СПОСОБ ОЦЕНКИ ЭФФЕКТИВНОСТИ ПРОТИВОВИРУСНОЙ ТЕРАПИИ ПРИ ИНФЕКЦИОННОМ МОНОНУКЛЕОЗЕ У ДЕТЕЙ Российский патент 2024 года по МПК G01N33/68 G01N33/573 

Изобретение относится к области медицины, а именно к детским инфекционным болезням, педиатрии, и предназначено для оценки эффективности противовирусной терапии при инфекционном мононуклеозе у детей.

Инфекционный мононуклеоз заслуживает особого внимания среди всех герпесвирусных инфекций, учитывая рост показателей заболеваемости в различных регионах мира, в том числе и в России, где за период с 2000 по 2020 г. она варьировала от 6,7 до 20,75 на 100 тыс.населения (О состоянии санитарно-эпидемиологического благополучия населения в Российской Федерации в 2020 году: Государственный доклад. М.: Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, 2021. 256 с.; Михнева С.А., Гришина Ю.Ю., Кухтевич Е.В., Мартынов Ю.В. Инфекционный мононуклеоз: пространственно-временное проявление эпидемического процесса // Инфекционные болезни: новости, мнения, обучение. - 2017. - №5. - С. 61-64; Касымова Е.Б. Инфекционный мононуклеоз у детей, ассоциированный с вирусами герпеса 4-го и 5-го типов / Е.Б. Касымова, О.А. Башкина, Х.М. Галимзянов, С.Ж. Неталиева // Инфекционные болезни. - Москва, 2012. - Т. 10. - №2. - С. 44-47; Касымова Е.Б. Актуальный подход к диагностике и лечению инфекционного мононуклеоза герпесвирусной этиологии / Е.Б. Касымова, О.А. Башкина, Г.Г. Руденко // Экспериментальная и клиническая фармакология. - Москва. 2022. - Т. 85. - №11. - С. 19-25). Согласно рейтинговой оценке величины экономического ущерба от инфекционных болезней (без туберкулеза и ВИЧ-инфекции), в 2010-2020 гг. в Российской Федерации инфекционный мононуклеоз занимает 6-е место, а в денежном выражении этот ущерб в 2020 г. составил 2 299 817,4 тыс. руб. (О состоянии санитарно-эпидемиологического благополучия населения в Российской Федерации в 2020 году: Государственный доклад. М.: Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, 2021. 256 с.).

Инфекционный мононуклеоз характеризуется полиморфизмом клинических симптомов и полиорганностью поражения, протекает с лихорадкой, поражением небных миндалин, полилимфаденопатией, гепато - и спленомегалией, в крови обнаруживают атипичные мононуклеары, гетерофильные антитела (Иванова В.В. Современное представление об инфекционном мононуклеозе / В.В. Иванова, И.В. Бабаченко, А.С.Левина // Материалы конференции «Старые» и «новые» инфекции у детей в современных условиях. - СПб., 2011. - С. 39-47; Касымова Е.Б. Современные особенности течения и возможности диагностики инфекционного мононуклеоза у детей / Е.Б. Касымова, О.А. Башкина, Х.М. Галимзянов, К.Ж. Енгибарян // Актуальные проблемы педиатрии: сборник научных работ / под ред. проф. А.Г. Муталова - «Уфа: Изд-во ГБОУ ВПО БГМУ Минздравсоцразвития России, 2012. - С. 144-146). Несмотря на сложное участие иммунной системы, герпесвирусные инфекции могут сохраняться в организме после латентной или манифестной форм заболевания пожизненно, в связи с чем в ряде случаев инфекционный мононуклеоз принимает хроническое рецидивирующее течение, а также может трансформироваться в иммунодефицитное состояние (Баранова И.П. Роль инфекционного мононуклеоза в формировании частых заболеваний у детей / И.П. Баранова, О.Н. Лесина, Д.Ю. Курмаева // Инфекционные болезни. Приложение № 1. - 2011. - Т. 9. - С. 36; Касымова Е.Б. Роль герпесвирусных инфекций в патологии часто болеющих детей / Е.Б. Касымова, Д.Ш. Кугушева // Медицина и фармакология: от вопросов к решениям / Сборник научных трудов по итогам международной научно-практической конференции. - №2. - г. Томск, 2017. - С. 34-35; Хмилевская С.А. Клинико-эпидемиологические аспекты инфекционного мононуклеоза у детей / С.А. Хмилевская, И.А. Зайцева // Эпидемиология и вакцинопрофилактика. - 2010. - Т. 54. - №5. - С. 45-50; Bravender Т. Epstein-Barr virus, cytomegalovirus, and infectious mononucleosis / T. Bravender // Adolesc Med State Art Rev. - 2010. - Vol. 21. - №2. - P. 251-264; Infectious mononucleosis / H.Wakiguchi [et al.] // Nippon Rinsho: Japan. J. Clinic. Med. - 2006. - Vol. 64. - №3 - P. 625-629). Инфекционный мононуклеоз относят к заболеваниям иммунной системы, так как под влиянием герпесвирусных инфекций запускается каскад последовательных иммунопатологических реакций (Kasymova Ye.B. Mechanisms of metabolic adaptation and oxidative stress in herpesvirus infections / Ye.B. Kasymova, OA. Bashkina, A.A. Zhidovinov // Archiv euromedica. - 2019. - Vol. 9, N. 1. - P. 149-150).

