СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ МОНОАЦИЛГЛИЦЕРИДНЫХ МАСЕЛ И ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТОВ, СОДЕРЖАЩИХ МОНОАЦИЛГЛИЦЕРИДНЫЕ МАСЛА Российский патент 2023 года по МПК C11C3/02 A23D9/07 A23D9/02 A23L33/115 A23L33/125 A23L33/15 A23L33/17 A23L33/18 A23L33/185 C12N9/20 C12P7/64 

Перекрестная ссылка на родственные заявки

[001] В настоящей заявке испрашивается приоритет предварительной заявки США 62/571910, поданной 13 октября 2017, которая включена в настоящее описание посредством ссылки в полном объеме.

Предпосылки создания изобретения

[002] Хронический дефицит секреции пищеварительных ферментов поджелудочной железой называется экзокринной недостаточностью поджелудочной железы (EPI). В отсутствии этих пищеварительных ферментов, у пациентов, страдающих EPI, питательные вещества, поступающие с пищей, не могут соответствующим образом перевариваться, и эти пациенты могут страдать нарушением питания и расстройствами брюшной полости. EPI чаще всего встречается у индивидуумов с хроническим панкреатитом и рядом других хронических расстройств желудочно-кишечного тракта. EPI также наблюдается у пациентов, страдающих муковисцидозом. Эффекты EPI могут быть ослаблены путем проведения ферменто-заместительной терапии поджелудочной железы (PERT), при которой индивидууму, при каждом потреблении пищи, вводят ферментные капсулы. Обычно, терапия PERT включает введение панкреатических ферментов, экстрагированных из поджелудочной железы свиньи.

[003] Липиды представляют собой энергетически плотные соединения, которые являются источником незаменимых длинноцепочечных жирных кислот. Потребляемые липиды перевариваются липазами, секретируемыми поджелудочной железой с образованием свободных жирных кислот (FFA) и моноацилглицерида (MAG). Блокирование высвобождения липазы из поджелудочной железы приводит к очень плохому усвоению жиров и масел. У пациентов, страдающих EPI, это может приводить к значительному нарушению питания, поскольку калории, незаменимые жирные кислоты и жирорастворимые питательные вещества задерживаются в непереваренных липидных частицах и уходят из организма.

[004] В настоящее время существует клиническая потребность в альтернативных источниках питания, которые могут усваиваться индивидуумами с EPI и не требуют проведения дополнительной PERT.

[005] Частично гидролизованные жиры и масла в форме MAG легко усваиваются индивидуумами с EPI и не требуют проведения PERT. Продукты на основе MAG-масел были клинически оценены как пищевые добавки на основе капсул, однако, эти капсулы были использованы для устранения неприятного вкуса. Что касается обычных источников MAG-масел, то исходное масло обрабатывали химически или ферментативно с получением MAG, которые затем экстрагировали растворителями и подвергали перегонке для фракционирования MAG из других компонентов исходных масел. Эти MAG-продукты имеются в продаже как относительно чистые продукты, содержащие лишь небольшое количество примесных FFA, DAG и TAG, и фактически не содержат других соединений. Таким образом, стандартные источники MAG-масел часто не содержат других природных соединений, присутствующих в масле, таких как токоферол.

[006] Существует клиническая потребность в пищевых продуктах с очень высокоэнергетической калорийностью, которые могут потребляться индивидуумами с неэффективным или нарушенным действием пищеварительной системы. Помимо индивидуумов с патологиями поджелудочной железы (например, пациентов с муковисцидозом, панкреатитом и раком поджелудочной железы), у других пациентов с диагностированной или недиагностированной экзокринной недостаточностью поджелудочной железы (EPI) при потреблении таких продуктов будет наблюдаться благоприятный эффект. Кроме того, у индивидуумов с дисфункцией желчных протоков (холестазом) может наблюдаться благоприятный эффект от «предварительно переваренных» жиров, которые не нуждаются в желчных кислотах для эмульгирования. В продаже имеются высококалорийные «энергетические батончики» и напитки. Но эти продукты не подходят для индивидуумов, у которых не могут перевариваться (гидролизоваться) жиры, присутствующие в этих продуктах. До сих пор не были получены липиды в жидкой форме (в форме коктейлей) и в твердой форме (в форме батончиков), подходящих для их применения без проведения PERT.

[007] В соответствии с этим, существует потребность в высококалорийнных продуктах, которые могли бы употреблять индивидуумы с неэффективным или нарушенным действием пищеварительной системы. В настоящей заявке описан способ получения пищевого модифицированного ферментом масла (EMO), которое, по существу, не содержит триацилглицеридов (TAG).

Сущность изобретения

[008] Настоящее изобретение относится к продукту, содержащему переработанное масло, полученное из источника масла. В одном варианте осуществления изобретения, переработанное масло содержит MAG в количестве, равном или превышающем 40 масс.% от общей массы переработанного масла, где переработанное масло не содержит TAG или содержит TAG в количестве, которое равно или меньше, чем 5 масс.% от общей массы переработанного масла, и где переработанное масло содержит немасляные ингредиенты, полученные из природного источника масла и обычно присутствующие в этом источнике масла, а поэтому немасляные ингредиенты не добавляют в переработанное масло.

[009] В некоторых вариантах осуществления изобретения, источник масла указанного продукта происходит от растений, животных или рыб.

[0010] В некоторых вариантах осуществления изобретения, немасляные ингредиенты указанного продукта выбраны из антиоксидантов, витаминов и их смесей.

[0011] В некоторых вариантах осуществления изобретения, указанный продукт содержит более чем 1 масс.% MAG от общей массы продукта.

[0012] В некоторых вариантах осуществления изобретения, указанный продукт содержит более чем 50 масс.% MAG от общей массы продукта.

[0013] Настоящее изобретение также относится к пищевому продукту. В одном варианте осуществления изобретения, пищевой продукт содержит масло и имеет калорийность приблизительно от 1 ккал/грамм до приблизительно 5 ккал/грамм, где приблизительно от 20% и приблизительно до 50% калорий получено из указанного масла.

[0014] В некоторых вариантах осуществления изобретения, масло указанного пищевого продукта представляет собой переработанное масло, полученное из источника масла, где переработанное масло содержит MAG в количестве, равном или превышающем 40 масс.% по общей массе переработанного масла, где переработанное масло не содержит TAG или содержит TAG в количестве, которое равно или меньше, чем приблизительно 5 масс.% по общей массе переработанного масла, и где переработанное масло содержит немасляные ингредиенты, полученные из природного источника масла и обычно присутствующие в этом источнике масла, а поэтому немасляные ингредиенты не добавляют в переработанное масло.

[0015] В некоторых вариантах осуществления изобретения, источник масла указанного пищевого продукта происходит от растений, животных или рыб.

[0016] В некоторых вариантах осуществления изобретения, немасляные ингредиенты указанного пищевого продукта выбраны из антиоксидантов, витаминов и их смесей.

[0017] В некоторых вариантах осуществления изобретения, указанный продукт содержит более чем 1 масс.% MAG от общей массы продукта.

[0018] В некоторых вариантах осуществления изобретения, указанный продукт содержит более чем 50 масс.% MAG от общей массы продукта.

[0019] В некоторых вариантах осуществления изобретения, указанный пищевой продукт имеет общую массу приблизительно от 25 граммов до приблизительно 500 граммов.

[0020] В некоторых вариантах осуществления изобретения, указанный пищевой продукт имеет общее содержание калорий приблизительно от 1 ккал до приблизительно 5 ккал на грамм.

[0021] В некоторых вариантах осуществления изобретения, указанный пищевой продукт может дополнительно содержать источник углеводов.

[0022] В некоторых вариантах осуществления изобретения, указанный пищевой продукт может дополнительно содержать источник белка.

[0023] В некоторых вариантах осуществления изобретения, указанное масло поставляет от 5 до 95% от общего содержания калорий в пищевом продукте.

[0024] Настоящее изобретение также относится к способу получения масла, обогащенного моноацилглицерином. В одном варианте осуществления изобретения, способ включает смешивание исходного масла, содержащего триацилглицерины (TAG), буферного раствора и первого фермента, способного гидролизовать указанные TAG до свободных жирных кислот (FFA), с получением первой реакционной смеси; реакцию взаимодействия указанной реакционной смеси в условиях, достаточных для гидролиза указанных TAG указанным первым ферментом, в течение первого периода времени с получением водной фазы и липидного продукта реакции (свободной жирной кислоты); инактивацию указанного первого фермента в указанном продукте реакции; сбор указанного липидного продукта реакции; смешивание указанного липидного продукта реакции и пищевого глицерина и второго фермента, способного этерифицировать FFA, с образованием второй реакционной смеси; реакцию взаимодействия указанной второй реакционной смеси в течение второго периода времени с получением продукта реакции липидной масляной фазы и глицериновой фазы; инактивацию указанного второго фермента в указанном продукте реакции; добавление соли к реакционной смеси и отделение липидной масляной фазы от указанной глицериновой фазы; и сбор указанной липидной масляной фазы.

[0025] В некоторых вариантах осуществления изобретения, указанное исходное масло представляет собой масло, выделенное из растений, животных или рыб.

[0026] В некоторых вариантах осуществления изобретения, указанный первый фермент представляет собой липазу AY.

[0027] В некоторых вариантах осуществления изобретения, указанный первый период времени представляет собой период времени, достаточный для гидролиза по меньшей мере 94% TAG в указанном исходном масле.

[0028] В некоторых вариантах осуществления изобретения, указанный первый период времени составляет приблизительно от 14 часов до 24 часов.

[0029] В некоторых вариантах осуществления изобретения, указанную стадию взаимодействия указанной реакционной смеси в условиях, достаточных для гидролиза указанных TAG указанным первым ферментом проводят при температуре приблизительно от 30°C до приблизительно 35°С.

[0030] В некоторых вариантах осуществления изобретения, указанные стадии смешивания исходного масла, содержащего триацилглицерины (TAG), буферного раствора и первого фермента, способного гидролизовать указанные TAG до свободных жирных кислот (FFA), и реакции взаимодействия указанной реакционной смеси в условиях, достаточных для гидролиза указанных TAG указанным первым ферментом с образованием FFA, проводят в атмосфере азота.

[0031] В некоторых вариантах осуществления изобретения, указанный второй фермент представляет собой липазу G.

