Средство, обладающее противоопухолевой активностью, и способ его получения Российский патент 2024 года по МПК A61K33/04 A61K47/36 A61P35/00 B82B3/00 B82Y30/00 

Селен, первоначально открытый Йонсом Якобом Берцелиусом, представляет собой химический элемент, жизненно необходимый для здоровья человека [Adv. Clin. Exp.Med. 2018, 27, 245]. Двадцать первая аминокислота, селеноцистеин (Sec) [Annu. Rev. Nutr. 2015, 35, 109] участвует в синтезе селенопротеинов [Biochim. Biophys. Acta, Gen. Subj. 2015, 1850, 1642], которые, помимо прочего, отвечают за безопасный химический транспорт активного селена по организму. Известно, что как дефицит, так и избыток селена лишает клетку способности синтезировать селенопротеины [Hormones 2020, 19, 9], что коррелирует с сердечно-сосудистыми и воспалительными заболеваниями, иммунодефицитом и нарушениями нервной деятельности [Metallomics 2014, 6, 25], диабетом второго типа [Curr. Environ. Health Rep. 2018, 5, 464.], нарушениями фертильности/репродукции [Hormones 2020, 19, 9], аутоиммунными заболеваниями щитовидной железы и раком [Crit. Rev. Food Sci. Nutr. 2016, 56, 36]. Считается, что опухолевые клетки, по-видимому, более восприимчивы к прооксидантным и потенциальным цитотоксическим эффектам, вызванным высокими дозами селена. Однако терапевтические соединения на основе селена имеют узкое терапевтическое окно и поэтому в основном используются против агрессивного рака на поздних стадиях [Biomed. Pharmacother. 2019, 111, 802].

Установлено, что селен-содержащие наночастицы (SeNP) обладают меньшей токсичностью и более высокой биосовместимостью, чем органические или неорганические соединения селена [Col. & Surf. В: Biointerf. 2021, 197, 111381]. Именно данный факт является причиной повышенного внимания научного сообщества к применению SeNP в качестве терапевтических и тераностических средств [Int. J. Nanomed. 2018, 13, 2107]. С другой стороны известно, что так называемые «голые» SeNP, полученные химическим синтезом, нестабильны в водных растворах, что приводит к образованию более крупных агрегатов вплоть до микрогетерогенных размеров [J. Food Biochem. 2020, 44, e13363]. Поэтому обычно при проведении синтезов SeNP, предназначенных для использования в качестве медицинских препаратов, добавляют стабилизаторы, способствующие сохранению размеров и биологической активности целевого продукта. Поскольку показано, что небольшие изменения размера SeNPs могут влиять на их токсическую активность [Int. J. Nanomed. 2017, 12,4527; Nanobiotechnol. Rep.2021, 16, 202]. Обычно для стабилизации SeNP используются такие соединения, как аминокислоты [Dalton Trans. 2014, 43, 1854], бычий сывороточный альбумин (BSA) [Int. J. Nanomed. 2020, 15, 115], полисахариды, например, хитозан [IET Nanobiotechnol. 2019, 13, 30], гуммиарабик [Int. J. Biol. Macromol. 2014, 65, 155] и арабиногалактан [Rus. J. Gen. Chem. 2015, 85, 485; IET Nanobiotechnol. 2020, 14, 519; Appl. Sci. 2021, 11, 3717], а также полимеры, такие как поли(молочно-гликолевая кислота) (PLGA) [Biol. Trace Elem. Res. 2019, 187, 80], поливиниловый спирт (PVA) [Colloids Surf., В 2015, 126, 546], полиэтиленимин (PEI) [Cancer Lett. 2018,416, 87] и др.

