Способ дифференциальной диагностики бактериальных и вирусных инфекционно-воспалительных заболеваний Российский патент 2024 года по МПК G01N33/68 G01N33/577 

Предлагаемое изобретение относится к медицине и может быть использовано при проведении ранней дифференциальной диагностики острых вирусных и бактериальных инфекций, оценки степени тяжести бактериальных инфекционно-воспалительных процессов, что должно способствовать своевременной оптимизации лечения различных инфекционно-воспалительных заболеваний с достижением более быстрой позитивной клинической эффективности.

Проблема инфицирования в современном мире признается одной из наиболее злободневных, поскольку является причиной трети от общего ежегодного количества смертей в мире [1, 2]. Самым грозным и тяжелым проявлением инфекционно-воспалительных заболеваний (ИВЗ) в разные возрастные периоды является гнойно-септическая патология. По данным мультицентровых исследований летальность при сепсисе колеблется от 18 до 33%, при тяжелом сепсисе - 35-55%, септическом шоке - 50-80% [3 - 6]. При остром перитоните (ОП) средние показатели летальности сохраняются на уровне 20-30 %, а при наиболее тяжелых его формах - 40-50 % [7], а на долю легочно-плевральных форм острой деструктивной пневмонии (ОДП) приходится от 26,5 до 60,0% случаев [8].

При верификации диагноза вирусного или бактериального процесса часто возникают определенные сложности, мешающие правильному выбору этиотропной терапии. Имеющиеся современные способы исследования, выявляющие этиологический фактор (ИФА, ПЦР, микробиологические), требуют больших временных затрат. В ряде крупных исследований продемонстрировано, что ни клиническая картина, ни уровень маркеров воспаления не обладают достаточной чувствительностью и специфичностью для дифференциальной диагностики вирусных и бактериальных инфекций и не позволяют оценить тяжесть течения инфекционного процесса бактериальной природы. Полагаться на "классические" маркеры воспаления (количество лейкоцитов, тромбоцитов, лейкоцитарная формула, лейкоцитарный индекс интоксикации (ЛИИ), скорость оседания эритроцитов (СОЭ), уровень С-реактивного белка (СРБ) и прокальцитонина (ПКТ) и др.) не всегда продуктивно, так как повышение плазменных уровней белков острой фазы происходят не только при инфекциях, но и при некрозах тканей (ожогах, травмах) и некоторых злокачественных опухолях [9, 10]. Известно, что прокальцитонин (ПКТ) может синтезироваться по "несептическому пути" и у некоторых гематологических пациентов. Так было выявлено, что в большинстве неинфекционных эпизодов повышение уровней ПКТ и СРБ было статистически неотличимо от таковых при "грамотрицательном" сепсисе [11].

В настоящее время существует большое разнообразие интегральных лейкоцитарных индексов, которые в 2007 году [12] было предложено классифицировать на:

I. Индексы интоксикации: интегральный показатель тяжести (ИПТ) по М.М. Соловьеву, Т.М. Алехиной [13]; лейкоцитарный индекс интоксикации (ЛИИ) по Л.Я. Кальф-Калифу [14]; лейкоцитарный индекс интоксикации В.К. Островского (ЛИИО) [15]; ядерный индекс интоксикации Г.А. Даштоянца (ЯИ) [14]; общий индекс эндогенной интоксикации (ОИИ); индекс сдвига лейкоцитов крови (ИСЛК).

II. Индексы неспецифической реактивности: индекс соотношения нейтрофилов и лейкоцитов В.М. Угрюмова (ИСНЛ) [12]; индекс соотношения нейтрофилов и моноцитов (ИСНМ); индекс соотношения лимфоцитов и моноцитов (ИСЛМ); индекс соотношения лимфоцитов и эозинофилов (ИСЛЭ).

III. Индексы активности воспаления: индекс соотношения лейкоцитов и СОЭ (ИЛСОЭ); лимфоцитарно-гранулоцитарный индекс (ИЛГ) [12].

Походенько-Чудакова И.О., Казакова Ю.М. (2007) [16] пришли к выводу, что индекс соотношения лимфоцитов и моноцитов (ИСЛМ) не информативен у больных с гнойно-воспалительными процессами челюстно-лицевой области, а ЛИИ, ЛИИО, ЯИ, ИСЛК, ИСНЛ, ИСНМ не отражают распространенность процесса. И.В. Гребенникова и соавт.(2022) [17] заключили, что гематологические лейкоцитарные и тромбоцитарные биомаркеры инфекции COVID-19 можно ориентировочно использовать, как альтернативу сложным и дорогостоящим методам. В работе Шойхет Я.Н., Устинова В.Г. (2011) [18] у больных с инфекционными деструкциями легких была отмечена разнонаправленность многих лейкоцитарных индексов. Для оценки уровня эндогенной интоксикации при бактериальной инфекции Громов М.И. и соавт. (2023) [19] выбрали упрощенный вариант индекса ЛИИ по Островскому (без учета плазматических клеток). Все вышеописанные индексы позволяют лишь ориентировочно оценить тяжесть протекающего инфекционно-воспалительного заболевания, но, при этом, во всех случаях отсутствует четкая верификация степени тяжести течения бактериальных ИВЗ (легкая, средняя, тяжелая).

