3-Бензил-5-метил-6-(фенилтио)-[1,2,4]триазоло[1,5-a]пиримидин-7(3H)-он, обладающий противовирусной активностью в отношении коронавируса SARS-CoV2 Российский патент 2023 года по МПК C07D487/04 A61K31/519 A61P31/14 

Изобретение относится к области медицинской химии и создания биологически активного соединения, представляющего собой 3-бензил-5-метил-6-(фенилтио)-[1,2,4]триазоло[1,5-а]пиримидин-7(3H)-он 3а, обладающий выраженным ингибирующим действием в отношении коронавируса SARS-CoV2, штамм hCoV-19/Russia/Vologda-171613-1208/2020.

Изобретение может найти применение в медицине.

Проблема создания новых противовирусных средств является одной из наиболее актуальных в настоящее время в связи с постоянным появлением как известных, так и новых инфекционных возбудителей, нечувствительных к ныне применяемым средствам -как вакцинам, так и химическим препаратам. Известные противовирусные препараты оказались не способны в должной мере справиться с новой инфекцией - пандемией COVID-19, вызванной возбудителем из ряда коронавирусов SARS-CoV2. Важное значение имеет создание препаратов прямого противовирусного действия на основе малых молекул. В этом направлении большой интерес представляют гетероциклы азолоазинового ряда, рассматриваемые в качестве структурных аналогов природных нуклеиновых оснований.

Одним из таких лекарственных средств средств является препарат Триазавирин^ (МНН Риамиловир (I)) - оригинальный отечественный препарат прямого противовирусного действия семейства азолоазинов, родоначальник препаратов данного класса [1-3]. Предполагается, что механизм действия Триазавирина® в отношении SARS-CoV2 - ингибирование синтеза вирусных РНК и репликация геномных фрагментов [2]. Признан успешным опыт применения Триазавирина® на базе ковидных госпиталей в качестве этиотропного средства при терапии коронавирусной инфекции COVID-19, а также в качестве средства медикаментозной профилактики [2, 3].

Полученные положительные эффекты препарата Триазавирин® в лечении SARS-CoV2 позволяют рассматривать азолоазиновый скаффолд как перспективный структурный фрагмент для создания новых молекул. Многообразие комбинаций атомов азота в азолах, азинах, азолоазинах чрезвычайно велико, что открывает достаточно широкие возможности для решения актуальной задачи мишень-ориентированного дизайна и скрининга перспективных кандидатов в лекарственные средства среди недоступных ранее малых молекул на их основе, перспективных в отношении SARS-CoV2 и других возбудителей вирусных инфекций.

Наряду с варьированием азолоазинового каркаса изостерическими скаффолдами с разным количеством и взаиморасположением эндоциклических атомов азота, рациональным представляется применение стратегии, подразумевающей направленную замену фармакофорных фрагментов в структуре молекулы-эффектора с целью увеличения фармакологической активности и индекса селективности в отношении конкретной нозологии, а также усовершенствования фармакокинетических параметров разрабатываемой молекулы. В контексте дизайна структурных аналогов риамиловира положительную роль может сыграть замена нитрогруппы в азиновом цикле на иные фармакофорные фрагменты. Анализ литературных данных позволяет позиционировать арилтиоэфирный остаток в качестве весьма перспективного фармакофора. Так, согласно патенту фармацевтической компании AstraZeneca [4], соединение формулы II, содержащее соответствующий остаток при родственном риамиловиру азолоазиновом каркасе, продемонстрировало довольно высокий уровень антагонизма в отношении рецептора С-С хемокинов 2b (CCR2b) (IC₅₀=0,16 мкМ) в экспериментах in vitro, в то время как аналог структуры II, отличный от последней лишь окисленной до сульфоксида группой, показал активность на порядок ниже (IC₅₀>1 мкМ), что может свидетельствовать о существенном влиянии тиоэфирного фрагмента на фармакологические свойства молекулы. В целом, ингибиторы CCR2b способны оказывать мощные противовоспалительный и иммуномодулирующий эффекты и могут быть задействованы в терапии ряда респираторных заболеваний, к числу которых относят и инфекции, вызываемые коронавирусами SARS [4] и SARS-CoV2 [5].

