Изобретение относится к области ветеринарной вирусологии и биотехнологии, может быть использовано для разработки и изготовления средств диагностики, специфической профилактики ящура типа А.
Ящур - высококонтагиозное вирусное заболевание, которое причиняет серьезный экономический ущерб в связи с затратами на ликвидацию болезни и введением строгих ограничений, налагаемых на внутреннюю и международную торговлю продукцией животноводства. Система мер для борьбы с ящуром и его профилактики предусматривает стемпинг-аут, а также массовую иммунизацию естественно восприимчивых животных, а также контроль уровня напряженности поствакцинального иммунитета [1].
Возбудителем является РНК-содержащий безоболочечный вирус рода Aphthovirus семейства Picornaviridae. Выделяют 7 различных серотипов вируса ящура: О, А, Азия-1, С и SAT-1, SAT-2, SAT-3. Геном кодирует 4 структурных белка: VP1, VP2, VP3, VP4 [2].
Изменчивость вируса в пределах одного генотипа приводит к возникновению новых изолятов, которые отличаются по степени вирулентности и иммуногенности от ранее выделенных штаммов вируса ящура. Белок VP1 является наиболее вариабельным, поскольку на него приходится около 90% мутаций всех структурных генов. Самыми вариабельными областями являются участки 40-60, 130-160 и 190-213 а.о. [2, 3]. Участок поверхностного белка VPi в регионе 130-160 а.о. отличается высокой вариабельностью, поскольку участвует в процессе связывания с рецепторами клетки-хозяина. Изменчивость данного региона дает возможность вирусу ящура взаимодействовать с рецепторами клеток разных типов и облегчает переход от одного вида хозяина к другому [4, 5].
Антигенная изменчивость наиболее выражена у вируса ящура типа А, что приводит к проблемам в специфической профилактики ящура при применении противоящурных вакцин, а также затрудняется штаммоспецифическая диагностика выделенных изолятов вируса ящура. В результате возникает необходимость создания новых средств диагностики и специфической иммунопрофилактики в отношении вируса ящура типа А.
На территории Российской Федерации вспышки ящура имеют спорадический характер и вызваны заносом возбудителя с территории сопредельных стран. Регионы РФ, граничащие с Китаем, Монголией, Азербайджаном и Грузией, подвержены очень высокой степени риска заноса ящура [6].
В Российской Федерации вспышки ящура типа А регистрировались в 2013-2014 гг. На территории Забайкальского края и Амурской области был выявлен вирус ящура типа А, относящийся к генотипу A/ASIA/SEA-97. На территории Карачаево-Черкесской Республики и Краснодарского края вспышки ящура были вызваны вирусом, относящимся к генотипу A/ASIA/Iran-05SIS-10 [6].
В настоящее время известны производственные штаммы вируса ящура типа А, которые применяются для производства средств специфической профилактики ящура:
- штамм А №550/Азербайджан/64 (генотип A/ASIA/Iraq-64),
- штамм А22/Ирак 24/64 (генотип A/ASIA/Iraq-64),
- штамм А/Турция/2006 (генотип A/ASIA/Iran-05),
- штамм А №2166/Краснодарский/2013 (генотип A/ASIA/Iran-05SIS-10),
- штамм А №2155/Забайкальский/2013 (генотип А/ASIA/SEA-97),
- штамм А №2269/ВНИИЗЖ/2015 (генотип A/ASIA/G-VII).
В ФГБУ «ВНИИЗЖ» из Всемирной справочной лаборатории института Пирбрайта (the World Reference Laboratory for Foot-and-Mouth Disease, the Pirbright institute, Великобритания) для проведения научных исследований в 2022 г. поступил изолят «A/IRN/2/2018». Его применяли для проведения научно-исследовательских работ.
По результатам сравнительного анализа нуклеотидных последовательностей выделенный изолят принадлежит к топотипу ASIA, генетической линии Iran-05 сублинии SIS-13 вируса ящура типа А, который значительно отличается от производственных штаммов вируса ящура типа А.