В настоящее время назрела острая необходимость поиска новых способов дифференциальной диагностики вирусных и бактериальных инфекционно-воспалительных заболеваний, при этом, выявление этиологических факторов ИВЗ и степени тяжести бактериальных ИВЗ очень важна для своевременной оптимизации дальнейшего лечения.

В работах многих авторов показано, что нейтрофильные гранулоциты (НГ) играют решающую и предопределяющую роль как в антибактериальной, так и в противовирусной защите, и что вирусные и бактериальные ИВЗ, как правило, протекают на фоне различных дисфункций этих ключевых клеток иммунной системы [20, 21, 22, 23,24]. Под действием внутри- и внеклеточных факторов НГ способны динамично перестраивать свое рецепторное оснащение, что в свою очередь отражается на их способности оказывать как позитивное регуляторное влияние на течение инфекционного процесса, так и проявлять супрессорный эффект или оказывать гиперэргическое повреждающее действие, что приводит к развитию рецидивирующих или тяжело протекающих гнойных инфекций, не отвечающих на традиционную терапию [2, 23, 24]. Определение относительного количества НГ с учетом характера представленности тех или иных мембранных рецепторов (CD62L CD63, CD11b/CD18, CD16, CD64 и т.д.), являющихся высоко чувствительными индикаторами происходящих клеточных реакций, позволяет оценить не только взаимосвязь НГ с экстрацеллюлярным окружением, фагоцитарный и микробицидный потенциал, но и адекватность включенности нейтрофильных гранулоцитов в иммунный ответ [25, 26, 27]. Аналог ближайший

В ближайшем аналоге авторы патента RU 2602677 С1 [28] оценили фенотипический профиль субпопуляции CD16(+)CD11b(+)НГ периферической крови при остром тонзиллите (ОТ) разной этиологии (вирусной, бактериальной) у взрослых пациентов (18-28 лет). Показано, что среди НГ в норме у здоровых лиц преобладает CD16brightCD11bdim-НГ (91,02±5,23%), в группе с острой вирусной Эпштейн Барр инфекцией (ОВЭБИ) -CD16brightCD11bbrightНГ (75,824,48%), в группе с острым бактериальным тонзиллитом (ОБТ) - CD16dimCD11bbrightНГ (88,6±5,95). Выявление небольшого количества при ОБТ - CD16brightCD11bbrightНГ (12,35±1,96) указывало на наличие в анамнезе перенесенной ОВЭБИ или других вирусных инфекций. Наличие при ОВЭБИ субпопуляции НГ - CD16dimCD11bbright (8,87±3,65) указывало на вероятность присоединения бактериальной инфекции. Таким образом, принимая за норму наличие у здоровых субъектов субпопуляции НГ - CD16brightCD11bdim от 80 и до 99,9% (с высокой плотностью экспрессии CD16 и низкой плотностью экспрессии CD11b) и при условии выявления субпопуляции НГ - CD16brightCD11bbright (с высокой плотностью экспрессии CD16 и CD11b) в количестве от 40% и более - определяют острую вирусную инфекцию, а при выявлении субпопуляции НГ - CD16dimCD11bbright(c низкой плотностью экспрессии CD16 и высокой CD11b) от 40% и более определяют острую бактериальную инфекцию.

Недостатки ближайшего аналога

В выше приведенной работе [28] авторы при верификации на острую вирусную/бактериальную инфекции не предусматривают определение степени тяжести бактериальных ИВЗ. При этом, изменение уровней экспрессии рецепторов CD16 и CD11b на НГ может происходить не только при инфекционных, но и при других процессах, не связанных с инфицированием (различные триместры беременности, онкология и др. [29]). Так же следует отметить трудоемкость способа: необходимость дополнительного гейтирования субпопуляции CD16+CD11b+НГ с целью определения характера экспрессии CD16 и CD11b (bright / dim) и дальнейшее проведение сопоставительного анализа с уровнем их экспрессии на мембране НГ периферической крови контрольного образца.

Задачи: расширить возможности дифференциальной диагностики вирусных и бактериальных инфекционно - воспалительных заболеваний, обеспечить определение степени тяжести бактериальных инфекционно -воспалительных заболеваний, снизить трудоемкость.

