КОМПОЗИЦИИ ДЛЯ МЕСТНОГО НАНЕСЕНИЯ, СОДЕРЖАЩИЕ Pichia anomala И РЕТИНОЛ Российский патент 2024 года по МПК A61K8/67 A61K8/9728 A61Q17/00 A61Q19/08 

ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ

В настоящем изобретении предложен способ лечения кожи путем местного нанесения на кожу комбинации экстракта Pichia anomala и ретинола. Дополнительно предлагается композиция для наружного применения, содержащая комбинацию экстракта Pichia anomala и ретинола.

ПРЕДПОСЫЛКИ СОЗДАНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Гиалуроновая кислота обнаруживается в коже в периферической зоне волокон коллагена и эластина, а также в местах пересечения таких волокон. Гиалуроновая кислота локализуется не только в дерме, но и в межклеточных пространствах эпидермиса, особенно в промежуточном шиповатом слое, но не в роговом слое (SC) или зернистом слое. С возрастом концентрация гиалуроновой кислоты в коже уменьшается, и она отделяется от коллагена и эластина. Кожа, содержащая пониженные концентрации гиалуроновой кислоты, также демонстрирует пониженное связывание воды, что может быть связано с изменениями, наблюдаемыми в зрелой коже, включая морщины, измененную эластичность, сниженную упругость и пониженную способность поддерживать микроциркуляторное русло кожи. Являясь одним из основных ГАГ, гиалуроновая кислота может связывать воду в количестве, в 1000 раз превышающем ее собственную массу, помогая коже удерживать и сохранять влагу. Она встречается во всей соединительной ткани и синтезируется, главным образом, фибробластами и кератиноцитами, содержащимися в коже.

Были предложены различные способы борьбы с морщинами и тонкими линиями, включая впрыск гиалуроновой кислоты. Впрыск экзогенной гиалуроновой кислоты применяются в качестве временного кожного наполнителя в процедурах контурной пластики. Однако введенная гиалуроновая кислота имеет ограниченный срок действия. С другой стороны, оказалось, что проникновения экзогенной гиалуроновой кислоты в кожу трудно достичь посредством местного нанесения.

Pichia является родом дрожжей в семействе Saccharomycetaceae. Известны более 100 видов этого рода. Наиболее известные виды включают Pichia anomala, Pichia guilliermondii, Pichia norvegensis и Pichia ohmeri.

Pichia anomala (ранее называвшиеся Hansenula anomala) можно найти в некипяченом молоке и сыре. Экстракты дрожжей рода Pichia имеют высокое содержание маннанов, полисахаридов, состоящих из мономеров маннозы. Известно, что Pichia anomala и маннаны используются для лечения стареющей кожи. См., например, FR 2938768, FR 2906719, FR 2897266 и FR 2976490.

PRO-LIPISKIN® представляет собой коммерчески доступный косметический ингредиент, содержащий экстракт Pichia anomala. Его получают с помощью штамма Pichia, выделенного из сахарного тростника. Его можно приобрести у компании Silab-France.

Патент США 2017/0172913A1 относится к композициям для местного нанесения, содержащим комбинации экстракта Pichia anomala и экстракта корня цикория, которые обеспечивают повышенную выработку гиалуроновой кислоты, а также к способам лечения признаков старения кожи и улучшения защиты кожного барьера и увлажнения кожи.

Ретиноиды, включая ретинол, являются хорошо известными активными веществами, способствующими замедлению старения. Их используют в различных косметических продуктах для местного нанесения. Ретинол используется, например, в препарате NEUTROGENA® Rapid Wrinkle Repair®, коммерчески доступном от компании Johnson & Johnson Consumer Inc., NEUTROGENA® Rapid Wrinkle Repair® используется для устранения видимости морщин на коже, разглаживания тонких линий, улучшения текстуры кожи и осветления ее тона. В частности, ретинол оказался высокоэффективным и экономически эффективным косметическим ингредиентом.

Экстракт Pichia anomala и ретинол действуют на основе различных биологических механизмов и приводят к улучшению в отношении различных благоприятных клинических эффектов. Ретинол известен как золотой стандарт для средств, предназначенных для замедления старения и, как известно, действует по биологическому пути, включающему маркеры CRABP2 и HBEGF. Экстракт Pichia anomala работает по пути гидратации, увеличивая активность фермента синтазы 2 гиалуроновой кислоты, что приводит к появлению благоприятных клинических эффектов, включая гидратацию, улучшение кожного барьера, повышение прочности и т. д.

Хотя в данной области предложено местное применение экстрактов Pichia anomala и ретинола по отдельности, заявители теперь обнаружили, что местное нанесение комбинации этих двух ингредиентов благоприятно усиливает активность ретинола и активность экстракта Pichia anomala. Такой подход неожиданно обеспечивает значимые преимущества для кожи, включая улучшение, снижение, ингибирование или отсрочку появления во внешнем виде по меньшей мере одного признака старения кожи, а также улучшение защиты кожного барьера и увлажнения кожи. Соответственно, теперь доступны новые способы лечения, например, признаков старения кожи.

ИЗЛОЖЕНИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение относится к композиции для наружного применения, содержащей экстракт Pichia anomala и ретинол.

Настоящее изобретение также относится к способу уменьшения признака старения кожи, включающему местное нанесение на кожу, требующую лечения в связи со старением кожи, композиции для местного нанесения, содержащей экстракт Pichia anomala и ретинол.

В настоящем изобретении дополнительно предложен способ улучшения функции кожного барьера и увлажнения, включающий местное нанесение на кожу, требующую улучшения функции кожного барьера и увлажнения, композиции для наружного применения, содержащей экстракт Pichia anomala и ретинол.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ

Композиция для местного нанесения настоящего изобретения улучшает выработку гиалуроновой кислоты в коже в результате синергетического действия экстракта Pichia anomala и ретинола.

Считается, что специалист в данной области, основываясь на представленном в настоящем документе описании, сможет использовать настоящее изобретение в самом полном объеме. Представленные ниже конкретные варианты осуществления следует рассматривать лишь в качестве примеров, которые ни в коей мере не ограничивают остальную часть описания.

Если не указано иное, все технические и научные термины, используемые в настоящем документе, имеют общепринятое значение, понятное любому обычному специалисту в данной области, к которой относится настоящее изобретение. Кроме того, все публикации, заявки на патенты, патенты и другие материалы, упомянутые в настоящем документе, включены в настоящий документ путем ссылки. Если не указано иное, используемые для выражения количеств ингредиентов проценты представляют собой массовое процентное содержание (т. е. % (масс./масс.)). Аналогично, массовые соотношения, используемые для выражения относительных пропорций ингредиентов, также определяются с использованием массового процентного содержания (т. е. массовые соотношения вычисляются делением массового процентного содержания одного ингредиента на массовое процентное содержание другого ингредиента). Если не указано иное, все диапазоны приведены с учетом предельных значений, например диапазон «от 4 до 9» включает предельные значения 4 и 9.

В настоящем документе «продукт» необязательно означает готовый продукт в упакованном виде. В одном варианте осуществления изобретения упаковка представляет собой емкость, например пластиковую, металлическую или стеклянную тубу или баночку, содержащую композицию. Также продукт может иметь дополнительную упаковку, например пластиковую или картонную коробку, в которую помещена упомянутая емкость. В одном варианте осуществления продукт включает композицию настоящего изобретения и содержит инструкцию для потребителя по нанесению композиции на кожу или волосы.

В настоящем документе термин «местное нанесение» означает непосредственное наложение или распределение по внешней поверхности кожи, кожи волосистой части головы или по волосам, например, руками или с применением аппликатора, такого как салфетка, ролик или аэрозоль.

В настоящем документе термин «косметическое средство» относится к веществу или препарату, улучшающему внешний вид, которое сохраняет, восстанавливает, придает, имитирует или повышает физическую привлекательность или создает эффект повышения привлекательности или молодости, в особенности в отношении внешнего вида ткани или кожи.

В настоящем документе термин «косметически приемлемый» означает, что ингредиенты, которые описывает термин, являются приемлемыми для применения в контакте с тканями (например, кожей или волосами), не оказывая нежелательного токсического воздействия, не проявляя несовместимости, нестабильности, не вызывая раздражения, аллергической реакции или т. п.

В ряде вариантов осуществления композиции настоящего изобретения являются приемлемыми для лечения признаков старения кожи. В настоящем документе термин «признаки старения кожи» включает наличие борозд и морщин, утрату эластичности, неровный тон кожи и пятнистость. В особенно предпочтительном варианте осуществления признаком старения является наличие складок, морщин и/или потеря эластичности.

В настоящем документе термин «устранение признаков старения кожи» относится к снижению, ослаблению, предотвращению, исправлению или устранению наличия описанных выше признаков старения кожи.

В настоящем документе термин «морщина» обозначает тонкие линии, тонкие морщины или глубокие морщины. Примеры морщин включают, без ограничений, тонкие линии вокруг глаз (например, «гусиные лапки»), морщины на лбу и щеках, межбровные борозды и мимические борозды вокруг рта.

В настоящем документе термин «потеря эластичности» включает утрату эластичности или структурной целостности кожи или ткани, включая, без ограничений, обвисание, вялость и дряблость ткани. Потеря эластичности или целостности тканевой структуры может являться следствием ряда факторов, включая, без ограничений, заболевание, старение, гормональные изменения, механическую травму, отрицательное воздействие окружающей среды, либо может быть результатом нанесения на ткань продуктов, таких как косметические или фармацевтические средства.

