КРЕМНИЙСОДЕРЖАЩИЕ АНАЛОГИ ИВАКАФТОРА Российский патент 2023 года по МПК C07F7/08 C07D215/56 A61K31/695 A61P11/00 

ПЕРЕКРЕСТНАЯ ССЫЛКА НА РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ

[1] Данная заявка испрашивает преимущество и приоритет предварительной заявки США №62/319439, поданной 7 апреля 2016 года, содержание которой включено в данный документ в полном объеме посредством ссылки.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

[2] Клетки обычно поддерживают баланс между синтезом, свертыванием, миграцией, агрегацией и деградацией белка, называемым белковым гомеостазом, используя рецепторы и сети метаболических путей(Sitia et al., Nature426: 891-894, 2003; Ron et al., Nat Rev Mol Cell Biol 8: 519-529, 2007) (Sitiaetal.,Nature426:891-894,2003,Ronetal.,NatRevMolCellBiol8:519-529,2007). Клеточное поддержание белкового гомеостаза, который также именуется протеостазом, относится к управлению конформацией, связывающими взаимодействиями, нахождением и концентрацией отдельных белков, составляющих протеом. Свертывание белка in vivo осуществляется посредством взаимодействий между свертываемой полипептидной цепью и макромолекулярными клеточными компонентами, включая несколько классов шаперонов и ферментов для свертывания, которые сводят к минимуму агрегацию (Wiseman et al., Cell131: 809-821, 2007).Свертываетсялиданныйбелоквопределенномтипеклетокзависитотраспределения, концентрациии субклеточной локализации шаперонов, ферментов для свертывания, метаболитов и т. п. (Wiseman et al.).Кистозный фиброз и другие заболевания неправильного свертывания белка возникают в результате дисбаланса в способности среды гомеостаза белка (протеостаза)справляться с пониженной энергетической стабильностью неправильно свернутых, мутированныхбелков, которые имеют решающее значение для нормальной физиологии (Balch et al., Science 319, 916-9 (2008); Powers, et al., Annu Rev Biochem78, 959-91 (2009); Hutt et al., FEBS Lett, 583, 2639-46 (2009)).

[3] Кистозный фиброз (КФ) вызван мутациями в гене трансмембранного регулятора проводимости кистозного фиброза (CFTR), который кодирует многоспиральный трансмембранный эпителиальный хлоридный канал (Riordan et al., Annu Rev Biochem77, 701-26 (2008)).Приблизительно девяносто процентов пациентов имеют делецию фенилаланина (Phe) 508 (ΔF508) по меньшей мере в одном аллеле. Данная мутация приводит к нарушению энергетического баланса свертывания белков, что приводит к деградации CFTR в эндоплазматическом ретикулуме (ЭР).Мутация ΔF508, таким образом, связана с дефектным свертыванием и миграцией, а также с усиленной деградацией мутантного белка CFTR (Qu et al., JBiol Chem 272, 15739-44 (1997)).Потеря функциональности канала CFTR на плазматической мембране нарушает ионный гомеостаз (Cl^-, Na⁺, HCO₃^-) и гидратацию поверхности дыхательных путей, приводящую к снижению функции легких (Riordan et al.).Уменьшенный объем перицилиарной жидкости и повышенная вязкость слизи препятствуют клиренсу слизи, приводя к хронической инфекции и воспалению, фенотипическим признакам заболевания КФ(Boucher, J Intern Med 261, 5-16 (2007)).В дополнение к респираторной дисфункции, ΔF508 CFTR также влияет на нормальную функцию других органов (поджелудочной железы, кишечника, желчного пузыря), что свидетельствует о том, что потеря функции влияет на несколько нисходящих путей, которые требуют коррекции.

[4] В дополнение к кистозному фиброзу, мутации в гене CFTR и/или активность канала CFTR также задействованы в других состояниях, включая, например, врожденное двустороннее отсутствие семявыносящего протока (CBAVD), острый, рецидивирующий или хронический панкреатит, диссеминированные бронхоэктазы, астму, аллергический аспергиллез легких, связанные с курением заболевания легких, такие как хроническая обструктивная болезнь легких (ХОБЛ), болезнь сухого глаза, синдром Шегрена и хронический синусит, холестатическую болезнь печени (например, первичный билиарный цирроз (PBC) и первичный склерозирующий холангит (PSC)) (Sloane et al. (2012), PLoS ONE 7(6): e39809.doi: 10.1371/journal. pone.0039809; Bombieri et al. (2011), J Cyst Fibros. 2011 Jun; 10 Suppl 2: S86-102; (Albert et al. (2008), Clinical Respiratory Medicine, Third Ed., Mosby Inc.; Levin et al. (2005), Invest Ophthalmol Vis Sci., 46(4): 1428-34; Froussard (2007), Pancreas 35(1): 94-5), Son et al. (2017) J Med Chem 60(6): 2401-10.)

[5] Потенциальной стратегией улучшения, например, метаболических свойств лекарственного средства, его эффективности и/или профиля безопасности является введение кремния. В то же время, поскольку общие его свойства аналогичны свойствам углерода, замещение углерода на кремний не повлияет, например, на биохимическую эффективность и/или селективность лекарственного средства по сравнению с исходной химической структурной единицей, которая содержит только атомы углерода.

[6] В данной области техники существует потребность в соединениях, композициях и способах повышения активности CFTR, а также в способах лечения КФ, других заболеваний, связанных с CFTR, а также других заболеваний, связанных с неправильным свертыванием белка.

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[7] Данное раскрытие частично направлено на соединение, выбранное из N-(2,4-ди-трет-бутил-5-гидроксифенил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамида и его фармацевтически приемлемой соли, где по меньшей мере один атом углерода замещен атомом кремния. В некоторых вариантах осуществления, атом(ы) углерода, замещенный атомом кремния, представляет собой неароматический атом углерода. В других вариантах осуществления атом(ы) углерода, замещенный атомом кремния, представляет собой четвертичный атом углерода одной трет-бутильной группы или двух трет-бутильных групп. В некоторых вариантах осуществления, один или более атомов водорода замещаются дейтерием.

[8] Например, в данном документе раскрыты соединения формулы I:

Формула I

или их фармацевтически приемлемые соли, в которых X¹, X² и Y являются такими, как определено в данном документе.

[9] Также в данном документе рассматриваются фармацевтические композиции, которые включают описанное соединение, например N-(2,4-ди-трет-бутил-5-гидроксифенил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамид, где по меньшей мере один атом углерода замещен кремнием, и фармацевтически приемлемый носитель или вспомогательное вещество. В данном документе также рассматриваются фармацевтические композиции, которые включают описанное соединение, такое как соединение Формулы I, и фармацевтически приемлемый носитель или вспомогательное вещество. В некоторых вариантах осуществления, композиции могут включать по меньшей мере один дополнительный модулятор CFTR, например, могут включать один, два, три, четыре, пять или более дополнительных модуляторов CFTR.

[10] В некоторых вариантах осуществления, предлагается способ, включающий введение раскрытого соединения субъекту (например, человеку), страдающему заболеванием, связанным с пониженной активностью CFTR (например, кистозным фиброзом, врожденным двусторонним отсутствием семявыносящего протока (CBAVD), острым, рецидивирующим или хроническим панкреатитом, диссеминированным бронхоэктазисом, астмой, аллергическим легочным аспергиллезом, хронической обструктивной болезнью легких (ХОБЛ), хроническим синуситом, заболеванием сухого глаза, дефицитом белка С, А-β липопротеинемией, лизосомной болезнью накопления, хиломикронемией 1-го типа, легкимлегочным заболеванием, расстройством обработки липидов, наследственной ангиоэдемой 1-го типа, коагуляционным фибринолизом, наследственным гемохроматозом, метаболическим синдромом, связанным с CFTR, хроническим бронхитом, запором, недостаточностью поджелудочной железы, наследственной эмфиземой, синдромом Шегрена, семейной гиперхолестеринемией, болезнью I-клеток/псевдо Гурлера, мукополисахаридозами, синдромом Сандхофа/ болезнью Тея-Сакса, синдромом Криглера-Найяра типа II, полиэндокринопатией/гиперинсулемией, сахарным диабетом, карликовостью Ларона, дефицитом милепероксидазы, первичным гипопаратиреозом, меланомой, гликанозом CDG типа 1, врожденным гипертиреозом, несовершенным остеогенезом, наследственной гипофибриногенемией, дефицитом АКТ, несахарным диабетом (НД), нейрофизарным НД, нефрогенным НД, синдромом Шарко-Мари-Тута, болезнью Пелицеуса-Мерцбахера, болезнью Альцгеймера, болезнью Паркинсона, боковым амиотрофическим склерозом, прогрессирующим надъядерным параличом, болезнью Пика, болезнью Хантингтона, спиноцеребеллярной атаксией типа I, спинальной и бульбарной мышечной атрофией, дентато-рубро-паллидо-льюисовой атрофией, миотонической дистрофией, наследственной болезнью Крейтцфельдта-Якоба (из-за дефекта обработки белка приона), болезнью Фабри, холестатическим заболеванием печени (например, первичным билиарным циррозом (PBC) и первичным склерозирующим холангитом (PSC)) и синдромом Штрауслера-Шейнкера). В некоторых вариантах осуществления, заболевание представляет собой кистозный фиброз. Например, рассматриваемый в данном документе способ лечения пациента, страдающего кистозным фиброзом, включает введение указанному пациенту эффективного количества описанного соединения.

[11] В некоторых вариантах раскрытые способы, описанные в данном документе, могут дополнительно включать введение по меньшей мере одного дополнительного модулятора CFTR, например, введение по меньшей мере двух, трех, четырех или пяти дополнительных модуляторов CFTR.В некоторых вариантах осуществления, по меньшей мере один дополнительный CFTR-модулятор является корректором CFTR (например, VX-661 (тезакафтор), VX-152, VX-440, VX-445, VX-659 или VX-983) или, например, VX -809 (лумакафтор) или, например, GLPG2851, GLPG2665, GLPG2737 или GLPG2222.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[12] В контексте данного документа, при употреблении единственного числа подразумевается включение множественного числа, если не указано иное. Например, термин «агент» охватывает как один агент, так и комбинацию из двух или более агентов.

[13] Как обсуждалось выше, настоящее раскрытие частично направлено на соединения, описанные в данном документе, имеющие формулу I или их фармацевтически приемлемую соль, фармацевтические композиции, способы повышения активности CFTR и способы лечения кистозного фиброза. Частично, раскрытие относится к новым производным ивакафтора и их фармацевтически приемлемым солям. Ивакафтор, также известный как VX-770 и по химическому названию, N-(2,4-ди-трет-бутил-5-гидроксифенил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамид, действует как стимулятор CFTR.

[14] Например, в данном документе представлено соединение, выбранное из N-(2,4-ди-трет-бутил-5-гидроксифенил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамида и его фармацевтически приемлемой соли, где по меньшей мере один атом углерода может быть замещен на атом кремния.

[15] В некоторых вариантах осуществления, один атом углерода может быть замещен на атом кремния.В других вариантах осуществления два атома углерода могут быть замещены на атом кремния. Например, атом углерода, замещенный атомом кремния, может быть неароматическим углеродом. В другом варианте осуществления четвертичный атом углерода одной трет-бутильной группы может быть замещен кремнием. В еще одном варианте осуществления четвертичные атомы углерода двух трет-бутильных групп могут быть замещены кремнием. В некоторых вариантах осуществления, один или более атомов водорода могут быть замещены дейтерием. Например, один или более атомов водорода трет-бутильной группы могут быть замещены дейтерием.

[16] Также в данном документе представлены соединения формулы I:

Формула I

или их фармацевтически приемлемые соли, где:

X¹ выбирают из группы, состоящей из -Si(R³)₃, -C(CY₃)_3, водорода, галогена, C_1-3 алкила, факультативно замещенного одним или более галогенами, C_3-6 циклоалкила и 4-6-членного насыщенного моноциклического гетероциклила; где C_3-6циклоалкил и 4-6-членный насыщенный моноциклический гетероциклил могут быть факультативно замещены одним, двумя, тремя или более заместителями, каждый из которых выбирается независимо для каждого случая из R¹¹;

X² выбирают из группы, состоящей из -Si(R³)₃ и -C(CY₃)₃;

где по меньшей мере один из X¹ или Х ² представляет собой -Si(R³)_3;

R³выбираетсянезависимо для каждого случая из группы, состоящей из гидроксила, C_1-4алкила, C_1-4алкокси и фенила, где C_1-4алкил, C_1-4алкокси и фенил факультативно могут быть замещены одним, двумя, тремя или более атомами дейтерия; или две группы R³ вместе с кремнием, к которому они присоединены, образуют 4-6-членный насыщенный циклосилан;

Y выбирается независимо для каждого случая из группы, состоящей из водорода и дейтерия; а также

R¹¹выбирается независимо для каждого случая из группы, состоящей из водорода, галогена, гидроксила, циано и C_1-6алкила; где C_1-6алкил может быть факультативно замещен одним или более заместителями, каждый из которых выбирается независимо для каждого случая из группы, состоящей из галогена, гидроксила и C_1-6алкокси.

[17] В некоторых вариантах осуществления, один из X¹ или X² представляет собой -C(CH₃)_3, а другой из X¹ или X² представляет собой -Si(R³)₃.

[18] Например, в некоторых вариантах осуществления, соединение может быть представлено:

Ia или Ib.

[19] В других вариантах осуществления оба из X¹ и X² представляют собой -Si(R³)₃.

[20] Например, в некоторых вариантах осуществления, соединение может быть представлено:

Ic.

[21] В некоторых вариантах осуществления, R³ может быть выбран независимо для каждого случая из группы, состоящей из гидроксила, метила, этила, изопропила, трет-бутила, метокси, этокси, изопропокси, трет-бутокси и фенила, где метил, этил, изопропил, трет-бутил, метокси, этокси, изопропокси, трет-бутокси и фенил, факультативно могут быть замещены одним, двумя, тремя или более атомами дейтерия. Например, R³ может быть выбран независимо для каждого случая из -CH₃ и -CD₃.

[22] Например, в данном документе раскрываются соединения, выбираемые из группы, состоящей из:

;

;

;

;

;

;

;

;

;

;

;

;

;

;

;

;

;

;

;

;

;

;

;

;

;

;

;

;

и их фармацевтически приемлемая соль; где любой атом, не обозначенный как дейтерий, присутствует в своем естественном изотопном составе.

[23] Также в данном документе рассматриваются фармацевтические композиции, которые включают описанное соединение, например N-(2,4-ди-трет-бутил-5-гидроксифенил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамид, где по меньшей мере один атом углерода замещен атомом кремния, и фармацевтически приемлемый носитель или вспомогательное вещество. В данном документе также рассматриваются фармацевтические композиции, которые включают описанное соединение, такое как соединения Формулы I, и фармацевтически приемлемый носитель или вспомогательное вещество. В некоторых вариантах осуществления, композиции могут включать по меньшей мере один дополнительный CFTR-модулятор, как описано в любом пункте данного изобретения, или по меньшей мере два дополнительных модулятора CFTR, каждый независимо, как описано в данном документе.

[24] Далее будут более подробно описаны особенности и другие подробности раскрытия. Перед дальнейшим описанием раскрытия, здесь собраны определенные термины, используемые в описании, примерах и прилагаемой формуле изобретения. Данные определения следует читать в свете остальной части раскрытия так, как они понимаются специалистом в данной области техники. Если не указано иное, все технические и научные термины, используемые в данном документе, имеют тот же смысл, в котором они обычно понимаются специалистом в данной области техники.

[25] Понятно, что описание раскрытия в данном документе должно толковаться в соответствии с законами и принципами химической связи.

[26] Под используемым в данном документе термином «алкил», если не указано иное, понимаются как разветвленные, так и линейные насыщенные алифатические углеводородные группы, имеющие указанное количество атомов углерода; например, «C₁ -C₁₀алкил» означает алкил, содержащий от 1 до 10 атомов углерода, и линейные или разветвленные углеводороды с 1-6, 1-4 или 1-3 атомами углерода, называемые в данном документе C_1-6алкилом, C_1-4алкилом и C_1-3алкилом, соответственно. Примеры алкила включают, но не ограничиваются ими, метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изо-бутил, втор-бутил, трет-бутил, н-пентил, н-гексил, 2-метилбутил, 2-метилпентил, 2-этилбутил, 3-метилпентил и 4-метилпентил.

[27] Используемый в данном документе термин «алкенил» относится к фрагментамс прямой и разветвленной цепью, имеющими указанное количество атомов углерода и имеющим по меньшей мере одну углерод-углеродную двойную связь. Примеры алкенильных групп включают, но не ограничиваются ими, прямую или разветвленную группу из 2-6 или 3-4 атомов углерода, называемую в данном документе C_2-6алкенилом и C_3-4алкенилом, соответственно. Примеры алкенильных групп включают, но не ограничиваются ими, винил, аллил, бутенил, пентенил и т.д.

[28] Используемый в данном документе термин «алкинил» относится к фрагментам с прямой и разветвленной цепью, имеющими указанное число атомов углерода, и имеет по меньшей мере одну тройную связь углерод-углерод.

[29] Используемый в данном документе термин «циклоалкил» относится к насыщенным циклическим алкильным фрагментам, имеющим 3 или более атомов углерода, например, 3-10, 3-6 или 4-6 атомов углерода, называемым в данном документе C_3-10циклоалкилом, C_3-6циклоалкилом или C_4-6циклоалкилом, соответственно. Примеры циклоалкила включают, но не ограничиваются ими, циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил и адамантил.

[30] Используемый в данном документе термин «циклоалкенил» относится к циклическим алкенильным фрагментам, имеющим 3 или более атомов углерода.

[31] Используемый в данном документе термин «циклоалкинил» относится к циклическим алкинильным фрагментам, имеющим 5 или более атомов углерода.

[32] «Алкилен» означает прямой или разветвленный насыщенный алифатический двухвалентный радикал, имеющий указанное количество атомов углерода. «Циклоалкилен» относится к двухвалентному радикалу карбоциклической насыщенной углеводородной группы, имеющему указанное количество атомов углерода.

[33] Используемый в данном документе термин «алкокси» относится к прямой или разветвленной алкильной группе, присоединенной к кислороду (алкил-O-).Примеры алкокси-групп включают, но не ограничиваются ими, алкокси-группы с 1-6 или 2-6 атомами углерода, называемые в данном документе C_1-6алкокси и C_2-6алкокси, соответственно. Примеры алкокси-групп включают, но не ограничиваются ими, метокси, этокси, изопропокси и т.д.

