ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ

[0001] Настоящее изобретение относится к комбинации пиримидинового соединения или его соли и другого противоопухолевого средства для применения в лечении опухоли, и средству, потенцирующему противоопухолевый эффект, для другого противоопухолевого средства.

ПРЕДШЕСТВУЮЩИЙ УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

[0002] HER2 (также обозначаемый как "ErbB2") является рецепторной тирозинкиназой, принадлежащей к семейству ErbB.

HER2 считают протоонкогеном. Описано, что амплификация, гиперэкспрессия, мутация гена HER2 и т.п. происходит в различных типах злокачественных новообразований. Учитывая неклинические и клинические исследовательские данные, считают, что активация HER2 и нисходящих сигналов играет важную роль в выживании и/или пролиферации и т.д. злокачественных клеток, ассоциированных с генетической аномалией, гиперэкспрессией и т.п. HER2 (непатентный документ 1).

Таким образом, предполагают, что ингибитор, способный регулировать киназную активность HER2, будет ингибировать HER2 и нисходящие сигналы в злокачественных клетках, имеющих амплификацию, гиперэкспрессию или мутацию гена HER2, демонстрируя противоопухолевые эффекты в отношении злокачественных клеток. Таким образом, такой ингибитор считают полезным для лечения, продления жизни или улучшения QOL пациенты со злокачественными новообразованиями.

[0003] Описано, что метастазирование в головной мозг происходит в приблизительно от 25 до 40% случаев рака легких, приблизительно от 15 до 30% случаев рака молочной железы и у некоторого процента случаев множества других злокачественных новообразований (непатентные документы 2 и 3). Фактически, описано, что метастазирование в головной мозг происходит в приблизительно от 20 до 30% случаев HER2-положительного рака молочной железы (непатентный документ 4).

[0004] Соединения, имеющие HER2-ингибиторную активность, такие как лапатиниб и нератиниб, одобрены в качестве терапевтических средств против HER2-положительного рака молочной железы. Однако описано, что, т.к. все эти терапевтические средства являются субстратами p-gp или Bcrp, в неклинических тестах свойства проникновения в головной мозг этих средств ограничены (непатентный документ 5). Фактически, в клинических тестах с использованием лапатиниба или нератиниба нельзя достичь достаточных эффектов этих средств против метастазирующего в головной мозг злокачественного новообразования (непатентные документы 6, 7, 8 и 9).

С точки зрения контроля патологических состояний, включая очаг метастазирования в головной мозг, желательно разработать ингибитор HER2, имеющий ингибиторную активность против HER2, а также свойства проникновения в головной мозг.

[0005] Одна из мутаций HER2, мутация HER2ex20ins, описана как активирующая мутация при раке легких и т.д. (непатентный документ 10), и в отношении этой мутации HER2ex20ins проводят множество клинических испытаний. Однако в текущих обстоятельствах еще не разработан терапевтический способ для этого. Таким образом, желательно разработать ингибитор HER2, имеющий ингибиторную активность против мутации HER2ex20ins.

[0006] Существует множество сообщений о противоопухолевых эффектах, вызванных комбинациями ингибиторов HER2 и других противоопухолевых средств. Например, описано комбинированное использование трастузумаба с паклитакселом (непатентный документ 11), паклитаксела/соединения платины (непатентный документ 12), или т.п. Кроме того, описано комбинированное использование лапатиниба с капецитабином (непатентный документ 13), 5-FU (непатентный документ 14), S-1 (непатентный документ 15) или т.п.

[0007] EGFR (также обозначаемый как "ErbB1") является рецепторной тирозинкиназой, принадлежащей к семейству ErbB и, как описано, участвующей в росте клеток или ингибированию апоптоз посредством связывания с эпидермальным фактором роста (также обозначаемым как "EGF"), в основном, в эпителиальных тканях, наряду с нормальными тканями (непатентный документ 16).

[0008] EGFR считают протоонкогеном. Описано, что амплификация, гиперэкспрессия, мутация гена EGFR и т.п. происходит в различных типах злокачественных новообразований. Учитывая неклинические и клинические исследовательские данные, считают, что активация EGFR и нисходящих сигналов играет важную роль в выживании и/или пролиферации и т.д. злокачественных клеток, ассоциированных с генетической аномалией, гиперэкспрессия и т.п. EGFR. Например, мутацию в области экзона 19 EGFR, при которой происходит делеция аминокислот в положениях 746-750 (также обозначаемую как "делеционная мутация в экзоне 19"), и мутацию в области экзона 21, при которой происходит замена аминокислоты лейцин в положении 858 аргинином (также обозначаемую как "мутация L858R") считают вносящими вклад в выживание и/или пролиферацию злокачественных клеток посредством аутофосфорилирования EGFR EGF-независимым образом и, таким образом, индуцирующими киназную активность (непатентный документ 17). Описано, что эти мутации присутствуют в приблизительно от 30 до 50% случаев немелкоклеточного рака легких в Восточной Азии и приблизительно 10% случаев немелкоклеточного рака легких в Европе и США (непатентный документ 18).

[0009] Таким образом, предполагают, что ингибитор, способный регулировать киназную активность EGFR, будет ингибировать EGFR и нисходящие сигналы в злокачественных клетках, имеющих амплификацию, гиперэкспрессию и/или мутацию гена EGFR, демонстрируя противоопухолевые эффекты в отношении злокачественных клеток. Таким образом, такой ингибитор считают полезным для лечения, продления жизни или улучшения QOL пациентов со злокачественными новообразованиями.

[0010] Таким образом, ранее исследовано и разработано множество ингибиторов EGFR в качестве противоопухолевых средств, и их используют в лечении положительной по мутации EGFR опухоли. Например, лекарственные средства, такие как афатиниб, гефитиниб и эрлотиниб одобрены в качестве терапевтических средств для положительного по мутации EGFR рака легких, имеющего делеционную мутацию в экзоне 19 или мутацию L858R. Кроме того, осимертиниб одобрен в качестве терапевтического средства для положительного по мутации EGFR рака легких, имеющего делеционную мутацию в экзоне 19 или мутацию L858R, а также мутацию в области экзона 20, приводящую к замене аминокислоты треонин в положении 790 метионином (также обозначаемую как "мутация T790M").

[0011] Мутацию в области экзона 20, приводящую к инсерции один или более аминокислот (также обозначаемую как "инсерционная мутация в экзоне 20"), также считают активирующей мутацией при раке легких и т.п. (непатентный документ 19). Описано, что злокачественное новообразование, имеющее такую мутацию, имеет тенденцию к низкой чувствительности к множеству существующих ингибиторов EGFR. Например, что касается клинического эффекта афатиниба в отношении положительного по мутации EGFR рака легких, описано, что его эффект в отношении инсерционной мутации в экзоне 20 имеет тенденцию быть намного ниже, чем в случае делеционной мутации в экзоне 19 или мутации L858R (непатентный документ 20). В отношении рака легких, имеющего инсерционную мутацию в экзоне 20 EGFR, проведено множество клинических испытаний. Однако в текущих обстоятельствах еще не разработан терапевтический способ для этого. Таким образом, желательно разработать ингибитор EGFR, имеющий ингибиторную активность против инсерционной мутации в экзоне 20.

[0012] Т.к. большинство из мутаций EGFR описано для рака легких, показано, что метастазирование в головной мозг происходит в приблизительно от 25 до 40% случаев.

[0013] С точки зрения контроля патологических состояний, включая очаг метастазирования в головной мозг, желательно разработать ингибитор EGFR, имеющий ингибиторную активность против мутаций EGFR, а также свойства проникновения в головной мозг.

[0014] Также описаны противоопухолевые эффекты, вызванные комбинацией ингибиторов EGFR и других противоопухолевых средств. Например, обнаружено, что комбинация ингибитора EGFR эрлотиниба с CDDP имеет комбинаторный эффект (непатентный документ 21). Также описано, что комбинация эрлотиниба и RAD001 имеет комбинаторный эффект (непатентный документ 22).

Список цитирования

Патентная литература

[0015] Патентный документ 1: Международная публикация № WO 2017/146116

Патентный документ 2: Международная публикация № WO 2017/038838

Непатентная литература

[0016] Непатентный документ 1: Cancer Treatment Reviews Reviews, 40, pp. 770-780 (2014)

Непатентный документ 2: Current Oncology, 25, pp. S103-S114 (2018)

Непатентный документ 3: Breast Cancer Research, 18(1), 8, pp. 1-9 (2016)

Непатентный документ 4: Journal of Clinical Oncology, 28, pp. 3271-3277 (2010)

Непатентный документ 5: Journal of Medicinal Chemistry, 59, pp. 10030-10066 (2016)

Непатентный документ 6: Journal of Medicinal Chemistry, 26, pp. 2999-3005 (2008)

Непатентный документ 7: Journal of Clinical Oncology, 26, pp. 1993-1999 (2008)

Непатентный документ 8: Journal of Clinical Oncology, 28, pp. 1301-1307 (2010)

Непатентный документ 9: Journal of Clinical Oncology, 34, pp. 945-952 (2016)

Непатентный документ 10: Proc Natl Acad Sci USA., 106, pp. 474-479 (2009)

Непатентный документ 11: N. Engl. J. Med., vol. 344, pp. 783-792 (2001)

Непатентный документ 12: J. Natl. Cancer Inst., 96, pp. 739-749 (2004)

Непатентный документ 13: Biologics., vol. 2, pp. 61-65 (2008)

Непатентный документ 14: Oncol. Rep., vol. 27, pp. 1639-1645 (2012)

Непатентный документ 15: Mol. Cancer Ther., vol. 9, pp. 1198-1207 (2010)

Непатентный документ 16: Nat. Rev. Cancer., vol. 6, pp. 803-812 (2006)

Непатентный документ 17: Nature Medicine., vol. 19, pp. 1389-1400 (2013)

Непатентный документ 18: Nat. Rev. Cancer., vol. 7, pp. 169-181 (2007)

Непатентный документ 19: Signal Transduct Target Ther., vol. 4: 5, pp. 1-10 (2019)

Непатентный документ 20: Lancet Oncol. vol. 16, pp. 830-838 (2015)

Непатентный документ 21: Neoplasia. vol. 17, pp. 190-200 (2015)

Непатентный документ 22: Clin Cancer Res., vol. 13, pp. S4628-4631 (2007)

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[0017] Целью настоящего изобретения является предоставление способа лечения опухоли с использованием пиримидинового соединения или его соли и другого противоопухолевого средства.

[0018] В частности, один из аспектов настоящего изобретения относится с следующему [1]-[17]:

[1] Противоопухолевое средство для комбинированного введения с другим противоопухолевым средством, где противоопухолевое средство содержит пиримидиновое соединение, представленное следующей формулой (I), или его соль:

где R₁ представляет собой C1-C4-алкильную группу, необязательно имеющую C1-C4-алкоксигруппу в качестве заместителя или C3-C4-циклоалкильную группу;

R₂ представляет собой атом водорода, атом галогена, C1-C6-алкильную группу, необязательно имеющую от 1 до 5 C1-C4-алкоксигрупп или атомов фтора в качестве заместителей, или C1-C6-алкоксигруппу;

R₃ представляет собой атом водорода или C1-C4-алкильную группу, необязательно имеющую от 1 до 5 атомов фтора в качестве заместителей;

R₄ представляет собой атом водорода или C1-C4-алкильную группу; и

R₅ представляет собой фенильную группу, необязательно имеющую от 1 до 3 заместителей, выбранных из атомов фтора и атомы хлора.

[0019] [2] Противоопухолевое средство по п.[1], где пиримидиновое соединение является соединением, представленным следующей формулой (II):

где R₁ представляет собой C1-C4-алкильную группу, необязательно имеющую C1-C4-алкоксигруппу в качестве заместителя, или C3-C4-циклоалкильную группу;

R₂ представляет собой атом водорода, атом галогена, C1-C6-алкильную группу, необязательно имеющую от 1 до 5 C1-C4-алкоксигрупп или атомов фтора в качестве заместителей, или C1-C6-алкоксигруппу;

R₃ представляет собой атом водорода или C1-C4-алкильную группу, необязательно имеющую от 1 до 5 атомов фтора в качестве заместителей;

R₄ представляет собой атом водорода или C1-C4-алкильную группу; и

R₅ представляет собой фенильную группа, необязательно имеющую от 1 до 3 заместителей, выбранных из группы, состоящей из атомов фтора и атомов хлора.

[0020] [3] Противоопухолевое средство по п.[1] или [2], где пиримидиновое соединение представлено формулой (I) или (II), где

R₁ является метильной группой, этильной группой, изопропильной группой, трет-бутильной группой, 1-метил-1-метоксиэтильной группой или циклопропильной группой;

R₂ является метильной группой, этильной группой, метоксиметильной группой или этоксиметильной группой;

R₃ является метильной группой, этильной группой или трифторметильной группой;

R₄ является атомом водорода или метильной группой; и

R₅ является фенильной группой, 2-фторфенильной группой, 3-хлорфенильной группой, 2,3-дифторфенильной группой, 2,4-дифторфенильной группой или 3,5-дифторфенильной группой.

[0021] [4] Противоопухолевое средство по любому из пп.[1]-[3], где пиримидиновое соединение представлено формулой (I) или (II), где

R₁ является метильной группой, трет-бутильной группой или циклопропильной группой;

R₂ является метильной группой, этильной группой или метоксиметильной группой;

R₃ является метильной группой;

R₄ является атомом водорода; и

R₅ является фенильной группой.

[0022] [5] Противоопухолевое средство по любому из пп.[1]-[4], где пиримидиновое соединение является соединением, выбранным из следующего (1)-(3):

(1) 7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-N-((R)-1-фенилэтил)-6-(проп-1-ин-1-ил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамида,

(2) 7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-6-(циклопропилэтинил)-N-((R)-1-фенилэтил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамида и

(3) 7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-6-(3,3-диметилбут-1-ин-1-ил)-N-((R)-1-фенилэтил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамида.

[0023] [6] Противоопухолевое средство по любому из пп.[1]-[5], где другое противоопухолевое средство является по меньшей мере одним средством, выбранным из антиметаболитов, лекарственных средств для молекулярного таргетинга, лекарственные средства на основе платины и лекарственные средства на основе алкалоидов.

[0024] [7] Противоопухолевое средство по любому из пп.[1]-[6], где другое противоопухолевое средство является по меньшей мере одним средством, выбранным из 5-фторурацила (5-FU), трифлуридина, гемцитабина, капецитабина, трастузумаба, пертузумаба, трастузумаб эмтанзина, AZD8055, эверолимуса, дактолисиба, бупарлисиба, тазелисиба, палбоциклиба, фулвестранта, цисплатина и паклитаксела.

[0025] [8] Противоопухолевое средство по любому из пп.[1]-[7] для лечения опухоли.

[0026] [9] Противоопухолевое средство по любому из пп.[1]-[8], где пиримидиновое соединение или его соль вводят пациенту с опухолью, которому вводят другое противоопухолевое средство, или пациенту с опухолью, которому будут вводить другое противоопухолевое средство.

[0027] [10] Противоопухолевое средство по любому из пп.[1]-[9] для перорального введения.

[0028] [11] Фармацевтическая комбинация пиримидинового соединения или его соли и другого противоопухолевого средства, где

пиримидиновое соединение является соединением, представленным следующей формулой (I):

где R₁ представляет собой C1-C4-алкильную группу, необязательно имеющую C1-C4-алкоксигруппу в качестве заместителя, или C3-C4-циклоалкильную группу;

R₂ представляет собой атом водорода, атом галогена, C1-C6-алкильную группу, необязательно имеющую от 1 до 5 C1-C4-алкоксигрупп или атомов фтора в качестве заместителей, или C1-C6-алкоксигруппу;

R₃ представляет собой атом водорода или C1-C4-алкильную группу, необязательно имеющую от 1 до 5 атомов фтора в качестве заместителей;

R₄ представляет собой атом водорода или C1-C4-алкильную группу; и

R₅ представляет собой фенильную группу, необязательно имеющую от 1 до 3 заместителей, выбранных из атомов фтора и атомов хлора.

[0029] [12] Фармацевтическая комбинация по п.[11] для применения в лечении опухоли, где пиримидиновое соединение или его соль и другое противоопухолевое средство вводят одновременно, последовательно или с интервалом.

[12a] Фармацевтическая комбинация по п.[11] или [12], где пиримидиновое соединение является соединением по любому из пп.[2]-[5].

[12b] Фармацевтическая комбинация по п.[11] или [12], где другое противоопухолевое средство является соединением, описанным в п.[6] или [7].

[12c] Фармацевтическая комбинация по п.[11], [12], [12a] или [12b], где пиримидиновое соединение или его соль вводят перорально.

[0030] [13] Набор, содержащий противоопухолевое средство по любому из пп.[1]-[10] или фармацевтическую комбинацию по п.[11] или [12] и инструкции, в которых указано, что пиримидиновое соединение или его соль и другое противоопухолевое средство вводят комбинированно.

[0031] [14] Применение пиримидинового соединения или его соли для производства лекарственного средства, используемого в комбинации с другим противоопухолевым средством в лечении опухоли, где

пиримидиновое соединение является соединением, представленным следующей формулой (I):

где R₁ представляет собой C1-C4-алкильную группу, необязательно имеющую C1-C4-алкоксигруппу в качестве заместителя, или C3-C4-циклоалкильную группу;

R₂ представляет собой атом водорода, атом галогена, C1-C6-алкильную группу, необязательно имеющую от 1 до 5 C1-C4-алкоксигруппов или атомов фтора в качестве заместителей, или C1-C6-алкоксигруппу;

R₃ представляет собой атом водорода или C1-C4-алкильную группу, необязательно имеющую от 1 до 5 атомов фтора в качестве заместителей;

R₄ представляет собой атом водорода или C1-C4-алкильную группу; и

R₅ представляет собой фенильную группу, необязательно имеющую от 1 до 3 заместителей, выбранных из атомов фтора и атомов хлора.

[14a] Применение пиримидинового соединения или его соли по п.[14], где пиримидиновое соединение является соединением по любому из пп.[2]-[5].

[14b] Применение пиримидинового соединения или его соли по п.[14] или [14a], где другое противоопухолевое средство является соединением, описанным в п.[6] или [7].

[14c] Применение пиримидинового соединения или его соли по п.[14], [14a] или [14b], где пиримидиновое соединение или его соль вводят перорально.

[0032] [15] Средство, потенцирующее противоопухолевый эффект, для потенцирования противоопухолевого эффекта другого противоопухолевого средства, где средство, потенцирующее противоопухолевый эффект, содержит пиримидиновое соединение представленное следующей формулой (I), или его соль:

где R₁ представляет собой C1-C4-алкильную группу, необязательно имеющую C1-C4-алкоксигруппу в качестве заместителя, или C3-C4-циклоалкильную группу;

R₂ представляет собой атом водорода, атом галогена, C1-C6-алкильную группу, необязательно имеющую от 1 до 5 C1-C4-алкоксигрупп или атомов фтора в качестве заместителей, или C1-C6-алкоксигруппу;

R₃ представляет собой атом водорода или C1-C4-алкильную группу, необязательно имеющую от 1 до 5 атомов фтора в качестве заместителей;

R₄ представляет собой атом водорода или C1-C4-алкильную группу; и

R₅ представляет собой фенильную группу, необязательно имеющую от 1 до 3 заместителей, выбранных из атомов фтора и атомов хлора.

[0033] [16] Способ лечения опухоли, включающий введение эффективного количества противоопухолевого средства по любому из пп.[1]-[10] и другого противоопухолевого средства или фармацевтической комбинации по п.[11] или [12] нуждающемуся в этом пациенту.

[0034] [17] Способ лечения опухоли посредством комбинированного использования с другим противоопухолевым средством, включающий введение эффективного количества пиримидинового соединения или его соли нуждающемуся в этом пациенту, где

пиримидиновое соединение является соединением, представленным следующей формулой (I):

где R₁ представляет собой C1-C4-алкильную группу, необязательно имеющую C1-C4-алкоксигруппу в качестве заместителя, или C3-C4-циклоалкильную группу;

R₂ представляет собой атом водорода, атом галогена, C1-C6-алкильную группу, необязательно имеющую от 1 до 5 C1-C4-алкоксигрупп или атомов фтора в качестве заместителей, или C1-C6-алкоксигруппу;

R₃ представляет собой атом водорода или C1-C4-алкильную группу, необязательно имеющую от 1 до 5 атомов фтора в качестве заместителей;

R₄ представляет собой атом водорода или C1-C4-алкильную группу; и

R₅ представляет собой фенильную группу, необязательно имеющую от 1 до 3 заместителей, выбранных из атомов фтора и атомов хлора.

[18] Пиримидиновое соединение или его соль для применения в способе лечения опухоли посредством комбинированного использования с другим противоопухолевым средством, где пиримидиновое соединение является соединением, представленным следующей формулой (I):

где R₁ представляет собой C1-C4-алкильную группу, необязательно имеющую C1-C4-алкоксигруппу в качестве заместителя, или C3-C4-циклоалкильную группу;

R₂ представляет собой атом водорода, атом галогена, C1-C6-алкильную группу, необязательно имеющую от 1 до 5 C1-C4-алкоксигрупп или атомов фтора в качестве заместителей, или C1-C6-алкоксигруппу;

R₃ представляет собой атом водорода или C1-C4-алкильную группу, необязательно имеющую от 1 до 5 атомов фтора в качестве заместителей;

R₄ представляет собой атом водорода или C1-C4-алкильную группу; и

R₅ представляет собой фенильную группу, необязательно имеющую от 1 до 3 заместителей, выбранных из атомов фтора и атомов хлора.

