ИНГИБИТОРЫ ПРОТЕИНКИНАЗЫ MKK4 ДЛЯ СТИМУЛЯЦИИ РЕГЕНЕРАЦИИ ПЕЧЕНИ ИЛИ УМЕНЬШЕНИЯ ИЛИ ПРЕДОТВРАЩЕНИЯ ГИБЕЛИ ГЕПАТОЦИТОВ Российский патент 2023 года по МПК C07D405/04 C07D471/04 A61K31/437 A61P1/16 A61P19/02 A61P25/00 

Настоящее изобретение относится к пиразоло-пиридиновым ингибиторам протеинкиназ, которые ингибируют активируемую митогеном протеинкиназу-киназу 4 (MKK4) и, в частности, селективно ингибируют MKK4 по сравнению с протеинкиназами JNK1 и MKK7.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Заболевания печени могут быть вызваны инфекцией, травмой, воздействием токсических соединений, таких как алкоголь или наркотики, аутоиммунными процессами, генетическими дефектами и другими факторами. Печень обладает замечательной регенеративной способностью, которая, однако, может быть нарушена при болезненном состоянии и, следовательно, может быть недостаточной для компенсации потери гепатоцитов и функции органа.

В WO 2007/002433 описаны соединения, которые являются ингибиторами протеинкиназы, полезными для лечения заболеваний и состояний, связанных с аберрантной активностью протеинкиназ. Эти соединения являются ингибиторами протеинкиназы Raf, в частности B-Raf и c-Raf и их мутаций, и поэтому полезны для лечения злокачественных новообразований. Кроме того, говорят, что они ингибируют большое разнообразие других протеинкиназ, среди которых N-концевые киназы c-Jun (JNK) и, в частности, JNK1. WO 2007/002325 содержит аналогичное раскрытие, а также WO 2012/109075 и WO 2014/194127 раскрывают модифицированные соединения, обладающие активностью ингибирования протеинкиназы Raf. H. Vin et al. относится к двум соединениям WO 2007/002433 в качестве ингибиторов B-Raf, которые подавляют апоптоз за счет нецелевого ингибирования передачи сигналов JNK. В WO 2010/111527 описаны соединения пиразоло[3,4-b]пиридина, которые являются ингибиторами протеинкиназы, полезными для лечения заболевания или состояния, опосредованного Raf протеинкиназой, такого как онкологическое заболевание. Кроме того, говорят, что они ингибируют большое разнообразие других протеинкиназ, среди которых N-концевые киназы c-Jun (JNK) и, в частности, JNK1. В WO 2012/136859 раскрыты некоторые соединения, которые описаны в качестве ингибиторов митоген-активируемой протеинкиназы 4 (MKK4) и которые полезны для лечения печеночной недостаточности, для защиты гепатоцитов от апоптоза и для регенерации гепатоцитов. Wuestefeld et al. (Cell 153: 389-401, 2013) описывают функциональный генетический подход для идентификации генов-мишеней, которые можно использовать для увеличения регенеративной способности гепатоцитов. В частности, Wuestefeld et al. идентифицировали протеинкиназу MKK4 как ключевой регулятор регенерации печени и сообщили, что супрессия MKK4 усиливает регенерацию гепатоцитов через компенсаторную активацию MKK7 и JNK1-зависимую активацию ATF2 и ELK1. На основании результатов предшествующего уровня техники был сделан вывод, что ингибиторы MKK4 и JNK1 могут быть полезны для лечения заболеваний, опосредованных JNK1. Однако, несмотря на признание того, что ингибирование JNK1 может быть полезным для лечения заболеваний печени, клинические исследования не проводились. В WO 2018/134254 раскрыты пирроло-пиридиновые соединения, которые являются ингибиторами протеинкиназы для стимуляции регенерации печени или уменьшения или предотвращения гибели гепатоцитов.

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Задача, лежащая в основе изобретения, заключалась в том, чтобы предложить соединения, которые являются полезными ингибиторами MKK4, в частности, ингибиторами MKK4, которые селективно ингибируют MKK4 по сравнению с MKK7 и JNK1. Еще одна проблема заключалась в создании соединений, которые являются ингибиторами MKK4, которые селективно ингибируют MKK4 по сравнению с MKK7 и JNK1, которые полезны для лечения заболеваний печени и особенно для стимуляции регенерации печени или уменьшения или предотвращения гибели гепатоцитов.

Эта проблема была решена путем предложения соединения формулы (I).

Таким образом, изобретение относится к следующим вариантам осуществления:

1. Соединение, имеющее формулу (I)

(I)

и его фармацевтически приемлемые соли, пролекарственные средства, биологически активные метаболиты, сольваты и стереоизомеры,

где переменные в формуле (I) имеют следующие значения:

R¹ представляет собой Н, алкил или гетероциклоалкил, имеющий от 4 до 5 атомов углерода в кольце и 1 или 2 гетероатома, независимо выбранные из О, NH или N-алкила;

А представляет собой связь или связующую группу, выбранную из

СО-,

-S-,

-SO-,

-SO₂-,

-O-,

-C (=N-NHR¹⁰)-,

-CH <,

-NR¹⁰-,

алкилена, который необязательно замещен ОН или алкокси,

алкилен-NR¹⁰-алкилена,

алкилен-NR¹⁰SO₂-алкилена,

алкилен-NR¹⁰SO₂-алкилена,

алкилен-NR¹⁰SO₂-алкилена,

-CONR¹⁰-,

-NR¹⁰CO-,

-NR¹⁰-SO₂-,

-O₂S-NR¹⁰-,

-CO-алкилена,

алкилен-СО-,

алкилен-NR¹⁰CO-,

-OCNR¹⁰-алкилена,

алкилен-NR¹⁰,

NR¹⁰-алкилена,

алкилен-NR¹⁰SO₂-,

-SO₂NR¹⁰-алкилена,

алкилен-CONR¹⁰-алкилена,

алкилен-NR¹⁰CO-алкилена,

алкилен-NR¹⁰CONR¹⁰-,

-NR¹⁰CONR¹⁰-алкилена,

алкилен-NR¹⁰CSNR¹⁰-,

-NR¹⁰CSNR¹⁰-алкилена,

алкилен-NR¹⁰-алкилен-NR¹⁰-,

-NR¹⁰-алкилен-NR¹⁰-алкилена,

-СО-алкилен-O- и

-О-алкилен-СО-;

Q представляет собой ароматическую или гетероароматическую 5- или 6-членную моноциклическую или ароматическую или гетероароматическую 9- или 10-членную бициклическую группу, где гетероароматические группы имеют 1, 2 или 3 гетероатома, независимо выбранных из О, N и S,

где Q замещена -NR¹⁰SO₂R¹² или -N=S(=O)R¹⁰NR¹⁰R¹⁰;

и необязательно замещена 1, 2 или 3 группами, независимо выбранными из

алкила, который необязательно замещен 1 или 2 заместителями, независимо выбранными из фенила, галогензамещенного фенила, галогена, ОН, CN, -NR¹⁰R¹⁰, циклоалкила и гетероароматической 5- или 6-членной моноциклической группы, имеющей 1, 2 или 3 гетероатома, независимо выбранных из О, N и S;

галоген;

гидрокси;

алкокси;

галогеналкокси;

фенил, который необязательно замещен 1 или 2 группами, независимо выбранными из алкила, гидроксиалкила, алкокси, галогена, алкилтио и NR¹⁰R¹⁰;

-NR¹⁰R¹⁰;

-NR¹⁰SO₂R¹²;

-NR¹⁰SO₂R¹³;

-NR¹⁰SO₂NHR¹⁰;

-NR¹⁰CONR¹⁰R¹⁷;

-NR¹⁰COR¹⁸;

-NR¹⁰COOR¹⁰;

-CO-NR¹⁰R¹⁹;

-алкилен-NR¹⁰SO₂R20;

-SO₂R²¹; и

-алкилен-NR¹⁰COR²³;

R⁴ представляет собой

H,

галоген,

CN,

NO₂,

алкил,

фенил, который необязательно замещен 1, 2 или 3 группами, независимо выбранными из алкила, алкокси, галогеналкила, гидроксиалкила, алкилсульфонила, CN и NO₂, или

гетероароматическую или неароматическую гетероциклическую 5- или 6-членную моноциклическую или гетероароматическую 9- или 10-членную бициклическую группу, имеющую 1, 2 или 3 гетероатома, независимо выбранных из О, N и S, причем эта группа необязательно замещена 1 или 2 группами, независимо выбранными из алкила, алкокси, галогена, циклоалкила и NR¹⁰R¹⁰;

R⁵ представляет собой

галоген,

алкил, который необязательно замещен 1 или 2 группами, независимо выбранными из алкокси, NR¹⁰R¹⁰, -COOR¹⁰ и оксадиазолила,

алкокси,

алкенил,

алкинил,

фенил или нафтил, которые необязательно замещены 1, 2 или 3 группами, независимо выбранными из алкила, галогена, галогеналкила, гидрокси, гидроксиалкила, алкилтио, алкилсульфинила, алкилсульфонила, алкил-SO(=NR¹⁰)-, алкилсульфонил-NR¹⁰-, NR¹⁰R¹⁰, R¹⁰R¹⁰NSO₂-, R¹⁰R¹¹NSO₂-, алкил-C(=O)-NR¹⁰SO₂-, R¹⁰R¹¹N(C=O)-, алкокси, бензилокси, галогеналкокси, -OCH₂O-(метилендиокси, присоединенный в соседних положениях к фенильному кольцу), -OCH₂CH₂O-(этилендиокси, присоединенный в соседних положениях к фенильному кольцу), NO₂, -COOR¹⁰, -COOR¹⁴, R¹⁰R¹⁰N(C=O)-, CN, алкилкарбонил-NR¹⁰-, тетразолила, алкенила, -CONR¹⁰-O-алкилен-OH, -CONR¹⁰-O-алкилен-O-алкила и карбоксилзамещенного алкенила, фенилалкенила, где фенильная группа необязательно замещена 1, 2 или 3 группами, независимо выбранными из ОН, алкокси и -CONR¹⁰R¹⁹, или

гетероароматическую или неароматическую гетероциклическую 5- или 6-членную моноциклическую или гетероароматическую 9- или 10-членную бициклическую группу, имеющую 1, 2 или 3 гетероатома, независимо выбранных из О, N и S, причем эта группа необязательно замещена 1 или 2 группами, независимо выбранными из алкила, галогеналкила, алкокси, -NR¹⁰R¹⁰, галогена, -NR¹⁰-циклоалкила, тетразолила, -O-алкилен-NR¹⁰R¹⁰, -NR¹⁰-алкилен-O-алкила, -CN, -CONR¹⁰R¹⁰, алкилSO(=NR¹⁰)-, -CONR¹⁰-O-алкилен-OH, -CONR¹⁰-O-алкилен-O-алкила, -COOR¹⁰, морфолинила, пиперазинила, оксадиазолила и фенилкарбонила;

R⁶ представляет собой Н, алкокси, NR¹⁰R¹⁰ или -NR¹⁰-фенил, где фенильная группа необязательно замещена NR¹⁰R¹⁰, алкокси, морфолинилом, галогеном или -SO₂морфолинилом;

R¹⁰ в каждом случае независимо представляет собой Н, алкил, фенил, который необязательно замещен гидроксилом или алкокси, или представляет собой фенилалкил, где фенильная группа необязательно замещена галогеном;

R¹¹ представляет собой алкил, который замещен 1, 2 или 3 гидроксигруппами;

R¹² представляет собой Н, алкил, фенилалкил, фенил-NR¹⁰-, -NR¹⁰R¹⁰, гетероалкил, имеющий 1, 2 или 3 гетероатома, независимо выбранных из O, N и S, или представляет собой фенил, который необязательно замещен 1, 2 или 3 группами, независимо выбранными из алкила, алкокси, алкоксикарбонила, галогеналкокси, галогена, галогеналкила, CN, NO₂, алкилкарбониламино, оксазолила, -OCH₂O-(метилендиокси, присоединенный в соседних положениях к фенильному кольцу) и -OCH₂CH₂O-(этилендиокси, присоединенный в соседних положениях к фенильному кольцу),

R¹³ представляет собой гетероароматическую или неароматическую гетероциклическую 5- или 6-членную группу, имеющую 1, 2 или 3 гетероатома, независимо выбранных из О, N и S, причем эта группа необязательно замещена 1 или 2 группами, независимо выбранными из алкила, пиридила, алкоксикарбонила, оксазолила и оксазолила, который замещен алкилом или алкоксикарбонилом;

R¹⁴ представляет собой алкил, который замещен 1 или 2 группами, независимо выбранными из

-NR¹⁰R¹⁰, гидрокси или алкокси;

R¹⁷ представляет собой H,

алкил,

галогеналкил,

алкоксиалкил,

циклоалкил,

гетероароматическую 5- или 6-членную группу, имеющую 1, 2 или 3 гетероатома, независимо выбранных из О, N и S, причем эта группа необязательно замещена алкилом или алкокси,

морфолиноалкил,

циклоалкилалкил,

N-бензилпирролидинил,

фенил, который необязательно замещен алкилом, алкокси, галогеналкилом, -NR¹⁰R¹⁰ или галогеном, или

фенилалкил, где фенильная группа необязательно замещена алкилом, галогеналкилом или галогеном, или

R¹⁷ и R¹⁰ вместе образуют циклоалкильное кольцо, которое необязательно замещено ацетиламиногруппой,

R¹⁸ представляет собой алкил, галогеналкил, фенил,

морфолинил или пирролидинил, который необязательно замещен -NR¹⁰R¹⁰;

R¹⁹ представляет собой Н, алкил, фенилалкил, фенил, фенил, который замещен алкокси, или представляет собой алкилен-SO₂-алкил или;

R²⁰ представляет собой фенил, который необязательно замещен алкилом, фенилом или фенилом, который замещен алкилом или гидроксиалкилом;

R²¹ представляет собой NR¹⁰R¹⁰, алкил или фенил, который необязательно замещен галогеном;

R²³ представляет собой фенил или фенил, замещенный алкилом, который необязательно замещен пиперазинилом или алкилзамещенным пиперазинилом;

2. Соединение и его фармацевтически приемлемые соли, пролекарственные средства, сольваты и оптические изомеры, согласно варианту осуществления 1, отличающиеся тем, что

R¹ представляет собой Н, алкил или гетероциклоалкил, имеющий от 4 до 5 атомов углерода в кольце и 1 или 2 гетероатома, независимо выбранных из О, NH или N-алкила;

А представляет собой связь или связующую группу, выбранную из

СО-,

-СО-СО-,

-S-,

-SO-,

-SO₂-,

-O-,

-NR¹⁰-,

алкилена, который необязательно замещен 1 или 2 группами, независимо выбранными из ОН и алкокси,

-CONR¹⁰-,

-NR¹⁰CO-,

-NR¹⁰-SO₂- и

-O₂S-NR¹⁰-;

Q представляет собой ароматическую или гетероароматическую 5- или 6-членную моноциклическую или 9- или 10-членную бициклическую группу,

где Q замещена -NR¹⁰SO₂R¹² или -N=S(=O)R¹⁰NR¹⁰R¹⁰ и необязательно замещена 1, 2 или 3 группами, независимо выбранными из

алкила, который необязательно замещен 1 или 2 заместителями, независимо выбранными из фенила, галогензамещенного фенила и галогена; и

галоген;

R⁴ представляет собой Н, галоген, или алкил;

R⁵ представляет собой

галоген,

алкил, который необязательно замещен 1 или 2 группами, независимо выбранными из

алкокси, NR¹⁰R¹⁰, -COOR¹⁰ и оксадиазолила,

алкенил,

алкинил,

фенил или нафтил, которые необязательно замещены 1, 2 или 3 группами, независимо выбранными из

алкила,

галогена,

галогеналкила,

гидрокси;

гидроксиалкила,

алкилтио,

алкилсульфонила,

алкилсульфонил-NR¹⁰-,

алкил-SO(=NR¹⁰)-,

алкилсульфонил-NR¹⁰-,

-NR¹⁰R¹⁰,

R¹⁰R¹⁰NSO₂-,

R¹⁰R¹¹NSO₂-,

алкил-С(=O)-NR¹⁰SO₂-,

R¹⁰R¹¹N(С=O)-,

алкокси,

бензилокси,

галогеналкокси,

-OCH₂O-(метилендиокси, присоединенный в соседних положениях к фенильному кольцу),

-OCH₂CH₂O-(этилендиокси, присоединенный в соседних положениях к фенильному кольцу),

NO₂,

-COOR¹⁰,

-COOR¹⁴,

R¹⁰R¹⁰N(C=O)-,

CN,

алкилкарбонил-NR¹⁰-,

тетразолила,

алкенила,

-CONR¹⁰-О-алкилен-ОН,

-CONR¹⁰-О-алкилен-О-алкила, и

карбоксилзамещенного алкенила,

фенилалкенил, где фенильная группа необязательно замещена 1, 2 или 3 группами, независимо выбранными из ОН, алкокси и -CONR¹⁰R¹⁹, или

гетероароматическую или неароматическую гетероциклическую 5- или 6-членную моноциклическую или гетероароматическую 9- или 10-членную бициклическую группу, имеющую 1, 2 или 3 гетероатома, независимо выбранных из О, N и S, причем эта группа необязательно замещена 1 или 2 группами, независимо выбранными из

алкила,

галогеналкила,

алкокси,

-NR¹⁰R¹⁰,

галогена,

-NR¹⁰-циклоалкила,

тетразолила,

-О-алкилен-NR¹⁰R¹⁰,

-NR¹⁰-алкилен-О-алкила,

-CN,

-CONR¹⁰R¹⁰,

-COOR¹⁰,

алкил-SO(=NR¹⁰)-,

-CONR¹⁰-О-алкилен-ОН,

-CONR¹⁰-О-алкилен-О-алкила, и

морфолинила,

пиперазинила,

оксадиазолила и

фенилкарбонила;

R⁶ представляет собой Н или алкил;

R¹⁰ в каждом случае независимо представляет собой Н, алкил, фенил, который необязательно замещен гидроксилом или алкокси, или представляет собой фенилалкил, где фенильная группа необязательно замещена галогеном;

R¹¹ представляет собой алкил, который замещен 1, 2 или 3 гидроксигруппами;

R¹² представляет собой Н, алкил, фенилалкил или -NR¹⁰R¹⁰;

R¹⁴ представляет собой алкил, который замещен 1 или 2 группами, независимо выбранными из

-NR¹⁰R¹⁰, гидрокси или алкокси;

R¹⁹ представляет собой Н, алкил, фенилалкил, фенил, фенил, который замещен алкокси, или представляет собой

алкилен-SO₂-алкил или

3. Соединение и его фармацевтически приемлемые соли, пролекарственные средства, сольваты и оптические изомеры, согласно варианту осуществления 1 или 2, отличающиеся тем, что R¹ представляет собой Н или гетероциклоалкил, имеющий от 4 до 5 атомов углерода в кольце и 1 гетероатом кислорода.

4. Соединение и его фармацевтически приемлемые соли, пролекарственные средства, сольваты и оптические изомеры, согласно варианту осуществления 1 или 2, отличающиеся тем, что R¹ представляет собой Н.

5. Соединение и его фармацевтически приемлемые соли, пролекарственные средства, сольваты и оптические изомеры, согласно варианту осуществления 1 или 2, отличающиеся тем, что R¹ представляет собой гетероциклоалкил, имеющий от 4 до 5 атомов углерода в кольце и 1 гетероатом кислорода.

6. Соединение и его фармацевтически приемлемые соли, пролекарственные средства, сольваты и оптические изомеры по любому из предшествующих вариантов осуществления, отличающиеся тем, что А представляет собой связующую группу, выбранную из

СО-,

-S-,

-SO-,

-SO₂-,

алкилена, который необязательно замещен 1 или 2 группами, независимо выбранными из ОН и алкокси,

-CONR¹⁰- и

-NR¹⁰CO-.

7. Соединение и его фармацевтически приемлемые соли, пролекарственные средства, сольваты и оптические изомеры по любому из предшествующих вариантов осуществления, отличающиеся тем, что Q представляет собой фенил или нафтил, и является замещенным и необязательно замещенным, как определено в пункте 2.

8. Соединение и его фармацевтически приемлемые соли, пролекарственные средства, сольваты и оптические изомеры, согласно варианту осуществления 7, отличающиеся тем, что Q представляет собой фенил и является замещенным и необязательно замещенным, как определено в пункте 2.

9. Соединение и его фармацевтически приемлемые соли, пролекарственные средства, сольваты и оптические изомеры согласно вариантам осуществления 7 или 8, отличающиеся тем, что Q представляет собой фенил, замещенный -NR¹⁰SO₂R¹² и дополнительно замещенный 1, 2 или 3 группами, независимо выбранными из галогена и алкила, который необязательно замещен 1 или 2 заместителями, независимо выбранными из фенила и галогензамещенного фенила.

10. Соединение и его фармацевтически приемлемые соли, пролекарственные средства, сольваты и оптические изомеры, согласно варианту осуществления 9, отличающиеся тем, что Q представляет собой фенил, замещенный -NR¹⁰SO₂R¹² и дополнительно замещенный 1, 2 или 3 атомами галогена.

11. Соединение и его фармацевтически приемлемые соли, пролекарственные средства, сольваты и оптические изомеры, согласно варианту осуществления 10, отличающиеся тем, что фенил замещен -NR¹⁰SO₂R¹² и дополнительно замещен 2 или 3 атомами галогена.

12. Соединение и его фармацевтически приемлемые соли, пролекарственные средства, сольваты и оптические изомеры по любому из вариантов осуществлений 9, 10 или 11, где атом галогена или атомы галогена представляют собой F или Cl, в частности, F.

13. Соединение и его фармацевтически приемлемые соли, пролекарственные средства, сольваты и оптические изомеры по любому из предыдущих вариантов осуществления, отличающиеся тем, что R⁴ и R⁶ представляют собой H или алкил.

14. Соединение и его фармацевтически приемлемые соли, пролекарственные средства, сольваты и оптические изомеры по любому из вариантов осуществлений 1-13, отличающиеся тем, что [3-(5-бром-1Н-пиразоло[3,4-b])пиридин-3-карбонил)-2,4-дифторфенил]амид пропан-1-сульфокислоты исключен.

15. Соединение и его фармацевтически приемлемые соли, пролекарственные средства, сольваты и оптические изомеры по любому из вариантов осуществлений 2-13, отличающиеся тем, что R⁵ представляет собой

алкил, который необязательно замещен 1 или 2 группами, независимо выбранными из

алкокси, NR¹⁰R¹⁰, -COOR¹⁰ и оксадиазолила,

алкенил,

алкинил,

фенил или нафтил, которые необязательно замещены 1, 2 или 3 группами, независимо выбранными из

алкила,

галогена,

галогеналкила,

гидрокси;

гидроксиалкила,

алкилтио,

алкилсульфонила,

алкилсульфонил-NR¹⁰-,

алкил-SO(=NR¹⁰)-,

алкилсульфонил-NR¹⁰-,

-NR¹⁰R¹⁰,

R¹⁰R¹⁰NSO₂-,

R¹⁰R¹¹NSO₂-,

алкил-С(=O)-NR¹⁰SO₂-,

R¹⁰R¹¹N(С=O)-,

алкокси,

бензилокси,

галогеналкокси,

-OCH₂O-(метилендиокси, присоединенный в соседних положениях к фенильному кольцу),

-OCH₂CH₂O-(этилендиокси, присоединенный в соседних положениях к фенильному кольцу), NO₂,

-COOR¹⁰,

-COOR¹⁴,

R¹⁰R¹⁰N(C=O)-,

CN,

алкилкарбонил-NR¹⁰-,

тетразолила,

алкенила,

-CONR¹⁰-О-алкилен-ОН,

-CONR¹⁰-O-алкилен-O-алкила и

карбоксилзамещенного алкенила,

фенилалкенил, где фенильная группа необязательно замещена 1, 2 или 3 группами, независимо выбранными из ОН, алкокси и -CONR¹⁰R¹⁹, или

гетероароматическую или неароматическую гетероциклическую 5- или 6-членную моноциклическую или гетероароматическую 9- или 10-членную бициклическую группу, имеющую 1, 2 или 3 гетероатома, независимо выбранных из О, N и S, причем эта группа необязательно замещена 1 или 2 группами, независимо выбранными из

алкила,

галогеналкила,

алкокси,

-NR¹⁰R¹⁰,

галогена,

-NR¹⁰-циклоалкила,

тетразолила,

-О-алкилен-NR¹⁰R¹⁰,

-NR¹⁰-алкилен-О-алкила,

-CN,

-CONR¹⁰R¹⁰,

-COOR¹⁰,

морфолинила,

пиперазинила,

оксадиазолила и

алкил-SO(=NR¹⁰)-,

-CONR¹⁰-О-алкилен-ОН,

алкил-SO(=NR¹⁰)-,

-CONR¹⁰-O-алкилен-O-алкила и

фенилкарбонила;

16. Соединение и его фармацевтически приемлемые соли, пролекарственные средства, сольваты и оптические изомеры по любому из предыдущих вариантов осуществления, отличающиеся тем, что R⁵ представляет собой

фенил или нафтил, которые необязательно замещены 1, 2 или 3 группами, независимо выбранными из

алкила,

галогена,

галогеналкила,

гидрокси;

гидроксиалкила,

алкилтио,

алкилсульфонила,

алкилсульфонил-NR¹⁰-,

алкил-SO(=NR¹⁰)-,

алкилсульфонил-NR¹⁰-,

-NR¹⁰R¹⁰,

R¹⁰R¹⁰NSO₂-,

R¹⁰R¹¹NSO₂-,

алкил-С(=O)-NR¹⁰SO₂-,

R¹⁰R¹¹N(С=O)-,

алкокси,

бензилокси,

галогеналкокси,

-OCH₂O-(метилендиокси, присоединенный в соседних положениях к фенильному кольцу),

-OCH₂CH₂O-(этилендиокси, присоединенный в соседних положениях к фенильному кольцу), NO₂,

-COOR¹⁰,

-COOR¹⁴,

R¹⁰R¹⁰N(C=O)-,

CN,

алкилкарбонил-NR¹⁰-,

тетразолила,

алкенила,

-CONR¹⁰-О-алкилен-ОН,

-CONR¹⁰-O-алкилен-O-алкила и

карбоксилзамещенный алкенила или

гетероароматическую или неароматическую гетероциклическую 5- или 6-членную моноциклическую или гетероароматическую 9- или 10-членную бициклическую группу, имеющую 1, 2 или 3 гетероатома, независимо выбранных из О, N и S, причем эта группа необязательно замещена 1 или 2 группами, независимо выбранными из

алкила,

галогеналкила,

алкокси,

-NR¹⁰R¹⁰,

галогена,

-NR¹⁰-циклоалкила,

тетразолила,

-О-алкилен-NR¹⁰R¹⁰,

-NR¹⁰-алкилен-О-алкила,

-CN,

-CONR¹⁰R¹⁰,

-COOR¹⁰,

морфолинила,

пиперазинила,

оксадиазолила и

алкил-SO(=NR¹⁰)-,

алкил-SO(=NR¹⁰)-,

-CONR¹⁰-О-алкилен-ОН,

-CONR¹⁰-O-алкилен-O-алкила и

фенилкарбонила;

17. Соединение и его фармацевтически приемлемые соли, пролекарственные средства, сольваты и оптические изомеры, согласно варианту осуществления 16, отличающиеся тем, что R⁵ представляет собой фенил или нафтил, где фенил или нафтил замещены 1, 2 или 3 группами, независимо выбранными из алкила, гидрокси, галогена, галогеналкила, алкилсульфонил, алкилSO(=NR¹⁰)-, алкилсульфонил-NR¹⁰-, -NR¹⁰R¹⁰, R¹⁰R¹⁰NSO₂-, R¹⁰R¹¹NSO₂-, алкил-C(=O)-NR¹⁰SO₂-, R¹⁰R¹¹N(C=O)-, алкокси, -OCH₂O-(метилендиокси, присоединенный в соседних положениях к фенильному кольцу), -OCH₂CH₂O-(этилендиокси, присоединенный в соседних положениях к фенильному кольцу), -NO₂, -COOR¹⁰, -COOR¹⁴, R¹⁰R¹⁰N(C=O)-, тетразолила, -CONR¹⁰-O-алкилен-ОН и -CONR¹⁰-О-алкилен-О-алкила.

18. Соединение и его фармацевтически приемлемые соли, пролекарственные средства, сольваты и оптические изомеры по любому из вариантов осуществлений 2-16, отличающиеся тем, что R⁵ представляет собой гетероароматическую 5- или 6-членную моноциклическую или гетероароматическую 9- или 10-членную бициклическую группу, имеющую 1, 2 или 3 гетероатома, независимо выбранных из О, N и S, причем эта группа необязательно замещена 1 или 2 группами, независимо выбранными из алкила, галогеналкила, алкокси, -NR¹⁰R¹⁰, галогена, -NR¹⁰-циклоалкила, тетразолила, -O-алкилен-NR¹⁰R¹⁰, -NR¹⁰ -алкилен-O-алкила, -CN, -CONR¹⁰R¹⁰, -COOR¹⁰, алкилSO(=NR¹⁰)-, -CONR¹⁰-O-алкилен-ОН и -CONR¹⁰-О-алкилен-О-алкила.

19. Соединение и его фармацевтически приемлемые соли, пролекарственные средства, сольваты и оптические изомеры, согласно варианту осуществления 18, отличающиеся тем, что R⁵ представляет собой гетероароматическую 5- или 6-членную моноциклическую группу, имеющую 1, 2 или 3 гетероатома, независимо выбранных из группы O, N и S, причем эта группа необязательно замещена 1 или 2 группами, независимо выбранными из алкила, галогеналкила, алкокси, -NR¹⁰R¹⁰, галогена, -NR¹⁰-циклоалкила, тетразолила, -O-алкилен-NR¹⁰R¹⁰, -NR¹⁰-алкилен-O-алкила, -CN, -CONR¹⁰R¹⁰, -COOR¹⁰, алкилSO(=NR¹⁰)-, -CONR¹⁰-O-алкилен-ОН и -CONR¹⁰-O-алкилен-O-алкила.

20. Соединение и его фармацевтически приемлемые соли, пролекарственные средства, сольваты и оптические изомеры, согласно варианту осуществления 19, отличающиеся тем, что R⁵ представляет собой гетероароматическую 5- или 6-членную моноциклическую группу, имеющую 1, 2 или 3 гетероатома, независимо выбранных из группы O, N и S, причем эта группа незамещена или замещена 1 или 2 группами, независимо выбранными из алкила, галогеналкила, алкокси, -NR¹⁰R¹⁰, галогена, -NR¹⁰-циклоалкила, тетразолила, -O-алкилен-NR¹⁰R¹⁰, -NR¹⁰-алкилен-O-алкила, -CN, -CONR¹⁰R¹⁰ и -COOR¹⁰.

21. Соединение и его фармацевтически приемлемые соли, пролекарственные средства, сольваты и оптические изомеры, согласно варианту осуществления 20, отличающиеся тем, что гетероароматическая группа незамещена или замещена 1 или 2 группами, независимо выбранными из алкила, галогеналкила или -COOR¹⁰.

22. Соединение и его фармацевтически приемлемые соли, пролекарственные средства, сольваты и оптические изомеры, согласно варианту осуществления 20, отличающиеся тем, что гетероароматическая группа представляет собой пиридил, пиридил, замещенный -COOR¹⁰, пиримидинил или пиримидинил, замещенный группой, выбранной из CF₃, галогеналкила, алкокси, -NR¹⁰R¹⁰, галогена, -NR¹⁰-циклоалкила, тетразолила, -O-алкилен-NR¹⁰R¹⁰, -NR¹⁰-алкилен-O-алкила, -CN и -CONR¹⁰R¹⁰.

23. Соединение и его фармацевтически приемлемые соли, пролекарственные средства, сольваты и оптические изомеры, согласно варианту осуществления 22, отличающиеся тем, что гетероароматическая группа представляет собой пиримидинил или пиримидинил, замещенный во 2-ом положении.

24. Соединение и его фармацевтически приемлемые соли, пролекарственные средства, сольваты и оптические изомеры, согласно варианту осуществления 22, отличающиеся тем, что гетероароматическая группа представляет собой пиридил или пиридил, замещенный -COOR¹⁰.

25. Соединение и его фармацевтически приемлемые соли, пролекарственные средства, сольваты и оптические изомеры по любому из предшествующих вариантов осуществления, отличающиеся тем, что R¹⁰ представляет собой H или алкил.

26. Соединение и его фармацевтически приемлемые соли, пролекарственные средства, сольваты и оптические изомеры по любому из предыдущих вариантов осуществления, отличающиеся тем, что R¹² представляет собой алкил или фенилалкил.

27. Соединение и его фармацевтически приемлемые соли, пролекарственные средства, сольваты и оптические изомеры, согласно варианту осуществления 26, отличающиеся тем, что R¹² представляет собой C₁-C₃-алкил или бензил.

28. Соединение и его фармацевтически приемлемые соли, пролекарственные средства, сольваты и оптические изомеры по любому из вариантов осуществлений 2-24, имеющие формулу (Ia)

(Ia)

отличающиеся тем, что

R^w представляет собой -NR¹⁰SO₂R¹² или -N=S(=O)R¹⁰NR¹⁰R¹⁰;

R^x представляет собой Н, галоген или алкил;

R^y представляет собой Н, галоген или алкил;

R^z представляет собой Н, галоген или алкил;

где один или два из R^x, R^y или R^z представляют собой галоген, а другой (другие) из R^x, R^y и R^z представляет собой Н, галоген или алкил;

R¹, R⁴, R⁵, R⁶, R¹⁰ и R¹² такие, как определено по любому из вариантов осуществления 2-27.

29. Соединение и его фармацевтически приемлемые соли, пролекарственные средства, сольваты и оптические изомеры, согласно варианту осуществления 28, отличающиеся тем, что

R¹ представляет собой Н или алкил;

R⁴ представляет собой Н или алкил;

R⁶ представляет собой Н или алкил;

R¹⁰ представляет собой Н, алкил или фенилалкил;

R¹² представляет собой Н, алкил или фенилалкил;

R^w представляет собой -NR¹⁰SO₂R¹² или -N=S(=O)R¹⁰NR¹⁰R¹⁰;

R^x представляет собой Н, галоген или алкил;

R^y представляет собой Н, галоген или алкил;

R^z представляет собой Н, галоген или алкил;

где один или два из R^x, R^y или R^z представляют собой галоген, а другой (другие) из R^x, R^y и R^z представляет собой Н, галоген или алкил;

R⁵ представляет собой

фенил, замещенный 1, 2 или 3 группами, независимо выбранными из

алкила,

гидрокси;

галогена,

галогеналкила,

алкилсульфонил-NR¹⁰-,

алкил-SO(=NR¹⁰)-,

алкилсульфонил-NR¹⁰-,

-NR¹⁰R¹⁰,

R¹⁰R¹⁰NSO₂-,

R¹⁰R¹¹NSO₂-,

алкил-С(=O)-NR¹⁰SO₂-,

R¹⁰R¹¹N(С=O)-,

алкокси,

-OCH₂O-(метилендиокси, присоединенный в соседних положениях к фенильному кольцу),

-OCH₂CH₂O-(этилендиокси, присоединенный в соседних положениях к фенильному кольцу),

-NO₂,

-COOR¹⁰,

-COOR¹⁴,

R¹⁰R¹⁰N(С=O)-,

тетразолила,

-CONR¹⁰-O-алкилен-ОН и

-CONR¹⁰-O-алкилен-O-алкила или

гетероароматическую 5- или 6-членная моноциклическую группу, имеющую 1, 2 или 3 гетероатома, независимо выбранных из O, N и S, причем эта группа незамещена или замещена 1 или 2 группами, независимо выбранными из

алкила,

галогеналкила,

алкокси,

-NR¹⁰R¹⁰,

галогена,

-NR¹⁰-циклоалкила,

тетразолила,

-О-алкилен-NR¹⁰R¹⁰,

-NR¹⁰-алкилен-О-алкила,

-CN,

-CONR¹⁰R¹⁰,

-COOR¹⁰,

алкил-SO(=NR¹⁰)-,

-CONR¹⁰-O-алкилен-ОН и

-CONR¹⁰-О-алкилен-О-алкила;

R¹¹ представляет собой алкил, который замещен 1, 2 или 3 гидроксигруппами; и

R¹⁴ представляет собой алкил, который замещен 1 или 2 группами, независимо выбранными из

-NR¹⁰R¹⁰, гидрокси или алкокси.

30. Соединение и его фармацевтически приемлемые соли, пролекарственные средства, сольваты и оптические изомеры, согласно варианту осуществления 29, отличающиеся тем, что

R⁵ представляет собой

фенил, замещенный 1, 2 или 3 группами, независимо выбранными из алкила, гидрокси, галогена, галогеналкила, алкилсульфонила, алкилSO(=NR¹⁰)-, алкилсульфонил-NR¹⁰-, -NR¹⁰R¹⁰, R¹⁰R¹⁰NSO₂-, R¹⁰R¹¹NSO₂-, алкил-C(=O)-NR¹⁰SO₂-, R¹⁰R¹¹N(C=O)-, алкокси, -OCH₂O-(метилендиокси, присоединенный в соседних положениях к фенильному кольцу), -OCH₂CH₂O-(этилендиокси, присоединенный в соседних положениях к фенильному кольцу), -NO₂, -COOR¹⁰, -COOR¹⁴, R¹⁰R¹⁰N(C=O)-, тетразолила, -CONR¹⁰-O-алкилен-ОН и -CONR¹⁰-O-алкилен-O-алкила или

гетероароматическую 5- или 6-членную моноциклическую группу, имеющую 1, 2 или 3 гетероатома, независимо выбранных из O, N и S, причем эта группа незамещена или замещена 1 или 2 группами, независимо выбранными из алкила, галогеналкила и -COOR¹⁰.

31. Соединение и его фармацевтически приемлемые соли, пролекарственные средства, сольваты и оптические изомеры по любому из вариантов осуществлений 28-30, имеющие формулу (Iaa)

(Iaa)

32. Соединение и его фармацевтически приемлемые соли, пролекарственные средства, сольваты и оптические изомеры по любому из вариантов осуществлений 2-27, имеющие формулу (Ib)

мм (Ib)

отличающиеся тем, что

R^w представляет собой -NR¹⁰SO₂R¹² или -N=S(=O)R¹⁰NR¹⁰R¹⁰;

R^x представляет собой галоген;

R^y представляет собой галоген и

R¹, R⁴, R⁵, R⁶, R¹⁰ и R¹² такие, как определено по любому из вариантов осуществления 2-30.

33. Соединение и его фармацевтически приемлемые соли, пролекарственные средства, сольваты и оптические изомеры, согласно варианту осуществления 32, отличающиеся тем, что

R^w представляет собой -NR¹⁰SO₂R¹²;

R^x представляет собой галоген;

R^y представляет собой галоген и

R⁵ представляет собой

фенил, замещенный 1, 2 или 3 группами, независимо выбранными из

алкила,

гидрокси;

галогена,

галогеналкила,

алкилсульфонил-NR¹⁰-,

алкил-SO(=NR¹⁰)-,

алкилсульфонил-NR¹⁰-,

-NR¹⁰R¹⁰,

R¹⁰R¹⁰NSO₂-,

R¹⁰R¹¹NSO₂-,

алкил-С(=O)-NR¹⁰SO₂-,

R¹⁰R¹¹N(С=O)-,

алкокси,

-OCH₂O-(метилендиокси, присоединенный в соседних положениях к фенильному кольцу),

-OCH₂CH₂O-(этилендиокси, присоединенный в соседних положениях к фенильному кольцу),

-NO₂,

-COOR¹⁰,

-COOR¹⁴,

R¹⁰R¹⁰N(С=O)-,

тетразолила,

алкил-SO(=NR¹⁰)-,

-CONR¹⁰-O-алкилен-ОН и

-CONR¹⁰-O-алкилен-O-алкила или

Гетероароматическую 5- или 6-членную моноциклическую группу, имеющую 1, 2 или 3 гетероатома, независимо выбранных из O, N и S, причем эта группа незамещена или замещена 1 или 2 группами, независимо выбранными из

алкила,

галогеналкила,

-COOR¹⁰,

алкил-SO(=NR¹⁰)-,

-CONR¹⁰-O-алкилен-ОН и

-CONR¹⁰-О-алкилен-О-алкил;

R¹¹ представляет собой алкил, который замещен 1, 2 или 3 гидроксигруппами; и

R¹⁴ представляет собой алкил, который замещен 1 или 2 группами, независимо выбранными из

-NR¹⁰R¹⁰, гидрокси или алкокси.

34. Соединение и его фармацевтически приемлемые соли, пролекарственные средства, сольваты и оптические изомеры, согласно варианту осуществления 33, отличающиеся тем, что

R⁵ представляет собой фенил, замещенный 1, 2 или 3 группами, независимо выбранными из алкила, гидрокси, галогена, галогеналкила, алкилсульфонила, алкилсульфонила-NR¹⁰-, -NR¹⁰R¹⁰, R¹⁰R¹⁰NSO₂-, R¹⁰R¹¹NSO₂-, алкил-C(=O)-NR¹⁰SO₂-, R¹⁰R¹¹N(C=O)-, алкокси, -NO₂, -COOR¹⁰, R¹⁰R¹⁰N(C=O)- и тетразолила.

35. Соединение и его фармацевтически приемлемые соли, пролекарственные средства, сольваты и оптические изомеры, согласно варианту осуществления 33, отличающиеся тем, что

R⁵ представляет собой гетероароматическую 5- или 6-членную моноциклическую группу, имеющую 1, 2 или 3 гетероатома, независимо выбранных из O, N и S, причем эта группа незамещена или замещена 1 или 2 группами, независимо выбранными из алкила, галогеналкила, -COOR¹⁰.