[34] Термин «гетероциклический» или «гетероцикл» или «гетероциклил» охватывает гетероциклоалкил, гетероциклоалкенил, гетеробициклоалкил, гетеробициклоалкенил, гетерополициклоалкил, гетерополициклоалкенил и тому подобное, если не указано иное. Гетероциклоалкил относится к циклоалкильным группам, содержащим один или более гетероатомов (О, S или N) внутри кольца. Используемый в данном документе гетероциклоалкенил относится к циклоалкенильным группам, содержащим один или более гетероатомов (О, S или N) внутри кольца. Гетеробициклоалкил относится к бициклоалкильным группам, содержащим один или более гетероатомов (О, S или N) внутри кольца. Гетеробициклоалкенил, используемый в данном документе, относится к бициклоалкенильным группам, содержащим один или более гетероатомов (О, S или N) внутри кольца, гетероцикл может относиться, например, к насыщенной или частично ненасыщенной 4- или 12-членной кольцевой структуре, включая мостиковые или конденсированные кольца, и чьи кольцевые структуры включают от одного до трех гетероатомов, таких как азот, кислород и сера. Там, где это возможно, гетероциклические кольца могут быть связаны с соседним радикалом через атом углерода или азота. Примеры гетероциклильных групп включают, но не ограничиваются ими, пирролидин, пиперидин, морфолин, тиоморфолин, пиперазин, оксетан, азетидин, тетрагидрофуран или дигидрофуран и т.д.

[35] Циклоалкильные, циклоалкенильные и гетероциклические группы также включают группы, подобные описанным выше для каждой из данных соответствующих категорий, но которые замещены одним или более оксо-фрагментами.

[36] Используемый в данном документе термин «гетероарил» относится к ароматическим карбоциклическим группам, содержащим один или более гетероатомов (О, S или N) внутри кольца. Гетероарильная группа, если не указано иное, может быть моноциклической или полициклической. Гетероарильная группа может дополнительно быть замещенной или незамещенной. Рассматриваемые гетероарильные группы включают кольцевые системы, замещенные одним или более оксо-фрагментами. Полициклический гетероарил может содержать конденсированные кольца, ковалентно присоединенные кольца или их комбинацию. Полициклический гетероарил представляет собой полициклическую кольцевую систему, которая содержит по меньшей мере одно ароматическое кольцо, содержащее один или более гетероатомов внутри кольца. Примеры гетероарильных групп включают, но не ограничиваются ими, пиридинил, пиридазинил, имидазолил, пиримидинил, пиразолил, триазолил, пиразинил, хинолил, изохинолил, тетразолил, фурил, тиенил, изоксазолил, тиазолил, оксазолил, изотиазолил, пирролил, хинолинил, изохинолинил, индолил, бензимидазолил, бензофуранил, циннолинил, индазолил, индолизинил, фталазинил, триазинил, изоиндолил, пуринил, оксадиазолил, тиадиазолил, фуразанил, бензофуразанил, бензотиофенил, бензотриазолил, бензотиазолил, бензоксазолил, хиназолинил, хиноксалинил, нафтиридинил, дигидрохинолил, тетрагидрохинолил, дигидроизохинолил, тетрагидроизохинолил, бензофурил, фуропиридинил, пиролопиримидинил, тиазолопиридинил, оксазолопиридинил и азаиндолил.Вышеупомянутые гетероарильные группы могут быть присоеденены к С или присоединены к гетероатому (где это возможно). Например, группа, полученная из пиррола, может представлять собой пиррол-1-ил (присоединенная через N) или пиррол-3-ил (присоединенная через С).В некоторых вариантах осуществления, гетероарил представляет собой 4-12-членный гетероарил. В других вариантах осуществления гетероарил представляет собой моно- или бициклический 4-10-членный гетероарил.

[37] Используемый в данном документе термин «галоген» относится к F, Cl, Br или I.

[38] Используемый в данном документе термин «галогеналкил» относится к алкильной группе, имеющей от 1 до (2n+1) заместителей, независимо выбранных из F, Cl, Br или I, где n представляет собой максимальное число атомов углерода в алкильной группе. Следует понимать, что галогеналкил является специфическим примером факультативно замещенного алкила.

[39] Используемые в данном документе термины «гидрокси» и «гидроксил» относятся к радикалу -ОН.

[40] Как будет понятно специалисту в данной области техники, «Н» является символом водорода, «D» является символом дейтерия, «N» является символом азота, «S» является символом серы, «O» является символом кислорода. «Me» является аббревиатурой для метила.

[41] Соединения раскрытия могут содержать один или более хиральных центров и, следовательно, существуют в виде стереоизомеров. Термин «стереоизомеры» при использовании в данном документе включает все энантиомеры или диастереомеры. Данные соединения могут обозначаться символами «(+)», «(-)», «R» или «S» в зависимости от конфигурации заместителей вокруг стереогенного атома углерода, но специалист поймет, что структура может обозначать хиральный центр неявно. Настоящее раскрытие охватывает различные стереоизомеры раскрытых соединений и их смесей. Смеси энантиомеров или диастереомеров можно обозначить как «(±)» в номенклатуре, но квалифицированный специалист поймет, что структура может обозначать хиральный центр неявно.

[42] Соединения раскрытия могут содержать одну или более двойных связей и, следовательно, существуют как геометрические изомеры, возникающие в результате расположения заместителей вокруг углерод-углеродной двойной связи. Символ «» обозначает связь, которая может быть одинарной, двойной или тройной связью, как описано в данном документе. Заместители вокруг углерод-углеродной двойной связи обозначены как находящиеся в конфигурации «Z» или «E», где термины «Z» и «E» используются в соответствии со стандартами ИЮПАК. Если не указано иное, структуры, изображающие двойные связи, охватывают как изомеры «E», так и «Z». Заместители вокруг углерод-углеродной двойной связи альтернативно могут быть обозначены как «цис» или «транс», где «цис» представляет собой случай, когда заместители находятся по одну сторону двойной связи, а «транс» представляет собой случай, когда заместители находятся на противоположных сторонах двойной связи.

[43] Соединения раскрытия могут содержать карбоциклическое или гетероциклическое кольцо и, следовательно, существуют как геометрические изомеры, образующиеся в результате расположения заместителей вокруг кольца. Расположение заместителей вокруг карбоциклического или гетероциклического кольца обозначается как находящееся в конфигурации «Z» или «E», где термины «Z» и «E» используются в соответствии со стандартами ИЮПАК. Если не указано иное, структуры, изображающие карбоциклические или гетероциклические кольца, охватывают как изомеры «Z», так и «E». Заместители вокруг карбоциклического или гетероциклического кольца также могут быть обозначены как «цис» или «транс», где термин «цис» представляет собой случай, когда заместители находятся по одну сторонуплоскости кольца, а термин «транс» представляет собой случай, когда заместители находятся на противоположных сторонах плоскости кольца. Смеси соединений, в которых заместители находятся на обеих одинаковых и противоположных сторонах плоскости кольца, обозначены как цис/транс.

[44] Отдельные энантиомеры и диастереоизомеры раскрытых соединений могут быть получены синтетически из коммерчески доступных исходных материалов, которые содержат асимметричные или стереогенные центры, или путем приготовления рацемических смесей с последующим разделением с помощью способов разделения, хорошо известных специалистам в данной области техники. Данные способы разделения иллюстрируются (1) взаимодействием смеси энантиомеров с хиральным вспомогательным веществом, разделение полученной смеси диастереомеров перекристаллизацией или хроматографией и выделением оптически чистого продукта из диастереомера, (2) образованием соли с использованием оптически активного агента разделения (3) прямым разделением смеси оптических энантиомеров на хиральных жидкостных хроматографических колонках или (4) кинетическим разделением с использованием стереоселективных химических или ферментативных реагентов. Рацемические смеси также могут быть разделены на составляющие их энантиомерыизвестными способами, такими как хирально-фазовая жидкостная хроматография или кристаллизация соединения из хирального растворителя. Стереоселективный синтез, химическая или ферментативная реакция, при которой один реагент образует неравную смесь стереоизомеров при создании нового стереоцентра или в процессе трансформации ранее существовавшего, хорошо известны в данной области техники. Стереоселективный синтез охватывает как энантио-, так и диастереоселективные превращения, и может включать использование хиральных вспомогательных веществ. Например, см. Carreira and Kvaerno, Classics in Stereoselective Synthesis, Wiley-VCH: Weinheim, 2009. Если конкретное соединение описано или изображено, оно должно охватывать данную химическую структуру, а также таутомеры данной структуры.

[45] Термин «энантиомерно чистый» означает стереохимически чистый состав соединения. Например, стереохимически чистая композиция представляет собой композицию, свободную или в значительной степени свободную от других стереоизомеров данного соединения. В другом примере для соединения, имеющего один хиральный центр, энантиомерно чистая композиция соединения является свободной или практически свободной от другого энантиомера. В еще одном примере для соединения, имеющего два хиральных центра, энантиомерно чистая композиция является свободной или практически свободной от других диастереомеров.

[46] Когда описывается или изображается конкретная стереохимия, предполагается, что конкретный энантиомер присутствует в избытке относительно другого энантиомера. Соединение имеет R- конфигурацию в определенном положении, когда оно присутствует в избытке по сравнению с соединением, имеющим S- конфигурацию в этом положении. Соединение имеет S- конфигурацию в определенном положении, когда оно присутствует в избытке по сравнению с соединением, имеющим R- конфигурацию в этом положении.

[47] Соединения, описанные в данном документе, могут существовать как в сольватированных, так и в несольватированных формах с фармацевтически приемлемыми растворителями, такими как вода, этанол и тому подобное, и предполагается, что раскрытые соединения включают как сольватированные, так и несольватированные формы. В одном варианте осуществления раскрытое соединение является аморфным или, в другом варианте осуществления, единственным полиморфом. В другом варианте осуществления раскрытое соединение представляет собой смесь полиморфов. В другом варианте осуществления раскрытое соединение находится в кристаллической форме.

[48] В данном документе также рассматриваются изотопно меченные соединения, которые идентичны указанным в данном документе, за исключением того, что один или более атомов замещены атомом, имеющим атомную массу или массовое число, отличное от атомной массы или массового числа изотопа, обычно встречающегося в природе. Примеры изотопов, которые могут быть включены в соединения изобретения, включают изотопы водорода, углерода, азота, кислорода, фосфора, серы, фтора и хлора, соответственно такие как ²H, ³H, ¹³C, ¹⁴C, ¹⁵N, ¹⁸O, ¹⁷O, ³¹P, ³²P, ³⁵S, ¹⁸F и ³⁶Cl.

[49] Например, раскрытое соединение может иметь один или более атомов Н, замещенных дейтерием. Будет признано, что в синтезированном соединении происходит некоторое изменение естественного изотопного состава в зависимости от происхождения химических материалов, используемых в синтезе. Таким образом, получают N -(2,4-ди-трет-бутил-5-гидроксифенил) -4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамид, где по меньшей мере один атом углерода замещен атомом кремния или получают раскрытое соединение, имеющее формулу I, которое по существу будет содержать небольшие количества дейтерированных изотопологов. Концентрация распространенных в природе стабильных изотопов водорода и углерода, несмотря на это изменение, является малой и несущественной по сравнению со степенью стабильного изотопного замещения в соединениях настоящего описания.

[50] В соединениях данного описания любой атом, специально не обозначенный как конкретный изотоп, предназначен для представления любого стабильного изотопа этого атома. Если не указано иное, когда позиция обозначена конкретно как «Н» или «водород», считается, что позиция имеет водород в изотопном составе естественного изотопного состава. Кроме того, если не указано иное, когда позиция обозначена конкретно как «D» или «дейтерий», считается, что позиция имеет дейтерий в составе, который по меньшей мере в 3000 раз превышает естественный изотопный состав дейтерия, что составляет 0,015% (т.е. не менее 45% включения дейтерия).

[51] Используемый в данном документе термин «коэффициент изотопного обогащения» означает соотношение между изотопным составом и естественным изотопным составом указанного изотопа.

[52] В других вариантах осуществления раскрытое соединение имеет изотопный коэффициент обогащения для каждого указанного атома дейтерия по меньшей мере 3500 (52,5% включение дейтерия в каждый указанный атом дейтерия), по меньшей мере 4000 (60% включение дейтерия), по меньшей мере 4500 (67,5% включение), по меньшей мере 5000 (75% включение дейтерия), по меньшей мере, 5500 (82,5% включение дейтерия), по меньшей мере 6000 (90% включение дейтерия), по меньшей мере 6333,3 (95% включение дейтерия), по меньшей мере 6466,7 (97% включение дейтерия), по меньшей мере 6600 (99% включение дейтерия) или по меньшей мере 6633,3 (99,5% включение дейтерия).

[53] Термин «изотополог» относится к соединению, в котором химическая структура соединения отличается от конкретного соединения этого раскрытия только в изотопном составе.

[54] Термин «соединение», когда речь идет о соединении этого раскрытия, относится к набору молекул, имеющих идентичную химическую структуру, за исключением возможного изотопного изменения среди составляющих атомов молекул. Таким образом, специалистам в данной области техники будет ясно, что соединение, представленное конкретной химической структурой, содержащей указанные атомы дейтерия, также будет содержать меньшее количество изотопологов, имеющих атомы водорода в одном или более обозначенных положениях дейтерия в этой структуре. Относительное количество таких изотопологов в соединении этого раскрытия будет зависеть от ряда факторов, включая изотопную чистоту дейтерированных реагентов, используемых для получения соединения, и эффективность включения дейтерия в различных стадиях синтеза, используемых для получения соединения. Однако, как указано выше, относительное количество таких изотопологов в общей сложности будет составлять менее 49,9% соединения. В других вариантах относительное количество таких изотопологов в общей сложности будет составлять менее чем 47,5%, менее чем 40%, менее чем 32,5%, менее чем 25%, менее чем 17,5%, менее чем 10%, менее чем 5%, менее чем 3%, менее чем 1% или менее чем 0,5% соединения.

[55] Определенные изотопно-меченые раскрытые соединения (например, те, которые помечены ³H и ¹⁴C) полезны в анализах распределения соединений и/или субстрата. Тритированные (т.е.³H) и меченные изотопом углерод-14 (т.е.¹⁴C) соединения подходят из-за легкости их получения и обнаруживаемости. Кроме того, замещение более тяжелыми изотопами, такими как дейтерий (т.е.²Н), может привести к определенным терапевтическим преимуществам, связанным с большей метаболической стабильностью (например, с увеличением периода полувыведения in vivo или снижением дозировки) и, следовательно, может быть подходящим в некоторых случаях. Изотопно меченные соединения обычно могут быть получены способами, аналогичными описанным в примерах в данном документе, путем замещения неизотопномеченного реагента изотопно-меченным.

[56] В некоторых вариантах осуществления, один или более атомов азота раскрытого соединения, если они присутствуют, окислены до N-оксида.

[57] Типичные пути синтеза для получения соединений, описанных в данном документе, представлены во всех разделах примеров. Специалист в данной области должен понимать, что диастереомеры могут быть отделены от реакционной смеси с использованием колоночной хроматографии.

[58] Как обсуждалось выше, рассматриваемый в данном документе в одном варианте осуществления способ, представляет собой способ повышения активности CFTR у субъекта, включающий введение эффективного количества раскрытого соединения. Также рассматриваемый в данном документе способ лечения пациента, страдающего от состояния, связанного с активностью CFTR, включает введение указанному пациенту эффективного количества описанного в данном документе соединения.

[59] Термины «лечить» или «лечение» включаетпредотвращение или задержку возникновения симптомов, осложнений или биохимических признаков заболевания, облегчение или улучшение симптомов или остановку, или ингибирование дальнейшего развития заболевания, состояния или расстройства. Термин «субъект» относится к животному, которое поддается лечению или нуждается в лечении. Термин «пациент» относится к человеку, нуждающемуся в лечении.

[60] Термин «эффективное количество» относится к такому количеству агента, которое является достаточным для достижения желаемого и/или декларированного эффекта. В контексте способа лечения «эффективное количество» терапевтического агента относится к количеству, которое является достаточным для того, чтобы улучшить один или более симптомов расстройства и/или предотвратить развитие расстройства, вызвать регресс расстройства и/или достичь желаемого эффекта.

[61] Термин «модулирование» охватывает увеличение, усиление, ингибирование, уменьшение, подавление и тому подобное. Термины «увеличение» и «усиление» означают получение чистого эффекта с помощью прямых или косвенных средств. Используемые в данном документе термины «ингибирование» и «уменьшение» включают чистое уменьшение эффекта с помощью прямых или косвенных средств.

[62] В некоторых примерах активность CFTR усиливается после введения соединения, описанного в данном документе, когда наблюдается увеличение активности CFTR по сравнению с таковой в отсутствии соединения. Активность CFTR включает, например, активность хлоридного канала CFTR и/или другую активность транспорта ионов (например, транспорт HCO₃^-).В некоторых из вариантов осуществления активность одного или более (например, одного или двух) мутантных CFTR (например, ΔF508, S549N, G542X, G551D, R117H, N1303K, W1282X, R553X, 621+1G>T, 1717-1G>A, 3849+10kbC>T, 2789+5G>A, 3120+1G>A, I507del, R1162X, 1898+1G>A, 3659delC, G85E, D1152H, R560T, R347P, 2184insA, A455E, R334W, Q493X, и 2184delA CFTR) усиливается (например, увеличивается). Рассматриваемые пациенты могут иметь мутацию(-и) CFTR из одного или более классов, таких как, без ограничения, мутации CFTR класса I, мутации CFTR класса II, мутации CFTR класса III, мутации CFTR класса IV, мутации CFTR класса V и мутации CFTR класса VI. Рассматриваемые генотипы CFTR субъекта (например, человеческий субъект) включают, без ограничения, гомозиготные мутации (например, ΔF508/ΔF508 и R117H/R117H) и сложные гетерозиготные мутации (например, ΔF508/G551D; ΔF508/A455E; ΔF508/G542X; Δ508F/W1204X; R553X/W1316X; W1282X/N1303K, 591Δ18/E831X, F508del/R117H/ N1303K/ 3849+10kbC>T; Δ303K/ 384; и DF508/G178R).

[63] В некоторых вариантах осуществления, мутация представляет собой мутацию класса I, например G542X; мутацию класса II/I, например сложную гетерозиготную мутацию ΔF508/G542X.В других вариантах осуществления мутация представляет собой мутацию класса III, например G551D; мутацию класса II/класса III, например сложную гетерозиготную мутацию ΔF508/G551D.В других вариантах осуществления мутация представляет собой мутацию класса V, например A455E; мутацию класса II/класса V, например сложную гетерозиготную мутацию ΔF508/A455E.Из более чем 1000 известных мутаций гена CFTR, мутация ΔF508 является наиболее распространенной мутацией CFTR, приводящей к неправильному свертыванию белка и нарушению миграции от эндоплазматического ретикулума к апикальной мембране (Dormer et al. (2001). J Cell Sci114, 4073-4081; http://www.genet.sickkids.on.ca/app).В некоторых вариантах осуществления, активность ΔF508 CFTR усиливается (например, увеличивается).В некоторых вариантах осуществления, активность ΔF508 CFTR и/или активность GTR42X CFTR, и/или активность G551D CFTR, и/или активность A455E CFTR усиливаются (например, увеличиваются).Усиление активности CFTR можно измерить, например, используя описанные в литературе способы, включая, например, анализы с использованием камеры Уссинга, пэтч-клэмп, и анализ hBE Ieq (Devor et al. (2000), Am J Physiol Cell Physiol 279(2): C461-79; Dousmanis et al. (2002), J Gen Physiol 119(6): 545-59; Bruscia et al. (2005), PNAS 103(8): 2965-2971).

