Leu Arg Lys Leu Cys Gln Lys Leu Phe Glu

1 5 10

<210> 485

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 485

Gln Leu Val Lys Leu Arg Lys Leu Ala Arg Arg Val Ser Tyr

1 5 10

<210> 486

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 486

Ser Glu Val Arg Pro Lys Lys Asp His Ser Arg Leu Phe Ile

1 5 10

<210> 487

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 487

Phe Leu Glu Lys Cys Arg Lys Phe Ile Ile Arg Val Ser Thr

1 5 10

<210> 488

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 488

Pro Glu Thr Arg His Arg Lys Met Phe Ile Arg Asp Phe Trp

1 5 10

<210> 489

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 489

Glu Trp Cys Lys Asn Lys Arg Trp His Ser Arg Glu Tyr Pro

1 5 10

<210> 490

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 490

Leu Trp Asn Arg Tyr Lys Lys Leu Leu Met Arg Ile Phe Trp

1 5 10

<210> 491

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 491

Cys Trp Cys Arg Gln Arg Lys Cys Phe His Lys Pro Trp Ile

1 5 10

<210> 492

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 492

Asn Leu Glu Arg Thr Lys Lys His Gly Leu Lys Gly Tyr Met

1 5 10

<210> 493

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 493

Glu Gly Gly Arg Ile Lys Arg Pro Asn Tyr Arg Gly Asp Gly

1 5 10

<210> 494

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 494

Pro Val Leu Lys Leu Arg Lys Gly Arg Val Arg Ala Gln Pro

1 5 10

<210> 495

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 495

Ser Ile Ser Arg Leu Arg Lys Ala His Gln Lys Phe Ile Pro

1 5 10

<210> 496

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 496

Glu Trp His Lys His Arg Arg Glu Met Val Arg Trp Gly Pro

1 5 10

<210> 497

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 497

Trp Ser Ala Lys Gly Arg Arg Met Gly Cys Lys Ser Thr Met

1 5 10

<210> 498

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 498

Pro Asn Gly Lys Val Arg Lys Arg Ile Arg Arg Arg Tyr Phe

1 5 10

<210> 499

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 499

Pro Cys Trp Lys Phe Arg Arg Ala Gln Met Lys Trp Gly Ile

1 5 10

<210> 500

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 500

Leu Glu Glu Arg Pro Lys Lys His Cys Ala Lys Asn His Cys

1 5 10

<210> 501

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 501

Gln Pro Trp Arg Gln Lys Lys Phe Trp Cys Arg Cys Trp Gly

1 5 10

<210> 502

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 502

Ile Met Val Lys Ile Arg Arg Cys Pro Ala Arg Pro Leu Cys

1 5 10

<210> 503

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 503

Asn Asp Trp Lys Leu Arg Lys Asp Phe Trp Arg Asn His Phe

1 5 10

<210> 504

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 504

Ala Ser Val Arg Asp Arg Lys Met Gly Tyr Lys Ser Asp Gly

1 5 10

<210> 505

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 505

Tyr Tyr Glu Lys Ile Arg Arg Gly Glu Ile Lys Ile Ala Glu

1 5 10

<210> 506

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 506

Asp Leu Val Arg Lys Arg Lys Thr Met Leu Arg Gln Leu Val

1 5 10

<210> 507

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 507

Asp Leu Ser Lys Val Arg Arg Gly His Gly Lys Asn Asp Ile

1 5 10

<210> 508

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 508

Glu Ser Tyr Arg Leu Arg Arg Gly Thr Asp Lys Glu Gln Trp

1 5 10

<210> 509

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 509

Tyr Ile Thr Lys Phe Arg Lys Phe Leu Met Lys Asp Gln Phe

1 5 10

<210> 510

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 510

Ala Trp Ala Lys Tyr Lys Lys Val Gln Pro Lys His His Thr

1 5 10

<210> 511

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 511

Thr Trp Leu Arg Gly Arg Arg Trp Pro Asp Lys Gln Pro Gln

1 5 10

<210> 512

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 512

Ala Leu Pro Arg Val Arg Lys Asp Ser His Arg Glu Glu Ile

1 5 10

<210> 513

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 513

Cys Leu Phe Lys Tyr Arg Lys Ser Cys Val Arg Leu Cys Gly

1 5 10

<210> 514

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 514

Leu Gln Asn Arg Met Arg Lys Ile Tyr Trp Lys Thr Phe Asp

1 5 10

<210> 515

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 515

Asn Asp Pro Arg Leu Arg Lys His Asn His Arg Cys Cys Thr

1 5 10

<210> 516

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 516

Tyr Gly Ser Lys Gln Arg Arg Phe Glu Glu Lys Ile Cys Gly

1 5 10

<210> 517

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 517