36. Соединение и его фармацевтически приемлемые соли, пролекарственные средства, сольваты и оптические изомеры по любому из вариантов осуществлений 2-31, имеющие формулу (Ic)

(Ic)

отличающиеся тем, что

R^w представляет собой -NR¹⁰SO₂R¹² или -N=S(=O)R¹⁰NR¹⁰R¹⁰;

R^x представляет собой галоген;

R^y представляет собой галоген; и

R¹, R⁴, R⁵, R⁶, R¹⁰ и R¹² такие, как определено по любому из вариантов осуществления 2-30.

37. Соединение и его фармацевтически приемлемые соли, пролекарственные средства, сольваты и оптические изомеры, согласно варианту осуществления 36, отличающиеся тем, что

R^w представляет собой -NR¹⁰SO₂R¹²;

R^x представляет собой галоген;

R^y представляет собой галоген и

R⁵ представляет собой

галоген,

фенил, замещенный 1, 2 или 3 группами, независимо выбранными из

алкила,

гидрокси;

галогена,

галогеналкила,

алкилсульфонил-NR¹⁰-,

алкил-SO(=NR¹⁰)-,

алкилсульфонил-NR¹⁰-,

-NR¹⁰R¹⁰,

R¹⁰R¹⁰NSO₂-,

R¹⁰R¹¹NSO₂-,

алкил-С(=O)-NR¹⁰SO₂-,

R¹⁰R¹¹N(С=O)-,

алкокси,

-OCH₂O-(метилендиокси, присоединенный в соседних положениях к фенильному кольцу),

-OCH₂CH₂O-(этилендиокси, присоединенный в соседних положениях к фенильному кольцу),

-NO₂,

-COOR¹⁰,

-COOR¹⁴,

R¹⁰R¹⁰N(С=O)-,

алкил-SO(=NR¹⁰)-,

-CONR¹⁰-О-алкилен-ОН,

-CONR¹⁰-O-алкилен-O-алкила и

тетразолила, или

гетероароматическую 5- или 6-членную моноциклическую группу, имеющую 1, 2 или 3 гетероатома, независимо выбранных из O, N и S, причем эта группа незамещена или замещена 1 или 2 группами, независимо выбранными из

алкила,

галогеналкила,

алкокси,

-NR¹⁰R¹⁰,

галогена,

-NR¹⁰-циклоалкила,

тетразолила,

-О-алкилен-NR¹⁰R¹⁰,

-NR¹⁰-алкилен-О-алкила,

-CN,

-CONR¹⁰R¹⁰,

-COOR¹⁰,

алкил-SO(=NR¹⁰)-,

-CONR¹⁰-O-алкилен-ОН и

-CONR¹⁰-О-алкилен-О-алкила;

R¹¹ представляет собой алкил, который замещен 1, 2 или 3 гидроксигруппами; и

R¹⁴ представляет собой алкил, который замещен 1 или 2 группами, независимо выбранными из

-NR¹⁰R¹⁰, гидрокси или алкокси.

38. Соединение и его фармацевтически приемлемые соли, пролекарственные средства, сольваты и оптические изомеры, согласно варианту осуществления 37, где R⁵ представляет собой

фенил, замещенный 1, 2 или 3 группами, независимо выбранными из

алкила,

гидрокси;

галогена,

галогеналкила,

алкилсульфонил-NR¹⁰-,

алкил-SO(=NR¹⁰)-,

алкилсульфонил-NR¹⁰-,

-NR¹⁰R¹⁰,

R¹⁰R¹⁰NSO₂-,

R¹⁰R¹¹NSO₂-,

алкил-С(=O)-NR¹⁰SO₂-,

R¹⁰R¹¹N(С=O)-,

алкокси,

-OCH₂O-(метилендиокси, присоединенный в соседних положениях к фенильному кольцу),

-OCH₂CH₂O-(этилендиокси, присоединенный в соседних положениях к фенильному кольцу),

-NO₂,

-COOR¹⁰,

-COOR¹⁴,

R¹⁰R¹⁰N(С=O)-,

тетразолила,

алкил-SO(=NR¹⁰)-,

-CONR¹⁰-O-алкилен-ОН и

-CONR¹⁰-O-алкилен-O-алкила или

гетероароматическую 5- или 6-членную моноциклическую группу, имеющую 1, 2 или 3 гетероатома, независимо выбранных из O, N и S, причем эта группа незамещена или замещена 1 или 2 группами, независимо выбранными из

алкила,

галогеналкила,

алкокси,

-NR¹⁰R¹⁰,

галогена,

-NR¹⁰-циклоалкила,

тетразолила,

-О-алкилен-NR¹⁰R¹⁰,

-NR¹⁰-алкилен-О-алкила,

-CN,

-CONR¹⁰R¹⁰,

-COOR¹⁰,

алкил-SO(=NR¹⁰)-,

-CONR¹⁰-O-алкилен-ОН и

-CONR¹⁰-О-алкилен-О-алкила.

39. Соединение и его фармацевтически приемлемые соли, пролекарственные средства, сольваты и оптические изомеры, согласно варианту осуществления 37, отличающиеся тем, что

R⁵ представляет собой фенил, замещенный 1, 2 или 3 группами, независимо выбранными из алкила, гидрокси, галогена, алкилSO(=NR¹⁰)-, R¹⁰R¹⁰NSO₂-, -COOR¹⁰, -COOR¹⁴, R¹⁰R¹⁰N(C=O)- и тетразолила.

40. Соединение и его фармацевтически приемлемые соли, пролекарственные средства, сольваты и оптические изомеры, согласно варианту осуществления 37, отличающиеся тем, что R⁵ представляет собой пиридил, пиридил, замещенный -COOR¹⁰, пиримидинил или пиримидинил, замещенный CF₃.

41. Соединение и его фармацевтически приемлемые соли, пролекарственные средства, сольваты и оптические изомеры по любому из вариантов осуществлений 2-31, имеющие формулу (Id)

(Id)

отличающиеся тем, что

R^w представляет собой -NR¹⁰SO₂R¹² или -N=S(=O)R¹⁰NR¹⁰R¹⁰;

R^x представляет собой галоген; и

R¹, R⁴, R⁵, R⁶, R¹⁰ и R¹² такие, как определено по любому из вариантов осуществления 2-30.

42. Соединение и его фармацевтически приемлемые соли, пролекарственные средства, сольваты и оптические изомеры, согласно варианту осуществления 41, отличающиеся тем, что

R^w представляет собой -NR¹⁰SO₂R¹²;

R^x представляет собой галоген;

R⁵ представляет собой

галоген,

фенил, замещенный 1, 2 или 3 группами, независимо выбранными из алкила, гидрокси, галогена, галогеналкила, алкилсульфонила, алкилSO(=NR¹⁰)-, алкилсульфонил-NR¹⁰-, -NR¹⁰R¹⁰, R¹⁰R¹⁰NSO₂-, R¹⁰R¹¹NSO₂-, алкил-C(=O)-NR¹⁰SO₂-, R¹⁰R¹¹N(C=O)-, алкокси, -OCH₂O-(метилендиокси, присоединенный в соседних положениях к фенильному кольцу), -OCH₂CH₂O-(этилендиокси, присоединенный в соседних положениях к фенильному кольцу), -NO₂, -COOR¹⁰, -COOR¹⁴, R¹⁰R¹⁰N(C=O)- и тетразолила, или

гетероароматическую 5- или 6-членную моноциклическую группу, имеющую 1, 2 или 3 гетероатома, независимо выбранных из O, N и S, причем эта группа незамещена или замещена 1 или 2 группами, независимо выбранными из алкила, галогеналкила, алкокси, -NR¹⁰R¹⁰, галогена, -NR¹⁰-циклоалкила, тетразолила, -O-алкилен-NR¹⁰R¹⁰, -NR¹⁰-алкилен-O-алкил, -CN, -CONR¹⁰R¹⁰ и -COOR¹⁰;

R¹¹ представляет собой алкил, который замещен 1, 2 или 3 гидроксигруппами; и

R¹⁴ представляет собой алкил, который замещен 1 или 2 группами, независимо выбранными из

-NR¹⁰R¹⁰, гидрокси или алкокси.

43. Соединение и его фармацевтически приемлемые соли, пролекарственные средства, сольваты и оптические изомеры, согласно варианту осуществления 42, отличающиеся тем, что R⁵ представляет собой

фенил, замещенный 1, 2 или 3 группами, независимо выбранными из алкила, гидрокси, галогена, галогеналкила, алкилсульфонила, алкилSO(=NR¹⁰)-, алкилсульфонил-NR¹⁰-, -NR¹⁰R¹⁰, R¹⁰R¹⁰NSO₂-, R¹⁰R¹¹NSO₂-, алкил-C(=O)-NR¹⁰SO₂-, R¹⁰R¹¹N(C=O)-, алкокси, -OCH₂O-(метилендиокси, присоединенный в соседних положениях к фенильному кольцу), -OCH₂CH₂O-(этилендиокси, присоединенный в соседних положениях к фенильному кольцу), -NO₂, -COOR¹⁰, и -COOR¹⁴, или

гетероароматическую 5- или 6-членную моноциклическую группу, имеющую 1, 2 или 3 гетероатома, независимо выбранных из O, N и S, причем эта группа незамещена или замещена 1 или 2 группами, независимо выбранными из алкила, галогеналкила, алкокси, галогена, -NR¹⁰-циклоалкила и -COOR¹⁰.

44. Соединение и его фармацевтически приемлемые соли, пролекарственные средства, сольваты и оптические изомеры, согласно варианту осуществления 42, отличающиеся тем, что

R⁵ представляет собой фенил, замещенный 1, 2 или 3 группами, независимо выбранными из алкила, галогена, алкокси, -OCH₂O-(метилендиокси, присоединенного в соседних положениях к фенильному кольцу), -OCH₂CH₂O-(этилендиокси, присоединенный в соседних положениях к фенильному кольцу).

45. Соединение и его фармацевтически приемлемые соли, пролекарственные средства, сольваты и оптические изомеры, согласно варианту осуществления 42, отличающиеся тем, что R⁵ представляет собой пиридил, пиридил, замещенный -COOR¹⁰, пиримидинил или пиримидинил, замещенный CF₃.

46. Соединение и его фармацевтически приемлемые соли, пролекарственные средства, сольваты и оптические изомеры по любому из вариантов осуществлений 2-31, имеющие формулу (Ie)

(Ie)

отличающиеся тем, что

R^w представляет собой -NR¹⁰SO₂R¹² или -N=S(=O)R¹⁰NR¹⁰R¹⁰;

R^x представляет собой галоген;

R^y представляет собой галоген и

R^z представляет собой галоген; и

R¹, R⁴, R⁵, R⁶, R¹⁰ и R¹² такие, как определено по любому из вариантов осуществления 2-30.

47. Соединение и его фармацевтически приемлемые соли, пролекарственные средства, сольваты и оптические изомеры, согласно варианту осуществления 46, отличающиеся тем, что

R^w представляет собой -NR¹⁰SO₂R¹²;

R^x представляет собой галоген;

R^y представляет собой галоген и

R⁵ представляет собой галоген,

фенил, замещенный 1, 2 или 3 группами, независимо выбранными из алкила, гидрокси, галогена, галогеналкила, алкилсульфонила, алкилSO(=NR¹⁰)-, алкилсульфонил-NR¹⁰-, -NR¹⁰R¹⁰, R¹⁰R¹⁰NSO₂-, R¹⁰R¹¹NSO₂-, алкил-C(=O)-NR¹⁰SO₂-, R¹⁰R¹¹N(C=O)-, алкокси, -OCH₂O-(метилендиокси, присоединенный в соседних положениях к фенильному кольцу), -OCH₂CH₂O-(этилендиокси, присоединенный в соседних положениях к фенильному кольцу), -NO₂, -COOR¹⁰, -COOR¹⁴, R¹⁰R¹⁰N(C=O)-, тетразолила, алкилSO(=NR¹⁰)-, -CONR¹⁰-O-алкилен-OH и -CONR¹⁰-O-алкилен-O-алкила или

гетероароматическую 5- или 6-членную моноциклическую группу, имеющую 1, 2 или 3 гетероатома, независимо выбранных из O, N и S, причем эта группа незамещена или замещена 1 или 2 группами, независимо выбранными из алкила, галогеналкила, алкокси, -NR¹⁰R¹⁰, галогена, -NR¹⁰-циклоалкила, тетразолила, -O-алкилен-NR¹⁰R¹⁰, -NR¹⁰-алкилен-O-алкил, -CN, -CONR¹⁰R¹⁰, -COOR¹⁰, алкилSO(=NR¹⁰)-, -CONR¹⁰-O-алкилен-ОН и -CONR¹⁰-O-алкилен-O-алкила;

R¹¹ представляет собой алкил, который замещен 1, 2 или 3 гидроксигруппами; и

R¹⁴ представляет собой алкил, который замещен 1 или 2 группами, независимо выбранными из

-NR¹⁰R¹⁰, гидрокси или алкокси.

48. Соединение и его фармацевтически приемлемые соли, пролекарственные средства, сольваты и оптические изомеры, согласно варианту осуществления 47, отличающиеся тем, что R⁵ представляет собой

фенил, замещенный 1, 2 или 3 группами, независимо выбранными из алкила, гидрокси, галогена, галогеналкила, алкилсульфонила, алкилSO(=NR¹⁰)-, алкилсульфонил-NR¹⁰-, -NR¹⁰R¹⁰, R¹⁰R¹⁰NSO₂-, R¹⁰R¹¹NSO₂-, алкил-C(=O)-NR¹⁰SO₂-, R¹⁰R¹¹N(C=O)-, алкокси, -OCH₂O-(метилендиокси, присоединенный в соседних положениях к фенильному кольцу), -OCH₂CH₂O-(этилендиокси, присоединенный в соседних положениях к фенильному кольцу), -NO₂, -COOR¹⁰, -COOR¹⁴, R¹⁰R¹⁰N(C=O)-, тетразолила, алкилSO(=NR¹⁰)-, -CONR¹⁰-O-алкилен-OH и -CONR¹⁰-O-алкилен-O-алкила или

гетероароматическую 5- или 6-членную моноциклическую группу, имеющую 1, 2 или 3 гетероатома, независимо выбранных из O, N и S, причем эта группа незамещена или замещена 1 или 2 группами, независимо выбранными из алкила, галогеналкила, алкокси, -NR¹⁰R¹⁰, галогена, -NR¹⁰-циклоалкила, тетразолила, -O-алкилен-NR¹⁰R¹⁰, -NR¹⁰-алкилен-O-алкила, -CN, -CONR¹⁰R¹⁰, -COOR¹⁰, алкилSO(=NR¹⁰)-, -CONR¹⁰-O-алкилен-ОН и -CONR¹⁰-O-алкилен-O-алкила.

49. Соединение и его фармацевтически приемлемые соли, пролекарственные средства, сольваты и оптические изомеры, согласно варианту осуществления 43, отличающиеся тем, что

R⁵ представляет собой фенил, замещенный 1, 2 или 3 группами, независимо выбранными из алкила, гидрокси, галогена, алкилSO(=NR¹⁰)-, R¹⁰R¹⁰NSO₂-, -COOR¹⁰, -COOR¹⁴, R¹⁰R¹⁰N(C=O)- и тетразолила.

50. Соединение и его фармацевтически приемлемые соли, пролекарственные средства, сольваты и оптические изомеры, согласно варианту осуществления 47 или 48, отличающиеся тем, что R⁵ представляет собой пиридил, пиридил, замещенный -COOR¹⁰, пиримидинил или пиримидинил, замещенный CF₃.

51. Соединение и его фармацевтически приемлемые соли, пролекарственные средства, сольваты и оптические изомеры по любому из вариантов осуществлений от 28 до 25-41, отличающиеся тем, что R^x, R^y и R^z представляют собой F или Cl, в частности, F.

52. Соединение и его фармацевтически приемлемые соли, пролекарственные средства, сольваты и оптические изомеры, имеющие формулу (Ic)

(Ic)

R¹ представляет собой Н или алкил;

R⁴ представляет собой Н или алкил;

R⁵ представляет собой галоген,

фенил, замещенный 1, 2 или 3 группами, независимо выбранными из

алкила,

гидрокси;

галогена,

галогеналкила,

алкилсульфонил-NR¹⁰-,

алкил-SO(=NR¹⁰)-,

алкилсульфонил-NR¹⁰-,

-NR¹⁰R¹⁰,

R¹⁰R¹⁰NSO₂-,

R¹⁰R¹¹NSO₂-,

алкил-С(=O)-NR¹⁰SO₂-,

R¹⁰R¹¹N(С=O)-,

алкокси,

-OCH₂O-(метилендиокси, присоединенный в соседних положениях к фенильному кольцу),

-OCH₂CH₂O-(этилендиокси, присоединенный в соседних положениях к фенильному кольцу),

-NO₂,

-COOR¹⁰,

-COOR¹⁴,

R¹⁰R¹⁰N(С=O)-,

тетразолила,

алкил-SO(=NR¹⁰)-,

-CONR¹⁰-O-алкилен-ОН и

-CONR¹⁰-О-алкилен-О-алкила или

гетероароматическую 5- или 6-членную моноциклическую группу, имеющую 1, 2 или 3 гетероатома, независимо выбранных из O, N и S, причем эта группа незамещена или замещена 1 или 2 группами, независимо выбранными из

алкила,

галогеналкила,

алкокси,

-NR¹⁰R¹⁰,

галогена,

-NR¹⁰-циклоалкила,

тетразолила,

-О-алкилен-NR¹⁰R¹⁰,

-NR¹⁰-алкилен-О-алкила,

-CN,

-CONR¹⁰R¹⁰,

-COOR¹⁰,

алкил-SO(=NR¹⁰)-,

-CONR¹⁰-O-алкилен-ОН и

-CONR¹⁰-О-алкилен-О-алкила;

R⁶ представляет собой Н или алкил;

R¹⁰ представляет собой Н, алкил или фенилалкил;

R¹¹ представляет собой алкил, который замещен 1, 2 или 3 гидроксигруппами;

R¹² представляет собой Н, алкил или фенилалкил;

R¹⁴ представляет собой алкил, который замещен 1 или 2 группами, независимо выбранными из

-NR¹⁰R¹⁰, гидрокси или алкокси.

R^w представляет собой -NR¹⁰SO₂R¹² или -N=S(=O)R¹⁰NR¹⁰R¹⁰;

R^x представляет собой галоген; и

R^y представляет собой галоген.

53. Соединение и его фармацевтически приемлемые соли, пролекарственные средства, сольваты и оптические изомеры, согласно варианту осуществления 52, отличающиеся тем, что R¹, R⁴ и R⁶ представляют собой Н.

54. Соединение и его фармацевтически приемлемые соли, пролекарственные средства, сольваты и оптические изомеры, согласно варианту осуществления 52 или 53, отличающиеся тем, что R^w представляет собой -NR¹⁰SO₂R¹².

55. Соединение и его фармацевтически приемлемые соли, пролекарственные средства, сольваты и оптические изомеры по любому из вариантов осуществлений 52-54, отличающиеся тем, что R¹² представляет собой C₁-C₄-алкил, в частности, C₁-C₃-алкил или бензил.

56. Соединение и его фармацевтически приемлемые соли, пролекарственные средства, сольваты и оптические изомеры по любому из вариантов осуществлений 52-55, отличающиеся тем, что R⁵ представляет собой

фенил, замещенный 1, 2 или 3 группами, независимо выбранными из алкила, гидрокси, галогена, галогеналкила, алкилсульфонила, алкилSO(=NR¹⁰)-, алкилсульфонил-NR¹⁰-, -NR¹⁰R¹⁰, R¹⁰R¹⁰NSO₂-, R¹⁰R¹¹NSO₂-, алкил-C(=O)-NR¹⁰SO₂-, R¹⁰R¹¹N(C=O)-, алкокси, -OCH₂O-(метилендиокси, присоединенный в соседних положениях к фенильному кольцу), -OCH₂CH₂O-(этилендиокси, присоединенный в соседних положениях к фенильному кольцу), -NO₂, -COOR¹⁰, -COOR¹⁴, R¹⁰R¹⁰N(C=O)-, тетразолила, алкилSO(=NR¹⁰)-, -CONR¹⁰-O-алкилен-OH и -CONR¹⁰-O-алкилен-O-алкила, или

гетероароматическую 5- или 6-членную моноциклическую группу, имеющую 1, 2 или 3 гетероатома, независимо выбранных из O, N и S, причем эта группа незамещена или замещена 1 или 2 группами, независимо выбранными из алкила, галогеналкила, алкокси, -NR¹⁰R¹⁰, галогена, -NR¹⁰-циклоалкила, тетразолила, -O-алкилен-NR¹⁰R¹⁰, -NR¹⁰-алкилен-O-алкил, -CN, -CONR¹⁰R¹⁰, -COOR¹⁰, алкилSO(=NR¹⁰)-, -CONR¹⁰-O-алкилен-ОН и -CONR¹⁰-O-алкилен-O-алкила.

57. Соединение и его фармацевтически приемлемые соли, пролекарственные средства, сольваты и оптические изомеры, согласно варианту осуществления 56, отличающиеся тем, что R⁵ представляет собой

фенил, замещенный 1, 2 или 3 группами, независимо выбранными из алкила, гидрокси, галогена, галогеналкила, алкилсульфонила, алкилSO(=NR¹⁰)-, алкилсульфонил-NR¹⁰-, -NR¹⁰R¹⁰, R¹⁰R¹⁰NSO₂-, R¹⁰R¹¹NSO₂-, алкил-C(=O)-NR¹⁰SO₂-, R¹⁰R¹¹N(C=O)-, алкокси, -OCH₂O-(метилендиокси, присоединенный в соседних положениях к фенильному кольцу), -OCH₂CH₂O-(этилендиокси, присоединенный в соседних положениях к фенильному кольцу), -NO₂, -COOR¹⁰, -COOR¹⁴, R¹⁰R¹⁰N(C=O)-, тетразолила, алкилSO(=NR¹⁰)-, -CONR¹⁰-O-алкилен-OH и -CONR¹⁰-O-алкилен-O-алкила, или

гетероароматическую 6-членную моноциклическую группу, имеющую 1, 2 или 3 гетероатома, независимо выбранных из O, N и S, причем эта группа незамещена или замещена 1 или 2 группами, независимо выбранными из алкила, галогеналкила, алкокси, -NR¹⁰R¹⁰, галогена, -NR¹⁰-циклоалкила, тетразолила, -O-алкилен-NR¹⁰R¹⁰, -NR¹⁰-алкилен-O-алкила, -CN, -CONR¹⁰R¹⁰, -COOR¹⁰, алкилSO(=NR¹⁰)-, -CONR¹⁰-O-алкилен-ОН и -CONR¹⁰-O- алкилен-О-алкила.

58. Соединение и его фармацевтически приемлемые соли, пролекарственные средства, сольваты и оптические изомеры по любому из вариантов осуществлений 52-57, отличающиеся тем, что

R⁵ представляет собой фенил, замещенный 1, 2 или 3 группами, независимо выбранными из алкила, гидрокси, галогена, алкилSO(=NR¹⁰)-, R¹⁰R¹⁰NSO₂-, -COOR¹⁰, -COOR¹⁴, R¹⁰R¹⁰N(C=O)- и тетразолила.

59. Соединение и его фармацевтически приемлемые соли, пролекарственные средства, сольваты и оптические изомеры по любому из вариантов осуществлений 52-58, отличающиеся тем, что R⁵ представляет собой пиридил, пиридил, замещенный -COOR¹⁰, пиримидинил или пиримидинил, замещенный галогеналкилом, алкокси,

-NR¹⁰R¹⁰, галогеном, -NR¹⁰-циклоалкилом, тетразолилом, -O-алкилен-NR¹⁰R¹⁰, -NR¹⁰-алкилен-O-алкилом, -CN, -CONR¹⁰R¹⁰ и -COOR¹⁰.

60. Соединение и его фармацевтически приемлемые соли, пролекарственные средства, сольваты и оптические изомеры, согласно варианту осуществления 59, отличающиеся тем, что R⁵ представляет собой пиридил, пиридил, замещенный -COOR¹⁰, пиримидинил или пиримидинил, замещенный галогеналкилом, в частности, CF₃.

61. Соединение и его фармацевтически приемлемые соли, пролекарственные средства, сольваты и оптические изомеры, согласно варианту осуществления 59 или 60, отличающиеся тем, что R⁵ представляет собой пиримидинил, замещенный во 2-ом положении (то есть у атома углерода между двумя атомами азота).

62. Соединение и его фармацевтически приемлемые соли, пролекарственные средства, сольваты и оптические изомеры по любому из вариантов осуществлений 52-61, отличающиеся тем, что R^x и R^y представляют собой F или Cl, в частности, F.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

В одном варианте осуществления R⁵ не является галогеном. В следующем варианте осуществления R 1, R⁴ и R 6 независимо друг от друга представляют собой H или алкил и, в частности, представляют собой H.

Еще в одном следующем варианте осуществления R¹⁰ представляет собой H, алкил или фенилалкил, где фенильная группа необязательно замещена галогеном, и, в частности, R¹⁰ представляет собой H или алкил.

Еще в одном следующем варианте осуществления A представляет собой -CO-.

Еще в одном следующем варианте осуществления Q представляет собой фенил, который замещен, как определено выше.

Еще в одном варианте осуществления изобретение относится к соединению формулы I и его фармацевтически приемлемым солям, пролекарственные средствам, сложным эфирам, сольватам и оптическим изомерам, где R¹, R⁴-R⁶, R¹⁰, A и Q такие, как определено выше для любой комбинации.

Еще в одном следующем варианте осуществления изобретение относится к соединению формулы (Ia), (Ib), (Ic) и (Id) и его фармацевтически приемлемым солям, пролекарственные средствам, сложным эфирам, сольватам и оптическим изомерам, где переменные такие, как определено в вариантах осуществления выше.

В дополнительном варианте осуществления, по меньшей мере, один или, по меньшей мере, два из R^x, R^y или R^z представляют собой галоген, а другие из R^x, R^y и R^z представляют собой H, галоген или алкил, в частности, алкил или галоген. Галоген предпочтительно представляет собой F или Cl.

В дополнительном варианте осуществления R¹, R⁴ и R⁶ представляют собой H.

В дополнительном варианте осуществления R¹² представляет собой метил, этил или пропил.

В одном варианте осуществления изобретение относится к ингибиторам MKK4 формул (I) и (Ia)-(Id) и их фармацевтически приемлемым солям, пролекарственные средствам, сольватам и оптическим изомерам, в частности, к ингибиторам MKK4, которые селективно ингибируют протеинкиназу MKK4 по сравнению с пртеинкиназами JNK1 и MKK7.

Кроме того, изобретение также относится к соединениям по изобретению для использования в ингибировании протеинкиназы MKK4 и, в частности, для применения в селективном ингибировании протеинкиназы MKK4 по сравнению с протеинкиназами JNK1 и MKK7.

Кроме того, изобретение также относится к указанным соединениям для применения в ускорении регенерации печени или уменьшении или предотвращении гибели гепатоцитов и в то же время для применения в усилении пролиферации гепатоцитов.

Изобретение также включает фармацевтически приемлемые соли указанных выше соединений. Фармацевтически приемлемые соли представляют собой особенно соли добавления кислоты или соли добавления основания с фармацевтически приемлемыми кислотами или основаниями. Примерами подходящих фармацевтически приемлемых органических и неорганических кислот являются соляная кислота, бромоводородная кислота, фосфорная кислота, серная кислота, сульфаминовая кислота, C₁-C₄-алкилсульфоновые кислоты, такие как метансульфоновая кислота, циклоалифатические сульфоновые кислоты, такие как S-(+)-10-камфорсульфоновая кислота, ароматические сульфоновые кислоты, такие как бензолсульфоновая кислота и толуолсульфоновая кислота, ди- и трикарбоновые кислоты и гидроксикарбоновые кислоты, имеющие от 2 до 10 атомов углерода, такие как щавелевая кислота, малоновая кислота, малеиновая кислота, фумаровая кислота, молочная кислота, винная кислота кислота, лимонная кислота, гликолевая кислота, адипиновая кислота и бензойная кислота. Другие используемые кислоты описаны, например, в Fortschritte der Arzneimittelforschung [Advances in drug research], Volume 10, pages 224 ff., Birkhäuser Verlag, Basel and Stuttgart, 1966. Примерами подходящих фармацевтически приемлемых органических и неорганических оснований являются гидроксиды щелочных металлов, такие как гидроксид натрия или гидроксид калия, гидроксиды щелочноземельных металлов, такие как гидроксид кальция или магния, гидроксид аммония, органические азотистые основания, такие как диметиламин, триметиламин, этаноламин, диэтаноламин, триэтаноламин холин, 2-амино-2-гидроксиметилпропан-1,3-диол, меглюмин, прокаин и др. L-аргинин, L-лизин, этилендиамин или гидроксиэтилпирролидин.

Изобретение также включает в себя любые таутомерные, кристаллические и полиморфные формы соединений и солей по настоящему изобретению и их смеси.

Изобретение также включает сольваты, такие как гидраты.

Соединения по изобретению могут содержать один или более хиральных центров и существуют в различных оптически активных формах, таких как энантиомеры и диастереомеры.

Используемый в настоящем описании термин «пролекарственное средство» относится к агенту, который in vivo превращается в исходное лекарственное средство посредством какого-либо физиологического химического процесса. Примером, без ограничения, пролекарственного средства может быть соединение по настоящему изобретению в форме сложного эфира.

Пролекарственные средства обладают многими полезными свойствами. Например, пролекарственное средство может быть более растворимым в воде, чем конечное лекарственное средство, что облегчает внутривенное введение лекарства. Пролекарственное средство может также иметь более высокий уровень пероральной биодоступности, чем конечное лекарственное средство. После введения пролекарственное средство ферментативно или химически расщепляется, чтобы доставить конечное лекарственное средство в кровь или ткань. Типичные пролекарственные средства включают, но не ограничиваются ими, соединения с заместителями карбоновой кислоты, в которых свободный водород заменен (C₁-C₄)алкилом, (C₁-C₁₂)алканоилоксиметилом, (C₄-C₉)1-(алканоилокси)этилом, 1-метил-1-(алканоилокси)этилом, имеющим от 5 до 10 атомов углерода, алкоксикарбонилоксиметилом, имеющим от 3 до 6 атомов углерода, 1-(алкоксикарбонилокси) этилом, имеющим от 4 до 7 атомов углерода, 1-метил-1-(алкоксикарбонилокси)этилом, имеющим от 5 до 8 атомов углерода, N-(алкоксикарбонил)аминометилом, имеющим от 3 до 9 атомов углерода, 1-(N-(алкоксикарбониламино)этилом, имеющим от 4 до 10 атомов углерода, 3-фталидилом, 4-кротонолактонилом, гамма-бутиролактон-4-илом, ди-N, N-(C₁-C₂)алкиламино(C₂-C₃)алкилом (таким как β-диметиламиноэтил), карбамоил-(C₁-C₂)алкилом, N, N-ди (C₁-C₂)-алкилкарбамоил-(C₁-C₂)алкилом и пиперидино-, пирролидино- или морфолино(C₂-C₃)алкилом. Другие пролекарственные средства высвобождают спирт формулы (I), где свободный водород гидроксильного заместителя (например, группа R содержит гидроксил) замещен (C₁-C₆)алканоилоксиметилом, 1-((C₁-C₆)алканоилокси)этилом, 1-метил-1-((C₁-C₆)алканоилокси)этилом, (C₁-C₁₂)алкоксикарбонилоксиметилом, N-(C₁-C₆)алкоксикарбониламинометилом, сукциноилом, (C₁-C₆)алканоилом, α-амино(C₁-C₄)алканоилом, ариллактилом и α-аминоацилом или α-аминоацил-α-миноацилом, где указанные α-аминоацильные фрагменты независимо представляют собой любой из встречающихся в природе L-аминокислот, присутствующих в белках, P(O)(OH)₂, -P(O)(O(C₁-C₆) алкил)₂ или гликозил (радикал, возникающий в результате отщепления гидроксила гемиацеталя углевода).

Экспрессия ингибитора MKK4 означает, что киназная активность MKK4 ингибируется при IC₅₀ <10 мкмоль/л, предпочтительно <1 мкмоль/л и, в частности, <0,5 мкмоль/л. Выражение «селективно ингибирует протеинкиназу MKK4 по сравнению с протеинкиназами JNK1 и MKK7» в контексте настоящего описания означает, что отношение активности, ингибирующей MKK7, к активности, ингибирующей MKK4, или отношение активности, ингибирующей JNK1, к активности, ингибирующей MKK4, выраженной в процентах от контроля или Kd, составляет ≥10, как измерено с помощью KINOMEscan™.

Используемое в настоящем описании выражение «стимулирование регенерации печени или уменьшение или предотвращение гибели гепатоцитов» означает увеличение относительного количества пролиферирующих гепатоцитов по меньшей мере на 30%, предпочтительно по меньшей мере на 50%, по сравнению с количеством пролиферирующих клеток в начале терапии. В частности, выражение означает увеличение на ≥100% по сравнению с количеством пролиферирующих клеток в начале терапии. В этом контексте экспериментальное определение и количественное определение будут выполняться с использованием стандартных методов, например, количественное определение белка Ki67, который строго связан с пролиферацией клеток. Для количественного определения пролиферирующих гепатоцитов на предметном стекле доступно несколько иммуногистохимических стандартных методов, в которых используется первичное антитело против Ki67 с последующей визуализацией связывания антитела против Ki67 с использованием, например, вторичного антитела, конъюгированного с пероксидазой хрена. Количество активности пероксидазы, которую визуализируют путем ферментативного превращения хромогенных субстратов, коррелирует с количеством белка Ki67 и количеством пролиферирующих клеток.

В экспериментах, описанных ниже, пролиферацию гепатоцитов определяли количественно окрашиванием Ki67 с использованием первичного поликлонального кроличьего антитела против Ki67 от Abcam (артикул №. ab15580, Abcam, Cambridge, USA) и флуорофор-тетраметилродамин-содержащего вторичного козьего поликлонального антитела от Invitrogen (артикул №. 16101, Invitrogen/ThermoFisher).

На основании данных, полученных из нескольких доклинических моделей мышей, было установлено, что супрессия MKK4, опосредованная кшРНК (коротко-шпилечная РНК), на модели с хроническим повреждением печени, опосредованным CCl4 (тетрахлорид углерода), увеличивает пролиферацию гепатоцитов с 13% до 27% (по сравнению с контрольной кшРНК) и связана с уменьшением повреждения печени (трансаминазы) и уменьшением фиброза печени. Согласно определению в предыдущей главе, относительное увеличение пролиферирующих клеток составило 108%. В модели стеатогепатита, вызванного алкоголем (ASH), сайленсинг MKK4, опосредованный кшРНК, приводил к скорости пролиферации гепатоцитов 4% по сравнению с 2% при использовании контрольной кшРНК (относительное увеличение: 100%). Удвоение пролиферации гепатоцитов было связано со сниженным стеатозом (отложением жира) и уменьшенным повреждением печени, измеренным с помощью трансаминаз. Аналогичным образом, сайленсинг MKK4, опосредованный кшРНК, увеличивал пролиферацию гепатоцитов с 16% (контрольная кшРНК) до 33% (относительное увеличение: 106%) в модели частичной гепатэктомии (48 часов после хирургического удаления двух третей печени). Снова, увеличенная пролиферация гепатоцитов была связана с улучшенной регенерацией печени и более быстрым восстановлением массы печени. В заключение, эти исследования подтверждают, что МКК4 является терапевтической мишенью для лечения острых и хронических заболеваний печени. Кроме того, WO 2018/134254 раскрывает новые соединения, которые селективно ингибируют MKK4 по сравнению с MKK7 и JNK1. В экспериментальных моделях регенерации печени in vitro и in vivo эти соединения были эффективными в предотвращении острой печеночной недостаточности, вызванной введением антитела Jo2, и индуцировали пролиферацию выделенных первичных гепатоцитов мыши.

Новые соединения, раскрытые в настоящей заявке, являются сильными ингибиторами MKK4 с селективностью в отношении MKK7 и JNK1 и, следовательно, по аналогии с соединениями, раскрытыми в WO 2018/134254, могут использоваться для лечения заболеваний печени и для стимуляции регенерации печени или уменьшения или предотвращения смерти гепатоцитов.

Органические фрагменты, упомянутые в приведенных выше определениях переменных, - подобно термину галоген - собирательные термины для отдельных списков отдельных членов группы. Приставка Cn-Cm указывает в каждом случае возможное количество атомов углерода в группе.

Термин галоген обозначает в каждом случае фтор, бром, хлор или йод, в частности, фтор или хлор и предпочтительно фтор.

Алкил представляет собой неразветвленную или разветвленную алкильную группу, которая предпочтительно представляет собой C₁-C₆-алкильную группу, т.е. алкильную группу, имеющую от 1 до 6 атомов углерода, и более предпочтительно C₁-C₄-алкильную группу и, в частности, C₁-C₃-алкильную группу. Примерами алкильной группы являются метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, 2-бутил, изобутил, трет-бутил, пентил, 1-метилбутил, 2-метилбутил, 3-метилбутил, 2,2-диметилпропил, 1-этилпропил, гексил, 1,1-диметилпропил, 1,2-диметилпропил, 1-метилпентил, 2-метилпентил, 3-метилпентил, 4-метилпентил, 1,1-диметилбутил, 1,2-диметилбутил, 1,3-диметилбутил, 2,2-диметилбутил, 2,3-диметилбутил, 3,3-диметилбутил, 1-этилбутил, 2-этилбутил, 1,1,2-триметилпропил, 1,2,2-триметилпропил, 1-этил-1-метилпропил и 1-этил-2-метилпропил.

Определение алкила также применимо к любой группе, которая включает алкильную группу.

Галогеналкил представляет собой галогенированную алкильную группу, как определено выше, где, по меньшей мере, один, например, 1, 2, 3, 4 или все атомы водорода заменены на 1, 2, 3, 4 или соответствующее количество одинаковых или разных атомов галогена, как например трифторметил, хлорметил, бромметил, дифторметил, фторметил, дифторэтил и т. д. Конкретные примеры включают фторированные C₁-C₄ алкильные группы, как они определены, такие как трифторметил, дифторметил, фторметил или дифторэтил.

Циклоалкил представляет собой циклоалифатический радикал, который предпочтительно представляет собой C₃-C₈-циклоалкил, то есть циклоалкильную группу, имеющую от 3 до 8 атомов углерода. В частности, от 3 до 6 атомов углерода образуют циклическую структуру, такую как циклопропил, циклобутил, циклопентил и циклогексил. Циклическая структура может быть незамещенной или может нести 1, 2, 3 или 4 С₁-С₄ алкильных радикала, предпочтительно один или более метильных радикалов.

Карбонил представляет собой >C=O.

Аминокарбонил представляет собой NH₂C(O)-.

Алкенил представляет собой одноненасыщенный углеводородный радикал, который предпочтительно представляет собой C₂-C₆-алкенильную группу, то есть алкенильную группу, имеющую 2, 3, 4, 5 или 6 атомов углерода, например, винил, аллил (2-пропен-1-ил), 1-пропен-1-ил, 2-пропен-2-ил, металлил (2-метилпроп-2-ен-1-ил) и тому подобное. C₃-C₅-алкенил представляет собой, в частности, аллил, 1-метилпроп-2-ен-1-ил, 2-бутен-1-ил, 3-бутен-1-ил, металлил, 2-пентен-1-ил, 3-пентен-1-ил, 4-пентен-1-ил, 1-метилбут-2-ен-1-ил или 2-этилпроп-2-ен-1-ил, 2-гексен-1-ил.

Алкинил представляет собой одноненасыщенный углеводородный радикал, который предпочтительно представляет собой C₂-C₆-алкинильную группу, то есть алкинильную группу, имеющую 2, 3, 4, 5 или 6 атомов углерода, например, этинил, 2-пропин-1-ил, 1-пропин-1-ил, 2-пропин-2-ил и тому подобное. С3-С5-алкинил представляет собой, в частности, 2-пропин-1-ил, 2-бутин-1-ил, 3-бутин-1-ил, 2-пентин-1-ил, 3-пентин-1-ил, 4-пентин-1-ил.

Алкилен представляет собой неразветвленную или разветвленную алкиленовую группу, которая предпочтительно представляет собой C₁-C₅-алкиленовую группу, то есть алкиленовую группу, имеющую от 1 до 5 атомов углерода. Алкиленовые группы, имеющие от 2 до 4 и, в частности, от 2 до 3 атомов углерода, являются особенно предпочтительными. Примеры включают метилен, этилен и 1-метилэтилен. Еще одним примером является пропилен. Другим дополнительным примером является бутилен. Определение алкилена также применимо к любой группе, которая включает алкиленовую группу.

Гетероалкилен представляет собой алкильную группу с прямой или разветвленной цепью, имеющую 1, 2 или 3 гетероатома, которые выбраны из кислорода, азота и серы. Примерами гетероалкилена являются алкилоксиалкил, алкиламиноалкил, диалкиламиноалкил или алкилтиоалкил. Любая алкильная или алкиленовая группа является такой, как определено выше. Алкилоксиалкил является предпочтительным.

Алкенилен представляет собой алкениленовую группу с прямой или разветвленной цепью, которая предпочтительно представляет собой C₂-C₄-алкениленовую группу, то есть алкениленовую группу, имеющую от 2 до 4 атомов углерода. Примеры включают винил и пропенил.

Алкинилен представляет собой алкиниленовую группу с прямой или разветвленной цепью, которая предпочтительно представляет собой C₂-C₄-алкиниленовую группу, то есть алкиниленовую группу, имеющую от 2 до 4 атомов углерода. Примеры включают пропинилен.

