НАТРИЕВАЯ СОЛЬ 2-н-ПРОПИЛТИО-6-НИТРО-1,2,4-ТРИАЗОЛО[5,1-с]-1,2,4-ТРИАЗИН-7-ОНА ДИГИДРАТ И НАТРИЕВАЯ СОЛЬ 2-н-БУТИЛТИО-6-НИТРО-1,2,4-ТРИАЗОЛО[5,1-с]-1,2,4-ТРИАЗИН-7-ОНА ДИГИДРАТ Российский патент 2010 года по МПК C07D487/04 A61K31/4196 A61P31/22 

Описание патента на изобретение RU2402552C2

1. Область техники, к которой относится изобретение

Изобретение относится к области биологически активных соединений и касается ди-гидратов натриевых солей 2-пропилтио-6-нитро-1,2,4-триазоло[5,1-с]-1,2,4-триазин-7(4Н)-она и 2-бутилтио-6-нитро-1,2,4-триазоло[5,1-с]-1,2,4-триазин-7(4Н)-она, обладающего противовирусным действием, предназначенного для лечения и профилактики инфекционных заболеваний животных и человека вирусной природы. Изобретение может быть использовано в лечебных учреждениях, научно-исследовательских лабораториях, а также в животноводстве и птицеводстве.

2. Уровень техники

Имеются данные о противовирусном действии 6-нитро-1,2,4-триазоло[5,1-с]-1,2,4-триазин-7(4Н)-онов (Синтез и противовирусная активность 6-нитро-7-оксо-4,7-дигидроазоло [5,1-с][1,2,4]триазинов. В.Л.Русинов, Е.Н.Уломский, О.Н.Чупахин, М.М.Зубаиров, А.Б.Капустин, Н.И.Митин и др. / Химико-фармацевтический журнал. №9, 1990, с.41-44).

В настоящее время известна натриевая соль 2-метилтио-6-нитро-1,2,4-триазоло[5,1-с]-1,2,4-триазин-7(4Н)-она (1) дигидрат, которая принадлежит к ряду соединений, проявляющих противовирусное действие (О.Н.Чупахин, В.Л.Русинов, Е.Н.Уломский, В.Н.Чарушин, А.Ю.Петров, О.И.Киселев. Натриевая соль 2-метилтио-6-нитро-1,2,4-триазоло[5,1-с]-1,2,4-триазин-7(4Н)-она, дигидрат, обладающая противовирусной активностью. Патент РФ №2294936 от 10.03.2007), и может быть использована в медицинской практике, животноводстве, птицеводстве.

Натриевая соль 2-метилтио-6-нитро-1,2,4-триазоло[5,1-с]-1,2,4-триазин-7(4Н)-она дигидрат (1) является близким структурным аналогом заявляемых соединений и потому использована в качестве прототипа.

3. Сущность изобретения

Сущность изобретения составляют натриевая соль 2-н-пропилтио-6-нитро-1,2,4-триазоло[5,1-с]-1,2,4-триазин-7(4Н)-она дигидрат формулы (2) и натриевая соль 2-н-бутилтио-6-нитро-1,2,4-триазоло[5,1-с]-1,2,4-триазин-7(4Н)-она дигидрат формулы (3)

4. Сведения, подтверждающие возможность осуществления изобретения.

4.1. Синтез дигидратов натриевых солей 2-алкилтио-6-нитро-1,2,4-триазоло [5,1-с]-1,2,4-триазин-7(4Н)-онов (2)

Соли 3-алкилтио-1,2,4-триазолил-5-диазония (4,5), полученную из 0,1 моль соответствующего 5-амино-3-алкилтио-1,2,4-триазола (6,7) (где алкил соответственно означает н-пропил и н-бутил) действием 0,1 моль нитрита натрия или калия в присутствии 0,25 экв. кислоты, с использованием в качестве растворителя водного этанола, конденсируют 11 мл (0,1 моль) этилнитроацетата в 150 мл 2 М растворе карбоната натрия. Выпавший осадок отфильтровывают, последовательно кристаллизуют из 20%-ной уксусной кислоты, воды и сушат на воздухе. Химическая схема синтеза заявляемых соединений приведена ниже.

Выход соединения (2) составляет 43%, выход соединения (3) - 47%.

Натриевая соль 2-н-пропилтио-6-нитро-1,2,4-триазоло[5,1-с]-1,2,4-триазин-7(4Н)-она дигидрат (2) имеет следующие физико-химические характеристики: ТПЛ>300°С; 1Н ЯМР спектр в ДМСО-(d6 δ, м.д.: 3,18 (т., 2Н, J=1,5 Гц, CH2), 1,78 (м., 2Н, СН2), 1,06 (т., 3Н, J=1.5 Гц, СН3). Найдено: С - 26,56, Н - 3,75, N - 26,92. Брутто-формула - C7H11NaO5S. Вычислено: С - 26,75, Н - 3,53, N - 26,74%.

