КРИСТАЛЛИЧЕСКИЕ СОЛИ ИНГИБИТОРА B-RAF-КИНАЗЫ Российский патент 2023 года по МПК C07D471/04 

ПЕРЕКРЕСТНАЯ ССЫЛКА НА РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ

Эта заявка испрашивает преимущество Предварительной Заявки на Патент США № 62/577,313, поданной 26 октября 2017 года, полное содержание которой включено в данное описание посредством ссылки.

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ

Настоящее изобретение относится к солевым формам, и, в частности, к кристаллическим солям N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида (BI 882370), ингибитора RAF-киназы, пригодного для лечения рака и других заболеваний.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Соединение N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамид (BI 882370), имеющее формулу I:

I

представляет собой ингибитор RAF-киназы, пригодного для лечения различных заболеваний, в том числе рака. Соединение формулы I, а также его получение и применение, были описаны в патентном документе WO/2012/104388, который включен в данное описание посредством ссылки во всей его полноте.

Сигнальный путь RAS-RAF-MAPK (митоген-активируемая протеинкиназа) играет критически важную роль в передаче сигналов пролиферации, генерируемых трансмембранными рецепторами и цитоплазматическими сигнальными элементами в ядро. Конститутивная активация этого пути включена в злокачественную трансформацию некоторых онкогенов. Активирующие мутации в семействе RAS происходят приблизительно в 15% случаев рака, и недавние данные показали, что B-RAF мутирует примерно в 7% рака (Wellbrock и др., «The RAF proteins take centre stage» («RAF-белки занимают центральное место»), Nature Rev. Mol. Cell Biol., 2004, том 5, стр. 875-885), идентифицируя его как еще один важный онкоген в этом пути. У млекопитающих RAF-семейство серин/треониновых киназ включает три представителя: A-RAF, B-RAF и C-RAF. Однако активирующие мутации до сих пор были идентифицированы только в B-RAF, подчеркивая важность этой изоформы. Представляется, что B-RAF является основной изоформой, которая связывает RAS с MEK, и что C-RAF и A-RAF сигналит ERK только на тонко настроенные клеточные реакции (Wellbrock и др., Nature Rev. Mol. Cell Biol., 2004, том 5, стр. 875-885). Наиболее распространенная канцерогенная мутация в B-RAF имеет результатом замену валина на глутаминовую кислоту в 600-ом положении белка (V600E), которая значительно повышает активность B-RAF, вероятно, потому, что его отрицательный заряд имитирует петлю активацию фосфорилирования (Wan и др., «Mechanism of activation of the RAF-ERK signaling pathway by oncogenic mutations of B-RAF» («Механизм активации RAF-ERK-сигнального пути онкогенными мутациями B-RAF»), Cell, 2004, том 116, стр. 855-867). Наибольшая доля V600-мутаций B-RAF приходится на злокачественную меланому (39%), рак щитовидной железы (46%), колоректальный рак (10%), рак желчных протоков (10%), рак простаты (4%), рак яичника (3%), и немелкоклеточный рак легких (2%), но они также происходят с меньшей частотой при многообразных других раковых заболеваниях (частоты мутаций согласно базе COSMIC (Catalogue Of Somatic Mutations In Cancer; Wellcome Trust Sanger Institute), публикация - том 53, 15 мая 2011 года; http://www.sanger.ac.uk/genetics/CGP/cosmic/). В литературе поддерживалась гипотеза, что мутированные B-RAF^V600E раковые клетки представляются весьма зависящими от непрерывной активации этого пути - явления, называемого «онкогенной аддикцией» - тогда как нормальные клетки B-RAF^wt используют более широкий диапазон сигналов. Этим создается ахиллесова пята в том плане, что может быть применен терапевтический подход в лечении пациентов с соматически мутировавшим B-RAF^V600E с использованием приема внутрь B-RAF-ингибиторов.

Ключевая роль B-RAF^V600E в искажении сигнального пути ERK и тем самым онкогенезе была продемонстрирована в нескольких независимых экспериментальных подходах, таких как сверхэкспрессия онкогенно мутировавшего B-RAF in vitro и in vivo (Wan и др., Cell, 2004, том 116, стр. 855-867; Wellbrock и др., Cancer Res., 2004, том 64: стр. 2338-2342), нокдаун siRNA in vitro (Karasarides и др., Oncogene, «V599EB-RAF is an oncogene in melanocytes» («V599EB-RAF как онкоген в меланоцитах»), 2004, том 23, стр. 6292-6298), или в индуцибельных коротких РНК-ксенотрансплантатных моделях, где был обнаружен доминантно-негативный сигнальный путь B-RAF, весьма связанный с in vivo канцерогенностью (Hoeflich и др., «Oncogenic BRAF is required for tumor growth and maintenance in melanoma models» («Онкогенный BRAF необходим для роста опухоли и поддерживания в моделях меланомы»), Cancer Res., 2006, том 66, стр. 999-1006).

Лечение меланомы при мутации B-RAF^V600E или клеток рака толстой кишки состоит в стимулировании фенотипического B-RAF ингибирования (например, снижении уровней фосфо-MEK и фосфо-ER, снижении экспрессии циклина D и стимулировании экспрессии белка p27). Таким образом, эти клетки блокируются в G1-фазе клеточного цикла и не пролиферируют.

Клинические доказательства механизма и подтверждение концепции были получены при лечении рака у пациентов с обусловленной мутацией B-RAF^V600E меланомой с использованием Zelboraf®, B-RAF-ингибитора (PLX-4032, вемурафениб, от фирмы Plexxikon/Daiichi Sankyo/Roche. Bollag и др., «Clinical efficacy of a RAF inhibitor needs broad target blockade in BRAF-mutant melanoma» («Для клинической эффективности RAF-ингибитора требуется широкая целевая блокада в BRAF-мутантной меланоме»), Nature, 2010, том 467(7315), стр. 596-599; Flaherty и др., New Engl. J. Med., «Inhibition of Mutated, Activated BRAF in Metastatic Melanoma» («Ингибирование мутированной активированной BRAF в метастатической меланоме»), 2010, том 363, стр. 809-819; Chapman и др., «Improved Survival with Vemurafenib in Melanoma with BRAF V600E Mutation» («Улучшенное выживание с вемурафенибом при меланоме с V600E-мутацией BRAF», New Engl. J. Med., 2011, том 364: стр. 2507-2516. Благоприятные показатели лечения наблюдались как в Фазе I, так и в Фазе III клинических испытаний. Сообщалось, что пациенты с меланомой, обусловленной мутацией B-RAF^V600K, также реагируют на терапию (Rubinstein и др., «Incidence of the V600K mutation among melanoma patients with BRAF mutations, and potential therapeutic response to the specific BRAF inhibitor PLX4032», («Заболеваемость с мутацией кодона V600K среди пациентов с меланомой при мутациях BRAF, и потенциальный терапевтический ответ на конкретный BRAF-ингибитор PLX4032»), J. Transl. Med., 2010, том 8, стр. 67).

Наиболее частой мутацией B-RAF является замена в аминокислотном остатке 600 валина на глутамат, при более чем 90%-ной частоте всех B-RAF-мутаций (Wellbrock и др., Nature Rev. Mol. Cell Biol., 2004, том 5, стр. 875-885), второй наиболее частой мутацией является замена валина на лизин, другие мутации были найдены в этом положении с меньшей частотой (Wellbrock и др., Nature Rev. Mol. Cell Biol., 2004, том 5, стр. 875-885, и частоты мутаций согласно базе COSMIC (Catalogue Of Somatic Mutations In Cancer; Wellcome Trust Sanger Institute) публикация - том 53, 15 мая 2011 года; http://www.sanger.ac.uk/genetics/CGP/cosmic/). Дополнительные мутации были обнаружены, например, в глицин-богатой петле (Wellbrock и др., Nature Rev. Mol. Cell Biol., 2004, том 5, стр. 875-885). Как представляется, скорее не все из этих редких мутаций приводят к прямой активации B-RAF (Wan и др., «Mechanism of activation of the RAF-ERK signaling pathway by oncogenic mutations of B-RAF» («Механизм активации RAF-ERK-сигнального пути онкогенными мутациями B-RAF»), Cell, 2004, том 116, стр. 855-867).

Соединение формулы I представляет собой сильнодействующий и селективный RAF-ингибитор, который связывается с конформацией DFG-out (неактивной) B-RAF-киназы. Соединение подавляет пролиферацию человеческих клеток меланомы с B-RAF-мутацией с 100 раз более высокой активностью (1-10 нмол/л), чем вемурафениб, тогда как действие на клетки дикого типа не проявлялось при 1000 нмол/л. Раствор соединения при приеме внутрь был действенным на мышиных моделях с меланомой с B-RAF-мутацией и колоректальным раком, и при приеме 25 мг/кг дважды в день показал превосходную эффективность сравнительно с вемурафенибом, дабрафенибом, или траметинибом. Соединение также было активным на мышах с A375-меланомой, которые были резистентными к вемурафенибу, в частности, при введении в комбинации с траметинибом. Мышь при лечении соединением не проявляла никакой потери веса или клинических симптомов непереносимости, и не наблюдались патологические изменения в нескольких исследованных главных органах, в том числе коже. Кроме того, в экспериментальном исследовании на крысах (до 60 мг/кг ежесуточно в течение 2 недель) соединение не проявило токсичности в плане клинической биохимии, гематологии, патологии и токсикогеномики. Эти результаты описаны в работе авторов Waizenegger и др., Mol. Cancer Ther., 2016, том 15 (№ 3); стр. 354-365, полное содержание которой включено в данное описание посредством ссылки.

Для получения, очистки и приготовления лекарственного препарата может быть благоприятным применение формы лекарственного средства, имеющей превосходную стабильность или другие желательные свойства рецептуры, проявляемые, например, одной или более солями или кристаллическими формами лекарственного препарата. Формирование солей оснóвных или кислотных лекарственных средств иногда может приводить к формам лекарственного препарата, которые имеют благоприятные свойства, такие как растворимость, негигроскопичность, кристалличность, и прочие физические свойства, которые являются благоприятными для приготовления лекарственного средства. С другой стороны, выявление подходящей соли или другой кристаллической формы, которая пригодна для приготовления лекарственного препарата, является затруднительным, поскольку существуют многообразные переменные факторы в плане образования соли или кристаллической формы. К ним относятся существование разнообразных возможных кислот и оснований, которые могли бы быть использованы в качестве противоиона, разнообразные стехиометрические соотношения, которые могут быть возможными для сочетания данного оснóвного или кислотного лекарственного средства с кислотным или оснóвным противоионом, самые разнообразные растворители и системы растворителей (в том числе комбинации растворителей), которые потенциально могут быть применены в попытках сформировать соли или кристаллические формы, и многообразные условия (такие как температура, или условия нагревания или охлаждения), при которых могут быть образованы соли или кристаллические формы. Все эти переменные факторы могут влиять на свойства солей или кристаллических форм, которые могли бы быть получены. Соли или твердые формы также могут иметь разнообразные свойства, которые делают их непригодными для разработки и приготовления лекарственного препарата, такие как отсутствие кристалличности (аморфные формы), присутствие или образование многочисленных кристаллических форм, которые могут быть способными к взаимопревращению и/или иметь различные свойства (полиморфизм), отсутствие растворимости в воде, гигроскопичность или липкость твердого вещества. Кроме того, формирование солей и кристаллических форм и их свойства, как правило, являются весьма непредсказуемыми.

Соответственно этому, представленные здесь формы кристаллических солей соединения формулы I помогают удовлетворить непреходящую потребность в разработке ингибитора RAF-киназы для лечения серьезных заболеваний.

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение предоставляет моносукцинатную соль N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида и конкретные кристаллические формы моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида.

В некоторых вариантах исполнения кристаллическая соль является по существу безводной.

В некоторых вариантах исполнения кристаллическая соль является по существу несольватированной.

В некоторых вариантах исполнения кристаллическая соль представляет собой Форму А моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида.

В некоторых вариантах исполнения кристаллическая соль имеет порошковую дифракционную рентгенограмму, содержащую по меньшей мере один из следующих пиков, в единицах 2θ: 15,4 ±0,5°; 20,0 ±0,5°; и 21,8 ±0,5°. В некоторых вариантах исполнения пик при 15,4 ±0,5°; 20,0 ±0,5°; 21,8 ±0,5° представляет собой пик с наибольшей относительной интенсивностью в порошковой дифракционной рентгенограмме.

В некоторых вариантах исполнения кристаллическая соль имеет порошковую дифракционную рентгенограмму, содержащую по меньшей мере один из следующих пиков, в единицах 2θ: 15,4 ±0,2°; 20,0 ±0,2°; и 21,8 ±0,2°. В некоторых вариантах исполнения пик при 15,4 ±0,2°; 20,0 ±0,2°; или 21,8 ±0,2° представляет собой пик с наибольшей относительной интенсивностью в порошковой дифракционной рентгенограмме.

В некоторых вариантах исполнения кристаллическая соль имеет порошковую дифракционную рентгенограмму, содержащую по меньшей мере один пик, в единицах 2θ, при 15,4 ±0,5°. В некоторых вариантах исполнения пик при 15,4 ±0,5° представляет собой пик с наибольшей относительной интенсивностью в порошковой дифракционной рентгенограмме.

В некоторых вариантах исполнения кристаллическая соль имеет порошковую дифракционную рентгенограмму, содержащую по меньшей мере один пик, в единицах 2θ, при 15,4 ±0,2°. В некоторых вариантах исполнения пик при 15,4 ±0,2° представляет собой пик с наибольшей относительной интенсивностью в порошковой дифракционной рентгенограмме.

В некоторых вариантах исполнения кристаллическая соль имеет порошковую дифракционную рентгенограмму, содержащую следующие пики, в единицах 2θ: 15,4 ±0,5°; 20,0 ±0,5°; и 21,8 ±0,5°. В некоторых вариантах исполнения пик при 15,4 ±0,5°; 20,0 ±0,5°; 21,8 ±0,5°, представляет собой пик с наибольшей относительной интенсивностью в порошковой дифракционной рентгенограмме.

В некоторых вариантах исполнения кристаллическая соль имеет порошковую дифракционную рентгенограмму, содержащую следующие пики, в единицах 2θ: 15,4 ±0,2°; 20,0 ±0,2°; и 21,8 ±0,2°. В некоторых вариантах исполнения пик при 15,4 ±0,2°; 20,0 ±0,2°; или 21,8 ±0,2° представляет собой пик с наибольшей относительной интенсивностью в порошковой дифракционной рентгенограмме.

В некоторых вариантах исполнения кристаллическая соль имеет порошковую дифракционную рентгенограмму, по существу такую, как показано на ФИГ. 10, ФИГ. 26 или ФИГ. 38.

В некоторых вариантах исполнения кристаллическая соль имеет термограмму дифференциальной сканирующей калориметрии (DSC), по существу как показанно на ФИГ. 11, ФИГ. 27 или ФИГ. 39.

В некоторых вариантах исполнения кристаллическая соль имеет результаты термогравиметрического анализа (TGA), по существу как показано на ФИГ. 12, ФИГ. 28 или ФИГ. 39.

В некоторых вариантах исполнения кристаллическая соль является по существу выделенной.

Настоящее изобретение предоставляет композицию (например, фармацевтическую композицию), содержащую кристаллическую моносукцинатную соль N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида, или любые варианты исполнения ее. Композиция может включать по меньшей мере один фармацевтически приемлемый носитель.

Настоящее изобретение предоставляет дозированную форму, содержащую кристаллическую моносукцинатную соль N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида, или любые варианты исполнения ее, или композицию, содержащую кристаллическую соль, или любые варианты исполнения ее. Дозированная форма может быть в виде таблетки.

Настоящее изобретение предоставляет способ получения кристаллической моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида. Способ включает взаимодействие N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида с одним эквивалентом янтарной кислоты. Способ может включать кристаллизацию или перекристаллизацию соли из С_1-4-спирта, водного С_1-4-спирта или этилацетата. Способ может включать кристаллизацию или перекристаллизацию соли из этанола, изопропанола, водного этанола или водного изопропанола, или из этилацетата.

Настоящее изобретение предоставляет способ лечения заболевания у пациента, в котором заболевание связано с аномальной экспрессией или активностью RAF-киназы, включающий введение пациенту терапевтически эффективного количества кристаллической моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида, или любых вариантов исполнения ее, или композиции, включающей кристаллическую моносукцинатную соль N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида. Настоящее изобретение также представляет кристаллическую моносукцинатную соль N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида, или любые варианты исполнения ее, для применения в лечении заболевания, связанного с аномальной экспрессией или активностью RAF-киназы. Также представлено применение кристаллической моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида, или любых вариантов исполнения ее, для лечения заболевания, связанного с аномальной экспрессией или активностью RAF-киназы. Также представлено применение кристаллической моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида, или любых вариантов исполнения ее, для получения медикамента для лечения заболевания, связанного с аномальной экспрессией или активностью RAF-киназы.

В некоторых вариантах исполнения заболевание связано с аномальной экспрессией или активностью B-RAF-киназы. В некоторых вариантах исполнения B-RAF-киназа представляет собой мутированную B-RAF-киназу. В некоторых вариантах исполнения B-RAF-киназа представляет собой V600E-мутированную B-RAF-киназу. В некоторых вариантах исполнения заболевание выбрано из рака, инфекционных заболеваний, воспаления и аутоиммунных болезней.

Кроме того, настоящее изобретение предоставляет способ лечения рака, включающий введение пациенту терапевтически эффективного количества кристаллической моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида, или любых вариантов исполнения ее, или композиции, включающей кристаллическую моносукцинатную соль N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида. Настоящее изобретение также предоставляет кристаллическую моносукцинатную соль N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида, или любые варианты исполнения ее, для применения в лечении рака. Также предоставлено применение кристаллической моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида, или любых вариантов исполнения ее, для лечения рака. Также предоставлено применение кристаллической моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида, или любых вариантов исполнения ее, для получения медикамента для лечения рака.

В некоторых вариантах исполнения рак представляет собой рак молочной железы, простаты, толстой кишки, эндометрия, мозга, мочевого пузыря, кожи, матки, яичника, легких, поджелудочной железы, почки, желудка, или рак крови. В некоторых вариантах исполнения рак представляет собой злокачественную меланому, рак щитовидной железы, колоректальный рак, рак желчных протоков, рак простаты, рак яичника или немелкоклеточный рак легких.

В некоторых вариантах исполнения рак связан с экспрессией или активностью RAF-киназы. В некоторых вариантах исполнения рак связан с экспрессией или активностью B-RAF-киназы. В некоторых вариантах исполнения B-RAF-киназа представляет собой мутированную B-RAF-киназу. В некоторых вариантах исполнения B-RAF-киназа представляет собой V600E-мутированную B-RAF-киназу. В некоторых вариантах исполнения рак представляет собой меланому. В некоторых вариантах исполнения рак представляет собой колоректальный рак. В некоторых вариантах исполнения рак представляет собой рак толстой кишки. В некоторых вариантах исполнения рак представляет собой рак щитовидной железы. В некоторых вариантах исполнения рак экспрессирует мутированную B-RAF-киназу. В некоторых вариантах исполнения рак экспрессирует V600E-мутированную B-RAF-киназу.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ

ФИГ. 1 представляет порошковую дифракционную рентгенограмму (XRPD) свободного основания N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида.

ФИГ. 2А представляет изображение многолуночного планшета, показывающее соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида, полученные с различными кислотами и растворителями, и выделенные кристаллизацией в суспензионном эксперименте.

ФИГ. 2В представляет серию изображений XRPD-сканов, выполненных на каждой из лунок многолуночного планшета на ФИГ. 2А, показывающих кристалличность солей N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида, полученных формированием суспензии с различными кислотами и растворителями.

ФИГ. 3А представляет изображение испарительной пластины, показывающее соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида, полученные с различными кислотами и растворителями, и выделенные кристаллизацией в эксперименте с выпариванием.

ФИГ. 3В представляет серию изображений XRPD-сканов, выполненных на каждой из лунок многолуночного планшета на ФИГ. 3А, показывающих кристалличность солей N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида, полученных выпариванием с различными кислотами и растворителями.

ФИГ. 4 представляет серию изображений XRPD-сканов, выполненных на образцах различных кристаллических солей N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида.

ФИГ. 5 представляет график XRPD моногидрохлоридной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида с образцом из лунки Е2 (нижний график) сравнительно с образцом, полученным из масштабированного синтеза (верхний график).

ФИГ. 6 представляет DSC-график моногидрохлоридной соли N-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида.

ФИГ. 7 представляет TGA-график моногидрохлоридной соли N-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида.

ФИГ. 8 представляет график сорбции-десорбции для моногидрохлоридной соли N-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида, показывающий прирост и потерю веса, когда относительная влажность варьировала в диапазоне 0-100%.