[19] Применение пиримидинового соединения или его соли для лечения опухоли посредством комбинированного использования с другим противоопухолевым средством, где пиримидиновое соединение является соединением, представленным следующей формулой (I):

где R₁ представляет собой C1-C4-алкильную группу, необязательно имеющую C1-C4-алкоксигруппу в качестве заместителя, или C3-C4-циклоалкильную группу;

R₂ представляет собой атом водорода, атом галогена, C1-C6-алкильную группу, необязательно имеющую от 1 до 5 C1-C4-алкоксигрупп или атомов фтора в качестве заместителей, или C1-C6-алкоксигруппу;

R₃ представляет собой атом водорода или C1-C4-алкильную группу, необязательно имеющую от 1 до 5 атомов фтора в качестве заместителей;

R₄ представляет собой атом водорода или C1-C4-алкильную группу; и

R₅ представляет собой фенильную группу, необязательно имеющую от 1 до 3 заместителей, выбранных из атомов фтора и атомов хлора.

[20] Применение по п.[14] или [19], средство, потенцирующее противоопухолевый эффект, по п.[15], способ по п.[17] или пиримидиновое соединение или его соль по п.[18], где пиримидиновое соединение является соединением по любому из пп.[2]-[5].

[21] Применение по п.[14], [19] или [20], средство, потенцирующее противоопухолевый эффект, по п.[15] или [20], способ по п.[17] или [20], или пиримидиновое соединение или его соль по п.[18] или [20], где другое противоопухолевое средство является средством, описанным в п.[6] или [7].

[22] Применение по п.[14], [19], [20] или [21], средство, потенцирующее противоопухолевый эффект, по п.[15], [20] или [21], способ по п.[17], [20] или [21], или пиримидиновое соединение или его соль по п.[18], [20] или [21], где пиримидиновое соединение или его соль вводят перорально.

[0035] Настоящее изобретение также относится к следующим аспектам:

Фармацевтическая композиция для лечения опухоли, содержащая пиримидиновое соединение, представленное формулой (I) или (II), или его соль и другое противоопухолевое средство.

Пиримидиновое соединение, представленное формулой (I) или (II), или его соль для применения в лечении опухоли, включающем комбинированное использование с другим противоопухолевым средством.

Применение пиримидинового соединения, представленного формулой (I) или (II), или его соли для лечения опухоли, включающего комбинированное использование с другим противоопухолевым средством.

Другое противоопухолевое средство для применения в лечении опухоли, включающем комбинированное использование с пиримидиновым соединением, представленным формулой (I) или (II), или его солью.

Применение другого противоопухолевого средства для лечения опухоли, включающего комбинированное использование с пиримидиновым соединением, представленным формулой (I) или (II), или его солью.

Применение другого противоопухолевого средства для производства лекарственного средства, используемого в комбинации с пиримидиновым соединением или его солью в лечении опухоли.

Применение комбинации пиримидинового соединения или его соли и другого противоопухолевого средства для получения лекарственного средства в лечении опухоли.

Пиримидиновое соединение, представленное формулой (I) или (II), или его соль для потенцирования противоопухолевого эффекта другого противоопухолевого средства.

Применение пиримидинового соединения, представленного формулой (I) или (II), или его соли для потенцирования противоопухолевого эффекта другого противоопухолевого средства.

Другое противоопухолевое средство для потенцирования противоопухолевого эффекта пиримидинового соединения, представленное формулой (I) или (II), или его соли.

Применение другого противоопухолевого средства для потенцирования противоопухолевого эффекта пиримидинового соединения, представленного формулой (I) или (II), или его соли.

Применение пиримидинового соединения, представленного формулой (I) или (II), или его соли для получения средства, потенцирующего противоопухолевый эффект другого противоопухолевого средства.

Применение другого противоопухолевого средства для получения средства, потенцирующего противоопухолевый эффект пиримидинового соединения, представленного формулой (I) или (II), или его соли.

Способ лечения опухоли, включающий стадию введения пациенту терапевтически эффективного количества пиримидинового соединения, представленного формулой (I) или (II), или его соли и другого противоопухолевого средства в комбинации.

Способ лечения опухоли, включающий стадию введения терапевтически эффективного количества пиримидинового соединения, представленного формулой (I) или (II), или его соли пациенту с опухолью, которому вводят другое противоопухолевое средство.

Способ лечения опухоли, включающий стадию введения терапевтически эффективного количества пиримидинового соединения, представленного формулой (I) или (II), или его соли пациенту с опухолью, которому будут вводить (запланировано вводить) другое противоопухолевое средство.

Способ лечения опухоли или способ потенцирования противоопухолевого эффекта, включающий стадию введения терапевтически эффективного количества другого противоопухолевого средства пациенту с опухолью, которому вводят пиримидиновое соединение, представленное формулой (I) или (II), или его соль.

Способ лечения опухоли или способ потенцирования противоопухолевого эффекта, включающий стадию введения терапевтически эффективного количества другого противоопухолевого средства пациенту с опухолью, которому будут вводить (запланировано вводить) пиримидиновое соединение, представленное формулой (I) или (II), или его соль.

Способ потенцирования противоопухолевого эффекта, включающий стадию введения терапевтически эффективного количества пиримидинового соединения, представленного формулой (I) или (II), или его соли пациенту с опухолью, которому вводят другое противоопухолевое средство.

Продукт, содержащий пиримидиновое соединение, представленное формулой (I) или (II), или его соль и другое противоопухолевое средство в качестве комбинированного продукта для одновременного, последовательного или поэтапного использования в лечении опухоли.

Комбинация пиримидинового соединения, представленного формулой (I) или (II), или его соли и другого противоопухолевого средства для одновременного, последовательного или поэтапного использования в лечении опухоли.

[0036] В одном из вариантов осуществления упомянутых выше аспектов опухоль является злокачественной опухолью, имеющей гиперэкспрессию HER2, амплификацию гена HER2 или мутацию HER2, и другое противоопухолевое средство является по меньшей мере одним средством, выбранным из антиметаболитов, ингибиторов Her2, ингибиторов PI3K/AKT/mTOR, ингибиторов CDK4/6, антагонистов эстрогеновых рецепторов, лекарственных средств на основе платины и лекарственных средств на основе растительных алкалоидов.

В одном из вариантов осуществления упомянутых выше аспектов опухоль является злокачественной опухолью, имеющей гиперэкспрессию HER2, амплификацию гена HER2 или мутацию HER2, и другое противоопухолевое средство является по меньшей мере одним средством, выбранным из антиметаболитов, ингибиторов PI3K/AKT/mTOR, ингибиторов CDK4/6, антагонистов эстрогеновых рецепторов, лекарственных средств на основе платины и лекарственных средств на основе растительных алкалоидов.

[0037] В одном из вариантов осуществления упомянутых выше аспектов опухоль является HER2-положительной опухолью, и другое противоопухолевое средство является по меньшей мере одним средством, выбранным из антиметаболитов, ингибиторов Her2, ингибиторов PI3K/AKT/mTOR, ингибиторов CDK4/6, антагонистов эстрогеновых рецепторов, лекарственных средств на основе платины и лекарственных средств на основе растительных алкалоидов.

В одном из вариантов осуществления упомянутых выше аспектов опухоль является EGFR-положительной опухолью, и другое противоопухолевое средство является по меньшей мере одним средством, выбранным из антиметаболитов, ингибиторов PI3K/AKT/mTOR, ингибиторов CDK4/6, антагонистов эстрогеновых рецепторов, лекарственных средств на основе платины и лекарственных средств на основе растительных алкалоидов.

[0038] Настоящее изобретение относится к новому способу лечения опухоли с использованием пиримидинового соединения или его соли и другого противоопухолевого средства.

С помощью противоопухолевого средства по настоящему изобретению можно осуществлять лечение опухоли, вызывая высокий противоопухолевый эффект (в частности, циторедуктивный эффект и эффект задержки роста опухоли (эффект продления жизни)), с одновременной профилактикой развития побочных эффектов.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ

[0039] [Фигура 1] На фигуре 1 показаны противоопухолевые эффекты соединения из примера 2 в отношении моделей, включающих прямую трансплантацию в головной мозг линии клеток, экспрессирующей HER2 с встроенным геном люциферазы (NCI-N87-luc).

[Фигура 2] На фигуре 2 показаны противоопухолевые эффекты соединения из примера 11 в отношении моделей, включающих прямую трансплантацию в головной мозг линии клеток, экспрессирующей HER2 с встроенным геном люциферазы (NCI-N87-luc).

[Фигура 3] На фигуре 3 показаны противоопухолевые эффекты соединения из примера 12 в отношении моделей, включающих прямую трансплантацию в головной мозг линии клеток, экспрессирующей HER2 с встроенным геном люциферазы (NCI-N87-luc).

[Фигура 4] На фигуре 4 показан процент снижения массы тела в моделях, включающих прямую трансплантацию в головной мозг линии клеток, экспрессирующей HER2 с встроенным геном люциферазы (NCI-N87-luc), вызванного соединением из примера 2.

[Фигура 5] На фигуре 5 показан процент снижения массы тела в моделях, включающих прямую трансплантацию в головной мозг линии клеток, экспрессирующей HER2 с встроенным геном люциферазы (NCI-N87-luc), вызванного соединением из примера 11.

[Фигура 6] На фигуре 6 показан процент снижения массы тела в моделях, включающих прямую трансплантацию в головной мозг линии клеток, экспрессирующей HER2 с встроенным геном люциферазы (NCI-N87-luc), вызванного соединением из примера 12.

[Фигура 7] На фигуре 7 показаны противоопухолевые эффекты соединений из примера 2, 11 и 12 в отношении моделей, включающих подкожную трансплантацию линии клеток H1975-EGFRinsSVD.

[Фигура 8] На фигуре 8 показан процент изменения массы тела мышей при введении соединений из примеров 2, 11 и 12 в моделях, включающих подкожную трансплантацию линии клеток H1975-EGFRinsSVD.

[Фигура 9] На фигуре 9 показаны противоопухолевые эффекты соединения из примера 11 в отношении моделей, включающих прямую трансплантацию в головной мозг линии клеток, экспрессирующей мутантный EGFR с инсерцией в экзоне 20 с встроенным геном люциферазы (H1975-EGFRinsSVD-Luc).

[Фигура 10] На фигуре 10 показан коэффициент выживаемости мышей при введении соединения из примера 11 в моделях, включающих прямую трансплантацию в головной мозг линии клеток, экспрессирующей мутантный EGFR с инсерцией в экзоне 20 с встроенным геном люциферазы (H1975-EGFRinsSVD-Luc).

[Фигура 11] На фигуре 11 показан терапевтический эффект комбинации соединения из примера 11 и трастузумаба в отношении опухолевых клеток, полученных из рака желудка человека.

[Фигура 12] На фигуре 12 показан терапевтический эффект комбинации соединения из примера 11, трастузумаба (T-mab) и пертузумаба (P-mab) в отношении опухолевых клеток, полученных из рака желудка человека.

[Фигура 13] На фигуре 13 показан терапевтический эффект комбинации соединения из примера 11 и трастузумаба эмтанзина в отношении опухолевых клеток, полученных из рака желудка человека.

[Фигура 14] На фигуре 14 показан терапевтический эффект комбинации соединения из примера 11 и капецитабина в отношении опухолевых клеток, полученных из рака желудка человека.

[Фигура 15] на фигуре 15 показан терапевтический эффект комбинации соединения из примера 11 и капецитабина в отношении опухолевых клеток, полученных из рака желудка человека.

ОПИСАНИЕ ВАРИАНТОВ ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[0040] Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к комбинации пиримидинового соединения, представленного формулой (I), имеющего пиримидин в качестве основного каркаса, или его соли и другого соединения, имеющего противоопухолевый эффект (другого противоопухолевого средства). Комбинированное использование пиримидинового соединения или его соли и другого противоопухолевого средства может потенцировать противоопухолевый эффект по сравнению с использованием каждого из них в отдельности и может предотвращать повышение токсичности и развитие побочных эффектов. Таким образом, с помощью комбинация можно осуществлять лечение опухоли, вызывающее исключительный противоопухолевый эффект при профилактике развития побочных эффектов.

В настоящем изобретении соединение, вызывающее исключительный синергический эффект при использовании в комбинации с другим противоопухолевым средством, является пиримидиновым соединением, представленным следующей формулой (I), или его солью:

,

[0041] где R₁-R₅ являются такими, как определено выше.

[0042] В одном из предпочтительных вариантов осуществления настоящего изобретения соединение, вызывающее исключительный синергический эффект при использовании в комбинации с другим противоопухолевым средством, является соединением, представленным следующей формулой (II), или его солью:

[0043], где R₁-R₅ являются такими, как определено выше.

[0044] Соединение, представленное приведенной выше формулой (I) или формулой (II), по настоящему изобретению является соединением, имеющим пирроло[2,3-d]пиримидин в качестве основной структуры, и оно является новым соединением, неописанным в указанных выше публикациях предшествующего уровня техники, и т.д. Далее в настоящем описании упомянутое выше соединение, представленное приведенной выше формулой (I) или формулой (II), также обозначают как "пиримидиновое соединение по изобретению или его соль".

[0045] В настоящем описании конкретные примеры "атома галогена" могут включать атом хлора, атом брома, атом фтора и атом йода. Среди них, атом хлора и атом фтора являются предпочтительными, и атом фтора является более предпочтительным.

[0046] В настоящем описании термин "алкильная группа" означает линейную или разветвленную насыщенную углеводородную группу. Конкретные примеры алкильной группы могут включать метильную группу, этильную группу, n-пропильную группу, изопропильную группу, n-бутильную группу, изобутильную группу, втор-бутильную группу, трет-бутильную группу, пентильную группа и гексильную группу. Среди них, линейная или разветвленная алкильная группа, содержащая от 1 до 4 атомов углерода, является предпочтительной, и метильная группа и трет-бутильная группа являются более предпочтительными.

[0047] В настоящем описании термин "галогеналкильная группа" означает линейную или разветвленную насыщенную углеводородную группу, в которой от одного до всех атомов водорода заменены описанными выше атомами галогена. Конкретные примеры галогеналкильной группы могут включать монофторметильную группу, дифторметильную группу, трифторметильную группу, 1-фторэтильную группу, 2-фторэтильную группу, 1,1-дифторэтильную группу, 1,2-дифторэтильную группу, 2,2-дифторэтильную группу, 2,2,2-трифторэтильную группу, монохлорметильную группу, дихлорметильную группу, трихлорметильную группу, 1-хлорэтильную группу, 2-хлорэтильную группу и 1,1-дихлорэтильную группу. Среди них, линейная или разветвленная насыщенная углеводородная группа, содержащая от 1 до 6 атомов углерода, среди которых от 1 до 3 атомов водорода заменены описанными выше атомами галогена, является предпочтительным, и монофторметильная группа является более предпочтительной.

[0048] В настоящем описании термин "циклоалкильная группа" означает моноциклическую или полициклическую насыщенную углеводородную группу, содержащую от 3 до 7 атомов углерода. Конкретные примеры циклоалкильной группы могут включать циклопропильную группу, циклобутильную группу, циклопентильную группу, циклогексильную группу и циклогептильную группу. Среди них, циклопропильная группа и циклобутильная группа являются предпочтительными.

[0049] В настоящем описании термин "ароматическая углеводородная группа" означает циклический заместитель, состоящий из углерода и водорода, имеющий ненасыщенную связь, в которой 4e+2 электронов (где e представляет собой целое число 1 или более) содержатся в циклической π-электронной системе.

[0050] В настоящем описании термин "C6-C14-ароматическая углеводородная группа" означает моноциклическую или полициклическую ароматическую углеводородную группу, содержащую от 6 до 14 атомов углерода. Конкретные примеры C6-C14-ароматической углеводородной группы могут включать фенильную группу, нафтильную группу, тетрагидронафтильную группу и антраценильную группу. Среди них, фенильная группа является предпочтительной.

[0051] В настоящем описании термин "аралкильная группа" означает описанную выше алкильную группу, замещенную описанной выше ароматической углеводородной группой. Конкретные примеры аралкильной группы могут включать C7-C16-аралкильные группы, такие как бензильная группа, фенилэтильная группа, фенилпропильная группа, нафтилметильная группа и нафтилэтильная группа. Среди них, бензильная группа является предпочтительной.

[0052] В настоящем описании термин "ненасыщенная углеводородная группа" означает линейную или разветвленную углеводородную группу, содержащую от 2 до 6 атомов углерода, содержащую по меньшей мере одну углерод-углеродную двойную связь или тройную связь. Конкретные примеры ненасыщенной углеводородной группы могут включать винильную группу, аллильную группу, метилвинильную группу, пропенильную группу, бутенильную группу, пентенильную группу, гексенильную группу, этинильную группу и 2-пропинильную группу. Среди них, винильная группа, аллильная группа и 1-пропенильная группа являются предпочтительными.

[0053] В настоящем описании термин "алкенильная группа" означает линейную или разветвленную углеводородную группу, содержащую от 2 до 6 атомов углерода, содержащую по меньшей мере одну углерод-углеродную двойную связь. Конкретные примеры алкенильной группы могут включать C2-C6-алкенильные группы, такие как винильная группа, аллильная группа, 2-метил-2-пропенильная группа, изопропенильная группа, 1-, 2- или 3-бутенильная группа, 2-, 3- или 4-пентенильная группа, 2-метил-2-бутенильная группа, 3-метил-2-бутенильная группа и 5-гексенильная группа. Среди них, винильная группа, аллильная группа, 1-пропенильная группа и 2-метил-2-пропенильная группа являются предпочтительными.

[0054] В настоящем описании термин "алкинильная группа" означает линейную или разветвленную ненасыщенную углеводородную группу, имеющую по меньшей мере одну тройную связь (например, 1 или 2, и предпочтительно - 1 тройную связь). Конкретные примеры алкинильной группы могут включать C2-C6-алкинильные группы такие как этинильная группа, 1- или 2-пропинильная группа, 1-, 2- или 3-бутинильная группа и 1-метил-2-пропинильная группа. Среди них, этинильная группа и 2-пропинильная группа являются предпочтительными.

[0055] В настоящем описании термин "C3-C10-циклическая ненасыщенная углеводородная группа" означает моноциклическую или полициклическую углеводородную группу, содержащую от 3 до 10 атомов углерода, содержащую по меньшей мере одну углерод-углеродную двойную связь. Конкретные примеры C3-C10-циклической ненасыщенной углеводородной группы могут включать циклопропенильную группу, циклобутенильную группу, циклопентенильную группу, циклогексенильную группу циклогептенильную группу, циклооктенильную группу и циклононильную группу. Среди них, моноциклическая или полициклическая углеводородная группа, содержащая от 3 до 7 атомов углерода, содержащая по меньшей мере одну углерод-углеродную двойную связь, является предпочтительной, и циклопропенильная группа является более предпочтительной.

[0056] В настоящем описании термин "алкоксигруппа" означает оксигруппу, имеющую описанную выше алкильную группу. Конкретные примеры алкоксигруппы могут включать C1-C6-алкоксигруппы, такие как метоксигруппа, этоксигруппа, n-пропоксигруппа, изопропоксигруппа, n-бутоксигруппа, изобутоксигруппа, втор-бутоксигруппа, трет-бутоксигруппа, пентилоксигруппа, изопентилоксигруппа и гексилоксигруппа. Среди них, метоксигруппа и этоксигруппа являются предпочтительными, и метоксигруппа является более предпочтительной.

[0057] В настоящем описании "галогеналкоксигруппа" могут включать описанную выше алкоксигруппу, имеющую по меньшей мере один атом галогена (предпочтительно - от 1 до 13, и более предпочтительно - от 1 до 3 атомов галогена). Конкретные примеры галогеналкоксигруппы могут включать C1-C6-галогеналкоксигруппы, такие как фторметоксигруппа, дифторметоксигруппа, трифторметоксигруппа, трихлорметоксигруппа, фторэтоксигруппа, 1,1,1-трифторэтоксигруппа, монофтор-n-пропоксигруппа, перфтор-n-пропоксигруппа и перфтор-изопропоксигруппа.

[0058] В настоящем описании термин "циклоалкоксигруппа" означает оксигруппу, имеющую описанную выше циклоалкильную группу. Конкретные примеры циклоалкоксигруппы могут включать C3-C7-циклоалкоксигруппы, такие как циклопропоксигруппа, циклобутоксигруппа, циклопентилоксигруппа, циклогексилоксигруппа и циклогептилоксигруппа. Среди них, циклобутоксигруппа, циклопентилоксигруппа и циклогексилоксигруппа являются предпочтительными.

[0059] В настоящем описании термин "аралкилоксигруппа" означает оксигруппу, имеющую описанную выше аралкильную группу. Конкретные примеры аралкилоксигруппы могут включать C7-C20-аралкилоксигруппы, такие как бензилоксигруппа, фенэтилоксигруппа, нафтилметилоксигруппа и фторенилметилоксигруппа. Среди них, бензилоксигруппа является предпочтительной.

[0060] В настоящем описании термин "алкилтиогруппа" означает тиоксигруппу, имеющую описанную выше алкильную группу. Конкретные примеры алкилтиогруппы могут включать C1-C6-алкилтиогруппы, такие как метилтиогруппа, этилтиогруппа, n-пропилтиогруппа, изопропилтиогруппа, n-бутилтиогруппа, изобутилтиогруппа, трет-бутилтиогруппа, n-пентилтиогруппа, изопентилтиогруппа и гексилтиогруппа. Среди них, метилтиогруппа, этилтиогруппа и n-пропилтиогруппа являются предпочтительными.