Cys Gly His Lys Asn Lys Lys Trp His Asn Arg Met Asp Pro

1 5 10

<210> 518

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 518

Tyr Gly Ile Arg Asp Arg Arg Pro Met Thr Lys His Thr Gln

1 5 10

<210> 519

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 519

Thr Pro Leu Lys Ser Arg Lys Tyr Trp Asn Lys His Ala Tyr

1 5 10

<210> 520

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 520

Phe Leu Tyr Lys Ala Lys Lys Ala Leu Met Arg Asp Ser Leu

1 5 10

<210> 521

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 521

Cys Asp Asp Lys Pro Lys Lys Thr Val Val Lys Leu Thr Trp

1 5 10

<210> 522

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 522

Met His Pro Arg Pro Arg Lys Met Ser His Lys Met Ser Cys

1 5 10

<210> 523

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 523

Pro Gly Glu Arg Leu Lys Lys Glu Asp His Arg Ala Ser Gly

1 5 10

<210> 524

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 524

Gly Ala Gln Arg Ala Arg Lys Pro Val Leu Arg Ala Val Gly

1 5 10

<210> 525

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 525

Met Gln Glu Lys Cys Arg Arg Cys Val Phe Lys Gly Asn Ile

1 5 10

<210> 526

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 526

Tyr Val Asp Arg Trp Arg Arg Met Gln Tyr Lys Leu Ser Ile

1 5 10

<210> 527

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 527

Trp Val Asp Arg Ser Arg Lys Phe Glu Asp Arg Asn Cys Leu

1 5 10

<210> 528

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 528

Ile Val Asn Arg Ala Lys Arg Ser Gln Ile Arg Phe Asp Val

1 5 10

<210> 529

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 529

Ile His Pro Arg Tyr Lys Arg His Gln Ala Arg Ser Cys Cys

1 5 10

<210> 530

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 530

Glu His Ser Lys His Arg Lys Asp Leu Phe Arg Met Val Gly

1 5 10

<210> 531

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 531

Tyr Thr Pro Lys Phe Arg Arg Ile Phe Trp Arg Ile Ile Asp

1 5 10

<210> 532

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 532

Thr Ile Thr Arg Val Lys Arg Ala Ser His Lys Thr Pro Ser

1 5 10

<210> 533

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 533

Val Asp Ser Arg Glu Lys Lys Trp Arg Gln Lys Cys Gln Cys

1 5 10

<210> 534

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 534

Tyr Trp Phe Arg Ile Lys Arg Ala His Ala Lys Gly Cys Pro

1 5 10

<210> 535

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 535

Asn Asp His Arg Met Arg Arg Ser Val Asp Arg Gly Glu Thr

1 5 10

<210> 536

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 536

Pro Phe Asp Arg Ala Arg Arg Asp Leu His Arg Ile Met Met

1 5 10

<210> 537

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 537

Gln Val Val Arg Leu Arg Arg Gly Lys Asn Arg Gly Thr Val

1 5 10

<210> 538

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 538

Thr Asn Gln Arg Pro Arg Arg Glu Thr Ala Lys Thr Ile Glu

1 5 10

<210> 539

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 539

Phe His His Arg His Lys Arg Ile Ala Thr Lys His Pro Ala

1 5 10

<210> 540

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 540

Glu His Cys Lys Trp Lys Lys Met Phe Asp Lys Glu Gly Glu

1 5 10

<210> 541

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 541

Phe Phe Tyr Arg Leu Arg Arg Cys Leu Thr Arg Trp Trp Val

1 5 10

<210> 542

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 542

Leu Gln Cys Lys Tyr Arg Arg Gly Ser Asp Lys Thr Val Val

1 5 10

<210> 543

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 543

Gln Thr Met Lys Phe Lys Arg Cys Cys Asn Lys Glu Met Val

1 5 10

<210> 544

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 544

Cys Ser Tyr Lys Leu Arg Arg Cys Asp Met Arg Leu Trp Gly

1 5 10

<210> 545

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 545

Met His Ile Lys Met Lys Arg Glu Gln Val Lys Asp Glu Glu

1 5 10

<210> 546

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 546

Ala Val Trp Arg Asn Arg Lys Asp Asn Val Lys Ala Ser Glu

1 5 10

<210> 547

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 547

Ala Asp His Arg Ala Lys Lys Thr Leu Ser Lys Phe Trp Thr

1 5 10

<210> 548

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 548

Met Met Ala Arg Cys Arg Arg Ile Met Cys Arg Ser Phe Asn

1 5 10

<210> 549

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 549

Pro Phe Gly Lys Phe Lys Arg Leu Glu Asn Lys Asp Glu Cys

1 5 10

<210> 550

