Изобретение относится к области медицины, а именно к местным гемостатическим средствам, и может применяться для остановки наружных кровотечений, а также при ранениях паренхиматозных органов и крупных сосудов.
На сегодняшний день местные гемостатические средства нашли широкое применение не только в хирургических клиниках, но и на догоспитальном этапе. Эти препараты удобны для интраоперационного гемостаза и при оказании первой помощи раненым. Во время оперативных вмешательств средства для локального гемостаза позволяют снизить или предотвратить интраоперационную кровопотерю. Топические гемостатики просты в применении и не способствуют дополнительной травматизации тканей, которая возможна при прошивании или перевязке источника кровотечения, применении диатермокоагуляции, лазерной фотокоагуляции и прочих физических методов гемостаза.
Современные материалы, используемые для производства местных гемостатических средств, отличаются по своей природе. По составу их можно подразделить на следующие группы:
- материалы на основе биологических факторов свертывания крови, полученных от животных или человека: коллаген, тромбин, фибрин, фибриноген, плазма и другие;
- материалы на основе производных целлюлозы;
- материалы на основе синтетических полимеров;
- материалы на основе неорганических соединений (цеолит, силикагель);
- материалы на основе экстрактов растений;
- материалы на основе хитозана и т.д.
По форме выпуска существуют средства для гемостаза в виде марли, с нанесенным на нее действующим веществом, гемостатических губок, пластин, порошков и т.д.
Наиболее распространены местные гемостатические средства на основе хитозана и коллагена.
Хитозан - это природный полисахарид, выделяемый из панцирей ракообразных; положительный заряд -NH2 группы хитозана электростатически взаимодействует с анионами на поверхности эритроцитов, что приводит к интенсивной агрегации эритроцитов вокруг ранения с образованием тромбов, которые быстро останавливают кровотечение. Хитозан способствует активации тромбоцитов и усилению их адгезии. Кроме того, in vivo хитозан приводит к контактной активации факторов свертывания крови, укрепляя сгусток. Он биологически инертен и способен к биодеградации. Лизоцим является основным ферментом, ответственным за деградацию хитозана in vivo путем гидролиза ацетилированных остатков. Лизоцим содержится в том числе в крови (Овсянников В.Г., Торопкина Ю.Е., Краскевич В.В., Алексеев В.В., Бойченко А.Е., Алексеева Н.С., Краскевич Д.А. Лизоцим - грани возможного// Современные проблемы науки и образования. - 2020. - № 3). Конечными продуктами деградации являются растворимые олигосахариды хитозана небольшой длины. Хитозан оказывает стимулирующее действие на макрофаги, а также является хемоаттрактантом для нейтрофилов, что способствует ускорению биодеградации хитозана. Хитозан обладает также неспецифической антимикробной активностью и способствует заживлению ран (Di Martino, A. Chitosan: a versatile biopolymer for orthopaedic tissue-engineering / A. Di Martino, M. Sittinger, M.V. Risbud // Biomaterials. -2005. - Vol. 26, № 30. - P. 5983-5990..), (Da Sacco, L. Chitin and chitosan as multipurpose natural polymers for groundwater arsenic removal and AS2O3 delivery in tumor therapy / L. Da Sacco, A. Masotti// Mar. Drugs. - 2010. - Vol. 8, № 5. - P. 1518-1525). Все эти свойства делают хитозан один из самых востребованных веществ для создания местных гемостатических средств и тканевых биоадгезивов.
Из патента RU2675631C1 известно местное гемостатическое средство, содержащие хитозан, карбоксиметилцеллюлозу и ципрофлоксацин. Препарат используется как средство первой помощи при наружных ранениях, позволяет профилактировать развитие инфекции в ране.
Бинт «ГЕМОФЛЕКС» (RU248770) создан на основе нановолокон хитозана. Он обладает большой удельной поверхностью, пористостью, воздухопроницаемостью и повышенными сорбционными свойствами.
К препаратам, производимым на территории Российской Федерации, относится также «ГЕПОГЛОС» (RU2635465), выпускаемый в форме бинта с нанесенным на него хитозаном. Действующее вещество - соль ацилированного хитозана, нанесено с двух сторон бинта. Бинт содержит также карбоксиметилкрахмал, для увеличения сорбционной ёмкости и выполнен из нетканого материала "спанлейс", содержащего вискозу и полиэфир.