Отметим, что в академической и патентной литературе описано множество способов синтеза SeNP, которые могут быть объединены в три общие группы: (1) восстановление неорганических селен-содержащих соединений (например, селенит или селенат) биоорганизмами (например, бактериями, грибами, простейшими), растительными экстрактами [Sci. Rep.2016, 6, 1; Front. Microbiol. 2019, 10, 931; Int. Microbiol. 2021, 24, 103]; (2) восстановление неорганических соединений селена под действием химических восстановителей (например, аскорбиновая кислота, гидразин гидрат) в присутствие другого(их) соединений, используемых в качестве стабилизатора(ов) [Biol. Trace Elem. Res. 2019, 187, 80; Int. J. Nanomed. 2020, 15, 115; Angew. Chem., Int. Ed. Engl. 2020, 59, 4406; IET Nanobiotechnol. 2020, 14, 519]; (3) использование физических методов (например, нагревание, лазерная абляция) для индукции изменений в неорганических соединениях селена и образование SeNP в присутствии стабилизирующего(их) агента(ов) [Molecules 2019, 24, 4048; Int. J. Biol. Macromol. 2020, 156, 1584; Biol. Trace Elem. Res. 2020, 195, 323]. Каждая из перечисленных групп методов обладает как набором преимуществ, так и принципиальных недостатков.

Анализ данной литературы позволяет предположить, что наиболее удобным для медицинского использования и простым в изготовлении SeNP-содержащим препаратом можно считать комплексную структуру, обладающую следующими параметрами: (1) результирующая субстанция должна быть растворимой в воде или других растворителях, традиционно применяющихся в медицине, при этом целевой композит должен удерживать селен-содержащую структуру в стабильной форме после растворения; (2) метод синтеза должен быть максимально простым, с минимальным количеством стадий (в идеале с одной стадией), при этом исходными соединениями должны выступать дешевые, коммерчески доступные, стабильные препараты; (3) желательно, чтобы полученная композиция после синтеза не требовала проведения дополнительных процедур, а именно, перекристаллизации, сублимации, очистки и т.д.; (4) каждый из компонентов целевого препарата сам по себе должен обладать определенной биологической активностью, а их сочетание приводить к синергизму желаемых свойств.

Препаратами, наиболее соответствующими описанным выше параметрам, можно считать молекулярные комплексы и/или аддукты полисахаридов, в том числе и модифицированных, с некоторыми биологически значимыми элементами [RU2614363C2, Rus. J. Gen. Chem. 2015, 85, 485; Int. J. Nanomed. 2018, 13, 2107; IET Nanobiotechnol. 2020, 14, 519; RU2778928C1; RU2795219C1], синтез которых в течении ряда лет разрабатываются в ИрИХ СО РАН (г. Иркутск).

Например, известен способ получения селен-содержащего фармацевтического препарата [RU2614363C2], который включает взаимодействие арабиногалактанового сырья (специально очищенного от фенольных примесей) и диоксида селена или солей селенистой кислоты в растворителе с последующим осаждением в этиловый спирт, или ацетон, или другой смешивающийся с водой органический растворитель. Осуществление изобретения позволяет получить стабильные водорастворимые нанокомпозиты, обладающие противоопухолевой активностью и может быть использовано для торможения развития опухолей эпителиального происхождения (карцином), в частности карциномы Эрлиха. Описанный способ синтеза обладает существенным недостатком, а именно, сложностью методологии синтеза, требующей осуществления процедуры получения целевого продукта в растворе, его выделения и сушки. Кроме того, авторы в качестве стабилизирующей матрицы использовали арабиногалактан, который, безусловно, обладает выдающимися биологическими параметрами [RU2778928C1; RU2795219C1], но его модифицированные аналоги более перспективны, как противоопухолевые агенты, например, сульфатированный арабиногалактан [RU2319707C1; RU2546965C1; Хим. растит. сырья 2019, 4, 47; Russ. J. Bioorg. Chem. 2020, 46, 1323; Wood Sci. & Technol. 2021, 55, 1725; Earth & Environm. Sci. 2021, 839, 042094].