ФИГ. 9 представляет график XRPD моногидрохлоридной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида до (нижний график) и после (верхний график) эксперимента с сорбцией-десорбцией.

ФИГ. 10 представляет график XRPD моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида с образцом из лунки F10 (нижний график) сравнительно с образцом, полученным из масштабированного синтеза (верхний график).

ФИГ. 11 представляет DSC-график моносукцинатной соли N-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида.

ФИГ. 12 представляет TGA-график моносукцинатной соли N-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида.

ФИГ. 13 представляет график сорбции-десорбции для моносукцинатной соли N-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида, показывающий прирост и потерю веса, когда относительная влажность варьировала в диапазоне 0-100%.

ФИГ. 14 представляет график XRPD моногидрохлоридной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида до (нижний график) и после (верхний график) эксперимента с сорбцией-десорбцией, показывающий, что существенное изменение структуры не происходило.

ФИГ. 15 представляет график XRPD моногидрохлоридной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида.

ФИГ. 16 представляет DSC-график моногидрохлоридной соли N-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида. Образец показал эндотерму с началом изменения при примерно 313°С. Как правило, образцы имели эндотерму с началом изменения в диапазоне 312-322°С, соответственно температуре плавления. Поэтому температуру плавления измеряли при величине около 317±5°C. Некоторые образцы имели дополнительное эндотермическое событие при температуре около 250°С, соответственно потере растворителя.

ФИГ. 17 представляет TGA-график моногидрохлоридной соли N-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида. Образец проявлял потерю при высушивании около 1,7-2,5% вплоть до около 250°С, соответственно выделению воды и растворителя. Содержание воды было измерено на уровне около 0,9% (метод Карла Фишера).

ФИГ. 18 представляет график изотермы сорбции-десорбции для моногидрохлоридной соли N-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида, показывающий прирост и потерю веса, когда относительная влажность варьировала в диапазоне 0-90%.

ФИГ. 19 представляет график XRPD моногидрохлоридной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида до (нижний график) и после (верхний график) эксперимента с сорбцией-десорбцией, показывающий, что существенное изменение структуры не происходило.

ФИГ. 20 представляет график XRPD моногидрохлоридной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида после измельчения в качающейся мельнице в течение 10 минут при 30 об/сек.

ФИГ. 21 представляет график XRPD моногидрохлоридной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида после спрессовывания при 2000 Н в течение 1 секунды с образованием таблетки (диаметр - 5 мм).

ФИГ. 22 представляет ¹Н-ЯМР-спектр (400 МГц, DMSO-d6) моногидрохлоридной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида.

ФИГ. 23 представляет фрагмент ¹Н-ЯМР-спектра (400 МГц, DMSO-d6) в алифатической области (δ 0,5-6,0) моногидрохлоридной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида.

ФИГ. 24 представляет фрагмент ¹Н-ЯМР-спектра (400 МГц, DMSO-d6) в ароматической области (δ 6,0-11,5) моногидрохлоридной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида.

ФИГ. 25 представляет график, показывающий скорость растворения моногидрохлоридной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида на протяжении периода 0-60 минут в водной среде при значениях рН от 1,0 до 7,4.

ФИГ. 26 представляет график XRPD моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида.

ФИГ. 27 представляет DSC-график моносукцинатной соли N-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида.

ФИГ. 28 представляет TGA-график моносукцинатной соли N-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида.

ФИГ. 29 представляет график изотермы сорбции-десорбции для моносукцинатной соли N-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида, показывающий прирост и потерю веса, когда относительная влажность варьировала в диапазоне 0-90%.

ФИГ. 30 представляет график XRPD моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида до (нижний график) и после (верхний график) эксперимента с сорбцией-десорбцией, показывающий, что существенное изменение структуры не происходило.

ФИГ. 31 представляет график XRPD моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида после измельчения в качающейся мельнице в течение 10 минут при 30 об/сек.

ФИГ. 32 представляет график XRPD моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида после спрессовывания при 2000 Н в течение 1 секунды с образованием таблетки (диаметр - 5 мм).

ФИГ. 33 представляет ¹Н-ЯМР-спектр (400 МГц, DMSO-d6) моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида.

ФИГ. 34 представляет фрагмент ¹Н-ЯМР-спектра (400 МГц, DMSO-d6) в алифатической области (δ 0,5-6,0) моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида.

ФИГ. 35 представляет фрагмент ¹Н-ЯМР-спектра (400 МГц, DMSO-d6) в ароматической области (δ 6,0-10,0) моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида.

ФИГ. 36 представляет график, показывающий скорость растворения моногидрохлоридной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида в течение периода 0-60 минут в водной среде при значениях рН от 1,0 до 7,4.

ФИГ. 37 представляет график значений концентрации в плазме относительно времени после введения внутрь крысам (А) моногидрохлоридной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида при 40 мг/кг; (В) моногидрохлоридной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида при 80 мг/кг; (С) моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида при 40 мг/кг; (D) моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида при 80 мг/кг.

ФИГ. 38 представляет график XRPD двух партий Формы А моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида.

ФИГ. 39 представляет пару графиков TGA- и DSC-анализа Формы А моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида.

ФИГ. 40 представляет ¹Н-ЯМР-спектр (DMSO-d6) Формы А моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида.

ФИГ. 41 представляет ¹Н-ЯМР-спектр (дейтерированный метанол) Формы А моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида.

ФИГ. 42 представляет пару графиков XRPD Формы А моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида до и после нагревания до 170°С и охлаждения до комнатной температуры.

ФИГ. 43 представляет пару графиков TGA Формы А моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида до и после нагревания до 170°С и охлаждения до комнатной температуры.

ФИГ. 44 представляет пару графиков DSC Формы А моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида до и после нагревания до 170°С и охлаждения до комнатной температуры.

ФИГ. 45 представляет ¹Н-ЯМР-спектр (DMSO-d6) Формы А моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида до и после нагревания до 170°С и охлаждения до комнатной температуры.

ФИГ. 46 представляет серию графиков XRPD, показывающих, что форма Формы А моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида не изменяется во время испытания на равновесную растворимость.

ФИГ. 47 представляет серию графиков XRPD, показывающих стабильность Формы А моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида после хранения в различных условиях.

ФИГ. 48 представляет серию графиков DVS-изотерм, показывающую низкую гигроскопичность Формы А моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида.

ФИГ. 49 представляет пару графиков XRPD, показывающих, что Форма А моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида не изменяет форму после DVS-испытания.

ФИГ. 50 представляет пару полученных микроскопией с поляризованным светом изображений Формы А моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

I. Определения

Если не оговаривается иное, все используемые здесь технические и научные термины имеют то же значение, как это обыкновенно понимается специалистом с обычной квалификацией в этой области технологии, к которой относится это изобретение.

Для терминов «например» и «такой как», и их грамматических эквивалентов, выражение «и без ограничения» понимается соответственно, если определенно не оговорено иное.

Как применяемый здесь, термин «около» подразумевает «приблизительно» (например, плюс или минус приблизительно 10% указанного значения).

В различных местах данного описания определенные признаки могут быть раскрыты в группах или диапазонах. Конкретно предполагается, что такое представление включает каждую и всякую индивидуальную субкомбинацию членов таких групп и диапазонов. Например, термин «С_1-4-алкил» конкретно подразумевает индивидуальное раскрытие (без ограничения) метильной, этильной, С₃-алкильной и С₄-алкильной групп.

Термин «индивид», «субъект» или «пациент», используемые взаимозаменяемо, имеют отношение к любому животному, включая млекопитающих, предпочтительно мышь, крыс, других грызунов, кроликов, собак, кошек, свинью, крупный рогатый скот, овцу, лошадей, или приматов, и наиболее предпочтительно людей.

Термин «лечение» или «терапия» подразумевает одно или более из (1) предотвращения заболевания; например, предотвращения заболевания, состояния или расстройства у индивида, который может быть предрасположен к заболеванию, состоянию или расстройству, но еще не испытывает или не проявляет признаков патологии или симптоматики заболевания; (2) подавления заболевания; например, подавления заболевания, состояния или расстройства у индивида, который испытывает или проявляет признаки патологии или симптоматику заболевания, состояния или расстройства (то есть, купирование или замедление дальнейшего развития патологии и/или симптоматологии); и (3) уменьшения интенсивности заболевания; например, улучшения состояния при заболевании, состоянии или расстройстве у индивида, который испытывает или проявляет признаки патологии или симптоматику заболевания, состояния или расстройства (то есть, изменение в обратную сторону патологии и/или симптоматологии), такое как снижение серьезности заболевания.

Выражение «терапевтически эффективное количество» подразумевает количество активной соли или кристаллической формы фармацевтического препарата, которое возбуждает биологический или медицинский отклик, который выявляется в ткани, системе, животном, особи или человеке исследователем, ветеринаром, медицинским работником или другим практикующим врачом.

Определенные признаки изобретения, которые, для ясности, описаны в контексте отдельных вариантов осуществления, также могут быть представлены в комбинации в единственном варианте осуществления. Напротив, различные признаки изобретения, которые, для краткости, описаны в контексте единственного варианта осуществления, также могут быть представлены по отдельности или в любой подходящей субкомбинации.

Сокращения

В настоящем изобретении могут быть использованы нижеследующие аббревиатуры и символы: Ac (ацетил); aq. (водный); Boc (трет-бутоксикарбонил); Bu (бутил); °C (градусов Цельсия); c (концентрация); conc. (концентрированный); d (день(дней)); DCM (дихлорметан); DEA (диэтиламин); DIPEA (N-этил-N, N-диизопропиламин (основание Хюнига)); DMF (N, N-диметилформамид); DMSO (диметилсульфоксид); DSC (дифференциальная сканирующая калориметрия); DVS (динамическая сорбция пара); EDTA (этилендиаминтетрауксусная кислота); EGTA (этиленгликольтетрауксусная кислота); eq. (эквивалент(-ты)); ESI (ионизация распылением в электрическом поле, электроспрей); Et (этил); Et₂O (диэтиловый простой эфир); EtOAc (этилацетат); EtOH (этанол); g (грамм(-мы)); h (час(часы); HPLC (высокоэффективная жидкостная хроматография); HCl (соляная кислота); i (изо-); iPrOH (изопропанол); L (литр(-ры)); LC (жидкостная хроматография); M (молярный); mg (миллиграмм(-мы)) Me (метил); MeCN (ацетонитрил); MeOH (метанол); min. (минут); mL (миллилитр); mM (миллимолярный); MPLC (жидкостная хроматография среднего давления); MS (масс-спектрометрия); NP (нормальная фаза); Ph (фенил); Pr (пропил); Py (пиридин); rac (рацемический); Rf (коэффициент удерживания); RH (относительная влажность); RP (противофаза); rps (оборотов в секунду); rt (температура окружающей среды); tBu (трет-бутил); TEA (триэтиламин); temp. (температура); tert (третичный); Tf (трифлат); TFA (трифторуксусная кислота); TGA (термогравиметрический анализ); THF (тетрагидрофуран); TLC (тонкослойная хроматография); tRet. (время удерживания (HPLC)); UV (ультрафиолетовый), XRPD (порошковая рентгеновская дифрактометрия). Здесь также могут применяться другие обычные сокращения.

II. Кристаллические соли

Настоящее изобретение, помимо всего прочего, относится к солевым формам, и, в частности, кристаллическим солевым формам N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида (BI 882370), имеющего формулу I:

I

которые применимы, например, в приготовлении твердых дозированных форм вышеуказанного соединения для лечения различных заболеваний, в том числе рака.

Различные солевые и кристаллические формы одного и того же вещества могут иметь различные объемные характеристики, имеющие отношение, например, к гигроскопичности, растворимости, стабильности, и тому подобным. Формы с высокими температурами плавления могут иметь хорошую термодинамическую стабильность, что может быть благоприятным в продлении срока годности при хранении лекарственных составов, содержащих конкретную солевую или кристаллическую форму. Формы с более низкими температурами плавления могут быть менее термодинамически стабильными, но являются преимущественными в том отношении, что они имеют повышенную растворимость в воде, которая проявляется в повышенной биодоступности лекарственного средства. Формы, которые имеют слабую гигроскопичность, могут быть желательными благодаря их стабильности в условиях нагревания и влажности и устойчивости к разложению во время длительного хранения. Безводные формы могут быть желательными, поскольку они могут единообразно получаться без проблем с вариацией веса или состава вследствие вариации растворителя или содержания воды. С другой стороны, гидратированные или сольватированные формы иногда могут быть предпочтительными, если они являются менее гигроскопичными и проявляют улучшенную устойчивость к влажности в условиях хранения.

Как применяемая здесь, «кристаллическая форма» предполагается означающей определенную конфигурацию кристаллической решетки кристаллического вещества (которое может включать описываемые здесь соли). Различные кристаллические формы одного и того же вещества могут иметь различные кристаллические решетки (например, элементарные ячейки), которым присущи различные физические свойства, которые являются характерными для каждой из кристаллических форм. В некоторых ситуациях различные конфигурации решеток имеют различное содержание воды или растворителя. Различные кристаллические решетки могут быть идентифицированы методами определения характеристик веществ в твердом состоянии, такими как порошковая рентгеновская дифракция (XRPD). Другие методы охарактеризования, такие как дифференциальная сканирующая калориметрия (DSC), термогравиметрический анализ (TGA), динамическая сорбция пара (DVS); твердотельная спектроскопия ЯМР, и тому подобные, дополнительно помогают идентифицировать кристаллическую форму, а также содействуют определению стабильности и содержания растворителя/воды.

Кристаллические формы вещества могут включать как сольватированные (например, гидратированные), так и несольватированные (например, безводные) формы. Гидратированная форма представляет собой кристаллическую форму, которая включает воду в кристаллической решетке. Гидратированные формы могут быть стехиометрическими гидратами, где вода присутствует в решетке в определенном водно-молекулярном соотношении, таком как для гемигидратов, моногидратов, дигидратов, и т.д. Гидратированные формы также могут быть нестехиометрическими, где содержание воды является переменным и зависящим от внешних условий, таких как влажность.

Кристаллические формы могут быть охарактеризованы порошковой рентгеновской дифракией (XRPD). Картина XRPD рефлексов (пиков, дифракционных максимумов) обычно рассматривается как характерная особенность структуры конкретной кристаллической формы. Является общеизвестным, что относительные интенсивности XRPD-пиков могут варьировать в широких пределах в зависимости, помимо прочего, от способа получения образца, дисперсности кристаллов, фильтров, методики монтажа образца, и конкретного используемого прибора. В некоторых случаях могут наблюдаться новые пики, или могут исчезать существующие пики, в зависимости от типа прибора или настроек (например, применяется ли Ni-фильтр или нет). Как используемый здесь, термин «пик» имеет отношение к рефлексу, имеющему относительную высоту/интенсивность по меньшей мере около 4% высоты/интенсивности максимального пика. Более того, вариация прибора и другие факторы могут влиять на значения 2-тета. Так, отнесения пиков, таких как описываемые здесь, могут варьировать на величину плюс или минут около 0,2° (2-тета), и термин «по существу», как применяемый здесь в контексте XRPD, предусматривает включение вышеуказанных вариаций.

Таким же образом показания температуры в связи с дифференциальной сканирующей калориметрией (DSC), термогравиметрическим анализом (TGA), или прочими термальными экспериментами, могут варьировать на величину около ±4°С в зависимости от прибора, конкретных настроек, условий получения образца, и т.д. Например, в отношении DSC известно, что наблюдаемые температуры будут зависеть от скорости изменения температуры, а также от способа получения образца и конкретного используемого прибора. Так, описанные здесь значения в отношении DSC-термограмм могут варьировать, как указано выше, на ±4°С. Соответственно этому, описываемая здесь кристаллическая форма, имеющая DSC-термограмму, «по существу» такую, как показано на любой из Фигур, понимается как включающая такую вариацию.

Описываемые здесь соли могут быть выделены в различных кристаллических формах, которые могут включать кристаллические формы, которые являются безводными, гидратированными, несольватированными или сольватированными. Примерные гидраты включают гемигидраты, моногидраты, дигидраты, и тому подобные. В некоторых вариантах исполнения кристаллические формы являются безводными и несольватированными. Под «безводным» подразумевается, что кристаллическая форма соединения формулы I по существу не содержит связанную воду в структуре кристаллической решетки, то есть, соединение не образует кристаллический гидрат.

В некоторых вариантах исполнения соли и кристаллические формы согласно изобретению могут быть по существу выделенными. Под «по существу выделенными» подразумевается, что конкретная соль или кристаллическая форма соединения является, по меньшей мере частично, свободной от примесей. Например, в некоторых вариантах исполнения солевая или кристаллическая форма согласно изобретению включает менее, чем около 50%, менее, чем около 40%, менее, чем около 30%, менее, чем около 20%, менее, чем около 15%, менее, чем около 10%, менее, чем около 5%, менее, чем около 2,5%, менее, чем около 1%, или менее, чем около 0,5% примесей. Как правило, примеси включают любое загрязнение, которое не является по существу выделенной солью или кристаллической формой, включая, например, другие соли или другие кристаллические формы, и другие вещества.

В некоторых вариантах исполнения солевая или кристаллическая форма по существу не содержит другие кристаллические формы. Выражение «существу не содержит другие кристаллические формы» означает, что конкретная кристаллическая форма включает более, чем около 80%, более, чем около 90%, более, чем около 95%, более, чем около 98%, более, чем около 99%, или более, чем около 99,5% по весу конкретной кристаллической формы.

Настоящее изобретение представляет кристаллическую моносукцинатную соль N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида, и конкретные кристаллические формы моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида.

Термин «моносукцинатная соль» означает, что компоненты янтарной кислоты и основания N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида, присутствующие в соли, находятся в соотношении «кислота:основание» около 1:1, например, с соотношением в диапазоне от около 0,8:1 до около 1,2:1, от около 0,9:1 до около 1,1:1, от около 1:1,2 до около 1:0,8, или от около 1:1,1 до около 1:0,9, например, в соотношении около 0,8:1, около 0,9:1, около 1:1, или около 1,1:1, или около 1:0,8, около 1:0,9, около 1:1, около 1:1,1 или около 1:1,2.

Как подробно описывается дополнительно ниже, кристаллическая моносукцинатная соль N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида имеет непредвиденные свойства, такие как улучшенная растворимость, улучшенная собственная скорость растворения, и улучшенные фармакокинетические характеристики, сравнительно со свободным основанием и другими солевыми формами N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида.

В некоторых вариантах исполнения кристаллическая соль является по существу безводной. Под «по существу безводной» подразумевается, что кристаллическая соль содержит менее, чем стехиометрически эквивалентное количество воды, и не содержит воду как часть кристаллической структуры соли. В некоторых вариантах исполнения вода, если присутствует, наличествует в количестве около 5% или менее, около 4% или менее, около 3% или менее, около 2% или менее, около 1% или менее, около 0,5% или менее, около 0,2% или менее, или около 0,1% или менее по весу кристаллической соли. Применение термина «по существу безводный» не исключает присутствия следовых количеств воды.

В некоторых вариантах исполнения кристаллическая соль является по существу несольватированной. Под «по существу несольватированной» подразумевается, что кристаллическая соль содержит менее, чем стехиометрически эквивалентное количество растворителя, и не содержит молекулы растворителя как часть кристаллической структуры соли. В некоторых вариантах исполнения растворитель, если присутствует, наличествует в количестве около 5% или менее, около 4% или менее, около 3% или менее, около 2% или менее, около 1% или менее, около 0,5% или менее, около 0,2% или менее, или около 0,1% или менее по весу кристаллической соли. Применение термина «по существу несольватированный» не исключает присутствия следовых количеств растворителя.

В некоторых вариантах исполнения кристаллическая соль по существу свободна от иных растворителей, нежели вода. Под «по существу свободной» подразумевается, что кристаллическая соль содержит менее, чем стехиометрически эквивалентное количество иного растворителя, нежели вода, и не содержит молекулы иного растворителя, чем вода, как часть кристаллической структуры соли. В некоторых вариантах исполнения иной растворитель, нежели вода, если присутствует, наличествует в количестве около 5% или менее, около 4% или менее, около 3% или менее, около 2% или менее, около 1% или менее, около 0,5% или менее, около 0,2% или менее, или около 0,1% или менее по весу кристаллической соли. Применение термина «по существу свободный от иных растворителей, нежели вода» не исключает присутствия следовых количеств таких растворителей.

В некоторых вариантах исполнения кристаллическая соль представляет собой Форму А моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида (как дополнительно описывается более подробно ниже).

Кристаллическая форма соли идентифицируется уникальными характерными особенностями в отношении, например, порошковой рентгеновской дифрактометрии (XRPD), дифференциальной сканирующей калориметрии (DSC), термогравиметрического анализа (TGA), и динамической сорбции пара (DVS).