Сущность изобретения: предлагается способ дифференциальной диагностики вирусных и бактериальных инфекционно-воспалительных заболеваний (ИВЗ) и степени тяжести бактериальных ИВЗ, включающий анализ пробы периферической крови и определение количества субпопуляций нейтрофильных гранулоцитов (НГ), экспрессирующих поверхностные мембранные рецепторы, отличающийся тем, что в крови выявляют НГ, которые несут рецепторы CD64, CD16, CD32, CD11b, затем путем последовательного гейтирования (примечание: гейтирование (gatiing) - последовательная сортировка и анализ данных в многоцветной проточной цитометрии на основе выделения интересующих популяций клеток) с помощью проточного цитометра Cytomics FC-500 выделяют субпопуляции НГ по наличию или отсутствию (примечание: «+» - означает наличие рецептора на мембране НГ; «-» - означает отсутствие рецептора на мембране НГ) оснащенности данными рецепторами - CD64-CD16+CD32+CD11b+НГ (К1) и CD64+CD16+CD32+CD11b+НГ (K2) - и при их соотношении (РИНГ=К1/К2), равном 0,1-18,9, определяют бактериальные ИВЗ, а при РИНГ не менее 19 -вирусные ИВЗ, причем при значении РИНГ в интервале 0,1-2,9 диагностируют тяжелое течение бактериальных инфекций, при РИНГ в интервале 3,0-5,8 - среднетяжелое, а при РИНГ в интервале 5,9-18,9 - легкое течение бактериальных ИВЗ.

Апробацию проводят способом проточной цитометрии, имеющей большое преимущество по сравнению с другими способами, так как позволяет по рецепторному профилю тестировать как редкие события, так и определять большое количество клеток с детекцией антигенов на их поверхности; количества как основных популяций, так и малых субпопуляций.

Технический результат.

Технический результат обоснован тем, что способ предусматривает выявление большего количества субпопуляций, оснащенных другими рецепторами, которые позволяют повысить достоверность способа, дифференцировать этиологию инфекции, сократить трудоемкость за счет отсутствия необходимости оценки уровня экспрессии каждого рецептора, кроме того, обеспечить определение степеней тяжести бактериальной инфекции.

Способ осуществляют следующим образом. Производят забор биоматериала - кровь из периферической венозной сети. Исследуют маркеры поверхностной цитоплазматической мембраны НГ: тестируют на мембране НГ одномоментную экспрессию рецепторов CD64, CD32, CD16, CD11b методом проточной цитометрии с использованием конъюгатов моноклональных антител с различными флюорохромами (CD64 - FITC, CD32 - РЕ, CD16 - ECD, CD11b - РС5) и соответствующих изотипических контролей («Beckman Coulter International S.A.», Франция) на проточном цитометре Cytomics FC-500 («Beckman Coulter», США) с использованием метода последовательного гейтирования, позволяющего на гистограммах проточного цитометра на основании наличия или отсутствия исследуемых рецепторов детектировать относительное количество (%) двух диагностически значимых субпопуляций CD64-CD16+CD32+CD11b+НГ (К1) и CD64+CD16+CD32+CD11b+НГ(К2).

На основании проведенных исследований при вирусных ИВЗ и бактериальных ИВЗ (сепсис, перитонит, острая деструктивная пневмония (ОДП), острый гематогенный остеомиелит (ОГО); гнойно-воспалительные заболевания челюстно-лицевой области; гнойные заболеваниях мягких тканей (ГЗМТ); врожденная пневмония (ВП), неонатальный сепсис (НС)) нами предлагается способ дифференциальной диагностики вирусных и бактериальных ИВЗ с оценкой степени тяжести бактериальных ИВЗ.

Предложен дифференциальный диагностический маркер - расчетный индекс нейтрофильных гранулоцитов (РИНГ).

Цитометрически производят регистрацию относительного содержания двух субпопуляций: (%)CD64-CD16+CD32+CD11b+НГ (К1) и (%)CD64+CD16+CD32+CD11b+НГ (К2) при вирусных и бактериальных инфекционно-воспалительных заболеваниях.

Затем вычисляют РИНГ по соотношению К1 к К2:

РИНГ=К1/К2.

Заявляемый способ лабораторной диагностики позволяет дифференцировать наличие вирусного или бактериального ИВЗ и оценить характер течения бактериального ИВЗ: легкая, средняя или тяжелая степень.

При клиническом проявлении инфекционно-воспалительного заболевания осуществляют дифференциальный скрининг на наличие вирусной или бактериальной инфекции.

Если РИНГ находится в интервале 0,1-18,9 - бактериальная инфекция.

Если РИНГ находится в интервале 19,0-99,0 - вирусная инфекция.

Дифференциальную диагностику тяжести бактериальной инфекции осуществляют при РИНГ от 0,1 до 18,9. Далее производят дифференцировку с учетом трех диапазонов значений РИНГ, позволяющих констатировать степень тяжести течения бактериальных инфекций (Таблица 1). Если РИНГ находится в интервале 0,1-2,9 - тяжелое течение бактериальных инфекций; если РИНГ находится в интервале 3,0-5,8 - среднетяжелое течение бактериальных инфекций; если РИНГ находится в интервале 5,9-18,9 - легкое течение бактериальных инфекций.

