ТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ АГЕНТ ДЛЯ ИНГИБИРОВАНИЯ ФОСФОДИЭСТЕРАЗЫ И СВЯЗАННЫХ С НЕЙ ПАТОЛОГИЧЕСКИХ РАССТРОЙСТВ Российский патент 2024 года по МПК C07D471/14 A61K31/277 A61K31/426 A61K47/06 A61K47/44 A61K31/166 A61K31/167 A61P17/06 A61P11/06 A61P17/00 

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к лечению расстройств, связанных с фосфодиэстеразой (ФДЭ).

Уровень техники изобретения

Фосфодиэстераза представляет собой класс ферментов, который разрывает фосфодиэфирную связь. Фосфодиэстеразы циклических нуклеотидов (ФДЭ) включают в себя группу ферментов, которые разрушают фосфодиэфирную связь в молекулах вторичных мессенджеров, а именно цАМФ (циклический аденозинмонофосфат) и цГМФ (циклический гуанозинмонофосфат). Они регулируют локализацию, продолжительность и амплитуду передачи сигналов с участием циклических нуклеотидов в субклеточных доменах. Следовательно, ФДЭ являются важными регуляторами передачи сигнала, опосредованного этими молекулами вторичных мессенджеров. ФДЭ также являются последующими эффекторами цАМФ и цГМФ. ФДЭ тесно связаны с регуляцией передачи каждого конкретного сигнала, и поэтому несколько ФДЭ играют важную роль в модуляции каждой клеточной функции.

Суперсемейство ферментов ФДЭ у млекопитающих подразделяется на 11 семейств, а именно от ФДЭ1 до ФДЭ11. Различные ФДЭ одного и того же семейства функционально связаны, несмотря на то, что их аминокислотные последовательности могут демонстрировать значительное расхождение. ФДЭ имеют разную субстратную специфичность. Некоторые из них являются цАМФ-селективными гидролазами (ФДЭ4, ФДЭ7 и ФДЭ8), в то время как другие являются цГМФ-селективными (ФДЭ5, ФДЭ6 и ФДЭ9). Другие могут гидролизовать как цАМФ, так и цГМФ (ФДЭ1, ФДЭ2, ФДЭ3, ФДЭ10 и ФДЭ11). Существует доказательство того, что многие из этих ФДЭ тесно связаны с различными физиологическими функциями в организме и, следовательно, также могут быть связаны с различными патологическими состояниями. Другим важным фактором в регуляции ФДЭ и их роли в метаболизме циклических нуклеотидов является тот факт, что изоферменты и семейства ФДЭ, как правило, являются в высокой степени тканеспецифичными.

Ферменты ФДЭ часто являются мишенями для фармакологического ингибирования вследствие их уникального распределения в тканях, структурных свойств и функциональных свойств. Ингибиторы ФДЭ могут продлевать или усиливать действие физиологических процессов, опосредованных цАМФ или цГМФ, путем ингибирования их деградации ФДЭ. Считается, что селективные и неселективные ингибиторы ФДЭ являются новыми перспективными терапевтическими средствами при некоторых заболеваниях. Селективные ингибиторы ФДЭ применяются, а также исследуются на возможность их применения, при широком спектре заболеваний, в том числе:

(i) Ингибитор ФДЭ1 винпоцетин был исследован в клинических испытаниях на предмет его нейропротекторного действия. Винпоцетин также обладает антиоксидантной активностью и противоязвенной активностью.

(ii) Ингибиторы ФДЭ2 были исследованы на предмет их применения при сепсисе, когнитивных расстройствах и синдроме острой дыхательной недостаточности (ARDS).

(iii) Ингибиторы ФДЭ3 применяются при лечении перемежающейся хромоты и предлагаются для применения при заболеваниях дыхательных путей и регуляции детородной функции (мужские и женские контрацептивы). Также было показано, что ингибитор ФДЭ3 обладает противоастматическим действием, благодаря, как противовоспалительным, так и бронхолитическим свойствами. При лечении атопического дерматита смешанный ингибитор ФДЭ3-ФДЭ4 зардаверин показал себя более сильным ингибитором пролиферации Т-клеток, чем ролипрам, селективный ингибитор ФДЭ4.

(iv) Ингибиторы ФДЭ4 продемонстрировали свой потенциал при лечении астмы, ХОБЛ, аллергического ринита, псориаза, рассеянного склероза, депрессии, болезни Альцгеймера, потери памяти, рака, дерматита и шизофрении. Пентоксифиллин, ингибитор ФДЭ4, обладает потенциалом по улучшению кровообращения и может применяться для лечения диабета, фиброзных расстройств, повреждения периферических нервов и микрососудистых повреждений. Ингибиторы ФДЭ4 также показали свою эффективность при лечении СПИДа, артритов, таких как ревматоидный, псориатический и остеоартрит, бронхита, эндотоксинового шока, воспалительных заболеваний кишечника, таких как язвенный колит и болезнь Крона, синдрома острой дыхательной недостаточности у взрослых (ARDS), аллергического конъюнктивита, синдрома сухого глаза и других воспалительных заболеваний. Ингибиторы ФДЭ4 подавляют высвобождение цитокинов и других сигналов воспаления и ингибируют выработку активных форм кислорода. Кризаборол представляет собой нестероидное, местно вводимое борсодержащее противовоспалительное соединение, которое ингибирует активность ФДЭ4 и тем самым подавляет высвобождение TNF-α, IL-12, IL-23 и других цитокинов. Кризаборол одобрен для лечения атопического дерматита (экзема) от легкой до умеренной степени у пациентов в возрасте 2 лет и старше. Кризаборол также прошел фазу I и фазу II клинических испытаний у пациентов с псориазом. Апремиласт, который также является ингибитором ФДЭ4, был одобрен для лечения псориатического артрита и псориаза. Было показано, что ингибиторы ФДЭ4 обладают благотворным действием при лечении воспаления легких и фиброза.

(v) Ингибиторы ФДЭ5 применялись для лечения эректильной дисфункции, сексуальной дисфункции у женщин, сердечно-сосудистых заболеваний, преждевременной эякуляции, инсульта, лейкемии и почечной недостаточности. Силденафил (ингибитор ФДЭ5) также в настоящее время исследуется на предмет его мио- и кардиопротекторного действия, при этом особый интерес представляет терапевтическая ценность соединения при лечении мышечной дистрофии Дюшенна. ФДЭ5 широко экспрессируется в легочной ткани и, по-видимому, активируется при легочной артериальной гипертензии (ЛАГ). Ингибиторы ФДЭ5 силденафил и тадалафил являются двумя препаратами из препаратов, рекомендованных в качестве терапии первой линии для пациентов с ЛАГ, в функциональных классах II или III Всемирной организации здравоохранения.

(vi) Ингибиторы ФДЭ7 применялись при лечении воспалительных заболеваний. Было показано, что соединение-ингибитор ФДЭ7А ASB16165 ингибирует активацию Т-лимфоцитов и подавляет воспаление кожи и нарушает пролиферацию кератиноцитов как in vitro, так и in vivo. Исследования показывают, что ФДЭ7А может регулировать выработку TNF-α в кератиноцитах цАМФ-зависимым образом, а также уменьшать воспаление кожи у животной модели. Специфичные ингибиторы ФДЭ7 также были описаны как перспективные новые лекарственные средства для лечения неврологических расстройств, благодаря их способности повышать внутриклеточные уровни цАМФ.

(vii) Ингибиторы ФДЭ9 были исследованы на предмет их применимости для лечения болезни Альцгеймера.

(viii) Ингибиторы ФДЭ 10 показали свою эффективность в лечении шизофрении и болезни Хантингтона.

Неселективные ингибиторы ФДЭ, такие как кофеин, аминофиллин, пентоксифиллин, теофиллин и т.д. обладают эффектом улучшения кровообращения и могут применяться для лечения диабета, фиброзных расстройств, повреждения периферических нервов и микрососудистых повреждений или в качестве бронходилататоров. Таким образом, даже неселективные ингибиторы фосфодиэстеразы имеют терапевтическое значение и, как было показано, ингибируют синтез TNF-α и лейкотриена и уменьшают воспаление и врожденный иммунитет.

Воспалительные клетки, такие как базофилы, B-лимфоциты, дендритные клетки, эндотелиальные клетки, эозинофилы, макрофаги, тучные клетки, моноциты, нейтрофилы и T-лимфоциты экспрессируют различные ФДЭ на разных уровнях, и ингибирование ФДЭ в этих клетках может приводить к противовоспалительным эффектам в разных тканях. Эти клетки также участвуют в нескольких иммунологических функциях и вовлечены в патогенез многих заболеваний.

Ингибиторы фосфодиэстеразы показали свою эффективность в лечении различных воспалительных заболеваний кожи. Кожные заболевания, такие как псориаз, дерматит или экзема, угревая сыпь, розацеа, имеют сложную патологию с некоторыми общими путями, вовлеченными во многие из этих заболеваний. Некоторые кожные заболевания, такие как угревая сыпь и дерматит, могут быть вызваны бактериальными инфекциями, но также могут иметь воспалительный компонент. Альтернативно, воспалительные кожные заболевания вызываются причинами, отличными от бактериальной инфекции (неинфекционного происхождения), например, расстройство иммунной системы, прием лекарств, пищевая аллергия, эмоциональный стресс, ультрафиолетовое излучение, мыло и ароматизаторы, аллергены и т. д. В группе вариантов осуществления изобретения описанные здесь соединения формулы I являются пригодными для лечения таких воспалительных заболеваний кожи, как псориаз, розацеа или дерматит. В другой группе вариантов осуществления изобретения описанные здесь соединения формулы I являются пригодными для лечения таких воспалительных заболеваний кожи, как псориаз или розацеа. В альтернативной группе вариантов осуществления изобретения описанные здесь соединения формулы I являются пригодными для лечения вторичного воспаления, связанного с кожными заболеваниями, которые могут первоначально вызываться бактериальными инфекциями. В других вариантах осуществления изобретения описанные здесь соединения формулы I являются пригодными для лечения дерматита или экземы, не связанных с первоначальной микробной инфекцией или не возникающих из-за нее.

