СПОСОБ УЛУЧШЕНИЯ СОСТОЯНИЯ ПИЩЕВАРИТЕЛЬНОЙ СИСТЕМЫ Российский патент 2024 года по МПК C07C233/29 A23L33/105 A61K31/165 A61K36/185 A61K36/21 A61K36/31 A61K36/67 A61K36/81 A61P1/14 

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

[0001] HNF4α представляет собой ядерный рецептор, который выступает в качестве регулятора транскрипции многих генетических программ у человека, включая программы, лежащие в основе метаболизма Сахаров и липидов. Он экспрессируется в ряде тканей, включая печень, поджелудочную железу и почки, а также кишечник. Известно, что HNF4α играет различные роли в биологии эпителия, клетках, включая центральные механизмы регуляции эпителиального морфогенеза, и гомеостаз и барьерную функцию кишечного эпителия (Cattin, et al. (2009) Mol. Cell. Biol. 29(23):6294-6308; Spath & Weiss (1998) J. Cell Biol. 140:935-946). Кроме того, ген HNF4α в высокой степени экспрессируется в тонком кишечнике и толстой кишке, а белок HNF4α в изобилии представлен в ядрах эпителиальных клеток слизистой оболочки (Jiang, et al. (2003) Nucl. Recept. 1:5). Кроме того, было высказано предположение, что HNF4α играет защитную роль при воспалительном заболевании кишечника (ВЗК), и что агонисты HNF4α можно применять для лечения ВЗК (Chahar, et al. (2014) Mol. Cell. Biol. 34:3291-3304).

[0002] Исследования показали, что HNF4α крайне важен для экспрессии и правильной локализации белков плотного и адгезионного контакта (Chiba, et al. (2003) Exp. Cell Res. 286:288-297; Parviz, et al. (2003) Nat. Genet. 34:292-296) и формирования микроворсинок в кишечнике (Chiba, et al. (2006) J. Cell Biol. 175(6):971-980). Кроме того, HNF4α также был описан в качестве центрального регулятора, защищающего эпителий кишечника от воспаления (Babeu & Boudreau (2014) World J. Gastroenterol. 20(1):22-30). При этом было показано, что экспрессия HNF4α резко понижена в тканях кишечника у пациентов с болезнью Крона (БК) и язвенным колитом (ЯК) (Darsigny, et al. (2009) PLoS One 4:e7609; Ahn, et al. (2008) Inflamm. Whel Dis. 14:908-920).

[0003] Исследования на мышах с отсутствующим кишечно-специфическим HNF4α показало, что эти нокаутные мыши более восприимчивы к колиту, индуцированному декстраном сульфата натрия (ДСН), и демонстрируют повышение кишечной проницаемости по сравнению с контрольными мышами (Ahn, et al. (2008) Inflamm. Whel Dis. 14:908-920). В другом исследовании у мышей с отсутствием экспрессии в кишечнике обеих изоформ HNF4α (PI и Р2) развивалось прогрессирующее хроническое воспаление кишечника, аналогичное ВЗК у человека, что позволяет предположить, что долгосрочное снижение активности HNF4α, вероятно, способствует развитию ВЗК (Darsigny, et al. (2009) PLoS One 4:e7609).

[0004] Согласно оценкам, трем миллионам взрослых американцев был поставлен диагноз ВЗК, что составляет более 1% населения, и распространенность этого заболевания растет. Прямые расходы на лечение ВЗК оцениваются в сумму около 7 миллиардов долларов США. Учитывая, что многие заболевания остаются недиагностированными, а ВЗК также может поражать и детей, вполне вероятно, что фактическая распространенность ВЗК намного выше и превышает текущие оценки затрат. Соответственно, в данной области техники существует потребность в улучшении состояния пищеварительной системы у этих индивидуумов таким способом, который имел бы высокую приемлемость для пациентов, эффективность, относительную безопасность и относительно низкую стоимость. Настоящее изобретение направлено на удовлетворение этой потребности в данной области техники.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[0005] В настоящем изобретении предложен способ улучшения состояния пищеварительной системы путем обеспечения композиции для приема внутрь, состоящей из по меньшей мере одного носителя и эффективного количества экстракта, содержащего соединение Формулы I или его изомер, соль, гомодимер, гетеродимер или конъюгат:

[0006] В некоторых вариантах реализации изобретения каждый из R¹, R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸ и R⁹ независимо выбран из водорода, дейтерия, гидроксила, галогена, цианогруппы, нитрогруппы, необязательно замещенной аминогруппы, необязательно замещенной С-амидогруппы, необязательно замещенной N-амидогруппы, необязательно замещенной сложноэфирной группы, необязательно замещенного -(O)C_1-6 алкила, необязательно замещенного -(O)C_1-6 алкенила, необязательно замещенного -(O)C_1-6 алкинила, необязательно замещенного -(O)С_4-12 циклоалкила, необязательно замещенного -(O)С_1-6алкилС_4-12циклоалкила, необязательно замещенного -(O)С_4-12 гетероциклила, необязательно замещенного -(O)С_1-6алкилС_4-12 гетероциклила, необязательно замещенного -(O)С_4-12 арила, необязательно замещенного -(O)С_1-6алкилС_5-12арила, необязательно замещенного -(O)C_1-12 гетероарила и необязательно замещенного (O)С_1-6алкилС_1-12 гетероарила; пунктирная связь означает наличие или отсутствие связи; X представляет собой СН₂ или О; Z представляет собой CHR^a, NR^a или О; a R^a выбран из водорода, дейтерия, гидроксила, галогена, цианогруппы, нитрогруппы, необязательно замещенной аминогруппы, необязательно замещенной С-амидогруппы, необязательно замещенной N-амидогруппы, необязательно замещенной сложноэфирной группы, необязательно замещенного (O)C_1-6 алкила, необязательно замещенного -(О)С_1-6 алкенила, необязательно замещенного -(О)С_1-6 алкинила, необязательно замещенного -(O)С_4-12 циклоалкила, необязательно замещенного -(О)С_1-6алкилС_4-12циклоалкила, необязательно замещенного -(O)С_4-12 гетероциклила, необязательно замещенного -(O)С_1-6алкилС_4-12 гетероциклила, необязательно замещенного -(O)С_4-12 арила, необязательно замещенного -(O)С_1-6алкилС_5-12арила, необязательно замещенного -(O)С_1-12 гетероарила и необязательно замещенного -(O)С_1-6алкилС_1-12 гетероарила, тем самым улучшая пищеварение.

[0007] В некоторых вариантах реализации изобретения соединение имеет структуру Формулы II:

[0008] В некоторых вариантах реализации изобретения каждый из R¹, R ², R³ и R⁴ независимо выбран из водорода, дейтерия, гидроксила, галогена, цианогруппы, нитрогруппы, необязательно замещенной аминогруппы, необязательно замещенной С-амидогруппы, необязательно замещенной N-амидогруппы, необязательно замещенной сложноэфирной группы, необязательно замещенного -(O)C_1-6 алкила, необязательно замещенного -(О)С_1-6 алкенила, необязательно замещенного (O)C_1-6 алкинила, необязательно замещенного (O)С_4-12 циклоалкила, необязательно замещенного -(O)C_1-6алкилС_4-12циклоалкила, необязательно замещенного -(O)С_4-12 гетероциклила, необязательно замещенного -(O)С1-еалкилС_4-12 гетероциклила, необязательно замещенного -(O)С_4-12 арила, необязательно замещенного -(O)С_1-6алкилС_5-12арила, необязательно замещенного -(O)C_1-12 гетероарила и необязательно замещенного (O)С_1-6алкилС_1-12 гетероарила; пунктирная связь говорит о присутствии или отсутствии связи; Z представляет собой CHR^a, NR^a или О; a R^a выбран из водорода, дейтерия, гидроксила, галогена, цианогруппы, нитрогруппы, необязательно замещенной аминогруппы, необязательно замещенной С-амидогруппы, необязательно замещенной N-амидогруппы, необязательно замещенной сложноэфирной группы, необязательно замещенного (O)C_1-6 алкила, необязательно замещенного (O)C_1-6 алкенила, необязательно замещенного (О)С_1-6 алкинила, необязательно замещенного -(O)С_4-12 циклоалкила, необязательно замещенного -(O)С_1-6алкилС_4-12 циклоалкила, необязательно замещенного -(O)С_4-12 гетероциклила, необязательно замещенного (O)С_1-6алкилС_4-12 гетероциклила, необязательно замещенного (O)С_4-12 арила, необязательно замещенного -(O)С_1-6алкилС_5-12арила, необязательно замещенного -(O)С_1-12 гетероарила и необязательно замещенного -(С)С_1-6алкилС_1-12гетероарила.

[0009] В некоторых вариантах реализации изобретения экстракт представляет собой этанольный экстракт растения, представителя рода Allium, Amoracia, Chenopodium, Spinacia, Fagopyrum, Annona, Jatropha, Hibiscus, Piper, Eragrostis, Zea, Nelumbo, Cannabis, Ziziphus, Zanthoxylum, Ipomea, Capsicum, Lycium, Solanum или Tribulus.

[0010] В некоторых вариантах реализации изобретения композиция приготовлена в виде добавки к рациону, пищевого ингредиента или пищевой добавки, продукта лечебного питания, нутрицевтика или фармацевтической композиции.

[0011] В некоторых вариантах реализации изобретения соединение Формулы (I) или Формулы (II) выбрано из группы, состоящей из: N-транс-кофеоилтирамина, N-цис-кофеоилтирамина, N-транс-ферулоилтирамина, N-цис-ферулоилтирамина, п-кумароилтирамина, циннамоилтирамина, синапоилтирамина и 5-гидроксиферулоилтирамина или их фармацевтически приемлемых солей, сольватов и комбинаций.

[0012] В некоторых вариантах реализации соединение Формулы (I) или Формулы (II) выбрано из группы, состоящей из: (Е)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-этоксифенил)акриламида, (Е)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-(2-метоксиэтокси)фенил)акриламида, (Е)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-(2-(метилсульфонил)этокси) фенил)акриламида, (Е)-2-(4-(2-(3-(3,4-дигидроксифенил)акриламидо)этил)фенокси)уксусной кислоты, этил(Е)-2-(4-(2-(3-(3,4-дигидроксифенил)акриламидо)этил)фенокси)ацетата, (E)-N-(4-(циклопропилметокси)фенэтил)-3-(3,4-дигидроксифенил)акриламида, (Е)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-(3,3,3-трифторпропокси)фенэтил)акриламида, (Е)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-((тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)метокси)фенэтил)акриламида, (Е)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-((4-фторбензил)окси)фенэтил)акриламида, (E)-N-(4-(цианометокси)фенэтил)-3-(3,4-дигидроксифенил)акриламида, (Е)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-(пиридин-3-илметокси)фенэтил)акриламида, (Е)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-(пиридин-2-илметокси)фенэтил)акриламида, (Е)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-(2-(диметиламино)этокси)фенэтил)акриламида, (Е)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-изобутоксифенэтил)акриламида, (Е)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-(пиридин-4-илметокси)фенэтил)акриламида, (Е)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-((4-метоксибензил)окси)фенэтил)акриламида, (Е)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-(оксетан-3-илметокси)фенэтил)акриламида, (Е)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-((тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)метокси)фенэтил)акриламида, (Е)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-((тетрагидрофуран-2-ил)метокси)фенэтил)акриламида, (Е)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-(тиофен-2-илокси)фенэтил)акриламида, (Е)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-(3,3-диметилбутокси)фенэтил)акриламида, (Е)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-(2-гидроксиэтокси)фенэтил)акриламида, (Е)-N-(4-((1Н-тетразол-5-ил)метокси)фенэтил)-3-(3,4-дигидроксифенил)акриламида, (Е)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-((1-метилпирролидин-2-ил)метокси)фенэтил)акриламида, (Е)-2-гидрокси-5-(3-((4-гидроксифенэтил)амино)-3-оксопроп-1-ен-1-ил)фенилгидрокарбоната, (Е)-3-(4-гидрокси-3-(пиридин-4-илокси)фенил)-N-(4-гидроксифенэтил)акриламида, (Е)-3-(4-гидрокси-3-изобутоксифенил)-N-(4-гидроксифенэтил)акриламида, (Е)-3-(3-(4-фторфенокси)-4-гидроксифенил)-N-(4-гидроксифенэтил)акриламида, (Е)-3-(3-(цианометокси)-4-гидроксифенил)-N-(4-гидроксифенэтил)акриламида, (Е)-2-(2-гидрокси-4-(3-((4-гидроксифенэтил)амино)-3-оксопроп-1-ен-1-ил)фенокси)уксусной кислоты, (Е)-3-(3-гидрокси-4-(пиридин-4-илметокси)фенил)-N-(4-гидроксифенил)акриламида, (Е)-3-(4-(4-фторбензил)окси)-3-гидроксифенил)-N-(4-гидроксифенэтил)акриламида, (Е)-3-(3-гидрокси-4-изобутоксифенил)-N-(4-гидроксифенэтил)акриламида, (Е)-3-(4-цианометокси)-3-гидроксифенил)-N-(4-гидроксифенэтил)акриламида, (Е)-N-(3-(3,4-дигидроксифенил)акрилоил)-N-(4-гидроксифенэтил)глицина, (Е)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-гидроксифенэтил)-N-(пиридин-4-илметил)акриламида, (Е)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-гидроксифенэтил)-N-изобутилакриламида, (Е)-N-(цианометил)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-гидроксифенэтил)акриламида, 3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-гидроксифенэтил)пропанамида, 3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-(метилсульфонамидо)фенэтил)пропанамида или фармацевтических солей, сольватов и комбинации вышеуказанного.

[0013] В некоторых вариантах реализации изобретения композиция соединения Формулы (I) или Формулы (II) представлена в единичной дозированной форме и выполнена с возможностью введения доз от 0,1 до 100 мг/кг массы тела субъекта за один прием.

[0014] В некоторых вариантах реализации изобретения введение соединения Формулы (I) или Формулы (II) повышает экспрессию HNF4α.

[0015] В некоторых вариантах реализации изобретения введение соединения Формулы (I) или Формулы (II) обращает вспять потерю клеток Панета, вызванную диетой с высоким содержанием жиров.

[0016] В некоторых аспектах изобретения способ лечения или профилактики заболевания или расстройства у субъекта включает введение терапевтически эффективного количества соединения Формулы I или его фармацевтически приемлемой соли нуждающемуся в этом субъекту.

[0017] где каждый из R¹, R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸ и R⁹ независимо выбран из водорода, дейтерия, гидроксила, галогена, цианогруппы, нитрогруппы, необязательно замещенной аминогруппы, необязательно замещенной С-амидогруппы, необязательно замещенной N-амидогруппы, необязательно замещенной сложноэфирной группы, необязательно замещенного -(О)С_1-6 алкила, необязательно замещенного -(О)С_1-6 алкенила, необязательно замещенного (O)C_1-6 алкинила, необязательно замещенного -(O)С_4-12 циклоалкила, необязательно замещенного -(O)С_1-6алкилС_4-12циклоалкила, необязательно замещенного -(O)С_4-12 гетероциклила, необязательно замещенного -(O)С_1-6алкилС_4-12 гетероциклила, необязательно замещенного -(O)С_4-12 арила, необязательно замещенного -(O)С_1-6алкилС_5-12арила, необязательно замещенного -(O)C_1-12 гетероарила и необязательно замещенного (O)С_1-6алкилС_1-12 гетероарила; пунктирная связь означает наличие или отсутствие связи; X представляет собой СН₂ или О; Z представляет собой CHR^a, NR^a или О; а R^a выбран из водорода, дейтерия, гидроксила, галогена, цианогруппы, нитрогруппы, необязательно замещенной аминогруппы, необязательно замещенной С-амидогруппы, необязательно замещенной N-амидогруппы, необязательно замещенной сложноэфирной группы, необязательно замещенного-(O)C_1-6 алкила, необязательно замещенного-(O)C_1-6 алкенила, необязательно замещенного (O)C_1-6 алкинила, необязательно замещенного (O)С_4-12 циклоалкила, необязательно замещенного -(O)C_1-6алкилС_4-12циклоалкила, необязательно замещенного -(O)С_4-12 гетероциклила, необязательно замещенного -(O)С_1-6алкилС_4-12 гетероциклила, необязательно замещенного -(O)С_4-12 арила, необязательно замещенного -(O)С_1-6алкилС_5-12арила, необязательно замещенного -(O)С_1-12 гетероарила и необязательно замещенного (O)С_1-6алкилС_1-12 гетероарила, при этом заболевание или расстройство связаны с кишечником.

[0018] В некоторых вариантах реализации изобретения введение соединения Формулы (I) вызывает значительное увеличение содержания HNF4α.

[0019] В некоторых вариантах реализации изобретения введение соединения Формулы (I) обеспечивает повышение количества кишечных ворсинок.

[0020] В некоторых вариантах реализации изобретения введение соединения Формулы (I) увеличивает скорость образования клеток Панета.

[0021] В некоторых вариантах реализации изобретения заболевание или расстройство, связанное с печенью или кишечником, представляет собой воспаление.

[0022] В некоторых вариантах реализации изобретения заболевание или расстройство, связанное с кишечником, представляет собой состояние, связанное с аллергическим ответом.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ

[0023] Особенности и преимущества композиций и способов, описанных в настоящем изобретении, будут очевидны из последующего описания, представленного вместе с сопроводительными графическими материалами. Эти графические материалы отображают определенные аспекты композиций и способов, описанных в настоящем изобретении, и, таким образом, не должны рассматриваться как ограничивающие его объем. Представленные на графических материалах аналогичные ссылочные номера или символы обычно обозначают аналогичные компоненты, если из контекста не следует иное. Графические материалы могут быть выполнены не в масштабе.

[0024] Фиг. 1 иллюстрирует анализ зависимости «доза-эффект» для N-транс-кофеоилтирамина, N-транс-ферулоилтирамина и п-кумароилтирамина при количественных определениях по измерению инсулин-промоторной активности. В качестве отрицательного и положительного контроля использовали диметилсульфоксид (ДМСО) и альверин (20 мкМ), соответственно.

[0025] Фиг. 2 иллюстрирует влияние N-транс-кофеоилтирамина, N-транс-ферулоилтирамина и п-кумароилтирамина на уровни HNF4α мРНК, определяемые методом количественной ПЦР. ДМСО и альверин (20 мкМ) использовали в качестве отрицательного и положительного контроля, соответственно.

[0026] Фиг. 3 иллюстрирует количества N-транс-кофеоилтирамина, N-транс-ферулоилтирамина и п-кумароилтирамина, присутствующие в этанольных экстрактах (масс % в экстракте), полученных из различных источников, включая семя Tribulus terrestris (1), оболочки семян Cannabis (конопли) (2), семя растений вида Аппопа (атемойя) (3), семяАппопа muricata (гуанабана) (4), листья A. cherimola (черимойя) (5), стебли Zea mays (6), семя Tribulus terrestris (якорец стелющийся, кавунец) (7), твердая древесинаА cherimola (кора и сердцевина) (8), измельченный жмых Solarium lycopersicum (9), кожура S. tuberosum (желтый картофель) (10), плоды Piper nigrum (черного перца) (11), кожура S. tuberosum (розовый картофель) (12), кожура S. tuberosum (касный картофель) (13), жмых S. lycopersicum (14), экструдированный жмых S. lycopersicum (15), листья A. muricata (гуанабана) (16), головки Allium sativum (чеснока) (17), кожура S. tuberosum (розовый картофель) (18), листья А. montana (анона горная) (19), листья Z. mays (20), проростки S. tuberosum (розовый картофель) (21), семя A. cherimola (черимойя) (22), цельное растения Allium fistulosum (зеленый лук) (23), кожура S. tuberosum (белый картофель) (24), сырая древесина A. cherimola (черимойя) (25), листья Cannabis (конопля) (26), кожура S. tuberosum (белый картофель) (27), семена S. lycopersicum (28), цельные плоды томата iS. lycopersicum (бычье сердце) (29), кожура незрелых плодов А. muricata (гуанабана) (30), свежие спелые плоды A. muricata (гуанабана) (31), цельные плоды А. squamosa (анона чешуйчатая, сахарное яблоко) (32), плоды Capsicum аппиит (перец серрано) (33), кожура S. tuberosum (картофель Рассет ) (34), плоды Lycium barbarum (годжи, китайская волчья ягода) (35), мякоть S. tuberosum (розовый картофель) (36), семя Chenopodium quinoa (лебеда квиноа) (37), цельные клубни Ipomoea batatas (сладкий картофель) (38), кожура Ipomoea batatas (сладкий картофель) (39), корневища Armoracia rusticana (хрен) (40), кожура S. tuberosum (колорадский картофель) (41), оболочка Fagopyrum esculentum (гречка) (42), плоды Capsicum frutescens (перец пири-пири) (43), мякоть S. tuberosum (розовый картофель) (44), стебли и листья С.annuum (тайский вид перца чили) (45), мякоть незрелых фруктов А. muricata (гуанабана) (46), мякоть S. tuberosum (желтый картофель) (47) и семя Eragrostis tef (полевичка тефф) (48).