Настоящее изобретение позволяет расширить арсенал производственных штаммов вируса ящура серотипа А, обладающих высокой инфекционной, антигенной и иммуногенной активностью в нативном виде, пригодный для контроля антигенной и иммуногенной активности вакцин, изготовления чувствительных и высокоспецифичных диагностических тест-систем и высоко иммуногенных вакцинных препаратов путем получения штамма А/Иран/2018 вируса ящура для изготовления биопрепаратов для диагностики и специфической профилактики ящура типа А.
Изолят «A/IRN/2/2018» вируса ящура был выделен от крупного рогатого скота на территории Ирана в населенном пункте Керман (Kerman) в 2018 году.
Штамм А/Иран/2018 серотипа А вируса ящура депонирован в Коллекцию штаммов микроорганизмов Федерального государственного бюджетного учреждения «Федеральный центр охраны здоровья животных» (ФГБУ «ВНИИЗЖ»), под регистрационным номером: №379 - деп / 22-13 - ГКШМ ФГБУ «ВНИИЗЖ».
Экспериментально подтверждена возможность использования штамма А/Иран/2018 вируса ящура для изготовления средств диагностики и профилактики ящура типа А.
Сущность изобретения отражена на дендрограмме, отражающей филогенетические взаимоотношения штамма А/Иран/2018 вируса ящура с эпизоотическими штаммами серологического типа А. Дендрограмма основана на сравнении полных нуклеотидных последовательностей гена VP1.
Сущность изобретения пояснена следующими перечнями последовательностей:
SEQ ID NO: 1 представляет последовательность нуклеотидов гена белка VPi штамма А/Иран/2018 вируса ящура типа А;
SEQ ID NO: 2 представляет последовательность аминокислот гена белка VP1 штамма А/Иран/2018 вируса ящура типа А.
Штамм А/Иран/2018 вируса ящура характеризуется следующими признаками и свойствами.
Морфологические признаки
Штамм А/Иран/2018 вируса ящура серотипа А относится к отряду Picornavirales, семейству Picornaviridae, роду Aphthovirus, виду Foot-and-Mouth Disease virus и обладает морфологическими признаками, характерными для возбудителя ящура: форма вириона иксаэдрическая, размер 20-25 нм. Вирион состоит из молекулы одноцепочечной молекулы РНК с позитивным смыслом, заключенной в белковую оболочку. Она состоит из 32 капсомеров, расположенных в кубической симметрии.
Антигенные свойства
По антигенным свойствам штамм А/Иран/2018 вируса ящура относится к серотипу А. Вирус стабильно нейтрализуется гомологичной антисывороткой. Вирус не проявляет гемагглютинирующей активности. У переболевших животных в сыворотке крови образуются типоспецифические антитела, выявляемые в иммуноферментном анализе (ИФА) и реакции микронейтрализации (РМН).
Методом нуклеотидного секвенирования была определена первичная структура гена белка VP1 штамма А/Иран/2018 вируса ящура. Сравнительный анализ нуклеотидных последовательностей показал, что штамм А/Иран/2018 вируса ящура принадлежит к генотипу A/ASIA/Iran-05SIS-13.
Антигенное родство (r1) штамма А/Иран/2018 вируса ящура изучено в перекрестном исследовании штамма со специфическими сыворотками, полученными на следующие производственные штаммы вируса ящура:
- штамм А №550/Азербайджан/64 (генотип A/ASIA/Iraq-64),
- штамм А22/Ирак 24/64 (генотип A/ASIA/Iraq-64),
- штамм А/Турция/2006 (генотип A/ASIA/Iran-05),
- штамм А №2166/Краснодарский/2013 (генотип A/ASIA/Iran-05SIS-10),
- штамм А №2155/Забайкальский/2013 (генотип A/ASIA/SEA-97),
- штамм А №2269/ВНИИЗЖ/2015 (генотип A/ASIA/G-VII)
в реакции микронейтрализации. Титр референтных сывороток крови КРС, полученных путем иммунизации животных моновалентными вакцинами из производственных штаммов вируса ящура серотипа А, против 102 ТЦД50 гомологичного и гетерологичного вируса определяли в РМН при перекрестном титровании, рассчитывая значения с использованием уравнения линейной регрессии, и выражали в lg. Значение r1 определяли, как антилогарифм разности lg титров сыворотки против гетерологичного и гомологичного вируса [7, 8, 9].
