Способ прогнозирования эффективности инвазивного лечения гипертрофического рубца Российский патент 2023 года по МПК G01N33/48 G01N33/50 G01N33/53 

Изобретение относится к медицине, а именно к челюстно-лицевой, пластической, реконструктивной хирургии и может быть использовано для прогнозирования эффективности различных инвазивных методов лечения у пациентов с гипертрофическими рубцами.

Гипертрофические рубцы возникают в течение нескольких недель после провоцирующей травмы, остаются в границах исходного поражения и в конечном итоге демонстрируют некоторую степень созревания/регрессии. Существуют определенные клинические рекомендации и алгоритмы выбора метода лечения при гипертрофическом рубце, но прогноз эффективности инвазивных методов лечения гипертрофических рубцов является сложной задачей в хирургии, поскольку нет достаточно адекватных маркеров для предсказания результатов.

Известен способ прогнозирования результата лазерного лечения гипертрофического рубца у женщин (Патент РФ 2761893, A61N 5/067, G01N 33/68. 74, публ. 2021), включающий исследование крови в фолликулярную фазу менструального цикла. У пациентки в венозной крови до лечения определяют концентрацию прогестерона, фолликулостимулирующего гормона, холестерина, интерлейкина. Используя их числовые значения, вычисляют результаты уравнений линейных классификационных функций F1 и F2 по предложенным формулам. Сравнивают полученные результаты и при F1>F2 прогнозируют положительный результат лазерного лечения. При F1<F2 прогнозируют отрицательный результат лечения.

Недостатком данного способа является ограничение метода, так как исследования проводят только у женщин и дают прогноз только для лазерного лечения гипертрофического рубца. Для других методов лечения: хирургическое, криолазерное в этом способе нет рекомендации по прогнозированию.

Наиболее близким, является способ прогнозирования эффективности инвазивного лечения гипертрофического рубца (Клинический протокол по диагностике и лечению пациентов с Рубцовыми поражениями кожи. Секция СтАР «Ассоциация челюстно - лицевых хирургов и хирургов - стоматологов», 21 апреля 2014, https://chlgvv.ru/media/media/documents/2018/10/12/kl_prot_rubzov_porag_kogi.pdf). включающий исследование клинических характеристик рубца с определением расположением рубца на тонкой или толстой коже, ее способность к растяжению и подвижность. При этом положительный прогноз ставят у рубцов со слабой степенью гипертрофии, расположенных в зонах с подвижной, расслабленной кожей, не испытывающей нагрузок при движении, при направлении, поперечном по отношению к линиям Лангера, хорошо подвижных окружающих тканях; и отрицательный прогноз - у гипертрофических рубцах с мало подвижной и толстой кожей, испытывающей значительные нагрузки при движениях, в зонах с малоподвижными тканями, при оси рубца, близкой к направлению линий Лангера.

Недостатком данного способа является то, что данный способ дает прогноз хирургической коррекции рубцов в зависимости от местных условий и клинической характеристики рубцовой ткани без оценки объективных диагностических и патогенетических критериев гипертрофического рубца. Также, в указанном способе нет определенного анализа прогноза результатов конкретных методов инвазивного лечения.

Задачей предлагаемого изобретения является устранение указанных недостатков, повышение точности прогноза за счет выбора более информативных параметров рубцовой ткани и обеспечение индивидуального подхода при определении эффективного вида инвазивного лечения: хирургического, криолазерного и хирургического.

Для решения поставленной задачи при прогнозировании эффективности инвазивного лечения гипертрофического рубца, включающем исследование клинических характеристик рубца с определением расположением рубца на тонкой или толстой коже, ее способность к растяжению и подвижность, предложено дополнительно проводить гистологическое исследование с определением реакции воспаления и ангиогенеза и иммуногистохимическое исследование рубцовой ткани, при котором выявлять значения TGF-b, ММР1, К III типа. По полученным значениям показателя воспаления в пределах 2,5 - 2,9 у.е., показателя ангиогенеза в пределах 2,2-2,6 у.е., TGF-b равного 4,0 у.е., отсутствии ММР1, а определение значения величины коллагена III типа в пределах 3,2-4,0 у.е., при тонкой или толстой коже и возможности к растяжению и подвижности, дают благоприятный прогноз хирургического лечения гипертрофического рубца. При расположении рубца в области малоподвижной толстой кожи неспособной к растяжению и при выявлении значения показателей воспаления в пределах 4,0-5,4 у.е., показателя ангиогенеза равного 6,0 у.е., значении TGF-b равного 6,0 у.е., определении ММР1 в пределах 2,0-3,4 у.е., а значение коллагена III типа равно 6,0 у.е. - прогноз криолазерного и лазерного лечения гипертрофического рубца благоприятный, прогноз хирургического лечения гипертрофического рубца неблагоприятный.