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 550

Tyr Leu Ser Arg Thr Lys Arg Trp Leu Ala Arg Tyr Val Glu

1 5 10

<210> 551

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 551

His Thr Leu Lys Pro Lys Arg Leu Tyr Pro Arg Pro Ser Glu

1 5 10

<210> 552

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 552

Val Val Ile Lys Cys Arg Lys Trp Thr His Lys Met Asp His

1 5 10

<210> 553

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 553

Phe His Thr Lys Leu Arg Lys Pro Ile Pro Lys Ile Asp Met

1 5 10

<210> 554

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 554

Glu Asn Ile Lys Ser Arg Lys Tyr Phe Val Lys Leu Thr Trp

1 5 10

<210> 555

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 555

Ala Trp Thr Arg Phe Arg Arg Phe Gln Cys Lys Gly Met Ser

1 5 10

<210> 556

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 556

Ile Val Pro Arg Asp Arg Lys Gln Ala Leu Arg Trp Thr Asn

1 5 10

<210> 557

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 557

Cys Met Leu Arg Trp Lys Arg Trp His Met Arg Phe Asn Pro

1 5 10

<210> 558

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 558

Phe Asp Met Arg Asp Arg Arg Pro Asn Ala Arg Val Met Pro

1 5 10

<210> 559

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 559

Gln Ile Ala Lys Leu Lys Arg Asp Gln Met Lys Glu Ala Trp

1 5 10

<210> 560

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 560

Leu Thr Ser Arg Cys Lys Lys Thr Phe Gln Lys Asn Ser Glu

1 5 10

<210> 561

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 561

Met Ala Ala Lys Trp Lys Lys Asp Gly Met Lys Ser His Tyr

1 5 10

<210> 562

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 562

Ala Asn Trp Arg Thr Arg Arg Asp Leu Ala Lys Glu His Val

1 5 10

<210> 563

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 563

Pro Phe Thr Lys Met Arg Lys Gln Phe Gln Arg Met Ser Ala

1 5 10

<210> 564

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 564

Gln Ile Asn Arg Val Lys Lys Ser Asp Ala Lys Phe Cys Thr

1 5 10

<210> 565

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 565

Tyr Leu Val Lys Leu Arg Arg Phe Trp Ala Lys Ile Asp Met

1 5 10

<210> 566

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 566

Glu Tyr Val Lys Ala Lys Arg Thr Pro Trp Lys Tyr Val Val

1 5 10

<210> 567

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 567

Ala Met Cys Arg Glu Lys Arg Phe Pro Tyr Arg Ala Ile Tyr

1 5 10

<210> 568

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 568

Met Gly Leu Arg Ala Arg Lys Tyr Glu Asp Lys Thr Leu His

1 5 10

<210> 569

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 569

Phe His Met Lys Ser Lys Lys Asp Gly Asp Lys Phe Val Met

1 5 10

<210> 570

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 570

Cys Ile Phe Lys Phe Lys Lys Asn Met Phe Lys Gly Tyr Ser

1 5 10

<210> 571

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 571

Leu Asp Thr Lys Asn Arg Arg Gly Ala Ser Lys Trp Asp Tyr

1 5 10

<210> 572

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 572

Val Thr Gly Lys Gly Arg Arg Val Thr Phe Arg Cys Met Asn

1 5 10

<210> 573

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 573

Gln Leu Gly Lys Gln Lys Arg Glu Ala Thr Arg Glu Tyr Val

1 5 10

<210> 574

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 574

Ser Ser Gly Lys Trp Lys Arg Pro His Ala Lys Tyr Ile Val

1 5 10

<210> 575

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 575

Thr Cys His Lys Thr Lys Arg Ser Ile Met Arg Ala Thr Ser

1 5 10

<210> 576

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 576

Met Ile Gly Lys Cys Arg Lys Cys Gly Thr Lys Cys Tyr Ala

1 5 10

<210> 577

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 577

Phe Gln Pro Lys Ser Arg Arg Ala Glu Thr Lys His Ser Tyr

1 5 10

<210> 578

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 578

Pro Asp Leu Lys Phe Arg Lys His Gln Asp Arg Thr Ala Ile

1 5 10

<210> 579

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 579

Tyr Asn Ala Arg Val Lys Arg Glu Gly Ile Lys Asn Ile Thr

1 5 10

<210> 580

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 580

Gln Gly Ile Arg Pro Arg Lys His Leu Gln Arg Met Pro Asn

1 5 10

<210> 581

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 581

Gly Pro Cys Arg Pro Arg Arg His Ser Ile Arg Leu Leu Trp

1 5 10

<210> 582

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 582

Phe Tyr Leu Arg Glu Arg Arg His Gln Leu Lys Thr Glu Phe

1 5 10

<210> 583