[0032] В некоторых вариантах осуществления изобретения, указанный второй период времени представляет собой период времени, достаточный для обогащения MAG в липидной масляной фазе приблизительно от 60% до 95%.

[0033] В некоторых вариантах осуществления изобретения, указанный второй период времени составляет приблизительно от 24 часов до приблизительно 72 часов.

[0034] В некоторых вариантах осуществления изобретения, указанную стадию взаимодействия указанной второй реакционной смеси в течение второго периода времени с получением липидной масляной фазы и глицериновой фазы проводят при температуре приблизительно от 17°С до 23°С.

[0035] В некоторых вариантах осуществления изобретения, способ дополнительно включает сушку указанного продукта реакции путем создания вакуума в течение третьего периода времени, достаточного для удаления по меньшей мере части воды из продукта реакции.

[0036] В некоторых вариантах осуществления изобретения, указанную стадию сушки указанного продукта реакции проводят при температуре 20°С - 30°С.

[0037] В некоторых вариантах осуществления изобретения, указанную стадию сушки проводят в течение второго периода времени.

[0038] В некоторых вариантах осуществления изобретения, указанную стадию инактивации указанного второго фермента осуществляют путем нагревания указанного продукта реакции.

[0039] В некоторых вариантах осуществления изобретения, указанное нагревание проводят при температуре по меньшей мере 70°С в течение по меньшей мере 1 часа.

[0040] В некоторых вариантах осуществления изобретения, указанная стадия отделения указанной липидной масляной фазы от указанной глицериновой фазы включает добавление хлорида натрия к указанному продукту реакции.

[0041] В некоторых вариантах осуществления изобретения, конечная концентрация хлорида натрия составляет до 0,3 масс.% хлорида натрия.

[0042] В некоторых вариантах осуществления изобретения, способ, перед смешиванием указанного липидного продукта реакции и пищевого глицерина и второго фермента, способного этерифицировать FFA и глицерин, дополнительно включает восстановление атмосферы азота над указанным липидным продуктом реакции.

[0043] В некоторых вариантах осуществления изобретения, указанные стадии удаления по меньшей мере части указанной водной фазы и замены указанной по меньшей мере части указанной водной фазы приблизительно эквивалентным объемом воды и выдерживания в течение второго периода времени повторяют перед проведением указанной стадии сбора указанного липидного продукта реакции.

[0044] В некоторых вариантах осуществления изобретения, способ дополнительно включает добавление токоферола к указанной липидной масляной фазе после сбора указанной липидной масляной фазы.

Краткое описание чертежей

[0045] На фигуре 1 показано ТСХ-разделение компонентов исходного растительного масла, промежуточных FFA и конечного MAG-масла.

[0046] На фигуре 2 показано ТСХ-разделение компонентов исходного растительного масла, промежуточных FFA и конечного MAG-масла.

[0047] На фигуре 3 показано распределение FFA, MAG, DAG и TAG в способе «приготовления исходного питательного коктейля» и модифицированного ферментом масляного продукта согласно изобретению («GBFS»).

[0048] На фигуре 4 показана блок-схема в виде диаграммы, иллюстрирующей способ приготовления масла, модифицированного ферментом.

[0049] На фигуре 5 показано распределение аминокислот и пептидов в готовых к употреблению питательных напитках и в гидролизованном белке гороха GBFS.

[0050] На фигуре 6А показан ЯМР-спектр аутентичного TAG (тристерина).

[0051] На фигуре 6В показан ЯМР-спектр модифицированного ферментом масла, полученного из миндального масла.

[0052] На фигуре 7 показано увеличение уровней триглицеридов в сыворотке после приема готового к употреблению коктейля на основе EMO.

[0053] На фигуре 8 показано увеличение уровней триглицеридов в сыворотке после приема RTDS на основе MAG без проведения PERT.

Подробное описание раскрытого предмета изобретения

[0054] Следует отметить, что вышепривиденное общее описание и последующее подробное описание приводятся лишь в целях иллюстрации и пояснения и не ограничивают объема заявленного изобретения. В настоящей заявке, употребление слов в единственном числе включает слова во множественном числе, артикли «а» или «an» означает «по меньшей мере один», а союз «или» означает «и/или», если это не оговорено особо. Кроме того, используемый здесь термин «включающий», а также другие его формы, такие как «включает» и «включенный», не являются ограничивающими. Кроме того, такие термины, как «элемент» или «компонент» охватывают элементы или компоненты, содержащие один объект, и элементы или компоненты, содержащие более, чем один объект, если это не оговорено особо.

[0055] Представленные здесь заголовки разделов приводятся лишь в организационных целях и не должны рассматриваться как ограничение описанного предмета изобретения. Все документы или части документов, цитируемых в настоящей заявке, включая, но не ограничиваясь ими, патенты, патентные заявки, статьи, книги и трактаты, точно и в полном объеме включены в настоящий документ посредством ссылки в любых целях. В случае, если в одном или более включенных документов и подобных материалов определение термина противоречит определению этого термина, данного в настоящей заявке, то следует отдать предпочтение определению, приведенному в настоящей заявке.

[0056] Термин «обогащенный» в контексте настоящего изобретения означает количество, превышающее количество в исходном материале. Так, например, MAG-обогащенное масло представляет собой масло, в котором содержание MAG превышает исходное содержание MAG до процесса обогащения, либо исходное масло имеет более высокий процент MAG, чем масло до процесса обогащения. Процесс обогащения может быть осуществлен путем превращения TAG в MAG и, тем самым, увеличения содержания и процента MAG и уменьшения содержания или процента TAG.

[0057] Триацилглицерин («TAG»), также известный как триглицерид, представляет собой глицерид, состоящий из трех цепей жирных кислот, ковалентно связанных с молекулой глицерина посредством сложноэфирных связей. TAG могут быть также классифицированы как молекулы, имеющие длинную или среднюю длину цепи. Длинноцепочечные TAG содержат жирные кислоты с 14 или более атомами углерода, а TAG со средней длинной цепи содержат жирные кислоты с 6-12 атомами углерода. Длинноцепочечные TAG могут включать жирные кислоты омега-3 и омега-6. TAG со средней длиной цепи содержат насыщенные жирные кислоты и, следовательно, не содержат жирных кислот омега-6 или омега-3. Источниками энергии могут служить длинноцепочечные TAG (LCT) и триглицериды со средней длиной цепи (MCT).

[0058] Диацилглицерин («DAG»), также известный как диглицерид, представляет собой глицерид, состоящий из двух цепей жирных кислот, ковалентно связанных с молекулой глицерина посредством сложноэфирных связей.

[0059] Моноацилглицерин («MAG»), также известный как моноглицерид, представляет собой глицерид, состоящий из одной цепи жирной кислоты, ковалентно связанной с молекулой глицерина посредством сложноэфирной связи.

[0060] Используемый здесь термин «переработанное масло» означает неприродную масляную композицию, по существу, не содержащую триацилглицеринов («TAG») или имеющую пониженное количество TAG по сравнению с предварительно модифицированным или предварительно переработанным маслом.

[0061] Используемые здесь термины «масло, модифицированное ферментом» или «ЕМО» относятся к переработанному маслу, в котором TAG ферментативно превращены в MAG, например, посредством ферментативного превращения согласно изобретению.

[0062] Используемый здесь термин «пищевой продукт» означает промышленный или не встречающийся в природе пищевой продукт. Следует отметить, что упомянутый здесь пищевой продукт, даже если он изготовлен промышленным способом и, в целом, не встречается в природе, может содержать различные комбинации природных ингредиентов, где указанные комбинации либо не встречаются в природе, либо они существуют в природе, но не присутствуют в тех относительных количествах, в которых они используются в данном пищевом продукте.

[0063] Используемый здесь термин «немасляный ингредиент» означает ингредиент, присутствующий в природном источнике масла, который не является MAG, DAG, TAG, FFA или липидом.

[0064] В некоторых вариантах осуществления изобретения, исходные масла могут включать, например, но не ограничиваются ими, масла, полученные из растений, такие как оливковое масло, миндальное масло, льняное масло, подсолнечное масло, кукурузное масло, рапсовое масло, пальмовое масло, соевое масло или масло, животного происхождения, такое как рыбий жир, сардиновый жир или анчоусный жир или масло из водорослей или их смеси. В одном аспекте изобретения, исходное масло включает смесь оливкового масла, подсолнечного масла и льняного масла, где приблизительно от 50 масс.% до приблизительно 80 масс.% от общей массы исходного масла составляет оливковое масло; приблизительно от 10 масс.% до приблизительно 30 масс.% от общей массы исходного масла составляет подсолнечное масло, а приблизительно от 5 масс.% до приблизительно 20 масс.% от общей массы исходного масла составляет льняное масло. В другом аспекте изобретения, приблизительно от 50 масс.% до приблизительно 80 масс.% от общей массы исходного масла составляет оливковое масло; приблизительно от 10 масс.% до приблизительно 30 масс.% от общей массы исходного масла составляет льняное масло; а приблизительно от 5 масс.% до приблизительно 20 масс.% от общей массы исходного масла составляет подсолнечное масло.

[0065] В некоторых вариантах осуществления изобретения, способ получения продукта, обогащенного MAG, включает первую стадию гидролиза TAG. В качестве неограничивающего примера, гидролиз TAG может быть осуществлен с использованием липазы, такой как липаза AY (Amano Enzymes, USA Elgin IL, USA), или любая нерегиоспецифическая липаза, которая разрезает цепь в положениях sn-1, sn-2 и sn-3.

[0066] В некоторых вариантах осуществления изобретения, первая стадия гидролиза TAG может быть проведена при температуре приблизительно от 30°C до 35°C. В качестве неограничивающего примера, первая стадия гидролиза TAG может быть проведена при температуре 30°C - 35°C, 31°C - 35°C, 32°C - 35°C, 33°C - 35°C, 34°C - 35°C, 30°C - 34°C, 31°C - 34°C, 32°C - 34°C, 33°C - 34°C, 30°C - 33°C, 31°C - 33°C, 32°C - 33°C, 30°C - 32°C, 31°C - 32°C, 30°C - 31°C или 30°C, 31°C, 32°C, 33°C, 33°C или 35°C.

