Антимикотическое и бактерицидное средство Российский патент 2021 года по МПК C07F9/40 A61K31/662 A61P31/00 

Изобретение относится к применению диэтоксифосфорилметангидразида формулы

в качестве антимикотического и бактерицидного средства.

Диэтоксифосфорилметангидразид формулы

известен как исходное вещество для синтеза, см. US Патент №4308263, МПК3 А61К 1/16, C07F 9/38, 1981.

Наиболее близким по технической сущности является применение дифенилфосфинилэтангидразида - гидразида дифенилфосфинилуксусной кислоты формулы

в качестве антимикотического и бактерицидного средства.

Средство на основе дифенилфосфинилэтангидразида обладает низкими антимикотической и бактерицидной активностью.

Технической проблемой является создание антимикотического и бактерицидного средства, проявляющего высокую антимикотическую и бактерицидную активность.

Техническая проблема повышение антимикотической и бактерицидной активности средства решается применением в качестве антимикотического и бактерицидного средства диэтоксифосфорилметангидразида формулы

Решение технической задачи позволяет получить значительно превосходящее антимикотическое и бактерицидное средство на основе диэтоксифосфорилметангидразида.

Диэтоксифосфорилметангидразид получают путем взаимодействия триэтилортоформиата с трихлоридом фосфора, затем из полученной реакционной массы путем перегонки выделяют O,O-диэтил(диэтоксиметил)фосфонат, который вводят во взаимодействие с N-бромсукцинимидом в среде четыреххлористого углерода при кипении, из реакционной массы перегонкой получают этилдиэтоксифосфорилметаноат, который вводят во взаимодействие с гидразином, по окончанию реакции легколетучие компоненты удаляют в вакууме. Диэтоксифосфорилметангидразид получают с выходом 97%, с показателем преломления - n_D²⁰ 1.4245.

Характеристика веществ, используемых для получения диэтоксифосфорилметангидразида:

Трихлорид фосфора - PCl₃, бесцветная, дымящая во влажной среде жидкость с резким неприятным запахом. Обладает слезоточивыми свойствами. Плотность 1,574 г/см³, т.кип. 76°С.

Триэтилортоформиат - СН(ОС₂Н₅)₃ - бесцветная жидкость с т.пл - 76°С, т.кип. 143°С, показатель преломления - n_D²⁰1.3922, плотность - d₄²⁰ 0.8909 г/см³.

Триалкилортоэфиры плохо растворимы в воде, растворимы в спирте, эфире.

O,O-диэтил(диэтоксиметил)фосфонат,

формулы (C₂H₅O)₂Р(O)СН(ОС₂Н₅)₂

Бесцветная жидкость с т.кип. 95-96°С при давлении 1 мм рт.ст., показатель преломления - n_D²⁰ 1.4245.

N-Бромсукцинимид (БСИ, NBS), формулы

Плотный белый порошок или кристаллы со слабым запахом брома.

Плотность - d₄²⁰ 2,098 г/см³, т.кип. 175-178°С.

Слабо растворим в воде, уксусной кислоте. Растворим в ацетоне, тетрагид-рофуране, диметилформамиде, диметилсульфоксиде, ацетонитриле. Не растворим в диэтиловом эфире, гексане, четыреххлористом углероде.

Этилдиэтоксифосфорилметаноат, формулы

(С₂Н₅0)₂Р(0)СООС₂Н₅

Бесцветная жидкость с т.кип. 98-101°С при давлении 2 мм рт.ст.

Гидразин - NH₂NH₂

Бесцветная, сильно гигроскопичная жидкость с неприятным запахом. Смешивается в любых соотношениях с водой, жидким аммиаком, этанолом; плохо растворяется в неполярных растворителях.

Плотность - 1,01 г/см³, т.кип. 114°С, т.пл. 2°С.

Структуру диэтоксифосфорилметангидразида подтверждают данные ЯМР ¹Н, ¹³С, ³¹Р и элементный анализ:

ЯМР ¹Н (400 МГц, CDC1₃), δ, м.д.: 0.98 т (6Н, ³J_HH 7.0 Гц, ОСН₂СН₃), 3.86 дк (4Н, ³J_HH 7.0 Гц, ³J_PH 14.0 Гц, ОСН₂Ме), 6.4 ушир. с (3Н, NHNH₂).

ЯМР ¹³С (100.6 МГц, CDCl₃), δ_С, м.д.: 13.2 с (ОСН₂Ме), 74.1 с (ОСН₂Ме), 163.0 д (С=O, ¹J_PC 191 Гц).

ЯМР ³¹Р (162 МГц, DMSO-d₆), δ_p, м.д.: 1.6.

Найдено, %: Р, 15.67 и 15.73; N, 14.2 и 14.35. Брутто формула C₅H₁₃O₄P. Вычислено, %: Р, 15.82; N, 14.29.

Диэтоксифосфорилметангидразид исследовали на антимикотическую и бактерицидную активность на тест-культурах условно-патогенной микрофлоры, исследования проведены на кафедре микробиологии Казанской государственной медицинской академии - филиала федерального государственного бюджетного образовательного учреждения дополнительного профессионального образования «Российская медицинская академия непрерывного профессионального образования» Министерства здравоохранения Российской Федерации.

В работе использовали музейные контрольные штаммы кафедры микробиологии: Escherichia coli - кишечная палочка, Bacillus cereus - вид грамположительных бактерий, Pseudomonas aeruginosa - синегнойная палочка - вид грамотрицательных подвижных бактерий, Staphylococcus aureus - золотистый стафилококк - патогенная бактерия, Candida albicans - дрожжеподобный гриб рода кандида.

Для оценки активности непосредственно перед исследованием готовят 1% водный раствор диэтоксифосфорилметангидразида. В качестве контроля для сравнения полученных данных использовали известные дезинфицирующие средства: «Ника-Пероксам», «Абактериал», «Слайт» и «Ника-Полицид».

Испытания антимикотического и бактерицидного средства: Суточные культуры микроорганизмов смывают физиологическим раствором со скошенных питательных агаров, отстандартизовывают по стандарту мутности до 0,5 по Мак Фарланду (1,5×10⁸ КОЕ/мл). Затем в 10 мл расплавленного и остуженного до 45°С питательного агара вносят 0,4 мл отстандартизованной тест-культуры, перемешивают и выливают в стерильные чашки Петри. После застывания в зараженном питательном агаре просекают лунки и вносят в них 1%-ный водный раствор диэтоксифосфорилметангидразида. В качестве питательных сред используют среду Сабуро для дрожжеподобных грибов рода Candida и среду Мюллера-Хинтона для условно-патогенной микрофлоры. Чашки инкубируют при температуре 35°С в течение 24-48 часов. Экспозиция данного времени необходима для диффузии испытуемых веществ в толщу питательного агара, содержащего различные виды микроорганизмов. Затем оценивают величину зоны задержки роста микроорганизмов, измерение которой ведут с точностью до 0,1 мм.

В Таблице 1 приведены антимикотическая и бактерицидная активность заявленного средства, по прототипу и известных дезинфицирующих средств.

На основе данных, приведенных в Таблице 1, заявленное средство на основе диэтоксифосфорилметангидразида по антимикотической и бактерицидной активности значительно превосходит по сравнению с прототипом и известными дезинфицирующими средствами.

Изобретение относится к применению диэтоксифосфорилметангидразида указанной ниже формулы в качестве антимикотического и бактерицидного средства, которое обладает высокой антимикотической и бактерицидной активностью. 1 табл.

Применение диэтоксифосфорилметангидразида формулы

в качестве антимикотического и бактерицидного средства.