Значение r1 в РМН интерпретировали следующим образом:
при ≥0,3 - исследуемый и производственный штаммы вируса ящура являются близкородственными;
при <0,3 - исследуемый образец штамма вируса ящура отличается от производственного штамма.
Показатели антигенного родства при изучении штамма А/Иран/2018 составили r1 от 0,04 до 0,23, что свидетельствует об отсутствии антигенного родства с производственными штаммами вируса ящура серотипа А (таблица 1).
Гено- и хемотаксономическая характеристики
Штамм А/Иран/2018 вируса ящура является РНК (+) - содержащим вирусом с молекулярной массой 7x106 Д.
Нуклеиновая кислота представлена одноцепочной линейной молекулой молекулярной массой 2,8×106 Д. Вирион имеет белковую оболочку, состоящую из четырех основных белков VP1, VP2, VP3 и VP4. Липопротеидная оболочка отсутствует.
Основным антигенным белком является VP1. В вирионе содержится приблизительно 31,5% РНК и 68,5% белка. Вирусная РНК является инфекционной и участвует в образовании белков-предшественников в инфицированных клетках. Предшественники, в свою очередь, расщепляются с образованием более стабильных структурных и неструктурных полипептидов вируса. Из 8 неструктурных полипептидов, накапливающихся в инфицированных клетках, один - 3D-РНК-зависимая РНК-полимераза, участвующая в репликации РНК для сборки новых вирионов.
Физические свойства
Масса вириона составляет 8,4×10-18 г. Плавучая плотность 1,45 г/см3.
Устойчивость к внешним факторам
Штамм А/Иран/2018 вируса ящура устойчив к детергентам и органическим растворителям, таким как эфир, хлороформ, фреон, ацетон. Наиболее стабилен при рН 7,4-7,6. Сдвиги рН как в кислую, так и в щелочную сторону ведут к инактивации вируса. Чувствителен к формальдегиду, УФ-облучению, γ-облучению, высоким температурам (выше 38°С).
Дополнительные признаки и свойства
Реактогенность - реактогенными свойствами не обладает.
Патогенность - патогенен для парнокопытных животных.
Вирулентность - вирулентен для естественно восприимчивых животных при контактном, аэрозольном и парентеральном заражении.
Стабильность - сохраняет исходные биологические свойства при пассировании в чувствительных биологических системах в течение 5 пассажей (срок наблюдения) на перевиваемых культурах.
Биотехнологические характеристики
Штамм А/Иран/2018 вируса ящура репродуцируется в перевиваемых культурах клеток: почки сибирского горного козерога (ПСГК-30), почки свиньи (IB-RS-2), почки сирийского хомячка (ВНК-21).
При испытании было проведено 5 последовательных пассажей штамма А/Иран/2018 вируса ящура в перевиваемых культурах клеток IB-RS-2, ПСГК-30, ВНК-21. Биологические свойства характеризовали путем определения инфекционной активности вируса каждого пассажа в перевиваемой клеточной линии IB-RS-2 и на естественно восприимчивых животных - крупном рогатом скоте (КРС) и свиньях.
Сущность предлагаемого изобретения пояснена примерами его исследования, которые не ограничивают объем изобретения.
Пример 1. Исследование биологических свойств штамма А/Иран/2018 вируса ящура при репродукции в монослойных перевиваемых клеточных культурах
При выделении изолята «A/IRN/2/2018» вируса ящура с целью получения его однородной популяции, обладающей оптимальными биотехнологическими свойствами, использовали комплекс биологических, вирусологических и биохимических методов, предусмотренных методическими указаниями по выявлению и идентификации штаммов вируса ящура [7].
Биологические и вирусологические методы включали в себя метод выделения в культуре клеток и адаптацию вируса ящура к перевиваемым клеточным линиям.