[0027] Фиг. 4 показывает, как повышается содержание HNF4α в кишечнике мышей DIO, получавших NCT.

[0028] Фиг. 5 иллюстрирует увеличение количества клеток Панета в кишечнике мышей DIO, получавших NCT.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[0029] В настоящем изобретении показано, что тираминсодержащие амиды гидроксикоричной кислоты и содержащие их экстракты, выделенные из природных источников, увеличивают или усиливают экспрессию/активность HNF4α. Учитывая, что снижение экспрессии HNF4α в эпителиальном слое кишечника, как было показано, связано с патогенезом ВЗК и других хронических заболеваний, связанных с воспалением кишечника, эти природные соединения и экстракты подходят для восстановления состояния пищеварительной системы в случае ВЗК и других хронических желудочно-кишечных состояний. Выигрышным образом, соединения и экстракты согласно настоящему изобретению имеют ряд потенциальных преимуществ, включая приемлемость для пациентов, относительную безопасность, низкую стоимость и возможность применения в качестве дополнительного метода лечения к традиционным западным медицинским подходам.

[0030] Тираминсодержащие амиды гидроксикоричной кислоты согласно настоящему изобретению представляют собой аналоги соединений свинца, идентифицированные в традиционных скрининговых анализах на агенты, модулирующие известные сигнальные пути. Тираминсодержащие амиды гидроксикоричной кислоты проявляют дозозависимую активность в отношении HNF4α, как это было первоначально определено на полученных генной инженерией клетках поджелудочной железы T6PNE, и повышают уровни HNF4α мРНК. Не ограничиваясь какой-либо конкретной теорией, полагают, что тираминсодержащие амиды гидроксикоричной кислоты согласно настоящему изобретению повышают активность HNF4α в результате более высокого сродства к сайту связывания HNF4α по сравнению с природным лигандом, пальмитиновой кислотой, которая снижает активность HNF4α. Соответственно, за счет повышения активности HNF4α соединения согласно настоящему изобретению можно применять для улучшения работы пищеварительной системы, тем самым устраняя патогенез, лежащий в основе желудочно-кишечных расстройств, таких как ВЗК, ЯК и БК. Применение композиции согласно настоящему изобретению укрепляет здоровье и улучшает самочувствие пациента.

Композиции

[0031] В некоторых аспектах настоящего изобретения предложены ароматические метаболиты растительного происхождения с одной или более кислотных гидроксильных групп, связанных с ароматическими аренами, и их применение для модулирования метаболизма. Согласно одному варианту реализации изобретения ароматический метаболит растительного происхождения представляет собой структурный аналог соединения 1.

[0032] В частности, изобретение охватывает соединение Формулы (I) или его изомер, соль, гомодимер, гетеродимер или конъюгат:

[0033] В некоторых вариантах реализации изобретения каждый из R¹, R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸ и R⁹ независимо выбран из водорода, дейтерия, гидроксила, галогена, цианогруппы, нитрогруппы, необязательно замещенной аминогруппы, необязательно замещенной С-амидогруппы, необязательно замещенной N-амидогруппы, необязательно замещенной сложноэфирной группы, необязательно замещенного (O)C_1-6 алкила, необязательно замещенного -(O)C_1-6 алкенила, необязательно замещенного -(O)C_1-6 алкинила, необязательно замещенного -(O)C_4-12 циклоалкила, необязательно замещенного -(O)С_1-6алкилС_4-12циклоалкила, необязательно замещенного -(O)С_4-12 гетероциклила, необязательно замещенного -(O)С_1-6алкилС_4-12 гетероциклила, необязательно замещенного -(O)C_4-12 арила, необязательно замещенного (O)С_1-6алкилС_5-12арила, необязательно замещенного -(O)С_1-12 гетероарила и необязательно замещенного -(О)C_1-6алкилС_1-12гетероарила.

[0034] В некоторых вариантах реализации изобретения каждый из R¹, R², R³ и R⁸ независимо выбран из водорода, дейтерия, гидроксила, галогена, цианогруппы, нитрогруппы, необязательно замещенной аминогруппы, необязательно замещенной С-амидогруппы, необязательно замещенной N-амидогруппы, необязательно замещенной сложноэфирной группы, необязательно замещенного -(O)C_1-6 алкила, необязательно замещенного -(О)С_1-6 алкенила, необязательно замещенного (O)C_1-6 алкинила, необязательно замещенного (O)С_4-12 циклоалкила, необязательно замещенного -(O)C_1-6алкилС_4-12циклоалкила, необязательно замещенного -(O)С_4-12 гетероциклила, необязательно замещенного -(O)С_1-6алкилС_4-12 гетероциклила, необязательно замещенного -(O)С_4-12 арила, необязательно замещенного -(O)С_1-6алкилС_5-12арила, необязательно замещенного -(O)С_1-12 гетероарила и необязательно замещенного (O)С_1-6алкилС_1-12 гетероарила, a R⁴ R⁵, R⁶, R⁷ и R⁹ независимо представляют собой водород, дейтерий, гидроксил или галоген;

[0035] В некоторых вариантах реализации изобретения каждый из R¹, R² и R⁸ независимо выбран из водорода, дейтерия, гидроксила, галогена, цианогруппы, нитрогруппы, необязательно замещенной аминогруппы, необязательно замещенной С-амидогруппы, необязательно замещенной N-амидогруппы, необязательно замещенной сложноэфирной группы, необязательно замещенного -(O)C_1-6алкила, необязательно замещенного -(O)C_1-6 алкенила, необязательно замещенного -(O)C_1-6 алкинила, необязательно замещенного, -(O)С_4-12 циклоалкила, необязательно замещенного -(O)C_1-6алкилС_4-12циклоалкила, необязательно замещенного -(O)C_4-12 гетероциклила, необязательно замещенного -(O)С_1-6алкилС_4-12 гетероциклила, необязательно замещенного -(O)С_4-12 арила, необязательно замещенного -(O)С_1-6алкилС_5-12арила, необязательно замещенного -(О)C_1-12гетероарила и необязательно замещенного -(O)С_1-6алкилС_1-12 гетероарила, а каждый из R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷ и R⁹ независимо представляют собой водород, дейтерий, гидроксил или галоген.

[0036] В некоторых вариантах реализации изобретения пунктирная связь означает наличие или отсутствие связи.

[0037] В некоторых вариантах реализации изобретения X представляет собой СН₂ или О.

[0038] В некоторых вариантах реализации изобретения Z представляет собой CHR^a, NR^a или О.

[0039] В некоторых вариантах реализации изобретения R^a выбран из водорода, дейтерия, гидроксила, галогена, цианогруппы, нитрогруппы, необязательно замещенной аминогруппы, необязательно замещенной С-амидогруппы, необязательно замещенной N-амидогруппы, необязательно замещенной сложноэфирной группы, необязательно замещенного -(О)С_1-6 алкила, необязательно замещенного -(O)C_1-6 алкенила, необязательно замещенного -(O)C_1-6 алкинила, необязательно замещенного -(O)С_4-12 циклоалкила, необязательно замещенного -(O)С_1-6алкилС_4-12циклоалкила, необязательно замещенного -(O)C_4-12 гетероциклила, необязательно замещенного -(O)С_1-6алкилС_4-12 гетероциклила, необязательно замещенного -(O)C_4-12 арила, необязательно замещенного -(O)С_1-6алкилС_5-12арила, необязательно замещенного -(O)С_1-12 гетероарила и необязательно замещенного -(О)С_1-6алкилС_1-12 гетероарила.

[0040] В некоторых вариантах реализации соединение Формулы (I) представлено в виде его фармацевтически приемлемой соли или сольвата.

[0041] В некоторых вариантах реализации изобретения соединение Формулы (I) выбрано из (Е)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-этоксифенил)акриламида, (Е)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-(2-метоксиэтокси)фенил)акриламида, (Е)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-(2-(метилсульфонил)этокси) фенил)акриламида, (Е)-2-(4-(2-(3-(3,4-дигидроксифенил)акриламидо)этил)фенокси)уксусной кислоты, этил(Е)-2-(4-(2-(3-(3,4-дигидроксифенил)акриламидо)этил)фенокси)ацетата, (E)-N-(4-(циклопропилметокси)фенэтил)-3-(3,4-дигидроксифенил)акриламида, (Е)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-(3,3,3-трифторпропокси)фенэтил)акриламида, (Е)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-((тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)метокси)фенэтил)акриламида, (Е)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-((4-фторбензил)окси)фенэтил)акриламида, (E)-N-(4-(цианометокси)фенэтил)-3-(3,4-дигидроксифенил)акриламида, (Е)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-(пиридин-3-илметокси)фенэтил)акриламида, (Е)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-(пиридин-2-илметокси)фенэтил)акриламида, (Е)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-(2-(диметиламино)этокси)фенэтил)акриламида, (Е)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-изобутоксифенэтил)акриламида, (Е)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-(пиридин-4-илметокси)фенэтил)акриламида, (Е)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-((4-метоксибензил)окси)фенэтил)акриламида, (Е)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-(оксетан-3-илметокси)фенэтил)акриламида, (Е)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-((тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)метокси)фенэтил)акриламида, (Е)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-((тетрагидрофуран-2-ил)метокси)фенэтил)акриламида, (Е)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-(тиофен-2-илокси)фенэтил)акриламида, (Е)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-(3,3-диметилбутокси)фенэтил)акриламида, (Е)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-(2-гидроксиэтокси)фенэтил)акриламида, (Е)-N-(4-((1Н-тетразол-5-ил)метокси)фенэтил)-3-(3,4-дигидроксифенил)акриламида, (Е)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-((1-метилпирролидин-2-ил)метокси)фенэтил)акриламида, (Е)-2-гидрокси-5-(3-((4-гидроксифенэтил)амино)-3-оксопроп-1-ен-1-ил)фенилгидрокарбоната, (Е)-3-(4-гидрокси-3-(пиридин-4-илокси)фенил)-N-(4-гидроксифенэтил)акриламида, (Е)-3-(4-гидрокси-3-изобутоксифенил)-N-(4-гидроксифенэтил)акриламида, (Е)-3-(3-(4-фторфенокси)-4-гидроксифенил)-N-(4-гидроксифенэтил)акриламида, (Е)-3-(3-(цианометокси)-4-гидроксифенил)-N-(4-гидроксифенэтил)акриламида, (Е)-2-(2-гидрокси-4-(3-((4-гидроксифенэтил)амино)-3-оксопроп-1-ен-1-ил)фенокси)уксусной кислоты, (Е)-3-(3-гидрокси-4-(пиридин-4-илметокси)фенил)-N-(4-гидроксифенил)акриламида, (Е)-3-(4-(4-фторбензил)окси)-3-гидроксифенил)-N-(4-гидроксифенэтил)акриламида, (Е)-3-(3-гидрокси-4-изобутоксифенил)-N-(4-гидроксифенэтил)акриламида, (Е)-3-(4-цианометокси)-3-гидроксифенил)-N-(4-гидроксифенэтил)акриламида, (Е)-N-(3-(3,4-дигидроксифенил)акрилоил)-N-(4-гидроксифенэтил)глицина, (Е)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-гидроксифенэтил)-N-(пиридин-4-илметил)акриламида, (Е)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-гидроксифенэтил)-N-изобутилакриламида, (Е)-N-(цианометил)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-гидроксифенэтил)акриламида, 3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-гидроксифенэтил)пропанамида, 3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-(метилсульфонамидо)фенэтил)пропанамида или фармацевтических солей, сольватов и комбинации вышеуказанного.

[0042] В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение включает соединение Формулы (II):

[0043] В некоторых вариантах реализации изобретения каждый из R¹, R², R³ и R⁴ независимо выбран из водорода, дейтерия, гидроксила, галогена, цианогруппы, нитрогруппы, необязательно замещенной аминогруппы, необязательно замещенной С-амидогруппы, необязательно замещенной N-амидогруппы, необязательно замещенной сложноэфирной группы, необязательно замещенного -(O)C_1-6 алкила, необязательно замещенного -(О)С_1-6 алкенила, необязательно замещенного (O)C_1-6 алкинила, необязательно замещенного (O)С_4-12 циклоалкила, необязательно замещенного -(O)C_1-6алкилС_4-12циклоалкила, необязательно замещенного -(O)С_4-12 гетероциклила, необязательно замещенного -(O)С_1-6алкилС_4-12 гетероциклила, необязательно замещенного -(O)С_4-12 арила, необязательно замещенного -(O)С_1-6алкилС_5-12арила, необязательно замещенного -(O)С_1-12 гетероарила и необязательно замещенного -(О)С_1-6алкилС_1-12гетероарила.

[0044] В некоторых вариантах реализации изобретения пунктирная связь означает наличие или отсутствие связи.

[0045] В некоторых вариантах реализации изобретения Z представляет собой CHR^a, NR^a или О.

[0046] В некоторых вариантах реализации изобретения R^a выбран из водорода, дейтерия, гидроксила, галогена, цианогруппы, нитрогруппы, необязательно замещенной аминогруппы, необязательно замещенной С-амидогруппы, необязательно замещенной N-амидогруппы, необязательно замещенной сложноэфирной группы, необязательно замещенного -(О)С_1-6 алкила, необязательно замещенного -(О)С_1-6 алкенила, необязательно замещенного -(O)C_1-6 алкинила, необязательно замещенного -(O)С_4-12 циклоалкила, необязательно замещенного -(O)С_1-6алкилС_4-12циклоалкила, необязательно замещенного -(O)С_4-12 гетероциклила, необязательно замещенного -(O)С_1-6алкилС_4-12 гетероциклила, необязательно замещенного -(O)С_4-12 арила, необязательно замещенного -(O)С_1-6алкилС_5-12арила, необязательно замещенного -(O)С_1-12 гетероарила и необязательно замещенного -(О)С_1-6алкилС_1-12гетероарила.

[0047] В некоторых вариантах реализации изобретения соединение Формулы (II) выбрано из (Е)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-этоксифенил)акриламида, (Е)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-(2-метоксиэтокси)фенил)акриламида, (Е)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-(2-(метилсульфонил)этокси) фенил)акриламида, (Е)-2-(4-(2-(3-(3,4-дигидроксифенил)акриламидо)этил)фенокси)уксусной кислоты, этил(Е)-2-(4-(2-(3-(3,4-дигидроксифенил)акриламидо)этил)фенокси)ацетата, (E)-N-(4-(циклопропилметокси)фенэтил)-3-(3,4-дигидроксифенил)акриламида, (Е)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-(3,3,3-трифторпропокси)фенэтил)акриламида, (Е)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-((тетрагидро-2Н-пиран-4-ил)метокси)фенэтил)акриламида, (Е)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-((4-фторбензил)окси)фенэтил)акриламида, (E)-N-(4-(цианометокси)фенэтил)-3-(3,4-дигидроксифенил)акриламида, (Е)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-(пиридин-3-илметокси)фенэтил)акриламида, (Е)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-(пиридин-2-илметокси)фенэтил)акриламида, (Е)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-(2-(диметиламино)этокси)фенэтил)акриламида, (Е)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-изобутоксифенэтил)акриламида, (Е)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-(пиридин-4-илметокси)фенэтил)акриламида, (Е)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-((4-метоксибензил)окси)фенэтил)акриламида, (Е)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-(оксетан-3-илметокси)фенэтил)акриламида, (Е)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-((тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)метокси)фенэтил)акриламида, (Е)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-((тетрагидрофуран-2-ил)метокси)фенэтил)акриламида, (Е)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-(тиофен-2-илокси)фенэтил)акриламида, (Е)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-(3,3-диметилбутокси)фенэтил)акриламида, (Е)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-(2-гидроксиэтокси)фенэтил)акриламида, (Е)-N-(4-((1Н-тетразол-5-ил)метокси)фенэтил)-3-(3,4-дигидроксифенил)акриламида, (Е)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-((1-метилпирролидин-2-ил)метокси)фенэтил)акриламида, (Е)-2-гидрокси-5-(3-((4-гидроксифенэтил)амино)-3-оксопроп-1-ен-1-ил)фенилгидрокарбоната, (Е)-3-(4-гидрокси-3-(пиридин-4-илокси)фенил)-N-(4-гидроксифенэтил)акриламида, (Е)-3-(4-гидрокси-3-изобутоксифенил)-N-(4-гидроксифенэтил)акриламида, (Е)-3-(3-(4-фторфенокси)-4-гидроксифенил)-N-(4-гидроксифенэтил)акриламида, (Е)-3-(3-(цианометокси)-4-гидроксифенил)-N-(4-гидроксифенэтил)акриламида, (Е)-2-(2-гидрокси-4-(3-((4-гидроксифенэтил)амино)-3-оксопроп-1-ен-1-ил)фенокси)уксусной кислоты, (Е)-3-(3-гидрокси-4-(пиридин-4-илметокси)фенил)-N-(4-гидроксифенил)акриламида, (Е)-3-(4-(4-фторбензил)окси)-3-гидроксифенил)-N-(4-гидроксифенэтил)акриламида, (Е)-3-(3-гидрокси-4-изобутоксифенил)-N-(4-гидроксифенэтил)акриламида, (Е)-3-(4-цианометокси)-3-гидроксифенил)-N-(4-гидроксифенэтил)акриламида, (Е)-N-(3-(3,4-дигидроксифенил)акрилоил)-N-(4-гидроксифенэтил)глицина, (Е)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-гидроксифенэтил)-N-(пиридин-4-илметил)акриламида, (Е)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-гидроксифенэтил)-N-изобутилакриламида, (Е)-N-(цианометил)-3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-гидроксифенэтил)акриламида, 3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-гидроксифенэтил)пропанамида, 3-(3,4-дигидроксифенил)-N-(4-(метилсульфонамидо)фенэтил)пропанамида или фармацевтических солей, сольватов и комбинации вышеуказанного.

[0048] В некоторых вариантах реализации изобретения соединение Формулы (II) представлено в виде его фармацевтически приемлемой соли или сольвата.

[0049] В некоторых вариантах реализации настоящее изобретение включает соединение Формулы (III):

В некоторых вариантах реализации изобретения каждый из R³ и R⁴ независимо выбран из водорода, дейтерия, гидроксила, галогена, цианогруппы, нитрогруппы, необязательно замещенной аминогруппы, необязательно замещенной С-амидогруппы, необязательно замещенной N-амидогруппы, необязательно замещенной сложноэфирной группы, необязательно замещенного -(О)С_1-6 алкила, необязательно замещенного -(О)С_1-6 алкенила, необязательно замещенного -(O)C_1-6 алкинила, необязательно замещенного -(O)C_4-12 циклоалкила, необязательно замещенного -(O)С_1-6алкилС_4-12циклоалкила, необязательно замещенного -(O)C_4-12 гетероциклила, необязательно замещенного -(O)С_1-6алкилС_2-12 гетероциклила, необязательно замещенного -(O)C_5-12 арила, необязательно замещенного -(O)С_1-6алкилС_5-12арила, необязательно замещенного -(O)С_2-12 гетероарила и необязательно замещенного -(О)С_1-6алкилС_1-12гетероарила.

[0050] В некоторых вариантах реализации изобретения каждая независимо выбранная пунктирная связь означает наличие или отсутствие связи.

[0051] В некоторых вариантах реализации изобретения Z представляет собой CHR^a, NR^a или О.

[0052] В некоторых вариантах реализации R^a выбран из водорода, дейтерия, гидроксила, галогена, цианогруппы, нитрогруппы, необязательно замещенной аминогруппы, необязательно замещенной С-амидогруппы, необязательно замещенной N-амидогруппы, необязательно замещенной сложноэфирной группы, необязательно замещенного -(О)С_1-6 алкила, необязательно замещенного -(O)C_1-6 алкенила, необязательно замещенного -(O)C_1-6 алкинила, необязательно замещенного -(O)С_4-12 циклоалкила, необязательно замещенного (O)C_4-12 гетероциклила, необязательно замещенного -(O)С_4-12 циклоалкила, необязательно замещенного -(O)С_1-6алкилС_5-12арила и необязательно замещенного -(O)С_1-6алкилС_5-12гетероарила.

[0053] В некоторых вариантах реализации изобретения каждый из Q^a Q^b, Q^c, Q^d независимо выбран из связи, CHR^a, NR^a, С=O и -О-.

[0054] В некоторых вариантах реализации изобретения R^a выбран из водорода, дейтерия, гидроксила, галогена, цианогруппы, нитрогруппы, необязательно замещенной аминогруппы, необязательно замещенной С-амидогруппы, необязательно замещенной N-амидогруппы, необязательно замещенной сложноэфирной группы, необязательно замещенного -(О)С_1-6 алкила, необязательно замещенного -(O)C_1-6 алкенила, необязательно замещенного -(O)C_1-6 алкинила, необязательно замещенного -(O)С_4-12 циклоалкила, необязательно замещенного -(O)С_1-6алкилС_4-12циклоалкила, необязательно замещенного -(O)C_4-12 гетероциклила, необязательно замещенного -(O)С_1-6алкилС_4-12 гетероциклила, необязательно замещенного -(O)C_4-12 арила, необязательно замещенного -(O)С_1-6алкилС_5-12арила, необязательно замещенного -(O)C_1-12 гетероарила и необязательно замещенного -(О)С_1-6алкилС_1-12 гетероарила.

