СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ МИКРОКАПСУЛ АНТИСЕПТИКА-СТИМУЛЯТОРА ДОРОГОВА (АСД) 2 ФРАКЦИЯ В КАППА-КАРРАГИНАНЕ Российский патент 2023 года по МПК A61K9/50 A61K47/36 B01J13/06 

Изобретение относится к области биотехнологии в частности к способам получения микрокапсул биологически активных веществ.

Тканевый препарат АСД обладает уникальными свойствами, впервые он был разработан в 1947 году А.В. Дороговым в виде двух отдельных фракций – АСД – 2 фракция (АСД-2ф) и АСД – 3 фракция (АСД-3ф). С тех пор препарат широко применяется как в ветеринарии, так и народной медицине. При этом наиболее часто используется препарат АСД-2ф, который при пероральном применении оказывает активирующее действие на центральную и вегетативную нервные системы, стимулирует перистальтику желудочно-кишечного тракта, повышает активность пищеварительных и тканевых ферментов, улучшает проникновение ионов натрия и калия через клеточные мембраны, способствует нормализации процессов пищеварения, усвоения питательных веществ и повышению неспецифической резистентности. При наружном применении препарат АСД-2ф стимулирует активность ретикулоэндотелиальной системы, нормализует трофику и ускоряет регенерацию поврежденных тканей, оказывает выраженное антисептическое и противовоспалительное действие.

В ветеринарной медицине АСД-2ф используют при заболеваниях желудочно- конечного тракта, органов дыхания, мочеполовой системы, при поражениях кожных покровов, нарушениях обмена веществ, для повышения неспецифической резистентности у ослабленных и переболевших инфекционными и инвазионными болезнями, а также стимуляции роста и развития молодняка сельскохозяйственных животных.

Однако, несмотря на все положительные стороны тканевый препарат АСД-2ф имеет существенный недостаток, это выраженный специфический неприятный запах, что ограничивает его применение, особенно при даче животным внутрь. Попытки «упаковки» препарата в макрокапсулы не увенчались успехом, так как в процессе жевания макрокапсулы в большинстве случаев разрушаются, и их содержимое животное выбрасывает из ротовой полости. Наружное применение препарата АСД-2ф также сопровождается неприятным запахом, что ограничивает его использование для лечения особенно мелких домашних животных.

Учитывая выше изложенное учеными были разработаны способы нано- и микрокапсулирования тканевого препарата АСД-2ф, в результате чего его неприятных запах практически исчезает. Например, известен способ получения частиц микрокапсулированного антисептика-стимулятора Дорогова (АСД) 2 фракция в каппа-каррагинане. Данный способ характеризуется тем, что 100 мг. АСД-2ф диспергируют в раствор каппа-каррагинана в присутствии 0,01 г. препарата Е472с при перемешивании 1300 об/сек. Далее приливают 5 мл., гексана и 1 мл., воды и полученную суспензию отфильтровывают и сушат при комнатной температуре (Патент РФ №2550951, авт. А.А. Кролевец, И.А. Богачев – 2015г.).

Существует способ получения нанокапсул антисептика – стимулятора Дорогова (АСД) 2 фракция в хитозане, характеризующийся тем, что в качестве оболочки используется хитозан, который осаждают из суспензии в гексане в присутствии сложного эфира глицерина с одной-двумя молекулами пищевых жирных кислот и одной-двумя молекулами лимонной кислоты путем добавления четыреххлористого углерода в качестве осадителя. При этом сушку нанокапсул проводят при комнатной температуре (Патент РФ №2566711, авт. А.А. Кролевец, О.Б. Сеин, И.А. Богачев – 2015 г.).

Известен способ получения нанокапсул антисептика-стимулятора Дорогова АСД-2ф, который заключается в том, что в качестве оболочки нанокапсул используется натрий карбоксиметилцеллюлоза, а в качестве ядра- АСД-2ф. При этом нанокапсулы получают методом осаждения не растворителем. С этой целью АСД-2ф диспергируют в суспензию натрий карбоксиметилцеллюлозы в бензоле в присутствии препарата Е472с и добавления ацетонитрила в качестве осадителя. Полученные нанокапсулы отфильтровывают и сушат при комнатной температуре (Патент РФ №2576239, авт. А.А. Кролевец, О.Б. Сеин и др.).

Существует способ получения нанокапсул антисептика – стимулятора Дорогова (АСД) 2 фракция, который характеризуется тем, что АСД-2ф диспергируют в суспензию натрий карбоксиметилцеллюлозы в бензоле в присутствии препарата Е472с. Затем приливают петролейный эфир в качестве осадителя и полученную суспензию отфильтровывают и сушат при комнатной температуре. При этом массовое соотношение ядро: оболочка составляет от 1:1 до 1:3 (Потент РФ №2599840, авт. А.А. Кролевец – 2016 г.).