Сущность изобретения

Техническим результатом данного изобретения является создание нового химического соединения азолоазинового ряда, а именно 3-бензил-5-метил-6-(фенилтио)-[1,2,4]триазоло[1,5-а]пиримидин-7(3H)-она 3а, обладающего выраженным ингибирующим действием в отношении коронавируса SARS-CoV2, штамм hCoV-19/Russia/Vologda-171613-1208/2020. Данное соединение может рассматриваться как потенциальный кандидат в терапевтические средства против COVID 19.

Сущность изобретения поясняется следующими графическими материалами: На фиг. 1 представлена химическая схема синтеза заявляемого соединения 3а и измерного ему соединения 3б. На фиг. 2 приведена гистограмма вирусной нагрузки у хомяков на 4-е сутки после интраназального заражения SARS-CoV2.

Способ получения 3-бензил-5-метил-6-(фенилтио)-[1,2,4]триазоло[1,5-a]пиримидин-7(3H)-она (3а)

Заявляемое соединение - 3-бензил-5-метил-6-(фенилтио)-[1,2,4]триазоло[1,5-a]пиримидин-7(3H)-он (3а), - получено в две стадии. Синтез исходного соединения - 5-метил-[1,2,4]триазоло[1,5-а]пиримидин-7(4H)-она (1) - осуществлен по методике, описанной в литературе [6]. Субстрат 1 подвергают N-бензилированию под действием бензилбромида в присутствии карбоната калия в N,N-диметилформамиде (DMF). В результате получают смесь двух изомеров 2а и 2б, содержащих бензильный остаток у триазольного и пиримидинового атомов азота соответственно. Данные изомеры разделяют посредством колоночной хроматографии на силикагеле, после чего каждый из изомеров отдельно подвергают реакции кросс-дегидрогенативного сочетания с тиофенолом в присутствии окислительной системы молекулярный иод/персульфат калия в ацетонитриле, приводящей к образованию соединений 3а и 3б.

Характеристики новых соединений приведены в примерах конкретного выполнения. Строение полученных соединений подтверждено методами спектроскопии ЯМР ¹Н и ¹³С, двумерной спектроскопии ЯМР ¹Н-¹³С HSQC и НМВС, масс-спектрометрии, инфракрасной спектроскопии и элементного анализа.

Все используемые реагенты и растворители, если не указано иное, приобретены из коммерческих источников (Sigma-Aldrich®, Alfa Aesar®, Реахим®, ЭКОС-1®) и использованы без дальнейшей очистки. Все реакции проведены в атмосфере воздуха.

Спектры ЯМР ¹Н и ¹³С зарегистрированы на спектрометрах Bruker Avance II 400 / Bruker Avance Neo 600 (частоты 400 / 600 МГц для протонных спектров и 101 / 151 МГц для углеродных, соответственно) с использованием ДМСО-d₆ в качестве дейтерированного растворителя; химические сдвиги приведены в δ-шкале (м.д.), калибровка сигналов осуществлялась относительно пика остаточного не дейтерированного растворителя (2,5 м.д. для ¹Н ЯМР и 39,52 м.д. для ¹³С ЯМР в ДМСО-d₆). Инфракрасные спектры зарегистрированы с использованием Фурье-трансформационного инфракрасного спектрометра PerkinElmer Spectrum One В, снабженного приставкой диффузного отражения (DRA). Спектры ¹³С ЯМР для всех характеризуемых соединений записаны в режиме ВВ (broadband) с полной развязкой на протонах. Аббревиатуры, используемые при описании ЯМР спектров: с - синглет, т - триплет, м - мультиплет, J (Гц) - константа спин-спинового взаимодействия. Масс-спектры зарегистрированы на масс-спектрометре SHIMADZU GCMS-QP2010 Ultra с ионизацией образца электронным ударом (ЭУ, 70 эВ). Элементный анализ выполнен на элементном анализаторе PerkinElmer CHN РЕ 2400 II (границы абсолютной погрешности измерений: ±0,3%). Ход реакций контролировался с помощью метода тонкослойной хроматографии на 0,25 мм пластинах с силикагелем (Merck 60F 254), визуализацию проводили с помощью УФ камеры (λ=254 нм). Колоночную хроматографию осуществляли на силикагеле (Macherey-Nagel 60, 0,04-0,063 мм) с использованием элюирующей системы этилацетат: гексан.