Известно гемостатическое средство «ГЕМОХИТ» (RU2681184C1), при изготовлении которого используется поперечно сшитый эпоксидной смолой хитозан, что обусловлено его более высокой поглотительной способностью по сравнению с несшитым хитозаном. Использование глицерина в качестве пластификатора (что обусловлено его высокими пластифицирующими свойствами), придает губке необходимые эластичность и прочность.
Корпорация HemCon Medical Technologies.Inc в США производит следующие гемостатические изделия: «HEMCON GUARDACARE PRO» US 9205170 B2 (покрытия для ран, содержащие хитозан) и «HEMCON BANDAGE PRO» (бинты с нанесённым на них хитозаном). Данный продукт широко применяется в условиях боевых действий при оказании помощи раненым.
Известен патент US 5836970 A: раневые повязки, содержащие хитозан и альгинат. Согласно патенту данное медицинское изделие может быть произведено в виде порошка, пленки, геля, пены или их смесей.
Среди местных гемостатических средств, содержащих хитозан известен патент US 20050123588 A1, в котором представлен гемостатик, содержащий хитозановые волокна, на которые нанесены кровоостанавливающие микропористые полисахаридные микросферы и лекарственное средство или биологически активное вещество. Гемостатический материал рекомендован авторами для остановки активного кровотечения при ранениях артерий и вен, герметизации проколов бедренных артерий.
Известен также патент US 20050203058 A1, где описано гемостатическое средство, содержащее α- и β-хитозан и их производные.
В патенте под номером US 6998509 B1 представлено средство для лечения ран, содержащее хитозан. Хитозан в данном продукте находится в форме волокон, модифицированных обработкой кислотой в растворителе, который не способен растворять волокна хитозана, и путем обработки теплом.
Патент US 8106030 B2 описывает изобретение, в котором гемостатический порошок содержит соль хитозана вместе с по меньшей мере одним инертным материалом.
В патенте GB 2393120 A описана композитная повязка на рану, содержащая хитозан и окисленную целлюлозу. Препарат может иметь форму губки или раневой повязки.
Известно изобретение CN 1833732 A, где из хитозановых волокон путем химической модификации получены карбоксиметилхитозановые волокна. Его можно использовать для приготовления хирургической повязки для ран и ожогов, послеоперационных повязок.
В патенте WO 2020021499 A1 представлено изобретение, которое описывает гемостатическую гелевую повязку, содержащую хитозан в качестве полисахарида, желатин в качестве белка и крахмал в качестве углевода в одной фазе.
Известен патент CN 105169459 B в котором описан следующий способ приготовления кровоостанавливающего порошка: смешивание высоковязкого хитозана с высокой степенью деацетилирования с альдегидной кислотой, альгинатом натрия цинком.
Патент под номером CN 105251036 A представляет кровоостанавливающий материал, содержащий по массе 60-75 частей хитозанового волокна, 6-15 частей кератина, 10-25 частей натрия карбоксиметилцеллюлозы и 5-10 частей поливинилового спирта. Медицинский гемостатический материал обладает такими преимуществами, как быстрый гемостаз, превосходные механические свойства, хорошая биосовместимость и т.п.
В патенте КР 101699924 Б1 раскрыт способ изготовления медицинского волокна, содержащего кальций-карбоксиметилцеллюлозу и соединение хитозана.
Известен также патент CN 104874011 A описывающий кровоостанавливающее средство, которое представляет собой твердый препарат, полученный реакцией производного хитозана, гиалуроновой кислоты, хондроитинсульфата, альгиновой кислоты, карбомера, ксантановой камеди или производного целлюлозы и сшивающего агента Сшивающим агентом является формальдегид, метилглиоксаль, глутаровый альдегид. Гемостатик имеет преимущества, заключающиеся в быстром и эффективном гемостатическом эффекте, хорошей биологической совместимости и биологической разлагаемости.
