Применение нитрила (5Z)-2-амино-5-бром-5-(1-бром-2-оксо-2-фенилэтилиден)-4-оксо-1H-4,5-дигидрофуран-3-карбоновой кислоты в качестве средства, проявляющего противогрибковую активность Российский патент 2024 года по МПК C07D307/68 A61K31/341 A61P31/04 

Заявляемое соединение относится к области органической химии, к производным 2-аминофурана, а именно к новым биологически активным веществам - нитрилу (5Z)-2-амино-5-бром-5-(1-бром-2-оксо-2-фенилэтилиден)-4-оксо-1H-4,5-дигидрофуран-3-карбоновой кислоты формулы:

который может найти применение в качестве лекарственного противогрибкового препарата.

Известны само заявляемое соединение, а также структурные аналоги, получаемые взаимодействием этиловых эфиров 2-амино-5-(2-арил-2-оксоэтилиден)-4-оксо-1H-4,5-дигидрофуран-3-карбоновых кислот с бромом [Дмитриев М.В., Иванов Д.В., Игидов Н.М., Махмудов P.P., Новикова В.В., Чернов И.Н. Синтез и биологическая активность моно- и дибромпроизводных 2-амино-5-(2-арил-2-оксоэтилиден)-4-оксо-1H-4,5-дигидрофуран-3-карбоновых кислот // Журнал общей Химии - 2018. - Т. 88, вып. 7.- С. 1105-1109; Этиловый эфир (5Z)-2-амино-5-[1-бром-2-(4-бромфенил)-2-оксоэтилиден]-4-оксо-1H-4,5-дигидрофуран-3-карбоновой кислоты, проявляющий противогрибковую активность // Патент России №2654207 С1. 2018. / Иванов Д.В., Махмудов P.P., Игидов Н.М., Новикова В.В.].

В качестве эталона сравнения нами был взят противогрибковый препарат - флуконазол [Cordeiro R. A., Teixeira С.Е. С., Brilhante R.S. N. et al /Minimum inhibitory concentrations of amphotericin B, azoles and caspofungin against Candida species are reduced by farnesol // Medical Mycology January 2013, 51, P. 53-59]. Целью предлагаемого изобретения является поиск среди производных 2-аминофуранов веществ, обладающих противогрибковым действием.

Исследование биологической активности

Противогрибковую активность заявляемого соединения определяли пробирочным методом двукратных серийных разведений в жидкой питательной среде [Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств / Под ред. А.Н. Миронова, Н.Д. Бунятян, А.Н. Васильева, О.Л. Верстаковой, М.В. Журавлевой, В.К. Лепахина, Н.В. Коробова, В.А. Меркулова, С.Н. Орехова, И.В. Сакаевой, Д.Б. Утешева, А.Н. Яворского. М.: Гриф и К, 2012. Ч. 1. 944 с.]. Скрининг противогрибковой активности осуществляли в отношении типовых штаммов: Candida albicans NCTC 885-653, Candida tropicalis РКПГY-1513/784, Candida krusei РКПГY-1472/310, Candida glabrata РКПГY-1485/47. Исследуемое соединение массой 0,05 г растворяли в 5 мл ДМСО, получая основной раствор вещества в концентрации 10⁴ мкг/мл. Данный раствор служил основой для рабочего раствора, имеющего концентрацию 2×10³ мкг/мл, который последовательно разводили двукратно в жидкой питательной среде в ряду из 10 пробирок. Концентрация исследуемого соединения в первой пробирке ряда разведений в питательной среде составляла 1000,0 мкг/мл. Для определения противогрибковой активности использовали бульон Сабуро (ФБУН ГНЦ ПМБ, г. Оболенск). Для приготовления взвеси дрожжевых культур применяли двухсуточные культуры, выращенные на агаре Сабуро. Концентрация микробных клеток в опыте составила 2-5×10⁴ КОЕ/мл. В качестве положительного контроля использовали питательную среду с внесенной исследуемой культурой. В качестве отрицательного контроля использовали интактную питательную среду. Посевы инкубировали в термостате при температуре 27±1°С. Оценку антимикотической активности осуществляли визуально на 40-48 ч инкубирования. Исследования проводили в двух повторах. В качестве значения МПК (минимальной подавляющей концентрации) принимали концентрацию соединения в последней прозрачной пробирке серии разведения.