Снижение значений РИНГ в диапазоне от 18,9 до 0,1 свидетельствует об утяжелении бактериального процесса.

Пример 1. Пациент А., 53 года (женского пола) инфекционного отделения ГБУЗ «Специализированная клиническая инфекционная больница» МЗ Краснодарского края.

Диагноз: Новая коронавирусная инфекция COVID-19 (подтвержденная), средне-тяжелая форма, двусторонняя пневмония. ДН 0.

Клиническая картина ИВЗ: наблюдалась гипертермия (Т 39-39,5°С), боль в горле, снижение обоняния и вкуса, увеличение шейных и подчелюстных лимфатических узлов, кашель сухой, одышка, сатурация (SpO2) 93%, слабость, утомляемость.

Дифференциальная диагностика инфекционно-воспалительного заболевания у пациента А. с клиническими проявлениями ИВЗ проводилась с применением иммунофенотипирования нейтрофильных гранулоцитов периферической крови (ПК) обследуемой с последующим выявлением относительного содержания (%) - К1 (CD64-CD16+CD32+CD11b+НГ) и К2 (CD64-CD16+CD32+CD11b+НГ) субпопуляций в процессе последовательного гейтирования на проточном цитометре.

Определили величины: К1=91,2% и К2=4,8%.

Далее рассчитали показатель РИНГ: РИНГ=К1/К2.

РИНГ=91,2/4,8=19,0.

Полученный РИНГ=19,0 явился нижним пороговым значением интервала РИНГ 19,0-99,0, определенного для верификации вирусной инфекции. Таким образом, полученное значение РИНГ=19,0 свидетельствовало о наличии у пациента ИВЗ вирусной природы.

Была назначена противовирусная терапия. Наблюдалась положительная динамика с выздоровлением.

Трудоемкость дифференциальной диагностики ИВЗ снижена на 45%.

Пример 2. Пациент Б., 27 лет (мужского пола) инфекционного отделения ГБУЗ «Специализированная клиническая инфекционная больница» МЗ Краснодарского края.

Диагноз: Энтеровирусная инфекция неуточненная, смешенная форма, среднетяжелое течение.

Клиническая картина ИВЗ: гипертермия (Т 38,5-39,0°С), фарингит, признаки интоксикации (головная боль, слабость, бледность кожных покровов), миалгии и артралгии, тошнота, боли в животе, жидкий стул 4-5 раз в день.

Дифференциальная диагностика инфекционно-воспалительного заболевания с клиническими проявлениями ИВЗ проводилась у пациента Б. по алгоритму, описанному выше в примере 1. Так, К1 составил 99,0%, а К2 - 1,0%.

Рассчитали РИНГ: РИНГ=99,0/1,0=99,0.

Полученное значение РИНГ=99,0 вошло в интервал РИНГ 19,0-99,0, определенного для верификации вирусной инфекции, и явилось верхним пороговым значением в данном интервале. Таким образом, ИВЗ обследованного пациента имеет вирусную этиологию.

Была назначена и проведена противовирусная терапия в комплексном лечении. Наблюдалась положительная клинико-лабораторная динамика, исход - выздоровление.

Трудоемкость дифференциальной диагностики ИВЗ снижена на 45%.

Пример 3. Пациент В. (3 года, мальчик), находился на стационарном лечении в хирургическом отделении №1 ГБУЗ «Детская краевая клиническая больница» МЗ Краснодарского края.

Диагноз: Острый гнойный лимфаденит в подчелюстной области слева.

Клинические проявления ИВЗ: увеличение подчелюстного лимфоузла слева до 2,5 см в диаметре с гиперемией кожи над лимфоузлом, лимфоузел болезненный при пальпации, эластичный, не спаянный с кожей, боли в шее при повороте головы влево, гипертермия до 38,2°С, снижение аппетита, слабость, ребенок капризничает, часто плачет.

Дифференциальная диагностика инфекционно-воспалительного заболевания с клиническими проявлениями ИВЗ проводилась у пациента В. с левосторонним подчелюстным лимфаденитом с уточнением вирусной или бактериальной этиологии заболевания по алгоритму, описанному выше в примере 1. Так, К1=96,4%, а К2=5,1%.

Рассчитали РИНГ: РИНГ=96,4/5,1=18,9.

Полученное значение РИНГ явилось верхней границей интервала РИНГ 0,1-18,9, определяющего наличие бактериальной инфекции. При этом, 18,9 явилось пороговым показателем в интервале РИНГ 5,9-18,9 (легкое течение бактериальной инфекции). Таким образом, произведенное вычисление РИНГ позволило определить бактериальную инфекцию легкого течения.

Было проведено хирургическое лечение и назначена антибактериальная терапия. Послеоперационный период протекал без осложнений. Пациент выписан с выздоровлением.