[0061] В настоящем описании термин "алкоксиалкильная группа" означает описанную выше алкильную группу, имеющую по меньшей мере одну из описанных выше алкоксигрупп. Конкретные примеры алкоксиалкильной группы могут включать C1-C6-алкокси-C1-C6-алкильные группы, такие как метоксиметильная группа, этоксиэтильная группа, метоксиэтильная группа и метоксипропильная группа.

[0062] В настоящем описании термин "алкиламиногруппа" означает аминогруппу, в которой 1 или 2 атома водорода заменены линейными или разветвленными углеводородными группами, содержащими от 1 до 6 атомов углерода. Конкретные примеры алкиламиногруппы могут включать метиламиногруппу, этиламиногруппу, диметиламиногруппу, диэтиламиногруппу и этилметиламиногруппу. Среди них, предпочтительной является аминогруппа, в которой 1 или 2 атома водорода заменены линейной или разветвленной углеводородной группой, содержащей от 1 до 3 атомов углерода.

[0063] В настоящем описании термин "моноалкиламиногруппа" означает аминогруппу, в которой один атом водорода заменен линейной или разветвленной углеводородной группой. Конкретные примеры моноалкиламиногруппы могут включать метиламиногруппу, этиламиногруппу, n-пропиламиногруппу, изопропиламиногруппу, n-бутиламиногруппу, изобутиламиногруппу, втор-бутиламиногруппу, трет-бутиламиногруппу, пентиламиногруппу и гексиламиногруппу. Среди них, предпочтительной является аминогруппа, в которой один атом водорода заменен линейной или разветвленной углеводородной группой, содержащей от 1 до 3 атомов углерода.

[0064] В настоящем описании термин "диалкиламиногруппа" означает аминогруппу, в которой два атома водорода заменены линейными или разветвленными углеводородными группами, содержащими от 1 до 6 атомов углерода. Конкретные примеры диалкиламиногруппы могут включать диметиламиногруппу, диэтиламиногруппу и этилметиламиногруппу. Среди них, аминогруппа, в которой два атома водорода заменены линейными или разветвленными углеводородными группами, содержащими от 1 до 3 атомов углерода, является предпочтительной, и диметиламиногруппа является более предпочтительной.

[0065] В настоящем описании термин "ацильная группа" означает формильную группу, в которой атом водорода заменен линейной или разветвленной углеводородной группой. Конкретные примеры ацильной группы могут включать ацетильную группу, n-пропаноильную группу, изопропаноильную группу, n-бутилоильную группу и трет-бутилоильную группу. Среди них, формильная группа, в которой атом водорода заменен линейной или разветвленной углеводородной группой, содержащей от 1 до 3 атомов углерода, является предпочтительной, и ацетильная группа является более предпочтительной.

[0066] В настоящем описании термин "ацилоксигруппа" означает оксигруппу, имеющую описанную выше ацильную группу. Конкретные примеры ацилоксигруппы могут включать алкилкарбонилоксигруппу и арилкарбонилоксигруппу. Среди них, оксигруппа, в которой атом водорода формильной группы заменен линейной или разветвленной углеводородной группой, содержащей от 1 до 3 атомов углерода, является предпочтительной, и алкилкарбонилоксигруппа является более предпочтительной.

[0067] В настоящем описании термин "алкоксикарбонильная группа" означает карбонильную группу, имеющую описанную выше алкоксигруппу. Конкретные примеры алкоксикарбонильной группы могут включать (C1-C6-алкокси)карбонильные группы, такие как метоксикарбонильная группа, этоксикарбонильная группа, пропоксикарбонильная группа, изопропоксикарбонильная группа, бутоксикарбонильная группа, изобутоксикарбонильная группа, трет-бутоксикарбонильная группа, пентилоксикарбонильная группа, изопентилоксикарбонильная группа и гексилоксикарбонильная группа. Среди них, трет-бутоксикарбонильная группа является предпочтительной.

[0068] В настоящем описании термин "аралкилоксикарбонильная группа" означает карбонильную группу, имеющую описанную выше аралкилоксигруппу. Конкретные примеры аралкилоксикарбонильной группы могут включать (C6-C20-аралкил)оксикарбонильные группы, такие как бензилоксикарбонильная группа, фенэтилоксикарбонильная группа, нафтилметилоксикарбонильная группа и фторенилметилоксикарбонильная группа. Среди них, бензилоксикарбонильная группа является предпочтительной.

[0069] В настоящем описании термин "насыщенная гетероциклическая группа" означает моноциклическую или полициклическую насыщенную гетероциклическую группу, имеющую по меньшей мере один гетероатом (предпочтительно - от 1 до 5, и более предпочтительно - от 1 до 3 гетероатомов), выбранный из атомов азота, атомов кислорода и атомов серы. Конкретные примеры насыщенной гетероциклической группы могут включать азиридинильную группу, азетидинильную группу, имидазолидинильную группу, морфолиногруппу, пирролидинильную группу, пиперидинильную группу, пиперазинильную группу, тетрагидрофуранильную группу, тетрагидропиранильную группу, тетрагидротиофенильную группу, тиазолидинильную группу и оксазолидинильную группу. Среди них, азетидинильная группа, пирролидинильная группа и пиперидинильная группа являются предпочтительными, и азетидинильная группа и пирролидинильная группа являются более предпочтительными.

[0070] В настоящем описании термин "ненасыщенная гетероциклическая группа" означает моноциклическую или полициклическую полностью ненасыщенную или частично ненасыщенную гетероциклическую группу, имеющую по меньшей мере один гетероатом (предпочтительно - от 1 до 5, и более предпочтительно - от 1 до 3 гетероатомов), выбранный из атомов азота, атомов кислорода и атомов серы. Конкретные примеры ненасыщенной гетероциклической группы могут включать имидазолильную группу, тиенильную группу, пирролильную группу, оксазолильную группу, изоксазолильную группу, тиазолильную группу, изотиазолильную группу, тиадиазолильную группу, оксадиазолилгруппу, пиразолильную группу, триазолильную группу, тетразолильную группу, пиридильную группу, пиразильную группу, пиримидинильную группу, пиридазинильную группу, индолильную группу, изоиндолильную группу, индазолильную группу, триазолопиридильную группу, бензимидазолильную группу, бензоксазолильную группу, бензотиазолильную группу, бензотиенильную группу, фуранильную группу, бензофуранильную группу, пуринильную группу, хинолильную группу, изохинолильную группу, хиназолинильную группу, хиноксалильной группу, метилендиоксифенильную группу, этилендиоксифенильную группу и дигидробензофуранильную группу. Среди них, имидазолильная группа, пиразолильная группа, тиазолильная группа, изоксазолильная группа и фуранильная группа являются предпочтительными; имидазолильная группа, пиразолильная группа и тиазолильная группа являются более предпочтительными; и имидазолильная группа является наиболее предпочтительной.

[0071] В настоящем описании термин "насыщенная гетероциклическая оксигруппа" означает оксигруппу, имеющую описанную выше насыщенную гетероциклическую группу. Конкретные примеры насыщенной гетероциклической оксигруппы могут включать морфолинилоксигруппу, 1-пирролидинилоксигруппу, пиперидиноксигруппу, пиперазинилоксигруппу, 4-метил-1-пиперазинилоксигруппу, тетрагидрофуранилоксигруппу, тетрагидропиранилоксигруппу, тетрагидротиофенилоксигруппу, тиазолидинилоксигруппу и оксазолидинилоксигруппу. Среди них, 1-пирролидинилоксигруппа, пиперидиноксигруппа и пиперазинилоксигруппа являются предпочтительными.

[0072] В соединении, представленном формулой (I) или формулой (II) по настоящему изобретению, R₁ представляет собой C1-C4-алкильную группу, необязательно имеющую C1-C4-алкоксигруппу в качестве заместителя, или C3-C4-циклоалкильную группу.

[0073] "C1-C4-алкоксигруппа" в выражении "C1-C4-алкильная группа, необязательно имеющая C1-C4-алкоксигруппу в качестве заместителя", представленная R₁, предпочтительно, представляет собой метоксигруппу или этоксигруппу, и наиболее предпочтительно - метоксигруппу. В настоящем описании количество заместителей предпочтительно составляет 1 до 3, и наиболее предпочтительно - 1. Если C1-C4-алкильная группа имеет два или более заместителей, заместители могут являться идентичными или отличаться друг от друга.

[0074] "C1-C4-алкильная группа" в выражении "C1-C4-алкильная группа, необязательно имеющая C1-C4-алкоксигруппу в качестве заместителя", представленная R₁, предпочтительно, представляет собой метильную группу, этильную группу, n-пропильную группу, изопропильную группу или трет-бутильную группу, более предпочтительно - метильную группу, этильную группу, изопропильную группу или трет-бутильную группу, и наиболее предпочтительно - метильную группу или трет-бутильную группу.

[0075] "C1-C4-алкильная группа, необязательно имеющая C1-C4-алкоксигруппу в качестве заместителя", представленная R₁, предпочтительно, представляет собой C1-C4-алкильную группу, имеющую от 1 до 3 метоксигрупп в качестве заместителей, более предпочтительно - метильную группу, этильную группу, изопропильную группу, трет-бутильную группу или 1-метил-1-метоксиэтильную группу, и наиболее предпочтительно - метильную группу или трет-бутильную группу.

[0076] "C3-C4-циклоалкильная группа", представленная R₁, предпочтительно, представляет собой циклопропильную группу или циклобутильную группу, и наиболее предпочтительно - циклопропильную группу.

[0077] R₁, предпочтительно, представляет собой C1-C4-алкильную группу, необязательно имеющую от 1 до 3 C1-C4-алкоксигрупп в качестве заместителей, или C3-C4-циклоалкильную группу.

[0078] R₁, более предпочтительно, представляет собой C1-C4-алкильную группу, необязательно имеющую от 1 до 3 метоксигрупп в качестве заместителей, или C3-C4-циклоалкильную группу.

[0079] R₁, более предпочтительно, представляет собой метильную группу, этильную группу, изопропильную группу, трет-бутильную группу, 1-метил-1-метоксиэтильную группу или циклопропильную группу.

[0080] R_1, наиболее предпочтительно, представляет собой метильную группу, трет-бутильную группу или циклопропильную группу.

[0081] В соединении, представленном формулой (I) или формулой (II), по настоящему изобретению R₂ является атомом водорода, атомом галогена, C1-C6-алкильной группой, необязательно имеющей от 1 до 5 C1-C4-алкоксигрупп или атомов фтора в качестве заместителей, или C1-C6-алкоксигруппой.

[0082] "Атом галогена", представленный R₂, предпочтительно, представляет собой атом фтора или атом хлора.

[0083] "C1-C4-алкоксигруппа" в выражении "C1-C6-алкильная группа, необязательно имеющая от 1 до 5 C1-C4-алкоксигрупп или атомов фтора в качестве заместителей", представленная R₂, предпочтительно, представляет собой метоксигруппу или этоксигруппу, и наиболее предпочтительно - метоксигруппу.

[0084] "C1-C6-алкильная группа, необязательно имеющая от 1 до 5 C1-C4-алкоксигрупп или атомов фтора в качестве заместителей", представленная R₂, предпочтительно, представляет собой метильную группу, этильную группу, n-пропильную группу, изопропильную группу или трет-бутильную группу, и наиболее предпочтительно - метильную группу.

[0085] "C1-C6-алкильная группа" в выражении "C1-C6-алкильная группа, необязательно имеющая от 1 до 5 C1-C4-алкоксигрупп или атомов фтора в качестве заместителей", представленная R₂, предпочтительно, представляет собой C1-C6-алкильную группу, необязательно имеющую от 1 до 5 метоксигрупп, этоксигрупп или атомов фтора в качестве заместителей (в частности, метильную группу, метоксиметильную группу, этоксиметильную группу, метоксиэтильную группу, этоксиэтильную группу, фторметильную группу, дифторметильную группу, трифторметильную группу и т.д.), более предпочтительно - C1-C6-алкильную группу, более предпочтительно - метильную группу, этильную группу, n-пропильную группу, изопропильную группу или трет-бутильную группу, и наиболее предпочтительно - метильную группу.

[0086] "C1-C6-алкоксигруппа", представленная R₂, предпочтительно, представляет собой метоксигруппу или этоксигруппу, и наиболее предпочтительно - метоксигруппу.

[0087] R₂, предпочтительно, представляет собой C1-C6-алкильную группу, необязательно имеющую от 1 до 5 C1-C4-алкоксигрупп или атомов фтора в качестве заместителей. В одном из вариантов осуществления R₂ представляет собой C1-C6-алкильную группу, необязательно имеющую от 1 до 5 метоксигрупп, этоксигрупп или атомов фтора в качестве заместителей. В другом варианте осуществления R₂ является метильной группой, этильной группой, n-пропильной группой, изопропильной группой или трет-бутильной группой (предпочтительно - метильной группой или этильной группой, и более предпочтительно - метильной группой), каждая из которых необязательно имеет от 1 до 5 метоксигрупп, этоксигрупп или атомов фтора в качестве заместителей.

[0088] R₂, более предпочтительно, представляет собой C1-C6-алкильную группу, необязательно имеющую от 1 до 5 C1-C4-алкоксигрупп в качестве заместителей. В одном из вариантов осуществления R₂ представляет собой C1-C6-алкильную группу, необязательно имеющую от 1 до 5 метоксигрупп или этоксигрупп в качестве заместителей. В другом варианте осуществления R₂ является метильной группой, этильной группой, n-пропильной группой, изопропильной группой или трет-бутильной группой (предпочтительно - метильной группой или этильной группой, и более предпочтительно - метильной группой), каждая из которых необязательно имеет от 1 до 5 метоксигрупп или этоксигрупп в качестве заместителей. В дополнительном варианте осуществления R₂ является метильной группой, этильной группой, метоксиметильной группой или этоксиметильной группой.

[0089] R₂, даже более предпочтительно, представляет собой C1-C6-алкильную группу.

[0090] R₂, более предпочтительно, представляет собой метильную группу, этильную группу, n-пропильную группу, изопропильную группу или трет-бутильную группу.

R₂, особенно предпочтительно, представляет собой метильную группу или этильную группу.

R₂, наиболее предпочтительно, представляет собой метильную группу.

[0091] В соединении, представленном формулой (I) или формулой (II), по настоящему изобретению R₃ является атомом водорода или C1-C4-алкильной группой, необязательно имеющей от 1 до 5 атомов фтора в качестве заместителей.

[0092] "C1-C4-алкильная группа" в выражении "C1-C4-алкильная группа, необязательно имеющая от 1 до 5 атомов фтора в качестве заместителей", представленная R₃, предпочтительно, представляет собой метильную группу, этильную группу, n-пропильную группу, изопропильную группу или трет-бутильную группу, более предпочтительно - метильную группу или этильную группу, и наиболее предпочтительно - метильную группу.

[0093] "C1-C4-алкильная группа, необязательно имеющая от 1 до 5 атомов фтора в качестве заместителей", представленная R₃, предпочтительно, представляет собой метильную группу, фторметильную группу, дифторметильную группу, трифторметильную группу или этильную группу, более предпочтительно - метильную группу, трифторметильную группу или этильную группу, и наиболее предпочтительно - метильную группу.

[0094] R₃, предпочтительно, представляет собой C1-C4-алкильную группу, необязательно имеющую от 1 до 5 атомов фтора в качестве заместителей.

[0095] R₃, более предпочтительно, представляет собой метильную группу, фторметильную группу, дифторметильную группу, трифторметильную группу, этильную группу, фторэтильную группу, дифторэтильную группу, трифторэтильную группу, n-пропильную группу, изопропильную группу или трет-бутильную группу.

[0096] R₃, даже более предпочтительно, представляет собой метильную группу, фторметильную группу, дифторметильную группу, трифторметильную группу или этильную группу.

[0097] R₃, более предпочтительно, представляет собой метильную группу, трифторметильную группу или этильную группу.

R₃, особенно предпочтительно, представляет собой метильную группу или этильную группу.

R₃, наиболее предпочтительно, представляет собой метильную группу.

[0098] В соединении, представленном формулой (I) или формулой (II), по настоящему изобретению R₄ является атомом водорода или C1-C4-алкильной группой.

[0099] "C1-C4-алкильная группа", представленная R₄, предпочтительно, представляет собой метильную группу, этильную группу, n-пропильную группу, изопропильную группу или трет-бутильную группу, более предпочтительно - метильную группу или этильную группу, и наиболее предпочтительно - метильную группу.

[0100] R₄, предпочтительно, представляет собой атом водорода, метильную группу, этильную группу, n-пропильную группу, изопропильную группу или трет-бутильную группу.

[0101] R₄, более предпочтительно, представляет собой атом водорода, метильную группу или этильную группу.

[0102] R₄, более предпочтительно, представляет собой атом водорода или метильную группу.

R₄, наиболее предпочтительно, представляет собой атом водорода.

[0103] В соединении, представленном формулой (I) или формулой (II), по настоящему изобретению R₅ является фенильной группой, необязательно имеющей от 1 до 3 заместителей, выбранных из группы, состоящей из атомов фтора и атомов хлора.

[0104] R₅, предпочтительно, представляет собой фенильную группу, необязательно имеющую 1 или 2 заместителя, выбранных из группы, состоящей из атомов фтора и атомов хлора.

[0105] R₅, более предпочтительно, представляет собой фенильную группу, 2-фторфенильную группу, 3-хлорфенильную группу, 2,3-дифторфенильную группу, 2,4-дифторфенильную группу или 3,5-дифторфенильную группу.

[0106] R₅, наиболее предпочтительно, представляет собой фенильную группу.

[0107] Пиримидиновое соединение по изобретению, предпочтительно, представляет собой соединение, представленное формулой (I) или формулой (II), или его соль, где в формуле (I) или формуле (II)

R₁ представляет собой C1-C4-алкильную группу, необязательно имеющую C1-C4-алкоксигруппу в качестве заместителя, или C3-C4-циклоалкильную группу,

R₂ представляет собой C1-C6-алкильную группу, необязательно имеющую от 1 до 5 C1-C4-алкоксигрупп в качестве заместителей,

R₃ представляет собой C1-C4-алкильную группу, необязательно имеющую от 1 до 5 атомов фтора в качестве заместителей,

R₄ является атомом водорода или C1-C4-алкильной группой, и

R₅ является фенильной группой, необязательно имеющей 1 или 2 заместителя, выбранных из группы, состоящей из атомов фтора и атомов хлора.

[0108] Соединение по изобретению, более предпочтительно, представляет собой соединение, представленное формулой (I) или формулой (II), или его соль, где в формуле (I) или формуле (II)

R₁ является метильной группой, этильной группой, n-пропильной группой, изопропильной группой, трет-бутильной группой, 1-метил-1-метоксиэтильной группой, циклопропильной группой или циклобутильной группой,

R₂ является метильной группой, этильной группой, n-пропильной группой, трет-бутильной группой, метоксиметильной группой или этоксиметильной группой,

R₃ является метильной группой, фторметильной группой, дифторметильной группой, трифторметильной группой, этильной группой, фторэтильной группой, дифторэтильной группой, трифторэтильной группой, n-пропильной группой, изопропильной группой или трет-бутильной группой,

R₄ является атомом водорода, метильной группой, этильной группой, n-пропильной группой, изопропильной группой или трет-бутильной группой, и

R₅ является фенильной группой, 2-фторфенильной группой, 3-фторфенильной группой, 2,4-дифторфенильной группой, 2,3-дифторфенильной группой, 3,5-дифторфенильной группой, 2-хлорфенильной группой, 3-хлорфенильной группой, 2,4-дихлорфенильной группой или 3,5-дихлорфенильной группой.

[0109] Соединение по изобретению, даже более предпочтительно, представляет собой соединение, представленное формулой (II), или его соль, где в формуле (II)

R₁ является метильной группой, этильной группой, изопропильной группой, трет-бутильной группой, 1-метил-1-метоксиэтильной группой или циклопропильной группой,

R₂ является метильной группой, этильной группой, метоксиметильной группой или этоксиметильной группой,

R₃ является метильной группой, фторметильной группой, дифторметильной группой, трифторметильной группой или этильной группой,

R₄ является атомом водорода, метильной группой или этильной группой, и

R₅ является фенильной группой, 2-фторфенильной группой, 3-хлорфенильной группой, 2,3-дифторфенильной группой, 2,4-дифторфенильной группой или 3,5-дифторфенильной группой.

[0110] Соединение по изобретению дополнительно предпочтительно представляет собой соединение, представленное формулой (II), или его соль, где в формуле (II)

R₁ является метильной группой, трет-бутильной группой или циклопропильной группой,

R₂ является метильной группой, этильной группой, метоксиметильной группой или этоксиметильной группой,

R₃ является метильной группой, трифторметильной группой или этильной группой,

R₄ является атомом водорода или метильной группой, и

R₅ является фенильной группой.

[0111] Соединение по изобретению дополнительно предпочтительно представляет собой соединение, представленное формулой (II), или его соль, где в формуле (II)

R₁ является метильной группой, трет-бутильной группой или циклопропильной группой,

R₂ является метильной группой, этильной группой или метоксиметильной группой,

R₃ является метильной группой,

R₄ является атомом водорода, и

R₅ является фенильной группой.