[0055] В некоторых вариантах реализации изобретения отсутствуют Q^c и Q^d. В некоторых вариантах реализации изобретения отсутствует Q^d.

[0056] В некоторых вариантах реализации изобретения n равен 1, 2, 3 или 4.

[0057] В некоторых вариантах реализации изобретения соединение Формулы (II) представлено в виде его фармацевтически приемлемой соли или сольвата.

[0058] Термин «изомер» относится главным образом к оптическим изомерам (например, к по существу чистым энантиомерам, по существу чистым диастереомерам и их смесям), а также к конформационньгм изомерам (т.е. изомерам, которые отличаются только углами по меньшей мере одной химической связи), позиционным изомерам (в частности, таутомерам) и геометрическим изомерам (например, цис-транс изомерам).

[0059] В некоторых вариантах реализации изобретения соединение Формулы (I) или Формулы (II) выбрано из следующего:

[0060] Соль соединения согласно настоящему изобретению относится к соединению, которое обладает желаемой фармакологической активностью исходного соединения и включает: (1) кислотно-аддитивную соль, образованную неорганической кислотой, такой как хлористоводородная кислота, бромистоводородная кислота, серная кислота, азотная кислота, фосфорная кислота и тому подобное; или образованную органической кислотой, такой как уксусная кислота, пропионовая кислота, капроновая кислота, циклопентанпропионовая кислота, гликолевая кислота, пировиноградная кислота, молочная кислота, малоновая кислота, янтарная кислота, яблочная кислота, малеиновая кислота, фумаровая кислота, винная кислота, лимонная кислота, бензойная кислота, 3-(4-гидроксибензоил)бензойная кислота, коричная кислота, миндальная кислота, метансульфоновая кислота, этансульфоновая кислота, 1,2-этан-дисульфоновая кислота, 2-гидроксиэтансульфоновая кислота, бензолсульфоновая кислота, 4-хлорбензолсульфоновая кислота, 2-нафталинсульфоновая кислота, камфорсульфоновая кислота, 4-толуолсульфоновая кислота, 4-метилбицикло[2.2.2]-окт-2-ен-1-овая кислота, глюкогепто новая кислота, 3-фенилпропионовая кислота, триметилуксусная кислота, третбутилуксусная кислота, лаурилсерная кислота, глюконовая кислота, глутаминовая кислота, гидроксинафтойная кислота, салициловая кислота, стеариновая кислота, муконовая кислота и т.п. или (2) соль, образованную путем замены кислотного протона, имеющегося в исходном соединении.

[0061] Как известно из уровня техники, гомодимер представляет собой молекулу, состоящую из двух идентичных субъединиц тираминсодержащего амида гидроксикоричной кислоты. Для сравнения, гетеродимер представляет собой молекулу, состоящую из двух различных субъединиц тираминсодержащих амидов гидроксикоричной кислоты. Примеры гомодимеров согласно настоящему изобретению включают, но не ограничиваются ими, сшитый N-транс-ферулоилтираминовый димер, сшитый N-транс-кофеоилтираминовый димер и сшитый п-кумароилтираминовый димер. См., например, работу King & Calhoun (2005) Phytochemistry 66(20):2468-73, в которой описано выделение сшитого N-транс-ферулоилтираминового димера из бляшек обыкновенной парши картофеля.

[0062] Конъюгаты мономеров тираминсодержащего амида гидроксикоричной кислоты и других соединений, таких как амиды лигнана. Примеры конъюгатов включают, но не ограничиваются ими, каннабизин А, каннабизин В, каннабизин С, каннабизин D, каннабизин Е, каннабизин F и гроссамид.

[0063] Во всех случаях, когда группу описывают как «необязательно замещенная», эта группа может быть незамещенной или замещенной одним или более из указанных заместителей. Аналогичным образом, когда группу описывают как «незамещенная или замещенная», в случае замещенной заместитель может быть выбран из одного или более указанных заместителей. Если заместители не указаны, подразумевается, что указанная «необязательно замещенная» или «замещенная» группа может быть индивидуально и независимо замещена одной или более группами, индивидуально и независимо выбранными из алкила, алкенила, алкинила, циклоалкила, цикло алкенила, циклоалкинила, арила, гетероарила, гетероалициклила, аралкила, гетероаралкила, (гетероалициклил)алкила, гидроксила, защищенного гидроксила, алкоксигруппы, арилоксигруппы, ацила, меркаптогруппы, алкилтиогруппы, арилтиогруппы, цианогруппы, галогена, тиокарбонила, О-карбамила, N-карбамила, О-тиокарбамила, N-тиокарбамила, С-амидогруппы, N-амидогруппы, S-сульфонамидогруппы, N-сульфонамидогруппы, С-карбоксигруппы, защищенной С-карбоксигруппы, О-карбоксигруппы, изоцианатогруппы, тиоцианотиатогруппы, изотиоцианотиатогруппы, нитрогруппы, силила, сульфенила, сульфинила, сульфонила, галоген алкила, галогеналкоксигруппы, тригалогенметансульфонамидогруппы, аминогруппы, однозамещенной аминогруппы, двузамещенной аминогруппы и их защищенных производных.

[0064] Для групп, упоминаемых в настоящем изобретении, следующие заключенные в скобки индексы дополнительно определяют группы следующим образом: обозначение "(C_n)" определяет точное количество (n) атомов углерода в группе. Например, "C₁-С₆-алкил" обозначает алкильные группы, имеющие от 1 до 6 атомов углерода (например, 1, 2, 3, 4, 5 или 6, или любой диапазон, который можно получить в этих пределах (например, 3-6 атомов углерода)).

[0065] Помимо изомеров, солей, гомодимеров, гетеродимеров и конъюгатов, тираминсодержащий амид гидроксикоричной кислоты также может быть гликозилирован. Гликозилированный тираминсодержащий амид гидроксикоричной кислоты, может быть получен путем трансгликозилирования тираминсодержащего амида гидроксикоричной кислоты, в результате чего происходит добавление глюкозных звеньев, например, одной, двух, трех, четырех, пяти или более пяти глюкозных звеньев, к тираминсодержащему амиду гидроксикоричной кислоты. Трансгликозилирование может быть проведено посредством любого подходящего фермента, включая, но не ограничиваясь ими, пуллуланазу и изомальтазу (Lobov, et al. (1991) Agric. Biol. Chem. 55:2959-2965), ~ -галактозидазу (Kitahata, et al. (1989) Agric. Biol. Chem. 53:2923-2928), декстринсахаразу (Yamamoto, et al. (1994) Biosci. Biotech. Biochem. 58:1657-1661) или циклодекстрин-глюконотрансферазу, при этом донорами являются пуллулан, мальтоза, лактоза, частично гидролизованный крахмал и мальтодекстрин.

[0066] В контексте настоящего изобретения термин «алкил» относится к линейной или разветвленной углеводородной цепи, которая содержит полностью насыщенную (без двойных или тройных связей) углеводородную группу. Алкильная группа может содержать от 1 до 20 атомов углерода (во всех случаях, когда она фигурирует в настоящем изобретении, числовой диапазон, такой как «от 1 до 20», относится к каждому целому числу в данном диапазоне; например, «от 1 до 20 атомов углерода» означает, что алкильная группа может состоять из 1 атома углерода, 2 атомов углерода, 3 атомов углерода и т.д., вплоть до 20 атомов углерода включительно, хотя настоящее определение также охватывает наличие термина «алкил» там, где числовой диапазон не обозначен). Алкильная группа также может представлять собой алкил среднего размера, содержащий от 1 до 10 атомов углерода. Алкильная группа также может представлять собой низший алкил, содержащий 1-6 атомов углерода. Алкильная группа в соединениях может быть обозначена как "С₁-С₄ алкил" или посредством аналогичных обозначений. Только в качестве примера, обозначение "С₁-С₄ алкил" показывает, что в алкильной цепи имеется от одного до четырех атомов углерода, то есть алкильная цепь выбрана из метила, этила, пропила, изо-пропила, н-бутила, изо-бутила, втор-бутила и трет-бутила. Типичные алкильные группы включают, но никоим образом не ограничиваются ими, метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, третичный бутил, пентил и гексилы. Алкильная группа может быть замещенной или незамещенной.

[0067] Термин «атом галогена» или «галоген» в контексте настоящего изобретения означает любой из радиационно стабильных изотопов атомов Группы VII Периодической таблицы элементов, например, атомы хлора (Cl), фтора (F), брома (Br) и иода (I).

[0068] В любой из групп, описанных в настоящем изобретении, имеющийся атом водорода может быть замещен на алкил, алкенил, алкинил, арил, гетероарил, аралкил, алкиларил, гетероаралкил, гетероарилалкенил, гетероарилалкинил, алкилгетероарил, гидроксильную группу, гидроксиалкил, алкоксигруппу, арилоксигруппу, алкоксиалкоксигруппу, алкоксикарбонил, ацил, галоген, нитрогруппу, арилоксикарбонил, цианогруппу, карбоксигруппу, аралкоксикарбонил, алкилсульфонил, арилсульфонил, гетероарилсульфонил, алкилтиогруппу, арилтиогруппу, гетероарилтиогруппу, аралкилтиогруппу, гетероаралкилтиогруппу, циклоалкил или гетероциклил.

[0069] Любая не обозначенная валентность на атоме структурной формулы, указанной в настоящем изобретении, подразумевает наличие атома водорода, связанного с указанным атомом.

[0070] В контексте настоящего изобретения термин «алкенил» относится к алкильной группе согласно определению в настоящем описании, которая содержит в прямой или разветвленной углеводородной цепи одну или более двойных связей. Алкенильная группа может быть незамещенной или замещенной.

[0071] В контексте настоящего изобретения термин «алкинил» относится к алкильной группе согласно определению в настоящем описании, которая содержит в прямой или разветвленной углеводородной цепи одну или более тройных связей. Алкинильная группа может быть незамещенной или замещенной.

[0072] В контексте настоящего изобретения термин «циклоалкил» относится к полностью насыщенной (без двойных или тройных связей) моно- или мультициклической углеводородной кольцевой системе. Когда она включает два или более колец, эти кольца могут быть соединены между собой конденсированным образом. Циклоалкильные группы могут содержать от 3 до 10 атомов в кольце (или кольцах) или от 3 до 8 атомов в кольце (или кольцах). Циклоалкильная группа может быть незамещенной или замещенной. Типичные циклоалкильные группы включают, но не ограничиваются ими, циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил и циклооктил.

[0073] В контексте настоящего изобретения термин «арил» относится к карбоциклической (полностью углеродной) моноциклической или мультициклической ароматической кольцевой системе (включая, например, конденсированные, мостиковые или спиро-кольцевые системы, в которых два карбоциклических кольца имеют общую химическую связь, например, одно или более арильных колец с одним или более арильными или неарильными кольцами), которая имеет полностью делокализованную пи-электронную систему по меньшей мере в одном из колец. Количество атомов углерода в арильной группе может варьироваться. Например, арильная группа может представлять собой С₆-С₁₄ арильную группу, С₆-С₁₀ арильную группу или С₆ арильную группу. Примеры арильных групп включают, но не ограничиваются ими, бензол, нафталин и азулен. Арильная группа может быть замещенной или незамещенной.

[0074] В контексте настоящего изобретения термин «гетероциклил» относится к моно- или полициклическим кольцевым системам, содержащим по меньшей мере один гетероатом (например, О, N, S). Такие системы могут быть ненасыщенными, могут включать некоторую ненасыщенность, или могут содержать некоторую ароматическую часть, или быть полностью ароматическими. Гетероциклильная группа может содержать от 3 до 30 атомов. Гетероциклильная группа может быть незамещенной или замещенной.

[0075] В частных вариантах реализации изобретения присутствует радикал R¹, который представляет собой гидроксильную группу в пара-положении, и радикал R², который представляет собой гидроксильную группу или низшую алкоксигруппу в мета-положении. В некоторых вариантах реализации изобретения тираминсодержащий амид гидроксикоричной кислоты, имеющий структуру Формулы (I), характеризуется транс-конфигурацией.

[0076] В контексте настоящего изобретения термин «гетероарил» относится к моноциклической или мультициклической ароматической кольцевой системе (кольцевой системе, содержащей по меньшей мере одно кольцо с полностью делокализованной пи-электронной системой), которая содержит один или более гетероатомов, то есть химический элемент, отличный от углерода, включая, но не ограничиваясь ими, азот, кислород и серу, и по меньшей мере одно ароматическое кольцо. Количество атомов в кольце (или кольцах) гетероарильной группы может варьироваться. Например, гетероарильная группа может содержать от 4 до 14 атомов в кольце (или кольцах), от 5 до 10 атомов в кольце (или кольцах) или от 5 до 6 атомов в кольце (или кольцах). Кроме того, термин «гетероарил» включает конденсированные кольцевые системы, в которых два кольца, такие как по меньшей мере одно арильное кольцо и по меньшей мере одно гетероарильное кольцо или по меньшей мере два гетероарильных кольца, имеют по меньшей мере одну общую химическую связь. Примеры гетероарильных колец включают, но не ограничиваются ими, фуран, фуразан, тиофен, бензотиофен, фталазин, пиррол, оксазол, бензоксазол, 1,2,3-оксадиазол, 1,2,4-оксадиазол, тиазол, 1,2,3-тиадиазол, 1,2,4-тиадиазол, бензотиазол, имидазол, бензимидазол, индол, индазол, пиразол, бензопиразол, изоксазол, бензоизоксазол, изотиазол, триазол, бензотриазол, тиадиазол, тетразол, пиридин, пиридазин, пиримидин, пурин, птеридин, хинолин, изохинолин, хиназолин, хиноксалин, циннолин и триазин. Гетероарильная группа может быть замещенной или незамещенной.

[0077] Термин «аминогруппа» в настоящем изобретении относится к группе NH₂.

[0078] В контексте настоящего изобретения термин «гидроксильная группа» относится к группе ОН.

[0079] Термин «цианогруппа» относится к группе CN.

[0080] Термин «карбонил» относится к группе С=O.

[0081] Термин «С-амидогруппа» относится к группе «-C(=O)N(R_AR_B)», в которой R_A и R_B могут независимо представлять собой водород, алкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, циклоалкенил, циклоалкинил, арил, гетероарил, гетероалициклил, аралкил или (гетероалициклил)алкил, как это определено выше. С-амидогруппа может быть замещенной или незамещенной.

[0082] Термин «N-амидогруппа» относится к группе «RC(=O)N(R_A)-», в которой радикалы R и R_A могут независимо представлять собой водород, алкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, циклоалкенил, циклоалкинил, арил, гетероарил, гетероалициклил, аралкил или (гетероалициклил)алкил, как это определено выше. N-амидогруппа может быть замещенной или незамещенной.

[0083] Термин «мочевинная или карбамидогруппа» относится к группе «-N(R_AR_B)-C(=O)-N(R_AR_B)-», в которой R_A и R_B могут независимо представлять собой водород, алкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, циклоалкенил, циклоалкинил, арил, гетероарил, гетероалициклил, аралкил или (гетероалициклил)алкил, как это определено выше. Мочевинная группа может быть замещенной или незамещенной.

[0084] Термин «фармацевтически приемлемая соль» в контексте настоящего изобретения является широким термином, и ему следует придавать его обычное и общепринятое значение, известное обычному специалисту в данной области техники (и не ограничиваться каким-либо специальным или индивидуально адаптированным значением), и относится без ограничения к соли соединения, которая не вызывает значительного раздражения организма, в который ее вводят, и при этом не аннулирует биологическую активность и свойства самого соединения. В некоторых вариантах реализации изобретения соль представляет собой кислотно-аддитивную соль соединения. Фармацевтические соли могут быть получены взаимодействием соединения с неорганическими кислотами, такими как галогенводородная кислота (например, хлористоводородная кислота или бромистоводородная кислота), серная кислота, азотная кислота и фосфорная кислота. Фармацевтические соли также могут быть получены взаимодействием соединения с органической кислотой, такой как алифатическая или ароматическая карбоновая или сульфоновая кислоты, например, муравьиная кислота, уксусная кислота (АсОН), пропионовая кислота, гликолевая кислота, пировиноградная кислота, малоновая кислота, малеиновая кислота, фумаровая кислота, трифторуксусная кислота (ТФУ), бензойная кислота, коричная кислота, миндальная кислота, янтарная кислота, молочная кислота, яблочная кислота, винная кислота, лимонная кислота, аскорбиновая кислота, никотиновая кислота, метансульфоновая кислота, этансульфоновая кислота, п-толуолсульфоновая кислота, салициловая кислота, стеариновая кислота, муконовая кислота, масляная кислота, фенилуксусная кислота, фенилмасляная кислота, вальпроевая кислота, 1,2-этандисульфоновая кислота, 2-гидроксиэтансульфоновая кислота, бензолсульфоновая кислота, 2-нафталинсульфоновая кислота или нафталинсульфоновая кислота. Фармацевтические соли также могут быть получены путем взаимодействия соединения с основанием, в результате чего образуется соль, такая как соль аммония, соль щелочного металла, такая как соль лития, натрия или калия, соль щелочноземельного металла, такая как соль кальция, магния или алюминия, соль органического основания, такого как дициклогексиламин, N-метил-В-глюкамин, трис(гидроксиметил)метиламин, С₁-С₇ алкиламин, циклогексиламин, дициклогексиламин, триэтаноламин, этилендиамин, этаноламин, диэтаноламин, триэтаноламин, трометамин и соль с аминокислотой, такой как аргинин и лизин, или соль неорганического основания, такого как гидроксид алюминия, гидроксид кальция, гидроксид калия, гидроксид натрия, гидроксид натрия, карбонат натрия и т.п.

[0085] Следует понимать, что в любом соединении, описанном в настоящем изобретении и имеющем один или более хиральных центров, при отсутствии явного указания на абсолютную стереохимию каждый центр может независимо иметь R-конфигурацию или S-конфигурацию, или представлять смесь конфигураций. Таким образом, соединения, предложенные в настоящем изобретении, могут быть энантиомерно чистыми, энантиомерно обогащенными или представлять собой стереоизомерные смеси и включать все диастереомерные и энантиомерные формы. Кроме того, следует понимать, что в любом соединении, описанном в настоящем изобретении и имеющем одну или более двойных связей, образующих геометрические изомеры, которые могут быть определены как Е или Z, каждая двойная связь может независимо представлять собой Е или Z изомеры или их смесь. Стереоизомеры при необходимости получают такими способами, как стереоселективный синтез и/или разделение стереоизомеров на хиральных хроматографических колонках.

[0086] Аналогичным образом, следует понимать, что любое описанное соединение подразумевает также включение всех его таутомерных форм.

[0087] Следует понимать, что соединения, описанные в настоящем изобретении, могут быть мечены изотопами или другими способами, включая, но не ограничиваясь ими, применение хромофоров или флуоресцентных фрагментов, биолюминесцентных меток или хемилюминесцентных меток. Замещение изотопами, такими как дейтерий, может придавать соединениям определенные терапевтические преимущества, обусловленные большей метаболической стабильностью, такие как, например, увеличение периода полувыведения in vivo или снижение требований к дозировке. Каждый химический элемент, представленный в структуре соединения, может означать любой изотоп указанного элемента. Например, в структурной формуле соединения атом водорода может быть раскрыт явным образом или подразумеваться как присутствующий в соединении. В любом положении молекулы соединения, в котором может присутствовать атом водорода, он может представлять собой любой изотоп водорода, включая, но не ограничиваясь ими, водород-1 (протий), водород-2 (дейтерий) и водород-3 (тритий). Таким образом, в настоящем изобретении ссылка на соединение охватывает все потенциальные изотопные формы, если из контекста явным образом не следует иное.

[0088] Следует понимать, что соединения, описанные в настоящем изобретении, могут быть мечены изотопами или другими способами, включая, но не ограничиваясь ими, применение хромофоров или флуоресцентных фрагментов, биолюминесцентных меток или хемилюминесцентных меток. Замещение изотопами, такими как дейтерий, может придавать соединениям определенные терапевтические преимущества, обусловленные большей метаболической стабильностью, такие как, например, увеличение периода полувыведения in vivo или снижение требований к дозировке. Каждый химический элемент, представленный в структуре соединения, может означать любой изотоп указанного элемента. Например, в структурной формуле соединения атом водорода может быть раскрыт явным образом или подразумеваться как присутствующий в соединении. В любом положении молекулы соединения, в котором может присутствовать атом водорода, он может представлять собой любой изотоп водорода, включая, но не ограничиваясь ими, водород-1 (протий), водород-2 (дейтерий) и водород-3 (тритий). Таким образом, в настоящем изобретении ссылка на соединение охватывает все потенциальные изотопные формы, если из контекста явным образом не следует иное.