Наиболее близким к предлагаемому способу получения целевой композиции является способ получения йод-содержащих композитов арабиногалактана с антимикробными и противогрибковыми свойствами [RU2795219C1], а именно, механохимическая активация двух исходных компонентов (йода и арабиногалактана). Данная методология чрезвычайно проста и эффективна и не требует использования дополнительных стадий, как подготовки исходных компонентов, так и целевого продукта.

Сущность заявляемого решения заключается в получении в сухом порошкообразном виде стабильных водорастворимых нанокомпозитов (на основе сульфатированного арабиногалактана и диоксида селена), которые обладают противоопухолевой активностью. На основе этих композитов готовится противоопухолевое средство, представляющее собой водные растворы этих нанокомпозитов, нормированные по содержанию селена (см. Примеры).

Преимуществами данного метода создания нанокомпозитов на основе сульфатированного арабиногалактана и диоксида селена является отсутствие как дополнительных стадий получения целевых структур (например, растворение, осаждение, сушка и т.д.), так и других специально вводимых компонентов, например, растворителей или восстановителей. Более того, весь процесс механосинтеза осуществляется при комнатной температуре.

Поставленная задача достигается следующим образом:

рассчитанное количество сульфатированного арабиногалактана и SeO₂ загружали в шаровую мельницу МЛ-1 (НПЭФ «Экон», Россия, материал рабочей камеры - титан) и подвергали обработке в течение 100 мин (см. Пример 1). Полученная таким образом порошкообразная композиция отличается оранжевой окраской, растворима в воде и ДМСО, не растворима в большинстве органических растворителей.

Содержание селена в полученных таким образом образцах, определенное элементным анализом и рентгеновским энергодисперсионным микроанализом, составляет от 5.0 до 17.4% селена, а серы - от 8.83 до 11.63%, в зависимости от исходного соотношения сульфатированный арабиногалактан / SeO₂ (см. Примеры 1-4). По данным просвечивающей электронной микроскопии, размеры наблюдаемых нанокомпозитов составляют от 5 до 50 нм (Рисунок 1).

Синтез сульфатированного арабиногалактана осуществляли в соответствии с методикой, описанной в [RU2319707C1].

Заявителем не выявлены источники, содержащие информацию о технических решениях, идентичных настоящему изобретению, что позволяет сделать вывод о его соответствии критерию «новизна».

Отличительной особенностью настоящего изобретения является:

- простота (исходные вещества - это коммерчески доступные компоненты, не требующие предварительной подготовки и обработки; все манипуляции проводятся на воздухе, при комнатной температуре (20-25°С) в одном реакционном сосуде) (см. Пример 1-4);

- конечный продукт, а именно селен-содержащий нанокомпозит сульфатированного арабиногалактана - это стабильное порошкообразное вещество, сохраняющие свои физико-химические параметры в течение длительного промежутка времени;

- полученный селен-содержащий нанокомпозит сульфатированного арабиногалактана обладает противоопухолевой активностью (Примеры 5-7) и не токсичен для нормальных клеток млекопитающего (фибробластов) (Пример 8).

Заявителем не обнаружены какие-либо источники информации, содержащие сведения о влиянии заявленных отличительных признаков на достигаемый вследствие их реализации технический результат. Это, по мнению заявителя, свидетельствует о соответствии данного технического решения критерию «изобретательский уровень».

Краткое описание рисунков.

На рисунке 1 представлены ТЭМ микрофотографии образца селен-содержащего нанокомпозита сульфатированного арабиногалактана (содержание селена 9.12%). Микрофотографии сделаны на трансмиссионном электронном микроскопе Leo 906 Ec ускоряющим напряжением 80 кв.

На рисунке 2 представлены клетки карциномы Эрлиха через 24 часа инкубации с раствором ArS-Se. Гибель опухолевых клеток Эрлиха (клетки окрашены пропидия йодидом - красный цвет) (А), отсутствие окраски у большинства клеток без воздействия ArS-Se (Б).