Трудоемкость дифференциальной диагностики ИВЗ снижена на 45%.

Пример 4. Пациент Г. (2 года, мальчик) находился на стационарном лечении в ГБУЗ «Детская краевая клиническая больница» МЗ Краснодарского края в хирургическом отделении №1.

Диагноз: Острый гнойный (абсцедирующий) лимфаденит в подмышечной области справа.

Клиническая картина ИВЗ: пальпируется увеличенный до 3 см в диаметре и болезненный лимфоузел в подмышечной области справа, гипертермия до 38,5°С, наличие признаков интоксикации (головная боль, вялость, слабость, снижение аппетита).

Дифференциальная диагностика инфекционно-воспалительного заболевания с клиническими проявлениями проводилась у двухлетнего пациента с правосторонним подмышечным лимфаденитом вирусной или бактериальной этиологии по алгоритму, описанному выше в примере 1. Так, К1=86,5%, аК2 - 14,5%.

Рассчитали РИНГ: РИНГ=86,5/14,5=5,9.

Вычисленный РИНГ=5,9 вошел в диапазон РИНГ 0,1-18,9, определенного для диагностики бактериальной инфекции. При этом, значение РИНГ=5,9 явилось нижним порогом в интервале РИНГ 5,9-18,9 (легкое течение бактериальной инфекции). Заключение: определили ИВЗ бактериальной природы легкого течения.

Ребенок получал комбинированную терапию: хирургическое лечение, антибактериальную терапию, дезинтоксикационную терапию, иммунокорригирующую терапию. В послеоперационном периоде осложнений не наблюдалось. Ребенок выписан с выздоровлением.

Трудоемкость дифференциальной диагностики ИВЗ снижена на 45%.

Пример 5. Пациент Д., 8 лет находился на стационарном лечении в хирургическом отделении №1 ГБУЗ «Детская краевая клиническая больница» МЗ Краснодарского края.

Диагноз: острый гематогенный остеомиелит дистального метадиафиза правой бедренной кости.

Клинические проявления ИВЗ: при поступлении в стационар на 4 день от начала заболевания у пациента наблюдалось острое начало после короткого продромального периода, гипертермия до 39,7-40,0°С, нарастающий интоксикационный синдром, боли распирающего характера в пораженной нижней конечности максимально выраженные над очагом воспаления и вынужденное положение конечности. Лабораторно отмечался высокий уровень СРБ - 60 мг/л. Гнойно-воспалительный процесс локализовался в дистальном метадиафизе правой бедренной кости.

Дифференциальная диагностика инфекционно-воспалительного заболевания у пациента Д. с клиническими проявлениями острого гематогенного остеомиелита (ОГО) по степени тяжести проводилась по алгоритму, описанному выше в примере 1. Так, К1=87,6% и К2=15,1%.

Рассчитали РИНГ: РИНГ=87,6/15,1=5,8

Вычисленный РИНГ вошел в диапазон РИНГ 0,1-18,9, определенного для диагностики бактериальной инфекции. При этом, РИНГ 5,8 явился пороговым значением в интервале РИНГ 3,0-5,8 (среднетяжелое течение бактериальной инфекции). Заключение: верифицируется бактериальная инфекция среднетяжелого течения.

Ребенок получал хирургическое пособие, комбинированную антибактериальную терапию, дезинтоксикационную терапию. Применение иммунотерапии в комплексе со стандартным лечением сопровождалось позитивными клиническими эффектами и восстановлением иммунологических показателей. Местный гнойно-воспалительный процесс купировался на 6 сутки. Восстановление функции в пораженной конечности на 14 сутки. Отсутствовали ранние послеоперационные осложнения.

Трудоемкость дифференциальной диагностики ИВЗ снижена на 45%.

Пример 6. Пациент К., находился на лечении в хирургическом отделении №1 ГБУЗ «Детская краевая клиническая больница» МЗ Краснодарского края.

Диагноз: Острый гематогенный остеомиелит (ОГО) костей, составляющих левый тазобедренный сустав.

Клинические проявления ИВЗ: на 14 день от начала заболевания наблюдались гипертермия 38,0-38,5°С, умеренный интоксикационный сидром, боль и ограничение движений в левом тазобедренном суставе. Уровень СРБ был резко повышен - 174 мг/л.

Дифференциальная диагностика инфекционно-воспалительного заболевания с клиническими проявлениями ОГО по степени тяжести проводилась у пациента К по алгоритму, описанному выше в примере 1.

Получили значения К1=75,0% и К2=25,0%.

Рассчитали РИНГ: РИНГ=75,0/25,0=3,0.

Вычисленный РИНГ вошел в диапазон РИНГ 0,1-18,9, определенного для диагностики бактериальной инфекции. При этом, РИНГ=3,0 вошел в интервал РИНГ 3,0-5,8 (среднетяжелое течение бактериальной инфекции), что позволило верифицировать бактериальную инфекцию среднетяжелого течения.