Арил (или ароматическая группа) представляет собой 6-12-членный, в частности 6-10-членный, ароматический циклический радикал, который может представлять собой моноциклическое ароматическое кольцо, например фенил и т. д., или конденсированное полициклическое ароматическое кольцо, содержащее первое моноциклическое ароматическое кольцо и один или несколько карбоциклов, которые являются насыщенными, частично ненасыщенными или ароматическими, например, нафтил, инденил, тетрагидронафтил, инданил.

Гетероароматическая (или гетероарильная) группа представляет собой 5- или 6-членную моноциклическую или 9- или 10-членную бициклическую ароматическую группу, имеющую 1, 2 или 3 гетероатома, выбранных из O, N или S. Гетероарильная или гетероароматическая группа может быть связана с соседней группой через атом углерода (С-связанный) или через гетероатом азота (N-связанный). Гетероциклические радикалы могут быть связаны через атом углерода (С-связанный) или атом азота (N-связанный). Предпочтительные гетероароматические радикалы содержат 1 атом азота в качестве атома члена кольца и необязательно 1 или 2 дополнительных гетероатома в качестве членов кольца, которые выбраны независимо друг от друга из О, S и N. Примерами являются:

С-связанные 5-членные гетероароматические кольца:

2-фурил, 3-фурил, 5-фурил, 2-тиенил, 3-тиенил, 5-тиенил, пиррол-2-ил, пиррол-3-ил, пиррол-5-ил, пиразол-3-ил, пиразол- 4-ил, пиразол-5-ил, изоксазол-3-ил, изоксазол-4-ил, изоксазол-5-ил, изотиазол-3-ил, изотиазол-4-ил, изотиазол-5-ил, имидазол-2- ил, имидазол-4-ил, имидазол-5-ил, оксазол-2-ил, оксазол-4-ил, оксазол-5-ил, тиазол-2-ил, тиазол-4-ил, тиазол-5-ил, 1,2,3-оксадиазол-имидазол-4-ил, 4-ил, 1,2,3-оксадиазол-5-ил, 1,2,4-оксадиазол-3-ил, 1,2,4-оксадиазол -5-ил, 1,3,4-оксадиазол-2-ил, 1,2,3-тиадиазол-4-ил, 1,2,3-тиадиазол-5-ил, 1,2,4-тиадиазол-3 ил, 1,2,4-тиадиазол-5-ил, 1,3,4-тиадиазолил-2-ил, 1,2,3-триазол-4-ил, 1,2,4-триазол-3-ил тетразол-5-ил;

С-связанные 6-членные гетероароматические кольца:

пиридин-2-ил, пиридин-3-ил (3-пиридил), пиридин-4-ил (4-пиридил), пиридин-5-ил, пиридазин-3-ил, пиридазин-4-ил, пиридазин-6- ил, пиримидин-2-ил, пиримидин-4-ил, пиримидин-5-ил, пиразин-2-ил, пиразин-5-ил, 1,3,5-триазин-2-ил, 1,2,4- триазин-3-ил, 1,2,4-триазин-5-ил, 1,2,4-триазин-6-ил, 1,2,4,5-тетразин-3-ил;

N-связанные 5-членные гетероароматические кольца:

пиррол-1-ил, пиразол-1-ил, имидазол-1-ил, 1,2,3-триазол-1-ил, 1,2,4-триазол-1-ил.

Бициклические гетероароматические группы включают одно из описанных 5- или 6-членных гетероароматических колец и дополнительный конденсированный, насыщенный или ненасыщенный или ароматический карбоцикл, такой как бензольное, циклогексановое, циклогексеновое или циклогексадиеновое кольцо. Примерами являются хинолинил, изохинолинил, индолил, индолизинил, изоиндолил, 4-, 5-, 6- или 7-азаиндол, индазолил, бензофурил, бензтиенил, бензо[b]тиазолил, бензоксазолил, бензтиазолил, бензимидазолил, имидазо[b]тиазолил, тиено[b]пиридил, имидазо[а]пиридил, пиразо[а]пиридил и пиррол[d]пиримидил. Примеры 5- или 6-членных гетероароматических соединений, включающих анеллированное циклоалкенильное кольцо, включают дигидроиндолил, дигидроиндолизинил, дигидроизоиндолил, дигидрохинолинил, дигидроизохинолинил, дигидробензофурил, хроменил, хроманил, дигидропирол[a]имидазолил и тетрагидробензотиазолил.

Неароматическая 5- или 6-членная группа (гетероциклическая группа) может быть насыщенной или частично ненасыщенной и включает 1, 2 или 3 гетероатома, выбранных из O, N и S. Гетероциклические радикалы могут быть связаны через атом углерода (C-связанные) или атом азота (N-связанные). Предпочтительные гетероциклические группы содержат 1 атом азота в качестве атома члена кольца и, необязательно, 1 или 2 дополнительных гетероатома в качестве членов кольца, которые выбраны независимо друг от друга из О, S и N. Примерами являются:

С-связанные 5-членные насыщенные кольца, такие как

тетрагидрофуран-2-ил, тетрагидрофуран-3-ил, тетрагидротиен-2-ил, тетрагидротиен-3-ил, тетрагидропиррол-2-ил, тетрагидропиррол-3-ил, тетрагидропиразол-3-ил, тетрагидропиразол-4-ил тетрагидроизоксазол-3-ил, тетрагидроизоксазол-4-ил, тетрагидроизоксазол-5-ил, 1,2-оксатиолан-3-ил, 1,2-оксатиолан-4-ил, 1,2-оксатиолан-5-ил, тетрагидроизотиазол-3-ил, тетрагидроизотиазол-4-ил, тетрагидроизотиазол-5-ил, 1,2-дитиолан-3-ил, 1,2-дитиолан-4-ил, тетрагидроимидазол-2-ил, тетрагидроимидазол-4-ил, тетрагидрооксазол-2-ил, тетрагидрооксазол-4-ил, тетрагидрооксазол-5-ил, тетрагидротиазол-2-ил, тетрагидротиазол-4-ил, тетрагидротиазол-5-ил, 1,3-диоксолан-2-ил, 1,3-диоксолан- 4-ил, 1,3-оксатиолан-2-ил, 1,3-оксатиолан-4-ил, 1,3-оксатиолан-5-ил, 1,3-дитиолан-2-ил, 1,3-дитиолан- 4-ил, 1,3,2-диоксатиолан-4-ил;

С-связанные 6-членные насыщенные кольца, такие как

тетрагидропиран-2-ил, тетрагидропиран-3-ил, тетрагидропиран-4-ил, пиперидин-2-ил, пиперидин-3-ил, пиперидин-4-ил, тетрагидротиопиран-2-ил, тетрагидротиопиран-3-ил, тетрагидротиопиран-3-ил, тетрагидротиопиран-4-ил, 1,3-диоксан-2-ил, 1,3-диоксан-4-ил, 1,3-диоксан-5-ил, 1,4-диоксан-2-ил, 1,3-дитиан- 2-ил, 1,3-дитиан-4-ил, 1,3-дитиан-5-ил, 1,4-дитиан-2-ил, 1,3-оксатиан-2-ил, 1,3-оксатиан- 4-ил, 1,3-оксатиан-5-ил, 1,3-оксатиан-6-ил, 1,4-оксатиан-2-ил, 1,4-оксатиан-3-ил, 1,2-дитиан-3-ил, 1,2-дитиан-4-ил, гексагидропиримидин-2-ил, гексагидропиримидин-4-ил, гексагидропиримидин-5-ил, гексагидропиразин-2-ил, гексагидропиридазин-3-ил, гексагидропиридазин-4-ил, тетрагидро-1,3-оксазин-2-ил, тетрагидро-1,3-оксазин-4-ил, тетрагидро-1,3-оксазин-5-ил, тетрагидро-1,3-оксазин-6-ил, тетрагидро-1,3-тиазин-2-ил, тетрагидро-1,3-тиазин-4-ил, тетрагидро-1,3-тиазин-5-ил, тетрагидро-1,3-тиазин-6-ил, тетрагидро-1,4-тиазин-2-ил, тетрагидро-1,4-тиазин-3-ил, тетрагидро-1,4-оксазин-2-ил, тетрагидро-1,4-оксазин-3-ил, тетрагидро-1,2-оксазин-3-ил, тетрагидро-1,2-оксазин-4-ил, тетрагидро-1,2-оксазин-5-ил, тетрагидро-1,2-оксазин-6-ил;

N-связанные 5-членные насыщенные кольца, такие как

тетрагидропиррол-1-ил (пирролидин-1-ил), тетрагидропиразол-1-ил, тетрагидроизоксазол-2-ил, тетрагидроизотиазол-2-ил, тетрагидроимидазол-1-ил, тетрагидрооксазол-3-ил, тетрагидрооксазол-3-ил;

N-связанные 6-членные насыщенные кольца, такие как

пиперидин-1-ил, гексагидропиримидин-1-ил, гексагидропиразин-1-ил (пиперазин-1-ил), гексагидропиридазин-1-ил, тетрагидро-1,3-оксазин-3-ил, тетрагидро-1,3 -тиазин-3-ил, тетрагидро-1,4-тиазин-4-ил, тетрагидро-1,4-оксазин-4-ил (морфолин-1-ил), тетрагидро-1,2-оксазин-2-ил;

С-связанные, 5-членные, частично ненасыщенные кольца, такие как

2,3-дигидрофуран-2-ил, 2,3-дигидрофуран-3-ил, 2,5-дигидрофуран-2-ил, 2,5-дигидрофуран-3-ил, 4,5-дигидрофуран-2- ил, 4,5-дигидрофуран-3-ил, 2,3-дигидротиен-2-ил, 2,3-дигидротиен-3-ил, 2,5-дигидротиен-2-ил, 2,5-дигидротиен-3-ил, 4,5-дигидротиен-2-ил, 4,5-дигидротиен-3-ил, 2,3-дигидро-1Н-пиррол-2-ил, 2,3-дигидро-1Н-пиррол-3-ил, 2,5-дигидро-1Н-пиррол-2-ил, 2,5-дигидро-1Н-пиррол-3-ил, 4,5-дигидро-1Н-пиррол-2-ил, 4,5-дигидро-1H-пиррол-3-ил, 3,4-дигидро-2H-пиррол-2-ил, 3,4-дигидро-2H-пиррол-3-ил, 3,4-дигидро-5H-пиррол-2-ил, 3,4-дигидро-5Н-пиррол-3-ил, 4,5-дигидро-1Н-пиразол-3-ил, 4,5-дигидро-1Н-пиразол-4-ил, 4,5-дигидро-1Н-пиразол-5-ил, 2,5-дигидро-1Н-пиразол-3-ил, 2,5-дигидро-1Н-пиразол-4-ил, 2,5-дигидро-1Н-пиразол-5-ил, 4, 5-дигидроизоксазол-3-ил, 4,5-дигидроизоксазол-4-ил, 4,5-дигидроизоксазол-5-ил, 2,5-дигидроизоксазол-3-ил, 2,5-дигидроизоксазол-4-ил, 2,5-дигидроизоксазол-5-ил, 2,3-дигидроизоксазол-3-ил, 2,3-дигидроизоксазол-4-ил, 2,3-дигидроизоксазол-5-ил, 4,5-дигидроизотиазол-3-ил, 4,5-ди гидроизотиазол-4-ил, 4,5-дигидроизотиазол-5-ил, 2,5-дигидроизотиазол-3-ил, 2,5-дигидроизотиазол-4-ил, 2,5-дигидроизотиазол-5-ил, 2,3-дигидроизотиазол-3-ил, 2,3-дигидроизотиазол-4-ил, 2,3-дигидроизотиазол-5-ил, 4,5-дигидро-1Н-имидазол-2-ил, 4,5-дигидро-1Н-имидазол- 4-ил, 4,5-дигидро-1Н-имидазол-5-ил, 2,5-дигидро-1Н-имидазол-2-ил, 2,5-дигидро-1Н-имидазол-4-ил, 2,5-дигидро-1Н-имидазол-5-ил, 2,3-дигидро-1Н-имидазол-2-ил, 2,3-дигидро-1Н-имидазол-4-ил, 4,5-дигидро-оксазол-2-ил, 4,5-дигидрооксазол-4-ил, 4,5-дигидрооксазол-5-ил, 2,5-дигидрооксазол-2-ил, 2,5-дигидрооксазол-4-ил, 2,5-дигидрооксазол-5-ил, 2,3-дигидрооксазол-2-ил, 2,3-дигидрооксазол-4-ил, 2,3-дигидрооксазол-5-ил, 4,5-дигидротиазол-2-ил, 4,5-дигидротиазол-4-ил, 4,5-дигидротиазол-5-ил, 2,5-дигидротиазол-2-ил, 2,5-дигидротиазол-4-ил, 2,5-дигидротиазол-5-ил, 2,3-дигидротиазол-2-ил, 2,3-дигидротиазол-4-ил, 2,3-дигидротиазол-5-ил, 1,3-диоксол-2-ил, 1,3-диоксол-4-ил, 1,3-дитиол-2-ил, 1,3-дитиол-4-ил, 1,3-оксатиол-2-ил, 1,3-оксатиол-4-ил, 1,3-оксатиол-5-ил;

С-связанные 6-членные частично ненасыщенные кольца, такие как

2H-3,4-дигидропиран-6-ил, 2H-3,4-дигидропиран-5-ил, 2H-3,4-дигидропиран-4-ил, 2H-3,4-дигидропиран-3-ил, 2H-3,4-дигидропиран-2-ил, 2H-3,4-дигидротиопиран-6-ил, 2H-3,4-дигидротиопиран-5-ил, 2H-3,4-дигидротиопиран-4-ил, 2H-3,4-дигидротиопиран-3-ил, 2H-3,4-дигидротиопиран-2-ил, 1,2,3,4-тетрагидропиридин-6-ил, 1,2,3,4-тетрагидропиридин-5-ил, 1,2,3,4-тетрагидропиридин-4-ил, 1,2,3,4-тетрагидропиридин-3-ил, 1,2,3,4-тетрагидропиридин-2-ил, 2H-5,6-дигидропиран-2-ил, 2Н-5,6-дигидропиран-3-ил, 2Н-5,6-дигидропиран-4-ил, 2Н-5,6-дигидропиран-5-ил, 2Н-5,6-дигидропиран-6-ил, 2H-5,6-дигидротиопиран-2-ил, 2H-5,6-дигидротиопиран-3-ил, 2H-5,6-дигидротиопиран-4-ил, 2H-5,6-дигидротиопиран-5-ил, 2H-5,6-дигидротиопиран-6-ил, 1,2,5,6-тетрагидропиридин-2-ил, 1,2,5,6-тетрагидропиридин-3-ил, 1,2,5,6-тетрагидропиридин-4-ил, 1,2,5,6-тетрагидропиридин-5-ил, 1,2,5,6-тетрагидропиридин-6-ил, 2,3,4,5-тетрагидропиридин-2-ил, 2,3, 4,5-тетрагидропиридин-3-ил, 2,3,4,5-тетрагидропиридин-4-ил, 2,3,4,5-тетрагидропиридин-5-ил, 2,3,4,5-тетрагидропиридин-6-ил, 4H-пиран-2-ил, 4H-пиран-3-ил-, 4H-пиран-4-ил, 4H-тиопиран-2 -ил, 4H-тиопиран-3-ил, 4H-тиопиран-4-ил, 1,4-дигидропиридин-2-ил, 1,4-дигидропиридин-3-ил, 1,4-дигидропиридин-4-ил, 2H-пиран-2-ил, 2Н-пиран-3-ил, 2Н-пиран-4-ил, 2Н-пиран-5-ил, 2Н-пиран-6-ил, 2Н-тиопиран-2-ил, 2Н-тиопиран -3-ил, 2Н-тиопиран-4-ил, 2Н-тиопиран-5-ил, 2Н-тиопиран-6-ил, 1,2-дигидропиридин-2-ил, 1,2-дигидропиридин-3-ил, 1,2-дигидропиридин-4-ил, 1,2-дигидропиридин-5-ил, 1,2-дигидропиридин-6-ил, 3,4-дигидропиридин-2-ил, 3,4-дигидропиридин-3-ил, 3,4-дигидропиридин-4-ил, 3,4-дигидропиридин-5-ил, 3,4-дигидропиридин-6-ил, 2,5-дигидропиридин-2-ил, 2,5-дигидропиридин-3-ил, 2,5-дигидропиридин-4-ил, 2,5-дигидропиридин-5-ил, 2,5-дигидропиридин-6-ил, 2,3-дигидропиридин-2-ил, 2,3-дигидропиридин -3-ил, 2,3-дигидропиридин-4-ил, 2,3-дигидропиридин-5-ил, 2,3-дигидропиридин-6-ил, 2Н-5,6-дигидро-1,2-оксазин-3 ил, 2Н-5,6-дигидро-1,2-оксазин-4-ил, 2Н-5,6-дигидро-1,2-оксазин-5-ил, 2Н-5,6-дигидро-1,2-оксазин-6-ил, 2Н-5,6-дигидро-1,2-тиазин-3-ил, 2Н-5,6-дигидро-1,2-тиазин-4-ил, 2Н-5,6-дигидро-1,2-тиазин-5-ил, 2H-5,6-дигидро-1,2-тиазин-6-ил, 4H-5,6-дигидро-1,2-оксазин-3- ил, 4Н-5,6-дигидро-1,2-оксазин-4-ил, 4Н-5,6-дигидро-1,2-оксазин-5-ил, 4Н-5,6-дигидро-1,2-оксазин-6-ил, 4Н-5,6-дигидро-1,2-тиазин-3-ил, 4Н-5,6-дигидро-1,2-тиазин-4-ил, 4Н-5,6-дигидро-1,2-тиазин-5-ил, 4H-5,6-дигидро-1,2-тиазин-6-ил, 2H-3,6-дигидро-1,2-оксазин-3-ил, 2H-3,6-дигидро-1,2-оксазин-4-ил, 2H-3,6-дигидро-1,2-оксазин-5-ил, 2H-3,6-дигидро-1,2-оксазин-6-ил, 2H-3,6-дигидро-1,2-тиазин-3-ил, 2H-3,6-дигидро-1,2-тиазин-4-ил, 2H-3,6-дигидро-1,2-тиазин- 5-ил, 2Н-3,6-дигидро-1,2-тиазин-6-ил, 2Н-3,4-дигидро-1,2-оксазин-3-ил, 2Н-3,4-дигидро-1, 2-оксазин-4-ил, 2Н-3,4-дигидро-1,2-оксазин-5-ил, 2Н-3,4-дигидро-1,2-оксазин-6-ил, 2Н-3,4-дигидро-1,2-тиазин-3-ил, 2H-3,4-дигидро-1,2-тиазин-4-ил, 2H-3,4-дигидро-1,2-тиазин-5-ил, 2H- 3,4-дигидро-1,2-тиазин-6-ил, 2,3,4,5-тетрагидропиридазин-3-ил, 2,3,4,5-тетрагидропиридазин-4-ил, 2,3,4,5-тетрагидропиридазин-5-ил, 2,3,4,5-тетрагидропиридазин-6-ил, 3,4,5,6-тетрагидропиридазин-3-ил, 3,4,5,6-тетрагидропиридазин-4-ил, 1,2,5,6-тетрагидропиридазин-3-ил, 1,2,5,6-тетрагидропиридазин-4-ил, 1,2,5,6-тетрагидропиридазин-5-ил, 1,2,5,6-тетрагидропиридазин-6-ил, 1,2,3,6-тетрагидропиридазин-3-ил, 1,2,3,6-тетрагидропиридазин-4-ил, 4H-5,6- дигидро-1,3-оксазин-2-ил, 4Н-5,6-дигидро-1,3-оксазин-4-ил, 4Н-5,6-дигидро-1,3-оксазин-5-ил, 4Н-5,6-дигидро-1,3-оксазин-6-ил, 4H-5,6-дигидро-1,3-тиазин-2-ил, 4H-5,6-дигидро-1,3-тиазин-4- ил, 4Н-5,6-дигидро-1,3-тиазин-5-ил, 4Н-5,6-дигидро-1,3-тиазин-6-ил, 3,4,5-6-тетрагидропиримидин-2- ил, 3,4,5,6-тетрагидропиримидин-4-ил, 3,4,5,6-тетрагидропиримидин-5-ил, 3,4,5,6-тетрагидропиримидин-6-ил, 1,2,3, 4-тетрагидропиразин-2-ил, 1,2,3,4-тетрагидропиразин-5-ил, 1,2,3,4-тетрагидропиримидин-2-ил, 1,2,3,4-тетрагидропиримидин-4- ил, 1,2,3,4-тетрагидропиримидин-5-ил, 1,2,3,4-тетрагидропиримидин-6-ил, 2,3-дигидро-1,4-тиазин-2-ил, 2,3- дигидро-1,4-тиазин-3-ил, 2, 3-дигидро-1,4-тиазин-5-ил, 2,3-дигидро-1,4-тиазин-6-ил, 2H-1,3-оксазин-2-ил, 2H-1,3-оксазин-4-ил, 2Н-1,3-оксазин-5-ил, 2Н-1,3-оксазин-6-ил, 2Н-1,3-тиазин-2-ил, 2Н-1,3-тиазин-4 -ил, 2Н-1,3-тиазин-5-ил, 2Н-1,3-тиазин-6-ил, 4Н-1,3-оксазин-2-ил, 4Н-1,3-оксазин-4-ил, 4H-1,3-оксазин-5-ил, 4H-1,3-оксазин-6-ил, 4H-1,3-тиазин-2-ил, 4H-1,3-тиазин-4-ил, 4H-1,3-тиазин-5-ил, 4H-1,3-тиазин-6-ил, 6H-1,3-оксазин-2-ил, 6H-1,3-оксазин-4-ил, 6H-1, 3-оксазин-5-ил, 6Н-1,3-оксазин-6-ил, 6Н-1,3-тиазин-2-ил, 6Н-1,3-оксазин-4-ил, 6Н-1,3 -оксазин-5-ил, 6Н-1,3-тиазин-6-ил, 2Н-1,4-оксазин-2-ил, 2Н-1,4-оксазин-3-ил, 2Н-1,4-оксазин-5-ил, 2Н-1,4-оксазин-6-ил, 2Н-1,4-тиазин-2-ил, 2Н-1,4-тиазин-3-ил, 2Н-1,4-тиазин-5-ил, 2Н-1,4-тиазин-6-ил, 4Н-1,4-оксазин-2-ил, 4Н-1,4-оксазин-3-ил, 4Н-1,4-тиазин-2-ил, 4H-1,4-тиазин-3-ил, 1,4-дигидропиридазин-3-ил, 1,4-дигидропиридазин-4-ил, 1,4-дигидропиридазин-5-ил, 1,4-дигидропиридазин-6-ил, 1,4-дигидропиразин-2-ил, 1,2-дигидропиразин-2-ил, 1,2-дигидропиразин-3-ил, 1,2-дигидропиразин-5-ил, 1,2-дигидропиразин-6-ил, 1,4-дигидропиримидин-2-ил, 1,4-дигидропиримидин-4-ил, 1,4-дигидропиримидин-5-ил, 1,4-дигидропиримидин-6-ил, 3,4-дигидропиримидин-2-ил, 3,4-дигидропиримидин-4-ил, 3,4-дигидропиримидин-5-ил или 3,4-дигидропиримидин-6-ил;

N-связанные, 5-членные, частично ненасыщенные кольца, такие как

2,3-дигидро-1Н-пиррол-1-ил, 2,5-дигидро-1Н-пиррол-1-ил, 4,5-дигидро-1Н-пиразол-1-ил, 2,5-дигидро-1Н-пиразол-1-ил, 2,3-дигидро-1Н-пиразол-1-ил, 2,5-дигидроизоксазол-2-ил, 2,3-дигидроизоксазол-2-ил, 2,5-дигидроизотиазол-2-ил, 2,3-дигидроизоксазол-2-ил, 4,5-дигидро-1Н-имидазол-1-ил, 2,5-дигидро-1Н-имидазол-1-ил, 2,3-дигидро-1Н-имидазол-1-ил, 2,3-дигидрооксазол-3-ил, 2,3-дигидротиазол-3-ил;

N-связанные, 6-членные, частично ненасыщенные кольца, такие как

1,2,3,4-тетрагидропиридин-1-ил, 1,2,5,6-тетрагидропиридин-1-ил, 1,4-дигидропиридин-1-ил, 1,2-дигидропиридин-1-ил, 2H-5,6-дигидро-1,2-оксазин-2-ил, 2H-5,6-дигидро-1,2-тиазин-2-ил, 2H-3,6-дигидро-1,2-оксазин-2-ил, 2Н-3,6-дигидро-1,2-тиазин-2-ил, 2Н-3,4-дигидро-1,2-оксазин-2-ил, 2Н-3,4-дигидро-1, 2-тиазин-2-ил, 2,3,4,5-тетрагидропиридазин-2-ил, 1,2,5,6-тетрагидропиридазин-1-ил, 1,2,5,6-тетрагидропиридазин-2-ил, 1,2,3,6-тетрагидропиридазин-1-ил, 3,4,5,6-тетрагидропиримидин-3-ил, 1,2,3,4-тетрагидропиразин-1-ил, 1,2,3,4- тетрагидропиримидин-1-ил, 1,2,3,4-тетрагидропиримидин-3-ил, 2,3-дигидро-1,4-тиазин-4-ил, 2H-1,2-оксазин-2-ил, 2H-1,2-тиазин-2-ил, 4H-1,4-оксазин-4-ил, 4H-1,4-тиазин-4-ил, 1,4-дигидропиридазин-1-ил, 1,4-дигидропиразин-1-ил, 1,2-дигидропиразин-1-ил, 1,4-дигидропиримидин-1-ил или 3,4-дигидропиримидин-3-ил.

Любая группа, содержащая гетероатомы, может содержать 1, 2 или 3 гетероатома, которые могут быть одинаковыми или разными.

Соединения по изобретению могут быть получены, как описано в WO 2010/111527, которая включена в настоящее описание посредством ссылки в полном объеме или в соответствии с аналогичными процедурами. Соли добавления кислоты или основания получают обычным способом, смешивая свободное основание с соответствующей кислотой или смешивая свободную кислоту с желаемым основанием. Необязательно, реакцию проводят в растворе в органическом растворителе, например, в низшем спирте, таком как MeOH, этанол или пропанол, в простом эфире, таком как метил-трет-бутиловый эфир или диизопропиловый эфир, в кетоне, таком как ацетон или метилэтилкетон, или в сложном эфире, таком как EtOAc.

Соединения по изобретению полезны для стимуляции регенерации печени или уменьшения или предотвращения гепатоцитов, одновременно увеличивая пролиферацию гепатоцитов. Следовательно, эти соединения полезны для лечения, модуляции, улучшения или предотвращения заболеваний, которые включают острые или хронические повреждения печени, которые могут быть вызваны инфекцией, травмой, воздействием токсических соединений, аномальным накоплением в крови нормальных веществ, аутоиммунным процессом, генетическим дефектом или неизвестными причинами.

Такие заболевания печени включают все заболевания, при которых усиление регенерации печени и уменьшение или предотвращение гибели гепатоцитов могут быть полезны для достижения потенциального терапевтического эффекта, то есть частичного или полного восстановления функций печени. Такие заболевания включают

острые и хронические или обострение при хронических заболеваниях печени, таких как острый и хронический вирусный гепатит, такой как гепатит B, C, E, гепатит, вызванный вирусом Эпштейна-Барра, цитомегаловирусом, вирусом простого герпеса и другими вирусами, все виды аутоиммунного гепатита, первичный склерозирующий гепатит, алкогольный гепатит;

метаболические заболевания печени, такие как метаболический синдром, жировой гепатоз типа неалкогольного жирового гепатоза (NAFL), неалкогольный стеатогепатит (NASH), алкогольный стеатогепатит (ASH), Morbus Wilson, гемохроматоз, дефицит альфа-1-антитрипсина, болезнь накопления гликогена;

все виды цирроза печени, такие как первичный билиарный цирроз печени, этилтоксический цирроз печени, криптогенный цирроз печени;

острая (молниеносная) или хроническая печеночная недостаточность, такая как токсическая печеночная недостаточность, такая как печеночная недостаточность, вызванная ацетаминофеном (парацетамолом), печеночная недостаточность, вызванная альфа-аманитином, лекарственная гепатотоксичность, печеночная недостаточность, вызванная, например, антибиотиками, нестероидными противовоспалительными препаратами и противосудорожными средствами, острая печеночная недостаточность, вызванная растительными добавками (кава, эфедра, шлемник, мята болотная и т. д.), заболевание печени и сбой вследствие сосудистых заболеваний, таких как синдром Бадда-Киари, острая печеночная недостаточность неизвестного происхождения, хроническое заболевание печени из-за правосторонней сердечной недостаточности;

галактоземия, муковисцидоз, порфирия, ишемии печени, перфузионное повреждение, синдром малой доли печени после трансплантации печени, первичный склерозирующий холангит или печеночная энцефалопатия.

Для ускорения регенерации печени или снижения или предотвращения гибели гепатоцитов соединения по изобретению вводят нуждающемуся в этом пациенту в терапевтически эффективном количестве. Существуют различные методы диагностики для выявления заболеваний печени. Известно, что уровни аланинаминотрансферазы (ALT) и аспартатаминотрансферазы (AST) в крови, превышающие клинически приемлемые нормальные уровни, свидетельствуют о продолжающемся поражении печени. Уровни билирубина в крови или другие ферменты печени могут использоваться в качестве критериев обнаружения или диагностики. Рутинный мониторинг пациентов с заболеваниями печени на уровень ALT и AST в крови используется для измерения прогресса заболевания печени во время лечения. Снижение повышенных уровней ALT и AST в пределах принятого нормального диапазона принимается за клинические доказательства, отражающие снижение тяжести повреждения печени у пациентов. Коммерческие анализы, такие как FibroTest/FibroSURE, HepaScore®, FibroMeter или Cirrhometer, оценивают объединенные результаты пяти и более биохимических параметров для выявления стеатоза печени, фиброза и цирроза печени. Кроме того, неинвазивные, инновационные методы физической визуализации, такие как магнитно-резонансная томография, сонография и, в частности, методы эластографии, доступны для обнаружения и мониторинга состояния и прогрессирования заболеваний печени.

Кроме того, было обнаружено, что супрессия MKK4, опосредованная кшРНК, ослабляет деградацию хрящевого матрикса, вызванную TNF-α, при остеоартрите (Cell Death and Disease (2017) 8, e3140). Следовательно, ингибирование активности MKK4 с использованием соединений по изобретению дополнительно полезно для лечения остеоартрита и ревматоидного артрита.

Кроме того, ингибиторы MKK4 также могут быть полезны для лечения нейродегенеративных заболеваний, таких как болезнь Альцгеймера и болезнь Паркинсона. Grueninger et al. обнаружили, что в клетках нейробластомы человека MKK4 играет ключевую роль в фосфорилировании белка Tau по серину 422, что способствует агрегации Tau (Mol Cell Biochem (2011) 357: 199-207). Ингибиторы фосфорилирования Tau, которые предотвращают агрегацию Tau, считаются полезными для профилактики или лечения болезни Альцгеймера.

Недавно был описан ингибитор MKK4 с мощными нейропротекторными эффектами in vitro и in vivo. В культурах гиппокампа инкубация с MKK4-ингибитором предотвращала индуцированную глутаматом гибель клеток и активацию каспазы-3, а также ингибировала клеточную смерть, индуцированную N-метил-4-фенилпиридиний йодидом и амилоидом β1-42, в клетках SH-SY5Y. Это же соединение облегчает 1-метил-4-фенил-1,2,3,6-тетрагидропиридин-индуцированную дегенерацию нигростриальных дофаминергических нейронов у мышей (Biochemical Pharmacology (2018), doi: https://doi.org/10.1016/). j.bcp.2018.10.008).

Соединения по изобретению обычно вводят в форме фармацевтических композиций, которые содержат, по меньшей мере, одно соединение по изобретению, необязательно вместе с инертным носителем (например, фармацевтически приемлемым вспомогательным веществом) и, при необходимости, другие лекарственные средства. Эти композиции можно вводить, например, перорально, ректально, трансдермально, подкожно, внутрибрюшинно, внутривенно, внутримышечно или интраназально.

Примерами подходящих фармацевтических композиций являются твердые лекарственные формы, такие как порошки, гранулы, таблетки, в частности, таблетки c пленочной оболочкой, пастилки, саше, каше, таблетки с сахарным покрытием, капсулы, такие как твердые желатиновые капсулы и мягкие желатиновые капсулы, или суппозитории, полутвердые лекарственные формы, такие как мази, кремы, гидрогели, пасты или пластыри, а также жидкие лекарственные формы, такие как растворы, эмульсии, в частности, эмульсии масло-в-воде, суспензии, например лосьоны, инъекционные препараты и препараты для инфузий. Кроме того, также можно использовать липосомы или микросферы.

При получении композиций соединения по изобретению необязательно смешивают или разбавляли одним или несколькими носителями (вспомогательными веществами). Носители (вспомогательные вещества) могут быть твердыми, полутвердыми или жидкими материалами, которые служат в качестве носителей или сред для активного соединения.

Подходящие носители (вспомогательные вещества) перечислены в специализированных медицинских монографиях. Кроме того, составы могут содержать фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества, такие как смачивающие агенты; эмульгирующие и суспендирующие агенты; консерванты; антиоксиданты; антиирританты; хелатирующие агенты; вспомогательные покрытия; стабилизаторы эмульсии; пленкообразователи; гелеобразователи; средства, маскирующие запахи; модификаторы вкуса; смолы; гидроколлоиды; растворители; солюбилизаторы; нейтрализующие агенты; ускорители диффузии; пигменты; четвертичные аммониевые соединения; пережиривающие агенты; сырье для мазей, кремов или масел; производные силикона; лиофилизирующие добавки; стабилизаторы; стерилизаторы; основы для суппозиториев; вспомогательные вещества для таблеток, такие как связующие, наполнители, глиданты, дезинтегранты или покрытия; пропеллент; сушильные агенты; матирующие агенты; загустители; воски; пластификаторы и белые минеральные масла. Состав в этом отношении основан на специальных знаниях, как описано, например, в Fiedler, HP, Lexikon der Hilfsstoffe für Pharmazie, Kosmetik und angrenzende Gebiete [Encyclopedia of auxiliaR^y substances for pharmacy, cosmetics and related fields], 4th edition, Aulendorf: ECV-Editio-Cantor-Verlag, 1996.

Соединения по изобретению также могут быть подходящими для комбинации с другими терапевтическими агентами. Следовательно, изобретение, кроме того, относится к комбинации, включающей соединение по изобретению с одним или несколькими дополнительными терапевтическими агентами, в частности, для применения, способствующего регенерации печени или уменьшающего или предотвращающего гибель гепатоцитов. Комбинированная терапия по изобретению может вводиться дополнительно. Под дополнительным введением подразумевается совместное или перекрывающееся введение каждого из компонентов в форме отдельных фармацевтических композиций или устройств. Эта схема терапевтического введения двух или более терапевтических агентов обычно упоминается специалистами в данной области и в данном документе как дополнительное терапевтическое введение; это также известно как дополнительное терапевтическое введение. Любые и все схемы лечения, при которых пациент получает раздельное, но со сходным распределением или перекрывающееся терапевтическое введение соединений по изобретению и, по меньшей мере, одного дополнительного терапевтического агента, входят в объем настоящего изобретения. В одном варианте осуществления дополнительного терапевтического введения, как описано в настоящем документе, пациент обычно стабилизируется при терапевтическом введении одного или нескольких компонентов в течение некоторого периода времени, а затем получает введение другого компонента.

Комбинированная терапия по изобретению также может вводиться одновременно. Под одновременным введением подразумевается схема лечения, при котором отдельные компоненты вводят вместе, либо в форме одной фармацевтической композиции или устройства, содержащего оба компонента, либо в виде отдельных композиций или устройств, каждый из которых содержит один из компонентов, вводимых одновременно. Такие комбинации отдельных индивидуальных компонентов для одновременной комбинации могут быть предоставлены в форме набора частей.

Подходящие агенты для использования в комбинации с соединениями по изобретению включают, например:

Ингибиторы ACC, такие как TOFA (5-(тетрадецилокси)-2-фурановая кислота), PF-05221304,

GS 0976 и ингибиторы ACC, раскрытые в WO 2016/112305,

антагонисты рецептора ангиотензина II,

ингибиторы ангиотензинпревращающего фермента (ACE), такие как эналаприл,

ингибиторы каспазы, такие как эмрикасан,

ингибиторы катепсина B, такие как смешанный ингибитор катепсина B/протеазы NS3 вируса гепатита C. типа VBY-376,

Антагонисты хемокинов CCR2, такие как смешанный антагонист хемокинов CCR2/CCR5, такой как ценикривирок,

Антагонисты хемокинов CCR5,

стимуляторы хлоридного канала, такие как кобипростон,

солюбилизаторы холестерина,

ингибиторы диацилглицерин-О-ацилтрансферазы 1 (DGAT1), такие как LCQ908,

ингибитор диацилглицерин-O-ацилтрансферазы 2 (DGAT2), такой как PF-06865571, ингибитор кетогексокиназы (KHK), такой как PF-06835919,

ингибиторы дипептидилпептидазы IV (DPPIV), такие как линаглиптин,

агонисты фарнезоидного X-рецептора (FXR), такие как INT-747 (обетихоловая кислота), LJN452 (тропифексор) и аналоги, раскрытые в Tully et al. (J. Med. Chem., 2017, 60 (24), 9960-9973) или GS-9674 (PX-102),

Двойные агонисты FXR/TGR5, такие как INT-767,

ингибиторы галектина-3, такие как GR-MD-02,

агонисты глюкагоноподобного пептида 1 (GLP1), такие как лираглутид или эксенатид,

предшественники глютатиона,

ингибиторы протеазы NS3 вируса гепатита C, такие как смешанный ингибитор протеазы NS3 вируса гепатита B/вируса гепатита C, такой как VBY-376,

Ингибиторы HMG CoA редуктазы, такие как статин, такой как аторвастатин,

Ингибиторы 11β-гидроксистероиддегидрогеназы (11β-HSD1), такие как R05093151,

антагонисты IL-1β,

Антагонисты IL-6, такие как смешанный ингибитор лиганда IL-6/IL-1β/TNFα, такой как BLX-1002,

Агонисты IL-10, такие как пэг-илодекакин,

Антагонисты IL-17, такие как KD-025,

ингибиторы котранспортера желчной кислоты натрия подвздошной кишки, такие как SHP-626,

аналоги лептина, такие как метрелептин,

Ингибиторы 5-липоксигеназы, такие как смешанный ингибитор 5-липоксигеназы/PDE3/PDE4/PLC, такой как типелукаст,

Стимуляторы гена LPL, такие как алипоген типарвовец,

ингибиторы гомолога лизилоксидазы 2 (LOXL2), такие как антитело против LOXL2, такое как GS-6624,

Ингибиторы PDE3, такие как смешанный ингибитор 5-липоксигеназы/PDE3/PDE4/PLC, такой как типелукаст,

Ингибиторы PDE4, такие как ASP-9831 или смешанный ингибитор 5-липоксигеназы/PDE3/PDE4/PLC, такой как типелукаст,

ингибиторы фосфолипазы C (PLC), такие как смешанный ингибитор 5-липоксигеназы/PDE3/PDE4/PLC, такой как типелукаст,

Агонисты PPARα, такие как смешанный агонист PPARα/δ, такой как GFT505,

Агонисты PPARγ, такие как пиоглитазон,

Агонисты PPARδ,

Ингибиторы Rho-ассоциированной протеинкиназы 2 (ROCK2), такие как KD-025,

ингибиторы натрий-глюкозного транспортера 2 типа (SGLT2), такие как ремоглифлозин этабонат,

ингибиторы стеароил-СоА-десатуразы-1, такие как арамхол или CVT-12805,

агонисты рецептора β гормонов щитовидной железы, такие как MGL-3196,

ингибиторы лиганда фактора некроза опухоли α (TNFα),

ингибиторы трансглутаминазы и предшественники ингибиторов трансглутаминазы, такие как меркаптамин,

Ингибиторы PTPlb, такие как A119505, A220435, A321842, CPT633, ISIS-404173, JTT-551, MX-7014, MX-7091, MX-7102, NNC-521246, OTX-001, OTX-002 или TTP814 и

Ингибиторы ASK1, такие как GS4977.

В некоторых вариантах осуществления один или несколько дополнительных терапевтических агентов выбирают из ацетилсалициловой кислоты, алипогена, типарвовека, арамхола, аторвастатина, BLX-1002, ценикривирока, кобипростона, колесевелама, эмнасана, эналаприла, GFT-505, GR-MD-02, гидрохлоротиазида, этилового эфира икосапента (этил-эйкозапентаеновая кислота), IMM-124E, KD-025, линаглиптина, лираглутида, меркаптамина, MGL-3196, обетихолевой кислоты, олесоксима, пэг-илодекакина, пиоглитазона, GS-9674, ремоглифлозин этабоната, SHP-626, солитромицина, типелукаста, TRx-318, урсодезоксихолевой кислоты и VBY-376.

В некоторых вариантах осуществления один из одного или нескольких дополнительных терапевтических агентов выбирают из ацетилсалициловой кислоты, алипогена, типарвовека, арамхола, аторвастатина, BLX-1002 и ценикривирока.