В патенте RU 2759898 C2 предложена абсорбирующая полимерная гидрогелевая ксерогелевая губка, представляющая собой пористую губку с трехмерной сетью с хитозаном в качестве ее основы, абсорбирующим полимером и макромолекулой или полимером в качестве сшивающего агента. Губку можно применять при экстренном гемостазе большого артериовенозного кровотечения.
В патенте RU2589840C1 описано изобретение гидрофильного геля для раневого покрытия, содержащий в качестве вспомогательных веществ сукцинат хитозана, воду и спирт этиловый. Технический результат - гидрофильный гель для раневого покрытия с улучшенными свойствами за счет повышения проникающей способности и заживления и обеззараживания и сохранения формы на ране.
К недостаткам всех аналогов относится низкая адгезивность, что заключается в необходимости дополнительной фиксации препарата к ране, а также то, что действующее вещество, содержащее хитозан или его соли, при контакте с жидкостями организма теряет механическую прочность и постепенно размокает. Кроме того, все перечисленные аналоги рекомендованы к использованию только при наружных ранениях, их применение при внутриполостных ранениях не описано.
Средства на основе коллагена также хорошо себя зарекомендовали в качестве гемостатиков.
Коллаген - белок, составляющий основу соединительной ткани животных организмов. Структурная и химическая стабильность коллагена, его физические особенности обусловлены уникальной организацией трёхспиральных макромолекул которые, в свою очередь, при физиологической температуре, рН и ионной силе агрегируют с образованием трёхмерной сети межмолекулярных связей различной природы. При контакте с «петлями» спиралей коллагена входящие молекулы и клетки образуются соединения включения (клатраты). Коллаген ускоряет естественный путь коагуляции и запускает процесс свертывания крови в момент первого контакта фибрилл материала с тромбоцитами.
Агрегированные тромбоциты подвергаются нормальным морфологическим изменениям - дегранулируются, высвобождая АДФ, серотонин, тромбоксан А2, помогающий сформировать сгусток. Таким образом, основной гемостатический механизм действия коллагена - агрегация и активация тромбоцитов.
Диспергированный коллаген в концентрации выше 0,5% образует стойкие эмульсии типа M/B. В обезвоживающих условиях из тонкого слоя дисперсии получают прозрачные нехрупкие пленки, при распылительной сушке - порошки. Технология производства губки коллагеновой основана на методе сублимационной (лиофильной) сушки тонкого слоя раствора коллагена. В процессе сублимации кристаллов замерзшей воды в глубоком вакууме получают высокопористые губки, в которых объем сквозных и тупиковых пор составляет 50-90% общего объема губки. Такая губка обладает высокой сорбционной способностью и вбирает в себя количество влаги, превышающее многократно собственный вес, практически не увеличиваясь в размерах. Гемостаз достигается в пределах 2-5 минут. Коллаген в течение 5 минут образует водо- и воздухопроницаемый гелеобразный слой, однако пластина губки должна быть плотно прижата к раневой поверхности (препарат плохо адгезируется к неровной раневой поверхности из-за ригидности коллагеновых волокон).
Из патента RU 2385726 C1 известна коллагеновая губка, которая содержит дополнительно содержит до 10% антибиотиков широкого спектра действия и до 3% антисептиков. Недостатком указанной гемостатической губки является ее адгезивность к перчаткам и другим хирургическим инструментам.
Изобретение RU 2584348 C2 описывает композиционную коллагеновую губку, которая предназначена для остановки кровотечения, а также для стимулирования роста и пролиферации клеток. Губка содержит коллаген, факторы роста клеток и защитный агент в количестве 10%-50% масс., где защитный агент содержит аминокислоты, сахариды и альбумин. Губка имеет водопоглощающую способность более чем 52 раза на основании массы губки и имеет модуль упругости более 70,0 Н/см2.
Способ изготовления коллагеновой губки, описанной в патенте EA 005697 B1 включает добавление воздуха в гель коллагена и перемешивание для получения пены коллагена, которую затем высушивают. Из полученного таким способом высушенного продукта получают коллагеновую губку путем отделения частей губки с диаметром камер более 0,75 и менее 4 мм или частей со средним диагональным размером камер 3 мм. Коллагеновую губку можно применять в качестве материала для закрытия ран, возможно с покрытием фибриновым клеем, например, комбинацией фибриногена, тромбина и апротинина.