На рисунке 3 представлены клетки Кребса через 24 часа инкубации с раствором ArS-Se. Гибель опухолевых клеток Кребса (клетки окрашены пропидия йодидом - красный цвет) (А), отсутствие окраски у большинства клеток без воздействия ArS-Se (Б). На рисунке 4 представлены фибробласты после инкубирования с ArS-Se в течение суток (А), контрольная группа (Б). Препараты окрашены пропидия йодидом для выявления погибших клеток. Отсутствие различий между контрольной группой и воздействием ArS-Se - положительно окрашены единичные клетки.

В таблице 1 Влияние селен-содержащего нанокомпозита сульфатированного арабиногалактана на развитие асцитной карциномы Эрлиха, где АКЭ - асцитная аденокарцинома Эрлиха, ArS-Se - селен-содержащий нанокомпозит сульфатированного арабиногалактана,* - р<0.001 в сравнении с контролем АКЭ.

Пример 1.

А) Получение сульфатированного арабиногалактана:

К раствору, содержащему 1.0 г арабиногалактана в 3 мл ДМСО, прилили 10 мл сульфатирующей смеси SO₃ в ДМФА с концентрацией SO3 18%. Сульфатирование проводили при интенсивном перемешивании при температуре 20°С в течение 30 мин. После этого реакционную смесь нейтрализовали 26 мл 10% водным раствором КОН и высаживали в 500 мл этилового спирта. Полученный осадок отфильтровали, промывали спиртом, сушили при пониженном давлении. Получили 1.8216 г продукта. Найдено, %: С 33.87; Н 5.51; S 12.99.

Б) Получение селен-содержащих нанокомпозитов сульфатированного арабиногалактана: Навески 1.001 г сульфатированного арабиногалактана и 0.126 г SeO₂ поместили в шаровую мельницу МЛ-1 (НПЭФ «Экон», Россия) (материал рабочей камеры - титан), и подвергали обработки в течение 100 минут.Была получена порошкообразная композиция массой 1.102 г, со следующим элементным составом, %: С, 30.26; Н, 5.10; S, 10.66; Se 9.12.

Пример 2.

А) Получение сульфатированного арабиногалактана проводили по аналогии с Примером 1(A).

Б) Получение селен-содержащих нанокомпозитов сульфатированного арабиногалактана: Навески 1.001 г сульфатированного арабиногалактана и 0.063 г SeO₂ поместили в шаровую мельницу МЛ-1 (НПЭФ «Экон», Россия) (материал рабочей камеры - титан), и подвергали обработки в течение 100 минут.Была получена порошкообразная композиция массой 1.002 г, со следующим элементным составом, %: С, 33.01; Н, 5.56; S, 11.63; Se 5.00.

Пример 3.

А) Получение сульфатированного арабиногалактана проводили по аналогии с Примером 1(A).

Б) Получение селен-содержащих нанокомпозитов сульфатированного арабиногалактана: Навески 1.001 г сульфатированного арабиногалактана и 0.25 г SeO₂ поместили в шаровую мельницу МЛ-1 (НПЭФ «Экон», Россия) (материал рабочей камеры - титан), и подвергали обработки в течение 100 минут.Была получена порошкообразная композиция массой 1.181 г, со следующим элементным составом, %: С, 25.05; Н, 4.22; S, 8.83; Se 17.40.

Пример 4.

А) Получение сульфатированного арабиногалактана проводили по аналогии с Примером 1(А).

Б) Получение селен-содержащих нанокомпозитов сульфатированного арабиногалактана: Навески 1.001 г сульфатированного арабиногалактана и 0.098 г SeO₂ поместили в шаровую мельницу МЛ-1 (НПЭФ «Экон», Россия) (материал рабочей камеры - титан), и подвергали обработки в течение 100 минут.Была получена порошкообразная композиция массой 0.9987 г, со следующим элементным составом, %: С, 31.54; Н, 5.31; S, 11.11; Se 7.20.