В настоящем документе термин «неровный тон кожи» означает состояние кожи, связанное с диффузной или пятнистой пигментацией, которую можно классифицировать как гиперпигментацию, например поствоспалительную гиперпигментацию.

В настоящем документе термин «пятнистость» означает состояние кожи, связанное с ее покраснением или эритемой.

В настоящем документе формулировка «увеличение прочности кожи» означает повышение прочности или эластичности кожи, предотвращение потери прочности или эластичности кожи либо предотвращение или устранение обвисания, дряблости и вялости кожи. Прочность или эластичность кожи можно измерить при помощи кутометра. См. справочник Handbook of Non-Invasive Methods and the Skin, eds. J. Serup, G. Jemec & G. Grove, Chapter 66.1 (2006). Утрату эластичности или прочности кожи может вызывать ряд факторов, включая, без ограничений, старение, повреждение под воздействием окружающей среды или следствие нанесения на кожу косметических средств.

В настоящем документе термин «улучшение текстуры кожи» означает разглаживание поверхности кожи для устранения выпуклостей или углублений на поверхности кожи.

В настоящем документе термин «улучшение внешнего вида в отношении морщин на коже» означает предотвращение, уменьшение выраженности, прекращение прогрессирования или реверсию процесса образования морщин и тонких линий на коже.

В настоящем документе формулировка «безопасное и эффективное количество» означает количество, достаточное для инициирования необходимого эффекта, но достаточно низкое для предотвращения серьезных побочных эффектов. Безопасное и эффективное количество соединения, экстракта или композиции меняется в зависимости, например, от возраста, состояния здоровья конечного потребителя, а также воздействия условий окружающей среды, длительности и характера лечения, установленного используемого экстракта, компонента или композиции, конкретного используемого носителя и подобных факторов.

В настоящем документе формулировка «кожа, требующая усиления функции кожного барьера и увлажнения» относится к коже, которая характеризуется, без ограничений, недостатком увлажнения, недостатком секрета сальных желез, наличием трещин, сухостью, зудом, шелушением, ксеродермией, обезвоживанием, недостатком упругости, недостатком блеска, вялостью или недостатком содержания липидов.

Как описано в настоящем документе, заявители обнаружили, что местное нанесение комбинации экстракта Pichia anomala и ретинола обеспечивает неожиданно хорошую функцию кожного барьера, увлажнение кожи и обеспечивает благоприятные эффекты замедления старения кожи.

Также заявители обнаружили, что, в частности, местное нанесение композиции, содержащей комбинацию экстракта Pichia anomala и ретинола, повышает концентрации эндогенной гиалуроновой кислоты (ГК) в коже, что обеспечивает улучшения гидратации и внешнего вида в отношении по меньшей мере одного признака старения кожи. Местное применение такой композиции может повышать уровни гиалуроновой кислоты до значений, приближающихся к значениям молодой кожи, тем самым обеспечивая структурный каркас кожи, необходимый для уменьшения признаков старения кожи.

Pichia anomala

Композиция для местного нанесения содержит один или более экстрактов Pichia anomala. В частности, такие экстракты могут представлять собой экстракты, полученные с использованием одного из различных штаммов Pichia anomala, выделенных из плода или других надземных частей растения. Можно использовать любой косметически приемлемый экстракт Pichia anomala.

Одним примером приемлемого экстракта Pichia anomala является PRO-LIPISKIN, коммерчески доступный от компании Silab-France. Он производится из штамма Pichia anomala, присутствующего на сахарном тростнике.

Другой пример приемлемого экстракта Pichia anomala получают из штамма Pichia anomala, содержащегося в плодах или листьях киви.

Экстракт Pichia anomala может быть представлен в виде раствора, содержащего сухое вещество (экстракт) в диапазоне от около 20% масс., более конкретно от 2 до 10% масс., наиболее конкретно от 3 до 7% масс.

Растворители для таких растворов включают воду, спирты, гликоли и т. п. В одном варианте осуществления растворитель составляет по меньшей мере около 90% масс. воды или по меньшей мере около 95% масс. воды.

Ретинол

Композиция для местного нанесения также содержит ретинол. Ретинол имеет формулу:

где R представляет собой CH₂OH.

Количества

В композициях настоящего изобретения можно использовать любые приемлемые количества экстракта Pichia anomala и ретинола. Композиции предпочтительно содержат безопасные и эффективные количества обоих ингредиентов. В частности, количества используемых экстракта Pichia anomala и ретинола являются косметически приемлемыми и выбраны для достижения желаемого лечения состояния кожи при конкретном состоянии, таком как признаки старения, пониженная барьерная функция или пониженное увлажнение.

В определенных предпочтительных вариантах осуществления композиции содержат от около 0,01 до около 1% по массе экстракта Pichia anomala, более предпочтительно от около 0,065 до около 0,26% по массе экстракта Pichia anomala. В одном варианте осуществления композиция содержит около 0,13% по массе экстракта Pichia anomala.

В некоторых предпочтительных вариантах осуществления композиции содержат от около 0,01% до около 10% по массе, более предпочтительно от около 0,05 до около 1% по массе ретинола. В одном варианте осуществления композиция содержит около 0,1% по массе ретинола.

В некоторых вариантах осуществления массовое соотношение экстракта Pichia anomala и ретинола в композициях составляет от около 0,5 до около 2. В одном варианте осуществления массовое соотношение экстракта Pichia anomala и ретинола в композициях составляет около 1,3.

Композиции для местного нанесения

Композиции настоящего изобретения наносят местно на кожу или волосы человека. Соответственно, композиция может дополнительно включать косметически приемлемый носитель для местного применения, который может составлять от около 50% до около 99,99% масс. композиции (например, от около 80% до около 99% масс. композиции). В предпочтительном варианте осуществления изобретения косметически приемлемый носитель для местного нанесения включает воду.

Композиции могут быть получены в форме продуктов множества типов, которые включают, без ограничений, лосьоны, кремы, гели, карандаши, аэрозоли, мази, очищающие жидкости и твердые бруски мыла, шампуни и кондиционеры для волос, средства фиксации волос, пасты, пены, порошки, муссы, кремы для бритья, салфетки, пластыри, гидрогели, пленкообразующие продукты, маски для лица и маски для кожи, пленки и средства декоративной косметики, такие как основы под макияж, и туши. Продукты данных типов могут содержать несколько типов косметически приемлемых носителей для местного применения, включая, без ограничений, растворы, суспензии, эмульсии, такие как микроэмульсии и наноэмульсии, гели, твердые вещества и липосомы. Ниже приведены не имеющие ограничительного характера примеры таких носителей. Специалисты в данной области могут вводить в составы и другие носители.

Композиции, используемые в настоящем изобретении, могут быть составлены в виде растворов. Растворы, как правило, включают водный или органический растворитель (например, от около 50% до около 99,99% или от около 90% до около 99% косметически приемлемого водного или органического растворителя). Примеры приемлемых органических растворителей включают пропиленгликоль, полиэтиленгликоль, полипропиленгликоль, глицерин, 1,2,4-бутантриол, сложные эфиры сорбита, 1,2,6-гексантриол, этанол и их смеси.

Композиции, используемые в качестве объекта изобретения, можно составлять в виде раствора, содержащего умягчитель. Такие композиции предпочтительно содержат от около 2% до около 50% умягчителя (-ей). При использовании в настоящем документе термин «умягчители» означает вещества, используемые для предотвращения или устранения сухости, например, посредством предотвращения трансэпидермальной потери воды из кожи. Примеры таких умягчителей включают известные специалистам в данной области. Примеры особенно приемлемых умягчителей включают растительные масла, минеральные масла, сложные эфиры жирных кислот и т. п.

Из такого раствора можно изготавливать лосьон. Лосьоны, как правило, содержат от около 1% до около 20% (например, от около 5% до около 10%) умягчителя (-ей) и от около 50% до около 90% (например, от около 60% до около 80%) воды.

Другой тип продукта, который можно готовить из раствора, представляет собой крем. Как правило, крем содержит от около 5% до около 50% (например, от около 10% до около 20%) умягчителя (-ей) и от около 45% до около 85% (например, от около 50% до около 75%) воды.

Композиция настоящего изобретения может включать воду, или альтернативно она может быть безводной или может представлять собой мазь, не включающую воду, но содержащую органические и/или силиконовые растворители, масла, липиды и воски. Мазь может содержать простую основу из животных или растительных масел или полутвердых углеводородов. Мазь может содержать от около 2% до около 10% умягчителя (-ей) и от около 0,1% до около 2% загустителя (-ей).

Композиция может быть приготовлена в виде эмульсии. Если носитель для местного нанесения представляет собой эмульсию, то от около 1% до около 10% (например, от около 2% до около 5%) носителя для местного нанесения составляет (-ют) эмульгатор (-ы). Эмульгаторы могут быть неионными, анионными или катионными. Примеры эмульсий известны специалистам в данной области.

Лосьоны и кремы могут быть приготовлены в виде эмульсий. Как правило, такие лосьоны содержат от 0,5% до около 5% эмульгатора (-ов). Такие кремы, как правило, содержат от около 1% до около 20% (например, от около 5% до около 10%) умягчителя (-ей); от около 20% до около 80% (например, от 30% до около 70%) воды; и от около 1% до около 10% (например, от около 2% до около 5%) эмульгатора (-ов).