Среди аналогов, которые применимы для интраоперационного использования при работе с ранениями паренхиматозных органов и сосудов необходимо упомянуть препараты на основе факторов свертывания. Они представляют собой комбинацию различных факторов свертывания. К ним относятся, например, «TACHOSIL» US 9517287 B2, который представляет собой коллагеновую губку, покрытую фибриногеном и тромбином, выделенными из крови человека. Этот препарат обладает быстрым и надежным гемостатическим эффектом.
«TACHOSIL» - является более совершенной модицикацией препарата «TACHOCOMB» (EP0059265B1). Последний изготовлен из лошадиного коллагена, бычьего тромбина, бычьего апротинина и человеческого фибриногена. «TACHOSIL» содержит только человеческий фибриноген с лошадиным коллагеном в качестве носителя. Он не содержит апротинина и других компонентов бычьего происхождения. Суть работы подобных средств - имитация заключительных этапов коагуляции. Они обеспечивают достижение гемостаза за 3-5 минут. При контакте с кровоточащей поверхностью препарат становится активным, высвобождает активные факторы свертывания. Их биодеградация в организме длится около 12 недель.
Подобные кровоостанавливающий средства демонстрируют быстрый и надежный гемостатический эффект, обладают биоадгезивностью, пригодны для внутриполостного использования. Однако, эти препараты несут большую антигенную нагрузку, а также содержат белки крови человека, что влечет за собой риск заражения пациента вирусными инфекциями. Кроме того, они несомненно дороже, чем их синтетические аналоги на основе хитозана, каолина и т.д.
Стоит отметить, что эффективность коллагеновых губок проявляется лишь при умеренном паренхиматозном кровотечении. Также они имеют плохую адгезию к раневой поверхности и могут потерять контакт с раной, что потенциально может привести к рецидиву кровотечения. При массивном, смешанном кровотечении они «смываются» с раневой поверхности [Будко Е.В., Черникова Д.А., Ямпольский Л.М., Яцюк В.Я. Местные гемостатические средства и пути их совершенствования // Рос. мед.-биол. вестн. им. акад. И.П. Павлова. 2019. №2]. Использование в них в качестве ранозаживляющих агентов тканевых факторов роста повышает риск возникновения аллергических реакций. Также до конца не ясны риски канцерогенности, связанные с применением факторов роста.
Наиболее близким к предлагаемому является биоразлагаемая коллагеновая губка, армированная наночастицами хитозана/пирофосфата кальция для быстрого гемостаза (Yan T, Cheng F, Wei X, Huang Y, He J. Biodegradable collagen sponge reinforced with chitosan/calcium pyrophosphate nanoflowers for rapid hemostasis. Carbohydr Polym. 2017 Aug 15;170:271-280. doi: 10.1016/j.carbpol.2017.04.080. Epub 2017 Apr 29. PMID: 28521997.), которая выбрана нами в качестве прототипа.
Авторы прототипа разработали биоразлагаемую коллагеновую губку, армированную наночастицами хитозана и пирофосфата кальция (CPNFs-Col sponge) для быстрого гемостаза. Обладая специфическими характеристиками, такими как способность быстро впитывать воду, положительный заряд поверхности губки за счет большого количества аминогрупп, и высокой удельной площади поверхности (952,5 м2г-1), полученная губка CNPFs-Col с оптимизированным составом может активировать внутренний путь каскада свертывания, индуцировать адгезию гемоцитов и тромбоцитов, способствовать свертыванию крови и достигать контроля кровотечений in vitro и in vivo. Кроме того, губка CNPFs-Col может полностью биоразлагаться в течение 3 недель, что подходит для послеоперационного лечения и профилактики спаек брюшины.
Для создания гемостатической губки был использован хитозан со степенью деацетилирования равной 82,5%, бычье сухожилие, пепсин из слизистой оболочки желудка свиньи, лизоцим, коллагеназа I типа и диализные пакеты (отсечка мембранной молекулярной массы 3, 8 и 12-16 кДа), ледяная уксусная кислота, набор CCK-8, лимонная кислота, цитрат натрия, d -глюкоза, хлорид кальция, карбонат натрия.