Прогнозирование эффективности терапии больных инфекционным мононуклеозом представляет собой важную практическую задачу в связи с высокой стоимостью противовирусных препаратов, наличием многочисленных побочных действий при их применении и связанной с этой необходимостью тщательного выбора методов лечения, оптимальных для конкретного пациента (персонализированная медицина) (Касымова Е.Б. Ключевые вопросы диагностики и лечения инфекционного мононуклеоза / Е.Б. Касымова, OA. Башкина, Х.М. Галимзянов // Астраханский медицинский журнал. - 2016. - Т. 11. - №3. - С. 38-44; Лесина О. Н. Катамнез часто болеющих пациентов, перенесших инфекционный мононуклеоз и эффективность иммунореабилитации / О.Н. Лесина, Д.Ю. Курмаева // Известия высших учебных заведений. Поволжский регион. Медицинские науки. 2010. №2. С. 63-68; Фармакотерапия детских болезней: Руководство для врачей / Под ред. А.Д. Царегородцева. - М.: ООО «Медицинское информационное агентство», 2010. - 880 с.; Арова А.А. Клинические маски» инфекционного мононуклеоза. Пути терапевтической коррекции / А. А. Арова Л.В. Крамарь, A.M. Алюшин, OA. Карпухина // Волгоград, науч.-мед. журн. - 2011. - №11. - С. 26-31).

Дозы, схемы и длительность противовирусной терапии должны быть индивидуализированы и определяются целым рядом параметров, относящихся как к особенностям вируса, так и характеристике пациента (Исаков В.А. Герпесвирусные инфекции человека: руководство для врачей / ВА. Исаков, Е.И Архипова, Д.В. Исаков. - СПб.: СпецЛит, 2006. - 303 с.; Шестакова И.В. Лечить или не лечить Эпштейна-Барр вирусную инфекцию: подробный обзор различных тактик / И.В. Шестакова // Инфекционные болезни: новости, мнения, обучение. - 2013. - Т. 4. - №3. - С. 12-23).

Перед началом терапии принято учитывать влияние таких факторов, как период болезни, тяжесть заболевания, возраст больного, наличие и характер осложнений и др. (Клинические рекомендации (протокол лечения) оказания медицинской помощи детям больным инфекционным мононуклеозом. - СПб.: Библиография, 2013. - 70 с.). Каждый из этих признаков в отдельности и их сочетания в определенной степени предопределяют вероятность благоприятного ответа на терапию.

Известен способ оценки эффективности иммунокорригирующей терапии при инфекционном мононуклеозе у детей (Левина А.С.Эффективность иммунокорригирующей терапии при инфекционном мононуклеозе у детей / А.С Левина, Г.Ф. Железникова, В.В. Иванова, И.В. Бабаченко и др. // Детские инфекции. - 2009. - №1. - С. 60-63).

Способ имеет ряд недостатков, ограничивающих его применение, к ним относятся: направленность на одного возбудителя; определение показателя до начала лечения имеет характер группового, а не индивидуального прогнозирования; его сложность, обусловленная необходимостью специально обученного персонала; высокая стоимость исследования, а, следовательно, его малодоступность.

Описан способ оценки эффективности разных методов терапии инфекционного мононуклеоза у детей (Спиридович В.И. Оценка эффективности разных методов терапии инфекционного мононуклеоза у детей / В.И. Спиридович, С.В. Кастусик, А.П. Кудин // Медицинский журнал. - 2012. - №3. - С. 148-151).

Однако способ обладает рядом недостатков и ограничений:

- не включает оценку иммунокоррегирующей терапии;

- общеклинические, биохимические и бактериологические параметры являются неспецифичными для инфекционного мононуклеоза.