Общая методика получения 3-бензил-5-метил-6-(фенилтио)-[1,2,4]триазоло[1,5-а]пиримидин-7(3H)-она 3а и 4-бензил-5-метил-6-(фенилтио)-[1,2,4]триазоло[1,5-а]пиримидин-7(4H)-она 3б.

Стадия 1. Получение 3-бензил-5-метил-[1,2,4]триазоло[1,5-а]пиримидин-7(3H)-она 2а и 4-бензил-5-метил-[1,2,4]триазоло[1,5-а]пиримидин-7(4H)-она 2б.

5-Метил-[1,2,4]триазоло[1,5-а]пиримидин-7(4H)-он (1) (1,50 г; 10,0 ммоль; 1,0 экв.) и карбонат калия (1,52 г; 11,0 ммоль; 1,1 экв.) помещают в круглодонную колбу, снабженную обратным холодильником и магнитным якорем; к данной смеси добавляют N,N-диметилформамид (х.ч.; 40 мл) и бензилбромид (2,38 мл; 20,0 ммоль; 2,0 экв.). Полученную суспензию перемешивают на глицериновой бане в течение 13 ч при температуре бани 100°С. По завершении перемешивания реакционную массу выливают в воду ("- 150-200 мл) и экстрагируют дихлорметаном (3 × 50 мл). Объединенный органический экстракт промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия и сушат над безводным сульфатом натрия. Экстракт концентрируют досуха при пониженном давлении. Полученный остаток подвергают колоночной хроматографии на силикагеле, элюент - этилацетат:гексан (7:3). Данная процедура позволяет разделить смесь двух изомеров - 2а и 26.

3-Бензил-5-метил-[1,2,4]триазоло[1,5-а]пиримидин-7(3H)-он (2а)

Выход: 540 мг (23%), бесцветное кристаллическое вещество, т.пл. 186-188°С. R_ƒ=0,11 (этилацетат). Спектр ЯМР ¹Н (400 МГц, ДМСО-d₆), δ, м.д.: 2,32 (с, 3Н); 5,28 (с, 2Н); 5,90 (с, 1Н); 7,31-7,39 (м, 3Н); 7,41-7,45 (м, 2Н); 8,90 (с, 1Н). Спектр ЯМР ¹³C{¹H} (101 МГц, ДМСО-d₆), δ, м.д.: 23,8; 46,6; 101,5; 127,8; 128,2; 128,8; 135,1; 142,7; 148,3; 155,5; 163,9. ИК-спектр (DRA), ν, см^-1: 3035, 2925, 1680, 1579, 1537, 830, 766, 755, 730, 700. Масс-спектр, m/z (I_отн., %): 240 [М]⁺ (100), 241 [М+1]⁺ (16). Найдено, %: 64,77; Н, 5,16; N, 23,21. Вычислено, % для C₁₃H₁₂N₄O: С, 64,99; Н, 5,03; N, 23,32.

4- Бензил-5-метил-[1,2,4]триазоло[1,5-а]пиримидин-7(4H)-он (2б)

Выход: 630 мг (26%), бесцветное кристаллическое вещество, т.пл. 182-184°С. R_ƒ=0,22 (этилацетат). Спектр ЯМР ¹Н (400 МГц, ДМСО-d₆), δ, м.д.: 2,39 (с, 3Н); 5,55 (с, 2Н); 5,97 (с, 1Н); 7,22-7,25 (м, 2Н); 7,28-7,35 (м, 3Н); 8,10 (с, 1Н). Спектр ЯМР ¹³С{¹Н} (101 МГц, ДМСО-d₆), δ, м.д.: 18,3; 50,2; 100,5; 126,3; 127,7; 128,8; 135,5; 151,8; 152,4; 152,6; 154,9. ИК-спектр (DRA), ν, см^-1: 3086, 2995, 1694, 1558, 1179, 840, 716, 663, 642, 625, 574, 530. Масс-спектр, m/z (I_отн., %): 240 [М]⁺ (100), 241 [М+1]⁺ (16). Найдено, %: 64,82; Н, 5,11; N, 23,18. Вычислено, % для C₁₃H₁₂N₄O: С, 64,99; Н, 5,03; N, 23,32.