[0067] В некоторых вариантах осуществления изобретения, первая стадия гидролиза TAG может быть проведена в течение периода времени приблизительно от 14 часов до 24 часов. В качестве неограничивающего примера, первая стадия гидролиза TAG может быть осуществлена в течение периода времени от 14 часов до 20 часов, от 14 часов до 16 часов, от 18 часов до 24 часов, от 22 часов до 24 часов, от 18 часов до 20 часов, или приблизительно в течение 14 часов, 15 часов, 16 часов, 17 часов, 18 часов, 19 часов, 20 часов, 21 часа, 22 часов, 23 часов или 24 часов.

[0068] В некоторых вариантах осуществления изобретения, первая стадия гидролиза TAG приводит к гидролизу, по существу, всего TAG. В качестве неограничивающего примера, первая стадия гидролиза TAG приводит к гидролизу TAG на 94% - 100%, 95% - 100%, 96% - 100%, 97% - 100%, 98% - 100%, 99% - 100%, 94% - 99%, 95% - 99%, 96% - 99%, 97% - 99%, 98% - 99%, 94% - 98%, 95% - 98%, 96% - 98%, От 97% - 98%, 94% - 97%, 95% - 97%, 96% - 97%, 94% - 96%, 95% - 96% или 94% - 95%, или по меньшей мере на 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100%.

[0069] В некоторых вариантах осуществления изобретения, способ получения продукта, обогащенного MAG, включает вторую стадию этерификации глицерином для увеличения содержания MAG-масла. В качестве неограничивающего примера, эта вторая стадия этерификации может быть осуществлена с использованием липазы, такой как липаза G (Amano Enzymes, USA Elgin IL, USA), или любая региоспецифическая липаза, которая катализирует этерификацию в положении sn-1, но не эффективно катализирует образование второго или третьего сложного эфира глицерина (для получения DAG и TAG).

[0070] В некоторых вариантах осуществления изобретения, вторая стадия этерификации глицерином для повышения содержания MAG-масла приводит к обогащению MAG в продукте приблизительно на 70-95%. В качестве неограничивающего примера, содержание масла MAG может быть увеличено на 70% - 95%, 75% - 95%, 80% - 95%, 85% -95%, 90% - 95%, 70% - 90%, 75% - 90%, 80% - 90%, 85% - 90%, 70% - 85%, 75% - 85%, 80% - 85%, 70% - 80%, 75% - 80%, 70% - 75% или 70%, 75%, 80%, 85%, 90% или 95%.

[0071] В некоторых вариантах осуществления изобретения, вторая стадия этерификации глицерином может быть осуществлена при температуре приблизительно от 17°C до 23°C. В качестве неограничивающего примера, этерификация глицерином может быть проведена при температуре 17°C - 23°C, 18°C - 23°C, 19°C - 23°C, 20°C - 23°C, 21°C - 23°C, 22°C - 23°C, 17°C - 22°C, 18°C - 22°C, 19°C - 22°C, 20°C - 22°C, 21°C - 22°C, 17°C - 21°C, 18°C - 21°C, 19°C - 21°C, 20°C - 21°C, 17°C - 20°C, 18°C - 20°C, 19°C - 20°C, 17°C - 19°C, 18°C - 19°C, 17°C - 18°C или 17°C, 18°C, 19°C, 20°C, 21°C, 22°C или 23°C.

[0072] В некоторых вариантах осуществления изобретения, вторая стадия этерификации глицерином может быть проведена в течение приблизительно от 24 часов до 72 часов. В качестве неограничивающего примера, вторая стадия этерификации глицерином может быть проведена в течение периода времени от 24 часов до 72 часов, от 36 часов до 72 часов, от 48 часов до 72 часов, от 60 часов до 72 часов, от 24 часов до 60 часов, от 36 часов до 60 часов, от 48 часов до 60 часов, от 24 часов до 48 часов, от 36 часов до 48 часов, от 24 часов до 36 часов или в течение 24 часов, 30 часов, 36 часов, 42 часов, 48 часов, 54 часов, 60 часов, 66 часов или 72 часов.

[0073] В некоторых вариантах осуществления изобретения, способ получения продукта, обогащенного MAG, включает третью стадию инактивации липазы и разделения фаз.

[0074] Полученный продукт вышеуказанных вариантов осуществления изобретения представляет собой переработанное масло, имеющее содержание MAG, равное или превышающее 40 масс.% от общей массы переработанного масла. В некоторых аспектах изобретения, содержание MAG составляет приблизительно от 40 масс.% до приблизительно 99 масс.% от общей массы переработанного масла. В некоторых аспектах изобретения, содержание MAG составляет приблизительно от 50 масс.% до приблизительно 99 масс.% от общей массы переработанного масла. В некоторых аспектах изобретения, содержание MAG составляет приблизительно от 60 масс.% до приблизительно 99 масс.% от общей массы переработанного масла. В некоторых аспектах изобретения, содержание MAG составляет приблизительно от 70 масс.% до приблизительно 99 масс.% от общей массы переработанного масла. В некоторых аспектах изобретения, содержание MAG составляет приблизительно от 80 масс.% до приблизительно 99 масс.% от общей массы переработанного масла. В некоторых аспектах изобретения, содержание MAG составляет приблизительно от 50 масс.% до приблизительно 80 масс.% от общей массы переработанного масла. В любом из вышеуказанных аспектов, содержание TAG равно или составляет менее 5 масс.% от общей массы переработанного масла. В любом из вышеуказанных аспектов, содержание TAG равно или составляет менее 4 масс.%, равно или составляет менее 3 масс.%, равно или составляет менее 2 масс.%, равно или составляет менее 1 масс.% от общей массы переработанного масла.

[0075] В некоторых вариантах осуществления изобретения, продукт содержит переработанное масло согласно изобретению.

[0076] В некоторых вариантах осуществления изобретения, переработанное масло имеет содержание MAG, равное или превышающее 40 масс.% от общей массы переработанного масла. В качестве неограничивающего примера, переработанное масло имеет содержание MAG приблизительно 40% - 95%, 50% - 95%, 60% - 95%, 70% - 95%, 80% - 95%, 90% - 95%, 40% - 90%, 50% - 90%, 60% - 90%, 70% - 90%, 80% - 90%, 40% - 80%, 50% - 80%, 60% - 80% 70% - 80%, 40% - 70%, 50% - 70%, 60% - 70%, 40% - 60%, 50% - 60%, 40% - 50% или приблизительно 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90% или 95% по общей массе переработанного масла.

[0077] В некоторых вариантах осуществления изобретения, переработанное масло либо не содержит TAG, либо имеет содержание TAG, которое равно или составляет менее 5% по общей массе переработанного масла. В качестве неограничивающего примера, переработанное масло имеет содержание TAG, составляющее приблизительно 0% - 5%, 1% - 5%, 2% - 5%, 3% - 5%, 4% - 5%, 0% - 4%, 1% - 4%, 2% - 4%, 3% - 4%, 0% - 3%, 1% - 3%, 2% - 3%, 0% - 2%, 1% - 2%, 0% - 1% или 0%, 1%, 2%, 3%, 4% или 5% по общей массе переработанного масла. В качестве другого неограничивающего примера, содержание TAG может составлять менее, чем 5%, 4%, 3%, 2%, 1%, 0,5% или 0,1%.

[0078] В некоторых вариантах осуществления изобретения, переработанное масло содержит немасляные ингредиенты, просиходящие от природного источника масла и присутствующие в этом источнике масла, а поэтому немасляные ингредиенты не добавляют в переработанное масло. В качестве неограничивающего примера, такие немасляные ингредиенты могут включать антиоксиданты, такие как токоферолы, которые включают альфа-токоферол, бета-токоферол, дельта-токоферол, гамма-токоферол, альфа-токотриенол, бета-токотриенол, дельта-токотриенол или гамма-токотриенол и другие витамины, такие как витамин К и структурно сходные производные 2-метил-1,4-нафтохинона. В некоторых вариантах осуществления изобретения, антиоксидант выбран из природных антиоксидантов (например, смешанных токоферолов или аскорбиновой кислоты) и синтетических антиоксидантов (например, бутилированного гидроксианизола или бутилированного гидрокситолуола).

[0079] В некоторых вариантах осуществления изобретения, продукт или пищевой продукт могут содержать по меньшей мере 1% MAG. В качестве неограничивающего примера, пищевой продукт может содержать по меньшей мере 1%, 2%, 3%, 4%, 5%, 6%, 7%, 8%, 9%, 10%, 11%, 12%, 13%, 14%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50% или более MAG от массе продукта или пищевого продукта и любое количество в интервале между указанными величинами. В другом неограничивающем примере, продукт или пищевой продукт может содержать от 5 масс.% до 15 масс.% MAG от общей массы продукта или пищевого продукта.

[0080] В некоторых вариантах осуществления изобретения, пищевой продукт может дополнительно содержать источник углеводов. В качестве неограничивающего примера, такой источник углеводов может содержать простые сахара, такие как глюкоза и фруктоза, происходящие от источников углеводов, таких как фруктовые сиропы и сиропы из агавы. Другие источники углеводов включают другие растительные сахарные сиропы, крахмалы и спирты ряда сахаров.

[0081] В некоторых вариантах осуществления изобретения, пищевой продукт может дополнительно содержать источник белка. В некоторых аспектах, источник белка может быть гидролизован или частично гидролизован. В качестве неограничивающего примера, такой источник белка может включать молочный белок (казеин и молочную сыворотку) и другие растительные белки, включая белок сои, риса и рисовых отрубей, чечевицы, нута, арахиса, миндаля, водорослей (спиралевидных), белок семян квиноя, микопротеин, белок семян чиа и белок семян конопли. Гидролизованный белок может быть полностью гидролизован, причем, белок гороха обогащен пептидами длиной от 1 до 10 аминокислот. В некоторых вариантах осуществления изобретения, белок обогащен пептидами длиной от 1 до 10 аминокислот приблизительно на 25-75% по сравнению с коммерчески доступным частично гидролизованным белком и другими продуктами-гидролизатами на основе молочной сыворотки, такими как Peptamen и Crucial. В качестве неограничивающего примера, белок обогащен пептидами длиной от 1 до 10 аминокислот по меньшей мере на 25% - 75%, 35% - 75%, 45% - 75%, 55% - 75%, 65% - 75%, 25% - 65%, 35% - 65%, 45% - 65%, 55% - 65%, 25% - 55%, 35% - 55%, 45% - 55%, 25% - 45%, 35% - 45%, 25% - 35% или на 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70% или 75%.