Составы типа «масло-в-воде» и «вода-в-масле» для ухода за кожей на основе однофазной эмульсии, такие как лосьоны и кремы, хорошо известны в косметической области и могут использоваться в заявленном изобретении. Композиции типа «вода-в-масле-в-воде» или «масло-в-воде-в-масле» на основе многофазной эмульсии также используются в заявленном изобретении. По существу такие одно- или многофазные эмульсии в качестве основных ингредиентов содержат воду, умягчители и эмульгаторы.

Композиции настоящего изобретения также могут быть составлены в виде геля (например, водного, спиртового, водно-спиртового или масляного геля с применением приемлемого (-ых) гелеобразующего (-их) агента (-ов)). Приемлемые гелеобразующие агенты для водных и/или спиртовых гелей включают, без ограничений, натуральные камеди, акриловую кислоту и акрилатные полимеры и сополимеры, производные целлюлозы (например, гидроксиметилцеллюлозу и гидроксипропилцеллюлозу). Приемлемые гелеобразующие агенты для масел (таких как минеральное масло) включают, без ограничений, гидрогенизированный сополимер бутилена/этилена/стирола и гидрогенизированный сополимер этилена/пропилена/стирола. В таких гелях содержание этих гелеобразующих агентов, как правило, составляет от около 0,1% до 5% масс.

В одном варианте осуществления композиция представляет собой крем-гель. Эстетическое воздействие крем-геля характеризуется созданием водянистой разрушаемой полупрозрачной текстуры и легкого остаточного ощущения на коже после нанесения. В настоящем документе термин «крем-гель» означает состав с низким содержанием капель масла, суспендированных в водной гелевой матрице.

Композиции настоящего изобретения также могут быть составлены в виде твердого состава (например, в виде карандаша на основе воска, композиции брусков мыла, порошка или салфетки, содержащей порошок).

Композиции могут содержать, в дополнение к вышеуказанным компонентам, широкий спектр дополнительных жирорастворимых материалов и/или водорастворимых материалов, традиционно используемых в композициях для ухода за кожей и волосами в известных специалистам концентрациях.

Дополнительные косметически активные агенты

Композиции настоящего изобретения могут дополнительно содержать любой из различных дополнительных косметически активных агентов. Примеры приемлемых дополнительных активных агентов включают агенты для осветления кожи, затемняющие агенты, дополнительные замедляющие старение агенты, стимуляторы тропоэластина, стимуляторы коллагена, противоугревые агенты, агенты для контроля сияния кожи, противомикробные агенты, такие как противодрожжевые агенты, противогрибковые и антибактериальные агенты, противовоспалительные агенты, противопаразитарные агенты, анальгетики для наружного применения, солнцезащитные средства, фотопротекторы, антиоксиданты, кератолитические агенты, детергенты/поверхностно-активные вещества, увлажнители, питательные вещества, витамины, повышающие использование энергии агенты, антиперспиранты, сужающие поры кожи средства, дезодоранты, средства для удаления волос, агенты для усиления роста волос, агенты для замедления роста волос, загустители, усилители гидратации, усилители эффективности, агенты против огрубения кожи, агенты для кондиционирования кожи, антицеллюлитные агенты, агенты для контроля запаха, такие как маскирующие запах агенты или изменяющие pH агенты и т. п.

Примеры различных подходящих дополнительных косметически приемлемых активных агентов включают гидроксикислоты; перекись бензоила; D-пантенол; УФ-фильтры, такие как, без ограничений, авобензон (Parsol 1789), бисдисулизол динатрия (Neo Heliopan AP), диэтиламиногидроксибензоилгексилбензоат (Uvinul A Plus), экамсул (Mexoryl SX), метилантранилат, 4-аминобензойная кислота (PABA), циноксат, этилгексилтриазон (Uvinul T 150), гомосалат, 4-метилбензилиденкамфора (Parsol 5000), октилметоксициннамат (Octinoxate), октилсалицилат (Octisalate), падимат O (Escalol 507), фенилбензимидазолсульфоновая кислота (Ensulizole), полисиликон-15 (Parsol SLX), троламинсалицилат, бемотризинол (Tinosorb S), бензофеноны 1-12, диоксибензон, дрометризолтрисилоксан (Mexoryl XL), искотризинол (Uvasorb HEB), октокрилен, оксибензон (Eusolex 4360), сулизобензон, бисоктризол (Tinosorb M), диоксид титана, оксид цинка; каротиноиды; акцепторы свободных радикалов; спиновые ловушки; Другие ретиноиды и предшественники ретиноидов, такие как ретиноевая кислота и ретинилпальмитат; церамиды; полиненасыщенные жирные кислоты; незаменимые жирные кислоты; ферменты; ингибиторы ферментов; минеральные вещества; гормоны, такие как эстрогены; стероиды, такие как гидрокортизон; 2-диметиламиноэтанол; соли меди, такие как хлорид меди; пептиды, содержащие медь, кофермент Q10; аминокислоты, такие как пролин; витамины; лактобионовую кислоту; ацетил-кофермент A; ниацин; рибофлавин; тиамин; рибозу; переносчики электронов, такие как NADH (никотинамидадениндинуклеотид) и FADH2 (восстановленная форма флавинадениндинуклеотида); и другие растительные экстракты, такие как экстракты овса, алоэ вера, пиретрума девичьего, сои, грибов шиитаке, а также их производные и смеси.

В некоторых предпочтительных вариантах осуществления композиции содержат комбинацию экстракта Pichia anomala, ретинола и по меньшей мере одного дополнительного активного агента, увлажняющего кожу.

В определенных предпочтительных вариантах осуществления композиции содержат комбинацию экстракта Pichia anomala, ретинола и по меньшей мере одного дополнительного агента для улучшения внешнего вида в отношении по меньшей мере одного признака старения кожи. Примеры приемлемых дополнительных агентов, улучшающих внешний вид в отношении по меньшей мере одного признака старения кожи, включают, без ограничений, стимуляторы тропоэластина, стимуляторы коллагена, ретиноиды, гиалуроновую кислоту, включающую поперечно сшитую гиалуроновую кислоту, хондроитинсульфат, включая поперечно сшитый хондроитинсульфат, диметиламиноэтанол, N,N,N',N'-тетракис(2-гидроксипропил)этилендиамин, альфа-гидроксикислоты, полигидроксикислоты, сахарные амины и комбинации двух или более из них.

В настоящем документе термин «стимуляторы тропоэластина» относится к классу соединений, обладающих биологической активностью, связанной с усилением выработки тропоэластина. В соответствии с настоящим изобретением стимуляторы тропоэластина включают все природные или синтетические соединения, способные повышать выработку тропоэластина в организме человека.

Примеры приемлемых стимуляторов тропоэластина включают, без ограничений, экстракты ежевики, экстракты скумпии, экстракты пиретрума девичьего и биметаллические комплексы, имеющие в своем составе медные и/или цинковые составляющие. Биметаллический комплекс, содержащий медные и/или цинковые составляющие, может представлять собой, например, цитрат меди-цинка, оксалат меди-цинка, тартрат меди-цинка, малат меди-цинка, сукцинат меди-цинка, малонат меди-цинка, малеат меди-цинка, аспартат меди-цинка, глутамат меди-цинка, глутарат меди-цинка, фумарат меди-цинка, глюкарат меди-цинка, полиакрилат меди-цинка, адипинат меди-цинка, пимелат меди-цинка, суберат меди-цинка, азеалат меди-цинка, себацинат меди-цинка, додеканоат меди-цинка или их комбинации. В предпочтительном варианте осуществления стимулятор тропоэластина выбран из экстрактов ежевики, экстрактов скумпии, экстрактов пиретрума девичьего и их комбинаций. В особенно предпочтительном варианте осуществления стимулятор тропоэластина выбран из экстрактов ежевики, экстрактов пиретрума девичьего и их комбинаций.

Под «экстрактом ежевики» подразумевают смесь соединений, выделенных из растения рода Rubus, предпочтительно Rubus fruticosus. В одном варианте осуществления соединения выделяют из цветков растения. В дополнительном варианте осуществления соединения выделяют из высушенных цветков растения. Такие соединения можно выделять из одной или более частей растения (например, всего растения, цветка, семени, корня, корневища, стебля, плода и/или листа растения). В предпочтительном варианте осуществления экстракт ежевики представляет собой экстракт листьев ежевики. Один особенно приемлемый экстракт ежевики получают при экстрагировании листьев Rubus fruticosus смесью воды и этанола с добавлением от около 5% до около 10% мальтодекстриновой матрицы, он коммерчески доступен от компании Symrise Inc., г. Тетерборо, штат Нью-Джерси, под торговым названием SymMatrix.

Композиции настоящего изобретения могут включать косметически эффективное количество одного или более стимуляторов тропоэластина, таких как описанные выше стимуляторы. Композиции предпочтительно включают (по содержанию активного вещества) от около 0,1% до около 10% стимуляторов тропоэластина, более предпочтительно от около 0,5% до около 5% стимуляторов тропоэластина и наиболее предпочтительно от около 0,5% до около 2% стимуляторов тропоэластина.

В настоящем документе термин «стимулятор коллагена» относится к соединениям, обладающим биологической активностью, связанной с усилением выработки коллагена. В соответствии с настоящим изобретением «неретиноидные стимуляторы коллагена» включают все природные или синтетические соединения, не являющиеся ретиноидами либо производными ретиноидов и способные увеличивать выработку коллагена в организме человека.

Примеры подходящих стимуляторов коллагена включают в себя, без ограничений, следующие: ретиноиды, экстракты пиретрума девичьего (Tanacetum parthenium), экстракты центеллы азиатской (Centella asiatica) и экстракты сигезбекии восточной (Siegesbeckia orientalis); экстракты сои; пептиды, стимулирующие образование коллагена; урсоловую кислоту и азиатикозид.

