Применение дифенилфосфинилметангидразида в качестве бактерицидного средства Российский патент 2023 года по МПК A61K31/66 A61K31/661 A61K33/42 A61P31/04 

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к применению дифенилфосфинилметангидразида формулы Ph₂P(O)CONHNH₂ в качестве бактерицидного средства.

На сегодняшний день вопрос о принятии радикальных мер для ликвидации различных инфекционных болезней остается остро актуальным. Известно, что микроорганизмы приспосабливаются к условиям внешней среды и быстро приобретают устойчивость ко многим антибактериальным и дезинфицирующим препаратам. В настоящее время во всем мире приобретает большое значение применение новых высокоэффективных препаратов с широким спектром бактерицидного действия.

Из уровня техники известны гидразиды фосфорилированных карбоновых кислот со структурной формулой R¹R²P(O)CH₂C(O)NHNH₂, где радикалы R¹ и R² могут быть фенильной, п-толильной, этильной, этокси- и бутоксисодержащими группами или их N-замещенными производными (Разумов А.И., Позняк Р.Л., Брудная К.Б., Берим М.Г., Слепова Р. И., Туктарова Ш.З., Ржевская Г.Ф. // Журн. общей химии, 1967, т. 37, с. 421-424). Некоторые из них обладают терапевтической активностью, в частности при лечении депрессии и при коррекции врожденных и приобретенных неврологических дефицитов, например, при нарушениях памяти, обучения, внимания, интегративных функций мозга.

Например, известен дифенилфосфинилэтангидразид - гидразид дифенилфосфинилуксусной кислоты (ДФФЭГ) формулы Ph₂P(O)CH₂CONHNH₂, который обладает вегетотропным, противоэпилептическим и антисеротониновым свойствами (А.с. СССР №467593, С07С 243/26, C07F 9/50, опуб. 1991 г.; А.с. СССР №741876, A61K 32/42, опуб. 1980 г.).

Известен дифенилфосфинилметангидразид - гидразид дифенилфосфинилмуравьиной кислоты (ДФФМГ) формулы Ph₂P(O)CONHNH₂, обладающий биологической активностью, включающей анксиолитическую, противовоспалительную активность и корригирующее нарушенное поведение при аутизме (патент RU 2783121, С07С 243/26, C07F 9/50, A61K 31/662, А61Р 29/00, А61Р 25/00, опуб. 2022).

Известен также диэтоксифосфорилметангидразид - гидразид диэтоксифосфорилмуравьной кислоты (ДЭФМГ) формулы (EtO)₂P(O)CONHNH₂, проявляющий антимикотическую и бактерицидную активность (патент RU 2754979, C07F 9/40, A61K 31/662, А61Р 31/00, опуб. 08.09.2021).

При анализе уровня техники было установлено, что ДФФЭГ также проявляет незначительную бактерицидную активность, но по отношению только к некоторым бактериям (см. таблицу 1 описания к патенту RU 2754979, C07F 9/40, A61K 31/662, А61Р 31/00, опуб. 08.09.2021).

Возможно, что и другие известные гидразиды фосфорилированных карбоновых кислот способны проявлять бактерицидную активность. Однако авторам не удалось обнаружить информацию о других гидразидах фосфорилированных карбоновых кислот, проявляющих бактерицидную и антимикотическую активность.

В качестве ближайшего аналога предполагаемого изобретения по достигаемому техническому результату выбрано антимикотическое и бактерицидное средство диэтоксифосфорилметангидразид (ДЭФМГ) формулы (EtO)₂P(O)CONHNH₂ (патент RU 2754979, C07F 9/40, A61K 31/662, А61Р 31/00, опуб. 08.09.2021).

Недостатки прототипа: ДЭФМГ обладает средней бактерицидной активностью по отношению к бактериям Bacillus cereus, а по отношению к бактериям Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus бактерицидной активностью ниже некоторых известных дезинфицирующих средств.

Технической проблемой является создание бактерицидного средства широкого спектра действия, проявляющего высокую бактерицидную активность.

Техническая проблема решается применением в качестве бактерицидного средства дифенилфосфинилметангидразида формулы Ph₂P(O)CONHNH₂.

Решение технической задачи позволяет получить высоэффективное бактерицидное средство широкого спектра действия.

ДФФМГ получали известным способом, в котором сначала ведут взаимодействие этилдифенилфосфинита с этилхлор метано атом при температуре 70°С до прекращения выделения этилхлорида, полученный этилдифенилфосфинилметаноат при температуре 50°С вводят в реакцию в этаноле с гидразин-гидратом, взятым в избытке, с последующим удалением легколетучих компонентов в вакууме и перекристаллизацией из диоксана (патент RU 2783121, С07С 243/26, C07F 9/50, A61K 31/662, А61Р 29/00, А61Р 25/00, опуб. 2022).

Полученный ДФФМГ исследовали на бактерицидную активность на тест-культурах условно-патогенной микрофлоры на кафедре микробиологии Казанской государственной медицинской академии. В работе использовали музейные контрольные штаммы кафедры микробиологии: Escherichia coli - кишечная палочка, Bacillus cereus - вид грамположительных бактерий, Pseudomonas aeruginosa - синегнойная палочка – вид грамотрицательных подвижных бактерий, Staphylococcus aureus - золотистый стафилококк - патогенная бактерия.

Для оценки активности непосредственно перед исследованием готовили 1% водный раствор ДФФМГ.

Испытания бактерицидного средства осуществляли следующим образом.

Суточные культуры микроорганизмов смывали физиологическим раствором со скошенных питательных агаров, отстандартизовывали по стандарту мутности до 0,5 по Мак Фарланду (1,5x10⁸ КОЕ/мл). Затем в 10 мл расплавленного и остуженного до 45°С питательного агара вносили 0,4 мл отстандартизованной тест-культуры, перемешивали и выливали в стерильные чашки Петри. После застывания в зараженном питательном агаре просекали лунки и вносили в них 1%-ный водный раствор ДФФМГ. В качестве питательных сред использовали среду Мюллера-Хинтона для условно-патогенной микрофлоры. Чашки инкубировали при температуре 35°С в течение 24-48 часов. Экспозиция данного времени необходима для диффузии испытуемых веществ в толщу питательного агара, содержащего различные виды микроорганизмов. Бактерицидную активность оценивали по величине зоны задержки роста микроорганизмов d с точностью до 0,1 мм.

В таблице приведена бактерицидная активность заявленного средства в сравнении с ДЭФМГ (прототип), ДФФЭГ (аналог) и известными дезинфицирующими средствами «Ника-Пероксам», «Абактериал», «Слайт» и «Ника-Полицид».

Как видно из табличных данных бактерицидное средство на основе ДФФМГ значительно превосходит средство на основе прототипа по отношению к бактериям Bacillus cereus, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus при сохранении бактерицидной активности в отношении Escherichia coli. Известные дезинфицирующие средства по бактерицидной активности существенно уступают заявляемому.

Дифенилфосфинилметангидразид малотоксичен, поэтому может найти широкое применение как бактерицидное средство в медицине и ветеринарии.

Изобретение относится к области медицины, а именно к фармацевтике и инфектологии, и предназначено для уничтожения бактерий при ликвидации различных инфекционных болезней. Применяют дифенилфосфинилметангидразид в качестве бактерицидного средства. Использование изобретения позволяет повысить эффективность применения бактерицидных средств широкого спектра действия. 1 таб.

Применение дифенилфосфинилметангидразида формулы Ph₂P(O)CONHNH₂ в качестве бактерицидного средства.