[0089] Следует понимать, что способы и составы, описанные в настоящем изобретении, включают применение кристаллических форм, аморфных фаз и/или фармацевтически приемлемых солей, сольватов, гидратов и конформеров соединений согласно некоторым вариантам реализации изобретения, а также метаболитов и активных метаболитов этих соединений, обладающих аналогичным типом активности. Конформер представляет собой структурный, то есть конформационный изомер. Конформационная изомерия представляет собой явление, характерное для молекул с одинаковой структурной формулой, но с разными конформациями атомов вокруг поворотной связи (конформеров). В конкретных вариантах реализации изобретения соединения, описанные в настоящем изобретении, существуют в сольватированных формах в сочетании с фармацевтически приемлемыми растворителями, такими как вода, этанол или т.п.В других вариантах реализации изобретения соединения, описанные в настоящем изобретении, существуют в несольватированной форме. Сольваты содержат стехиометрические или нестехиометрические количества растворителя и могут быть образованы в процессе кристаллизации с фармацевтически приемлемыми растворителями, такими как вода, этанол или т.п.Гидраты образуются в случае, если растворитель представляет собой воду, а алкоголяты образуются в случае, если растворитель представляет собой спирт. Кроме того, соединения, предложенные в настоящем изобретении, могут существовать как в несольватированных, так и в сольватированных формах. В целом, сольватированные формы считаются эквивалентными несольватированным формам для целей и задач, выполняемых путем применения соединений и способов, предложенных в настоящем изобретении. Другие формы, в которых могут быть представлены соединения согласно некоторым вариантам реализации изобретения, включают аморфные формы, размолотые формы и наночастичные формы.

[0090] Аналогичным образом, следует понимать, что соединения, описанные в настоящем изобретении, такие как соединения согласно некоторым вариантам реализации изобретения, включают соединения в любой из форм, описанных в настоящем изобретении (например, фармацевтически приемлемые соли, пролекарства, кристаллические формы, аморфные формы, сольватированные формы, энантиомерные формы, таутомерные формы и т.п.).

Источники действующего соединения

[0091] Соединение согласно настоящему изобретению может быть получено из любого подходящего растительного вида и/или растительного сырьевого материала, который заведомо содержит соединение Формулы (I). Предпочтительно, соединение предлагается в виде экстракта, содержащего данное соединение, или в виде по существу чистого соединения.

[0092] Термин «экстракт» относится к композиции, содержащей соединение Формулы (I), которое отделено от других нежелательных веществ, присутствующих в природном исходном материале, из которого был получен экстракт. В некоторых вариантах реализации изобретения природный исходный материал представляет собой растение. Экстракты растений могут быть получены из любой растительной ткани, включая цельное растение, части растения, такие как вегетативные органы/структуры побегов (например, листья, стебли и клубни), корни, цветы и цветковые органы/структуры (например, прицветники, чашелистики, лепестки, тычинки, плодолистики, пыльники и семяпочки), семена (включая зародыши, эндоспермы и семенную кожуру) или плоды (созревшую завязь), растительные ткани (например, сосудистые ткани, покровные ткани и т.п.); клетки (например, устьичные клетки, гаплоидные клетки и т.п.) или экссудаты, а также их потомство и культуры или клеточные линии. Предпочтительно экстракт содержит соединения, которые будут признаны в целом безопасными (GRAS) для приема внутрь человеком. Соответственно, в некоторых вариантах реализации изобретения экстракт получают из съедобного источника. В этом отношении экстракт представляет собой съедобный экстракт.

[0093] Экстракты могут быть получены путем вымораживания, измельчения, вымачивания, тонкого растирания в порошок, ферментации, процеживания, отваривания, экстрагирования растворителем (например, разделением в системе растворителей) или осаждения, обработки активированным углем, упаривания, фильтрования и/или хроматографического фракционирования представляющего интерес исходного материала. В этом отношении "экстракт" согласно настоящему изобретению может быть неочищенным (сырым), фракционированным, субфракционированным, сепарированным, выделенным, обогащенным или очищенным, не ограничиваясь перечисленным. Термин «неочищенный или сырой» означает соединения или молекулы, которые не были полностью отделены от компонентов исходной композиции, в которой он присутствовал. В вариантах реализации изобретения, касающихся фракций или субфракций, молекулы в сыром экстракте могут быть подвергнуты частичному разделению, в результате чего получают менее сырой экстракт, содержащий другие вещества. В некоторых вариантах реализации изобретения соединение выделяют. Термин «выделенный» означает, что соединения или молекулы существенно обогащены или очищены по сравнению со сложной клеточной средой, в которой они обычно встречаются, например, в неочищенном экстракте. Когда выделенные молекулы обогащены или очищены, абсолютная степень чистоты не имеет принципиального значения, и специалисты в данной области техники могут легко определить подходящие степени чистоты, соответствующие области применения конкретного материала. В некоторых обстоятельствах выделенные молекулы образуют часть композиции (например, более или менее сырой экстракт, содержащий многие другие вещества), которая может, например, содержать и другие компоненты. В других обстоятельствах выделенные молекулы могут быть очищены до существенной однородности, например, количественными методами спектрофотометрии, ЯМР или хроматографии (например, ЖХ-МС).

[0094] Подходящие растворители для приготовления экстракта включают, например, н-пентан, гексан, бутан, хлороформ, дихлорметан, диэтиловый эфир, ацетонитрил, воду, бутанол, изопропанол, этанол, метанол, ледяную уксусную кислоту, ацетон, бутанон, пентанон, норфлуран (HFA134a), этилацетат, диметилсульфоксид, гептафторпропан (HFA227) и подкритические или сверхкритические жидкости, такие как жидкий диоксид углерода и вода, или их комбинацию в любом соотношении. При применении растворителей, таких как перечисленные выше, полученный экстракт обычно содержит неспецифический жирорастворимый материал. Он может быть удален с помощью различных способов, включая «винтеризацию», которая предполагает охлаждение экстракта до заданной температуры, обычно до -20°С с последующей фильтрацией или центрифугированием для удаления воскообразного балласта, экстракцию подкритическим или сверхкритическим диоксидом углерода или неполярными растворителями (например, гексаном) и дистилляцию.

[0095] Экстракты, обогащенные соединением согласно настоящему изобретению, в идеале получают хроматографическим фракционированием. Хроматографическое фракционирование обычно включает колоночную хроматографию и может базироваться на молекулярных размерах, заряде, растворимости и/или полярности соединения. В зависимости от типа хроматографического способа, колоночную хроматографию можно проводить с матричными материалами, включающими, например, декстран, агарозу, полиакриламид, силикагель, С18, С8, поливинилпирролидон, полистирол, целит и адсорбент Phenyl-Hexy, и она также может включать такие растворители, как диметилсульфоксид, пиридин, вода, диметилформамид, метанол, солевой раствор, этиле ндих лор ид, хлороформ, пропанол, этанол, изобутанол, формамид, метилендихлорид, бутанол, ацетонитрил, изопропанол, тетрагидрофуран, диоксан, хлороформ/дихлорметан, метанол, гексан и этилацетат.

[0096] Как правило продукт, получаемый на отдельных стадиях хроматографирования, собирают пофракционно, после чего отдельные фракции могут быть проанализированы на наличие требуемого соединения с помощью любого подходящего аналитического метода (например, тонкослойной хроматографии, масс-спектрометрии и ультрафиолетового поглощения). Затем фракции, обогащенные требуемым соединением, могут быть отобраны для проведения дальнейшей очистки.

[0097] В качестве альтернативы или совместно с хроматографированием можно провести кристаллизацию для получения высокочистых амидов. Раствор тираминсодержащего амида гидроксикоричноой кислоты корректируют по содержанию путем изменения температуры и/или состава раствора, например, путем удаления из него этанола, и/или корректирования уровня рН, так чтобы способствовать осаждению, после чего проводят фильтрование или центрифугирование выпавших кристаллов или маслянистых веществ. Другие подходящие способы включают, но не ограничиваются ими, жидкостно-жидкостную экстракцию, хроматографию с центробежным разделением, адсорбцию на смолах или удаление примесей на смолах.

[0098] «По существу чистый» препарат соединения определяют как препарат, имеющий хроматографическую чистоту (по требуемому соединению) более 95%, предпочтительно более 96%, предпочтительнее более 97%, еще более предпочтительно более 98%, еще более предпочтительно более 99% и наиболее предпочтительно более 99,5%, при определениях путем нормализации площади пиков на профиле ВЭЖХ.

[0099] Термин «экстракт, содержащий соединение» охватывает препараты, имеющие по меньшей мере 2%, предпочтительно более 5%, предпочтительнее более 10% хроматографической чистоты по требуемому соединению. Такой экстракт будет в целом иметь большее содержание примесей, нецелевых материалов и прочих молекул, чем «по существу чистый» препарат.

[0100] В отдельных вариантах реализации изобретения «экстракт, содержащий соединение» представляет собой «растительный» продукт или вещество. В данном контексте термин «растительный» относится к «продуктам, которые включают растительные материалы, водоросли, макроскопические грибы и их комбинации». Растительное сырье определяют путем проведения стадий процесса, используемого для получения экстракта (например, путем измельчения, отваривания, отжима, экстракции водным раствором и/или этанолом), и проводят количественное определение содержания одного или более представляющих интерес соединений.

[0101] В идеале, соединение согласно настоящему описанию экстрагируют и/или выделяют из растения. Примерные растительные источники включают, но не ограничиваются ими, растения, представленные по классам, семействам, порядкам, родам и видам, перечисленным в Таблице 1.

[0102] В качестве иллюстрации экстракт, содержащий N-транс-кофеоилтирамин, получают следующим образом: тонко растирают или размалывают сухие плоды Tribulus terrestris, обрабатывают полученный порошковый материал 80%-ным этанолом при комнатной температуре, фильтруют и концентрируют полученный 80%-ный этанольный экстракт, ресуспендируют концентрированный экстракт в воде, проводят разделение водного раствора с использованием гексана, к водному слою добавляют хлороформ и подвергают хлороформный слой жидкостной хроматографии на силикагеле. См., например, Ko, et al. (2015) Internatl. J. Mot Med. 36(4):1042-8.

[0103] Экстракт, в котором содержится тираминсодержащий амид гидроксикоричной кислоты, можно стандартизировать посредством традиционных методов, таких как высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) или высокоэффективная тонкослойная хроматография (ВЭТСХ). Термин «стандартизированный экстракт» относится к экстракту, стандартизированному путем идентификации присутствующего в нем характеризующего ингредиента (ингредиентов) или биоактивного маркера (маркеров). Характеризация может быть проведена, например, путем анализа спектральных данных, таких как масс-спектр (МС), спектр инфракрасного поглощения (ИК), спектр ультрафиолетового поглощения (УФ) и спектр ядерного магнитного резонанса (ЯМР).

Биологическая активность

[0104] Биологическая активность соединений и/или экстрактов может быть определена с использованием одного или нескольких хорошо известных биологических проб и животных моделей, более подробно описанных ниже. Каждая из таких биопроб определяет уровень активности соединений согласно настоящему изобретению в обеспечении благоприятных воздействий на конечные клеточные показатели, связанные с состоянием пищеварительного тракта и хроническими заболеваниями или расстройствами кишечника, включая, но не ограничиваясь ими, ВЗК, синдром раздраженного кишечника (СРК), ЯК, глютеновую болезнь и БК.

[0105] Модель для оценки целостности эпителиального барьера. Для оценки барьерной функции 3D-сфероиды инкубируют базолатерально с образцами плазмы субъектов, больных СРК, или здоровых контрольных субъектов. В качестве отрицательного и положительного контроля используют только среду и 2 мМ этиленгликольтетрауксусную кислоту (ЭГТУК), соответственно. Сфероиды инкубируют с 2 мл раствора, содержащего 37,5% (об./об.) плазмы, 52,5% (об./об.) среды и 10% (об./об.) декстрана 4 кДа (FD4), меченого флуоресцинизотиоцианатом, в присутствии или в отсутствие соединения или экстракта согласно настоящему изобретению. Отношение базальной и люминальной проницаемости FD4 оценивают с помощью конфокальной микроскопии. См. Ludidi, et al. (2015) PLoS One 10(5):e0123498.

[0106] Модель «Произведенный из энтероида поляризованный монослой (EDM)-сокультура моноцитов». Для оценки трехсторонних взаимодействий между микробами, эпителием кишечника и иммунной системой можно использовать модель «Произведенный из энтероида поляризованный монослой (EDM)-сокультура моноцитов». См. WO 2018/161077 А1. В этой биопробе EDM подготавливают для совместного культивирования на 2-луночных предметных стеклах с ВЗК-ассоциированными микробами на апикальной стороне и неэпителиальными (иммунными и неиммунными клетками, например, моноцитами, Т-клетками, миофибробластами и т.д.) на базолатеральной стороне для воспроизведения 3-сторонней системы, содержащей микробы, эпителий кишечника и иммунную систему. Таким образом можно оценить влияние микробов на эпителий и способность последнего выделять растворимые факторы на базолатеральной стороне (цитокины, такие как МСР-1 или бутирофиллины, которые вовлекают уδ Т-клетки) и одновременно измерить, как такие факторы запускают рекрутинг и активацию неэпителиальных клеток. Используя этот подход, можно индивидуально оценить влияние экстрактов или соединений согласно настоящему изобретению на сложное взаимодействие между кишечными микробами, эпителием и неэпителиальными клетками на экспрессию генов с помощью секвенирования РНК и экспрессии цитокинов посредством анализа методами количественной ПЦР и ИФА.

[0107] Животная модель СРК. Модель Wrap Restrain Stress (WRS) является утвержденной моделью для СРК человека (Williams, et al. (1988) Gastroenterology 94:611-621). Модель WRS обычно применяется однократно (острая проба) и включает принудительную иммобилизацию животного в течение по меньшей мере 2 часов. Эффективность данной пробы подтверждается развитием немедленной гипералгезии, количественно выражаемой по числу колоректальной дистенции (CRD), подавлению транзита тонкой кишки, стимуляции активности толстой кишки и повышенной фекальной экскреции. Кроме того, было продемонстрировано, что крысы в этой пробе показывают слабовыраженное воспаление слизистой оболочки со значительным увеличением уровня тучных клеток и эозинофильных гранулоцитов (Traini, et al. (2016) Neurogastroenterol. Motil. 28:1172-1185; Traini, et al. (2017) J. Cell. Mol. Med. 21:735-745), которые перекрывают уровни, описанные в биопсиях толстой кишки, взятых на СРК. Более того, эти животные показали важные изменения в глиальных клетках, в ингибирующих и возбуждающих нейромедиаторах и рецепторах, которые были интерпретированы как ответственные за нарушение моторики и гиперчувствительность, наблюдаемых у пациентов с СРК. Такая модель полезна для демонстрации in vivo реакции на соединения согласно настоящему изобретению и изучения важнейших показателей, таких как доза-ответ.

[0108] Животная модель хронического колита. Хронический колит индуцируют воздействием раствора 1%-5% (масс./об.) декстрана сульфата натрия (ДСН) (молекулярная масса 36, 000-50, 000 кДа), растворенного в питьевой воде (Okayasu, et al. (1990) Gastroenterology 98:694-702). Раствор ДСН дают ad libitum (без ограничений) в течение пяти-семи дней, после чего в течение несколько дней дают нормальную питьевую воду. Во время введения раствора ДСН у мышей развивается острый колит с образованием язв, потерей массы тела и кровавой диареей. С учетом этого, начиная со дня непосредственно после третьего цикла введения ДСН, мышам вводят соединение или экстракт согласно настоящему описанию для демонстрации in vivo ответа. Макроскопические и гистологические показатели оценивают по всей толстой кишке целиком, а биохимические пробы можно выполнять на отдельных сегментах толстой кишки, отобранных из воспаленной области, непосредственно прилегающей и на расстоянии от области обширного некротического повреждения.

[0109] Скрининг по селективности и специфичности препарата. При выборе из списка соединений часто используют скрининг по селективности и специфичности, чтобы избежать возможных побочных эффектов. В настоящем изобретении желаемой целью является активность соединений в качестве модуляторов активности HFN4α, даже несмотря на то, что при этом могут иметь место другие побочные эффекты. Лекарственные препараты, представленные на рынке для применения у людей, направленные на получение эффектов, не связанных с HFN4α, как оказалось впоследствии, обладают активностью в качестве активаторов HNF4α (Alverine and Benfluorex; Lee, et al. (2013) ACS Chem. Biol. 8(8):1730-6). Альверин зарегистрирован в качестве релаксанта гладкой мускулатуры при желудочно-кишечных расстройствах, в то время как бенфлуорекс зарегистрирован в качестве анорексигенного средства. Известно, что бенфлуорекс метаболизируется путем расщепления сложноэфирного фрагмента на фенфлурамин, мощный агонист серотониновых 5-гидрокситриптамин 2 (5-НТ₂) рецепторов; этот эффект, как полагают, связан с его активностью в качестве анорексигенного агента (Porter, et al. (1999) Br. J. Pharmacol. 128 (1): 13-20). Однако модуляция рецепторов 5-HT₂ с помощью бенфлуорекса была связана с нежелательными сердечно-легочными побочными эффектами. Соответственно, на основании этого опыта с синтетическими соединениями соединения и экстракты согласно настоящему изобретению будут проверены на побочные эффекты, связанные с активацией 5-гидрокситриптаминового рецептора, путем проведения, например, анализа посредством спектрофотометра для чтения планшетов визуализации флуоресценции (FLIPR), который позволяет быстро обнаруживать повышение внутриклеточных уровней кальция в клетках, экспрессирующих человеческий рецептор 5-НТ_2А, 5-HT_2B или 5-НТ_2С в клетках СНО-K1. См., например, Porter, et al. (1999) Br. J. Pharma col. 128(l):13-20. Другие варианты скрининга могут быть выбраны, исходя из первоначальных исследований, в которых токсические эффекты могут быть связаны с другими побочными действиями.

Составы

[0110] По существу чистое соединение или экстракт, содержащий соединение согласно настоящему изобретению, может быть скомбинирован с носителем и представлен в любой подходящей форме для приема внутрь или введения субъекту. В этом смысле соединение или экстракт добавляют в качестве экзогенного ингредиента или добавки к продукту для приема внутрь. Подходящие формы для приема внутрь включают, но не ограничиваются ими, добавку к рациону, пищевой ингредиент или пищевую добавку, продукт лечебного питания, нутрицевтик или фармацевтическую композицию. В некоторых вариантах реализации изобретения соединение или экстракт представлены в жидкой или порошкообразной форме.

[0111] Пищевой ингредиент или пищевая добавка представляет собой съедобное вещество, предназначенное для того, чтобы в конечном результате, прямо или косвенно, превратиться в компонент или иным образом повлиять на характеристики любого пищевого продукта (включая любое вещество, предназначенное для использования в получении, производстве, укладке, переработке, подготовке, обработке, упаковке, транспортировке или хранении пищевых продуктов). Пищевой продукт, в частности, функциональный продукт питания, представляет собой пищевой продукт, функционально усиленный или обогащенный в ходе процесса его производства с целью включения в него дополнительных питательных веществ и/или полезных ингредиентов. Пищевой продукт согласно настоящему изобретению может быть представлен, например, в форме сливочного масла, маргарина, сладких или пикантных спредов, приправ, печенья, батончика здорового питания, хлеба, торта, хлопьев, конфет, кондитерских изделий, супа, молока, йогурта или кисломолочного продукта, сыра, напитков на основе фруктовых или овощных соков, сброженных напитков, коктейлей, ароматизированной воды, чая, масла или любой другой подходящей пищи. В некоторых вариантах реализации изобретения пищевой продукт представляет собой цельный пищевой продукт, в котором концентрация соединения была дополнительно пополнена посредством особых способов послеуборочной переработки и последующего пищевого производства до уровней, обеспечивающих эффективное содержание соединения.

[0112] Добавка к рациону представляет собой продукт для перорального приема, содержащий соединение или экстракт согласно настоящему описанию и предназначенный для дополнения рациона. Нутрицевтик представляет собой продукт, полученный из пищевого источника, который обеспечивает дополнительные преимущества для здоровья в дополнение к основной пищевой ценности, уже имеющейся в пище. Фармацевтическая композиция означает любой компонент лекарственного продукта, предназначенный для придания фармакологической активности или оказания иного прямого эффекта при диагностике, лечении, смягчении, лечении или профилактике заболевания, или для воздействия на структуру или любую функцию организма человека или других животных. Добавки к рациону, нутрицевтики и фармацевтические композиции могут находиться в разнообразных капсулах, формах, таких как таблетки, таблетки в оболочке, пилюли, капсулы, драже, гранулы, мягкие желатиновые капсулы, гелевые капсулы, жидкости, порошки, эмульсии, суспензии, эликсиры, сиропы, и в любых других формах, подходящих для применения.