Стадия 2. Получение 3-бензил-5-метил-6-(фенилтио)-[1,2,4]триазоло[1,5-a]пиримидин-7(3H)-она 3а либо 4-бензил-5-метил-6-(фенилтио)-[1,2,4]триазоло[1,5-a]пиримидин-7(4H)-она 3б.

Бензилсодержащий азолоазин, полученный на предыдущей стадии (2а либо 2б; 120 мг; 0,5 ммоль; 1,0 экв.), персульфат калия (270 мг; 1,0 ммоль; 2,0 экв.) и кристаллический иод (191 мг; 0,75 ммоль; 1,5 экв.) последовательно помещают в винтовой стеклянный виал объемом 4 мл, снабженный магнитным якорем. К смеси добавляют 1 мл ацетонитрила (класса ВЭЖХ) и тиофенол (0,077 мл; 0,75 ммоль; 1,5 экв.). Виал закупоривают и перемешивают реакционную массу на глицериновой бане в течение 16 ч при температуре бани 80°С. По завершении реакции к полученной массе добавляют 10 мл насыщенного водного раствора тиосульфата натрия и 10 мл дистиллированной воды, после чего экстрагируют дихлорметаном (4 × 10 мл). Объединенный органический экстракт промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия и сушат над безводным сульфатом натрия. Экстракт концентрируют при пониженном давлении. Полученный остаток растворяют при кипячении в ~ 20 мл толуола, фильтруют горячим, к полученному фильтрату приливают 50-100 мл гексана, что при доведении до комнатной температуры приводит к образованию однородного осадка. Осадок отфильтровывают при пониженном давлении и сушат на воздухе. В результате данной процедуры получают аналитически чистый продукт (3а либо 3б).

3-Бензил-5-метил-6-(фенилтио)-[1,2,4] триазоло[1,5-а]пиримидин-7(3H)-он (3а)

Выход: 147 мг (84%), светло-бежевый порошок, т.пл. 186-188°С. R_ƒ=0,34 (этилацетат). Спектр ЯМР ¹Н (400 МГц, ДМСО-d₆), δ, м.д.: 2,52 (с, 3Н); 5,33 (с, 2Н); 7,08-7,14 (м, 3Н); 7,24 (т, J=7,7 Гц, 2Н); 7,35-7,47 (м, 5Н); 9,05 (с, 1Н). Спектр ЯМР ¹³С{¹Н} (101 МГц, ДМСО-d₆), δ, м.д.: 24,4; 46,7; 103,0; 125,0; 125,5; 127,9; 128,3; 128,8; 128,9; 134,8; 137,1; 143,2; 148,1; 155,1; 169,5. ИК-спектр (DRA), ν, см^-1: 3049, 1686, 1592, 1536, 1476, 1136, 761, 739, 708, 690, 638. Масс-спектр, w/z (I_отн., %): 348 [M]⁺ (100), 349 [М+1]⁺ (23), 350 [М+2]⁺ (7). Найдено, %: С, 65,31; Н, 4,47; N, 15,92. Вычислено, % для C₁₉H₁₆N₄OS: С, 65,50; Н, 4,63; N, 16,08.

4-Бензил-5-метил-6-(фенилтио)-[1,2,4]триазоло[1,5-а]пиримидин-7(4H)-он (36)