Пример 5.

Изучение противоопухолевой активности селен-содержащего нанокомпозита сульфатированного арабиногалактана in vivo в эксперименте.

Экспериментальные исследования выполнены на белых беспородных мышах-самцах (n=40 m=20-25 г), разводимых в виварии ФГБНУ Иркутский научный центр хирургии и травматологии. Культура перепрививаемого штамма асцитной аденокарциномы Эрлиха получена в питомнике ФГУН «Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор» (Россия, Новосибирская область, Кольцово). Все исследования выполнены в соответствии с этическими требованиями по работе с экспериментальными животными [ГОСТ 33044-2014 Принципы надлежащей лабораторной практики [Электронное издание https://docs.cntd.ru/document/1200115791; Directive 2010/63/EU of the European parliament and of the council of 22 September 2010 on the protection of animals used for scientific purposes // Off. J. Eur. Union. 2010. - Vol.L276. Iss. 53. P. 33-79]. На проведение исследования получено разрешение Комитета по этике ФГБНУ Иркутского научного центра хирурги и травматологии №9 от 16.12.2021 г. Всем экспериментальным животным внутрибрюшинно вводили культуру перепрививаемого штамма асцитной аденокарциномы Эрлиха (АКЭ) в дозе 3×10⁶ клеток в 0.2 мл 0,9% растворе натрия хлорида для инъекций. Контрольной группе вводили только культуру перепрививаемого штамма АКЭ. Опытной группе через 24 часа после перепрививки вводили внутрибрюшинно раствор селен-содержащего нанокомпозита сульфатированного арабиногалактана, с содержанием ионов селена 9.12% однократно. Изучались следующие группы животных. Группа №1: была выполнена перепрививка АКЭ с последующем однократным введение через 24 часа после перепрививки селен содержащего нанокомпозита сульфатированного арабиногалактана с 9.12% содержанием селена в дозе 5 мг селена на 1 кг живой массы внутрибрюшинно в объеме 1 мл предварительно разведя в 0.9% натрия хлориде. Группа №2: (контроль), выполнена только перепрививка АКЭ

Оценивали показатели: объем асцитной жидкости опухоли (мл), количество клеток (млн / мл), торможение роста опухоли в (%) [Хабриев Р.У. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ: второе изд., перераб. и доп.- М.: Медицина, 2005. - 832 с.].

Десять мышей из каждой группы выведены на десятые сутки после перепрививки АКЭ и десять оставлены для оценки критерия продолжительности жизни [Инжеваткин Е.В. Практикум по экспериментальной онкологии на примере асцитной карциномы Эрлиха: Метод. разработка / Краснояр. гос.ун-т; Красноярск, 2004. -10 с.].

День забора биоматериала определяли периодом логарифмического увеличения числа клеток (лог-фаза роста опухоли) после появления опухоли в организме, которым явился 10-й день с момента прививки. Результаты представлены в Таблице 1. Исследуемый селенсодержащий нанокомпозит сульфатированного арабиногалактана обладает противоопухолевой активностью, что объективно продемонстрировано на модели перевиваемой асцитной карциномы Эрлиха: установлено достоверное увеличение продолжительности жизни на 97% сравнении с контролем, а также снижение концентрации опухолевых клеток, их количество составило в среднем 46,88 млн /мл, а в контроле - 232.82 млн /мл. Продолжительность увеличения жизни экспериментальных животных в опытной группе с селенсодержащим нанокомпозитом сульфатированного арабиногалактана составила 65%.

Пример 6.