Ребенок получал комплексное лечение: хирургическое пособие, комбинированная антибактериальная терапия, дезинтоксикационная терапия, иммунокорригирующая терапия, препараты, влияющие на систему гемостаза. Наблюдался позитивный клинический эффект и восстановление иммунологических показателей. Местный гнойно-воспалительный процесс (отек, гиперемия, отделяемое из послеоперационной раны) купировался на 21 сутки. Отсутствовали ранние послеоперационные осложнения. Восстановление функции в тазобедренном суставе наблюдалось на 40 сутки.

Трудоемкость дифференциальной диагностики ИВЗ снижена на 45%.

Пример 7. Ребенок М. (2 года, девочка) находился на стационарном лечении в хирургическом отделении №1 ГБУЗ «Детская краевая клиническая больница» МЗ Краснодарского края.

Диагноз: Острая левосторонняя деструктивная полисегментарная пневмония. ДН 2 ст.

Клинические проявления ИВЗ: в течение 5 дней отмечались жалобы на повышение температуры до 38,7°С, кашель малопродуктивный, одышку, слабость. Рентгенографически признаки левосторонней деструктивной полисегментарной пневмонии.

Дифференциальная диагностика инфекционно-воспалительного заболевания с клиническими проявлениями острой деструктивной пневмонии по степени тяжести бактериального процесса проводилась по алгоритму, описанному выше в примере 1. Получены значения К1=76,0 К2=26,0.

Рассчитали РИНГ: РИНГ=2,9.

Вычисленный РИНГ вошел в диапазон РИНГ 0,1-18,9, определенного для диагностики бактериальной инфекции. При этом, РИНГ=2,9 вошел в интервал РИНГ 0,1-2,9 (тяжелое течение бактериальной инфекции), что позволило верифицировать бактериальную инфекцию тяжелого течения.

Ребенок получал хирургическое пособие (дренирование очагов деструкции легочной ткани), комбинированная антибактериальная терапия, дезинтоксикационная терапия, коррекция гемостаза, иммунокорригирующая терапия, симптоматическая терапия. На фоне комплексного лечения отмечались: регресс гнойно-воспалительного очага в легких, санация респираторного тракта с улучшением эвакуации мокроты, купирование дыхательной недостаточности и интоксикационного синдрома. Исход заболевания - выздоровление.

Трудоемкость дифференциальной диагностики ИВЗ снижена на 45%.

Пример 8. Ребенок К. (4 года, мальчик), находился на лечении в хирургическом отделении №1 ГБУЗ «Детская краевая клиническая больница» МЗ Краснодарского края.

Диагноз: Абдоминальный сепсис. Острый гангренозно-перфоративный аппендицит. Периаппендикулярный абсцесс. Отграниченный гнойный перитонит. Септическая пневмония.

Клинические проявления ИВЗ: болен в течение 1 недели, когда появились интенсивные боли в правой подвздошной области, сопровождающиеся тошнотой и неоднократной рвотой, не приносящей облегчения, гипертермия до 39,0-39,5°С, проявления интоксикации (мраморность кожных покровов, слабость, адинамия), кашель, нарастающие симптомы дыхательной недостаточности - ДН2 ст.

Дифференциальная диагностика инфекционно-воспалительного заболевания с оценкой степени тяжести бактериального процесса проводилась у пациента К. по алгоритму, описанному выше в примере 1. Так, К1=10,0%; К2=90,0%. Рассчитали РИНГ: РИНГ=0,1.

Вычисленный РИНГ вошел в диапазон РИНГ 0,1-18,9, определенного для диагностики бактериальной инфекции. При этом, РИНГ=0,1 вошел в интервал РИНГ 0,1-2,9 (тяжелое течение бактериальной инфекции), что позволило верифицировать бактериальную инфекцию тяжелого течения (более тяжелого, чем в примере 7).

Ребенок получал хирургическое лечение, проведена коррекция антибактериальной терапии с применением 3 антибиотиков из группы резерва, также использовалась дезинтоксикационная терапия, коррекция электролитного баланса, гемостаза, гемодинамических нарушенией, противогрибковая терапия, иммунокорригирующая терапия и симптоматическая терапия. На фоне комплексного лечения отмечалось улучшение клинического состояния, регресс септического процесса, нормализация лабораторных и иммунологических показателей. Ребенок выписан на 50 сутки с выздоровлением и рекомендациями по наблюдению у педиатра и хирурга по месту жительства.

Трудоемкость дифференциальной диагностики ИВЗ снижена на 45%.

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Яковлев С.А. Инфекционные заболевания как глобальная проблема современности. Территория науки. 2017. №1, с. 20-23.

2. Балмасова И.П., Малова Е.С., Сепиашвили Р.И. Вирусно-бактериальные коинфекции как глобальная проблема современной медицины // Вестник РУДН. Серия: Медицина. - 2018. - Т. 22. - №1. - С. 29-42.