В одном варианте осуществления изобретение относится к способу ингибирования протеинкиназы МКК4, селективного ингибирования протеинкиназы MKK4 по сравнению с протеинкиназами JNK1 и MKK7, стимулирования регенерации печени или предотвращения гибели гепатоцитов, лечения острых, обострения хронических или хронических заболеваний печени, лечения острых и хронических или обострений при хронических заболеваниях печени, таких как острый и хронический вирусный гепатит, такой как гепатит B, C, E, гепатит, вызванный вирусом Эпштейна-Барра, цитомегаловирусом, вирусом простого герпеса и другими вирусами, все виды аутоиммунного гепатита, первичный склерозирующий гепатит, алкогольный гепатит;

лечения метаболических заболеваний печени, таких как метаболический синдром, жировой гепатоз типа неалкогольного жирового гепатоза (NAFL), неалкогольного стеатогепатита (NASH), алкогольного стеатогепатита (ASH), Morbus Wilson, гемохроматоза, дефицита альфа-1-антитрипсина, болезни накопления гликогена;

лечения всех типов цирроза печени, таких как первичный билиарный цирроз печени, этилтоксический цирроз печени, криптогенный цирроз печени;

лечения острой (молниеносной) или хронической печеночной недостаточности, такой как токсическая печеночная недостаточность, такая как печеночная недостаточность, вызванная ацетаминофеном (парацетамолом), печеночной недостаточности, вызванной альфа-аманитином, лекарственной гепатотоксичности и печеночной недостаточности, вызванной, например, антибиотиками, нестероидными противовоспалительными препаратами, противосудорожными средствами, острой печеночной недостаточности, вызванной растительными добавками (кава, эфедра, шлемник, мята болотная и т. д.), заболевания печени и сбоя вследствие сосудистых заболеваний, таких как синдром Бадда-Киари, острой печеночной недостаточности неизвестного происхождения, хронического заболевания печени из-за правосторонней сердечной недостаточности;

лечения галактоземии, муковисцидоза, порфирии, ишемии печени, перфузионного повреждения, синдрома малой доли после трансплантации печени, первичного склерозирующего холангита или печеночной энцефалопатии,

лечения остеоартрита, ревматоидного артрита или заболеваний, связанных с ЦНС, таких как болезнь Альцгеймера и болезнь Паркинсона,

который включает введение эффективного количества соединения или композиции, как определено выше, пациенту, нуждающемуся в этом.

В одном варианте осуществления соединения по изобретению вводят в дозе от 0,2 до 15 мг/кг или от 0,5 до 12 мг/кг пациенту, которого подвергают лечению. Соединения можно вводить один или несколько раз в день. Соединения вводят в течение 4-12 недель.

Следующие примеры иллюстрируют изобретение, не ограничивая его.

ПРИМЕРЫ

СОКРАЩЕНИЯ:

Boc2O-ди-трет.-бутилоксикарбонат

CPME циклопентилметиловый эфир

DCM дихлорметан

4-DMAP 4-диметиламинопиридин

DME диметиловый эфир

ДМФ диметилформамид

ДМСО: диметилсульфоксид

EtOAc этилацетат

ВЭЖХ высокоэффективная жидкостная хроматография

LDA диизопропиламид лития

MeCN ацетонитрил

MeOH метанол

NaHCO₃ Бикарбонат натрия

NH₄Cl хлорид аммония

Na₂SO₄ сульфат натрия

Pd2 (dba3) трис(дибензилиденацетон)дипалладий (0)

PE петролейный эфир

RT Комнатная температура

Раств. Раствор

THF тетрагидрофупан

TLC Тонкослойная хроматография

Xantphos 4,5-бис (дифенилфосфино)-9,9-диметилксантен

Пример 1. Синтез N-(3-(5-бром-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида (VI)

Стадия 1: Синтез 5-бром-3-йод-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридина (II)

К перемешиваемой смеси 5-бром-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридина ((I), 6,81 г, 34,4 ммоль) и КОН (6,75 г, 120,4 ммоль) в ДМФА (45 мл) добавляли йод (45 мл). 9,60 г, 37,8 ммоль) одной порцией при комнатной температуре. После короткого индукционного периода началась экзотермическая реакция. Через 1 час добавляли еще 1 г порции йода и смесь перемешивали при 45°С в течение 1 часа. Смесь выливали в 300 мл разбавленного раствора Na₂SO₃ и смесь подкисляли 2Н HCl. Твердые вещества собирали вакуум-фильтрацией, промывали водой и сушили в печи при 110°С. Выход: 10,92 г, чистота по ВЭЖХ: 95%, ¹H ЯМР (200 МГц, ДМСО) δ 14,29 (с, 1H), 8,62 (с, 1H), 8,17 (с, 1H); ¹³C ЯМР (50 МГц, ДМСО) δ 150,53, 150,17, 131,86, 120,58, 112,43, 91,95; [М-Н]- = 322,0/324,0.

Стадия 2. Синтез 5-бром-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбоновой кислоты (III)

5-Бром-3-йод-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин ((II), 10,44 г, 32,2 ммоль) объединяли с ДМФА, МеОН и триэтиламином (по 75 мл каждый). Сосуд вакуумировали и продували аргоном (4 раза). Добавляли XantPhos (1,12 г, 1,93 ммоль) и Pd (OAc) 2 (217 мг, 0,97 ммоль) и через раствор барботировали монооксид углерода (образующийся из муравьиной и серной кислот) при нагревании до 60 °C. Смесь перемешивали в атмосфере моноксида углерода (баллон) в течение 8 часов. Каждые 1,5 часа окись углерода барботировали через раствор в течение 5 минут. Смесь концентрировали при пониженном давлении и остаток растирали с 2Н HCl. Твердые вещества нагревали при 95 °С в примерно 100 мл 1 Н NaOH в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры смесь подкисляли конц. HCl и осадок собирали вакуум-фильтрацией и промывали водой. Твердые вещества высушивали в печи при 110 °С до постоянной массы. Твердые вещества обрабатывали ультразвуком в 100 мл толуола в течение 5 минут и перемешивали в течение 30 минут. Продукт отфильтровали, промыли дополнительными 20 мл толуола и высушили при 110°С. Выход: 7,92 г, чистота по ВЭЖХ:> 99%, ¹H ЯМР (200 МГц, ДМСО) δ 8,64 (д, J=7,9 Гц, 2H), 5,69 (шир. С., 1H); ¹³C ЯМР (50 МГц, ДМСО) δ 163,27, 150,97, 149,67, 136,69, 132,65, 115,73, 113,6; [М-Н]- = 239,9/241,9.

Стадия 3: Синтез 5-бром-N-метокси-N-метил-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбоксамида (IV)

5-Бром-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбоновая кислота ((III), 7,91 г, 32,7 ммоль) и 1,1'-карбонилдиимидазол (5,83 г, 35,9 ммоль) перемешивались в 200 мл. ДМФА при 60°С в течение 45 минут. К полученной суспензии добавляли гидрохлорид N, O-диметилгидроксиламина (3,51 г, 35,9 ммоль) и смесь перемешивали в течение 4 часов при 65°C. Большую часть растворителя удаляли в вакууме и остаток наполовину насыщали. Добавляли раствор NaHCO₃. Твердые вещества собирали вакуум-фильтрацией, промывали водой и сушили при 110°С. Выход: 7,94 г, чистота по ВЭЖХ: 96%, ¹H ЯМР (200 МГц, ДМСО) δ 14,46 (с, 1H), 8,62 (д, J=20,4 Гц, 2H), 3,76 (с, 3H), 3,44 (с, 3H), [MH]- = 283,0/285,0.

Стадия 4. Синтез (3-амино-2,6-дифторфенил)(5-бром-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-ил)метанона (V)

2,4-Дифторанилин (6,25 г, 48,4 ммоль) растворяли в 50 мл сухого ТГФ и охлаждали до -78°С в атмосфере аргона. По каплям добавляли 2,5 М n-бутиллитий в гексане (19,4 мл, 48,4 ммоль). Через 15 минут по каплям добавляли 1,2-бис(хлордиметилсилил) этан (10,9 г, 49,5 ммоль) в 15 мл сухого ТГФ и смесь перемешивали в течение 30 минут. По каплям добавляли 2,5 М n-бутиллитий в гексане (19,4 мл, 48,4 ммоль) и смеси давали достичь комнатной температуры в течение 1 часа. После охлаждения до -78°С по каплям добавляли 2,5 М n-бутиллитий в гексане (19,4 мл, 48,4 ммоль) и перемешивали в течение 1 часа при 78°С. (Это считается раствором А).

5-Бром-N-метокси-N-метил-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбоксамид ((IV), 6,00 г, 21,1 ммоль) суспендировали в 50 мл сухого ТГФ и охлаждали до 0 °С в атмосфере аргона. NaH (60% в минеральном масле, 0,88 г, 22,1 ммоль) добавляли порциями и раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. (Это считается раствором B).

Раствор B добавляли по каплям к раствору A при -78 °C. После завершения добавления смесь нагревали до комнатной температуры в течение 30 минут. 12 мл конц. HCl осторожно добавляли и смесь перемешивали в течение 30 минут. Для нейтрализации раствора добавляли твердый NaHCO₃, твердые вещества отфильтровывали и промывали ТГФ. Фильтрат упаривали и остаток растирали с МеОН и водой и сушили при 110°С. Выход: 4,03 г; Чистота ВЭЖХ: 97%, ¹H ЯМР (200 МГц, ДМСО) δ 14,91 (с, 1H), 8,77 (дд, J=5,4, 2,1 Гц, 2H), 7,18-6,59 (м, 2H), 5,25 (с, 2H).); ¹³C ЯМР (50 МГц, ДМСО) δ 183,95, 151,04, 150,79, 150,27 (дд, J=161,0, 6,8 Гц), 145,50 (дд, J=167,3, 6,8 Гц), 141,34, 133,35 (дд, J=12,8, 2,6 Гц), 132,28, 117,45 (дд, J=8,4, 6,5 Гц), 116,24 (дд, J=22,7, 19,1 Гц), 115,55, 114,81, 111,26 (дд, J=21,7, 3,5 Гц); [М-Н]^- = 351,1/353,1.

Стадия 5. Синтез N-(3-(5-бром-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида (VI)

(3-амино-2,6-дифторфенил)(5-бром-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-ил)метанон ((V), 2,00 г, 5,66 ммоль) и 4-DMAP (35 мг (0,28 ммоль) нагревали в 9 мл пиридина до 65 °С и добавляли 1-пропансульфонилхлорид (1,21 г, 0,96 мл, 8,50 ммоль). Через 2 часа добавляли еще 0,19 мл 1-пропансульфонилхлорида. Теплый раствор добавляли к примерно 80 мл 2Н HCl, твердое вещество собирали и промывали водой. Твердое вещество растворяли в EtOAc, промывали 2Н HCl и солевым раствором и сушили над Na₂SO₄. Растворитель выпаривают и продукт очищают флэш-хроматографией (SiO2, градиент DCM/EtOAc, от 0% до 20% EtOAc) и растирали с н-гексаном. Выход: 1,68 г, чистота по ВЭЖХ: 97%, ¹H ЯМР (200 МГц, ДМСО) δ 9,86 (с, 1H), 8,79 (дд, J=5,3, 2,0 Гц, 3H), 7,64 (тд, J=9,0, 6,0. Гц, 1H), 7,30 (т, J=8,9 Гц, 1H), 3,17-2,96 (м, 3H), 1,87-1,62 (м, 2H), 0,96 (т, J=7,4 Гц, 4H); ¹³C ЯМР (50 МГц, ДМСО) δ 182,75, 157,39 (дд, J=177,1, 7,4 Гц), 152,42 (дд, J=180,3, 7,3 Гц), 151,56, 151,34, 141,39, 132,59, 130,78-130,05 (м), 122,20 (дд, J=13,5, 3,6 Гц), 117,19 (дд, J=23,0, 20,9 Гц), 116,14, 115,18, 112,59 (дд, J=22,2, 3,8 Гц), 54,14, 17,22 12,97; [М-Н]^- = 457,1/459,1.

Пример 2: Синтез [3,4-b]фтор-3-(5-фенил-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)фенил)пропан-1-сульфонамида

В микроволновую камеру загружали магнитную мешалку, N-(3-(5-бром-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамид ((VI), 50 мг, 0,11 ммоль), фенилбороновую кислоту (15 мг, 0,12 ммоль), Pd (PPh3) 4 (6 мг, 5 мол.%) и продували аргоном. Добавляли дегазированный 1,4-диоксан (0,3 мл) и дегазированный водный раствор 1,5 М K₂CO₃ (0,25 мл, 0,38 ммоль), и смесь нагревали до 120°C при микроволновом облучении в течение 30 минут. После охлаждения смесь разбавляли EtOAc и нейтрализовали насыщенным раствором NH₄Cl. Растворители удаляли и продукт выделяли флэш-хроматографией и сушили при 100°С в вакуумной печи. Выход: 27 мг, чистота по ВЭЖХ: 97, ¹H ЯМР (200 МГц, ДМСО), δ 7,84 (д, J=7,2 Гц, 2H), 7,71-7,40 (м, 4H), 7,31 (т, J=8,7 Гц, 1H.), 3,18-3,04 (м, 2H), 1,87-1,63 (м, 2H), 0,97 (т, J=7,4 Гц, 3H). [M-H]^- = 455.1.

Общая процедура реакции Сузуки: в микроволновую камеру загружают магнитную мешалку, N-(3-(5-бром-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамид, соответствующую бороновую кислоту или пинаколовый эфир бороновой кислоты (1,1 экв.) и Pd (PPh3) 4 [(tBu) 3P Pd G4 и/или XPhos Pd G4 (G4: 4-го поколения; имеется в продаже) для нитрофенилбороновой кислоты, 4-гидроксифенилбороновую кислоту и сложный эфир пинакола 4-диметиламинофенилбороновой кислоты] (0,05 экв.) и продувают аргоном, добавляют дегазированный 1,4-диоксан (0,4 М) и дегазированный водный 1,5 М K₂CO₃ (3,5 экв.) и смесь нагревают до 120°C при микроволновом облучении до полного превращения (обычно 30 минут). После охлаждения смесь разбавляют EtOAc и нейтрализуют с помощью насыщ. раствора NH₄Cl. Растворители удаляют и продукт выделяют флэш-хроматографией и сушили при 100°С в вакуумной печи.

По аналогии были получены соединения, приведенные в следующей Таблице 1.

Пример 44: Синтез N-(5-(4-хлорфенил)-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-ил)-2,6-дифтор-3-(пропилсульфонамидо)бензамида

Синтез 2,6-дифтор-3-(пропилсульфонамидо)бензойной кислоты (Промежуточное соединение Е)

Синтез N-(5-(4-хлорфенил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-ил)-2,6-дифтор-3-(пропилсульфонамидо)бензамида:

Пример 45: Синтез 5-(4-хлорфенил)-N-(2,6-дифтор-3-(пропилсульфонамидо)фенил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбоксамида

Синтез N-(3-амино-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида (Промежуточное соединение F)

Синтез 5-(4-хлорфенил)-N-(2,6-дифтор-3-(пропилсульфонамидо)фенил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбоксамида:

Пример 46: Синтез N-(3-((5-(4-хлорфенил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-ил) тио)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида

Синтез N-(2,4-дифтор-3-меркаптофенил)пропан-1-сульфонамида (промежуточное соединение С)

Синтез N-(3-((5-(4-хлорфенил)-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-ил) тио)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида:

Пример 47 и 48: Синтез N-(3-((5-(4-хлорфенил)-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-ил)сульфинил)-2,4-дифторфенил)пропана-1-сульфонамида (Прим. 47) и N-(3-((5-(4-хлорфенил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-ил)сульфонил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида (Прим. 48)

Пример 49: Синтез N-(3-((5-(4-хлорфенил)-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-ил)(гидрокси)метил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида

Синтез N-(2,4-дифтор-3-формилфенил)пропан-1-сульфонамида (промежуточное соединение A):

Синтез N-(3-((5-(4-хлорфенил)-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-ил)(гидрокси)метил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида :

Пример 50: Синтез N-(3-((5-(4-хлорфенил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-ил) метил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида

Пример 51:

Соединения Примера 51a-51m были получены в соответствии с методикой, показанной на схеме 1.

Схема 1:

(3-Амино-2,6-дифторфенил)(5-бром-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-ил)метанон (1) получали, как описано в Примере 1 (Стадии 1-4).

Последующее превращение в сульфонилхлорид, приводящее к промежуточному соединению 2, проводили по аналогии с Примером 1, Стадия 5.

Реакции сочетания Сузуки с конечными продуктами 51a-51m проводили следующим образом (общая методика): в микроволновую камеру загружают магнитную мешалку, производные 5-бром-1H-пиразолопиридина, соответствующую бороновую кислоту или сложный эфир пинакола и бороновой кислоты (1,1 экв.) и XPhos Pd G3 или Pd G4 (0,05 экв.) и продувают аргоном. Дегазированный 1,4-диоксан (0,4 М) и дегазированный водный 1,5 М K₂CO₃ (3,5 экв., +1 экв. для каждой кислотной функциональной группы) и смесь нагревали до 120°C (100°C для амидов) при микроволновом облучении до полного превращения (от 30 до 60 минут). После охлаждения смесь разбавляли EtOAc и нейтрализовали с помощью насыщ. раствора NH₄Cl (или подкисленный 2Н HCl для кислотных функциональных групп). Растворители удаляли и продукт выделяют флэш-хроматографией (используя смеси DCM, EtOAc и/или MeOH), растирали при необходимости и сушили при 100°C в вакуумной печи.

Пример 51а: 4-(3-(2,6-дифтор-3-((фенилметил)сульфонамидо)бензоил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил)бензолсульфонамид

Стадия 1: N-[3-(5-бром-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)-2,4-дифторфенил]-1-фенилметансульфонамид:

(3-амино-2,6-дифторфенил)-(5-бром-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-ил)метанон (350 мг, 0,991 ммоль) и N, N-диметилпиридин-4-амин (6,05 мг, 0,0496 ммоль) растворяли в пиридине (1,98 мл) и нагревали до 65°С. Добавляли фенилметансульфонилхлорид (283 мг, 1,49 ммоль) и смесь перемешивали в течение 2 часов. Смесь выливали в водную 2Н HCl и экстрагировали EtOAc. Органическую фазу промывали 2Н HCl и солевым раствором, сушили над Na₂SO₄, фильтровали и растворитель удаляли при снятом давлении. Остаток очищали флэш-хроматографией (н-гексан+EtOAc) от 0 до 50% и растирали с н-гексаном. N-[3-(5-бром-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)-2,4-дифторфенил]-1-фенилметансульфонамид (315 мг, 0,6210 ммоль, выход 63%),

¹H ЯМР (200 МГц, CDCl₃) δ 14,22 (с, 1H), 8,96 (с, 1H), 8,79 (д, J=2,2 Гц, 1H), 8,59 (д, J=2,1 Гц, 1H), 7,52-7,25 (м, 6H), 6,87 (тд, J=9,1, 1,6 Гц, 1H), 4,32 (с, 2H);

¹³C ЯМР (101 МГц, CDCl₃) δ 182,7, 156,6 (дд, J=251, 6,8 Гц), 153,03 (д, J=7,7 Гц), 151,2, 150,6, 150,5, 141,6, 132,9, 130,8, 127,75 (дд, J=151,3, 7,9 Гц), 126,9, 121,87 (дд, J=13,1, 3,9 Гц), 117,12 (дд, J=22,8, 20,7 Гц), 115,7, 115,5, 111,61 (дд, J=22,5, 3,8 Гц), 58,8

МС: [M-1]^- = 504.7

Стадия 2: Сочетание Сузуки в соответствии с общей процедурой (см. Пример 2 выше)

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, ДМСО) δ 15,01 (с, 1H), 9,89 (с, 1H), 9,11 (д, J=1,7 Гц, 1H), 8,87 (д, J=1,7 Гц, 1H), 8,17-7,81 (м, 4Н), 7,70-7,14 (м, 9Н), 4,54 (с, 2Н);

¹³C ЯМР (101 МГц, ДМСО) δ 182,6, 155,95 (дд, J=248,0, 6,2 Гц), 152,4, 152,14 (дд, J=251,0, 7,4 Гц), 149,8, 143,5, 142,0, 140,4, 132,0, 131,9, 131,5, 131,5, 131,4, 130,9, 129,2, 128,7, 128,6, 128,3, 128,3, 127,9, 127,5, 126,4, 126,3, 122,10 (дд, J=13,1, 3,5 Гц), 117,2, 117,0, 113,4, 111,90 (дд, J=22,0 3,9 Гц) 58,5;

МС: [M-1]^- = 581.8.

Пример 51b: 4-(3-(2,6-дифтор-3-(метилсульфонамидо)бензоил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил)бензолсульфонамид

Стадия 1: N-[3-(5-бром-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)-2,4-дифторфенил]метансульфонамид:

(3-амино-2,6-дифторфенил)-(5-бром-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-ил)метанон (350 мг, 0,991 ммоль) и N, N-диметилпиридин-4-амин (6,05 мг, 0,0496 ммоль) растворяли в пиридине (1,98 мл) и нагревали до 65°С. Добавляли метансульфонилхлорид (0,357 мл, 1,49 ммоль) и смесь перемешивали в течение 2 часов. Смесь выливали в водную 2Н HCl и экстрагировали EtOAc. Органическую фазу промывали 2Н HCl и солевым раствором, сушили над Na₂SO₄, фильтровали и растворитель удаляли при снятом давлении. Остаток очищали флэш-хроматографией (DCM+EtOAc) от 0 до 30% и растирали с н-гексаном. N-[3-(5-бром-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)-2,4-дифторфенил]метансульфонамид (164 мг, 0,3800 ммоль, выход 38%)

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, ДМСО) δ 15,07 (с, 1H), 9,82 (с, 1H), 8,80 (дд, J=4,8, 2,1 Гц, 2H), 7,65 (тд, J=9,0, 5,9 Гц, 1H) 7,32 (тд, J=8,9, 1,5 Гц, 1H), 3,07 (с, 3H);

¹³C ЯМР (101 МГц, ДМСО) δ 182,3, 156,4 (дд, J=248,8, 6,6 Гц), 152,92 (дд, J=251,8, 8,1 Гц), 151,0, 150,9, 141,0, 132,2, 130,1, 130,0, 121,80 (дд, J=13,2, 3,7 Гц), 116,84 (дд, J=23,0, 20,9 Гц), 115,7, 114,7, 112,16 (дд, J=22,4, 3,7 Гц), 40,4;

МС: [M-1]^- = 428,7.

Стадия 2: Сочетание Сузуки в соответствии с общей процедурой

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, ДМСО) δ 14,99 (с, 1H), 9,85 (с, 1H), 9,10 (д, J=2,1 Гц, 1H), 8,86 (д, J=2,1 Гц, 1H), 8,03 (дд, J=20,8, 8,4 Гц, 4H), 7,65 (тд, J=9,1, 6,1 Гц, 1H), 7,48 (с, 2H), 7,33 (т, J=8,8 Гц, 1H), 3,08 (с, 3H);

¹³C ЯМР (101 МГц, ДМСО) δ 182,5, 156,40 (дд, J=248,5, 6,7 Гц), 153,0 (дд, J=251,5, 8,0 Гц), 152,4, 149,8, 143,5, 142,0, 140,3, 131,5, 130,0, 129,9 128,2, 127,9, 126,4, 121,8 (дд, J=13,3, 3,5 Гц), 117,13 (дд, J=23,0, 21,5 Гц), 113,4, 112,15 (дд, J=22,1, 3,1 Гц), 40,4;

МС: [M-1]^- = 505,9.

Пример 51с: 4-(3-(3-(бутилсульфонамидо)-2,6-дифторбензоил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил)бензолсульфонамид

Стадия 1: N-[3-(5-бром-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)-2,4-дифторфенил] бутан-1-сульфонамид:

(3-амино-2,6-дифторфенил)-(5-бром-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-ил)метанон (350 мг, 0,991 ммоль) и N, N-диметилпиридин-4- амин (6,05 мг, 0,0496 ммоль) растворяли в пиридине (1,98 мл) и нагревали до 65°С. Добавляли бутан-1-сульфонилхлорид (0,357 мл, 1,49 ммоль) и смесь перемешивали в течение ночи. 0,25 экв. бутан-1-сульфонилхлорида добавляли и перемешивание продолжали в течение 2 ч при 65°С. Смесь выливали в водную 2Н HCl и экстрагировали EtOAc. Органическую фазу промывали 2Н HCl и солевым раствором, сушили над Na₂SO₄, фильтровали и растворитель удаляли при снятом давлении. Остаток очищали флэш-хроматографией (гексан+EtOAc) от 10% до 50% и растирали с н-гексаном. N-[3-(5-бром-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)-2,4-дифторфенил] бутан-1-сульфонамид (180 мг, 0,3800 ммоль, выход 38%)

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, ДМСО) δ 15,03 (с, 1Н), 9,83 (с, 1Н), 9,02-8,62 (м, 2Н), 3,21-3,03 (м, 2Н), 1,70 (дт, J=15,0, 7,5). Гц, 2H), 1,37 (дк, J=14,5, 7,3 Гц, 2H), 0,84 (т, J=7,2 Гц, 3H);

¹³C ЯМР (50 МГц, ДМСО) δ 182,4, 151,1, 151,0, 141,1, 132,3, 115,8, 114,8, 51,8, 25,1, 20,7, 13,4;

МС: [M-1]^- = 470,8.

Стадия 2: Сочетание Сузуки в соответствии с общей процедурой

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, ДМСО) δ 15,00 (с, 1H), 9,82 (с, 1H), 9,10 (д, J=2,1 Гц, 1H), 8,86 (д, J=2,0 Гц, 1H), 8,13-7,93 (м, 4H), 7,64 (тд, J=9,0, 6,2 Гц, 1H), 7,48 (с, 2H), 7,32 (тд, J=8,9, 1,2 Гц, 1H), 3,21-3,07 (м, 2H), 1,82-1,61 (м, 2H), 1,50-1,27 (м, 2H), 0,85 (т, J=7,2 Гц, 3H);

¹³C ЯМР (101 МГц, ДМСО) δ 182,5, 156,3 (дд, J=248,2, 6,3 Гц), 152,7 (дд, J=251,1, 8,8 Гц), 152,4, 149,8, 143,5, 142,0, 140,3, 131,5, 129,9, 129,8, 128,2, 127,9, 127,5, 126,4, 126,3, 121,8 (дд, J=13,0, 3,7 Гц), 117,08 (дд, J=23,1, 21,2 Гц), 113,4, 112,2, 112,2, 112,0, 51,8, 25,1, 20,7, 13,4;

МС: [M-1]^- = 547,9.

Пример 51d: 4-(3-(2,6-дифтор-3-(пропилсульфонамидо)бензоил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил)бензойная кислота

Сочетание Сузуки в соответствии с общей процедурой

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, ДМСО) δ 14,99 (с, 1H), 13,14 (уш.с. 1H), 9,83 (с, 1H), 9,10 (д, J=2,1 Гц, 1H), 8,84 (д, J=2,2 Гц, 1H), 8,04 (дд, J=22,3, 8,5 Гц, 4H), 7,64 (тд, J=9,0, 5,9 Гц, 1H), 7,31 (тд, J=8,9, 1,5 Гц, 1H), 3,21-3,03 (м, 2Н), 1,86-1,61 (м, 2Н), 0,97 (т, J=7,4 Гц, 3Н);

¹³C ЯМР (101 МГц, ДМСО) δ 182,5, 167,0, 152,4, 149,8, 142,0, 141,3, 131,8, 130,2, 130,1, 128,1, 127,6, 113,5, 53,8, 16,8, 12,5;

МС: [M-1]^- = 499,6.

Пример 51е: N-[2,4-дифтор-3-[5-[4-(1Н-тетразол-5-ил)фенил]-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил]фенил]пропан-1-сульфонамид

Сочетание Сузуки в соответствии с общей процедурой

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, ДМСО) δ 14,99 (с, 1H), 9,83 (с, 1H), 9,14 (д, J=2,1 Гц, 1H), 8,88 (д, J=2,2 Гц, 1H), 8,17 (дд, J=19,9, 8,4 Гц, 4H), 7,65 (тд, J=9,0, 6,1 Гц, 1H), 7,32 (тд, J=9,0, 1,4 Гц, 1H), 3,20-3,05 (м, 2H), 1,90-1,59 (м, 2H), 0,97 (т, J=7,4 Гц, 3H);

¹³C ЯМР (101 МГц, ДМСО) δ 182,5, 156,29 (дд, J=248,3, 6,4 Гц), 152,8 (дд, J=251,2, 8,2 Гц), 152,4, 149,8, 142,0, 139,7, 131,7, 129,9, 129,8, 128,3, 127,9, 127,7, 127,6, 123,8, 121,79 (дд, J=13,4, 3,4 Гц), 117,1, 113,5, 112,12 (дд, J=22,6, 4,3 Гц), 53,8, 16,8, 12,5;

МС: [M-1]^- = 522,9.

Пример 51f: 4-(3-(2,6-дифтор-3-(пропилсульфонамидо)бензоил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил)бензамид

Сочетание Сузуки в соответствии с общей процедурой

Аналитические данные:

¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 14,97 (с, 1H), 9,83 (с, 1H), 9,10 (д, J=1,3 Гц, 1H), 8,83 (д, J=1,3 Гц, 1H), 8,13-7,92. (м, 5H), 7,64 (тд, J=8,9, 6,2 Гц, 1H), 7,46 (с, 1H), 7,32 (т, J=8,7 Гц, 1H), 3,18-3,06 (м, 2H), 1,83-1,68 (м, 2H), 0,97 (т, J=7,5 Гц, 3H);

¹³C ЯМР (101 МГц, ДМСО) δ 182,6, 167,4, 152,4, 149,8, 142,0, 139,8, 133,7, 132,0, 128,4, 127,9, 127,2, 113,5, 53,8, 16,8, 12,6;

МС: [M-1]^- = 498,0.

Пример 51g: N-(2,4-дифтор-3-(5-(4-(метилсульфонамидо)фенил)-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)фенил)пропан-1-сульфонамид

Стадия 1: N-(4-бромфенил)метансульфонамид (2)

4-Броманилин (1, 2,08 г, 12,1 ммоль) и 4-диметиламинопиридин (0,0739 г, 0,605 ммоль) растворяли в пиридине (12,1 мл) и добавляли метансульфонилхлорид (1,03 мл, 13,3 ммоль) при комнатной температуре, что приводило к экзотермической реакции. После достижения комнатной температуры снова (30 мин) смесь прливали к 2Н HCl. Продукт экстрагировали EtOAc, экстракт промывали 2Н HCl и солевым раствором, сушили над Na₂SO₄, фильтровали и растворитель удаляли при пониженном давлении, и остаток растирали с н-гексаном с получением N-(4-бромфенил)метансульфонамида (2,40 г, 9,6 ммоль, выход 79%).

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, ДМСО) δ 9,91 (с, 1Н), 7,60-7,42 (м, 2Н), 7,22-7,09 (м, 2Н), 3,00 (с, 3Н);

¹³C ЯМР (50 МГц, ДМСО) δ 137,9, 132,2, 121,5, 115,9, 39,3; [М-1]^- = 247,7.

Стадия 2: N-[4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил]метансульфонамид (3)

В сосуд загружали N-(4-бромфенил)метансульфонамид (2, 252 мг, 1,01 ммоль), бис(пинаколато)диборон (281 мг, 1,11 ммоль), ацетат калия (297 мг, 3,02 ммоль) и дегазированный сухой 1,4-диоксан (5,04 мл). Сосуд вакуумировали и снова заполняли аргоном (3х), добавляли XPhos Pd G4 (8,67 мг, 0,0101 ммоль) и смесь перемешивали при 85°С в течение 4 часов. После охлаждения до комнатной температуры смесь разбавляли EtOAc и уксусной кислотой (0,173 мл, 3,02 ммоль), перемешивали в течение 30 минут и фильтровали через целит. Растворитель удаляли при пониженном давлении. Остаток растворяли в минимальном количестве EtOAc, осаждали н-гептаном и твердые вещества собирали вакуум-фильтрацией, получая N-[4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил]метансульфонамид (281 мг, 0,9460 ммоль, выход 94%), который использовали без дальнейшей очистки.

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, ДМСО) δ 7,60 (д, J=8,5 Гц, 2H), 7,17 (д, J=8,5 Гц, 2H), 2,99 (с, 3H), 1,27 (с, 12H);

¹³C ЯМР (50 МГц, ДМСО) δ 142,4, 135,8, 117,9, 83,5, 24,7.

Стадия 3: Сочетание Сузуки в соответствии с общей процедурой

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, ДМСО) δ 14,93 (с, 1Н), 9,98 (с, 1Н), 9,83 (с, 1Н), 9,02 (д, J=2,2 Гц, 1Н), 8,73 (д, J=2,1 Гц, 1H), 7,84 (д, J=8,6 Гц, 2H), 7,64 (тд, J=9,0, 6,1 Гц, 1H), 7,43-7,26 (м, 3H), 3,19-3,03 (м, 5H), 1,86-1,63 (м, 2H), 0,97 (т, J=7,4 Гц, 3H);

¹³C ЯМР (101 МГц, ДМСО) δ 182,5, 152,1, 149,6, 141,8, 138,5, 132,4, 128,3, 127,0, 120,0, 113,5, 53,8, 16,8, 12,5;

[M-1]^- = 547.8.

Пример 51h: 4-(3-(2,6-дифтор-3-(пропилсульфонамидо)бензоил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил)-N-метилбензолсульфонамид

Стадия 1: 4-бром-N-метилбензолсульфонамид (2)

К раствору 4-бромбензолсульфонилхлорида (1, 2,52 г, 9,86 ммоль) в тетрагидрофуране (49,3 мл) добавляли метиламин (14,8 мл, 29,6 ммоль) 2M в ТГФ. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 15 минут, выливали в раствор NH₄Cl и экстрагировали EtOAc. Органический слой сушили над Na₂SO₄, концентрировали и растирали с н-гексаном с получением 4-бром-N-метилбензолсульфонамида (2,15 г, 8,6 ммоль, выход 87%)

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, CDCl₃) δ 7,77-7,59 (м, 1H), 5,03 (дд, J=10,0, 4,9 Гц, 1H), 2,62 (д, J=5,2 Гц, 1H);

¹³C ЯМР (50 МГц, CDCl₃) δ 137,8, 132,5, 128,9, 127,8, 29,3; [М-1]^- = 247,8.

Стадия 2: [4-(метилсульфамоил)фенил]бороновая кислота (3)

К раствору 4-бром-N-метилбензолсульфонамида (2, 1,05 г, 4,20 ммоль) и триизопропилбората (1,45 мл, 6,30 ммоль) в тетрагидрофуране (8,40 мл) добавляли н-бутиллитий (4,20 мл, 10,5 ммоль) при -70°С. Смесь медленно нагревали до 0°С, затем добавляли 10% раствор HCl до рН 3-4. Полученную смесь экстрагировали EtOAc. Органический слой экстрагировали NaOH (2 М) и водную фазу промывали диэтиловым эфиром. Водную фазу подкисляли до рН 3, экстрагировали EtOAc (примеси и неиспользованный реагент все еще присутствовали) сушили над Na₂SO₄ и упаривали при пониженном давлении. Остаток растирали с диэтиловым эфиром, получая [4-(метилсульфамоил)фенил] бороновую кислоту (187 мг, 0,8700 ммоль, выход 21%).

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, ДМСО) δ 7,96 (д, J=8,1 Гц, 2H), 7,72 (д, J=8,0 Гц, 2H), 7,42 (кв, J=4,9 Гц, 1H), 2,39 (д, J=5,0 Гц, 3H);

¹³C ЯМР (50 МГц, ДМСО) δ 140,6, 134,8, 125,7, 28,8.

Стадия 3: Сочетание Сузуки в соответствии с общей процедурой

Аналитические данные:

¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 15,01 (с, 1H), 9,83 (с, 1H), 9,11 (д, J=2,1 Гц, 1H), 8,87 (д, J=2,0 Гц, 1H), 8,11 (д, J=8,3 Гц, 2H), 7,93 (д, J=8,3 Гц, 2H), 7,64 (тд, J=9,0, 5,9 Гц, 1H), 7,58 (кв, J=5,0 Гц, 1H), 7,32 (т, J=8,7 Гц, 1H), 3,19-3,02 (м, 2H), 1,80-1,70 (м, 2H), 0,97 (т, J=7,5 Гц, 3H);

¹³C ЯМР (101 МГц, ДМСО) δ 182,6, 152,5, 149,9, 142,0, 141,0, 138,8, 131,4, 128,4, 128,2, 127,5, 113,4, 53,8, 28,6, 16,8, 12,5;

МС: [M-1]^- = 547,9.

Пример 51i: 4-(3-(2,6-дифтор-3-(пропилсульфонамидо)бензоил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил)-N-этилбензолсульфонамид

Стадия 1: 4-бром-N-этилбензолсульфонамид (2)

4-Бромбензолсульфонилхлорид (1, 2,57 г, 10,1 ммоль) растворяли в DCM (25,1 мл). Добавляли триэтиламин (3,50 мл, 25,1 ммоль) и этиламин гидрохлорид (1,07 г, 13,1 ммоль), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Смесь разбавляли полунасыщен. раствором NH₄Cl и экстрагирлвали EtOAc. Органическую фазу промывали солевым раствором, сушили над Na₂SO₄, фильтровали и растворитель удаляли при пониженном давлении. Остаток растирали с н-гексаном, получая 4-бром-N-этилбензолсульфонамид (2,40 г, 9,09 ммоль, выход 90%).

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, CDCl₃) δ 7,92-7,47 (м, 4H), 5,17 (с, 1H), 3,08-2,81 (м, 2H), 1,08 (т, J=7,2 Гц, 3H);

¹³C ЯМР (50 МГц, CDCl₃) δ 139,1, 132,4, 128,7, 127,6, 38,3, 15,1; [М-1]^- = 261,7.

Стадия 2: [4-(этилсульфамоил)фенил]бороновая кислота (3)

К раствору 4-бром-N-этилбензолсульфонамида (2, 1,06 г, 4,01 ммоль) и триизопропилбората (1,39 мл, 6,02 ммоль) в тетрагидрофуране (20,1 мл) добавляли н-бутиллитий (4,01 мл, 10,0 ммоль) при -70°С. Смесь медленно нагревали до 0°С, затем добавляли 10% раствор HCl до рН 3-4. Полученную смесь экстрагировали EtOAc и экстракт промывали солевым раствором, сушили над Na₂SO₄, фильтровали и растворитель удаляли при пониженном давлении. Остаток растирали с диэтиловым эфиром, получая [4-(этилсульфамоил)фенил] бороновую кислоту (368 мг, 1,61 ммоль, выход 40%).

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, ДМСО) δ 8,41 (с, 2H), 7,94 (д, J=8,1 Гц, 2H), 7,74 (д, J=8,1 Гц, 2H), 7,52 (т, J=5,7 Гц, 1H), 2,87-2,67 (м, 2H), 0,93 (т, J=7,2 Гц, 3H);

¹³C ЯМР (50 МГц, ДМСО) δ 142,1, 135,0, 125,7, 37,9, 15,0.

Стадия 3: Сочетание Сузуки в соответствии с общей процедурой

Аналитические данные:

¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 14,97 (с, 1H), 9,82 (с, 1H), 9,10 (д, J=2,1 Гц, 1H), 8,86 (д, J=2,1 Гц, 1H), 8,09 (д, J=8,3 Гц, 2H), 7,94 (д, J=8,5 Гц, 2H), 7,73-7,58 (м, 2H), 7,31 (т, J=8,7 Гц, 1H), 3,16-3,06 (м, 2H) 2,89-2,80 (м, 2H), 1,81-1,69 (м, 2H), 1,05-0,94 (м, 6H);

¹³C ЯМР (101 МГц, ДМСО) δ 182,5, 152,5, 149,8, 142,0, 140,8, 140,0, 131,4, 128,3, 128,2, 127,3, 113,4, 53,8, 37,6, 16,8, 14,8, 12,5;

МС: [M-1]^- = 561,9.

Пример 51j: 4-(3-(2,6-дифтор-3-(пропилсульфонамидо)бензоил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил)-N-(2,3-дигидроксипропил)бензолсульфонамид

Стадия 1: 4-бром-N-(2,3-дигидроксипропил)бензолсульфонамид (2)

4-Бромбензолсульфонилхлорид (1, 2,10 г, 8,22 ммоль) и триэтиламин (2,29 мл, 16,4 ммоль) объединяли в DCM (41,1 мл). Добавляли 3-аминопропан-1,2-диол (0,952 мл, 12,3 ммоль) и смесь перемешивали в течение 1 часа при комнатной температуре. После выпаривания растворителя остаток растворяли в EtOAc, промывали 1 Н HCl, водой и солевым раствором. Экстракт сушили над Na₂SO₄, фильтровали и растворитель удаляли при пониженном давлении. Продукт промывали водой и диэтиловым эфиром и сушили, получая 4-бром-N-(2,3-дигидроксипропил)бензолсульфонамид (0,980 г, 3,16 ммоль, выход 38%).

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, ДМСО) δ 7,77 (дд, J=17,1, 8,5 Гц, 5H), 4,79 (с, 1H), 4,56 (с, 1H), 3,46 (с, 1H) под пиком воды, 3,27 (с)., 2H), 2,89 (дд, J=12,6, 4,2 Гц, 1H), 2,61 (дд, J=12,5, 7,1 Гц, 1H);

¹³C ЯМР (50 МГц, ДМСО) δ 139,9, 132,3, 128,7, 126,1, 70,3, 63,5, 46,3; [М-1]^- = 307,8.