[64] Как обсуждалось выше, раскрытие также охватывает способ лечения кистозного фиброза. Способы лечения других состояний, связанных с активностью CFTR, включая условия, связанные с недостаточной активностью CFTR, в том числе введение эффективного количества раскрытого соединения, также приведены в данном документе.

[65] Например, в данном документе представлен способ лечения состояния, связанного с недостаточной или пониженной активностью CFTR, включающий введение эффективного количества раскрытого соединения, которое повышает активность CFTR. Неограничивающими примерами состояний, связанных с недостаточной активностью CFTR, являются кистозный фиброз, врожденное двустороннее отсутствие семявыносящего протока (CBAVD), острый, рецидивный или хронический панкреатит, диссеминированный бронхоэктазис, астма, аллергический аспергиллез легких, связанные с курением заболевания легких, такие как хроническая обструктивная болезнь легких (ХОБЛ), хронический синусит, сухой глаз, дефицит белка С, А-β-липопротеинемия, лизосомная болезнь накопления, хиломикронемия 1 типа, легкая болезнь легких, болезнь недостаточной обработки липидов, наследственная ангйодема 1 типа, болезнь коагуляции-фибринолизиса, наследственный гемохроматоз, метаболический синдром, связанный с CFTR, хронический бронхит, запор, панкреатическая недостаточность, наследственная эмфизема, холестатическая болезнь печени (например, первичный билиарный цирроз (PBC) и первичный склерозирующий холангит (PSC)),а также синдром Шегрена.

[66] В некоторых вариантах осуществления, раскрытые способы лечения дополнительно включают введение дополнительного терапевтического агента. Например, в одном варианте осуществления, представленном в данном документе, представлен способ введения раскрытого соединения и по меньшей мере одного дополнительного терапевтического агента. В некоторых аспектах раскрытый способ лечения включает введение раскрытого соединения и по меньшей мере двух дополнительных терапевтических агентов. Дополнительные терапевтические агенты включают, например, муколитические агенты, бронходилататоры, антибиотики, противоинфекционные агенты, противовоспалительные агенты, агенты модулирующие активность ионного канала, терапевтические агенты, используемые в генной терапии, исправители активности CFTR и усилители CFTR или другие агенты, которые модулируют активность CFTR.В некоторых вариантах осуществления, по меньшей мере один дополнительный терапевтический агент выбирают из группы, состоящей из исправителя активности CFTR и усилителя CFTR. Неограничивающие примеры модуляторов, исправителей активности и усилителей CFTR включают VX-152, VX-440, VX-809 (лумакафтор) (3-(6-(1-(2,2-дифторбензо[d][1,3]5-ил) циклопропанкарбоксамидо)-3-метилпиридин-2-ил)бензойную кислоту, VX-661 (1-(2,2-дифтор-1,3-бензодиоксол-5-ил)-N-[1-[(2R) -2,3-дигидроксипропил]-6-фтор-2-(2-гидрокси-1,1-диметилэтил) -1H-индол-5-ил]циклопропанкарбоксамид), VX-983, Ataluren (PTC124) (3-[5-(2-фторфенил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил]бензойную кислоту), FDL169, GLPG2222 (например, исправитель активности CFTR), GLPG2851, GLPG2665, GLPG2737; и соединения, описанные, например, в международных заявках WO2014/144860 и 2014/176553, включенных в данный документе посредством ссылки. Неограничивающие примеры модуляторов включают GLPG2451, GLPG1837, GLPG3067, QBW -251, QR-010, NB-124, риоцикват и соединения, описанные, например, в международных заявках WO02014/045283; WO2014/081821, WO2014/081820, WO2014/152213; WO02014/160440, WO02014/160478, US2014027933; WO2014/0228376, WO2013/038390, WO2011/113894, WO2013/038386; и WO2014/180562, описанные в данных публикациях модуляторы рассматриваются как дополнительные терапевтические агенты и включены в данный документе посредством ссылки. Неограничивающие примеры противовоспалительных агентов включают N6022 (3-(5-(4-(1Н-имидазол-1-ил) фенил)-1-(4-карбамоил-2-метилфенил)-¹Н-пиррол-2-ил)пропионовую кислоту), СТХ-4430, N1861, N1785 и N91115.

[67] В некоторых вариантах осуществления, описанные в данном документе, способы могут дополнительно включать введение дополнительного терапевтического агента или введение по меньшей мере двух дополнительных терапевтических агентов CFTR.Эти терапевтические агенты могут быть выбраны из любых соединений или терапевтических агентов, которые, как известно, обладают или демонстрируют выгодные свойства при введении с соединением, имеющим тот же механизм действия, что и N-(2,4-ди-трет- бутил-5-гидроксифенил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамид, например, любой терапевтический агент, который, как известно, полезен для совместного введения с N -(2,4-ди-трет- бутил-5-гидроксифенил) -4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновой кислотой. В некоторых вариантах осуществления, описанные в данном документе способы могут дополнительно включать введение дополнительного модулятора CFTR или введение по меньшей мере двух дополнительных модуляторов CFTR.В некоторых вариантах осуществления, по меньшей мере один CFTR модулятор представляет собой исправитель активности CFTR (например, VX-809, VX-152, VX-440, VX-661, VX-445, VX-659, VX-983, FDL169, GLPG2851, GLPG2665, GLPG2737, и GLPG2222) или усилитель. В некоторых из данных вариантов осуществления один из по меньшей мере двух дополнительных терапевтических агентов является исправителем активности CFTR (например, VX-809, VX-661 и VX-983), а другой является усилителем активности CFTR.В некоторых из данных вариантов осуществления один из по меньшей мере двух дополнительных терапевтических агентов является исправителем активности CFTR (например, GLPG2222), а другой является усилителем активности CFTR.В некоторых из данных вариантов осуществления один из по меньшей мере двух дополнительных терапевтических агентов является исправителем активности (например, VX-809 или VX-661), а другой является усилителем активности CFTR.В некоторых из данных вариантов осуществления по меньшей мере один модулятор CFTR является агентом, который улучшает считывание стоп-кодонов (например, NB124 или аталурен). В других вариантах осуществления описанные в данном документе способы могут дополнительно включать введение ингибитора эпителиального натриевого канала (ENaC) (например, VX-371).В других вариантах осуществления способы, описанные в данном документе, могут дополнительно включать введение генной или РНК-терапии, включая SHP-636.

[68] Соответственно, в другом аспекте данное раскрытие представляет собой способ лечения состояния, связанного с недостаточной или пониженной активностью CFTR (например, кистозный фиброз), который включает введение нуждающемуся в этом субъекту (например, нуждающемуся в этом человеку) эффективного количества раскрытого соединения и по меньшей мере одного или двух дополнительных терапевтических агентов CFTR (например, по меньшей мере один или два дополнительных терапевтических агента CFTR, например, в которых один из, по меньшей мере, одного или двух дополнительных терапевтических агентов является необязательным исправителем активности CFTR, модулятором или усилителем (например, VX-809, VX-661, VX-983, VX-445, VX-659, GLPG2222, NB124, аталурен); например, один из по меньшей мере двух дополнительных терапевтических агентов-GLPG2222 и другой-GLPG1837 или GLPG3067; или один из по меньшей мере двух дополнительных терапевтических агентов-VX-809 или VX-661.Дополнительные агенты, например усилители, описаны в совместно рассматриваемых заявках PCT/US14/044100, PCT/US15 /020460, PCT/US15/020499 и PCT/US15/036691, каждая из которых включена в данный документ посредством ссылки. Например, в качестве примера усилитель предствляет собой N-(3-(5-(гидроксиметил)-1H-1,2,3-триазол-1-ил)пропил) -5-фенилизоксазол-3-карбоновую кислоту («соединение А»).В некоторых вариантах осуществления, генотип CFTR субъекта включает, без ограничения, одну или болеемутаций CFTR класса I, одну или более мутаций CFTR класса II, одну или более мутаций CFTR класса III, одну или более мутаций CFTR класса IV, или одну или более мутаций CFTR класса V, или одну или более мутаций CFTR класса VI.В некоторых вариантах осуществления, генотип CFTR субъекта включает, без ограничения, одну или более гомозиготных мутаций (например, ΔF508/ΔF508 или R117H/R117H) и/или одну или более сложных гетерозиготных мутаций (например, ΔF508/G551D; ΔF508/A455E; ΔF508/G542X; Δ508F/W1204X; R553X/W1316X; W1282X/N1303K; F508del/R117H; N1303K/ 3849+10kbC>T; ΔF508/R334W; DF508/G178R, и 591Δ18/E831X).В некоторых вариантах осуществления, генотип CFTR субъекта включает мутацию класса I, например мутацию G542X класса I, например сложную гетерозиготную мутацию ΔF508/G542X.В других вариантах осуществления генотип CFTR субъекта включает мутацию класса III, например мутацию G551D класса III, например сложную гетерозиготную мутацию ΔF508/G551D.В других вариантах осуществления генотип CFTR субъекта включает мутацию класса V, например мутацию A455E класса V, например сложную гетерозиготную мутацию ΔF508/A455E.В некоторых вариантах осуществления, активность ΔF508 CFTR и/или активность G542X CFTR, и/или активность G551D CFTR, и/или активность A455E усиливаются (например, увеличиваются).В некоторых вариантах осуществления, повышение активности (например, увеличение активности), обеспечиваемое комбинацией раскрытого соединения и одного или двух дополнительных терапевтических агентов, больше, чем повышение активности, обеспечиваемое каждым терапевтическим компонентом индивидуально.

Класс Влияние на белок CFTR Пример мутации I Укороченный белок W1282X Вместо введения аминокислоты триптофан (W), последовательность белка преждевременно останавливается (обозначается как Х). II Белок не достигает клеточной мембраны ΔF508 Удалена аминокислотафенилаланин (F) III Канал не регулируется должным образом G551D «миссенс»-мутация: вместо аминокислоты глицина (G) добавляется аспарагиновая кислота (D) IV Сниженная проводимость хлорида R117H Миссенс мутация V Уменьшение из-за неправильного сплайсинга гена 3120+1G>Мутация сайта сплайсинга в интроне гена 16 VI Сниженная из-за нестабильности белка N287Y a A -> T при 991

Генотип Описание Возможные симптомы Δ508F/Δ508F гомозигота Тяжелое заболевание легких, недостаточность поджелудочной железы R117H/R117H гомозигота Врожденное двустороннее отсутствие семявыносящих протоков,
Отсутствие болезни легких или поджелудочной железы, WT/Δ508F гетерозигота незатронутый WT/3120+1 G> A гетерозигота незатронутый Δ508F/W1204X сложная гетерозигота Отсутствие болезни легких, недостаточности поджелудочной железы R553X и W1316X сложная гетерозигота Легкая болезнь легких, недостаточность поджелудочной железы 591Δ18/E831X сложная гетерозигота Отсутствие болезни легких или поджелудочной железы, носовых полипов

[69] Например, предложенный в данном документе способ лечения пациента, имеющего одну или более из следующих мутаций в CFTR гене: G1244E, G1349D, G178R, G551S, S1251N, S1255P, S549N, S549R, G970R, или R117H, G551D и/или G167R, и/или, например, пациента с одной или двумя копиями мутации F508del, или одной копией мутации ΔF508 и второй мутацией, которая приводит к эффекту гейтирования в белке CFTR (например, пациент который является гетерозиготным для мутации ΔF508 и G551D), пациента с одной копией мутации ΔF508 и второй мутацией, которая приводит к остаточной активности CFTR, или пациента с одной копией мутации ΔF508 и второй мутацией, которая приводит к остаточной активности CFTR, включающий введение эффективного количества раскрытого соединения. Как описано в данном документе, такие примерные способы (например, пациент, имеющий одну или мутации, такие как описанные выше) могут включать, например, введение такому пациенту комбинированной терапии, например, введение (одновременно или последовательно) эффективного количества VX-661 или лумакафтор указанному пациенту, и эффективное количество раскрытого соединения, которое может действовать как усилитель, или раскрытое соединение, которое может действовать как усилитель. Такое введение может приводить, например, к увеличению переноса хлорида в эпителиальных клетках бронхов человека, например, в случае одной или двух копий мутаций, например мутации ΔF508, по сравнению с введением только лумакафтора или ивакафтора. Другая комбинированная терапия, которая включает раскрытое соединение, может также включать эффективное количество считывающего агента (например, аталурен, NB124) и эффективное количество раскрытого соединения, которое может действовать как усилитель или как исправитель активности.

[70] Используемая в данном документе фраза «комбинированная терапия» относится к варианту осуществления, в котором пациенту совместно вводится раскрытое соединение, CFTR-усилитель и, факультативно, один или более агентов исправителей активности CFTR (например, VX-661 и/или лумакафтор) в рамках конкретного режима лечения, предназначенного для обеспечения благоприятного эффекта от совместного действия данных терапевтических агентов. Например, полезный эффект комбинации может включать, но не ограничивается ими, фармакокинетическое или фармакодинамическое совместное действие, возникающее в результате комбинации терапевтических агентов. Например, введение раскрытого соединения с одним усилителем или с исправителем активности CFTR (например, лумакафтор или VX-661) может приводить к уровню функции (например, при измерении с помощью хлоридной активности в клетках HBE или у пациентов, у которых есть мутация ΔF508), достигающему клинического улучшения (или улучшения) по сравнению с уровнем хлоридной активности в клетках или у пациентов с мутацией G551D, которые получали только один исправитель активности (например, лумакафтор или VX-661).Введение раскрытых терапевтических агентов в комбинации обычно осуществляется в течение определенного периода времени (обычно день, дни, недели, месяцы или годы в зависимости от выбранной комбинации).Комбинированная терапия предназначена для последовательного введения нескольких терапевтических агентов, то есть, когда каждый терапевтический агент вводят в другое время, а также введения данных терапевтических агентов или по меньшей мере двух из терапевтических агентов, существенно одновременным образом. Существенно одновременное введение может быть осуществлено, например, путем введения субъекту одной таблетки или капсулы, имеющей фиксированное отношение каждого терапевтического агента или в нескольких отдельных капсулах для каждого из терапевтических агентов. Последовательное или по существу одновременное введение каждого терапевтического агента может быть осуществлено любым подходящим путем, включая, но не ограничиваясь ими, пероральные пути, ингаляционные пути, внутривенные пути, внутримышечные пути и прямое поглощение через ткани слизистой оболочки. Терапевтические агенты можно вводить одним и тем же путем или разными путями. Например, первый терапевтический агент выбранной комбинации может вводиться внутривенной инъекцией или ингаляцией или распылителем, в то время как другие терапевтические агенты комбинации могут вводиться перорально. Альтернативно, например, все терапевтические агенты можно вводить перорально или все терапевтические агенты можно вводить путем внутривенной инъекции, ингаляции или распыления.

[71] Комбинированная терапия также может охватывать введение терапевтических агентов, как описано выше, в дальнейшей комбинации с другими биологически активными ингредиентами и немедикаментозной терапией. В тех случаях, когда комбинированная терапия дополнительно включает немедикаментозную терапию, лечение немедикаментозной терапией может проводиться в любое подходящее время если при этом достигается положительный эффект от сочетания терапевтических агентов и немедикаментозной терапии. Например, в соответствующих случаях полезный эффект все же достигается, когда немедикаментозное лечение временно удаляется из введения терапевтических агентов, скажем, на день, дни или даже недели.

[72] Компоненты раскрытой комбинации могут вводиться пациенту одновременно или последовательно. Понятно, что компоненты могут присутствовать в одном и том же фармацевтически приемлемом носителе и, следовательно, вводится одновременно. Альтернативно, активные ингредиенты могут присутствовать в отдельных фармацевтических носителях, таких как обычные пероральные лекарственные формы, которые могут вводиться либо одновременно, либо последовательно.

[73] Используемый в данном документе термин «фармацевтически приемлемая соль(и)» относится к солям кислотных или основных групп, которые могут присутствовать в раскрытых соединениях, используемых в раскрытых композициях. Соединения, включенные в настоящие композиции, которые являются основными по своей природе, способны образовывать широкий спектр солей с различными неорганическими и органическими кислотами. Кислотами, которые могут быть использованы для получения фармацевтически приемлемых кислотно-аддитивных солей таких основных соединений, являются кислоты, которые образуют нетоксичные кислотно-аддитивные соли, то есть соли, содержащие фармакологически приемлемые анионы, включая, но не ограничиваясь ими, малат, оксалат, хлорид, бромид, йодид, нитрат, сульфат, бисульфат, фосфат, кислый фосфат, изоникотинат, ацетат, лактат, салицилат, цитрат, тартрат, олеат, таннат, пантотенат, битартрат, аскорбат, сукцинат, малеат, гентизинат, фумарат, глюконат, глюкаронат, сахарат, формиат, бензоат, глутамат, метансульфонат, этансульфонат, бензолсульфонат, п-толуолсульфонат и памоат (т.е. 1,1'-метилен-бис-(2-гидрокси-3-нафтоат)).Соединения, включенные в настоящие композиции, которые являются кислыми по своей природе, способны образовывать основные соли с различными фармакологически приемлемыми катионами.Примерами таких солей являются соли щелочных или щелочноземельных металлов, в частности соли кальция, магния, натрия, лития, цинка, калия и железа. Соединения, включенные в настоящие композиции, которые включают основной или кислотный фрагмент, могут также образовывать фармацевтически приемлемые соли с различными аминокислотами. Соединения описания могут содержать как кислотные, так и основные группы; например, одну аминогруппу и одну карбоксильную группу. В таком случае соединение может существовать в виде кислотно-аддитивной соли, цвиттериона или соли основания.

[74] В одном варианте осуществления рассматриваемые способы могут включать, например, введение пролекарств соединений, описанных в данном документе, например пролекарств соединения формулы I или его фармацевтической композиции.