Натриевая соль 2-н-бутилтио-6-нитро-1,2,4-триазоло[5,1-с]-1,2,4-триазин-7(4Н)-она дигидрат (3) имеет следующие физико-химические характеристики: ТПЛ>300°С; 1Н ЯМР спектр в ДМСО-(d6 δ, м.д.: 3,20 (т., 2Н, J=1.5 Гц), 1,74 (м., 2Н, CH2), 1,49 (м., 2Н, СН2), 0,96 (т., 3Н, J=1.5 Гц, СН3). Найдено, %: С - 29,10; Н - 4,08; N - 25,46; C8H13N6NaO5S;

Вычислено, %: С - 29,27%; Н - 3,99%; N - 25,60%.

Заявляемые соединения представляют собой желтые кристаллические высокоплавкие (более 300°С) вещества, растворимые в воде, метаноле, ацетоне, диметилформамиде, диметилсульфоксиде, нерастворимое в бензоле, хлороформе и большинстве апротонных растворителей.

4.2. Противовирусные свойства дигидратов натриевых солей 2-алкилтио-6- нитро-1,2,4-триазоло[5,1-с]-1,2,4-триазин-7(4Н)-онов (2)

Пример 1. Определение противовирусной активности соединений в отношении вируса простого герпеса

Клетки. Использовали монослойные 24-часовые культуры перевиваемых клеток почек зеленой мартышки Vero.

Вирусы. В работе использовали вирус простого герпеса (ВПГ-1), штамм ЕС.

Максимальные переносимые концентрации соединений определяли с помощью МТТ-теста в культуре клеток Vero.

Исследование максимальной переносимой концентрации для заявляемых соединений (2,3) и соединения прототипа (1) показали, что цитотоксичность одинакова и составляет 1000 мкг/мл, что позволяет квалифицировать их как малотоксичные соединения.

Изучение противовирусной активности соединений в отношении вируса простого герпеса проводили на 96-луночных полистирольных микропланшетах на клеточных линиях Vero. Результаты оценивали через 72 часа культивирования зараженных клеток по степени цитопатического действия, вызываемого вирусом:

«++++» - более 90% клеток имеют характерные изменения (цитопатический эффект)

«+++» - около 60% клеток имеют характерные изменения;

«++» - менее 20% клеток имеют характерные изменения;

«+» - менее 10% клеток имеют характерные изменения;

«-» - клетки не изменены.

В таблице приведены данные по противовирусной активности заявляемых соединений (2,3) и соединения-прототипа (1) в отношении вируса простого герпеса (ВПГ-1).

Противовирусная активность соединений в отношении ВПГ-1 соединение концентрация, мкг/мл Концентрация вируса, lg (ТЦД50)/мл 3 2 1 (1) прототип 1000 +++ +++ + 500 +++ +++ ++ 200 ++++ +++ ++ 100 ++++ +++ ++ 50 ++++ +++ ++ 20 ++++ +++ ++ (2) 1000 - - - 500 - - - 200 + + - 100 ++ ++ + 50 +++ ++ + 20 ++++ +++ + (3) 1000 - - - 500 - - - 200 ++ + - 100 ++ ++ - 50 +++ ++ + 20 ++++ +++ + ВПГ-1 ++++ +++ ++

Из данных, приведенных в таблице, видно, что соединение-прототип (1) практически не активно в отношении вируса простого герпеса (ВПГ-1) при концентрации вируса 3 lg (ТЦД5о)/мл даже в максимально переносимой концентрации (1000 мкг/мл). В то же время, заявляемые соединения в меньшей концентрации (500 мкг/мл) полностью подавляют цитопатическое действие вируса простого герпеса (ВПГ-1), то есть являются болеез активными противовирусными соединениями по сравнению с соединением-прототипом.