В некоторых вариантах исполнения Форма А моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида охарактеризована рентгенограммой XRPD, по существу такой, как показано на ФИГ. 10, ФИГ. 26 или ФИГ. 38.

В некоторых вариантах исполнения Форма А моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида охарактеризована рентгенограммой XRPD, по существу такой, как показано в Таблице 9.

В некоторых вариантах исполнения кристаллическая соль имеет порошковую дифракционную рентгенограмму, содержащую по меньшей мере один из следующих пиков, в единицах 2θ: 15,4 ±0,5°; 20,0 ±0,5°; и 21,8 ±0,5°. В некоторых вариантах исполнения пик при 15,4 ±0,5°; 20,0 ±0,5°; 21,8 ±0,5°, представляет собой пик с наибольшей относительной интенсивностью в порошковой дифракционной рентгенограмме.

В некоторых вариантах исполнения кристаллическая соль имеет порошковую дифракционную рентгенограмму, содержащую по меньшей мере один из следующих пиков, в единицах 2θ: 15,4 ±0,2°; 20,0 ±0,2°; и 21,8 ±0,2°. В некоторых вариантах исполнения пик при 15,4 ±0,2°; 20,0 ±0,2°; или 21,8 ±0,2°, представляет собой пик с наибольшей относительной интенсивностью в порошковой дифракционной рентгенограмме.

В некоторых вариантах исполнения кристаллическая соль имеет порошковую дифракционную рентгенограмму, содержащую по меньшей мере один пик, в единицах 2θ, при 15,4 ±0,5°. В некоторых вариантах исполнения пик при 15,4 ±0,5° представляет собой пик с наибольшей относительной интенсивностью в порошковой дифракционной рентгенограмме.

В некоторых вариантах исполнения кристаллическая соль имеет порошковую дифракционную рентгенограмму, содержащую по меньшей мере один пик, в единицах 2θ, при 15,4 ±0,2°. В некоторых вариантах исполнения пик при 15,4 ±0,2° представляет собой пик с наибольшей относительной интенсивностью в порошковой дифракционной рентгенограмме.

В некоторых вариантах исполнения кристаллическая соль имеет порошковую дифракционную рентгенограмму, содержащую следующие пики, в единицах 2θ: 15,4 ±0,5°; 20,0 ±0,5°; и 21,8 ±0,5°. В некоторых вариантах исполнения пик при 15,4 ±0,5°; 20,0 ±0,5°; или 21,8 ±0,5°, представляет собой пик с наибольшей относительной интенсивностью в порошковой дифракционной рентгенограмме.

В некоторых вариантах исполнения кристаллическая соль имеет порошковую дифракционную рентгенограмму, содержащую следующие пики, в единицах 2θ: 15,4 ±0,2°; 20,0 ±0,2°; и 21,8 ±0,2°. В некоторых вариантах исполнения пик при 15,4 ±0,2°; 20,0 ±0,2°; или 21,8 ±0,2° представляет собой пик с наибольшей относительной интенсивностью в порошковой дифракционной рентгенограмме.

В некоторых вариантах исполнения кристаллическая соль имеет порошковую дифракционную рентгенограмму, содержащую по меньшей мере три, по меньшей мере четыре, по меньшей мере пять, по меньшей мере шесть, по меньшей мере семь, по меньшей мере восемь, по меньшей мере девять, или все из следующих пиков, единицах 2θ: 15,4 ±0,5°; 16,1 ±0,5°; 17,2 ±0,5°; 19,1 ±0,5°; 19,8 ±0,5°; 20,0 ±0,5°; 20,2 ±0,5°; 20,5 ±0,5°; 21,5 ±0,5°; и 21,8 ±0,5°. В некоторых вариантах исполнения порошковая дифракционная рентгенограмма содержит пик 15,4 ±0,5°; 20,0 ±0,5°; или 21,8 ±0,5°, как пик с наибольшей относительной интенсивностью в порошковой дифракционной рентгенограмме.

В некоторых вариантах исполнения порошковая дифракционная рентгенограмма содержит пик при 15,4 ±0,5° как пик с наибольшей относительной интенсивностью в порошковой дифракционной рентгенограмме.

В некоторых вариантах исполнения кристаллическая соль имеет порошковую дифракционную рентгенограмму, содержащую по меньшей мере три, по меньшей мере четыре, по меньшей мере пять, по меньшей мере шесть, по меньшей мере семь, по меньшей мере восемь, по меньшей мере девять, или все из следующих пиков, единицах 2θ: 15,4 ±0,2°; 16,1 ±0,2°; 17,2 ±0,25°; 19,1 ±0,2°; 19,8 ±0,2°; 20,0 ±0,2°; 20,2 ±0,2°; 20,5 ±0,2°; 21,5 ±0,2°; и 21,8 ±0,2°. В некоторых вариантах исполнения порошковая дифракционная рентгенограмма содержит пик 15,4 ±0,2°; 20,0 ±0,2°; или 21,8 ±0,2°, как пик с наибольшей относительной интенсивностью в порошковой дифракционной рентгенограмме. В некоторых вариантах исполнения порошковая дифракционная рентгенограмма содержит пик при 15,4 ±0,2° как пик с наибольшей относительной интенсивностью в порошковой дифракционной рентгенограмме.

В некоторых вариантах исполнения порошковая дифракционная рентгенограмма содержит по меньшей мере два из пиков при 15,4 ±0,5°; 20,0 ±0,5°; или 21,8 ±0,5°, как пики с наибольшей относительной интенсивностью в порошковой дифракционной рентгенограмме.

В некоторых вариантах исполнения порошковая дифракционная рентгенограмма содержит по меньшей мере три из пиков при 15,4 ±0,5°; 20,0 ±0,5°; или 21,8 ±0,5°, как пики с наибольшей относительной интенсивностью в порошковой дифракционной рентгенограмме.

В некоторых вариантах исполнения порошковая дифракционная рентгенограмма содержит по меньшей мере два из пиков при 15,4 ±0,2°; 20,0 ±0,2°; или 21,8 ±0,2°, как два пика с наибольшей относительной интенсивностью в порошковой дифракционной рентгенограмме.

В некоторых вариантах исполнения порошковая дифракционная рентгенограмма содержит по меньшей мере пики при 15,4 ±0,2°; 20,0 ±0,2°; или 21,8 ±0,2°, как три пика с наибольшей относительной интенсивностью в порошковой дифракционной рентгенограмме.

В некоторых вариантах исполнения кристаллическая соль имеет термограмму дифференциальной сканирующей калориметрии (DSC), по существу как показано на ФИГ. 11, ФИГ. 27 или ФИГ. 39.

В некоторых вариантах исполнения кристаллическая соль имеет результат термогравиметрического анализа (TGA), по существу как показано на ФИГ. 12, ФИГ. 28 или ФИГ. 39.

В некоторых вариантах исполнения кристаллическая соль является по существу выделенной. В некоторых вариантах исполнения кристаллическая соль составляет по меньшей мере 80%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 96%, по меньшей мере 97%, по меньшей мере 98%, по меньшей мере 99% Формы А моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида

Моносукцинатная соль N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида может быть получена реакцией N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида с надлежащим количеством, типично примерно одним эквивалентом, янтарной кислоты.

Реакция может быть проведена в подходящем растворителе. Реакция может быть проведена растворением N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида и добавлением янтарной кислоты, которая также может быть растворена в кислоте. Если необходимо, может быть выполнено нагревание растворов N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида и/или янтарной кислоты для растворения соединения. Нагревание может быть проведено до температуры выше комнатной температуры, например, около 30°С, около 40°С, около 50°С, около 60°С, около 70°С, около 80°С, около 90°С, или около 100°С. Реакция может быть проведена в течение периода времени, например, около 5 минут, около 10 минут, около 20 минут, около 30 минут, около 40 минут, около 50 минут, около 1 часа, около 2 часов, около 3 часов, или около 4 часов. После нагревания раствор может быть охлажден, например, до температуры на уровне комнатной температуры или ниже, например, около 25°С, около 20°С, около 15°С, около 10°С, около 5°С, или около 0°С. После такого охлаждения реакционная смесь может выдерживаться в течение дополнительного периода времени при более низкой температуре, например, в течение около 5 минут, около 10 минут, около 20 минут, около 30 минут, около 40 минут, около 50 минут, около 1 часа, около 2 часов, около 3 часов, около 4 часов, около 8 часов, около 16 часов, или около 24 часов.

Во время исполнения стадий для формирования соли или ее кристаллической формы, раствор или суспензия, в которых проводится реакция, может взбалтываться, например, перемешиваться.

Подходящие растворители для образования соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида с янтарной кислотой, в том числе Формы А соли, включают С_1-4-спирт, водный С_1-4-спирт, или этилацетат. Растворители могут включать метанол, этанол, изопропанол, водный метанол, водный этанол, водный изопропанол, или этилацетат.

Кристаллическая соль N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида с янтарной кислотой, и, в частности, Форма А, могут быть образованы непосредственно из реакции N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида с янтарной кислотой при надлежащих условиях. В альтернативрном варианте, кристаллическая соль или ее Форма А может быть получена кристаллизацией соли и/или перекристаллизацией соли из подходящего растворителя.

Подходящая методика кристаллизации соли или перекристаллизации соли включает растворение или суспендирование соли в подходящем растворителе. Может быть проведено нагревание выше комнатной температуры, например, около 30°С, около 40°С, около 50°С, около 60°С, около 70°С, около 80°С, около 90°С, или около 100°С. Нагревание может быть проведено в течение периода времени, например, около 5 минут, около 10 минут, около 20 минут, около 30 минут, около 40 минут, около 50 минут, около 1 часа, около 2 часов, около 3 часов, или около 4 часов. После нагревания раствор может быть охлажден, например, до температуры на уровне комнатной температуры или ниже, например, около 25°С, около 20°С, около 15°С, около 10°С, около 5°С, или около 0°С. После такого охлаждения реакционная смесь может выдерживаться в течение дополнительного периода времени при более низкой температуре, например, в течение около 5 минут, около 10 минут, около 20 минут, около 30 минут, около 40 минут, около 50 минут, около 1 часа, около 2 часов, около 3 часов, около 4 часов, около 8 часов, около 16 часов, или около 24 часов. Во время исполнения стадий кристаллизации или перекристаллизации соли или ее кристаллической формы раствор или суспензия, в которых проводится реакция, может взбалтываться, например, перемешиваться.

III. Способы применения

Соли и кристаллические формы, описываемые в настоящем изобретении, представляют собой ингибиторы B-RAF-киназы, и поэтому пригодны для лечения патологических расстройств (заболеваний), в которых активируется сигнальный путь RAS-RAF-MAPK, в частности, клеточных пролиферативных заболеваний, таких как рак. Соли и кристаллические формы могут ингибировать пролиферацию клеток, в частности, подавлением доступа в фазу синтеза ДНК. Обработанные клетки угнетаются в G1-фазе клеточного цикла. Поэтому соли и кристаллические формы полезны для лечения заболеваний, которые характеризуются чрезмерной или аномальной пролиферацией клеток.

Патологические заболевания, которые могут излечиваться солями и кристаллическими формами, описываемыми в настоящем изобретении, включают заболевания, связанные с аномальной экспрессией или активностью RAF-киназы. Заболевание может излечиваться введением пациенту при необходимости в таком лечении терапевтически эффективного количества кристаллической соли, или любого из вариантов исполнения ее, как здесь описывается. В некоторых вариантах исполнения заболевание связано с экспрессией или активностью мутированной B-RAF-киназы. В некоторых вариантах исполнения заболевание связано с экспрессией или активностью V600E-мутированной B-RAF-киназы. В других вариантах исполнения заболевание может быть связано с экспрессией или активностью мутированной B-RAF-киназы, выбранной из следующих мутантов: R461I, I462S, G463E, G463V, G465A, G465E, G465V, G468A, G468E, N580S, E585K, D593V, F594L, G595R, L596V, T598I, V599D, V599E, V599K, V599R, V600K, и A727V.

Патологические заболевания, которые могут излечиваться солями и кристаллическими формами, описываемыми в настоящем изобретении, включают рак, инфекционные заболевания, воспаление и аутоиммунные болезни.

Патологические заболевания, которые могут излечиваться солями и кристаллическими формами, описываемыми в настоящем изобретении, включают онкологические заболевания. Онкологические заболевания могут включать новообразования, и также онкологические заболевания, которые не сопровождаются образованием опухолей, такие как гематологические раковые заболевания.

В некоторых вариантах исполнения рак представляет собой рак молочной железы, рак простаты, рак толстой кишки, рак эндометрия, рак мозга, рак мочевого пузыря, рак кожи, рак матки, рак яичника, рак легких, рак поджелудочной железы, рак почки, рак желудка, или рак крови. В некоторых вариантах исполнения рак крови представляет собой острый миелобластный лейкоз, хронический миелоилный лейкоз, В-клеточную лимфому, хроническую лимфоцитарную лейкемию (CLL), неходжкинскую лимфому, лейкоз ворсистых клеток, мантийноклеточную лимфому, лимфому Беркитта, мелкоклеточную лимфоцитарную лимфому, фолликулярную лимфому, лимфоплазмоцитарную лимфому, экстранодальную В-клеточную лимфому маргинальной зоны, диффузную крупноклеточную В-клеточную лимфому подтипа активированных В-клеток (ABC), или диффузную крупноклеточную В-клеточную лимфому подтипа В-клеток герминативного центра (GCB). В некоторых вариантах исполнения неходжкинская лимфома (NHL) выбирается из рецидивной NHL, резистентной NHL, и рецидивной фолликулярной NHL.

В некоторых вариантах исполнения рак представляет собой рак молочной железы, простаты, толстой кишки, эндометрия, мозга, мочевого пузыря, кожи, матки, яичника, легких, поджелудочной железы, почки, желудка, или рак крови.

В некоторых вариантах исполнения рак представляет собой злокачественную меланому, рак щитовидной железы, колоректальный рак, рак желчных протоков, рак простаты, рак яичника или немелкоклеточный рак легких.

В некоторых вариантах исполнения рак связан с экспрессией или активностью RAF-киназы.

В некоторых вариантах исполнения рак связан с экспрессией или активностью B-RAF-киназы.

В некоторых вариантах исполнения рак связан с экспрессией или активностью мутированной B-RAF-киназы.

В некоторых вариантах исполнения рак связан с экспрессией или активностью V600E-мутированной B-RAF-киназы.

В некоторых вариантах исполнения рак связан с экспрессией или активностью V600E-мутированной B-RAF-киназы, выбранной из следующих мутантов: R461I, I462S, G463E, G463V, G465A, G465E, G465V, G468A, G468E, N580S, E585K, D593V, F594L, G595R, L596V, T598I, V599D, V599E, V599K, V599R, V600K, и A727V.

В некоторых вариантах исполнения рак представляет собой меланому.

В некоторых вариантах исполнения рак представляет собой колоректальный рак.

В некоторых вариантах исполнения рак представляет собой рак толстой кишки.

В некоторых вариантах исполнения рак представляет собой рак щитовидной железы.

В некоторых вариантах исполнения рак экспрессирует мутированную B-RAF-киназу. В некоторых вариантах исполнения рак экспрессирует один или многие из следующих мутантов B-RAF-киназы: R461I, I462S, G463E, G463V, G465A, G465E, G465V, G468A, G468E, N580S, E585K, D593V, F594L, G595R, L596V, T598I, V599D, V599E, V599K, V599R, V600K, и A727V.

Следующие онкологические заболевания могут излечиваться соединениями согласно изобретению, без ограничения этим: опухоли мозга, например, такие как акустическая неврома, астроцитомы, такие как пилоидные астроцитомы, фибриллярная астроцитома, протоплазматическая астроцитома, гемистоцитарная астроцитома, анапластическая астроцитома и глиобластома, лимфомы мозга, метастазы мозга, опухоль гипофизарного хода, такая как пролактинома, продуцирующая HGH (гормон роста человека) опухоль и продуцирующая ACTH опухоль (адренокортикотропный гормон), краниофарингиомы, медуллобластомы, менингиомы и олигодендроглиомы; опухоли нервов (неоплазмы), такие как, например, опухоли вегетативной нервной системы, такие как симпатогониома, ганглионейрома, параганглиома (феохромоцитома, хромаффинома), и опухоль каротидного гломуса, опухоли периферической нервной системы, такие как ампутационная неврома, нейрофиброма, невринома (нейрилеммома, шваннома) и малигнантная шваннома, а также опухоли центральной нервной системы, такие как опухоли мозга и опухоли костного мозга; рак кишечника, например, такой как карцинома прямой кишки, карцинома толстой кишки, колоректальная карцинома, рак анального канала, рак толстой кишки, опухоли тонкой кишки и двенадцатиперстной кишки; опухоли века, такие как базалиома или базальноклеточная карцинома; рак поджелудочной железы или карцинома поджелудочной железы; рак мочевого пузыря или карцинома мочевого пузыря; рак легкого (бронхиальная карцинома), например, такой как мелкоклеточные бронхиальные карциномы (овсяно-клеточные карциномы), и немелкоклеточные бронхиальные карциномы (NSCLC), такие как карциномы плоского эпителия, аденокарциномы и крупноклеточные бронхиальные карциномы; рак молочной железы, например, такой как карцинома молочной железы, такой как внутрипротоковая карцинома, мукоидный рак, инвазивный дольковый рак, тубулярный рак, аденоидная кистозная карцинома и папиллярная карцинома; неходжкинская лимфома (NHL), такая как, например, лимфома Беркитта, неходжкинские лимфомы (NHL) с низким злокачественным потенциалом и грибовидный микоз; рак матки, или рак эндометрия, или карцинома эндометрия, или рак тела матки; CUP-синдром (рак без выявленного первичного очага); рак яичника или карцинома яичника, такая как слизистый рак, рак эндометрия или серозный рак; рак желчного пузыря; рак желчного протока, например, такой как опухоль Клацкина; рак яичек, например, такой как семиномы и несеминомы; лимфома (лимфосаркома), например, такая как злокачественная лимфома, болезнь Ходжкина, неходжкинские лимфомы (NHL), такие как хроническая лимфоцитарная лейкемия, волосатоклеточный лейкоз, иммуноцитома, плазмоцитома (множественная миелома), иммунобластома, лимфома Беркитта, Т-клеточный грибовидный микоз, крупноклеточная анапластическая лимфобластома и лимфобластома; рак гортани, например, такой как опухоли голосовых связок, супраглоттальные, глоттальные и субглоттальные опухоли; рак кости, например, такой как остеохондрома, хондрома, хондробластома, хондромиксоидная фиброма, остеома, остеоидная остеома, остеобластома, эозинофильная гранулема, гигантоклеточная опухоль, хондросаркома, остеосаркома, саркома Юинга, ретикулосаркома, плазмоцитома, фиброзная дисплазия, ювенильные костные кисты и аневризмальные костные кисты; опухоли головы и шеи, например, такие как опухоли на губах, языке, дна ротовой полости, ротовой полости, десен, неба, слюнных желез, горла, носовой полости, придаточных пазух носа, гортани и среднего уха; рак печени, например, такой как гепатоклеточная карцинома или гепатоцеллюлярная карцинома (HCC); лейкемии, например, такие как острый лейкоз, такие как острая лимфатическая/лимфатобластная лейкемия (ALL), острый миелоидный лейкоз (AML); хронические лейкемии, такие как хроническая лимфатическая лейкемия (CLL), хронический миелоидный лейкоз (CML); рак желудка или карцинома желудка, например, такие как папиллярная, тубулярная и муцинозная аденокарцинома, рак из перстневидных клеток, аденосквамозный рак, мелкоклеточная карцинома и недифференцированный рак; меланомы, например, такие как поверхностная распространенная, узловая, типа злокачественного лентиго и акральная лентигинозная меланома; рак почки, например, такой как почечно-клеточный рак или гипернефрома, или опухоль Гравица; рак пищевода или карцинома пищевода; рак полового члена; рак простаты; рак горла или карциномы глотки, например, такие как карциномы носоглотки, карциномы ротовой части глотки и карциномы гипофаринкса; ретинобластома, рак влагалища или вагинальная карцинома; карциномы плоского эпителия, аденокарциномы, преинвазиные карциномы, злокачественные меланомы и саркомы; карциномы щитовидной железы, например, такие как папиллярная, фолликулярная и медуллярная карцинома щитовидной железы, а также анапластические карциномы; спиналиома, эпидермоидная карцинома и рак плоского эпителия кожи; тимомы, рак уретры и рак вульвы.

Новые соли и кристаллические формы могут быть использованы для профилактики, краткосрочного или долговременного лечения вышеупомянутых заболеваний, необязательно, также в сочетании с радиотерапией или другими «самыми современными» соединениями, например, такими как цитостатики или цитотоксины, ингибиторы пролиферации клеток, антиангиогенные препараты, стероиды или антитела.