CPNF были успешно синтезированы с помощью усовершенствованного метода приготовления в одном сосуде. При добавлении трипирофосфата кальция образовывались крошечные кристаллы Ca2P2O7, образующие четко выраженную матрицу. Молекулы хитозана затем адсорбировались на анизотропных нанокристаллах, что приводило к образованию гибридных наночастиц. Средний диаметр CPNF был рассчитан как 322 нм.
Таким образом, коллагеновая губка, армированная наночастицами хитозана/пирофосфата кальция, была разработана для быстрого контроля кровотечений. Полученная губка CPNFs-Col с оптимизированным составом обладала способностью к быстрому водопоглощению, положительной поверхностью, богатой аминогруппами, и высокой удельной поверхностью. Губка CNPFs-Col может активировать внутренний путь каскада свертывания крови, индуцировать прилипание гемоцитов и тромбоцитов, способствовать свертыванию крови и достигать быстрого контроля кровотечения.
Несомненно, прототип доказал свою эффективность, однако, он не лишен ряда недостатков. Коллаген не обладает собственными адгезивными свойствами, а хитозан в прототипе использован в качестве наночастиц для армирования губки, что также не влияет на повышение адгезивности. Как сказано выше, все коллагеновые губки имеют плохую адгезию к раневой поверхности и могут потерять контакт с раной, что потенциально может привести к рецидиву кровотечения. Для фиксации губки-прототипа необходимо применение дополнительных материалов: марлевой или другой циркулярной повязки, пластыря, одноразовой раневой повязки с клейкой поверхностью и т.д.
Также необходимо отметить, что при создании гемостатической губки использованы фосфаты кальция, которые могут быть потенциально токсичны, особенно при использовании больших количеств гемостатической губки, например при обширных повреждениях (Ксензенко В. И., Стасиневич Д. С. Кальция фосфаты // Химическая энциклопедия: в 5 т. / Гл. ред. И. Л. Кнунянц. - М.: Советская энциклопедия, 1990. - Т. 2: Даффа - Меди. - С. 299. - 671 с.). Таким образом, прототип также не предназначен для остановки кровотечений из внутренних органов и не может быть применен при массивных кровотечениях.
Актуальной задачей на сегодняшний день является поиск наиболее эффективного решения проблемы остановки кровотечения как при наружных кровотечениях, так и при повреждении паренхиматозных органов.
Технический результат настоящего изобретения заключается в создании эффективного гемостатического средства с повышенной адгезией (в том числе к влажной раневой поверхности), не требующего дополнительных материалов для его фиксации.
Этот результат достигается тем, что создано гемостатическое средство, содержащее производные хитозана и гидролизованный коллаген, согласно изобретению, в качестве производных хитозана используют его соль и дополнительно таннин и аргинин, или олигоаргинин, или полиаргинин, или протамина сульфата при следующем соотношении компонентов, масс. %:
Гемостатическое средство, по п.1 выполнено в виде пленки, для получения которой соли хитозана, аргинин, или олигоаргинин, или полиаргинин, или протамин сульфат, таннин и гидролизованный коллаген растворяют в воде в воде и высушивают при комнатной температуре на ровной поверхности в течение 48 часов в вытяжном шкафу.
Молекула коллагена состоит из трех полипептидных цепей, которые образуют полипролиновую спираль. Коллаген является белком внеклеточного матрикса в организме, его функция заключается в обеспечении механической прочности ткани. Благодаря ему ткани противостоят механической деформации. Коллаген обладает низкой антигенностью (Gan K, Li J, Wu W, Xia C, Zhang T, Bi M, Zhou K, Li J, Xu D. Effect of Absorbable Collagen Sponge and Steroid Injection for 1- or 2-Segment Anterior Cervical Discectomy and Fusion: A Retrospective Comparison Study. World Neurosurg. 2022 Aug;164:e574-e581. doi: 10.1016/j.wneu.2022.05.009. Epub 2022 May 10. PMID: 35552033). Из положительных свойств коллагена также стоит отметить то, что продукты деградации коллагена приводит к образованию аминокислот, обладающих тромбогенным потенциалом и активируют каскад коагуляции.