Выход: 148 мг (85%), светло-бежевый порошок, т.пл. 158-160°С. R_ƒ=0,51 (этилацетат). Спектр ЯМР ¹Н (600 МГц, ДМСО-d₆), δ, м.д.: 2,64 (с, 3Н); 5,69 (с, 2Н); 7,12-7,16 (м, 1Н); 7,19-7,23 (м, 2Н); 7,24-7,28 (м, 2Н); 7,30-7,39 (м, 5Н); 8,32 (с, 1Н). Спектр ЯМР ¹³С{¹Н} (151 МГц, ДМСО-d₆), δ, м.д.: 18,4; 52,1; 102,6; 125,5; 125,7; 126,4; 127,8; 128,9; 129,1; 135,1; 136,1; 152,0; 152,1; 154,5; 158,6. ИК-спектр (DRA), ν, см^-1: 3049, 2924, 1698, 1590, 1535, 1174, 750, 735, 722, 701, 690, 645, 510. Масс-спектр, m/z (I_отн., %): 348 [М]⁺ (100), 349 [М+1]⁺ (24), 350 [М+2]⁺ (7). Найдено, %: С, 65,35; Н, 4,84; N, 15,97. Вычислено, % для C₁₉H₁₆N₄OS: С, 65,50; Н, 4,63; N, 16,08.

Исследование противовирусной активности 3-бензил-5-метил-6-(фенилтио)-[1,2,4]триазоло[1,5-а]пиримидин-7(3Н)-она (3а) против коронавируса SARS - CoV2 in vitro.

Соединение растворяли в диметилсульфоксиде (ДМСО) до концентрации 10 мг/мл (исходный раствор) и хранили при -20°С.

В исследовании был использован штамм коронавируса SARS - CoV2 (hCoV-19/Russia/Vologda-171613-1208/2020), гомологичный вирусному изоляту, выделенному в начале пандемии в г. Ухань (КНР).

Исследование противовирусной активности проводили с использованием перевиваемой линии клеток Vero (эпителиальные из почки Африканской зеленой мартышки). Клетки выращивали в модифицированной среде Дульбеко (ДМЕМ) с 10% эмбриональной сыворотки телят, 1% смесью антибиотиков и антимикотиков и 1% глутамина (Gibco, Life Technologies, UK).

Клетки Vero высевали в 96-луночные планшеты (примерно 2×10⁴ клеток на лунку) и инкубировали в течение 24 ч при 37°С до образования конфлюэнтного монослоя. Затем среду удаляли из лунок и заменяли 200 мкл свежей среды, содержащей 0-100 мкМ соединения, и инкубировали в течение 2 ч. Затем среду удаляли из лунок и заменяли свежей средой, содержащей вирус с множественностью заражения (MOI) 0,1. После 1-часовой инкубации среду заменяли свежей средой, содержащей соединение, и инкубировали в течение 72 - 96 часов при 37°С до появления ЦПД в лунках с контролем вируса (без ингибитора).

Во всех экспериментах добавляли в инфицированные вирусом клетки в качестве отрицательного контроля в концентрации, соответствующей разведению исходного раствора соединение - ДМСО.

Количество жизнеспособных клеток (защищенных от ЦПД вируса соединением) определяли с помощью 3-(4,5-диметил-2-тиазолил)-2,5-дифенил-2H-тетразолия бромида (метод МТТ). В основе теста лежит реакция превращения бледно-желтого 3-(4,5-диметил-2-тиазолил)-2,5-дифенил-2H-тетразолия бромида (Sigma-Aldrich, USA) в формазан фиолетового цвета под действием фермента сукцинатдегидрогеназы.

Для этого к супернатанту клеток добавляли раствор МТТ (50 мкл, 5 мг/мл). Планшет инкубировали в течение 90 мин при 37°С. Супернатант полностью удаляли, а клетки фиксировали 4%-м раствором формальдегида в течение 30 мин. Кристаллы тетразолия растворяли в 1 мл 96% этанола в течение 10 мин.

На многофункциональном спектрофотометре xMark (Bio-Rad, USA) измеряли значения оптической плотности (экстинкцию) в 96-луночных планшетах при длине волны 450 нм. В качестве контроля интактного монослоя клеток использовали лунки, не зараженные вирусом.

Эффективность ингибирования вирусной репродукции изучаемым соединением определяли по формуле:

где ОП - оптическая плотность.

По показателям ОП рассчитывали 50%-ю токсическую концентрацию (ТС₅₀) и 50%-ю ингибирующую (эффективную) концентрацию (IC₅₀) соединения при помощи компьютерной программы SoftMaxPro-4.0. На основании этих показателей рассчитывали индекс селективности (SI) исследуемого соединения:

где ТС₅₀ - концентрация вещества, при которой разрушаются (теряют жизнеспособность) 50% клеток в неинфицированном монослое;

IC₅₀ - концентрация вещества, при которой не разрушаются (остаются жизнеспособными) 50% клеток в инфицированном монослое.