[75] Термин «пролекарство» относится к соединениям, которые трансформируют in vivo с получением описанного соединения или фармацевтически приемлемой соли, гидрата или сольвата соединения. Трансформация может происходить через различные механизмы (такие как посредством эстеразы, амидазы, фосфатазы, окислительного и восстановительного метаболизма) в различных местах (например, в просвете кишечника или при прохождении кишечника, в крови или печени). Пролекарства хорошо известны в данной области (например, см. Rautio, Kumpulainen, et al., Nature Reviews Drug Discovery 2008, 7, 255).Например, если соединение раскрытия или его фармацевтически приемлемая соль, гидрат или сольват соединения содержит функциональную группу карбоновой кислоты, пролекарство может содержать сложный эфир, образованный заменой атома водорода кислотной группы такой группой, как (C_1-8)алкил, (C_2-12) алкилкарбонилоксиметил, 1-(алкилкарбонилокси)этил, имеющий от 4 до 9 атомов углерода, 1-метил-1-(алкилкарбонилокси)-этил, имеющий от 5 до 10 атомов углерода, алкоксикарбонилоксиметил, имеющий от 3 до 6 атомов углерода, 1-(алкоксикарбонилокси) этил, имеющий от 4 до 7 атомов углерода, 1-метил-1-(алкоксикарбонилокси)этил, имеющий от 5 до 8 атомов углерода, N-(алкоксикарбонил)аминометил, имеющий от 3 до 9 атомов углерода, 1-(N-(алкоксикарбонил)амино)этил, имеющий от 4 до 10 атомов углерода, 3-фталидил, 4-кротонолактонил, гамма-бутиролактон-4-ил, ди-N,N-(C_{1- 2})алкиламино-(C_2-3)алкил (такой как β-диметиламиноэтил), карбамоил-(C _1-2)алкил, N,N-ди(C_1-2)алкилкарбамоил-(C_1-2)алкил и пиперидино-, пирроллино- или морфолино(C_2-3)алкил.

[76] Аналогично, если соединение раскрытия содержит спиртовую функциональную группу, пролекарство может быть образовано путем замещения атома водорода спиртовой группы такой группой, как (C_1-6)алкилкарбонилоксиметил, 1-((C_1-6) алкилкарбонилокси) этил, 1-метил-1 -((C_1-6)алкилкарбонилокси) этил(C_1-6)алкоксикарбонилокси)метил, N-(C_1-6) алкоксикарбониламинометил, сукциноил, (C_1-6)алкилкарбонил, α-амино(C_1-4)алкилкарбонил, арилалкилкарбонил и α-аминоалкилкарбонил, или α-аминоалкилкарбонил-α-аминоалкилкарбонил, где каждая α-аминоалкилкарбонильная группа независимо выбирается из встречающихся в природе L -аминокислот, P(O)(OH)₂, -P(O)(O(C_1-6)алкил)₂ или гликозил (радикал, образующийся в результате удаления гидроксильной группы в полуацетальной форме углевода).

[77] Если соединение раскрытия включает аминогруппу, пролекарство может быть образовано, например, путем образования амида или карбамата, N-алкилкарбонилоксиалкильного производного, (оксодиоксоленил)метилпроизводного, N-основания Манниха, имина или енамина. Кроме того, вторичный амин может метаболически расщепляться для получения биоактивного первичного амина или третичный амин может метаболически расщепляться для получения биоактивного первичного или вторичного амина.Например, см. Simplício, et al.,Molecules 2008, 13, 519 и ссылки.

[78] В некоторых вариантах осуществления, также рассматривается использование клатратов описанных в данном документе соединений, фармацевтических композиций, содержащих клатраты, и способов использования клатратов. В данном документе также рассматриваются клатраты описанного соединения или его фармацевтической композиции.

[79] Как обсуждалось выше, раскрытие также предусматривает введение фармацевтических композиций, содержащих фармацевтически приемлемый носитель или вспомогательное вещество и соединение, описанное в данном документе. Раскрытое соединение или его фармацевтически приемлемую соль, сольват, клатрат или пролекарство можно вводить в фармацевтических композициях, содержащих фармацевтически приемлемый носитель или вспомогательное вещество. Вспомогательное вещество может быть выбрано на основе ожидаемого пути введения композиции в терапевтических применениях. Способ введения композиции зависит от состояния, подлежащего лечению. Например, внутривенная инъекция может быть пригодна для лечения системного расстройства, а пероральное введение может быть подходящим для лечения желудочно-кишечного расстройства. Способ введения и дозировка вводимой композиции могут быть определены квалифицированным специалистом без дополнительного эксперимента в сочетании со стандартными исследованиями доза-реакция. Соответствующие обстоятельства, которые следует учитывать при принятии данного решения, включают состояние или условия, подлежащие лечению, выбор способа введения, возраст, вес и реакцию отдельного пациента, а также тяжесть симптомов пациента. Фармацевтическую композицию, включающую раскрытое соединение или фармацевтически приемлемую соль, сольват, клатрат или пролекарство, можно вводить различными путями, включая, но не ограничиваясь ими, парентерально, перорально, легочно, офтальмологически, назально, ректально, вагинально, местно, трансбуккально, трансдермально, внутривенно, внутримышечно, подкожно, внутрикожно, внутриглазно, внутрицеребрально, внутрилимфатически, внутрисуставно, интратекально и внутрибрюшинно. Композиции могут также включать, в зависимости от желаемой композиции, фармацевтически приемлемые нетоксичные носители или разбавители, которые определяются как носители, обычно используемые для приготовления фармацевтических композиций для введения животным или человеку. Разбавитель выбирают так, чтобы не влиять на биологическую активность фармакологического агента или композиции. Примерами таких разбавителей являются дистиллированная вода, физиологический фосфатный буффер, растворы Рингера, раствор декстрозы и раствор Хэнкса.Кроме того, фармацевтическая композиция или состав могут также включать другие носители, вспомогательные вещества или нетоксичные, нетерапевтические, неиммуногенные стабилизаторы и тому подобное. Фармацевтические композиции могут также включать большие, медленно метаболизируемые макромолекулы, такие как белки, полисахариды, такие как хитозан, полимолочные кислоты, полигликолевые кислоты и сополимеры (такие как функционализированная латексом SEPHAROSE™, агароза, целлюлоза и тому подобное), полимерные аминокислоты, сополимеры аминокислот, и липидные агрегаты (такие как капельки масла или липосомы).

[80] Раскрытые композиции можно вводить парентерально, например, внутривенной, внутримышечной, интратекальной или подкожной инъекцией. Парентеральное введение может быть осуществлено путем включения композиции в раствор или суспензию. Такие растворы или суспензии могут также включать стерильные разбавители, такие как вода для инъекций, физиологический раствор, фиксированные масла, полиэтиленгликоли, глицерин, пропиленгликоль или другие синтетические растворители. Парентеральные составы могут также включать антибактериальные агенты, такие как, например, бензиловый спирт или метилпарабен, антиоксиданты, такие как, например, аскорбиновая кислота или бисульфит натрия и хелатирующие агенты, такие как ЭДТА. Также могут быть добавлены буферы, такие как ацетаты, цитраты или фосфаты и агенты для регулировки тоничности, такие как хлорид натрия или декстроза. Парентеральный состав может быть заключен в ампулы, одноразовые шприцы или многоразовые флаконы из стекла или пластика.

[81] Кроме того, в композициях могут присутствовать вспомогательные вещества, такие как смачивающие или эмульгирующие агенты, поверхностно-активные вещества, рН буферные вещества и тому подобное. Другими компонентами фармацевтических композиций являются вещества нефтяного, животного, растительного или синтетического происхождения, например арахисовое масло, соевое масло и минеральное масло. В общем, гликоли, такие как пропиленгликоль или полиэтиленгликоль, являются подходящими жидкими носителями, в особенности для инъекционных растворов.

[82] Инъецируемые составы могут быть получены либо в виде жидких растворов, либо суспензий; также могут быть получены твердые формы, пригодные для растворения или суспензии в жидких носителях до инъекции. Состав также можно эмульгировать или инкапсулировать в липосомах или микрочастицах, таких как полилактид, полигликолид или сополимер для усиления вспомогательного эффекта, как описано выше [Langer, Science, 249: 1527, 1990 и Hanes, Advanced Drug Delivery Reviews 28: 97- 119, 1997].Композиции и фармакологические агенты, описанные в данном документе, можно вводить в форме депо-инъекции или состава имплантата, который может быть приготовлен таким образом, чтобы обеспечить устойчивое или периодичное высвобождение активного ингредиента.

[83] Дополнительные композиции, подходящие для других способов введения, включают пероральные, интраназальные и легочные составы, суппозитории, средства для трансдермального применения и окулярной доставки. Для суппозиториев связующие вещества и носители включают, например, полиалкиленгликоли или триглицериды; такие суппозитории могут быть образованы из смесей, содержащих активный ингредиент, в диапазоне от около 0,5% до около 10% или от около 1% до около 2%.Пероральные составы включают вспомогательные вещества, такие как маннит, лактоза, крахмал, стеарат магния, сахарин натрия, целлюлоза и карбонат магния фармацевтической чистоты. Местное применение может подразумевать трансдермальную или внутрикожную доставку. Трансдермальную доставку можно проводить с помощью пластыря для кожи или с помощью трансферосом.[Pauletal., Eur. J. Immunol. 25: 3521-24, 1995; Cevc et al., Biochem. Biophys. Acta 1368: 201-15, 1998].

[84] Для целей перорального терапевтического введения в фармацевтические композиции могут быть включены вспомогательные вещества и композиции могут использоваться в форме таблеток, пастилок, капсул, эликсиров, суспензий, сиропов, вафель, жевательных резинок и тому подобного. Таблетки, пилюли, капсулы, пастилки и тому подобное могут также содержать связующие вещества, вспомогательные вещества, дезинтегрирующий агент, смазывающие вещества, скользящие вещества, подсластители и ароматизаторы. Некоторые примеры связующих веществ включают микрокристаллическую целлюлозу, трагакантовую камедь или желатин. Примеры вспомогательных веществ включают крахмал или лактозу. Некоторые примеры дезинтегрирующих агентов включают альгиновую кислоту, кукурузный крахмал и тому подобное. Примеры смазывающих веществ включают стеарат магния или стеарат калия. Примером скользящего вещества является коллоидный диоксид кремния. Некоторые примеры подсластителей включают сахарозу, сахарин и тому подобное. Примеры ароматизаторов включают перечную мяту, метилсалицилат, апельсиновый ароматизатор и тому подобное. Материалы, используемые при приготовлении различных композиций, должны быть фармацевтически чистыми и нетоксичными в используемых количествах. В другом варианте осуществления композицию вводят в виде таблетки или капсулы.

[85] Различные другие материалы могут присутствовать в виде покрытий или модифицировать физическую форму единицы дозировки. Например, таблетки могут быть покрыты шеллаком, сахаром или же и тем и другим. Сироп или эликсир могут содержать в дополнение к активному ингредиенту сахарозу в качестве подсластителя, метил и пропилпарабен в качестве консервантов, краситель и ароматизатор, такие как вишневый или оранжевый ароматизатор и тому подобное. Для вагинального введения фармацевтическая композиция может быть представлена вагинальным суппозиторием, тампоном, кремом, гелем, пастой, пеной или спреем.

[86] Фармацевтическую композицию также можно вводить путем назального введения. В данном документе назальное введение или введение через нос включает введение композиции в слизистые оболочки носового прохода или носовой полости пациента.В данном документе фармацевтические композиции для назального введения включают терапевтически эффективные количества соединений, полученных хорошо известными способами, которые можно вводить, например, в виде назального спрея, носовых капель, суспензии, геля, мази, крема или порошка. Введение композиции также может происходить с использованием носового тампона или носовой губки.

[87] Для местного введения подходящие составы могут включать биосовместимое масло, воск, гель, порошок, полимер или другие жидкие или твердые носители. Такие составы можно вводить путем нанесения непосредственно на пораженные ткани, например, жидкую композицию для лечения инфекции конъюнктивальной ткани можно вводить по каплям в глаз субъекта или наносить кремовую композицию на кожу.

[88] Ректальное введение включает введение фармацевтических композиций в прямую кишку или толстую кишку.Это может быть достигнуто с помощью суппозиториев или клизмы.Композиции суппозиториев могут быть легко получены способами, известными в данной области. Например, композиции для суппозиториев могут быть получены путем нагревания глицерина до примерно 120°С, растворения фармацевтической композиции в глицерине, смешивания нагретого глицерина, после чего можно добавлять очищенную воду и заливать горячую смесь в форму для суппозиториев.

[89] Трансдермальное введение включает чрескожное всасывание композиции через кожу. Трансдермальные составы включают пластыри, мази, кремы, гели, бальзамы и тому подобное.

[90] В дополнение к обычному значению введения составов, описанных в данном документе, в любую часть, ткань или орган, чья первичная функция представляет собой газообмен с внешней средой, для целей настоящего раскрытия, смысл термина «легочный» также включает ткани или полости, относящиеся к дыхательным путям, в частности, носовые пазухи. Для легочного введения, аэрозольный препарат, содержащий активный агент, ручной насос, спрей или распылитель под давлением дозирующего ингалятора, а также рассматриваются сухие порошкообразные составы. Подходящие композиции этого типа могут также включать другие агенты, такие как антистатики, для поддержания раскрытых соединений в виде эффективных аэрозолей.

[91] Устройство доставки лекарственного средства для доставки в виде аэрозолей содержит подходящий контейнер для аэрозоля с дозирующим клапаном, содержащим фармацевтический аэрозольный состав, согласно описанию, и корпус исполнительного механизма, приспособленный для удержания контейнера и осуществления доставки лекарственного средства. Балон в устройстве доставки лекарственного средства имеет пространство в верхней части, составляющее более 15% от общего объема контейнера. Часто соединение, предназначенное для легочного введения, растворяют, суспендируют или эмульгируют в смеси растворителя, поверхностно-активного вещества и пропеллента. Смесь содержится под давлением в баллоне, который герметизирован дозирующим клапаном.

[92] Раскрытие изобретения также охватывает лечение состояния, связанного с дисфункцией протеостаза у субъекта, включающее введение указанному субъекту эффективного количества раскрытого соединения, которое усиливает, улучшает или восстанавливает протеостаз белка. Протеостаз относится к гомеостазу белка. Дисфункция в белковом гомеостазе является следствием неправильного свертывания белка, агрегации белка, нарушения миграции белка или деградации белка.Например, изобретение предусматривает введение раскрытого соединения, например, соединения формулы I, которое исправляет неправильное свертывание белка, уменьшает агрегацию белка, исправляет или восстанавливает миграцию белка и/или влияет на деградацию белков для лечения состояния, связанного с дисфункцией в протеостазе. В некоторых аспектах вводят раскрытое соединение, например соединение формулы I, которое исправляет неправильное свертывание белка и/или исправляет миграция белка. При кистозном фиброзе мутирующим или дефектным ферментом является регулятор трансмембранной проводимости при кистозном фиброзе (CFTR).Одной из наиболее распространенных мутаций этого белка является ΔF508, который представляет собой делецию (Δ) трех нуклеотидов, что приводит к потере аминокислоты фенилаланина (F) в положении 508 (508) в белке. Как описано выше, мутантный регулятор трансмембранной проводимости при кистозном фиброзе существует в неправильно свернутом состоянии и характеризуется измененной миграцией по сравнению с CFTR дикого типа. Дополнительные иллюстративные белки, которые могут иметь дисфункцию в протеостазе, например, которые могут существовать в неправильно свернутом состоянии, включают, но не ограничиваются ими, глюкоцереброзидазу, гексозамин А, аспартилглюкозаминидазу, α-галактозидазу А, транспортер цистеина, кислотную церемидазу, кислотную α-L-фукозидазу, защитный белок, катепсин A, кислотную β-глюкозидазу, кислотную β-галактозидаза, идуронат-2-сульфатазу, α-L-идуронидазу, галактоцереброзидазу, кислотную α-маннозидазу, кислотную β-маннозидазу, арилсульфатазу B, арилсульфатазу A, N- ацетилгалактозамин-6-сульфатсульфатазу, кислотную β-галактозидазу, N- ацетилглюкозамин-1-фосфотрансферазу, кислотную сфингмиелиназу, NPC-1, кислотную α-глюкозидазу, β-гексоамин B, гепарин N- сульфатазу, α-N- ацетилглюкозаминидазу, α-глюкозаминилин N -ацетилтрансферазу, N -ацетилглюкозамин-6-сульфат сульфатазу, α-N -ацетилгалактозаминидазу, α-нейрамидазу, β-глюкуронидазу, β-гексозамин А и кислую липазу, полиглутамин, α-синуклеин, TDP-43, супероксиддисмутазу (СОД), Аβ пептид, тау-белок, транстиретин и инсулин.Соединения формулы I могут быть использованы для восстановления протеостаза (например, правильного свертывания и/или изменения перемещения) белков, описанных выше.

[93] Заболевания, связанные с конформацией белков, охватывают усиление функциональных нарушений и снижение функциональных нарушений. В одном варианте осуществления заболевание, связанное с конформацией белка, проявляется как усиление функционального расстройства. Термины «усиление функционального расстройства», «усиление функционального заболевания», «усиление токсического функционального расстройства» и «усиление токсического функционального заболевания» используются в данном документе взаимозаменяемо. Усиление функционального расстройства представляет собой заболевание, характеризующееся повышенной протеотоксичностью, связанной с агрегацией. При данных заболеваниях агрегация превышает внутренний и/или наружный клиренс клетки.Усиление функциональных заболеваний включает, но не ограничивается ими, нейродегенеративные заболевания, связанные с агрегацией полиглютамина, заболевания связанными с тельцами Леви, амиотрофический боковой склероз, связанные с транстиретином болезни агрегации, болезнь Альцгеймера, болезнь Мачадо-Иосифа, церебральную B-амилоидную ангиопатию, дегенерацию клеток ганглиона сетчатки (прогрессирующий супрануклеарный паралич, кортикобазальная дегенерация, лобно-височная лобарная дегенерация), церебральное кровоизлияние с амилоидозом, болезнь Александра, серпинопатии, семейную амилоидозную невропатию, сенильный системный амилоидоз, амилоидоз ApoAI, амилоидоз ApoAII, амилоидоз ApoAIV, семейный амилоидоз финского типа, амилоидоз лизоцима, амилоидоз фибриногена, амилоидоз диализа, миозит/миопатию с включенными тельцами, катаракты, карциному медуллярной щитовидной железы, сердечный предсердный амилоидоз, пролактиному гипофиза, наследственную дистрофию роговицы, кожный лишайный амилоидоз, амилоидоз лактоферрина роговицы, амилоидоз лактоферрина роговицы, легочный альвеолярный протеиноз, одонтогенный опухолевый амилоид, семенной везикулярный амилоид, серповидно-клеточную анемию, миопатию с критической болезнью, болезнь фон Хиппель-Линдау, спиноцеребеллярную атаксию 1, синдром Ангельмана, невропатию гигантских аксонов, миопатию с включенными тельцами с болезнью костей Педжета, лобно-височную деменцию (ИМБПР) и прионные заболевания. Нейродегенеративные заболевания, связанные с агрегацией полиглутамина включают, но не ограничивается ими, болезнь Хантингтона, дентаторубральную и паллидолюзийную атрофии, несколько форм спино-мозжечковой атаксии, и спинальную и бульбарную мышечные атрофии.Болезнь Альцгеймера характеризуется образованием двух типов агрегатов: внеклеточных агрегатов A βпептида и внутриклеточных агрегатов связанного с микротрубочками тау-белка.Связанные с транстиретином агрегационные заболевания включают, например, старческие системные амилоидозы и семейную амилоидозную невропатию. Болезни телец Леви характеризуются агрегацией белка α-синуклеина и включают, например, болезнь Паркинсона, деменцию с тельцами Леви (LBD) и множественную системную атрофию (SMA). Прионные заболевания (также известные как трансмиссивные губчатые энцефалопатии или TSE) характеризуются агрегацией прионных белков. Примерами прионных заболеваний человека являются болезнь Крейтцфельдта-Якоба (CJD), вариант болезни Крейтцфельдта-Якоба, синдром Герстмана-Штрауслера-Шейнкера, смертельная семейная бессонница и куру. В другом варианте осуществления неправильно свернутый белок представляет собой альфа-1 анти-трипсин.