[0112] Соединение по изобретению, особенно предпочтительно, представляет собой соединение, представленное формулой (II), или его соль, где в формуле (II)

R₁ является метильной группой, трет-бутильной группой или циклопропильной группой,

R₂ является метильной группой,

R₃ является метильной группой,

R₄ является атомом водорода, и

R₅ является фенильной группой.

[0113] Конкретные примеры соединения, представленного формулой (I) или формулой (II), могут включать соединения, полученные в следующих примерах, но не ограничены ими.

Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к соединению, выбранному из следующих (1)-(19), или его соли. Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к соединению, выбранному из следующих (1)-(15), или его соли.

(1) 7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-N-((R)-1-фенилэтил)-6-(проп-1-ин-1-ил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамид,

(2) 7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-6-(циклопропилэтинил)-N-((R)-1-фенилэтил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамид,

(3) 7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-6-(3,3-диметилбут-1-ин-1-ил)-N-((R)-1-фенилэтил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамид,

(4) 7-(R)-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-N-((R)-1-(3,5-дифторфенил)этил)-6-(проп-1-ин-1-ил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамид,

(5) 7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-N-(2-фенилпропан-2-ил)-6-(проп-1-ин-1-ил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамид,

(6) 7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-N-((R)-1-фенилпропил)-6-(проп-1-ин-1-ил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамид,

(7) 7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-N-(2-(2-фторфенил)пропан-2-ил)-6-(проп-1-ин-1-ил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамид,

(8) 7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-N-((R)-1-(3-хлорфенил)этил)-6-(проп-1-ин-1-ил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамид,

(9) 7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-N-((R)-1-(2,4-дифторфенил)этил)-6-(проп-1-ин-1-ил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамид,

(10) 7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-6-(проп-1-ин-1-ил)-N-((S)-2,2,2-трифтор-1-фенилэтил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамид,

(11) 7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-6-(циклопропилэтинил)-N-(2-фенилпропан-2-ил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамид,

(12) 7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-6-(циклопропилэтинил)-N-((R)-1-(2,3-дифторфенил)этил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамид,

(13) 7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-6-(3-метокси-3-метилбут-1-ин-1-ил)-N-((R)-1-фенилэтил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамид,

(14) 7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-6-(бут-1-ин-1-ил)-N-((R)-1-фенилэтил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамид,

(15) 7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-N-(2-(2-фторфенил)пропан-2-ил)-6-(3-метилбут-1-ин-1-ил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамид,

(16) 7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-этилпирролидин-3-ил)-4-амино-N-((R)-1-фенилэтил)-6-(проп-1-ин-1-ил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамид,

(17) 7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-этилпирролидин-3-ил)-4-амино-6-(циклопропилэтинил)-N-((R)-1-фенилэтил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамид,

(18) 7-((3R,5R)-1-акрилоил-5-(метоксиметил)пирролидин-3-ил)-4-амино-6-(циклопропилэтинил)-N-((R)-1-фенилэтил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамид и

(19) 7-((3R,5R)-1-акрилоил-5-(этоксиметил)пирролидин-3-ил)-4-амино-6-(циклопропилэтинил)-N-((R)-1-фенилэтил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамид.

[0114] Предпочтительным примером соединения, представленного формулой (I) или формулой (II), может являться соединение, выбранное из следующих (1)-(3), или его соль.

(1) 7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-N-((R)-1-фенилэтил)-6-(проп-1-ин-1-ил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамид,

(2) 7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-6-(циклопропилэтинил)-N-((R)-1-фенилэтил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамид, и

(3) 7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-6-(3,3-диметилбут-1-ин-1-ил)-N-((R)-1-фенилэтил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамид.

[0115] Наиболее предпочтительным пиримидиновым соединением по изобретению является 7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-6-(циклопропилэтинил)-N-((R)-1-фенилэтил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамид.

[0116] <Способ получения соединения, представленного формулой (I)>

Соединение по изобретению можно получать, например, следующим способом получения или способами, описанными в примерах. Однако способ получения соединения по изобретению не ограничен этими примерами.

Соединения (I) и (II) по настоящему изобретению можно получать, например, следующим способом получения.

<Способ получения>

В указанном выше способе каждый из L₁, L₂ и L₃, являющихся одинаковыми или разными, представляет собой уходящую группу; каждый из P₁ и P₂, являющихся одинаковыми или разными, представляет собой защитную группу; и другие символы являются такими, как определено выше.

[0117] <Стадия 1>

Эта стадия представляет собой способ получения соединения, представленного формулой 3, посредством осуществления реакции Мицунобу между соединением, представленным формулой 1, и соединением, представленным формулой 2, являющимся коммерчески доступным соединением или соединением, которое можно получать известным способом. Реакцию Мицунобу, как правило, осуществляют в присутствии реагента Мицунобу и фосфинового реагента.

Соединение, представленное формулой 2 (в формуле 2 P₁ представляет собой защитную группу для аминогруппы), можно использовать в количестве от 1 до 10 эквивалентов, и предпочтительно - от 1 до 3 эквивалентов, с учетом количества соединения, представленного формулой 1 (1 моль).

"Защитная группа для аминогруппы" конкретно не ограничена, при условии, что она имеет защитную функцию. Примеры защитной группы для аминогруппы могут включать: аралкильные группы, такие как бензильная группа, p-метоксибензильная группа, 3,4-диметоксибензильная группа, o-нитробензильная группа, p-нитробензильная группа, бензгидрильная группа, тритильная группа и кумильная группа; низшие алканоильные группы, такие как, например, формильная группа, ацетильная группа, пропионильная группа, бутирильная группа, пивалоильная группа, трифторацетильная группа и трихлорацетильная группа; например, бензоильная группы; арилалканоильные группы, такие как, например, фенилацетильная группа и феноксиацетильная группа; низшие алкоксикарбонильные группы, такие как, например, метоксикарбонильная группа, этоксикарбонильная группа, пропилоксикарбонильная группа и трет-бутоксикарбонильная группа; аралкилоксикарбонильные группы, такие как, например, p-нитробензилоксикарбонильная группа и фенэтилоксикарбонильная группа; низшие алкилсилильные группы, такие как, например, триметилсилильная группа и трет-бутилдиметилсилильная группа; например, тетрагидропиранильные группы; например, триметилсилилэтоксиметильные группы; низшие алкилсульфонильные группы и т.д., такие как, например, метилсульфонильная группа, этилсульфонильная группа и трет-бутилсульфонильная группа; низшие алкилсульфинильные группы и т.д., такие как, например, трет-бутилсульфинильная группа; арилсульфонильные группы и т.д., такие как, например, бензолсульфонильная группа и толуолсульфонильная группа; и имидные группы, такие как, например, фталимидная группа. Среди них, трифторацетильная группа, ацетильная группа, трет-бутоксикарбонильная группа, бензилоксикарбонильная группа, триметилсилилэтоксиметильная группа или кумильная группа являются особенно предпочтительными.

[0118] В качестве реагента Мицунобу используют диэтилазодикарбоксилат, диизопропилазодикарбоксилат или т.п. Такой реагент Мицунобу используют в количестве, как правило, приблизительно от 1 до 100 моль, и предпочтительно - приблизительно от 1 до 10 моль, с учетом соединения, представленного формулой 1 (1 моль).

В качестве фосфинового реагента используют трифенилфосфин, трибутилфосфин, трифурилфосфин или т.п. Такой фосфиновый реагент используют в количестве, как правило, приблизительно от 1 до 100 моль, и предпочтительно - приблизительно от 1 до 10 моль, с учетом соединения, представленного формулой 1 (1 моль).

Растворитель конкретно не ограничен, при условии, что он не влияет на реакцию. Примеры растворителя могут включать углеводороды (например, бензол, толуол, ксилол и т.д.), галогенированные углеводороды (например, хлороформ, 1,2-дихлорэтан и т.д.), нитрилы (например, ацетонитрил и т.д.), простые эфиры (например, диметоксиэтан, тетрагидрофуран и т.д.), спирты (например, метанол, этанол и т.д.), апротонные полярные растворители (например, N, N-диметилформамид, диметилсульфоксид, гексаметилфосфорамид и т.д.), воду и их смеси. Время реакции составляет от 0,1 до 100 часов, и предпочтительно - от 0,5 до 24 часов. Соответственно, температура реакции составляет от 0°C до температуры, при которой растворитель кипит, и предпочтительно - от 0°C до 100°C.

Полученное таким образом соединение, представленное формулой 3, можно выделять и очищать известными способами разделения и очистки или можно подвергать последующей стадии без выделения и очистки.

[0119] <Стадия 2>

Эта стадия представляет собой способ получения соединения, представленного формулой 4, посредством допущения реакции между соединением, представленным формулой 3, с аммиаком или его солью.

Аммиак или его соль можно использовать в количестве от 1 до 1000 эквивалентов, и предпочтительно - от 1 до 100 эквивалентов, с учетом количества соединения, представленного формулой 3 (1 моль).

Растворитель конкретно не ограничен, при условии, что он не влияет на реакцию. Примеры растворителя могут включать углеводороды (например, бензол, толуол, ксилол и т.д.), галогенированные углеводороды (например, хлороформ, 1,2-дихлорэтан и т.д.), нитрилы (например, ацетонитрил и т.д.), простые эфиры (например, диметоксиэтан, тетрагидрофуран и т.д.), спирты (например, метанол, этанол и т.д.), апротонные полярные растворители (например, N, N-диметилформамид, диметилсульфоксид, гексаметилфосфорамид и т.д.), воду и их смеси. Время реакции составляет от 0,1 до 100 часов, и предпочтительно - от 0,5 до 24 часов. Соответственно, температура реакции составляет от 0°C до температуры, при которой растворитель кипит, и предпочтительно - от 0°C до 150°C.

Полученное таким образом соединение, представленное формулой 4, можно выделять и очищать известными способами разделения и очистки или можно подвергать последующей стадии без выделения и очистки.

[0120] <Стадия 3>

Эта стадия представляет собой способ получения соединения, представленного формулой 5, посредством проведения реакции соединения, представленного формулой 4, в атмосфере монооксида углерода, например, в присутствии катализатора на основе переходного металла, основания и спирта.

На этой стадии, давление монооксида углерода составляет, как правило, от 1 до 20 атмосфер, и предпочтительно - от 1 до 10 атмосфер.

Примеры спирта могут включать метанол, этанол, пропанол, изопропанол, диэтиламиноэтанол, изобутанол, 4-(2-гидроксиэтил)морфолин, 3-морфолинопропанол и диэтиламинопропанол.

Спирт используют в количестве, как правило, приблизительно от 1 до 100 моль, и предпочтительно - приблизительно от 1 до 50 моль, с учетом количества соединения, представленного формулой 4 (1 моль).

[0121] Примеры катализатора на основе переходного металла, используемого в настоящем описании, могут включать палладиевые катализаторы (например, ацетат палладия, хлорид палладия, тетракис(трифенилфосфин)палладий, палладированный уголь и т.д.). При необходимости, можно добавлять лиганд (например, трифенилфосфин, три-трет-бутилфосфин и т.д.). Количество используемого катализатора на основе переходного металла отличается в зависимости от типа катализатора. катализатор на основе переходного металла используют в количестве, как правило, приблизительно от 0,0001 до 1 моль, и предпочтительно - приблизительно от 0,01 до 0,5 моль, с учетом количества соединения 4 (1 моль). Лиганд используют в количестве, как правило, приблизительно от 0,0001 до 4 моль, и предпочтительно - приблизительно от 0,01 до 2 моль, с учетом количества соединения, представленного формулой 4 (1 моль).

[0122] Примеры основания могут включать органические амины (например, триметиламин, триэтиламин, диизопропилэтиламин, N-метилморфолин, 1,8-диазабицикло[5,4,0]ундец-7-ен, пиридин, N, N-диметиланилин и т.д.), соли щелочных металлов (например, гидрокарбонат натрия, гидрокарбонат калия, карбонат натрия, карбонат калия, карбонат цезия, фосфат натрия, фосфат калия, гидроксид натрия, гидроксид калия и т.д.), гидриды металлов (например, гидрид калия, гидрид натрия и т.д.), алкоксиды щелочных металлов (например, метоксид натрия, этоксид натрия, трет-бутоксид натрия, трет-бутоксид калия и т.д.) и дисилазиды щелочных металлов (например, дисилазид лития, дисилазид натрия, дисилазид калия и т.д.). Помимо прочего, предпочтительными являются соли щелочных металлов, такие как карбонат калия, карбонат цезия, фосфат натрия и фосфат калия, алкоксиды щелочных металлов, такие как трет-бутоксид натрия и трет-бутоксид калия, органические амины, такие как триэтиламин и диизопропилэтиламин, и т.п. Основание используют в количестве, как правило, приблизительно от 0,1 до 50 моль, и предпочтительно - приблизительно от 1 до 20 моль, с учетом количества соединения, представленного формулой 4 (1 моль).

[0123] Растворитель конкретно не ограничен, при условии, что он не влияет на реакцию. Примеры растворителя могут включать углеводороды (например, бензол, толуол, ксилол и т.д.), галогенированные углеводороды (например, хлороформ, 1,2-дихлорэтан и т.д.), нитрилы (например, ацетонитрил и т.д.), простые эфиры (например, диметоксиэтан, тетрагидрофуран и т.д.), спирты (например, метанол, этанол и т.д.), апротонные полярные растворители (например, N, N-диметилформамид, диметилсульфоксид, гексаметилфосфорамид, N-метилпирролидон и т.д.), воду и их смеси. Время реакции составляет от 0,1 до 100 часов, и предпочтительно - от 0,5 до 24 часов. Соответственно, температура реакции составляет от 0°C до температуры, при которой растворитель кипит, и предпочтительно - от 0°C до 150°C.

[0124] После завершения этой реакции сложноэфирную форму, соответствующую используемому спирту, или смесь сложноэфирной формы и соединения, представленного формулой 5, подвергают реакции гидролиза, таким образом, что она может превращаться в соединение, представленное формулой 5.

В качестве такого основания, предпочтительно, используют гидрокарбонат натрия, карбонат натрия, карбонат калия, карбонат цезия, гидроксид натрия, гидроксид калия, гидроксид лития или т.п. Основание используют в количестве, как правило, приблизительно от 0,5 до 100 моль, и предпочтительно - приблизительно от 1 до 10 моль, с учетом количества соединения, представленного формулой 4 (1 моль).

Растворитель конкретно не ограничен, при условии, что он не влияет на реакцию. Например, воду, метанол, этанол, изопропанол, тетрагидрофуран, 1,4-диоксан, N, N-диметилформамид и т.п. можно использовать в отдельности или в комбинации. Время реакции составляет от 0,1 до 100 часов, и предпочтительно - от 0,5 до 24 часов. Соответственно, температура реакции составляет от 0°C до температуры, при которой растворитель кипит, и предпочтительно - от 0°C до 100°C.

Полученное таким образом соединение, представленное формулой 5, можно выделять и очищать известными способами разделения и очистки или можно подвергать последующей стадии без выделения и очистки.

[0125] <Стадия 4>

Эта стадия представляет собой способ получения соединения, представленного формулой 6 (где P₂ представляет собой защитную группу для карбоксильной группы) посредством встраивания защитной группы в соединение, представленное формулой 5. Защиту можно осуществлять общеизвестным способом, например, способом, описанным в Protective Groups in Organic Synthesis, third edition, T. W. Greene and P. G. M. Wuts, John Wiley & Sons (1999), или эквивалентным ему способом.

"Защитная группа для карбоксильной группы" конкретно не ограничена, при условии, что она имеет защитную функцию. Примеры защитной группы для карбоксильной группы могут включать: низшие алкильные группы, такие как, например, метильная группа, этильная группа, пропильная группа, изопропильная группа и трет-бутильная группа; низшие галогеналкильные группы, такие как, например, 2,2,2-трихлорэтильная группа; низшие алкенильные группы, такие как, например, аллильная группа; например, триметилсилилэтоксиметильная группа; и аралкильные группы, такие как, например, бензильная группа, p-метоксибензильная группа, p-нитробензильная группа, бензгидрильная группа и тритильная группа. В частности, предпочтительной является метильная группа, этильная группа, трет-бутильная группа, аллильная группа, бензильная группа, p-метоксибензильная группа или триметилсилилэтоксиметильная группа.

В этой реакции, предпочтительно, встраивают защитную группу, такая как, например, группа трет-бутилового сложного эфира, группа метилового сложного эфира или группа этилового сложного эфира.

Средство-защитная группа, используемое в этой реакции, может являться, например, 2-трет-бутил-1,3-диизопропилизомочевиной. Такое средство-защитную группу используют в количестве, как правило, приблизительно от 1 до 50 моль, и предпочтительно - приблизительно от 1 до 10 моль, с учетом количества соединения, представленного формулой 5 (1 моль).

Растворитель конкретно не ограничен, при условии, что он не влияет на реакцию. Примеры растворителя могут включать углеводороды (например, бензол, толуол, ксилол и т.д.), галогенированные углеводороды (например, хлороформ, 1,2-дихлорэтан и т.д.), нитрилы (например, ацетонитрил и т.д.), простые эфиры (например, диметоксиэтан, тетрагидрофуран, трет-бутилметиловый простой эфир и т.д.), спирты (например, метанол, этанол и т.д.), апротонные полярные растворители (например, N, N-диметилформамид, диметилсульфоксид, гексаметилфосфорамид и т.д.), воду и их смеси. Время реакции составляет от 0,1 до 100 часов, и предпочтительно - от 0,5 до 24 часов. Соответственно, температура реакции составляет от 0°C до температуры, при которой растворитель кипит, и предпочтительно - от 0°C до 100°C.

Полученное таким образом соединение, представленное формулой 6, можно выделять и очищать известными способами разделения и очистки или можно подвергать последующей стадии без выделения и очистки.

[0126] <Стадия 5>

Эта стадия представляет собой способ получения соединения, представленного формулой 7 (где L₃ представляет собой атом галогена), посредством галогенирования соединения, представленного формулой 6. Галогенирование можно осуществлять способом с использованием фтора, хлора, брома, йода и т.д. или способом с использованием N-хлорсукцинимида, N-бромсукцинимида, N-йодсукцинимида и т.д. В этой реакции способ с использованием N-хлорсукцинимида, N-бромсукцинимида, N-йодсукцинимида и т.д. является предпочтительным.

N-хлорсукцинимид, N-бромсукцинимид, N-йодсукцинимид и т.д. можно использовать в количестве от 1 до 10 эквивалентов, и предпочтительно - от 1 до 3 эквивалентов, с учетом количества соединения, представленного формулой 6 (1 моль).

Растворитель конкретно не ограничен, при условии, что он не влияет на реакцию. Примеры растворителя могут включать углеводороды (например, бензол, толуол, ксилол и т.д.), галогенированные углеводороды (например, хлороформ, 1,2-дихлорэтан и т.д.), нитрилы (например, ацетонитрил и т.д.), простые эфиры (например, диметоксиэтан, тетрагидрофуран и т.д.), спирты (например, метанол, этанол и т.д.), апротонные полярные растворители (например, N, N-диметилформамид, диметилсульфоксид, гексаметилфосфорамид и т.д.), воду и их смеси. Время реакции составляет от 0,1 до 100 часов, и предпочтительно - от 0,5 до 24 часов. Соответственно, температура реакции составляет от 0°C до температуры, при которой растворитель кипит, и предпочтительно - от 0°C до 100°C.

Полученное таким образом соединение, представленное формулой 7, можно выделять и очищать известными способами разделения и очистки или можно подвергать последующей стадии без выделения и очистки.

[0127] <Стадия 6>

Эта стадия представляет собой способ получения соединения, представленного формулой 8, посредством удаления защитной группы для аминогруппы (P₁ в формуле 7) из соединения, представленного формулой 7 (снятия защитных групп). Такое снятие защитных групп можно осуществлять общеизвестным способом, например, способом, описанным в Protective Groups in Organic Synthesis, third edition, T. W. Greene and P. G. M. Wuts, John Wiley & Sons (1999), или эквивалентным ему способом.

Защитная группа может являться, например, трет-бутилоксикарбонилом. Если такую трет-бутилоксикарбонильную группу используют, например, в качестве защитной группы, снятие защитных групп, предпочтительно, осуществляют в кислых условиях. Примеры кислоты, используемой в настоящем описании, могут включать соляную кислоту, уксусную кислоту, трифторуксусную кислоту, серную кислоту и тозиловую кислоту.

Кислоту, предпочтительно, используют в количестве приблизительно от 1 до 100 эквивалентов с учетом количества соединения, представленного формулой 7 (1 моль).

Растворитель, используемый в реакции, конкретно не ограничен, при условии, что он не влияет на реакцию. Примеры растворителя, используемого в настоящем описании, могут включать спирты (например, метанол и т.д.), углеводороды (например, бензол, толуол, ксилол и т.д.), галогенированные углеводороды (например, метиленхлорид, хлороформ, 1,2-дихлорэтан и т.д.), нитрилы (например, ацетонитрил и т.д.), простые эфиры (например, диметоксиэтан, тетрагидрофуран и т.д.), апротонные полярные растворители (например, N, N-диметилформамид, диметилсульфоксид, гексаметилфосфорамид и т.д.) и их смеси. Время реакции составляет от 0,1 до 100 часов, и предпочтительно - от 0,5 до 24 часов. Соответственно, температура реакции составляет 0°C до 100°C, и предпочтительно - от 0°C до 50°C.

