Замещенные азоло[1,5-а]пиримидины обладают широким спектром биологической активности. Среди них выявлены модуляторы кальциевых каналов [патент ЕР 0217142] и эффективные туберкулостатики [ЖОрХ 2019, 55, №6, 871]. Найдены вещества с выраженной противовоспалительной [Molecules 2023, 28, 741] и антикоагулянтной активностью, что становится актуальным при лечении вирусных инфекций [Int. J. Mol. Sci. 2023, 24, 15581]. Описаны соединения, обладающие противовирусной активностью в отношении коронавируса SARS-COV-2 [Патент РФ №2769828] или вируса гриппа [Патент РФ №2568849]. К замещенным триазоло[1,5-а]пиримидинам относится новый противовирусный препарат «Триазид» формулы 1 с умеренной противовирусной активностью в отношении вируса гриппа A/H1N1 [Патент РФ №2529487].
Настоящее изобретение относится способу получения к 6-бензилоксикарбонил-5-метил-7-(гет)арил-4,7-дигидроазоло[1,5-а]пиримидинов, которые могут быть использованы в качестве противовирусных агентов и перспективных химических соединений при создании препаратов для лечения и экстренной профилактики гриппа A/H1N1.
Замещенные 6-бензилоксикарбонил-5-метил-7-(гет)арил-4,7-дигидроазоло[1,5-а]пиримидины формулы 2 описаны [ЖОрХ, 2019, т.55, №6, С.871-878] как эффективные туберкулостатики, в патенте ЕР 0217142 описано соединение формулы 3, являющееся модулятором кальциевых каналов. Аналог - триазид формулы 1 обладает лишь умеренной противовирусной активностью в отношении вируса гриппа А (МИК 100 мкг/мл) [Патент РФ №2529487].
В патенте ЕР 0217142 описан двух стадийный способ синтеза соединения формулы 3, предусматривающий первоначальное получение, выделение и очистку продукта взаимодействия бензилацетоацетата с альдегидом в этаноле присутствии кислотного катализатора. Затем полученное соединение кипятили в этаноле с производным аминоазола 10 ч, выделяли и очищали кристаллизацией из этанола. К недостаткам метода следует отнести его длительность (две стадии) и большой расход органических растворителей.
Известен мультикомпонентный (одностадийный) способ получения соединений формулы 2 путем кипячения бензилацетоацетата, аминоазола с соответствующим альдегидом в этаноле в присутствии каталитических количеств концентрированной соляной кислоты в течение 8-9 часов [ЖОрХ, 2019, т.55, №6, С.871-878] (прототип). Недостатками метода является необходимость использования органического растворителя и кислотного катализатора, а также формирование значительного количества [4,3-а]-изомера наряду с целевым [1,5-а]-изомером [Вестник УГТУ-УПИ. Серия химическая. 2005. №5(57), с. 164-167], что снижает выход целевых продуктов формулы 2 до 9-16%.
Задача изобретения - разработка простого и эффективного способа получения 6-бензилоксикарбонил-5-метил-7-(гет)арил-4,7-дигидроазоло[1,5-а]пиримидинов общей формулы А, обладающих широким спектром биологической активности.
где R=Н, арил, выбранный из возможно замещенного фенила или гетерил, выбранный из тиенила, пиридила, индолила, тиазолила, при этом замещенный фенил имеет 1-3 заместителя, выбранных из группы, включающей этил, галоген или нитрогруппу; X=СН, N.
Поставленная задача решается тем, что, в качестве среды для проведения реакции используют воду вместо этанола, что позволяет повысить хемоселективность процесса и увеличить выходы целевых продуктов с 9-16% до 36-68%. Новый способ включает нагревание эквимолярных количеств соответствующего арил- или гетарилальдегида, бензилацетоацетата и аминоазола в воде. Указанный способ отличается от известных своей простотой - проведением в одну стадию, с использованием более экологичного растворителя (воды) и отсутствием катализатора. Побочный [4,3-а]-изомер реакции с участием 3-амино-1,2,4-триазола (соединения 1-13) образуется, однако, его количество снижается при проведении реакции в воде, без катализатора, соотношение изомеров изменяется в пользу целевого [1,5-а]-изомера и составляет в воде 8.4: 1 против 6.7: 1, в этаноле. Это связано с различиями в процессах протонирования атомов азота (N-2 и N-5) в 3-амино-1,2,4-триазоле в этаноле (в присутствии кислотного катализатора) и в воде, без катализатора. По-видимому, в воде процесс протонирования атома N-2, ведущий к формированию целевого [1,5-а]-изомера превалирует в сравнении с протонированием атома N-5, обуславливающим образование минорного [4,3-а]-изомера. Необходимо подчеркнуть, что в этаноле, без катализатора реакция получения соединений формулы А не идет.