Описываемые здесь соли и кристаллические формы также могут быть применены для лечения неонкологических пролиферативных заболеваний. Примеры пролиферативных заболеваний, которые могут подвергаться лечению, включают, но без ограничения этим, доброкачественные опухоли мягких тканей, костные опухоли, опухоли мозга и спинного мозга, опухоли век и глазниц, гранулому, липому, менингиому, множественную эндокринную неоплазию, носовые полипы, гипофизарные опухоли, пролактиному, доброкачественную внутричерепную гипертензию, себорейные кератозы, желудочные полипы, узелки в щитовидной железе, циститные неоплазмы поджелудочной железы, гемангеомы, узелки голосовых связок, полипы и цисты, болезнь Кастлемана, хроническую пилонидальную болезнь, дерматофиброму, волосяную кисту, пиогенную гранулему, и синдром ювенильного полипоза.

Другие заболевания, которые могут излечиваться, включают вирусные инфекции (например, вирус Эпштейна-Барра, вирус гепатита В, вирус гепатита С, вирус герпеса, вирус иммунодефицита человека, вирус папилломы человека, саркома Капоши, аденовирус, поксвирус, и другие вирусы с эписомальной ДНК). Поэтому соли и кристаллические формы могут быть использованы для лечения таких заболеваний и состояний, как инфекции и реактивации простого герпеса, герпетические холодные болячки, инфекции и реактивации опоясывающего лишая, ветрянка, опоясывающие герпесы, вирус папилломы человека, цервикальная неоплазия, аденовирусные инфекции, в том числе острое респираторное заболевание, и поксвирусные инфекции, такие как коровья оспа и оспа, и вирус африканской чумы свиней. В одном конкретном варианте исполнения, соли и кристаллические формы указаны для лечения папилломовирусных инфекций кожи или цервикального эпителия человека.

Другие заболевания, которые могут подвергаться лечению, включают воспалительные процессы и аутоиммунные заболевания. Примеры аутоиммунных заболеваний и воспалительных процессов, которые могут подвергаться лечению, включают такие как острое, сверхострое или хроническое отторжение пересаженных органов, острый подагрический артрит, острые воспалительные реакции (такие как синдром острого респираторного дистресса и ишемическое/реперфузное повреждение), болезнь Аддисона, агаммаглобулинемия, аллергический ринит, аллергия, алопеция, болезнь Альцгеймера, аппендицит, атеросклероз, астма, остеоартрит, ювенильный артрит, псориатический артрит, ревматоидный артрит, атопический дерматит, аутоиммунная алопеция, аутоиммунные гемолитические и тромбоцитопенные состояния, аутоиммунный гипопитуитаризм, аутоиммунный полигландулярный синдром, болезнь Бехчета, буллезный эпидермолиз, холецистит, хроническая идиопатическая тромбоцитопеническая пурпура, хроническая обструктивная болезнь легких (COPD), цирроз, дегенеративная болезнь суставов, депрессия, дерматит, дерматомиозит, экзема, энтерит, энцефалит, гастрит, гломерулонефрит, гигантоклеточный артериит, синдром Гудпасчера, синдром Гийена-Барре, гингивит, болезнь Грейвса, тиреоидит Хашимото, гепатит, гипофизит, воспалительное заболевание кишечника (болезнь Крона и язвенный колит), воспалителение тазовых органов, синдром раздраженного кишечника, болезнь Кавасаки, эндотоксин-индуцированный шок, менингит, рассеянный склероз, миокардит, миастения гравис, грибовидный микоз, миозит, нефрит, остеомиелит, панкреатит, болезнь Паркинсона, перикардит, злокачественная анемия, пульмонит, первичный склерозирующий холангит желчных протоков, узелковый полиартрит, псориаз, ретинит, склерит, склерасиерма, склеродермия, синусит, болезнь Шегрена, сепсис, септический шок, солнечный ожог, системная красная волчанка, отторжение тканевого лоскута, тиреоидит, диабет 1-ого типа, артериит Такаясу, уретрит, увеит, васкулит, васкулит, включающий гигантоклеточный артериит, васкулит с вовлечением органов, такой как гломерулонефрит, витилиго, макроглобулинемия Вальденстрема и гранулематоз Вегенера.

Дополнительные заболевания включают бактериальные, грибковые и/или паразитарные инфекции; кожные болезни (например, псориаз); заболевания, обусловленные гиперплазией, которые характеризуются увеличением числа клеток (например, фибробластов, гепатоцитов, костей и клеток костного мозга, хрящевых клеток, или гладкомышечных клеток, или эпителиальных клеток (например, гиперплазия эндометрия); заболевания костей и сердечно-сосудистые заболевания (например, рестеноз и гипертрофия).

Описываемые здесь соли и кристаллические формы также пригодны для защиты пролиферирующих клеток (например, волосковых, кишечных, кровяных и недифференцированных клеток) от повреждения ДНК, вызванного радиацией, воздействием УФ-излучения и/или цитостатической терапией.

Комбинированные терапии

Описываемые здесь соли и кристаллические формы могут быть применены самостоятельно или в комбинации с другими активными субстанциями согласно изобретению, необязательно также в комбинации с другими фармакологически активными веществами, такими как другие химиотерапевтические агенты.

Для лечения рака и других пролиферативных заболеваний соединения согласно изобретению могут быть применены в комбинации с химиотерапевтическими агентами, или с другими антипролиферативными препаратами. Химиотерапевтические агенты, которые могут быть введены в комбинации с описываемыми здесь солями и кристаллическими формами для лечения рака и других пролиферативных заболеваний, включают, без ограничения этим, гормоны, аналоги гормонов и антигормональные препараты (например, тамоксифен, торемифен, ралоксифен, фульвестрант, мегестрола ацетат, флутамид, нилутамид, бикалутамид, аминоглютетимид, ципротерона ацетат, финастерид, бусерелина ацетат, флудрокортизон, флюоксиместерон, медроксипрогестерон, октреотид), ингибиторы ароматазы (например, анастрозол, летрозол, лиарозол, ворозол, эксеместан, атаместан), LHRH агонисты и антагонисты LHRH (например, гозерелина ацетат, лупролид), ингибиторы факторов роста (таких факторов роста, как, например, «фактор роста тромбоцитов (PDGF)», «фактор роста фибробластов (FGF)», «фактор роста эндотелия сосудов (VEGF)», «эпидермальный фактор роста (EGF)», «инсулиноподобные факторы роста (IGF)», «эпидермальный фактор роста человека (HER, например, HER2, HER3, HER4)», и «фактор роста гепатоцитов (HGF)»), например, ингибиторы представляют собой антитела к «факторам роста», антитела к «рецепторам факторов роста», и ингибиторы тирозинкиназ, например, такие как цетуксимаб, гефитиниб, иматиниб, лапатиниб и трастузумаб); антиметаболиты (например, антифолаты, такие как метотрексат, ральтитрексед, аналоги пиримидина, такие как 5-фторурацил, капецитабин и гемцитабин, аналоги пурина и аденозина, такие как меркаптопурин, тиогуанин, кладрибин и пентостатин, цитарабин, флударабин); противоопухолевые антибиотики (например, антрациклины, такие как доксорубицин, даунорубицин, эпирубицин и идарубицин, митомицин-С, блеомицин, дактиномицин, пликамицин, стрептозоцин); производные платины (например, цисплатин, оксалиплатин, карбоплатин); алкилирующие реагенты (например, эстрамустин, меклоретамин, мелфалан, хлорамбуцил, бусульфан, дакарбазин, циклофосфамид, ифосфамид, темозоломид, нитрозомочевины, например, такие как кармустин и ломустин, тиотепа); антимитотические препараты (например, алкалоиды барвинка, например, такие как винбластин, виндезин, винорелбин и винкристин; и таксаны, такие как паклитаксел, доцетаксел); ингибиторы тубулина; ингибиторы PARP, ингибиторы топоизомеразы (например, эпиподофиллотоксины, например, такие как этопозид и этопофос, тенипозид, амсакрин, топотекан, иринотекан, митоксантрон), ингибиторы серин/треонинкиназы (например, ингибиторы PDK 1, ингибиторы B-Raf, ингибиторы mTOR, ингибиторы mTORC1, ингибиторы PI3K, двойные ингибиторы mTOR/PI3K, ингибиторы STK 33, ингибиторы AKT, ингибиторы PLK 1, ингибиторы CDKs, ингибиторы Aurora-киназы), ингибиторы тирозинкиназы (например, ингибиторы PTK2/FAK), ингибиторы белок-белковых взаимодействий (например, IAP, Mcl-1, MDM2/MDMX), ингибиторы MEK, ингибиторы ERK, ингибиторы IGF-1R, ингибиторы ErbB-рецепторов, аналоги рапамицина (например, эверолимус, темсиролимус, ридафоролимус, сиролимус) и разнообразные химиотерапевтические препараты, такие как аминофостин, анагрелид, клодронат, филграстин, интерферон, интерферон альфа, лейковорин, ритуксимаб, прокарбазин, левамизол, месна, митотан, памидронат и порфимер.

Другие препараты, которые могут быть введены в комбинации с описываемыми здесь солями и кристаллическими формами, включают 2-хлордезоксиаденозин, 2-фтордезоксицитидин, 2-метоксиэстрадиол, 2C4, 3-алетин, 131-I-TM-601, 3CPA, 7-этил-10-гидроксикамптотецин, 16-аза-эпофилон B, A 105972, A 204197, абареликс, абиратерон, алдеслейкин, алемтузумаб, алитретиноин, аллопуринол, алловектин-7, алтретамин, альвоцидиб, амонафид, анастрозол, антрапиразол, AG-2037, AP-5280, апазикуон, апомин, аранозу, арглабин, триоксид мышьяка, арзоксифен, аспарагиназа, атаместан, антрасентан, ауристатин PE, AVLB, AZ10992, ABX-EGF, AMG-479 (ганитумаб), ARRY 162, ARRY 438162, ARRY-300, ARRY-142886/AZD-6244 (селуметиниб), ARRY-704/AZD-8330, AR-12, AR-42, AS-703988, AXL-1717, AZD-8055, AZD-5363, AZD-6244, ARQ-736, ARQ 680, AS-703026 (примасертиб), авастин, AZD-2014, азацитидин, азаэпотилон B, азонафиб, BAY-43-9006, BAY 80-6946, BBR-3464, BBR-3576, бевацизумаб, бексаротен, BEZ-235, бирикодара дицитрат, BCX-1777, BKM-120, блеоцин, BLP-25, BMS-184476, BMS-247550, BMS-188797, BMS-275291, BMS-663513, BMS-754807, BNP-1350, BNP-7787, BIBW 2992 (афатиниб, томтовок), BIBF 1120 (варгатеф), BI 836845, BI 2536, BI 6727, BI 836845, BI 847325, BI 853520, BIIB-022, блеомициновую кислоту, блеомицин A, блеомицин B, бриваниб, бриостатин-1, бортезомиб, бросталлицин, бисульфан, BYL-719, пролекарство CA-4, CA-4, CapCell, кальцитриол, калустерон, канертиниб, канфосфамид, капецитабин, карбоплатин, карбоксифталатоплатин, кармустин, CCI-779, CC-115, CC-223, CEP-701, CEP-751, CBT-1, цефиксим, цефлатонин, цефтриаксон, целекоксиб, цельмолейкин, цематодин, цетуксимаб, хлорамбуцил, CH4987655/RO-4987655, хлортрианизен, циленгитид, цисплатин, CDA-II, CDC-394, CKD-602, CKI-27, кладрибин, клофарабин, колхицин, комбретастатин A4, ингибиторы COT, CHS-828, CH-5132799, CLL-Thera, CMT-3 криптофицин 52, CTP-37, CTLA-4 моноклональные антитела, CP-461, CV-247, цианоморфолинодоксорубицин, циклофосфамид, циклоспорин, цианоморфолинодоксорубицин, D 24851, дакарбазин, дактиномицин, далтепарин натрия, дазатиниб, даунорубицин, децитабин, денилейкин, денилейкин дифтитокс, деоксорубицин, деоксирубицин, деоксикоформицин, депсипептид, дезоксиэпотилон B, дексаметазон, дексразоксан, дексразоксанет, диэтилстильбэстрол, дифтомотекан, дидокс, DMDC, доластатин 10, доцетаксел, доранидазол, доксорубицин, дромостанолона пропионат, DS-7423, E7010, E-6201, экулизумаб, эдатрексат, эдотреотид, эфапроксирал, эфлорнитин, ингибиторы EGFR, EKB-569, EKB-509, энзастаурин, элзамитруцин, эпирубицин, эпотилон B, эпратузумаб, ER-86526, эрлотиниб, эстрамустин, ET-18-OCH3, этинилцитидин, этинилэстрадиол, этопозида фосфат, этопозид, эксатекан, эксатекана мезилат, эксеместан, эксисулинд, фентанила цитрат, фенретинид, фигитумумаб, филграстин, флоксуридин, флударабин, фолиевую кислоту, фторурацил, FOLFOX, FOLFOX4, FOLFIRI, форместан, фотемустин, фульвестрант, галарубицин, галлия мальтолат, гефинитиб, гемцитабин, гемтузумаб, гемтузумаб озогамицин, гиматекан, глуфосфамид, GCS-IOO, GDC-0623, GDC-0941 (пиктрелисиб), GDC-0980, GDC-0032, GDC-0068, GDC-0349, GDC-0879, G17DT иммуноген, GMK, GPX-100, gp100-пептидные вакцины, GSK-5126766, GSK-690693, GSK-1120212 (траметиниб), GSK-2118436 (дабрафениб), GSK-2126458, GSK-2132231A, GSK-2334470, GSK-2110183, GSK-2141795, GW2016, гозерелина ацетат, гранисетрон, герцептин, гексаметилмеламин, гистамин, гистрелина ацетат, гомохаррингтонин, гомохаррингтонин, гидроксимочевина, гидроксипрогестерона капроат, ибандронат, ибритумомаб, ибритумомаб тиуксетан, идарубицин, идатрексат, иденестрол, IDN-5109, ифосфамид, ингибиторы IGF-1R, IMC-1C11, IMC-A12 (циксутумумаб), иматиниба мезилат, иммунол, индисулам, интерферон альфа-2a, интерферон альфа-2b, пегилированный интерферон альфа-2b, интерлейкин-2, INK-1117, INK-128, INSM-18, ионафарниб, ипилимумаб, ипроплатин, иринотекан, ирофульвен, изогомогалихондрин-B, изофлавон, изотретиноин, иксабепилон, JRX-2, JSF-154, J-107088, сопряженные эстрогены, кахалид F, кетоконазол, KW-2170, KW-2450, лапатиниба дитозилат, лефлуномид, леналидомид, ленограстим, летрозол, лейковорин, леупролид, леупролида ацетат, леупорелин, левамизол, лексидронам, LGD-1550, линезолид, лобаплатин, тексафирин лютеция, лометрексол, ломустин, лозоксантрон, LU 223651, луртотекан, LY-S6AKT1, LY-2780301, мафосфамид, маримастат, мехлорэтамин, мегестрола ацетат, ингибиторы MEK, MEK-162, мелфалан, меркаптопурин, метотрексат, метоксзален, метилтестостерон, метилпреднизолон, MEDI-573, MEN-10755, MDX-H210, MDX-447, MDX-1379, MGV, мидостаурин, минодронную кислоту, митомицин, митомицин C, митотан, митоксантрон, мивобулин, MK-2206, MK-0646 (далотузумаб), MLN518, мотексафин гадолиния, MS-209, MS-275, MX6, нандролона фенилпропионат, неларабин, неридронат, нератиниб, Нексавар, неовастат, нилотиниб, нимесулид, нитроглицерин, нофетумомаб, нолатрексед, норелин, N-ацетилцистеин, N-бензилгуанин, облимерсен, омепразол, онкофаг, oncoVEX^GM-CSF, ормиплатин, ортатаксел, оксалиплатин, антитела к OX44, OSI-027, OSI-906 (линситиниб), антитела к 4-1BB, оксантразол, эстроген, паклитаксел, памидронат, панитумумаб, патупилон, пэгфилграстим, PCK-3145, пэгаспаргас, пэгфилграстим, PBI-1402, PBI-05204, PDO325901, антитела к PD-1, PEG-пакситаксел, стабилизированный альбумином пакситаксел, PEP-005, PF-05197281, PF-05212384, PF-04691502, PHT-427, P-04, PKC412, P54, PI-88, пелитиниб, пеметрексед, пеметрексед динатрия, пентостатин, пентрикс, перифозин, перилловый спирт, пертузумаб, ингибиторы PI3K, ингибиторы PI3K/mTOR, PG-TXL, PG2, PLX-4032/RO-5185426 (вемурафениб), PLX-3603/RO-5212054, PT-100, PWT-33597, PX-866, пикоплатин, пипоброман, пивалоилоксиметилбутират, пиксантрон, феноксодиол O, PKI166, плевитрексед, пликамицин, полипреновую кислоту, порфиромицин, преднизон, преднизолон, прокарбазин, хинакрин, гинамед, гинупристин, R115777, RAF-265, рамосетрон, ранпирназу, расбуриказуа, RDEA-119/BAY 869766, RDEA-436, аналоги ребеккамицина, ингибиторы рецепторной тирозинкиназы (RTK), ревимид, RG-7167, RG-7304, RG-7421, RG-7321, RG 7440, ризоксин, rhu-MAb, ринфабат, ризедронат, ритуксимаб, робатумумаб, рофекоксиб, RO-31-7453, RO-5126766, RO-5068760, RPR 109881A, рубидазон, рубинекан, R-флурбипрофен, RX-0201, S-9788, сабарубицин, SAHA, сарграмостим, сатраплатин, SB 408075, Se-015/Ve-015, SU5416, SU6668, SDX-101, семустин, сеокальцитол, SM-11355, SN-38, SN-4071, SR-27897, SR-31747, SR-13668, SRL-172, сорафениб, спироплатин, скваламин, стрептозоцин, суберанилогидроксамовую кислоту, сунитиниб, сунитиниба малеат, сутент, T 900607, T 138067, TAK-733, TAS-103, тацединалин, талапорфин, тамоксифен, Тарцева, таригитар, тасисулам, таксотер, таксопрексин, тазаротен, тегафур, темозоламид, тенипозид, тесмилифен, тестостерон, тестостерона пропионат, тесмилифен, тестолактон, тетраплатин, тетродотоксин, тезацитабин, талидомид, тералюкс, терарубицин, тиогуанин, тиотепа, тималфацин, тиазофурин, типифарниб, тирапазамин, токладезин, томудекс, топотекан, торемифен, торемофин, тозитумомаб, трабектедин, TransMID-107, транс-ретиноевую кислоту, трастузумаб, тремелимумаб, третиноин, триацетилуридин, тиапин, трицирибин, триметрексат, TLK-286TXD 258, тикерб/тайверб, уроцидин, урациловую горчицу, валрубицин, ваталаниб, винбластин, винкристин, винфлунин, винорелбин, вирулизин, WX-UK1, WX-554, вестибикс, вориностат, кселоду, XELOX, XL-147, XL-228, XL-281, XL-518/R-7420/GDC-0973, XL-765, YM-511, YM-598, ZD-4190, ZD-6474, ZD-4054, ZD-0473, ZD-6126, ZD-9331, ZDI839, ZSTK-474, золедронат и зосугуидар.

Соединения согласно изобретению также могут быть использованы в комбинации с медицинской терапией, такой как хирургия или радиотерапия, например, с гамма-излучением, нейтронная лучевая радиотерапия, электронно-лучевая радиотерапия, протонно-лучевая терапия, брахитерапия, и системные радиоактивные изотопы.

Для лечения аутоиммунных заболеваний и воспалительных процессов соединение согласно изобретению может быть введено в комбинации с кортикостероидом, таким как триамцинолон, дексаметазон, флуоцинолон, кортизон, преднизолон или флуметолон.

Для лечения аутоиммунных заболеваний и воспалительных процессов соединение согласно изобретению может быть введено в комбинации с иммунодепрессантом, таким как флуоцинолона ацетонид (Retisert®), римексолон (AL-2178, Vexol, Alcon), или циклоспорин (Restasis®).