Стадия 2: N-(2,3-дигидроксипропил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензолсульфонамид (3)

В сосуд загружали 4-бром-N-(2,3-дигидроксипропил)бензолсульфонамид (2, 205 мг, 0,661 ммоль), ацетат калия (195 мг, 1,98 ммоль), бис(пинаколато)диборон (185 мг, 0,727 ммоль) и дегазированный сухой 1,4-диоксан (6,61 мл). Сосуд вакуумировали и заполняли аргоном (3х), добавляли XPhos Pd G4 (5,69 мг, 0,00661 ммоль) и смесь перемешивали при 85 °С в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры смесь разбавляли EtOAc и перемешивали в течение 30 минут, фильтровали через целит и растворитель удаляли при пониженном давлении. Остаток растворяли в минимальном количестве EtOAc, осаждали н-гептаном и твердые вещества собирали вакуум-фильтрацией, получая N-(2,3-дигидроксипропил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензолсульфонамид (202 мг, 0,5650 ммоль, выход 86%), который использовали без дополнительной очистки.

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, ДМСО) δ 7,80 (кв, J=8,0 Гц, 3H), 7,44 (с, 2H), 3,52-2,56 (м, 5H), 1,35-1,22 (м, 7H), 1,15 (с, 5H), 1,07 (с, 2H).

Стадия 3: Сочетание Сузуки в соответствии с общей процедурой

Аналитические данные:

¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 15,00 (с, 1H), 9,82 (с, 1H), 9,11 (д, J=2,1 Гц, 1H), 8,87 (д, J=2,1 Гц, 1H), 8,09 (д, J=8,5 Гц, 2H), 7,95 (д, J=8,5 Гц, 2H), 7,68-7,60 (м, 2H), 7,32 (т, J=8,3 Гц, 1H), 4,82 (д, J=5,2 Гц, 1H), 4,58 (т, J=5,7 Гц, 1H), 3,50 (дк, J=10,6, 5,3 Гц, 1H), 3,32-3,22 (м, 2H), 3,14-3,08 (м, 2H), 2,94 (ддд, J=11,7, 6,6, 4,9 Гц, 1H), 2,66 (ддд, J=12,8, 7,0, 5,8 Гц, 1H), 1,83-1,69 (м, 2H), 0,97 (т, J=7,5 Гц, 3H);

¹³C ЯМР (101 МГц, ДМСО) δ 182,5, 152,5, 149,8, 142,0, 140,8, 140,0, 131,4, 128,3, 128,1, 127,3, 113,4, 70,3, 63,5, 53,8, 46,1, 16,8, 12,5;

МС: [M-1]^- = 607,8.

Пример 51k: N-((4-(3-(2,6-дифтор-3-(пропилсульфонамидо)бензоил)-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил)фенил)сульфонил)ацетамид

Стадия 1: N-(4-бромфенил)сульфонилацетамид (2)

4-Бромбензолсульфонилхлорид (1,22 г, 9,08 ммоль) и ацетамид (1,34 г, 22,7 ммоль) (промытый диэтиловым эфиром перед использованием) растворяли в тетрагидрофуране (30,3 мл). Гидрид натрия (0,908 г, 22,7 ммоль) (60%) добавляли порциями при 0°C и смесь перемешивали в течение 2 часов. Смесь подкисляли конц. HCl и воду добавляли до разделения фаз. Фазы разделяли и водный слой экстрагировали EtOAc. Органическую фазу промывали водой и солевым раствором, сушили над Na₂SO₄, фильтровали и растворитель удаляли при пониженном давлении. Остаток растирали с водой и сушили в вакууме, получая N-(4-бромфенил)сульфонилацетамид (1,33 г, 4,78 ммоль, выход 53%).

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, ДМСО) δ 12,22 (с, 1Н), 7,84 (с, 4Н), 1,93 (с, 3Н);

¹³C ЯМР (50 МГц, ДМСО) δ 169,0, 138,6, 132,3, 129,6, 127,7, 23,3; [М-1]^- = 275,8.

Стадия 2: N-[4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил]сульфонилацетамид (3)

В сосуд загружали N-(4-бромфенил)сульфонилацетамид (2, 206 мг, 0,741 ммоль), ацетат калия (218 мг, 2,22 ммоль), бис(пинаколато)диборон (207 мг, 0,815 ммоль) и дегазированный сухой 1,4-диоксан (7,41 мл). Сосуд вакуумировали и снова заполняли аргоном (3х), добавляли XPhos Pd G4 (6,37 мг, 0,00741 ммоль) и смесь перемешивали при 85°С в течение ночи. Добавляли дополнительное количество XPhos Pd G4 и бис(пинаколато)диборон и смесь перемешивали в течение еще 2 часов. После охлаждения до комнатной температуры смесь разбавляли EtOAc и перемешивали в течение 30 минут и фильтровали через целит. Фильтрат удаляли и фильтр промывали 2Н HCl и EtOAc. Растворитель удаляли при пониженном давлении и остаток растирали с н-гептаном с получением N-[4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил]сульфонилацетамида (163 мг, 0,5010 ммоль, выход 68%), который использовали без дальнейшей очистки.

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, ДМСО) δ 12,14 (с, 1H), 8,02-7,81 (м, 4H), 1,92 (с, 3H), 1,30 (с, 12H);

¹³C ЯМР (50 МГц, ДМСО) δ 168,8, 141,8, 134,9, 126,8, 84,3, 24,6, 23,2.

Стадия 3: Сочетание Сузуки в соответствии с общей процедурой

Аналитические данные:

¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 15,01 (с, 1Н), 12,21 (с, 1Н), 9,83 (с, 1Н), 9,11 (д, J=2,1 Гц, 1Н), 8,87 (д, J=2,1 Гц, 1H), 8,12 (д, J=8,5 Гц, 2H), 8,05 (д, J=8,5 Гц, 2H), 7,64 (тд, J=9,0, 5,9 Гц, 1H), 7,32 (т, J=8,5 Гц, 1H), 3,11 (дд, J=5,7, 3,8 Гц, 2H), 1,96 (с, 3H), 1,83-1,69 (м, 2H), 0,97 (т, J=7,5 Гц, 3H);

¹³C ЯМР (101 МГц, ДМСО) δ 182,6, 152,5, 149,9, 142,0, 141,0, 138,8, 131,4, 128,4, 128,2, 127,5, 113,4, 53,8, 28,6, 16,8, 12,5;

МС: [M-1]^- = 575,7.

Пример 51I: 4-(3-(2,6-дифтор-3-(пропилсульфонамидо)бензоил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил)-N-(2,3-дигидроксипропил)бензамид

Стадия 1: 4-бром-N-(2,3-дигидроксипропил)бензамид (2)

Метил 4-бромбензоат (2,41 г, 11,2 ммоль) и 3-аминопропан-1,2-диол (1,12 г, 12,3 ммоль) нагревали до 125°С в течение 4 часов. Смесь разбавляли МеОН, выпаривали над целитом и очищали на короткой колонке. (DCM+MeOH+муравьиная кислота (от 99+0+1 до 90+9+1). После выпаривания растворителей маслянистый остаток высушивали при 0,05 мбар до кристаллизации. Затем его растирали с диэтиловым эфиром, получая 4-бром-N-(2,3-дигидроксипропил)бензамид (1,90 г, 6,93 ммоль, выход 62%) в виде белого твердого вещества. ¹H ЯМР (200 МГц, ДМСО) δ 8,49 (с, 1H), 7,73 (д, J=22,1 Гц, 4H), 4,72 (д, J=48,1 Гц, 2H), 3,83-2,99 (м, 5H); ¹³C ЯМР (50 МГц, ДМСО) δ 165,8, 133,7, 131,3, 129,5, 124,9, 70,4, 64,0, 43,2; [М-1]^- = 271,7.

Стадия 2: N-(2,3-дигидроксипропил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензамид (3)

В сосуд загружали 4-бром-N-(2,3-дигидроксипропил)бензамид (656 мг, 2,39 ммоль), бис(пинаколато)диборон (669 мг, 2,63 ммоль), ацетат калия (705 мг, 7,18 ммоль) и дегазированный сухой 1,4-диоксан (12,0 мл). Сосуд вакуумировали и снова заполняли аргоном (3х), добавляли XPhos Pd G3 (10,3 мг, 0,0120 ммоль) и смесь перемешивали при 85 °С в течение 2 часов. После охлаждения до комнатной температуры смесь разбавляли EtOAc, перемешивали в течение 30 минут и фильтровали через целит. Растворитель удаляли при пониженном давлении. Остаток растворяли в минимальном количестве EtOAc, добавляли по каплям к н-гептану при перемешивании и твердые вещества собирали вакуум-фильтрацией, получая N-(2,3-дигидроксипропил)-4-(4,4,5,5-тетраметил)-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензамид (410 мг, 1,28 ммоль, выход 53%), который использовали без дополнительной очистки.

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, ДМСО) δ 7,91-7,65 (м, 4H), 1,30 (с, 12H), 1,15 (с, 4H), 1,07 (с, 2H);

¹³C ЯМР (101 МГц, ДМСО) δ 134,2, 126,5, 83,8, 81,3, 73,5, 70,3, 64,0, 39,5, 24,9, 24,6, 24,4.

Стадия 3: Сочетание Сузуки в соответствии с общей процедурой

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, ДМСО) δ 9,10 (д, J=2,1 Гц, 1H), 8,83 (д, J=2,2 Гц, 1H), 8,54 (т, J=5,7 Гц, 1H), 8,00 (кв, J=8,5 Гц, 4H), 7,64 (тд, J=9,0, 5,8 Гц, 1H), 7,32 (тд, J=9,1, 1,3 Гц, 1H), 4,87 (д, J=5,1 Гц, 1H), 4,62 (т, J=5,7 Гц, 1H), 3,80-3,58 (м, 1H), 3,26-3,02 (м, 3H), 1,75 (дк, J=14,9, 7,4 Гц, 2H), 0,97 (т, J=7,4 Гц, 3H);

¹³C ЯМР (50 МГц, CDCl₃) δ 182,6, 166,1, 152,5, 142,0, 139,7, 133,9, 132,0, 128,2, 127,3, 113,6, 70,4, 64,0, 53,8, 43,1, 16,9, 12,6;

МС: [M-1]^- = 571,7.

Пример 51m: 4-(3-(2,6-дифтор-3-(пропилсульфонамидо)бензоил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил)-3-фторбензолсульфонамид

Стадия 1: 4-бром-3-фторбензолсульфонамид (2)

К охлажденному на льду раствору 4-бром-3-фторбензолсульфонилхлорида (1, 1,03 г, 3,77 ммоль) в ацетонитриле (1,88 мл) по каплям добавляли 25% раствор аммиака (1,46 мл, 9,41 ммоль). Смесь перемешивали в течение 10 минут при комнатной температуре, разбавляли водой и экстрагировали диэтиловым эфиром. Экстракт промывали солевым раствором, сушили над Na₂SO₄, фильтровали и растворитель удаляли при пониженном давлении, получая 4-бром-3-фторбензолсульфонамид (0,780 г, 3,07 ммоль, выход 82%).

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, ДМСО) δ 7,95 (дд, J=8,2, 6,9 Гц, 1H), 7,75 (дд, J=8,4, 2,1 Гц, 1H), 7,64-7,57 (м, 3H);

¹³C ЯМР (50 МГц, ДМСО) δ 157,9 (д, J=249,0 Гц), 145,5 (д, J=6,1 Гц), 134,6, 123,2 (д, J=3,8 Гц), 114,1 (д, J=25,3 Гц) 112,3 (д, J=20,8 Гц).

Стадия 2: 3-фтор-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензолсульфонамид (3)

В сосуд загружали 4-бром-3-фторбензолсульфонамид (2, 255 мг, 1,00 ммоль), бис(пинаколато)диборон (280 мг, 1,10 ммоль), ацетат калия (295 мг, 3,01 ммоль) и дегазированный сухой 1,4-диоксан (5,02 мл). Сосуд вакуумировали и снова заполняли аргоном (3х), добавляли XPhos Pd G4 (4,32 мг, 0,00502 ммоль) и смесь перемешивали при 85°С в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры смесь разбавляли EtOAc и уксусной кислотой (0,172 мл, 3,01 ммоль), перемешивали в течение 30 минут и фильтровали через целит. Растворитель удаляли при пониженном давлении. Остаток растворяли в минимальном количестве EtOAc, осаждали н-гептаном и твердые вещества собирали вакуум-фильтрацией, получая 3-фтор-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензолсульфонамид (220 мг, 0,7310 ммоль, выход 73%), который использовали без дополнительной очистки.

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, ДМСО) δ 7,91-7,09 (м, 5H), 1,42-0,95 (м, 12H);

¹³C ЯМР (50 МГц, ДМСО) δ 148,6 (д, J=8,2 Гц), 137,5 (д, J=8,3 Гц), 121,05 (д, J=2,1 Гц), 112,48 (д, J=27,6 Гц), 83,9 73,6, 25,0, 24,7.

Стадия 3: Сочетание Сузуки в соответствии с общей процедурой

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, ДМСО) δ 15,06 (с, 1Н), 9,83 (с, 1Н), 8,95 (с, 1Н), 8,81 (с, 1Н), 7,99 (т, J=8,0 Гц, 1Н), 7,88 7,74 (м, 2Н), 7,73-7,55 (м, 3Н), 7,40-7,23 (м, 1Н), 3,22-2,98 (м, 2Н), 1,88-1,59 (м, 2Н), 0,97 (т, J =). 7,4 Гц, 3H).

МС: [M-1]^- = 551,7.

ПРИМЕР 52

Соединения Примеров 52a-52c были получены в соответствии с методикой, показанной на схеме 2.

Схема 2

Стадия 1: N-[3-[5-бром-1-(оксан-2-ил)пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил]-2,4-дифторфенил]пропан-1-сульфонамид (2)

К суспензии N-[3-(5-бром-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)-2,4-дифторфенил]пропан-1-сульфонамида (1, 0,333 г, 0,725 ммоль)) в DCM (2,90 мл) добавляли дигидропиран (0,132 мл, 1,45 ммоль) и моногидрат п-толуолсульфоновой кислоты (0,0276 г, 0,145 ммоль), и смесь нагревали до температуры кипения с обратным холодильником в течение 45 минут. После охлаждения смесь промывали насыщ. раствором NaHCO₃, сушили над Na₂SO₄, фильтровали и растворитель удаляли при пониженном давлении. Остаток растворяли в минимальном количестве DCM и по каплям добавляли в н-гексан при перемешивании. Через 5 минут твердые вещества собирали вакуум-фильтрацией и сушили с получением N-[3-[5-бром-1-(оксан-2-ил)пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил]-2,4-дифторфенил]пропан-1-сульфонамида (0,297 г, 0,5470 ммоль, выход 75%), который использовали без дополнительной очистки.

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, CDCl₃) δ 8,83 (с, 1H), 8,65 (с, 1H), 7,70 (дд, J=13,6, 8,1 Гц, 1H), 7,02 (д, J=9,6 Гц, 2H), 6,14 (д, J=9,2 Гц, 1H), 4,14-3,64 (м, 2H), 3,22-2,90 (м, 2H), 2,61-2,31 (м, 1H), 2,15-1,16 (м, 10H);

¹³C ЯМР (50 МГц, CDCl₃) δ 182,4, 151,0, 149,7, 140,7, 133,7, 127,33 (д, J=8,6 Гц), 121,36 (дд, J=13,1, 3,8 Гц), 116,8, 116,6, 112,44 (дд, J=22,6, 3,7 Гц), 83,3, 77,2, 68,2, 54,1, 28,9, 24,8, 22,4, 17,3, 12,9;

МС: [M-1]^- = 540,7.

Стадия 2: N-[2,4-дифтор-3-[1-(оксан-2-ил)-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил]фенил]пропан-1-сульфонамид (3)

В сосуд загружали N-[3-[5-бром-1-(оксан-2-ил)пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил]-2,4-дифторфенил]пропан-1-сульфонамид (2, 271 мг, 0,499 ммоль), бис(пинаколато)диборон (139 мг, 0,549 ммоль) и безводный ацетат калия (147 мг, 1,50 ммоль). Добавляли дегазированный сухой 1,4-диоксан (4,99 мл) и сосуд вакуумировали и снова заполняли аргоном (3х). Добавляли 1,1'-бис (дифенилфосфино)ферроцен-дихлорпалладий (1: 1) (9,12 мг, 0,0125 ммоль) и смесь перемешивали при 85°C в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры смесь разбавляли EtOAc, фильтровали через целит и растворитель удаляли. Остаток растворяли в DCM, добавляли петролейный эфир (60/90) и DCM удаляли при пониженном давлении. После охлаждения в течение 1 часа при 4°C твердые вещества собирали вакуум-фильтрацией и сушили с получением N-[2,4-дифтор-3-[1-(оксан-2-ил)-5-(4,4,5 г.). 5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил) пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил]фенил]пропан-1-сульфонамида (267 мг, 0,4520 ммоль, выход 91%), который использовали без дальнейшей очистки.

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, CDCl₃) δ 9,11 (с, 1H), 8,94 (с, 1H), 7,68 (д, J=5,9 Гц, 1H), 7,12-6,83 (м, 2H), 6,22 (д, J=9,0 Гц, 1Н), 4,19-3,60 (м, 2Н), 3,07 (с, 2Н), 2,57-1,11 (м, 23Н);

¹³C ЯМР (50 МГц, CDCl₃) δ 182,5, 155,5, 152,4, 141,9, 139,3, 127,3 (д, J=9,0 Гц), 121,23 (дд, J=13,1, 4,0 Гц), 114,9, 112,33 (дд, J=23,2, 2,9 Гц), 84,4, 82,8, 77,2, 68,1, 54,1, 29,0, 24,9, 22,5, 17,2, 12,9;

МС: [M-1]^- = 588,9.

Пример 52а: 3-хлор-4-[3-[2,6-дифтор-3-(пропилсульфониламино)бензоил]-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]бензолсульфонамид

Стадия 1: 4-бром-3-хлорбензолсульфонамид (2)

К охлажденному льдом раствору 4-бром-3-хлорбензолсульфонилхлорида (1, 0,450 г, 1,55 ммоль) в ацетонитриле (7,76 мл) по каплям добавляли 25% раствор аммиака (0,602 мл, 3,88 ммоль). Смесь перемешивали в течение 10 минут при комнатной температуре, разбавляли водой и экстрагировали EtOAc. Экстракт промывали солевым раствором, сушили над Na₂SO₄, фильтровали и растворитель удаляли при пониженном давлении, получая 4-бром-3-хлорбензолсульфонамид (0,370 г, 1,37 ммоль, выход 88%).

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, ДМСО) δ 8,01 (д, J=8,1 Гц, 2H), 7,89-7,47 (м, 3H);

¹³C ЯМР (50 МГц, ДМСО) δ 144,9, 134,8, 133,8, 127,3, 125,8, 125,5;

МС: [M-1]^- = 267,7.

Стадия 2: 3-хлор-4-[3-[2,6-дифтор-3-(пропилсульфониламино)бензоил]-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]бензолсульфонамид (3)

В сосуд загружали N-[2,4-дифтор-3-[1-(оксан-2-ил)-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил]фенил]пропан-1-сульфонамид (71,0 мг, 0,120 ммоль), тетракис Pd (6,95 мг, 0,00601 ммоль) и 4-бром-3-хлорбензолсульфонамид (2 (39,0 мг, 0,144 ммоль) и продували аргоном. Добавляли дегазированный 1,4-диоксан (0,401 мл) и дегазированный водный 1,5 М карбонат калия (0,240 мл, 0,361 ммоль), и сосуд вакуумировали и заполняли аргоном (3х). Смесь нагревали до 55°C в течение 1ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли iPrOH, конц. HCl добавляли до тех пор, пока смесь не становилась сильно кислой, и перемешивание продолжали при 70°C в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры добавляли твердый NaHCO₃ для нейтрализации смеси, растворители удаляли и остаток очищали флэш-хроматографией (DCM+EtOAc от 20% до 60%), получая 3-хлор-4-[3-[2,6-дифтор-3-(пропилсульфониламино)бензоил]-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]бензолсульфонамид (23,0 мг, 0,0378 ммоль, выход 31%).

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, ДМСО) δ 8,82 (д, J=2,0 Гц, 1H), 8,69 (д, J=1,8 Гц, 1H), 7,96-7,81 (м, 2H), 7,74-7,55 (м, 3H) 7,31 (т, J=8,7 Гц, 1H), 3,19-3,05 (м, 3H), 1,87-1,62 (м, 2H), 0,97 (т, J=7,5 Гц, 3H);

¹³C ЯМР (101 МГц, ДМСО) δ 183,1, 152,7, 151,3, 145,9, 142,5, 140,2, 133,4, 132,9, 131,2, 130,6, 127,3, 125,2, 122,4, 113,3, 54,4, 17,3, 13,1;

МС: [M-1]^- = 567,9.

Пример 52b: 4-[3-[2,6-дифтор-3-(пропилсульфониламино)бензоил]-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]-2-фторбензолсульфонамид

Стадия 1: 4-бром-2-фторбензолсульфонамид (2)

К охлажденному на льду раствору 4-бром-2-фторбензолсульфонилхлорида (1, 0,450 г, 1,55 ммоль) в ацетонитриле (10,6 мл) по каплям добавляли 25% раствор аммиака (0,823 мл, 5,30 ммоль). Смесь перемешивали в течение 10 минут при комнатной температуре, разбавляли водой и экстрагировали EtOAc. Экстракт промывали солевым раствором, сушили над Na₂SO₄, фильтровали и растворитель удаляли при пониженном давлении, получая 4-бром-2-фторбензолсульфонамид (0,520 г, 2,05 ммоль, выход 97%).

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, ДМСО) δ 7,87-7,67 (м, 4H), 7,60 (дд, J=8,6, 1,5 Гц, 1H);

¹³C ЯМР (50 МГц, ДМСО) δ 158 (д, J=258 Гц), 131,1 (д, J=15 Гц), 129,9, 127,9 (д, J=4 Гц), 126,4 (д, J=9 Гц) 120,5 (д, J=25 Гц);

МС: [M-1]^- = 251,8.

Стадия 2: 4-[3-[2,6-дифтор-3-(пропилсульфониламино)бензоил]-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]-2-фторбензолсульфонамид (3)

В сосуд загружали N-[2,4-дифтор-3-[1-(оксан-2-ил)-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил]фенил]пропан-1-сульфонамид (74,0 мг, 0,125 ммоль), 4-бром-2-фторбензолсульфонамид (35,0 мг, 0,138 ммоль) и XPhos Pd G3 (1,06 мг, 0,00125 ммоль) и продували аргоном. Добавляли дегазированный 1,4-диоксан (0,401 мл) и дегазированный водный 1,5 М карбонат калия (0,240 мл, 0,361 ммоль), и сосуд вакуумировали и заполняли аргоном (3х). Смесь нагревали до 55°С в течение 2 часов. Смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли iPrOH (3 мл), конц. HCl добавляли до тех пор, пока смесь не становилась сильно кислой, и перемешивание продолжали при 70°C в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры добавляли твердый NaHCO₃ для нейтрализации смеси, растворители удаляли и остаток очищали флэш-хроматографией (DCM+EtOAc от 20% до 60%), получая 4-[3-[2,6-дифтор-3-(пропилсульфониламино)бензоил]-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]-2-фторбензолсульфонамид (26,0 мг, 0,0460 ммоль, выход 37%).

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, ДМСО) δ 15,01 (с, 1Н), 9,81 (с, 1Н), 9,13 (с, 1Н), 8,91 (с, 1Н), 8,14-7,53 (м, 6Н), 7,43-7,21 (м, 1H), 3,21-3,06 (м, 2H), 1,90-1,63 (м, 2H), 0,97 (т, J=7,5 Гц, 3H);

¹³C ЯМР (101 МГц, ДМСО) δ 182,5, 159,6, 157,1, 155,0, 155,0, 154,0, 153,9, 152,5, 149,8, 143,2, 143,2, 142,0, 130,8, 130,7, 130,3, 130,2, 129,9, 129,8, 129,0, 128,6, 123,3 123,3, 121,8, 121,8, 121,7, 121,7, 116,0, 115,7, 113,3, 112,2, 112,2, 112,0, 53,8, 16,7, 12,5, все зарегистрированные пики;

МС: [M-1]^- = 551,9.

Пример 52с: 4-[3-[2,6-дифтор-3-(пропилсульфониламино)бензоил]-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]-3-метилбензолсульфонамид

Стадия 1: 4-бром-3-метилбензолсульфонамид (2):

К охлажденному льдом раствору 4-бром-3-метилбензолсульфонилхлорида (1, 0,690 г, 2,76 ммоль) в ацетонитриле (1,48 мл) по каплям добавляли 25% раствор аммиака (1,15 мл, 7,42 ммоль). Смесь перемешивали в течение 10 минут при комнатной температуре, разбавляли водой и экстрагировали диэтиловым эфиром. Экстракт промывали солевым раствором, сушили над Na₂SO₄, фильтровали и растворитель удаляли при пониженном давлении, получая 4-бром-3-метилбензолсульфонамид (0,690 г, 2,76 ммоль, выход 93%).

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, ДМСО) δ 7,86-7,72 (м, 2H), 7,56 (ддд, J=8,4, 2,3, 0,5 Гц, 1H), 7,43 (с, 2H), 2,41 (с, 3H);

¹³C ЯМР (50 МГц, ДМСО) δ 143,5, 138,5, 132,8, 127,9, 125,0, 22,6;

МС: [M-1]^- = 247,7.

Стадия 2: 4-[3-[2,6-дифтор-3-(пропилсульфониламино)бензоил]-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]-3-метилбензолсульфонамид (3)

В сосуд загружали N-[2,4-дифтор-3-[1-(оксан-2-ил)-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2- ил) пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил]фенил]пропан-1-сульфонамид (75,0 мг, 0,127 ммоль), 4-бром-3-метилбензолсульфонамид (34,9 мг, 0,140 ммоль) и XPhos Pd G3 (2,69 мг, 0,00318 ммоль) и продували аргоном. Добавляли дегазированный 1,4-диоксан (0,401 мл) и дегазированный водный 1,5 М карбонат калия (0,240 мл, 0,361 ммоль), и сосуд вакуумировали и заполняли аргоном (3х). Смесь нагревали до 55°С в течение 1,5 часов. Растворитель удаляли при пониженном давлении, остаток растворяли в 2 мл ТГФ и 1,25 М HCl в iPrOH и перемешивали при 70°С в течение ночи. Растворитель удаляли, остаток нейтрализовали NaHCO₃ и экстрагировали EtOAc. Растворитель удаляли и остаток очищали флэш-хроматографией (DCM+EtOAc от 10 до 50%) и растирали с DCM с получением 4-[3-[2,6-дифтор-3-(пропилсульфониламино)бензоил]-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]-3-метилбензолсульфонамида (41,0 мг, 0,0739 ммоль, выход 58%).

Аналитические данные:

¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 15,00 (с, 1H), 9,82 (с, 1H), 8,76 (д, J=2,0 Гц, 1H), 8,55 (д, J=1,9 Гц, 1H), 7,84 (с, 1H), 7,78 (дд, J=8,0, 1,3 Гц, 1H), 7,67-7,56 (м, 2H), 7,44 (с, 2H), 7,31 (т, J=8,7 Гц, 1H), 3,16-3,07 (м, 2Н), 1,80-1,69 (м, 2Н), 0,97 (т, J=7,4 Гц, 3Н);

¹³C ЯМР (101 МГц, ДМСО) δ 182,5, 152,0, 150,7, 143,7, 141,8, 141,0, 136,6, 132,4, 130,9, 129,9, 127,3, 123,3, 113,0, 53,8, 20,1, 16,8, 12,5;

МС: [M-1]^- = 547,9.

ПРИМЕР 53

Соединения Примера 53a-53c были получены в соответствии с методикой, показанной на схеме 3.

Схема 3

Стадия 1: 5-бром-N-метокси-N-метил-1-(оксан-2-ил)пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбоксамид

К суспензии 5-бром-N-метокси-N-метил-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбоксамида (4,43 г, 15,5 ммоль) в DCM (62,2 мл) добавляли дигидропиран (2,84 мл, 31,1 ммоль) и моногидрат п-толуолсульфоновой кислоты (0,591 г, 3,11 ммоль), и смесь нагревали до температуры кипения с обратным холодильником в течение 30 минут. После охлаждения смесь промывали насыщ. раствором NaHCO₃ и рассол, сушили над Na₂SO₄, фильтровали и растворитель удаляли при пониженном давлении. Остаток очищали флэш-хроматографией (гексан+EtOAc от 10 до 50%), получая 5-бром-N-метокси-N-метил-1-(оксан-2-ил)пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбоксамид (5,05 г, 13,7 ммоль, выход 88%) в виде масла, которое затвердевало после сушки в глубоком вакууме и выдерживания.

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, CDCl₃) δ 8,69 (д, J=2,0 Гц, 1H), 8,58 (д, J=2,2 Гц, 1H), 6,12 (дд, J=10,0, 2,4 Гц, 1H), 4,15-4,01 (м, 1Н), 3,93-3,71 (м, 4Н), 3,54 (с, 3Н), 2,71-2,48 (м, 1Н), 2,22-1,65 (м, 5Н);

¹³C ЯМР (50 МГц, CDCl₃) δ 150,5, 149,0, 136,5, 134,2, 118,3, 115,1, 83,0, 68,2, 61,9, 29,2, 25,0, 22,8;

МС: [М+Н]⁺ = 390,8.

Стадия 2а: (3-амино-2,6-дифторфенил)-[5-бром-1-(оксан-2-ил)пиразоло[3,4-b]пиридин-3-ил]метанон:

К раствору 2,4-дифторанилина (0,815 г, 6,32 ммоль) и хлортриметилсилана (1,60 мл, 12,6 ммоль) в тетрагидрофуране (5,74 мл), охлажденного до -78°С, добавляли 2М диизопропиламид лития (6,32 мл, 12,6 ммоль) в ТГФ/гептан/этилбензол по каплям. Смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 30 минут. Добавляли 5-бром-N-метокси-N-метил-1-(оксан-2-ил)пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбоксамид (1,06 г, 2,87 ммоль) и смесь охлаждали до -30°С. Добавляли по каплям диизопропиламид лития (3,16 мл, 6,32 ммоль) в смеси ТГФ/гептан/этилбензол, и смесь перемешивали при -15°C в течение 10 минут. Добавляли 2Н HCl (20 мл) и перемешивание продолжали при комнатной температуре в течение 20 минут. PH смеси доводили до ~ 9 с помощью 2Н NaOH и экстрагировали EtOAc. Экстракт промывали солевым раствором, сушили над Na₂SO₄, фильтровали и растворитель удаляли. Остаток очищали флэш-хроматографией (гексан+EtOAc, от 10 до 40%) с получением (3-амино-2,6-дифторфенил)-[5-бром-1-(оксан-2-ил) пиразоло[3, 4-b]пиридин-3-ил]метанона (0,732 г, 1,67 ммоль, выход 58%) в виде желтого твердого вещества.

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, ДМСО) δ 8,86 (д, J=2,2 Гц, 1H), 8,79 (д, J=2,2 Гц, 1H), 7,31-6,69 (м, 2H), 6,14 (дд, J=9,8, 2,0 Гц, 1Н), 5,28 (с, 2Н), 4,02-3,85 (м, 1Н), 3,81-3,62 (м, 1Н), 2,42-2,14 (м, 1Н), 2,04-1,46 (м, 5Н);

¹³C ЯМР (50 МГц, ДМСО) δ 183,7, 151,0, 149,1, 140,3, 132,8, 116,3, 115,5, 82,9, 67,1, 28,4, 24,4, 21,6;

МС: [М+Na]⁺ = 458,9.

Стадия 2b: (3-амино-2,4,6-трифторфенил)-[5-бром-1-(оксан-2-ил)пиразоло[3,4-b]пиридин-3-ил]метанон:

К раствору 2,4,6-трифторанилина (0,789 г, 5,36 ммоль) и хлортриметилсилана (1,36 мл, 10,7 ммоль) в тетрагидрофуране (4,88 мл), охлажденного до -78 °С, добавляли 2М диизопропиламид лития (5,36 мл, 10,7 ммоль) в ТГФ/гептан/этилбензол по каплям. Смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 30 минут. Добавляли 5-бром-N-метокси-N-метил-1-(оксан-2-ил) пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбоксамид (1,06 г, 2,87 ммоль) и смесь охлаждали до -30°С. Добавляли по каплям диизопропиламид лития (2,68 мл, 5,36 ммоль) в смеси ТГФ/гептан/этилбензол, и смесь перемешивали при -15°C в течение 20 минут. Добавляли 2Н HCl (20 мл) и перемешивание продолжали при комнатной температуре в течение 10 минут. PH смеси доводили до pH 9, используя 2Н NaOH, и экстрагировали EtOAc. Экстракты промывали солевым раствором, сушили над Na₂SO₄ и растворитель удаляли. ТСХ-МС почти не выявила снятия защиты с TMS-групп. Остаток растворяли в 10 мл ТГФ, 1 мл конц. HCl добавляли. Снятие защиты было завершено немедленно. После разбавления EtOAc добавляли твердый K₂CO₃, суспензию фильтровали и растворитель удаляли. Остаток очищали флэш-хроматографией (гексан+EtOAc от 5 до 25%). Выход: 715 мг, 64%.

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, ДМСО) δ 8,85 (д, J=2,1 Гц, 1H), 8,79 (д, J=2,2 Гц, 1H), 7,34-7,16 (м, 1H), 6,14 (д, J=8,4 Гц), 1Н), 5,36 (с, 2Н), 4,03-3,82 (м, 1Н), 3,84-3,58 (м, 1Н), 2,44-2,17 (м, 1Н), 2,05-1,51 (м, 5Н);

¹³C ЯМР (50 МГц, ДМСО) δ 183,7, 151,0, 149,1, 140,3, 132,8, 116,3, 115,5, 82,9, 67,1, 28,4, 24,4, 21,6;

МС: [М+Na]⁺ = 476,9.

Пример 53а: 4-[3-[2,6-дифтор-3-(фенилсульфамоиламино)бензоил]-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]бензолсульфонамид

Стадия 1: приготовление N-фенилсульфамата натрия (2)

Анилин (1, 3,95 г, 42,4 ммоль) и триэтиламин (59,1 мл, 424 ммоль) растворяли в DCM (106 мл). Хлоросерную кислоту (2,82 мл, 42,4 ммоль) добавляли по каплям при -5 °С и смесь перемешивали в течение 10 минут. Смесь концентрировали в вакууме и твердое вещество растворяли в 1 Н гидроксиде натрия (84,8 мл, 84,8 ммоль). Смесь концентрировали в вакууме досуха. Продукт суспендировали в примерно 500 мл кипящего EtOH, фильтровали в горячем состоянии и уменьшали до примерно 150 мл. После охлаждения до 7°С в течение ночи продукт собирали фильтрованием и сушили в вакууме, получая N-фенилсульфамат натрия (3,94 г, 20,2 ммоль, выход 48%) в виде белого твердого вещества.

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, ДМСО) δ 7,90 (с, 1Н), 7,15-7,01 (м, 4Н), 6,74-6,63 (м, 1Н);

¹³C ЯМР (50 МГц, ДМСО) δ 143,7, 128,2, 118,5, 116,3.

Стадия 2: получение фенилсульфамоилхлорида (3)

N-фенилсульфамат натрия (2,12 г, 5,74 ммоль) и пентахлорид фосфора (1,20 г, 5,74 ммоль) нагревали в толуоле (19,1 мл) при 80°C на масляной бане в течение 6 часов. Реакционную смесь фильтровали и концентрировали в вакууме, получая N-фенилсульфамоилхлорид (0,990 г, 5,17 ммоль, выход 90%) в виде масла, которое затвердевает при стоянии. Продукт использовали без дальнейшей очистки и определения характеристик.

Стадия 3: [5-бром-1-(оксан-2-ил) пиразоло[3,4-b]пиридин-3-ил]-[2,6-дифтор-3-(фенилсульфамоиламино)фенил]метанон (4)

К раствору (3-амино-2,6-дифторфенил)-[5-бром-1-(оксан-2-ил) пиразоло[3,4-b]пиридин-3-ил]метанона (0,127 г, 0,290 ммоль) и триэтиламина (0,0607 мл, 0,436 ммоль) в DCM (1,45 мл) добавляли N-фенилсульфамоилхлорид (0,0724 г, 0,378 ммоль) в DCM (1,45 мл) при 0°C. После перемешивания в течение 10 минут при комнатной температуре смесь разбавляли DCM, промывали водой и раствором NH₄Cl, сушили над Na₂SO₄, фильтровали и растворитель удаляли при пониженном давлении с получением [5-бром-1-(оксан-2-ила)) пиразоло[3,4-b]пиридин-3-ил]-[2,6-дифтор-3-(фенилсульфамоиламино)фенил]метанона (0,170 г, 0,2870 ммоль, выход 99%), который использовали без дополнительной очистки. К липкому маслу добавляли 2 мл Et2O и растворитель быстро удаляли в вакууме с получением продукта в виде вспененного твердого вещества.

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, CDCl₃) δ 8,89 (д, J=2,1 Гц, 1H), 8,71 (д, J=2,1 Гц, 1H), 7,73 (тд, J=8,9, 5,4 Гц, 1H), 7,47-6,97 (м, 8H), 6,21 (дд, J=9,7, 2,1 Гц, 1H), 3,97 (дд, J=46,6, 10,1 Гц, 2H), 2,66-2,39 (м, 1H), 2,22-1,56 (м, 5H);

¹³C ЯМР (50 МГц, CDCl₃) δ 182,4, 151,0, 149,6, 140,7, 136,0, 133,7, 129,5, 125,8, 121,6, 116,8, 116,6, 83,4, 68,2, 29,0, 24,8, 22,4;

МС: [M-1]^- = 589,8.

Стадия 4: 4-[3-[2,6-дифтор-3-(фенилсульфамоиламино)бензоил]-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]бензолсульфонамид (5)

В сосуд загружали [5-бром-1-(оксан-2-ил) пиразоло[3,4-b]пиридин-3-ил]-[2,6-дифтор-3-(фенилсульфамоиламино)фенил]метанон (4, 0,0880 г, 0,149 ммоль), (4-сульфамоилфенил)бороновой кислоты (32,8 мг, 0,163 ммоль) и XPhos Pd G3 (3,77 мг, 0,00446 ммоль) и продували аргоном. Добавляли дегазированный 1,4-диоксан (0,495 мл) и дегазированный 1,5 М водный карбонат калия (0,297 мл, 0,446 ммоль) и смесь перемешивали при 65 °С в течение 1,5 часов. Насыщ. раствор NH₄Cl и EtOAc добавляли и фазы разделяли. Органическую фазу сушили над Na₂SO₄ и упаривали. Остаток растворяли в ТГФ (3 мл) и добавляли TFA (300 мкл) при комнатной температуре. После перемешивания в течение ночи добавляли еще 300 мкл TFA и перемешивание продолжали в течение 2 часов (10-12 часов). (Все еще нет превращения) Смесь концентрировали и помещали в DCM (3 мл) и обрабатывали ультразвуком. Добавляли еще 300 мкл TFA и перемешивание продолжали при комнатной температуре. Через 3 ч добавляли 3 мл TFA при комнатной температуре и смесь перемешивали в течение ночи и гасили в растворе NaHCO₃. Водный слой экстрагировали EtOAc, экстракт сушили над Na₂SO₄ и растворитель удаляли. Продукт очищали флэш-хроматографией (DCM+MeOH от 3% до 13%) с получением 4-[3-[2,6-дифтор-3-(фенилсульфамоиламино)бензоил]-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]бензолсульфонамида (34,0 мг, 0,0547 ммоль, выход 37%).

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, ДМСО) δ 14,96 (с, 1H), 10,20 (с, 1H), 10,09 (с, 1H), 9,09 (д, J=1,9 Гц, 1H), 8,84 (д, J=1,9 Гц), 1H), 8,14-7,89 (м, 4H), 7,60-7,41 (м, 3H), 7,37-7,15 (м, 5H), 7,02 (т, J=6,9 Гц, 1H);

МС: [M-1]^- = 583,0.

Пример 53b: 4-[3-[2,6-дифтор-3-(сульфамоиламино)бензоил]-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]бензолсульфонамид

Стадия 1: Получение трет-бутил N-хлорсульфонилкарбамата (2)

К раствору хлорсульфонилизоцианата (1, 1,78 мл, 20,4 ммоль) в толуоле (8,17 мл) медленно добавляли раствор 2-метилпропан-2-ола (1,66 г, 22,5 ммоль) в толуоле (1,16 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Добавляли гексан (23,1 мл) и раствор перемешивали в течение 30 минут. Образовавшийся осадок отфильтровывали и промывали гексаном, получая трет-бутил-N-хлорсульфонилкарбамат (3,33 г, 15,4 ммоль, выход 76%) в виде белого твердого вещества, которое хранили в атмосфере азота при -20°C.

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, CDCl₃) δ 8,86 (с, 1H), 1,56 (с, 9H);

¹³C ЯМР (50 МГц, CDCl₃) δ 148,0, 87,3, 27,9.

Стадия 2: трет-бутилN-[[3-[5-бром-1-(оксан-2-ил) пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил]-2,4-дифторфенил]сульфамоил]карбамат (3)

К раствору (3-амино-2,6-дифторфенил)-[5-бром-1-(оксан-2-ил) пиразоло[3,4-b]пиридин-3-ил]метанона (3, 0,126 г)., 0,288 ммоль) и триэтиламина (0,0602 мл, 0,432 ммоль) в DCM (1,15 мл) добавляли трет-бутил-N-хлорсульфонилкарбамат (0,0808 г, 0,375 ммоль) в DCM (1 мл) при 0°C. После перемешивания в течение 10 минут при комнатной температуре смесь разбавляли DCM, промывали водой и раствором NH₄Cl, сушили над Na₂SO₄, фильтровали и растворитель удаляли при пониженном давлении, получая трет-бутил N-[[3-[5-бром-1-(оксан-2-ил)пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил]-2,4-дифторфенил]сульфамоил]карбамат (0,176 г, 0,2860 ммоль, выход 99%) в виде желтой пены который использовали без дальнейшей очистки.