Для соединений 1 и 11 выявлено выраженное ингибирующее действие в отношении штамма вируса гриппа A/California/04/2009 (H1N1)v, при этом индексы селективности (SI) для соединений 1 и 11 составляют более 8 (30.4 и 18.7) (табл. 1) и являются приемлемыми для того, чтобы рекомендовать эти соединения для дальнейших доклинических исследований [Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств / Под ред. Миронова А.Н. Часть первая. - М.: Гриф и К, 2012. - 944 с.].
Чистоту полученных соединений контролируют методом ТСХ, значения Rf определяют с использованием пластинок «Sorbfil» (Силикагель СТХ-1А, УФ) (Россия) или «Silufol-UV» (Чехословакия). Структуру полученных соединений доказывают данными элементного анализа (С,Н,N,O-анализатор фирмы Karlo Erba). ИК спектры регистрируют на ИК - Фурье спектрометре «Spectrum One» фирмы «PerkinElmer» с помощью приставки диффузного отражения (Diffuse Reflectance Sampling Accessory (DRA)). Спектры ЯМР 1Н соединений записывают в ДМSО-d6 на приборе "Bruker-400" с рабочей частотой 400 мГц и ТМС в качестве внутреннего стандарта. Температуры плавления определяют на микронагревательном столике «Boetius».
Общий метод синтеза 6-бензилоксикарбонил-5-метил-7-(гет)арил-4,7-дигидроазоло[1,5-а]пиримидинов
Суспензию 0.7 г (3.6 ммоль) бензилацетоацетата, (3.6 ммоль) 3-амино-1,2,4-триазола или 5-аминотетразола и 3.6 ммоль соответствующего альдегида в 4 мл воды нагревают с обратным холодильником при 60°С 23-25 часов. По окончании процесса реакционную массу упаривают досуха, при необходимости промывают этанолом, либо кристаллизуют из него.
Примеры конкретного выполнения
Пример 1
6-Бензилоксикарбонил-5-метил-7-фенил-4,7-дигидро-1,2,4-триазоло[1,5-а]пиримидин (1).
Выход: 47% (0.59 г). Желтый порошок, т.пл. 223-224°С. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6): 10.88 (ш. с, 1Н), 7.65 (с, 1H), 7.28-7.26 (м, 6Н), 7.20-7.18 (м, 2Н), 7.08-7.07 (м, 2Н), 6.31 (с, 1Н), 5.01 (кв, J=12.7 Гц, 2Н), 2.44 (с, 3Н). 13С ЯМР (125 МГц, ДМСО-d6): 164.8, 150.1, 147.6, 146.8, 141.8,136.3, 128.4,128.2, 127.9, 127.6, 127.5, 127.0, 96.6, 65.0, 59.4,18.5. Найдено, %: С 69.54; Н 5.31; N 16.35. Вычислено для C20H18N4O2, %: С 69.35; Н 5.24; N 16.17.
Пример 2
6-Бензилоксикарбонил-5-метил-7-(2-нитрофенил)-4,7-дигидро-1,2,4-триазоло[1,5-а]пиримидин (2).
Выход: 51% (0.72 г). Желтый порошок, т.пл. 223-224°С. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6): 11.06 (ш. с, 1Н), 7.88 (дд, J=8.1 Гц, 1Н), 7.68 (с, 1Н), 7.64 (т, J=7.6 Гц, 1H), 7.52 (т, J=7.8 Гц, 1Н), 7.40 (д, J=7.8 Гц, 1H), 7.23-7.21 (м, 3Н), 7.12 (с, 1Н), 7.00-6.99 (м, 2Н), 4.96 (кв, J=12.7 Гц, 2Н), 2.45 (с, 3Н). 13С ЯМР (125 МГц, ДМСО-d6): 164.5, 150.5, 149.0, 148.2, 146.7, 136.2, 135.6, 133.7, 129.3, 129.1, 128.1, 127.6, 127.3, 124.2, 95.2, 65.0, 53.7, 18.7. Найдено, %: С 61.55; Н 4.55; N 18.02. Вычислено для C20H17N5O4, %: С 61.38; Н 4.38; N 17.89.