Для лечения аутоиммунных заболеваний и воспалительных процессов соединение согласно изобретению может вводиться в комбинации с одним или многими дополнительными препаратами, выбранными из Dehydrex™ (Holles Labs), Цивамида (Opko), гиалуроната натрия (Vismed, Lantibio/TRB Chemedia), циклоспорина (ST-603, Sirion Therapeutics), ARG101(T) (тестостерона, Argentis), AGR1012(P) (Argentis), экабета натрия (Senju-Ista), гефарната (Santen), 15-(s)-гидроксиэйкозантетраеновой кислоты (15(S)-HETE), цевилемина, доксициклина (ALTY-0501, Alacrity), миноциклина, iDestrin™ (NP50301, Nascent Pharmaceuticals), циклоспорина A (Nova22007, Novagali), окситетрациклина (Дурамицин, MOLI1901, Lantibio), CF101 (2S, 3S, 4R, 5R)-3, 4-дигидрокси-5-[6-[(3-иодофенил)метиламино]пурин-9-ил]-N-метил-оксолан-2-карбамила, Can-Fite Biopharma), воклоспорина (LX212 или LX214, Lux Biosciences), ARG103 (Agentis), RX-10045 (синтетический аналог резольвина, Resolvyx), DYN15 (Dyanmis Therapeutics), ривоглитазона (DE011, Daiichi Sanko), TB4 (RegeneRx), OPH-01 (Ophtalmis Monaco), PCS101 (Pericor Science), REV1-31 (Evolutec), Лакритина (Senju), ребамипида (Otsuka-Novartis), OT-551 (Othera), PAI-2 (University of Pennsylvania and Temple University), пилокарпина, такролимуса, пимекролимуса (AMS981, Novartis), лотепреднола этабоната, ритуксимаба, дикуафозола тетранатрия (INS365, Inspire), KLS-0611 (Kissei Pharmaceuticals), дегидроэпиандростерона, анакинры, эфализумаба, микофенолята натрия, этанерцепта (Embrel®), гидроксихлорохина, NGX267 (TorreyPines Therapeutics), или талидомида.

В некоторых вариантах исполнения соединение согласно изобретению может вводиться в комбинации с одним или многими препаратами, выбранными из антибиотиков, антивирусных, противогрибковых препаратов, анестетиков, противовоспалительных средств, в том числе стероидных и нестероидных противовоспалительных препаратов, и антиаллергических средств. Примеры пригодных медикаментов включают аминогликозиды, такие как амикацин, гентамицин, тобрамицин, стрептомицин, нетилмицин и канамицин; фторхинолоны, такие как ципрофлоксацин, норфлоксацин, офлоксацин, тровафлоксацин, ломефлоксацин, левофлоксацин и эноксацин; нафтиридин; сульфонамиды; полимиксин; хлорамфеникол; неомицин; парамомицин; колистиметат; бацитрацин; ванкомицин; тетрациклины; рифампин и его производные («рифампины»); циклосерин; бета-лактамы; цефалоспорины; амфотерицины; флуконазол; флуцитозин; натамицин; миконазол; кетоконазол; кортикостероиды; диклофенак; флурбипрофен; кеторолак; супрофен; кромолин; лодоксамид; левокабастин; нафазолин; антазолин; фенирамин; или азалидный антибиотик.

Один или многие дополнительные фармацевтические препараты могут быть введены пациенту одновременно или последовательно.

IV. Приготовление, дозированные формы и введение

Будучи применяемыми в качестве фармацевтических препаратов, описываемые здесь соли и кристаллические формы могут быть введены в форме фармацевтических композиций. Эти композиции могут быть составлены общеизвестным в фармацевтической технологии способом, и могут быть введены различными путями, в зависимости от того, желательно ли локальное или системное лечение, и от подвергаемой лечению области. Введение может быть местным (включающим чрезкожное, эпидермальное, глазное, и на слизистые оболочки, в том числе внутриносовое, вагинальное и ректальное введение), пульмональным (например, ингаляцией или вдуванием порошков или аэрозолей, в том числе посредством распылителя), оральным или парэнтеральным. Парэнтеральное введение включает внутривенное, внутриартериальное, подкожное, внутрибрюшинное, внутримышечное введение, или инъекцией или инфузией; или внутричерепное, например, подоболочечное или внутрижелудочковое, введение. Парэнтеральное введение может быть в форме однократной болюсной дозы, или может быть, например, непрерывным перфузионном вливанием. Фармацевтические композиции и составы для местного введения могут включать трансдермальные пластыри, мази, лосьоны, кремы, гели, капли, суппозитории, аэрозоли, растворы и порошки. Могут быть необходимыми или желательными традиционные фармацевтические носители, на водной, порошковой или масляной основе, загустители и тому подобные. Содержание фармацевтически активного соединения должно быть в диапазоне от 0,1 до 90 вес.%, предпочтительно от 0,5 до 50 вес.%, композиции в целом, то есть, в количестве, которое является достаточным для достижения указанного ниже диапазона дозировки.

Это изобретение также включает фармацевтические композиции, которые содержат, в качестве активного ингредиента, описываемые здесь соли и кристаллические формы, в комбинации с одним или многими фармацевтически приемлемыми носителями (эксципиентами). В некоторых вариантах исполнения композиция пригодна для местного применения. При получении композиций согласно изобретению активный ингредиент обычно смешивают с эксципиентом, разбавляют эксципиентом или заключают внутри такого носителя в форме, например, капсулы, маленького пакета, бумаги или другого контейнера. Когда эксципиент служит в качестве разбавителя, он может быть твердым, полутвердым или жидким материалом, который действует как наполнитель, носитель или среда для активного ингредиента. Таким образом, композиции могут быть в форме таблеток, пилюль, порошков, пастилок, саше, облаток, эликсиров, суспензий, эмульсий, растворов, сиропов, аэрозолей (как в твердой, так и в жидкостной среде), мазей, содержащих, например, до 10% по весу активного соединения, мягких и твердых желатиновых капсул, суппозиториев, стерильных растворов для инъекций и стерильных упакованных порошков.

При составлении композиции активное соединение в виде соли или кристаллической формы, как здесь описанных, может быть измельчено с образованием частиц надлежащей величины перед объединением с другими ингредиентами. Если соль или кристаллическая форма являются по существу нерастворимыми, они могут быть измельчены до частиц с размером менее 200 меш. Если соль или кристаллическая форма по существу растворимы в воде, размер частиц может быть отрегулирован измельчением для обеспечения по существу однородного распределения в композиции, например, около 40 меш.

Описываемые здесь соли и кристаллические формы могут быть измельчены с использованием известных способов размалывания, таких как мокрое измельчение, для получения частиц с размером, пригодным для формирования таблетки и для композиций других типов. Тонко измельченные (например, до наночастиц) препараты описываемых здесь солей и кристаллических форм могут быть получены известными в технологии способами, например, смотри Международную Патентную Заявку № WO 2002/000196.

Некоторые примеры пригодных эксципиентов включают лактозу, декстрозу, сахарозу, сорбит, маннит, крахмалы, гуммиарабик, фосфат кальция, альгинаты, трагакант, желатин, силикат кальция, микрокристаллическую целлюлозу, поливинилпирролидон, целлюлозу, воду, сироп, и метилцеллюлозу. Композиции могут дополнительно включать: смазывающие средства, такие как тальк, стеарат магния и минеральное масло; смачиватели; эмульгаторы и суспендирующие агенты; консерванты, такие как метил- и пропилгидроксибензоаты; подсластители; и вкусо-ароматические добавки. Описываемые здесь соли и кристаллические формы могут быть составлены так, чтобы обеспечивать быстрое, непрерывное или отсроченное высвобождение активного ингредиента после введения пациенту с использованием известных в технологии процедур.

Подходящие таблетки могут быть получены, например, смешением активного(-ных) вещества(-ществ) с известными наполнителями, например, инертными разбавителями, такими как карбонат кальция, фосфат кальция или лактоза, дезинтегрантами, такими как кукурузный крахмал или альгиновая кислота, связующими материалами, такими как крахмал или желатин, смазывающими материалами, такими как стеарат магния или тальк, и/или агентами для отсроченного высвобождения, такими как карбоксиметилцеллюлоза, ацетат-фталат целлюлозы, или поливинилацетат. Таблетки также могут включать несколько слоев.

Композиции могут быть составлены в единичной дозированной форме, причем каждая дозированная форма содержит от около 5 до около 1000 мг (1 г), более привычно от около 100 мг до около 500 мг, активного ингредиента. Термин «единичная дозированная форма» подразумевает физически дискретные единицы, пригодные как унитарные дозировки для человеческих субъектов и других млекопитающих, причем каждая единица содержит предварительно заданное количество активного материала, рассчитанное для получения желательного терапевтического эффекта, в связи с подходящим фармацевтическим эксципиентом.

В некоторых вариантах исполнения композиции согласно изобретению содержат от около 5 мг до около 50 мг активного ингредиента. Специалисту с обычной квалификацией в этой области технологии будет понятно, что осуществимы соединения или композиции, содержащие от около 5 мг до около 10 мг, от около 10 мг до около 15 мг, от около 15 мг до около 20 мг, от около 20 мг до около 25 мг, от около 25 мг до около 30 мг, от около 30 мг до около 35 мг, от около 35 мг до около 40 мг, от около 40 мг до около 45 мг, или от около 45 мг до около 50 мг активного ингредиента. Описываемые дозы могут представлять собой заданное количество конкретных соли или кристаллической формы, или количество конкретных соли или кристаллической формы, которое создает заданную дозу соединения в виде свободного основания (а именно, N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида).

В некоторых вариантах исполнения композиции согласно изобретению содержат от около 50 мг до около 500 мг активного ингредиента. Специалисту с обычной квалификацией в этой области технологии будет понятно, что осуществимы соединения или композиции, содержащие от около 50 мг до около 100 мг, от около 100 мг до около 150 мг, от около 150 мг до около 200 мг, от около 200 мг до около 250 мг, от около 250 мг до около 300 мг, от около 350 мг до около 400 мг, или от около 450 мг до около 500 мг активного ингредиента. Описываемые дозы могут представлять собой заданное количество конкретных соли или кристаллической формы, или количество конкретных соли или кристаллической формы, которое создает заданную дозу соединения в виде свободного основания (а именно, N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида).

В некоторых вариантах исполнения композиции согласно изобретению содержат от около 500 мг до около 1000 мг активного ингредиента. Специалисту с обычной квалификацией в этой области технологии будет понятно, что осуществимы соединения или композиции, содержащие от около 500 мг до около 550 мг, от около 550 мг до около 600 мг, от около 600 мг до около 650 мг, от около 650 мг до около 700 мг, от около 700 мг до около 750 мг, от около 750 мг до около 800 мг, от около 800 мг до около 850 мг, от около 850 мг до около 900 мг, от около 900 мг до около 950 мг, или от около 950 мг до около 1000 мг активного ингредиента. Описываемые дозы могут представлять собой заданное количество конкретных соли или кристаллической формы, или количество конкретных соли или кристаллической формы, которое создает заданную дозу соединения в виде свободного основания (а именно, N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида).

Заданные дозы могут быть рассчитаны на один прием в день, или, если необходимо, на несколько приемов в день, например, дважды, трижды, или четыре раза в день.

Активное соединение может быть эффективным в широком диапазоне дозирования, и, как правило, вводится в фармацевтически эффективном количестве. Однако будет понятно, что фактически введенная доза обычно определяется лечащим врачом, согласно уместным обстоятельствам, в том числе излечиваемому состоянию, выбранному пути введения, фактическому вводимому соединению, возрасту, весу, и реакции индивидуального пациента, серьезности симптоматики пациента, и тому подобному.

Для получения твердых композиций, таких как таблетки, основной активный ингредиент смешивают с фармацевтическим эксципиентом с образованием твердой предварительно составленной композиции, содержащей однородную смесь соли или кристаллической формы, как здесь описанной. Когда эти предварительно составленные композиции описываются как однородные, активный ингредиент обычно равномерно диспергирован во всей композиции так, что композиция может быть легко разделена на одинаково эффективные единичные дозированные формы, такие как таблетки, пилюли и капсулы. Затем эту твердую предварительно составленную композицию разделяют на единичные дозированные формы описанного выше типа, содержащие, например, от около 0,1 до около 1000 мг активного ингредиента.

Таблетки или пилюли, содержащие описываемые здесь соли и кристаллические формы, могут быть покрыты или иным образом компаундированы с созданием дозированной формы, обеспечивающей преимущество замедленного действия. Покрытые таблетки могут быть получены нанесением покрытия на сердцевины, образованного аналогично таблеткам с веществами, обычно применяемыми для покрытий на таблетках, например, коллидона или шеллака, гуммиарабика, талька, диоксида титана или сахара. Чтобы обеспечить отсроченное высвобождение или предотвратить несовместимости, сердцевина также может состоять из нескольких слоев. Подобным образом, покрытие на таблетке может состоять из нескольких слоев для достижения отсроченного высвобождения, возможно, с использованием вышеупомянутых эксципиентов для таблеток.

Например, таблетка или пилюля может включать внутренний компонент дозы и наружный компонент дозы, причем последний в форме оболочки поверх первого. Два компонента могут быть разделены энтеросолюбильным слоем, который служит для противодействия дезинтеграции в желудке и позволяет внутреннему компоненту пройти незатронутым до двенадцатиперстной кишки, или высвобождение которого отсрочивается. Для таких энтеросолюбильных слоев или покрытий могут быть использованы разнообразные материалы, причем такие материалы включают некоторые полимерные кислоты и смеси полимерных кислот с такими материалами, как шеллак, цетиловый спирт и ацетат целлюлозы.

Жидкие формы, в которые соли, кристаллические формы и композиции согласно изобретению могут быть включены для приема внутрь или инъекцией, включают водные растворы, подходящие ароматизированные сиропы, водные или масляные суспензии, и ароматизированные эмульсии с пищевыми маслами, такими как хлопковое масло, кунжутное масло, кокосовое масло или арахисовое масло, а также эликсиры и подобные фармацевтические носители. Хотя жидкие композиции, в которых соль растворена, обычно не будут содержать соль в кристаллической форме, описываемые здесь соли и кристаллические формы тем не менее будут полезными для приготовления жидких композиций, например, растворением соли или ее кристаллической формы в подходящей среде.

Растворы для инъекции и инфузии могут быть приготовлены обычным путем, например, добавлением изотонических растворов, консервантов, таких как пара-гидроксибензоаты, или стабилизаторов, таких как соли этилендиаминтетрауксусной кислоты со щелочными металлами, необязательно, с использованием эмульгаторов и/или диспергаторов, если же в качестве разбавителя применяется вода, например, органические растворители необязательно могут быть использованы как сольватирующие добавки или для стимулирования растворения, и перенесены в флаконы или ампулы для инъекций или бутылки для инфузии.

Капсулы, содержащие одно или многие активные вещества или комбинации активных веществ, могут быть получены, например, смешением активных веществ с инертными носителями, такими как лактоза или сорбит, и заключением их в желатиновые капсулы.

Композиции для ингаляции или вдувания включают растворы и суспензии в фармацевтически приемлемых, водных или органических растворителях или их смесях, и порошки. Жидкие или твердые композиции могут содержать пригодные фармацевтически приемлемые эксципиенты, как описано выше. В некоторых вариантах исполнения композиции вводятся в ротовые или носовые дыхательные пути для локального или системного действия. Композиции могут быть распылены с использованием инертных газов. Распыленные растворы могут вдыхаться непосредственно из распылительного устройства, или же распылительное устройство может быть присоединено к лицевой маске, навесу, или дыхательному аппарату с пульсирующим повышенным давлением. Композиции в виде раствора, суспензии или порошки могут быть введены через рот или нос из устройств, которые подают композицию надлежащим образом.

Составы для наружного применения могут содержать один или более традиционных носителей. В некоторых вариантах исполнения мази могут содержать воду и один или многие гидрофобные носители, выбранные, например, из жидкого парафина, полиоксиэтиленалкилового простого эфира, пропиленгликоля, белого вазелина, и тому подобного Составы носителей в кремах могут основываться на воде в комбинации с глицерином и одним или многими другими компонентами, например, моностеаратом глицерина, полиэтиленгликоль(PEG)-моностеаратом глицерина и цетилстеариловым спиртом. Гели могут быть получены с использованием изопропилового спирта и воды, обычно в комбинации с другими компонентами, например, такими как глицерин, гидроксиэтилцеллюлоза, и тому подобные. В некоторых вариантах исполнения составы для наружного применения содержат по меньшей мере около 0,1 вес.%, по меньшей мере около 0,25 вес.%, по меньшей мере около 0,5 вес.%, по меньшей мере около 1 вес.%, по меньшей мере около 2 вес.%, или по меньшей мере около 5 вес.% соединения согласно изобретению. Составы для наружного применения могут быть надлежащим образом упакованы в тюбики, например, с содержанием 100 г, которые необязательно сопровождаются инструкцией для лечения выбранного показания, например, псориаза или другой кожной болезни.

Количество соли или кристаллической формы, или их композиции, вводимое пациенту, будет варьировать в зависимости от того, что именно вводится, цели введения, такой как профилактика или терапия, состояния пациента, способа введения, и тому подобного. В терапевтических вариантах применения композиции могут вводиться пациенту уже в болезненном состоянии в количестве, достаточном для излечения или по меньшей мере частичного устранения симптомов болезни и ее осложнений. Эффективные дозы будут зависеть от состояния излечиваемой болезни, а также сообразно оценке лечащего врача, в зависимости от таких факторов, как серьезность заболевания, возраст, вес и общее состояние пациента, и тому подобного.

Терапевтическая дозировка соединения согласно настоящему изобретению может варьировать сообразно, например, конкретному применению, для которого проводится лечение, способа введения соединения, здоровья и состояния пациента, и оценке предписывающего лечение врача. Пропорция или концентрация соединения согласно изобретению в фармацевтической композиции может варьировать в зависимости от ряда факторов, включающих дозировку, химические характеристики (например, гидрофобность), и путь введения. Например, соединения согласно изобретению могут быть представлены в водном физиологическом буферном растворе, содержащем от около 0,1% до около 10% (вес/объем) соединения для парэнтерального введения. Некоторые типичные диапазоны дозирования составляют от около 1 мкг/кг до около 1 г/кг веса тела в день. В некоторых вариантах исполнения диапазон дозировки составляет от около 0,01 мг/кг до около 100 мг/кг веса тела в день. Скорее всего, доза зависит от таких переменных факторов, как тип и степень развития заболевания или расстройства, общего состояния здоровья конкретного пациента, относительно биологической эффективности выбранного соединения, состава эксципиента, и пути его введения. Эффективные дозы могут быть экстраполированы от кривых «доза-эффект», выведенных из экспериментов in vitro или испытательных систем на модельных животных.

Как ожидается, надлежащие дозы для введения человеку будут в диапазоне от около 50 мг до около 2000 мг, например, от около 100 мг до около 2000 мг, от около 200 мг до около 2000 мг, от около 400 мг до около 2000 мг, от около 600 мг до около 2000 мг, от около 800 мг до около 2000 мг, от около 1000 мг до около 2000 мг, от около 1200 мг до около 2000 мг, от около 1400 мг до около 2000 мг, от около 1500 мг до около 2000 мг, от около 1600 мг до около 2000 мг, от около 1800 мг до около 2000 мг, от около 50 мг до около 1500 мг, от около 100 мг до около 1500 мг, от около 200 мг до около 1500 мг, от около 400 мг до около 1500 мг, от около 600 мг до около 1500 мг, от около 800 мг до около 1500 мг, от около 1000 мг до около 1500 мг, от около 1200 мг до около 1500 мг, от около 1250 мг до около 1500 мг, от около 50 мг до около 1000 мг, от около 100 мг до около 1000 мг, от около 200 мг до около 1000 мг, от около 400 мг до около 1000 мг, от около 600 мг до около 1000 мг, от около 800 мг до около 1000 мг, от около 50 мг до около 500 мг, от около 100 мг до около 500 мг, от около 200 мг до около 500 мг, от около 400 мг до около 500 мг, или доза около 50 мг, около 100 мг, около 150 мг, около 200 мг, около 250 мг, около 300 мг, около 350 мг, около 400 мг, около 450 мг, около 500 мг, около 600 мг, около 700 мг, около 750 мг, около 800 мг, около 900 мг, около 1000 мг, около 1200 мг, около 1400 мг, около 1500 мг, около 1600 мг, около 1800 мг или около 2000 мг. Надлежащая доза, как заданная, может быть дозой самой соли, создающей количество соединения в виде свободного основания (а именно, N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида).

Композиции согласно изобретению могут дополнительно включать один или многие добавочные фармацевтические препараты, такие как химиотерапевтический препарат, стероид, противовоспалительное соединение, или иммунодепрессант, примеры которых перечислены здесь ниже.

Нижеследующие примеры композиций иллюстрируют настоящее изобретение без ограничения его области:

Примеры фармацевтических композиций

А)

Таблетки На таблетку Соль или кристаллическая форма соединения 100 мг Лактоза 140 мг Кукурузный крахмал 240 мг Поливинилпирролидон 15 мг Стеарат магния 5 мг 500 мг

Тонкоизмельченное активное вещество, лактозу и некоторое количество кукурузного крахмала смешивают друг с другом. Смесь просеивают, затем увлажняют раствором поливинилпирролидона в воде, промешивают, гранулируют во влажном состоянии и высушивают. Гранулы, оставшийся кукурузный крахмал и стеарат магния просеивают и смешивают друг с другом. Смесь спрессовывают с образованием таблеток с надлежащими формой и размером.