Псориаз включает в себя без ограничений бляшковидный псориаз (обыкновенный псориаз), каплевидный псориаз, обратный псориаз, эритродермический псориаз и пустулезный псориаз, имеющие различные клинические признаки и распространенность среди больных псориазом. Дерматит включает в себя без ограничений атопический дерматит, контактный дерматит, застойный дерматит, дисгидротический дерматит, нумуллярный дерматит, нейродермит, себорейный дерматит и тому подобное. Розацеа включает в себя без ограничений, эритематозно-телеангиэктатическую розацеа, папулопустулярную розацеа, фиматозную розацеа, глазную розацеа и тому подобное. Эффективное лечение кожных заболеваний, таких как псориаз, розацеа и дерматит, требует лечения различных воспалительных процессов, вовлеченных в патогенез заболевания.

Псориаз характеризуется гиперплазией эпидермальных кератиноцитов, ангиогенезом и инфильтрацией Т-лимфоцитов, нейтрофилов и других типов лейкоцитов в пораженную кожу. Предполагается, что ответ пролиферативного кератиноцита обусловлен активацией клеточной иммунной системы, при которой в патогенезе участвуют Т-клетки, дендритные клетки и различные связанные с иммунитетом цитокины и хемокины. Кроме того, в патогенезе псориаза определенную роль играют гистамин и протеазы. В настоящее время псориаз рассматривается как аутоиммунное заболевание, опосредованное Т-лимфоцитами, и новые биологические методы лечения, напавленные на Т-клетки, только недавно вошли в рутинную клиническую практику в виде моноклональных антител к IL-17 и IL-23, что указывает на важность пути с участием IL-17/IL-23 в патогенезе псориаза. Однако современные наблюдения показывают, что хотя активированные Т-лимфоциты играют бесспорную роль в патогенезе псориаза, существуют и другие регуляторные системы, которые способствуют воспалительным и пролиферативным процессам псориаза. В настоящее время считается, что в патогенезе псориаза участвуют кератиноциты, NK-клетки, плазмоцитоидные дендритные клетки, макрофаги, которые выделяют несколько цитокинов, таких как TNF-α, IL-6, IL-β, IFN-γ, что приводит к активации миелоидных дендритных клеток, которые выделяют IL-23 и IL-12 для активации клеток Th-17 и Th-1. Активированные клетки Th-17 высвобождают цитокины, такие как IL-17A, IL-17F и IL-22, тогда как активированные клетки Th-1 высвобождают TNF-α и IFN-γ, которые активируют кератиноциты, которые, в свою очередь, высвобождают несколько цитокинов и хемокинов, тем самым поддерживая состояние заболевания. Было показано, что ингибирование ФДЭ снижает уровень цитокинов, вовлеченнных в путь IL-17/IL-23. Одна из таких регуляторных систем включает в себя циклические нуклеотиды, которые играют ключевую роль при псориазе. Медиаторная система, цАМФ-цГМФ как система включения-выключения, не так проста, как изначально считалось, и цАМФ может либо стимулировать, либо ингибировать пролиферацию клеток. Было показано, что ингибиторы ФДЭ, аминофиллин и теофиллин, которые повышают уровни цАМФ, оказывают благотворное действие при лечении псориаза.

Повышенная активность цАМФ-фосфодиэстеразы в лейкоцитах периферической крови связана с иммунной и воспалительной гиперреактивностью, которая характерна для атопического дерматита. Атопический дерматит реагирует на различные ингибиторы ферментов. Способность селективных высокоэффективных ингибиторов ФДЭ снижать продукцию простагландина E2, IL-10 и IL-4 в культурах атопических мононуклеарных лейкоцитов была продемонстрирована in vitro. Клиническое исследование ингибитора ФДЭ4 у 20 пациентов с атопическим дерматитом показало значительное снижение всех воспалительных параметров. Ингибиторы ФДЭ модулируют несколько путей, способствующих усилению иммунных и воспалительных реакций, которые характерна для атопического дерматита. Таким образом, ингибиторы ФДЭ могут обеспечить работоспособную альтернативу чрезмерной зависимости от терапии кортикостероидами при атопических заболеваниях, таких как псориаз, экзема и розацеа. Кроме того, было описано вовлечение цитокинов IL-23 и Thl7 при аллергическом контактном дерматите, для которого характерно вовлечение в это заболевание таких цитокинов, как IL-17A, IL-17F и IL-22.

Розацеа представляет собой хроническое и потенциально разрушительное для жизни заболевание, главным образом воспаление кожи лица, часто характеризуемое вспышками и ремиссиями. Оно проявляется покраснением на щеках, носу, подбородке или лбу. В некоторых случаях розацеа также может возникнуть на шее, груди, коже головы или ушах; это заболевание может быть обусловлено факторами, связанными с кровотоком, кожными бактериями, микроскопическими кожными клещами (демодекс), раздражением фолликулов, повреждением подкожной соединительной ткани солнечными лучами, аномальной иммунной или воспалительной реакцией или психологическими факторами. Апремиласт (ингибитор ФДЭ 4) был исследован на небольшой популяции на предмет его эффективности при лечении розацеа, и этот препарат показал многообещающие результаты. Недавнее исследование показало участие клеток Th1/Th17 в патогенезе всех подтипов розацеа.

Ингибиторы ФДЭ могут являться альтернативой при лечении фиброзно-кожных заболеваний с различными путями введения, включая местное введение. Ингибитор ФДЭ5 силденафил является эффективным лекарственным препаратом для лечения проявлений склеродермической васкулопатии, таких как феномен Рейно (RP), дигитальные язвы (DU); и/или некрозы (N); 00, и легочная гипертензия (PH). Таким образом, ингибиторы ФДЭ специфичные в отношении обоих циклических нуклеотидов (цАМФ и цГМФ) могут обеспечить различные варианты лечения склеродермии. Это иллюстрируется использованием ингибитора ФДЭ3 цилостазол для лечения синдрома Райно (RS).

Таким образом, ингибиторы ФДЭ могут играть ключевую роль в облегчении некоторых иммунных и кожных заболеваний. Многие из этих иммунных и кожных заболеваний лечатся кортикостероидами и лекарственными препаратами, имеющими несколько ограничений их применения и проблем, связанных с безопасностью. Поэтому существует потребность в безопасных и эффективных композициях для лечения расстройств, связанных с ФДЭ.

Сущность изобретения

Настоящее изобретение частично основано на том факте, что определенные антипаразитарные препараты (например, определенные антигельминтные лекарственные препараты, определенные антипротозойные лекарственные препараты) могут ингибировать фосфодиэстеразы. Настоящее изобретение представляет собой открытие того факта, что композиции, содержащие соединения Формулы I, являются применимыми для лечения расстройств, связанных с фосфодиэстеразой, у млекопитающего.

где R1 представляет собой –H или –COCH₃; R2 представляет собой –H, –Cl, –Br или –I; R3 представляет собой –H, –Cl, –Br или –I; R4 представляет собой –H или –Cl; Ar представляет собой

,

,

или

где R₅ представляет собой –H, –NO₂ или –Br; R₆ представляет собой –H или –Cl; R₇ представляет собой –H или –OH, –Cl; R₈ представляет собой –H или –Cl;

Соединения Формулы I являются производными салициламида. В одном варианте осуществления изобретения соединения Формулы I включают в себя антипаразитарные лекарственные средства, такие как никлозамид, оксиклозанид, рафоксанид, клозантел, дибромсалан, метабромсалан, трибромсалан и нитазоксанид. В другом варианте осуществления соединения Формулы I в себя антипаразитарные лекарственные средства, такие как никлозамид, оксиклозанид, рафоксанид, клозантел, дибромсалан, метабромсалан и трибромсалан. Было обнаружено, что соединения Формулы I. являются ингибиторами фосфодиэстераз и, следовательно, могут обеспечить безопасное и эффективное лечение связанных с ФДЭ расстройств. Соответственно, в настоящее изобретение относится к способу лечения расстройств, связанных с фосфодиэстеразой (ФДЭ), путем введения нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества соединений Формулы I, включая, например, антипаразитарные лекарственные средства, такие как никлозамид, оксиклозанид, рафоксанид, клозантел, дибромсалан, метабромсалан, трибромсалан и нитазоксанид, а также их пролекарства, метаболиты или их фармацевтически приемлемые соли, сольваты и полиморфы в фармацевтически приемлемом носителе, вспомогательном веществе или разбавителях.

Соединения Формулы I или их пролекарства или метаболиты или их фармацевтически приемлемые соли, сольваты и полиморфы могут быть введены в подходящей форме. Млекопитающим может быть примат, собака, кошка, корова, овца, свинья, верблюд, коза, грызун или лошадь. Предпочтительно примат является человеком.

Связанные с ФДЭ расстройства можно лечить путем введения терапевтически эффективного количества соединения Формулы I, которое может включать в себя без ограничений никлозамид, оксиклозанид, рафоксанид, клозантел, дибромсалан, метабромсалан, трибромсалан и нитазоксанид, а также их пролекарства или метаболиты, или их фармацевтически приемлемые соли, сольваты и полиморфы в фармацевтически приемлемом носителе, вспомогательном веществе или разбавителях. Введение можно осуществлять ежечасно, ежедневно, еженедельно или ежемесячно. Ежедневное введение может включать от одного до шести введений в сутки.