Полученное таким образом соединение, представленное формулой 8, можно выделять и очищать известными способами разделения и очистки или можно подвергать последующей стадии без выделения и очистки.

[0128] <Стадия 7>

Эта стадия представляет собой способ получения соединения, представленного формулой 9, посредством осуществления реакции амидирования между аминогруппой соединения, представленного формулой 8, и галидом акриловой кислоты или ангидридом акриловой кислоты.

В случае использования галида акриловой кислоты или ангидрида акриловой кислоты, такой галид акриловой кислоты или ангидрид акриловой кислоты используют в количестве, как правило, приблизительно от 0,5 до 10 моль, и предпочтительно - приблизительно от 1 до 5 моль, с учетом количества соединения, представленного формулой 8 (1 моль). Следует отметить, что этот галид акриловой кислоты или ангидрид акриловой кислоты можно получать в виде коммерчески доступного продукта или можно получать известным способом.

Кроме того, при необходимости, можно добавлять основание. Примеры основания могут включать органические амины (например, триметиламин, триэтиламин, изопропилэтиламин, диизопропилэтиламин, N-метилморфолин, 1,8-диазабицикло[5,4,0]ундец-7-ен, пиридин, N, N-диметиланилин и т.д.), соли щелочных металлов (например, гидрокарбонат натрия, гидрокарбонат калия, карбонат натрия, карбонат калия, карбонат цезия, фосфат натрия, фосфат калия, гидроксид натрия, гидроксид калия и т.д.), гидриды металлов (например, гидрид калия, гидрид натрия и т.д.) и алкоксиды щелочных металлов (например, метоксид натрия, этоксид натрия, трет-бутоксид натрия, трет-бутоксид калия и т.д.). Основание используют в количестве, как правило, приблизительно от 1 до 100 моль, и предпочтительно - приблизительно от 1 до 10 моль, с учетом количества соединения, представленного формулой 8 (1 моль).

Растворитель, используемый в реакции, конкретно не ограничен, при условии, что он не влияет на реакцию. Примеры растворителя, используемого в настоящем описании, могут включать спирты (например, метанол и т.д.), углеводороды (например, бензол, толуол, ксилол и т.д.), галогенированные углеводороды (например, метиленхлорид, хлороформ, 1,2-дихлорэтан и т.д.), нитрилы (например, ацетонитрил и т.д.), простые эфиры (например, диметоксиэтан, тетрагидрофуран и т.д.), апротонные полярные растворители (например, N, N-диметилформамид, диметилсульфоксид, гексаметилфосфорамид и т.д.) и их смеси. Время реакции составляет от 0,1 до 100 часов, и предпочтительно - от 0,5 до 24 часов. Соответственно, температура реакции составляет от 0°C до температуры, при которой растворитель кипит, и предпочтительно - от 0°C до 100°C.

Полученное таким образом соединение, представленное формулой 9, можно выделять и очищать известными способами разделения и очистки или можно подвергать последующей стадии без выделения и очистки.

[0129] <Стадия 8>

Эта стадия представляет собой способ получения соединения, представленного формулой 10, посредством осуществления реакции Соногаширы между соединением, представленным формулой 9, и производным ацетиленом, которое является коммерчески доступным продуктом, или которое можно получать известным способом.

Производное ацетилена можно использовать в количестве от 1 до 50 эквивалентов, и предпочтительно - от 1 до 10 эквивалентов, с учетом количества соединения, представленного формулой 9 (1 моль).

Примеры катализатора на основе переходного металла, используемого в настоящем описании, могут включать палладиевые катализаторы (например, ацетат палладия, хлорид палладия, тетракис(трифенилфосфин)палладий, дихлорбис(трифенилфосфин)палладий и т.д.) и никелевые катализаторы (например, хлорид никеля и т.д.). При необходимости, можно добавлять лиганд (например, трифенилфосфин, три-трет-бутилфосфин и т.д.) и в качестве сокатализатора можно использовать медный катализатор (например, йодид меди, бромид меди, или хлорид меди) или т.п. Количество используемого катализатора на основе переходного металла отличается в зависимости от типа катализатора. Катализатор на основе переходного металла используют в количестве, как правило, приблизительно от 0,0001 до 1 моль, и предпочтительно - приблизительно от 0,01 до 0,5 моль, с учетом количества соединения, представленного формулой 9 (1 моль). Лиганд используют в количестве, как правило, приблизительно от 0,0001 до 4 моль, и предпочтительно - приблизительно от 0,01 до 2 моль, с учетом количества соединения, представленного формулой 9 (1 моль). Медный катализатор используют в количестве, как правило, приблизительно от 0,0001 до 4 моль, и предпочтительно - приблизительно от 0,010 до 2 моль, с учетом количества соединения, представленного формулой 9 (1 моль).

[0130] Примеры основания могут включать органические амины (например, триметиламин, триэтиламин, диизопропилэтиламин, N-метилморфолин, 1,8-диазабицикло[5,4,0]ундец-7-ен, пиридин, N, N-диметиланилин и т.д.), соли щелочных металлов (например, гидрокарбонат натрия, гидрокарбонат калия, карбонат натрия, карбонат калия, карбонат цезия, фосфат натрия, фосфат калия, гидроксид натрия, гидроксид калия и т.д.), гидриды металлов (например, гидрид калия, гидрид натрия и т.д.), алкоксиды щелочных металлов (например, метоксид натрия, этоксид натрия, трет-бутоксид натрия, трет-бутоксид калия и т.д.), и дисилазид щелочного металла (например, дисилазид лития, дисилазид натрия, дисилазид калия и т.д.). Среди них, предпочтительные примеры основания могут включать: соли щелочных металлов, такие как карбонат калия, карбонат цезия, фосфат натрия и фосфат калия; алкоксиды щелочных металлов, такие как трет-бутоксид натрия и трет-бутоксид калия; и органические амины, такие как триэтиламин и диизопропилэтиламин. Основание используют в количестве, как правило, приблизительно от 0,1 до 10 моль, и предпочтительно - приблизительно от 1 до 5 моль, с учетом количества соединения, представленного формулой 9 (1 моль).

Растворитель конкретно не ограничен, при условии, что он не влияет на реакцию. Примеры растворителя могут включать углеводороды (например, бензол, толуол, ксилол и т.д.), галогенированные углеводороды (например, хлороформ, 1,2-дихлорэтан и т.д.), нитрилы (например, ацетонитрил и т.д.), простые эфиры (например, диметоксиэтан, тетрагидрофуран и т.д.), спирты (например, метанол, этанол и т.д.), апротонные полярные растворители (например, N, N-диметилформамид, диметилсульфоксид, гексаметилфосфорамид и т.д.), воду и их смеси. Время реакции составляет от 0,1 до 100 часов, и предпочтительно - от 0,5 до 24 часов. Соответственно, температура реакции составляет от 0°C до температуры, при которой растворитель кипит, и предпочтительно - от 0°C до 150°C.

Полученное таким образом соединение, представленное формулой 10, можно выделять и очищать известными способами разделения и очистки или можно подвергать последующей стадии без выделения и очистки.

[0131] <Стадия 9>

Эта стадия представляет собой способ получения соединения, представленного формулой 11, посредством снятия защитных групп для карбоксильной группы (P₂ в формуле 10) соединения, представленного формулой 10. Снятие защитных групп можно осуществлять общеизвестным способом, например, способом, описанным в Protective Groups in Organic Synthesis, third edition, T. W. Greene and P. G. M. Wuts, John Wiley & Sons (1981), или эквивалентным ему способом.

Защитная группа может являться, например, трет-бутиловым сложным эфиром. Если такую группу трет-бутилового сложного эфира используют в качестве защитной группы, например, снятие защитных групп, предпочтительно, осуществляют в кислых условиях. Примеры кислоты, используемой в настоящем описании, могут включать соляную кислоту, уксусную кислоту, трифторуксусную кислоту, серную кислоту и тозиловую кислоту.

Кислоту, предпочтительно, используют в количестве приблизительно от 1 до 100 эквивалентов с учетом количества соединения, представленного формулой 10 (1 моль).

Растворитель, используемый в реакции, конкретно не ограничен, при условии, что он не влияет на реакцию. Примеры растворителя, используемого в настоящем описании, могут включать спирты (например, метанол и т.д.), углеводороды (например, бензол, толуол, ксилол и т.д.), галогенированные углеводороды (например, метиленхлорид, хлороформ, 1,2-дихлорэтан и т.д.), нитрилы (например, ацетонитрил и т.д.), простые эфиры (например, диметоксиэтан, тетрагидрофуран и т.д.), апротонные полярные растворители (например, N, N-диметилформамид, диметилсульфоксид, гексаметилфосфорамид и т.д.) и их смеси. Время реакции составляет от 0,1 до 100 часов, и предпочтительно - от 0,5 до 24 часов. Соответственно, температура реакции составляет 0°C до 100°C, и предпочтительно - от 0°C до 50°C.

Полученное таким образом соединение, представленное формулой 11, можно выделять и очищать известными способами разделения и очистки или можно подвергать последующей стадии без выделения и очистки.

[0132] <Стадия 10>

Эта стадия представляет собой способ получения соединения, представленного формулой (I), посредством осуществления реакции амидирования между карбоксильной группой соединения, представленного формулой 11, и амина, который является коммерчески доступным продуктом, или который можно получать известным способом.

Амидирование можно осуществлять общеизвестным способом. Примеры способа амидирования могут включать способ осуществления реакции в присутствии конденсирующего средства и способ, включающий активацию части карбоновой кислоты общеизвестным способом для получения реакционноспособного производного, а затем осуществления амидирования между производным и амином (см. оба способа в "Peptide Gosei no Kiso to Jikken (Principle of Peptide Synthesis and Experiments)" (Nobuo IZUMIYA et al., Maruzen Co., Ltd., 1983)).

Примеры конденсирующего средства могут включать N,N'-дициклогексилкарбодиимид (DCC), N,N'-диизопропилкарбодиимид (DIC), гидрохлорид 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимида (WSC), дифенилфосфорилазид (DPPA), гексафторфосфат бензотриазол-1-ил-окситрисдиметиламинофосфония (BOP), гексафторфосфат бензотриазол-1-ил-окситрипирролидинoфосфония (PyBOP), фосфат 7-азабензотриазол-1-илокситриспирролидинoфосфония (PyAOP), гексафторфосфат бромтриспирролидинoфосфония (BroP), гексафторфосфат хлортрис(пирролидин-1-ил)фосфония (PyCroP), 3-(диэтоксифосфорилокси)-1,2,3-бензотриазин-4(3H)-он (DEPBT), Гексафторфосфат O-(азабензотриазол-1-ил)-N,N,N',N'-тетраметилурония (HATU) и гидрохлорид 4-(5,6-диметокси-1,3,5-триазин-2-ил)-4-метилморфолин (DMTMM). Примеры добавки, используемой в это время, могут включать 1-гидроксибензотриазол (HOBt), 1-гидрокси-7-азабензотриазол (HOAt) и N-гидроксисукцинимид (HOSu). Такие средства используют в количестве, как правило, приблизительно от 1 до 100 моль, и предпочтительно - приблизительно от 1 до 10 моль, с учетом количества соединения, представленного формулой 11 (1 моль).

[0133] Кроме того, при необходимости, можно добавлять основание. Примеры такого основания могут включать органические амины (например, триметиламин, триэтиламин, диизопропилэтиламин, N-метилморфолин, 1,8-диазабицикло[5,4,0]ундец-7-ен, пиридин, N, N-диметиланилин и т.д.), соли щелочных металлов (например, гидрокарбонат натрия, гидрокарбонат калия, карбонат натрия, карбонат калия, карбонат цезия, фосфат натрия, фосфат калия, гидроксид натрия, гидроксид калия и т.д.), гидриды металлов (например, гидрид калия, гидрид натрия и т.д.), и алкоксиды щелочных металлов (например, метоксид натрия, этоксид натрия, трет-бутоксид натрия, трет-бутоксид калия и т.д.). Основание используют в количестве, как правило, приблизительно от 1 до 100 моль, и предпочтительно - приблизительно от 1 до 10 моль, с учетом количества соединения, представленного формулой 11 (1 моль).

Растворитель, используемый в реакции, конкретно не ограничен, при условии, что он не влияет на реакцию. Примеры растворителя, используемого в настоящем описании, могут включать спирты (например, метанол и т.д.), углеводороды (например, бензол, толуол, ксилол и т.д.), галогенированные углеводороды (например, метиленхлорид, хлороформ, 1,2-дихлорэтан и т.д.), нитрилы (например, ацетонитрил и т.д.), простые эфиры (например, диметоксиэтан, тетрагидрофуран и т.д.), апротонные полярные растворители (например, N, N-диметилформамид, диметилсульфоксид, гексаметилфосфорамид и т.д.) и их смеси. Время реакции составляет от 0,1 до 100 часов, и предпочтительно - от 0,5 до 24 часов. Соответственно, температура реакции составляет от 0°C до температуры, при которой растворитель кипит, и предпочтительно - от 0°C до 100°C.

Полученные таким образом соединения (I) и (II) можно выделять и очищать известными способами разделения и очистки, такими как, например, концентрирование, концентрирование под вакуумом, кристаллизация, экстракция растворителем, переосаждение или хроматография.

В описанном выше способе получения стадии в диапазоне от "встраивания защитной группы в карбоксильную группу соединения, представленного формулой 5" (стадии 4) до "реакции амидирования между карбоксильной группы соединения, представленного формулой 11, и амином, который является коммерчески доступным продуктом, или который можно получать известным способом" (стадии 10) последовательно осуществляют в этом порядке. Однако порядок осуществления этих стадий можно изменять. Кроме того, "встраивание защитной группы в карбоксильную группу соединения, представленного формулой 5" (стадию 4) и "удаление защитной группы для карбоксигруппы из соединения, представленного формулой 10" (стадию 9) можно опускать.

[0134] В частности, отдельные стадии осуществляют в порядке "реакция амидирования между карбоксильной группой соединения, представленного формулой 11, и амином, который является коммерчески доступным продуктом, или который можно получать известным способом" (стадия 10), "галогенирование соединения, представленного формулой 6" (стадия 5), "удаление защитной группы для аминогруппы из соединения, представленного формулой 7" (стадия 6), "реакция амидирования между аминогруппой соединения, представленного формулой 8, и галидом акриловой кислоты или ангидридом акриловой кислоты" (стадия 7), и "реакция Соногаширы между соединением, представленным формулой 9, и производным ацетилена, которое является коммерчески доступным продуктом, или которое можно получать известным способом, если L3 соединения, представленного формулой 9, имеет уходящую группу, такую как галоген" (стадия 8), таким образом, что от рассматриваемого соединения можно дойти до соединений, представленных формулами (I) и (II). Условия, используемые на отдельных стадиях, являются такими же, как и описанные выше.

[0135] Если пиримидиновое соединение по изобретению имеет изомер, такой как оптический изомер, стереоизомер, вращательный изомер или таутомер, все из этих изомеров или их смеси включены в пиримидиновое соединение по изобретению, если не указано иначе. Например, если пиримидиновое соединение по изобретению имеет оптический изомер, и рацемат, и оптический изомер, полученный в результате разделения рацематов, включены в пиримидиновое соединение по изобретению, если не указано иначе.

[0136] Термин "соль пиримидинового соединения по изобретению" означает фармацевтически приемлемую соль, и она может являться, например, основной солью присоединения или кислой солью присоединения.

[0137] Пиримидиновое соединение по изобретению или его соль также включает пролекарство. Термин "пролекарство" означает соединение, превращающееся в пиримидиновое соединение по изобретению или его соль в результате реакции с ферментом, желудочным соком и т.д. в физиологических условиях в живом организме; а именно, соединение, ферментативно вызывающие окисление, восстановление, гидролиз и т.д., таким образом, что оно превращается в пиримидиновое соединение по изобретению или его соль, или соединение, вызывающее гидролиз и т.д. желудочным соком или т.п., таким образом, что оно превращается в пиримидиновое соединение по изобретению или его соль. В ином случае, оно также может являться соединением, превращающимся в пиримидиновое соединение по изобретению или его соль в физиологических условиях, как описано в "Iyakuhin no Kaihatsu (Development of Pharmaceutical Products)," Hirokawa Shoten, 1990, Vol. 7, Bunshi Sekkei (Molecular Designing), pp. 163 to 198.

[0138] Пиримидиновое соединение по изобретению или его соль может являться аморфным материалом или кристаллом. Хотя его кристаллическая форма может представлять собой монокристалл или полиморфную смесь, они включены в пиримидиновое соединение по изобретению или его соль. Кристалл можно получать посредством кристаллизации пиримидинового соединения по изобретению или его соли известным способом кристаллизации. Пиримидиновое соединение по изобретению или его соль может являться сольватом (например, гидратом и т.д.) или не-сольватом, и оба из них включены в соединение по изобретению или его соль. Соединения, меченые радиоактивными изотопами (например, ³H, ¹⁴C, ³⁵S, ¹²⁵I и т.д.) и т.п. также включены в пиримидиновое соединение по изобретению или его соль.

[0139] Неограничивающие примеры другого противоопухолевого средство включают антиметаболиты, лекарственные средства для молекулярного таргетинга, лекарственные средства на основе платины и лекарственные средства на основе растительных алкалоидов. Эти другие противоопухолевые средства можно использовать в отдельности или в комбинации из двух или более из них.

[0140] Неограничивающие примеры антиметаболита включают 5-фторурацил (5-FU), 5-фтор-2'-дезоксиуридин (FdUrd), тегафур, комбинированные лекарственные средства тегафур-урацил (например, UFT®), комбинированные лекарственные средства тегафур-гимерацил-отерацил (например, TS-1®), трифлуридин (FTD), комбинированные лекарственные средства трифлуридин-типирацил гидрохлорид (например, Lonsurf®), гемцитабин, капецитабин и цитарабин. Предпочтительными являются 5-фторурацил (5-FU), трифлуридин (FTD), гемцитабин или капецитабин. Эти антиметаболиты можно использовать в отдельности или в комбинации из двух или более из них.

[0141] Примеры лекарственного средства для молекулярного таргетинга включают ингибиторы семейства ErbB (EGFR, Her2, Her3 или Her4), ингибиторы PI3K/AKT/mTOR, ингибиторы CDK4/6 и антагонисты эстрогеновых рецепторов. Эти лекарственные средства для молекулярного таргетинга можно использовать в отдельности или в комбинации из двух или более из них.

[0142] Ингибитор семейства ErbB (EGFR, Her2, Her3, Her4), предпочтительно, представляет собой ингибитор Her2, более предпочтительно - антитело против Her2, такое как трастузумаб, пертузумаб, трастузумаб эмтанзин, трастузумаб дерукстекан или трастузумаб дуокармазин, и еще более предпочтительно - трастузумаб, пертузумаб или трастузумаб эмтанзин. Эти ингибиторы семейства ErbB можно использовать в отдельности или в комбинации из двух или более из них. В одном из вариантов осуществления ингибитор семейства ErbB является трастузумабом и пертузумабом.

[0143] Ингибитор PI3K/AKT/mTOR является соединением, ингибирующим путь передачи сигнала PI3K/AKT/mTOR. Его примеры включают AZD5363, AZD8055, эверолимус (RAD001), дактолисиб (BEZ235), бупарлисиб (BKM120), тазелисиб (GDC-0032), MK2206 и транс-3-амино-1-метил-3-[4-(3-фенил-5H-имидазо[1,2-c]пиридо[3,4-e][1,3]оксазин-2-ил)фенил]-циклобутанол. Предпочтительными являются AZD8055, эверолимус, дактолисиб, бупарлисиб, тазелисиб или MK2206. Эти ингибиторы PI3K/AKT/mTOR можно использовать в отдельности или в комбинации из двух или более из них.

[0144] Примеры ингибитора CDK4/6 включают палбоциклиб и абемациклиб. Предпочтительным является палбоциклиб. Эти ингибиторы CDK4/6 можно использовать в отдельности или в комбинации из двух или более из них.

[0145] Примеры антагониста эстрогеновых рецепторов включают фулвестрант, тамоксифен и мепитиостан. Предпочтительным является фулвестрант. Эти антагонисты эстрогеновых рецепторов можно использовать в отдельности или в комбинации из двух или более из них.

[0146] Примеры лекарственного средства на основе платины включают оксалиплатин, карбоплатин, цисплатин и недаплатин. Предпочтительным является цисплатин. Эти лекарственные средства на основе платины можно использовать в отдельности или в комбинации из двух или более из них.

[0147] Примеры лекарственного средства на основе растительных алкалоидов включают ингибиторы микротрубочек, такие как паклитаксел, доцетаксел, винбластин, винкристин, виндезин, винорелбин и эрибулин, и ингибиторы топоизомеразы, такие как иринотекан, ногитекан и этопозид. Более предпочтительным является таксановый ингибитор микротрубочек, такой как паклитаксел или доцетаксел, или ингибитор топоизомеразы I, такой как иринотекан или ногитекан, и еще более предпочтительным является паклитаксел или иринотекан. Эти лекарственные средства на основе растительных алкалоидов можно использовать в отдельности или в комбинации из двух или более из них.