Пример 3
6-Бензилоксикарбонил-5-метил-7-(3-нитрофенил)-4,7-дигидро-1,2,4-триазоло[1,5-а]пиримидин (3).
Выход: 61% (0.87 г). Желтый порошок, т.пл. 227-230°С. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6): 11.05 (ш. с, 1Н), 8.11 (дд, J=8.1 Гц, 1H), 7.99-7.98 (м, 1Н), 7.69 (с, 1Н), 7.67-7.66 (м, 1Н), 7.56 (т, J=7.9 Гц, 1H), 7.24-7.21 (м, 3Н), 7.06-7.04 (м, 2Н), 6.50 (с, 1H), 5.00 (кв, J=12.5 Гц, 2Н), 2.48 (с, 3Н). 13С ЯМР (125 МГц, ДМСО-d6): 164.6, 150.5, 148.5, 147.5, 146.6, 143.9, 135.9, 133.6, 130.2, 128.1, 127.7, 127.6, 122.9, 121.8, 95.6, 65.1, 58.8, 18.7. Найдено, %: С 61.32; Н 4.56; N 18.06. Вычислено для C20H17N5O4, %: С 61.38; Н 4.38; N 17.89.
Пример 4
6-Бензилоксикарбонил-5-метил-7-(4-нитрофенил)-4,7-дигидро-1,2,4-триазоло[1,5-а] пиримидин (4).
Выход: 58% (0.82 г). Желтый порошок, т.пл. 258-259°С. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6): 11.05 (ш. с, 1Н), 8.09 (д, J=8.7 Гц, 2Н), 7.69 (с, 1Н); 7.47 (д, J=8.7 Гц, 2Н), 7.26-7.22 (м, 3Н), 7.09-7.07 (м, 2Н), 6.46 (с, 1Н), 4.99 (кв, J=12.5 Гц, 2Н), 2.46 (с, 3Н). 13С ЯМР (125 МГц, ДМСО-d6): 164.6, 150.5, 148.7, 148.4, 147.0, 146.7, 136.1, 128.5, 128.1, 127.8, 123.6, 95.6, 65.0, 58.8, 18.7. Найдено, %: С 61.43; Н 4.40; N 17.89. Вычислено для C20H17N5O4,%: С 61.38; Н 4.38; N 17.89.
Пример 5
6-Бензилоксикарбонил-5-метил-7-(4-фторфенил)-4,7-дигидро-1,2,4-триазоло[1,5-а] пиримидин (5).
Выход: 51% (0.68 г). Белый порошок, т.пл. 266-267°С. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6): 10.91 (ш. с, 1H), 7.66 (с, 1Н), 7.28-7.23 (м, 5Н), 7.10-7.08 (м, 4Н), 6.33 (с, 1H), 5.02 (кв, J=12.7 Гц, 2Н), 2.44 (с, 3Н). 13С ЯМР (125 МГц, ДМСО-d6): 164.8, 162.6, 160.7, 150.2, 147.9, 146.8, 138.2, 136.3, 129.1, 128.2, 127.7, 127.5, 115.1, 96.3, 64.9, 58.7, 18.7. Найдено, %: С 65.74; Н 4.68; N 15.41. Вычислено для C20H17FN4O2, %: С 65.93; Н 4.70; F 5.21; N 15.38.
Пример 6
6-Бензилоксикарбонил-5-метил-7-(4-бромфенил)-4,7-дигидро-1,2,4-триазоло[1,5-а]пи-римидин (6).