Использование в настоящем изобретении соли хитозана делает пленку биологически инертной и позволяет оставлять ее на ране после завершения операции на паренхиматозных органах и сосудах. Для создания соли хитозана могут быть использованы органические и одноосновные неорганические кислоты, например, ацетат, лактат, сукцинат, малат, цитрат и им подобные. Хитозан при высыхании образует пленку, обладающую адгезивными свойствами, но которая при избытке жидкости набухает и переходит в желеобразное состояние, там самым повышая адгезивные свойства предлагаемого изобретения.
Дополнительно средство содержит аргинин - аминокислоту, имеющую в составе положительно заряженную гуанидиновую группу, благодаря которой потенцируются адгезивные и гемостатические свойства хитозана. Пленка Хитозан/Аргинин продемонстрировала подавление роста колоний E. Coli и S. Aureus. Более того, раствор хитозана и аргинина не проявлял цитотоксичности и способствовал клеточной пролиферации (Song J, Feng H, Wu M, Chen L, Xia W, Zhang W. Preparation and characterization of arginine-modified chitosan/hydroxypropyl methylcellose antibacterial film. Int J Biol Macromol. 2020 Feb 15;145:750-758. doi: 10.1016/j.ijbiomac.2019.12.141. Epub 2019 Dec 17. PMID: 31857168).
Адгезивные свойства пленки и устойчивость к размоканию во влажной среде усилены за счет добавления к слою для контакта с раной таннина - растительного полифенольного дубильного вещества. Хорошая адгезивность таннина обусловлена его химической реакцией с нуклеофильными группами, такими как -NH2 или -SH на поверхности ткани. Добавление таннина к раствору обеспечило значительную силу адгезии к влажной ткани и хорошую цитосовместимость (Guo J, Sun W, Kim JP, Lu X, Li Q, Lin M, Mrowczynski O, Rizk EB, Cheng J, Qian G, Yang J. Development of tannin-inspired antimicrobial bioadhesives. Acta Biomater. 2018 May; 72:35-44. doi: 10.1016/j.actbio.2018.03.008. Epub 2018 Mar 17. PMID: 29555464; PMCID: PMC6328059). Биологические адгезивы на основе таннина обладают антиоксидантными, противовоспалительными и антибактериальными свойствами. Таннин может связывать свободные радикалы, а также способствовать пролиферации клеток млекопитающих. Противовоспалительные свойства таннина обусловлены его способностью вызвать снижение экспрессии интерлейкина 1В и фактора некроза опухоли альфа (Wu K, Fu M, Zhao Y, Gerhard E, Li Y, Yang J, Guo J. Anti-oxidant anti-inflammatory and antibacterial tannin-crosslinked citrate-based mussel-inspired bioadhesives facilitate scarless wound healing. Bioact Mater. 2022 May 21;20:93-110. doi: 10.1016/j.bioactmat.2022.05.017. PMID: 35633874; PMCID: PMC9131258). Таннин не обладает токсичностью, что было изучено при применении повязок, содержащих таннин у больных с обширными ожогами (Chokotho L, van Hasselt E. The use of tannins in the local treatment of burn wounds - a pilot study. Malawi Med J. 2005 Jun;17(1):19-20. doi: 10.4314/mmj.v17i1.10866. PMID: 27528993; PMCID: PMC3346037).
Существует вариант изобретения, где в качестве добавки к хитозану и таннину в активном слое использован протамина сульфат - белок, в котором 67% аминокислотного состава представлено аргинином, который делает его сильнощелочным поликатионным веществом с молекулярной массой 4,5 тыс. Да. Множественные положительно заряженные цепи протамина обеспечивают сильное электростатическое взаимодействие с отрицательно заряженными группами на клеточных мембранах.
Олигоаргинин - это пептид, содержащий участок аргинина и обладающий схожими с аргинином химическими свойствами (KASHEVEROV, I. E., KRYUKOVA, E. V., IVANOV, I. A., LEBEDEV, D. S., SPIROVA, E. N., EGOROVA, N. S., & TSETLIN, V. I. (2019). Oligo-arginine peptides as a new class of ligands of nicotinic acetylcholine receptors. Вестник Дальневосточного отделения Российской академии наук, (6s), 44).