В)

Таблетки На таблетку Соль или кристаллическая форма соединения 80 мг Лактоза 55 мг Кукурузный крахмал 190 мг Микрокристаллическая целлюлоза 35 мг Поливинилпирролидон 15 мг Натриевая соль карбоксиметилкрахмала 23 мг Стеарат магния 2 мг 400 мг

Тонкоизмельченное активное вещество, некоторое количество кукурузного крахмала, лактозы, микрокристаллической целлюлозы и поливинилпирролидона смешивают друг с другом, смесь просеивают и обрабатывают остальным количеством кукурузного крахмала и водой с образованием гранулята, который высушивают и просеивают. Добавляют натриевую соль карбоксиметилкрахмала и стеарат магния, и перемешивают, и смесь спрессовывают с образованием таблеток с надлежащим размером.

V. Наборы

Настоящее изобретение также включает фармацевтические наборы, применимые, например, для лечения или профилактики связанных с B-RAF заболеваний или расстройств, таких как рак, которые включают один или многие контейнеры, содержащие фармацевтическую композицию, содержащую терапевтически эффективное количество соли или кристаллической формы, как здесь описанных. Кроме того, такие наборы, если желательно, могут включать один или многие разнообразные компоненты стандартного фармацевтического набора, например, такие как контейнеры с одним или многими фармацевтически приемлемыми носителями, дополнительные контейнеры, и т.д., как будет без труда понятно квалифицированному специалисту в этой области технологии. В набор также могут быть включены инструкции, как в виде вкладок, так и в виде этикеток, указывающие количества вводимых компонентов, методические рекомендации для введения, и/или инструкции для смешения компонентов.

Изобретение будет описано гораздо более подробно посредством конкретных примеров. Нижеследующие примеры представлены для целей иллюстрирования, и не предполагаются ограничивающими изобретение никоим образом. Квалифицированным специалистам в этой области технологии будет без труда понятно разнообразие некритических параметров, которые могут быть изменены или модифицированы для достижения по существу таких же результатов.

ПРИМЕРЫ

Общие методы

В приведенных ниже примерах, за исключением оговоренного как иного, анализ рентгеновской порошковой дифрактометрией проводили на порошковом дифрактометре STOE STADI в режиме пропускания, оснащенном позиционно-чувствительным детектором (PSD) и Cu-анодом в качестве источника рентгеновского излучения с монохроматическим CuKα1-излучением. (λ=1,54056 Å, 40 кВ, 40 мА). Общие условия измерения были следующими:

- начальный угол - 3°

- конечный угол - 40°

- выборка - 0,02 град.

- скорость сканирования- 10 сек/шаг.

Измерение дифференциальной сканирующей калориметрией (DSC) проводили на приборе TA Instrument Differential Scanning Calorimetry, модель Q2000, с использованием образца с размером 8-10 мг. Общие экспериментальные условия были следующими: 25-350°C при 10°C/минуту.

Термогравиметрический анализ (TGA) проводили на анализаторе TA Instrument Thermogravimetric Analyzer, модель Q5000, в следующих условиях: рост температуры со скоростью 10°C/минуту до 350°С.

Динамическую сорбцию пара (DVS) измеряли в анализаторе IGAsorp Water Sorption Analyzer от фирмы Hiden Isochema. Изотермы адсорбции и десорбции регистрировали при 25°С с 10%-ными ступенчатыми RH-интервалами в диапазоне от 0%-ной относительной влажности до 90%-ной относительной влажности.

В отношении метода HPLC-масс-спектрометрии/УФ-спектроскопии, параметры времени удерживания/MS-ESI⁺ для характеристики примерных образцов согласно изобретению получены с использованием HPLC-MS-прибора (высокоэффективная жидкостная хроматография с детектором масс). Соединениям, которые вымываются при пике впрыска, приписано время удерживания t_Ret.=0,00. Методы, описанные ниже в Примерах, являются следующими.

Метод А HPLC-MS

HPLC: Agilent 1100 Series

MS: Agilent LC/MSD SL

Колонка: Waters, XBridge™ C18, 5 мкм, 2,1×50 мм

Элюент: A: H₂O (5 мМ (NH₄)₂CO₃, 19 мМ NH₃)

B: ацетонитрил сорта для HPLC

Детектирование: MS: положительный и отрицательный режим

Диапазон масс: 120-800 m/z

Расход потока: 1,20 мл/мин

Температура колонки: комнатная (rt)

Градиент: 0,00 мин., 5% B

0,00-1,25 мин., 5%→95% B

1,25-2,00 мин., 95% B

Метод В HPLC-MS

HPLC: Agilent 1100 Series

MS: Agilent LC/MSD SL

Колонка: Waters, XBridge™ C18, 2,5 мкм, 2,1×20 мм

Элюент: A: H₂O (0,1% NH₃)

B: ацетонитрил сорта для HPLC

Детектирование: MS: положительный и отрицательный режим

Диапазон масс: 120-800 m/z

Расход потока: 1,00 мл/мин

Температура колонки: 60°C

Градиент: 0,00 мин. 5% B

0,00-2,50 мин., 5%→95% B

2,50-2,80 мин., 95% B

Метод С HPLC-MS

HPLC: Agilent 1100 Series

MS: Agilent LC/MSD SL

Колонка: Waters, Sunfire™ C18, 5 мкм, 2,1×50 мм

Элюент: A: H₂O (0,2% HCOOH)

B: ацетонитрил сорта для HPLC (0,2% HCOOH)

Детектирование: MS: положительный и отрицательный режим

Диапазон масс: 120-800 m/z

Расход потока: 1,20 мл/мин

Температура колонки: rt

Градиент: 0,00 мин., 5% B

0,00-1,50 мин., 5%→95% B

1,50-2,00 мин., 95% B

Измерения равновесной растворимости

Насыщенные растворы получают в многолуночных планшетах добавлением необходимого объема выбранной водной среды (типично в диапазоне 0,25-1,5 мл) в каждую лунку, которая содержит известное количество твердого лекарственного вещества (обычно в диапазоне 0,5-5,0 мг). Лунки встряхивают или перемешивают в течение предварительно заданного периода времени (типично в диапазоне 2-24 часа), и затем содержимое профильтровывают с использованием мембранных фильтров (обычно PTFE-фильтров с размером пор 0,45 мкм). Абсорбции на фильтре избегают выпуском первых нескольких капель фильтрата. Количество растворенного лекарственного вещества определяют УФ-спектроскопией. В дополнение, измеряют значение рН водного насыщенного раствора с использованием рН-метра со стеклянным электродом.

Измерения собственной скорости растворения

Собственную скорость растворения солей N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида определяли в водной среде с охватом диапазона рН 1,1-7,4, с использованием метода вращающегося диска, в котором сохраняется постоянная площадь поверхности.

Лекарственное вещество (5 мг) спрессовывали с усилием 356,1 Ньютонов в течение 60 секунд с образованием диска. Эти диски устанавливали в держатели образцов, которые вставляли в миниатюризированное устройство для испытания растворимости. Среду для растворения перемешивали со скоростью 200 об/мин при температуре 37°С. Образцы автоматически извлекали каждую вторую минуту из резервуара для растворения и оценивали с помощью УФ-спектрофотометрии.

Получение N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида (BI 882370)

Стадия 1. трет-Бутиловый сложный эфир 4-(6-метил-5-нитропиридин-2-ил)-пиперазин-1-карбоновой кислоты (3)

DIPEA (62,82 мл, 0,435 моля) добавляют к раствору 6-хлор-3-нитро-2-метилпиридина (1) (50 г, 290 ммол) и N-Boc-пиперазина (2) (53,95 г, 290 ммол) в безводном MeCN (200 мл) и перемешивают в течение 4 часов при 50°С. После завершения реакции реакционную смесь разбавляют ацетонитрилом (MeCN) и водой, и перемешивают в течение 30 минут. Осажденный продукт выделяют фильтрованием, промывают водой, и твердое вещество высушивают в вакууме.

Стадия 2. трет-Бутиловый сложный эфир 4-[6-((E)-2-диметиламиновинил)-5-нитропиридин-2-ил]-пиперазин-1-карбоновой кислоты (4)

К перемешиваемому раствору трет-бутилового сложного эфира 4-(6-метил-5-нитропиридин-2-ил)-пиперазин-1-карбоновой кислоты (3) (13 г, 40,3 ммол) в DMF (35 мл) добавляют диметилацеталь N, N-диметилформамида (14,47 г, 121 ммол), и перемешивают в атмосфере аргона в течение 36 часов при 90°C. Добавляют дополнительные 1,5 эквивалента диметилацеталя N, N-диметилформамида и перемешивают в течение 12 часов при 90°C. Реакционную смесь выливают в воду и экстрагируют дихлорметаном (DCM). Объединенные органические слои промывают водой, обезвоживают над безводным Na₂SO₄ и концентрируют в вакууме. Остаток используют без дополнительной очистки для следующей стадии.

Стадия 3. трет-Бутиловый сложный эфир 4-(1H-пирроло[3,2-b]пиридин-5-ил)пиперазин-1-карбоновой кислоты (5)

трет-Бутиловый сложный эфир 4-[6-((E)-2-диметиламиновинил)-5-нитропиридин-2-ил]-пиперазин-1-карбоновой кислоты (36,4 г, 96 ммол) помещают в MeOH, добавляют Pd/C (0,56 г, 10%), и смесь подвергают гидрированию в автоклаве при давлении 60 psi (0,41 МПа) в течение 16 часов. Реакционную смесь профильтровывают и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают колоночной хроматографией в условиях NP MPLC. Продукт, содержащий фракции соединения (5) (HPLC-MS, метод B: t_Ret.=1,55 мин.; MS (M+H)⁺=303), объединяют и упаривают в вакууме.

Стадия 4. N-(3-Амино-2,6-дифторфенил)ацетамид (7)

Соединение (6) (55,0 г, 254 ммол) переносят в MeOH (1,0 л). Добавляют Pd/C (10,0 г, 10%), и смесь подвергают гидрированию в автоклаве при давлении 200 psi (1,38 МПа) в течение 3 часов. Реакционную смесь профильтровывают и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают в условиях NP-MPLC на силикагеле с использованием DCM/MeOH (96:4) в качестве элюента. Продукт, содержащий фракции анилинового интермедиата (HPLC-MS, метод B: t_Ret.=0,25 мин.; MS (M-H)^-=185), объединяют и упаривают.

Стадия 5. N-(2,6-Дифтор-3-пропилсульфонамидо)фенил)ацетамид (9)

К анилиновому промежуточному продукту (35,0 г, 188 ммол) в DCM (100 мл) добавляют пиридин (6,6 мл, 75 ммол) и н-пропансульфонилхлорид (8) (29,5 мл, 263 ммол), и смесь перемешивают при комнатной температуре (rt) в течение 16 часов. Реакционную смесь разбавляют EtOAc (200 мл), промывают H₂O и HCl (водной, 1 н.), и отделяют слои, обезвоживают над MgSO₄, и упаривают с образованием сульфонамида (9), который использовали без дополнительной очистки.

Стадия 6. N-(3-Амино-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамид (10)

Сульфонилированный анилин (9) (38,0 г, 130 ммол) переносят в EtOH (250 мл), добавляют H₂O (200 мл) и концентрированную соляную кислоту (200 мл), и нагревают до 80°C в течение 2 часов. Реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении, добавляют водный раствор NaOH (4 н.), пока не будет достигнуто значение pH=6, и смесь дважды экстрагируют с использованием DCM. Объединенный органический слой промывают рассолом, обезвоживают над MgSO₄, профильтровывают и упаривают с образованием дезацилированного анилина (10) (HPLC-MS, метод B: t_Ret.=0,22 мин.; MS (M-H)^-=249) в виде гидрохлорида, который использовали без дополнительной очистки.

Стадия 7. N-(2,4-дифтор-3-иодфенил)пропан-1-сульфонамид (11)

Гидрохлорид соединения (10) помещают в DCM и экстрагируют раствором NaHCO₃. Органический слой обезвоживают над MgSO₄, профильтровывают и упаривают. К свободному основанию (10) (3,55 г, 14,21 ммол) в TFA (80 мл) при 0°C небольшими порциями добавляют NaNO₂ (1,96 г, 28,4 ммол), и смесь перемешивают в течение 30 минут. Добавляют KI (23,83 г, 142 ммол), и перемешивание продолжают в течение дополнительных 15 минут. Реакционную смесь разбавляют эфиром (Et₂O) и перемешивают в течение 1 часа. Добавляют раствор Na₂S₂O₃ (полуконц.), и смесь трижды экстрагируют эфиром (Et₂O). Объединенный органический слой обезвоживают над MgSO₄, профильтровывают и концентрируют в вакууме. Остаток очищают колоночной хроматографией в условиях NP-MPLC. Продукт, содержащий фракции соединения (11) (HPLC-MS, метод A: t_Ret.=1,58 мин.; MS (M-H)^-=360), объединяют и упаривают в вакууме.

Стадия 8. трет-Бутиловый сложный эфир 4-((1-(2,6-дифтор-3-(пропилсульфонамидо)фенил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-5-ил)(метил)амино)пиперидин-1-карбоновой кислоты (12)

1H-Пирроло[3,2-b]пиридин (5) (10,0 г, 30,27 ммол), сульфонамид (11) (16,4 г, 45,4 ммол), CuI (576 мг, 3,03 ммол), транс-(1R,2R)-N, N’-бисметил-1,2-циклогександиамин (1,91 мл, 12,1 ммол) и Cs₂CO₃ (29,6 г, 90,85 ммол) вносят в безводный толуол (3 мл), и полученную смесь продувают аргоном и перемешивают в течение 16 часов при 120°C. После добавления дополнительных количеств CuI (576 мг, 3,03 ммол), транс-(1R,2R)-N, N’-бисметил-1,2-циклогександиамина (1,91 мл, 12,1 ммол) и Cs₂CO₃ (20,0 г, 60,0 ммол) реакционную смесь перемешивают в течение дополнительных 24 часов. Растворитель удаляют в вакууме, остаток переносят в DCM и экстрагируют раствором NaHCO₃ (полуконц.). Органический слой обезвоживают над MgSO₄, профильтровывают, растворитель удаляют в вакууме, и остаток очищают в условиях NP-MPLC. Продукт, содержащий фракции (12) (HPLC-MS, метод C: t_Ret.=1,62 мин.; MS (M+H)⁺=564), объединяют, и растворитель удаляют в вакууме.

Стадия 9. трет-Бутиловый сложный эфир 4-((1-(2,6-дифтор-3-(пропилсульфонамидо)фенил)-3-иод-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-5-ил)(метил)амино)пиперидин-1-карбоновой кислоты (13)

К раствору сульфонамида (12) (1,078 г, 1,9 ммол) в DMF (4 мл)/THF (100 мкл) добавляют N-иодсукцинимид (NIS) (474 мг, 2,1 ммол), и смесь перемешивают в течение 1 часа при комнатной температуре. Реакционную смесь разбавляют 30 мл DCM и экстрагируют раствором NaHCO₃ (полуконц.). Объединенный органический слой обезвоживают над MgSO₄, профильтровывают и концентрируют при пониженном давлении. Остаток очищают колоночной хроматографией в условиях RP HPLC. Продукт, содержащий фракции (13) (HPLC-MS, метод B: t_Ret.=2,035 мин.; MS (M+H)⁺=688), высушивают вымораживанием.

Стадия 10. трет-Бутиловый сложный эфир 4-((1-(2,6-дифтор-3-(пропилсульфонамидо)фенил)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-5-ил)(метил)амино)пиперидин-1-карбоновой кислоты (15)

Сульфонамид (13) (770 мг, 1,12 ммол), пиримидин-5-илбороновую кислоту (14) (194 мг, 1,57 ммол), Pd(dppf)Cl₂ (82 мг, 0,11 ммол), LiCl (142 мг, 3,35 ммол) и Na₂CO₃ (294 мг, 2,8 ммол) помещают в смесь диоксан/H₂O (2:1, 12 мл), и полученную смесь продувают аргоном и перемешивают в течение 1 часа при 100°C. Реакционную смесь разбавляют DCM и экстрагируют раствором NaHCO₃ (полуконцентрированным). Органический слой обезвоживают над MgSO₄, профильтровывают, добавляют Isolute®, растворитель удаляют в вакууме, и остаток очищают в условиях RP HPLC. Продукт, содержащий фракции (15) (HPLC-MS, метод C: t_Ret.=2,149 мин.; MS (M+H)⁺=642), высушивают вымораживанием.

Стадия 11. N-(2,4-дифтор-3-(5-(метил(пиперидин-4-ил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-5-ил)фенил)пропан-1-сульфонамид

К раствору примерного соединения (15) (154 мг, 0,24 ммол) в DCM/MeOH (1:1, 4 мл) добавляют HCl (в диоксане, 4 н., 2 мл), и смесь перемешивают в течение 3 часов при комнатной температуре. Растворитель удаляют в вакууме. Полученное соединение (16) (HPLC-MS, метод B: t_Ret.=1,02 мин.; MS (M+H)⁺=542) используют без дополнительной очистки.

Стадия 12. N-3-(5-((1-Этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамид (I)

Соединение I получили из соединения (16) восстановительным алкилированием с ацетальдегидом (40% в iPrOH) в присутствии 1,5 эквивалентов ацетоксиборгидрида натрия в iPrOH. Необработанный продукт перекристаллизовали из этанола для получения указанного в заголовке соединения с 84%-ным выходом.

Масштабированный синтез N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида (BI 882370)

Стадия 1. N-(2,4-Дифтор-3-(5-(метил(пиперидин-4-ил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)фенил)пропан-1-сульфонамид

В реактор добавили изопропанол (8,83 кг) и соединение (15) (1,80 кг, 2,8 моля), и смесь перемешивали и нагревали до 55~60°С. В реактор по каплям добавляли концентрированную соляную кислоту (2,76 кг, 28 молей) в течение более 20 минут при 60-65°С. Затем реакционную массу нагревали до 60-70°С и выдерживали в течение 1 часа. Степень конверсии отслеживали с помощью HPLC, и она достигла около 99,5% спустя примерно 1 час.

Реакционную массу охладили, и изопропанол удалили отгонкой при пониженном давлении при температуре не выше 50°С. Полученное коричневое масло растворили в воде (6,75 кг) и промывали экстракцией этилацетатом (2,02 кг) при 20-30°С. Водную фазу охладили до 15-20°С. Скорректировали значение рН до 8,0-8,5 10%-ным водным раствором NaOH (~8,0 кг) при 20-30°С. Смесь перемешивали в течение 3-4 часов при 20-30°С с корректированием величины pH до 8,0-8,5 добавлением 10%-ного водного раствора NaOH каждые полчаса. Продукт выделили фильтрованием, и осадок на фильтре промывали водой (3,6 кг). Твердое вещество высушили в вакууме при 45~50, пока содержание воды не достигло уровня не выше 5,5%. В результате получили около 1,64 кг необработанного соединения (16) (выход 108% от теоретического; образован необработанный продукт, содержащий воду и NaCl). Использовали непосредственно необработанный продукт.

Стадия 12. N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамид (I)

Наименование Молекулярная масса Молей Вес Количество Поставщик BI 878426 541,62 2,77 моля 1,50 кг 1,0 экв. Bioduro STAB (95%) 211,94 4,16 моля 0,93 кг 1,5 экв. Дихлорметан нет нет 19,88 кг 10,0 объемов 40%-ный раствор ацеталь-дегида в DCM 44,05 9,71 моля 1,07 кг 3,5 экв. H₂O нет нет 30,0 кг 20,0 объемов Аммиак 17,03 16,61 моля 1,13 кг 6,0 экв. Медицинский углерод нет нет 0,15 кг 10,0%

Методика:

В реактор добавили дихлорметан (19,88 кг) и соединение (16) (1,5 кг, 2,77 моля), и смесь перемешивали и охлаждали до 0-10°С в атмосфере азота. К смеси добавили триацетоксиборгидрид натрия (STAB) (95%, 0,93 кг, 4,16 моля) при 0-10°С. Смесь перемешивали в течение 20-30 минут при 0-10°С. К смеси медленно добавляли ацетальдегид в DCM (40%, 1,07 кг, 9,71 моля) в течение 2 часов при 0-10°С. Реакционную смесь перемешивали при 0~10°С в атмосфере азота в течение 0,5-1 часа. Степень конверсии отслеживали с помощью HPLC, и она достигла около 99,5% спустя примерно 0,5-1 час.

К реакционной массе добавили воду (15 кг) при температуре ниже 15°С. Смесь перемешивали при 15-30°С в течение 20~30 минут. К смеси добавили водный аммиак (25%-ный, 1,13 кг, 16,61 моля), и затем смесь перемешивали в течение 0,5 часа. Органическую фазу отделили, и затем промыли экстракцией водой (15 кг) при 20-25°С. К органической фазе добавили активированный уголь (0,15 кг). Смесь перемешивали в течение 1 часа, и затем профильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении при температуре не выше 40°С, и получили соединение (I) (1,58 кг, 100%-ный выход) в виде вспененного твердого вещества.

