3-Бутилтио-1-(бета-D-2-дезоксирибофуранозил)-5-фенил-(4Н)-1,2,4-триазол, синтез, противогерпесвирусное действие Российский патент 2024 года по МПК C07D405/04 A61K31/7056 A61P31/22 

Изобретение относится к биотехнологии и медицине, в частности к получению нуклеозида 3-бутилтио-1-(бета-D-2-дезоксирибофуранозил)-5-фенил-(4Н)-1,2,4-триазола (соединение (1), фиг. 1) (БДФТ) и обнаружению его противовирусного действия. Изобретение может быть использовано для лечения и профилактики герпетической инфекции человека, в научно-исследовательских лабораториях, химико-фармацевтической промышленности, лечебных учреждениях.

Модифицированные нуклеозиды, по своей природе являющиеся антиметаболитами, проявляют широкий спектр антивирусной активности. В современной лечебной практике активно используются препараты Ацикловир, Видарабин, Азидотимидин, и Рибавирин в комплексной терапии герпетических инфекций, ВИЧ и гепатита С, соответственно [Looking Back in 2009 at the Dawning of Antiviral Therapy Now 50 Years Ago: An Historical Perspective. Erik De Clercq. Advances in Virus Research, Volume 73. 2009 Elsevier Inc.]. Отдельного внимания заслуживают нуклеозиды 1,2,4-триазола, проявляющие антивирусную активность широкого спектра против гриппа А и В, респераторно-синтициальной вирусной инфекции, цитомегаловируса (ЦМВ), вируса герпеса простого 1 и 2 типов, вируса герпеса 6 типа. Среди всех синтезированных нуклеозидов 1,2,4-триазол-3-карбоксамида только рибавирин (1-бета-D-рибофуранозил-1,2,4-триазол-3-карбоксамид) последние 40 лет используется в моно- и комплексных схемах терапии вирусного гепатита С, респераторно-синтициальной вирусной инфекции и гемморагической лихорадки с почечным синдромом [Witkowski J. T., Robins R. K., Sidwell R. W., and Simon L. N. Design, Synthesis, and Broad Spectrum Antiviral Activity of 1-β-D-Ribofuranosyl-1,2,4-triazole-3-carboxamide and Related Nucleosides. // Journal of Medicinal Chemistry. 1972. V. 15, No. 11. P. 1150-1154; Pol S., Corouge M., Vallet-Pichard A. Daclatasvir-sofosbuvir combination therapy with or without ribavirin for hepatitis C virus infection: from the clinical trials to real life // Hepatic medicine: evidence and research. 2016. P. 21-26; Kim, Uh Jin, et al. "Combination therapy with lopinavir/ritonavir, ribavirin and interferon-α for Middle East respiratory syndrome." Antiviral therapy 21.5 (2016): 455-459; Хронический вирусный гепатит С (2021) . Клинические рекомендации. https://medi.ru/klinicheskie-rekomendatsii/khronicheskij-virusnyj-gepatit-s-khvgs-u-vzroslykh_14028/#t16]. Однако рибавирин обладает тератогенностью, мутагенностью и гемолитической активностью, что инициирует поиск среди его структурных аналогов соединений с лучшим терапевтическим индексом [Asahina, Yasuhiro, et al. "Mutagenic effects of ribavirin and response to interferon/ribavirin combination therapy in chronic hepatitis C." Journal of hepatology 43.4 (2005): 623-629; Kowdley, Kris V. "Hematologic side effects of interferon and ribavirin therapy." Journal of clinical gastroenterology 39 (2005): S3-S8; Koh, Christopher, and T. Jake Liang. "What is the future of ribavirin therapy for hepatitis C?." Antiviral research 104 (2014): 34-39]. Работы по созданию новых нуклеозидов на основе 1,2,4-триазола, обладающих низкой цитотоксичностью и высокой противовирусной активностью носят актуальный характер.

Изобретение иллюстрируют рисунки: Фиг. 1. Структура 3-бутилтио-1-(бета-D-2-дезоксирибофуранозил)-5-фенил-(4Н)-1,2,4-триазола (БДФТ); Фиг. 2. Схема получения 3-бутилтио-1-(бета-D-2-дезоксирибофуранозил)-5-фенил-(4Н)-1,2,4-триазола.

Технической задачей изобретения является получение нуклеозида 2’-дезоксирибозида 3-бутилтио-5-фенил-(4Н)-1,2,4-триазола, (соединение (1), БДФТ, фиг. 1) и изучение его противогерпесвирусной активности.