Полиаргинин представляет собой положительно заряженную синтетическую полиаминокислоту (Fuchs SM, Raines RT. Polyarginine as a multifunctional fusion tag. Protein Sci. 2005 Jun;14(6):1538-44).
Благодаря биологической интертности, способности к биодеградации препарат можно использовать при ранениях паренхиматозных органов, таких как печень, почки и селезенка, как средство временного или окончательного гемостаза. После операции препарат может быть оставлен в брюшной полости на ране.
При изготовлении пленки на ровной поверхности высушивается раствор коллагена, соли хитозана, таннина и аргинина в течение 48 часов при комнатной температуре в вытяжном шкафу. После высыхания пластина готова к использованию.
Сушка в вытяжном шкафу для получения сухой пластины выбрана потому, что во влажном состоянии в виде гидрогеля средство не обладает достаточной адгезией: в этом случае нет плотного контакта положительно заряженных групп с поверхностями клеток. Использование сухой пленки приводит к тому, что в месте ее контакта с биологической тканью происходит локальная дегидратация поверхности ткани и образуется плотный контакт между функциональными группами компонентов пленки и клеточной мембраной.
Аппликация пластины производится на кровоточащую поверхность паренхиматозного органа, сосуда, наружного или внутреннего ранения. Далее осуществляется плотное прижатие пленки к раневой поверхности в течение 1 минуты. После чего пленка остается на поверхности повреждения на необходимый срок. В момент контакта с поверхностью раны происходит быстрая дегидратация ее поверхности и образование электростатических связей между положительно заряженными аминогруппами хитозана и гуаниновыми группами аргинина с отрицательно заряженными молекулами клеточных мембран, а также между тригидроксибензойными остатками таннинов с заряженными группами белков раневой поверхности.
Сущность поясняется примерами
Пример №1
1. Получают 2 масс.% водный раствор ацетата хитозана (к 95 г деионизированной воды добавляют 2 г хитозана и 2 г ледяной уксусной кислоты). Раствор перемешивают в течение 10 часов до полного растворения хитозана.
2. Готовят водный раствор гидролизованного коллагена. Для этого 20 г гидролизованного коллагена, полученного путем энзимного гидролиза, растворяют в 76 г воды, далее раствор перемешивают в течение часа до полного растворения коллагена.
3. Полученный ацетат хитозана в количестве 2 г добавляют к водному раствору коллагена, затем к раствору добавляют 1 г аргинина, перемешивают на магнитной мешалке до полного растворения в течение примерно 2 часов. Полученный раствор нагревают до 60°C, после чего при постоянном помешивании на магнитной мешалке добавляют 1 г таннина, помешивая при температуре 60°C до полного растворения последнего в течение 2 часов. Раствор высушивается при комнатной температуре на ровной поверхности в течение 48 часов. После высыхания пленка готова к использованию. Состав и содержание компонентов, масс.%:
Пример №2
Все стадии аналогичны примеру №1. Отличие состоит в том, что используется 2 г соляной кислоты для образования соли хитозана. Состав и содержание компонентов в слое для контакта с раной, масс.%:
Пример №3
Все стадии аналогичны примеру №1. Отличие состоит в том, что используется 4 г лимонной кислоты для образования соли хитозана. Состав и содержание компонентов в слое для контакта с раной, масс.%:
Пример №4
Все стадии аналогичны примеру №1. Отличие состоит в том, что используется 4 г молочной кислоты для образования соли хитозана. Состав и содержание компонентов в слое для контакта с раной, масс.%:
Пример №5
Все стадии аналогичны примеру №1. Отличие состоит в том, что используется 2 г сукцинат хитозана в готовом виде, растворенный в воде. Состав и содержание компонентов в слое для контакта с раной, масс.%:
Пример №6
Все стадии аналогичны примеру №1. Отличие состоит в том, что вместо аргинина используется 1 г протамина сульфата. Состав и содержание компонентов в слое для контакта с раной, масс.%:
Пример №7
Все стадии аналогичны примеру №1. Отличие состоит в том, что вместо аргинина используется 1 г полиаргинина. Состав и содержание компонентов в слое для контакта с раной, масс.%:
Пример №8
Все стадии аналогичны примеру №1. Отличие состоит в том, что вместо аргинина используется 1 г олигоаргинина. Состав и содержание компонентов в слое для контакта с раной, масс.%:
Таким образом, совокупность описанных выше компонентов в указанных количествах обеспечивает выраженный гемостатический эффект и повышенную адгезию средства при биологической инертности и способности к биодеградации, что позволяет использовать его без дополнительных фиксирующих материалов, а также обеспечивает универсальность его применения: изобретение может применяться при массивных кровотечениях как при наружных ранениях, так и при повреждениях паренхиматозных органов и сосудов.