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, CDCl₃) δ 8,89 (д, J=1,8 Гц, 1H), 8,70 (д, J=1,8 Гц, 1H), 7,74 (тд, J=8,9, 5,8 Гц, 1H), 7,06 (т, J=8,4 Гц, 1H), 6,19 (д, J=7,6 Гц, 1H), 4,08 (д, J=11,1 Гц, 1H), 3,91-3,72 (м, 1H), 2,66-2,39 (м, 1H) 2,22-1,90 (м, 2H), 1,88-1,57 (м, 3H), 1,45 (с, 9H);

¹³C ЯМР (50 МГц, CDCl₃) δ 182,4, 151,0, 150,4, 149,7, 140,7, 133,7, 116,8, 116,6, 84,2, 83,5, 77,2, 68,2, 46,0, 27,9, 24,8, 22,4.

МС: [M-1]^- = 613,9.

Стадия 3: 4-[3-[2,6-дифтор-3-(сульфамоиламино)бензоил]-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]бензолсульфонамид (4)

В сосуд загружали трет-бутил N -[[3-[5-бром-1-(оксан-2-ил) пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил]-2,4-дифторфенил] сульфамоил] карбамат (3, 129 мг, 0,209 ммоль), (4-сульфамоилфенил) бороновую кислоту (46,3 мг, 0,230 ммоль) и XPhos Pd G3 (5,31 мг, 0,00628 ммоль) и продували аргоном. Добавляли дегазированный 1,4-диоксан (0,698 мл) и дегазированный 1,5 М водный карбонат калия (0,419 мл, 0,628 ммоль) и смесь перемешивали при 65 °С в течение 1,5 часов. Насыщ. раствор NH₄Cl и EtOAc добавляли и фазы разделяли. Органическую фазу сушили над Na₂SO₄ и упаривали. Остаток растворяли в DCM (3 мл) и добавляли TFA (300 мкл) при комнатной температуре. После перемешивания в течение ночи смесь гасили в растворе NaHCO₃ и экстрагировали EtOAc. Экстракт сушили над Na₂SO₄ и растворитель удаляли. Продукт очищали флэш-хроматографией (DCM+MeOH от 1% до 11%) с получением 4-[3-[2,6-дифтор-3-(сульфамоиламино)бензоил]-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]бензолсульфонамида (37,0 мг, 0,0728 ммоль, 35% выход).

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, ДМСО) δ 14,96 (с, 1H), 9,32 (с, 1H), 9,10 (д, J=2,0 Гц, 1H), 8,86 (д, J=2,0 Гц, 1H), 8,02 (дд, J=20,7, 8,4 Гц, 4H), 7,68 (тд, J=8,9, 5,9 Гц, 1H), 7,47 (с, 2H), 7,36-7,13 (м, 3H);

МС: [M-1]^- = 507,0.

Пример 53с: 4-[3-[2,4,6-трифтор-3-(пропилсульфониламино)бензоил]-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]бензолсульфонамид

Стадия 1: N-[3-[5-бром-1-(оксан-2-ил)пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил]-2,4,6-трифторфенил]-N-пропилсульфонилпропан-1-сульфонамид (2)

К (3-амино-2,4,6-трифторфенил)-[5-бром-1-(оксан-2-ил) пиразоло[3,4-b]пиридин-3-ил]метанону (1, 0,289 г, 0,635 ммоль) и триэтиламину (0,133 мл, 0,952 ммоль) в DCM (2,54 мл) медленно добавляли 1-пропансульфонилхлорид (0,0715 мл, 0,635 ммоль) при 0 °C. После перемешивания при комнатной температуре в течение 15 минут смесь разбавляли DCM, промывали раствором NH₄Cl, сушили над Na₂SO₄ и растворители удаляли. Остаток очищали флэш-хроматографией (гексан+EtOAc, от 0 до 25%) с получением N-[3-[5-бром-1-(оксан-2-ил)пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил]-2,4,6-трифторфенил]-N-пропилсульфонилпропан-1-сульфонамида (0,233 г, 0,3490 ммоль, выход 55%). Полученное масло растворяли в DCM, добавляли гексан и растворители удаляли. Желтоватое твердое вещество.

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, CDCl₃) δ 8,81 (д, J=2,0 Гц, 1H), 8,65 (д, J=2,0 Гц, 1H), 6,97 (тд, J=9,1, 1,8 Гц, 1H), 6,15 (дд, J=9,9, 2,2 Гц, 1H), 4,03 (д, J=11,1 Гц, 1H), 3,88-3,48 (м, 5H), 2,53 (дд, J=20,4, 11,9 Гц, 1H), 2,15-1,51 (m, 9H), 1,07 (тд, J=7,4, 3,9 Гц, 6H);

¹³C ЯМР (50 МГц, CDCl₃) δ 182,4, 151,0, 150,4, 149,7, 140,7, 133,7, 116,8, 116,6, 84,2, 83,5, 77,2, 68,2, 46,0, 27,9, 24,8, 22,4.

МС: [М+Na]⁺ = 688,8.

Стадия 2: N-[3-[5-бром-1-(оксан-2-ил)пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил]-2,4,6-трифторфенил]пропан-1-сульфонамид (3)

К раствору N-[3-[5-бром-1-(оксан-2-ил)пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил]-2,4,6-трифторфенил]-N-пропилсульфонилпропан-1-сульфонамида (2, 0,227 г, 0,340 ммоль) в тетрагидрофуране (1,2 мл) и МеОН (0,40 мл) добавляли 1 М водный раствор NaOH (1,02 мл, 1,02 ммоль). После перемешивания в течение 1 часа добавляли воду (3 мл) и органические растворители выпаривали. 2Н HCl добавляли для нейтрализации смеси. Твердые вещества собирали вакуум-фильтрацией и сушили, получая N-[3-[5-бром-1-(оксан-2-ил)пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил]-2,4,6-трифторфенил]пропан-1-сульфонамид (0,159 г, 0,2830 ммоль, выход 83%) в виде желтоватого твердого вещества.

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, ДМСО) δ 9,70 (с, 1H), 8,84 (д, J=10,9 Гц, 2H), 7,62 (т, J=9,3 Гц, 1H), 6,15 (д, J=8,6 Гц, 1H), 4,08-3,59 (м, 2H), 3,25-3,06 (м, 2H), 2,40-2,16 (м, 1H), 2,08-0,76 (м, 10H);

¹³C ЯМР (50 МГц, ДМСО) δ 151,2, 149,2, 139,8, 132,7, 116,6, 115,5, 82,9, 67,1, 54,8, 28,4, 24,4, 21,7, 16,9, 12,6;

МС: [M-1]^- =559,0.

Стадия 3: 4-[3-[2,4,6-трифтор-3-(пропилсульфониламино)бензоил]-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]бензолсульфонамид (4)

В сосуд загружали N-[3-[5-бром-1-(оксан-2-ил)пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил]-2,4,6-трифторфенил]пропан-1. -сульфонамид (3, 0,113 г, 0,201 ммоль), 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензолсульфонамид (62,7 мг, 0,221 ммоль) и XPhos Pd G3 (4,26 мг, 0,00503 ммоль) и продували аргоном. Добавляли дегазированный 1,4-диоксан (0,671 мл) и дегазированный 1,5 М карбонат калия (0,403 мл, 0,604 ммоль) и смесь нагревали до 65 °С в течение 1 часа. Добавляли раствор NH₄Cl и смесь экстрагировали EtOAc. Экстракты промывали солевым раствором, сушили над Na₂SO₄ и растворитель удаляли. Остаток растворяли в DCM (3 мл) и добавляли TFA (300 мкл) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Добавляли 3 мл TFA и перемешивание продолжали в течение 1 часа. Реакционную смесь гасили раствором NaHCO₃, экстрагировали EtOAc, сушили над Na₂SO₄ и растворитель удаляли. Остаток очищали флэш-хроматографией (DCM+MeOH от 1% до 11%) с получением 4-[3-[2,4,6-трифтор-3-(пропилсульфониламино)бензоил]-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]бензолсульфонамида (60,0 мг, 0,1070 ммоль, выход 53%).

Аналитические данные:

¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 15,02 (с, 1H), 9,66 (с, 1H), 9,10 (д, J=2,1 Гц, 1H), 8,85 (д, J=2,1 Гц, 1H), 8,02 (дд, J=37,6, 8,5 Гц, 4H), 7,59 (т, J=9,4 Гц, 1H), 7,47 (с, 2H), 3,14 (дд, J=8,7, 6,6 Гц, 2H), 1,88-1,73 (м, 2H), 0,99 (т, J=7,4 Гц, 3H);

¹³C ЯМР (101 МГц, ДМСО) δ 181,5, 152,4, 149,9, 143,5, 141,8, 140,3, 131,5, 128,2, 127,9, 126,4, 113,4, 54,7, 16,8, 12,5;

МС: [M-1]^- = 552,0.

Пример 53d: 4-[3-[3-(этилсульфамоиламино)-2,6-дифторбензоил]-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]бензолсульфонамид (5)

Стадия 1: N-этилсульфамоилхлорид (2)

По аналогии с процедурой, описанной в литературе: смесь этиламин гидрохлорида (2,00 г, 24,5 ммоль) и сульфурилхлорида (7,93 мл, 98,1 ммоль) в ацетонитриле (4,91 мл) нагревали до 75 °С в течение ночи. Смесь выпаривали, обрабатывали диэтиловым эфиром и фильтровали. Растворитель удаляли с получением N-этилсульфамоилхлорида (3,28 г, 22,8 ммоль, выход 93%), который использовали без дальнейшей характеристики.

Стадия 2: [5-бром-1-(оксан-2-ил) пиразоло[3,4-b]пиридин-3-ил]-[3-(этилсульфамоиламино)-2,6-дифторфенил]метанон (4)

К раствору (3-амино-2,6-дифторфенил)-[5-бром-1-(оксан-2-ил)пиразоло[3,4-b]пиридин-3-ил]метанона (90,0 мг, 0,206 ммоль) и триэтиламина (0,0373 мл, 0,268 ммоль) в DCM (0,823 мл) добавляли N-этилсульфамоилхлорид (35,5 мг, 0,247 ммоль) в DCM (0,823 мл) при 0 °C. После перемешивания в течение 10 минут при комнатной температуре смесь разбавляли DCM, промывали водой и раствором NH₄Cl, сушили над Na₂SO₄, фильтровали и растворитель удаляли при пониженном давлении с получением [5-бром-1-(оксан-2-ила)пиразоло[3,4-b]пиридин-3-ил]-[3-(этилсульфамоиламино)-2,6-дифторфенил]метанона (4, 0,110 г, 0,202 ммоль, выход 98%) в виде желтой пены, которую использовали без дальнейшей очистки.

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, CDCl₃) δ 8,85 (с, 1H), 8,67 (с, 1H), 7,69 (тд, J=8,9, 5,6 Гц, 1H), 7,01 (т, J=8,9 Гц, 1H), 6,73 (с, 1H), 6,15 (д, J=7,5 Гц, 1H), 4,75 (т, J=5,9 Гц, 1H), 4,13-3,97 (м, 1H), 3,90-3,67 (м, 1H), 3,24-3,04 (м, 2H), 2,63-2,31 (м, 1H), 2,21-1,51 (м, 5H), 1,16 (т, J=7,2 Гц, 3H).

¹³C ЯМР (50 МГц, CDCl₃) δ 182,6, 156,8 (дд, J=252,0, 6,7 Гц), 151,5 (дд, J=250,7, 7,5 Гц), 151,1, 149,7, 140,8, 133,8, 125,8 (дд, J=9,8, 2,0 Гц), 122,0 (дд, J=12,7, 3,5 Гц), 116,8, 116,6, 112,29 (дд, J=22,2, 3,8 Гц), 83,4, 68,3, 38,6, 29,0, 24,8, 22,5, 15,1.

Стадия 3: 4-[3-[3-(этилсульфамоиламино)-2,6-дифторбензоил]-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]бензолсульфонамид (5)

В сосуд загружали [5-бром-1-(оксан-2-ил) пиразоло[3,4-b]пиридин-3-ил]-[3-(этилсульфамоиламино)-2,6-дифторфенил]метанон (4). 94,0 мг, 0,173 ммоль), (4-сульфамоилфенил) бороновую кислоту (38,2 мг, 0,190 ммоль) и XPhos Pd G3 (4,38 мг, 0,00518 ммоль) и продували аргоном. Добавляли дегазированный 1,4-диоксан (0,576 мл) и дегазированный 1,5 М водный карбонат калия (0,345 мл, 0,518 ммоль) и смесь перемешивали при 65 °С в течение 1,5 часов. Насыщ. раствор NH₄Cl и EtOAc добавляли и фазы разделяли. Органическую фазу сушили над Na₂SO₄ и упаривали. Остаток растворяли в DCM (3 мл) и добавляли TFA (300 мкл) при комнатной температуре. Через 4 часа смесь гасили раствором NaHCO₃ и экстрагировали EtOAc. Экстракт сушили над Na₂SO₄ и растворитель удаляли. Продукт очищали флэш-хроматографией (DCM+MeOH от 1% до 11%) с получением 4-[3-[3-(этилсульфамоиламино)-2,6-дифторбензоил]-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]бензолсульфонамида (5, 35,0 мг, 0,0652 ммоль, выход 38%).

Аналитические данные:

¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 14,97 (с, 1H), 9,54 (с, 1H), 9,10 (д, J=2,0 Гц, 1H), 8,86 (д, J=1,9 Гц, 1H), 8,02 (дд, J=38,5, 8,3 Гц, 4H), 7,64 (тд, J=9,0, 5,9 Гц, 1H), 7,51-7,41 (м, 3H), 7,30 (т, J=8,7 Гц, 1H), 3,04-2,88 (м, 2H), 1,04 (т, J=7,2 Гц, 3H);

¹³C ЯМР (101 МГц, ДМСО) δ 182,8, 162,8, 152,4, 149,8, 143,5, 142,0, 140,3, 131,4, 128,2, 127,9, 126,4, 113,4, 37,2, 14,6;

МС: [M-1]^- = 535,0.

Пример 54: Синтез N-[3-(5-бром-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)-2,6-дифторфенил]метансульфонамида (6)

Стадия 1: N-(2,6-дифторфенил)ацетамид

2,6-дифторанилин (1,33 г, 25,9 ммоль) и уксусный ангидрид (2,56 мл, 27,2 ммоль) объединяли в DCM (34,5 мл) и перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь разбавляли DCM (50 мл), промывали водой и насыщенным бикарбонатом натрия, сушили над Na₂SO₄ и упаривали, получая N-(2,6-дифторфенил)ацетамид (2, 3,88 г, 22,7 ммоль, выход 88%) в виде белого твердого вещества.

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, ДМСО) δ 9,69 (с, 1Н), 7,43-7,23 (м, 1Н), 7,13 (т, J=7,9 Гц, 2Н), 2,08 (с, 3Н);

¹³C ЯМР (50 МГц, ДМСО) δ 168,5, 160,4, 160,3, 155,5, 155,4, 128,0, 127,8, 127,6, 115,1, 114,7, 114,4, 112,1, 112,0, 111,9, 111,8, 111,6, 111,6, 22,4, все пики регистрировали;

МС: [М+Н]⁺ = 171,9.

Стадия 2: 3-бром-2,6-дифторанилин (3)

N-(2,6-дифторфенил)ацетамид (2, 8,77 г, 51,2 ммоль) растворяли в серной кислоте (41,0 мл, 769 ммоль) и N-бромсукцинимид (9,12 г, 51,2 ммоль) добавляли порциями при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре и медленно гасили при перемешивании в ледяной воде (400 мл). Твердые вещества собирали вакуум-фильтрацией и снова промывали водой, гексаном, гексаном+EtOAc (8+2) и снова гексаном. Твердые вещества растворяли в этаноле (30,0 мл) и конц. HCl (30 мл) и кипятили с обратным холодильником в течение 3 часов. Смесь выливали в лед (400 г), нейтрализовали твердым NaOH и твердые вещества собирали фильтрованием под вакуумом, промывали водой и сушили в вакууме, получая 3-бром-2,6-дифторанилин (3, 7,83 г, 37,6 ммоль, выход 73%).

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, CDCl₃) δ 6,95-6,59 (м, 2Н), 3,84 (с, 2Н);

¹³C ЯМР (50 МГц, CDCl₃) δ 152,2 (дд, J=133,8, 6,5 Гц), 147,5 (дд, J=132,7, 6,9 Гц), 125,4 (т, J=16,9 Гц), 122, 119,6 (д, J=8,4 Гц), 111,7 (дд, J=19,9, 3,1 Гц), 103,8 (дд, J=19,2, 3,8 Гц).

Стадия 3: (3-амино-2,4-дифторфенил)-(5-бром-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-ил)метанон (5)

К 3-бром-2,6-дифторанилину (3, 12,9 г, 61,9 ммоль) в тетрагидрофуране (76,9 мл) добавляли по каплям 2М изопропилмагний хлорид в ТГФ (30,9 мл, 61,9 ммоль) при 0°C и перемешивали в течение 15 минут при комнатной температуре. После охлаждения до 0°С добавляли хлортриметилсилан (7,85 мл, 61,9 ммоль), смесь нагревали до 25°С и перемешивали в течение 20 минут. Суспензию охлаждали до 0°С и по каплям добавляли 2М изопропилмагний хлорид в ТГФ (30,9 мл, 61,9 ммоль) и перемешивали в течение 15 минут при комнатной температуре. После охлаждения до 0°С добавляли хлортриметилсилан (7,85 мл, 61,9 ммоль), перемешивание продолжали в течение 20 минут при 25°С. Суспензию снова охлаждали до 0°С и по каплям добавляли 2М изопропилмагний хлорид в ТГФ (30,9 мл, 61,9 ммоль) и смесь перемешивали в течение 10 минут при 0°С (раствор А). Тем временем 2М изопропилмагний хлорид в ТГФ (13,5 мл, 26,9 ммоль) по каплям добавляли к суспензии 5-бром-N-метокси-N-метил-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбоксамида (4, 7,67 г, 26,9 ммоль) в тетрагидрофуране (76,9 мл) при 0°С. Полученную суспензию перемешивали в течение 5 минут и переносили в раствор А. Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, конц. HCl (26,9 мл, 323 ммоль) добавляли и перемешивали в течение 10 минут. Воду добавляли до тех пор, пока фазы не стали прозрачными. Смесь нейтрализовали 2Н NaOH, насыщали NaCl и экстрагировали ТГФ. Экстракты промывали солевым раствором, сушили над Na₂SO₄ и фильтровали. После выпаривания растворителя твердые вещества перемешивали в 100 мл DCM, собирали вакуум-фильтрацией, и сушили с получением 6,35 г первого предшественника в виде светло-желтого твердого вещества. Фильтрат упаривали, растирали с диэтиловым эфиром и DCM с получением второго предшественника (0,41 г). Общий выход (3-амино-2,4-дифторфенил)-(5-бром-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-ил) метанона (5, 6,76 г, 19,1 ммоль, выход 71%).

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, ДМСО) δ 14,55 (с, 1H), 8,65 (дд, J=5,2, 2,1 Гц, 2H), 7,13-6,86 (м, 2H), 5,44 (с, 2H);

¹³C ЯМР (50 МГц, ДМСО) δ 186,1, 153,5 (дд, J=188, 9 Гц), 150,8, 150,3, 148,6 (дд, J=191, 9 Гц), 141,1, 132,5, 126,1 (т, J=17). Гц), 122,8 (дд, J=12, 3 Гц), 116,2 (дд, J=9, 3 Гц), 115,4, 115, 110,6 (дд, J=19, 3 Гц);

МС: [M-1]^- = 351,2.

Стадия 4: N-[3-(5-бром-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)-2,6-дифторфенил]метансульфонамид (6)

К суспензии (3-амино-2,4-дифторфенил)-(5-бром-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-ил)метанона (5, 0,620 г, 1,76 ммоль) в пиридине (2,83 мл, 35,1 ммоль) добавляли метансульфонилхлорид (0,544 мл, 7,02 ммоль) при комнатной температуре 50°C в течение 2 часов. Реакционную смесь концентрировали и растворяли в 2 М растворе гидроксида натрия (13,2 мл, 26,3 ммоль) и перемешивали в течение 15 минут. Раствор выливали в охлажденную 3Н HCl 20 мл, экстрагировали EtOAc и экстракты промывали 2Н HCl, сушили над Na₂SO₄ и упаривали. Продукт очищали флэш-хроматографией (DCM+EtOAc от 0 до 40%), получая N-[3-(5-бром-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)-2,6-дифторфенил]метансульфонамид (0,390 г, 0,9040 ммоль, выход 52%) в виде красного твердого вещества.

Аналитические данные:

¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 14,87 (с, 1H), 9,75 (с, 1H), 8,71 (д, J=13,9 Гц, 2H), 7,85 (д, J=6,6 Гц, 1H), 7,39 (т J=8,5 Гц, 1Н), 3,12 (с, 3Н);

¹³C ЯМР (101 МГц, ДМСО) δ 184,7, 160,8 (дд, J=255, 3 Гц), 157,06 (дд, J=257,4, 4,2 Гц), 150,8, 150,5, 140,9, 132,4, 130,6 (дд, J=10, 3 Гц), 123,3 (дд, J=13, 3 Гц), 115,4, 115,1, 114,3 (т, J=17 Гц), 111,9 (дд, J=21, 3 Гц), 41,5;

МС: [M-1]^- = 429,1.

Пример 54а: N-[2,6-дифтор-3-[5-[4-(1Н-тетразол-5-ил)фенил]-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил]фенил]метансульфонамид

В микроволновую камеру загружали N-[3-(5-бром-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)-2,6-дифторфенил]метансульфонамид (60,0 мг, 0,139 ммоль), XPhos Pd G3 (3,53 мг, 0,00417 ммоль) и [4-(1H-тетразол-5-ил)фенил] бороновую кислоту (31,7 мг, 0,167 ммоль) и продували аргоном. Добавляли дегазированный 1,4-диоксан (0,464 мл) и дегазированный водный 1,5 М карбонат калия (0,325 мл, 0,487 ммоль) и смесь нагревали до 110°С при микроволновом облучении в течение 60 минут. После охлаждения смесь разбавляли EtOAc и нейтрализовали насыщенным раствором NH₄Cl. Органическую фазу концентрировали при пониженном давлении и продукт выделяли флэш-хроматографией (DCM+MeOH (+ 1% муравьиная кислота) от 5% до 15%), растирали с MeOH и сушили при 100°C в вакуумной печи с получением N-[ 2,6-дифтор-3-[5-[4-(1H-тетразол-5-ил)фенил]-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил]фенил]метансульфонамида (21,0 мг, 0, 0423 ммоль, выход 30%).

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, ДМСО) δ 14,85 (с, 1H), 9,75 (с, 1H), 9,10 (д, J=2,1 Гц, 1H), 8,86 (д, J=2,2 Гц, 1H), 8,25-8,00 (м, 4H), 7,97-7,81 (м, 1H), 7,41 (тд, J=8,9, 1,3 Гц, 1H), 3,12 (с, 3H);

МС: [M-1]^- = 495,2.

Пример 54b: 4-[3-[2,4-дифтор-3-(метансульфонамидо)бензоил]-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]бензамид

В микроволновую камеру загружали N-[3-(5-бром-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)-2,6-дифторфенил]метансульфонамид (60,0 мг, 0,139 ммоль), XPhos Pd G3 (5,89 мг, 0,00696 ммоль) и (4-карбамоилфенил)бороновую кислоту (27,5 мг, 0,167 ммоль) и продували аргоном. Добавляли дегазированный 1,4-диоксан (0,464 мл) и дегазированный водный 1,5 М карбонат калия (0,325 мл, 0,487 ммоль) и смесь нагревали до 110°С при микроволновом облучении в течение 60 минут. После охлаждения смесь разбавляли EtOAc и нейтрализовали насыщенным раствором NH₄Cl. Растворители удаляли при пониженном давлении и продукт выделяли флэш-хроматографией (DCM+MeOH, от 5% до 15%) и сушили при 100°C в вакуумной печи с получением 4-[3-[2,4-дифтор-3-(метансульфонамидо)бензоил]-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]бензамида (40,0 мг, 0,0789 ммоль, выход 57%).

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, ДМСО) δ 9,06 (д, J=1,9 Гц, 1H), 8,82 (д, J=2,0 Гц, 1H), 8,14-7,80 (м, 6H), 7,49-7,33 (м, 2H) 3,11 (с, 3Н);

МС: [M-1]^- = 470,3

Пример 54с: 4-[3-[2,4-дифтор-3-(метансульфонамидо)бензоил]-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]бензолсульфонамид

В микроволновую камеру загружали N-[3-(5-бром-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)-2,6-дифторфенил]метансульфонамид (60,0 мг, 0,139 ммоль), XPhos Pd G3 (5,89 мг, 0,00696 ммоль) и 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензолсульфонамид (47,3 мг, 0,167 ммоль) и продували аргоном. Добавляли дегазированный 1,4-диоксан (0,464 мл) и дегазированный водный 1,5 М карбонат калия (0,325 мл, 0,487 ммоль) и смесь нагревали до 110°C при микроволновом облучении в течение 60 минут. После охлаждения смесь разбавляли EtOAc и нейтрализовали насыщенным раствором NH₄Cl. Растворители удаляли при пониженном давлении и продукт выделяли флэш-хроматографией (DCM+EtOAc, от 50% до 100%) и сушили при 100°C в вакуумной печи с получением 4-[3-[2,4-дифтор-3-(метансульфонамидо)бензоил]-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]бензолсульфонамида (31,0 мг, 0,0574 ммоль, выход 41%). ¹H ЯМР (200 МГц, ДМСО) δ 9,07 (д, J=2,1 Гц, 1H), 8,84 (д, J=2,1 Гц, 1H), 8,12-7,78 (м, 4H), 7,50-7,32 (м, 2H) 3,11 (с, 3Н); [М-1]^- = 506,2.

Пример 55: Синтез 4-[3-[2,4-дифтор-3-(метансульфонамидо)бензоил]-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]бензойной кислоты (4) и этил 4-[3-[2,4-дифтор-3-(метансульфонамидо)бензоил]-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]бензоата (5)

Стадия 1: N-[3-[5-бром-1-(оксан-2-ил) пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил]-2,6-дифторфенил]метансульфонамид (2)

К суспензии N-[3-(5-бром-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)-2,6-дифторфенил]метансульфонамида (380 мг, 0,881 ммоль) и моногидрата п-толуолсульфоновой кислоты (33,5 мг, 0,176 ммоль) в DCM (2,94 мл) добавляли дигидропиран (0,161 мл, 1,76 ммоль) и реакционную смесь нагревали до температуры кипения с обратным холодильником в течение 1 часа. Реакционную смесь разбавляли DCM, промывали насыщенным раствором NaHCO₃, сушили над Na₂SO₄ и концентрировали. Остаток растирали с н-гексаном, получая N-[3-[5-бром-1-(оксан-2-ил)пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил]-2,6-дифторфенил]метансульфонамид (370 мг, 0,7180 ммоль, выход 81%) в виде твердого вещества бежевого цвета.

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, ДМСО) δ 9,78 (с, 1H), 8,80 (дд, J=13,4, 1,6 Гц, 2H), 7,88 (дд, J=14,6, 7,8 Гц, 1H), 7,43 (т, J=9,0 Гц, 1H), 6,14 (д, J=8,6 Гц, 1H), 3,94 (д, J=11,6 Гц, 1H), 3,72 (дд, J=14,6, 9,1 Гц, 1H), 3,13 (с, 3H) 2,46-2,19 (м, 1H); 2,00-1,18 (м, 5H);

¹³C ЯМР (50 МГц, ДМСО) δ 184,4, 150,8, 149,0, 139,9, 133,0, 116,1, 116,0, 82,7, 67,2, 41,5, 28,5, 24,5, 21,8;

МС: [M-1]^- = 513,2.

Стадия 2: 4-[3-[2,4-дифтор-3-(метансульфонамидо)бензоил]-1-(оксан-2-ил)пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]бензойная кислота (3)

N-[3-[5-бром-1-(оксан-2-ил)пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил]-2,6-дифторфенил]метансульфонамид (355 мг, 0,689 ммоль) и 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензойную кислоту (188 мг, 0,758 ммоль)d XPhos Pd G3 (17,5 мг, 0,0207 ммоль) объединяли в дегазированном 1, 4-диоксане (2,30 мл) и 1,5 М карбонате калия (2,07 мл, 3,10 ммоль). Реакционную смесь вакуумировали и продували аргоном (3 раза). Добавляли XPhos Pd G3 (17,5 мг, 0,0207 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при температуре масляной ванны 60°C в течение 3 часов. После охлаждения смесь подкисляли 2Н HCl и экстрагировали EtOAc. Экстракт промывали солевым раствором, сушили над Na₂SO₄ и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (DCM+MeOH от 3% до 25%) и растирали с н-гексаном с получением 4-[3-[2,4-дифтор-3-(метансульфонамидо)бензоил]-1-(оксан-2-ил)пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]бензойной кислоты (276 мг, 0,4960 ммоль, выход 72%).

Аналитические данные:

¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 9,77 (с, 1H), 9,10 (д, J=2,1 Гц, 1H), 8,83 (д, J=2,1 Гц, 1H), 8,09 (д, J=8,3 Гц, 2H), 7,96 (д, J=8,3 Гц, 2H), 7,90 (дд, J=14,8, 7,6 Гц, 1H), 7,44 (т, J=8,8 Гц, 1H), 6,21 (дд, J=9,9, 2,0 Гц), 1H), 4,01-3,91 (м, 1H), 3,80-3,68 (м, 1H), 3,59 (т, J=6,6 Гц, 2H), 3,13 (с, 3H), 2,46-2,33 (м, 1H), 2,06-1,93 (м, 2H), 1,84-1,68 (м, 2H);

МС: [M-1]^- = 555,4.

Стадия 3: 4-[3-[2,4-дифтор-3-(метансульфонамидо)бензоил]-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]бензойная кислота (4)

4-[3-[2,4-дифтор-3-(метансульфонамидо)бензоил]-1-(оксан-2-ил) пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]бензойную кислоту (203 мг, 0,365 ммоль) суспендировали в 3Н HCl и нагревали до 70°С при перемешивании в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали, твердые вещества собирали вакуум-фильтрацией, промывали водой и сушили при 100°С с получением 4-[3-[2,4-дифтор-3-(метансульфонамидо)бензоил]-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]бензойной кислоты (133 мг, 0,2820 ммоль, выход 77%).

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, ДМСО) δ 9,06 (д, J=2,1 Гц, 1H), 8,83 (д, J=2,1 Гц, 1H), 8,10 (д, J=8,3 Гц, 2H), 8,00-7,80 (м, 3H), 7,40 (тд, J=9,0, 1,3 Гц, 1H), 3,12 (с, 3H);

МС: [M-1]^- = 471,2.

Стадия 4: этил 4-[3-[2,4-дифтор-3-(метансульфонамидо)бензоил]-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]бензоат (5)

4-[3-[2,4-дифтор-3-(метансульфонамидо)бензоил]-1-(оксан-2-ил) пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]бензойную кислоту (50,0 мг, 0,0898 ммоль) перемешивали в 1,25 М HCl в этаноле (0,719 мл, 0,898 ммоль) при 75°С в герметичном сосуде. Через 3 часа добавляли 200 мкл H₂SO₄ и перемешивание продолжали при 75°C в течение ночи. Реакцию гасили в растворе NaHCO₃, твердые вещества собирали центрифугированием, промывали водой и диэтиловым эфиром и сушили в вакууме, получая этил 4-[3-[2,4-дифтор-3-(метансульфонамидо)бензоил]-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]бензоат (22,0 мг, 0,0440 ммоль, выход 49%).

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, ДМСО) δ 14,86 (с, 1H), 9,74 (с, 1H), 9,06 (д, J=2,1 Гц, 1H), 8,83 (д, J=2,1 Гц, 1H), 8,18-7,80 (м, 5H), 7,41 (т, J=8,9 Гц, 1H), 4,36 (кв, J=7,0 Гц, 2H), 3,12 (с, 3H), 1,35 (т, J=7,0 Гц, 3H);

МС: [M-1]^- = 499,4.

Пример 56: Синтез [(2S)-2-амино-3-метокси-3-оксопропил] 4-[3-[2,4-дифтор-3-(метансульфонамидо)бензоил]-1H-пиразоло[3,4- б]пиридин-5-ил]бензоат гидрохлорид

Стадия 1: [(2S)-3-метокси-2 -[(2-метилпропан-2-ил) оксикарбониламино]-3-оксопропил] 4-бромбензоат

4-Бромбензоилхлорид (1,13 г, 5,15 ммоль) растворяли в 25,7 мл ТГФ и охлаждали до 0°С. Добавляли триэтиламин (0,861 мл, 6,18 ммоль) и к полученной суспензии добавляли метил (2S)-3-гидрокси-2-[(2-метилпропан-2-ил)оксикарбониламино]пропаноат (1,35 г, 6,18 ммоль) и 4-DMAP (31,5 мг, 0,257 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 60 минут, затем разбавляли EtOAc и промывали водой, насыщ. NaHCO₃ и насыщ. раствором NH₄Cl. После сушки над Na₂SO₄ растворитель удаляли в вакууме. Остаток растворяли в небольшом количестве МеОН и добавляли в воду при перемешивании. Твердые вещества собирали вакуум-фильтрацией и сушили с получением [(2S)-3-метокси-2 -[(2-метилпропан-2-ил) оксикарбониламино]-3-оксопропил] 4-бромбензоата (1,70 г, 4,23 ммоль, выход 82%).

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, CDCl₃) δ 7,89-7,78 (м, 2H), 7,61-7,50 (м, 2H), 5,38 (д, J=8,0 Гц, 1H), 4,70 (дд, J=8,2, 4,0 Гц, 1H), 4,59 (д, J=4,0 Гц, 2H), 3,76 (д, J=4,3 Гц, 3H), 1,42 (д, J=4,2 Гц, 9H).

¹³C ЯМР (50 МГц, CDCl₃) δ 170,4, 165,4, 155,2, 132,0, 131,3, 128,7, 128,5, 80,6, 65,3, 53,1, 52,9, 28,4.

МС (ESI +): m/z 424,04 [М+1]⁺.

Стадия 2: N-(2,6-дифтор-3-(1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)фенил)метансульфонамид

В сосуд загружали N-[3-[5-бром-1-(оксан-2-ил)пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил]-2,6-дифторфенил]метансульфонамид (0,630 г, 1,22 ммоль), бис(пинаколато)диборон (341 мг, 1,34 ммоль), безводный ацетат калия (360 мг, 3,67 ммоль) и сухой 1,4-диоксан (4,08 мл). Сосуд вакуумировали и заполняли аргоном (3х). Добавляли 1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен-дихлорпалладий (1: 1) (17,9 мг, 0,0245 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при 80°C в течение ночи. После охлаждения добавляли EtOAc, суспензию перемешивали в течение 30 минут и фильтровали через целит. Растворитель концентрировали, добавляли н-гептан и твердые вещества собирали вакуум-фильтрацией, промывали гексаном и сушили с получением N-[2,6-дифтор-3-[1-(оксан-2-ил)-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил]фенил]метансульфонамида (0,690 г, 1,23 ммоль, колич.).

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, ДМСО) δ 8,94-8,71 (м, 2Н), 7,19-6,88 (м, 2Н), 6,18 (д, J=9,1 Гц, 1Н), 4,05-3,61 (м, 2Н), 2,64 (с, 3Н), 2,44-1,10 (м, 18Н).

Стадия 3: [(2S)-3-метокси-2-[(2-метилпропан-2-ил)оксикарбониламино]-3-оксопропил]4-[3-[2,4-дифтор-3-(метансульфонамидо)бензоил]-1-(оксан-2-ил)пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]бензоат

В сосуд загружали N-[2,6-дифтор-3-[1-(оксан-2-ил)-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил]фенил]метансульфонамид (101 мг, 0,180 ммоль), [(2S)-3-метокси-2-[(2-метилпропан-2-ил)оксикарбониламино]-3-оксопропил]4-бромбензоат (79,5 мг, 0,198 ммоль), фторид калия (31,3 мг, 0,539 ммоль), Pd(dppf)Cl₂ DCM (7,33 мг, 0,00898 ммоль) и дегазированный 1,4-диоксан/вода (4+1) (0,6 мл) с последующим вакуумированием и заполнением аргоном (3х). Реакционную смесь нагревали до 65 °С в течение ночи при перемешивании. Смесь разбавляли EtOAc, промывали солевым раствором и растворители удаляли. Продукт выделяли с помощью флэш-хроматографии (градиент DCM/EtOAc, от 0% до 20% EtOAc), получая [(2S)-3-метокси-2-[(2-метилпропан-2-ил) оксикарбониламино]-3-оксопропил]4-[3-[2,4-дифтор-3-(метансульфонамидо)бензоил]-1-(оксан-2-ил)пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]бензоат (68,0 мг, 0 (0897 ммоль, 50% выход) в виде белого твердого вещества.

Аналитические данные:

¹H ЯМР (400 МГц, ацетон) δ 9,00 (д, J=2,0 Гц, 1H), 8,85 (д, J=2,1 Гц, 1H), 8,47 (с, 1H), 8,17 (д, J=8,3 Гц, 2H), 7,97-7,89 (м, 3H), 7,33 (т, J=8,5 Гц, 1H), 6,65 (д, J=7,6 Гц, 1H), 6,26 (дд, J=9,9, 2,3 Гц, 1H), 4,79 4,58 (м, 3H), 4,02 (д, J=11,4 Гц, 1H), 3,85-3,69 (м, 4H), 3,21 (с, 3H), 2,60-2,46 (м, 1H), 2,17-2,06 (м., 1Н), 2,04-1,96 (м, 1Н), 1,92-1,78 (м, 1Н), 1,74-1,57 (м, 2Н), 1,42 (с, 9Н).

¹³C ЯМР (101 МГц, ацетон) δ 185,7, 171,1, 166,2, 162,2 (дд, J=256, 3 Гц), 158,7 (дд, J=258, 5 Гц), 156,4, 151,9, 150,3, 143,3, 142,2, 133,6, 131,6 (дд, J=11, 4 Гц), 131,3, 130,3, 130,2, 128,6, 124,7 (дд, J=14, 4 Гц), 116,2, 115,8 (т, J=17 Гц), 112,7 (дд, J=21, 4 Гц), 83,9, 79,8, 68,3, 65,4, 54,0, 52,8, 42,1, 29,8, 29,8, 28,6, 25,7, 23,1.

ТСХ-МС (ESI-): m/z 756,5 [М-1]^-.

Стадия 4: [(2S)-2-амино-3-метокси-3-оксопропил]4-[3-[2,4-дифтор-3-(метансульфонамидо)бензоил]-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]бензоат гидрохлорид

[(2S)-3-метокси-2-[(2-метилпропан-2-ил)оксикарбониламино]-3-оксопропил]4-[3-[2,4-дифтор-3-(метансульфонамидо)бензоил]-1-(оксан-2-ил)пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]бензоат (63,0 мг, 0,0831 ммоль) перемешивали в трифторуксусной кислоте (1 мл) при комнатной температуре в течение 3 часов. Смесь нагревали до 50 °С в течение 40 мин. После охлаждения на льду к раствору добавляли 4 Н HCl (1,04 мл, 4,16 ммоль) в 1,4-диоксане, перемешивание продолжали в течение 5 минут и добавляли диэтиловый эфир (3 мл). Продукт собирали вакуум-фильтрацией, промывали диэтиловым эфиром и сушили в вакууме с получением [(2S)-2-амино-3-метокси-3-оксопропил]4-[3-[2,4-дифтор-3-(гидрохлоридметансульфонамидо)бензоил]-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]бензоата (44,0 мг, 0,0721 ммоль, выход 87%) в виде желтоватого твердого вещества.

Аналитические данные:

¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 14,92 (с, 1H), 9,76 (с, 1H), 9,10 (д, J=2,0 Гц, 1H), 8,97 (с, 2H), 8,86 (д, J=2,1 Гц), 1H), 8,20 (д, J=8,5 Гц, 2H), 8,03 (д, J=8,3 Гц, 2H), 7,88 (дд, J=14,7, 7,6 Гц, 1H), 7,41 (т, J=8,7 Гц), 1H), 4,73 (д, J=3,3 Гц, 2H), 4,67 (с, 1H), 3,81 (с, 3H), 3,12 (с, 3H).

¹³C ЯМР (101 МГц, ДМСО) δ 185,1, 167,4, 164,8, 152,2, 149,5, 142,3, 141,8, 131,1, 130,5, 128,5, 128,0, 127,5, 114,0, 62,2, 53,1, 51,3, 41,5, 40,1.

ТСХ-МС (ESI-): m/z 572,4 [М-1].

Пример 57: Синтез гидрохлорида (2S)-2-амино-3-[4-[3-[2,4-дифтор-3-(метансульфонамидо)бензоил]-1H-пиразоло[3,4-b]пиридина-5-ил]бензоил]оксипропановой кислоты

Стадия 1: бензил(2S)-3-гидрокси-2-[(2-метилпропан-2-ил)оксикарбониламино]пропаноата

Раствор ди-трет-бутилдикарбоната (7,06 мл, 30,7 ммоль) в 1,4-диоксане (14,5 мл) добавляли к раствору (2S)-2-амино-3-гидроксипропановой кислоты (2,69 г, 25,6 ммоль)и карбоната калия (3,54 г, 25,6 ммоль) в воде (14,5 мл). Раствор перемешивали в течение 16 часов при комнатной температуре. 1,4-Диоксан выпаривали и водный раствор промывали 3 × диэтиловым эфиром (10 мл). Воду упаривали в вакууме и оставшиеся следы азеотропно удаляли с помощью EtOH. Полученный белый порошок суспендировали в DMF (28,9 мл) и добавляли бензилбромид (3,44 мл, 28,9 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. DMF выпаривали в вакууме и остаток перемешивали с толуолом (28,9 мл) и фильтровали. Фазу дважды промывали водой и солевым раствором и сушили над Na₂SO₄. После фильтрации растворитель выпаривали при 90°С в вакууме. Масляный бензил(2S)-3-гидрокси-2-[(2-метилпропан-2-ил)оксикарбониламино]пропаноат (4,77 г, 16,2 ммоль, выход 63%) использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, CDCl₃) δ 7,34 (с, 5H), 5,56 (с, 1H), 5,20 (с, 2H), 4,40 (с, 1H), 3,92 (кд, J=11,2, 3,7 Гц, 2H) 2,46 (с, 1H), 1,43 (с, 9H).