Centella asiatica, также известная как Violette marronne на острове Реюньон, готу кола или индийский щитолистник в Индии, Centella repanda в Северной Америке и талапетрака на острове Мадагаскар, представляет собой полиморфное травянистое растение и относится к семейству зонтичных (Umbelliferae (Apiaceae)), в частности к подсемейству щитолистниковые (Hydrocotyle). Данное дикорастущее растение встречается во всех тропиках и предпочитает влажные и затененные области на высоте от около 600 до 1200 метров над уровнем моря. Существует три вида Centella asiatica: обыкновенная (Typica), абиссинская (Abyssinica) и флоридская (Floridana). Растение известно своими заживляющими, успокаивающими, обезболивающими, антидепрессантными, противовирусными и противомикробными свойствами. Биологическая активность растения связана, по-видимому, с наличием в нем молекул тритерпенов. Приемлемый экстракт Centella asiatica под торговым названием TECA производит компания Bayer Consumer HealthCare, г. Базель, Швейцария.

Под «экстрактами Siegesbeckia orientalis» подразумевают любой из различных экстрактов растения Siegesbeckia orientalis, включая Darutoside производства компании Sederma (Croda International Group, г. Эдисон, штат Нью-Джерси, США).

Подходящие пептиды, стимулирующие образование коллагена, включают в себя следующие: пептиды-матрикины (т. е. пептиды, полученные при деструкции белков внеклеточного матрикса - коллагена, эластина или протеогликана), включая пальмитоилпентапептиды, такие как MATRIXYL, производимый компанией Sederma (Croda International Group, г. Эдисон, штат Нью-Джерси); комплекс пептида GHK (глицин-гистидин-лизин) с медью, производимый компанией Photomedex, г. Монтгомеривилл, штат Пенсильвания, под торговым названием PROCYTE;пальмитоиловую производную пептида GHK, производимую компанией Sederma (Croda International Group, г. Эдисон, штат Нью-Джерси) под торговым названием Biopoeptide CL; биомиметические тетрапептиды, доступные в продаже от компании Unipex, г. Квебек, Канада, под торговым названием Chronoline Tri Peptide; а также пальмитоилтрипептид, доступный в продаже от компании DSM, г. Базель, Швейцария, под торговым названием Syn-Coll.

Урсоловая кислота также известна как пентациклическая тритерпеновая кислота, Prunol, Malol, Urson, бета-урсоловая кислота и 3-бета-гидрокси-урс-12-ен-28-овая кислота. Она является коммерчески доступной, например, от компании Sigma-Aldrich, г. Сент-Луис, штат Миссури, США.

Азиатикозид, также известный как химическое соединение [6-[[3,4-дигидрокси-6-(гидроксиметил)-5-(3,4,5-тригидрокси-6-метилоксан-2-ил)оксиоксан-2-ил]оксиметил]-3,4,5-тригидроксиоксан-2-ил]-10,11-дигидрокси-9-(гидроксиметил)-1,2,6a,6b,9,12a-гексаметил-2,3,4,5,6,6a,7,8,8a,10,11,12,13,14b-тетрадекагидро-1H-пицен-4a-карбоксилат), доступен в продаже, в частности, от компании Bayer Santé Familiale, Division Serdex, 69, Boulevard Victor Hugo, 93400, SAINT-OUEN, France.

Композиции настоящего изобретения могут включать косметически эффективное количество одного или более стимуляторов коллагена. Композиции предпочтительно включают (по содержанию активного вещества) от около 0,1% до около 10% стимуляторов коллагена, более предпочтительно от около 0,5% до около 5% стимуляторов коллагена и наиболее предпочтительно от около 0,5% до около 2% стимуляторов коллагена.

Композиции настоящего изобретения могут содержать дополнительно по меньшей мере один активный осветляющий кожу агент. Примеры приемлемых активных агентов для осветления кожи включают, без ограничений, ингибиторы тирозиназы, агенты, стимулирующие деструкцию меланина, агенты, ингибирующие перенос меланосом, включая антагонисты PAR-2, эксфолианты, солнцезащитные средства, ретиноиды, антиоксиданты, транексамовую кислоту, гидрохлорид цетилового сложного эфира транексамовой кислоты, агенты для отбеливания кожи, линолевую кислоту, динатриевую соль аденозинмонофосфата, экстракт ромашки, аллантоин, замутнители, тальки и двуокиси кремния, соли цинка и т. п., а также другие агенты, описанные в работах Solano et al. Pigment Cell Res. 19 (550-571) и Ando et al. Int J Mol Sci 11 (2566-2575).

Примеры приемлемых ингибиторов тирозиназы включают, без ограничений, витамин C и его производные, витамин E и его производные, койевую кислоту, арбутин, резорцины, гидрохинон, флавоны (например, флавоноиды солодки, экстракт корня солодки, экстракт корня шелковицы, экстракт корня Dioscorea Coposita, экстракт камнеломки и т. п.), эллаговую кислоту, салицилаты и их производные, глюкозамин и его производные, фуллерен, хинокитиол, дикарбоновую кислоту, ацетилглюкозамин, 5,5'-дипропилдифенил-2,2'-диол (магнолигнан), 4-(4-гидроксифенил)-2-бутанол (4-HPB), комбинации двух или более из них и т. п. Примеры производных витамина C включают в себя без ограничений аскорбиновую кислоту и ее соли, 2-глюкозид аскорбиновой кислоты, аскорбилфосфат натрия, аскорбилфосфат магния и натуральный экстракт, обогащенный витамином C. Примеры производных витамина E включают, без ограничений, альфа-токоферол, бета-токоферол, гамма-токоферол, дельта-токоферол, альфа-токотриенол, бета-токотриенол, гамма-токотриенол, дельта-токотриенол и их смеси, токоферолацетат, токоферолфосфат и натуральные экстракты, обогащенные производными витамина E. Примеры производных резорцина включают, без ограничений, резорцин, 4-замещенные резорцины, такие как 4-алкилрезорцины, такие как 4-бутилрезорцин (руцинол), 4-гексилрезорцин (Synovea HR, Sytheon), фенилэтилрезорцин (Symwhite, Symrise), 1-(2,4-дигидроксифенил)-3-(2,4-диметокси-3-метилфенил)-пропан (nivitol, Unigen) и т. п., а также природные экстракты, обогащенные резорцинами. Примеры салицилатов включают, без ограничений, 4-метоксисалицилат калия, салициловую кислоту, ацетилсалициловую кислоту, 4-метоксисалициловую кислоту и их соли. В некоторых предпочтительных вариантах осуществления ингибиторы тирозиназы включают 4-замещенный резорцин, производное витамина C или производное витамина E. В более предпочтительных вариантах осуществления ингибитор тирозиназы содержит фенилэтилрезорцин, 4-гексилрезорцин или аскорбил-2-глюкозид.

Примеры приемлемых стимулирующих деструкцию меланина агентов включают, без ограничений, перекиси и ферменты, такие как пероксидазы и лигниназы. В некоторых предпочтительных вариантах осуществления ингибирующие меланин агенты включают перекись или лигниназу.

Примеры приемлемых агентов, ингибирующих перенос меланосом, включают антагонисты PAR-2, такие как ингибитор соевого трипсина или ингибитор Баумана-Бирка, витамин B3 и производные, такие как ниацинамид, соевая эссенция, цельная соя, соевый экстракт. В некоторых предпочтительных вариантах осуществления ингибирующие перенос меланосом агенты включают соевый экстракт или ниацинамид.

Примеры эксфолиантов включают, без ограничений, альфа-гидроксикислоты, такие как молочная кислота, гликолевая кислота, яблочная кислота, винная кислота, лимонная кислота или любая комбинация любых из перечисленных веществ, бета-гидроксикислоты, такие как салициловая кислота, полигидроксикислоты, такие как лактобионовая кислота и глюконовая кислота, а также средства механического отшелушивания, такие как для микродермабразии. В определенных предпочтительных вариантах осуществления эксфолианты включают гликолевую кислоту или салициловую кислоту.

Примеры ретиноидов, отличных от ретинола, включают, без ограничений, ретиналь (альдегидная форма витамина A), ретинилацетат, ретинилпропионат, ретиниллинолеат, ретиноевую кислоту, ретинилпальмитат, изотретиноин, тазаротен, бексаротен, адапален, комбинации двух или более из них и т. п. В некоторых предпочтительных вариантах осуществления ретиноид выбирают из группы, состоящей из ретиналя, ретинилацетата, ретинилпропионата, ретиниллинолеата и комбинаций из двух или более из них.

Примеры антиоксидантов включают, без ограничений, водорастворимые антиоксиданты, такие как сульфгидрильные соединения и их производные (например, метабисульфит натрия и N-ацетилцистеин, глютатион), липоевую кислоту и дигидролипоевую кислоту, стильбеноиды, такие как ресвератрол и его производные, лактоферрин, агенты, хелатирующие железо и медь, а также аскорбиновую кислоту и производные аскорбиновой кислоты (например, аскорбил-2-глюкозид, аскорбилпальмитат и аскорбилполипептид). Жирорастворимые антиоксиданты, приемлемые для применения в композициях настоящего изобретения, включают, без ограничений, бутилированный гидрокситолуол, ретиноиды, токоферолы (например, токоферола ацетат), токотриенолы и убихиноны. Природные экстракты, содержащие антиоксиданты, приемлемые для применения в композициях настоящего изобретения, включают, без ограничений, экстракты, содержащие флавоноиды и изофлавоноиды, а также их производные (например, генистеин и диадзеин), экстракты, содержащие ресвератрол и т. п. Примеры таких природных экстрактов включают экстракты косточек винограда, зеленого чая, черного чая, белого чая, сосновой коры, пиретрума девичьего, экстракт пиретрума девичьего, не содержащий партенолида, экстракт овса, экстракт ежевики, экстракт скумпии, экстракт сои, экстракт помело, экстракт зародышей пшеницы, гесперидин, экстракт винограда, экстракт портулака, ликохалькон, халькон, 2,2'-дигидроксихалькон, экстракт примулы, прополис и т. п.