[0148] Другое противоопухолевое средство, предпочтительно, представляет собой по меньшей мере один антиметаболит, лекарственное средство для молекулярного таргетинга, лекарственное средство на основе платины или лекарственное средство на основе растительных алкалоидов, более предпочтительно - по меньшей мере один антиметаболит, ингибитор семейства ErbB (EGFR, Her2, Her3 или Her4), ингибитор PI3K/AKT/mTOR, ингибитор CDK4/6, антагонист эстрогеновых рецепторов, лекарственное средство на основе платины или лекарственное средство на основе растительных алкалоидов, еще более предпочтительно - по меньшей мере один антиметаболит, ингибитор Her2, ингибитор PI3K/AKT/mTOR, ингибитор CDK4/6, антагонист эстрогеновых рецепторов, лекарственное средство на основе платины или лекарственное средство на основе растительных алкалоидов, даже более предпочтительно - по меньшей мере один антиметаболит, ингибитор Her2, ингибитор PI3K/AKT/mTOR, ингибитор CDK4/6, антагонист эстрогеновых рецепторов, лекарственное средство на основе платины, ингибитор микротрубочек или ингибитор топоизомераза I, еще более предпочтительно - по меньшей мере один антиметаболит, ингибитор Her2, ингибитор PI3K/AKT/mTOR, ингибитор CDK4/6, антагонист эстрогеновых рецепторов, лекарственное средство на основе платины, таксановый ингибитор микротрубочек или ингибитор топоизомераза I, более предпочтительно - по меньшей мере одно средство, выбранное из 5-фторурацила (5-FU), 5-фтор-2'-дезоксиуридина (FdUrd), тегафура, комбинированных лекарственных средств тегафур-урацил (например, UFT®), комбинированных лекарственных средств тегафур-гимерацил-отерацил (например, TS-1®), трифлуридина, комбинированных лекарственных средств трифлуридин-типирацил гидрохлорид (например, Lonsurf®), гемцитабина, капецитабина, цитарабина, трастузумаба, пертузумаба, трастузумаб эмтанзина, трастузумаб дерукстекана, трастузумаб дуокармазина, AZD5363, AZD8055, эверолимуса, дактолисиба, бупарлисиба, тазелисиба, MK2206, транс-3-амино-1-метил-3-[4-(3-фенил-5H-имидазо[1,2-c]пиридо[3,4-e][1,3]оксазин-2-ил)фенил]-циклобутанола, палбоциклиба, абемациклиба, фулвестранта, тамоксифена, мепитиостана, оксалиплатина, карбоплатина, цисплатина, недаплатина, паклитаксела и доцетаксела, еще более предпочтительно - по меньшей мере одно средство, выбранное из 5-фторурацила (5-FU), трифлуридина, гемцитабина, капецитабина, трастузумаба, пертузумаба, трастузумаб эмтанзина, AZD8055, эверолимуса, дактолисиба, бупарлисиба, тазелисиба, палбоциклиба, фулвестранта, цисплатина и паклитаксела, и особенно предпочтительно - по меньшей мере одно средство, выбранное из капецитабина, трастузумаба, пертузумаба и трастузумаб эмтанзина.

Другое противоопухолевое средство также включает его DDS-препараты. Например, термин "паклитаксел" включает альбумин-связанный паклитаксел (например, Абраксан®) и мицеллярный паклитаксел (например, NK105) и т.д. Термин "цисплатин" включает мицеллярный цисплатин (например, NC-6004) и т.д.

[0149] В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения примеры противоопухолевых средств включают химиотерапевтические средства (например, цитотоксические средства), иммунотерапевтические средства, гормональные и противогормональные средства, средства таргетированной терапии, и антиангиогенные средства. Многие противоопухолевые средства можно классифицировать в одну или более из этих групп. Хотя некоторые противоопухолевые средства в настоящем описании категоризированы по конкретным группам или подгруппам, многие из этих средств также можно указывать в одной или более других группах или подгруппах, как известно в настоящее время в этой области. Противоопухолевое средство конкретно не ограничено, и его неограничивающие примеры включают химиотерапевтическое средство, митотический ингибитор, растительный алкалоид, алкилирующее средство, антиметаболит, аналог платины, фермент, ингибитор топоизомеразы, ретиноид, азиридин, антибиотик, гормональное средство, противогормональное средство, антиэстрогенное средство, антиандрогенное средство, антиадреналовое средство, андроген, средство таргетированной терапии, иммунотерапевтическое средство, модификатор биологического ответа, ингибитор цитокинов, противоопухолевая вакцина, моноклональное антитело, ингибитор иммунных контрольных точек, средство против PD-1, средство против PD-L1, колониестимулирующий фактор, иммуномодулятор, иммуномодулирующий имид (IMiD), средство против CTLA4, средство против LAG1, средство против OX40, агонист GITR, CAR-T-клетка, BiTE, ингибитор передачи сигнала, ингибитор факторов роста, ингибитор тирозинкиназ, ингибитор EGFR, ингибитор HER2, ингибитор гистоновых деацетилаз (HDAC), ингибитор протеасом, ингибитор клеточного цикла, антиангиогенное средство, ингибитор матричных металлопротеиназ (MMP), ингибитор фактора роста гепатоцитов, ингибитор TOR, ингибитор KDR, ингибитор VEGF, ингибитор HIF-1α, ингибитор HIF-2α, ингибитор фактора роста фибробластов (FGF), ингибитор RAF, ингибитор MEK, ингибитор ERK, ингибитор PI3K, ингибитор AKT, ингибитор MCL-1, ингибитор BCL-2, ингибитор SHP2, ингибитор BRAF, ингибитор RAS, модулятор экспрессии генов, ингибитор аутофагии, индуктор апоптоза, антипролиферативное средство и ингибитор гликолиза.

[0150] Неограничивающие примеры химиотерапевтических средств включают митотические ингибиторы и растительные алкалоиды, алкилирующие средства, антиметаболиты, аналоги платины, ферменты, ингибиторы топоизомераз, ретиноиды, азиридины и антибиотики.

[0151] Неограничивающие примеры митотических ингибиторов и растительных алкалоидов включают таксаны, такие как кабазитаксел, доцетаксел, ларотаксел, ортатаксел, паклитаксел и тезетаксел; демеколцин; эпотилон; эрибулин; этопозид (VP16); этопозид фосфат; навельбин; носкапин; тенипозид; талибластин; винбластин; винкристин; виндезин; винфлунин и винорелбин.

[0152] Неограничивающие примеры алкилирующих средств включают азотистые иприты, такие как хлорамбуцил, хлорнафазин, холофосфамид, цитофосфан, эстрамустин, ифосфамид, манномустин, мехлоретамин, мехлоретамина оксид гидрохлорид, мелфалан, новэмбихин, фенестерин, преднимустин, трис(2-хлорэтил)амин, трофосфамид и урамустин; алкилсульфонаты, такие как бусульфан, импросульфан и пипосульфан; нитрозомочевины, такие как кармустин, хлорозотоцин, фотемустин, ломустин, нимустин, ранимустин, стрептозотоцин и TA-07; этиленимины и метилмеламины, такие как алтретамин, тиотепа, триэтиленмеламин, триэтилентиофосфорамид, триэтиленфосфорамид и триметилоломеламин; амбамустин; бендамустин; дакарбазин; циклофосфамид; этоглюцид; ирофулвен; мафосфамид; митобронитол; митолактол; пипоброман; прокарбазин; темозоломид; треосульфан и триазихон.

[0153] Неограничивающие примеры антиметаболитов включают аналоги фолиевой кислоты, такие как аминоптерин, деноптерин, эдатрексат, метотрексат, птероптерин, ралтитрексед и триметрексат; аналоги пурина, такие как 6-меркаптопурин, 6-тиогуанин, флударабин, фородезин, тиамиприн и тиогуанин; аналоги пиримидина, такие как 5-фторурацил (5-FU), тегафур/гимерацил/отерацил калия, тегафур/урацил, трифлуридин, трифлуридин/типирацил гидрохлорид, 6-азауридин, анцитабин, азацитидин, капецитабин, кармофур, цитарабин, децитабин, дидезоксиуридин, доксифлуридин, эноцитабин, флоксуридин, галоцитабин, гемцитабин и сапацитабин; 3-аминопиридин-2-карбоксальдегид тиосемикарбазон; броксуридин; кладрибин; циклофосфамид; цитарабин; эмитефур; гидроксимочевина; меркаптопурин; неларабин; пеметрексед; пентостатин; тегафур и троксацитабин.

[0154] Неограничивающие примеры аналогов платины включают карбоплатин, цисплатин, дициклоплатин, гептаплатин, лобаплатин, недаплатин, оксалиплатин, сатраплатин и триплатин тетранитрат.

[0155] Неограничивающие примеры ферментов включают аспарагиназу и пэгаспаргазу.

[0156] Неограничивающие примеры ингибиторов топоизомераз включают акридин карбоксамид, амонафид, амсакрин, белотекан, ацетат эллиптиния, экзатекан, индолокарбазол, иринотекан, луртотекан, митоксантрон, разоксан, рубитекан, SN-38, собузоксан и топотекан.

[0157] Неограничивающие примеры ретиноидов включают алитретиноин, бексаротен, фенретинид, изотретиноин, лиарозол, RII ретинамид и третиноин.

[0158] Неограничивающие примеры азиридинов включают бензодопа, карбоквон, метуредопа и уредопа.

[0159] Неограничивающие примеры антибиотиков включают интеркалирующие антибиотики; антрацендионы; антрациклиновые антибиотики, такие как акларубицин, амрубицин, дауномицин, даунорубицин, доксорубицин, эпирубицин, идарубицин, меногарил, ногаламицин, пирарубицин и валрубицин; 6-диазо-5-оксо-L-норлейцин; аклациномицины; актиномицин; аутрамицин; азасерин; блеомицины; кактиномицин; калихимицин; карабицин; карминомицин; карцинофилин; хромомицины; дактиномицин; деторубицин; эзорубицин; эсперамицины; гелданамицин; марцелломицин; митомицины; митомицин C; микофеноловую кислоту; оливомицины; новантрон; пепломицин; порфиромицин; потфиромицин; пуромицин; хеламицин; ребеккамицин; родорубицин; стрептонигрин; стрептозоцин; танеспимицин; туберцидин; убенимекс; зиностатин; зиностатин стималамер и зорубицин.

[0160] Неограничивающие примеры гормональных и противогормональных средств включают антиандрогенные средства, такие как абиратерон, апалутамид, бикалутамид, даролутамид, энзалутамид, флутамид, гозерелин, лейпролид и нилутамид; антиэстрогенные средства, такие как 4-гидрокситамоксифен, ингибирующие ароматазу 4(5)-имидазолы, EM-800, фосфэстрол, фулвестранта, кеоксифен, LY 117018, онапристон, ралоксифен, тамоксифен, торемифен и триоксифен; антиадреналовые средства такие как аминоглутетимид, дексаминоглутетимид, митотан и трилостан; андрогены, такие как калустерон, дромостанолон пропионат, эпитиостанол, мепитиостан и тестолактон; абареликс; анастрозол; цетрореликс; деслорелин; экземестан; фадрозол; финастерид; форместан; гистрелин (RL 0903); хорионический гонадотропин человека; ланреотид; LDI 200 (Milkhaus); летрозол; лейпрорелин; мифепристон; нафарелин; нафоксидин; осатерон; преднизон; тиротропин альфа и трипторелин.

[0161] Неограничивающие примеры иммунотерапевтических средств (т.е. иммунотерапии) включают модификаторы биологического ответа, ингибиторы цитокинов, противоопухолевые вакцины, моноклональные антитела, ингибиторы иммунных контрольных точек, колониестимулирующие факторы и иммуномодуляторы.

[0162] Неограничивающие примеры модификаторов биологического ответа, включая ингибиторы цитокинов (цитокины), такие как интерфероны и интерлейкины, включают интерферон альфа, такой как интерферон альфа-2, интерферон альфа-2a, интерферон альфа-2b, интерферон альфа-n1, интерферон альфа-n3, интерферон альфакон-1, пегинтерферон альфа-2a, пегинтерферон альфа-2b и лейкоцитарный интерферон альфа; интерферон бета, такой как интерферон бета-1a и интерферон бета-1b; интерферон гамма, такой как природный интерферон гамма-1a и интерферон гамма-1b; алдеслейкин; интерлейкин-1 бета; интерлейкин-2; опрелвекин; сонермин; тасонермин и вирулизин.

[0163] Неограничивающие примеры противоопухолевых вакцин включают APC 8015, AVICINE, вакцину против рака мочевого пузыря, противоопухолевую вакцину (Biomira), иммуноген гастрин 17, вакцину Маруяма, вакцину на основе меланомного лизата, вакцину на основе меланомного онколизата (New York Medical College), вакцину против меланомы (New York University), вакцину против меланомы (Sloan Kettering Institute), БЦЖ TICE^® (бацилла Кальметта-Герена) и вирусную вакцину на основе меланомного клеточного лизата (Royal Newcastle Hospital).

[0164] Неограничивающие примеры моноклональных антител включают абаговомаб, адекатумумаб, афлиберцепт, алемтузумаб, блинатумомаб, брентуксимаб ведотин, CA 125 MAb (Biomira), противоопухолевое MAb (Japan Pharmaceutical Development), даклизумаб, даратумумаб, деносумаб, эдреколомаб, гемтузумаб зогамицин, MAb против HER-2 и Fc (Medarex), ибритумомаб тиуксетан, идиотипическое MAb 105AD7 (CRC Technology), идиотипическое MAb CEA (Trilex), ипилимумаб, линтузумаб, MAb LYM-1-йод 131 (Techni clone), митумомаб, моксетумомаб, офатумумаб, MAb против полиморфного эпителиального муцина- иттрий 90 (Antisoma), ранибизумаб, ритуксимаб, велтузумаб и трастузумаб.

[0165] Неограничивающие примеры ингибиторов иммунных контрольных точек включают средства или антитела против PD-1, такие как цемиплимаб, ниволумаб и пембролизумаб; средства или антитела против PD-L1, такие как атезолизумаб, авелумаб и дурвалумаб; средства или антитела против CTLA-4, такие как ипилимумаб и тремелимумаб; средства против LAG1 и средства против OX40.

[0166] Неограничивающие примеры колониестимулирующих факторов включают дарбэпоэтин альфа, эпоэтин альфа, эпоэтин бета, филграстим, гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор, ленограстим, леридистим, миримостим, молграмостин, нартограстим, пегфилграстим и сарграмостим.

[0167] Неограничивающие примеры дополнительных иммунотерапевтических средств включают BiTE, CAR-T-клетки, агонисты GITR, имиквимод, иммуномодулирующие имиды (IMiD), ошибочно спаренную двухцепочечную РНК (Ampligen), резиквимод, SRL 172 и тимальфазин.

Средства таргетированной терапии включают, например, моноклональные антитела и низкомолекулярные лекарственные средства.

[0168] Неограничивающие примеры средств таргетированной терапии включают ингибиторы передачи сигнала, ингибиторы факторов роста, ингибиторы тирозинкиназ, ингибиторы EGFR, ингибиторы HER2, ингибиторы гистоновых деацетилаз (HDAC), ингибиторы протеасом, ингибиторы клеточного цикла, ингибиторы ангиогенеза, ингибиторы матричных металлопротеиназ (MMP), ингибиторы фактора роста гепатоцитов, ингибиторы TOR, ингибиторы KDR, ингибиторы VEGF, ингибиторы фактор роста фибробластов (FGF), ингибиторы RAF, ингибиторы MEK, ингибиторы ERK, ингибиторы PI3K, ингибиторы AKT, ингибиторы MCL-1, ингибиторы BCL-2, ингибиторы SHP2, ингибиторы BRAF, ингибиторы RAS, модуляторы экспрессии генов, ингибиторы аутофагии, индукторы апоптоза, антипролиферативные средства и ингибиторы гликолиза.

[0169] Неограничивающие примеры ингибиторов передачи сигнала включают ингибиторы тирозинкиназ, ингибиторы множества киназ, анлотиниб, авапритиниб, акситиниб, дасатиниб, довитиниб, иматиниб, ленватиниб, лонидамин, нилотиниб, нинтеданиб, пазопаниб, пегвисомант, понатиниб, вандетаниб и средства, ингибирующие EGFR и/или HER2 (т.е. иные, чем соединение формулы (I) или его соль).

[0170] Неограничивающие примеры ингибиторов EGFR включают низкомолекулярные антагонисты EGFR, такие как афатиниб, бригатиниб, эрлотиниб, гефитиниб, лапатиниб, нератиниб, дакомитиниб, вандетаниб и осимертиниб, ингибиторы EGFR на основе антитело, включая любое антитело против EGFR или фрагмент антитела, которое может частично или полностью блокировать активацию EGFR его природным лигандом; и специфический антисмысловой нуклеотид или миРНК. EGFR-ингибиторные средства на основе антител могут включать, например, описанные в Modjtahedi, H., et al., 1993, Br. J. Cancer 67:247-253; Teramoto, T., et al., 1996, Cancer 77:639-645; Goldstein et al, 1995, Clin. Cancer Res. 1: 1311-1318; Huang, S. M., et al., 1999, Cancer Res. 15:59(8): 1935-40; и Yang, X., et al., 1999, Cancer Res. 59: 1236-1243; моноклональное антитело Mab E7.6.3 (Yang, 1999, выше); Mab C225 (регистрационный номер ATCC HB-8508) или антитело или фрагмент антитела, имеющий его специфичность связывания; цетуксимаб; матузумаб; нецитумумаб; нимотузумаб; панитумумаб и залутумумаб.

[0171] Неограничивающие примеры ингибиторов HER2 включают ингибиторы тирозинкиназ HER2, такие как афатиниб, лапатиниб, нератиниб и тукатиниб; и антитела против HER2 или их лекарственные конъюгаты, такие как трастузумаб, трастузумаб эмтанзина (T-DM1), пертузумаб, маргетуксимаб, трастузумаб дерукстекан (DS-8201a) и трастузумаб дуокармазин.

[0172] Неограничивающие примеры ингибиторов гистоновых деацетилаз (HDAC) включают белиностат, панобиностат, ромидепсин и вориностат.

[0173] Неограничивающие примеры ингибиторов протеасом включают бортезомиб, карфилзомиб, иксазомиб, маризомиб (салиноспорамид A) и опрозомиб.

[0174] Неограничивающие примеры ингибиторов клеточного цикла, включая ингибиторы CDK, включают абемациклиб, алвоцидиб, палбоциклиб и рибоциклиб.

[0175] Неограничивающие примеры антиангиогенных средств (или ингибиторов ангиогенеза) включают ингибиторы матричных металлопротеиназ (MMP); ингибиторы VEGF; ингибиторы EGFR; ингибиторы TOR, такие как эверолимус и темсиролимус; ингибиторы киназ PDGFR, такие как креноланиб; ингибиторы HIF-1α, такие как PX 478; ингибиторы HIF-2α, такие как белзутифан и ингибиторы HIF-2α, описанные в WO 2015/035223; ингибиторы фактора роста фибробластов (FGF) или FGFR, такие как B-FGF и RG 13577; ингибиторы фактора роста гепатоцитов; ингибиторы KDR; ингибиторные средства против Ang1 и против Ang2; ингибиторы киназ Tie2; антагонисты Tek (US 2003/0162712; US 6413932); средства против TWEAK (US 6727225); дизинтегриновый домен ADAM, антагонистически действующий на связывание интегрина с его лигандами (US 2002/0042368); антитела или антигенсвязывающие области против рецептора eph и/или против eph (US 5981245; 5728813; 5969110; 6596852; 6232447 и 6057124); и антагонисты PDGF-BB, а также антитела или антигенсвязывающие области, специфически связывающиеся с лигандами PDGF-BB.

[0176] Неограничивающие примеры ингибиторов матричных металлопротеиназ (MMP) включают ингибиторы MMP-2 (матричной металлопротеиназы 2), ингибиторы MMP-9 (матричной металлопротеиназы 9), приномастат, RO 32-3555 и RS 13-0830. Примеры пригодных ингибиторов матричных металлопротеиназ описаны, например, в WO 96/33172, WO 96/27583, EP 1004578, WO 98/07697, WO 98/03516, WO 98/34918, WO 98/34915, WO 98/33768, WO 98/30566, EP 0606046, EP 0931788, WO 90/05719, WO 99/52910, WO 99/52889, WO 99/29667, WO 1999/007675, EP 1786785, EP 1181017, US 2009/0012085, US 5863949, US 5861510 и EP 0780386. Предпочтительными ингибиторами MMP-2 и MMP-9 являются те, которые не имеют или имеют низкую активность ингибирования MMP-1. Более предпочтительными являются те, которые селективно ингибируют MMP-2 и/или MMP-9 относительно других матричных металлопротеиназ (т.е. MMP-1, MMP-3, MMP-4, MMP-5, MMP-6, MMP-7, MMP-8, MMP-10, MMP-11, MMP-12 и MMP-13).

[0177] Неограничивающие примеры VEGF- и VEGFR-ингибиторных средств включают бевацизумаб, цедираниб, CEP 7055, CP 547632, KRN 633, орантиниб, пазопаниб, пегаптаниб, пегаптаниб октанатрия, семаксаниб, сорафениб, сунитиниб, антагонист VEGF (Borean, Denmark) и VEGF-TRAP™.