За аналог предлагаемого изобретения выбран способ оценки эффективности терапии инфекции, вызванной вирусом Эпштейна-Барр у детей («Способ оценки эффективности терапии инфекции, вызванной вирусом Эпштейна-Барр у детей» Дерюшева А.А., Львова И.И., Леготина Н.С, Филипьева Е.И., патент на изобретение №2618391 от 03.05.2017 г. ), который предусматривает у ребенка до начала терапии, затем через один, три и шесть месяцев от начала лечения определение вирусной нагрузки ДНК ВЭБ методом ПЦР в соскобе из эпителия ротоглотки. При снижении вирусной нагрузки через указанные промежутки времени на 2 log₁₀ и более делают вывод о высокой эффективности терапии, при снижении вирусной нагрузки более чем на 1 log₁₀, но менее чем на 2 log₁₀ - об умеренной эффективности, при снижении вирусной нагрузки менее чем на 1 log₁₀ - о низкой эффективности лечения.

Основными недостатками данного способа является его сложность; высокая стоимость проведения исследования; необходимость повторного взятия биоматериала через указанные промежутки времени, что затруднено на практике в амбулаторных условиях; ограничение применения только при ВЭБ-инфекции.

Предлагаемое изобретение отвечает критерию изобретения «новизна», так как в процессе проведения патентно-информационных исследований не выявлено технических решений, порочащих новизну предлагаемого способа.

Изобретение направлено на повышение оценки эффективности противовирусной терапии и позволяет улучшить клиническое течение и исход заболевания.

Технический результат достигается тем, что у детей с острым инфекционным мононуклеозом через 1,5 месяца после проведения противовирусного лечения определяют в сыворотке крови фракталкин методом иммуноферментного анализа, и при уровне фракталкина в сыворотке крови менее 8,8 нг/мл - оценивают противовирусную терапию как эффективную, а при уровне фракталкина более 8,9 нг/мл - оценивают противовирусную терапию как неэффективную.

Предлагаемый способ прошел успешную апробацию на базе ГБУЗ АО «Областная инфекционная клиническая больница им. Ничоги А.М.» г. Астрахани.

Промышленная применимость способа и его работоспособность подтверждена на материале обследования и лечения 100 детей с острым инфекционным мононуклеозом.

Определение уровня CX3CL1 в образцах сыворотки крови осуществлялось с помощью иммуноферментного набора для количественного определения CX3CL1 в биологических жидкостях с применением тест-системы «RayBio^® Human Fractalkine», фирмы «RayBiotech, Inc.» (США). Данный тест основан на методе иммуноферментного анализа и разработан для определения CX3CL1 непосредственно в биологических жидкостях человеческого организма (сыворотка, плазма, моча, супернатант культуры клеток).

У пациента, страдающего инфекционным мононуклеозом, проводили забор венозной крови через 1,5 месяца после проведения противовирусного лечения. Забор венозной крови осуществляли стандартным способом: в утренние часы, натощак, в пробирки объемом 5 мл. Свежесобранные образцы немедленно помещались на лед. Плазма выделялась путем центрифугирования со скоростью 3000 оборот/минуту в течение 15 минут и помещалась в силиконовые пробирки. Образцы замораживали и доставляли в специальном холодильнике в лаборатории, где хранились при температуре-70°С до проведения анализа.

Все данные, полученные в ходе исследования, обработали методами параметрической статистики с помощью программы Microsoft Excel с опцией «Анализ данных». Вычисляли М (среднее арифметическое), m (ошибку средней), SD (стандартное отклонение), Me (медиану), 25%Q1 (25 прецентиль), 75%Q3 (75 прецентиль). Для оценки различий средних тенденций между группами использовали критерий Манна-Уитни (U). Различия считали статистически значимыми при р<0,05. Различия значений считали достоверными при уровне вероятности более 95% (р<0,05).

Ниже приводятся результаты апробации.

Клинический пример 1

Максалина Ш., 6 лет, диагноз: Острый инфекционный мононуклеоз, вызванный вирусом Эпштейна-Барр, средней степени тяжести.

Поступила с жалобами на фебрильную лихорадку, боли в горле, увеличение лимфоузлов, заложенность носа.

Из анамнеза: со слов мамы, ребенок болел на протяжении недели. Лечились в поликлинике по месту жительства. Противовирусная терапия не проводилась, в процессе лечения получала симптоматическую терапию.

Объективно: общее состояние средней степени тяжести. Температура тела на момент осмотра 38,5°С. Вяловата. Кожные покровы и видимые слизистые чистые, обычной окраски. Дыхание через нос затруднено. Скудное серозное отделяемое из носовых ходов. Пальпируются передне- и заднешейные лимфатические узлы до 2 размера в виде «цепочки», плотновато-эластичной консистенции, безболезненные, не спаянные между собой и окружающими тканями. В зеве выраженная гиперемия. Миндалины до 3 размера, рыхлые, гипертрофированные, желтые налеты, которые легко снимаются шпателем, не кровоточат. Перкуторно над легкими легочный звук неизменен, аускультативно - жесткое дыхание, ЧДД 22 в мин. Сердечные тоны умеренно приглушены, ритмичные, ЧСС 120 уд/мин. Печень+2,0 см из-под правого края реберной дуги. Селезенка не пальпируется.