Дополнительный косметически активный агент может присутствовать в композиции в любом приемлемом количестве, например в количестве от около 0,0001% до около 20% масс. композиции, например от около 0,001% до около 10%, в частности от около 0,01% до около 5%. В определенных предпочтительных вариантах осуществления - в количестве от 0,1% до 5%, а в других предпочтительных вариантах осуществления - от 1% до 2%.

Композиции настоящего изобретения могут включать косметически эффективное количество одного или более противовоспалительных соединений.

Примеры подходящих противовоспалительных агентов включают в себя замещенные резорцины, (E)-3-(4-метилфенилсульфонил)-2-пропеннитрил (такой как Bay 11-7082 производства компании Sigma-Aldrich, г. Сент-Луис, штат Миссури), тетрагидрокуркуминоиды (такие как Tetrahydrocurcuminoid CG производства компании Sabinsa Corporation, г. Пискатауэй, штат Нью-Джерси), экстракты и вещества, полученные из следующего сырья: экстракта коры Phellodendron amurense (PCE), неденатурированной сои (Glycine max), пиретрума девичьего (Tanacetum parthenium), имбиря (Zingiber officinale), гинкго (Ginkgo biloba), мадекассосида (ингредиент экстракта Centella asiatica), скумпии (Cotinus coggygria), экстракта белокопытника (Petasites hybridus), плодов годжи (Lycium barbarum), экстракта расторопши пятнистой (Silybum marianum), жимолости (Lonicera japonica), перуанского бальзама (Myroxylon pereirae), шалфея (Salvia officinalis), экстракта клюквы (Vaccinium oxycoccos), амарантового масла (Amaranthus cruentus), граната (Punica granatum), мате (экстракта листьев Ilex paraguariensis), экстракта цветов белой лилии (Lilium candidum), экстракта листьев маслины (Olea europaea), флоретина (экстракт яблок), овсяной муки (Aveena sativa), экстракта Lifenol (хмель: Humulus lupulus), Bugrane P (Ononis spinosa), ликохалькона (солодка: компонент экстракта Glycyrrhiza inflate), симрелифа (бисаболол и экстракт имбиря), комбинации двух или более из них и т. п.

В одном варианте осуществления противовоспалительным агентом является резорцин. Особенно приемлемые замещенные резорцины включают 4-гексилрезорцин и 4-октилрезорцин, в особенности 4-гексилрезорцин. 4-Гексилрезорцин под торговым названием SYNOVEA HR коммерчески доступен от компании Sytheon, г. Линкольн-Парк, штат Нью-Джерси, США. 4-Октилрезорцин коммерчески доступен от компании City Chemical LLC, г. Уэст-Хейвен, штат Коннектикут, США.

Под «экстрактами пиретрума девичьего» подразумевают экстракты растения Tanacetum parthenium, которые можно получать, например, в соответствии с подробной информацией, приведенной в публикации заявки на патент США № 2007/0196523 под названием PARTHENOLIDE FREE BIOACTIVE INGREDIENTS FROM FEVERFEW (TANACETUM PARTHENIUM) AND PROCESSES FOR THEIR PRODUCTION. Один особенно приемлемый экстракт пиретрума девичьего в форме, содержащей около 20% активного пиретрума девичьего, коммерчески доступен от компании Integrated Botanical Technologies, г. Оссининг, штат Нью-Йорк, США.

В композиции для ухода за кожей данного изобретения соотношение количеств комбинации экстракта Pichia anomala и ретинола к количеству противовоспалительного соединения может варьироваться. Например, экстракт и противовоспалительное соединение могут присутствовать в массовом соотношении (которое определяют путем деления количества в расчете на массу сухого экстракта на количество в расчете на массу противовоспалительного соединения) от около 0,001 до около 100, предпочтительно от около 0,01 до около 10, более предпочтительно от около 0,25 до около 2.

В композициях настоящего изобретения также может присутствовать ряд других материалов. В определенных предпочтительных вариантах осуществления композиция содержит один или более компонентов для местного применения, которые выбирают из группы, состоящей из поверхностно-активных веществ, комплексообразующих агентов, умягчителей, смачивающих средств, кондиционеров, консервантов, замутнителей, ароматизаторов и т. п.

Под умягчителем понимают соединение, помогающее поддерживать мягкость, гладкость и пластичность кожи (например, путем размещения на поверхности кожи или в роговом слое и действия в качестве смазывающего вещества). Примеры приемлемых умягчителей включают умягчители, представленные в главе 35, стр. 399-415 (Skin Feel Agents, G Zocchi) в издании Handbook of Cosmetic Science and Technology (под ред. A. Barel, M. Paye and H. Maibach, опубликованном в 2001 Marcel Dekker, Inc New York, NY), и включают, без ограничений, вазелин, гексилдецилстеарат и растительные, ореховые масла, а также масла растительного происхождения, такие как масло орехов макадамии, масло рисовых отрубей, масло косточек винограда, пальмовое масло, масло примулы, гидрогенизированное арахисовое масло и масло авокадо.

Под смачивающим средством понимают соединение, предназначенное для повышения содержания воды в верхних слоях кожи (например, гигроскопические соединения). Примеры приемлемых увлажнителей включают увлажнители, представленные в главе 35, стр. 399-415 (G. Zocchi, Skin Feel Agents) в издании Handbook of Cosmetic Science and Technology (под ред. A. Barel, M. Paye and H. Maibach, опубликованном в 2001 Marcel Dekker, Inc New York, NY), и включают, без ограничений, глицерин, сорбит или трегалозу (например, α,α-трегалозу, β,β-трегалозу, α,β-трегалозу) или их соль или сложный эфир (например, трегалозу-6-фосфат).

В одном варианте осуществления композиция содержит глицерин. Например, композиция содержит, по меньшей мере, 10% масс. глицерина. Композиция может содержать, по меньшей мере, 12% масс. глицерина.

В другом варианте осуществления композиция содержит от 0,5 до 25 процентов по массе глицерина. В одном варианте осуществления композиция содержит от 1 до 6 процентов по массе глицерина.

В другом варианте осуществления композиция имеет рН 6,5 или менее. Например, композиция может иметь рН 5,5 или менее.

В конкретном варианте осуществления композиция содержит, по меньшей мере, 10% масс. глицерина и имеет рН 6,5 или менее.

В другом варианте осуществления композиция содержит от 0,1 до 5 процентов по массе цетеарилоливата. В одном варианте осуществления композиция содержит от 0,1 до 2 процентов по массе цетеарилоливата.

В еще одном варианте осуществления композиция содержит от 0,1 до 5 процентов по массе сорбитаноливата. В одном варианте осуществления композиция содержит от 0,1 до 2 процентов по массе сорбитаноливата.

Подходящим источником цетеарилоливата и сорбитаноливата является Olivem 1000, доступный для приобретения у компании Hallstar Itali.

Под поверхностно-активным веществом понимают поверхностно-активный агент, предназначенный для очищения или эмульгирования. Примеры подходящих поверхностно-активных веществ включают в себя поверхностно-активные вещества, представленные в главе 37, стр. 431-450 (Classification of surfactants, by L. Oldenhove de Guertechin) в издании Handbook of Cosmetic Science and Technology (под ред. A. Barel, M. Paye and H. Maibach, опубликованном в 2001 by Marcel Dekker, Inc., New York, NY), и включают, без ограничений, анионные поверхностно-активные вещества, такие как сульфаты, катионные поверхностно-активные вещества, такие как бетаины, амфотерные поверхностно-активные вещества, такие как кокоглицинат натрия, неионогенные поверхностно-активные вещества, такие как алкилполиглюкозиды.

Примеры приемлемых хелатирующих агентов включают агенты, которые способны защищать и сохранять композиции этого изобретения. Хелатирующий агент предпочтительно представляет собой этилендиаминтетрауксусную кислоту (ЭДТК) и более предпочтительно тетранатриевую соль ЭДТК, коммерчески доступную от компании Dow Chemical Company, г. Мидленд, штат Мичиган, США, под торговым названием VERSENE 100XL.

Приемлемые консерванты включают, например, парабены, четвертичные аммониевые соединения, феноксиэтанол, бензоаты, DMDM гидантоин, органические кислоты и присутствуют в композиции в количестве, в расчете на общую массу композиции, от около 0 до около 1 процента или от около 0,05 процента до около 0,5 процента.