[0113] Фармацевтические композиции, раскрытые в настоящем изобретении, могут быть произведены способом, который известен сам по себе, например, с помощью традиционных процессов смешивания, растворения, гранулирования, дражирования, отмучивания, эмульгирования, инкапсулирования, включения или таблетирования. Кроме того, активные ингредиенты содержатся в количестве, эффективном для реализации их назначения. Многие соединения, используемые в фармацевтических комбинациях, раскрытых в настоящем изобретении, могут быть представлены в виде солей с фармацевтически совместимыми противоионами.

[0114] В данной области техники существует множество способов введения соединения, его соли и/или композиции, включая, но не ограничиваясь ими, пероральные, ректальные, ингаляционные, местные, аэрозольные, инъекционные, инфузионные и парентеральные методы доставки, включая внутримышечные, подкожные, внутривенные, интрамедуллярные инъекции, интратекальные, прямые интравентрикулярные, интраперитонеальные, интраназальные и внутриглазные инъекции. В некоторых вариантах реализации изобретения соединение, описанное в настоящем изобретении, включая соединение Формулы (I), (II), (III) или его фармацевтически приемлемую соль, можно вводить перорально.

[0115] Также можно вводить соединение, соль и/или композицию локально, а не системно, например, путем инъекции или имплантации соединения непосредственно в пораженную область, часто в виде депо-формы или состава с замедленным высвобождением. Кроме того, можно вводить соединение в составе системы направленной доставки лекарств, например, в липосоме, покрытой тканеспецифическим антителом. Липосомы будут нацелены на нужный орган и селективно поглощены им. Например, может оказаться желательной интраназальная или ингаляционная доставка, направленная непосредственно на респираторное заболевание или состояние.

[0116] При необходимости композиции могут быть представлены в упаковке или дозирующем устройстве, которое может содержать одну или более единичных дозированных форм, содержащих активный ингредиент. Упаковка может, например, включать металлическую или пластиковую фольгу, как, например, блистерная упаковка. К упаковке или дозатору может быть приложена инструкция по введению препарата. Упаковка или дозатор также могут сопровождаться уведомлением, нанесенным на контейнер, в форме, предписанной правительственным учреждением, регулирующим производство, применение или продажу фармацевтических препаратов, причем указанное уведомление свидетельствует об одобрении данной формы лекарственного средства для введения человеку или животному соответствующим регулирующим органом. Такое уведомление, например, может представлять собой маркировку, одобренную Управлением по контролю качества пищевых продуктов и лекарственных средств США, для лекарственных средств, отпускаемых по рецепту, или вкладыш в одобренный продукт. Композиции, которые могут включать соединение и/или соль, описанные в настоящем изобретении, в виде готовой смеси с совместимым фармацевтическим вспомогательным веществом, также могут быть приготовлены, помещены в соответствующий контейнер и помечены для лечения указанного состояния.

[0117] Соединения, соли и/или фармацевтические композиции могут быть предоставлены лечащему врачу или другому специалисту в области здравоохранения в форме набора. Набор представляет собой упаковку, в которой находится контейнер, содержащий соединение (соединения) в подходящей фармацевтической композиции и инструкции по введению данной фармацевтической композиции субъекту. Набор может также необязательно содержать один или более дополнительных терапевтических агентов. Набор также может содержать отдельные дозы соединения (соединений) или фармацевтической композиции для периодического или последовательного введения. Набор может необязательно содержать один или более диагностических инструментов и инструкций по применению. Набор может содержать подходящие устройства доставки, например, шприцы и т.п., наряду с инструкциями по введению соединения (соединений) и любого другого терапевтического агента. Набор необязательно может содержать инструкции по хранению, восстановлению (если применимо) и введению любого или всех включенных терапевтических агентов. Наборы могут содержать множество контейнеров, по количеству введений, которые должны быть сделаны субъекту.

[0118] В некоторых вариантах реализации изобретения соединение Формулы (I), Формулы (II) или Формулы (III) вводят дозой в диапазоне примерно 1-200 мг/кг массы тела. В некоторых вариантах реализации изобретения соединение Формулы (I), Формулы (II) или Формулы (III) вводят в дозе в диапазоне примерно 1-10, 1-20, 1-30, 1-40, 1-50, 1-60, 1-70, 1-80, 1-90,1-100,1-200,1-300, 1-400,1-500,1-600, 1-700, 1-800, 1-900, 1-1000,1-11, 1-12, 1-13, 1-13, 1-14, 1-15, 1-16, 1-17, 1-18, 1-19, 10-20, 10-30, 10-40, 10-50, 10-60, 10-70, 10-80, 10-90, 10-100, 10-200, 10-300, 10-400, 10-500, 10-600, 10-700, 10-800, 10-900, 10-1000, 20-30, 20-40, 20-50, 20-60, 20-70, 20-80, 20-90, 20-100, 20-200, 20-300, 20-400, 20-500, 20-600, 20-700, 20-800, 20-900, 20-1000, 30-40, 30-50, 30-60, 30-70, 30-80, 30-90, 30-100, 30-200, 30-300, 30-400, 30-500, 30-600, 30-700, 30-800, 30-900, 30-1000, 40-50, 40-60, 40-70, 40-80, 40-90, 40-100, 40-200, 40-300, 40-400, 40-500, 40-600, 40-700, 40-800, 40-900, 40-1000, 50-60, 50-70, 50-80, 50-90, 50-100, 50-200, 50-300, 50-400, 50-500, 50-600, 50-700, 50-800, 50-900, 60-70, 60-80, 60-90, 60-100, 60-200, 60-300, 60-400, 60-500, 60-600, 60-700, 60-800, 60-900, 60-1000, 70-80, 70-90, 70-100, 70-200, 70-300, 70-400, 70-500, 70-600, 70-700, 70-800, 70-900, 70-1000, 80-90, 80-100, 80-200, 80-300, 80-400, 80-500, 80-600, 80-700, 80-800, 80-900, 80-100, 90-100, 90-200, 90-300, 90-400, 90-500, 90-600,90-700, 90-800, 90-900, 90-1000, 100-150, 100-200, 100-300, 100-400, 100-500, 100-600, 100-700, 100-800, 100-900 или 100-1000 мг/кг массы тела. В некоторых вариантах реализации соединение Формулы (I), Формулы (II) или Формулы (III) вводят дозой примерно 0,01, 0,02, 0,03, 0,05, 0,07, 0,1, 0,25, 0,5, 0,75, 1, 1,5, 2, 2,5, 3, 3,5, 4, 4,5, 5, 5,5, 6, 6,5, 7, 7,5, 8, 8,5, 9, 9,5, 10, 10,5, 11, 11,5, 12, 12,5, 13, 13,5, 14, 14,5, 15, 15,5, 16, 16,5, 17, 17,5, 18, 18,5, 19, 19,5, 20, 20,5, 21, 21,5, 22, 22,5, 23, 23,5, 24, 24,5, 25, 25,5, 26, 26,5, 27, 27,5, 28, 28,5, 29, 29,5, 30, 30,5, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 55, 60, 65, 70, 80, 90 или 95 мг/кг массы тела. В некоторых вариантах реализации соединение Формулы (I), Формулы (II) или Формулы (III) вводят дозой менее чем примерно 0,01, 0,02, 0,03, 0,05, 0,07, 0,1, 0,25, 0,5, 0,75, 1, 1,5, 2, 2,5, 3, 3,5, 4, 4,5, 5, 5,5, 6, 6,5, 7, 7,5, 8, 8,5, 9, 9,5, 10, 10,5, 11, 11,5, 12, 12,5, 13, 13,5, 14, 14,5, 15, 15,5, 16, 16,5, 17, 17,5, 18, 18,5, 19, 19,5, 20, 20,5, 21, 21,5, 22, 22,5, 23, 23,5, 24, 24,5, 25, 25,5, 26, 26,5, 27, 27,5, 28, 28,5, 29, 29,5, 30, 30,5, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40 мг/м² площади тела. В некоторых вариантах реализации соединение Формулы (I), Формулы (II) или Формулы (III) вводят дозой более чем примерно 0,01, 0,02, 0,03, 0,05, 0,07, 0,1, 0,25, 0,5, 0,75, 1, 1,5, 2, 2,5, 3, 3,5, 4, 4,5, 5, 5,5, 6, 6,5, 7, 7,5, 8, 8,5, 9, 9,5, 10, 10,5, 11, 11,5, 12, 12,5, 13, 13,5, 14, 14,5, 15, 15,5, 16, 16,5, 17, 17,5, 18, 18,5, 19, 19,5, 20,20,5, 21, 21,5, 22, 22,5, 23, 23,5, 24, 24,5, 25, 25,5, 26, 26,5, 27, 27,5, 28, 28,5, 29, 29,5, 30, 30,5, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95 или 100 мг/кг массы тела субъектов.

[0119] В некоторых вариантах реализации изобретения соединение Формулы (I), Формулы (II) или Формулы (III) дозой примерно 0,1 мг 10 мг, 0,1 мг-25 мг, 0,1 мг-30 мг, 0,1 мг-50 мг, 0,1 мг-75 мг, 0,1 мг-100 мг, 0,5 мг-10 мг, 0,5 мг-25 мг, 0,5 мг-30 мг, 0,5 мг-50 мг, 0,5 мг-75 мг, 0,5 мг-100 мг, 1 мг-10 мг, 1 мг-25 мг, 1 мг-30 мг, 1 мг-50 мг, 1 мг-75 мг, 1 мг-100 мг, 2 мг-10 мг, 2 мг-25 мг, 2 мг-30 мг, 2 мг-50 мг, 2 мг-75 мг, 2 мг-100 мг, 3 мг-10 мг, 3 мг-25 мг, 3 мг-30 мг, 3 мг-50 мг, 3 мг-75 мг, 3 мг-100 мг, 4 мг-100 мг, 5 мг-10 мг, 5 мг-25 мг, 5 мг-30 мг, 5 мг-50 мг, 5 мг-75 мг, 5 мг-300 мг, 5 мг-200 мг, 7,5 мг-15 мг, 7,5 мг-25 мг, 7,5 мг-30 мг, 7,5 мг-50 мг, 7,5 мг-75 мг, 7,5 мг-100 мг, 7,5 мг -200 мг, 10 мг-20 мг, 10 мг-25 мг, 10 мг-50 мг, 10 мг-75 мг, 10 мг-100 мг, 15 мг-30 мг, 15 мг-50 мг, 15 мг-100 мг, 20 мг-20 мг, 20 мг-100 мг, 30 мг-100 мг, 40 мг-100 мг, 10 мг-80 мг, 15 мг-80 мг, 20 мг-80 мг, 30 мг-80 мг, 40 мг-80 мг, 10 мг-60 мг, 15 мг-60 мг, 20 мг -60 мг, 30 мг-60 мг или примерно 40 мг-60 мг. В некоторых вариантах реализации изобретения количество вводимого соединения Формулы (I), Формулы (II) или Формулы (III) составляет примерно 20 мг-60 мг, 27 мг-60 мг, 20 мг-45 мг или 27 мг-45 мг. В некоторых вариантах реализации изобретения количество вводимого соединения Формулы (I), Формулы (II) или Формулы (III) составляет примерно 1 мг-5 мг, 1 мг-7,5 мг, 2,5 мг-5 мг, 2,5 мг-7,5 мг, 5 мг-7,5 мг, 5 мг-9 мг, 5 мг-10 мг, 5 мг-12 мг, 5 мг-14 мг, 5 мг-15 мг, 5 мг-16 мг, 5 мг-18 мг, 5 мг-20 мг, 5 мг-22 мг, 5 мг-24 мг, 5 мг-26 мг, 5 мг-28 мг, 5 мг-30 мг, 5 мг-32 мг, 5 мг-34 мг, 5 мг-36 мг, 5 мг-38 мг, 5 мг-40 мг, 5 мг-42 мг, 5 мг-44 мг, 5 мг-46 мг, 5 мг-48 мг, 5 мг-50 мг, 5 мг-52 мг, 5 мг-54 мг, 5 мг-56 мг, 5 мг-58 мг, 5 мг-60 мг, 7 мг-7,7 мг, 7 мг-9 мг, 7 мг-10 мг, 7 мг-12 мг, 7 мг-14 мг, 7 мг-15 мг, 7 мг-16 мг, 7 мг-18 мг, 7 мг -20 мг, 7 мг-22 мг, 7 мг-24 мг, 7 мг-26 мг, 7 мг-28 мг, 7 мг-30 мг, 7 мг-32 мг, 7 мг-34 мг, 7 мг-36 мг, 7 мг-38 мг, 7 мг-40 мг, 7 мг-42 мг, 7 мг-44 мг, 7 мг-46 мг, 7 мг-48 мг, 7 мг-50 мг, 7 мг-52 мг, 7 мг-54 мг, 7 мг-56 мг, 7 мг-58 мг, 7 мг-60 мг, 9 мг-10 мг, 9 мг-12 мг, 9 мг-14 мг, 9 мг-15 мг, 9 мг-16 мг, 9 мг-18 мг, 9 мг-20 мг, 9 мг-22 мг, 9 мг-24 мг, 9 мг -26 мг, 9 мг-28 мг, 9 мг-30 мг, 9 мг-32 мг, 9 мг-34 мг, 9 мг-36 мг, 9 мг-38 мг, 9 мг-40 мг, 9 мг-42 мг, 9 мг-44 мг, 9 мг-46 мг, 9 мг-48 мг, 9 мг-50 мг, 9 мг-52 мг, 9 мг-54 мг, 9 мг-56 мг, 9 мг-58 мг, 9 мг-60 мг, 10 мг-12 мг, 10 мг-14 мг, 10 мг-15 мг, 10 мг-16 мг, 10 мг -18 мг, 10 мг-20 мг, 10 мг-22 мг, 10 мг-24 мг, 10 мг-26 мг, 10 мг-28 мг, 10 мг-30 мг, 10 мг-32 мг, 10 мг-34 мг, 10 мг-36 мг, 10 мг-38 мг, 10 мг-40 мг, 10 мг-42 мг, 10 мг-44 мг, 10 мг-46 мг, 10 мг-48 мг, 10 мг-50 мг, 10 мг-52 мг, 10 мг-54 мг, 10 мг-56 мг, 10 мг-58 мг, 10 мг-60 мг, 12 мг-14 мг, 12 мг-15 мг, 12 мг-16 мг, 12 мг-18 мг, 12 мг-20 мг, 12 мг-22 мг, 12 мг-24 мг, 12 мг-26 мг, 12 мг-28 мг, 12 мг-30 мг, 12 мг-32 мг, 12 мг-34 мг, 12 мг-36 мг, 12 мг-38 мг, 12 мг-40 мг, 12 мг-42 мг, 12 мг-44 мг, 12 мг-46 мг, 12 мг-48 мг, 12 мг-50 мг, 12 мг-52 мг, 12 мг-54 мг, 12 мг-56 мг, 12 мг-58 мг, 12 мг-60 мг, 15 мг-16 мг, 15 мг-18 мг, 15 мг-20 мг, 15 мг-22 мг, 15 мг-24 мг, 15 мг-26 мг, 15 мг-28 мг, 15 мг-30 мг, 15 мг-32 мг, 15 мг-34 мг, 15 мг-36 мг, 15 мг-38 мг, 15 мг-40 мг, 15 мг-42 мг, 15 мг-44 мг, 15 мг-46 мг, 15 мг-48 мг, 15 мг-50 мг, 15 мг-52 мг, 15 мг-54 мг, 15 мг-56 мг, 15 мг -58 мг, 15 мг-60 мг, 17 мг-18 мг, 17 мг-20 мг, 17 мг-22 мг, 17 мг-24 мг, 17 мг-26 мг, 17 мг-28 мг, 17 мг-30 мг, 17 мг-32 мг, 17 мг-34 мг, 17 мг-36 мг, 17 мг-38 мг, 17 мг-40 мг, 17 мг-42 мг, 17 мг-44 мг, 17 мг-46 мг, 17 мг-48 мг, 17 мг-50 мг, 17 мг-52 мг, 17 мг-54 мг, 17 мг-56 мг, 17 мг-58 мг, 17 мг-60 мг, 20 мг-22 мг, 20 мг-24 мг, 20 мг-26 мг, 20 мг-28 мг, 20 мг-30 мг, 20 мг-32 мг, 20 мг-34 мг, 20 мг-36 мг, 20 мг-38 мг, 20 мг-40 мг, 20 мг-42 мг, 20 мг-44 мг, 20 мг-46 мг, 20 мг-48 мг, 20 мг-50 мг, 20 мг-52 мг, 20 мг-54 мг, 20 мг -56 мг, 20 мг-58 мг, 20 мг-60 мг, 22 мг-24 мг, 22 мг-26 мг, 22 мг-28 мг, 22 мг-30 мг, 22 мг-32 мг, 22 мг-34 мг, 22 мг-36 мг, 22 мг-38 мг, 22 мг-40 мг, 22 мг-42 мг, 22 мг-44 мг, 22 мг-46 мг, 22 мг-48 мг, 22 мг-50 мг, 22 мг-52 мг, 22 мг-54 мг, 22 мг-56 мг, 22 мг-58 мг, 22 мг-60 мг, 25 мг-26 мг, 25 мг-28 мг, 25 мг-30 мг, 25 мг-32 мг, 25 мг-34 мг, 25 мг-36 мг, 25 мг-38 мг, 25 мг-40 мг, 25 мг-42 мг, 25 мг-44 мг, 25 мг-46 мг, 25 мг-48 мг, 25 мг -50 мг, 25 мг-52 мг, 25 мг-54 мг, 25 мг-56 мг, 25 мг-58 мг, 25 мг-60 мг, 27 мг-28 мг, 27 мг-30 мг, 27 мг-32 мг, 27 мг-34 мг, 27 мг-36 мг, 27 мг-38 мг, 27 мг-40 мг, 27 мг-42 мг, 27 мг-44 мг, 27 мг-46 мг, 27 мг-48 мг, 27 мг-50 мг, 27 мг-52 мг, 27 мг-54 мг, 27 мг-56 мг, 27 мг-58 мг, 27 мг-60 мг, 30 мг-32 мг, 30 мг-34 мг, 30 мг-36 мг, 30 мг-38 мг, 30 мг-40 мг, 30 мг-42 мг, 30 мг-44 мг, 30 мг-46 мг, 30 мг-48 мг, 30 мг-50 мг, 30 мг-52 мг, 30 мг -54 мг, 30 мг-56 мг, 30 мг-58 мг, 30 мг-60 мг, 33 мг-34 мг, 33 мг-36 мг, 33 мг-38 мг, 33 мг-40 мг, 33 мг-42 мг, 33 мг-44 мг, 33 мг-46 мг, 33 мг-48 мг, 33 мг-50 мг, 33 мг-52 мг, 33 мг-54 мг, 33 мг-56 мг, 33 мг-58 мг, 33 мг-60 мг, 36 мг-38 мг, 36 мг-40 мг, 36 мг-42 мг, 36 мг-44 мг, 36 мг-46 мг, 36 мг-48 мг, 36 мг-50 мг, 36 мг-52 мг, 36 мг-54 мг, 36 мг-56 мг, 36 мг-58 мг, 36 мг-60 мг, 40 мг-42 мг, 40 мг-44 мг, 40 мг-46 мг, 40 мг-48 мг, 40 мг-50 мг, 40 мг-52 мг, 40 мг-54 мг, 40 мг-56 мг, 40 мг-58 мг, 40 мг-60 мг, 43 мг-46 мг, 43 мг-48 мг, 43 мг-50 мг, 43 мг-52 мг, 43 мг-54 мг, 43 мг-56 мг, 43 мг-58 мг, 42 мг-60 мг, 45 мг-48 мг, 45 мг-50 мг, 45 мг-52 мг, 45 мг-54 мг, 45 мг-56 мг, 45 мг-58 мг, 45 мг-60 мг, 48 мг-50 мг, 48 мг-52 мг, 48 мг-54 мг, 48 мг-56 мг, 48 мг-58 мг, 48 мг-60 мг, 50 мг-52 мг, 50 мг-54 мг, 50 мг-56 мг, 50 мг-58 мг, 50 мг-60 мг, 52 мг-54 мг, 52 мг-56 мг, 52 мг -58 мг или 52 мг-60 мг. В некоторых вариантах реализации доза соединения Формулы (I), Формулы (II) или Формулы (III) превышает или равна примерно 0,1 мг, 0,3 мг, 0,5 мг, 0,75 мг, 1 мг, 1,25 мг, 1,5 мг, 1,75 мг, 2 мг, 2,5 мг, 3 мг, 3,5 мг, 4 мг, 5 мг, примерно 10 мг, примерно 12,5 мг, примерно 13,5 мг, примерно 15 мг, примерно 17,5 мг, примерно 20 мг, примерно 22,5 мг, примерно 25 мг, примерно 27 мг, примерно 30 мг, примерно 40 мг, примерно 50 мг, примерно 60 мг, примерно 70 мг, примерно 80 мг, примерно 90 мг, примерно 100 мг, примерно 125 мг, примерно 150 мг, примерно 200 мг, примерно 300 мг, примерно 400 мг, примерно 500 мг, примерно 600 мг, примерно 700 мг, примерно 800 мг, примерно 900 мг или примерно 1000 мг. В некоторых вариантах реализации изобретения доза соединения Формулы (I), Формулы (II) или Формулы (III) меньше, чем примерно 0,5 мг, 0,75 мг, 1 мг, 1,25 мг, 1,5 мг, 1,75 мг, 2 мг, 2,5 мг, 3 мг, 3,5 мг, 4 мг, 5 мг, примерно 10 мг, примерно 12,5 мг, примерно 13,5 мг, примерно 15 мг, примерно 17,5 мг, примерно 20 мг, примерно 22,5 мг, примерно 25 мг, примерно 27 мг, примерно 30 мг, примерно 40 мг, примерно 50 мг, примерно 60 мг, примерно 70 мг, примерно 80 мг, примерно 90 мг, примерно 100 мг, примерно 125 мг, примерно 150 мг или примерно 200 мг.