Разработанная пленка за счет отличных адгезивных свойств позволяет использовать ее без дополнительной фиксации.
Внесение аргинина и таннина в препарат помимо усиления адгезивных свойств позволяет улучшить его благоприятные свойства, не увеличивая при этом количество побочных эффектов.
| название | год | авторы | номер документа |
|---|---|---|---|
| Местное гемостатическое средство | 2023 |
|
RU2807892C1 |
| Композиция для временной остановки кровотечений | 2023 |
|
RU2819603C1 |
| ГЕМОСТАТИЧЕСКОЕ СРЕДСТВО НА ОСНОВЕ ПОЛИВИНИЛПИРРОЛИДОНА И СПОСОБЫ ПОЛУЧЕНИЯ ЕГО ФАРМАКОЛОГИЧЕСКИХ ФОРМ | 2018 |
|
RU2705812C1 |
| Термоуправляемая композиция для временной остановки кровотечений | 2023 |
|
RU2810584C1 |
| Многослойное комбинированное гемостатическое средство местного действия | 2023 |
|
RU2826069C1 |
| КРОВООСТАНАВЛИВАЮЩАЯ ГУБКА | 1996 |
|
RU2122867C1 |
| ГЕМОСТАТИЧЕСКАЯ ГУБКА | 2008 |
|
RU2385726C1 |
| Гемостатичекий гель однократного местного применения | 2023 |
|
RU2796161C1 |
| СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ МАТЕРИАЛА ДЛЯ УКРЫТИЯ РАНЕВОЙ ПОВЕРХНОСТИ ПОЧКИ | 2001 |
|
RU2186572C1 |
| КОМПОЗИЦИЯ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ РАН И ИЗДЕЛИЯ НА ЕЕ ОСНОВЕ | 2011 |
|
RU2467767C1 |
Изобретение относится к области медицины, а именно к местному гемостатическому средству. Гемостатическое средство, содержащее производные хитозана и гидролизованный коллаген, при этом в качестве производных хитозана используют его соль и дополнительно таннин и аргинин, или олигоаргинин, или полиаргинин, или протамина сульфат при следующем соотношении компонентов, масс. %: соль хитозана 2-4, таннин 1, аргинин 1, или олигоаргинин 1, или полиаргинин 1, или протамина сульфат 1, гидролизованный коллаген 20, вода - остальное. Использование изобретения обеспечивает создание эффективного гемостатического средства с повышенной адгезией, в том числе к влажной раневой поверхности, не требующего дополнительных материалов для его фиксации. 1 з.п. ф-лы, 8 пр.
1. Гемостатическое средство, содержащее производные хитозана и гидролизованный коллаген, отличающееся тем, что в качестве производных хитозана используют его соль и дополнительно таннин и аргинин, или олигоаргинин, или полиаргинин, или протамина сульфат при следующем соотношении компонентов, масс. %:
2. Гемостатическое средство по п. 1, отличающееся тем, что оно выполнено в виде пленки.
| CN 116019960 A, 28.04.2023 | |||
| ГЕМОСТАТИЧЕСКАЯ СМЕСЬ КОРОТКИХ И ДЛИННЫХ ВОЛОКОН НА ОСНОВЕ ЦЕЛЛЮЛОЗЫ | 2016 |
|
RU2731371C2 |
| US 10960105 B2, 30.03.2021 | |||
| ГЕМОСТАТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ | 2016 |
|
RU2741304C2 |
| CN 108653800 A, 16.10.2018. | |||