Агликон - 3-бутилтио-5-фенил-(4Н)-1,2,4-триазол - упоминается в патентах WO2005/097758A1 (25.03.2005) и US 2005/0288347A1 (29.12.2005) (C.N.Hodge, «Certaine triazole-based compounds, composition, and uses thereof»,) как препарат, активный в отношение киназ AURORA-A, FLT-3, c-TAK1, пособ синтеза не описан. Известен способ получения группы 3-арил-5-алкилтио-(4Н)-1,2,4-триазолов, проявляющих свойства миорелаксантов, антиконвульсантов, спазмолитиков, седативных препаратов (патент PT86623B, Португалия, 26.01.1988. «Processo para a preparacao de derivados de 3-aril-5-alquiltio-4H-1,2,4-triazo»).

Синтез нуклеозидов на основе 3-бутилтио-5-фенил-(4Н)-1,2,4-триазола не описан.

Химический синтез 2'-дезоксирибозида 3-бутилтио-5-фенил-(4Н)-1,2,4-триазола, не описан, по всей вероятности, в силу трудности его реализации по схеме классической реакции гликозилирования, в результате которой возможно образование плохо разделимой смеси альфа и бета-аномеров целевого соединения. Также возможно образование побочных N2 и N4 региоизомерных продуктов гликозилирования основания.

Технический результат получен за счет разработки химико-ферментативного способа синтеза БДФТ. Проблема синтеза нуклеозида решена за счет использования регио- и стерео- селективного химико-ферментативного подхода на стадии гликозилирования основания (4), (Схема приведена на фиг. 2).

Для получения 3-бутилтио-5-фенил-(4Н)-1,2,4-триазола используется традиционный способ синтеза триазолтионов. В качестве исходного соединения на первой стадии синтеза используют бензоилтиосемикарбазид (соединение 2) (фиг. 2). На первой стадии проводят циклизацию бензоилтиосемикарбазида (2) обработкой 20%-ным раствором натриевой щелочи при температуре реакционной смеси 90-95°С. После нейтрализации реакционной смеси соляной кислотой продукт 5-фенил-2,4-дигидро-1,2,4-триазол-3-тион (3) отделяют простой фильтрацией. Выход 5-фенил-2,4-дигидро-1,2,4-триазол-3-тиона (соединение 3, фиг. 2) составляет 84 %.

На следующей стадии синтеза 5-фенил-2,4-дигидро-1,2,4-триазол-3-тион (3) обрабатывают йодистым бутилом с K₂CO₃ в сухом ацетоне. После удаления растворителя 3-бутилтио-5-фенил-(4Н)-1,2,4-триазол (4) промывают последовательно водой, раствором NaOH и снова водой до нейтральной реакции. Выход 3-бутилтио-5-фенил-(4Н)-1,2,4-триазола (соединение 4, фиг. 2) 73 %.

На последней стадии синтеза для осуществления переноса остатка 2-дезоксирибозы с природного нуклеозида 2'-дезоксиуридина (соединение 5, фиг. 2) на модифицированное основание (соединение 4, фиг. 2) используют генно-инженерные ферменты нуклеозидфосфорилазы: пуриннуклеозидфосфорилазу (PNP, КФ 2.4.2.1) и уридинфосфорилазу (UP, КФ 2.4.2.3). Использование реакции ферментативного трансгликозилирования позволяет синтезировать 3-бутилтио-1-(бета-D-2-дезоксирибофуранозил)-5-фенил-(4Н)-1,2,4-триазол (соединение 1, фиг. 2) с выходом 32 % чистотой > 92 %. Данные об использовании PNP для синтеза нуклеозидов 3-бутилтио-5-фенил-(4Н)-1,2,4-триазола в открытой печати отсутствуют.

Таким образом, способ получения соединения БДФТ, включает циклизацию бензоилтиосемикарбазида обработкой раствором натриевой щелочи, реакцию алкилирования полученного 5-фенил-2,4-дигидро-1,2,4-триазол-3-тиона с иодистым бутилом, реакцию ферментативного гликозилирования полученного основания 3-бутилтио-5-фенил-(4Н)-1,2,4-триазола с 2’-дезоксиуридином в К-фосфатном буферном растворе в присутствии каталитических количеств уридинфосфорилазы (80-200 ед.) и пуриннуклеозидфосфорилазы (80-200 ед.).