Клетки карциномы Эрлиха получены из перевиваемой культуры, которая поддерживается в белых лабораторных мышах. Культура перепрививаемого штамма асцитной аденокарциномы Эрлиха получена в питомнике ФГУН «Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор» (Россия, Новосибирская область, Кольцово). Забор клеточной культуры у экспериментального животного осуществляли в период логарифмического роста штамма асцитной карциномы Эрлиха - через 9 суток после перепрививания. Полученную клеточную суспензию промывали раствором фосфатного буфера (FBS) рН 7.4, осаждали клетки центрифугированием при G=300 в течение 3 минут.Отмытые клетки разводили питательной средой DMEM, дополненной 10% FBS, 1% антибиотиком/антимикотиком. Культивировали клеточную культуру 1 сутки при температуре 37°С, влажности 80%) и содержании СО₂ 5% в условиях CO₂-инкубатора BioStation CT (Nikon) в планшете с повышенной клеточной адгезией CellATTACH (BIOFIL).

На проведение исследования получено разрешение Комитета по этике ФГБНУ Иркутского научного центра хирурги и травматологии №9 от 16.12.2021 г. Через 24 часа инкубирования чистых культур клеток был добавлен раствор селен-содержащего нанокомпозита сульфатированного арабиногалактана (ArS-Se). Тестировали образец, полученный по Примеру 3. Предварительно рН раствора ArS-Se доводили до нейтрального раствором (NH₄)OH. Вещество добавляли в культуральную среду до конечной концентрации в лунках по селену 20 мг/л. В качестве контроля в соответствующие лунки был добавлен физиологический раствор. Фотофиксацию осуществляли в режиме фазового контраста - Ph Tiling 10×10 при увеличении 10х каждые 6 часов в течение 1 суток.

Для определения жизнеспособности испытуемых клеток через 24 часа выполнили окрашивание раствором пропидия иодида (PI) в конечной концентрации 5 мкг/мл. Через 5 минут после добавления PI результаты фотофиксировали в режиме фазового контраста - Ph и с фильтром флюоресценции 600±50 нм - Ch-3 (красный цвет) Tiling 10×10 при увеличении 10х однократно.

В лунках с добавлением раствора ArS-Se через 24 часа инкубации наблюдалась тотальная гибель опухолевых клеток Эрлиха, что подтверждается окраской 100% клеток PI (Рисунок 2А), в то время как клетки без воздействия ArS-Se в 95% не окрашиваются PI (Рисунок 2Б).

Пример 7.

Клетки карциномы Кребса получены из перевиваемой культуры, которая поддерживается в белых лабораторных мышах. Забор культуры клеток осуществляли через 9 суток после перевивания. Полученную суспензию клеток промывали раствором фосфатного буфера (FBS) рН 7.4, осаждали клетки центрифугированием при G=300 в течение 3 минут. После этого клетки добавляли в питательную среду DMEM с 10% FBS и 1% антибиотиком/антимикотиком. Культивировали клеточную культуру Кребса 1 сутки при температуре 37°С, влажности 80% и содержании СО₂ 5% в условиях СО₂-инкубатора BioStation CT (Nikon).

На проведение исследования получено разрешение Комитета по этике ФГБНУ Иркутского научного центра хирурги и травматологии №9 от 16.12.2021 г. Через 24 часа инкубирования чистых культур клеток был добавлен раствор селен-содержащего нанокомпозита сульфатированного арабиногалактана (ArS-Se). Тестировали образец, полученный по Примеру 2. Предварительно рН раствора ArS-Se доводили до нейтрального раствором (NH₄)OH. Вещество добавляли в культуральную среду до конечной концентрации в лунках по селену 20 мг/л. В качестве контроля в соответствующие лунки был добавлен физиологический раствор. Фотофиксацию осуществляли в режиме фазового контраста - Ph Tiling 10x10 при увеличении 10× каждые 6 часов в течение 1 суток.