Выход: 42% (0.65 г). Белый порошок, т.пл. 259-260°С. 1Н ЯМР (500 MHz, ДМСО-d6): 10.93 (ш. с, 1Н), 7.67 (с, 1Н), 7.46 (д, J=8.4 Гц, 2Н), 7.28- 7.26 (м, 3Н), 7.16 (д, J=8.4 Гц, 2Н), 7.06-7.05 (м, 2Н), 6.31 (с, 1Н), 5.02 (кв, J=12.7 Гц, 2Н), 2.43 (с, 3Н). Найдено, %: С 56.47; Н 3.98; N 13.28. Вычислено для C20H17BrN4O2, %: С 56.48; Н 4.03; N 13.17.
Пример 7
6-Бензилоксикарбонил-5-метил-7-(4-этилфенил)-4,7-дигидро-1,2,4-триазоло[1,5-а]пиримидин (7).
Выход: 45% (0.61 г). Белый порошок, т.пл. 250-251°С. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6): 10.85 (ш. с, 1H), 7.64 (с, 1Н), 7.27-7.25 (м, 3Н), 7.10-7.05 (м, 6Н), 6.27 (с, 1H), 5.02 (кв, J=12.8 Гц, 2Н), 2.43 (с, 3Н), 2.55 (кв, J=7.6 Гц, 2Н), 1.15 (т, J=7.6 Гц, 3Н). 13С ЯМР (125 МГц, ДМСО-d6): 164.9, 150.0, 147.4, 146.8, 143.5, 139.3, 136.3, 128.1, 127.7, 127.6, 127.4, 126.9, 96.7, 64.9, 59.1, 39.0, 27.8, 18.5, 15.5. Найдено, %: С 70.37; Н 6.04; N 14.98. Вычислено для C22H22N4O2, %: С 70.57; Н 5.92; N 14.96.
Пример 8
6-Бензилоксикарбонил-5-метил-7-(пиридин-4-ил)-4,7-дигидро-1,2,4-триазоло[1,5-а]пиримидин (8).
Выход: 68% (0.86 г). Белый порошок, т.пл. 241-243°С. 1Н ЯМР (500 МГЦ, ДМСО-d6): 11.02 (ш. с, 1Н), 8.47 (д, J=6.0 Гц, 2Н), 7.70 (с, 1H), 7.29- 7.27 (м, 3Н), 7.17 (д, J=6.0 Гц, 2Н), 7.13-7.11 (м, 2Н), 6.32 (с, 1Н), 5.02 (кв, J=12.6 Гц, 2Н), 2.44 (с, 3Н). 13С ЯМР (125 МГц, ДМСО-d6): 164.6, 150.4, 149.8, 149.7, 148.5, 146.9, 136.1, 128.2, 127.7, 122.0, 95.3, 65.1, 58.5, 18.6. Найдено, %: С 65.82; Н 4.94; N 20.09. Вычислено для C19H17N5O2, %: С 65.69; Н 4.93; N 20.16.
Пример 9
6-Бензилоксикарбонил-5-метил-7-(1Я-индол-3-ил)-4,7-дигидро-1,2,4-триазоло[1,5-а]пиримидин (9).
Выход: 13% (0.18 г). Белый порошок, т.пл. 286-289°С. 1Н ЯМР (500 МГц, DMSO-d6): 11.05 (ш. с, 1Н), 10.86 (с, 1Н), 7.60 (с, 1Н), 7.37 (кв, J=8.0 Гц, 2Н), 7.23-7.17 (м, 4Н), 7.08-7.04 (м, 3Н), 6.95 (т, J=7.5 Гц, 1Н), 6.65 (с, 1Н), 5.01 (кв, J=12.9 Гц, 2Н), 2.44 (с, 3Н). 13С ЯМР (125 МГц, ДМСО-d6): 165.2, 149.6, 146.9, 146.5, 136.4, 128.1, 127.2, 125.1, 124.2, 121.1, 118.4, 115.9, 111.6, 96.7, 64.7, 52.5, 18.4. Найдено, %: С 68.43; Н 4.95; N 18.09. Вычислено для C22H19N5O2, %: С 68.56; Н 4.97; N 18.17.
Пример 10
6-Бензилоксикарбонил-5-метил-7-(тиофенил-2-ил)-4,7-дигидро-1,2,4-триазоло[1,5-а]пиримидин (10).