Для применения в целях настоящего изобретения приемлем любой из ряда кондиционеров, которые приводят к появлению дополнительных характеристик, таких как блеск волос. Примеры включают, без ограничений, летучий силиконовый кондиционирующий агент, имеющий температуру кипения при атмосферном давлении менее чем около 220 °C. Примеры приемлемых летучих силиконов включают, без ограничений, полидиметилсилоксан, полидиметилциклосилоксан, гексаметилдисилоксан, циклометиконовые текучие среды, такие как полидиметилциклосилоксан производства компании Dow Corning Corporation (г. Мидленд, штат Мичиган, США), доступный в продаже под торговым названием DC-345, и их смеси, и предпочтительно включают циклометиконовые текучие среды. Другие приемлемые кондиционеры включают катионные полимеры, включая поликватерниумы, катионную гуаровую смолу и т. п.

Для применения в композиции приемлем любой из ряда коммерчески доступных перлесцентных или опалесцирующих агентов. Примеры подходящих перлесцентных или опалесцирующих агентов включают, без ограничений, сложные моно- или диэфиры (а) жирных кислот, имеющих от около 16 до около 22 атомов углерода, и (b) этилен- или пропиленгликоля; сложные моно- или диэфиры (а) жирных кислот, имеющих от около 16 до около 22 атомов углерода, и (b) полиалкиленгликоля формулы: HO-(JO)_a-H, где J - алкиленовая группа, имеющая от около 2 до около 3 атомов углерода; и a равно 2 или 3; жирные спирты, содержащие от около 16 до около 22 атомов углерода; сложные эфиры жирных кислот формулы: KCOOCH₂L, где K и L независимо содержат от около 15 до около 21 атома углерода; неорганические твердые вещества, нерастворимые в композиции шампуня, и смеси перечисленных веществ.

В соответствии с настоящим изобретением можно применять любые ароматизирующие композиции, приемлемые для нанесения на кожу.

В определенных предпочтительных вариантах осуществления настоящее изобретение представлено в форме субстрата, содержащего композицию настоящего изобретения. Можно использовать любой приемлемый субстрат. Примеры приемлемых субстратов и материалов субстратов описаны, например, в опубликованных заявках на патент США №№ 2005/0226834 и 2009/0241242, содержание которых полностью включено в настоящий документ путем ссылки.

В определенных предпочтительных вариантах осуществления субстрат представляет собой влажную салфетку, перчатку или маску для лица. Такие варианты осуществления предпочтительно содержат нерастворимый в воде субстрат, определенный, как указано в приведенных выше ссылках. В определенных вариантах осуществления нерастворимый в воде субстрат может иметь такие размер и форму, чтобы покрывать лицо человека-пользователя для облегчения размещения нерастворимого в воде субстрата на лице пользователя в качестве субстрата-маски. Например, нерастворимый в воде субстрат-маска может иметь отверстия для рта, носа и/или глаз пользователя. В альтернативном варианте осуществления нерастворимый в воде субстрат-маска может не иметь таких отверстий. Такая конфигурация без отверстий может подходить для вариантов осуществления изобретения, в которых нерастворимый в воде субстрат предназначен для оборачивания вокруг участков кожи, находящихся не на лице, или нерастворимый в воде субстрат предназначен для использования в качестве влажной салфетки. Нерастворимый в воде субстрат может иметь различные формы, такие как форма с углами, например форма прямоугольника, или изогнутая форма, например круглая или овальная. В определенных вариантах осуществления субстрат представляет собой перчатку, такую как описанная в опубликованной заявке на патент США № 2006/0141014, содержание которой полностью включено в настоящий документ путем ссылки. В одном варианте осуществления настоящего изобретения продукт включает множество нерастворимых в воде субстратов различной формы.

Настоящее изобретение дополнительно включает в себя способ усиления барьерной функции и/или увлажнения кожи посредством нанесения на кожу, требующую усиления функции кожного барьера и/или увлажнения, комбинации экстракта Pichia anomala и ретинола. Этот способ включает, например, местное нанесение композиции настоящего изобретения, содержащей комбинацию экстракта Pichia anomala и ретинола на кожу, требующую улучшения функции кожного барьера и увлажнения. Такое местное нанесение можно выполнять на кожу, требующую ухода, в любой части тела, например на кожу лица, губ, шеи, грудной клетки, спины, рук, подмышек, кистей рук, стоп и/или ног. Комбинацию экстракта Pichia anomala и ретинола предпочтительно наносят в эффективном количестве, которое приводит к достижению желаемого усиления функции кожного барьера.

Настоящее изобретение дополнительно включает способ улучшения внешнего вида в отношении по меньшей мере одного признака старения кожи посредством нанесения на кожу, требующую улучшения внешнего вида в отношении по меньшей мере одного признака старения, комбинации экстракта Pichia anomala и ретинола. Этот способ включает, например, местное нанесение композиции настоящего изобретения, содержащей экстракт Pichia anomala и ретинол, на кожу, требующую лечения по меньшей мере одного признака старения. Такое местное нанесение можно выполнять на кожу, требующую ухода, в любой части тела, например на кожу лица, губ, шеи, грудной клетки, спины, рук, подмышек, кистей рук, стоп и/или ног. Комбинацию экстракта Pichia anomala и ретинола предпочтительно наносят в эффективном количестве, которое приводит к достижению желаемого улучшения внешнего вида в отношении по меньшей мере одного признака старения кожи.

Можно применять любой приемлемый способ нанесения композиции на кожу, требующую ухода. Например, композицию можно наносить непосредственно из упаковки на кожу, требующую ухода, наносить рукой на кожу, требующую ухода, либо можно переносить на кожу с субстрата, такого как влажная салфетка или маска, либо использовать комбинацию двух или более из перечисленного. В других вариантах осуществления композицию можно наносить посредством пипетки, тубы, ролика, аэрозоля и пластыря или можно добавлять в ванну или иным образом в воду для нанесения на кожу и т. п. Композицию можно наносить различными способами и в различных формах, включая, без ограничений, несмываемый крем, маску и/или сыворотку.

В определенных вариантах осуществления способы настоящего изобретения включают нанесение на кожу по меньшей мере двух различных композиций или продуктов, содержащих экстракт Pichia anomala и ретинол. Например, способы могут включать нанесение первой композиции, содержащей экстракт Pichia anomala, и последующее нанесение второй композиции, содержащей ретинол, которая отличается от первой композиции, на требующую лечения кожу.

В определенных предпочтительных вариантах осуществления первую и вторую композиции можно независимо выбрать из группы, состоящей из лосьонов, очищающих средств, масок, влажных салфеток, кремов, сывороток, гелей и т. п. В определенных предпочтительных вариантах осуществления, по меньшей мере, одна из первой и второй композиций представляет собой очищающее средство, лосьон, крем, эссенцию или сыворотку, а другая представляет собой маску для лица или влажную салфетку. В других определенных предпочтительных вариантах осуществления, по меньшей мере, одна из первой и второй композиций представляет собой очищающее средство, а другая представляет собой лосьон или крем.

Композиции, составы и продукты, содержащие такие композиции настоящего изобретения, могут быть приготовлены с применением методики, хорошо известной среднему специалисту в данной области. Эти композиции могут быть использованы при лечении признаков старения кожи, таких как морщины, потеря эластичности, «неровная кожа», включая уменьшение пятнистости. Композиция может применяться на регулярной основе и по существу не содержит раздражителей кожи.

Приводимые ниже не имеющие ограничительного характера примеры являются дополнительной иллюстрацией настоящего изобретения.

Пример 1

Выработку гиалуроновой кислоты (ГК) эксплантатами кожи человека определяли после их обработки тестируемыми композициями 1-4, содержащими различные количества экстракта Pichia anomala, следующим образом.

Сначала был изготовлен гель, содержащий следующие ингредиенты:

Наименование по INCI % масс. Феноксиэтанол; Метилпарабен; Этилпарабен; Пропилпарабен 0,7 Карбомер 1 20% Раствор гидроксида натрия До достижения pH=6 Вода 98,3

Композиции 1-4 получали соединением 2% масс. геля с различными количествами 5% водного раствора экстракта Pichia anomala вместе с дополнительными ингредиентами. Pichia anomala выращивали на растении киви. Обрабатывали 5% водный раствор как 100% базовый раствор.

Композиции 1-4 содержали ингредиенты, показанные в таблице 1.

ТАБЛИЦА 1

Наименование по INCI Композиция 1 (% масс) Композиция 2 (% масс) Композиция 3 (% масс) Композиция 4 (% масс) гель 2 2 2 2 Цетеариловый спирт; Цетеариловый глюкозид 7 7 7 7 Изононилизононаноат 8 8 8 8 Феноксиэтанол; Метилпарабен; Этилпарабен; Пропилпарабен 0,7 0,7 0,7 0,7 5% Водн. раствор экстракта Pichia anomala 2,5 (0,065% масс. экстракта Pichia anomala) 5 (0,13% масс. экстракта Pichia anomala) 7,5 (0,195% масс. экстракта Pichia anomala) 10 (0,26% масс. экстракта Pichia anomala) Вода 79,8 77,3 74,8 72,3

Выработку ГК композициями 1-4 определяли с помощью иммуногистопатологического анализа на нормальных эксплантатах человеческой кожи у трех доноров (29, 30, 55 лет). Из эксплантатов вырезали лоскуты диаметром восемь мм, размещали на кусках стерильной марли и помещали в шесть лунок с 3 мл культуральной среды по одному эксплантату на лунку. Культуральная среда продавалась под торговым названием GIBCO DMEM/F-12 (ThermoFisher Scientific, г. Уолтем, штат Массачусетс, США, кат. № 11514436) с 1% пенициллином-стрептомицином GIBCO (ThermoFisher Scientific, кат. № 11528876) и 0,1% амфотерицин B продавался под торговым названием FUNGIZONE (ThermoFisher Scientific, кат. № 11510496).