На каждое разведение соединения использовали по 3 лунки планшета, по которым определяли среднее значение. В таблице 1 представлены данные о цитотоксичности и противовирусной активности соединения 3а в отношении коронавируса SARS-CoV2, штамм hCoV-19/Russia/Vologda-171613-1208/2020 в перевиваемой линии клеток Vero.

Исследование противовирусной активности 3-бензил-5-метил-6-(фенилтио)-[1,2,4]триазоло[1,5-а]пиримидин-7(3Н)-она (3а) против коронавируса SARS - CoV2 in vivo.

Сирийские хомяки (Mesocricetus auratus) обоих полов, весом 60-80 г были получены из питомника лабораторных животных ГНЦ ВБ «Вектор» Роспотребнадзора и содержались по двое в вентилируемых клетках с неограниченным доступом к пище и воде.

В работе использовали 2 группы животных (1 опытная и 1 контрольная). Под внутримышечным наркозом Zoletil 100 («Virbac», Франция) всем животным была проведена интраназальная инокуляция в оба носовых хода по 50 мкл среды, содержащей 30 ИД₅₀ вируса SARS-CoV2 штамм hCoV-19/Russia/Vologda-171613-1208/2020.

Исследуемое соединение для внутрижелудочного введения суспендировали в водном растворе метилцеллюлозы 0,75%, до концентрации 15 мг/мл. Суточная доза вводимого вещества составила 300 мг/кг.Животным суспензию вводили внутрижелудочно через зонд 18G 2 раза в день, в течение 4 суток, начиная первое введение за 2 часа перед заражением, через 2 часа после заражения, далее в течение 3 суток каждые 12 часов. Группа контроля вместо исследуемого соединения получала 0,75% р-р метилцеллюлозы по аналогичной с группой лечения схеме.

Ежедневно во всех группах производили замеры температуры и массы тела. На 4-е сутки после заражения животных подвергали эвтаназии внутривенным введением 500 мкл долетала (200 мг / мл пентобарбитала натрия, Франция). Ткани легких и носовых раковин забирали с соблюдением правил асептики. Из образцов тканей легких с помощью гомогенизатора (Precellys) подготавливали 10% гомогенаты на среде MEM, после производили отбор аликвот от каждого образца для ПЦР анализа и определения инфекционного титра вируса на культуре клеток Vero E6.

Противовирусную активность соединения 3а оценивали по снижению вирусной нагрузки в тканях носовой полости и легких, отобранных на 4-е сутки после заражения. Вирусную нагрузку измеряли количественным методом ПЦР-РВ, значение Ct, которое является суррогатным показателем вирусной нагрузки, меньшее значение Ct соответствует большей вирусной нагрузке. Результаты представлены в виде гистограмм на фиг. 2. На рисунке представлены гистограммы медианных значений пороговых циклов (Ct) в гомогенатах тканей носовой полости (а) и легких (б), в которых вершиной гистограммы представлены медианы, вертикальной линией - 95% доверительный интервал. Значения Р представляют собой тест Манна-Уитни, сравнение группы лечения с контролем.

В эксперименте на модели сирийского хомячка показано, что исследуемое соединение 3-бензил-5-метил-6-(фенилтио)-[1,2,4]триазоло[1,5-а]пиримидин-7(3Н)-он 3а в дозе 300 мг/кг при внутрижелудочном введении обладает противовирусной активностью в отношении вируса SARS-CoV2. Это подтверждено достоверным (р<0,0001) снижением в 3,4 раза вирусной нагрузки, в тканях носовой полости на 4-е сутки после инфицирования.

Источники научно-технической и патентной информации:

1. Русинов В.Л., Чарушин В.Н., Чупахин О.Н. Биологически активные азоло-1,2,4-триазины и азолопиримидины // Изв. АН. Сер. хим. - 2018. - Т. 67. - №4. - С.573-599. DOI: 10.1007/s11172-018-2113-8.