Выделение вируса ящура проводили в монослойных перевиваемых клеточных линиях ПСГК-30, IB-RS-2, ВНК-21 с последующей адаптацией в течение 5 последовательных пассажей. Культуры клеток выращивали на соответствующих питательных средах, в стационарных условиях во флаконах с площадью поверхности 25 см2, отмывали от ростовой среды и заражали 10%-ной суспензией афтозного материала (множественность заражения составляла 1-10 ТЦД50 на клетку), приготовленной в растворе Хэнкса с 0,5% гидролизата лактальбумина и антибиотиками по стандартной рецептуре. Для удаления микрофлоры и балластных клеточных компонентов вирусную суспензию предварительно обрабатывали 10%-ным раствором хлороформа. После 30-минутного контакта вируса с клеточной культурой при температуре 37±0,5°С во флаконы вносили по 5,0 см3 поддерживающей среды и инкубировали при температуре 37±0,5°С до появления цитопатического действия (ЦПД) в культуре клеток, которое представлено в виде округления клеток, повышения их оптической плотности, дегенерации и отделении клеток от поверхности субстрата. При ЦПД не менее 90% клеток, флаконы подвергали замораживанию-оттаиванию, очистке клеточной взвеси хлороформом и центрифугированию при 3000 g в течение 15 мин. Полученный вируссодержащий материал использовали для последующих пассажей. Вирус считался адаптированным к культурам клеток, если в течение не менее 24 часов проявлялось 90-100% ЦПД в монослое клеточных культур. Адаптация эпизоотического изолята «A/IRN/2/2018» к различным клеточным линиям наступала на уровне пятого пассажа. Титр инфекционной активности определяли с помощью разработанной ранее методики [10]. Результаты адаптации вируса к различным клеточным культурам представлены в таблице 2, данные которой свидетельствуют о высокой адаптационной способности изолята «A/IRN/2/2018» вируса ящура к использованным клеточным культурам. Так, в монослойной культуре клеток ПСГК-30 за 14 ч получали вирусную суспензию с активностью в РСК 1:8 и титром инфекционной активности 7,45±0,10 lg ТЦД50/см3. В монослойной культуре клеток IB-RS-2 за 13 ч получали вирусную суспензию с активностью в РСК 1:8 и титром инфекционной активности 7,30±0,10 lg ТЦД50/см3. В монослойной культуре клеток ВНК-21 за 12 ч получали вирусную суспензию с активностью в РСК 1:8 и титром инфекционной активности 7,50±0,12 lg ТЦД50/см3. В результате проведения исследований по адаптации изолята «A/IRN/2/2018» вируса ящура получен штамм А/Иран/2018 с охарактеризованными биологическими культуральными свойствами, который далее использовали для исследования его свойств.
Пример 2. Оценка биологических свойств штамма А/Иран/2018 вируса ящура на крупном рогатом скоте
Заражение КРС исходным штаммом вируса ящура проводили интрадермолингвально (I пассаж). Адаптацию и наработку штамма А/Иран/2018 вируса ящура на КРС проводили в течение 2 последовательных пассажей. С целью определения титра инфекционной активности адаптированного штамма из афт на этапе 2 пассажа на КРС получали 10%-ную вирусную суспензию, из которой готовили последовательные 10-кратные разведения на 1/15 М фосфатно-солевом буферном растворе (ФБР). Подготовленные разведения с 10-2 по 10-6 вводили интрадермолингвально в 4 точки по 0,1 см3 двум головам КРС. Учет результатов титрования на животных проводили спустя 24 ч по наличию афт на месте введения разведений вируса ящура штамма А/Иран/2018. Титр инфекционной активности на КРС штамма А/Иран/2018 вируса ящура на стадии 2 пассажа на КРС составил 5,50 lg ИД50/0,1 см3. Таким образом, была получена 10%-ная афтозная суспензия вируса ящура штамма А/Иран/2018 (2 пассаж на КРС) с титром инфекционной активности 5,50 lg ИД50/0,1 см3.