Известен способ получения нанокапсул антисептика – стимулятора Дорогова (АСД) 2 фракция в конжаковой камеди, который заключается в том, что АСД-2ф диспергируют в суспензию конжаковой камеди в бензоле в присутствии 0,01 г., препарата Е472с в качестве поверхностно – активного вещества при перемешивании 1300 об/мин. Далее приливают 5 мл., хлористого метилена и выпавший осадок отфильтровывают и сушат при комнатной температуре. В полученных нанокапсулах соотношения ядро: оболочка составляет 1:1 или 1:3 (Патент РФ №2612347, авт. А.А. Кролевец – 2017 г.).

Существует способ получения нанокапсул антисептика – стимулятора Дорогова (АСД) 2 фракция в каррагинане, заключается в том, что АСД-2ф диспергируют в раствор каррагинана в бензоле в присутствии препарата Е472с в качестве поверхностно-активного вещества при перемешивании 1300 об/мин. Далее приливают 10 мл, серного эфира и полученную суспензию отфильтровывают и сушат при комнатной температуре. При этом массовое соотношение ядро: оболочка составляет 1:1 ,1:3 или 3:1 (Патент РФ №2625547, авт. А.А. Кролевец – 2017 г.).

Известен способ получения нанокапсул антисептика – стимулятора Дорогова (АСД) 2 фракция, характеризующийся тем, что в качестве оболочки нанокапсул используется геллановая камедь. Для этого АСД-2ф медленно добавляют к суспензии геллановой камеди в этаноле в присутствии 0,01 г., Е472с в качестве поверхностно–активного вещества при перемешивании 1300 об/мин. Затем добавляют гексан и получают осадок отфильтровывают и сушат при комнатной температуре. В полученных нанокапсулах соотношение ядро: оболочка составляет 1:1, или 1:3, или 3:1 (Патент РФ №2640489, авт. А.А. Кролевец – 2018 г.).

Существует способ получения антисептика-стимулятора Дорогова (АСД) 2 фракция в хитозане. Данный способ характеризуется тем, что АСД-2ф диспергируют в раствор хитозана в гексане в присутствии Е472с в качестве поверхностно–активного вещества при 1000 об/мин. Затем приливают 10 мл, бутилхлорида, отфильтровывают выпавший осадок и сушат при комнатной температуре. При этом в полученных нанокапсулах массовое соотношение ядро: оболочка составляет 1:1, или 1:3, или 3:1 ( Патент РФ №2644726, авт. А.А. Кролевец – 2018 г.).

Известен способ получения нанокапсул антисептика – стимулятора Дорогова (АСД) 2 фракция, характеризующийся тем, что АСД-2ф медленно добавляют к суспензии альгината натрия в бутаноле при перемешивании 1300 об/мин. Затем добавляют метиленхлорид и получают осадок который отфильтровывают и сушат при комнатной температуре. В полученных нанокапсулах массовое соотношение ядро: оболочка составляет 1:1, 1:3 или 3:1 соответственно (Патент РФ №2544727, авт. А.А. Кролевец – 2018 г.).

Общим недостатком всех вышеперечисленных способов микрокапсулирования АСД-2ф является получение нанокапсул (микрокапсул) размеры которых варьируют в широких пределах, что оказывает отрицательное влияние на биологические свойства полученных препаратов.

В качестве прототипа выбран способ получения инкапсулированного антисептика – стимулятора Дорогова (АСД) 2 фракция, характеризующийся тем, что для оболочки используется каппа-каррагинан, который осаждают из раствора в этаноле в присутствии сложного эфира глицерина с одной-двумя молекулами пищевых жирных кислот и одной-двумя молекулами лимонной кислоты путем добавления серного эфира в качестве осадителя. Полученные микрокапсулы отфильтровывают и сушат при комнатной температуре ( Патент РФ №2543632, авт. О.Б. Сеин, М.И. Наумов, Е.Е. Быковская, А.А. Кролевец, И.А. Богачев – 2015 г.).

Недостатком способа–прототипа является наличие в конечном продукте большого количества микрокапсул разного размера, что отрицательно сказывается на биологических свойствах микрокапсулированного препарата.

Техническим результатом изобретения является получение препарата с большим содержанием микрокапсул одинакового размера и уменьшение потерь в процессе микрокапсулирования.

Технический результат достигается тем, что АСД-2ф растворяют в диметилсульфоксиде диспергируют полученную смесь с использованием специального устройства разработанной нами конструкции (Устройство для дозирования жидкости каплями. Патент РФ на полезную модель №194572, авт. О.Б. Сеин и др. – 2019 г.), в растворе каппа – каррагинана в этаноле, включающем указанный полимер и препарат Е472с (сложный эфир глицерина с одной-двумя молекулами лимонной кислоты), при перемешивании при 1000-1300 об/мин. Затем добавляют серный эфир и воду для осаждения микрокапсул. Полученные микрокапсулы отфильтровывают на фильтре Шотта, промывают ацетоном и высушивают при 30-35°С.