2. a) Chupakhin O.N., Rusinov V.L., Varaksin M.V., Ulomskiy E.N., Savateev K.V., Butorin I.I., Du W., Sun Z., Charushin V.N. Triazavirin - A Novel Effective Antiviral Drug // Int. J. Mol. Sci. - 2022. - V. 23. - 14537. DOI: 10.3390/ijms232314537; б) Чепур С. В., Смирнова A.B., Кириенко А.Н., Мясникова И.А., Каневский Б.А., Сорокин П.В. Исследование активности препарата риамиловир в отношении инфекции SARS-CoV-2 на сирийских хомяках // Антибиотики и Химиотерапия. - 2021. - Т. 66. - №7-8. - С.13-19. DOI: 10.37489/0235-2990-2021-66-7-8-13-19.

3. а) Сабитов А.У., Белоусов В.В., Един А.С., Олейниченко Е.В., Гладунова Е.П., Тихонова Е.П., Кузьмина Т.Ю., Калинина Ю.С., Сорокин П.В. Практический опыт применения препарата Риамиловир в лечении пациентов с COVID-19 средней степени тяжести // Антибиотики и Химиотерапия. - 2020. - Т. 65. - №7-8. - С.27-30. DOI: 10.37489/0235-2990-2020-65-7-8-27-30; б) Касьяненко К.В., Козлов К.В., Мальцев О.В., Лапиков И.И., Гордиенко В.В., Шарабханов В.В., Сорокин П.В., Жданов К.В. Оценка эффективности Риамиловира в комплексной терапии больных COVID-19 // Терапевтический архив. - 2021. - Т. 93. - №3. - С.290-294. DOI: 10.26442/00403660.2021.03.200719; в) Сабитов А.У., Сорокин П.В., Дашутина С.Ю. Опыт профилактического применения препарата Риамиловир в очагах коронавирусной инфекции (COVID-19) // Терапевтический архив. - 2021. - Т. 93. - №3 - С.435-439. DOI: 10.26442/00403660.2021.04.200751.

4. AstraZeneca АВ; AstraZeneca UK Ltd; Bengtsson В. A.; Blackaby W.; Cumming J.; Faull A. W.; Larsson J.; Nash I. A.; Oldham K.; Pape A. 4H-[1,2,4]Triazolo[5,1-b]pyrimidin-7 -one derivatives as CCR2b receptor antagonists. 2011; PCT Int. Appl. WO 2011/114148 A1.

5. Files D.C, Tacke F., O'Sullivan A., Dorr P., Ferguson W.G., Powderly W.G. Rationale of Using the Dual Chemokine Receptor CCR2/CCR5 Inhibitor Cenicriviroc for the Treatment of COVID-19. // PLoS Pathog. - 2022. - V. 18 - N. 6. - el010547. DOI: 10.1371/joumal.ppat. 1010547.

6. Loubidi M., Moutardier A., Campos J.F., Berteina-Raboin S. Pd-Catalyzed Suzuki/ Sonogashira Cross-Coupling Reaction and the Direct sp³ Arylation of 7-Chloro-5-Methyl-[1,2,4]Triazolo[1,5-a]Pyrimidine // Tetrahedron Lett. - 2018. - V. 59 - N. 11. - P. 1050-1054. DOI: 10.1016/j.tetlet.2018.02.001.

Изобретение относится к области медицинской химии, а именно к 3-бензил-5-метил-6-(фенилтио)-[1,2,4]триазоло[1,5-а]пиримидин-7(3H)-ону формулы 3а. Технический результат - 3-бензил-5-метил-6-(фенилтио)-[1,2,4]триазоло[1,5-а]пиримидин-7(3H)-он, обладающий выраженным ингибирующим действием в отношении штамма hCoV-19/Russia/Vologda-171613-1208/2020 вируса SARS-CoV2. 2 ил., 1 табл.

3-Бензил-5-метил-6-(фенилтио)-[1,2,4]триазоло[1,5-а]пиримидин-7(3H)-он формулы 3а

,

обладающий противовирусным действием в отношении штамма hCoV-19/Russia/Vologda-171613-1208/2020 вируса SARS-CoV2.