[0082] В некоторых вариантах осуществления изобретения, пищевой продукт может быть жидким, полутвердым или твердым. В качестве неограничивающего примера, полутвердое вещество может включать продукт, похожий на пудинг, мусс, эскимо или мороженое. В качестве неограничивающего примера, жидкость может представлять собой коктейль или другой напиток. В качестве неограничивающего примера, твердое вещество может представлять собой батончик или другой твердый пищевой продукт.

[0083] В некоторых вариантах осуществления изобретения, продукт или пищевой продукт дополнительно содержит агент, изменяющий вязкость. Агентом, изменяющим вязкость, может быть, например, но не ограничивается ими, ксантановая камедь или камедь акации. В некоторых вариантах осуществления изобретения, продукт или пищевой продукт может дополнительно содержать компонент, улучшающий структуру или повышающий стабильность, такой как, например, но ограничивающийся ими, гуммиарабик, лецитин подсолнечника и ксантановая камедь. В некоторых вариантах осуществления изобретения, продукт или пищевой продукт дополнительно содержит источник волокна, такой как, например, но ограничивающийся ими, олигосахариды. В некоторых вариантах осуществления изобретения, продукт или пищевой продукт может дополнительно содержать пищевой консервант, такой как, например, но ограничивающийся ими, бензоат натрия или сорбат калия.

[0084] В некоторых вариантах осуществления изобретения, продукт или пищевой продукт дополнительно содержит ароматизатор, маскирующий агент или блокатор. В качестве неограничивающего примера, ароматизаторы могут включать шоколадные, ванильные, клубничные или другие отдушки.

[0085] В некоторых вариантах осуществления изобретения, пищевой продукт имеет общую массу приблизительно от 25 граммов до 500 граммов. В качестве неограничивающего примера, пищевой продукт может иметь массу от 25 граммов до 500 граммов, от 50 граммов до 500 граммов, от 100 граммов до 500 граммов, от 250 граммов до 500 граммов, от 25 граммов до 250 граммов, от 50 граммов до 250 граммов, от 100 граммов до 250 граммов, от 25 граммов до 100 граммов, от 50 граммов до 100 граммов, от 25 граммов до 50 граммов или общую массу, которая меньше или равна 25 граммам, 50 граммам, 100 граммам, 150 граммам, 200 граммам, 250 граммам, 300 граммам, 350 граммам, 400 граммам, 450 граммам или 500 граммам.

[0086] В некоторых вариантах осуществления изобретения, пищевой продукт имеет общую калорийность приблизительно от 200 ккал до 1000 ккал. В качестве неограничивающего примера, пищевой продукт может иметь калорийность приблизительно от 200 ккал до 1000 ккал, от 400 ккал до 1000 ккал, от 600 ккал до 1000 ккал, от 800 ккал до 1000 ккал, от 200 ккал до 800 ккал, 400 ккал до 800 ккал, от 600 ккал до 800 ккал, от 200 ккал до 600 ккал, от 400 ккал до 600 ккал, от 200 ккал до 400 ккал или количество калорий, составляющее менее, чем или равное 200 ккал, 300 ккал, 400 ккал, 500 ккал, 600 ккал 700 ккал, 800 ккал, 900 ккал или 1000 ккал.

[0087] В некоторых вариантах осуществления изобретения, от 20% до 75% калорий в пищевом продукте дают масло или жир. В одном аспекте изобретения, масло или жир представляет собой переработанное масло. В еще одном аспекте изобретения, переработанное масло имеет содержание MAG, равное или превышающее 40 масс.% от общей массы переработанного масла. В других аспектах изобретения, переработанное масло имеет содержание MAG приблизительно от 40% до приблизительно 99% от общей массы переработанного масла. В еще одном аспекте изобретения, переработанное масло имеет содержание TAG менее 5 масс.% от общей массы переработанного масла. В качестве неограничивающего примера, 20% - 50%, 30% - 50%, 40% - 50%, 20% - 40%, 30% - 40%, 20% - 30%, 20% - 75%, 30% - 75%, 40% - 75%, 50% - 75%, 60% - 75%, 70% - 75%, 20% - 70%, 30% - 70%, 40% - 70%, 50% - 70%, 60% - 70%, 20% - 60%, 30% - 60%, 40% - 60%, 50% - 60% или приблизительно 20%, 21%, 22%, 23%, 24% 25%, 26%, 27%, 28%, 29%, 30%, 31%, 32%, 33%, 34%, 35%, 36%, 37%, 38%, 39%, 40%, 41%, 42%, 43%, 44%, 45%, 46%, 47%, 48%, 49%, 50%, 51%, 52%, 53%, 54%, 55%, 56%, 57%, 58%, 59%, 60%, 61%, 62%, 63%, 64%, 65%, 66%, 67%, 68%, 69%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74% или 75% калорий в пищевом продукте поступают из любых вышеописанных переработанных масел.

[0088] В некоторых вариантах осуществления изобретения, приблизительно 20-50% калорий в пищевом продукте поступают из источника углеводов. В качестве неограничивающего примера, 20% - 50%, 30% - 50%, 40% - 50%, 20% - 40%, 30% - 40%, 20% - 30% или приблизительно 20%, 21%, 22%, 23%, 24%, 25%, 26%, 27%, 28%, 29%, 30%, 31%, 32%, 33%, 34%, 35%, 36%, 37%, 38%, 39%, 40%, 41%, 42%, 43%, 44%, 45%, 46%, 47%, 48%, 49% или 50% калорий в пищевом продукте поступают из источника углеводов.

[0089] В некоторых вариантах осуществления изобретения, приблизительно 10% - 50% калорий в пищевом продукте поступают из источника белка. В качестве неограничивающего примера, 10% - 50%, 20% - 50%, 30% - 50%, 40% - 50%, 10% - 40%, 20% - 40%, 30% - 40%, 10% - 30%, 20% - 30%, 10% - 20% или приблизительно 10%, 11%, 12%, 13%, 14%, 15%, 16%, 17%, 18%, 19%, 20%, 21%, 22%, 23%, 24%, 25%, 26%, 27%, 28%, 29%, 30%, 31%, 32%, 33%, 34%, 35%, 36% 37%, 38%, 39%, 40%, 41%, 42%, 43%, 44%, 45%, 46%, 47%, 48%, 49% или 50% калорий в пищевом продукте поступают из источника белка.

[0090] Следует отметить, что раскрытые выше варианты пищевого продукта могут быть объединены.

[0091] В некоторых вариантах осуществления изобретения, продукты на основе EMO употребляются в пищу индивидуумами с плохо функционирующей пищеварительной системой, например, но ограничивающийся ими, индивидуумами, страдающими EPI, или индивидуумами, которые принимают пищу во время проведения PERT. В некоторых вариантах осуществления изобретения, продукты на основе EMO употребляются в пищу индивидуумами, которые нуждаются в более быстром или более полном превращении липидов в триглицериды сыворотки. Таким образом, настоящее изобретение относится к способу разработки режима питания человека или животного с плохо функционирующей пищеварительной системой. Этот способ включает введение указанному пациенту пищевого продукта, описанного в любом из вышеуказанных вариантов осуществления изобретения или в комбинациях таких вариантов. В одном аспекте аспекте изобретения, человека или животное страдает острым нарушением пищеварения (например, детской EPI) или хроническим нарушением пищеварения. Такими группами индивидуумов являются группы индивидуумов, страдающих муковисцидозом, панкреатитом, раком поджелудочной железы или холестазом, раком желудочно-кишечного тракта, глютеновой болезнью, сахарным диабетом, болезнью Крона, синдромом короткого кишечника, синдромом Золингера-Эллисона; индивидуумов после хирургической операции на поджелудочной железе и кишечнике, и индивидуумов с другими состояниями, при которых пищеварение нарушается или происходит неэффективно. В других аспектах изобретения, у человека или животного может наблюдаться благоприятный эффект от более быстрого и более эффективного пищеварения даже в отсутствии какого-либо конкретного заболевания (например, у пожилых людей и спортсменов).

Примеры

Пример 1. Способ получения продукта, обогащенного MAG, по сравнению с исходным маслом, обогащенным TAG

[0092] Способ получения продукта, обогащенного MAG, по сравнению с исходным маслом, обогащенным TAG, включает 3 ключевых стадии: (1) мягкую катализируемую ферментом реакцию гидролиза триглицеридов (TAG) с последовательным превращением нейтральных масел в специфические комбинации FFA, MAG, DAG и TAG с низким остаточным содержанием; (2) этерификацию глицерином с образованием преимущественно высоких количеств MAG, имеющих низкие концентрации FFA; и (3) выделение модифицированного липидного продукта, что достигается путем разделения фаз с использованием или без использования центрифуги.

[0093] Стадия 1. Ферментативное превращение триацилглицеринов

[0094] Приготовление буферного раствора. Раствор цитрата натрия (100 мМ, рН 5,8) получали в резервуарном реакторе с мешалкой. 11,1 л деионизированной (DI) воды помещали в сосуд-смеситель, мешалку устанавливали на 200 об/мин и добавляли 0,213 кг лимонной кислоты (безводной). После растворения порошка, рН доводили до рН=5,8 путем добавления раствора гидроксида натрия (приблизительно 0,121 кг). 220 мл удаляли для последующего приготовления раствора фермента.

[0095] Приготовление раствора фермента. В отдельной 250 мл-бутыли приготавливали раствор фермента при осторожном перемешивании: 200 мл раствора цитратного буфера помещали в сосуд-смеситель. Затем добавляли 10 г липазы AY AMANO, и бутыль встряхивали до растворения фермента.

[0096] Превращение смеси триглицеридных масел. Три растительных масла: оливковое масло, льняное масло и подсолнечное масло добавляли в сосуд для получения в целом 10 кг смеси растительного масла. Затем подавали вакуум для снижения давления приблизительно до 20 мм рт.ст., и продукт дегазировали (в частности, удаляли растворенный кислород). Перемешивание устанавливали на 200 об/мин, и смесь нагревали до 33°C и перемешивали приблизительно в течение 15 минут для удаления любого растворенного газа. Затем вакуум заменяли атмосферой газообразного азота. Как только смесь была достаточно диспергирована, добавляли 220 мл ферментного препарата в буферном растворе. Перемешивание продолжали и проводили мониторинг реакции с помощью ТСХ-анализа в течение 24 часов до завершения превращения в FFA.

[0097] Температуру реактора повышали до 70°C и перемешивание снова проводили в течение 1 часа для инактивации фермента.