Противовирусное действие БДФТ впервые изучено на примере двух штаммов вируса герпеса простого типа 1 (ВПГ-1), включая штамм, устойчивый к действию базового противогерпетического препарата ацикловира. Установлен антигерпесвирусный эффект, выражающийся в ингибировании развития вирусиндуцированного цитопатического эффекта в культуре клеток Vero E6, инфицированных различными штаммами ВПГ-1. Соединение (1) может входить в эффективной терапевтической дозе в качестве действующего вещества в фармацевтическую композицию для использования в виде лекарственного средства, обладающего антигерпетической противовирусной активностью.

Изобретение иллюстрируют примеры.

Пример 1.

Синтез 5-фенил-2,4-дигидро-1,2,4-триазол-3-тиона (соединение 3, фиг. 2).

Бензоилтиосемикарбазид (2) 1.95 г (10 ммоль) растворяют в 20 мл 20% -ного раствора NaOH, смесь нагревают при 90-95°С в течение 3 ч, затем реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры (25°С) и подкисляют HCl до рН 7.0. Полученный белый осадок отфильтровывают, промывают холодной водой (5×20 мл), сушат на воздухе. Выход 5-фенил-2,4-дигидро-1,2,4-триазол-3-тиона (3) составляет 1.48 г (84%), т.пл. 253-255°С, R_f 0.59 (ТСХ на пластинах «Silicagel 60 F₂₅₄» («Merck») в системе хлороформ - этанол, 10:1). Масс-спектр, m/z: C₈H₇N₃S, [M+H]⁺= 178.0442, расч.=178.0435.

¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆, δ, м.д., (J, Гц)): 7.51 (3Н, м, ArH-3′,4′,5′), 7.91 (2Н, д, J=6.2, ArH-2', 6'), 13.68 (1Н, уш.с. NH триазол), 13.84 (1Н, уш.с. NH триазол).

Пример 2.

Синтез 3-бутилтио-5-фенил-(4Н)-1,2,4-триазола (соединение 4, фиг. 2).

Смесь, состоящую из 0.88 г (5 ммоль) 5-фенил-2,4-дигидро-1,2,4-триазол-3-тиона, 0.92 г (0.56 мл, 5 ммоль) бутила йодистого и 0.68 г (5 ммоль) К₂СО₃ нагревают в 15 мл сухого ацетона в течение 5 ч. Ход реакции контролируют методом ТСХ (R_f продукта 0.89 (ТСХ на пластинах «Silicagel 60 F254» («Merck») в системе хлороформ - метанол, 5:1). После удаления растворителя, остаток промывают поочередно 3×20 мл Н₂О, 20 мл 2%-ного раствора NaOH и снова 100 мл воды до нейтральной реакции. Остаток высушивают на воздухе. Получают 0.85 г (73%) 3-бутилтио-5-фенил-(4Н)-1,2,4-триазола (4) в виде порошка бледно молочного цвета, т.пл. 96-97°С. Масс-спектр, m/z: C₁₂H₁₅N₃S, [M+H]⁺= 234.1075, расч.=234.1061.

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆+CCl₄, δ, м.д., (J, Гц)): 0.95 (3Н, т, J=7.4, CH₃), 1.48 (2Н, секстет, J=7.4, CH₂-CH₃), 1.71 (2Н, квинтет, J=7.2, -СН₂-CH₂-CH₃), 3.14 (2Н, т, J=7.3, S-CH₂,), 7.37 (1Н, т, J=7.1, ArH-4'), 7.42 (2Н, т, J=7.4, ArH-3',5'), 7.98 (2H, д, J=7.1, ArH-2',6'), 14.04 (1Н, уш.с., 4-NH триазол). ¹³С ЯМР (100 МГц, DMSO-d₆+CCl₄, δ, м.д.): 13.29 (C-10), 21.19 (C-9), 31.09 (C-7), 31.33 (С-8), 125.73 (С-1',2',6'), 128.18 (C-3',5'), 128.99 (C-4'), 154.77 (С-5), 159.39 (С-3).

Пример 3.