Фунгистатический эффект заявляемого соединения (I) сравнивали с экспериментальными данными флуконазола. Результаты испытаний представлены в таблице 1.

Как видно из таблицы 1 заявляемое соединение (I) по противогрибковой активности превосходит эффект эталона сравнения флуконазола в отношении Candida albicans NCTC 885-653 не менее чем в 2 раза при сравнимых показателях токсичности.

Острую токсичность рассчитывали, соблюдая рекомендации государственного фармакологического комитета по изучению общетоксического действия биологически активных веществ [Методические рекомендации по изучению общетоксического действия фармакологических средств. Утв. 25.12.97 / Вестн. фармакоп. комитета. -1998. -№1. - С. 27-32].

В связи с наличием высокой противогрибковой активности заявляемого соединения (I) в отношении типового штамма С.albicans NCTC 885-653 было изучено его действие на другие штаммы грибов рода Candida. Проведенные исследования показали наличие высокой антифунгальной активности заявляемого соединения (I), превосходящей эффект эталона сравнения флуконазола в отношении штамма С.tropicalis РКПГY-1513/784. В отношении проблемного для практической медицины С.krusei, обладающего резистентностью к флуконазолу, соединение (I) также обладает высокой антифунгальной активностью.

Таким образом, заявляемое соединение (I) проявляет более высокую противогрибковую активность по сравнению с эталоном сравнения флуконазолом, а также является практически нетоксичным соединением [Измеров Н.Ф., Саноцкий И.В., Сидоров К.К. Параметры токсикометрии промышленных ядов при однократном воздействии: Справочник. М., 1977. - с. 196]. Все это делает возможным его использование для создания нового лекарственного средства, обладающего антифунгальной активностью.

БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК

1. Дмитриев М.В., Иванов Д.В., Игидов Н.М., Махмудов P.P., Новикова B.В., Чернов И.Н. Синтез и биологическая активность моно- и дибромпроизводных 2-амино-5-(2-арил-2-оксоэтилиден)-4-оксо-1Н-3-карбоновых кислот // Журнал общей Химии - 2018. - Т. 88, вып. 7.-C. 1105-1109.

2. Этиловый эфир (5Z)-2-амино-5-[1-бром-2-(4-бромфенил)-2-оксоэтилиден]-4-оксо-1Н-4,5-дигидрофуран-3-карбоновой кислоты, проявляющий противогрибковую активность // Патент России №2654207 С1. 2018. / Иванов Д.В., Махмудов P.P., Игидов Н.М., Новикова В.В.

3. Cordeiro R. A., Teixeira С.Е. С., Brilhante R.S. N. et al /Minimum inhibitory concentrations of amphotericin B, azoles and caspofungin against Candida species are reduced by farnesol // Medical Mycology January 2013, 51, P. 53-59.

4. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. - Ч. 1. - М.: Гриф и K, 2012. - С. 576-578.

5. Методические рекомендации по изучению общетоксического действия фармакологических средств. Утв. 25,12,97 / Вестн. фармакоп. комитета. - 1998. - №1. - С.27-32.

6. Измеров Н.Ф., Саноцкий И.В., Сидоров К.К. 1 Параметры токсикометрии промышленных ядов при однократном воздействии: Справочник. М., 1977. - с. 196.

Настоящее изобретение относится к применению нитрила (5Z)-2-амино-5-бром-5-(1-бром-2-оксо-2-фенилэтилиден)-4-оксо-1H-4,5-дигидрофуран-3-карбоновой кислоты в качестве средства, проявляющего противогрибковую активность

.

Технический результат – применение соединения, в качестве средства, обладающего противогрибковым действием с минимальной подавляющей концентрацией 1.0 мкг/мл в отношении Candida albicans NCTC 885-653, 0.5 мкг/мл в отношении Candida tropicalis РКПГY-1513/784, 0.5 мкг/мл в отношении Candida krusei РКПГY-1472/310, 1.0 мкг/мл в отношении Candida glabrata РКПГY-1485/47. 1 табл.

Применение нитрила (5Z)-2-амино-5-бром-5-(1-бром-2-оксо-2-фенилэтилиден)-4-оксо-1H-4,5-дигидрофуран-3-карбоновой кислоты в качестве средства, проявляющего противогрибковую активность

.