[0098] Перемешивание прекращали, и фазы разделяли приблизительно через 60 минут.

[0099] Водную (нижнюю) фазу удаляли вместе с небольшим количеством масляной фазы для гарантии удаления остаточного белка на границе раздела фаз.

[00100] Стадия 2. Этерификация глицерином. Обычно, при переэтерификации FFA глицерином образуется смесь MAG, DAG и TAG. Авторами было обнаружено, что при значительном снижении температуры (ниже 25°C) и удалении воды (путем выпаривания) по мере ее образования в реакционной смеси, количество MAG в продукте может быть в значительной степени увеличено (по меньшей мере на 60%, но не выше 95%). Этот результат был неожиданным.

[00101] В этой реакции, продукт реакции стадии 1 (приблизительно 10 л) охлаждали до приблизительно 30°C и перемешивали при 300 об/мин. К липидной смеси добавляли 10 кг пищевого глицерина, и температуру поддерживали на уровне ~30°C. Смесь перемешивали с получением дисперсии масла и глицерина. Для сушки реакционной смеси подавали вакуум: сначала подавали вакуум (25 мм рт.ст., Торр), а затем устанавливали приемник для сбора воды. После испарения остаточной воды, в реактор добавляли 20 г липазы G Amano, растворенной в воде (50 мл). Температуру снижали до 23°C, а вакуум доводили до 5 мм рт.ст. с использованием масляного мембранного насоса и холодной ловушки для сбора воды. Смесь перемешивали при 300 об/мин при 23°C в вакууме в течение 72 часов, после чего вакуум снимали и смесь обрабатывали в атмосфере газообразного азота. Смесь анализировали через 72 часа с помощью ТСХ для оценки превращения в MAG, как показано на фигуре 1.

[00102] Стадия 3. Инактивация липазы и разделение фаз. После завершения реакции, липазу инактивировали путем нагревания смеси (в атмосфере газообразного азота) до 70°C в течение 1 часа. В это время MAG-масло и глицерин тщательно смешивали, так как их очень трудно разделить традиционными гравитационными или центрифужными методами. После длительного экспериментирования, авторами было обнаружено, что липид можно отделить от избытка глицерина путем добавления 0,3% масс.% соли (NaCl) к реакционной смеси при перемешивании. Затем смесь продуктов оставляли для охлаждения приблизительно до 60°C и оставляли без перемешивания приблизительно на 1 час.

[00103] Липидная масляная фаза отделялась от оставшейся более тяжелой глицериновой фазы. Глицериновая фаза была удалена: она содержала немного соли, остаточную воду и растворенный инактивированный фермент, который присутствовал на видимой границе раздела фаз. Глицериновая фаза может быть снова использована после мембранной фильтрации и должна храниться для повторной переработки. Токоферол (витамин Е) добавляли до концентрации 200 м.д. (0,02 масс.%) масляного продукта. Гидролизованное масло (приблизительно 10 кг) было готово к применению и могло храниться в атмосфере азота.

[00104] Хранение продукта. Конечные гидролизованные продукты переносили в пищевые контейнеры с газообразным азотом для хранения и транспортировки.

Пример 2: Характеристика масла, полученного в Примере 1.

[00105] Продукты реакции и общая процедура могут быть оценены с использованием тонкослойной хроматографии и газовой хроматографии.

[00106] Тестирование с помощью тонкослойной хроматографии. Компоненты образцов масла разделяли с использованием ТСХ-пластин (с силикагелем Analtech Uniplate GHL, содержащим неорганическое связующее вещество, 20×20 см, 250 мкм). Растворитель представлял собой раствор гексана:диэтилового эфира:уксусной кислоти (70:30:1). Типичные размеры образцов составляли 3 мкл. После того, как фронт растворителя приближался к верхней части пластины (~1 см), эти пластины удаляли из ТСХ-резервуара, и растворитель выпаривали в вытяжном шкафу. Компоненты визуализировали с помощью паров йода (при комнатной температуре) в ТСХ-резервуаре и оценивали относительную интенсивность с помощью колориметрической визуализации (на визуализаторе Amersham 600). После выдерживания в течение 15 минут в резервуаре, пластины вынимали и фотографировали. Интенсивность пятен уменьшилась через 30-60 минут.

[00107] Определение физических свойств проводили для оценки консистенции продукта, цвета, содержания воды, жиров и масел (смешиваемых).

[00108] На фигуре 1 представлены конечные результаты стадий 1-3 в спсообе приготовления продукта, обогащенного MAG, по сравнению с исходным маслом, обогащенным TAG, как описано в Примере 1. На фигуре 2 показано, что токоферол, изначально присутствующий в оливковом масле, сохранялся после проведения стадий, описанных в Примере 1. На фигуре 2 видно, что пятно токоферола прослеживается над пятном TAG на всех трех дорожках.

[00109] Тестирование профиля жирных кислот с помощью газовой хроматографии. Липидные компоненты, включая каприновую кислоту C10:0, лауриновую кислоту C12:0, миристиновую кислоту C14:0, пальмитиновую кислоту C16:0, стеариновую кислоту C18:0, олеиновую кислоту C18:1, линолевую кислоту C18:2 и альфа- линоленовую кислоту C18:3 анализировали после дериватизации в виде метиловых эфиров жирных кислот и сравнивали со стандартами. Для дериватизации, образец (500 мкл) добавляли в реакционную 5 мл-пробирку, содержащую 2 мл раствора трифторида бора (12% в метаноле), 20 мкл диметоксипропана и 100 мкл раствора тридекановой кислоты в качестве внутреннего стандарта (10 мг/мл). Реакционную пробирку встряхивали и инкубировали в нагревательном блоке при 60°C в течение 30 минут.

[00110] Реакционную пробирку вынимали из нагревательного блока и оставляли для охлаждения на 15 минут. Затем добавляли 1 мл дистиллированной воды для гашения реакции, а затем добавляли 1 мл гексана. Реакционную пробирку встряхивали в течение 60 секунд, и фазы оставляли на 3 минуты для разделения. Верхнюю (гидрофобную) фазу переносили в 1,5 мл-пробирку, содержащую приблизительно 50 мг сульфата натрия (безводного). После встряхивания в течение 60 секунд, 1,5 мл-пробирку центрифугировали и ~500 мкл осветленной осушенной гидрофобной фазы переносили в сосуд с образцами для проведения газовой хроматографии.

[00111] Образцы анализировали с использованием газового хроматографа Agilent 7890A с пламенно-ионизационным детектором и компьютерной программы Agilent Openlab CDS Chemstation. ГХ-колонка представляет собой колонку Omegawax 100 (15 × 0,1 мм × 0,1 мкм). Результаты были преобразованы в масс.% по внутреннему стандарту.

[00112] На фигуре 3 показано распределение FFA, MAG, DAG и TAG при проведении способа приготовления продукта ENSURE и продукта GBFS согласно изобретению. Процентное содержание FFA, MAG, DAG и TAG в маслах определяли с помощью тонкослойной хроматографии.

Пример 3: Другой пример способа приготовления продукта, обогащенного MAG, по сравнению с исходным маслом, обогащенным TAG.

[00113] Нижеследующая процедура представлена блок-схемой на фигуре 4.

[00114] Растительное масло добавляли в лимонную кислоту и гидроксид натрия (едкий натр) в деионизованной воде и нагревали до 33°C ± 2°C. Низкий вакуум подавали для дегазирования в целях удаления кислорода. После этого добавляли липазу AY. Гидролиз смеси проводили в течение 14-24 часов в атмосфере азота при температуре 33°C ± 2°C.

[00115] Липазу инактивировали при температуре 70°C ± 2°C в течение 1 часа. Водную фазу с инактивированным ферментом сливали. Затем добавляли глицерин. Затем реакционную смесь охлаждали до 22°C ± 2°C. После этого добавляли липазу G, и воду выпаривали в умеренном вакууме.

[00116] Переэтерификацию проводили в течение 72 часов в высоком вакууме (приблизительно 720 мм рт.ст.) при температуре 20°C ± 2°C. Липазу G инактивировали при 70°C ± 2°C в течение одного часа, и к реакционной смеси добавляли соль.

[00117] Инактивацию фермента и разделение фаз проводили в атмосфере азота в течение 1 часа при 70°C ± 2°C. Водную фазу с инактивированным ферментом, глицерином и солью сливали. Реакционную смесь охлаждали до 60°C ± 2°C. После этого добавляли антиоксидант. Конечный продукт хранили при 4°C ± 2°C в атмосфере азота.

Пример 4: Готовая к употреблению композиция, включающая MAG и гидролизованный белок

[00118] Продукт согласно изобретению был приготовлен в виде обычного «молочного коктейля», который включал источник жиров, белков, углеводов, витаминов и волокон в дополнение к традиционным поверхностно-активным веществам и стабилизирующим агентам, обычно присутствующим в этих продуктах. Отдельная порция составляла 250 мл. На этикетке «Ингредиенты» были указаны следующие ингредиенты: вода, органический сироп агавы, гидролизованный белок гороха, смесь гидролизованных масел, гуммиарабик, лецитин подсолнечника, ксантановая камедь, олигосахариды, сорбат калия, бензоат натрия, растворимый кофе, натуральная органическая ванильная отдушка, витамин С, сукцинат витамина Е, пальмитат витамина А, ниацинамид, D-пантотинат кальция, пиродоксин-HCl, тиамин-HCl, рибофлавин, витамин D3, фолиевая кислота, цианокобаламин, витамин K2.

[00119] Углеводы подавались в виде простых сахаров (глюкозы и фруктозы) из фруктовых сиропов и сиропов агавы.

[00120] Белок в продукте представлял собой частично гидролизованный белок гороха (PURIS Pea Protein 870H, World Food Processing LLC, Turtle Lake, WI 54889).

[00121] Автоами был также получен полностью гидролизованный белок гороха (EHP) с пептидами в интервале размеров, которые биологически были более подходящими для транспорта через стенку кишечника. EHP получали путем последующего ферментативного гидролиза. Так, например, частично гидролизованный белок гороха (белок гороха Puris 870H, описанный выше) растворяли в 100 мМ фосфатного буфера до концентрации 25 мг/мл. Затем добавляли фермент, и реакционную смесь инкубировали при 50°C в течение ночи. Были оценены три различных коммерчески доступных фермента GRAS: алкалаза, термоаза и флаворзим.