Отличительной особенностью заявляемого способа является использование в техническом процессе устройства для дозирования жидкости каплями, которое имеет корпус с поршнем в виде шприца и 8 капельниц, расположенных по окружности в торце корпуса, из центра которой выведена трубка с патрубком, через которую набирается жидкость в корпус с использованием поршня. На патрубке выполнена резьба, на которую навинчивается колпачок. Вдоль корпуса по обе стороны размещены две пружины, которые крепятся к корпусу и поршню и обеспечивают плавное движение поршня. Применение данного устройства обеспечивает одновременное формирование и дозированную подачу 8 капель одинакового размера жидкого вещества (в нашем случае АСД-2ф ), что позволяет получить микрокапсулы с наименьшей разницей диаметра.

Результатом предлагаемого способа является получение микрокапсул АСД стабильного размера в оболочке каппа-каррагинана.

Каппа-каррагинан относится к линейным сульфатным полисахаридам, которые получают из красных морских водорослей. Его широко используют в пищевой промышленности в качестве загустителя или стабилизатора в виде пищевой добавки Е407 или Е407а. Каппа-каррагинан применяют в фармации, так как он способен ускорять процессы регенерации тканей, укреплять стенки кровеносных сосудов, выводить из организма шлаки и токсины.

Примеры получения микрокапсул АСД-2ф в каппа- каррагинане с использованием предлагаемого способа и способа – прототипа.

Пример 1 (предлагаемый способ).

100 мг., АСД -2ф растворяют в 1 мл диметилсульфоксида и диспергируют с использованием устройства для дозирования жидкости каплями в раствор каппа-каррагинана в этаноле, содержащий 300 мг указанного полимера в присутствии 0,01 г препарата Е472с при перемешивании 1200 об/мин. Затем приливают 2 мл серного эфира и 1 мл дистиллированной воды и перемешивают в магнитной мешалке. Сформировавшиеся микрокапсулы отфильтровывают на фильтре Шотта, промывают и сушат при температуре 30-35 ⁰С. Микрокапсулы АСД-2ф представляют собой округлые микрочастицы серо- желтого цвета размером от 80 до 105 мкм. Выход готовых микрокапсул составил 88,5%.

Пример 2. (способ – прототип)

100 мг. АСД-2ф растворяют в 1 мл диметилсульфоксида и диспергируют полученную смесь в раствор каппа- каррагинана в этаноле, содержащий 300 мг указанного полимера в присутствии 0,01 г. препарата Е472с при перемешивании 1200 об/мин. Затем приливают 2 мл серногого эфира и 1 мл дистиллированной воды и перемешивают в магнитной мешалке.

Сформировавшиеся микрокапсулы отфильтровывают на фильтре Шотта, промывают и сушат при температуре 30-35 ⁰С.

Микрокапсулы АСД-2ф представляют собой округлые микрочастицы серо-желтого цвета размером от 55 до 150 мкм. Выход готовых микрокапсул составил 73,3%.

Таким образом, при использовании разработанного способа был больше выход готовых микрокапсул, а их размеры находились в более узких границах (80,0-105,0 мкм) по сравнению с соответствующими показателями (55,0-150,0 мкм) полученными при использовании способа-прототипа.

Изобретение относится к области биотехнологии и фармации и предназначено для получения микрокапсул биологически активных веществ. При получении микрокапсул антисептика-стимулятора Дорогова (АСД) 2 фракция в качестве оболочки микрокапсул используют каппа-каррагинан, который осаждают из раствора в этаноле в присутствии препарата Е472 с путем добавления серного эфира в качестве осадителя. Диспергирование АСД-2ф в раствор каппа-каррагинана в этаноле проводят с использованием устройства для дозирования жидкости каплями, обеспечивающего одновременное формирование и дозированную подачу 8 капель АСД-2ф одинакового размера, при одновременном перемешивании со скоростью 1000-1300 об/мин с последующим добавлением серного эфира и дистиллированной воды. Осажденнные сформировавшиеся микрокапсулы отфильтровывают на фильтре Шотта, промывают и сушат при температуре 30-35ᵒС. Использование изобретения обеспечивает получение округлых микрочастиц серо-желтого цвета, размером от 80 до 105 мкм, с выходом готовых микрокапсул 88,5%. 2 пр.

Способ получения микрокапсул антисептика-стимулятора Дорогова (АСД) 2 фракция, характеризующийся тем, что в качестве оболочки микрокапсул используется каппа-каррагинан, который осаждают из раствора в этаноле в присутствии препарата Е472 с – сложного эфира глицерина с одной-двумя молекулами пищевых жирных кислот и одной-двумя молекулами лимонной кислоты, путем добавления серного эфира в качестве осадителя, отличающийся тем, что диспергирование АСД-2ф в раствор каппа-каррагинана в этаноле проводят с использованием устройства для дозирования жидкости каплями, обеспечивающего одновременное формирование и дозированную подачу 8 капель АСД-2ф одинакового размера, при одновременном перемешивании со скоростью 1000-1300 об/мин с последующим добавлением серного эфира и дистиллированной воды, с целью осаждения сформировавшихся микрокапсул, которые отфильтровывают на фильтре Шотта, промывают и сушат при температуре 30-35ᵒС, при этом полученные микрокапсулы АСД-2ф представляют собой округлые микрочастицы серо-желтого цвета, размером от 80 до 105 мкм, выход готовых микрокапсул составляет 88,5%.