Для каждой исследуемой композиции 5 мкл исследуемой композиции наносили на эксплантат один раз в сутки в течение 5 дней. В качестве контроля использовали необработанный образец эксплантата. На день 7 эксплантаты извлекали, протирали стерильной марлей, затем разрезали пополам вертикально и фиксировали в 4% параформальдегиде (об./об.). На день 8 эксплантаты обезвоживали и погружали в парафин. Каждую тестируемую композицию испытывали трижды.

Парафинизированные предметные стекла смывали ксилолом, извлечение эпитопов выполняли на приборе PT link (Agilent, г. Санта-Клара, штат Калифорния, США) с использованием целевого извлекающего раствора, продаваемого под торговым названием ENVISION Flex, High pH (Dako, DM828, Agilent, г. Санта-Клара, штат Калифорния, США). Затем предметные стекла промывали промывочным буфером, продаваемым под торговым названием ENVISION (Dako, DM831, Agilent, г. Санта-Клара, штат Калифорния, США), один раз в течение 10 мин. Пермеабилизацию и насыщение выполняли с использование фосфатно-солевого буферного раствора (PBS) 0,3% тритона/5% козьей сыворотки (Dako, г. Санта-Клара, штат Калифорния, США, кат. № CP3418/X090710-8) в течение 30 мин с последующим мечением белком, связывающим гиалуроновую кислоту (HAPB производства Calbiochem, кат. № 385911, Millipore Sigma, г. Сент-Луис, штат Нью-Джерси, США), в течение ночи при 4 °C. На следующий день предметные стекла трижды промывали PBS в течение 5 минут. Антитела обнаруживали при помощи связывающего биотин белка, ковалентно присоединенного к флуоресцентной метке, продаваемой под торговым названием ALEXA FLUOR 488 стрептавидин (Invitrogen™, кат. № S11223), и окрашивание ядер выполняли с использованием раствора DAPI (Dako, г. Санта-Клара, штат Калифорния, США) в количестве 5 мкг/мл в течение 30 мин при комнатной температуре. Затем предметные стекла промывали PBS и заливали средой для заливки Fluoprep (BioMerieux UK, № британского кат. 75521).

Изображения срезов кожи получали с помощью флуоресцентного микроскопа Olympus IX70 (Olympus Corporation, Япония), соединенным с системой анализа изображений (программное обеспечение NIS-Elements AR, Nikon instruments, г. Мелвилл, штат Нью-Йорк, США). Количественный анализ изображений проводили с использованием программного обеспечения ImageJ.

Результаты показаны в таблице 2. Результаты выражены в виде средней интенсивности флуоресценции дермы (в условных единицах (у. е.)). Интенсивность (зеленой) флуоресценции пропорциональна синтезу HABP.

ТАБЛИЦА 2

Количество 5% раствора экстракта Pichia anomala Весовое процентное содержание экстракта Pichia anomala Дельта HABP по сравнению с необработанным контролем Композиция 1 2,5% 0,065% 10,36583333 Композиция 2 5% 0,13% 17,73 Композиция 3 7,5% 0,195% 15,23666667 Композиция 4 10% 0,26% 15,4125

Эти результаты показывают, что максимальная выработка ГК кожей происходит при использовании около 0,13% масс. экстракта Pichia anomala. При превышении этого количества выработка ГК выравнивалась.

Пример 2

Выработку гиалуроновой кислоты (ГК) эксплантатами кожи человека определяли после их обработки четырьмя тестируемыми композициями: композицией 2, описанной в примере 1 (содержащей экстракт Pichia anomala), композицией 5 (содержащей ретинол) и композициями 6 и 7 (содержащими и то, и другое) в соответствии с изобретением.

Композиция 5, содержащая 0,1% масс. ретинола и другие ингредиенты, показана в таблице 3.

ТАБЛИЦА 3 Композиция 5

Наименование по INCI % масс. Вода 62,18 Кроссполимер акрилоилдиметилтаурата натрия/винилпирролидона (ВП) 0,5 Динатриевая соль ЭДТА 0,1 Глицерин 5 Бутиленгликоль 2 Гиалуронат натрия 0,1 Каприлилгликоль 0,5 стеариловый спирт; цетеарет-20. 3 цетеариловый спирт; цетеарет-20. 3 изогексадекан; 1,5 Стеариловый эфир ППГ-15 4,5 пентаэритритилтетраэтилгексаноат; 7 БГТ 0,1 Полиакриламид; лаурет-7; C13-14 изопарафин 1 диметикон; кроссполимер диметикона; 5 диметикон; трисилоксан; диметикон; Диметикон 3 Аскорбиновая кислота 0,05 Феноксиэтанол 0,5 Хлорфенезин 0,2 Полиэтилен; ПТФЭ 0,5 Полисорбат 20 Ретинол 0,23 Гидроксид натрия 0,04

Композиция 5 была приготовлена следующим образом. Удаляли полисорбат 20; использовали ретинол из холодильника; помещали в печь с температурой 50°C до расплавления. Предварительная смесь аскорбиновой кислоты. Смешивали аскорбиновую кислоту с 2% воды и доводили до pH ~ 5. Откладывали для последующего добавления при 40°C. Основная фаза. Добавляли воду (-2% для предварительной смеси аскорбиновой кислоты) и начинали перемешивание до однородного состояния. Затем добавляли динатриевую соль ЭДТА. При перемешивании на высоких оборотах добавляли кроссполимер акрилоилдиметилтаурата натрия/винилпирролидона (ВП). Перед продолжением убеждались в гомогенности/полной гидратации. Начинали нагревание до целевой температуры 73°C. Затем добавляли глицерин и бутиленгликоль. При температуре выше 65°C добавляли каприлилгликоль, хлорфенезин, феноксиэтанол и гиалуронат натрия. Масляная фаза. Добавляли изогексадекан, стеариловый сложный эфир ППГ 15, пентаэритритилтетраэтилгексаноат, диметикон; сшитый полимер диметикона, диметикон; трисилоксан; диметикон; диметикон-стеариловый спирт; цетеарет-20 и цетеариловый спирт; цетеарет-20. Нагревали до целевой температуры 73°C при перемешивании. За 5 минут до эмульгирования добавляли БГТ. Эмульгирование. После доведения основной фазы и масляной фазы до температуры ~ 73°C, масляную фазу медленно добавляли в водную фазу. Перемешивали в течение 10-15 мин, после чего добавляли полиакриламид; лаурет-7; C13-14 изопарафин. Гомогенизировали (Silverson, 4000 об./мин) в течение 1 мин. Начинали охлаждение после смешивания при помощи винта. Последующие добавления. При 40°C или ниже добавляли полиэтилен; ПТФЭ и предварительную смесь 1 (аскорбиновой кислоты). Измеряли pH и доводили его до целевого значения pH 6,5-6,8. Под желтым светом и в атмосфере аргона добавляли ретинол при 50°C и тщательно перемешивали в течение 10-15 минут. Оставляли охладиться до 30-35°C.

Композиции 6 и 7 получали таким же образом, как и композицию 5, за исключением того, что после предварительной смеси аскорбиновой кислоты добавляли 2,5% масс. или 5% масс. соответственно 5% раствора экстракта Pichia anomala, описанного в примере 1, и корректировали соответственно количество воды.

Выработку ГК определяли посредством иммуногистопатологического анализа следующим образом. У взрослых людей, которым проводилась абдоминопластика, брали образцы кожи брюшной полости. У каждого пациента было получено информированное согласие, и все экспериментальные стадии были одобрены экспертным советом организации (IRB). Подкожный жир осторожно удаляли, биоптаты кожи размером 0,93 см² готовили в стерильных условиях и акклиматизировали в культуральной среде DMEM/F12 (1:1) (Thermofisher Scientific, г. Бриджуотер, штат Нью-Джерси, США, кат. № 11320082) с инактивированной нагреванием 2% фетальной бычьей сывороткой (Thermofisher Scientific, г. Бриджуотер, штат Нью-Джерси, кат. № A3840202), 10 мкг/мл инсулина (Sigma Aldrich, г. Аллентаун, штат Пенсильвания, США, кат. № I0516-5ML), 10 нг/мл гидрокортизона (Sigma Aldrich, г. Аллентаун, штат Пенсильвания, США, кат. № H 0135), 10 нг/мл EGF (Sigma Aldrich, г. Аллентаун, штат Пенсильвания, США, кат. № 11376454001), 1x ABAM (Thermofisher Scientific, г. Бриджуотер, штат Нью-Джерси, США, кат. № 15240062) в течение ночи во влажной атмосфере, содержащей 5% CO₂.

Эксплантаты местно обрабатывали 4 мкл исследуемой композиции ежедневно в течение 5 дней. В качестве контроля использовали необработанный образец эксплантата. На день 6 ткани собирали. Собранные ткани фиксировали в буферизированном формалине в течение 24 часов. После фиксации образцы обезвоживали и пропитывали парафином с помощью автоматического устройства для дегидратации Leica TP 1020 (Leica Biosystems, г. Буффало Гроув, штат Иллинойс, США). Образцы заливали с использованием станции для заливки образцов Leica EG 1160 (Leica Biosystems). Срезы толщиной 5 мкм получали с использованием микротома Leica RM 2125 типа Minot (Leica Biosystems), и срезы фиксировали на гистологических предметных стеклах, продаваемых под торговым названием SUPERFROST. Микроскопические исследования проводили с помощью микроскопа Leica DMLB (Leica Biosystems) или Olympus BX43 (Olympus Corporation, Япония). Изображения оцифровывали цифровой камерой Olympus DP72 с программным обеспечением для хранения CellD (Olympus Corporation, Япония). Окрашивание гиалуроновой кислоты проводили на парафинизированных срезах с использованием биотинилированного HABP (AMS Biotechnology Limited, г. Абингдон, Великобритания, код продукта AMS.HKD.BC41), разведенного 1:100 в PBS-BSA 0,3% в течение 1 часа при комнатной температуре, усиливали системой стрептавидин/биотин и выявляли с использованием пероксидазного субстрата, продаваемого под торговой маркой Vector VIP (Vector Laboratories, г. Берлингейм, штат Калифорния, США, кат. № SK-4600). Окрашивание оценивали посредством наблюдения под микроскопом.