[00122] Средний размер и распределение пептидов в образцах белка оценивали с помощью эксклюзионной хроматографии. Образцы растворяли в 100 мМ фосфатном буфере, рН 6,8 до концентрации 25 мг/мл, и анализировали с помощью ВЭЖХ Shimadzu с УФ-детектором (214 нм) с использованием колонки Phenomenex Yarra 3 мкм SEC-2000 (элюирование 100 мМ фосфатно-натриевого буфера (рН 6,8), скорость потока 0,8 мл/мин при комнатной температуре). Образцы сравнивали со стандартом молекулярной массы (стандартная часть Phenomenex SEC ALO-3042). Размеры оценивали с использованием калибровочной кривой, построенной по известным стандартам молекулярной массы. Средний размер негидролизованного белка гороха составлял ~200 аминокислот. Средний размер частично гидролизованного белка гороха Puris Pea 870H составлял 34 аминокислоты со значительным количеством аминокислот в диапазоне 2-40, аналогичном количеству аминокислот в других продуктах гидролизата белка (на основе молочной сыворотки).

[00123] На фигуре 5 показано распределение аминокислот и пептидов в готовых к употреблению питательных напитках, как описано E. Phillips et al., 2005 Peptide-Based Formulas: the Nutraceuticals of Enteral Feeding? EPCN October: 40-45 по сравнению с полностью гидролизованным белком гороха GBFS, описанным выше. На Фигуре 5 указан процент аминокислот (ось Y) размером в 1 аминокислоту, 2-4 аминокислот, 9-10 аминокислот, 10-40 аминокислот или более 40 аминокислот в продуктах Oeotamen, Perative, Cricual, Pivot и GBFS согласно изобретению (ось X). Средний размер EHP GBFS составлял 3-4 аминокислоты, а в основном 1-7 аминокислот.

[00124] Жир был получен в виде реструктурированного липидного MAG и был приготовлен из смеси оливкового масла (70%), подсолнечного масла (21%) и льняного масла (9%) для обеспечения энергетической ценности и других преимуществ полиненасыщенных жирных кислот (ПНЖК), ПНЖК омега-6 и ПНЖК омега-3. Соотношение омега-6/омега-3 составляло ~4/1.

[00125] Гуммиарабик, лецитин подсолнечника и ксантановая камедь являются обычными пищевыми ингредиентами GRAS, используемыми для улучшения структуры и повышения стабильности напитка. Олигосахариды обеспечивают неперевариваемое волокно. Сорбат калия и бензоат натрия являются обычными пищевыми консервантами. Растворимый кофе и ваниль придают вкус.

[00126] Была включена упаковка витаминов, содержащая жирорастворимые и водорастворимые витамины.

[00127] Прототип продукта с этикеткой «Питательный продукт» показан в Таблице 1. В Таблице 1 ** означают ежедневные значения в процентах (% DV), полученные на основе диеты в 2000 калорий. † - ежедневное значение (DV) не установлено.

Дополнительные факты
Размер порции 250 мл Количество на порцию % DV ** Калории 379 ккал Всего жиров 19 г 24% Холестерин - мг 0% Всего углеводов 32 г 12% Пищевое волокно 2 г 7% Сахара 30 г Белок 20 г 40% Витамин А 320 мкг 35% Витамин С 480 мг 35% Витамин D 7 мкг 35% Витамин Е 5 мг 35% Витамин K 42 мкг 35% Тиамин 400 мкг 35% Рибофлавин 450 мкг 35% Ниацин 6 мг 35% Витамин В6 600 мкг 35% Фолат 132 мкг 35% Витамин В12 1 мкг 35% Биотин 10 мкг 35% Пантотеновая кислота 2 мг 35% Кальций 480 мг 35% Железо 6 мг 35% Фосфор 450 мг 35% Хлорид - мг † Натрий 175 мг 7% Калий 1600 мг 35%

[00128] Сенсорная оценка. FFA, полученные из смеси растительного масла, были оценены по вкусовой панели как неприятные. Удивительно то, что MAG-масло, полученное из этой смеси, было приятным на вкус и по вкусу и консистенции напоминало исходное триглицеридное масло. Когда MAG-масло вводили в состав продукта RTD, описанного выше, аромат был приемлемым и не отличался от аромата аналогичных коммерческих продуктов с интактными (не-переваренными) липидами и белками.

Пример 5: Получение множества партий EМО

[00129] Было оценено время, затраченное на приготовление EMO, как описано в Примере 1, в результате чего было получено масло, которое имело содержание MAG более чем 70%; MAG+FFA и TAG более, чем >85%; и TAG 5% или менее.

[00130] В Таблице 2 проиллюстрировано сканирование ТСХ-пластин с указанием концентраций MAG и FFA в модифицированном ферментом масле (EMO), полученном из смеси оливкового масла/льняного масла/подсолнечного масла (в отношении 7/2/1). В этих экспериментах, стадию 2 продлевали до 84 часов для установления верхних временных и температурных пределов во избежание образования TAG.

Эксперимент TAG DAG MAG FFA FFA+MAG 1 4 26 56 13 70 2 4 11 73 13 85 3 5 10 76 9 85

Мониторинг реакции может быть проведен, по существу, в реальном времени с помощью ТСХ-анализа и прекращен в любой момент времени на стадии 2 с получением желаемых количеств MAG, DAG, TAG и FFA. Было установлено, что время реакции, составляющее 72 часа для стадии 2, является практической и продуктивной точкой прекращения процесса, как показано в Примере 6.

Пример 6: Оценка модифицированного ферментом миндального масла, не содержащего TAG, с помощью ЯМР-анализа.

[00131] ЕМО, не содержащие TAG, получали с использованием миндального масла. Условия реакции были такими, как описано в Примере 1. Для минимизации образования TAG, стадию 2 проводили в течение 72 часов.

[00132] На Фигурах 6А-6В проиллюстрирован ¹³С-ЯМР-анализ EMO, полученного из миндального масла. На Фигуре 6А показано, что ¹³С-ЯМР-сигнал ассоциирован с аутентичным TAG (тристерином) и с характеристическими пиками при 62,173 м.д. и 68,921 м.д. На Фигуре 6В проиллюстрирован ¹³С-ЯМР-сигнал для ЕМО. Это означает, что каких-либо заметных сигналов TAG на наблюдалось. Интеграция фактических сигналов указывает на распределение ацилглицерина между MAG:DAG=88%:12%. Образцы анализировали на ЯМР-спектрометре модели JEOL ECA600II, работающем на протонном излучении с частотой 600 МГц и на углеродном излучении с частотой 150 МГц. Образцы приготавливали в 5 мм-пробирках и блокировали CDCl₃ при температуре окружающей среды.

Пример 7: Клинические испытания готового к употреблению коктейля на основе EМО

[00133] Это исследование было разработано для того, чтобы показать, что пациенты с EPI могут употреблять пищу, приготовленную с использованием масел, не содержащих TAG, которые было получены авторами без добавления каких-либо ферментных лекарственных добавок, и у этих пациентов будут усваиваться липиды с продуцированием TAG в сыворотке, но, при этом, у них будут отсутствовать симптомы (метеоризм, судороги и стеаторея), ассоциированные с потреблением липидов без проведения PERT.

[00134] Это клиническое исследование представляет собой одноцентровое, рандомизированное, двойное слепое перекрестное исследование с оценкой готового к употреблению коктейля на основе EMO (RTDS) для определения уровня липидов в крови, для оценки безопасности, переносимости и вкусовых качеств по сравнению со стандартной питательной добавкой, используемой вместе с капсулами для ферменто-заместительной терапии поджелудочной железы («PERT»).

[00135] Пациенты приходили в клинику после ночного голодания и вечернего приема стандартизированной пищи. Пациентам Группы 1 (10 пациентам) вводили RTDS вместе с плацебо при PERT, а пациентам Группы 2 (10 пациентам) вводили стандартную пищевую добавку при PERT. Серийные пробы крови, взятые в течение 6 часов (0, 1, 2, 3, 4, 5, 6 часов), были получены от пациентов в обеих экспериментальных группах без повторного приема RTDS или стандартной пищевой добавки. Воду можно было употреблять во время всего исследования.

[00136] Пациенты возвращались в клинику для лечения 2 (перекрестного лечения) после голодания в течение ночи и вечернего приема стандартизированной пищи. Пациентам Группы 1 вводили стандартную пищевую добавку при PERT, а пациентам Группы 2 вводили RTDS вместе с PERT-плацебо. Серийные пробы крови, взятые в течение 6 часов (0, 1, 2, 3, 4, 5, 6 часов), были получены от пациентов в обеих экспериментальных группах без повторного приема RTDS или стандартной пищевой добавки.

[00137] Доза липида составляла 0,5 г/кг массы тела. Липид в стандартной пищевой добавке представлял собой смесь TAG, выделенных из масла канолы, подсолнечного масле с высоким содержанием олеиновой кислоты и кукурузного масла. В лечебном напитке, MAG были получены из миндального масла. Доза липида для каждого пациента была основана на хорошо известных «тестах на переносимость липидов», которые по своему протоколу и объему аналогичны известным тестам на переносимость глюкозы. Рекомендуемая доза для этих тестов составляет 0,5-1,0 г/кг, вводимая в течение 20-30 минут. Образцы брали в начале испытаний и ежечасно в течение 6-8 часов. Уровни триглицеридов в сыворотке измеряли с применением стандартных лабораторных методов.

[00138] PERT-доза, используемая в исследовании, была рекомендована производителями и составляла 2500 МЕ активности липазы на грамм потребляемого жира. Это равносильно 3-4 капсулам, вводимым на перекрестной стадии исследования.

[00139] На Фигуре 7 показано увеличение уровней триглицеридов в сыворотке после приема готового к употреблению коктейля на основе EMO двумя пациентами. На Фигуре 7, пунктирными линии показаны пациенты, которые принимали 0,5 г модифицированного ферментами миндального масла на кг массы тела, а сплошными линиями показаны пациенты, которые принимали 0,5 г масла канолы, подсолнечного масла с высоким содержанием олеиновой кислоты и кукурузного масла на кг массы тела, где такое масло было включено в RTDS, употребляемое в течение получаса. На Фигуре 7 показано, что модифицированное ферментом масло в RTDS усваивалось пациентами и превращалось в триглицериды сыворотки. Такое лечение хорошо переносилось пациентами.