3. Носкова О.А., Анганова Е.В., Гвак Г.В., Савилов Е.Д. Эпидемиологические аспекты сепсиса // Журн. микробиол. - 2018. - N 5. - С. 121-126.

4. Linde-Zwirble W.T., Lidicker J. et al. Epidemiology of severe sepsis in the United States: analysis of incidence, outcome, and associated costs of care // Crit. Care Med. - 2001. - Vol. 29, No. 7. P. 1303-1310.

5. Martin G.S., Mannino D.M., Eaton S. The epidemiology of sepsis in the United States from 1979 through 2000 // Engl. J. Med. - 2003. - Vol. 348, No. 16. P. 1546-1554.

6. Fujishima S., Gando S., Saitoh D. et al. A multicenter, prospective evaluation of quality of care and mortality in Japan based on the surviving sepsis campaign guidelines // J. Infect. Chemother. - 2014. - Vol. 20, No. 2. P. 115-120.

7. Власов А.П., Тимошкин С.П., Абрамова С.В. и др.. Показатели эндогенной интоксикации - критерии энтеральной недостаточности при остром перитоните // Фундаментальные исследования. - 2014. - N 106. - С.1 066-1070.

8. Чучалин А.Г. Пневмония: актуальная проблема медицины XXI века // Пульмонология. - 2015. - Т. 25. - N 2. - С. 133-142; Бычков В.А., Манжос П.И., Городова А.В.. Основные вопросы хирургии детского возраста - Москва: Российский ун-т дружбы народов, 2011. - 328 с.

9. Reynvoet Е., Vandijck D.M., Blot S.I. et al. Epidemiology of infection in critically ill patients with acute renal failure // Crit. Care Med. 2009; 37: 2203-2209.

10. Вельков B.B. Цистатин С: новые возможности и новые задачи для лабораторной диагностики. Часть 1 // Клинико-лабораторный консилиум. Научно-практический журнал. 2010. №5 (36). С. 23-31.

11. Dornbusch H.J., Strenger V., Sovinz P. et al. Non-infectious causes of elevated procalcitonin and C-reactive protein serum levels in pediatric patients with hematologic and oncologic disorders // Support Care Cancer. 2008.16(9): 1035-1040.

12. Овсянникова T.B. Особенности нарушения гемолимфоциркуляции в патогенезе обострения хронического воспалительного процесса органов малого таза у женщин и их коррекции лимфогенными технологиями: Автореф. дис. … доктора мед. наук: 14.00.16,14.00.01 /ГОУ Научно-исследовательский институт клинической и экспериментальной лимфологии Сибирского отделения Рос. академии мед. наук.- Новосибирск, 2007. - 37 с.

13. Супиев Т.К. Гнойно-воспалительные заболевания челюстно-лицевой области. М.: Изд-во «МЕДпресс», 2001. - 160 с.

14. Карабанов Г.Н. Использование лейкоцитарной формы крови для оценки тяжести интоксикации // Вестник хирургии. - 1989. - №4.- С. 146 – 149.

15. Островский В.К., Свитич Ю.М. Упрощенная формула лейкоцитарного индекса интоксикации в диагностике острых хирургических заболеваний // Здр. Казахстана. - 1982.- №7. - С. 24.

16. Походенько-Чудакова И.О., Казакова Ю.М.. Использование интегральных лейкоцитарных индексов для оценки тяжести и прогнозирования течения гнойно-воспалительных процессов челюстно-лицевой области. Вятский медицинский вестник, 2007, №2-3, с. 22-27.

17. Гребенникова И.В., Лидохова О.В., Макеева А.В., Бердников А.А., Савченко А.П., Блинова Ю.В., Воронцова З.А.. Гематологические индексы при COVID-19: ретроспективное исследование. Вестник Новых Медицинских Технологий. Электронное издание - 2022 - N 6. DOI: 10.24412/2075-4094-2022-6-3-5.

18. Шойхет Я.Н., Устинов В.Г. Интегральные лейкоцитарные индексы при острых инфекционных деструкциях легких, Бюллетень ВСНЦ СО РАМН, - 2011. - 4(80), с. 119-120

19. Громов М.И., Рысев А.В., Журавлев Ю.Ф., Пивоварова Л.П., Арискина О.Б., Маркелова Е.В. Лейкоцитарный индекс интоксикации по В.К. Островскому как критерий оценки бактериальной инфекции. Вестник хирургии имени И.И. Грекова. 2023; 182(2):53-58. DOI: 10.24884/0042-4625-2023-182-2-53-58.

20. Ерюхин И.А., Гельфанд Б.Р., Шляпников С.А. Хирургические инфекции. Медицина. - 2003.- 864 с; Zhang D., Chen G., Manwani D. et al. Neutrophil ageing is regulated by the microbiome // Nature.- 2015.- Vol. 525, No. 7570. P. 528-532.