3-Бутилтио-5-фенил-(4Н)-1,2,4-триазол (4) (55.6 мг, 0.238 ммоль), 2'-дезоксиуридин (325 мг, 1.424 ммоль) и KH₂PO₄ (170 мг, 1.249 ммоль) растворяют в 135 мл воды при перемешивании и нагревании до 50°C. Смесь нейтрализовают добавлением 5N KOH. Затем в реакционную смесь добавляют EcPNP (1.68 мг, 84 ед.) и EcUP (0.84 мг, 84 ед.) и термостатируют при 50°C в течение 7.5 ч. Реакцию проводят до тех пор, пока конверсия основания (4) в целевое соединение (1) не составит 93 %. По окончании процесса реакционную смесь концентрируют в вакууме (15 мм. рт. ст.) до объема 30 мл, выпавший осадок удаляют фильтрованием. Остаток хроматографируют на обращеннофазовом сорбенте октадецилсиликагель (Supelco-60), размеры колонки: 40×140 мм. Целевое соединение элюируют в градиенте этанола от 0 до 50%. Фракции содержащие продукт объединяют, растворитель удаляют в вакууме (15 мм. рт. ст.). Выход продукта составляет 26.2 мг (0.075 ммоль; 32 %), чистота 92.1% (ВЭЖХ: R_t = 14.3 мин, градиент элюента B 0-100 % за 20 минут). λ_max 248 нм. Масс-спектр, m/z: C₁₇H₂₃N₃O₃S, [M+H]⁺= 350.1551, расч.=350.1534.

¹H ЯМР (700 МГц): δ = 7.98 (d, J_H2,H3 = J_H6,H5 = 7.9, 2H, H2 & H6 фенила), 7.49 (м, 2H, H3 & H5 фенила), 7.45 (м, 1H, H4 фенила), 6.13 (т, J_H1,H2a = J_H1,H2b = 6.2, 1 H, H-1'), 5.30 (д, J_OH3',H3' = 4.7, 1 H, OH-3'), 4.73 (т, J_OH5',H5'a = J_OH5',H5'b = 5.6, 1 H, OH-5'), 4.46 (м, 1 H, H-3'), 3.84 (м, 1 H, H-4), 3.53 (м, 1 H, H-5a), 3.41 (м, 1 H, H-5'b), 3.29 (м, 2 H, H2 тиобутила), 2.78 (м, 1 H, H-2a), 2.31 (м, 1 H, H-2a), 1.70 (м, 2 H, H3 тиобутила), 1.43 (м, 2 H, H4 фенила), ¹³C ЯМР (176 МГц): δ = 161.31 (C-1 фенила), 154.37 (C-5 триазола), 130.88 (C-3 триазола), 130.04 (C-4 фенила), 129.15 (C-3 и C-5 фенила), 126.12 (C-2 и C-6 фенила), 88.55 (C-4'), 85.99 (C-1'), 71.46 (C-3'), 62.49 (C-5'), 38.45 (C-2), 32.91 (C-2 тиобутила), 31.57 (C-3 тиобутила), 21.54 (C-4 тиобутила), 13.64 (C-5 тиобутила). ¹⁵N ЯМР (71 МГц): δ = 284.2 (N-2), 225.5 (N-1).

Пример 4.

Антигерпесвирусное действие БДФТ изучалось в отношении двух различных штаммов вируса герпеса простого типа 1, включая штамм вируса, резистентный к действию ацикловира (ациклогуанозина).

Пример 4.1. Генотипическая характеристика штаммов вируса герпеса простого типа 1, использованных для оценки антивирусной активности соединения 1.

Для определения антигерпесвирусной активности использовали эталонный штамм L₂ вируса герпеса простого типа 1 (ВПГ-1/ L₂), полученный из Государственной коллекции вирусов Института вирусологии им. Д.И.Ивановского (ФГНИЦЭМ им. Н.Ф. Гамалеи МЗ РФ). Штамм ВПГ-1 с лекарственной резистентностью получен путем проведения серийного пассирования вируса в присутствии ацикловира (ВПГ-1/L₂/R_АЦВ) с последующим клонированием.

Таблица 1. Аминокислотные замены в ДНК-полимеразе и тимидинкиназе штамма вируса простого герпеса типа 1 относительно эталонного штамма L₂.