[00140] На Фигуре 8 проиллюстрировано увеличение уровней триглицеридов в сыворотке у другого пациента после приема тестируемых напитков. На Фигуре 8, пунктирными линии показаны триглицериды сыворотки после приема RTDS на основе MAG без PERT, а сплошной линией показано стандартное RTDS-лечение вместе с PERT. Пациенты получали 0,5 г модифицированного ферментами миндального масла на кг массы тела или 0,5 г кукурузного масла на кг массы тела, где такое масло было включено в RTDS, употребляемое в течение получаса. Такое лечение хорошо переносилось пациентами.

[00141] У этого пациента, усвояемость липида и превращение в триглицериды сыворотки происходило значительно быстрее после приема RTDS на основе MAG без PERT, чем после приема продукта на основе TAG (при стандартном лечении) вместе с PERT. Это позволяет предположить, что пациент, помимо EPI, страдал холестазом (нарушением оттока желчи из печени), а не просто недостатком ферментов, а поэтому, у него не могло происходить должным образом эмульгирование масла канолы, подсолнечного масла с высоким содержанием олеиновой кислоты и кукурузного масла при приеме стандартного напитка. Эмульгирование масла в очень маленькие капельки необходимо для создания площади поверхности, требующейся липазе поджелудочной железы для гидролиза масла в MAG и FFA, которые транспортируются в энтероциты. Для достижения такой активности необходимы желчные кислоты печени. TAG в стандартном лечебном напитке не могут быть эмульгированы в микроэмульсии, необходимые для оптимальной активности липазы в тонком кишечнике, и, таким образом, уровень триглицеридов в сыворотке не увеличивался так быстро, как это происходит в случае препарата MAG, который не требует дополнительного эмульгирования или активности липазы.

Пример 8: Высококалорийный готовый к употреблению коктейль без PERT

[00142] Высококалорийные RTDS могут быть приготовлены следующим образом: в основной сосуд-смеситель добавляют деионизированную воду (~60% от конечного объема) и воду нагревают до ~60°C. Затем смешивают с гидролизованным белком, и добавляют сироп агавы. Для смешивания используют ручной миксер. В отдельном контейнере смешивают теплое (60°C) EMO и лецитин. После растворения лецитина, к водной фазе добавляют EMO/лецитин и перемешивают. Затем снова добавляют воду для достижения конечной массы (объема). После этого эмульгируют с помощью блендера с высоким сдвиговым усилием. Для приготовления очень высококалорийных RTDS добавляют более высокие уровни компонентов.

[00143] После приготовления основы для напитка, для получения уникальных продуктов можно добавить различные отдушки, маскирующие вещества и блокаторы, такие как шоколад, ваниль, клубника и т.п.

[00144] Этот способ может быть также применен для приготовления высококалорийных продуктов в полутвердой форме, таких как продукты, напоминающие пудинги, муссы, «эскимо» и мороженое, с использованием рецептуры приготовления основы для напитков с добавлением агентов, изменяющих вязкость, таких как ксантановая камедь и камедь акации.

[00145] Первичные ингредиенты и питательная ценность указаны в Таблице 3 для высококалорийных (1,5 ккал/мл) RDTS.

Высококалорийные компоненты Масс. % ккал/г ккал/325 мл напитка ккал/мл EMO 7,5 9 219 0,7 Сахара агавы 14 4 182 0,6 Гидролизованный белок 5 4 65 0,2 Жир гороха 0,7 9 21 0,1 Лецитин подсолнечника 0,5 9 15 0,0 Итого 28 502 1,5

[00146] Первичные ингредиенты и питательная ценность приведены в Таблице 4 для очень высококалорийных (2,5 ккал/мл) RDTS.

Высококалорийные компоненты Масс. % ккал/г ккал/325 мл напитка ккал/мл EMO 12 9 351 1,1 Сахара агавы 20 4 260 0,8 Гидролизованный белок 10 4 130 0,4 Жир гороха 1,4 9 42 0,1 Лецитин подсолнечника 0,5 9 15 0,0 Итого 44 797 2,5

Пример 9: Высококалорийный батончик, не содержащий PERT

[00147] Высококалорийный батончик может быть приготовлен следующим образом: в основной сосуд-смеситель добавляют деионизированную воду (~60% от конечного объема) и воду нагревают до ~60°C. Затем смешивают с гидролизованным белком и добавляют сироп агавы. В отдельном контейнере смешивают теплое (60°C) EMO и лецитин с помощью ручного миксера. После растворения лецитина, к водной фазе добавляют EMO/лецитин и перемешивают. Затем снова добавляют воду для достижения конечной массы (объема).

[00148] Первичные ингредиенты и питательная ценность приведены в Таблице 5 для высококалорийного батончика без PERT.

Высококалорийные компоненты Масс. % в продукте ккал/г ккал/60 г батончика EMO 9 9 81 Сахара агавы 15 4 60 Гидролизованный белок 19 4 76 Жир гороха 2,7 9 24 Лецитин подсолнечника 0,5 9 15 Итого 46 256

[00149] После приготовления основы для батончика, перед выпечкой, для получения уникальных продуктов можно добавить различные отдушки, маскирующие вещества и блокаторы, такие как шоколад, ваниль и т.п.

Пример 10. Изготовление готового к употреблению коктейля.

[00150] В основной сосуд-смеситель добавляют деионизированную воду, и эту воду нагревают до ~60°C ± 2°C. Как только вода достигнет 60°C, медленно добавляют сахарный сироп (такой как сироп агавы или финиковый сироп) с легким перемешиванием. Затем раствор смешивают. Отдельные сухие вещества (смесь витаминов/микроэлементов и гидролизованный белок) взвешивают и объединяют в отдельном контейнере. Сухие ингредиенты тщательно смешивают. Затем медленно добавляют смешанные сухие ингредиенты непосредственно в основной сосуд-смеситель с легким перемешиванием путем раскачивания. После этого, EMO взвешивают в отдельном контейнере. EMO нагревают до 60°C ± 2°C. Затем в теплый EMO медленно добавляют лецитин подсолнечника при умеренном перемешивании (если это необходимо), до тех пор, пока лецитин подсолнечника полностью не смешается с раствором. После этого, в основной сосуд-смеситель медленно добавляют смесь EMO/лецитина подсолнечника. Затем добавляют дистиллированную воду для увеличения объема до 95% по общей массе жидкости, и оставляют при температуре 70°C ± 2°C. В основной сосуд-смеситель медленно добавляют отдушки и краситель. Затем, в основной сосуд-смеситель медленно добавляют стабилизатор (такой как камедь акации). Раствор смешивают в течение 20 минут (для увеличения вязкости). Температуру раствора поддерживают при 70°C ± 2°C. Раствор доводят до конечного объема путем добавления достаточного количества дистиллированной воды. Продукт пропускают через гомогенизатор(ы) для снижения давления в целях получения стабильных эмульсий. Продукт пастеризуют или стерилизуют. Затем продукт охлаждают до комнатной температуры. После этого продукт заливают в упаковку.

[00151] Следовательно, настоящее изобретение хорошо адаптировано для достижения вышеупомянутых целей и преимуществ, а также присущих ему преимуществ. Хотя специалист в данной области может внести различные изменения, однако, такие изменения должны входить в объем настоящего изобретения, проиллюстрированного, в основном, в прилагаемой формуле изобретения.

[00152] Вышеприведенное описание конкретных вариантов осуществления изобретения было представлено в целях его иллюстрации и описания. Репрезентативные варианты осуществления изобретения были выбраны и описаны для лучшего понимания принципов раскрытия изобретения и его практического применения, и для того, чтобы дать возможность другим специалистам наилучшим образом использовать данный предмет изобретения и различные варианты его осуществления с различными модификациями, подходящими для конкретно рассматриваемого применения. Различные признаки и раскрытие различных вариантов осуществления изобретения могут быть объединены и входят в объем раскрытия настоящего изобретения.

Настоящее изобретение относится к пищевой промышленности, конкретно к пищевому продукту (варианты), переработанному маслу и способу получения переработанных масел с высоким содержанием моноацилглицеридов (MAG). Пищевой продукт содержит переработанное масло и имеет общее содержание калорий от 25 ккал до 1000 ккал, характеризуется тем, что от 5% до 75% от общего содержания калорий поставляется указанным переработанным маслом, где переработанное масло получено из источника масла и содержит менее чем 10 масс. % триацилглицеридов (TAG) и более чем 50 масс. % MAG от общей массы переработанного масла и где переработанное масло дополнительно содержит немасляные ингредиенты, происходящие от природного источника масла и присутствующие в этом источнике масла, и немасляные ингредиенты не добавляют в переработанное масло. Техническим результатом изобретений является предоставление способа получения пищевого, модифицированного ферментом масла, практически не содержащего TAG и пищевых продуктов на основе масла для индивидуумов с нарушенным действием пищеварительной системы. 4 н. и 58 з.п. ф-лы, 8 ил., 5 табл., 10 пр.

1. Пищевой продукт, содержащий переработанное масло и имеющий общее содержание калорий приблизительно от 25 ккал до приблизительно 1000 ккал, где приблизительно от 5% до приблизительно 75% от общего содержания калорий поставляется указанным переработанным маслом, где переработанное масло получено из источника масла, где переработанное масло содержит меньше чем 10 масс. % триацилглицеридов (TAG) от общей массы масла, где переработанное масло содержит более чем 50 масс. % моноацилглицерида (MAG) от общей массы переработанного масла

и где переработанное масло дополнительно содержит немасляные ингредиенты, происходящие от природного источника масла и присутствующие в этом источнике масла, а поэтому немасляные ингредиенты не добавляют в переработанное масло.

2. Пищевой продукт по п. 1, где переработанное масло содержит более чем 60 масс. % MAG от общей массы переработанного масла.

3. Пищевой продукт по п. 1, где переработанное масло содержит более чем 70 масс. % MAG от общей массы переработанного масла.

4. Пищевой продукт по п. 1, где переработанное масло содержит более чем 80 масс. % MAG от общей массы переработанного масла.

5. Пищевой продукт по п. 1, где переработанное масло содержит более чем 90 масс. % MAG от общей массы переработанного масла.

6. Пищевой продукт по любому из пп. 1-5, где приблизительно от 10% до приблизительно 60% от общего содержания калорий поступает от указанного переработанного масла.

7. Пищевой продукт по любому из пп. 1-5, где приблизительно от 20% до приблизительно 50% от общего содержания калорий поступает от указанного переработанного масла.