Результаты показаны в таблице 4.

ТАБЛИЦА 4

Композиция Увеличение HABP % увеличения по сравнению с необработанными Без проведения обработки 31,425 Композиция 5 (0,1% масс. ретинола) 44,775 42,48 Композиция 2 (0,13% масс. экстракта Pichia anomala) 44,28 40,90 Композиция 6 (0,1% ретинола+0,065% масс. экстракта Pichia anomala) 47,075 49,80 Композиция 7 (0,1% ретинола+0,13% масс. экстракта Pichia anomala) 54,175 72,39

Обработка эксплантатов ткани композициями 6 и 7, содержащих комбинации экстракта Pichia anomala и ретинола в соответствии с изобретением, обеспечивала повышение выработки ГК по сравнению с композицией 5, содержащей только ретинол, или композицией 2, содержащей только экстракт Pichia anomala.

Более того, композиция 7, содержащая 0,1% ретинола и 0,13% масс. экстракта Pichia anomala, обеспечивала увеличение HAPB на 72,39 процента по сравнению с необработанным образцом, тогда как композиция 2, содержащая 0,13% масс. экстракта Pichia anomala, обеспечивала увеличение только на 40,90 процентов по сравнению с необработанным образцом, а композиция 5, содержащая 0,1% масс. ретинола, обеспечивала увеличение только на 42,48 процента по сравнению с необработанным образцом.

Пример 3

Экспрессию генов для гепарин-связывающего эпидермального фактора роста (HBEGF), синтазы 2 гиалуроновой кислоты (HAS 2) и CD44 измеряли для композиции 5 (0,1% масс. ретинола), 5% раствора экстракта Pichia anomala, описанного в примере 1, и совместного нанесения композиции 5 и 5% раствора экстракта Pichia anomala.

Сначала у взрослых людей, которым проводилась абдоминопластика, брали образцы кожи брюшной полости. У каждого пациента было получено информированное согласие, и все экспериментальные стадии были одобрены экспертным советом организации (IRB). Подкожно-жировую клетчатку осторожно удаляли, а биоптаты кожи размером 0,93 см² готовили в стерильных условиях и акклиматизировали в среде для выращивания кератиноцитов, продаваемой под торговым названием KGM-GOLD BULLETKIT (Lonza, г. Уолкерсвилл, штат Мэриленд, США), с 10% антибиотиками в течение ночи во влажной атмосфере, содержащей 5% CO₂.

Кожные эксплантаты местно обрабатывали 4 мкл различных композиций и оставляли для инкубирования в течение 48 часов. В качестве контроля использовали необработанный образец эксплантата. В случае комбинированного нанесения композиции 5 и 5% раствора экстракта Pichia anomala применяли по 4 мкл каждого из них. В конце периода из 48 ч эпидермис и дерму разделяли нагреванием. Каждый из них лизировали в 400 мкл буфера для лизиса, состоящего из 100 частей буфера RLT (мининабор RNeasy, Qiagen, г. Валенсия, штат Калифорния, США) и одной части 2-меркаптоэтанола внутри усиленной пробирки с навинчивающейся крышкой и уплотнительным кольцом, в пробирку добавляли керамические сферы для истирания тканей (продается под торговым наименованием PRECELLYS CKMix50-R, Bertin Corp, г. Роквилл, штат Мэриленд, США). Пробирки встряхивали в течение 40 с при 6300 об./мин. Из растворов экстрагировали РНК с помощью мининабора RNeasy (QIAGEN, г. Валенсия, штат Калифорния, США) в соответствии с инструкциями производителя, и РНК элюировали в 25 мкл воды, не содержащей РНКаз. Обратную транскрипцию (RT) выполняли с применением набора для обратной транскрипции высокой производительности Biosystems (ThermoFisher Scientific, г. Бриджуотер, штат Нью-Джерси, США).

Анализы экспрессии генов выполняли методом количественной полимеразной цепной реакции (ПЦР) в реальном времени на основе метода с использованием красителя SyBR green. Проводили кПЦР на системе ПЦР реального времени, которая продается под торговым названием CFX96 TOUCH (Bio Rad Laboratories, inc., г. Геркулес, штат Калифорния, США). Экспрессию этих генов нормировали к экспрессии конститутивного гена человеческой РНК 18S. Кратные изменения рассчитывали по сравнению с необработанными контролями и проводили статистический тест ANOVA.

Полученные результаты показаны в таблицах 5, 6 и 7.

ТАБЛИЦА 5

Экспрессия HBEGF Составы Зарегистри-рованный T-тест Наблюдаемые нормированные к необработанным Ожидаемый аддитивный эффект % Синергии Без проведения обработки 100 Композиция 5 (0,1% ретинол) 391 0,011330802 291 5% Раствор экстракта Pichia anomala 77 0,308217589 0 Композиция 5+5% раствор экстракта Pichia anomala 594 0,001658771 494 291 69,76

Применение комбинации ретинола и экстракта Pichia anomala привело к неожиданному усилению экспрессии HBEGF (494) по сравнению с экспрессией HBEGF, полученной при обработке только ретинолом (291). Наблюдалось увеличение почти на 70%.

ТАБЛИЦА 6

Экспрессия HAS 2 Составы Зарегистри-рованный T-тест Наблюдаемые нормированные к необработанным Ожидаемый аддитивный эффект % Синергии Без проведения обработки 100 Композиция 5 (0,1% ретинол) 122 0,406565333 22 5% раствор экстракта Pichia anomala 93 0,704495851 0 0,1% ретинол+5% раствор экстракта Pichia anomala 137 0,244891449 37 22 68,18

Применение комбинации ретинола и экстракта Pichia anomala привело к неожиданному увеличению, почти на 70%, в стимуляции экспрессии HAS 2 (37) по сравнению с ожидаемым аддитивным результатом применения только ретинола и только экстракта Pichia anomala (22).

ТАБЛИЦА 7

Экспрессия CD44 Составы Зарегистри-рованный T-тест Наблюдаемые нормированные к необработанным Ожидаемый аддитивный эффект % Синергии Без проведения обработки 100 Композиция 5 120 0,407059542 20 5% раствор экстракта Pichia anomala 90 0,397819867 0 NTG RWR+экстракт Pichia anomala, 5% 165 0,11812913 65 20 225

Применение комбинации ретинола и экстракта Pichia anomala привело к неожиданной стимуляции экспрессии CD44 (65) по сравнению с ожидаемым аддитивным результатом применения только ретинола и только экстракта Pichia anomala (20). Это увеличение составило 225%.

Группа изобретений относится к косметической промышленности, а именно, к композиции для местного нанесения на кожу человека для увеличения количества вырабатываемой кожей гиалуроновой кислоты и к способу увеличения количества вырабатываемой кожей гиалуроновой кислоты. Композиция для местного нанесения на кожу человека для увеличения количества вырабатываемой кожей гиалуроновой кислоты, содержащая 5% водный раствор экстракта Pichia anomala, при содержании экстракта Pichia anomala в композиции от 0,065 до 0,26% по массе, и от 0,05 до 1% по массе ретинола, при этом массовое соотношение экстракта Pichia anomala и ретинола в композиции для местного нанесения составляет 1,3. Способ увеличения количества вырабатываемой кожей гиалуроновой кислоты при контакте с экстрактом Pichia anomala, включающий приведение в контакт кожи с композицией для местного нанесения по п. 1. Вышеописанная композиция эффективно увеличивает количество вырабатываемой кожей гиалуроновой кислоты, стимулирует экспрессию HAS2, CD44. 2 н. и 4 з.п. ф-лы, 7 табл., 3 пр.

1. Композиция для местного нанесения на кожу человека для увеличения количества вырабатываемой кожей гиалуроновой кислоты, содержащая 5% водный раствор экстракта Pichia anomala, при содержании экстракта Pichia anomala в композиции от 0,065 до 0,26% по массе, и от 0,05 до 1% по массе ретинола, при этом массовое соотношение экстракта Pichia anomala и ретинола в композиции для местного нанесения составляет 1,3.

2. Композиция для местного нанесения по п. 1, в которой экстракт Pichia anomala получен из штамма Pichia anomala, присутствующего в плодах или листьях киви.

3. Композиция для местного нанесения по п. 1, в которой экстракт Pichia anomala получен из штамма Pichia anomala, присутствующего в сахарном тростнике.

4. Композиция для местного нанесения по п. 1, дополнительно содержащая, по меньшей мере, 10 масс.% глицерина.

5. Композиция для местного нанесения по п. 1, имеющая уровень рН 6,5 или менее.

6. Способ увеличения количества вырабатываемой кожей гиалуроновой кислоты при контакте с экстрактом Pichia anomala, включающий приведение в контакт кожи с композицией для местного нанесения по п. 1.