Соединение формулы-I можно вводить пероральным, внутривенным, внутрибрюшинным, офтальмологическим, парентеральным, местным, трансдермальным, подкожным, субдуральным, внутривенным, внутримышечным, внутрикожным, интратекальным, внутрибрюшинным, внутримозговым, внутриартериальным, внутриочаговым, локализованным или легочным путем. При пероральном введении дозировка соединения Формулы I предпочтительно составляет от примерно 1 до 3000 мг в день в форме таблетки, капсулы, раствора, суспензии, сиропа или зубной пасты. При введении офтальмологическим путем дозировка соединения Формулы I предпочтительно составляет от 0,001 до 10,0% (мас./об.), и композиция вводится в количестве от 1 до 3 капель (то есть от 0,05 до 0,15 мл) за один раз до 3 раз в день. Офтальмологическая композиция вводится в виде глазных капель или глазного геля. При введении местным путем дозировка соединения Формулы I предпочтительно составляет от 0,001% до 20,0% (мас./мас.), и такое введение осуществляется до трех раз в день в количестве, достаточном для покрытия композицией пораженной области слоем толщиной приблизительно от 0,1 мм до 5 мм. Композиция для местного применения может быть в форме крема, геля, пластыря, мази, тампона для наружного применения, эмульсии, пасты, шампуня, раствора или спрея, наносимых при помощи аппликатора или без него. При введении внутривенным, внутрикожным, внутриочаговым или подкожным путем концентрация терапевтически активного ингредиента соединения Формулы I предпочтительно составляет примерно от 0,001% до 10,0% (мас./об.), и введение осуществляется до 3 раз в сутки, с максимальной дозой 500 мг в каждой инъекции или инфузии. Легочную композицию можно вводить млекопитающему при помощи ингалятора, небулайзера или испарителя в концентрации от примерно 0,001% до 10,0% (мас./мас.), до 10 раз в сутки.

Настоящее изобретение также относится к композиции и способам лечения связанных с ФДЭ расстройств, опосредованных чрезмерной активацией одной или нескольких изоформ ФДЭ у млекопитающего, включающим в себя введение терапевтически эффективного количества соединения Формулы I, его пролекарств или метаболитов или фармацевтически приемлемых солей, сольватов и полиморфов нуждающемуся в этом пациенту. Предпочтительно соединение Формулы I представляет собой никлозамид, оксиклозанид, рафоксанид, клозантел, дибромсалан, метабромсалан, трибромсалан и нитазоксанид. Терапевтически эффективное количество соединения Формулы I, его пролекарства или его фармацевтически приемлемой соли или сольватов может находиться в фармацевтически приемлемом носителе, вспомогательном веществе или разбавителе.

Предпочтительно, расстройства, связанные с ФДЭ, представляют собой легочные расстройства, например астма, бронхит, хроническая обструктивная болезнь легких (ХОБЛ), синдром острой дыхательной недостаточности у взрослых (ARDS), легочная артериальная гипертензия; аллергические заболевания, такие как, например, аллергический ринит и аллергический конъюнктивит; эндотоксиновый шок; воспалительные заболевания кишечника, например язвенный колит и болезнь Крона; заболевания суставов, такие как артрит, псориатический артрит и остеоартрит; ишемическую болезнь сердца; перемежающуюся хромоту; психические расстройства, например, деменция, депрессия, шизофрения; эректильную дисфункцию; мышечную дистрофию Дюшенна; мужское и женское бесплодие; синдром сухого глаза, псориаз, розацеа, дерматит; фиброзные кожные заболевания, такие как келоиды, гипертрофическое рубцевание, коллагенома и системный склероз или склеродермия, очаговую алопецию, красный плоский лишай, эксфолиативную пузырчатку, обыкновенную пузырчатку, хронический периодонтит, герпетиформный дерматит, витилиго и буллезный пемфигоид. В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения нитазоксанид в комбинации или с противовирусным соединением или с антибиотиком широкого спектра действия не включает лечение артрита, остеоартрита и бурсита. В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения только нитазоксанид (то есть не в комбинации с противовирусным соединением или антибиотиком широкого спектра действия) вводят нуждающемуся в этом субъекту для лечения артрита, остеоартрита и бурсита.

Описание изобретения

Настоящее изобретение относится к композициям, содержащим соединения Формулы I, которые представляют собой антипаразитарные лекарственные средства, их пролекарства и соли, сольваты и полиморфы, а также все возможные диастереомеры и все энантиомерные формы, а также все комбинации диастереомеров и энантиомеров, включая рацемические смеси и все таутомерные формы.

Субъектом настоящего изобретения может быть любой человек или животное с расстройствами, связанными с ФДЭ. Животное может быть млекопитающим. Млекопитающим может быть собака, кошка, примат, корова, овца, свинья, верблюд, коза, грызун или лошадь. Предпочтительно примат является человеком.

В одном варианте осуществления изобретения соединение Формулы I представляет собой никлозамид, который, помимо того, что он является антигельминтным и пискицидным средством, также считается эффективным в лечении новообразований, протозойных и паразитарных инфекций, акне бактериального происхождения, тяжелого острого респираторного синдрома (ТОРС), шистосомного дерматита, а также применяется как препарат против сибиреязвенного токсина, как противоопухолевый препарат, и для предотвращения и/или лечения легочного фиброза. В другом варианте осуществления изобретения соединения Формулы I представляют собой галогенированные салициланилидные соединения, такие как клозантел, рафоксанид, оксиклозанид и никлозамид, которые применяются для лечения кожных заболеваний, таких как импетиго, инфицированный дерматит (например, инфицированный атопический дерматит), инфицированная экзема, инфицированные раны кожи, инфицированные ожоги и инфицированные язвы (например, диабетические язвы), возникающие в результате бактериальных инфекций, вызываемых грамположительными бактериями, такими как Staphylococcus, в частности Staphylococcus aureus, и Streptococcus, в частности Streptococcus pyogenes. Оксиклозанид и рафоксанид являются салициланилидами Формулы I, которые применяются для лечения и контроля фасциолеза у жвачных животных. Бромсаланы (например, дибромсалан и трибромсалан) представляют собой бифенольные соединения, используемые в качестве фасциолицидов, эффективных против ювенильных трематод. Бромированные производные, включая дибромсалан, метабромсалан и трибромсалан, используются в качестве дезинфицирующих средств с антибактериальной и противогрибковой активностью. Нитазоксанид, пролекарство, которое при пероральном введении быстро гидролизуется до его активного метаболита, тизоксанида, применяется для лечения инфекционной диареи, болезни, вызванной другими простейшими и/или гельминтами. Нитазоксанид в настоящее время проходит фазу II клинических испытаний для лечения гепатита C в комбинации с пэгинтерфероном альфа-2а и рибавирином. Сам по себе нитазоксанид продемонстрировал предварительные доказательства эффективности лечения хронического гепатита B. В последнее время было предложено применение нитазоксанида для лечения микобактерий туберкулеза. Соответственно, большинство известных соединений Формулы I обычно являются признанными антиинфекционными средствами (например, антибактериальными, антипаразитическими, антипротозойными препаратами). В настоящем изобретении описаны способы применения соединений Формулы I по новому назначению для лечения состояний, которые не связаны с инфекциями, то есть для состояний, связанных с ФДЭ.

Соединения Формулы I включают в себя без ограничений никлозамид, оксиклозанид, рафоксанид, клозантел, дибромсалан, метабромсалан, трибромсалан и нитазоксанид, их пролекарства, их метаболиты или их фармацевтически приемлемые соли, сольваты и полиморфы, которые неожиданно оказались эффективными в ингибировании одной или нескольких фосфодиэстераз, таких как ФДЭ1, ФДЭ2, ФДЭ3, ФДЭ4, ФДЭ5, ФДЭ7, ФДЭ9 и ФДЭ10, и, следовательно, могут применяться для лечения расстройств, связанных с ФДЭ. Расстройства, связанные с ФДЭ, связанные с повышенной активностью PDE, включают в себя без ограничений легочные расстройства, например астма, бронхит, хроническая обструктивная болезнь легких (ХОБЛ), легочная артериальная гипертензия; аллергические заболевания, например, аллергический ринит и аллергический конъюнктивит; эндотоксиновый шок; воспалительные заболевания кишечника, например язвенный колит и болезнь Крона; заболевания суставов, такие как артрит, псориатический артрит и остеоартрит; ишемическую болезнь сердца; перемежающуюся хромоту; психические расстройства, например, деменция, депрессия, шизофрения; эректильную дисфункцию; мышечную дистрофию Дюшенна; мужское и женское бесплодие; синдром сухого глаза, псориаз, розацеа, дерматит; фиброзные кожные заболевания, например келоиды, гипертрофическое рубцевание, коллагенома и системный склероз или склеродермию и другие заболевания. Ингибирование ФДЭ оказывает терапевтическое воздействие на расстройство, связанное с ФДЭ, как показано в разделе Примеры.

Было установлено, что соединения Формулы I ингибируют высвобождение нескольких цитокинов из мононуклеарных клеток периферической крови (МКПК), в частности цитокинов Th-17, таких как IL-17A, IL-17F и IL-22, а также ингибируют высвобождение цитокинов IL-12 (см. Пример 5). Эти цитокины относятся к числу ФДЭ-регулируемых цитокинов. Учитывая это эффективное ингибирование цитокинов Th-17, соединения Формулы I можно применять для лечения нескольких таких заболеваний, как очаговая алопеция, красный плоский лишай, эксфолиативная пузырчатка, обыкновенная пузырчатка, хронический периодонтит, герпетиформный дерматит, витилиго и буллезный пемфигоид.

Один вариант осуществления настоящего изобретения включает в себя композиции соединений, имеющих структуру Формулы I, для лечения расстройств, связанных с фосфодиэстеразой, у млекопитающего,

где R1 представляет собой –H или –COCH₃; R2 представляет собой –H, –Cl, –Br или –I; R3 представляет собой –H, –Cl, –Br или –I; R4 представляет собой –H или –Cl; Ar представляет собой

или

где R₅ представляет собой –H, –NO₂ или –Br; R₆ представляет собой –H или –Cl; R₇ представляет собой –H или –OH, –Cl; R₈ представляет собой –H или –Cl.