В крови выявлены маркеры ВЭБ-инфекции: IgM VCA - положительный, IgG VCA/EA - положительный, IgG EBNA - отрицательный. Результат - методом ПЦР обнаружена ДНК вируса герпеса 4-го типа.

В лечении на фоне стандартной терапии дополнительно получала противовирусные препараты в возрастной дозировке. Через 1,5 месяца после окончания противовирусной терапии, показатель уровня фракталкина составил 6,8 нг/мл. Значения фракталкина (его снижение) после проводимой терапии указывали на то, что терапия эффективна. При ПЦР-диагностике (контроль после лечения) - ДНК вируса герпеса 4-го типа не выявляется. Дальнейшее наблюдение подтвердило отсутствие рецидива заболевания.

Клинический пример 2

Егор И., возраст 7 лет, диагноз: Острый инфекционный мононуклеоз, вызванный ВЭБИ и ЦМВИ, средней степени тяжести.

Поступил с жалобами на подъем температуры до 39,5°С, увеличение лимфатических узлов, боль в горле.

Из анамнеза: заболел 06.04.20 г. Лечились дома, самостоятельно, симптоматическими препаратами. Противовирусная терапия не проводилась. Без улучшения. Госпитализирован.

Объективно: общее состояние средней степени тяжести. Самочувствие страдает. Температура тела на момент осмотра 38,6°С Кожные покровы и видимые слизистые чистые, обычной окраски. Пальпируются передне- и заднешейные лимфатические узлы до 2-3 размера, плотновато-эластичной консистенции, безболезненные, не спаянные между собой и окружающими тканями; подчелюстные (до 1 размера), подмышечные (до 1 размера), паховые (до 1 размера) - без особенностей. Дыхание через нос затруднено. Скудное серозное отделяемое из носовых ходов. В зеве выраженная гиперемия. Носовое дыхание не затруднено. Миндалины до 2 размера, рыхлые, гипертрофированные, желтые налеты, которые легко снимаются шпателем, не кровоточат.Печень+2,0 см из-под правого края реберной дуги. Селезенка+0,5 см.

В крови выявлены маркеры ВЭБ-инфекции: IgM VCA - положительный, IgG VCA/EA - положительный, IgG EBNA - отрицательный; методом ИФА выявлены маркеры цитомегаловирусной инфекции: IgM - положительный, IgG - отрицательный. Результат - методом ПЦР обнаружены ДНК ВЭБ и ДНК ЦМВ.

В лечении на фоне стандартной терапии дополнительно получал противовирусные препараты в возрастной дозировке. Через 1,5 месяца после окончания противовирусной терапии, показатель уровня фракталкина составил 11,7 нг/мл. Значения фракталкина на фоне проводимой терапии указывали на то, что терапия неэффективна и необходима ее коррекция. При ПЦР-диагностике (контроль после лечения) - ДНК ВЭБ - обнаруживается, ДНК ЦМВ - обнаруживается.

Клинический пример демонстрирует возможность использования способа в клинической практике для решения вопроса о назначении противовирусной терапии.

Преимуществами предлагаемого способа является повышение эффективности лечения детей с инфекционным мононуклеозом за счет обеспечения возможности более патогенетически обоснованной тактики лечения, а, следовательно, внедрение его в практику повысит качество оказания медицинской помощи пациентам с данной патологией.

Значения фракталкина (нг/мл) в сыворотке крови у детей с острым инфекционным мононуклеозом

Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии, инфектологии, и может быть использовано для оценки эффективности противовирусной терапии при инфекционном мононуклеозе у детей. Через 1,5 месяца после проведения противовирусного лечения у детей с острым инфекционным мононуклеозом определяют в сыворотке крови фракталкин методом иммуноферментного анализа. При уровне фракталкина в сыворотке крови менее 8,8 нг/мл оценивают противовирусную терапию как эффективную, а при уровне фракталкина более 8,9 нг/мл оценивают противовирусную терапию как неэффективную. Способ обеспечивает возможность повышения оценки эффективности противовирусной терапии у детей с острым инфекционным мононуклеозом и позволяет улучшить клиническое течение и исход заболевания за счет определения в крови уровня фракталкина через 1,5 месяца после проведения противовирусного лечения. 1 табл., 2 пр.

Способ оценки эффективности противовирусной терапии при инфекционном мононуклеозе у детей, заключающийся в том, что у детей с острым инфекционным мононуклеозом через 1,5 месяца после проведения противовирусного лечения определяют в сыворотке крови фракталкин методом иммуноферментного анализа, и при уровне фракталкина в сыворотке крови менее 8,8 нг/мл оценивают противовирусную терапию как эффективную, а при уровне фракталкина более 8,9 нг/мл оценивают противовирусную терапию как неэффективную.