[94] В дополнительном варианте осуществления заболевание, связанное с конформацией белка, представляет собой расстройство потери функциональности. Термины «заболевание потери функциональности» и «расстройство потери функциональности» используются в данном документе взаимозаменяемо. Заболевания потери функциональности представляют собой группу заболеваний, характеризующихся неэффективным свертыванием белка, что приводит к чрезмерной деградации белка. Заболевания потери функциональности включают, например, заболевания лизосомногонакопления. Заболевания лизосомного накопления представляют собой группу заболеваний, характеризующихся специфическим дефицитом лизосомного фермента, который может возникать в различных тканях, что приводит к накоплению молекул, обычно деградируемых дефицитным ферментом. Дефицит лизосомального фермента может быть дефицитом лизосомальной гидролазы или белка, вовлеченного в лизосомальное перемещение. Заболевания лизосомногонакопления включают, но не ограничиваются ими, аспартилглюкозаминарию, болезнь Фабри, болезнь Батта, цистиноз, фарбер, фукозидоз, галактазидозиалид, болезнь Гоше (включая типы 1, 2 и 3), ганглиозидоз Gm1, болезнь Хантера, болезнь Херлера-Шейе, болезнь Краббе, α-маннозидоз, β-маннозидоз, болезнь Марото-Лами, метахроматическую лейкодистрофию, синдром Моркио А, синдром Моркио Б, муколипидоз II, муколипидоз III, болезнь Ниманна-Пика (включая типы А, В и С), болезнь Помпе, болезнь Сандхоффа, синдром Санфилиппо (включая типы A, B, C и D), болезнь Шиндлера, болезнь Шиндлера-Канзаки, сиалидоз, синдром Слай, болезнь Тай-Саха и болезнь Вольмана.

[95] В другом варианте осуществления заболеванием, связанным с дисфункцией в протеостазе, является сердечно-сосудистое заболевание. Сердечно-сосудистые заболевания включают, но не ограничиваются ими, болезнь коронарной артерии, инфаркт миокарда, инсульт, рестеноз и артериосклероз. Состояния, связанные с дисфункцией протеостаза, также включают ишемические состояния, такие как травма ишемии/реперфузии, миокардиальная ишемия, стабильная стенокардия, нестабильная стенокардия, инсульт, ишемическая болезнь сердца и церебральная ишемия.

[96] В еще одном варианте осуществления лечение заболевания, связанного с дисфункцией в протеостазе, представляет собой диабет и/или осложнения диабета, включая, но не ограничиваются ими, диабетическую ретинопатию, кардиомиопатию, невропатию, нефропатию и нарушение заживления ран.

[97] В дополнительном варианте осуществления лечение заболевания, связанного с дисфункцией в протеостазе, представляет собой окулярное заболевание, включающее, но не ограничиваются ими, возрастную макулярную дегенерацию (AMD), диабетический макулярный отек (DME), диабетическую ретинопатию, глаукому, катаракту, пигментный ретинит (RP) и сухую макулярную дегенерацию.

[98] В еще дополнительных вариантах раскрытый способ направлен на лечение заболевания, связанного с дисфункцией в протеостазе, где заболевание поражает дыхательную систему или поджелудочную железу. В некоторых дополнительных вариантах осуществления рассматриваемый способ охватывает лечение состояния, выбранного из группы, состоящей из полиэндокринопатии/ гиперинсулинемии, сахарного диабета, синдрома Шарко-Мари-Зуба, болезни Пелизея-Мерцбахера и синдрома Горхама.

[99] Дополнительные состояния, связанные с дисфункцией протеостаза, включают гемоглобинопатии, воспалительные заболевания, промежуточные заболевания филаментов, вызванные лекарствами повреждения легких и потерю слуха. Например, в данном документе представлены способы лечения гемоглобинопатий (например, серповидноклеточной анемии), воспалительного заболевания (такого как воспалительное заболевание кишечника, колит, анкилозирующий спондилоартрит), промежуточных заболеваний филаментов (таких как безалкогольная и алкогольная жирная болезни печени) и вызванного лекарствами повреждения легких (например, вызванного метотрексатом повреждения легких).В другом варианте осуществления предлагаются способы лечения потери слуха, такие как потеря слуха, вызванная шумом, потеря слуха, вызванная аминогликозидом, и потеря слуха, вызванная цисплатином, включающая введение раскрытого соединения.

[100] Дополнительные условия включаютте условия, которые связаны с дефектом в миграции белка и которые можно лечить в соответствии с раскрытыми способами, включая мутации PGP, мутации, связанные с миграцией HERG, нефрогенный мутации в несахрном диабете в рецепторе аргинин-вазопрессина 2, стойкие мутации в гиперинсулинемической гипогликемии у младенцев (PHH1) в рецепторе сульфонилмочевины 1 и α1AT.

[101] Раскрытие иллюстрируется следующими примерами, которые никоим образом не должны ограничивать данное раскрытие.

ПРИМЕРЫ

[102] Соединения, описанные в данном документе, могут быть получены несколькими способами на основе изложенных в данном документе принципов и способов синтеза, известных в данной области. В описании синтетических способов, описанных ниже, следует понимать, что все предлагаемые условия реакции, включая выбор растворителя, реакционной атмосферы, температуры реакции, продолжительности эксперимента и способов обработки, могут быть выбраны как стандартные условия, если не указано иное. Специалисту в области органического синтеза понятно, что функциональность, присутствующая в различных частях молекулы, должна быть совместима с предложенными реагентами и реакциями. Заместители, не совместимые с условиями реакции, будут очевидны специалисту в данной области техники, и поэтому указываются альтернативные способы. Исходные материалы для примеров являются либо коммерчески доступными, либо легко получаемы стандартными способами из известных материалов. По меньшей мере некоторые из соединений, обозначенных в данном документе как «промежуточные соединения», рассматриваются как соединения по данному изобретению.

Общие методики:

[103] Общие методики получения соединений по данному изобретению описаны на схемах I-IV. Раскрытые соединения могут быть получены, например, путем катализируемой переходным металлом реакции сочетания соответствующего замещенного силильного реагента с соответствующим функционализированным производным фенола с последующим восстановлением нитро-группы и образованием амидной связи (схема I) или с помощью катализируемой переходным металлом реакции сочетания соответствующего замещенного силильного реагента с соответствующим функционализированным хинолонокарбоксамидом (схемы II-IV).

Схема I:

Схема II:

Схема III:

Схема IV:

Список сокращений

Сокращение Название к.т. комнатная температура ТГФ тетрагидрофуран MeCN Ацетонитрил ДМП 1,3-диметил-3,4,5,6-тетрагидро-2(1H)-пиримидинон ДХМ Дихлорметан MeOH Метанол EtOAc Этилацетат ДМФ N,N- диметилформамид DMAP 4-(диметиламино)пиридин AcOH уксусная кислота NaOAc ацетат натрия HATU 1-[бис(диметиламино)метилен]-1Н-1,2,3-триазоло[4,5-b]пиридиний-3-оксида гексафторфосфат DIEA N,N-диизопропилэтиламин ТЭА Триэтиламин dba дибензилиденацетон cod цис, цис-1,5-циклооктадиен JohnPhos (2-бифенил)ди-трет-бутилфосфин Ni(OAc)₂ ацетат никеля (II) NIS N-йодсукцинимид атм. Атмосфера NaBH(OAc)₃ триацетоксиборгидрид натрия конц. концентрированный ЭСИ электроспрей-ионизация поз. положительный отр. отрицательный Вычисл. вычисленный

Пример 1. Получение N-[2-трет-бутил-5-гидрокси-4-(триметилсилил)фенил]-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамида (соединение 1)

[104] A.2-Бром-4-трет-бутилфенилметилкарбонат.В круглодонную колбу емкостью 500 мл помещали раствор 2-бром-4-трет-бутилфенола (60 г, 263,1 ммоль), ТЭА (53,145 г, 525 ммоль) и DMAP (321 мг, 26,31 ммоль) в ДХМ (900 мл), затем раствор охлаждали до 0°Cи при перемешивании по каплям добавляли метилхлорформиат (29,7 г, 315 ммоль).Реакционную смесь перемешивали в течение 5 ч при 0°С, гасили добавлением 500 мл воды/льда и экстрагировали ДХМ (3×500 мл).Органические экстракты объединяли, сушили над безводным Na₂SO₄ и упаривали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией, элюируя EtOAc/петролейным эфиром (1:100-2:100), получая 60,6 г указанного в заголовке соединения в виде светло-желтого масла.

[105] B.2-Бром-4-трет-бутил-5-нитрофенилметилкарбонат.К концентрированной серной кислоте (500 мл), охлажденной до 0°C, добавляли небольшими порциями 2-бром-4-трет-бутилфенилметилкарбонат (20 г, 69,9 ммоль, полученный на предыдущей стадии).После завершения добавления, добавляли небольшими порциями KNO₃ (8,474 г, 83,9 ммоль) со скоростью, поддерживающей температуру ниже 0°С. Реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре, затем выливали в 100 мл воды/льда и экстрагировали ДХМ (3×100 мл).Органические экстракты объединяли, сушили над безводным Na₂SO₄ и упаривали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя EtOAc/петролейным эфиром (1: 9), получая 20 г указанного в заголовке соединения в виде светло-желтого масла.¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): δ 7,80 (с, 1H), 7,31 (с, 1H), 5,32 (с, 1H), 4,00 (с, 3H), 1,48 (с, 9H).

[106] C. 4-трет-Бутил-5-нитро-2-(триметилсилил)фенол.В 40-мл герметично закрывающуюся пробирку, продутую и заполненную инертной атмосферой азота, помещали раствор 2-бром-4-трет-бутил-5-нитрофенилметилкарбоната (1 г, 3,01 ммоль, полученого на предыдущей стадии), гексаметилдисилан (8,8 г, 60 ммоль), Pd₂(dba)₃ CHCl₃ (155 мг, 0,15 ммоль), JohnPhos (134 мг, 0,45 ммоль) и KF/Al₂O₃ (50%, 1,205 г) в DMPU (10 мл).Реакционную смесь перемешивали в течение 6 ч при 110°С, затем охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат разбавляли 100 мл воды и экстрагировали EtOAc (3×50 мл).Органические экстракты объединяли, сушили над безводным Na₂SO₄ и упаривали при пониженном давлении. Данную реакцию повторяли еще 49 раз, затем объединенный неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией, элюируя EtOAc/петролейным эфиром (1:20), получая 30 г 4-трет-бутил-5-нитро-2-(триметилсилил) фенола в виде желтого твердого вещества.Масс-спектр (ЖХМС, ЭСИ пол.): вычислено для C₁₃H₂₂NO₃Si⁺: 268,1 (М+Н); Найдено: 268,1.

[107] D. 5-амино-4-трет-бутил-2-(триметилсилил) фенол.В круглодонную колбу емкостью 500 мл помещали раствор 4-трет-бутил-5-нитро-2-(триметилсилил)фенола (10 г, 37,5 ммоль, полученного на предыдущей стадии) и Ni(OAc)₂ (10 г, 56,8 ммоль) в MeOH/ТГФ (80/80 мл), затем раствор охлаждали до 0°С и добавляли порциями NaBH₄ (5 г, 132 ммоль).Реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин при комнатной температуре, затем твердые вещества удаляли фильтрованием. К фильтрату добавляли 300 мл насыщенного водного раствора NH₄Cl и экстрагировали EtOAc (3×300 мл).Органические экстракты объединяли, сушили над безводным Na₂SO₄ и затем разбавляли 150 мл ДМФ. Полученный раствор упаривали при пониженном давлении для удаления низкокипящих растворителей, получая раствор с ДМФ указанного в заголовке соединения, который использовали непосредственно на следующей стадии. Эту реакцию повторяли еще 2 раза и три партии объединяли. Масс-спектр (ЖХМС, ЭСИ пол.): вычислено для С₁₃Н₂₄НОSi^+: 238,2 (М+Н); Найдено: 238,2.

[108] E. N-[2-трет-бутил-5-гидрокси-4-(триметилсилил)фенил] -4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамид. В 1-литровую круглодонную колбу помещали раствор 5-амино-4-трет-бутил-2-(триметилсилил)фенола в ДМФ (450 мл, полученного на предыдущей стадии), затем добавляли 4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновой кислоты (21 г, 0,11 моль), HATU (50 г, 0,13 моль) и ТЭА (33 г, 0,33 моль).Реакционную смесь перемешивали в течение 48 ч при комнатной температуре, затем разбавляли 300 мл воды и экстрагировали EtOAc (3×300 мл).Органические экстракты объединяли, сушили над безводным Na₂SO₄ и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (ВЭЖХ-10: колонка, X Bridge C18 OBD Prep Column, 19 мм×250 мм, подвижная фаза, вода (10 ммоль/л NH₄HCO₃) и MeCN (70% MeCN до 90% за 6 мин), детектор УФ 254/220 нм), получая 5,13 г указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества. Масс-спектр (ЖХМС, ЭСИ пол.): вычислено для C₂₃H₂₉N₂O₃Si⁺: 409,2 (М+Н); Найдено: 409,1.¹H ЯМР (300 МГц, ДМСО-d₆): δ 12,90 (с, 1H), 11,91 (с, 1H), 9,28 (с, 1H), 8,88 (с, 1H), 8.35-8.32 (м, 1H), 7,82-7,74 (м, 2H), 7,55-7,49 (м, 1H), 7,26 (с, 1H), 7,16 (с, 1H), 1,39 (с, 9H), 0,25 (с, 9H).Чистота по ВЭЖХ (254 нм): 96,2%.

Пример 2. Получение N-[2-трет-бутил-4-(этилдиметилсилил)-5-гидроксифенил]-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамида (соединение 2).

[109] A. 4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбонилхлорид.В круглодонную колбу емкостью 500 мл помещали раствор 4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновой кислоты (6 г, 31,72 ммоль) в ДХМ (250 мл), ТЕА (6,4 г, 63,25 ммоль), затем раствор охлаждали до 0°С и по каплям при перемешивании добавляли тионилхлорид (7,49 г).Реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при 50°С, затем упаривали при пониженном давлении, получая 5,5 г указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества.

[110] B. 3-Амино-4-трет-бутилфенилметилкарбонат.В круглодонную колбу емкостью 500 мл помещали раствор 2-бром-4-трет-бутил-5-нитрофенилметилкарбоната (10 г, 30,11 ммоль, полученный в примере 1, стадия B) в MeOH (300 мл), затем добавляли Pd на углероде (1 г).Полученный раствор дегазировали и заполняли H₂ (5 атм) и перемешивали в течение 16 ч при комнатной температуре.H₂ продували, затем твердые вещества удаляли фильтрованием. Фильтрат упаривали при пониженном давлении, получая 6,3 г указанного в заголовке соединения в виде коричневого твердого вещества. Масс-спектр (ЖХМС, ЭСИ пол.): вычислено для C₁₂H₁₈NO₃⁺: 224,1 (М+Н); Найдено: 224,1.

[111] C. 5-Амино-4-трет-бутил-2-йодфенилметилкарбонат.В 100-мл круглодонную колбу помещали раствор 3-амино-4-трет-бутилфенилметилкарбоната (6,3 г, 28,22 ммоль, полученного на предыдущей стадии) и NIS (4,5 г, 20,00 ммоль) в ДМФ (40 мл).Реакционную смесь перемешивали в течение 1,5 ч при комнатной температуре, гасили добавлением 50 мл воды и экстрагировали EtOAc (3×50 мл).Органические экстракты объединяли и упаривали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией, элюируя EtOAc/петролейным эфиром (1: 2), получая 9,1 г указанного в заголовке соединения в виде коричневого масла. Масс-спектр (ЖХМС, ЭСИ пол.): вычислено для C₁₂H₁₇INO₃⁺: 350,0 (M+H); 350,0.

[112] D. 4-трет-бутил-2-йод-5-(4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-амидо) фенилметилкарбонат. В 250-мл круглодонную колбу помещали раствор 5-амино-4-трет-бутил-2-йодфенилметилкарбоната (3,49 г, 10,00 ммоль, полученного на предыдущей стадии) и DIEA (3,255 г, 24,95 ммоль) в ДХМ (100 мл), затем добавляли 4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбонилхлорид (4,14 г, 19,94 ммоль, полученный на стадии А).Реакционную смесь перемешивали в течение 2 дней при комнатной температуре, затем промывали водой (3×50 мл), сушили над Na₂SO₄ и упаривали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией, элюируя ДХМ/MeOH (20: 1), получая 1,2 г указанного в заголовке соединения в виде коричневого твердого вещества. Масс-спектр (ЖХМС, ЭСИ пол.): вычислено для C₂₂H₂₂IN₂O₅⁺: 521,1 (M+H); Найдено: 521,0.

[113] E. N-[2-трет-бутил-4-(этилдиметилсилил)-5-гидроксифенил]-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамид.В 8-мл герметично закрывающуюся пробирку, продутую и заполненную инертной атмосферой азота, помещали раствор 4-трет-бутил-2-йод-5-(4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-амидо)фенилметилкарбоната (200 мг, 0,38 ммоль, полученного на предыдущей стадии) в DMPU (2,5 мл), затем этилдиметилсилан (136 мг, 1,54 ммоль), [Rh(cod)₂]BF₄ (8 мг, 0,02 ммоль) и K₃PO₄ (123 мг, 0,58 ммоль).Реакционную смесь перемешивали в течение 16 ч при 60°С, затем охлаждали до комнатной температуры и фильтровали.Фильтрат разбавляли 50 мл воды, затем экстрагировали EtOAc (3×50 мл). Органические экстракты объединяли, сушили над безводным Na₂SO₄ и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (ВЭЖХ-10: колонка, X Bridge C18 OBD Prep Column, 10мкм, 19 мм×250 мм, подвижная фаза, вода (10 ммоль/л NH₄HCO₃) и MeCN (60,0% MeCN до 81,0% за 10 мин), детектор УФ 254/220 нм), получая 12,7 мг указанного в заголовке соединения в виде серого твердого вещества. Масс-спектр (ЖХМС, ЭСИ пол.): вычислено для C₂₄H₃₁N₂O₃Si⁺: 423,2 (М+Н); Найдено: 423,2.¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆): δ 12,90 (д, J=6,8 Гц, 1H), 11,90 (с, 1H), 9,25 (с, 1H), 8,70 (д, J=6,4 Гц, 1H), 8,33 (д, J=8,4 Гц, 1H), 7,90-7,70 (м, 2H), 7,52 (т, J=7,6 Гц, 1H), 7,25 (с, 1H), 7,16 (с, 1H), 1,39 (с, 9H), 0,94 (т, J=7,6 Гц, 3H), 0,76 (кв, J=7,6 Гц, 2H), 0,22 (с, 6H).Чистота по ВЭЖХ (254 нм): 96,9%.