Также в одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения расстройств, связанных с фосфодиэстеразой у млекопитающего, включающему в себя введение терапевтически эффективного количества композиции, содержащей соединение Формулы I или его пролекарство или метаболит или его фармацевтически приемлемые соли, сольваты и полиморфы в фармацевтически приемлемом носителе, вспомогательном веществе или разбавителях нуждающемуся в таком лечении субъекту.

В одном аспекте настоящее изобретение относится к способу ингибирования фосфодиэстеразы, включающему в себя контактирование фосфодиэстеразы с соединением Формулы I

где R₁ представляет собой –H или –COCH₃; R₂ представляет собой –H, –Cl, –Br или –I; R₃ представляет собой –H, –Cl, –Br или –I; R₄ представляет собой –H или –Cl; Ar представляет собой

или

где R₅ представляет собой –H, –NO₂ или –Br; R₆ представляет собой –H или –Cl; R₇ представляет собой –H,–OH или –Cl; R₈ представляет собой –H или –Cl; и их энантиомерами, диастереомерами, пролекарствами или метаболитами или их фармацевтически приемлемыми солями, сольватами и полиморфами.

Определения

Термин «терапевтически эффективное количество» относится к количеству, требуемому для уменьшения тяжести симптомов расстройств, связанных с ФДЭ.

Псориаз может включать такие виды псориаза, как бляшковидный псориаз (обыкновенный псориаз), каплевидный псориаз, обратный псориаз, эритродермический псориаз и пустулезный псориаз. Псориаз может поражать один или несколько органов организма одновременно, включая кожу головы.

Дерматит может включать в себя различные виды дерматита, такие как атопический дерматит, контактный дерматит, застойный дерматит, дисгидротический дерматит, нумуллярный дерматит, нейродермит, себорейный дерматит.

Розацеа может включать в себя эритематозно-телеангиэктатическую розацеа, папулопустулярную розацеа, фиматозную розацеа и глазную розацеа.

Способы введения

В одном аспекте настоящее изобретение относится к применению терапевтически эффективного количества антипаразитарных лекарственных средств Формулы I, таких как никлозамид, оксиклозанид, рафоксанид, клозантел, дибромсалан, метабромсалан, трибромсалан и нитазоксанид, их пролекарств, их метаболитов или их фармацевтически приемлемых солей, сольватов и полиморфов в лечении расстройств, связанных с ФДЭ, включая легочные расстройства, например астма, бронхит, хроническая обструктивная болезнь легких (ХОБЛ), легочная артериальная гипертензия; аллергические заболевания, например, аллергический ринит и аллергический конъюнктивит; эндотоксиновый шок; воспалительные заболевания кишечника, например язвенный колит и болезнь Крона; заболевания суставов, такие как артрит, псориатический артрит и остеоартрит; ишемическую болезнь сердца; перемежающуюся хромоту; психические расстройства, например, деменция, депрессия, шизофрения; эректильную дисфункцию; мышечную дистрофию Дюшенна; мужское и женское бесплодие; синдром сухого глаза, псориаз, розацеа, дерматит; фиброзные кожные заболевания, например келоиды, гипертрофическое рубцевание, коллагенома и склеродермия, очаговую алопецию, красный плоский лишай, эксфолиативную пузырчатку, обыкновенную пузырчатку, хронический периодонтит, герпетиформный дерматит, витилиго и буллезный пемфигоид. Было обнаружено, что соединения Формулы I лечат расстройства, связанные с ФДЭ, путем ингибирования ФДЭ и различных индуцируемых ей механизмов, включая без ограничения ингибирование высвобождения цитокинов и хемокинов; ингибирование высвобождения одного или нескольких маркеров воспаления, таких как TNF-α, STAT3, NFκB и их комбинации.

Антипаразитарные лекарственные средства Формулы I, такие как никлозамид, оксиклозанид, рафоксанид, клозантел, дибромсалан, метабромсалан, трибромсалан и нитазоксанид, их пролекарства, их метаболиты и их соли, сольваты и полиморфы, предназначенные для лечения расстройств, связанных с ФДЭ, вводят субъекту в физиологически приемлемом носителе. Лечение некоторых расстройств, связанных с ФДЭ, может проводиться различными способами введения, включая без ограничений пероральное введение, офтальмологическое введение, назальное введение, парентеральное введение, включая местное, местное кожное, а также трансдермальное, подкожное (s.c.), субдуральное, внутривенное (i.v.), внутримышечное (i.m.), внутрикожное интратекальное, внутрибрюшинное (i.p.), интрацеребральное, внутриартериальное или внутриочаговое введение, локализованное введение (например, хирургическое применение или хирургический суппозиторий) и легочное введение (например, аэрозоли, ингаляция или порошок) и как описано далее ниже.

Правильная дозировка фармацевтической композиции, содержащей антипаразитарные лекарственные средства Формулы I, будет варьироваться в зависимости от фармацевтической композиции, способа применения, а также от конкретных места, организма-хозяина и связанного с ФДЭ расстройства, подлежащего лечению. Другие факторы, включая возраст, массу тела, пол, рацион питания, время введения, скорость выведения, состояние организма-хозяина, комбинации лекарственных препаратов, аллергическую реакцию и тяжесть заболевания, могут быть легко учтены лечащим врачом или специалистом в данной области техники. Доза заявленных соединений зависит от нескольких факторов, в том числе от способа введения, подлежащего лечению заболевания, тяжести заболевания, а также от того, следует ли это заболевание лечить или предотвратить.

Введение можно осуществлять непрерывно или периодически в пределах максимально переносимой дозы. Введение может проводиться, например, ежечасно, один раз каждые два часа, один раз каждые три часа, один раз каждые шесть часов, один раз каждые восемь часов, один раз каждые двенадцать часов, ежедневно, через день, еженедельно, каждые две недели, каждые три недели или ежемесячно, при необходимости. Доза может вводиться от одного дня до 12 месяцев в зависимости от заболевания или состояния, которое нужно лечить или предотвращать.

Местный путь введения является предпочтительным путем лечения кожных заболеваний, таких как псориаз, розацеа, дерматит и фиброзные заболевания, такие как келоиды, гипертрофическое рубцевание, коллагенома и склеродермия, а также таких заболеваний, как очаговая алопеция, красный плоский лишай, эксфолиативная пузырчатка, обыкновенная пузырчатка, хронический периодонтит, герпетиформный дерматит, витилиго и буллезный пемфигоид. Композиция для местного кожного введения, содержащая антиаразитарные лекарственные средства Формулы I, действует локально и проникает в такие слои кожи, как роговой слой, другие части эпидермиса и части дермы. Фармацевтическая композиция для местного применения, содержащая антипаразитарные лекарственные средства Формулы I, исключает водостойкую антипенетрантную композицию для местного применения. Подходящие композиции для местного применения могут включать в себя кремы, гели, лосьоны, мыло, шампуни, аэрозоль, бальзам, сыворотку, мусс, пластырь, пасту, спрей, шариковый аппликатор, раствор для местного применения, палочку, влажную салфетку, мазь, салфетку, эмульсию, косметику и любую их комбинацию. Было обнаружено, что соединения Формулы I настоящего изобретения являются пригодными при лечении кожных заболеваний. Таким образом, настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции для местного применения, для лечения кожных заболеваний, таких как псориаз, розацеа, дерматит и фиброзные кожные заболевания, а также таких заболеваний, как очаговая алопеция, красный плоский лишай, эксфолиативная пузырчатка, обыкновенная пузырчатка, хронический периодонтит, герпетиформный дерматит, витилиго и буллезный пемфигоид, содержащей антипаразитарные лекарственные средства настоящего изобретения, их пролекарства или их фармацевтически приемлемую соль или сольваты в фармацевтически приемлемом носителе, вспомогательном веществе или разбавителе для местного применения. Композиция для местного применения, содержащая соединение Формулы I настоящего изобретения, предпочтительно находится в форме геля, пластыря, раствора для местного применения, крема, мази, тампона для местного применения, эмульсии, шампуня, спрея или лосьона. Композиция может находиться ​​в форме с замедленным высвобождением.

В зависимости от способа введения антипаразитарные лекарственные средства Формулы I настоящего изобретения, их пролекарства или метаболиты или фармацевтически приемлемые соли, сольваты и полиморфы могут быть приготовлены различными способами. Концентрация соединения Формулы I в препарате для местного применения обычно может варьироваться от концентрации примерно 0,001% до 20,0% (мас./мас.), вводимой от одного до десяти раз в день в течение от одной недели до 12 месяцев. Предпочтительно концентрация антипаразитарных лекарственных средств в препарате для местного применения может варьироваться от концентрации примерно 0,001% до 10,0% (мас./мас.). При лечении кожных заболеваний, таких как псориаз, розацеа, дерматит и фиброзные кожные заболевания, композицию, содержащую соединение Формулы I настоящего изобретения в качестве активного ингредиента, предпочтительно вводить нуждающемуся в этом субъекту посредством местного препарата, имеющего концентрацию антипаразитарных лекарственных средств настоящего изобретения примерно от 0,001% до 10,0% (мас./мас.) в подходящем фармацевтическом носителе. При лечении заболеваний легких антипаразитарное лекарственное средство может вводиться млекопитающему при помощи ингалятора, небулайзера или испарителя в концентрации от примерно 0,001% до 10,0% (мас./мас.), и предпочтительно от 0,1% до 5% (мас./мас.) от одного до десяти раз в день в течение периода времени от одного дня до 12 месяцев и более.