Выбор предлагаемых параметров для анализа повышает эффективность проводимого лечения за счет более адекватного индивидуального определения критериев прогноза лечения гипертрофического рубца.

Показатели выраженности воспалительной реакции и ангиогенеза, а также особенности накопления коллагена, матриксной металлопротеиназы, TGF-β в рубцовой ткани может быть положено в основу разработки новых методов патогенетической терапии.

Проведение гистологического и иммуногистохимического исследований рубцовой ткани с определением указанных показателей выраженности воспалительной реакции и ангиогенеза, а также особенности накопления коллагена, матриксной металлопротеиназы, TGF-β в рубцовой ткани позволяет увидеть целостную картину выявленной патологии и дать более точный прогноз при выборе инвазивного лечения гипертрофических рубцов, что имеет большое практическое значение в прикладной медицине.

Данный способ объективно оценивает состояние гипертрофического рубца в предоперационном периоде, что, в свою очередь, позволяет оптимизировать лечение пациентов, учитывая характер развития рубца. Это позволит сократить число осложнений, уменьшить сроки реабилитации и добиться хороших функциональных и эстетических результатов у пациентов с гипертрофическими рубцами.

На фиг. 1 представлено фото пациентки К., 33 лет с гипертрофическим рубцом с толстой кожей с плохо растяжимой тканью (пример 6, см. таблицу); на фиг. 2 - микрофотограмма пациентки К., 33 лет реакция воспаления и неоангиогенеза в гипертрофическом рубце (пример 6, см. таблицу); на фиг. 3 микрофотограмма пациентки К., 33 лет - TGF-β в эндотелии сосудов и макрофагах гипертрофического рубца (пример 6, см. таблицу), на фиг. 4 - таблица данных клинических примеров.

Способ осуществляется следующим образом.

В предоперационном периоде оцениваются клинические параметры рубцово-измененной кожи: определение расположения рубца на тонкой или толстой коже, способность к растяжению и подвижность. После анализа клинических характеристик рубцово-измененной ткани, проводят панч биопсию в области рубца с последующей гистологической и иммуногистохимической диагностикой.

Материал для проведения гистологического и иммуногистохимического исследования, фиксируется в 10% забуференном формалине. Фиксация, проводка, заливка в парафин и окрашивание серийных срезов толщиной 4 мкм по гематоксилину и эозину Ван-Гизону выполняются по стандартным протоколам (Мавликеев М.О., Архипова С.С., Чернова О.Н., Титова А.А., Певнер Г.О., Шафтгуллина А.К., Киясов А.П. Краткий курс гистологической техники. Учебно-методическое пособие под научной редакцией Р.В. Деева, Казанский Университет, 2020, с. 25-69). Для иммуногистохимических исследований изготавливаются серийные парафиновые срезы толщиной 4 мкм, расположенные на стеклах, покрытых полилизиновым слоем (Menzel Glaser Polylisine, Германия). Реакции проводятся в соответствии с международными рекомендациями (Иммуногистохимические методы: Руководство /Ed. By George L. Kumar, Lars Rudbeck:DAKO/ пер. с англ. Под ред. Г.А.Франка и П.Г. Малькова - М., 2011 - с. 128-160).

Оценка гистологических и иммуногистохимичсеких изменений для выраженности грубых коллагеновых волокон III типа, воспалительной реакции, неоангиогенеза, TGF-b, определении ММР1 рубцовой ткани осуществляется в условных единицах.

Осуществление способа показано на клинических примерах, данные по которым приведены в таблице (приложение 1).

Клинические результаты (столбец 11, таблица) лечения при хорошем результате, который определялся как достигнутая полная резорбция патологического рубца с сохранением косметического и функционального состояния анатомической области. Неудовлетворительный результат характеризовался продолженным ростом рубца после криолазерного лечения или рецидивом рубцовой ткани, подтвержденным как клинически, так и гистологически.

Оценка результатов иммуногистохимических реакций для всех изученных маркеров оценивалась в условных единицах.

Как показали приведенные примеры послеоперационная область замещалась нормотрофическим рубцом и незначительно отличалась от окружающих здоровых тканей, а в отдаленные сроки наблюдения отсутствовал рецидив гипертрофического рубца.