Стадия 2: [(2S)-2-[(2-метилпропан-2-ил)оксикарбониламино]-3-оксо-3-фенилметоксипропил] 4-бромбензоат

К раствору 4-бромбензоилхлорида (0,500 г, 2,28 ммоль) в ТГФ (11,4 мл) добавляли триэтиламин (0,381 мл, 2,73 ммоль) и 4-DMAP (0,0139 г, 0,114 ммоль). К полученной суспензии добавляли бензил (2S)-3-гидрокси-2-[(2-метилпропан-2-ил)оксикарбониламино]пропаноат (0,807 г, 2,73 ммоль) в 2 мл ТГФ и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 60 минут. Реакционную смесь разбавляли EtOAc, промывали водой, насыщ. NaHCO₃ и насыщ. раствором NH₄Cl. После сушки над Na₂SO₄ растворитель удаляли в вакууме. Продукт очищали флэш-хроматографией (градиент н-гексан/EtOAc, от 0% до 20% EtOAc) с получением [(2S)-2-[(2-метилпропан-2-ил)оксикарбониламино]-3-оксо-3-фенилметоксипропил]4-бромбензоата (0,501 г, 1,05 ммоль, выход 46%) в виде белого твердого вещества.

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, ДМСО) δ 7,84 (д, J=8,5 Гц, 2H), 7,75-7,64 (м, 3H), 7,38-7,23 (м, 5H), 5,26-5,03 (м, 2H), 4,55 (дд, J=16,6, 7,0 Гц, 3H), 1,38 (с, J=14,3 Гц, 9H).

¹³C ЯМР (50 МГц, ДМСО) δ 169,6, 164,7, 155,4, 135,7, 131,7, 131,3, 128,5, 128,3, 128,0, 127,7, 127,5, 78,6, 66,3, 52,7, 28,1.

МС: [М+Na]⁺ = 500,3.

Стадия 3: [(2S)-2-[(2-метилпропан-2-ил)оксикарбониламино]-3-оксо-3-фенилметоксипропил]4-[3-[2,4-дифтор-3-(метансульфонамидо)бензоил]-1-(оксан-2-ил)пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]бензойная кислота

В сосуд загружали [(2S)-2-[(2-метилпропан-2-ил)оксикарбониламино]-3-оксо-3-фенилметоксипропил]4-бромбензоат (124 мг, 0,260 ммоль), N-[2,6дифтор-3-[1-(оксан-2-ил)-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил]фенил]метансульфонамид (146 мг, 0,260 ммоль), Pd(dppf)Cl₂ DCM (10,6 мг, 0,0130 ммоль), фторид калия (45,2 мг, 0,779 ммоль) и дегазированный 1,4-диоксан/вода (4+1) (0,8 мл), и сосуд вакуумировали и заполняли аргоном (3х). Реакционную смесь нагревали до 50 °С при перемешивании в течение 6 часов. Смесь разбавляли EtOAc, промывали солевым раствором и растворители удаляли. Продукт выделяли с помощью флэш-хроматографии (3-кратный объем колонки гексан/EtOAc (80/20 об./об., Затем DCM/EtOAc 80/20 об./об., чтобы элюировать продукт) с получением [(2S)-2-[(2-метилпропан-2-ил)оксикарбониламино]-3-оксо-3-фенилметоксипропил]4-[3-[2,4-дифтор-3-(метансульфонамидо)бензоил]-1-(оксан-2-ил)пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]бензоата (147 мг, 0,1760 ммоль, выход 68%) в виде белого твердого вещества.

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, ацетон) δ 9,06 (с, 1Н), 8,90 (с, 1Н), 8,55 (с, 1Н), 8,22-7,89 (м, 5Н), 7,59-7,31 (м, 5Н), 6,82 (d, J=7,6 Гц, 1H), 6,34 (д, J=9,2 Гц, 1H), 5,44-5,23 (м, 2H), 4,99-4,72 (м, 3H), 4,20-3,76 (м, 2H), 3,30 (с, 3Н), 2,62 (дд, J=20,1, 9,7 Гц, 1Н), 2,25-1,61 (м, 5Н), 1,60-1,32 (м, 10Н).

¹³C ЯМР (50 МГц, ацетон) δ 185,7, 170,6, 166,1, 156,4, 151,7, 150,3, 143,1, 142,1, 136,8, 133,5, 131,3, 130,1, 129,3, 129,0, 128,9, 128,4, 116,1, 83,8, 79,8, 68,3, 67,6 65,4, 54,2, 42,0, 29,7, 28,5, 25,7, 23,1.

ТСХ-МС (ESI-): m/z 833,0 [М-1]^-.

Стадия 4: гидрохлорид (2S)-2-амино-3-[4-[3-[2,4-дифтор-3-(метансульфонамидо)бензоил]-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]бензоил]оксипропановой кислоты

[(2S)-2-[(2-метилпропан-2-ил)оксикарбониламино]-3-оксо-3-фенилметоксипропил]4-[3-[2,4-дифтор-3-(метансульфонамидо)бензоил]-1-(оксан-2-ил)пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]бензоат (142 мг, 0,170 ммоль) растворяли в EtOAc (1,70 мл) и добавляли 14 мг палладия на активированном угле (10%), Реакционную смесь перемешивали в атмосфере Н2 (3 бар) в течение ночи. Реакционную смесь дегазировали, добавляли 5 мг палладия на активированном угле (10%) и реакционную смесь перемешивали в атмосфере Н 5 при 5 бар (в течение 6 часов). Реакционную смесь фильтровали через целит и растворитель удаляли. Остаток растворяли в 2 мл TFA и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. 4Н HCl в диоксане (2 мл) добавляли при охлаждении льдом. Через 5 минут добавляли 5 мл ТГФ и твердые вещества собирали вакуум-фильтрацией, промывали ТГФ и сушили в вакууме с получением гидрохлорида (2S)-2-амино-3-[4-[3-[2,4-дифтор-3-(метансульфонамидо)бензоил]-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]бензоил]оксипропановой кислоты (50,0 мг, 0,0814 ммоль, выход 48%) в виде желтоватого твердого вещества.

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, ДМСО) δ 14,92 (с, 1H), 9,76 (с, 1H), 9,10 (д, J=2,1 Гц, 1H), 8,86 (д, J=2,1 Гц, 1H), 8,78 (с, 3H), 8,22 (д, J=8,5 Гц, 2H), 8,03 (д, J=8,5 Гц, 2H), 7,88 (дд, J=15,0, 7,6 Гц, 1H), 7,41 (тд, J=8,9, 1,2 Гц, 1Н), 4,71 (с, 2Н), 4,53 (с, 1Н), 3,12 (с, 3Н).

¹³C ЯМР (50 МГц, ДМСО) δ 185,2, 168,4, 164,9, 152,3, 149,6, 142,4, 141,9, 131,1, 130,5, 128,6, 128,2, 127,6, 114,1, 66,3, 51,4, 41,5.

ТСХ-МС (ESI-): m/z 558,2 [М-1]^-.

Пример 58. Синтез гидрохлорида 5-[3-[2,4-дифтор-3-(метансульфонамидо)бензоил]-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]пиридин-2-карбоновой кислоты

Стадия 1. Метил5-[3-[2,4-дифтор-3-(метансульфонамидо)бензоил]-1-(оксан-2-ил)пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]пиридин-2-карбоксилат

В сосуд загружали N-[2,6-дифтор-3-[1-(оксан-2-ил)-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил]фенил]метансульфонамид (132 мг, 0,235 ммоль), метил 5-бромпиридин-2-карбоксилат (55,8 мг, 0,258 ммоль), фторид калия (40,9 мг, 0,704) ммоль), Pd(dppf)Cl₂·DCM (9,58 мг, 0,0117 ммоль) и дегазированный 1,4-диоксан/вода (4+1) (0,6 мл), и сосуд вакуумировали и заполняли аргоном (3х). Реакционную смесь нагревали до 50°С в течение ночи при перемешивании. Смесь разбавляли EtOAc, промывали солевым раствором и растворители удаляли. Продукт выделяли с помощью флэш-хроматографии (градиент DCM/EtOAc, от 20% до 60% EtOAc), получая метил 5-[3-[2,4-дифтор-3-(метансульфонамидо)бензоил]-1-(оксан-2-ил)пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]пиридин-2-карбоксилат (97,0 мг, 0,1700 ммоль, выход 72%) в виде белого твердого вещества.

Аналитические данные:

¹H ЯМР (400 МГц, ацетон) δ 9,14 (д, J=1,9 Гц, 1H), 9,06 (д, J=2,1 Гц, 1H), 8,91 (д, J=2,1 Гц, 1H), 8,40 (дд, J=8,1, 2,3 Гц, 1H), 8,22 (д, J=8,1 Гц, 1H), 7,95 (дд, J=14,9, 7,5 Гц, 1H), 7,34 (дд, J=8,8, 8,0 Гц, 1H), 6,27 (дд, J=9,9, 2,4 Гц, 1H), 4,09-3,91 (м, 4H), 3,80 (тд, J=11,2, 3,5 Гц, 1H), 3,21 (с, 3H), 2,54 (ддд, J=16,4 13,3, 4,0 Гц, 1Н), 2,19-2,06 (м, 1Н), 2,05-1,97 (м, 1Н), 1,94-1,77 (м, 1Н), 1,76-1,56 (м, 2Н).

¹³C ЯМР (101 МГц, ацетон) δ 185,7, 166,1, 162,3 (дд, J=256, 3 Гц), 158,7 (дд, J=258, 5 Гц), 152,0, 150,3, 149,3, 148,5, 142,3, 137,3, 136,7, 131,63 (дд, J=10,9, 3,2 Гц), 130,7, 125,9, 124,7 (дд, J=14, 4 Гц), 116,2, 115,8 (т, J=17 Гц), 112,8 (дд, J=21, 4 Гц), 83,9, 68,4, 52,8, 42,1, 29,8, 25,8, 23,1.

ТСХ-МС (ESI-): m/z 570,4 [М-1]^-.

Стадия 2: метил5-[3-[2,4-дифтор-3-(метансульфонамидо)бензоил]-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]пиридин-2-карбоксилат

К раствору метил 5-[3-[2,4-дифтор-3-(метансульфонамидо)бензоил]-1-(оксан-2-ил)пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]пиридин-2-карбоксилата (60,0 мг, 0,105 ммоль) в МеОН (0,525 мл) добавляли метансульфокислоту (0,0273 мл, 0,420 ммоль) и смесь перемешивали при 65°С в течение 1,5 часов. Смесь охлаждали до комнатной температуры и медленно добавляли в 15 мл диэтилового эфира, твердое вещество собирали вакуумной фильтрацией, промывали диэтиловым эфиром и сушили в вакууме с получением метила 5-[3-[2,4-дифтор-3-(метансульфонамидо)бензоил]-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]пиридин-2-карбоксилата (36,0 мг, 0,0739 ммоль, выход 70%) в виде белого твердого вещества.

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, CDCl₃) δ 14,90 (с, 1H), 9,74 (с, 1H), 9,16 (дд, J=12,4, 1,9 Гц, 2H), 8,93 (д, J=2,0 Гц, 1H), 8,47 (дд, J=8,2, 2,3 Гц, 1H), 8,19 (д, J=8,3 Гц, 1H), 7,88 (дд, J=14,8, 7,7 Гц, 1H), 7,41 (т, J=8,7 Гц, 1H) 3,93 (с, 3Н), 3,12 (с, 3Н).

¹³C ЯМР (50 МГц, CDCl₃) δ 185,1, 165,0, 152,4, 149,6, 148,3, 146,5, 141,9, 136,1, 136,0, 129,2, 128,4, 125,0, 114,0, 52,5, 41,5.

МС: [М+Na]⁺ = 510,4.

Стадия 3: гидрохлорид 5-[3-[2,4-дифтор-3-(метансульфонамидо)бензоил]-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]пиридин-2-карбоновая кислота

Метил 5-[3-[2,4-дифтор-3-(метансульфонамидо)бензоил]-1-(оксан-2-ил)пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]пиридин-2-карбоксилат (46,0 мг, 0,0805 ммоль) перемешивали в 3 Н HCl (2,68 мл, 8,05 ммоль) при 70°C в течение ночи в открытом сосуде. Растворитель удаляли, оставшуюся воду азеотропно удаляли с толуолом. Остаток растворяли в МеОН (1 мл) и добавляли по каплям к диэтиловому эфиру. Твердое вещество собирали вакуумной фильтрацией, промывали диэтиловым эфиром и сушили в вакууме с получением гидрохлорида 5-[3-[2,4-дифтор-3-(метансульфонамидо)бензоил]-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]пиридин-2-карбоновой кислоты (33,0 мг, 0,0647 ммоль, выход 80%).

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, CDCl₃) δ 14,96 (с, 1Н), 9,77 (с, 1Н), 9,18 (с, 1Н), 9,13 (д, J=1,9 Гц, 1Н), 8,93 (д, J=1,9 Гц), 1H), 8,48 (д, J=8,1 Гц, 1H), 8,19 (д, J=7,8 Гц, 1H), 7,88 (дд, J=14,7, 7,8 Гц, 1H), 7,41 (т, J=8,6 Гц), 1H), 3,12 (с, 3H).

¹³C ЯМР (101 МГц, ДМСО) δ 185,0, 152,3, 149,5, 141,9, 136,1, 114,2, 114,0, 48,5, 41,5, 15,1.

ТСХ-МС (ESI-): m/z 472,3 [М-1]^-.

Пример 59: Синтез гидрохлорида N-[2,6-дифтор-3-(5-пиридин-4-ил-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)фенил]метансульфонамида

Стадия 1: N-[2,6-дифтор-3-[1-(оксан-2-ил)-5-пиридин-4-илпиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил]фенил]метансульфонамид

В сосуд загружали N-[2,6-дифтор-3-[1-(оксан-2-ил)-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил]фенил]метансульфонамид (86,0 мг, 0,153 ммоль), гидрохлорид 4-бромпиридина (29,7 мг, 0,153 ммоль), Pd(dppf)Cl₂·DCM (3,75 мг, 0,00459 ммоль), дегазированный 1,4-диоксан (0,382 мл) и дегазированный 1,5 М водный карбонат калия (0,408 мл, 0,612 ммоль). Сосуд вакуумировали и заполняли аргоном (3х) и нагревали до 60°С в течение 2 часов. После охлаждения реакционную смесь разбавляли EtOAc, нейтрализованным раствором NH 4 Cl, водную фазу отбрасывали и органические вещества концентрировали. Продукт выделяли флэш-хроматографией (градиент DCM/MeOH, от 2% до 12% MeOH). N-[2,6-дифтор-3-[1-(оксан-2-ил)-5-пиридин-4-илпиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил]фенил]метансульфонамид (63,0 мг, 0 1230 ммоль, выход 80%).

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, ацетон) δ 9,03 (д, J=2,3 Гц, 1H), 8,89 (д, J=2,1 Гц, 1H), 8,72 (д, J=5,9 Гц, 3H), 7,94 (ддд, J=8,8, 7,5, 6,2 Гц, 1H), 7,80 (дд, J=4,5, 1,6 Гц, 2H), 7,34 (тд, J=9,0, 1,7 Гц, 1H), 6,25 (дд, J=9,9, 2,3 Гц, 1H), 4,12-3,95 (м, 1H), 3,90-3,68 (м, 1H), 3,21 (с, 3H), 2,51 (дт, J=10,1, 7,1 Гц, 1H), 2,16-1,57 (м, 5H),

¹³C ЯМР (50 МГц, ацетон) δ 185,7, 152,1, 151,4, 150,1, 145,8, 142,2, 131,9, 131,6 (дд, J=10, 4 Гц), 130,3, 124,6 (дд, J=13, 4 Гц), 122,8 116,1, 115,8, 112,8 (дд, J=21, 4 Гц), 83,8, 68,3, 42,0, 29,7, 25,7, 25,3, 23,1.

ТСХ-МС (ESI-): m/z 512,6 [М-1]^-.

Стадия 2: гидрохлорид N-[2,6-дифтор-3-(5-пиридин-4-ил-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)фенил]метансульфонамида

N-[2,6-дифтор-3-[1-(оксан-2-ил)-5-пиридин-4-илпиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил]фенил]метансульфонамид (60,0 мг, 0,117 ммоль) нагревали с обратным холодильником в МеОН (2 мл) и 4 Н HCl в диоксане (0,5 мл) в течение 1 часа. Растворитель удаляли и остаток растирали с ТГФ с получением гидрохлорида N-[2,6-дифтор-3-(5-пиридин-4-ил-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)фенила]метансульфонамида (37,0 мг, 0,0794 ммоль, выход 68%) в виде белого твердого вещества.

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, ДМСО) δ 15,09 (с, 1H), 9,77 (с, 1H), 9,28 (д, J=2,3 Гц, 1H), 9,13 (д, J=2,3 Гц, 1H), 8,99 (д, J=6,7 Гц, 2H), 8,52 (д, J=6,7 Гц, 2H), 7,90 (дд, J=15,0, 7,6 Гц, 1H), 7,42 (тд, J=8,9, 1,2 Гц, 1H), 3,12 (с, 3Н).

¹³C ЯМР (101 МГц, ДМСО) δ 184,9, 160,7 (дд, J=255, 3 Гц), 157,1 (дд, J=257, 4 Гц), 153,0, 151,8, 149,7, 143,6, 142,3, 130,5, 127,3, 124,1, 123,4 (дд, J=13, 4 Гц), 114,3 (т, J=17 Гц), 112,0 (дд, J=21. 3 Гц), 41,5.

ТСХ-МС (ESI-): m/z 428,6 [М-1]^-.

Пример 60: Синтез N-[2,6-дифтор-3-[5-[4-(метилсульфонимидоил)фенил]-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил]фенил]метансульфонамида

Стадия 1: (4-бромфенил)-имино-метил-оксо-λ^{6}-сульфан

1-Бром-4-метилсульфанилбензол (0,970 г, 4,78 ммоль), ацетат аммония (1,47 г, 19,1 ммоль) и (диацетоксийодо)бензол (3,85 г, 11,9 ммоль) объединяли в 9,55 мл МеОН при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали в течение 1 часа, разбавляли водой (20 мл) и экстрагировали EtOAc. Экстракты промывали водой, сушили над Na₂SO₄ и растворители удаляли в вакууме. Продукт выделяли с помощью флэш-хроматографии (DCM/MeOH, 97/3% об./об.) (4-бромфенил) имино-метил-оксо-λ^{6}-сульфан (0,570 г, 2,43 ммоль, выход 51%).

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, ДМСО) δ 7,91-7,76 (м, 4H), 4,24 (с, 1H), 3,08 (с, 1H).

¹³C ЯМР (50 МГц, ДМСО) δ 143,5, 132,0, 129,4, 126,4, 45,6.

МС: [М+Н]⁺ = 234,1.

Стадия 2: N-[2,6-дифтор-3-[5-[4-(метилсульфонимидоил)фенил]-1-(оксан-2-ил)пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил]фенил]метансульфонамид

В сосуд загружали N-[2,6-дифтор-3-[1-(оксан-2-ил)-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил]фенил]метансульфонамид (93,0 мг, 0,165 ммоль), (4-бромфенил) имино-метил-оксо-λ^{6}-сульфан (38,7 мг, 0,165 ммоль), Pd(dppf)Cl₂·DCM (4,05 мг, 0,00496 ммоль), фторид калия (28,8 мг, 0,496 ммоль) и дегазированный 1,4-диоксан/вода (4: 1, 0,5 мл). Сосуд вакуумировали и заполняли аргоном (3х) и нагревали до 50°С в течение 3 часов. После охлаждения реакционную смесь разбавляли EtOAc, промывали солевым раствором и растворители удаляли. Продукт выделяли флэш-хроматографией (градиент DCM/MeOH, от 1% до 8% MeOH). N-[2,6-дифтор-3-[5-[4-(метилсульфонимидоил)фенил]-1-(oxan-2-ил)пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил]фенил]метансульфонамид (63,0 мг, 0,1070 ммоль, выход 65%).

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, ацетон) δ 8,97 (д, J=1,9 Гц, 1H), 8,82 (д, J=2,0 Гц, 1H), 8,63 (с, 1H), 8,13 (д, J=8,3 Гц, 2H), 8,03-7,87 (м, 3H), 7,33 (тд, J=8,9, 1,3 Гц, 1H), 6,24 (дд, J=9,7, 1,9 Гц, 1H), 4,11-3,93 (м, 1H), 3,87-3,70 (м, 1H), 3,18 (д, J=13,0 Гц, 7H), 2,66-2,37 (м, 1H), 2,18-1,52 (м, 5H).

¹³C ЯМР (50 МГц, ацетон) δ 151,8, 150,4, 142,7, 142,1, 130,3, 129,4, 129,0, 116,1, 83,8, 68,4, 46,6, 42,0, 35,2, 32,3, 29,8, 25,7, 23,1, 14,3.

ТСХ-МС (ESI-): m/z 588,4 [М-1]^-.

Стадия 3: N-[2,6-дифтор-3-[5-[4-(метилсульфонимидоил)фенил]-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил]фенил]метансульфонамид

К N-[2,6-дифтор-3-[5-[4-(метилсульфонимидоил)фенил]-1-(оксан-2-ил)пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил]фенил]метансульфонамид (63,0 мг, 0,107 ммоль) в 2 мл MeOH добавляли 4 Н HCl в 1,4-диоксане (2 мл) и реакционную смесь перемешивали при температуре кипения с обратным холодильником в течение 1 часа. После охлаждения смесь концентрировали, обрабатывали сухим ТГФ/диэтиловым эфиром (1+1) и твердые вещества собирали вакуум-фильтрацией, промывали диэтиловым эфиром. Твердые вещества растворяли в воде и нейтрализовали раствором NaHCO₃. Продукт собирали вакуум-фильтрацией, промывали водой и сушили в вакууме, получая N-[2,6-дифтор-3-[5-[4-(метилсульфонимидоил)фенил]-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил]фенил]метансульфонамид (24,0 мг, 0,0451 ммоль, выход 42%).

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, ДМСО) δ 9,08 (с, 1H), 8,85 (с, 1H), 8,07 (с, 4H), 7,87 (дд, J=14,8, 8,0 Гц, 1H), 7,41 (т, J=8,5 Гц, 1H), 4,31 (с, 1H), 3,13 (д, J=3,4 Гц, 6H).

¹³C ЯМР (101 МГц, ДМСО) δ 185,1, 152,3, 149,5, 143,5, 141,8, 141,1, 131,0, 128,6, 128,1, 127,9, 114,0, 45,8, 41,5.

МС: [М+Н] + = 506,4.

Пример 61: Синтез N-[3-[5-(4-хлорфенил)-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил]-2,6-дифторфенил]пропан-1-сульфонамида

Стадия 1: N-[3-(5-бром-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)-2,6-дифторфенил]пропан-1-сульфонамид

К суспензии (3-амино-2,4-дифторфенил)-(5-бром-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-ил)метанона (805 мг, 2,28 ммоль) и триэтиламина (3,50 мл). 25,1 ммоль) в DCM (11,4 мл) медленно добавляли 1-пропансульфонилхлорид (898 мкл, 7,98 ммоль) в DCM (11,4 мл) при -10°C и реакционную смесь перемешивали при -10°C в течение 15 минут. Реакционную смесь разбавляли DCM, промывали 2Н HCl и солевым раствором, сушили над Na₂SO₄ и упаривали. Остаток растворяли в ТГФ (2 мл) и добавляли 2 Н КОН (2 мл). Через 10 минут реакционную смесь разбавляли водой и ТГФ упаривали. Раствор добавляли к 2Н HCl (10 мл) при перемешивании, перемешивание продолжали в течение 30 минут и твердые вещества собирали вакуум-фильтрацией, промывали 2Н HCl и водой и сушили при 100°C с получением N-[3-(5-бром-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)-2,6-дифторфенил]пропан-1-сульфонамида (801 мг, 1,69 ммоль, выход 74%).

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, ацетон) δ 13,77 (с, 1H), 8,72 (д, J=12,1 Гц, 2H), 8,38 (с, 1H), 7,91 (дд, J=14,8, 7,6 Гц, 1H), 7,30 (т, J=8,7 Гц, 1H), 3,40-3,14 (м, 2H), 2,03-1,81 (м, 2H), 1,07 (т, J=7,4 Гц, 3H).

¹³C ЯМР (50 МГц, ацетон) δ 185,7, 162,1 (дд, J=255, 4 Гц), 153,7 (дд, J=222, 4 Гц), 152,0, 151,6, 142,5, 133,7, 131,5 (дд, J=11, 4 Гц), 124,5 (дд, J=14, 4 Гц), 116,6, 116,2, 115,7 (т, J=17 Гц), 112,8, 112,7, 112,4, 112,3, 56,2, 18,1, 13,1.

МС: [М-1]^- = 457,3.

Стадия 2: N-[3-[5-(4-хлорфенил)-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил]-2,6-дифторфенил]пропан-1-сульфонамид

В микроволновую камеру загружали N-[3-(5-бром-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)-2,6-дифторфенил]пропан-1-сульфонамид (60,0 мг, 0,131 ммоль).), (4-хлорфенил) борной кислоты (21,4 мг, 0,137 ммоль) и Pd(dppf)Cl₂·DCM (5,33 мг, 0,00653 ммоль) и продували аргоном. Добавляли дегазированный 1,4-диоксан (0,435 мл) и дегазированный водный 1,5 М K₂CO₃ (0,261 мл, 0,392 ммоль) и смесь перемешивали при 110°C при микроволновом облучении в течение 30 минут. Добавляли шпатель Pd(dppf)Cl₂ и нагревание продолжали в течение 30 минут. После охлаждения смесь нейтрализовали с помощью насыщ. раствора NH₄Cl и разбавляли EtOAc. Водную фазу отбрасывали, а растворитель удаляли при пониженном давлении. Остаток очищали флэш-хроматографией (градиент DCM/EtOAc, от 0 до 35% EtOAc) и растирали с DCM с получением N-[3-[5-(4-хлорфенил)-1H-пиразоло[3,4-b]пиридина-3-карбонил]-2,6-дифторфенил]пропан-1-сульфонамида (30,0 мг, 0,0605 ммоль, выход 46%) в виде белого твердого вещества.

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, ДМСО) δ 14,81 (с, 1H), 9,66 (с, 1H), 9,01 (д, J=2,1 Гц, 1H), 8,77 (д, J=2,1 Гц, 1H), 7,98-7,78 (м, 3Н), 7,60 (д, J=8,4 Гц, 2Н), 7,40 (т, J=8,7 Гц, 1Н), 3,22-3,09 (м, 2Н), 1,92-1,70 (м, 2Н), 1,00 (т, J=7,5 Гц, 3H).

¹³C ЯМР (101 МГц, ДМСО) δ 185,2, 152,1, 149,4, 141,8, 136,2, 133,1, 131,3, 129,2, 128,1, 114,1, 55,0, 39,5, 16,9, 12,7.

МС: [М-1]^- = 489,5.

Пример 68: Синтез N-[2,6-дифтор-3-(5-пиридин-4-ил-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)фенил]-1-фенилметансульфонамида

Стадия 1: N-[3-(5-бром-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)-2,6-дифторфенил]-1-фенилметансульфонамид

К раствору (3-амино-2,4-дифторфенил)-(5-бром-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-ил)метанона (830 мг, 2,35 ммоль) и 4-DMAP (0,574 г, 4,70 ммоль) в пиридине (4,74 мл, 58,8 ммоль) добавляли фенилметансульфонилхлорид (583 мг, 3,06 ммоль) при -10°C и смесь перемешивали при -10°C в течение 10 минут до образования гомогенной суспензии. Перемешивание продолжали при комнатной температуре в течение 10 минут и реакционную смесь нагревали до 50°С в течение 30 минут. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и растворяли в 2Н NaOH (3,53 мл, 7,05 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 10 минут. Смесь разбавляли водой и медленно добавляли к 25 мл 2Н HCl при перемешивании. Через 10 минут твердые вещества собирали вакуум-фильтрацией, промывали водой и сушили при 100 °C, получая N-[3-(5-бром-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)-2,6-дифторфенил]-1-фенилметансульфонамид (1,02 г, 2,01 ммоль, выход 86%) в виде желтоватого твердого вещества.

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, ДМСО) δ 14,98 (с, 1H), 9,81 (с, 1H), 8,73 (дд, J=6,1, 2,2 Гц, 2H), 7,88 (дд, J=14,9, 7,6 Гц, 1H) 7,50-7,30 (м, 6H), 4,53 (с, 2H).

¹³C ЯМР (50 МГц, ДМСО) δ 184,8, 150,9, 150,6, 140,9, 132,5, 131,0, 129,4, 128,4, 128,3, 115,5, 115,2, 59,4.

МС: [М-1]^- = 505,2.

Стадия 2: N-[2,6-дифтор-3-(5-пиридин-4-ил-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)фенил]-1-фенилметансульфонамид

В микроволновую камеру загружали N-[3-(5-бром-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)-2,6-дифторфенил]-1-фенилметансульфонамид (75,0 мг, 0,148 ммоль) 4-пиридинилбороновой кислоты (21,8 мг, 0,177 ммоль) и Pd (dppf) Cl2 · DCM (6,04 мг, 0,00739 ммоль) и продували аргоном. Добавляли дегазированный 1,4-диоксан (0,493 мл) и дегазированный водный 1,5 М K₂CO₃ (0,345 мл, 0,517 ммоль) и смесь нагревали до 110°C при микроволновом облучении в течение 60 минут. После охлаждения реакционную смесь разбавляли EtOAc и нейтрализовали раствором NH₄Cl. Водную фазу разрезали и растворитель выпарили. Остаток очищали флэш-хроматографией (DCM+MeOH от 2% до 10%) и растирали с DCM с получением N-[2,6-дифтор-3-(5-пиридин-4-ил-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)фенил]-1-фенилметансульфонамида (40,0 мг, 0,0783 ммоль, выход 53%).

Аналитические данные:

¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 14,91 (с, 1H), 9,77 (с, 1H), 9,13 (д, J=2,3 Гц, 1H), 8,92 (д, J=2,3 Гц, 1H), 8,72 (дд J=4,7, 1,4 Гц, 2H), 8,07-7,68 (м, 3H), 7,53-7,26 (м, 6H), 4,53 (с, 2H). [М-1]^- = 504,4.

Пример 69: Синтез N-[2,6-дифтор-3-(5-пиридин-4-ил-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)фенил]этансульфонамида

Стадия 1: (3-амино-2,4-дифторфенил)-[5-бром-1-(оксан-2-ил) пиразоло[3,4-b]пиридин-3-ил]метанон

К 3-бром-2,6-дифторанилину (4,69 г, 22,6 ммоль) в тетрагидрофуране (19,6 мл) по каплям добавляли 2М изопропилмагнийхлорид в ТГФ (11,3 мл, 22,6 ммоль) при 0°C и перемешивали в течение 15 минут без дополнительного охлаждения. После повторного охлаждения до 0°С добавляли хлортриметилсилан (2,86 мл, 22,6 ммоль), смесь нагревали до 25°С и перемешивали в течение 20 минут. Раствор охлаждали до 0°С и добавляли хлортриметилсилан (2,86 мл, 22,6 ммоль), продолжая перемешивание в течение 20 минут при 25°С. Раствор снова охлаждали до 0°С и по каплям добавляли 2М изопропилмагнийхлорид в ТГФ (11,3 мл, 22,6 ммоль) и смесь перемешивали в течение 10 минут при 0°С. 5-бром-N-метокси-N-метил-1-(оксан-2-ил)пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбоксамид (3,62 г, 9,80 ммоль) растворяли в 10 мл ТГФ и добавляли к смеси и перемешивание продолжали в течение 1 часа при комнатной температуре. еакцию гасили насыщ. раствором NH₄Cl, добавляли воду до тех пор, пока водная фаза не становилась прозрачной, и фазы разделялись. Водный слой экстрагировали EtOAc, экстракты промывали солевым раствором, сушили над Na₂SO₄ и растворитель удаляли. Масляный остаток растворяли в 25 мл ТГФ и 2 мл конц. HCl добавляли при перемешивании. Через 5 минут смесь осторожно нейтрализовали твердым K₂CO₃, разбавляли EtOAc и фильтровали. Растворители удаляли и остаток очищали флэш-хроматографией (градиент н-гексан/EtOAc, от 0% до 40% EtOAc), получая (3-амино-2,4-дифторфенил)-[5-бром-1-(оксан)-2-ил) пиразоло[3,4-b]пиридин-3-ил]метанон (2,35 г, 5,37 ммоль, выход 55%).

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, ДМСО) δ 8,76 (дд, J=13,9, 2,1 Гц, 2H), 7,15-6,89 (м, 2H), 6,12 (д, J=7,8 Гц, 1H), 5,51 (с, 2H) 4,08-3,56 (м, 2Н), 2,46-2,20 (м, 1Н), 2,06-1,46 (м, 5Н).

¹³C ЯМР (50 МГц, ДМСО) δ 185,6, 153,6 (дд, J=190, 9 Гц), 150,6, 149,0, 148,8 (д, J=9 Гц), 140,2, 133,0, 126,3 (т, J=17 Гц) 122,3 (дд, J=11,3 Гц), 116,4 (д, J=3 Гц), 116,2, 116,2, 115,7, 110,7 (дд, J=19,3 Гц), 82,7, 67,0, 28,5, 24,4, 21,8.

МС: [М+Na+MeOH]⁺ = 491,05.

Стадия 2: N-[3-[5-бром-1-(оксан-2-ил) пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил]-2,6-дифторфенил]этансульфонамид

К раствору (3-амино-2,4-дифторфенил)-[5-бром-1-(оксан-2-ил) пиразоло[3,4-b]пиридин-3-ил]метанона (286 мг, 0,654 ммоль) и триэтиламин (0,547 мл, 3,92 ммоль) в DCM (3,27 мл) добавляли этансульфонилхлорид (143 мкл, 1,50 ммоль) при 0°C. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 15 минут и промывали 2Н HCl и солевым раствором. Растворитель удаляли и растворяли в 2 мл ТГФ и 2 мл 2 Н водного раствра КОН и перемешивали в течение 10 минут. Реакционную смесь подкисляли 2Н HCl, разбавляли водой и экстрагировали EtOAc. Экстракт промывали солевым раствором, сушили над Na₂SO₄ и упаривали. Остаток очищали флэш-хроматографией (градиент н-гексан/EtOAc, от 5% до 40% EtOAc) с получением N-[3-[5-бром-1-(оксан-2-ил)пиразоло[3,4- b]пиридин-3-карбонил]-2,6-дифторфенил]этансульфонамида (0,267 г, 0,5040 ммоль, выход 77%).

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, ДМСО) δ 9,70 (с, 1H), 8,80 (дд, J=14,1, 2,1 Гц, 2H), 7,87 (дд, J=14,8, 7,7 Гц, 1H), 7,43 (тд, J=8,9, 1,0 Гц, 1H), 6,14 (дд, J=9,6, 1,7 Гц, 1H), 4,07-3,87 (м, 1H), 3,83-3,62 (м, 1H), 3,20 (кв, J=7,2 Гц, 2H), 2,34 (дд, J=22,5, 11,3 Гц, 1H), 2,07-1,46 (м, 5H), 1,33 (т, J=7,3 Гц, 3H).

¹³C ЯМР (50 МГц, ДМСО) δ 184,4,161,8 (дд, J=191, 4 Гц), 156,7 (дд, J=193, 4 Гц), 150,8, 149,0, 139,9, 133,0, 130,8 (дд, J=11, 4 Гц), 122,9 (дд, J=13, 4 Гц), 116,1, 116,0, 114,4 (т, J=17 Гц), 112,2 (дд, J=21, 4 Гц), 82,7, 67,1, 47,7, 28,5 24,5, 21,8, 8,0.

МС: [М-1]^- = 527,1.

Стадия 3: N-[2,6-дифтор-3-(5-пиридин-4-ил-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)фенил]этансульфонамид

В микроволновую камеру загружали N-[3-[5-бром-1-(оксан-2-ил) пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил]-2,6-дифторфенил]этансульфонамид (76,0 мг, 0,144 ммоль), 4-пиридинилбороновой кислоты (19,4 мг, 0,158 ммоль) и три(трет-бутил)фосфин Pd G3 (6,08 мг, 0,00718 ммоль) и продували аргоном. Добавляли дегазированный 1,4-диоксан (0,479 мл) и дегазированный 1,5 М водный карбонат калия (0,287 мл, 0,431 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при 70°C в течение 45 минут при микроволновом облучении. Реакционную смесь подкисляют 2 мл 6Н HCl, разбавленного 3 мл МеОН, и нагревали до 70°С при микроволновом облучении в течение 60 минут. Смесь разбавляли водой, нейтрализовали 2Н NaOH и экстрагировали ТГФ. Экстракт промывали солевым раствором, сушили над Na₂SO₄ и растворитель удаляли. Остаток очищали флэш-хроматографией (градиент DCM/MeOH, от 2% до 10% MeOH), получая N-[2,6-дифтор-3-(5-пиридин-4-ил-1H-пиразоло[3,4]-b]пиридин-3-карбонил)фенил]этансульфонамид (42,0 мг, 0,0947 ммоль, выход 66%).

Аналитические данные:

¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 14,89 (с, 1H), 9,66 (с, 1H), 9,12 (д, J=2,1 Гц, 1H), 8,91 (д, J=2,3 Гц, 1H), 8,72 (д, J=5,9 Гц, 2H), 7,91-7,83 (м, 3H), 7,40 (т, J=8,8 Гц, 1H), 3,18 (кв, J=7,3 Гц, 2H), 1,33 (т, J=7,3 Гц), 3Н).

¹³C ЯМР (101 МГц, ДМСО) δ 185,0, 152,6, 150,3, 149,3, 144,4, 141,9, 129,5, 128,7, 121,8, 114,0, 47,7, 7,9.

МС: [М-1]^- = 442,1.

Пример 70: Синтез 4-(3-(2,4-дифтор-3-(пропилсульфонамидо)бензоил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил)-3-метилбензолсульфонамида

Стадия 1: N-[3-[5-бром-1-(оксан-2-ил)пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил]-2,6-дифторфенил]пропан-1-сульфонамид

К суспензии N-[3-(5-бром-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)-2,6-дифторфенил]пропан-1-сульфонамида (778 мг, 1,64 ммоль) в DCM (8,47 мл) добавляли моногидрат п-толуолсульфоновой кислоты (31,3 мг, 0,164 ммоль) и дигидропиран (0,165 мл, 1,81 ммоль) и реакционную смесь нагревали до 40°C в течение 1 часа. Реакционную смесь промывали раствором NaHCO₃ и растворитель удаляли. Остаток очищали флэш-хроматографией (н-гексан+EtOAc, от 5% до 45%) с получением N-[3-[5-бром-1-(оксан-2-ил)пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил]-2,6-дифторфенил]пропан-1-сульфонамида (693 мг, 1,28 ммоль, выход 78%).

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, ацетон) δ 8,73 (дт, J=8,0, 1,8 Гц, 2H), 8,39 (с, 1H), 7,92 (ддд, J=8,8, 7,4, 6,2 Гц, 1H), 7,32 (тд, J=8,9, 1,7 Гц, 1H), 6,18 (дд, J=9,8, 2,4 Гц, 1H), 4,03-3,67 (м, 2H), 3,33-3,20 (м, 2H), 2,61-2,38 (м, 1H) 2,01-1,54 (м, 5H), 1,07 (т, J=7,5 Гц, 3H).

¹³C ЯМР (50 МГц, ацетон) δ 361,8, 339,4 (дд, J=178, 4 Гц), 334,3 (дд, J=181, 4 Гц), 327,9, 326,8, 317,5, 310,4, 308,0 (дд, J=11, 4 Гц), 300,7 (дд, J=13, 4 Гц), 293,8, 293,2, 292,2 (т, J=17 Гц), 289,0 (дд, J=22, 4 Гц), 260,2, 244,7, 232,6, 206,3 206,0, 202,0, 199,4, 194,5, 189,5.

ТСХ-МС (ESI-): m/z 541,0/543,0 [М-Н]^-.

Стадия 2: N-[2,6-дифтор-3-[1-(оксан-2-ил)-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил]фенил]пропан-1-сульфонамид

В сосуд загружали N-[3-[5-бром-1-(оксан-2-ил)пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил]-2,6-дифторфенил]пропан-1-сульфонамид (875 мг, 1,61 ммоль), бис(пинаколато)диборон (429 мг, 1,69 ммоль), бис (трифенилфосфин) палладий (II) дихлорид (22,6 мг, 0,0322 ммоль), безводный ацетат калия (474 мг, 4,83 ммоль) и сухой 1,4-диоксан (8,05 мл). Сосуд вакуумировали и заполняли аргоном (3х), и реакционную смесь нагревали до 80°С в течение 3 часов. После охлаждения реакционную смесь разбавляли EtOAc, фильтровали через целит и упаривали. Остаток поглощали в EtOAc (прим. 20 мл), добавляли активированный уголь и смесь нагревали с обратным холодильником в течение 10 минут. После охлаждения смесь фильтровали через целит, растворитель выпаривали и остаток обрабатывали ультразвуком с н-гексаном. Твердые вещества собирали вакуум-фильтрацией и в вакууме с получением N-[2,6-дифтор-3-[1-(оксан-2-ил)-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3)2-диоксаборолан-2-ил)пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил]фенил]пропан-1-сульфонамида (765 мг, 1,3 ммоль, выход 80%) в виде бесцветного твердого вещества.