При пероральном введении доза антипаразитарного лекарственного средства настоящего изобретения предпочтительно составляет от примерно 0,1 до 3000 мг в день (желательно от примерно 0,5 до 2000 мг) от одного до десяти раз в день (предпочтительно от одного до пяти раз в день, более желательно от одного до трех раз в день) в течение периода времени от одного дня до 12 месяцев и более. При введении офтальмологическим путем доза антипаразитарного лекарственного средства настоящего изобретения предпочтительно находится в концентрации от 0,001% до 10,0% (мас./об.) При введении от одной до десяти капель, т.е. от 0,05 мл до 0,5 мл (предпочтительно от одной до трех капель, т.е. от 0,05 мл до 0,15 мл) за один раз до десяти раз в день (предпочтительно от одного до пяти раз в день, более желательно от одного до трех раз в день) в течение периода времени от одного дня до 12 месяцев или более. При введении местным путем доза антипаразитарного лекарственного средства настоящего изобретению предпочтительно находится в концентрации от 0,001% до 20,0% (мас./мас.), и введение осуществляется от одного до десяти раз в день в течение периода времени от одной недели до 12 месяцев или более, в количестве, достаточном для покрытия пораженной области слоем композиции толщиной приблизительно от 0,1 до 5 мм. При введении внутривенным или внутримышечным путем концентрация терапевтически активного ингредиента антипаразитарного лекарственного средства настоящего изобретения предпочтительно составляет от примерно 0,001% до 10,0% мас./об., и введение осуществляется от одного до десяти раз в день, с максимальной дозой 500 мг за одно применение в течение периода времени от одного дня до 12 месяцев и более.

Предпочтительно, в антипаразитарных лекарственных средствах настоящего изобретения, их пролекарствах или фармацевтически приемлемых солях, сольватах и полиморфах концентрация такого терапевтически активного ингредиента в композиции для перорального введения может варьироваться от концентрации примерно от 1 до 3000 мг в день для любого из расстройств, связанных с ФДЭ. Концентрация антипаразитарных лекарственных средств настоящего изобретения в композиции для офтальмологического введения может варьироваться от концентрации примерно от 0,001 до 10,0% (мас./об.) Концентрация терапевтически активного ингредиента антипаразитарных лекарственных средств настоящего изобретения в композиции для внутривенного, внутрикожного, внутриочагового или внутримышечного введения может варьироваться от концентрации примерно 0,001% до 10,0% (мас./об.).

Для парентерального введения антипаразитарные лекарственные средства настоящего изобретения, их пролекарства или их фармацевтически приемлемые соли, сольваты и полиморфы настоящего изобретения можно вводить в виде инъецируемых доз раствора или суспензии вещества в физиологически приемлемом разбавителе с фармацевтическим носителем, который может представлять собой стерильную жидкость, такую как вода и масла, с добавлением или без добавления поверхностно-активного вещества. Другие приемлемые разбавители включают в себя масла животного, растительного или синтетического происхождения, например, арахисовое масло, соевое масло и минеральное масло. Как правило, гликоли, такие как пропиленгликоль или полиэтиленгликоль (ПЭГ), являются предпочтительными жидкими носителями, особенно для растворов для инъекций. Антипаразитарные лекарственные средства настоящего изобретения, их пролекарства или фармацевтически приемлемые соли, сольваты и полиморфы настоящего изобретения могут вводиться в форме инъекции веществ с замедленным всасыванием или препарата-имплантата, рецептура которых может быть составлена таким образом, чтобы обеспечить контролируемое или замедленное высвобождение активного ингредиента(ов).

Фармацевтические композиции, содержащие антипаразитарные лекарственные средства настоящего изобретения, их пролекарства или фармацевтически приемлемые соли, сольваты и полиморфы, также могут включать в себя фармацевтически приемлемые нетоксичные носители или разбавители, которые являются носителями, обычно используемыми для приготовления фармацевтических композиций для введения животным или людям. Композиции могут также содержать обычные добавки, такие как солюбилизаторы, изотонические агенты, суспендирующие агенты, эмульгирующие агенты, стабилизаторы, повышающие проницаемость агенты, увлажнители и консерванты.

Композиции могут иметь рецептуру, делающую их пригодными для замедленного высвобождения. Антипаразитарные лекарственные средства настоящего изобретения, их пролекарства или фармацевтически приемлемые соли, сольваты и полиморфы настоящего изобретения могут быть введены в форме с длительным высвобождением, например, в форме инъекции веществ с замедленным всасыванием, в форме препарата-имплантата или в форме осмотического насоса, которые могут иметь рецептуру, обеспечивающую замедленное высвобождение активного ингредиента. Имплантаты для композиций с замедленным высвобождением хорошо известны в данной области техники. Имплантаты изготавливаются в виде микросфер, блоков и т.д. с биоразлагаемыми или не биоразлагаемыми полимерами. Например, полимеры молочной кислоты и/или гликолевой кислоты образуют разрушаемый полимер, который хорошо переносится организмом-хозяином.

Пример 1: Расчетная модель(и) прогнозирования действия антипаразитарного препарата никлозамид как сильнодействующего ингибитора фосфодиэстеразы

Скрининг базы данных малых молекул с использованием in-silico технологий докинга показал, что препарат никлозамид является кандидатом в сильнодействующие ингибиторы ФДЭ. GRIP докинг никлозамида наряду с лигандной вариативностью с целью изучения конформационного пространства молекулы проводился для различных изотипических кристаллических структур ФДЭ, как предусмотрено в программном обеспечении VlifeMDS (VLifeMDS версия 4.1: Molecular Design Suite, разработанное NovaLead Pharma Pvt. Ltd., Pune, Индия 2014. В случае ФДЭ4В (1R06) положение докинга подтверждает возможность связывания никлозамида с фосфодиэстеразой, главным образом, за счет двух водородных связей с Thr407, Gln443 и пи-стэкинг-взаимодействий остатков с Phe446 и Phe414. Эти взаимодействия являются общими для многих совместно кристаллизующихся лигандов для структур ФДЭ4В Аналогично, докинг никлозамида в отношении различных кристаллических структур ФДЭ4D и ФДЭ10A, показал многообещающее связывание в соответствующем активном сайте. Таким образом, никлозамид показал способность связываться с одним или несколькими изотипами ФДЭ и, следовательно, может быть перспективным ингибитором ФДЭ. Другие антипаразитарные лекарственные средства Формулы 1 имеют структурное сходство (индекс сходства) с никлозамидом, как показано ниже в Таблице I:

Таблица I: Индекс сходства лекарственных препаратов с никозамидом

Наименование лекарственного препарата Индекс сходства Дибромсалан 0,68 Трибромсалан 0,67 Метабромсалан 0,50 Рафоксанид 0,75 Оксиклозанид 0,76 Клозантел 0,70 Нитазоксанид 0,52 Никлозамид 1,0

Высокое структурное сходство указывает на то, что эти лекарственные средства (соединения Формулы 1) связываются с одним или несколькими изоферментами ФДЭ типом связывания, аналогичным типу связывания никлозамида, и, следовательно, также являются ингибиторами ФДЭ.

Докинг всех других антипаразитарных лекарственных средств Формулы I, таких как нитазоксанид, оксиклозанид, рафоксанид, дибромсалан, метабромсалан и трибромсалан, показал их связывание с различными кристаллическими структурами изоферментов ФДЭ. Обнаружено, что эти препараты эффективно связываются с одной или несколькими структурами изоферментов ФДЭ. Информация о репрезентативном ферменте, взаимодействующем с антипаразитарными лекарственными средствами настоящего изобретения, вместе с их ключевыми взаимодействиями, подобными взаимодействиям с соответствующими совместно кристаллизующимися лигандами, обобщена ниже в Таблице II.

Таблица II: Выявленные при помощи докинга взаимодействия лекарственных препаратов с ФДЭ

Вовлечeнный препарат Тип ФДЭ Код ФДЭ H-связывающие остатки Пи-стэкинг остатки Никлозамид ФДЭ4B 1RO6 Thr407, Gln443 Phe446, Phe414 ФДЭ4D 3SL4 Gln369 Phe372, Phe340 ФДЭ10A 4DFF Gln726 Phe729 Нитазоксанид ФДЭ4B 1XM6 Gln443 Phe446, Phe414, Tyr233 ФДЭ4A 3I8V Gln581, Tyr371 Phe584, Tyr371, His372, His376 ФДЭ10A 4AEL Gln726 Phe729, Phe696 Дибромсалан ФДЭ4D 1Y2C Gln369 Phe372, Phe340 ФДЭ10A 3UUO Gln726 Phe729, Phe696 Оксиклозанид ФДЭ4A 3I8V Tyr371 Phe584 ФДЭ10A 3UUO Gln726 Phe729, Phe696, Tyr524 ФДЭ5 2H44 Gln817 Phe820, Phe786, Tyr612 Рафоксанид ФДЭ7A 1ZKL Asn260 Phe416 ФДЭ10A 4AEL Gln726 Phe729, Phe696 Метабромсалан ФДЭ4B 1RO6 Gln443 Phe446, Phe414 ФДЭ4A 2QYK Gln581 Phe584, Tyr371, Phe552 Трибромсалан ФДЭ5A 3TGE Gln817 Phe820, Phe786, Tyr612 ФДЭ4B 1RO6 Gln443 Phe446 Клозантел ФДЭ4A 3I8V His372 Tyr371, Phe584 ФДЭ7A 1ZKL Asn260 Tyr419 ФДЭ4D 3SL4 Asn209, Gln343, Ser355 Phe372

Приведенные выше результаты показали, что антипаразитарные лекарственные средства настоящего изобретения (соединения Формулы I) обладают способностью связывать и ингибировать один или несколько типов изомеров ФДЭ.