Похожие патенты RU2402552C2

название год авторы номер документа
НАТРИЕВАЯ СОЛЬ 2-ЭТИЛТИО-6-НИТРО-1,2,4-ТРИАЗОЛО[5,1-c]-1,2,4-ТРИАЗИН-7-ОНА ДИГИДРАТ 2008
  • Чупахин Олег Николаевич
  • Русинов Владимир Леонидович
  • Уломский Евгений Нарциссович
  • Чарушин Валерий Николаевич
  • Медведева Наталья Розыевна
  • Киселев Олег Иванович
  • Деева Элла Германовна
  • Логинова Светлана Яковлевна
  • Борисевич Сергей Владимирович
  • Бондарев Владимир Петрович
RU2404182C2
НАТРИЕВАЯ СОЛЬ 2-МЕТИЛ-6-ФТОР-1,2,4-ТРИАЗОЛО[5,1-с]-1,2,4-ТРИАЗИН-7(4Н)-ОНА ДИГИДРАТ, ОБЛАДАЮЩАЯ ПРОТИВОВИРУСНЫМ ДЕЙСТВИЕМ 2009
  • Чупахин Олег Николаевич
  • Русинов Владимир Леонидович
  • Уломский Евгений Нарциссович
  • Медведева Наталья Розыевна
  • Киселев Олег Иванович
  • Деева Элла Германовна
  • Синяшин Олег Герольдович
  • Мамедов Вахид Абдулла-Оглы
RU2493158C2
4-((Z)-4'-ГИДРОКСИБУТЕН-2'-ИЛ)-2-R-6-ФЕНИЛ-1,2,4-ТРИАЗОЛО[5,1-c][1,2,4]ТРИАЗИН-7-ОНЫ 2008
  • Чупахин Олег Николаевич
  • Русинов Владимир Леонидович
  • Уломский Евгений Нарциссович
  • Чарушин Валерий Николаевич
  • Шестакова Татьяна Сергеевна
  • Деев Сергей Леонидович
  • Русинова Лариса Ивановна
  • Андронова Валерия Львовна
  • Галегов Георгий Артемьевич
  • Карпенко Инна Леонидовна
  • Ясько Максим Владимирович
  • Куханова Марина Константиновна
RU2376307C1
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ НАТРИЕВОЙ СОЛИ 2-МЕТИЛТИО-6-НИТРО-1,2,4-ТРИАЗОЛО[5,1-c]-1,2,4-ТРИАЗИН-7-ОНА, ДИГИДРАТА 2007
  • Чупахин Олег Николаевич
  • Русинов Владимир Леонидович
  • Уломский Евгений Нарциссович
  • Чарушин Валерий Николаевич
  • Петров Александр Юрьевич
  • Киселев Олег Иванович
  • Артемьев Григорий Андреевич
RU2343154C2
6-(2'-АМИНО-2'-КАРБОКСИЭТИЛТИО)-2-МЕТИЛТИО-4-ПИВАЛОИЛОКСИМЕТИЛ-1,2,4-ТРИАЗОЛО[5,1-c]1,2,4-ТРИАЗИН-7(4Н)-ОН 2011
  • Русинов Владимир Леонидович
  • Чупахин Олег Николаевич
  • Чарушин Валерий Николаевич
  • Уломский Евгений Нарциссович
  • Медведева Наталья Розыевна
  • Киселев Олег Иванович
  • Деева Элла Германовна
RU2455304C1
4-(4'-ГИДРОКСИБУТИЛ)-6-ФЕНИЛ-1,2,4-ТРИАЗОЛО[5,1-c][1,2,4]ТРИАЗИН-7-ОН 2007
  • Русинов Владимир Леонидович
  • Чупахин Олег Николаевич
  • Уломский Евгений Нарциссович
  • Чарушин Валерий Николаевич
  • Шестакова Татьяна Сергеевна
  • Лукьянова Людмила Сергеевна
  • Деев Сергей Леонидович
  • Киселев Олег Иванович
  • Деева Элеонора Германовна
  • Русинова Лариса Ивановна
RU2345080C2
2-R-4-(АЛЛИЛОКСИМЕТИЛ)-6-НИТРО-1,2,4-ТРИАЗОЛО[5,1-С]-1,2,4-ТРИАЗИН-7(4Н)-ОНЫ И 2-R-4-(ПРОПАРГИЛОКСИМЕТИЛ)-6-НИТРО-1,2,4-ТРИАЗОЛО[5,1-С]-1,2,4-ТРИАЗИН7(4Н)-ОНЫ, ОБЛАДАЮЩИЕ ПРОТИВОВИРУСНЫМ ДЕЙСТВИЕМ 2006
  • Чупахин Олег Николаевич
  • Русинов Владимир Леонидович
  • Уломский Евгений Нарциссович
  • Деев Сергей Леонидович
  • Русинова Лариса Ивановна
  • Шестакова Татьяна Сергеевна
  • Киселев Олег Иванович
  • Деева Элла Германовна
RU2340614C2
НАТРИЕВАЯ СОЛЬ 2-МЕТИЛТИО-6-НИТРО-1,2-4-ТРИАЗОЛО[5,1-C]-1,2,4-ТРИАЗИН-7(4H)-ОНА, ДИГИДРАТ, ОБЛАДАЮЩАЯ ПРОТИВОВИРУСНОЙ АКТИВНОСТЬЮ 2005
  • Чупахин Олег Николаевич
  • Русинов Владимир Леонидович
  • Уломский Евгений Нарциссович
  • Чарушин Валерий Николаевич
  • Петров Александр Юрьевич
  • Киселев Олег Иванович
RU2294936C1
НАТРИЕВАЯ СОЛЬ 5-МЕТИЛ-6-НИТРО-1,2,4,-ТРИАЗОЛО[1,5-a]ПИРИМИДИН-7-ОНА ДИГИДРАТ 2006
  • Чупахин Олег Николаевич
  • Русинов Владимир Леонидович
  • Уломский Евгений Нарциссович
  • Чарушин Валерий Николаевич
  • Петров Александр Юрьевич
  • Киселев Олег Иванович
RU2330036C1
НАТРИЕВАЯ СОЛЬ 2-МЕТИЛТИО-6-ЦИАНО-1,2,4-ТРИАЗОЛО[5,1-с]-1,2,4-ТРИАЗИН-7(4Н)-ОНА, ТРИГИДРАТ 2015
  • Русинов Владимир Леонидович
  • Чупахин Олег Николаевич
  • Чарушин Валерий Николаевич
  • Сапожникова Ирина Михайловна
  • Медведева Наталья Розыевна
  • Уломский Евгений Нарциссович
  • Киселев Олег Иванович
  • Деева Элла Германовна
  • Коновалова Надежда Игоревна
  • Васин Андрей Владимирович
RU2607628C1