[0120] В настоящем изобретении термин «носитель» означает материал, композицию или носитель, такой как жидкий или твердый наполнитель, разбавитель, вспомогательное вещество, вспомогательное производственное средство (например, смазывающее вещество, тальк, стеарат магния, кальция или цинка или стеариновая кислота) или материал, инкапсулирующий растворитель, участвующий в переносе или транспортировке рассматриваемого соединения из одного органа или части тела в другой орган или часть тела. Каждый носитель должен быть совместим с другими ингредиентами состава и не причинять вреда субъекту. Некоторые примеры материалов, которые могут служить в качестве носителей, включают: (1) сахара, такие как лактоза, глюкоза и сахароза; (2) крахмалы, такие как кукурузный крахмал и картофельный крахмал; (3) целлюлоза и ее производные, такие как натриевая карбоксиметилцеллюлоза, этилцеллюлоза, ацетат целлюлозы и гидроксипропилметилцеллюлоза; (4) порошкообразный трагакант; (5) солод; (6) желатин; (7) тальк; (8) вспомогательные вещества, такие как масло какао и суппозиторные воски; (9) растительные масла, такие как арахисовое масло, хлопковое масло, сафлоровое масло, кунжутное масло, оливковое масло, кукурузное масло и соевое масло; (10) гликоли, такие как пропиленгликоль; (11) полиолы, такие как глицерин, сорбит, маннит и полиэтиленгликоль; (12) сложные эфиры, такие как этилолеат и этилаурат; (13) агар; (14) буферные агенты, такие как гидроксид магния и гидроксид алюминия; (15) альгиновая кислота; (16) апирогенная вода; (17) изотонический солевой раствор; (18) раствор Рингера; (19) этиловый спирт; (20) забуференные по определенным рН растворы; (21) полиэфиры, поликарбонаты и/или полиангидриды и (22) прочие нетоксичные совместимые вещества, используемые в традиционных лекарственных составах.

[0121] Для получения твердых композиций, таких как таблетки или капсулы, соединение или экстракт смешивают с носителем (например, обычными таблетировочными ингредиентами, такими как кукурузный крахмал, лактоза, сахароза, сорбит, тальк, стеариновая кислота, стеарат магния, дикальция фосфат или камеди) и другими разбавителями (например, водой), в результате чего получают твердую композицию. Эту твердую композицию затем подразделяют на единичные дозированные формы, содержащие эффективное количество соединения согласно настоящему изобретению. Таблетки или пилюли, содержащие соединение или экстракт, могут быть покрыты оболочкой или составлены иным образом с получением дозированной лекарственной формы, обеспечивающей преимущества пролонгированного действия.

[0122] В отдельных вариантах реализации настоящего изобретения композиция для приема внутрь включает соединение или экстракт, носитель и консервант для уменьшения или замедления роста микроорганизмов. Консервант добавляют в количествах до примерно 5%, предпочтительно примерно от 0,01% до 1% от массы пленки. Предпочтительные консерванты включают бензоат натрия, метилпарабены, пропилпарабены, нитрит натрия, диоксид серы, сорбат натрия и сорбат калия. Другие подходящие консерванты включают, но не ограничиваются ими, соли этилендиаминтетрауксусной кислоты (EDTA) или эдетаты, например, эдетат динатрия.

[0123] Жидкие формы для перорального или парентерального введения, содержащие соединение или экстракт согласно настоящему изобретению, включают водные растворы, подходящим образом ароматизированные сиропы, водные или масляные суспензии и ароматизированные эмульсии с пищевыми маслами, а также эликсиры и аналогичные носители. Подходящие диспергирующие или суспендирующие агенты для водных суспензий включают синтетические природные камеди, такие как трагакант, аравийская камедь, альгинат, декстран, натрий-карбоксиметилцеллюлоза, метилцеллюлоза, поливинилпирролидон или желатин. Жидкие препараты для перорального введения могут иметь форму, например, растворов, сиропов или суспензий, или они могут быть представлены в виде сухого продукта для восстановления водой или другими подходящими носителями перед применением. Такие жидкие препараты могут быть приготовлены традиционными способами с приемлемыми добавками, такими как суспендирующие агенты (например, сорбитовый сироп, метилцеллюлоза или гидрогенизированные пищевые жиры); эмульгаторы (например, лецитин или аравийская камедь); неводные носители (например, миндальное масло, маслянистые сложные эфиры или этиловый спирт); консерванты (например, метил- или пропил-п-гидроксибензоаты или сорбиновая кислота); и искусственные или натуральные красители и/или подсластители.

[0124] Способы получения составов или композиций согласно настоящему описанию включают стадию объединения (смешивания) соединения или экстракта согласно настоящему описанию с носителем и, необязательно, одним или более вспомогательными и/или активными ингредиентами. В целом, составы получают путем однородного и тесного объединения (смешения) соединения или экстракта согласно настоящему изобретению с жидкими носителями или мелкодисперсными твердыми носителями, или теми и другими одновременно и, при необходимости, последующего формования продукта. Таким образом, раскрытый в данном описании состав может состоять или по существу состоит из соединения или экстракта, описанного в настоящем изобретении, в комбинации с подходящим носителем.

[0125] Когда соединение или экстракт согласно настоящему изобретению вводят в виде фармацевтических препаратов, нутрицевтиков или добавок к рациону людям и животным, их можно вводить как таковые или в виде композиции, содержащей, например, от 0,1 до 99% (более предпочтительно, от 10 до 30%) активного ингредиента в комбинации с приемлемым носителем.

[0126] Потребляемый продукт может принимать сам субъект, но так, чтобы получать не более 100 мг соединения, описанного в настоящем изобретении, в сутки. В определенных вариантах реализации изобретения материал для приема внутрь обеспечивает от 10 до 60 мг/сутки тираминсодержащего амида гидроксикоричной кислоты. Эффективное количество может быть установлено способами, известными из уровня техники, и его величина зависит от биодоступности, токсичности и т.д.

[0127] Хотя подразумевается, что в продуктах для приема внутрь согласно настоящему изобретению можно применять отдельные тираминсодержащие амиды гидроксикоричной кислоты индивидуально, дополнительно предполагается, что можно комбинировать два или более соединений или экстрактов в любых относительных количествах для получения различных специализированных комбинаций ингредиентов, содержащих два или более тираминсодержащих амидов гидроксикоричной кислоты в желаемых соотношениях для повышения эффективности продукта, улучшения его органолептических свойств или каких-либо других показателей качества, важных для конечного применения продукта.

Молекулярная мишень

[0128] HNF4α (ядерный фактор гепатоцитов 4α) представляет собой глобальный фактор ядерной транскрипции, регулирующий экспрессию многих генов, участвующих в поддержании сбалансированного метаболизма (гомеостаза). Он экспрессируется в ряде тканей, включая печень, поджелудочную железу и почки, а также кишечник. Известно, что HNF4α играет разнообразную роль в эпителиальной биологии, включая архитектуру эпителиальных клеток, центральную регуляцию эпителиального морфогенеза и гомеостаза и барьерное функционирование кишечного эпителия (Cattin, et al. (2009) MAL. Cell. Biol. 29(23):6294-6308; Spath & Weiss (1998) J. Cell Biol. 140:935-946). Кроме того, ген HNF4α в высокой степени экспрессируется в тонком кишечнике и толстой кишке, а белок HNF4α в изобилии представлен в ядрах эпителиальных клеток слизистой оболочки (Jiang, et al. (2003) Nucl. Recept. 1:5). Помимо этого, было предположено, что HNF4α играет защитную роль при ВЗК и что при лечении ВЗК могут быть использованы агонисты HNF4α (Chahar, et al. (2014) Mol. Cell. Biol. 34:3291-3304).

[0129] Исследования показали, что HNF4α крайне важен для экспрессии и правильной локализации белков плотного и адгезионного контакта (Chiba, et al. (2003) Exp.Cell Res. 286:288-297; Parviz, et al. (2003) Nat. Genet. 34:292-296) и формирования микроворсинок в кишечнике (Chiba, et al. (2006) J. Cell Biol. 175(6):971-980). Кроме того, HNF4α также был описан в качестве центрального регулятора, защищающего эпителий кишечника от воспаления (Babeu & Boudreau (2014) World J. Gastroenterol. 20(l):22-30). При этом было показано, что экспрессия HNF4α резко понижена в тканях кишечника у пациентов с болезнью Крона (БК) и язвенным колитом (ЯК) (Darsigny, et al. (2009) PLoS One 4:e7609; Ahn, et al. (2008) Inflamm. WhelDis. 14:908-920).

[0130] Исследования на кишечно-специфических мышах с нулевым уровнем HNF4α продемонстрировали, что нулевые (нокаутированные) мыши склонны к повышенной восприимчивости к модели колита с декстрансульфатом натрия (ДСН), а также продемонстрировали повышенную проницаемость кишечника по сравнению с контрольными мышами (Ahn, et al. (2008) Inflamm. Whel Dis. 14:908-920). В другом исследовании у мышей с отсутствием экспрессии обеих изоформ HNF4α (P1 и Р2), развивалось прогрессирующее хроническое воспаление кишечника, аналогичное ВЗК у человека, что позволяет предположить, что долгосрочное снижение активности HNF4α, вероятно, способствует развитию ВЗК (Darsigny, et al. (2009) PLoS One 4:e7609).

[0131] Как вариант или в дополнение к вышесказанному, предполагается, что основной патофизиологический механизм функционирования HNF4α при регуляции проницаемости кишечника состоите том, что HNF4α может взаимодействовать с микробиотой кишечника, предотвращая развития хронического воспаления. В частности, было высказано предположение, что HNF4α представляет собой микробиально подавляемый фактор транскрипции внутри кишечника, и что регулируемые им гены могут включать факторы, которые могли бы обеспечивать новые мишени для терапии ВЗК (Davison, et al. (2017) Genome Res. 27:1195-206). Кроме того, было показано, что на экспрессию HNF4α влияют диета и бактерии. В частности, продукты бактериального метаболизма в толстой кишке могут продуцировать жирные кислоты, которые служат лигандами для HNF4α, тем самым изменяя его экспрессию (Qin, et al. (2018) Genome Biol. 19:7). Кроме того, желчные кислоты (или их производные), которые также связаны с кишечной проницаемостью (Stenman, et al. (2012) World J. Gastroenterol. 18(9):923-9), могут также выступать в качестве лигандов HNF4α.

[0132] Клинические свидетельства дополнительно указывают на то, что агонисты HNF4α могут быть полезны для лечения расстройств и заболеваний пищеварительной системы. В частности, агонист HNF4α альверин был одобрен для применения в Европе при лечении СРК.

Хронические желудочно-кишечные заболевания

[0133] Термины «хроническое желудочно-кишечное расстройство», «расстройство желудочно-кишечного эпителиального барьера», «хроническое заболевание, связанное с нарушением кишечного эпителиального барьера» и т.п. относятся к состояниям, при которых индивидуумы имеют хронический или рецидивирующий иммунный ответ и воспаление желудочно-кишечного (ЖК) тракта. Наиболее распространенными заболеваниями или расстройствами являются синдром раздраженного кишечника (СРК), воспалительное заболевание кишечника (ВЗК), болезнь Крона (БК), язвенный колит (ЯК) и глютеновая болезнь. Другие хронические желудочно-кишечные заболевания включают, но не ограничиваются ими, некротизирующий энтероколит, неспецифический колит, хронический колит, энтеропатию ВИЧ, хеликобактерный гастрит, НПВП-энтеропатию/энтерит, воспаление тонкокишечного резервуара, прерывистое или пестрое поражение кишечника, воспаление подвздошной кишки, внекишечное воспаление, гранулематозное воспаление в ответ на надрыв кишечных крипт, афтозные язвы, трансмуральное воспаление, микроскопический колит, дивертикулит, воспаление в отключенной кишке, синдром короткого кишечника, желудочно-кишечный мукозит, индуцированный химиотерапией мукозит, индуцированный лучевой терапией мукозит и интерстициальный цистит.

[0134] Язвенный колит (ЯК). ЯК представляет собой заболевание, вызывающее воспаление и раны, называемые язвами, в выстилающем внутреннем слое толстой кишки. Воспаление обычно происходит в прямой кишке и нижней части толстой кишки, но оно может поражать всю толстую кишку. ЯК может возникать у людей любого возраста и, как полагают, является результатом реакции иммунной системы организма на вирус или бактерию, вызывающей постоянно действующее воспаление в стенке кишечника. У людей с язвенным колитом имеются нарушения иммунной системы, но при этом не было доказано, что эти нарушения являются причиной или результатом заболевания.

[0135] Наиболее распространенными симптомами язвенного колита являются боль в животе и кровавая диарея. Пациенты также могут испытывать усталость, потерю веса, потерю аппетита, ректальное кровотечение и потерю биологических жидкостей и питательных веществ. Около половины пациентов имеют легкие симптомы. Другие страдают от частой лихорадки, кровавой диареи, тошноты и сильных спазмов в животе.

[0136] Болезнь Крона (БК). Болезнь Крона характеризуется воспалением кишечника и развитием кишечного стеноза и свищей; эти симптомы часто сопровождаются нейропатией. В некоторых случаях считается, что болезнь Крона возникает в результате нарушения слизистого барьера кишечника, возможно, в результате генетической восприимчивости и факторов окружающей среды (например, курения), которые подвергают иммунную систему действию антигенов из просвета кишечника, включая бактериальные и пищевые антигены. Другая гипотеза состоит в том, что стойкая кишечная инфекция патогенами, такими как Mycobacterium paratuberculosis, Listeria monocytogenes, патологическая Escherichia coli или парамиксовирус, стимулирует иммунный ответ; или, как вариант, симптомы возникают в результате разрегулированного иммунного ответа на общераспространенные антигены, такие как нормальная кишечная микрофлора, метаболиты и токсины, которые они продуцируют.

[0137] Наличие антител IgA и IgG к Saccharomyces cerevisiae (ASCA) в сыворотке крови, как выяснилось, позволяет с высокой точностью диагностировать болезнь Крона у детей. Кроме того, в активных случаях болезни Крона повышенные концентрации TNF-α и IL-6 секретируются в кровеносную систему, а TNF-α, IL-1, TL-6 и IL-8 в избытке продуцируются локально клетками слизистой оболочки. В этом отношении было предположено, что профили цитокинов в образцах стула могут быть полезным диагностическим инструментом при болезни Крона.

[0138] Синдром раздраженного кишечника (СРК). СРК представляет собой заболевание, поражающее главным образом пищеварительный тракт или толстый кишечник. СРК вызывает судороги, вздутие живота, газы, диарею и запор. При СРК нервы и мышцы в кишечнике становятся сверхчувствительными и могут активироваться во время или вскоре после приема пищи или физических упражнений, тем самым вызывая судороги и диарею. Продукты, которые склонны вызывать симптомы, включают молочные продукты, шоколад, алкоголь, кофеин, газированные напитки и жирные продукты. В некоторых случаях симптомы вызывает простое употребление большого количества пищи.

[0139] Некротизирующий энтероколит. Некротизирующий энтероколит представляет собой приобретенное заболевание, главным образом у недоношенных младенцев или больных новорожденных, при котором происходит отмирание кишечной ткани. При некротизирующем энтероколите выстилающий слой стенок кишечника отмирает, и ткань отслаивается. Причина этого заболевания неизвестна, но считается, что снижение притока крови к кишечнику препятствует выработке им нормальной защитной слизи. Причиной также могут быть бактерии, присутствующие в кишечнике. В группу риска входят маленькие недоношенные младенцы, младенцы, которых кормят концентрированными составами, младенцы в детском саду, где произошла вспышка заболевания (предполагаемой инфекционной природы), и младенцы, которым были произведены обменные переливания крови.

[0140] Симптомы включают вздутие живота, рвоту, вялость, пищевую непереносимость, кровь в стуле, нестабильность температуры и диарею. Диагностика обычно включает рентгенографию брюшной полости и обследование на скрытую каловую кровь, повышенное количество лейкоцитов, тромбоцитопению и лактоацидоз.

[0141] Глютеновая болезнь. Глютеновая болезнь представляет собой заболевание пищеварительного тракта, которое поражает тонкий кишечник, нарушая всасывание питательных веществ из пищи. Люди с нарушениями пищеварения, страдающие глютеновой болезнью, не могут переносить глютен, т.е. белок, содержащийся в пшенице, ржи и ячмене. Когда люди с глютеновой болезнью едят пищу или используют продукты, содержащие глютен, их иммунная система реагирует на него, повреждая тонкий кишечник.

[0142] Глютеновая болезнь является генетическим заболеванием, которое первоначально может быть спровоцировано или активировано в результате хирургической операции, беременности, родов, вирусной инфекции или тяжелого эмоционального стресса. У субъекта с глютеновой болезнью могут быть диарея и боль в животе, раздражительность, депрессия, газообразование, повторяющееся вздутие живота, неприятный запах или масляный стул, потеря/увеличение веса, усталость, необъяснимая анемия, боль в костях или суставах, остеопороз, остеопения, поведенческие изменения, онемение ног (в связи с повреждением нервов), спазмы мышц, судороги, пропущенные менструации (часто из-за чрезмерной потери веса), бесплодие, повторяющийся выкидыш, замедленный рост, отставание в развитии у младенцев, бледные раны во рту (называемые афтозными язвами), обесцвечивание зубов или потеря зубной эмали и зудящая кожная сыпь (герпетиформный дерматит). Диагноз «глютеновая болезнь» может быть поставлен посредством анализа крови на количественное определение уровней иммуноглобулина A (IgA), антител к тканевой трансглутаминазе (tTGA) и антител IgA к эндомизию (АЕА).

[0143] ВИЧ-ассоциированная энтеропатия. ВИЧ-ассоциированная энтеропатия представляет собой синдром, характеризующийся хронической, устойчивой диареей (длительностью более одного месяца), которая по результатам тщательной оценки не имеет выявленной инфекционной причины, у ВИЧ-положительного человека. Считается, что это связано с прямым или косвенным воздействием ВИЧ на слизистую оболочку кишечника.

[0144] Хеликобактерный гастрит. Бактерии Helicobacter pylori могут вызывать инфицирование желудка, которое может способствовать развитию диспепсии (изжога, вздутие живота и тошнота), гастрита (воспаление желудка) и язвы желудка или двенадцатиперстной кишки. Инфекция Н. pylori может быть диагностирована посредством эндоскопической биопсии с последующим анализом отобранной ткани на бактерии, дыхательного теста или анализа крови (измерение уровня присутствующих в крови антител к этим бактериям). Симптомы включают дискомфорт, вздутие живота, тошноту и, возможно, рвоту, а также язвы.

[0145] НПВП-энтеропатия/энтерит. Противовоспалительные, обезболивающие и жаропонижающие свойства нестероидных противовоспалительных препаратов (НПВП) хорошо установлены и могут быть использованы при лечении широкого спектра заболеваний. Основным ограничением для клинической применимости НПВП является их гастродуоденальная эпителиальная токсичность. Токсичность НПВП не является сайт-специфической для желудочно-двенадцатиперстной системы и может индуцировать токсические эффекты в более удаленных отделах кишечника.

Состояние пищеварительной системы

[0146] В настоящем изобретении предложены способы улучшения, восстановления или поддержания состояния пищеварительной системы. Согласно таким способам нуждающемуся в этом субъекту вводят эффективное количество соединения или экстракта согласно настоящему изобретению, в результате чего обеспечивают улучшение или поддержание пищеварительной функции у субъекта, решая проблему базового патогенеза одного или более хронических желудочно-кишечных заболеваний и способствуя улучшению здоровья, самочувствия и качества жизни субъекта. В контексте настоящего изобретения термин «субъект» относится к животному, предпочтительно млекопитающему. В некоторых вариантах реализации изобретения субъект представляет собой подлежащее ветеринарному лечению, домашнее, сельскохозяйственное, лабораторное или зоологическое животное. В других вариантах реализации изобретения субъект представляет собой человека.