Выход: 56% (0.72 г). Белый порошок, т.пл. 216-218°С. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6): 11.00 (ш. с, 1Н), 7.72 (с, 1Н), 7.42 (т, J=3.2 Гц, 1H), 7.30-7.28 (м, 3Н), 7.17-7.14 (м, 2Н), 6.92 (д, J=3.3 Гц, 2Н), 6.63 (с, 1Н), 5.08 (кв, J=12.8 Гц, 2Н), 2.43 (с, 3Н). 13С ЯМР (125 МГц, ДМСО-d6): 164.7, 150.3, 147.9, 146.7, 145.2, 136.3, 128.3, 127.7, 127.4, 126.8, 126.0, 125.6, 96.6, 65.1, 54.1, 18.5. Найдено, %: С 61.28; Н 4.53; N 15.87; S 9.17. Вычислено для C17H16N4S, %: С 61.35; Н 4.58; N 15.90; S 9.10.
Пример 11
6-Бензилоксикарбонил-5-метил-7-(тиофенил-3-ил)-4,7-дигидро-1,2,4-триазоло[1,5-а]пиримидин (11).
Выход: 51% (0.65 г). Белый порошок, т.пл. 232-233°С. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6): 10.86 (ш. с, 1Н), 7.69 (с, 1H), 7.43 (дд, J=5 Гц, 1Н), 7.30-7.26 (м, 4Н), 7.16-7.13 (м, 2Н), 6.88 (дд, J=5 Гц, 1H), 6.44 (с, 1Н), 5.08 (кв, J=12.8 Гц, 2Н), 2.42 (с, 3Н). 13С ЯМР (125 МГц, DMSO-d6): 164.9, 150.1, 147.6, 146.9, 142.7, 136.4, 128.3, 127.6, 127.4, 126.7, 126.4, 122.9, 96.5, 64.9, 54.4, 18.5. Найдено, %: С 61.29; Н 4.63; N 15.90; S 9.01. Вычислено для C18H16N4S, %: С 61.35; Н 4.58; N 15.90; S 9.10.
Пример 12
6-Бензилоксикарбонил-5-метил-7-(тиазол-2-ил)-4,7-дигидро-1,2,4-триазоло[1,5-а]пиримидин (12).
Выход: 48% (0.62 г). Белый порошок, т.пл. 176-177°С. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6): 11.10 (ш. с, 1Н), 7.73 (с, 1H); 7.68 (кв, J=3.2 Гц, 2Н), 7.32-7.26 (м, 3Н), 7.17-7.16 (м, 2Н), 6.72 (с, 1Н), 5.07 (кв, J=12.8 Гц, 2Н), 2.44 (с, 3Н). 13С ЯМР (125 МГц, ДМСО-d6): 168.9, 164.6, 150.5, 148.6, 147.1, 142.3, 136.2, 128.2, 127.7, 127.5, 121.4, 95.2, 65.1, 56.0, 18.6. Найдено, %: С 57.84; Н 4.40; N 19.86; S 9.16. Вычислено для C17H15N5O2S, %: С 57.78; Н 4.28; N 19.82; S 9.07.
Пример 13
6-Бензилоксикарбонил-5-метил-4,7-дигидро-1,2,4-триазоло[1,5-а]пиримидин (13).
Выход: 68% (0.99 г). Белый порошок, т.пл. 190-191°С. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6): 10.55 (ш. с, 1Н), 7.73 (с, 1H), 7.40-7.36 (м, 4Н), 7.35-7.31 (м, 1Н), 5.16 (ш. с, 2Н), 4.88 (ш. с, 2Н), 2.33 (с, 3Н). 13С ЯМР (125 МГц, ДМСО-d6): 165.0, 149.7, 147.7, 147.0, 136.6, 128.4, 127.8, 127.6, 91.7, 64.9, 45.3, 18.2. Найдено, %: С 62.00; Н 5.30; N 20.52. Вычислено для C14H14N4O2, %: С 62.21; Н 5.22; N 20.73.
Пример 14
6-Бензилоксикарбонил-5-метил-7-фенил-4,7-дигидро-тетразоло[1,5-а]пиримидин (14).