Стадия 3:

В сосуд загружали N-[2,6-дифтор-3-[1-(оксан-2-ил)-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил]фенил]пропан-1-сульфонамид (100 мг, 0,169 ммоль), фторид калия (29,5 мг, 0,508 ммоль), 4-бром-3-метилбензолсульфонамид (46,6 мг, 0,186 ммоль), Pd(dppf)Cl₂·DCM (6,92 мг, 0,00847 ммоль) и 0,5 мл 1,4-диоксан/вода (4+1). Сосуд вакуумировали и заполняли аргоном (3х) и нагревали до 60°С в течение 2 часов. Реакционную смесь подкисляли конц. HCl (0,3 мл), разбавляли MeOH (0,2 мл) и нагревали до 60°C в течение ночи. После охлаждения реакционную смесь разбавляли EtOAc и водой. Органическую фазу выпаривали и продукт очищали флэш-хроматографией (градиент DCM/EtOAc, от 10% до 50% EtOAc) 4-[3-[2,4-дифтор-3-(пропилсульфониламино)бензоил]-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]-3-метилбензолсульфонамид (42,0 мг, 0,0764 ммоль, выход 45%).

Аналитические данные:

ТСХ-МС (ESI-): m/z 528,2/548,1 [М-Н]^-.

Пример 71: Синтез N-(2,6-дифтор-3-(5-(2-(трифторметил)пиримидин-5-ил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)фенила) пропан-1-сульфонамида

В сосуд загружали N-[2,6-дифтор-3-[1-(оксан-2-ил)-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил]фенил]пропан-1-сульфонамид (88,0 мг, 0,149 ммоль), 5-бром-2-(трифторметил)пиримидин (37,2 мг, 0,164 ммоль), калий фторид (26,0 мг, 0,447 ммоль), бис(трифенилфосфин)палладий (II) дихлорид (5,23 мг, 0,00745 ммоль) и 0,5 мл 1,4-диоксан/вода (4+1). Сосуд вакуумировали и заполняли аргоном (3х) и нагревали до 60°С в течение 2 часов. Реакционную смесь подкисляли конц. HCl (0,3 мл), разбавляли MeOH (0,2 мл) и нагревали до 60°C в течение ночи. После охлаждения реакционную смесь разбавляли EtOAc и водой. Органическую фазу выпаривали и продукт очищали флэш-хроматографией (градиент DCM/EtOAc, от 5% до 35% EtOAc) N-[2,6-дифтор-3-[5-[2-(трифторметил)пиримидин-5 ил]-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил]фенил]пропан-1-сульфонамид (42,0 мг, 0,0798 ммоль, выход 54%).

Аналитические данные:

ТСХ-МС (ESI-): m/z=505,1, 525,1 [М-Н]^-

Пример 72: Синтез N-(3-(5-(4-хлор-2-метилфенил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)-2,6-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида

В сосуд загружали N-[2,6-дифтор-3-[1-(оксан-2-ил)-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил]фенил]пропан-1-сульфонамид (80,0 мг, 0,135 ммоль), 1-бром-4-хлор-2-метилбензол (18,0 мкл, 0,135 ммоль), фторид калия (23,6 мг, 0,406 ммоль), дихлорид бис(трифенилфосфин) палладия (II) (4,76 мг, 0,00677 ммоль) и 0,5 мл 1,4-диоксан/вода (4+1). Сосуд вакуумировали и заполняли аргоном (3 раза) и нагревали до 60°С в течение 1 часа. Реакционную смесь подкисляли конц. HCl (0,2 мл), разбавляли MeOH (0,2 мл) и нагревали до 60°C в течение ночи. После охлаждения реакционную смесь разбавляли EtOAc и водой. Органическую фазу упаривали и продукт очищали флэш-хроматографией (градиент DCM/EtOAc, 0% -40% EtOAc), получая N-[3-[5-(4-хлор-2-метилфенил)-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил]-2,6-дифторфенил]пропан-1-сульфонамид (32,0 мг, 0,0608 ммоль, выход 45%).

Аналитические данные:

ТСХ-МС (ESI-): m/z=483,3, 503,3 [М-Н]^-

Пример 73. Синтез N-(3-(5-(4-(1H-тетразол-5-ил)фенил)-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)-2,6-дифторфенил)этансульфонамида

Стадия 1: N-(3-(5-бром-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)-2,6-дифторфенил)этансульфонамид

К суспензии (3-амино-2,4-дифторфенил)-(5-бром-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-ил)метанона (823 мг, 2,33 ммоль) и триэтиламина (3,57 мл, 25,6 ммоль) в DCM (11,7 мл) медленно добавляли этансульфонилхлорид (0,773 мл, 8,16 ммоль) в DCM (11,7 мл) при -10°C и реакционную смесь перемешивали при -10°C в течение 20 минут. Реакционную смесь промывали 2Н HCl и солевым раствором и растворитель удаляли. Оставшуюся смолу растворяли в 10 мл ТГФ и добавляли 2Н NaOH (6,99 мл, 14,0 ммоль). После перемешивания в течение 30 минут раствор подкисляли 2Н HCl. Добавляли воду, ТГФ удаляли в вакууме и твердые вещества собирали вакуум-фильтрацией, промывали водой и сушили при 100°С, получая N-[3-(5-бром-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)-2,6-дифторфенил]этансульфонамид (761 мг, 1,71 ммоль, выход 73%).

Стадия 2: N-(3-(5-бром-1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)-2,6-дифторфенил)этансульфонамид

К суспензии N-[3-(5-бром-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)-2,6-дифторфенил]этансульфонамида (529 мг, 1,19 ммоль) и моногидрата п-толуолсульфоновой кислоты (22,6 мг, 0,119 ммоль) в DCM (5,94 мл) добавляли дигидропиран (0,130 мл, 1,43 ммоль) и реакционную смесь нагревали до 30°C в течение 1 часа. Реакционную смесь разбавляли EtOAc, промывали насыщ. раствором NaHCO₃ и солевым раствором, и растворитель удаляли. Продукт очищали флэш-хроматографией (градиент н-гексан/EtOAc, 0% - 40% EtOAc) с получением N-[3-[5-бром-1-(оксан-2-ил)пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил]-2,6-дифторфенил]этансульфонамида (534 мг, 1,01 ммоль, выход 85%).

Стадия 3:

Аналитические данные:

ТСХ-МС (ESI-): m/z=509,3 [М-Н]^-

Пример 74: Синтез N-(3-(5-(4-(1H-тетразол-5-ил)фенил)-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)-2,6-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида

В сосуд загружали N-[3-[5-бром-1-(оксан-2-ил)пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил]-2,6-дифторфенил]пропан-1-сульфонамид (80,0 мг, 0,147 ммоль), [4-(1H-тетразол-5-ил)фенил] борной кислоты (33,6 мг, 0,177 ммоль) и Pd(dppf)Cl₂·DCM (6,01 мг, 0,00736 ммоль) и продували аргоном, Добавляли дегазированный 1,4-диоксан (0,491 мл) и дегазированный 1,5 М водный карбонат калия (0,393 мл, 0,589 ммоль), сосуд герметизировали и реакционную смесь нагревали до 80°С в течение 2,5. Реакционную смесь разбавляли МеОН, подкисляли конц. HCl и перемешивание продолжали при 60°C в течение 3 часов. Реакционную смесь выливали в воду и экстрагировали EtOAc. Экстракт промывали солевым раствором, растворитель удаляли и продукт очищали флэш-хроматографией (DCM+MeOH (+ 1% муравьиная кислота), от 5% до 10%), растирали с DCM и сушили при 100 °C, получая N-[2,6-дифтор-3-[5-[4-(1H-тетразол-5-ил)фенил]-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил]фенил]пропан-1-сульфонамид (38,0 мг, 0,0724 ммоль, выход 49%).

Аналитические данные:

¹H ЯМР (200 МГц, ДМСО) δ 14,99 (с, 1H), 9,83 (с, 1H), 9,14 (д, J=2,1 Гц, 1H), 8,88 (д, J=2,2 Гц, 1H), 8,17 (дд, J=19,9, 8,4 Гц, 4H), 7,65 (тд, J=9,0, 6,1 Гц, 1H), 7,32 (тд, J=9,0, 1,4 Гц, 1H), 3,20-3,05 (м, 2H), 1,90-1,59 (м, 2H), 0,97 (т, J=7,4 Гц, 3H).

¹³С ЯМР (101 МГц, ДМСО) δ 182,5, 156,29 (дд, J=248,3, 6,4 Гц), 152,8 (дд, J=251,2, 8,2 Гц), 152,4, 149,8, 142,0, 139,7, 131,7, 129,9, 129,8, 128,3, 127,9, 127,7, 127,6, 123,8, 121,79 (дд, J=13,4, 3,4 Гц), 117,1, 113,5, 112,12 (дд, J=22,6, 4,3 Гц), 53,8, 16,8, 12,5.

ТСХ-МС (ESI-): m/z=522,9 [М-Н]^-.

Пример 75: Синтез N-(3-(5-(4-(1H-тетразол-5-ил)фенил)-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)-2,6-дифторфенила))-1-фенилметансульфонамида

В сосуд загружали N-[3-[5-бром-1-(оксан-2-ил)пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил]-2,6-дифторфенил]-1-фенилметансульфонамид (76,0 мг, 0,129 ммоль), [4-(1H-тетразол-5-ил)фенил]борную кислоту (26,9 мг, 0,141 ммоль) и Pd(dppf)Cl₂·DCM (5,25 мг, 0,00643 ммоль) и продували аргоном. Добавляли дегазированный 1,4-диоксан (0,428 мл) и дегазированный 1,5 М водный карбонат калия (0,343 мл, 0,514 ммоль), сосуд герметизировали и реакционную смесь нагревали до 80°С в течение 2,5 часов. Реакционную смесь разбавляли МеОН (1 мл), подкисляли конц. HCl (1 мл) и перемешивание продолжали при 60°C в течение 3 часов. Реакционную смесь выливали в воду и экстрагировали EtOAc. Экстракт промывали солевым раствором, растворитель удаляли и продукт очищали флэш-хроматографией (градиент DCM/MeOH (+ 1% муравьиная кислота), от 5% до 15% MeOH (1% муравьиная кислота)), растирали с DCM и сушили при 100°С, получая N-[2,6-дифтор-3-[5-[4-(1Н-тетразол-5-ил)фенил]-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил]фенил]-1-фенилметансульфонамид (40,0 мг, 0,0699 ммоль, выход 54%).

ТСХ-МС (ESI-): m/z 571,0 [М-Н]^-

Пример 76: Синтез N-(2,6-дифтор-3-(5-(4-гидроксифенил)-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)фенил)пропан-1-сульфонамида

В сосуд загружали N-[3-[5-бром-1-(оксан-2-ил)пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил]-2,6-дифторфенил]пропан-1-сульфонамид (72,0 мг, 0,133 ммоль), (4-гидроксифенил)бороновую кислоту (20,1 мг, 0,146 ммоль), фторид калия (23,1 мг, 0,398 ммоль) и Pd(dppf)Cl₂·DCM (5,41 мг, 0,00663 ммоль) и продували аргоном. Добавляли дегазированный 1,4-диоксан/вода (4+1) и смесь перемешивали при 80°C в течение 20 минут. После охлаждения смесь разбавляли 1 мл МеОН, подкисляли 0,3 мл конц. HCl и перемешивают при 60°С в течение 2 часов. Реакционную смесь растворяли в воде и EtOAc, органическую фазу промывали солевым раствором, сушили над Na₂SO₄ и упаривали. Продукт очищали флэш-хроматографией (градиент DCM 7EtOAc, от 20% до 60% EtOAc) и растирали с DCM с получением N-[2,6-дифтор-3-[5-(4-гидроксифенил)-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил]фенил]пропан-1-сульфонамида (39,0 мг, 0,0817 ммоль, выход 62%).

Аналитические данные:

¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 14,70 (с, 1H), 9,70 (с, 2H), 8,94 (д, J=1,9 Гц, 1H), 8,64 (д, J=2,0 Гц, 1H), 7,85 (дд, J=14,5, 7,8 Гц, 1H), 7,63 (д, J=8,5 Гц, 2H), 7,39 (т, J=8,8 Гц, 1H), 6,93 (д, J=8,5 Гц, 2H), 3,20-3,06 (м, 2Н), 1,87-1,75 (м, 2Н), 1,00 (т, J=7,4 Гц, 3Н).

¹³С ЯМР (101 МГц, ДМСО) δ 182,3, 156,4 (дд, J=248,8, 6,6 Гц), 152,92 (дд, J=251,8, 8,1 Гц), 151,0, 150,9, 141,0, 132,2, 130,1, 130,0, 121,80 (дд, J=13,2, 3,7 Гц), 116,84 (дд, J=23,0, 20,9 Гц), 115,7, 114,7, 112,16 (дд, J=22,4, 3,7 Гц), 40,4;

ТСХ-МС (ESI-): m/z 450,9, 471,0 [М-Н]^-.

Пример 77: Биологическая активность

Пример 77-1: анализы связывания

Киназные активности соединений по настоящему изобретению измеряли с использованием KINOMEscan™ Profiling Service в DiscoveR^x Corporation, 42501 Albrae St. Fremont, CA 94538, США, который основан на анализе конкурентного связывания, который количественно измеряет способность соединения конкурировать с иммобилизованным лигандом, направленным на активный сайт. Анализ осуществляли путем объединения трех компонентов: ДНК-меченой киназы; иммобилизованного лиганда; и тестируемого соединения. Способность тестируемого соединения конкурировать с иммобилизованным лигандом измеряли с помощью количественной ПЦР ДНК-метки. Технология подробно описана в Fabian, M.A. et al. A small molecule-kinase interaction map for clinical kinase inhibitors. Nat. Biotechnol., 23, 329-336 (2005) и в Karaman, M.W. et al. A quantitative analysis of kinase inhibitor selectivity, Nat. Biotechnol., 26, 127-132 (2008).

Для исследования аффинности к MKK4, MKK7 и JNK1 киназы были продуцированы в клетках HEK-293 и впоследствии были помечены ДНК для детекции кПЦР. Магнитные гранулы, покрытые стрептавидином, обрабатывали биотинилированными низкомолекулярными лигандами в течение 30 минут при комнатной температуре для получения аффинных смол для анализа киназы. Лигандированные гранулы блокировали избытком биотина и промывали блокирующим буфером (SEABLOCK ™ (Pierce), 1% BSA, 0,05% TWEEN®20, 1 мМ DTT) для удаления несвязанного лиганда и уменьшения неспецифического связывания. Реакции связывания собирали объединением киназ, лигандированных аффинных гранул и тестируемых соединений в 1x связывающем буфере (20% SEABLOCK™, 0,17x PBS, 0,05% TWEEN®20, 6 мМ DTT). Все реакции проводили в полистирольных 96-луночных планшетах в конечном объеме 0,135 мл. Планшеты для анализа инкубировали при комнатной температуре при встряхивании в течение 1 часа и аффинные гранулы промывали промывочным буфером (1х PBS, 0,05% TWEEN®20). Затем гранулы повторно суспендировали в элюирующем буфере (1хPBS, 0,05% TWEEN®20, 0,5 11М небиотинилированного аффинного лиганда) и инкубировали при комнатной температуре при встряхивании в течение 30 минут. Концентрацию киназы в элюатах измеряли с помощью кПЦР.

Средние значения Z' и стандартные отклонения рассчитывали для каждой киназы на основе четырнадцати контрольных лунок на эксперимент в более чем 135 независимых экспериментах, охватывающих период в шестнадцать месяцев. Среднее Z'= 0,71.

Эффективность тестируемых соединений:

Соединения были подвергнуты скринингу в указанных концентрациях, и результаты для взаимодействий связывания представлены как [% от контроля], где более низкие числа указывают на более сильное связывание, то есть более высокую активность.

Подробности относительно протестированных киназ приведены в таблице 2 ниже.

Тестируемые соединения были предоставлены в виде 10 мМ маточных растворов. Тестируемые растворы в указанных конечных концентрациях готовили в DiscoveR^x. Результаты приведены в таблицах 3-6 ниже.

Таблица 2:

MKK4 MKK7 JNK1 Группа STE STE CMCG Конструкция киназы Неполная длина Полноразмерная Полноразмерная Номер доступа NP_003001.1 NP_660186.1 NP_002741.1 Виды Человек Человек Человек Форма киназы Дикого типа Дикого типа Дикого типа Экспрессирующая система Млекопитающих Млекопитающих Млекопитающих Аминокислота Старт/Стоп S84/D399 M1/R419 M1/Q384 Панель средних значений Z' 0,67 0,78 0,79

Эффективность MKK4:

Эффективность соединений Примеров 2-43 в отношении протеинкиназы MKK4, выраженный как остаточный процент контрольного связывания (PoC), определяли при концентрации 100 нМ. Результаты приведены в таблице 3 ниже (N/D означает не определено).

PoC <1 = «+++»; 1 ≤ PoC <10 = «++»; 10 ≤ PoC <30 = «+»; PoC ≥ 30 = «O».

Селективность против JNK1:

Селективность Примеров 2-67 против нецелевой JNK1, определенную путем расчета отношения остаточного процента контрольного связывания (PoC) к JNK1 и MKK4, была определена при концентрации 100 нМ. Результаты приведены в таблице 4 ниже.

PoC (JNK1)/PoC (MKK4) ≥ 30 = «+++»; 30> PoC (JNK1)/PoC (MKK4) ≥ 10 = «++»; 10> PoC (JNK1)/PoC (MKK4) ≥ 3 = «+»; PoC (JNK1)/PoC (MKK4) <3 = «О».

Эффективность MKK4 и селективность против MKK7:

Селективность Примеров 2-43 против нецелевой MKK7, определенная путем расчета отношения остаточного процента контрольного связывания (PoC) к MKK7 и MKK4, определяли при концентрации 100 нМ. Результаты приведены в таблице 5 ниже.

PoC (MKK7)/PoC (MKK4) ≥ 30 = «+++»; 30> PoC (MKK7)/PoC (MKK4) ≥ 10 = «++»; 10> PoC (JNK1)/PoC (MKK4) ≥ 3 = «+»; PoC (JNK1)/PoC (MKK4) <3 = «О».

Эффективность и селективность МКК4 против BRaf:

Селективность Примеров 2-43 по отношению к нецелевому BRaf, определенная путем расчета отношения остаточного процента контрольного связывания (PoC) к BRaf и MKK4, определяли при концентрации 100 нМ. Результаты приведены в таблице 6 ниже.

PoC (BRaf)/PoC (MKK4) ≥ 30 = «+++»; 30> PoC (BRaf)/PoC (MKK4) ≥ 10 = «++»; 10> PoC (BRaf)/PoC (MKK4) ≥ 3 = «+»; PoC (BRaf)/PoC (MKK4) <3 = «О».

Пример 77-2: Функциональный анализ ферментов

(а) Материал

Рекомбинантные киназные белки (коммерчески доступны)

MEKK2, рекомбинантный, активный: продукт ProQinase # 0583-0000-1

MEKK2, рекомбинантный, активированный: продукт ProQinase # 0583-0000-1

МКК4, рекомбинантный, не активированный: продукт ProQinase № 0948-0000-2

Субстратные белки

Казеин (Sigma C-4765)

JNK1 K55R/K56R, рекомбинантный, неактивный: продукт ProQinase # 0524-0000-1

(b) Методы

(b-1) MEKK2-зависимая активация MKK4

MKK4 (не активированную) инкубируют с MEKK2 (активной) в соотношении 10: 1 (масс/масс), что соответствует молярному соотношению 20: 1, в присутствии соединения или носителя и 20 мкМ ATP в течение 30 минут при 30°С. Стадия активации проводится в 50 мМ HEPES, рН 7,5, 50 мМ NaCl, 3,8 мМ MgCl₂, 2,5 мМ DTT, 10% (об./об.) глицерина. Конечная концентрация ДМСО составляет 1%. Активирующая смесь пипетируется в следующем порядке:

2,5 мкл соединения в 4% ДМСО

2,5 мкл смеси ATP/MgCl₂

5 мкл предварительно смешанного раствора киназ MKK4: MEKK2 10: 1 (масс./масс.)

Концентрации белка в активационной смеси составляют 1 мкМ MKK4 и 50 нМ MEKK2.

(b-2) Анализ протеинкиназы

Радиометрический анализ протеинкиназы использовали для измерения киназной активности соответствующих протеинкиназ. Все анализы киназы проводили в 96-луночных полипропиленовых планшетах. После того как реакции были остановлены, смеси для анализа переносили в 96-луночные MSFC-фильтр-планшеты (Millipore). Реакционную смесь пропускали через фильтрующую мембрану путем аспирации, мембрану промывали 3 раза 150 мМ H₃PO₄, один раз этанолом, сушили и добавляли жидкий сцинтилляционный коктейль. Радиоактивность определяли путем измерения счета образцов в многолуночном сцинтилляционном счетчике Microbeta (Wallac). Реакции пипетировали в следующем порядке:

a) MEKK2-MKK4 активационная смесь

20 мкл стандартного аналитического буфера

10 мкл MEKK2-MKK4 активационная смесь

5 мкл радиоактивного раствора ³³P - ATP (обычно 106 имп/мин/на лунку)γ

10 мкл субстратного раствора

b) Одиночные киназы

20 мкл стандартного аналитического буфера

5 мкл соединения в 10% ДМСО

20 мкл смси фермент-субстрат

10 мкл субстратного раствора

Анализ содержал 70 мМ HEPES-NaOH, рН 7,5, 3 мМ MgCl₂, 3 мМ MnCl2, 3 М Na-ортованадат, 1,2 мМ DTT, ATP (переменные количества, соответствующие кажущейся ATP-Km соответствующей киназы, см. Таблицу 1). [³³P-γ-ATP (приблизительно 8×10⁵ импульсов в минуту на лунку), протеинкиназа (переменные количества; см. Таблицу 1) и субстрат (переменные количества; см. Таблицу 7 ниже). Результаты приведены в таблице 8 ниже.

Таблица 7: Ферменты, субстраты и условия анализа (количество/лунка)

# Киназа Конц. киназы Конц. киназы Конц. ATP Субстрат Название нг/50мкл нМ мкМ Название мкг/50мкл нМ 1 MKK4-MEKK2 смесь 25 10 0,2 JNK1 KRKR 1 430 2 MKK4 активная 25 10 0,2 JNK1 KRKR 1 430 3 MEKK2 150 30 0,2 Казеин 1 870

Таблица 8: Эффективность тестируемых соединений

Прим. Каскад MKK4 MEKK2 Прим. Каскад MKK4 MEKK2 2 + +++ O 51k +++ +++ O 3 + +++ O 51l + ++ + 4 + + O 51m + +++ + 5 + +++ O 52a N/D +++ N/D 8 O + O 52b N/D ++ N/D 9 + ++ + 52c N/D ++ N/D 13 + +++ + 53a N/D ++ N/D 14 + ++ O 53b N/D ++ N/D 15 + +++ + 53c N/D +++ N/D 17 + + O 53d N/D ++ N/D 18 ++ +++ + 54a N/D +++ N/D 19 + +++ + 54b N/D +++ N/D 21 + ++ + 54c N/D +++ N/D 23 O O O 55 N/D +++ N/D 24 O ++ O 57 N/D +++ N/D 25 + ++ O 58 N/D +++ N/D 27 ++ +++ + 59 N/D +++ N/D 31 + +++ + 61 N/D +++ N/D 32 + ++ O 62 N/D +++ N/D 37 ++ +++ + 63 N/D +++ N/D 39 O + O 64 N/D +++ N/D 40 O + O 65 + ++ + 41 + + O 66 + +++ + 42 + + O 67 +++ +++ +++ 51a ++ ++ + 68 N/D +++ N/D 51b + ++ + 69 N/D +++ N/D 51c ++ +++ + 70 ++ +++ ++ 51d +++ +++ + 71 ++ +++ O 51e +++ +++ + 72 + ++ + 51f + +++ + 73 N/D +++ N/D 51g + ++ + 74 +++ +++ + 51j + +++ O 75 ++ +++ + 76 N/D +++ N/D

*: эффективность, полученная из значений IC50 (PoC) в соответствии со следующим правилом классификации:

IC₅₀ ≥ 10 µM 10 > IC₅₀ ≥ 1 µM 1 > IC₅₀ ≥ 0.5 µM IC₅₀< 0.5 µM O + ++ +++

Изобретение относится к пиразоло-пиридиновым соединениям, а именно к соединению формулы (Iс) или его фармацевтически приемлемой соли или оптическому изомеру. В формуле (Iс) R¹ представляет собой Н; R^w представляет собой -NR¹⁰SO₂R¹²; R^x представляет собой F; R^y представляет собой F; R⁴ представляет собой Н; R⁵ представляет собой фенил, замещенный 1, 2 или 3 группами, независимо выбранными из С₁-С₆ алкила, гидрокси, галогена, С₁-С₆ галогеналкила, С₁-С₆ алкилсульфонила, С₁-С₆ алкил-SO(=NR¹⁰)-, С₁-С₆ алкилсульфонил-NR¹⁰-, -NR¹⁰R¹⁰, R¹⁰R¹⁰NSO₂-, R¹⁰R¹¹N(C=O)-, С₁-С₆ алкокси, -OCH₂CH₂O-(этилендиокси, присоединенный в соседних положениях к фенильному кольцу), -NO₂, -COOR¹⁰, R¹⁰R¹⁰N(C=O)-, и тетразолила, или R⁵ представляет собой пиридил, пиридил, замещенный -COOR¹⁰, или пиримидинил, замещенный CF₃; R⁶ представляет собой Н; R¹⁰ в каждом случае независимо представляет собой Н или С₁-С₆ алкил; R¹¹ представляет собой алкил, который замещен 1 или 2 гидроксигруппами; и R¹² представляет собой С₁-С₆ алкил, фенилС₁-С₆ алкил или -NR¹⁰R¹⁰. Также предложены соединение, выбранное из группы индивидуальных соединений, фармацевтическая композиция, применение соединения и способ селективного ингибирования протеинкиназы MKK4 по сравнению с протеинкиназами JNK1 и MKK7 или стимулирования регенерации печени или предотвращения гибели гепатоцитов. Предложенные соединения ингибируют митоген-активируемую протеинкиназу-киназу 4 (MKK4) и, в частности, селективно ингибируют MKK4 по сравнению с протеинкиназами JNK1 и MKK7. Соединения полезны для стимуляции регенерации печени или уменьшения или предотвращения гибели гепатоцитов. 7 н. и 3 з.п. ф-лы, 8 табл., 97 пр.

(Ic)

1. Соединение формулы (Iс) или его фармацевтически приемлемая соль или оптический изомер

(Ic)

где

R¹ представляет собой Н;

R^w представляет собой -NR¹⁰SO₂R¹²;

R^x представляет собой F;

R^y представляет собой F;

R⁴ представляет собой Н;

R⁵ представляет собой

фенил, замещенный 1, 2 или 3 группами, независимо выбранными из

С₁-С₆ алкила,

гидрокси,

галогена,

С₁-С₆ галогеналкила,

С₁-С₆ алкилсульфонила,

С₁-С₆ алкил-SO(=NR¹⁰)-,

С₁-С₆ алкилсульфонил-NR¹⁰-,

-NR¹⁰R¹⁰,

R¹⁰R¹⁰NSO₂-,

R¹⁰R¹¹N(C=O)-,

С₁-С₆ алкокси,

-OCH₂CH₂O-(этилендиокси, присоединенный в соседних положениях к фенильному кольцу),

-NO₂,

-COOR¹⁰,

R¹⁰R¹⁰N(C=O)-, и

тетразолила, или

R⁵ представляет собой пиридил, пиридил, замещенный -COOR¹⁰, или пиримидинил, замещенный CF₃;

R⁶ представляет собой Н;

R¹⁰ в каждом случае независимо представляет собой Н или С₁-С₆ алкил;

R¹¹ представляет собой алкил, который замещен 1 или 2 гидроксигруппами; и

R¹² представляет собой С₁-С₆ алкил, фенилС₁-С₆ алкил или -NR¹⁰R¹⁰.

2. Соединение и его фармацевтически приемлемая соль или оптический изомер по п.1, где R⁵ представляет собой пиридил, пиридил, замещенный -COOR¹⁰, пиримидинил или пиримидинил, замещенный CF₃.

3. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль или оптический изомер по п.1, где

R⁵ представляет собой фенил, замещенный 1, 2 или 3 группами, независимо выбранными из C₁-C₆ алкила, гидрокси, галогена, C₁-C₆ алкил-SO(=NR¹⁰)-, R¹⁰R¹⁰NSO₂-, -COOR¹⁰, R¹⁰R¹⁰N(C=O)- и тетразолила.

4. Соединение, выбранное из группы, состоящей из

N-(2,4-дифтор-3-(5-фенил-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)фенил)пропан-1-сульфонамида;

N-(3-(5-(4-хлорфенил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида;

N-(2,4-дифтор-3-(5-(4-фтор-2-метилфенил)-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)фенил)пропан-1-сульфонамида;

N-(3-(5-(2-хлор-4-метоксифенил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида;

N-(2,4-дифтор-3-(5-(4-метоксифенил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)фенил)пропан-1-сульфонамида;

N-(3-(5-(3-хлорфенил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)-2,4-дифтор-фенил)пропан-1-сульфонамида;

N-(3-(5-(4-(диметиламино)фенил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида;

N-(3-(5-(2-хлорфенил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)-2,4-дифтор-фенил)пропан-1-сульфонамида;

N-(3-(5-(4-трет-бутилфенил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)-2,4-дифтор-фенил)пропан-1-сульфонамида;

N-(2,4-дифтор-3-(5-(4-изопропилфенил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)фенил)пропан-1-сульфонамида;

N-(3-(5-(3,4-диметилфенил)-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)-2,4-дифтор-фенил)пропан-1-сульфонамида;

N-(2,4-дифтор-3-(5-о-толил-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)фенил)пропан-1-сульфонамида;

N-(2,4-дифтор-3-(5-(2-метоксифенил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)фенил)пропан-1-сульфонамида;

4-(3-(2,6-дифтор-3-(пропилсульфонамидо)бензоил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил)бензолсульфонамида;

N-(2,4-дифтор-3-(5-(3-фторфенил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)фенил)пропан-1-сульфонамида;

N-(2,4-дифтор-3-(5-(3-метоксифенил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)фенил)пропан-1-сульфонамида;

N-(3-(5-(4-аминофенил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида;

N-(2,4-дифтор-3-(5-(4-гидроксифенил)-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)фенил)пропан-1-сульфонамида;

N-(2,4-дифтор-3-(5-п-толил-1H-пиразол [3,4-b]пиридин-3-карбонил)фенил)пропан-1-сульфонамида;

N-(2,4-дифтор-3-(5-(2-гидроксифенил)-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)фенил)пропан-1-сульфонамида;

N-(3-(5-(3,5-дихлорфенил)-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)-2,4-дифтор-фенил)пропан-1-сульфонамида;

N-(2,4-дифтор-3-(5-(4-нитрофенил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)фенил)пропан-1-сульфонамида;

N-(2,4-дифтор-3-(5-(4-(метилсульфонил)фенил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)фенил)пропан-1-сульфонамида;

N-(2,4-дифтор-3-(5-(4-фторфенил)-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)фенил)пропан-1-сульфонамида;

N-(3-(5-(2-аминофенил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)-2,4-дифтор-фенил)пропан-1-сульфонамида;

N-(3-(5-(3-аминофенил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)-2,4-дифтор-фенил)пропан-1-сульфонамида;

N-(3-(5-(3-(диметиламино)фенил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида;

N-(2,4-дифтор-3-(5-м-толил-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)фенил)пропан-1-сульфонамида;

N-(2,4-дифтор-3-(5-(3-(трифторметил)фенил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)фенил)пропан-1-сульфонамида;

N-(2,4-дифтор-3-(5-(2-фторфенил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)фенил)пропан-1-сульфонамида;

N-(2,4-дифтор-3-(5-(3-нитрофенил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)фенил)пропан-1-сульфонамида;

N-(3-(5-(3,4-дихлорфенил)-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)-2,4-дифтор-фенил)пропан-1-сульфонамида;

N-(2,4-дифтор-3-(5-(4-(трифторметил)фенил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)фенил)пропан-1-сульфонамида;

N-(3-(5-(2,4-дихлорфенил)-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)-2,4-дифтор-фенил)пропан-1-сульфонамида;

N-(3-(5-(4-хлор-3-(трифторметил)фенил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида;

N-(2,4-дифтор-3-(5-(3-гидроксифенил)-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)фенил)пропан-1-сульфонамида;

N-(3-(5-(2-хлор-4-метоксифенил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)-2-фтор-фенил)метансульфонамида;

N-(2-фтор-3-(5-(4-фтор-2-метилфенил)-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)фенил)метансульфонамида;

N-(3-(5-(2,3-дигидробензо[b][1,4]диоксин-6-ил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)-2-фторфенил)метансульфонамида;

N-(3-(5-(2-хлор-4-метоксифенил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)-2-фтор-фенил)бутан-1-сульфонамида;

N-(2-фтор-3-(5-(4-фтор-2-метилфенил)-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)фенил)бутан-1-сульфонамида;

N-(3-(5-(2,3-дигидробензо[b][1,4]диоксин-6-ил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)-2-фторфенил)бутан-1-сульфонамида;

N-(5-(4-хлорфенил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-ил)-2,6-дифтор-3-(пропилсульфонамидо)бензамида;

5-(4-хлорфенил)-N-(2,6-дифтор-3-(пропилсульфонамидо)фенил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбоксамида;

N-(3-((5-(4-хлорфенил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-ил)тио)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида;

N-(3-((5-(4-хлорфенил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-ил)сульфинил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида;

N-(3-((5-(4-хлорфенил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-ил)сульфонил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида;

N-(3-((5-(4-хлорфенил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-ил)(гидрокси)метил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида;

N-(3-((5-(4-хлорфенил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-ил) метил)-2,4-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида;

4-(3-(2,6-дифтор-3-((фенилметил)сульфонамидо)бензоил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил)бензолсульфонамида;

4-(3-(2,6-дифтор-3-(метилсульфонамидо)бензоил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил)бензолсульфонамида;

4-(3-(3-(бутилсульфонамидо)-2,6-дифторбензоил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил)бензолсульфонамида;

4-(3-(2,6-дифтор-3-(пропилсульфонамидо)бензоил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил)бензойной кислоты;

N-[2,4-дифтор-3-[5-[4-(1H-тетразол-5-ил)фенил]-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил]фенил]пропан-1-сульфонамида;

4-(3-(2,6-дифтор-3-(пропилсульфонамидо)бензоил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил)бензамида;

N-(2,4-дифтор-3-(5-(4-(метилсульфонамидо)фенил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)фенил)пропан-1-сульфонамида;

4-(3-(2,6-дифтор-3-(пропилсульфонамидо)бензоил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил)-N-метил-бензолсульфонамида;

4-(3-(2,6-дифтор-3-(пропилсульфонамидо)бензоил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил)-N-этилбензолсульфонамида;

4-(3-(2,6-дифтор-3-(пропилсульфонамидо)бензоил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил)-N-(2,3-дигидроксипропил)бензолсульфонамида;

N-((4-(3-(2,6-дифтор-3-(пропилсульфонамидо)бензоил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил)фенил)сульфонил)ацетамида;

4-(3-(2,6-дифтор-3-(пропилсульфонамидо)бензоил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил)-N-(2,3-дигидроксипропил)бензамида;

4-(3-(2,6-дифтор-3-(пропилсульфонамидо)бензоил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил)-3-фторбензолсульфонамида;

3-хлор-4-[3-[2,6-дифтор-3-(пропилсульфониламино)бензоил]-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]бензолсульфонамида;

4-[3-[2,6-дифтор-3-(пропилсульфониламино)бензоил]-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]-2-фторбензолсульфонамида;

4-[3-[2,6-дифтор-3-(пропилсульфониламино)бензоил]-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]-3-метил-бензолсульфонамида;

4-[3-[2,6-дифтор-3-(фенилсульфомоиламино)бензоил]-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]бензолсульфонамида;

4-[3-[2,6-дифтор-3-(сульфомоиламино)бензоил]-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]бензолсульфонамида;

4-[3-[2,4,6-трифтор-3-(пропилсульфониламино)бензоил]-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]бензолсульфонамида;

4-[3-[3-(этилсульфамоиламино)-2,6-дифторбензоил]-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]бензолсульфонамида;

N-[3-(5-бром-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)-2,6-дифторфенил]метансульфонамид;

N-[2,6-дифтор-3-[5-[4-(1Н-тетразол-5-ил)фенил]-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил]фенил]метансульфонамида;

4-[3-[2,4-дифтор-3-(метансульфонамидо)бензоил]-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]бензамида;

4-[3-[2,4-дифтор-3-(метансульфонамидо)бензоил]-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]бензолсульфонамида;

4-[3-[2,4-дифтор-3-(метансульфонамидо)бензоил]-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]бензойной кислоты;

этил-4-[3-[2,4-дифтор-3-(метансульфонамидо)бензоил]-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]бензоата;

[(2S)-2-амино-3-метокси-3-оксопропил] 4-[3-[2,4-дифтор-3-(метансульфонамидо)бензоил]-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-5 ил]бензоата;

(2S)-2-амино-3-[4-[3-[2,4-дифтор-3-(метансульфонамидо)бензоил]-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]бензоил]оксипропановой кислоты;

5-[3-[2,4-дифтор-3-(метансульфонамидо)бензоил]-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил]пиридин-2-карбоновой кислоты;

N-[2,6-дифтор-3-(5-пиридин-4-ил-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)фенил]метансульфонамида;

N-[2,6-дифтор-3-[5-[4-(метилсульфонимидоил)фенил]-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил]фенил]метансульфонамида;

N-[3-[5-(4-хлорфенил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил]-2,6-дифторфенил]пропан-1-сульфонамида;

4-(3-(2,4-дифтор-3-(пропилсульфонамидо)бензоил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил)бензойной кислоты;

N-(3-(5-(2-хлорфенил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)-2,6-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида;

N-(2,6-дифтор-3-(5-(4-изопропил-фенил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)фенил)пропан-1-сульфонамида;

N-(2,6-дифтор-3-(5-(4-фтор-2-метилфенил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)фенил)пропан-1-сульфонамида;

4-(3-(2,4-дифтор-3-(пропилсульфонамидо)бензоил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил)бензолсульфонамида;

N-[2,6-дифтор-3-(5-пиридин-4-ил-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)фенил]-1-фенилметансульфонамида;

N-[2,6-дифтор-3-(5-пиридин-4-ил-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)фенил]этансульфонамида;

4-(3-(2,4-дифтор-3-(пропилсульфонамидо)бензоил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-5-ил)-3-метил-бензолсульфонамида;

N-(2,6-дифтор-3-(5-(2-(трифторметил)пиримидин-5-ил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)фенил)пропан-1-сульфонамида;

N-(3-(5-(4-хлор-2-метилфенил)-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)-2,6-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида;

N-(3-(5-(4-(1Н-тетразол-5-ил)фенил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)-2,6-дифторфенил) этансульфонамида;

N-(3-(5-(4-(1Н-тетразол-5-ил)фенил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)-2,6-дифторфенил)пропан-1-сульфонамида;

N-(3-(5-(4-(1Н-тетразол-5-ил)фенил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)-2,6-дифторфенил)-1-фенидметансульфонамида;

N-(2,6-дифтор-3-(5-(4-гидроксифенил)-1H-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)фенил)пропан-1-сульфонамида;

или его фармацевтически приемлемая соль или оптический изомер.

5. N-(2,6-дифтор-3-(5-(пиридин-4-ил)-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-3-карбонил)фенил)пропан-1-сульфонамид или его фармацевтически приемлемая соль или оптический изомер.

6. Фармацевтическая композиция для селективного ингибирования протеинкиназы MKK4 по сравнению с протеинкиназами JNK1 и MKK7, содержащая эффективное количество соединения по любому из пп.1-5 или его фармацевтически приемлемой соли или оптического изомера.

7. Фармацевтическая композиция для стимулирования регенерации печени или уменьшения или предотвращения гибели гепатоцитов, содержащая эффективное количество соединения по любому из пп.1-5 или его фармацевтически приемлемой соли или оптического изомера.

8. Применение соединения или его фармацевтически приемлемой соли или оптического изомера по любому из пп.1-5 для

ингибирования протеинкиназы MKK4 и, в частности, для применения при селективном ингибировании протеинкиназы MKK4 по сравнению с протеинкиназами JNK1 и MKK7; или

стимулирования регенерации печени или уменьшения или предотвращения гибели гепатоцитов.

9. Применение по п.8, отличающееся тем, что соединение вводят в дозе от 0,2 до 15 мг/кг пациенту, подлежащему лечению, в течение от 1 до 12 месяцев.

10. Способ

селективного ингибирования протеинкиназы MKK4 по сравнению с протеинкиназами JNK1 и MKK7 или

стимулирования регенерации печени или предотвращения гибели гепатоцитов,

который включает введение эффективного количества соединения по любому из пп.1-5 или композиции по п.6 или 7 пациенту, нуждающемуся в этом.