[0147] В некоторых аспектах настоящего изобретения композиция, содержащая соединение Формулы (I), Формулы (II) или Формулы (III), или его фармацевтически приемлемую соль, изомер, гомодимер, гетеродимер или конъюгат, улучшает состояние пищеварительной системы у субъекта. В некоторых вариантах реализации изобретения композиция, содержащая соединение Формулы (I), Формулы (II) или Формулы (III), позволяет лечить или облегчать тяжесть заболевания или патологического состояния, связанного с состоянием пищеварительной системы у субъекта. В некоторых вариантах реализации изобретения лечение или улучшение состояния пищеварительной системы у субъекта не является лечением или облегчением тяжести воспаления. В некоторых вариантах реализации изобретения композиция, содержащая соединение Формулы (I), Формулы (II) или Формулы (III), позволяет лечить или облегчать заболевание или патологическое состояние, связанное с состоянием пищеварительной системы у субъекта, путем повышения экспрессии HNF4α. В некоторых вариантах реализации изобретения композиция, содержащая соединение Формулы (I), Формулы (II) или Формулы (III), позволяет лечить или облегчать тяжесть заболевания или патологического состояния, связанного с состоянием пищеварительной системы у субъекта, обращает вспять потерю клеток Панета, вызванную диетой с высоким содержанием жиров. В некоторых вариантах реализации изобретения композиция, содержащая соединение Формулы (I), Формулы (II) или Формулы (III), позволяет лечить или облегчать тяжесть заболевания или патологического состояния, связанного с состоянием пищеварительной системы у субъекта, обеспечивает повышение количества кишечных ворсинок. В некоторых вариантах реализации изобретения композиция, содержащая соединение Формулы (I), Формулы (II) или Формулы (III), позволяет лечить или облегчать тяжесть заболевания или патологического состояния, связанного с состоянием пищеварительной системы у субъекта, путем повышения скорости образования клеток Панета. В некоторых вариантах реализации изобретения композиция, содержащая соединение Формулы (I), Формулы (II) или Формулы (III), позволяет лечить или облегчать тяжесть заболевания или патологического состояния, связанного с состоянием пищеварительной системы у субъекта, путем смягчения патологического состояния, связанного с аллергическим ответом.

[0148] В варианте реализации изобретения композиция, содержащая соединение Формулы (I), Формулы (II) или Формулы (III), или его фармацевтически приемлемую соль, позволяет лечить или улучшать по меньшей мере один фактор, связанный с состоянием пищеварительной системы субъекта. В других аспектах настоящего изобретения композиция, содержащая соединение Формулы (I), Формулы (II) или Формулы (III) или его фармацевтически приемлемую соль и описанная в настоящем изобретении, улучшает состояние пищеварительной системы субъекта, например, по меньшей мере на 10%, по меньшей мере на 15%, по меньшей мере на 20%, по меньшей мере на 25%, по меньшей мере на 30%, по меньшей мере на 35%, по меньшей мере на 40%, по меньшей мере на 45%, по меньшей мере на 50%, по меньшей мере на 55%, по меньшей мере на 60%, по меньшей мере на 65%, по меньшей мере на 70%, по меньшей мере на 75%, по меньшей мере на 80%, по меньшей мере на 85%, по меньшей мере на 90% или по меньшей мере на 95%. В других аспектах настоящего изобретения композиция, содержащая Формулу (I), Формулу (II) или Формулу (III), или ее фармацевтически приемлемую соль, улучшает состояние пищеварительной системы путем смягчения заболевания или болезненного состояния, связанного с состоянием пищеварительной системы, например, от примерно 10% до примерно 100%, от примерно 20% до примерно 100%, от примерно 30% до примерно 100%, от примерно 40% до примерно 100%, от примерно 50% до примерно 100%, от примерно 60% до примерно 100%, от примерно 70% до примерно 100%, от примерно 80% до примерно 100%, от примерно 10% до примерно 90%, от примерно 20% до примерно 90%, от примерно 30% до примерно 90%, от примерно 40% до примерно 90%, от примерно 50% до примерно 90%, от примерно 60% до примерно 90%, от примерно 70% до примерно 90%, от примерно 10% до примерно 80%, от примерно 20% до примерно 80%, от примерно 30% до примерно 80%, от примерно 40% до примерно 80%, от примерно 50% до примерно 80%, или от примерно 60% до примерно 80%, от примерно 10% до примерно 70%, от примерно 20% до примерно 70%, от примерно 30% до примерно 70%, от примерно 40% до примерно 70%, или от примерно 50% до примерно 70%. В некоторых вариантах реализации изобретения заболевание или болезненное состояние, связанное с состоянием пищеварительной системы, определяется уровнем клеток Панета, уровнем HNF4α, аллергическим ответом или количеством кишечных ворсинок.

[0149] В варианте реализации изобретения композиция, содержащая соединение Формулы (I), Формулы (II) или Формулы (III), или его фармацевтически приемлемую соль, обладает противовоспалительной активностью, способной снижать уровни воспаления в печени или кишечнике. В других аспектах настоящего изобретения композиция, содержащая соединение Формулы (I), Формулы (II) или Формулы (III) или его фармацевтически приемлемую соль и описанная в настоящем изобретении, обладает противовоспалительной активностью, способной облегчать воспаления, например, по меньшей мере на 10%, по меньшей мере на 15%, по меньшей мере на 20%, по меньшей мере на 25%, по меньшей мере на 30%, по меньшей мере на 35%, по меньшей мере на 40%, по меньшей мере на 45%, по меньшей мере на 50%, по меньшей мере на 55%, по меньшей мере на 60%, по меньшей мере на 65%, по меньшей мере на 70%, по меньшей мере на 75%, по меньшей мере на 80%, по меньшей мере на 85%, по меньшей мере на 90% или по меньшей мере на 95%. В других аспектах настоящего изобретения композиция, содержащая Формулу (I), Формулу (II) или Формулу (III), или ее фармацевтически приемлемая соль, обладает противовоспалительной активностью, способной снижать уровни воспаления в печени или кишечнике в диапазоне, например, от примерно 10% до примерно 100%, от примерно 20% до примерно 100%, от примерно 30% до примерно 100%, от примерно 40% до примерно 100%, от примерно 50% до примерно 100%, от примерно 60% до примерно 100%, от примерно 70% до примерно 100%, от примерно 80% до примерно 100%, от примерно 10% до примерно 90%, от примерно 20% до примерно 90%, от примерно 30% до примерно 90%, от примерно 40% до примерно 90%, от примерно 50% до примерно 90%, от примерно 60% до примерно 90%, от примерно 70% до примерно 90%, от примерно 10% до примерно 80%, от примерно 20% до примерно 80%, от примерно 30% до примерно 80%, от примерно 40% до примерно 80%, от примерно 50% до примерно 80%, или от примерно 60% до примерно 80%, от примерно 10% до примерно 70%, от примерно 20% до примерно 70%, от примерно 30% до примерно 70%, от примерно 40% до примерно 70%, или примерно 50% до примерно 70%. В некоторых вариантах реализации изобретения воспаление представляет собой хроническое воспаление. В некоторых вариантах реализации изобретения композиция смягчает симптом, связанный с воспалением. В некоторых вариантах реализации изобретения указанная композиция позволяет лечить, смягчать или устранять симптом, связанный с воспалением у субъекта. В некоторых вариантах реализации изобретения указанная композиция позволяет лечить, смягчать или устранять воспаление у субъекта.

[0150] В некоторых вариантах реализации изобретения симптомы воспаления могут включать, но не ограничиваются ими, отек, гиперемию, эритему, синяки, болезненную чувствительность, скованность, опухание, лихорадку, озноб, заложенность носа, ощущение тяжести в голове, проблемы с дыханием, задержку жидкости, тромбозы, потерю аппетита, повышенное сердцебиение, образование гранулем, фибриноз, гной, невязкую серозную жидкость, язвы и боли.

[0151] В некоторых вариантах реализации изобретения симптомы воспаления могут быть ассоциированы с большой, несвязанной группой расстройств, лежащих в основе различных заболеваний и расстройств. В некоторых вариантах реализации изобретения воспалительные заболевания часто связаны с иммунной системой, что было продемонстрировано при различных аллергических реакциях и некоторых миопатиях, при этом многие расстройства иммунной системы сами по себе приводят к аномальному воспалению.

[0152] Субъект, нуждающийся в композиции согласно настоящему описанию, представляет собой субъекта с наблюдаемыми симптомами хронического желудочно-кишечного расстройства (например, это субъект с болями в животе, кровью в стуле, гноем в стуле, лихорадкой, потерей веса, частой диареей, усталостью, сниженным аппетитом, тенезмами и ректальным кровотечением), а также субъекта, у которого отсутствуют наблюдаемые симптомы хронического желудочно-кишечного расстройства, но который, как было установлено, склонен к развитию желудочно-кишечных расстройств (т.е. субъект с риском развития желудочно-кишечных заболеваний)

[0153] В контексте настоящего изобретения термин «эффективное количество» означает количество соединения, экстракта или состава, содержащего соединение или экстракт, достаточное для значительного снижения тяжести заболевания. В контексте настоящего изобретения термин «улучшение» или «улучшенный» следует понимать в широком смысле как охватывающий улучшение идентифицированной характеристики патологического состояния (причем специалистами в данной области техники указанная характеристика считается в целом коррелирующей или индикативной для рассматриваемого заболевания) по сравнению с контрольным субъектом или по сравнению с известным средним показателем, свойственным рассматриваемой характеристике. Например, «улучшенное» состояние пищеварительной системы, связанное с применением соединения или экстракта согласно настоящему изобретению, может быть продемонстрировано путем сравнения состояния пищеварительной системы (например, абдоминальных симптомов, стула, лихорадки, массы тела, аппетита и/или целостности эпителиального барьера) человека, получавшего соединение или экстракт, по сравнению с состоянием пищеварительной системы человека, не получавшего такого лечения. Как вариант, можно сравнить состояние пищеварительной системы человека, получавшего лечение соединением или экстрактом согласно настоящему описанию, со средним состоянием состояния пищеварительной системы человека, описанным в научных или медицинских публикациях, которые известны специалистам в данной области техники. В настоящем изобретении термин «улучшенный» не обязательно требует, чтобы данные были статистически значимыми (т.е. р<0,05); скорее, любая количественно определяемая разница, демонстрирующая, что одно значение (например, среднее значение при лечении) отличается от другого (например, среднего значения у контрольного субъекта), может повышать показатель состояния здоровья до «улучшенного».

[0154] При определении эффективного количества, предполагаемого к применению на людях, важно учитывать соотношение желаемых эффектов (преимуществ) и рисков, связанных с применением соединения. При проведении таких оценок соотношения «риск-польза» возникает вопрос о типах наблюдаемых побочных эффектов и вероятности их возникновения. Также учитывается тот факт, что эффективное количество может варьировать в зависимости от конкретного заболевания, подлежащего лечению, например, ВЗК, СРК, ЯК или БК, возраста и физического состояния конечного пользователя, тяжести состояния, продолжительности лечения, конкретного используемого носителя и других подобных факторов.

[0155] В целом, подходящая суточная доза соединения или экстракта согласно настоящему изобретению будет представлять минимально необходимое эффективное количество соединения или экстракта, обеспечивающее требуемого эффект, в данном случае эффект улучшения состояния пищеварительной системы и, следовательно, общего здоровья и благополучия. Такая эффективная доза в целом будет зависеть от факторов, описанных в настоящем изобретении. В случае перорального введения доза может составлять от примерно 0,0001 мг до примерно 10 грамм на килограмм массы тела в сутки, от примерно 5 мг до примерно 5 грамм на килограмм массы тела в сутки, от примерно 10 мг до примерно 2 грамм на килограмм массы тела в сутки или любую другую подходящую дозу. При необходимости эффективную суточную дозу соединения или экстракта можно вводить в виде двух, трех, четырех, пяти, шести или более суб-доз, вводимых раздельно с подходящими интервалами в течение дня, необязательно в виде единичных дозированных форм. В некоторых вариантах реализации изобретения дозирование проводят путем одного введения в сутки.

[0156] Соединение или экстракт согласно настоящему описанию можно применять самостоятельно или в комбинации с особой диетой или стандартными методами клинической практики. В качестве иллюстрации, соединение или экстракт согласно настоящему изобретению можно комбинировать с безглютеновой диетой или использованы в комбинации с приемом аминосалицилата, кортикостероида, атиопурина, метотрексата, ингибитора JAK, ингибитора рецептора сфингозин-1-фосфата (SIP), анти-интегринового биологического агента, анти-IL12/23R или анти-1b23 биологического агента и/или ингибитора фактора некроза опухоли или биологического агента.

[0157] Прием соединения или экстракта согласно настоящему описанию улучшает функцию пищеварения, тем самым устраняя основополагающий патогенез одного или более заболеваний желудочно-кишечной системы и улучшая состояние, самочувствие и качество жизни субъекта. В идеале, эффективное количество соединения или экстракта обеспечивает измеримое улучшение уровней содержания или активности HNF4α и/или кишечного эпителиального барьера, и/или пищеварительной функции по сравнению с субъектом, не получающим такого лечения. Если более конкретно, то применение соединения или экстракта согласно настоящему изобретению предпочтительно предупреждает, замедляет прогрессирование, сокращает продолжительность или излечивает желудочно-кишечные заболевания, такие как ВЗК, СРК, ЯК и/или БК.

[0158] Для дополнительной иллюстрации настоящего изобретения представлены следующие неограничивающие примеры.

Пример 1: Оценка показателей метаболической активности: Материалы и способы

[0159] Экспрессия инсулина и HNF4α. РНК очищали с помощью наборов для хроматографического разделения и выделения RNEASY® (Qiagen) и конвертировали в кДНК с помощью реактива qScript™ cDNA SuperMix (Quanta Biosciences). Количественный ПЦР тест (Q-PCR) проводили на количестве кДНК, соответствующем 2 мкг РНК, с использованием оптического регистратора Optic on Real-Time System (MJ Research) и реактива QPCR SuperMix (BioPioneer). Все значения по мРНК были нормализованы к значениям 18S рРНК и выражены как кратные изменения относительно контроля, обработанного носителем.

[0160] Первичные антитела. Использовали антитела HNF4α (#sc-6556, Santa Cruz Biotechnology; Santa Cruz, CA и #3113, Cell Signaling Technology; Danvers, MA). Для флуоресцентной визуализации образцы инкубировали с зеленым флуоресцентным красителем ALEXA FLUOR® 488 или меченными родамином антителами мыши, кролика или козы, а ядра контрастировали с помощью DAPI (4',6-диамидино-2-фенилиндола). Отдельно использовали антитела с иммунным окрашиванием. Контроли для подтверждения меток по вторичной специфичности срезов подвергали флуоресцентному анализу с помощью обычного инвертирующего микроскопа (Olympus, PlanFl 40х/0.60) или конфокального микроскопа, оснащенного криптон-аргоновым лазером.

[0161] Определение биодоступности. Самцам мышей C57BL/6 вводили N-транс-кофеоилтирамин или N-транс-ферулоилтирамин внутривенно, внутрибрюшинно или перорально (по три мыши на каждый способ введения) (см. Таблицу 2).

[0162] Образцы крови у каждой мыши отбирали через 0,25, 0,5, 1, 2, 4, 6 и 24 часа после введения. Для анализа использовали аликвоту крови объемом 8 мкл. После добавления 200 мкл внутреннего стандарта, содержащего 100 нг/мл лабеталола, 100 нг/мл дексаметазона, 100 нг/мл толбутамида, 100 нг/мл верапамила, 100 нг/мл глибурида и 100 нг/мл целекоксиба в ACN, смесь перемешивали на вихревой мешалке и центрифугировали при 12000 об/мин в течение 15 минут при 4°С для осаждения белка. По четыре мкл супернатанта вводили для анализа в ЖХ-МС/МС хроматограф. Биодоступность (%) рассчитывали по величинам AUC_0-inf (% AUC_Extra<20%) или AUC_0-iast (% AUC_Extra>20%) с номинальной дозой.

[0163] Оценка стабильности при различных рН. Готовили отдельные исходные растворы соединений в ДМСО с концентрациями 10 мг/мл. Для получения растворов с рН 2, 7,4, 8,5 и 10 были приготовлены четыре различных буферных раствора. Для проведения анализа при каждом рН к 245 мкл буферного раствора добавляли 5 мкл исходного раствора в пробирке на 2 мл, перемешивали на вихревой мешалке и инкубировали на водяной бане при 37°С. В каждой временной точке отбирали 50 мкл-вые аликвоты, которые нейтрализовали и подвергали ВЭЖХ-анализу с диодно-матричным детектором (DAD) при 280 нм. Кратные изменения площади пика при 280 нм определяли от начальной и до конечной временной точки, т.е. от 0,5 и до 72 часов инкубирования, соответственно.

Пример 2: Оценка активности соединений в качестве агонистов HNF4α

[0164] Учитывая роль HNF4α в поддержании здорового метаболизма у людей, испытуемые соединения подвергали скринингу по активности в качестве агонистов HNF4α (как по прямым, так и косвенным эффектам). Используя известный инсулин-промоторный репортерный генный анализ, Киселюк и его коллеги (2010. J. Biomol. Screen 15(6):663-70) подвергли скринингу библиотеки соединений на активность по промотированию активации инсулина. Они идентифицировали соединение 1 в качестве активатора инсулина (Kiselyuk, et al. (2012) Chem. Biol. 19(7):806-18), и впоследствии было показано, что это соединение обладает HNF4α агонистической активностью при анализе промотора орнитинтранскарбамоилазы (ОТС). Известно, что промотор ОТС реагирует на HNF4α в анализах временной трансфекции (Inoue, et al. (2002) J. Biol. Chem. 277:25257-65).

[0165] Для идентификации растительных соединений, которые обладают такой же биологической активностью, что и этот синтетический агент (соединение 1), был использован биоинформационный подход, позволяющий из множества всех известных растительных соединений предсказать целевое подмножество с желаемой HNF4α агонистической активностью. Используя ряд алгоритмов в сочетании с обучающими данными (т.е. известными положительными данными), на основе важных особенностей этих положительных данных были построены модели, позволяющие прогнозировать желаемую биологическую активность соединений. Более конкретно, в набор с положительными данными было включено множество из 18 синтетических соединений с известной способностью влиять на активность HNF4α (например, соединение 1). Структуры этих соединений использовали, чтобы найти в базе данных имеющихся растительных соединений такие химические структуры, которые имели бы аналогичные структурные особенности. Для определения сходства использовали ряд метрик, подобранных, исходя из концепций, принятых в области теории графов и теории шаблонов, как по отдельности, так и в комбинации.

[0166] Были выбраны растительные соединения в 10-м процентиле сходства с 18 целевыми структурами, и эти соединения, которые, учитывая их химические структурные особенности, прогнозировались как потенциальные агонисты активности HNF4α, были подвергнуты скринингу посредством анализа на HNF4α. Результаты скрининга выявили класс растительных тираминсодержащих амидов гидроксикоричной кислоты (т.е., N-транс-кофеоилтирамин, N-цис-кофеоилтирамин, N-транс-ферулоилтирамин и п-кумароилтирамин), способных действовать в качестве модуляторов HNF4α. Примечательно, что N-транс-кофеоилтирамин по степени активации HNF4α оказался примерно на порядок эффективнее альверина (Фиг. 1). Ввиду гидроксильной дериватизации обоих фенильных колец N-транс-кофеоилтирамин является менее липофильным и, следовательно, как предполагается, характеризуется улучшенной биодоступностью. В целом, повышенная эффективность и ожидаемая повышенная биодоступность позволяют предполагать, что N-транс-кофеоилтирамин и другие тираминсодержащие амиды гидроксикоричной кислоты могут быть более желательными соединениями для применения в способах, раскрытых в настоящем изобретении.

[0167] Для демонстрации того, что эти соединения непосредственно модулируют активность HNF4α, были проведены соответствующие эксперименты. В частности, было продемонстрировано, что в присутствии N-транс-кофеоилтирамина и N-транс-ферулоилтирамина повышается экспрессия гена HNF4α (как, например, это было определено методом количественного ПЦР анализа) (Фиг. 2). Кроме того, было установлено, что п-кумароилтирамин также повышающе влияет на экспрессию гена HNF4α; однако, цис-ферулоилтирамин, N-кумароилдопамин, N-транс-ферулоилоктопамин и п-кумароилоктопамин оказались неактивны.

Пример 3: Оценка токсичности, связанной с соединением

[0168] Учитывая необходимость соблюдения баланса между пользой и риском, для соединений согласно настоящему изобретению обычно проводят исследования токсичности in vivo на лабораторных животных (например, мышах, крысах, собаках). Такие исследования обычно проводят в соответствии с правилами и нормами надлежащей лабораторной практики (GLP), что позволяет обеспечить надежность и воспроизводимость полученных результатов, представляемых в в регулирующие органы. Если соединения предполагается вводить людям в течение недель, месяцев или лет, обычно проводят исследования хронической токсичности (исследования продолжительностью от шести месяцев до одного года). Для соединений, используемых в составе пищевых продуктов, рекомендуется проведение исследований пероральной токсичности.