Пример 3. Исследование биологических свойств штамма А/Иран/2018 вируса ящура на свиньях
Заражение свиней исходным штаммом А/Иран/2018 вируса ящура проводили внутрикожно на стадии первого пассажа в область венчика передних конечностей. Адаптацию и наработку штамма А/Иран/2018 вируса ящура на свиньях вели в течение 2 последовательных пассажей. С целью определения титра инфекционной активности адаптированного штамма из афт 2 пассажа на свиньях получали 10%-ную вирусную суспензию, из которой готовили последовательные 10-кратные разведения с использованием в качестве растворителя 1/15 М ФБР. Подготовленные разведения с 10-2 по 10-6 вводили внутрикожно в венчики копытец по 0,1 см3 в 4 точки на каждый палец конечности одного разведения, из расчета 1 разведение на 2 копытца 1 конечности каждому из 2 подопытных подсвинков.
Учет результатов титрования проводили через 24 ч по наличию афт на месте введения разведений. Титр инфекционной активности на свиньях для штамма А/Иран/2018 вируса ящура (2 пассаж на свиньях в виде 10%-ной афтозной суспензии) составил 5,75 lg ИД50/0,1 см3.
Пример 4. Исследование биологических свойств штамма А/Иран/2018 вируса ящура при репродукции в перевиваемой суспензионной клеточной линии ВНК-21/SUSP/ARRIAH
Штамм А/Иран/2018 вируса ящура репродуцировали в суспензионной перевиваемой культуре клеток из почки новорожденного сирийского хомячка ВНК-21/SUSP/ARRIAH. В качестве поддерживающей среды использовали среду Игла, с добавлением ферментативного гидролизата мышц сухого (ФГМС), гидролизата белков крови сухого (ГБКС) при рН среды 7,4-7,6. Клеточную линию заражали вирусом из расчета 0,001-0,100 ТЦД50/клетка.
Культивирование штамма А/Иран/2018 вируса ящура осуществляли при температуре 37±0,5°С в течение 11,0-12,5 ч до достижения цитопатического действия вируса, соответствующего 90-100%. Полученную вируссодержащую суспензию контролировали на стерильность и содержание 146S компонента и общего вирусного белка (ОВБ). Концентрация ОВБ в суспензии составляла 2,93±0,14 мкг/см3. Значения титра инфекционной активности вируса, а также процентное содержание 146S компонента штамма А/Иран/2018 вируса ящура отражены в таблице 3. Из данных которой видно, что при средней концентрации клеток ВНК-21/SUSP/ARRIAH, равной 4,04±0,14 млн клеток/см3, дозе заражения 0,005 ТЦД50/кл и продолжительности репродукции вируса 11,65±0,53 ч средний титр инфекционной активности возбудителя ящура был равен 7,42±0,17 lg ТЦД50/см3. Концентрацию 146S компонента вируса ящура определяли с помощью ранее разработанной методики [11]. Содержание данного компонента составило 67,93±0,97% (1,99±0,09 мкг/см3).
Пример 5. Оценка типовой специфичности и активности штамма А/Иран/2018 вируса ящура
Оценку типовой специфичности и активности штамма А/Иран/2018 вируса ящура проводили в реакции связывания комплемента (РСК).
К полученному антигену штамма А/Иран/2017 вируса ящура, взятому в объеме 0,4 см3 в цельном виде и в разведениях 1:2, 1:4, 1:8, 1:16 добавляли по 0,1 см3 гомологичной и гетерологичных гипериммунных сывороток, полученных на вирус ящура типов А, О, Азия-1 в рабочем (удвоенном) титре и 0,1 см3 комплемента в рабочем разведении. Смесь выдерживали в водяной бане в течение 20 мин при температуре 37±0,5°С. Затем вносили по 0,2 см3 гемолитической системы и выдерживали 30 мин при температуре 37±0,5°С. Положительный результат реакции соответствовал 100%-ной задержке гемолиза эритроцитов барана («4 креста»). Параллельно проводили контрольные реакции без сыворотки, без комплемента и компонентов реакции.