Выход: 36% (0.45 г). Белый порошок, т.пл. 198-200°С. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6): 11.35 (ш. с, 1H), 7.33-7.25 (м, 8Н), 7.06-7.04 (м, 2Н), 6.71 (с, 1H), 5.02 (кв, 7=12.7 Гц, 2Н), 2.48 (с, 3Н). 13С ЯМР (125 МГц, ДМСО-d6): 164.3, 148.3, 147.5, 140.7, 136.0, 128.7, 128.5, 128.2, 127.7, 127.5, 127.2, 97.1, 65.2, 58.4, 18.6. Найдено, %: С 65.62; Н 4.88; N 20.11. Вычислено для C19H17N5O2, %: С 65.69; Н 4.93; N 20.16.
Пример 15
6-Бензилоксикарбонил-5-метил-7-(4-нитрофенил)-4,7-дигидро-1,2,4-триазоло[1,5-а]пиримидин (15).
Выход: 40% (0.57 г). Белый порошок, т.пл. 250-251°С. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6): 11.51 (ш. с, 1H), 8.11 (д, J=8.8 Гц, 2Н), 7.59 (д, J=8.8 Гц, 2Н), 7.26-7.20 (м, 3Н), 7.08-7.06 (м, 2Н), 6.87 (с, 1Н), 5.02 (кв, J =12.5 Гц, 2Н), 2.50 (с, 3Н). 13С ЯМР (125 МГц, ДМСО-d6): 164.1, 148.3, 148.2, 147.4, 135.8, 128.8, 128.1, 127.8, 123.9, 96.2, 65.3, 58.0, 18.7. Найдено, %: С 58.16; Н 4.11; N 21.42. Вычислено для C19H16N6O4, %: С 58.10; Н 4.12; N21.52.
Пример 16
6-Бензилоксикарбонил-5-метил-7-(тиофенил-2-ил)-4,7-дигидро-1,2,4-триазоло[1,5-я] пиримидин (16).
Выход: 41% (0.52 г). Белый порошок, т.пл. 148-149°С. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6): 11.46 (ш. с, 1H), 7.50-7.49 (м, 1H), 7.29-7.28 (м, 3Н), 7.15-7.12 (м, 2Н), 7.08-7.07 (м, 2Н), 6.98-6.96 (м, 1Н), 5.09 (кв, J=12.8 Гц, 2Н), 2.48 (с, 3Н). 13С ЯМР (125 МГц, ДМСО-d6): 164.2, 148.2, 147.7, 143.9, 136.1, 128.2, 127.7, 127.4, 127.2, 126.8, 126.5, 97.2, 65.3, 53.3, 18.5. Найдено, %: С 57.69; Н 4.30; N 19.67; S 9.16. Вычислено для C17H15N5O2S, %: С 57.78; Н 4.28; N 19.82; S 9.07.
Пример 17
6-Бензилоксикарбонил-5-метил-7-(тиофенил-3-ил)-4,7-дигидротетразоло[1,5-а]пири-мидин (17).
Выход: 41% (0.52 г). Желтый порошок, т.пл. 164-165°С. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6): 11.32 (ш. с, 1H), 7.50-7.48 (м, 1Н), 7.45-7.44 (м, 1H), 7.29-7.28 (м, 3Н), 7.13-7.12 (м, 2Н), 6.98 (дд, J=5.0 Гц, 1H), 6.84 (с, 1H), 5.08 (кв, J=12.8 Гц, 2Н), 2.46 (с, 3Н). 13С ЯМР (125 МГц, ДМСО-d6): 164.4, 148.4, 147.4, 141.5, 136.2, 128.2, 127.7, 127.4, 127.3, 126.3, 124.1, 97.0, 65.1, 53.6, 18.6. Найдено, %: С 57.51; Н 4.30; N 19.59; S 9.18. Вычислено для C17H15N5O2S, %: С 57.78; Н 4.28; N 19.82; S 9.07.