Пример 3. Получение N-[2-трет-бутил-4-[диэтил(метил)силил]-5-гидроксифенил]-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамида (соединение 3).

[114] A. N-[2-трет-бутил-4-[диэтил(метил)силил]-5-гидроксифенил]-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамид.В 20-млгерметично закрывающуюся пробирку, продутую и заполненную инертной атмосферой азота, помещали раствор 4-трет-бутил-2-йод-5-(4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-амидо) фенилметилкарбоната (200 мг, 0,38 ммоль, полученного в примере 2, стадия D) в DMPU (2,5 мл), затем добавляли диэтил(метил)силан (157 мг, 1,54 ммоль), [Rh(cod)₂]BF₄ (7,8 мг, 0,02 ммоль) и K₃PO₄ (123 мг, 0,58 ммоль).Реакционную смесь перемешивали в течение 16 ч при 60°С, затем охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат разбавляли 50 мл воды, затем экстрагировали EtOAc (3×50 мл).Органические экстракты объединяли, сушили над безводным Na₂SO₄ и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (ВЭЖХ-10: колонка, X Bridge C18 OBD Prep Column, 10 мкм, 19 мм×250 мм, подвижная фаза, вода (10 ммоль/л NH₄HCO₃) и MeCN (63,0% MeCN до 85,0% за 10 мин), детектор УФ 254/220 нм), получая 20,2 мг указанного в заголовке соединения в виде серого твердого вещества. Масс-спектр (ЖХМС, ЭСИ пол.): вычислено для C₂₅H₃₃N₂O₃Si⁺: 437,2 (М+Н); Найдено: 437,2.¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆): δ 12,90 (д, J=6,4 Гц, 1H), 11,90 (с, 1H), 9,23 (с, 1H), 8,87 (д, J=6,8 Гц, 1H), 8,33 (д, J=8,0 Гц, 1H), 7,90-7,70 (м, 2H), 7,52 (т, J=7,6 Гц, 1H), 7,25 (с, 1H), 7,17 (с, 1H), 1,39 (с, 9H), 0,94 (т, J=8,0 Гц, 6H), 0,77 (кв, J=7,6 Гц, 4H), 0,20 (с, 3H).Чистота по ВЭЖХ (254 нм): 98,7%.

Пример 4: Получение N-(2-(трет-бутил)-5-гидрокси-4-(триэтилсилил)фенил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамида (соединение 4).

[115] A. 5-Амино-2-бром-4-трет-бутилфенилметилкарбонат.В 100-мл круглодонную колбу помещали раствор 2-бром-4-трет-бутил-5-нитрофенилметилкарбоната (3,3 г, 10 ммоль, полученного в примере 1, стадия B) в ТГФ/AcOH (60/15 мл), затем добавляли Fe (2,8 г, 50 ммоль).Реакционную смесь перемешивали в течение 5 ч при комнатной температуре, затем твердые вещества удаляли фильтрованием. Фильтрат упаривали при пониженном давлении.Остаток очищали колоночной хроматографией, элюируя EtOAc/петролейным эфиром (1:10), получая 2,6 г указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества. Масс-спектр (ЖХМС, ЭСИ пол.): вычислено для C₁₂H₁₇BrNO₃⁺: 302,0 (М+Н); Найдено: 302,1.

[116] B. 2-Бром-4-трет-бутил-5-(4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамидо) фенилметилкарбонат. В 100-мл круглодонную колбу помещали раствор 5-амино-2-бром-4-трет-бутилфенилметилкарбоната (1,5 г, 5 ммоль, полученный на предыдущей стадии) в ДМФ (20 мл), затем 4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновой кислоты (1,5 г, 7,5 ммоль), HATU (2,9 г, 7,5 ммоль) и DIEA (19 г, 15 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 16 часов при комнатной температуре, затем разбавляли 100 мл воды и экстрагировали EtOAc (3×100 мл).Органические экстракты объединяли, сушили над безводным Na₂SO₄ и упаривали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией, элюируя смесью EtOAc/петролейный эфир (1: 5), получая 1,4 г указанного в заголовке соединения в виде серого твердого вещества. Масс-спектр (ЖХМС, ЭСИ пол.): вычислено для C₂₂H₂₂BrN₂O₅⁺: 473,1 (М+Н); Найдено: 473,2.

[117] C. N-(2-(трет-бутил)-5-гидрокси-4-(триэтилсилил)фенил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамид.В 20-мл герметично закрывающуюся пробирку, продутую и заполненную инертной атмосферой азота, помещали раствор 2-бром-4-трет-бутил-5-(4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-амидо)фенилметилкарбоната (600 мг, 1,27 ммоль, полученного на предыдущей стадии) в DMPU (4,5 мл), затем добавляли Pd₂(dba)₃×CHCl₃ (39 мг, 0,04 ммоль), JohnPhos (57 мг, 0,19 ммоль), KF/Al₂O₃ (50%, 737 мг, 12,71 ммоль) и триэтилсилан (589 мг, 5,07 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 16 ч при 90°С, охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат разбавляли 100 мл воды и экстрагировали EtOAc (3×50 мл).Органические экстракты объединяли, сушили над безводным Na₂SO₄ и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (ВЭЖХ-10: колонка, X Select CSH Prep C18 OBD Column, 5мкм, 19*150 мм, подвижная фаза, вода (10 ммоль/л NH₄HCO₃) и MeCN (50,0% MeCN до 76,0% за 1 мин, до 95,0% за 7 мин), детектор, УФ 254/220 нм), получая 8,6 мг указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества. Масс-спектр (ЖХМС, ЭСИ пол.): вычислено для C₂₆H₃₅N₂O₃Si⁺: 451,2 (М+Н); Найдено: 451,3.¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆): δ 12,94 (шс, 1H), 12,02 (с, 1H), 8,91 (с, 1H), 8,33 (д, J=7,2 Гц, 1H), 7.85-7.70 (м, 2H), 7,51 (т, J=8,0 Гц, 1H), 7,34 (д, J=2,8 Гц, 1H), 7,25 (д, J=8,8 Гц, 1H), 6,63 (дд, J=2,8, 8,4 Гц, 1H), 1,41 (с, 9H), 0,96 (т, J=8,0 Гц, 9H), 0,73 (кв, J=8,0 Гц, 6H).Чистота по ВЭЖХ (254 нм): 95,7%.

Пример 5. Получение N-(2-трет-бутил-4-(трет-бутилдиметилсилил)-5-гидроксифенил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамида (соединение 5).

[118] A. N-(2-трет-бутил-4-(трет-бутилдиметилсилил)-5-гидроксифенил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамид.В 20-мл герметично закрывающуюся пробирку, продутую и заполненную инертной атмосферой азота, помещали раствор 2-бром-4-трет-бутил-5-(4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамидо)фенилметилкарбоната (300 мг, 0,63 ммоль, полученного в примере 4, стадия B) в DMPU (4 мл) добавляли диметил(пропан-2-ил)силан (294 мг, 2,53 ммоль), [Rh(cod)₂]BF₄ (13 мг, 0,03 ммоль) и K₃PO₄ (200 мг, 0,95 ммоль).Реакционную смесь перемешивали в течение 72 ч при 90°С, охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат разбавляли 50 мл воды и экстрагировали EtOAc (3×50 мл).Органические экстракты объединяли, сушили над безводным Na₂SO₄ и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (ВЭЖХ-10: колонка, X Bridge C18 OBD Prep Column, 10 мкм, 19 мм×250 мм, подвижная фаза, вода (10 ммоль/л NH₄HCO₃ и MeCN (60,0% MeCN до 80,0% за 8 мин), детектор, УФ 254/220 нм), получая 11,4 мг указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества.Масс-спектр (ЖХМС, ЭСИ пол.): вычислено для C₂₆H₃₅N₂O₃Si⁺: 451,2 (М+Н); Найдено: 451,3.¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆): δ 12,89 (с, 1H), 11,91 (с, 1H), 9,20 (с, 1H), 8,87 (с, 1H), 8,33 (д, J=7,2 Гц, 1H), 7.90-7.70 (м, 2H), 7,52 (т, J=7,2 Гц, 1H), 7,27 (с, 1H), 7,19 (с, 1H), 1,39 (с, 9H), 0,90 (с, 9H), 0,26 (с, 9H).Чистота по ВЭЖХ (254 нм): 97,2%.

Пример 6. Получение N-[2-трет-бутил-4-[диметил(пропан-2-ил)силил-5-гидроксифенил]-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамида (соединение 6).

[119] A. N-[2-трет-бутил-4-[диметил(пропан-2-ил)силил]-5-гидроксифенил]-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамид.В 20-мл герметично закрывающуюся пробирку, продутую и заполненную инертной атмосферой азота, помещали раствор 4-трет-бутил-2-йод-5-(4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-амидо)фенилметилкарбонат (250 мг, 0,48 ммоль, полученный в примере 2, стадия D) в DMPU (3 мл), добавляли диметил(пропан-2-ил)силан (196 мг, 1,92 ммоль), [Rh(cod)₂]BF₄ (9,7 мг, 0,02 ммоль) и K₃PO₄ (153 мг, 0,72 ммоль).Реакционную смесь перемешивали в течение 16 ч при 90°С, охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат разбавляли 50 мл воды и экстрагировали EtOAc (3×50 мл).Органические экстракты объединяли, сушили над безводным Na₂SO₄ и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (ВЭЖХ-10: колонка, X Bridge C18 OBD Prep Column, 10 мкм, 19 мм×250 мм, подвижная фаза, вода (10 ммоль/л NH₄HCO₃) и MeCN (65,0% MeCN до 82,0% за 8 мин), детектор, УФ 254/220 нм), получая 20,7 мг указанного в заголовке соединения в виде серого твердого вещества. Масс-спектр (ЖХМС, ЭСИ пол.): вычислено для C₂₅H₃₃N₂O₃Si⁺: 437,2 (М+Н); 437,1.¹H ЯМР (300 МГц, ДМСО-d₆): δ 11,90 (с, 1H), 9,21 (с, 1H), 8,85 (с, 1H), 8,31 (д, J=8,1 Гц, 1H), 7.85-7.70 (м, 2H), 7,49 (т, J=7,8 Гц, 1H), 7,24 (с, 1H), 7,16 (с, 1H), 1,37 (с, 9H), 1,30-0,93 (м, 1H) д, J=7,2 Гц, 6H), 0,18 (с, 6H).Чистота по ВЭЖХ (254 нм): 98,9%.

Пример 7. N-(2-(трет-Бутил)-4-(диметил(фенил)силил)-5-гидроксифенил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамид (соединение 7).

[120] A. N-(2-(трет-бутил)-4-(диметил(фенил)силил)-5-гидроксифенил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамид. В 20-мл герметично закрывающуюся пробирку, продутую и заполненную инертной атмосферой азота, помещали раствор 4-трет-бутил-2-йод-5-(4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-амидо)фенилметилкарбоната (250 мг, 0,48 ммоль, полученный в примере 2, стадия D) в DMPU (3 мл), затем добавляли диметил(фенил)силан (261 мг, 1,92 ммоль), [Rh((cod)₂]BF₄ (9,7 мг, 0,02 ммоль) и добавляли K₃РO₄ (153 мг, 0,72 ммоль).Реакционную смесь перемешивали в течение 16 ч при 90°С, охлаждали до комнатной температуры и твердые вещества удаляли фильтрованием. Фильтрат разбавляли водой (50 мл) и экстрагировали EtOAc (3×50 мл).Органические экстракты объединяли, сушили над безводным Na₂SO₄ и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (колонка, X Bridge C18 OBD Prep Column, 10 мкм, 19 мм×250 мм, подвижная фаза, вода (10 ммоль/л NH₄HCO₃) и ACN (50,0% ACN до 75,0% за 9 мин), детектор УФ 254/220 нм), получая 30,8 мг указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества серого цвета. Масс-спектр (ЖХМС, ЭСИ пол.): вычислено для C₂₈H₃₁N₂O₃Si⁺: 471,2 (М+Н); Найдено: 471,3.¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆): δ 12,82 (шс, 1H), 11,91 (с, 1H), 9,33 (с, 1H), 8,85 (с, 1H), 8,30 (д, J=8,1 Гц, 1H), 7.81-7.71 (м, 2H), 7.56-7.46 (м, 3H), 7,34 (д, J=2,4 Гц, 3H), 7,18 (с, 1H), 7,13 (с, 1H), 1,30 (с, 9H), 0,50 (с, 6H).Чистота по ВЭЖХ (254 нм): 98,9%.

Пример 8. Получение N-[4-трет-бутил-5-гидрокси-2-(триметилсилил)фенил]-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамида (соединение 8)

[121] A. 4-Бром-2-трет-бутилфенилметилкарбонат.В 100-мл трехгорлую круглодонную колбу, продутую и сохраняющую инертную атмосферу азота, помещали раствор 4-бром-2-трет-бутилфенола (1 г, 4,36 ммоль), ТЭА (887 мг, 8,77 ммоль) и DMAP (54 мг, 0,42 ммоль) в ДХМ (10 мл), затем раствор охлаждали до 0°С и добавляли метилхлорформиат (494 мг, 5,23 ммоль).Реакционную смесь перемешивали в течение 3 ч при 0°С, затем гасили добавлением 20 мл воды и экстрагировали ДХМ (3×20 мл).Органические экстракты объединяли и упаривали при пониженном давлении, получая 1,5 г указанного в заголовке соединения в виде желтого масла.

[122] B. 4-Бром-2-трет-бутил-5-нитрофенилметилкарбонат.В круглодонную колбу емкостью 50 мл помещали раствор 4-бром-2-трет-бутилфенилметилкарбоната (1,2 г, 4,18 ммоль, полученного на предыдущей стадии) в конц. серной кислоте (5 мл), затем раствор охлаждали до 0°С и добавляли порциями KNO₃ (0,55 г).Реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре, затем гасили добавлением 30 мл воды/льда и экстрагировали ДХМ (3×30 мл).Органические экстракты объединяли и упаривали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией, элюируя EtOAc/петролейным эфиром (1:20), получая 1,1 г указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества.¹H ЯМР (300 МГц, CD₃OD): δ 7,87 (с, 1H), 7,77 (с, 1H), 3,91 (с, 3H), 1,35 (с, 9H).

[123] C. 5-Амино-4-бром-2-трет-бутилфенилметилкарбонат.В 25-мл круглодонную колбу помещали раствор 4-бром-2-трет-бутил-5-нитрофенилметилкарбоната (664 мг, 2,00 ммоль, полученного на предыдущей стадии) в ТГФ (10 мл) и AcOH (2 мл), затем порошок Fe (1000 мг, 17,91 ммоль) добавляли порциями в течение 15 мин при 66°С. Реакционную смесь перемешивали в течение 8 ч при 66°С, охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат упаривали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией, элюируя EtOAc/петролейным эфиром (1: 1), получая 450 мг указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества.

[124] D. 4-бром-2-трет-бутил-5-(4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-амидо)фенилметилкарбонат.В 25-мл круглодонную колбу помещали раствор 5-амино-4-бром-2-трет-бутилфенилметилкарбоната (604 мг, 2,00 ммоль, полученный на предыдущей стадии) в ДМФА (10 мл), затем добавляли 4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновую кислоту (567 мг, 3,00 ммоль), DIEA (516 мг, 3,99 ммоль) и HATU (1524 мг, 4,00 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 16 ч при 65°С, затем гасили добавлением 50 мл воды/льда и экстрагировали EtOAc (3×25 мл).Органические экстракты объединяли и упаривали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией, элюируя EtOAc/петролейным эфиром (1: 1), получая 800 мг указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества. Масс-спектр (ЖХМС, ЭСИ пол.): вычислено для C₂₂H₂₂BrN₂O₅⁺: 473,1 (М+Н); Найдено: 473,1.

[125] E. N-[4-трет-бутил-5-гидрокси-2-(триметилсилил)фенил]-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамид.В 40-мл герметично закрывающуюся пробирку помещали раствор 4-бром-2-трет-бутил-5-(4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-амидо) фенилметилкарбоната (47,3 мг, 0,10 ммоль, полученного на предыдущей стадии) в DMPU (1 мл), затем в атмосфере азота добавляли [Rh(cod)₂]BF₄ (20,3 мг, 0,05 ммоль), гексаметилдисилан (1 мл) и K₃PO₄ (84,9 мг, 0,40 ммоль).Реакционную смесь перемешивали в течение 16 ч при 110°С, затем гасили добавлением 10 мл льда/воды и экстрагировали EtOAc (3×10 мл). Органические экстракты объединяли, сушили над Na₂SO₄ и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (колонка ВЭЖХ-10: Column, X Bridge Shield RP18, 19*250 мм, 10 мкм, подвижная фаза, вода (10 ммоль/л NH₄HCO₃) и MeCN (60,0% MeCN до 90,0% за 11 мин), детектор, УФ 254/220 нм), получая 10,1 мг указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества. Масс-спектр (ЖХМС, ЭСИ пол.): вычислено для C₂₃H₂₉N₂O₃Si⁺: 409,2 (М+Н); Найдено: 409,2.¹H ЯМР (300 МГц, ДМСО-d₆): δ 11,73 (с, 1H), 8,96 (с, 1H), 9,51 (с, 1H), 8,43 (с, 1H), 8,30 (д, J=8,4 Гц, 1H), 7,71-7,81 (м, 2H), 7,49 (т, J=8,1 Гц, 1H), 7,29 (с, 1H), 7,21 (с, 1H), 1,34 (с, 9H), 0,28 (с, 9H).Чистота по ВЭЖХ (254 нм): 98,1%.