Пример 2: Оценка ингибирующего действия на фосфодиэстеразы никлозамида и нитазоксанида в анализе с радиоактивно меченым ферментом

Для проверки ингибирующей активности никлозамида и нитазоксанида были использованы следующие ферменты: ФДЭ1 (головной мозг крупного рогатого скота), ФДЭ2 (тромбоциты человека), ФДЭ3 (тромбоциты человека), ФДЭ4 (клетки U937 человека), ФДЭ5 (тромбоциты человека). Ферментные анализы были оптимизированы по времени инкубации, концентрации субстрата и метода определения конечного продукта. Субстрат, используемый для ФДЭ1-ФДЭ4, представлял собой 1,01 мкМ [³H] цАМФ + цАМФ; тогда как для ФДЭ5 использовали 1,01 мкМ [³H] цГМФ + цГМФ.

Результаты в % ингибирования различных изотипов ФДЭ никлозамидом и нитазоксанидом приведены ниже в Таблице III:

Таблица III: ингибирование ФДЭ никлозамидом и нитазоксанидом в анализе с радиоактивно меченым ферментом

№ п.п. Тип фосфодиэстеразы % ингибирования 30 мкМ никлозамида % ингибирования
30 мкМ нитазоксанида 1 ФДЭ1 61 18 2 ФДЭ2 16 13 3 ФДЭ3 62 -4 4 ФДЭ4 27 89 5 ФДЭ5 49 9

Приведенные выше данные показывают, что никлозамид обладает хорошей способностью ингибировать многие изотипы ФДЭ. Связывание никлозамида с изотипами ФДЭ было дополнительно подтверждено в экспериментах и подробных исследованиях. Значения ИК50 для никлозамида были определены для ФДЭ3 и ФДЭ1, и было установлено, что они составляют 21,3 мкМ и 72,9 мкМ соответственно. Эти данные показывают, что никлозамид обладает ингибирующей активностью в отношении нескольких ФДЭ. Приведенные выше данные также показывают, что нитазоксанид обладает ингибирующей активностью в отношении ФДЭ4.

Пример 3: In vitro оценка ингибирования ФДЭ лекарственными препаратами при помощи флуоресцентного поляризационного анализа

Был проведен эксперимент по проверке ингибирования различных подтипов целевого фермента фосфодиэстераза (ФДЭ) в анализе in vitro. В эксперименте in vitro были определены значения IC₅₀ никлозамида, нитазоксанида и тизоксанида для 10 подтипах ФДЭ, а именно ФДЭ1A, ФДЭ2A, ФДЭ4A, ФДЭ4B, ФДЭ4C, ФДЭ4D, ФДЭ5A, ФДЭ7A, ФДЭ9A, ФДЭ10A.

Результаты ИК50 трех препаратов для различных подтипов ФДЭ приведены в таблице IV.

Таблица IV: Значения IC₅₀никлозамида, нитазоксанида и тизоксанида для подтипов ФДЭ

Фермент ФДЭ Субстрат IC₅₀ (мкМ) Никлозамид Нитазоксанид Тизоксанид ФДЭ1A цГМФ, Ca-CaM 88,66 137 96,1 ФДЭ2A цГМФ 11,59 67,5 12,0 ФДЭ4A цАМФ 100,00 -- -- ФДЭ4B цАМФ 69,06 >500 >500 ФДЭ4C цАМФ 20,22 -- 366,0 ФДЭ4D цАМФ 111,20 -- -- ФДЭ5A цГМФ 16,70 -- 136,0 ФДЭ7A цАМФ 19,12 -- 134,0 ФДЭ9A цГМФ 59,82 -- -- ФДЭ10A цАМФ 19,05 -- --

Эти данные показывают, что никлозамид, нитазоксанид и тизоксанид ингибируют один или несколько подтипов ФДЭ. Никлозамид является неселективным ингибитором ФДЭ, тогда как нитазоксанид и его метаболит тизоксанид демонстрируют ингибирование ФДЭ2А и ФДЭ1А.

Пример 4: In vitro оценка ингибирования пролиферации кератиноцитов (HaCat)

Был проведен эксперимент по проверке активности ингибирования пролиферации кератиноцитов отдельных соединений Формулы I для установления их применимости при кожных заболеваниях, связанных с гиперпролиферацией кератиноцитов. Клетки HaCaT, являющиеся иммортализованной клеточной линией человека, полученной из кератиноцитов, представляющей гиперпролиферирующие кератиноциты, использовали для оценки антипролиферативного потенциала выбранных соединений с помощью МТТ-анализа.

Результаты в виде % пролиферации клеток по сравнению с контролем для никлозамида, нитазоксанида и тизоксанида в 24 часа, 48 часов и 72 часа приведены в Таблице V.

Таблица V: Ингибирование пролиферации клеток по сравнению с контролем в 24, 48 и 72 часа для никлозамида, нитазоксанида и тизоксанида

Соединение Концентрация мкМ Пролиферация клеток (% от контроля) 24 ч 48 ч 72 ч Никлозамид Контроль 100 100 100 0,01 129,5 124,8 109,5 0,1 114,5 103,8 94 0,5 121,5 70,5 66,5 1 94,8 55 60,4 2,5 94,8 57,9 55 5 96,7 62 40,7 10 107,4 64,1 39,2 25 115,4 74,6 37,6 IC₅₀ Н.д. Н.д. 3,25 мкМ Нитазоксанид Контроль 100 100 100 0,01 126,3 113,7 114,6 0,1 114,3 115,2 102,4 0,5 120,3 113,4 106,2 1 123 110,8 101,7 5 121,6 91,8 82,9 10 103,8 77 69,5 50 92,6 69,6 49,6 100 89,7 61 33,1 IC₅₀ Н.д. Н.д. 39,94 мкМ Тизоксанид Контроль 100 100 100 0,01 98,2 109,5 87,4 0,1 93,9 120,1 82,7 0,5 93,2 108,9 87,7 1 99,7 112,4 81 5 101,6 89,3 77,9 10 94,9 74,1 64,3 50 67,3 59,9 38 100 53,5 38,6 22,8 IC₅₀ Н.д. 59,89 мкМ 22,35 мкМ

Приведенные выше данные показывают, что никлозамид, нитазоксанид и тизоксанид обладают хорошей способностью ингибировать пролиферацию кератиноцитов после 48 часов. Это явно указывает на то, что соединения Формулы I настоящего изобретения могут применяться при лечении одного или нескольких заболеваний кожи, связанных с гиперпролиферацией кератиноцитов.

Пример 5: In vitro оценка влияния лекарственных препаратов на жизнеспособность клеток и выработку цитокинов в МКПК человека

Свежую кровь человека от здорового добровольца собирали в пробирки, содержащие этилендиаминтетрауксусную кислоту (ЭДТА), с антикоагулянтом (5 мМ). Используемая для выращивания среда представляла собой среду RPMI-1640 (с 3% ФБС), которую инкубировали при температуре 37°C в течение 60 минут в инкубаторе в атмосфере, содержащей 5% CO₂, с 1% ДМСО, использованным в качестве носителя. Жизнеспособность клеток проверяли в различные моменты времени с использованием аламарового синего и измеряли флуоресценцию при длине волны возбуждения 544 нм и длине волны испускания 590 нм.

Результаты:

Результаты в виде % жизнеспособности клеток по сравнению с контролем для никлозамида, нитазоксанида и тизоксанида в 24 часа, 48 часов и 72 часа приведены в Таблице VI

Таблица VI: % жизнеспособности клеток МКПК в присутствии лекарственных препаратов в различных концентрациях и в разные моменты времени

Соединение Концентрация (мкМ) % жизнеспособности (±S.E.M.) 24 ч 48 ч 72 ч Контроль ДМСО - 100 ± 0 100 ± 1 100 ± 4 Дексаметазон 3 82 ± 6 78 ± 1 81 ± 1 Доксорубицин 3 110 ± 1 70 ± 5 52 ± 1 Никлозамид 100 27 ± 5 2 ± 1 -2 ± 0 1 94 ± 4 63 ± 0 60 ± 1 0,01 134 ± 7 107 ± 1 107 ± 6 Нитазоксанид 100 76 ± 4 42 ± 4 11 ± 3 1 91 ± 2 105 ± 7 106 ± 2 0,01 97 ± 1 106 ± 8 113 ± 10 Тизоксанид 100 91 ± 5 64 ± 2 25 ± 2 1 84 ± 2 101 ± 4 102 ± 3 0,01 91 ± 3 96 ± 3 115 ± 1

Концентрация выбранных соединений Формулы 1, которой соответствует жизнеспособность клеток 70%, рассматривалась как максимальная концентрация, при которой стимуляция МКПК(PBMC’s) должна быть изучена для соответствующего соединения. Было установлено, что она составляет 2,5 мкМ для никлозамида и 50 мкМ для нитазоксанида и тизоксанида, поэтому концентрации ниже этой концентрации использовали для изучения ингибирования/индукции различных цитокинов при стимуляции МКПК. Все измерения проводили в трижды.

Используемые стимуляторы:

МКПК стимулировали различными стимуляторами следующим образом:

a. Клетки подвергали воздействию стимулятора LPS в концентрации 100 нг/мл в течение 18 часов для стимуляции TNF-α, IL-6, IFN-γ, IL10, IL-Ιβ

b. Клетки подвергали воздействию стимулятора IFN-γ + LPS в концентрации 100 нг/мл + 1 мкг/мл в течение 18 часов для стимуляции IL-12.

c. Клетки подвергали воздействию стимулятора PMA + иономицин в концентрации 50 нг/мл + 1 мкг/мл в течение 18 часов для стимуляции IL-23, IL-22, IL-17A, IL-17F

Через 18 часов супернатанты собирали и центрифугировали для удаления остатков клеток, аликвоты использовали для ИФА (ELISA).

Результаты

Влияние выбранных соединений Формулы 1 на индукцию/ингибирование воспалительных цитокинов в стимулированных МКПК показано ниже.