Для изучения противовирусной активности использовали штамм вируса гриппа A/California/04/2009 (H1N1)v (субтип A/H1N1pdm09), полученный из Государственной коллекции возбудителей вирусных инфекций и риккетсиозов ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор» Роспотребнадзора. Для определения цитотоксичности и противовирусной активности использовали монослойную перевиваемую культуру клеток MDCK (клетки почки кокер-спаниеля), полученную из коллекции культур клеток ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор» Роспотребнадзора (п. Кольцово, Новосибирская обл., Россия). Оценку цитотоксичности и противовирусной активности препаратов проводили по модифицированной авторами методике с помощью прижизненного красителя - нейтрального красного, поглощенного клетками, неразрушенными под влиянием препаратов или вируса [Smee D.F., Morrison А.С., Barnard D.L., Sidwell R.W. Comparison of colorimetric and visual methods for determining anti-influenza (H1N1 and H3N2) viruses activities and toxicities of compounds // Journal of Virological Methods. - 2002. - V. 106. - P. 71-79]. Оптическую плотность (ОП) красителя, перешедшего в раствор лизирующего буфера, измеряли с использованием планшетного спектрофотометра Emax (Molecular Devices, США) при длине волны 490 нм. Учет результатов проводили с помощью программы SoftMax 4.0 (Molecular Devices, США), которая рассчитывала 50% цитотоксическую концентрацию (СС50, в мкг/мл) и 50% вирус-ингибирующую концентрацию (IC50, в мкг/мл) препаратов. На основании этих показателей высчитывали индекс селективности (SI) препарата: SI = СС50 : IC50. Величина SI менее 8 считается неприемлемой для соединений, которые могут быть перспективными в качестве противовирусных препаратов [Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств / Под ред. Миронова А.Н. Часть первая. - М.: Гриф и К, 2012. - 944 с.]. Результаты представлены в табл. 1.
Примечание: па - нет активности.
* - штамм вируса гриппа A/California/04/2009 (H1N1)v прошел несколько пассажей и наработан в культуре клеток MDCK.
СС50 - 50%-я цитотоксическая концентрация, при которой разрушаются 50% клеток в неинфицированном монослое клеток MDCK; IC50 - 50%-я вирус-ингибирующая концентрация, при которой сохраняется 50% клеток в инфицированном монослое клеток MDCK; SI - индекс селективности препарата (SI = CC50/IC50).
# - величина индекса селективности (SI) менее 8 считается неприемлемой для соединений, которые могут быть перспективными в качестве противовирусных препаратов [Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств / Под ред. Миронова А.Н. Часть первая. - М.: Гриф и К, 2012. - 944 с].
Соединения 1 и 11 превосходят по своим характеристикам (СС50, IC50, индекс селективности SI) «Триазид», аналог по строению и действию, для которого СС50 = 750 мкг/мл, IC50 = 100 мкг/мл, а индекс селективности SI = 7.5 [Патент РФ №2529487].
название | год | авторы | номер документа |
---|---|---|---|
Этиловый эфир 2-(адамантан-1-ил)-3-бром-7-оксо-4,7-дигидропиразоло[1,5-a]пиримидин-6-карбоновой кислоты, обладающий противовирусным действием в отношении коронавируса SARS-CoV-2 | 2024 |
|
RU2839407C1 |
3-Бензил-5-метил-6-(фенилтио)-[1,2,4]триазоло[1,5-a]пиримидин-7(3H)-он, обладающий противовирусной активностью в отношении коронавируса SARS-CoV2 | 2022 |
|
RU2808622C1 |
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ 2-СУЛЬФОНИЛАМИНО-1,2,4,-ТРИАЗОЛО[1,5-a] ПИРИМИДИНОВ | 2007 |