Выводы о благоприятном прогнозе рекомендованного хирургического лечения гипертрофического рубца были сделаны при оценке клинической характеристики рубца: расположении рубца в области хорошо подвижной тонкой кожи, способной к растяжению, при получении значений показателя воспаления в пределах 2,5-2,9 у.е., показателя ангиогенеза в пределах 2,2-2,6 у.е., значения TGF-b равного 4,0 у.е., определении отсутствия ММР1, а значение величины коллагена III типа в пределах 3,2-4,0 у.е.

Выводы о неблагоприятном прогнозе хирургического лечения гипертрофического рубца были сделаны при оценке клинической характеристики рубца: расположении рубца в области малоподвижной толстой кожи, неспособной к растяжению; при выявления значения показателей воспаления в пределах 4,0-5,4 у.е., показателя ангиогенеза равного 6,0 у.е., значении TGF-b равного 6,0 у.е., определении ММР1 в пределах 2,0 - 3,4 у.е., а значение коллагена III типа равно 6,0 у.е., прогноз криолазерного и лазерного лечения гипертрофического рубца был благоприятным при данных показателях.

Пациент, данные которого приведены в примере номер 6 (таблица), отказался от выбора метода лечения предложенного с учетом сделанного прогноза по предлагаемому способу и ему была проведена хирургическое лечение по коррекции гипертрофического рубца. Через 3 месяца пациент отметил появление рецидива в послеоперационной области. После этого было проведено криолазерное лечение - получен хороший результат, который удовлетворил пациента и функционально, и эстетически.

По предлагаемому способу было проведено исследование 176 пациентов с различной локализацией гипертрофических рубцов. Сделанный прогноз и на его основе проведенное соответствующее инвазивное лечение гипертрофических рубцов было эффективно в 96,4%. Все пациенты наблюдались в течение 1 года после операции и регулярно приходили на контрольные осмотры через 1,3,6 месяцев и через год после операции.

Предлагаемый способ прогнозирования эффективности инвазивного лечения гипертрофического рубца дает возможность выбора оптимального метода лечения, и подобрать индивидуально каждому пациенту определенную методику исходя из его клинико-морфологических параметров. Это позволит провести своевременные профилактические мероприятия, что обеспечивает раннюю реабилитацию у пациентов с гипертрофическими рубцами. С помощью данного способа прогнозирования, возможно уменьшить сроки реабилитации и добиться хороших функциональных и эстетических результатов у пациентов с гипертрофическими рубцами.

Изобретение относится к медицине, а именно к челюстно-лицевой, пластической и реконструктивной хирургии, и может быть использовано для прогнозирования инвазивного лечения гипертрофических рубцов. Проводят гистологическое исследование с определением реакции воспаления, ангиогенеза и иммуногистохимическое исследование рубцовой ткани, при котором выявляют значения TGF-b, ММР1, К III типа, и на основании этих показателей делают вывод об эффективности инвазивного лечения. Способ позволяет повысить точность прогнозирования, подобрать наиболее оптимальный способ лечения, уменьшить сроки лечения за счет оценки совокупности определяемых параметров рубцовой ткани. 4 ил., 10 пр.

Способ прогнозирования эффективности инвазивного лечения гипертрофического рубца, включающий исследование клинических характеристик рубца с определением расположения рубца на тонкой или толстой коже, ее способность к растяжению и подвижность, отличающийся тем, что дополнительно проводят гистологическое исследование с определением реакции воспаления и ангиогенеза и иммуногистохимическое исследование рубцовой ткани, при котором выявляют значения TGF-b, ММР1, К III типа, и при получении значения показателя воспаления в пределах 2,5-2,9 у.е., показателя ангиогенеза в пределах 2,2-2,6 у.е., TGF-b, равного 4,0 у.е., отсутствии ММР1, а значение величины коллагена III типа в пределах 3,2-4,0 у.е., при тонкой или толстой коже и возможности к растяжению и подвижности прогноз хирургического лечения гипертрофического рубца благоприятный; при расположении рубца в области малоподвижной толстой кожи, неспособной к растяжению, и при выявлении значения показателей воспаления в пределах 4,0-5,4 у.е., показателя ангиогенеза, равного 6,0 у.е., значении TGF-b, равном 6,0 у.е., определении ММРТ в пределах 2,0-3,4 у.е., а значение коллагена III типа равно 6,0 у.е. - прогноз криолазерного и лазерного лечения гипертрофического рубца благоприятный, прогноз хирургического лечения гипертрофического рубца неблагоприятный.