штамм ДНК-полимераза Тимидинкиназа ВПГ-1/L₂/R_АЦВ D46N, D151G, A346T, D741N, S866F, N871D, G1085E V12A, W88R, R220H

Примечание: жирным шрифтом выделены аминокислотные замены, которые могут быть ассоциированы с изменением лекарственной чувствительности, локализованные в консервативных участках фермента и описанные в литературе (Andrei G, Georgala A, Topalis D, Fiten P, Aoun M, Opdenakker G, Snoeck R. Heterogeneity and evolution of thymidine kinase and DNA polymerase mutants of herpes simplex virus type 1: implications for antiviral therapy. J Infect Dis. 2013; 207(8):1295-305; Coen N., Singh U., Vuyyuru V., Van den Oord J.J., Balzarini J., Duraffour S., Snoeck R., Cheng Y.C., Chu C.K., Andrei G. Activity and mechanism of action of HDVD, a novel pyrimidine nucleoside derivative with high levels of selectivity and potency against gammaherpesviruses. J Virol. 2013; 87(7):3839-51; J Virol. 2005;79(9):5863-9; LeGoff J., Péré H., Bélec L. Diagnosis of genital herpes simplex virus infection in the clinical laboratory. Virol J. 2014;11(1):83; Burrel S., C. Deback H. Agut, Boutolleau D. Genotypic characterization of UL23 thymidine kinase and UL30 DNA polymerase of clinical isolates of herpes simplex virus: natural polymorphism and mutations associated with resistance to antivirals. Antimicrob. Agents Chemother. 2010; 54(11):4833-4842.)

Пример 4.2. Изучение цитотоксического действия соединения (1) на культуру клеток Vero E6.

При изучении токсического действия соединения (1) в культуре клеток Vero Е6 с использованием метода окрашивания клеток трипановым голубым, основанного на способности мертвых клеток окрашиваться красителем, после 72-часовой инкубации клеточной монослойной культуры в присутствии изучаемого соединения клетки подсчитывали с помощью гемоцитометра и определяли величину ЦД₅₀ - концентрацию соединения, в присутствии которой погибает не более 50% клеток по сравнению с контролем, инкубируемым без препарата.

Пример 4.3. Биологическая активность соединения (1).

Изучение противовирусной активности соединения (1) проводили in vitro в культуре клеток Vero Е6. При изучении противогерпетической активности соединения 1 in vitro культуру клеток Vero Е6 инфицировали различными штаммами ВПГ-1 с множественностью 0.1 и 0.01 БОЕ/кл (где БОЕ - бляшкообразующая единица) и инкубировали под жидкой средой поддержки, состоящей из сред Игла и 199, соединенных в равных соотношениях, содержащей соединение (1) в известных концентрациях. После 48 часов инкубации, когда в контроле вируса развивался 95-100% цитопатический эффект (ЦПЭ), определяли концентрации, ингибирующие развитие вирусиндуцированного цитопатического эффекта по сравнению с контролем на 50% (ИД₅₀) и практически полностью (ИД₉₅).

В качестве референс-препаратов использовали ацикловир (АЦВ, ациклогуанозин, АЦГ, 9-[(2-гидроксиэтокси)-метил]гуанин, acyclovir, зовиракс) производства Sigma Aldrich, США (брутто-формула: C₈H₁₁N₅O₃, Mr:225.20, кат. номер: 59277-89-3), рибавирин (Ribavirin, виразол, 1-β-D-рибофуранозил-1,2,4-триазол-3-карбоксамид) производства Sigma Aldrich, США (брутто-формула: C₈H₁₂N₄O₅, 244.20, кат. номер: 36791-04-5).

Синтезированный нуклеозид исследовали на противовирусную активность в отношении вируса простого герпеса первого типа двух штаммов (ВПГ-1/L₂).

Результаты исследования показали, что 2'-дезоксирибозид 3-бутилтио-5-фенил-(4Н)-1,2,4-триазола является более токсичным для нормальных (Vero E6) клеток, чем рибавирин (Таблица 2), но при этом IC₅₀ дезоксирибозида ниже в >1521 раз, чем у рибавирина (Таблицы 3-4) и соотношение CD₅₀ к ID₅₀ (индекс селективности ИС) составляет 16, то есть БДФТ по противовирусному эффекту превосходит Рибавирин в 4 раза.

Таблица 2. Цитотоксичность нуклеозида на культуре клеток Vero E6.

Соединение CC₅₀¹ мкг/мл мкМ БДФТ 127.09±2.09 363.69±5.98 Рибавирин (контроль) >500 >2047.5

¹ CC₅₀ - 50% цитотоксическая концентрация соединения, необходимая для снижения жизнеспособности клеток на 50% (мкг/мл). Количество мертвых клеток в контроле - 4.74±0.13 %.