Пример 9: Получение N-(4-(трет-бутил)-2-(этилдиметилсилил)-5-гидроксифенил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамида (соединение 9)

[126] A. N-(4-(трет-бутил)-2-(этилдиметилсилил)-5-гидроксифенил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамид.В 40-мл герметично закрывающуюся пробирку, продутую и заполненную инертной атмосферой азота, помещали раствор 4-бром-2-трет-бутил-5-(4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-амидо)фенилметилкарбоната (47,3 мг, 0,10 ммоль, полученный в примере 8, стадия D) в DMPU (0,2 мл), затем добавляли этилдиметилсилан (2 мл), Rh(cod)₂BF₄ (20 мг) и K₃PO₄ (84 мг, 0,40 ммоль).Реакционную смесь перемешивали при 110°С в течение 16 часов.Эту реакцию повторяли 15 раз. Неочищенные продукты из 16 реакций объединяли, разбавляли EtOAc (5 мл), фильтровали и упаривали в вакууме. Неочищенный продукт очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (колонка, XBridge C18 OBD Prep Column, 10 мкм, 19 мм×250 мм, подвижная фаза, вода (10 ммоль/л NH₄HCO₃) и ACN (70% ACN до 85% в течение 11 мин), детектор УФ 254/220 нм), получая 20 мг указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества. Масс-спектр (ЖХМС, ЭСИ отр.): вычислено для C₂₄H₂₉N₂O₃Si^-: 421,2 (M-H); Найдено: 421,3.¹H ЯМР (300 МГц, ДМСО-d₆): δ 12,72 (шс, 1H), 11,71 (с, 1H), 9,52 (с, 1H), 8,84 (с, 1H), 8,30 (д, J=8,4 1Н), 7,20 (с, 1Н), 1,34 (с, 9Н), 0,95-0,77 (с, 1Н), 7,82-7,71 (м, 2Н), 7,49 (т, J=(м, 5H), 0,28 (с, 6H).Чистота по ВЭЖХ (254 нм): 99,0%.

Пример 10: Получение N-(4-(трет-бутил)-2-(трет-бутилдиметилсилил)-5-гидроксифенил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамида (соединение 10).

[127] A. N-(4-(трет-бутил)-2-(трет-бутилдиметилсилил)-5-гидроксифенил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамидВ 10-мл герметично закрывающуюся пробирку, продутую и заполненную инертной атмосферой азота помещали раствор 4-бром-2-трет-бутил-5-(4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-амидо)фенилметилкарбоната (47,3 мг, 0,10 ммоль, полученного в примере 8, стадия D) в DMPU (1 мл), затем в атмосфере азота добавляли трет-бутилдиметилсилан (0,5 мл), Rh(cod)₂BF₄ (20 мг) и K₃PO₄ (84 мг, 0,40 ммоль).Реакционную смесь перемешивали в течение 16 ч при 110°С, затем разбавляли EtOAc (5 мл), фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (колонка, X Bridge C18 OBD Prep Column, 10 мкм, 19 мм×250 мм, подвижная фаза, вода (10 ммоль/л NH₄HCO₃) и ACN (83,0% ACN до 90,0% в течение 11 мин), детектор УФ 254/220 нм), получая 8,9 мг указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества. Масс-спектр (ЖХМС, ЭСИ пол.): вычислено для C₂₆H₃₅N₂O₃Si⁺: 451,2 (М+Н); Найдено: 451,3.¹H ЯМР (300 МГц, ДМСО-d₆): δ 12,81 (шс, 1H), 11,43 (с, 1H), 9,54 (с, 1H), 8,82 (с, 1H), 8,29 (д, J=7,8 Гц, 1H), 7,81-7,71 (м, 2H), 7,51-7,46 (м, 1H), 7,22 (с, 1H), 7,05 (с, 1H), 1,34 (с, 9H), 0,86 (с, 9H), 0,25 (с, 6H).Чистота по ВЭЖХ (254 нм): 98,2%.

Пример 11: Получение N-(5-гидрокси-2,4-бис(триметилсилил)фенил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамида (соединение 11).

[128] A. N-(2,4-дибром-5-гидроксифенил)ацетамид. В круглодонную колбу емкостью 3000 мл помещали раствор N-(3-гидроксифенил)ацетамида (15 г, 99,23 ммоль) в MeOH (300 мл) и ДХМ (1,2 л), затем добавляли порциями Py⋅Br₃ (70,18 г, 220,13 ммоль) при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, затем упаривали при пониженном давлении. Полученную смесь разбавляли 800 мл воды и экстрагировали EtOAc (2×1,5 л).Органические экстракты объединяли, сушили над безводным Na₂SO₄ и упаривали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией, элюируя EtOAc/петролейным эфиром (1:1), получая 9 г указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества. Масс-спектр (ЖХМС, ЭСИ пол.): вычислено для C₈H₈Br₂NO₂⁺: 307,9 (М+Н); Найдено: 308,1.

[129] B. 5-амино-2,4-дибромфенол.В круглодонную колбу емкостью 500 мл помещали раствор N-(2,4-дибром-5-гидроксифенил)ацетамида (10,4 г, 33,66 ммоль, полученного на предыдущей стадии) в H₂O (130 мл), затем добавляли конц. HCl (46 мл).Реакционную смесь перемешивали в течение 3 ч при 100°С, затем добавляли NaOAc для доведения рН до 7.Твердые вещества удаляли фильтрованием, затем фильтрат экстрагировали EtOAc (3×300 мл).Органические экстракты объединяли, сушили над безводным Na₂SO₄ и упаривали при пониженном давлении, получая 8,2 г указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества. Масс-спектр (ЖХМС, ЭСИ пол.): вычислено для C₆H₆Br₂NO⁺: 265,9 (М+Н); Найдено: 266,2.

[130] C. N-(2,4-дибром-5-гидроксифенил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамид.В 100-мл круглодонную колбу помещали раствор 4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновой кислоты (945 мг, 5,00 ммоль) в ДМФ (25 мл), затем добавляли 5-амино-2,4-дибромфенол (1,99 г, 7,46 ммоль, полученный на предыдущей стадии), HATU (3,8 г, 9,99 ммоль) и DIEA (2 г, 15,48 ммоль).Реакционную смесь перемешивали в течение 2 дней при 85°С, затем разбавляли 100 мл воды и экстрагировали EtOAc (3×200 мл).Органические экстракты объединяли и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный продукт растирали с EtOAc, получая 1,1 г указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества. Масс-спектр (ЖХМС, ЭСИ пол.): вычислено для C₁₆H₁₁Br₂N₂O₃⁺: 436,9 (М+Н); Найдено: 437,1.

[131] D. N-[5-гидрокси-2,4-бис(триметилсилил)фенил]-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамид.В 20-мл герметично закрывающуюся пробирку, продутую и заполненную инертной атмосферой азота, помещали раствор N-(2,4-дибром-5-гидроксифенил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамида (200 мг, 0,46 ммоль, полученный на предыдущей стадии) в DMPU (3 мл), затем добавляли гексаметилдисилан (533 мг, 3,64 ммоль), Pd₂(dba)₃⋅CHCl₃ (24 мг, 0,02 ммоль), JohnPhos (20 мг, 0,07 ммоль) и добавляли KF/Al₂O₃ (50%, 265 мг, 4,57 ммоль).Реакционную смесь перемешивали в течение 16 ч при 110°С, охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат разбавляли 50 мл воды и экстрагировали EtOAc (3×50 мл).Органические экстракты объединяли, сушили над безводным Na₂SO₄ и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (ВЭЖХ-10: колонка, X Bridge C18 OBD Prep Column, 10 мкм, 19 мм×250 мм, подвижная фаза, вода (10 ммоль/л NH₄HCO₃) и MeCN (60,0% MeCN до 85,0% за 8 мин), детектор УФ 254/220 нм), получая 8,2 мг указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества. Масс-спектр (ЖХМС, ЭСИ пол.): вычислено для C₂₂H₂₉N₂O₃Si₂⁺: 425,2 (М+Н); Найдено: 425,1.¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆): δ 12,89 (шс, 1H), 11,86 (с, 1H), 9,60 (с, 1H), 8,87 (с, 1H), 8,32 (д, J=8,4 Гц, 1H), 7,90-7,70 (м, 2H), 7,50 (т, J=7,6 Гц, 1H), 7,35 (д, J=7,6 Гц, 2H), 0,31 (с, 9H), 0,25 (с, 9H).Чистота по ВЭЖХ (254 нм): 96,1%.

Пример 12. Получение N-(2-(трет-бутил)-5-гидрокси-4-(трис(метил-d₃)силил) фенил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамида (соединение 12).

[132] A. N-(2-(трет-Бутил)-5-гидрокси-4-(трис(метил-d₃) силил)фенил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамид.В 8-мл герметично закрывающуюся пробирку, продутую и заполненную инертной атмосферой азота, помещали раствор 2-бром-4-трет-бутил-5-(4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-амидо)фенилметилморната (50 мг, 0,11 ммоль, полученного в примере 4, стадия B), в DMPU (3 мл), затем добавляли d₁₈-гексаметилдисилан (52 мг, 0,32 ммоль), [Rh(cod)₂]ВF₄ (2,2 мг, 0,01 ммоль) и K₃PO₄ (34 мг, 0,16 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 16 ч при 90°С, охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат разбавляли 50 мл воды и экстрагировали EtOAc (3×50 мл).Органические экстракты объединяли, сушили над безводным Na₂SO₄ и упаривали при пониженном давлении. Эту реакцию повторяли еще раз, затем две партии объединяли и очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (ВЭЖХ-10: колонка, X Bridge C18 OBD Prep Column, 10 мкм, 19 мм×250 мм, подвижная фаза, вода (10 ммоль/л NH₄HCO₃) и MeCN (55,0% MeCN до 87,0% за 7 мин), детектор УФ 254/220 нм), получая 4,9 мг указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества. Масс-спектр (ЖХМС, ЭСИ пол.): вычислено для C₂₃H₂₀D₉N₂O₃Si⁺: 418,3 (М+Н); Найдено: 418,1.¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d_6): δ12.89 (шс, 1H), 11,91 (с, 1H), 9,26 (с, 1H), 8,87 (с, 1H), 8.34-8,32 (м, 1H), 7,90-7,70 (м, 2H), 7,51 (т, J=8,0 Гц, 1H), 7,25 (с, 1H), 7,15 (с, 1H), 1,39 (с, 9H).Чистота по ВЭЖХ (254 нм): 95,3%.

Пример 13. N-(5-Гидрокси-2,4-бис(трис(метил-d₃)силил)фенил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамид (соединение 13).

[133] A. N-(5-Гидрокси-2,4-бис(трис(метил-d₃)силил)фенил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамид.В 40-мл герметично закрывающуюся пробирку, продутую и заполненную инертной атмосферой азота, помещали раствор N-(2,4-дибром-5-гидроксифенил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамида (50 мг, 0,11 ммоль, полученного в примере 9, стадия C) в DMPU (1 мл), затем добавляли KF/Al₂O₃ (100 мг, 1,72 ммоль), Pd₂(dba)₃CHCl₃ (20 мг, 0,02 ммоль), Johnphos (10 мг, 0,03 ммоль) и d_18-гексаметилдисилан (74 мг, 0,45 ммоль).Реакционную смесь перемешивали в течение 16 ч при 110°С. Эту стадию повторяли еще 5 раз, затем неочищенные реакции объединяли и очищали колоночной хроматографией, элюируя EtOAc (100%).Полученный материал очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (колонка, колонка OBD Atlantis Prep T3, подвижная фаза 19*250 мм 10 мкм, вода (10 ммоль/л NH₄HCO₃) и ACN (75% ACN до 90% за 8 минут), детектор УФ 254/220 нм), получая 27,0 мг указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества. Масс-спектр (ЖХМС, ЭСИ пол.): вычислено для C₂₂H₁₁D₁₈N₂O₃Si₂⁺: 443,3 (М+Н); Найдено: 443,4.¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆): δ 12,90 (с, 1H), 11,82 (с, 1H), 9,61 (с, 1H), 8,87 (с, 1H), 8,32 (д, J=8,0 Гц, 1H), 7,85-7,73 (м, 2H), 7,54 (т, J=7,8 Гц, 1H), 7,36 (с, 1H), 7,33 (с, 1H).Чистота по ВЭЖХ (254 нм): 95,3%.

Пример 14. N-(3-Гидрокси-4-(триметилсилил)фенил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамид (соединение 17).

[134] A. 5-Нитро-2-(триметилсилил)фенол.В 20-мл герметично закрывающуюся пробирку, продутую и заполненную инертной атмосферой азота, помещали раствор 2-бром-5-нитрофенола (1,1 г, 5,05 ммоль) в DMPU (10 мл), затем добавляли гексаметилдисилан (14,7 г, 100,42 ммоль), Pd₂(dba)₃CHCl ₃ (520 мг, 0,50 ммоль), JohnPhos (450 мг, 1,51 ммоль) и KF (1,45 г, 25,00 ммоль).Реакционную смесь перемешивали при 110°Cв течение 16 часов на масляной бане, затем охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат разбавляли водой (100 мл) и экстрагировали EtOAc (3×100 мл).Органические экстракты объединяли, сушили над безводным Na₂SO₄ и упаривали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией, элюируя EtOAc/петролейным эфиром (0-50%), получая 850 мг в виде желтого масла. Масс-спектр (ЖХМС, ЭСИ отр.): вычислено для C₉H₁₂NO₃Si^-: 210,1 (MH); Найдено: 210,0.

[135] B. 5-амино-2-(триметилсилил)фенол. В круглодонную колбу емкостью 50 мл помещали раствор 5-нитро-2-(триметилсилил)фенола (200 мг, 0,95 ммоль, полученный на предыдущей стадии) в метаноле/ТГФ (4/2 мл), затем добавляли Ni(OAc)₂ (168 мг, 0,95 ммоль) с последующим добавлением порциями NaBH₄ (36 мг, 0,95 ммоль) при 0°C. Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 10 мин на бане с водой/льдом, затем твердые вещества удаляли фильтрованием. Реакцию гасили добавлением воды (50 мл) и полученный раствор экстрагировали EtOAc (3×50 мл).Органические слои объединяли, сушили над безводным Na₂SO₄ и разбавляли ДМФ (6 мл).Полученный раствор упаривали при пониженном давлении для удаления EtOAc, получая ДМФ раствор указанного в заголовке соединения, который непосредственно использовали на следующей стадии без выделения. Масс-спектр (ЖХМС, ЭСИ пол.): вычислено для C₉H₁₆NOSi⁺: 182,1 (М+Н); Найдено: 182,1.

[136] C. N-(3-гидрокси-4-(триметилсилил)фенил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамид. В 50-мл круглодонную колбу, продутую и сохраняющую инертную атмосферу азота, помещали раствор 5-амино-2-(триметилсилил)фенола как в ДМФА (6 мл, полученного на предыдущей стадии), затем добавляли 4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновую кислоту (180 мг, 0,95 ммоль), HATU (543 мг, 1,43 ммоль) и DIEA (245 мг, 1,90 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч, затем разбавляли водой (50 мл) и экстрагировали EtOAc (2×50 мл).Органические экстракты объединяли, сушили над безводным Na₂SO₄ и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали путем повторной кристаллизации из EtOAc, получая 59,4 мг указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества. Масс-спектр (ЖХМС, ЭСИ пол.): вычислено для C₁₉H₂₁N₂O₃Si⁺: 353,1 (М+Н); Найдено: 353,3.¹H ЯМР (300 МГц, ДМСО-d₆): δ 12,95 (с, 1H), 12,41 (с, 1H), 9,51 (с, 1H), 8,86 (с, 1H), 8,32 (д, J=7,5 Гц, 7,27-7,74 (м, 2H), 7,54 (т, J=7,5 Гц, 1H), 7,39 (с, 1H), 7,19 (д, J=7,8 Гц, 1H), 7,02-7,69 (м, 1H), 0,23 (с, 9H).Чистота по ВЭЖХ (254 нм): 99,2%.

Пример 15. N-(3-Гидрокси-4-(триметилсилил)фенил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамид (соединение 18).

[137] A. 2-Бром-4-фторфенилметилкарбонат.В 100-мл круглодонную колбу помещали раствор 2-бром-4-фторфенола (1,9 г, 9,95 ммоль) в ДХМ (20 мл), затем добавляли ТЭА (2,0 г, 19,76 ммоль) и DMAP (120 мг, 0,98 ммоль) с последующим добавлением по каплям метилхлорформиата (1,23 г, 13,02 ммоль) при перемешивании при 0°C.Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч, затем гасили добавлением воды (100 мл) и экстрагировали ДХМ (3×100 мл).Органические экстракты объединяли, сушили над безводным Na₂SO₄ и упаривали при пониженном давлении, получая 1,5 г указанного в заголовке соединения в виде желтого масла.

[138] B. 2-Бром-4-фтор-5-нитрофенилметилкарбонат. В 100-мл круглодонную колбу помещали раствор 2-бром-4-фторфенилметилкарбоната (1 г, 4,02 ммоль, полученный на предыдущей стадии) в ДХМ (10 мл), затем при перемешивании по каплям добавляли HNO₃/H₂SO₄ (1: 1) (5 мл) при 0°C.Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч, затем выливали в 200 мл воды/льда и экстрагировали ДХМ (3×100 мл).Органические экстракты объединяли, сушили над безводным Na₂SO₄ и упаривали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией, элюируя EtOAc/петролейным эфиром (2: 1), получая 700 мг указанного в заголовке соединения в виде светло-желтого твердого вещества. Масс-спектр (ЖХМС, ЭСИ пол.): вычислено для C₈H₆BrFNO₅⁺: 293,9 (М+Н); Найдено: 294,0.

[139] C. 4-фтор-5-нитро-2-(триметилсилил)фенол. В 20-мл герметично закрывающуюся пробирку, продутую и заполненную инертной атмосферой азота, помещали раствор 2-бром-4-фтор-5-нитрофенилметилкарбоната (300 мг, 1,02 ммоль, полученного на предыдущей стадии), и добавляли DMPU (3 мл), затем гексаметилдисилан (2,98 г, 20,36 ммоль), PdCl₂ (184 мг, 1,04 ммоль) и K₃PO₄ (441 мг, 2,08 ммоль).Реакционную смесь перемешивали при 110°С в течение 24 часов на масляной бане, затем охлаждали до комнатной температуры и фильтровали.Фильтрат разбавляли водой (50 мл) и экстрагировали EtOAc (3×100 мл).Органические экстракты объединяли, сушили над безводным Na₂SO₄ и упаривали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией, элюируя EtOAc/петролейным эфиром (0-60%), получая 150 мг указанного в заголовке соединения в виде желтого масла.Масс-спектр (ЖХМС, ЭСИ отр): Вычислено для C₉H₁₁FNO₃Si^-: 228,1 (М+Н); Найдено: 228,0.

[140] D. 5-амино-4-фтор-2-(триметилсилил)фенол.В круглодонную колбу емкостью 50 мл помещали раствор 4-фтор-5-нитро-2-(триметилсилил)фенола (150 мг, 0,65 ммоль, полученного на предыдущей стадии) в метаноле/ТГФ (2/2 мл), затем добавляли Ni(OAc)₂ (116 мг, 0,66 ммоль) с последующим добавлением порциями NaBH₄ (25 мг, 0,66 ммоль) при 0°С. Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 10 мин, затем твердые вещества удаляли фильтрованием. Фильтрат разбавляли водой (20 мл) и экстрагировали EtOAc (3×20 мл).Органические экстракты объединяли, сушили над безводным Na₂SO₄ и упаривали при пониженном давлении, получая 100 мг указанного в заголовке соединения в виде желтого масла. Масс-спектр (ЖХМС, ЭСИ пол.): вычислено для C₉H₁₅FNOSi⁺: 200,1 (М+Н); Найдено: 200,1.