|
RU2325390C1 |
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ КОНДЕНСИРОВАННЫХ ГЕМ-ДИМЕТИЛЗАМЕЩЕННЫХ АМИНО-1,3,5-ТРИАЗИНОВ | 2006 |
|
RU2330854C2 |
СЕЛЕКТИВНЫЕ ПРОТИВОТУБЕРКУЛЕЗНЫЕ АГЕНТЫ, ПРЕДСТАВЛЯЮЩИЕ СОБОЙ ЗАМЕЩЕННЫЕ 7-АРИЛ(ГЕТЕРИЛ)-6-КАРБЭТОКСИ-4,7-ДИГИДРО-1,2,4-ТРИАЗОЛО[1,5-a]ПИРИМИДИНЫ ИЛИ ЗАМЕЩЕННЫЕ 7-АРИЛ(ГЕТЕРИЛ)-4,7-ДИГИДРО-6-НИТРО-1,2,4-ТРИАЗОЛО[1,5-a]ПИРИМИДИНЫ ИЛИ ИХ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИ ПРИЕМЛЕМЫЕ АДДИТИВНЫЕ СОЛИ, ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ НА ИХ ОСНОВЕ И СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЗАМЕЩЕННЫХ 7-АРИЛ(ГЕТЕРИЛ)-6-КАРБЭТОКСИ-5-МЕТИЛ-4,7-ДИГИДРО-1,2,4-ТРИАЗОЛО[1,5-a]ПИРИМИДИНОВ | 2007 |
|
RU2360905C2 |
НОВОЕ ПРОИЗВОДНОЕ ПИПЕРИДИНА И СОДЕРЖАЩАЯ ЕГО ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ ДЛЯ ИНГИБИРОВАНИЯ АУТОТАКСИНА | 2022 |
|
RU2834850C2 |
4-(ИМИДАЗО[1,2-а]ПИРИДИН-3-ИЛ)-ПИРИМИДИНОВЫЕ ПРОИЗВОДНЫЕ | 2020 |
|
RU2822388C2 |
ЗАМЕЩЕННЫЕ [1,2,4]ТРИАЗОЛО[1,5-a]ПИРИМИДИН-7-ИЛЬНЫЕ СОЕДИНЕНИЯ В КАЧЕСТВЕ ИНГИБИТОРОВ PDE2 | 2015 |
|
RU2659070C9 |
Ингибиторы образования конечных продуктов гликирования на основе азопроизводных фенилсульфокислот | 2016 |
|
RU2634594C1 |
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СУЛЬФАНИЛПРОИЗВОДНЫХ АНТИПИРИНА | 2020 |
|
RU2740911C1 |
Изобретение относится к способу получения 6-бензилоксикарбонил-5-метил-7-(гет)арил-4,7-дигидроазоло[1,5-а]пиримидинов общей формулы А, где R представляет собой арил, выбранный из возможно замещенного фенила, или гетерил, выбранный из тиенила, пиридина, индолила, тиазолила, при этом замещенный фенил имеет 1-3 заместителя, выбранных из группы, включающей этил, галоген или нитрогруппу; Х представляет собой СН или N. Способ включает нагревание эквимолярных количеств соответствующего арил- или гетерилальдегида, бензилацетоацетата и аминоазола в воде. Технический результат - простой и эффективный способ получения 6-бензилоксикарбонил-5-метил-7-(гет)арил-4,7-дигидроазоло[1,5-а]пиримидинов. 1 з.п. ф-лы, 1 табл., 17 пр.
1. Способ получения 6-бензилоксикарбонил-5-метил-7-(гет)арил-4,7-дигидроазоло[1,5-а]пиримидинов общей формулы А, где R=Н, арил, выбранный из возможно замещенного фенила или гетерил, выбранный из тиенила, пиридила, индолила, тиазолила, при этом замещенный фенил имеет 1-3 заместителя, выбранных из группы, включающей этил, галоген или нитрогруппу; X=СН или N,
включающий нагревание эквимолярных количеств соответствующего арил- или гетерилальдегида, бензилацетоацетата и аминоазола, отличающийся тем, что реакцию ведут в одну стадию в воде.
2. Способ по п. 1 получения соединений, обладающих активностью против вируса гриппа A/H1N1, характеризующийся тем, что в качестве аминоазола используют 3-амино-1,2,4-триазол, а в качестве альдегида - бензальдегид или 3-тиофенкарбоксальдегид.
0 |
|
SU217142A1 | |
WO 2009006580 A1, 08.01.2009 | |||
US 20160113931 A1, 28.04.2016 | |||
SPASOV, A | |||
et al | |||
Amino Derivatives of Diaryl Pyrimidines and Azolopyrimidines as Protective Agents against LPS-Induced Acute Lung Injury | |||
Molecules, 2023, 28, p | |||
ПЕРЕДВИЖНОЕ ДРОВОПИЛЬНО-ДРОВОКОЛЬНОЕ УСТРОЙСТВО | 1923 |
|
SU741A1 |
ТИТОВА, Ю.А | |||
и др | |||
Очаг для массовой варки пищи, выпечки хлеба и кипячения воды | 1921 |
|
SU4A1 |
Авторы
Даты
2025-03-17—Публикация
2024-05-22—Подача