Реферат патента 2010 года НАТРИЕВАЯ СОЛЬ 2-н-ПРОПИЛТИО-6-НИТРО-1,2,4-ТРИАЗОЛО[5,1-с]-1,2,4-ТРИАЗИН-7-ОНА ДИГИДРАТ И НАТРИЕВАЯ СОЛЬ 2-н-БУТИЛТИО-6-НИТРО-1,2,4-ТРИАЗОЛО[5,1-с]-1,2,4-ТРИАЗИН-7-ОНА ДИГИДРАТ

Описывается натриевая соль 2-н-пропилтио-6-нитро-1,2,4-триазоло[5,1-с]-1,2,4-триазин-7(4Н)-она дигидрат и натриевая соль 2-н-бутилтио-6-нитро-1,2,4-триазоло[5,1-с]-1,2,4-триазин-7(4Н)-она дигидрат

проявляющие противовирусное действие в отношении вируса простого герпеса ВПГ-1.

1 табл.

Формула изобретения RU 2 402 552 C2

Натриевая соль 2-н-пропилтио-6-нитро-1,2,4-триазоло[5,1-с]-1,2,4-триазин-7(4Н)-она дигидрат и натриевая соль 2-н-бутилтио-6-нитро-1,2,4-триазоло[5,1-с]-1,2,4-триазин-7(4Н)-она дигидрат

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2010 года RU2402552C2

НАТРИЕВАЯ СОЛЬ 2-МЕТИЛТИО-6-НИТРО-1,2-4-ТРИАЗОЛО[5,1-C]-1,2,4-ТРИАЗИН-7(4H)-ОНА, ДИГИДРАТ, ОБЛАДАЮЩАЯ ПРОТИВОВИРУСНОЙ АКТИВНОСТЬЮ 2005
  • Чупахин Олег Николаевич
  • Русинов Владимир Леонидович
  • Уломский Евгений Нарциссович
  • Чарушин Валерий Николаевич
  • Петров Александр Юрьевич
  • Киселев Олег Иванович
RU2294936C1
RU 2058307 С1, 20.04.1996
АММОНИЕВАЯ СОЛЬ 2-(4- ПИРИДИЛ)-6- НИТРО-7-ОКСО -4,7-ДИГИДРО- 1,2,4-ТРИАЗОЛО [5,1-C] [1,2,4] ТРИАЗИНА, ОБЛАДАЮЩАЯ ПРОТИВОВИРУСНОЙ АКТИВНОСТЬЮ 1987
  • Чупахин О.Н.
  • Русинов В.Л.
  • Уломский Е.Н.
  • Львов Д.К.
  • Березина Л.К.
SU1473303A1

RU 2 402 552 C2

Авторы

Чупахин Олег Николаевич

Русинов Владимир Леонидович

Уломский Евгений Нарциссович

Чарушин Валерий Николаевич

Медведева Наталья Розыевна

Киселев Олег Иванович

Деева Элла Германовна

Синяшин Олег Герольдович

Мамедов Вахид Абдулла-Оглы

Даты

2010-10-27Публикация

2008-12-23Подача