Таблица 3. Противовирусная активность нуклеозида в отношении ВПГ-1/L₂ (ТК⁺) дикого типа в культуре клеток Vero E6*.

Соединение ВПГ-1/L₂ (ТК⁺) IC₅₀¹ IC₉₅¹ ИС² мкг/мл мкМ мкг/мл мкМ БДФТ 8.19 23.44 32.76 93.75 16 Рибавирин 125 511.88 >500 >2047.5 >4 *Примечание: множественность инфицирования - 0.01 БОЕ/кл.
¹ IC₅₀ и IC₉₅ - 50% или 95% ингибирующие концентрации соединения, вызывающие 50% или 95-100% ингибирование развития, вирус-индуцированного цитопатического эффекта, соответственно, по отношению к полному цитопатическому эффекту в инфицированном, но необработанном контроле.
² Индекс селективности (ИС) определяли, как отношение CD₅₀ к ID₅₀.

Таблица 4. Противовирусная активность нуклеозидов в отношении ВПГ-1/L₂/R^AЦВ дикого типа в культуре клеток Vero E6*

Соединение ВПГ-1/L₂/R^AЦВ IC₅₀¹ IC₉₅¹ ИС² мкг/мл мкМ мкг/мл мкМ БДФТ 16.98 46.88 32.76 93.75 8 Рибавирин 250 1023.75 >500 >2047.5 >2

*Примечание: множественность инфицирования - 0.01 БОЕ/кл.

¹ IC₅₀ и IC₉₅ - 50% или 95% ингибирующие концентрации соединения, вызывающие 50% или 95-100% ингибирование развития, вирус-индуцированного цитопатического эффекта, соответственно, по отношению к полному цитопатическому эффекту в инфицированном, но необработанном контроле.

² Индекс селективности (ИС) определяли, как отношение CD₅₀ к ID₅₀.

Существенно, что соединение (1) обладает выраженным противовирусным действием в отношении вируса простого герпеса первого типа (ВПГ-1). Селективность противогерпесвирусного действия соединения (1) сравнима или превосходит активность известного лекарственного препарата рибавирин.

Фармацевтические композиции на основе соединения (1) могут быть перспективны для создания новых противовирусных средств.

Изобретение относится к биотехнологии и медицине, а именно к новому соединению, применяемому для лечения герпетической инфекции. Соединение по изобретению представляет собой 3-бутилтио-1-(бета-D-2-дезоксирибофуранозил)-5-фенил-(4Н)-1,2,4-триазол. Также изобретение относится к способу получения соединения по изобретению, включающему циклизацию бензоилтиосемикарбазида обработкой раствором натриевой щелочи, реакцию алкилирования полученного 5-фенил-2,4-дигидро-1,2,4-триазол-3-тиона с иодистым бутилом, реакцию ферментативного гликозилирования полученного основания 3-бутилтио-5-фенил-(4Н)-1,2,4-триазола с 2’-дезоксиуридином в К-фосфатном буферном растворе в присутствии каталитических количеств уридинфосфорилазы (80-200 ед.) и пуриннуклеозидфосфорилазы (80-200 ед.). Технический результат - 3-бутилтио-1-(бета-D-2-дезоксирибофуранозил)-5-фенил-(4Н)-1,2,4-триазол для лечения герпетической инфекции. 2 н. и 1 з.п. ф-лы, 2 ил., 4 табл., 6 пр.

1. Соединение 3-бутилтио-1-(бета-D-2-дезоксирибофуранозил)-5-фенил-(4Н)-1,2,4-триазол, имеющее структурную формулу

2. Соединение по п. 1, обладающее активностью в отношении вируса простого герпеса 1-го типа, в том числе вируса простого герпеса 1-го типа с лекарственной устойчивостью к ацикловиру.

3. Способ получения соединения по п. 1, включающий циклизацию бензоилтиосемикарбазида обработкой раствором натриевой щелочи, реакцию алкилирования полученного 5-фенил-2,4-дигидро-1,2,4-триазол-3-тиона с иодистым бутилом, реакцию ферментативного гликозилирования полученного основания 3-бутилтио-5-фенил-(4Н)-1,2,4-триазола с 2’-дезоксиуридином в К-фосфатном буферном растворе в присутствии каталитических количеств уридинфосфорилазы (80-200 ед.) и пуриннуклеозидфосфорилазы (80-200 ед.).