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 583

Asn Met Ala Arg Ser Arg Lys Asn Glu Cys Lys Tyr Ile Ala

1 5 10

<210> 584

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 584

Asp Met Asp Lys Val Lys Lys Trp Val Trp Arg Ser Phe Pro

1 5 10

<210> 585

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 585

Val Leu Pro Lys Glu Arg Arg Trp Leu Thr Arg Phe Leu Ile

1 5 10

<210> 586

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 586

Tyr Glu His Arg His Lys Arg Phe Phe His Lys Asp Met Pro

1 5 10

<210> 587

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 587

His Gly His Lys Pro Arg Arg Trp Ile Tyr Arg Met Pro Met

1 5 10

<210> 588

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 588

Asp Gly Ile Arg Asp Lys Lys Cys Cys Trp Arg Asp Leu Ile

1 5 10

<210> 589

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 589

Glu Leu Val Lys His Arg Arg Leu Asp Phe Arg Asp Pro Met

1 5 10

<210> 590

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 590

Val His His Lys Leu Arg Arg Val His Leu Arg Leu Asp Val

1 5 10

<210> 591

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 591

Gly Ile Asn Arg Gly Arg Lys Val Ser Pro Lys Asp Glu Gln

1 5 10

<210> 592

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 592

Asn Gly Tyr Arg Ala Arg Lys Glu Asn Leu Lys Phe Pro Glu

1 5 10

<210> 593

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 593

Ala Ala Tyr Arg Ala Arg Lys Ile Val Glu Lys Ser Gly Trp

1 5 10

<210> 594

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 594

Trp Ala Pro Arg Asp Arg Arg Asn Met Gly Arg Asp Pro Ala

1 5 10

<210> 595

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 595

Ile Glu Asp Lys Ser Lys Arg Phe Asn Cys Lys Glu Cys Gly

1 5 10

<210> 596

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 596

Ile Glu Met Arg Tyr Arg Arg Asp Cys Ser Arg Phe Val Asn

1 5 10

<210> 597

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 597

Gln Gln Ile Lys Tyr Lys Arg Pro Thr Tyr Arg Met Val Cys

1 5 10

<210> 598

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 598

Leu Pro Trp Arg Glu Arg Arg Asn Gly Gly Arg Ser Ser Glu

1 5 10

<210> 599

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 599

Pro Gln Thr Arg Tyr Arg Lys Tyr Phe Tyr Arg Pro Gln Met

1 5 10

<210> 600

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 600

His Met Cys Arg Trp Arg Arg Gln Ile Asn Lys Gly Val Ser

1 5 10

<210> 601

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 601

Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg

1 5 10

<210> 602

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 602

Gly Gly Gly Arg Lys Lys Arg Arg Gln Arg Arg

1 5 10

<210> 603

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 603

Gly Gly Arg Lys Lys Arg Arg Gln Arg Arg Arg

1 5 10

<210> 604

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 604

Gly Gly Gly Arg Lys Lys Arg Arg Gln Arg Arg Arg Gly Gly

1 5 10

<210> 605

<211> 14

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 605

Gly Gly Arg Lys Lys Arg Arg Gln Arg Arg Arg Gly Gly Gly

1 5 10

<210> 606

<211> 11

<212> Белок

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Пептид, связывающийся с ацетилхолиновыми рецепторами (AchR)

<400> 606

Gly Gly Gly Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg

1 5 10

<---

Изобретение относится к ингибирующим ацетилхолиновые рецепторы пептидам и их применениям, при этом фаги с высокой аффинностью связывания в отношении ацетилхолиновых рецепторов подвергали скринингу с использованием произвольных пептидных рекомбинантных фагов и связывающие ацетилхолиновые рецепторы пептиды отбирали с помощью фаговой ДНК. Поскольку с использованием отобранных пептидов подтверждены аффинность связывания с ацетилхолиновыми рецепторами и эффект ингибирования действия ацетилхолиновых рецепторов, и подтверждены посредством модификаций пептидов, пептидных сайтов и последовательностей, которые имеют жизненно важное значение для связывания с ацетилхолиновыми рецепторами, предполагается, что ингибирующие ацетилхолиновые рецепторы пептиды в соответствии с настоящим изобретением будут использоваться при разработке косметической композиции для разглаживания морщин, лекарственного препарата для предупреждения или лечения ассоциированных с ацетилхолиновым рецептором заболеваний и оздоровительного функционального пищевого продукта для их облегчения. 10 н.п. ф-лы, 39 ил., 13 табл., 22 пр.