Таблица VII: Концентрация цитокинов в (пг/мл) в присутствии стимулятора и различных концентраций лекарственных препаратов

Конц мкМ IL-22
человека IL-17A человека IL-17F человека TNF-α человека IL-6
человека IL-10
человека IL-12
еловека IFN-γ
человека IL-Ιβ
человека Клетки+ 0,5%ДМСО -- 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0 65 ± 3 1471 ± 47 128 ± 0 114 ± 0 178 ± 13 903 ± 30 Клетки+ 0,5%ДМСО+Стимуля-
тор* -- 9421 ± 848 381 ± 0 364 ± 16 3296 ± 193 5568 ± 781 1222 ± 47 4351 ± 237 204 ± 13 2138 ± 99 Декса-
метазон 1 2496 ± 34 186 ± 0 322 ± 10 325 ± 7 3052 ± 221 710 ± 21 163 ± 0 165 ± 0 174 ± 0 Никло-
замид 2,5 84 ± 0 0 ± 0 0 ± 0 3074 ± 91 3103 ± 75 53 ± 0 138 ± 0 165 ± 26 2166 ± 31 1 756 ± 16 0 ± 0 0 ± 0 2938 ± 15 4435 ± 245 89 ± 13 663 ± 12 125 ± 14 4519 ± 1373 0,5 2795 ± 195 0 ± 0 0 ± 0 3839 ± 73 5653 ± 697 837 ± 65 1359 ± 0 125 ± 14 4126 ± 596 0,1 10574 ± 0 350 ± 32 202 ± 2 4611 ± 150 5682 ± 668 1645 ± 180 1221 ± 0 165 ± 26 4287 ± 959 Нитазо-
ксанид 50 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0 2896 ± 117 2531 ± 94 42 ± 11 101 ± 12 191 ± 0 2506 ± 139 25 228 ± 0 0 ± 0 0 ± 0 3679 ± 123 3567 ± 127 76 ± 0 406 ± 0 152 ± 13 3203 ± 326 10 1093 ± 6 0 ± 0 0 ± 0 3472 ± 50 5342 ± 386 512 ± 19 1500 ± 29 125 ± 14 3971 ± 217 1 5612 ± 373 39 ± 0 166 ± 10 5708 ± 27 5520 ± 506 1799 ± 79 3892 ± 88 217 ± 0 4470 ± 636 Тизокса-
нид 50 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0 2440 ± 13 2086 ± 38 42 ± 11 101 ± 12 191 ± 0 2522 ± 80 25 280 ± 0 0 ± 0 0 ± 0 3489 ± 34 3428 ± 154 76 ± 0 381 ± 0 139 ± 0 4168 ± 1079 10 1189 ± 18 0 ± 0 0 ± 0 3244 ± 48 5225 ± 649 493 ± 0 1401 ± 42 111 ± 0 4118 ± 853 1 7858 ± 1361 39 ± 0 151 ± 5 5351 ± 174 6122 ± 865 1591 ± 25 4715 ± 176 204 ± 13 4577 ± 975

*Стимулятор и его концентрация для высвобождения каждого цитокина, такие как указано выше.

Выводы, сделанные из приведенной выше таблицы:

1. Анализ цитокинов, стимулированных LPS или LPS + IFN-γ: Все протестированные соединения, по-видимому, демонстрируют устойчивое и дозозависимое ингибирование IL-12 и IL-10, умеренное ингибирование IL-6, незначительное влияние или отсутствие действия на TNF-α, IFN-γ и IL-Ιβ.

2. Анализ цитокинов, стимулированных PMA + иономицином. Все протестированные соединения, по-видимому, демонстрируют устойчивое ингибирование цитокинов Th17-типа IL-17A, IL-17F и IL-22. Комбинация PMA + иономицин не индуцировала IL-23.

Пример 6: In vitro оценка влияния лекарственных препаратов на жизнеспособность клеток и выработку цитокинов в клетках HaCaT.

Клетки HaCaT выращивали в колбе Т-75 с поверхностью культивирования 75 см² в модифицированной Дульбекко среде Игла с добавлением ФБС (10%), L-глутамина (2 мМ), пенициллина (100 мкг/мл), стрептомицина (100 мкг/мл) при температуре 37°C в инкубаторе в атмосфере, содержащей 5% CO₂. Рост клеток поддерживали до 70-80% конфлюэнтности для посева, а используемый носитель представлял собой 1% ДМСО. Жизнеспособность клеток проверяли в различные моменты времени с использованием аламарового синего и измеряли флуоресценцию при длине волны возбуждения 544 нм и длине волны испускания 590 нм.

Результаты:

Результаты в виде % жизнеспособности клеток по сравнению с контролем для никлозамида, нитазоксанида и тизоксанида в 24 часа, 48 часов и 72 часа приведены в Таблице VIII.

Таблица VIII: % жизнеспособности клеток HaCaT в присутствии лекарственных препаратов в различных концентрациях и в разные моменты времени

Соединение Конц. (мкМ) % жизнеспособности (± СОС) 24 ч 48 ч 72 ч Контроль ДМСО - 100 ± 11 100 ± 2 100 ± 2 Дексаметазон 3 46 ± 3 18 ± 2 8 ± 0 Доксорубицин 3 74 ± 6 108 ± 5 110 ± 2 Никлозамид 50 28 ± 1 16 ± 0 23 ± 7 10 38 ± 2 29 ± 1 33 ± 2 5 48 ± 1 36 ± 2 45 ± 8 1 62 ± 4 46 ± 0 59 ± 11 0,1 111 ± 9 82 ± 3 98 ± 6 Нитазоксанид 100 17 ± 1 13 ± 1 17 ± 1 50 18 ± 1 15 ± 2 18 ± 1 10 41 ± 1 40 ± 2 46 ± 3 1 81 ± 3 86 ± 8 91 ± 2 0,1 89 ± 1 99 ± 9 103 ± 3 Тизоксанид 100 20 ± 0 13 ± 0 20 ± 0 50 24 ± 1 20 ± 0 25 ± 0 10 34 ± 1 35 ± 0 43 ± 1 1 74 ± 6 91 ± 5 91 ± 2 0,1 76 ± 6 114 ± 2 112 ± 6

Концентрация соединений Формулы I, которой соответствует жизнеспособность клеток 70%, рассматривалась как максимальная концентрация, при которой следует изучать стимуляцию клеток HaCaT. Было обнаружено, что она составляет 0,25 мкМ для никлозамида, 1 мкМ для нитазоксанида и тизоксанида, и, следовательно, концентрации ниже этой концентрации были использованы для изучения ингибирования/индукции различных цитокинов при стимуляции клеток HaCaT. Все измерения проводились трижды.

Используемые стимуляторы:

Клетки HaCaT стимулировали различными стимуляторами следующим образом:

a. Клетки подвергали воздействию стимулятора LPS в концентрации 1 мкг/мл в течение 48 часов для стимуляции IL-Ιβ.

b. Клетки подвергали воздействию стимулятора IFN-γ в концентрации 50 нг/мл в течение 48 часов для стимуляции TNF-α, IL-6.

Через 48 часов супернатанты собирали и центрифугировали для удаления остатков клеток, аликвоты использовали для ИФА.

Результаты

Влияние соединений Формулы 1 на индукцию/ингибирование воспалительных цитокинов в стимулированных клетках HaCaT показано в Таблице IX.

Таблица IX: Концентрация цитокинов в (пг/мл) в присутствии стимулятора и различных концентраций лекарственного препарата

Группа Конц. (мкМ) TNF-α IL-6 Конц. (пг/мл) ДМСО 0,05% 2,8 ± 0,1 17 ± 1 Контроль (0,5% ДМСО + Стимулятор) 3,3 ± 0,1 82 ± 1 Дексаметазон 1 3,2 ± 0 33 ± 1 Никлозамид + Стимулятор 0,25 2,5 ± 0,1 54 ± 11 0,1 2,8 ± 0,1 76 ± 4 0,05 2,5 ± 0,1 103 ± 4 Нитазоксанид + Стимулятор 1 2,3 ± 0,4 70 ± 4 0,5 2,5 ± 0,5 79 ± 4 0,1 3 ± 0,2 83 ± 1 Тизоксанид + Стимулятор 1 2,3 ± 0,5 78 ± 6 0,5 3,2 ± 0,1 80 ± 2 0,1 2,9 ± 0,2 87 ± 2

Из приведенной выше таблицы видно, что клетки HaCaT продуцировали умеренные уровни IL-6, очень низкие уровни TNF-α и совсем не продуцировали IL-Ιβ в ответ на IFN-γ. Снижение высвобождения IL-6 наблюдали в клетках HaCaT, обработанных 0,25 мкл никлозамида.

Пример 7: Местные и трансдермальные препараты антипаразитарных лекарственных средств

Таблица X: Композиции местных и трансдермальных препаратов

Ингредиент/Вспомогательное в-во NIC-1 NIC-2 NIT-1 NIT-2 Никлозамид 3% 3% - - Нитазоксанид - - 5% 5% Вазелин 96% 81% 94% 79% Ланолин 1% 1% Метилтригликоль 5% 4,5% Жидкий парафин 10% 10,5% Сорбитансесквиолеат 1% 1%

Композиции NIC-1 и NIT-1 являются местными дермальными, тогда как композиции NIC-2 и NIT-2 являются трансдермальными композициями.