Исследование кристалличности свободного основания N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида

Исследование кристалличности свободного основания N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида, полученного перекристаллизацией из водного этанола, который был использован в качестве исходного материала для изучения формирования соли, показало, что соединение имело низкую кристалличность, как видно на ФИГ. 1.

Исследование солевых форм N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида

Соединение N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамид смешивали с различными кислотами в различных системах растворителей.

В 96-луночный планшет поместили дозированное соединение в МеОН (маточный раствор) с концентрацией приблизительно 40 мг/мл. Этот планшет поместили в вакуумируемый сушильный шкаф для удаления жидкости с получением одинакового количества твердого материала в каждой лунке. Затем к твердому материалу в каждой лунке добавили различные растворители/смеси растворителей и кислоты (приблизительно 500 мкл), и весь планшет нагревали до 50°С в течение 2 часов, в то же время с перемешиванием (с использованием маленького перемешивающего якорька, помещенного в каждую лунку).

Использованные кислоты были такими, как показано в Таблице 1. Использованные растворители были такими, как показано в Таблице 2. Кристалличность солей получали либо в суспензионном эксперименте, либо после кристаллизации испарением.

Для изучения формирования кристаллов в суспензионном эксперименте полученные соли исследовали методом XRPD. Изображение многолуночного планшета, показывающее полученные соли, представлено на ФИГ. 2А, и рентгенограммы XRPD, выполненного на соли из каждой из лунок в планшете, показывающие кристалличность образованных солей, представлены на ФИГ. 2В.

Для исследования формирования кристаллов в эксперименте с испарением, после периода нагревания растворы профильтровали при одинаковой температуре (50°С) с использованием предварительно нагретой фильтрационной пластинки для обеспечения того, что нерастворенный материал не может быть перенесен в другие кристаллизационные пластины. Фильтрат распределили в испарительную пластину (приблизительно 200 мкл). Растворители оставили испаряться, и кристалличность полученных солей исследовали методом XRPD. Изображение многолуночного планшета, показывающее полученные соли, представлено на ФИГ. 3А, и рентгенограммы XRPD, выполненного на соли из каждой из лунок в испарительной пластине, показывающие кристалличность образованных солей, представлены на ФИГ. 3В.

Таблица 1. Соли, использованные для исследования формирования солей

Опыт Кислота (просьба подтвердить использованные кислоты) Код 1 Свободное основание (без добавления кислоты) BS 2 Соляная кислота CL 3 Лимонная кислота CI 4 Винная кислота TA 5 Фумаровая кислота FU 6 Салициловая кислота SA 7 R-миндальная кислота MY 8 Серная кислота SU 9 Фосфорная кислота PH 10 Янтарная кислота SC 11 Бензойная кислота BZ 12 Малеиновая кислота ML

Таблица 2. Растворители, использованные для исследования формирования солей

Опыт Растворитель A Этанол B Водный этанол (90%) C 2-Пропанол (iPrOH) D Водный iPrOH/(90%) E Ацетон F Этилацетат G Метилизобутилкетон (MIBK) H Тетрагидрофуран (THF)

На основе первоначального отбора сформировались шесть кристаллических солей, хлорид (CL), фумарат (FU), фосфат (PH), сукцинат (SC), сульфат (SU) и тартрат (TA), как обобщено в Таблице 3.

Таблица 3. Результаты первоначального исследования солевых форм

Солевая форма Число проявлений Кристалличность Показательная лунка (планшета) Растворитель для кристаллизации Свободное основание 0 Аморфное Гидрохлорид 9 Высокая E2 Ацетон Фумарат (форма I) 9 Средняя F5 Этилацетат Фумарат (форма II) 1 Средняя D5 Водный iPrOH (90%) Тартрат 8 Высокая F4 Этилацетат Фосфат 8 Средняя G9 MIBK Сукцинат 7 Средняя F10 Этилацетат Сульфат 8 Средняя F8 Этилацетат

Изображения выполненного на образцах XRPD для каждой из солевых форм, обобщенных в Таблице 3, показаны на ФИГ. 4.

Масштабированный синтез солевых форм N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида

На основе результатов первоначальной идентификации солевых форм, были повторно синтезированы хлорид (CL), фумарат (FU), фосфат (PH), сукцинат (SC), сульфат (SU) и тартрат (TA) в масштабе около 50 мг. За исключением фосфата, было возможным получение кристаллических форм каждого из хлорида (CL), фумарата (FU), сукцината (SC), сульфата (SU) и тартрата (TA), как обобщено в Таблице 4.

Таблица 4. Результаты первоначального исследования солевых форм

Солевая форма Растворитель для кристаллизации Кристалличность Примечания Гидрохлорид Ацетон Высокая Так же, как гидрохлорид из первоначального исследования солевой формы Тартрат Этилацетат Средняя Так же, как тартрат из первоначального исследования солевой формы Фумарат (форма I) Этилацетат Средневысокая Так же, как форма I из первоначального исследования солевой формы Фумарат (форма II) iPrOH/H2O Аморфная Сульфат Этилацетат Высокая Так же, как сульфат из первоначального исследования солевой формы Сульфат THF Аморфная Фосфат MIBK Аморфная Так же, как сульфат из первоначального исследования солевой формы Сукцинат Этилацетат Высокая Этилацетат

Данные для моногидрохлорида N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида, полученного масштабированием, показаны на ФИГ. 5-9.

ФИГ. 5 представляет график XRPD моногидрохлоридной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида с образцом из лунки Е2 (нижний график) сравнительно с образцом, полученным из масштабированного синтеза (верхний график).

ФИГ. 6 представляет DSC-график моногидрохлоридной соли N-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида. Образец показывал эндотерму при около 321°С.

ФИГ. 7 представляет TGA-график моногидрохлоридной соли N-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида.

ФИГ. 8 представляет график сорбции-десорбции для моногидрохлоридной соли N-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида, показывающий прирост и потерю веса, когда относительная влажность варьировала в диапазоне 0-100%. Образец показывал прирот веса приблизительно на 2,4% в диапазоне 10-90%-ной относительной влажности.

ФИГ. 9 представляет график XRPD моногидрохлоридной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида до (нижний график) и после (верхний график) эксперимента с сорбцией-десорбцией, показывающий, что существенное изменение структуры не происходило.

Данные для моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида, полученной масштабированием, показаны на ФИГ. 10-14.

ФИГ. 10 представляет график XRPD моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида с образцом из лунки F10 (нижний график) сравнительно с образцом, полученным из масштабированного синтеза (верхний график).

ФИГ. 11 представляет DSC-график моносукцинатной соли N-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида. Образец показывал эндотерму при около 182°С.

ФИГ. 12 представляет TGA-график моносукцинатной соли N-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида.

ФИГ. 13 представляет график сорбции-десорбции для моносукцинатной соли N-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида, показывающий прирост и потерю веса, когда относительная влажность варьировала в диапазоне 0-100%. Образец показывал прирот веса приблизительно на 1,2% в диапазоне 10-90%-ной относительной влажности.

ФИГ. 14 представляет график XRPD моногидрохлоридной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида до (нижний график) и после (верхний график) эксперимента с сорбцией-десорбцией, показывающий, что существенное изменение структуры не происходило.

Синтез и свойства моногидрохлоридной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида

Моногидрохлоридную соль N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида получили в различных системах растворителей растворением N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида (100 мг, 176 мкмол) в различных растворителях (10-20 мл), добавлением HCl (10 М раствор в этаноле; 1 эквивалент) при 50°С. Затем полученный раствор нагревали с перемешиванием при температуре около температуры кипения растворителя в течение около 1 часа, затем оставляли охлаждаться до комнатной температуры и перемешивали в течение 3 часов или более (например, в течение ночи). Затем соль извлекали фильтрованием и высушивали при 50°С.

Обобщение проведенных экспериментов представлено в Таблице 5.

Таблица 5. Синтез моногидрохлоридной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида

Растворитель Выход соли Чистота по ЯМР Кристалличность Форма EtOH (абс.) 79% >95% Высокая A EtOH (90%) 71% >95% Высокая A iPrOH (абс.) 76% >95% Высокая A iPrOH (90%) 68% >95% Высокая A Ацетон 65% >95% Высокая A Этилацетат 73% >95% Средняя A MIBK 74% >95% Средняя A THF 76% >95% Низкая iPrOH (98%) 98% >95% Высокая A^# EtOH 95% Высокая A^#

# Синтезирована в масштабе 1 г

Синтез в препаративном масштабе моногидрохлоридной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида

N-(3-(5-((1-Этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамид (1,0 г, 1,76 ммол) в изопропаноле (8 мл) нагревали с перемешиванием при 60°С, с образованием коричневого раствора. Добавили HCl (10 М раствор в этаноле; 1,84 ммол, 1,05 эквивалента). Полученную суспензию нагревали с перемешиванием при 60°С в течение 1 часа, затем при 80°С в течение 1 часа, затем при 50°С в течение 1 часа, и затем оставили остывать до комнатной температуры с перемешиванием в течение ночи (около 16 часов). Затем соль отделили фильтрованием и высушили при подниженном давлении при 50°С в течение ночи (около 16 часов). Тем самым получили моногидрохлоридную соль N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида (1,023 г, выход 96%) в виде беловатого твердого вещества. Данные для моногидрохлоридной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида показаны на ФИГ. 15-24.

ФИГ. 15 представляет график XRPD моногидрохлоридной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида.

Таблица 6 представляет список показательных XRPD-пиков, d-значений и относительных интенсивностей для XRPD моногидрохлоридной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида.

Таблица 6. XRPD-пики, d-значения и относительные интенсивности для XRPD моногидрохлоридной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида.

Значение 2θ (°) d-Значение (Å) Относительная интенсивность (I/I₀ (%) 4,86 18,18 6 6,43 13,74 12 7,13 12,38 9 11,65 7,59 5 11,90 7,43 13 12,91 6,85 33 13,15 6,73 19 14,24 6,21 22 14,38 6,15 57 15,37 5,76 6 15,56 5,69 9 16,22 5,46 50 16,50 5,37 14 16,70 5,30 6 17,37 5,11 100 18,09 4,90 8 18,25 4,86 8 18,57 4,77 26 18,90 4,69 38 19,19 4,62 99 19,41 4,57 12 19,64 4,51 16 20,41 4,35 7 20,91 4,25 5 21,26 4,18 19 21,59 4,11 18 21,72 4,09 19 23,23 3,83 9 23,40 3,80 18 23,56 3,77 11 23,66 3,76 10 23,96 3,71 19 24,32 3,66 30 24,73 3,60 10 25,11 3,54 14 25,30 3,52 6 25,52 3,49 18 25,80 3,45 17 26,01 3,42 11 26,41 3,37 9 26,74 3,33 18 27,16 3,28 14 27,44 3,25 8 28,09 3,17 5 28,93 3,08 15 29,49 3,03 7 30,01 2,98 16 30,25 2,95 12 30,57 2,92 10 30,73 2,91 10 31,05 2,88 17 31,60 2,83 4 32,33 2,77 6 32,69 2,74 16 33,31 2,69 5 34,10 2,63 4 34,61 2,59 6 35,38 2,53 7 36,01 2,49 6 36,43 2,46 5 37,23 2,41 4 38,78 2,32 6 39,47 2,28 5 39,89 2,26 4

ФИГ. 16 представляет DSC-график моногидрохлоридной соли N-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида. Образец показал эндотерму с началом изменения при примерно 313°С. Как правило, образцы имели эндотерму с началом изменения в диапазоне 312-322°С, соответственно температуре плавления. Поэтому температуру плавления измеряли при величине около 317±5°C. Некоторые образцы имели дополнительное эндотермическое событие при температуре около 250°С, соответственно потере растворителя.

ФИГ. 17 представляет TGA-график моногидрохлоридной соли N-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида. Образец проявлял потерю при высушивании около 1,7-2,5% вплоть до около 250°С, соответственно выделению воды и растворителя. Содержание воды было измерено на уровне около 0,9% (метод Карла Фишера).

ФИГ. 18 представляет график изотермы сорбции-десорбции для моногидрохлоридной соли N-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида, показывающую прирост и потерю веса, когда относительная влажность варьировала в диапазоне 0-90%. Образец показал обратимый прирост веса приблизительно 4% в диапазоне 0-90% относительной влажности, и обратимую потерю веса приблизительно 2,5% в диапазоне 0-80% относительной влажности. Количество абсорбированной и десорбированной влаги проявляется в зависимости от количества органического растворителя, присутствующего в образце.

ФИГ. 19 представляет график XRPD моногидрохлоридной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида до (нижний график) и после (верхний график) эксперимента с сорбцией-десорбцией, показывающий, что существенное изменение структуры не происходило.

ФИГ. 20 представляет график XRPD моногидрохлоридной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида после измельчения в качающейся мельнице в течение 10 минут при 30 об/сек. Образец показал значительное снижение кристалличности, но без изменения полиморфной модификации.

ФИГ. 21 представляет график XRPD моногидрохлоридной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида после спрессовывания при 2000 Н в течение 1 секунды с образованием таблетки (диаметр - 5 мм). Образец показал небольшое снижение кристалличности, но без изменения полиморфной модификации.

ФИГ. 22 представляет ¹Н-ЯМР-спектр (400 МГц, DMSO-d6) моногидрохлоридной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида.

ФИГ. 23 представляет фрагмент ¹Н-ЯМР-спектра (400 МГц, DMSO-d6) в алифатической области (δ 0,5-6,0) моногидрохлоридной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида.

ФИГ. 24 представляет фрагмент ¹Н-ЯМР-спектра (400 МГц, DMSO-d6) в ароматической области (δ 6,0-11,5) моногидрохлоридной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида.

Определили равновескную растворимость моногидрохлоридной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида в различных средах. Результаты обобщены в Таблице 7.

Таблица 7. Растворимость моногидрохлоридной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида в различных средах

Среда Растворимость после 2 часов (мг/мл) Вода 0,1 HCl (0,1 M) 0,06 HCl (0,01 M) 0,02 Буфер МакИлвейна (pH 2,2) 0,40 Буфер МакИлвейна (pH 3,0) 0,20 Буфер МакИлвейна (pH 4,0) 0,10 Буфер МакИлвейна (pH 4,5) 0,20 Буфер МакИлвейна (pH 5,0) 0,20 Ацетатный буфер (pH 5,0) 0,20 Буфер МакИлвейна (pH 6,0) 0,10 Буфер МакИлвейна (pH 6,8) 0,10 Фосфатный буфер (pH 6,8) 0,20 Буфер МакИлвейна (pH 7,4) 0,01 Буфер Соренсена (pH 9,0) 0,01 Буфер Соренсена (pH 11) 0,70 0,1 M NaOH >10,00 0,1 M лимонная кислота 0,40 Модельный кишечный сок (после еды, FaSSIF) 0,002 Модельный кишечный сок (натощак, FeSSIF) 0,03

Собственную скорость растворения моногидрохлоридной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида в различных средах измерили в среде с различными значениями рН. Результаты обобщены в Таблице 8.

Таблица 8. Собственная скорость растворения моногидрохлоридной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида в различных средах при рН 1,0-7,4

pH среды Собственная скорость растворения (мкг/см²/мин) 1,0 4 2,2 121 3,0 80 4,5 38 6,8 15 7,4 3

ФИГ. 25 представляет график, показывающий скорость растворения моногидрохлоридной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида на протяжении периода 0-60 минут в водной среде при значениях рН от 1,0 до 7,4.

Синтез и свойства моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида

Моносукцинатную соль N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида получили в различных системах растворителей растворением N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида (100 мг, 176 ммол) в различных растворителях (около 8-10 мл на мг лекарственного средства) при нагревании, и добавлением янтарной кислоты (1 эквивалента). Полученный раствор нагревали с перемешиванием при около 60-80°С в течение около 1 часа, затем оставляли охлаждаться до комнатной температуры и перемешивали в течение 3 часов или более (например, в течение ночи). Затем соль выделяли фильтрованием и высушивали при 50°С.

Обобщение выполненных экспериментов приведено в Таблице 8.

Таблица 8. Синтез моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида

Растворитель Выход соли Чистота по ЯМР Кристалличность Форма EtOH (абс.) 77% >95% Высокая A iPrOH 85% >95% Высокая A Ацетон 85% >95% Высокая F^* Этилацетат 84% >95% Высокая A MIBK 0% (нет кристал-лизации) EtOH (абс.) 89% >95% Высокая A EtOH (96%) 70% около 95% Высокая A EtOH (96%) 75% >95% Высокая A EtOH (96%) 75% >95% Высокая A EtOH (98%) 92% >95% Высокая A EtOH (абс.) 94% >95% Высокая A EtOH (98%) 95% Высокая A EtOH (97%) 92% >95% Высокая A

* Ацетоновый сольват

Для моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида кристаллизация из ряда растворителей дала одну и ту же кристаллическую форму (Форму А), как было получено в вышеописанных экспериментах, но иную кристаллическую форму (Форму В) (ацетоновый сольват) получили при кристаллизации из ацетона.

Синтез в препаративном масштабе моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида (Формы А)

N-(3-(5-((1-Этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамид (800 мг, 1,40 ммол) в этаноле (8 мл) нагревали с перемешиванием при 60°С, с образованием светло-желтого раствора. Добавили янтарную кислоту (166 мг, 1,40 ммол, 1,0 эквивалент). Полученный раствор нагревали с перемешиванием при 60°С в течение 10 минут, затем при 45°С в течение 10 минут, пока при перемешивании не образовался осадок. Затем суспензию нагревали при 55°С в течение 1 часа, и затем оставили остывать до комнатной температуры с перемешиванием в течение ночи (около 16 часов). Затем соль отделили фильтрованием и высушили при пониженном давлении при 50°С в течение 3 дней. Тем самым получили моносукцинатную соль N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида (726 мг, выход 75%) в виде беловатого твердого вещества. Данные для полученной моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида (Формы А) показаны на ФИГ. 26-35.

ФИГ. 26 представляет график XRPD моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида (Формы А).

Таблица 9 представляет список показательных XRPD-пиков, d-значений и относительных интенсивностей для XRPD моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида (Формы А).

Таблица 9. XRPD-пики, d-значения и относительные интенсивности для XRPD моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида (Формы А).

Значение 2θ (°) d-Значение (Å) Относительная интенсивность (I/I₀ (%) 5,63 15,68 20 6,72 13,15 5 7,26 12,16 1 10,05 8,80 13 11,28 7,84 32 12,15 7,28 20 12,72 6,95 17 12,94 6,84 17 13,45 6,58 3 13,85 6,39 25 14,20 6,23 3 14,56 6,08 38 14,87 5,95 9 15,13 5,85 6 15,44 5,73 100 15,86 5,58 38 16,13 5,49 63 16,97 5,22 12 17,15 5,17 40 17,33 5,11 4 17,54 5,05 6 17,85 4,97 13 18,00 4,92 37 18,67 4,75 4 19,14 4,63 47 19,48 4,55 2 19,82 4,48 43 20,01 4,43 79 20,20 4,39 62 20,54 4,32 60 21,01 4,23 10 21,48 4,13 44 21,78 4,08 74 22,68 3,92 10 23,07 3,85 6 24,17 3,68 23 24,38 3,65 13 24,60 3,62 16 24,86 3,58 15 25,37 3,51 5 25,67 3,47 17 25,79 3,45 17 26,05 3,42 21 26,23 3,39 20 26,39 3,37 12 26,61 3,35 3 27,06 3,29 21 27,42 3,25 11 27,77 3,21 11 27,90 3,19 8 28,25 3,16 7 28,64 3,11 24 29,45 3,03 9 29,79 3,00 3 30,02 2,97 5

ФИГ. 27 представляет DSC-график моносукцинатной соли N-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида. Образец показал эндотерму с началом изменения при примерно 180°С. Как правило, образцы имели эндотерму с началом изменения в диапазоне 179-182°С, соответственно температуре плавления. Поэтому температуру плавления измеряли при величине около 180±3°C. Некоторые образцы имели дополнительное эндотермическое событие при температуре около 160-165°С, соответственно потере растворителя.

ФИГ. 28 представляет TGA-график моносукцинатной соли N-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида. Образец проявлял потерю при высушивании около 1,4-3,7% вплоть до около 250°С, соответственно высвобождению воды и растворителя. Содержание воды измеряли на уровне около 0,03% (метод Карла Фишера). Соль склонна включать переменные количества растворителя в кристаллах, которая выделяется при температурах выше, чем около 160°С.