21. Yang F., Feng C., Zhang X., Lu J., Zhao Y. The diverse biological functions of neutrophils, beyond the defense against Infections // Inflammation - 2017. - No. 40. P. 311-323.

22. Нестерова И.В., Колесникова H.B., Чудилова Г.А., Ломтатидзе Л.В., Ковалева С.В., Евглевский А.А., Нгуен Т.З.Л. Новый взгляд на нейтрофильные гранулоциты: переосмысление старых догм. (Часть 2) // Инфекция и иммунитет. -2018.-Т. 8.-N1.-C. 7-18.

23. Mantovani A., Cassatella М.С., Costantini С., Jaillon S. Neutrophils in the activation and regulation of innate and adaptive immunity // NatureReviewsImmunology. - 2011. - No. 11. P. 519-531.

24. Leliefeld P.H., Wessels С.М., Leenen L.P., Koenderman L., Pillay J. The role of neutrophils in immune dysfunction during severe inflammation // Crit. Care. -2016.-No. 20. P. 73.

25. Beyrau M., Bodkin J.V., NoursharghS. Neutrophil heterogeneity in health and disease: a revitalized avenue in inflammation and immunity. Open Biol. - 2012. - V. 2, N. 11.-P. 120-134.

26. Pillay J., Так Т., Kamp V.M., Koenderman L. Immune suppression by neutrophils and granulocytic myeloidderived suppressor cells: similarities and differences. Cell. Mol. Life Sci. - 2013. V. 70. - P. 3813-3827.

27. Irmeli Nupponen; Sture Andersson; Anna-Liisa Järvenpää; Hannu Kautiainen; Heikki Repo, Neutrophil CD11b expression and circulating Interleukin-8 as diagnostic markers for early-onset neonatal sepsis PEDIATRICS Vol.108 No. 1 July 2001, 1-6

28. Нестерова И.В., Колесникова Н.В., Авдеева М.Г, Чудилова Г.А. Ковалева С.В., Ломтатидзе Л.В. Патент «СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ЭКСПРЕСС-ДИАГНОСТИКИ ОСТРЫХ ВИРУСНЫХ И БАКТЕРИАЛЬНЫХ ИНФЕКЦИЙ» (RU 2602677 С 1) Опубликовано: 20.11.2016 Бюл. №32.

29. Чудилова Г.А. Мультивариантность фенотипической трансформации субпопуляций нейтрофильных гранулоцитов при различных иммунозависимых заболеваниях: специальность 14.03.09 «Клиническая иммунология, аллергология»: диссертация на соискание ученой степени доктора биологических наук; Кубанский государственный медицинский университет. - Краснодар, 2020. - 375 с.

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике, и может быть использовано для дифференциальной диагностики бактериальных и вирусных инфекционно-воспалительных заболеваний (ИВЗ). Проводят анализ пробы периферической крови и определение количества субпопуляций нейтрофильных гранулоцитов (НГ), которые несут рецепторы CD64, CD16, CD32, CD11b. Путем последовательного гейтирования с помощью проточного цитометра Cytomics FC-500 выделяют субпопуляции НГ по наличию или отсутствию оснащенности данными рецепторами - CD64-CD16+CD32+CD11b+НГ (К1) и CD64+CD16+CD32+CD11b+HГ (К2). Вычисляют расчетный индекс нейтрофильных гранулоцитов (РИНГ) как соотношение К1/К2. При значении РИНГ, равном 0,1-18,9, определяют бактериальные ИВЗ. При значении РИНГ не менее 19 определяют вирусные ИВЗ. Способ обеспечивает повышение достоверности дифференциальной диагностики бактериальных и вирусных ИВЗ за счет определения соотношения двух диагностически значимых субпопуляций НГ. 1 табл., 8 пр.

Способ дифференциальной диагностики бактериальных и вирусных инфекционно-воспалительных заболеваний (ИВЗ), включающий анализ пробы периферической крови и определение количества субпопуляций нейтрофильных гранулоцитов (НГ), экспрессирующих поверхностные мембранные рецепторы, отличающийся тем, что в крови выявляют НГ, которые несут рецепторы CD64, CD16, CD32, CD11b, затем путем последовательного гейтирования с помощью проточного цитометра Cytomics FC-500 выделяют субпопуляции НГ по наличию или отсутствию оснащенности данными рецепторами - CD64^-CD16⁺CD32⁺CD11b⁺НГ (К1) и CD64⁺CD16⁺CD32⁺CD11b⁺HГ (К2), вычисляют расчетный индекс нейтрофильных гранулоцитов (РИНГ) как соотношение К1/К2, и при значении РИНГ, равном 0,1-18,9, определяют бактериальные ИВЗ, а при значении РИНГ не менее 19 - вирусные ИВЗ.