Пример 8: In vivo оценка лекарственных препаратов на модели индуцированного имиквимодом псориаза у мышей линии Balb/c

Эксперимент in vivo для проверки антипсориатического потенциала никлозамида и нитазоксанида был проведен у вида Mus musculus. Мышей линии BALB/c (пол: самка, возраст: 7-8 недель) использовали для индукции псориаза с использованием IMQ. Местное применение имиквимода (IMQ) у мышей может вызывать и усугублять псориаз, очень похожий на псориаз человека. Параллельное лечение различными концентрациями никлозамида и нитазоксанида исследовали для количественной оценки уменьшения параметров индуцированного IMQ псориаза у мышей. Исследовали девять групп животных (8 животных на группу), включая нормальный контроль, контроль заболевания; три концентрации никлозамида, а именно 1%, 2% и 3%; три концентрации нитазоксанида, а именно 3%, 4% и 5% и положительный контроль теновата (клобетазол) 0,05% крем. Всем животным на спинную область (бритая спина) и правое ухо наносили 63 мг крема, содержащего 5% IMQ, в течение 8 дней. В этом эксперименте использовали местные составы из Примера 7. Через три часа после применения IMQ различные дозы никлозамида (1%, 2% и 3%) и нитазоксанида (3%, 4% и 5%) наносили на область спины (50 мг) и ухо (25 мг) у животных соответствующих групп. Дозы никлозамида, нитазоксанида или носителя наносили два раза в день.

Исследуемыми параметрами были изменение толщины уха, % ингибирования воспаления уха, индекс тяжести псориатической области (PASI). Гистопатология проводили для правого уха и кожи спины путем окрашивания гематоксилином и эозином. Биомаркером в этом исследовании был воспалительный цитокин IL-23, проанализированный методом ИФА, полученный из лизата ткани той области уха, где применялись IMQ и дозы лекарственных препаратов.

Результаты исследований in vivo для никлозамида и нитазоксанида приведены в таблице XI.

Таблица XI. Параметры, оцененные в анализе IMQ-индуцированного псориаза для никлозамида и нитазоксанида

Группа % изменения массы
тела Масса селезенки (мг) % ингибирования
воспаления уха Балл PASI Уровень IL23 (пг/мл) Баллы гистопатологии Гиперкератоз Толщина эпидермиса Пролиферация эпидермальных тяжей Нормаль-ный контроль 10,8 141,6 ± 15,5 100,0 0,00 83,9 ± 6,8 1,00 ± 0,0 4,13 ± 0,1 0,00 Контроль заболе-вания -1,9 222,5 ± 19,3 0,0 20,3 ± 1,6 249,5 ± 52,0 1,7 ± 0,2 6,7 ± 0,2 1,7 ± 0,2 Никло-замид 1% -6,0 265,2 ± 49,2 27,1 15,8 ± 3,0 119,9 ± 7,8* 0,8 ± 0,2^# 6,8 ± 0,2 1,8 ± 0,2 Никло-замид 2% -7,5 214,4 ± 15,1 30,4 17,2 ± 1,7 96,6 ± 10,9* 1,4 ± 0,2 5,6 ± 0,8 1,4 ± 0,2 Никло-замид 3% -6,0 229,7 ± 18,7 42,7 10,7 ± 4,1* 83,6 ± 9,8* 1,0 ± 0,0^$ 5,2 ± 0,2 0,5 ± 0,2^# Нитазо-ксанид 3% -4,75 203,6 ± 22,6 -5,9 14,2 ± 5,1^# 147,79^# 1,0 ± 0,0^$ 5,6 ± 0,4 1,2 ± 0,2 Нитазоксанид 4% -0,59 274,7 ± 54,3 26,1 21,5 ± 3,4 128,67* 1,3 ± 0,2 4,7 ± 0,3^# 1,0 ± 0,3 Нитазо-ксанид 5% -3,78 204,1 ± 15,3 40,9 13,1 ± 1,6* 89,45* 1,1 ± 0,1 5,3 ± 0,6 1,1 ± 0,1 Клобе-тазол 0,05% -16,9 49,3 ± 10,3 86,9 4,83 ± 2,3 64,1 ± 7,4 1,0 ± 0,0* 4,3 ± 0,3^# 0,3 ± 0,3^#

*р <0,001, #р <0,01, $р <0,05; однофакторный дисперсионный анализ с последующим применением критерия Дуннетта, сравнение с контролем заболевания

Приведенные выше результаты из таблицы XI показывают, что как никлозамид, так и нитазоксанид обладают хорошей способностью ингибировать пролиферацию утолщения кожи и уменьшать воспалительные процессы при заболевании, демонстрируя, таким образом, антипсориатический потенциал этих лекарственных средств. Испытанные лекарственные средства показали дозозависимое уменьшение воспаления уха на 7-й день. Никлозамид и нитазоксанид ингибировали воспаление уха на 42,7% и 40,9% соответственно при самых высоких испытанных концентрациях. Оценки индекса тяжести псориатической области (PASI) в группах лечения показали значительное снижение тяжести заболевания. Никлозамид показал снижение баллов PASI до 50% при концентрации 3%, что указывает на его антипсориатический потенциал. В гомогенатах тканей уха наблюдалось значимое увеличение уровней IL-23 (р <0,001) при применении имиквимода. Животные, получавшие никлозамид и нитазоксанид в различных дозах, показали значимое (р <0,01, р <0,001 соответственно) снижение уровня IL-23. Лечение никлозамидом показало дозозависимый ответ, где при самой высокой концентрации уровень IL23 снижался до нормального контроля, что свидетельствует о способности этого соединения уменьшать воспаление. С другой стороны, клобетазол снижал уровни IL-23 ниже уровня нормального контроля, указывая на то, что это может снизить безопасность этого препарата. Ингибирование IL-23 соединениями формулы I приводит к противовоспалительному действию, наблюдаемому в этой модели заболевания. Зависимое от концентрации снижение уровня цитокина IL-23 как никлозамидом, так и нитазоксанидом указывает на их потенциал в лечении заболеваний, связанных с активацией пути IL-17/IL-23, включая кожные заболевания, такие как псориаз, розацеа и экзема.

Результаты, приведенные в Таблице XI, показали, что в группах никлозамида и нитазоксанида не наблюдалось значимого изменения массы тела; тогда как клобетазол показал значимое изменение массы тела с 7 по 9 день (р <0,01, р <0,001). Значимое снижение массы тела группы клобетазола является показателем лекарственной токсичности. На 9 день всех экспериментальных животных умерщвляли, у них отбирали и взвешивали селезенку. Среди нескольких групп лечения; незначительное снижение массы селезенки наблюдалось при лечении никлозамидом 2%, нитазоксанидом 3% и 5%, однако оно не было статистически значимым по сравнению с контролем заболевания. Значимое снижение массы селезенки наблюдалось в группе клобетазола, что указывает на вредное воздействие этого препарата на клетки селезенки.

Были проведены гистопатологические исследования мочек ушной раковины, при которых оценивали такие критические параметры, как гиперкератоз, толщина эпидермиса и пролиферация эпидермальных тяжей. Эта оценка показала дозозависимое уменьшение толщины эпидермиса и пролиферации эпидермальных тяжей. Значимое снижение гиперкератоза было показано как в случае никлозамида, так и в случае нитазоксанида. Таким образом, соединения Формулы I, такие как никлозамид и нитазоксанид, обладают антипсориатическим потенциалом с хорошим профилем безопасности.

Следует понимать, что, хотя конкретные варианты осуществления настоящего изобретения были описаны здесь для целей иллюстрации, могут быть сделаны различные модификации без отклонения от сущности и объема изобретения. Предполагается, что все такие модификации и варианты включены в объем настоящего изобретения.

Изобретение относится к области фармацевтики, а именно к ингибированию фосфодиэстеразы. Раскрывается способ ингибирования фосфодиэстеразы, включающий в себя контактирование фосфодиэстеразы с соединением Формулы I или с композицией, содержащей соединение Формулы I, где R₁ выбран из –H или –COCH₃; R₂ представляет собой –H; R₃ выбран из –H или –Cl; R₄ представляет собой –H; Ar выбран из или , где R₅ представляет собой –NO₂; R₆ представляет собой –H; R₇ представляет собой –Cl; R₈ представляет собой –H. Использование изобретения позволяет эффективно ингибировать фосфодиэстеразы и может быть полезно при лечении расстройств, связанных с фосфодиэстеразой. 2 н. и 5 з.п. ф-лы, 11 табл., 8 пр.

1. Способ ингибирования фосфодиэстеразы, включающий в себя контактирование фосфодиэстеразы с соединением Формулы I

,

где R₁ выбран из –H или –COCH₃; R₂ представляет собой –H; R₃ выбран из –H или –Cl; R₄ представляет собой –H; Ar выбран из

или

,

где R₅ представляет собой –NO₂; R₆ представляет собой –H; R₇ представляет собой –Cl; R₈ представляет собой –H.

2. Способ ингибирования фосфодиэстеразы, включающий в себя контактирование фосфодиэстеразы с композицией, содержащей соединение Формулы I

,

где R₁ выбран из –H или –COCH₃; R₂ представляет собой –H; R₃ выбран из –H или –Cl; R₄ представляет собой –H; Ar выбран из

или

,

где R₅ представляет собой –NO₂; R₆ представляет собой –H; R₇ представляет собой –Cl; R₈ представляет собой –H; и фармацевтически приемлемого носителя, вспомогательного вещества или разбавителя.

3. Способ по п. 2, в котором композиция содержит соединение Формулы I в концентрации от примерно 1% до 5,0% (мас./мас.) и фармацевтически приемлемый носитель выбран из вазелина, ланолина, метилтригликоля, жидкого парафина, сорбитана сесквиолеата или их сочетания, при этом композиция представлена в форме крема, геля, пластыря, мази, тампона для наружного применения, эмульсии, раствора, пасты, шампуня или спрея с аппликатором или без него и вводится локальным путем.

4. Способ по п. 2 или 3, где композицию, содержащую соединение Формулы I, вводят местным или трансдермальным путем.

5. Способ по п. 4, где композицию, содержащую соединение Формулы I, вводят местным путем.

6. Способ по п. 5, где композиция для местного применения содержит 3% (мас./мас.) никлозамида, 96% (мас./мас.) вазелина и 1% (мас./мас.) ланолина.

7. Способ по п. 1 или 2, где способ ингибирования фосфодиэстеразы обеспечивает лечение псориаза.