ФИГ. 29 представляет график изотермы сорбции-десорбции для моносукцинатной соли N-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида, показывающий прирост и потерю веса, когда относительная влажность варьировала в диапазоне 0-90%. Образец показал обратимый прирост веса приблизительно 0,4% в диапазоне 0-90% относительной влажности, и обратимую потерю веса приблизительно 0,25% в диапазоне 0-80% относительной влажности. Количество абсорбированной и десорбированной влаги проявляется зависящим от количества органического растворителя, присутствующего в образце. Сорбция и десорбция были полностью обратимыми без изменения кристалличности или полиморфной модификации.

ФИГ. 30 представляет график XRPD моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида до (нижний график) и после (верхний график) эксперимента с сорбцией-десорбцией, показывающий, что существенное изменение структуры не происходило.

ФИГ. 31 представляет график XRPD моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида после измельчения в качающейся мельнице в течение 10 минут при 30 об/сек. Образец показал небольшое снижение кристалличности, но без изменения полиморфной модификации.

ФИГ. 32 представляет график XRPD моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида после спрессовывания при 2000 Н в течение 1 секунды с образованием таблетки (диаметр - 5 мм). Образец не показал существенного снижения кристалличности или изменения полиморфной модификации.

ФИГ. 33 представляет ¹Н-ЯМР-спектр (400 МГц, DMSO-d6) моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида.

ФИГ. 34 представляет фрагмент ¹Н-ЯМР-спектра (400 МГц, DMSO-d6) в алифатической области (δ 0,5-6,0) моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида.

ФИГ. 35 представляет фрагмент ¹Н-ЯМР-спектра (400 МГц, DMSO-d6) в ароматической области (δ 6,0-10,0) моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида.

Определяли растворимость моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида в различных средах. Результаты обобщены в Таблице 10.

Таблица 10. Растворимость моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида в различных средах

Среда Растворимость после 2 часов (мг/мл) Вода >2,00 HCl (0,1 M) 0,20 HCl (0,01 M) >0,05 Буфер МакИлвейна (pH 2,2) >5,00 Буфер МакИлвейна (pH 3,0) >5,00 Буфер МакИлвейна (pH 4,0) >5,00 Буфер МакИлвейна (pH 4,5) >5,00 Буфер МакИлвейна (pH 5,0) >5,00 Ацетатный буфер (pH 5,0) >5,00 Буфер МакИлвейна (pH 6,0) 3,7 Буфер МакИлвейна (pH 6,8) >5,00 Фосфатный буфер (pH 6,8) >5,00 Буфер МакИлвейна (pH 7,4) 0,30 Буфер Соренсена (pH 9,0) 0,001 Буфер Соренсена (pH 11) 0,05 0,1 M лимонная кислота >5,00 Модельный кишечный сок (после еды, FaSSIF) 0,003 Модельный кишечный сок (натощак, FeSSIF) 0,40

Собственную скорость растворения моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида в различных средах измерили в среде с различными значениями рН. Результаты обобщены в Таблице 11.

Таблица 11. Собственная скорость растворения моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида в различных средах при рН 1,0-7,4

pH среды Собственная скорость растворения (мкг/см²/мин.) 1,0 (0,1 M HCl) 201 2,2 6844 3,0 6605 4,5 2457 6,8 2533 7,4 <1

ФИГ. 36 представляет график, показывающий скорость растворения моногидрохлоридной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида в течение периода 0-60 минут в водной среде при значениях рН от 1,0 до 7,4.

Неожиданно растворимость моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида оказалась более высокой в некоторых испытанных средах, чем растворимость моногидрохлоридной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида. Собственная скорость растворения моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида также была значительно более высокой, чем собственная скорость растворения моногидрохлоридной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида.

Фармакокинетические параметры моногидрохлоридной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида и моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида у крысы

Фармакокинетические параметры моногидрохлоридной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида и моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида были измерены при пероральном введении в дозах 40 мг и 80 мг (дозы рассчитаны как свободное основание) у норвежских крыс HsdHan:WIST Norway. Каждую соль вводили 3 животным. Результаты показаны в Таблице 12.

Таблица 12. Средние концентрации в плазме после перорального введения моногидрохлоридной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида или моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида норвежским крысам (среднее значение n=3±стандартное отклонение)

Время Концентрации в плазме крови (нМ) Моногидрохлоридная соль
(40 мг/кг) Моногидрохлоридная соль
(80 мг/кг) Моносукцинатная соль (40 мг/кг) Моносукцинатная соль
(80 мг/кг) 0,5 3,53 (±1,76) 523 (±303) 274 (±198) 1,0 6,56 (±5,7) 3,69 1320 (±691) 638 (±713) 2,0 107 (±124) 69,9 (±23,3) 6550 (±975) 3380 (±2720) 4,0 60,9 (±22,3) 419 (±32,6) 3860 (±671) 2620 (±1640) 6,0 13,3 (±8,45) 69 (±12,8) 1140 (±299) 1420 (±1300) 24,0 3,98 (±0,317) 5,09 (±198) PK-параметры AUD-диапазон 0-6 часов 0-6 часов 0-24 часа 0-24 часа AUD (нМ⋅час) 312 (±211) 1040 (±51,1) 30300 (±3120) 25100 (±20900) C_max (нМ) 123 (±107) 419 (±32,6) 6550 (±975) 3520 (±2590) T_max (час) 3,3 (±1,2) 4,0 (±0,0) 2,0 (±0,0) 2,7 (±1,2) Биодоступность при пероральном введении 1% 50%

Данные показывают, что величины экспозиции были значительно более высокими для моносукцинатной соли, чем для моногидрохлориданой соли. Кроме того, биодоступность при пероральном введении в дозе 40 мг/кг составляла только 1% для моногидрохлориданой соли, сравнительно с 50% для моносукцинатной соли.

ФИГ. 37 представляет график значений концентрации в плазме относительно времени после введения внутрь крысам (А) моногидрохлоридной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида при 40 мг/кг; (В) моногидрохлоридной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида при 80 мг/кг; (С) моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида при 40 мг/кг; (D) моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида при 80 мг/кг.

Масштабированное получение моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида (Формы А)

В реактор поместили метанол (11,26 кг) и соединение (compound) (I) (1,58 кг, 2,63 моля), и полученную смесь перемешивали и нагревали до 60-70°С, пока твердое вещество не растворилось. К смеси добавили янтарную кислоту (393 г, 3,16 моля). Перемешивание при 60-70°С продолжали в течение 0,5-1 часа, затем раствор охладили до 10~25°С. В смесь внесли затравочные кристаллы Формы А моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида (3 г), и перемешивание продолжали в течение дополнительного 1 часа до полной кристаллизации продукта. Затем смесь охладили до 0-10°С и выдерживали в течение 3-4 часов. Выпавший в осадок продукт отделили фильтрованием, и промыли охлажденным метанолом. Твердое вещество высушили в вакууме при 45-50°С с образованием Формы А моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида (1,53 кг, выход 80,2%).

Дополнительное охарактеризование солевых форм моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида

Провели дополнительные эксперименты для характеристики Формы А моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида. Во время охарактеризования были идентифицированы некоторые дополнительные формы.

Дополнительные общие методы

Для описываемх ниже исследований, если не оговорено иное, были использованы приборы и методы, как описанные ниже.

Рентгеновская порошковая дифрактометрия

XRPD-анализ проводили с использованием порошковых дифрактометров PANalytical Empyrean и X’Pert3 X-ray, которые были применены с использованием параметров, перечисленных в Таблице 13.

Таблица 13. Параметры XRPD

Параметры Empyrean (режим отражения) X’Pert3 (режим отражения) Рентгеновское излучение Cu, Kα, Kα1: 1,540598Å; Kα2: 1,544426Å; Kα2/Kα1 отношение интенсивностей: 0,5 Cu, Kα, Kα1: 1,540598Å; Kα2: 1,544426Å; Kα2/Kα1 отношение интенсивностей: 0,5 Настройка рентгеновской трубки 45 кВ, 40 мА 45 кВ, 40 мА Щель дивергенции автоматически 1/8° Режим сканирования непрерывный непрерывный Диапазон сканирования (°2θ) 3°-40° 3°-40° Диапазон шагов (°2θ) 0,0167° 0,0263° Время шага сканирования (сек) 33,02 46,665 Время испытания (мин.) ~10 минут ~5 минут

Термогравиметрический анализ и дифференциальная сканирующая калориметрия

Данные TGA были зарегистрированы с использованием прибора TA Q500/Q5000/5500 TGA от фирмы TA Instruments. DSC-измерения были проведены с использованием прибора TA Q200/Q2000/2500 DSC от фирмы TA Instruments. Подробные использованные параметры перечислены в Таблице 14.

Таблица 14. Параметры XPRD

Параметры TGA DSC Метод линейный линейный Кювета для образца алюминиевая, открытая алюминиевая, скрученная Температура комнатная-350°С 25-250°С Скорость нагревания 10°С/минуту 10°С/минуту Продувочный газ азот азот

Динамическая сорбция пара

Измерения DVS проводили на приборе SMS (Surface Measurement Systems) DVS Intrinsic. Относительную влажность при 25°С откалибровали относительно точки расплывания LiCl, Mg(NO₃)₂ и KCl. Параметры для испытания DVS перечислены в Таблице 15.

Таблица 15. Параметры DVS

Параметры DVS Температура 25°C Величина образца 10-200 мг Газ и расход потока азот, 200 мл/минуту dm/dt 0,002%/минуту. Минимальная продолжительность стабильности dm/dt 10 минут Максимальное время установления равновесия 180 минут Диапазон RH от 0% RH до 95% RH до 0% RH Величина ступени RH 10% RH от 0% RH до 90% RH
5% RH от 90% RH до 95% RH

Ядерный магнитный резонанс

Измерения ¹Н ЯМР растворов проводили с использованием ЯМР-спектрометра Bruker 400 МГц с использованием DMSO-d6 или дейтерированного метанола в качестве растворителя.

Микроскопия с поляризованным светом

PLM-изображения были зарегистрированы с использованием прямого микроскопа Axio Lab. A1 с камерой ProgRes® CT3 при комнатной температуре.

HLPC

HLPC-анализы были выполнены с использованием хроматографа Agilent 1260 HPLC. Условия хроматографирования перечислены в Таблицах 16 и 17.

Таблица 16. Параметры HLPC для испытания чистоты

HLPC Agilent 1260 с диодно-матричным (DAD) детектором Колонка Gemini C18 110A, 250×4,6 мм, 5 мкм Подвижная фаза A: 0,1% TFA в H₂O; B: 0,1% в MeCN Программа градиента Время (минут) %В 0,00 20 45,00 60 45,01 20 60,00 20 Время обработки 60,0 минут Продолжительность паузы 0,0 минут Расход потока 1,0 мл/минуту Объем впрыска 10 мкл Длина волны детектора УФ при 234 нм Температура колонки 30°C Температура отбора образца комнатная температура Разбавитель MeCN/H₂O (20:80 по объему)

Таблица 17. Параметры HLPC для испытания растворимости

HLPC Agilent 1260 с DAD-детектором Колонка Gemini C18 110A, 250×4,6 мм, 5 мкм Подвижная фаза A: 0,1% TFA в H₂O; B: 0,1% в MeCN Программа градиента Время (минут) % В 0,00 20 5,00 70 5,10 20 10,00 20 Время обработки 10,0 минут Продолжительность паузы 0,0 минут Расход потока 1,0 мл/минуту Объем впрыска 10 мкл Длина волны детектора УФ при 234 нм Температура колонки 30°C Температура отбора образца комнатная температура Разбавитель MeCN

Эксперименты по отбору полиморфов были проведены с использованием добавления антирастворителя, обратного добавления антирастворителя, способов твердофазно-паровой диффузии, растворо-паровой диффузии, суспензионных, медленного испарения, медленного охлаждения и полимер-индуцируемой кристаллизации. В дополнение к Форме А, были идентифицированы четыре новых формы сукцината, которые были обозначены как сукцинатные Формы C, D, E и F. Все из этих кристаллических форм были охарактеризованы методами рентгеновской порошковой дифрактометрии (XRPD), термогравиметрического анализа (TGA), дифференциальной сканирующей калориметрии (DSC), протонного ядерного магнитного резонанса (¹H-NMR) и HPLC. Две из дополнительных форм были как безводные, одна представляла собой сольват, и еще одна не была охарактеризована вследствие ограниченных количеств образца и трудностей повторного получения. Все Формы C, D, E и F сукцинатной соли имели худшие свойства, чем свойства Формы А, в отношении стабильности и прочих характеристик.

Дополнительное охарактеризование Формы А моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида

Был дополнительно охарактеризован образец Формы А моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида.

Результаты XRPD двух партий Формы А моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида показаны на ФИГ. 38.

Результаты TGA- и DSC-анализа показаны на ФИГ. 39. На кривой TGA сукцинатной Формы А наблюдалась потеря веса 1,9% до 140°С. На кривой DSC ступень эндормического сигнала при 159,5°С (начала изменения) наблюдалась перед резкой эндотермой при 181,3°С (начало изменения).

Спектры ¹Н-ЯМР показаны на ФИГ. 40 (с DMSO-d6 в качестве растворителя) и на ФИГ. 41 (с дейтерированным MeOH в качестве растворителя), и молярное отношение янтарной кислоты к свободному основанию было определено составляющим 0,9:1. Молярное отношение «кислота/свободное основание» в сукцинате Типа А было рассчитано с использованием интегрирования пиков при 2,38 м.д. (интегральная интенсивность 3,58, водородные атомы сукцината, 4H) и при 1,78 м.д. (интегральная интенсивность 6,00, водородные атомы свободного основания, 6H).

HPLC-анализ подтвердил, что чистота образца сукцинатной Формы А (810023-01-A) составляла 99,5% (общая площадь пика).

Дополнительные XRPD-, TGA-, DSC- и ¹H-ЯМР-анализы были проведены после нагревания сукцинатной Формы А до 170°C и затем охлаждения до комнатной температуры. Результаты были показаны на ФИГ. 42-45.

Методом XRPD (ФИГ. 42) подтверждено, что после нагревания кристаллическая форма по-прежнему представляла собой сукцинатную Форму А.

В TGA-кривой (ФИГ. 43) наблюдалась потеря веса 2,6% до 140°C, которая, вероятно, была обусловлена адсорбированной на поверхности влагой, когда нагретый образец подвергался воздействию воздуха перед дополнительным TGA-испытанием. TGA-анализ проводили примерно через 4,5 часа после эксперимента с нагреванием. Убыль веса нагретого образца (2,6%) была более высокой, чем наблюдавшаяся первоначально (1,9%), показывая, что гигроскопичность сукцинатной Формы А может слегка возрастать после тепловой обработки.

На DSC-кривой (ФИГ. 44) наблюдалась только одна эндотерма при 182,7°C (начало изменения).

В ЯМР-анализе (ФИГ. 45) молярное отношение «янтарная кислота/свободное основание» по-прежнему наблюдалось составляющим 0,9:1.

На основе вышеуказанных результатов сукцинат Типа А был идентифицирован как безводный.

Равновесная растворимость

Равновесную растворимость Формы А в воде измеряли при комнатной температуре. Твердое вещество суспендировали в H₂O (при скорости перемешивания ~800 об/мин) при комнатной температуре. Через 24 часа суспензию центрифугировали (10000 об/мин, 5 минут) с последующим фильтрованием (через PTFE-мембрану с размером пор 0,45 мкм). Надосадочную жидкость (первые несколько капель были отброшены) анализировали методом HPLC, и измеряли значение рН. Оставшееся твердое вещество анализировали методом XRPD. Измеренная растворимость Формы А составляла 14,3 мг/мл, соответственно.

XRPD-анализ показал отсутствие изменения формы для Формы А (ФИГ. 46) во время эксперимента с растворением.

Стабильность в твердом состоянии

Образцы Формы А моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида выдерживали для хранения при 80°C в течение одного дня, при 25°C в условиях 60%-ной RH и при 40°C в условиях 75%-ной RH в течение одной недели. Все образцы затем были охарактеризованы с использованием XRPD и HPLC, с результатами, обобщенными в Таблице 18.

Никаикх изменений формы или снижения чистоты по HPLC не наблюдалось для Формы А при любом из условий, показывая, что Форма А моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида обладает хорошей стабильностью в твердом состоянии. Результаты XRPD-анализа показаны на ФИГ. 47.

Таблица 18. Обобщение результатов оценки стабильности в твердом состоянии Формы А моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида

Условия: 80%C/1 день 25°C, 60% RH/1 неделя 25°C, 60% RH/1 неделя Начальная чистота: Чистота (% от начальной) Изменение формы Чистота (% от начальной) Изменение формы Чистота (% от начальной) Изменение формы 99,5% 99,9 нет 100,0 нет 100,0 нет

Гигроскопичность

Для исследования стабильности твердой формы как функции влажности, построили график DVS-изотермы Формы А моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида при 25°C между 0 и 95%-ной RH.

График DVS Формы А моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида, приведенный на ФИГ. 48, показывает 0,14%-ное поглощение воды при 25°C/80%-ной RH, подтверждая, что Форма А не является гигроскопичной.

XRPD-анализ, как представленный на ФИГ 49, показал, что DVS-анализ не привел ни к какому изменению формы для Формы А моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида.

Микроскопия с поляризованным светом

PLM-изображения были сняты для изучения морфологии Формы А моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида. Как показано на ФИГ. 50, Форма А состоит из стержневидных кристаллов.

Заключение

На основе всех вышеуказанных результатов, Форма А моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида была найдена стабильной, негигроскопичной кристаллической формой, которая была пригодна для фармацевтического применения.

Разнообразные модификации изобретения, в дополнение к описанным здесь, будут очевидными квалифицированным специалистам в этой области технологии из вышеприведенного описания. Такие модификации также предполагаются входящими в пределы области пунктов прилагаемой формулы изобретения. Каждая ссылка, в том числе все патенты, патентные заявки и публикации, цитированные в настоящей заявке, включены в данное описание посредством ссылки во всей своей полноте.

Изобретение относится к способу получения кристаллической моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида, имеющей порошковую дифракционную рентгенограмму, содержащую по меньшей мере пять из следующих пиков, в единицах 2θ: 15,4° ± 0,5°; 16,1° ± 0,5°; 17,2° ± 0,5°; 19,1° ± 0,5°; 19,8° ± 0,5°; 20,0° ± 0,5°; 20,2° ± 0,5°; 20,5° ± 0,5°; 21,5° ± 0,5°; и 21,8° ± 0,5°, включающему взаимодействие N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида с одним эквивалентом янтарной кислоты в растворителе, где растворитель выбран из С_1-4-спирта или водного С_1-4-спирта, или из этилацетата, где способ включает: нагревание и перемешивание N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида с одним эквивалентом янтарной кислоты в растворителе при 30-100°C в течение от 5 мин до 4 ч с формированием суспензии, охлаждение и перемешивание суспензии до 0-25°C в течение от 5 мин до 24 ч, фильтрование кристаллической соли из суспензии, и высушивание кристаллической соли при пониженном давлении при 50°C с получением кристаллической соли. Технический результат – разработан способ получения кристаллической моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида, пригодной для лечения рака и других заболеваний, связанных с активностью RAF-киназы, которая является растворимой, стабильной и негигроскопичной. 1 з.п. ф-лы, 50 ил., 18 табл.

1. Способ получения кристаллической моносукцинатной соли N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида, имеющей порошковую дифракционную рентгенограмму, содержащую по меньшей мере пять из следующих пиков, в единицах 2θ: 15,4° ± 0,5°; 16,1° ± 0,5°; 17,2° ± 0,5°; 19,1° ± 0,5°; 19,8° ± 0,5°; 20,0° ± 0,5°; 20,2° ± 0,5°; 20,5° ± 0,5°; 21,5° ± 0,5°; и 21,8°±0,5°, включающий взаимодействие N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида с одним эквивалентом янтарной кислоты в растворителе, где растворитель выбран из С_1-4-спирта или водного С_1-4-спирта, или из этилацетата,

где способ включает:

нагревание и перемешивание N-(3-(5-((1-этилпиперидин-4-ил)(метил)амино)-3-(пиримидин-5-ил)-1H-пирроло[3,2-b]пиридин-1-ил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида с одним эквивалентом янтарной кислоты в растворителе при 30-100°C в течение от 5 мин до 4 ч с формированием суспензии,

охлаждение и перемешивание суспензии до 0-25°C в течение от 5 мин до 24 ч,

фильтрование кристаллической соли из суспензии, и

высушивание кристаллической соли при пониженном давлении при 50°C с получением кристаллической соли.

2. Способ по п. 1, дополнительно включающий кристаллизацию соли из этанола, изопропанола, водного этанола или водного изопропанола, или из этилацетата.