1. Связывающий ацетилхолиновый рецептор пептид, состоящий из аминокислотной последовательности, представленной приведенной ниже формулой 2:

Формула 2

(K или R)-X-(K или R)-(K или R)-X_M-1-(K или R)

(где X_M-1 состоит из трех произвольных аминокислот, а X состоит из одной произвольной аминокислоты),

где указанный пептид представляет собой пептид любой последовательности,

выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1-200,

и где N-конец или C-конец указанного пептида может быть модифицированным путем пальмитоилирования, ацетилирования, амидирования или пегилирования или путем связывания с миристиновой кислотой или стеариновой кислотой.

2. Связывающий ацетилхолиновый рецептор пептид, состоящий из аминокислотной последовательности, представленной приведенной ниже формулой 3:

Формула 3

X_L-(K или R)-X-(K или R)-(K или R)-X_M-1-(K или R)

(где каждый X_L и X_M-1 независимо состоит из трех произвольных аминокислот, а X состоит из одной произвольной аминокислоты),

где указанный пептид представляет собой пептид любой последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 201-400,

и где N-конец или C-конец указанного пептида может быть модифицированным путем пальмитоилирования, ацетилирования, амидирования или пегилирования или путем связывания с миристиновой кислотой или стеариновой кислотой.

3. Связывающий ацетилхолиновый рецептор пептид, состоящий из аминокислотной последовательности, представленной приведенной ниже формулой 4:

Формула 4

X_L-(K или R)-X-(K или R)-(K или R)-X_M-1-(K или R)-X_N

(где каждый X_L, X_M-1 и X_N независимо состоит из трех произвольных аминокислот, а X состоит из одной произвольной аминокислоты),

где указанный пептид представляет собой пептид любой последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 401-600,

и где N-конец или C-конец указанного пептида может быть модифицированным путем пальмитоилирования, ацетилирования, амидирования или пегилирования или путем связывания с миристиновой кислотой или стеариновой кислотой.

4. Полинуклеотид, кодирующий пептид по любому из пп. 1-3.

5. Косметическая композиция для разглаживания морщин, где указанная косметическая композиция содержит пептид по любому из пп. 1-3.

6. Фармацевтическая композиция для предупреждения или лечения ассоциированного с гиперактивностью ацетилхолинового рецептора заболевания, где указанная композиция содержит пептид по любому из пп. 1-3,

где ассоциированное с гиперактивностью ацетилхолинового рецептора заболевание представляет собой по меньшей мере одно, выбранное из группы, состоящей из: цервикальной дистонии, дистонии конечностей, дистонии туловища, блефароспазма, спастичности, гемифациального спазма, косоглазия, нистагма, тиков, нейрогенного мочевого пузыря, диссинергии детрузора и сфинктера, ахалазии кардии, гипергидроза и сиалореи.

7. Фармацевтическая композиция для предупреждения или лечения морщин кожи или квадратной челюсти, где указанная композиция содержит пептид по любому из пп. 1-3.

8. Оздоровительная функциональная пищевая композиция для облегчения ассоциированного с гиперактивностью ацетилхолинового рецептора заболевания, где указанная композиция содержит пептид по любому из пп. 1-3,

где ассоциированное с гиперактивностью ацетилхолинового рецептора заболевание представляет собой по меньшей мере одно, выбранное из группы, состоящей из: цервикальной дистонии, дистонии конечностей, дистонии туловища, блефароспазма, спастичности, гемифациального спазма, косоглазия, нистагма, тиков, нейрогенного мочевого пузыря, диссинергии детрузора и сфинктера, ахалазии кардии, гипергидроза и сиалореи.

9. Оздоровительная функциональная пищевая композиция для предупреждения или лечения морщин кожи или квадратной челюсти, где указанная композиция содержит пептид по любому из пп. 1-3.

10. Композиция, содержащая связывающий ацетилхолиновый рецептор пептид, для наполнителя, дополняющего ткани кожи, где указанная композиция содержит пептид по любому из пп. 1-3.