[141] E. N-(3-гидрокси-4-(триметилсилил)фенил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамид.В круглодонную колбу емкостью 50 мл помещали раствор 5-амино-4-фтор-2-(триметилсилил)фенола (100 мг, 0,50 ммоль, полученный на предыдущей стадии) в ДМФА (5 мл), затем 4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновой кислоты (95 мг, 0,50 ммоль), HATU (285 мг, 0,75 ммоль) и DIEA (129 мг, 1,00 ммоль).Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч, затем разбавляли водой (50 мл) и экстрагировали EtOAc (3×50 мл).Органические экстракты объединяли, сушили над безводным Na₂SO₄ и упаривали при пониженном давлении.Неочищенный продукт очищали с помощью препаративной ВЭЖХ (колонка, X Bridge C18 OBD Prep Column, 10 мкм, 19 мм×250 мм, подвижная фаза, вода (10 мМ NH₄HCO₃) и ACN (50,0% ACN до 83,0% в течение 8 мин), детектор УФ 254/220 нм), получая 68,2 мг указанного в заголовке соединения в виде не совсем белого твердого вещества.Масс-спектр (ЖХМС, ЭСИ пол.): вычислено для C₁₉H₂₀FN₂O₃Si⁺: 371,1 (М+Н); Найдено: 371,1.¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆): δ 12,97 (с, 1H), 12,69 (д, J=2,4 Гц, 1H), 9,48 (с, 1H), 8,88 (с, 1H), 8.35-8.32 (м, 1H), 8,08 (д, J=6,0 Гц, 1H), 7,85-7,75 (м, 2H), 7,56-7,52 (м, 1H), 7,03 (д, J=10,8 Гц, 1H) с, 9H).Чистота по ВЭЖХ (254 нм): 99,1%.

Пример 16. N-(5-Гидрокси-2-(трифторметил)-4-(триметилсилил)фенил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамид (соединение 19).

[142] A. 2-Бром-4-(трифторметил)фенилметилкарбонат.В 250-мл круглодонную колбу помещали раствор 2-бром-4-(трифторметил)фенола (4,8 г, 19,92 ммоль) в ДХМ (100 мл), затем ТЭА (4 г, 39,53 ммоль) и DMAP (250 мг, 2,05 ммоль) с последующим добавлением по каплям метилхлорформиата (3,8 г, 40,21 ммоль) при перемешивании при 0°C. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч, затем гасили добавлением воды (100 мл) и экстрагировали ДХМ (3×100 мл).Органические экстракты объединяли, сушили над безводным Na₂SO₄ и упаривали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией, элюируя EtOAc/петролейным эфиром (0-5%), получая 4,0 г указанного в заголовке соединения в виде желтого масла.

[143] B. 2-Бром-5-нитро-4-(трифторметил)фенилметилкарбонат. В 250-мл круглодонную колбу помещали раствор 2-бром-4-(трифторметил)фенилметилкарбоната (4 г, 13,38 ммоль, полученный на предыдущей стадии) в H₂SO₄ (20 мл), затем добавляли по каплям HNO₃/H₂SO₄ (1: 1, 10 мл) при перемешивании при 0°C.Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч, затем гасили добавлением 300 мл воды/льда и экстрагировали ДХМ (3×100 мл).Органические экстракты объединяли, сушили над безводным Na₂SO₄ и упаривали при пониженном давлении.Остаток очищали колоночной хроматографией, элюируя EtOAc/петролейным эфиром (0-50%), получая 1,0 г указанного в заголовке соединения в виде светло-желтого твердого вещества.

[144] C. 5-нитро-4-(трифторметил)-2-(триметилсилил)фенол.В 40-мл герметично закрывающуюся пробирку, продутую и заполненную инертной атмосферой азота, помещали раствор 2-бром-5-нитро-4-(трифторметил) фенилметилкарбоната (300 мг, 0,87 ммоль, полученного на предыдущей стадии) в DMPU (3 мл), затем добавляли гексаметилдисилан (2,6 г, 17,76 ммоль), PdCl₂ (154 мг, 0,87 ммоль) и K₃PO₄ (369 мг, 1,74 ммоль).Реакционную смесь перемешивали при 110°С в течение 24 ч, затем охлаждали и фильтровали. Фильтрат разбавляли водой (50 мл) и экстрагировали EtOAc (3×100 мл).Органические экстракты объединяли, сушили над безводным Na₂SO₄ и упаривали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией, элюируя EtOAc/петролейным эфиром (0-50%), получая 160 мг указанного в заголовке соединения в виде светло-желтого масла.Масс-спектр (ЖХМС, ЭСИ отр.): вычислено для C₁₀H₁₁F₃NO₃Si^-: 278,0 (М+Н); Найдено: 278,0.

[145] D. 5-амино-4-(трифторметил)-2-(триметилсилил)фенол. В 25-мл круглодонную колбу помещали раствор 5-нитро-4-(трифторметил)-2-(триметилсилил)фенола (160 мг, 0,57 ммоль, полученного на предыдущей стадии) и Ni(OAc)₂ (102 мг, 0,58 ммоль) в метаноле/ТГФ (2 мл), затем порциями добавляли NaBH₄ (22 мг, 0,58 ммоль) при 0°C. Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 10 мин, затем фильтровали, разбавляли водой (100 мл) и экстрагировали EtOAc (3×100 мл). Органические экстракты объединяли, сушили над безводным Na₂SO₄ и упаривали при пониженном давлении, получая 120 мг указанного в заголовке соединения в виде желтого масла. Масс-спектр (ЖХМС, ЭСИ пол.): вычислено для C₁₀H₁₅F₃NOSi⁺: 250,1 (М+Н); Найдено: 250,1.

[146] E. N-(5-гидрокси-2-(трифторметил)-4-(триметилсилил)фенил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамид.В 100-мл круглодонную колбу помещали раствор 5-амино-4-(трифторметил)-2-(триметилсилил)фенола (120 мг, 0,48 ммоль, полученный на предыдущей стадии) в ДМФА (10 мл), затем добавляли 4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновую кислоту (137 мг, 0,72 ммоль), HATU (365 мг, 0,96 ммоль) и DIEA (186 мг, 1,44 ммоль).Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов, разбавляли водой (100 мл) и экстрагировали EtOAc (3×100 мл). Органические экстракты объединяли, сушили над безводным Na₂SO₄ и упаривали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хиральной препаративной ВЭЖХ (колонка, Chiralpak IA, 2*25 см, 5 мкм, подвижная фаза, гексан- и этанол-(выдерживали 10,0% этанола в течение 13 мин), детектор УФ 220/254 нм), получая 6,6 мг указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества. Масс-спектр (ЖХМС, ЭСИ пол.): вычислено для C₂₀H₂₀F₃N₂O₃Si⁺: 421,1 (М+Н); Найдено: 421,2.¹H ЯМР (300 МГц, ДМСО-d₆): δ 13,15 (шс, 1H), 12,67 (с, 1H), 10,37 (с, 1H), 8,86 (с, 1H), 8,31 (д, J=8,1 Гц, 1H), 7,99 (с, 1H), 7,84-7,73 (м, 2H), 7,54-7,49 (м, 1H), 7,45 (с, 1H), 0,25 (с, 9H).Чистота по ВЭЖХ (254 нм): 99,8%.

[147] Типовые соединения данного изобретения, полученные вышеуказанными способами синтеза, приведены в таблице 1:

Таблица 1

Соединение Структура Название 1 N-(2-(трет-бутил)-5-гидрокси-4-(триметилсилил)фенил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамид 2 N-(2-(трет-бутил)-4-(этилдиметилсилил)-5-гидроксифенил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамид 3 N-(2-(трет-бутил)-4-(диэтил(метил)силил)-5-гидроксифенил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамид 4 N-(2-(трет-бутил)-5-гидрокси-4-(триэтилсилил)фенил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамид 5 N-(2-(трет-бутил)-4-(трет-бутилдиметилсилил)-5-гидроксифенил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамид 6 N-(2-(трет-бутил)-5-гидрокси-4-(изопропилдиметилсилил)фенил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамид 7 N-(2-(трет-бутил)-4-(диметил(фенил)силил)-5-гидроксифенил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамид 8 N-(4-(трет-бутил)-5-гидрокси-2-(триметилсилил)фенил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамид 9 N-(4-(трет-бутил)-2-(этилдиметилсилил)-5-гидроксифенил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамид 10 N-(4-(трет-бутил)-2-(трет-бутилдиметилсилил)-5-гидроксифенил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамид 11 N-(5-гидрокси-2,4-бис(триметилсилил)фенил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамид 12 N-(2-(трет-бутил)-5-гидрокси-4-(трис(метил-d₃) силил)фенил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамид 13 N-(5-гидрокси-2,4-бис(трис(метил-d₃)силил)фенил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамид 14 N-(2-(трет-бутил)-4-(этоксидиметилсилил)-5-гидроксифенил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамид 15 N-(2-(трет-бутил)-5-гидрокси-4-(гидроксидиметилсилил)фенил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамид 16 N-(5-гидрокси-2,4-бис(гидроксидиметилсилил)фенил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамид 17 N-(3-гидрокси-4-(триметилсилил)фенил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамид 18 N-(2-фтор-5-гидрокси-4-(триметилсилил)фенил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамид 19 N-(5-гидрокси-2-(трифторметил)-4-(триметилсилили)фенил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамид 20 N-(2-хлор-5-гидрокси-4-(триметилсилил)фенил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамид 21 N-(5-гидрокси-2-(1-метилциклопропил)-4-(триметилсилили)фенил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамид 22 N-(5-гидрокси-2-(1-метилциклобутил)-4-(триметилсилили)фенил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамид 23 N-(2-(трет-бутил)-5-гидрокси-4-(1-метилсилетан-1-ил)фенил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамид 24 N-(5-гидрокси-2-(3-метилоксетан-3-ил)-4-(триметилсилил)фенил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамид 25 N-(2-(1-Цианоциклобутил)-5-гидрокси-4-(триметилсилил)фенил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамид 26 N-(5-гидрокси-2-(1-(гидроксиметил)циклобутил)-4-(триметилсилил)фенил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамид 27 N-(5-гидрокси-2-(1-(метоксиметил)циклобутил)-4-(триметилсилил)фенил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамид 28 N-(2-(1-(фторметил)циклобутил)-5-гидрокси-4-(триметилсилил)фенил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамид

Пример 17: Анализ активности CFTR.

i. Измерения с помощью камеры Уссинга

[148] Как обсуждалось выше, и змерения с помощью камеры Уссинга используются для измерения активности CFTR.В этом способе первичные легочные эпителиальные клетки (hBE), гомозиготные по мутации вызывающего кистозный фиброз ΔF508, дифференцировали в течение как минимум 4 недель на границе раздела водной и воздушной сред на фильтровальных пластинах SnapWell до измерений с помощью камеры Уссинга. Клетки апикально промывали от слизи в течение 30 минут до обработки соединениями. Базолатеральную среду удаляли и заменяли средой, содержащей представляющее интерес соединение, разбавленное до его конечной концентрации из исходных растворов ДМСО. Обработанные клетки инкубировали при 37°С и 5% СО₂ в течение 24 часов. В конце периода обработки клетки на фильтрах переносили в камеру Уссинга и уравновешивали в течение 30 минут. Ток короткого замыкания измеряли в режиме зажима напряжения (V_hold=0 мВ), и весь анализ проводили при температуре 36°C-36,5°C. Как только напряжения стабилизировались, камеры зажимали, и данные записывали с помощью считывания импульсных показаний каждые 5 секунд. После базовой стабилизации тока могли применяться следующие добавки, и изменения в токе и сопротивлении клеток записывали:

1. Добавление бензамила в апикальную камеру для ингибирования натриевого канала ENaC.

2. Добавление форсколина в обе камеры для активации ΔF508-CFTR с помощью фосфорилирования.

3. Добавление VX-770 в апикальную камеру для усиления открытия канала F508-CFTR.

4. Добавление CFTRinh-172 в апикальную камеру для ингибирования Cl-проводимости ΔF508-CFTR.

[149] Ингибирующий ток (тот ток, который блокирует CFTRinh-172) измеряется как удельная активность канала F508-CFTR и увеличение этой активности в ответ на соединение по сравнению с той, которая наблюдается в обработанных носителем образцах, идентифицируется как коррекция функции ΔF508-CFTR, вносимая самим тестируемым соединением.

[150] Результаты показаны ниже в таблице 2. (+ указывает активность <200% исправляющего соединения (VX-809 (3 мкМ)) с соединением при 1 мкМ, ++ указывает активность> 200% исправляющего соединения (VX-809 (3 мкМ)) с соединением при 1 мкМ.

Таблица 2

Соединение Структура Активность 1 ++ 2 ++ 3 ++ 4 + 5 ++ 6 ++ 7 ++ 8 ++ 9 10 ++ 11 ++ 12 ++ 13 ++ 14 15 16 17 ++ 18 ++ 19 ++ 20 21 22 23 24 25 26 27 28

[151] Хотя данное изобретение было конкретно показано и описано со ссылками на определенные варианты его осуществления, специалистам в данной области техники будет понятно, что в него могут быть внесены различные изменения по форме и в деталях, без отступления от объема изобретения, охватываемого прилагаемой формулой изобретения.

Включение в описание изобретения сведений путем ссылки

[152] Все публикации и патенты, упомянутые в данном документе, включая перечисленные ниже элементы, настоящим включены в качестве ссылки в полном объеме для всех целей, как если бы каждая отдельная публикация или патент были конкретно и индивидуально включены путем ссылки. В случае конфликта, данная заявка, включая любые определения в настоящем документе, будет иметь преимущественное право.

Эквиваленты

[153] Хотя выше обсуждались конкретные варианты осуществления данного изобретения, приведенное выше описание является иллюстративным и не ограничивающим. Многие варианты данного изобретения станут очевидными для специалистов в данной области после рассмотрения данного описания. Полный объем раскрытия должен быть определен путем ссылки на формулу изобретения вместе с полным набором ее эквивалентов и спецификацию вместе с такими вариантами.

Если не указано иное, все числа, выражающие количество ингредиентов, условия реакции и так далее, используемые в описании и формуле изобретения, следует рассматривать как числа, модифицированные во всех случаях термином «около». Соответственно, если не указано обратное, то числовые параметры, указанные в этом описании и прилагаемой формуле изобретения, являются приблизительными параметрами, которые могут варьироваться в зависимости от желаемых свойств, которые предполагается получить в соответствии с данным раскрытием.

Изобретение относится к соединениям, которые влияют на скрытые дефекты в клеточном процессинге активности CFTR. Предложено соединение, выбранное из N-(2,4-ди-трет-бутил-5-гидроксифенил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамида, отличающееся тем, что, по меньшей мере, один атом углерода замещен кремнием и углерод, замещенный кремнием, является неароматическим углеродом; и, необязательно, один или несколько атомов водорода замещены дейтерием. Предложены также варианты соединения и способ повышения активности трансмембранного регулятора кистозного фиброза с использованием указанных соединений. Предложенные соединения имеют улучшенный профиль безопасности при сохранении биологической эффективности по сравнению с соединениями-аналогами, не содержащими кремния. 4 н. и 12 з.п. ф-лы, 2 табл., 17 пр.

1. Соединение, выбранное из N-(2,4-ди-трет-бутил-5-гидроксифенил)-4-оксо-1,4-дигидрохинолин-3-карбоксамида, отличающееся тем, что, по меньшей мере, один атом углерода замещен кремнием и углерод, замещенный кремнием, является неароматическим углеродом; и, необязательно, один или несколько атомов водорода замещены дейтерием.

2. Соединение по п. 1, отличающееся тем, что один атом углерода замещен атомом кремния.

3. Соединение по п. 1, отличающееся тем, что два атома углерода замещены атомом кремния.

4. Соединение по любому из пп. 1-3, отличающееся тем, что углерод, замещенный кремнием, представляет собой неароматический углерод.

5. Соединение по п. 1 или 2, отличающееся тем, что четвертичный атом углерода одного трет-бутилового фрагмента замещен кремнием.

6. Соединение по п. 1 или 3, отличающееся тем, что четвертичные атомы углерода двух трет-бутиловых фрагментов замещены кремнием.

7. Соединение по любому из пп. 1-6, отличающееся тем, что один или более атомов водорода замещены дейтерием.

8. Соединение по любому из пп. 1-7, отличающееся тем, что один или более атомов водорода трет-бутилового фрагмента замещены дейтерием.

9. Соединение, представленное формулой I:

Формула I,

отличающееся тем, что:

X¹ выбран из группы, состоящей из -Si(R³)₃, -C(CY₃)_3, водорода, галогена, C_1-3алкила, необязательно замещенного одним или более атомами галогена;

X² выбран из группы, состоящей из -Si(R³)₃ и -C(CY₃)₃;

где по меньшей мере один из X¹ или Х² представляет собой -Si(R³)_3;

R³ независимо выбран для каждого случая из группы, состоящей из C_1-4алкила и фенила, где C_1-4 алкил необязательно может быть замещен одним, двумя, тремя или более атомами дейтерия; и

Y независимо выбран для каждого случая из группы, состоящей из водорода и дейтерия.

10. Соединение по п. 9, отличающееся тем, что один из X¹ или X² представляет собой -C(CH₃)₃, и другой из X¹ или X² представляет собой -Si(R³)₃.

11. Соединение по п. 9 или 10, отличающееся тем, что соединение представляет собой:

12. Соединение по п. 9, отличающееся тем, что оба X¹ и X² представляют собой -Si(R³)₃.

13. Соединение по п. 9 или 12, отличающееся тем, что соединение представляет собой:

14. Соединение по любому из пп. 9-13, отличающееся тем, что R³ независимо выбран для каждого случая из группы, состоящей из гидроксила, метила, этила, изопропила, трет-бутила, метокси, этокси, изопропокси, трет-бутокси и фенила, где метил, этил, изопропил, трет-бутил, метокси, этокси, изопропокси, трет-бутокси и фенил необязательно могут быть замещены одним, двумя, тремя или более атомами дейтерия.

15. Соединение, выбранное из группы, состоящей из:

отличающееся тем, что любой атом, не обозначенный как дейтерий, присутствует в своем природном изотопном составе.

16. Способ повышения активности трансмембранного регулятора проводимости кистозного фиброза (CFTR) у субъекта, нуждающегося в этом, включающий введение указанному субъекту эффективного количества соединения по любому из пп. 1-15, где CFTR имеет мутацию ΔF508.