В качестве реагентов в РСК использовали сыворотки ящурные типоспецифические гипериммунные морских свинок, полученные на производственные штаммы вируса ящура А/Иран/2018 (предлагаемое изобретение), А/Турция/2006, О/Забайкальский/2016, Азия-1/Таджикистан/2011, комплемент сухой для РСК, гемолизин (сыворотка гемолитическая), эритроциты барана 2% (взвесь на физиологическом растворе, рН=7,05-7,15). В качестве контроля использовали антигены вируса ящура штаммов А/Иран/2018 (предлагаемое изобретение), А/Турция/2006, О/Забайкальский/2016, Азия-1 /Таджикистан/2011.
Результаты исследования отражены в таблице 4, из которой следует, что штамм А/Иран/2018 вируса ящура обладает выраженной типовой специфичностью, относится к вирусу ящура серотипа А и активен в РСК в разведении 1:8.
Источники информации, принятые во внимание при составлении описания изобретения к заявке на выдачу патента Российской Федерации на изобретение «Штамм А/Иран/2018 вируса ящура Aphtae epizooticae типа А для изготовления биопрепаратов для диагностики и специфической профилактики ящура типа А».
1. OIE. Manual of Diagnostic Tests and Vaccines for Terrestrial Animals. 7th ed. Paris, 2018. - Ch. 3.1.8
2. Пономарев А.П., Узюмов В.Л. Вирус ящура: структура, биологические и физико-химические свойства. Владимир: Фолиант, 2006. - 250 с.
3. Alexandersen, S. The pathogenesis and diagnosis of foot and mouth disease / S. Alexsandersen, Z. Zhang, A.L. Donaldson // J. Compr. Pathol. - 2003. - V. 129. - P. 268-282.
4. Жильцова M.B. Биологические свойства эпизоотических изолятов вируса ящура типов А, О и Азия-1: Автореф… дис. кан. наук. - Владимир: 2008. - 23 с.
5. Бурдов А.Н., Дудников А.И., Малярец П.В. и др. Ящур. / Под ред. А.Н. Бурдова. - М., Агропромиздат, 1990, 320 с.
6. Анализ эпизоотической ситуации по ящуру в России с 2010 г. по март 2019 г. / В.П. Семакина, Т.П. Акимова, В.А. Мищенко, А.К. Караулов // Ветеринария. - 2019. - №11. - С. 16-20.
7. Методические рекомендации по выделению и идентификации штаммов вируса ящура /А.А. Гусев, В.М. Захаров, Ж.А. Шажко и др.; ФГУ «ВНИИЗЖ». - Владимир. 2002. - 31 с.
8. Методические рекомендации по определению антигенного соответствия между эпизоотическими изолятами и производственными штаммами вируса ящура в перекрестной реакции микронейтрализации /С.Р. Кременчугская, М.В. Жильцова, Т.К. Майорова; ФГБУ «ВНИИЗЖ». - Владимир: 2012. - 36 с.
9. Эпизоотологические особенности ящура типа А, вызванного гетерологичными штаммами вируса / А.В. Мищенко, В.А. Мищенко, В.В. Дрыгин [и др.] // Ветеринария. - 2014. - №11. - С. 20-24.
10. Патент №2674076 С1, Российская Федерация, МПК А61К 39/135 C12Q 1/68. Способ определения титра инфекционной активности вируса ящура в неинактивированном сырье для вакцины с применением метода обратной транскрипции и полимеразной цепной реакции в режиме реального времени: №2017145889: заявл. 25.12.2017: опубл. 04.12.2018 / Д.А. Лозовой, Д.В. Михалишин [и др.]; заявитель Федеральное государственное бюджетное учреждение "Федеральный центр охраны здоровья животных" (ФГБУ "ВНИИЗЖ").