8. Пищевой продукт по любому из пп. 1-5, где приблизительно от 25% до приблизительно 45% от общего содержания калорий поступает от указанного переработанного масла.

9. Пищевой продукт по любому из пп. 1-5, где приблизительно от 30% до приблизительно 40% от общего содержания калорий поступает от указанного переработанного масла.

10. Пищевой продукт по любому из пп. 1-5, дополнительно содержащий источник углеводов.

11. Пищевой продукт по п. 10, где указанный источник углеводов представляет собой фруктовый сироп или сироп агавы.

12. Пищевой продукт по п. 10, где указанный источник углеводов содержит простые сахара.

13. Пищевой продукт по п. 10, где приблизительно от 20% до приблизительно 50% калорий поступает от источника углеводов.

14. Пищевой продукт по п. 10, дополнительно содержащий источник белка.

15. Пищевой продукт по п. 14, где приблизительно от 10% до приблизительно 50% калорий поступает от источника белка.

16. Пищевой продукт по п. 14, где указанный источник белка содержит гидролизованный или частично гидролизованный белок.

17. Пищевой продукт по п. 16, где указанный гидролизованный белок выбирают из гидролизованного белка гороха и продукта-гидролизата на основе молочной сыворотки.

18. Пищевой продукт по любому из пп. 1-5, дополнительно содержащий источник белка.

19. Пищевой продукт по п. 18, где приблизительно от 10% до приблизительно 50% калорий поступает от источника белка.

20. Пищевой продукт по п. 18, где указанный источник белка содержит гидролизованный или частично гидролизованный белок.

21. Пищевой продукт по п. 20, где указанный гидролизованный белок выбирают из гидролизованного белка гороха и продукта-гидролизата на основе молочной сыворотки.

22. Пищевой продукт по п. 1, где немасляные ингредиенты выбирают из антиоксидантов, витаминов и их смесей.

23. Пищевой продукт по п. 22, где указанный антиоксидант представляет собой токоферол.

24. Пищевой продукт по п. 23, где указанный токоферол выбирают из α-токоферола, β-токоферола, δ-токоферола, γ-токоферола, α-токотриенола, β-токотриенола, δ-токотриенола и γ-токотриенола.

25. Пищевой продукт, содержащий переработанное масло, источник углеводов и источник белка и имеющий общую массу приблизительно от 25 граммов до приблизительно 500 граммов с калорийностью приблизительно от 1 ккал на грамм до приблизительно 5 ккал на грамм, где переработанное масло содержит приблизительно от 10% до приблизительно 50% от общего содержания калорий, где переработанное масло имеет содержание MAG, превышающее более чем 50 масс. % от общей массы переработанного масла, и содержание TAG, равное или составляющее менее чем 10 масс. % от общей массы переработанного масла, где переработанное масло получено из источника масла и где переработанное масло дополнительно содержит немасляные ингредиенты, происходящие от природного источника масла и присутствующие в этом источнике масла, а поэтому немасляные ингредиенты не добавляют в переработанное масло.

26. Переработанное масло, полученное из источника масла, где переработанное масло имеет содержание MAG, равное или превышающее 40 масс. % от общей массы переработанного масла, где переработанное масло не содержит TAG или имеет содержание TAG, равное или составляющее менее чем 10 масс. % от общей массы переработанного масла, и где переработанное масло содержит немасляные ингредиенты, происходящие от природного источника масла и присутствующие в этом источнике масла, а поэтому немасляные ингредиенты не добавляют в переработанное масло.

27. Переработанное масло по п. 26, где указанный источник масла происходит от источника, выбранного из растений, животных, водорослей или рыб.

28. Переработанное масло по п. 26, где указанный источник масла имеет растительное происхождение.

29. Переработанное масло по п. 26, где указанный источник масла выбирают из группы, состоящей из оливкового масла, подсолнечного масла, кукурузного масла, миндального масла, рапсового масла, пальмового масла, соевого масла, льняного масла и их смесей.

30. Переработанное масло по любому из пп. 26-29, где немасляные ингредиенты выбирают из группы, состоящей из антиоксидантов, витаминов и их смесей.

31. Переработанное масло по п. 30, где указанный антиоксидант представляет собой токоферол.

32. Переработанное масло по п. 31, где указанный токоферол выбирают из группы, состоящей из α-токоферола, β-токоферола, δ-токоферола, γ-токоферола, α-токотриенола, β-токотриенола, δ-токотриенола и γ-токотриенола.

33. Переработанное масло по любому из пп. 26-29, где указанное переработанное масло имеет содержание MAG приблизительно от 50 масс. % до приблизительно 95 масс. % от общей массы переработанного масла.

34. Переработанное масло по п. 33, где указанное переработанное масло имеет содержание TAG приблизительно от 5 масс. % до приблизительно 0,5 масс. % от общей массы переработанного масла.

35. Переработанное масло по любому из пп. 26-29, где указанное переработанное масло имеет содержание TAG приблизительно от 5 масс. % до приблизительно 0,5 масс. % от общей массы переработанного масла.

36. Способ получения переработанного масла по любому из пп. 1-35, включающий:

смешивание исходного масла, содержащего триацилглицерины (TAG), где TAG присутствуют в количестве более чем 50 масс. % от общей массы исходного масла; буферного раствора и первого фермента, способного гидролизовать указанные TAG до свободных жирных кислот (FFA), с получением первой реакционной смеси;

реакцию первой реакционной смеси в условиях, достаточных для гидролиза указанных TAG указанным первым ферментом, в течение первого периода времени с образованием водной фазы и первого липидного продукта реакции, содержащего FFA;

инактивацию указанного первого фермента в указанном первом липидном продукте реакции;

сбор указанного первого липидного продукта реакции путем его удаления из водной фазы;

смешивание указанного первого липидного продукта реакции с пищевым глицерином и вторым ферментом, способным этерифицировать FFA, с образованием второй реакционной смеси;

реакцию указанной второй реакционной смеси в течение второго периода времени с образованием второго липидного продукта реакции, включающего липидную масляную фазу и глицериновую фазу;

инактивацию указанного второго фермента в указанном втором липидном продукте реакции;

добавление соли к продукту реакции и отделение липидной масляной фазы от указанной глицериновой фазы; и

сбор указанной липидной масляной фазы.

37. Способ по п. 36, где указанное исходное масло представляет собой масло, полученное из растений, животных или рыб.

38. Способ по п. 36, где указанное исходное масло представляет собой растительное масло или смесь растительных масел.

39. Способ по п. 36, где указанное исходное масло представляет собой растительное масло, выбранное из группы, состоящей из оливкового масла, подсолнечного масла, кукурузного масла, миндального масла, рапсового масла, пальмового масла, соевого масла, льняного масла и их смесей.

40. Способ по п. 36, где указанный первый фермент представляет собой липазу.

41. Способ по п. 40, где указанный первый фермент представляет собой липазу AY.

42. Способ по п. 36, где указанный буферный раствор представляет собой раствор цитрата натрия.

43. Способ по п. 36, где указанный первый период времени представляет собой период времени, достаточный для гидролиза по меньшей мере 94% TAG в указанном исходном масле.

44. Способ по п. 36, где указанный первый период времени составляет приблизительно от 14 до приблизительно 24 часов.

45. Способ по п. 36, где указанную стадию реакции указанной реакционной смеси в условиях, достаточных для гидролиза указанных TAG указанным первым ферментом, проводят при температуре приблизительно от 30°C до приблизительно 35°C.

46. Способ по п. 36, где указанные стадии смешивания исходного масла, содержащего триацилглицерины (TAG), буферного раствора и первого фермента, способного гидролизовать указанные TAG до свободных жирных кислот (FFA), и реакции указанной реакционной смеси в условиях, достаточных для гидролиза указанных TAG указанным первым ферментом до FFA, осуществляют в атмосфере азота.

47. Способ по п. 36, где указанный второй фермент представляет собой липазу.

48. Способ по п. 36, где указанный второй фермент представляет собой липазу G.

49. Способ по п. 36, где указанный второй период времени представляет собой период времени, достаточный для обогащения MAG в липидной масляной фазе приблизительно до 60-95%.

50. Способ по п. 36, где указанный второй период времени составляет приблизительно от 24 часов до приблизительно 72 часов.

51. Способ по п. 36, где указанную стадию реакции указанной второй реакционной смеси в течение второго периода времени с образованием липидной масляной фазы и глицериновой фазы, проводят при температуре приблизительно от 17 до 23°C.

52. Способ по любому из пп. 36-51, дополнительно включающий сушку указанного второго липидного продукта реакции путем подачи вакуума в течение третьего периода времени, достаточного для удаления по меньшей мере части воды из второго липидного продукта реакции.

53. Способ по п. 52, где указанную стадию сушки указанного второго продукта липидной реакции проводят при температуре 20-30°C.

54. Способ по п. 52, где указанную стадию сушки осуществляют в течение второго периода времени.

55. Способ по любому из пп. 36-51, где указанную стадию инактивации указанного второго фермента осуществляют путем нагревания указанного второго липидного продукта реакции.

56. Способ по п. 55, где указанное нагревание осуществляют при температуре по меньшей мере 70°C в течение по меньшей мере 1 часа.

57. Способ по любому из пп. 36-51, где указанная стадия отделения указанной липидной масляной фазы от указанной глицериновой фазы включает добавление хлорида натрия к указанному второму липидному продукту реакции.

58. Способ по п. 57, где конечная концентрация хлорида натрия составляет до 0,3 масс. % хлорида натрия.

59. Способ по любому из пп. 36-51, который, перед смешиванием указанного первого липидного продукта реакции и пищевого глицерина и второго фермента, способного этерифицировать FFA и глицерин, дополнительно включает повторную подачу атмосферы азота над указанным первым липидным продуктом реакции.

60. Способ по любому из пп. 36-51, дополнительно включающий добавление токоферола к указанной липидной масляной фазе после сбора указанной липидной масляной фазы.

61. Способ по любому из пп. 37-51, где липидная масляная фаза содержит MAG в количестве приблизительно от 40 масс. % до приблизительно 99 масс. % от общей массы липидной масляной фазы, и где липидная масляная фаза либо не содержит TAG, либо содержит TAG в количестве приблизительно от 0,1 масс. % до приблизительно 10 масс. % от общей массы липидной масляной фазы.

62. Способ по любому из пп. 36-61, где удаляют воду из второй реакционной смеси в течение второго периода времени.