[0169] Целью испытаний на хроническую токсичность является определение токсикологического профиля испытуемого соединения. В начальной фазе испытаний будет проведено исследование на крысах. В общей сложности будут случайным образом выбраны и распределены по группам лечения согласно массе 160 крыс линии Sprague Dawley (80 самцов и 80 самок) в возрасте примерно 5-7 недель с массой тела 80-100 г каждая; таким образом, средняя масса тела особи в каждой группе не будет значительно отличаться. Исследуемое соединение или экстракт будут вводить крысам перорально в дозах 0,5, 1 и 2 г/кг массы тела в сутки в течение 90 последовательных дней. Животных будут наблюдать ежедневно на предмет любых клинических проявлений токсичности (например, поведенческих изменений; внешнего вида кожи и шерсти; активности в приеме пищи и питья; и т.д.). По окончании эксперимента животные будут подвергнуты гематологической, биохимической и гистопатологической оценке в соответствии со стандартными токсикологическими методами.

[0170] Также были проведены первоначальные определения безопасности/токсичности, общие результаты которых представлены в Таблице 3.

Пример 4: Выделение тираминсодержащих амидов гидроксикоричной кислоты из растительных источников

[0171] Этанольные экстракты готовили из различных видов растений и их тканей. Отдельные соединения в экстрактах идентифицировали после экстрагирования сухого растительного порошкообразного материала 95% водным этанолом. Этанольный экстракт концентрировали и адсорбировали на целите, после чего загружали в твердофазную экстракционную колонку С18 методом сухого ввода образца. Экстракт обессоливали, промывая двумя колоночными объемами воды, которую затем собирали и отбрасывали. Соединения элюировали двумя колоночными объемами метанола, и полученный экстракт концентрировали досуха. Перед проведением анализа экстракт ресуспендировали в смеси ацетонитрил-вода (1:1). Для построения калибровочных кривых перед анализом использовали синтетические стандарты с известными концентрациями. Перечень источников, взятых для анализа, представлен ниже в Таблице 4. Растения отображены по каждому соединению в порядке убывания его содержания, при этом растения, производящие наибольшее количество соединения, находятся в верхней части списка, а производящие наименьшее количество соединения находятся в нижней части списка.

[0172] Определяли количества N-транс-кофеоилтирамина, N-транс-ферулоилтирамина и п-кумароилтирамина, присутствующих в определенных этанольных экстрактах (% в экстракте, масс/масс). Количественное определение соединений проводили путем нормализации результатов по массе этанольных экстрактов (Фиг. 3).

Пример 5: N-транс-кофеоилтирамин улучшает плотные клеточные соединения

[0173] TNFα представляет собой воспалительный цитокин, который повышает проницаемость плотного соединения кишечника. Чтобы проанализировать влияние N-транс-кофеоилтирамина на плотные соединения, 200 нг или 300 нг TNF-α добавляли в монослой эпителиальных клеток СаСо-2 для индуцированного повреждения плотного соединения. После обработки TNF-α в систему добавляли N-транс-кофеоилтирамин и по окрашиванию антителами определяли образование плотного соединения для замыкающих (плотных) контактов (ZO)-1. Для демонстрации жизнеспособности клеток применяли ядерный краситель (DAPI). Клетки СаСо-2 сортировали по высокой экспрессии TNF-α при нарушенной целостностью плотных контактов. Увеличение концентрации экзогенного TNF-α с 200 нг до 300 нг уменьшало окрашивание ZO-1. Однако добавление N-транс-кофеоилтирамина аннулировало действие TNF-α на ZO-1 как при 200 нг, так и при 300 нг его содержания.

[0174] Для подтверждения эффекта N-транс-кофеоилтирамина в условиях in vivo мышам линии C57BL/6 производили внутрибрюшинные инъекции (IP) доз N-транс-кофеоилтирамина два раза в сутки в течение 14 дней. Образцы кишечной ткани отбирали и подкрашивали для визуализации экспрессии HNFα и ZO-1 красителем DAPI. Экспрессию HNF4α наблюдали в стволовых клетках эпителиального слоя у всех мышей. Распространение экспрессии HNF4α вдоль ворсинок эпителия было визуально заметно через 2 недели после обработки N-транс-кофеоилтирамином, показывая, что это соединение вызывает экспрессию HNF4α в выстилающей кишечной оболочке мышей, обработанных N-транс-кофеоилтирамином.

Пример 6: Влияние N-транс-кофеоилтирамина на кишечник

[0175] Образцы кишечной ткани мышей, обработанных ДМСО или N-транс-кофеоилтирамином, подвергали гистологическим исследованиям. Общий морфологический вид оставался неизменным. Мыши DIO (с алиментарным ожирением) не показывали каких-либо значимых изменений в экспрессии HNF4α. В обоих случаях HNF4α был высоко экспрессирован в крипте, но при этом гораздо реже обнаруживался в ворсинках (см. Фиг. 4). N-транс-кофеоилтирамин индуцировал значительное увеличение экспрессии HNF4α повсеместно, с большим ростом экспрессии в ворсинках и меньшим приростом экспрессии в крипте, где экспрессия и так уже была достаточно сильной (см. Фиг. 5, данные количественных определений показаны в нижней панели). Анализ генов, индуцированных N-транс-кофеоилтирамином, позволил предположить, что N-транс-кофеоилтирамин может способствовать формированию и/или функционированию клеток Панета. Клетки Панета представляют собой специализированные секреторные клетки, играющие важнейшую роль в защите от кишечных микробов. Для этого они выделяют множество различных антимикробных пептидов. Следует отметить, что клетки Панета также играют важную роль в патогенезе ВЗК. Сообщалось, что диета с высоким содержанием жиров сокращает количество клеток Панета, и наши исследования подтвердили этот вывод (см. Фиг. 4), но механизм, по которому это происходит, не до конца понятен. Примечательно, что N-транс-кофеоилтирамин индуцировал полное восстановление количества клеток Панета у мышей DIO (см. Фиг. 4).

[0176] Настоящее изобретение в целом описано с использованием утвердительных формулировок для описания многочисленных вариантов реализации изобретения. Настоящее изобретение также включает варианты его реализации, в которых объект изобретения полностью или частично исключен, например, вещества или материалы, этапы и условия способа, протоколы или процедуры. В способы и структуры, описанные выше, могут вноситься и различные другие пропуски, дополнения и изменения, и это не будет считаться отступлением от объема заявленного предмета изобретения. Подразумевается, что все подобные модификации и изменения попадают в объем предмета изобретения, как это определено прилагаемой формулой изобретения.

[0177] Что касается использования по существу любых терминов во множественном и/или единственном числе, то специалисты в данной области техники могут переводить их из множественного в единственное число и/или из единственного во множественное число так, как это будет им удобно, в зависимости от контекста и/или области применения. Различные перестановки типа «единственное число/множественное число» для ясности могут быть представлены в настоящем изобретении в явном виде.

[0178] Специалистам в данной области техники будет понятно, что, в целом, термины, используемые в настоящем изобретении, и особенно в прилагаемой формуле изобретения (например, отличительные части формулы изобретения), как правило, подразумеваются как «открытые» термины (например, термин «включая» следует интерпретировать как «включая, но не ограничиваясь следующим», термин «имеющий» следует интерпретировать как «имеющий по меньшей мере», термин «включает» следует интерпретировать как «включает, но не ограничивается следующим» и т.д.). Кроме того, специалистам в данной области техники будет понятно, что если в пункте формулы изобретения предполагается упоминание определенного количества перечислений, то такое намерение будет явно выражено в формуле, а в отсутствие такого упоминания отсутствует и соответствующее намерение. Например, чтобы лучше это понять, прилагаемая ниже формула изобретения может включать применение вводных фраз «по меньшей мере один» и «один или более» для введения перечислений в пункте формулы изобретения. Однако употребление таких фраз не следует толковать таким образом, что включение в пункт формулы изобретения перечислений посредством неопределенных артиклей «а» или «an» ограничивает любой конкретный пункт, содержащий введенное таким образом перечисление, вариантами реализации, содержащими только одно такое перечисление, даже если этот же пункт включает в себя вводные фразы «один или более» или «по меньшей мере один» и неопределенные артикли, такие как «а» или «an» (например, «а» и/или «an» следует толковать как «по меньшей мере один» или «один или более»); то же самое относится к применению определенных артиклей, употребляемых для введения перечислений в пункте формулы изобретения. Кроме того, даже если конкретное количество включенных в пункт формулы изобретения перечислений указано явно, специалистам в данной области техники будет понятно, что такое перечисление следует интерпретировать как означающее по меньшей мере указанное количество (например, самая простая фраза «два наименования» без каких-либо других модификаторов означает по меньшей мере два наименования или две или более наименований). Кроме того, в тех случаях, когда используется условная фраза, аналогичная фразе «по меньшей мере один из А, В и С и т.д.», то в целом предполагается, что специалисту в данной области техники будет понятно значение этой условной фразы (например, «система, содержащая по меньшей мере один из А, В и С» будет включать, но не ограничивается ими, системы, которые имеют только А, только В, только С, одновременно А и В, одновременно А и С, одновременно В и С и/или одновременно А, В и С и т.д.). В тех случаях, когда используется условная фраза, аналогичная фразе «по меньшей мере один из А, В или С и т.д.», то в целом предполагается, что специалист в данной области техники поймет эту условную фразу (например, «система, содержащая по меньшей мере один из А, В или С» будет включать, но не ограничивается ими, системы, которые имеют только А, только В, только С, одновременно А и В, одновременно А и С, одновременно В и С и/или одновременно А, В и С и т.д.). Специалистам в данной области техники также будет понятно, что практически любой разделительный союз и/или фраза, представляющее два или более альтернативных термина, будь то в описании, формуле изобретения или графических материалах, следует понимать как предусматривающие возможность включения одного из терминов, любого из терминов, или одновременно обоих терминов. Например, фразу «А или В» следует понимать как включающую возможности «А» или «В» или «А и В».

[0179] Кроме того, в тех случаях, когда признаки или аспекты настоящего изобретения описаны в терминах групп Маркуша, специалистам в данной области техники будет понятно, что настоящее изобретение также описывается в терминах любого отдельного члена или подгруппы членов группы Маркуша.

[0180] Как будет понятно специалисту в данной области техники, для любой и всех целей, например, при предоставлении письменного описания, все диапазоны, раскрытые в настоящем изобретении, также охватывают любые и все возможные поддиапазоны и комбинации поддиапазонов. Любой из перечисленных диапазонов может быть легко признан как достаточно описательный и допускающий разделение указанного диапазона по меньшей мере на равные половины, трети, четверти, пятые, десятые и т.д. В качестве неограничивающего примера, каждый диапазон, обсуждаемый в настоящем изобретении, может быть легко разбит на нижнюю треть, среднюю треть и верхнюю треть и т.д. Как также будет понятно специалисту в данной области техники, все формулировки, такие как «до», «по меньшей мере», «больше», «меньше» и т.п., включают указанное количество и касаются диапазонов, которые впоследствии могут быть разбиты на поддиапазоны, как обсуждалось выше. Наконец, как будет понятно специалисту в данной области техники, диапазон включает в себя каждый отдельный член. Так, например, группа, содержащая 1-3 наименования, относится к группам, содержащим 1, 2 или 3 наименования. Аналогично, группа, содержащая 1-5 наименований, относится к группам, содержащим 1, 2, 3, 4 или 5 наименований и т.д.

[0181] Хотя в настоящем описании раскрыты самые разные аспекты и варианты реализации изобретения, специалистам в данной области техники будут очевидны и другие аспекты и варианты реализации данного изобретения. Раскрытые в настоящем изобретении различные аспекты и варианты реализации приведены лишь в иллюстративных целях и не подразумеваются как ограничительные, при этом подлинные объем и сущность изобретения определены в приведенной ниже формуле.

Группа изобретений относится к области медицины, а именно к способу улучшения пищеварительной функции или желудочно-кишечного расстройства и способу лечения или профилактики заболевания или расстройства, связанного с кишечником. Способ улучшения пищеварительной функции или желудочно-кишечного расстройства, включающий обеспечение композиции для приема внутрь, содержащей по меньшей мере один носитель и эффективное количество соединения формулы (I) или его транс-изомера, или его фармацевтически приемлемой соли

где R¹, R⁸ выбраны из гидроксила; R² выбран из водорода, гидроксила и –(O)C₁-₆ алкила; R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷ и R⁹ выбраны из водорода; пунктирная связь означает наличие связи; X представляет собой O; Z представляет собой NR^a; и R^a выбран из водорода, где указанное желудочно-кишечное расстройство выбрано из группы, состоящей из синдрома раздраженного кишечника, язвенного колита, глютеновой болезни, хронического желудочно-кишечного расстройства, нарушения барьерной функции желудочно-кишечных эпителиальных клеток, некротизирующего энтероколита, неспецифического колита, хронического колита, энтеропатии ВИЧ, хеликобактерного гастрита, НПВП-энтеропатии/энтерита, воспаления тонкокишечного резервуара, прерывистого или пестрого поражения кишечника, воспаления подвздошной кишки, внекишечного воспаления, гранулематозного воспаления, афтозных язв, трансмурального воспаления, микроскопического колита, дивертикулита, воспаления в отключенной кишке, синдрома короткого кишечника, желудочно-кишечного мукозита, индуцированного химиотерапией мукозита, индуцированного лучевой терапией мукозита и интерстициального цистита. Способ лечения или профилактики заболевания или расстройства у субъекта, включающий введение терапевтически эффективного количества соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли нуждающемуся в этом субъекту, где R¹, R⁸ выбраны из гидроксила; R² выбран из водорода, гидроксила и -(O)C_1-6 алкила; каждый из R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷ и R⁹ представляет собой водород; пунктирная связь означает наличие связи; X представляет собой O; Z представляет собой NR^a; и R^a выбран из водорода; при этом указанное заболевание или расстройство связано с кишечником. Вышеуказанная группа изобретений позволяет эффективно и безопасно улучшать пищеварительную функцию и лечить заболевания или расстройства, связанные с кишечником. 2 н. и 26 з.п. ф-лы, 5 ил., 4 табл., 6 пр.

1. Способ улучшения пищеварительной функции или желудочно-кишечного расстройства, включающий обеспечение композиции для приема внутрь, содержащей по меньшей мере один носитель и эффективное количество соединения Формулы (I) или его транс-изомера, или его фармацевтически приемлемой соли

где R¹, R⁸ выбраны из гидроксила;

R² выбран из водорода, гидроксила и -(O)C_1-6 алкила;

R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷ и R⁹ выбраны из водорода;

пунктирная связь означает наличие связи;

X представляет собой О;

Z представляет собой NR^a; и

R^a выбран из водорода,

где указанное желудочно-кишечное расстройство выбрано из группы, состоящей из синдрома раздраженного кишечника, язвенного колита, глютеновой болезни, хронического желудочно-кишечного расстройства, нарушения барьерной функции желудочно-кишечных эпителиальных клеток, некротизирующего энтероколита, неспецифического колита, хронического колита, энтеропатии ВИЧ, хеликобактерного гастрита, НПВП-энтеропатии/энтерита, воспаления тонкокишечного резервуара, прерывистого или пестрого поражения кишечника, воспаления подвздошной кишки, внекишечного воспаления, гранулематозного воспаления, афтозных язв, трансмурального воспаления, микроскопического колита, дивертикулита, воспаления в отключенной кишке, синдрома короткого кишечника, желудочно-кишечного мукозита, индуцированного химиотерапией мукозита, индуцированного лучевой терапией мукозита и интерстициального цистита.

2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что указанное соединение имеет структуру Формулы II

где R¹, R⁴ представляет собой гидроксил;

R² выбран из гидроксила и -(O)C_1-6 алкила;

R³ представляет собой водород;

пунктирная связь означает наличие связи;

Z представляет собой NR^a; и

R^a выбран из водорода.

3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что указанная композиция приготовлена в виде добавки к рациону, пищевого ингредиента или пищевой добавки, продукта лечебного питания, нутрицевтика или фармацевтической композиции.

4. Способ по п. 2, отличающийся тем, что R¹, R² и R⁴ представляют собой -ОН;

R³ представляет собой Н;

пунктирная связь означает наличие связи;

Z представляет собой NR^a; и

R^a выбран из водорода.

5. Способ по п. 1 или 2, отличающийся тем, что соединение Формулы (I) или Формулы (II) выбрано из группы, состоящей из: N-транс-кофеоилтирамина, N-транс-ферулоилтирамина, п-кумароилтирамина или их фармацевтически приемлемых солей и комбинаций.

6. Способ по п. 1 или 2, отличающийся тем, что соединение Формулы (I) или Формулы (II) представлено в форме фармацевтически приемлемой соли.

7. Способ по п. 1 или 2, отличающийся тем, что композиция соединения Формулы (I) или Формулы (II) представлена в виде единичной дозированной формы и выполнена с возможностью введения от 0,1 до 100 мг соединения Формулы (I) или Формулы (II) на кг массы тела субъекта за один прием.

8. Способ по п. 1 или 2, отличающийся тем, что введение соединения Формулы (I) или Формулы (II) обращает вспять потерю клеток Панета, вызванную диетой с высоким содержанием жиров.

9. Способ по п. 1 или 2, отличающийся тем, что улучшение состояния кишечника представляет собой лечение или облегчение заболевания пищеварительной системы у субъекта.

10. Способ по п. 1 или 2, отличающийся тем, что улучшение состояния кишечника представляет собой лечение или облегчение воспаления.

11. Способ по п. 1 или 2, отличающийся тем, что улучшение состояния кишечника обращает вспять потерю клеток Панета.

12. Способ по п. 1 или 2, отличающийся тем, что улучшение пищеварительной функции представляет собой улучшение у субъекта по меньшей мере на 30%.

13. Способ по п. 1 или 2, отличающийся тем, что улучшение пищеварительной функции облегчает заболевание или состояние примерно на 30%.

14. Способ по п. 1 или 2, отличающийся тем, что улучшение пищеварительной функции представляет собой повышение количества кишечных ворсинок.

15. Способ лечения или профилактики заболевания или расстройства у субъекта, включающий:

введение терапевтически эффективного количества соединения Формулы I или его фармацевтически приемлемой соли нуждающемуся в этом субъекту

где R¹, R⁸ выбраны из гидроксила;

R² выбран из водорода, гидроксила и -(O)C_1-6 алкила;

каждый из R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷ и R⁹ представляет собой водород;

пунктирная связь означает наличие связи;

X представляет собой О;

Z представляет собой NR^a; и

R^a выбран из водорода;

при этом указанное заболевание или расстройство связано с кишечником.

16. Способ по п. 15, отличающийся тем, что введение соединения Формулы (I) обеспечивает повышение количества кишечных ворсинок.

17. Способ по любому из пп. 15 или 16, отличающийся тем, что введение соединения Формулы (I) повышает скорость формирования клеток Панета.

18. Способ по любому из пп. 15-17, отличающийся тем, что указанное заболевание или расстройство, связанное с кишечником, представляет собой воспаление.

19. Способ по любому из пп. 15-18, отличающийся тем, что указанное заболевание или расстройство, связанное с кишечником, представляет собой состояние, ассоциированное с аллергическим ответом.

20. Способ по любому из пп. 15-19, отличающийся тем, что указанное соединение приготовлено в виде добавки к рациону, пищевого ингредиента или пищевой добавки, продукта лечебного питания, нутрицевтика или фармацевтической композиции.

21. Способ по любому из пп. 15-20, отличающийся тем, что R¹, R² и R⁸ выбраны из гидроксила; и

R³ представляет собой водород.

22. Способ по любому из пп. 15-21, отличающийся тем, что R¹, R⁸ выбраны из гидроксила; и

R² представляет собой -(O)C_1-6 алкил.

23. Способ по любому из пп. 15-22, отличающийся тем, что соединение Формулы (I) выбрано из группы, состоящей из: N-транс-кофеоилтирамина, N-транс-ферулоилтирамина, п-кумароилтирамина.

24. Способ по любому из пп. 15-23, отличающийся тем, что соединение Формулы (I) представлено в форме фармацевтически приемлемой соли.

25. Способ по любому из пп. 1-14, отличающийся тем, что соединение Формулы (I) представляет собой N-транс-кофеоилтирамин.

26. Способ по п. 25, отличающийся тем, что соединение Формулы (I) также включает N-транс-ферулоилтирамин.

27. Способ по любому из пп. 15-24, отличающийся тем, что соединение Формулы (I) представляет собой N-транс-кофеоилтирамин.

28. Способ по п. 27, отличающийся тем, что соединение Формулы (I) также включает N-транс-ферулоилтирамин.