Для определения жизнеспособности испытуемых клеток через 24 часа выполнили окрашивание раствором пропидия иодида (PI) в конечной концентрации 5 мкг/мл. Через 5 минут после добавления PI результаты фотофиксировали в режиме фазового контраста -Ph и с фильтром флюоресценции 600±50 нм - Ch-3 (красный цвет) Tiling 10×10 при увеличении 10× однократно.

В лунках с добавлением раствора ArS-Se через 24 часа инкубации наблюдалась тотальная гибель опухолевых клеток Кребса, что подтверждается окраской 100% клеток PI (Рисунок 3А), в то время как клетки без воздействия ArS-Se в 95% не окрашиваются PI (Рисунок 3Б).

Пример 8.

Исследование проведено на чистой культуре фибробластов, полученных в остром эксперименте из сальника крысы линии Wistar. Выделенные фибробласты культивировали в DMEM, дополненной 10% FBS, 1% антибиотик/антимикотик при температуре 37°С, влажности 80% и 5% СО₂ в Biostation CT, Nikon. Все исследования проводили в стерильных условиях в клеточном боксе. Для получения чистой культуры фибробласты субкультивировали через каждые 7 суток и через 3 пассажа полученную чистую культуру фибробластов использовали для экспериментальных исследований.

На проведение исследования получено разрешение Комитета по этике ФГБНУ Иркутского научного центра хирурги и травматологии №9 от 16.12.2021 г. Через 24 часа инкубирования чистых культур клеток был добавлен раствор селен-содержащего нанокомпозита сульфатированного арабиногалактана (ArS-Se). Тестировали образец, полученный по Примеру 1. Предварительно рН раствора ArS-Se доводили до нейтрального раствором (NH₄)OH. Вещество добавляли в культуральную среду до конечной концентрации в лунках по селену 20 мг/л. В качестве контроля в соответствующие лунки был добавлен физиологический раствор. Фотофиксацию осуществляли в режиме фазового контраста - Ph Tiling 10×10 при увеличении 10× каждые 6 часов в течение 1 суток.

Для определения жизнеспособности испытуемых клеток через 24 часа выполнили окрашивание раствором пропидия иодида (PI) в конечной концентрации 5 мкг/мл. Через 5 минут после добавления PI результаты фотофиксировали в режиме фазового контраста -Ph и с фильтром флюоресценции 600±50 нм - Ch-3 (красный цвет) Tiling 10×10 при увеличении 10× однократно.

Через 24 часа инкубирования фибробластов с ArS-Se уровень клеточной гибели остался без изменения. На Рисунке 4А показаны фибробласты после инкубирования с ArS-Se в течение суток. На Рисунке 4Б - контрольная группа. Препараты окрашены PI для выявления погибших клеток. В обеих группах отмечается гибель единичных клеток (красная окраска). Различий между группой с воздействием ArS-Se и контрольной группой не обнаружено.

Разумеется, изобретение никоим образом не ограничивается описанными и проиллюстрированными вариантами осуществления, которые были представлены лишь в качестве примеров.

Изобретение относится к области химии и фармацевтической промышленности, а именно к средству на основе диоксида селена и сульфатированного арабиногалактана, которое характеризуется тем, что обладает противоопухолевой активностью и представляет собой сухой водорастворимый порошок с содержанием селена 5,00-17,40% и размером композитов 5-50 нм, при этом селен-содержащие структуры механохимическим образом внедрены в матрицу сульфатированного арабиногалактана. Изобретение обеспечивает селен-содержащий нанокомпозит сульфатированного арабиногалактана с противоопухолевой активностью, который не токсичен для нормальных клеток млекопитающего. 4 ил., 1 табл., 8 пр.

Средство, обладающее противоопухолевой активностью на основе диоксида селена и сульфатированного арабиногалактана в виде сухих водорастворимых порошков с содержанием селена от 5,00 до 17,40% и размером композитов от 5 до 50 нм, включающее селен-содержащие структуры, механохимическим образом внедренные в матрице сульфатированного арабиногалактана.