11. Патент №2712769 С1, Российская Федерация, МПК G01M 33/58, C12Q 1/68. Способ спектрометрического определения концентрации 146S частиц вируса ящура в неинактивированном сырье для вакцины по оценке количества молекул вирусной РНК, выделенной после иммунного захвата вирионов: №2019116272: заявл. 27.05.2019: опубл. 31.01.2020 / Д.А. Лозовой, Д.В. Михалишин [и др.]; заявитель Федеральное государственное бюджетное учреждение "Федеральный центр охраны здоровья животных" (ФГБУ "ВНИИЗЖ").
| название | год | авторы | номер документа |
|---|---|---|---|
| Штамм А/Афганистан/2017 вируса ящура Aphtae epizooticae типа А для изготовления биопрепаратов для диагностики и специфической профилактики ящура типа А | 2022 |
|
RU2799601C1 |
| Вакцина против ящура из штамма А/Иран/2018 нового генотипа A/ASIA/Iran-05 культуральная инактивированная сорбированная | 2022 |
|
RU2799605C1 |
| Штамм А 2205/G IV вируса ящура Aphtae epizooticae типа А для изготовления биопрепаратов для диагностики и специфической профилактики ящура типа А | 2021 |
|
RU2773659C1 |
| Штамм "А/Танзания/2013" вируса ящура Aphtae epizooticae генотипа A/AFRICA/G-I для изготовления биопрепаратов для диагностики и специфической профилактики ящура генотипа A/AFRICA/G-I | 2023 |
|
RU2810133C1 |
| Штамм А/Египет/EURO-SA/2022 вируса ящура Aphtae epizooticae для изготовления биопрепаратов для диагностики и специфической профилактики ящура генотипа A/EURO-SA | 2023 |
|
RU2817256C1 |
| Штамм "О N 2620/Оренбургский/2021" вируса ящура Aphtae epizooticae генотипа O/ME-SA/Ind-2001e для изготовления биопрепаратов для диагностики и специфической профилактики ящура | 2023 |
|
RU2806606C1 |
| Вакцина против ящура генотипа A/AFRICA/G-I из штамма "А/Танзания/2013" культуральная инактивированная сорбированная | 2023 |
|
RU2815536C1 |
| Вакцина против ящура из штамма А/Афганистан/2017 нового генотипа A/ASIA/Iran-05 культуральная инактивированная сорбированная | 2022 |
|
RU2798293C1 |
| Штамм А N2269/ВНИИЗЖ/2015 вируса ящура Aphtae epizooticae типа А для контроля антигенной и иммуногенной активности и для изготовления биопрепаратов для диагностики и специфической профилактики ящура типа А | 2016 |
|
RU2640261C1 |
| Штамм вируса ящура Aphtae epizooticae для изготовления биопрепаратов для диагностики и специфической профилактики ящура генотипа SAT-1/X | 2023 |
|
RU2807038C1 |
Изобретение относится к области биотехнологии и касается нового штамма вируса ящура Aphtae epizooticae типа А семейства Picomaviridae рода Aphthovims, депонированного во Всероссийской государственной коллекции экзотических типов вируса ящура и других патогенов животных (ГКШМ) ФГБУ «ВНИИЗЖ» под регистрационным номером: №379 - деп/22-13 - ГКШМ ФГБУ «ВНИИЗЖ» штамм А/Иран/2018 типа А вируса ящура. Представленный штамм репродуцируется в перевиваемых культурах клеток почки сибирского горного козерога (ПСГК-30), почки свиньи (IB-RS-2), почки новорожденного сирийского хомячка (ВИК-21). В перевиваемой суспензионной культуре клеток почки сирийского хомячка BHK-21/SUSP/ARRIAH в течение 11,0-12,5 часов инкубирования концентрация 146S компонента штамма А/Иран/2018 вируса ящура имеет средние значения 1,99±0,09 мкг/см3 (67,93±0,97%), сохраняя исходные характеристики при пассировании в клеточной культуре на протяжении 10 пассажей. Представленный штамм может быть использован для изготовления биопрепаратов для диагностики и специфической профилактики ящура типа А и для контроля антигенной активности противоящурных вакцин. 1 ил., 4 табл., 5 пр.
Штамм вируса ящура Aphtae epizooticae А/Иран/2018, депонированный во Всероссийской государственной коллекции экзотических типов вируса ящура и других патогенов животных ФГБУ «ВНИИЗЖ» под регистрационным номером 379 - деп/22-13 - ГКШМ ФГБУ «ВНИИЗЖ» для изготовления биопрепаратов для диагностики и специфической профилактики ящура типа А.