[0178] Другие антиангиогенные средства могут включать, в качестве неограничивающих примеров, 2-метоксиэстрадиол, AE 941, алемтузумаб, Mab альфа-D148 (Amgen, US), альфастатин, анекортав ацетат, ангиоцидин, ингибиторы ангиогенеза (SUGEN, US), ангиостатин, Mab против Vn (Crucell, Netherlands), атипримод, акситиниб, AZD 9935, BAY RES 2690 (Bayer, Germany), BC 1 (Genoa Institute of Cancer Research, Italy), белораниб, бенефин (Lane Labs, US), кабозантиниб, CDP 791 (Celltech Group, UK), хондроитиназу AC, циленгитид, пролекарство комбретастатин A4, CP 564959 (OSI, US), CV247, CYC 381 (Harvard University, US), E 7820, EHT 0101, эндостатин, энзастаурин гидрохлорид, ER-68203-00 (IVAX, US), фрагмент фибриногена-E, Flk-1 (ImClone Systems, US), формы FLT 1 (VEGFR 1), FR-111142, GCS-100, GW 2286 (GlaxoSmithKline, UK), IL-8, иломастат, IM-862, ирсогладин, KM-2550 (Kyowa Hakko, Japan), леналидомид, ленватиниб, MAb против интегрина альфа-5-бета-3, VEGF (Xenova, UK), маримастат, маспин (Sosei, Japan), метастатин, мотупорамин C, M-PGA, омбрабулин, OXI4503, PI 88, тромбоцитарный фактор 4, PPI 2458, рамуцирумаб, rBPI 21 и антиангиогенное средство на основе BPI (XOMA, US), регорафениб, SC-236, SD-7784 (Pfizer, US), SDX 103 (University of California at San Diego, US), SG 292 (Telios, US), SU-0879 (Pfizer, US), TAN-1120, TBC-1635, тесеватиниб, тетратиомолибдат, талидомид, ингибитор тромбоспондина 1, лиганды Tie-2 (Regeneron, US), ингибиторы пути тканевого фактора (EntreMed, US), ингибиторы фактора некроза опухоли-альфа, тумстатин, TZ 93, ингибиторы урокиназного активатора плазминогена, вадимезан, вандетаниб, вазостатин, ваталаниб, антагонисты VE-кадгерина-2, ксанторизол, XL 784 (Exelixis, US), зив-афлиберцепт и ZD 6126.

[0179] Противоопухолевые средства, которые можно комбинировать с соединением формулы (I), также могут представлять собой активное средство, нарушающее или ингибирующее пути передачи сигнала RAS-RAF-ERK или PI3K-AKT-TOR или являющееся антагонистом PD-1 и/или PD-L1. Их неограничивающие примеры включают ингибитор RAF, ингибитор EGFR, ингибитор MEK, ингибитор ERK, ингибитор PI3K, ингибитор AKT, ингибитор TOR, ингибитор MCL-1, ингибитор BCL-2, ингибитор SHP2, ингибитор протеасом или иммунотерапию, включая моноклональные антитела, иммуномодулирующие имиды (IMiD), средство против PD-1, средство против PD-L1, средство против CTLA4, средство против LAG1 и средства против OX40, агонисты GITR, CAR-T-клетки и BiTE.

[0180] Неограничивающие примеры ингибиторов RAF включают дабрафениб, энкорафениб, регорафениб, сорафениб и вемурафениб.

[0181] Неограничивающие примеры ингибиторов MEK включают биниметиниб, CI-1040, кобиметиниб, PD318088, PD325901, PD334581, PD98059, рефаметиниб, селуметиниб и траметиниб.

[0182] Неограничивающие примеры ингибиторов ERK включают LY3214996, LTT462, MK-8353, SCH772984, равоксертиниб, уликсертиниб и ASTX029.

[0183] Неограничивающие примеры ингибиторов PI3K включают аналоги 17-гидроксивортманнин (например, WO 06/044453); AEZS-136; алпелисиб; AS-252424; бупарлисиб; CAL263; копанлисиб; CUDC-907; дактолисиб (WO 06/122806); деметоксивиридин; дувелисиб; GNE-477; GSK1059615; IC87114; иделалисиб; INK1117; LY294002; паломид 529; паксалисиб; перифосин; PI-103; PI-103 гидрохлорид; пиктилисиб (например, WO 09/036082; WO 09/055730); PIK 90; PWT33597; SF1126; сонолисиб; TGI 00-115; TGX-221; XL147; XL-765; вортманнин; тазелисиб (GDC-0032) и ZSTK474.

[0184] Неограничивающие примеры ингибиторов AKT включают Akt-1-1 (ингибирует Akt1) (Barnett et al. (2005) Biochem. J., 385 (Pt. 2), 399-408); Akt-1-1,2 (Barnett et al. (2005) Biochem. J. 385 (Pt. 2), 399-408); API-59CJ-Ome (например, Jin et al. (2004) Br. J. 91 Cancer 1808-12); 1-H-имидазо[4,5-c]пиридиниловые соединения (например, WO05/011700); индол-3-карбинол и его производные (например, патент США № 6656963; Sarkar and Li (2004) J Nutr. 134(12 Suppl), 3493S-3498S); перифосин (Dasmahapatra et al. (2004) Clin. Cancer Res. 10(15), 5242-52, 2004); липидные аналоги простого эфира фосфатидилинозитола (например, Gills and Dennis (2004) Expert. Opin. Investig. Drugs 13, 787-97); трицирибин (Yang et al. (2004) Cancer Res. 64, 4394-9); соединения имидазооксазона, включая гидрохлорид транс-3-амино-1-метил-3-[4-(3-фенил-5H-имидазо[1,2-c]пиридо[3,4-e][1,3]оксазин-2-ил)фенил]-циклобутанола (WO 2012/137870); афуресертиб; капивасертиб; 8-[4-(1-аминоциклобутил)фенил]-9-фенил-1,2,4-триазоло[3,4-f][1,6]нафтиридин-3(2H)-он (MK2206) и его фармацевтически приемлемые соли; AZD5363; транс-3-амино-1-метил-3-(4-(3-фенил-5H-имидазо[1,2-c]пиридо[3,4-e][1,3]оксазин-2-ил)фенил)циклобутанол (TAS-117) и его фармацевтически приемлемые соли и патасертиб.

[0185] Неограничивающие примеры ингибиторов TOR включают дефоролимус; АТФ-конкурентные ингибиторы TORC1/TORC2, включая PI-103, PP242, PP30 и торин 1; ингибиторы TOR в энхансере FKBP12, рапамицины и их производные, включая темсиролимус, эверолимус, WO 9409010; рапалоги, например, описанные в WO 98/02441 и WO 01/14387, например, AP23573, AP23464 или AP23841; 40-(2-гидроксиэтил)рапамицин, 40-[3- гидрокси(гидроксиметил)метилпропаноат]-рапамицин; 40-эпи-(тетразолил)-рапамицин (также названный ABT578); AZD8055; 32-деоксорапамицин; 16-пентинилокси-32(S)-дигидрорапамицин и другие производные, описанные в WO 05/005434; производные, описанные в US 5258389, WO 94/090101, WO 92/05179, US 5118677, US 5118678, US 5100883, US 5151413, US 5120842, WO 93/111130, WO 94/02136, WO 94/02485, WO 95/14023, WO 94/02136, WO 95/16691, WO 96/41807, WO 96/41807 и US 5256790; и фосфорсодержащие производные рапамицина (например, WO 05/016252).

[0186] Неограничивающие примеры ингибиторов MCL-1 включают AMG-176, MIK665 и S63845.

[0187] Неограничивающие примеры ингибиторов SHP2 включают JAB-3068, RMC-4630, TNO155, SHP-099, RMC-4550 и ингибиторы SHP2, описанные в WO 2019/167000, WO 2020/022323 и WO2021/033153.

[0188] Неограничивающие примеры ингибиторов RAS включают AMG510, MRTX849, LY3499446, JNJ-74699157 (ARS-3248), ARS-1620, ARS-853, RM-007 и RM-008.

[0189] Дополнительные неограничивающие примеры противоопухолевых средств, которые могут быть пригодны для использования, включают 2-этилгидразид, 2',2'-трихлортриэтиламин, ABVD, ацеглатон, ацеманнан, альдофосфамид гликозид, альфарадин, амифостин, аминолевулиновую кислоту, анагрелид, ANCER, анцестим, иммунотоксины против CD22, антитуморогенные растения, апазиквон, арглабин, триоксид мышьяка, азатиоприн, BAM 002 (Novelos), bcl-2 (Genta), бестрабуцил, бирикодар, бизантрен, бромокриптин, бросталлицин, бриостатин, бутионин сульфоксимин, каликулин, неспецифические антинеопластические блокаторы клеточного цикла, целмолейкин, клодронат, клотримазол, цитарабин окфосфат, DA 3030 (Dong-A), дефофамин, денилейкин дифтитокс, дексразоксан, диазиквон, дихлоруксусную кислоту, дилазеп, дискодермолид, доконазол, доксеркальциферол, эделфозин, эфлорнитин, EL532 (Elan), элфомитин, элсамитруцин, енилурацил, этанидазол, эксисулинд, ферругинол, восполнители фолиевой кислоты, такие как фолиновая кислота, гацитозин, нитрат галлия, комбинация гимерацил/отерацил/тегафур (S-1), гликопин, дигидрохлорид гистамина, диклофенак HIT, генотерапию HLA-B7 (Vical), фетальный альфа-фетопротеин человека, ибандронат, ибандроновую кислоту, схему химиотерапии ICE, имексон, йобенгуан, IT-101 (CRLX101), ланиквидар, LC 9018 (Yakult), лефлуномид, лентинан, левамизол+фторурацил, ловастатин, лукантон, масопрокол, меларсопрол, метоклопрамид, милтефозин, мипроксифен, митогуазон, митозоломид, мопидамол, мотексафин гадолиния, MX6 (Galderma), налоксон+пентазоцин, нитракрин, нолатрексед, октреотид NSC 631570 (Ukrain), олапариб, белок P-30, PAC-1, палифермин, памидронат, памидроновую кислоту, пентозан полисульфат натрия, фенамет, пицибанил, пиксантрон, платину, подофиллиновую кислоту, порфимер натрия, PSK (полисахарид-K), антитимоцитарное поликлональное антитело кролика, расбуриказу, ретиноевую кислоту, этидронат рения ¹⁸⁶Re, ромуртид, лексидронам самария (¹⁵³Sm), сизофиран, фенилацетат натрия, спарфозиевую кислоту, спирогерманий, хлорид стронция-89, сурамин, свайнсонин, талапорфин, тариквидар, тазаротен, тегафур-урацил, темопорфин, тенуазоновую кислоту, тетрахлордекаоксид, тромбопоэтин, этилэтиопурпурин олова, тирапазамин, TLC ELL-12, тозитумомаб-йод 131, комбинация трифлуридина и типирациал, тропонин I (Harvard University, US), уретан, валсподар, вертепорфин, золедроновую кислоту и зосуквидар.

[0190] В настоящем описании термин "HER2" включает HER2 человека или не являющегося человеком млекопитающего, и он, предпочтительно, представляет собой HER2 человека. NCBI Gene ID HER2 человека представляет собой 2064. Кроме того, термин "HER2" включает изоформы.

[0191] В настоящем описании термин "EGFR" включает EGFR человека или не являющегося человеком млекопитающего, и он, предпочтительно, представляет собой EGFR человека. NCBI Gene ID EGFR человека представляет собой 1956. Кроме того, термин "EGFR" включает изоформы.

[0192] Опухоль, являющаяся мишенью по настоящему изобретению, конкретно не ограничена, при условии, что противоопухолевое средство вызывает в отношении нее противоопухолевый эффект. Предпочтительной является опухоль, в отношении которой пиримидиновое соединение, представленное формулой (I) или его соль, вызывает противоопухолевый эффект, и более предпочтительной является злокачественная опухоль, ассоциированная с HER2, или злокачественная опухоль, ассоциированная с EGFR. В этом контексте термин "злокачественная опухоль, ассоциированная с HER2" означает злокачественную опухоль, при которой снижения частоты возникновения или ремиссии, облегчения и/или полного восстановления ее симптомов достигают посредством делеции, супрессии и/или ингибирования функции HER2. Такая злокачественная опухоль, предпочтительно, представляет собой злокачественную опухоль, имеющую гиперэкспрессию HER2, амплификацию гена HER2 или мутацию HER2. В одном из вариантов осуществления "злокачественная опухоль, ассоциированная с HER2" является HER2-положительной опухолью. Термин "злокачественная опухоль, ассоциированная с EGFR" означает злокачественную опухоль, при которой снижения частоты возникновения или ремиссии, облегчения и/или полного восстановления ее симптомов достигают посредством делеции, супрессии и/или ингибирования функции EGFR. Такая злокачественная опухоль, предпочтительно, представляет собой злокачественную опухоль, имеющую гиперэкспрессию EGFR, амплификацию гена EGFR или мутацию EGFR. В одном из вариантов осуществления "злокачественная опухоль, ассоциированная с EGFR" является EGFR-положительной опухолью. В одном из вариантов осуществления опухоль, являющаяся мишенью по настоящему изобретению, является злокачественной опухолью, имеющей гиперэкспрессию HER2, амплификацию гена HER2 или мутацию HER2, или злокачественной опухолью, имеющей гиперэкспрессию EGFR, амплификацию гена EGFR или мутацию EGFR. В одном из вариантов осуществления опухоль, являющаяся мишенью по настоящему изобретению, является HER2-положительной опухолью или EGFR-положительной опухолью.

[0193] Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к противоопухолевому средству для комбинированного введения с другим противоопухолевым средством, содержащему пиримидиновое соединение по изобретению или его соль. Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к противоопухолевому средству, включающему комбинированное введение пиримидинового соединения по изобретению или его соли и другого противоопухолевого средства. Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к комбинации (фармацевтической комбинации, комбинированному способу, комбинированному продукту или терапевтической комбинации) пиримидинового соединения по изобретению или его соли и другого противоопухолевого средства.

Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к противоопухолевому средству для комбинированного введения с другим противоопухолевым средством, содержащему пиримидиновое соединение по изобретению или его соль для лечения опухоли. Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к комбинации (фармацевтической комбинации, комбинированному способу, комбинированному продукту или терапевтической комбинации) пиримидинового соединения по изобретению или его соли и другого противоопухолевого средства для лечения опухоли. Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к применению комбинации (фармацевтической комбинации, комбинированного способа, комбинированного продукта или терапевтической комбинации) пиримидинового соединения по изобретению или его соли и другого противоопухолевого средства для лечения опухоли. Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к противоопухолевому средству, включающему введение пиримидинового соединения по изобретению или его соли пациенту с опухолью, которому вводят другое противоопухолевое средство, или пациенту с опухолью, которому будут вводить (запланировано вводить) другое противоопухолевое средство. Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к противоопухолевому средству, включающему введение другого противоопухолевого средства пациенту с опухолью, которому вводят пиримидиновое соединение по изобретению или его соль, или пациенту с опухолью, которому будут вводить (запланировано вводить) пиримидиновое соединение по изобретению или его соль.

В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения противоопухолевое средство вводят перорально.

Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к применению пиримидинового соединения по изобретению или его соли для получения лекарственного средства, используемого в комбинации с другим противоопухолевым средством в лечении опухоли. Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к применению другого противоопухолевого средства для получения лекарственного средства, используемого в комбинации с пиримидиновым соединением по изобретению или его солью в лечении опухоли. Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к применению комбинации пиримидинового соединения по изобретению или его соли и другого противоопухолевого средства для получения лекарственного средства в лечении опухоли.

Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к средству, потенцирующему противоопухолевый эффект, для потенцирования противоопухолевого эффекта другого противоопухолевого средства, содержащему пиримидиновое соединение по изобретению или его соль.

Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к пиримидиновому соединению по изобретению или его соли или применению пиримидинового соединения по изобретению или его соли в лечении опухоли, включающем комбинированное использование с другим противоопухолевым средством. Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к другому противоопухолевому средству или применению другого противоопухолевого средства в лечении опухоли, включающем комбинированное использование с пиримидиновым соединением по изобретению или его солью. Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к пиримидиновому соединению по изобретению или его соли или применению пиримидинового соединения по изобретению или его соли для лечения пациента с опухолью, которому вводят другое противоопухолевое средство, или пациенту с опухолью, которому будут вводить (запланировано вводить) другое противоопухолевое средство. Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к другому противоопухолевому средству или применению другого противоопухолевого средства для лечения пациента с опухолью, которому вводят пиримидиновое соединение по изобретению или его соль, или пациента с опухолью, которому будут вводить (запланировано вводить) пиримидиновое соединение по изобретению или его соль.

Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к комбинации противоопухолевое средство, включающей комбинированное введение пиримидинового соединения по изобретению или его соли и другого противоопухолевого средства. Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к комбинации (фармацевтической комбинации, комбинированному способу, комбинированному продукту или терапевтической комбинации) пиримидинового соединения по изобретению или его соли и другого противоопухолевого средства, где пиримидиновое соединение или его соль и другое противоопухолевое средство вводят одновременно, последовательно или с интервалом в лечении опухоли.

Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к пиримидиновому соединению по изобретению или его соли для потенцирования противоопухолевого эффекта другого противоопухолевого средства. Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к применению пиримидинового соединения по изобретению или его соли для потенцирования противоопухолевого эффекта другого противоопухолевого средства.

Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к способу лечения опухоли, включающему стадию введения пациенту терапевтически эффективного количества пиримидинового соединения по изобретению или его соли и другого противоопухолевого средства в комбинации. Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к способу лечения опухоли, включающему стадию введения эффективного количества пиримидинового соединения по изобретению или его соли и другого противоопухолевого средства нуждающемуся в этом пациенту. Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к способу лечения опухоли, включающему введение эффективного количества комбинации (фармацевтической комбинации или комбинированного продукта) пиримидинового соединения по изобретению или его соли и другого противоопухолевого средства нуждающемуся в этом пациенту. Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к способу лечения опухоли, включающему стадию введения терапевтически эффективного количества пиримидинового соединения по изобретению или его соли пациенту с опухолью, которому вводят другое противоопухолевое средство, или пациенту с опухолью, которому будут вводить (запланировано вводить) другое противоопухолевое средство. Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к способу лечения опухоли посредством комбинированного использования с другим противоопухолевым средством, включающему введение эффективного количества пиримидинового соединения по изобретению или его соли нуждающемуся в этом пациенту.

Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к фармацевтической композиции для лечения опухоли, содержащей пиримидиновое соединение по изобретению или его соль и другое противоопухолевое средство.

Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к способу лечения опухоли или способу потенцирования противоопухолевого эффекта, включающему стадию введения терапевтически эффективного количества другого противоопухолевого средства пациенту с опухолью, которому вводят пиримидиновое соединение по изобретению или его соль, или пациенту с опухолью, которому будут вводить (запланировано вводить) пиримидиновое соединение по изобретению или его соль. Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к способу потенцирования противоопухолевого эффекта, включающему стадию введения терапевтически эффективного количества пиримидинового соединения по изобретению или его соли пациенту с опухолью, которому вводят другое противоопухолевое средство, или пациенту с опухолью, которому будут вводить (запланировано вводить) пиримидиновое соединение по изобретению или его соль.

[0194] Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к противоопухолевому средству для комбинированного введения с другим противоопухолевым средством, содержащему 7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-6-(циклопропилэтинил)-N-((R)-1-фенилэтил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамид или его соль. Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к противоопухолевому средству, включающему комбинированное введение 7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-6-(циклопропилэтинил)-N-((R)-1-фенилэтил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамида или его соли и другого противоопухолевого средства. Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к комбинации (фармацевтической комбинации, комбинированному способу, комбинированному продукту или терапевтической комбинации) 7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-6-(циклопропилэтинил)-N-((R)-1-фенилэтил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамида или его соли и другого противоопухолевого средства.

Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к противоопухолевому средству для комбинированного введения с другим противоопухолевым средством, содержащему 7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-6-(циклопропилэтинил)-N-((R)-1-фенилэтил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамид или его соль для лечения опухоли. Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к комбинации (фармацевтической комбинации, комбинированному способу, комбинированному продукту или терапевтической комбинации) 7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-6-(циклопропилэтинил)-N-((R)-1-фенилэтил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамида или его соли и другого противоопухолевого средства для лечения опухоли. Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к применению комбинации (фармацевтической комбинации, комбинированного способа, комбинированного продукта или терапевтической комбинации) 7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-6-(циклопропилэтинил)-N-((R)-1-фенилэтил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамида или его соли и другого противоопухолевого средства для лечения опухоли. Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к противоопухолевому средству, включающему введение 7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-6-(циклопропилэтинил)-N-((R)-1-фенилэтил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамида или его соли пациенту с опухолью, которому вводят другое противоопухолевое средство, или пациенту с опухолью, которому будут вводить (запланировано вводить) другое противоопухолевое средство. Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к противоопухолевому средству, включающему введение другого противоопухолевого средства пациенту с опухолью, которому вводят 7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-6-(циклопропилэтинил)-N-((R)-1-фенилэтил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамид или его соль, или пациенту с опухолью, которому будут вводить (запланировано вводить) 7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-6-(циклопропилэтинил)-N-((R)-1-фенилэтил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамид или его соль.

В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения противоопухолевое средство вводят перорально.

Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к применению 7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-6-(циклопропилэтинил)-N-((R)-1-фенилэтил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамида или его соли для получения лекарственного средства, используемого в комбинации с другим противоопухолевым средством в лечении опухоли. Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к применению другого противоопухолевого средства для получения лекарственного средства, используемого в комбинации с 7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-6-(циклопропилэтинил)-N-((R)-1-фенилэтил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамидом или его солью в лечении опухоли. Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к применению комбинации 7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-6-(циклопропилэтинил)-N-((R)-1-фенилэтил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамида или его соли и другого противоопухолевого средства для получения лекарственного средства в лечении опухоли.

Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к средству, потенцирующему противоопухолевый эффект, для потенцирования противоопухолевого эффекта другого противоопухолевого средства, содержащему 7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-6-(циклопропилэтинил)-N-((R)-1-фенилэтил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамид или его соль.

Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к 7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-6-(циклопропилэтинил)-N-((R)-1-фенилэтил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамиду или его соли или применению 7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-6-(циклопропилэтинил)-N-((R)-1-фенилэтил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамида или его соли в лечении опухоли, включающем комбинированное использование с другим противоопухолевым средством. Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к другому противоопухолевому средству или применению другого противоопухолевого средства для применения в лечении опухоли, включающем комбинированное использование с 7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-6-(циклопропилэтинил)-N-((R)-1-фенилэтил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамидом или его солью. Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к 7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-6-(циклопропилэтинил)-N-((R)-1-фенилэтил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамиду или его соли или применению 7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-6-(циклопропилэтинил)-N-((R)-1-фенилэтил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамида или его соли для лечения пациента с опухолью, которому вводят другое противоопухолевое средство, или пациента с опухолью, которому будут вводить (запланировано вводить) другое противоопухолевое средство. Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к другому противоопухолевому средству или применению другого противоопухолевого средства для лечения пациента с опухолью, которому вводят 7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-6-(циклопропилэтинил)-N-((R)-1-фенилэтил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамид или его соль, или пациенту с опухолью, которому будут вводить (запланировано вводить) 7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-6-(циклопропилэтинил)-N-((R)-1-фенилэтил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамид или его соль.

Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к комбинации противоопухолевого средства, включающей комбинированное введение 7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-6-(циклопропилэтинил)-N-((R)-1-фенилэтил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамида или его соли и другого противоопухолевого средства. Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к комбинации (фармацевтической комбинации, комбинированному способу, комбинированному продукту или терапевтической комбинации) 7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-6-(циклопропилэтинил)-N-((R)-1-фенилэтил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамида или его соли и другого противоопухолевого средства, где соединение или его соль и другое противоопухолевое средство вводят одновременно, последовательно или с интервалом в лечении опухоли.

Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к 7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-6-(циклопропилэтинил)-N-((R)-1-фенилэтил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамиду или его соли для потенцирования противоопухолевого эффекта другого противоопухолевого средства. Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к применению 7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-6-(циклопропилэтинил)-N-((R)-1-фенилэтил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамида или его соли для потенцирования противоопухолевого эффекта другого противоопухолевого средства. Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к применению 7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-6-(циклопропилэтинил)-N-((R)-1-фенилэтил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамида или его соли для потенцирования противоопухолевого эффекта другого противоопухолевого средства.

Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к способу лечения опухоли, включающему стадию введения пациенту терапевтически эффективного количества 7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-6-(циклопропилэтинил)-N-((R)-1-фенилэтил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамида или его соли и другого противоопухолевого средства в комбинации. Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к способу лечения опухоли, включающему стадию введения эффективного количества 7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-6-(циклопропилэтинил)-N-((R)-1-фенилэтил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамида или его соли и другого противоопухолевого средства нуждающемуся в этом пациенту. Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к способу лечения опухоли, включающему введение эффективного количества комбинации (фармацевтической комбинации или комбинированного продукта) 7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-6-(циклопропилэтинил)-N-((R)-1-фенилэтил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамида или его соли и другого противоопухолевого средства нуждающемуся в этом пациенту. Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к способу лечения опухоли, включающему стадию введения терапевтически эффективного количества 7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-6-(циклопропилэтинил)-N-((R)-1-фенилэтил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамида или его соли пациенту с опухолью, которому вводят другое противоопухолевое средство, или пациенту с опухолью, которому будут вводить (запланировано вводить) другое противоопухолевое средство. Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к способу лечения опухоли посредством комбинированного использования с другим противоопухолевым средством, включающему введение эффективного количества 7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-6-(циклопропилэтинил)-N-((R)-1-фенилэтил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамида или его соли нуждающемуся в этом пациенту.

Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к фармацевтической композиции для лечения опухоли, содержащей 7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-6-(циклопропилэтинил)-N-((R)-1-фенилэтил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамид или его соль и другое противоопухолевое средство.

Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к способу лечения опухоли или способу потенцирования противоопухолевого эффекта, включающему стадию введения терапевтически эффективного количества другого противоопухолевого средства пациенту с опухолью, которому вводят 7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-6-(циклопропилэтинил)-N-((R)-1-фенилэтил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамид или его соль, или пациенту с опухолью, которому его будут вводить (запланировано вводить). Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к способу потенцирования противоопухолевого эффекта, включающему стадию введения терапевтически эффективного количества 7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-6-(циклопропилэтинил)-N-((R)-1-фенилэтил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамида или его соли пациенту с опухолью, которому вводят другое противоопухолевое средство, или пациенту с опухолью, которому будут вводить (запланировано вводить) другое противоопухолевое средство.

[0195] Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к противоопухолевому средству для применения в лечении злокачественной опухоли, ассоциированной с HER2, где другое противоопухолевое средство, используемое в комбинации с пиримидиновым соединением по изобретению или его солью, представляет собой по меньшей мере один антиметаболит, ингибитор Her2, ингибитор PI3K/AKT/mTOR, ингибитор CDK4/6, антагонист эстрогеновых рецепторов, лекарственное средство на основе платины или лекарственное средство на основе растительных алкалоидов.

Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к противоопухолевому средству для применения в лечении злокачественной опухоли, ассоциированной с EGFR, где другое противоопухолевое средство, используемое в комбинации с пиримидиновым соединением по изобретению или его солью, представляет собой по меньшей мере один антиметаболит, ингибитор PI3K/AKT/mTOR, ингибитор CDK4/6, антагонист эстрогеновых рецепторов, лекарственное средство на основе платины или лекарственное средство на основе растительных алкалоидов.

[0196] Противоопухолевое средство по настоящему изобретению можно использовать в послеоперационной адъювантной химиотерапии, проводимой для профилактики рецидивирования после хирургического удаления опухоли, или предоперационной адъювантной химиотерапии, проводимой для хирургического удаления опухоли.

[0197] Ген HER2 человека дикого типа показан, например, в SEQ ID NO: 1. Белок HER2 дикого типа состоит из аминокислотной последовательности, приведенной, например, в SEQ ID NO: 2. Информацию о нуклеотидной последовательности гена HER2 человека можно получать, например, из регистрационного номера NM_004448, или т.п. и информацию об аминокислотной последовательности белка HER2 дикого типа можно получать, например, из регистрационного номера NP_004439 или т.п.

[0198] В нескольких вариантах осуществления пиримидиновое соединение по изобретению или его соль демонстрирует ингибиторную активность против мутантного HER2, содержащего одну или более мутаций из G309A, S310F, R678Q, L755S, L755_T759del, D769H, A775_G776insYVMA, V777L, V842I и R896C, при использовании аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 2, в качестве референса. В другом варианте осуществления пиримидиновое соединение по изобретению или его соль демонстрирует ингибиторную активность против мутантного HER2, содержащего A775_G776insYVMA, при использовании аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 2, в качестве референса.

[0199] Кроме того, в нескольких вариантах осуществления, что касается мутации в некоторой изоформе HER2, даже если положение мутации отличается от положения аминокислоты, приведенного в SEQ ID NO: 2 из-за делеции или инсерции аминокислот, следует понимать, что мутация является той же, что и мутация в положении, соответствующем положению аминокислоты, приведенному SEQ ID NO: 2. Таким образом, например, глицин в положении 309 в HER2, приведенный в SEQ ID NO: 2, соответствует глицину в положении 294 в HER2, состоящем из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 4. Например, термин "G309A" означает, что глицин в положении 309 в HER2, приведенном в SEQ ID NO: 2, подвергнут мутации в аланин. Т.к. такой "G309" находится в положении, соответствующем аминокислоте в положении 294 в HER2, состоящем из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 4, "G294A" в HER2, состоящем из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 4, соответствует "G309A" в HER2, приведенном в SEQ ID NO: 2. Кроме того, положение аминокислоты в SEQ ID NO: 2, соответствующее некоторой аминокислоте в некоторой изоформе HER2, можно подтверждать посредством множественного сравнения в BLAST.

[0200] Список последовательностей

[Таблица A]

SEQ ID NO: 1
Регистрационный номер NM_004448
CDS: 262.4029
1 gcttgctccc aatcacagga gaaggaggag gtggaggagg agggctgctt gaggaagtat
61 aagaatgaag ttgtgaagct gagattcccc tccattggga ccggagaaac caggggagcc
121 ccccgggcag ccgcgcgccc cttcccacgg ggccctttac tgcgccgcgc gcccggcccc
181 cacccctcgc agcaccccgc gccccgcgcc ctcccagccg ggtccagccg gagccatggg
241 gccggagccg cagtgagcac catggagctg gcggccttgt gccgctgggg gctcctcctc
301 gccctcttgc cccccggagc cgcgagcacc caagtgtgca ccggcacaga catgaagctg
361 cggctccctg ccagtcccga gacccacctg gacatgctcc gccacctcta ccagggctgc
421 caggtggtgc agggaaacct ggaactcacc tacctgccca ccaatgccag cctgtccttc
481 ctgcaggata tccaggaggt gcagggctac gtgctcatcg ctcacaacca agtgaggcag
541 gtcccactgc agaggctgcg gattgtgcga ggcacccagc tctttgagga caactatgcc
601 ctggccgtgc tagacaatgg agacccgctg aacaatacca cccctgtcac aggggcctcc
661 ccaggaggcc tgcgggagct gcagcttcga agcctcacag agatcttgaa aggaggggtc
721 ttgatccagc ggaaccccca gctctgctac caggacacga ttttgtggaa ggacatcttc
781 cacaagaaca accagctggc tctcacactg atagacacca accgctctcg ggcctgccac
841 ccctgttctc cgatgtgtaa gggctcccgc tgctggggag agagttctga ggattgtcag
901 agcctgacgc gcactgtctg tgccggtggc tgtgcccgct gcaaggggcc actgcccact
961 gactgctgcc atgagcagtg tgctgccggc tgcacgggcc ccaagcactc tgactgcctg
1021 gcctgcctcc acttcaacca cagtggcatc tgtgagctgc actgcccagc cctggtcacc
1081 tacaacacag acacgtttga gtccatgccc aatcccgagg gccggtatac attcggcgcc
1141 agctgtgtga ctgcctgtcc ctacaactac ctttctacgg acgtgggatc ctgcaccctc
1201 gtctgccccc tgcacaacca agaggtgaca gcagaggatg gaacacagcg gtgtgagaag
1261 tgcagcaagc cctgtgcccg agtgtgctat ggtctgggca tggagcactt gcgagaggtg
1321 agggcagtta ccagtgccaa tatccaggag tttgctggct gcaagaagat ctttgggagc
1381 ctggcatttc tgccggagag ctttgatggg gacccagcct ccaacactgc cccgctccag
1441 ccagagcagc tccaagtgtt tgagactctg gaagagatca caggttacct atacatctca
1501 gcatggccgg acagcctgcc tgacctcagc gtcttccaga acctgcaagt aatccgggga
1561 cgaattctgc acaatggcgc ctactcgctg accctgcaag ggctgggcat cagctggctg
1621 gggctgcgct cactgaggga actgggcagt ggactggccc tcatccacca taacacccac
1681 ctctgcttcg tgcacacggt gccctgggac cagctctttc ggaacccgca ccaagctctg
1741 ctccacactg ccaaccggcc agaggacgag tgtgtgggcg agggcctggc ctgccaccag
1801 ctgtgcgccc gagggcactg ctggggtcca gggcccaccc agtgtgtcaa ctgcagccag
1861 ttccttcggg gccaggagtg cgtggaggaa tgccgagtac tgcaggggct ccccagggag
1921 tatgtgaatg ccaggcactg tttgccgtgc caccctgagt gtcagcccca gaatggctca
1981 gtgacctgtt ttggaccgga ggctgaccag tgtgtggcct gtgcccacta taaggaccct
2041 cccttctgcg tggcccgctg ccccagcggt gtgaaacctg acctctccta catgcccatc
2101 tggaagtttc cagatgagga gggcgcatgc cagccttgcc ccatcaactg cacccactcc
2161 tgtgtggacc tggatgacaa gggctgcccc gccgagcaga gagccagccc tctgacgtcc
2221 atcatctctg cggtggttgg cattctgctg gtcgtggtct tgggggtggt ctttgggatc
2281 ctcatcaagc gacggcagca gaagatccgg aagtacacga tgcggagact gctgcaggaa
2341 acggagctgg tggagccgct gacacctagc ggagcgatgc ccaaccaggc gcagatgcgg
2401 atcctgaaag agacggagct gaggaaggtg aaggtgcttg gatctggcgc ttttggcaca
2461 gtctacaagg gcatctggat ccctgatggg gagaatgtga aaattccagt ggccatcaaa
2521 gtgttgaggg aaaacacatc ccccaaagcc aacaaagaaa tcttagacga agcatacgtg
2581 atggctggtg tgggctcccc atatgtctcc cgccttctgg gcatctgcct gacatccacg
2641 gtgcagctgg tgacacagct tatgccctat ggctgcctct tagaccatgt ccgggaaaac
2701 cgcggacgcc tgggctccca ggacctgctg aactggtgta tgcagattgc caaggggatg
2761 agctacctgg aggatgtgcg gctcgtacac agggacttgg ccgctcggaa cgtgctggtc
2821 aagagtccca accatgtcaa aattacagac ttcgggctgg ctcggctgct ggacattgac
2881 gagacagagt accatgcaga tgggggcaag gtgcccatca agtggatggc gctggagtcc
2941 attctccgcc ggcggttcac ccaccagagt gatgtgtgga gttatggtgt gactgtgtgg
3001 gagctgatga cttttggggc caaaccttac gatgggatcc cagcccggga gatccctgac
3061 ctgctggaaa agggggagcg gctgccccag ccccccatct gcaccattga tgtctacatg
3121 atcatggtca aatgttggat gattgactct gaatgtcggc caagattccg ggagttggtg
3181 tctgaattct cccgcatggc cagggacccc cagcgctttg tggtcatcca gaatgaggac
3241 ttgggcccag ccagtccctt ggacagcacc ttctaccgct cactgctgga ggacgatgac
3301 atgggggacc tggtggatgc tgaggagtat ctggtacccc agcagggctt cttctgtcca
3361 gaccctgccc cgggcgctgg gggcatggtc caccacaggc accgcagctc atctaccagg
3421 agtggcggtg gggacctgac actagggctg gagccctctg aagaggaggc ccccaggtct
3481 ccactggcac cctccgaagg ggctggctcc gatgtatttg atggtgacct gggaatgggg
3541 gcagccaagg ggctgcaaag cctccccaca catgacccca gccctctaca gcggtacagt
3601 gaggacccca cagtacccct gccctctgag actgatggct acgttgcccc cctgacctgc
3661 agcccccagc ctgaatatgt gaaccagcca gatgttcggc cccagccccc ttcgccccga
3721 gagggccctc tgcctgctgc ccgacctgct ggtgccactc tggaaaggcc caagactctc
3781 tccccaggga agaatggggt cgtcaaagac gtttttgcct ttgggggtgc cgtggagaac
3841 cccgagtact tgacacccca gggaggagct gcccctcagc cccaccctcc tcctgccttc
3901 agcccagcct tcgacaacct ctattactgg gaccaggacc caccagagcg gggggctcca
3961 cccagcacct tcaaagggac acctacggca gagaacccag agtacctggg tctggacgtg
4021 ccagtgtgaa ccagaaggcc aagtccgcag aagccctgat gtgtcctcag ggagcaggga
4081 aggcctgact tctgctggca tcaagaggtg ggagggccct ccgaccactt ccaggggaac
4141 ctgccatgcc aggaacctgt cctaaggaac cttccttcct gcttgagttc ccagatggct
4201 ggaaggggtc cagcctcgtt ggaagaggaa cagcactggg gagtctttgt ggattctgag
4261 gccctgccca atgagactct agggtccagt ggatgccaca gcccagcttg gccctttcct
4321 tccagatcct gggtactgaa agccttaggg aagctggcct gagaggggaa gcggccctaa
4381 gggagtgtct aagaacaaaa gcgacccatt cagagactgt ccctgaaacc tagtactgcc
4441 ccccatgagg aaggaacagc aatggtgtca gtatccaggc tttgtacaga gtgcttttct
4501 gtttagtttt tacttttttt gttttgtttt tttaaagatg aaataaagac ccagggggag
4561 aatgggtgtt gtatggggag gcaagtgtgg ggggtccttc tccacaccca ctttgtccat
4621 ttgcaaatat attttggaaa acagctaaaa aaaaaaaaaa aaaa SEQ ID NO: 2
Регистрационный номер NM_004448
MELAALCRWG LLLALLPPGA ASTQVCTGTD MKLRLPASPE THLDMLRHLY QGCQVVQGNL 60
ELTYLPTNAS LSFLQDIQEV QGYVLIAHNQ VRQVPLQRLR IVRGTQLFED NYALAVLDNG 120
DPLNNTTPVT GASPGGLREL QLRSLTEILK GGVLIQRNPQ LCYQDTILWK DIFHKNNQLA 180
LTLIDTNRSR ACHPCSPMCK GSRCWGESSE DCQSLTRTVC AGGCARCKGP LPTDCCHEQC 240
AAGCTGPKHS DCLACLHFNH SGICELHCPA LVTYNTDTFE SMPNPEGRYT FGASCVTACP 300
YNYLSTDVGS CTLVCPLHNQ EVTAEDGTQR CEKCSKPCAR VCYGLGMEHL REVRAVTSAN 360
IQEFAGCKKI FGSLAFLPES FDGDPASNTA PLQPEQLQVF ETLEEITGYL YISAWPDSLP 420
DLSVFQNLQV IRGRILHNGA YSLTLQGLGI SWLGLRSLRE LGSGLALIHH NTHLCFVHTV 480
PWDQLFRNPH QALLHTANRP EDECVGEGLA CHQLCARGHC WGPGPTQCVN CSQFLRGQEC 540
VEECRVLQGL PREYVNARHC LPCHPECQPQ NGSVTCFGPE ADQCVACAHY KDPPFCVARC 600
PSGVKPDLSY MPIWKFPDEE GACQPCPINC THSCVDLDDK GCPAEQRASP LTSIISAVVG 660
ILLVVVLGVV FGILIKRRQQ KIRKYTMRRL LQETELVEPL TPSGAMPNQA QMRILKETEL 720
RKVKVLGSGA FGTVYKGIWI PDGENVKIPV AIKVLRENTS PKANKEILDE AYVMAGVGSP 780
YVSRLLGICL TSTVQLVTQL MPYGCLLDHV RENRGRLGSQ DLLNWCMQIA KGMSYLEDVR 840
LVHRDLAARN VLVKSPNHVK ITDFGLARLL DIDETEYHAD GGKVPIKWMA LESILRRRFT 900
HQSDVWSYGV TVWELMTFGA KPYDGIPARE IPDLLEKGER LPQPPICTID VYMIMVKCWM 960
IDSECRPRFR ELVSEFSRMA RDPQRFVVIQ NEDLGPASPL DSTFYRSLLE DDDMGDLVDA 1020
EEYLVPQQGF FCPDPAPGAG GMVHHRHRSS STRSGGGDLT LGLEPSEEEA PRSPLAPSEG 1080
AGSDVFDGDL GMGAAKGLQS LPTHDPSPLQ RYSEDPTVPL PSETDGYVAP LTCSPQPEYV 1140
NQPDVRPQPP SPREGPLPAA RPAGATLERP KTLSPGKNGV VKDVFAFGGA VENPEYLTPQ 1200
GGAAPQPHPP PAFSPAFDNL YYWDQDPPER GAPPSTFKGT PTAENPEYLG LDVPV 1255 SEQ ID NO: 3
Регистрационный номер NM_001289936
CDS: 583.4305
1 aagttcctgt gttctttatt ctactctccg ctgaagtcca cacagtttaa attaaagttc
61 ccggattttt gtgggcgcct gccccgcccc tcgtccccct gctgtgtcca tatatcgagg
121 cgatagggtt aagggaaggc ggacgcctga tgggttaatg agcaaactga agtgttttcc
181 atgatctttt ttgagtcgca attgaagtac cacctcccga gggtgattgc ttccccatgc
241 ggggtagaac ctttgctgtc ctgttcacca ctctacctcc agcacagaat ttggcttatg
301 cctactcaat gtgaagatga tgaggatgaa aacctttgtg atgatccact tccacttaat
361 gaatggtggc aaagcaaagc tatattcaag accacatgca aagctactcc ctgagcaaag
421 agtcacagat aaaacggggg caccagtaga atggccagga caaacgcagt gcagcacaga
481 gactcagacc ctggcagcca tgcctgcgca ggcagtgatg agagtgacat gtactgttgt
541 ggacatgcac aaaagtgaga tacttcaaag attccagaag atatgccccg ggggtcctgg
601 aagccacaag tgtgcaccgg cacagacatg aagctgcggc tccctgccag tcccgagacc
661 cacctggaca tgctccgcca cctctaccag ggctgccagg tggtgcaggg aaacctggaa
721 ctcacctacc tgcccaccaa tgccagcctg tccttcctgc aggatatcca ggaggtgcag
781 ggctacgtgc tcatcgctca caaccaagtg aggcaggtcc cactgcagag gctgcggatt
841 gtgcgaggca cccagctctt tgaggacaac tatgccctgg ccgtgctaga caatggagac
901 ccgctgaaca ataccacccc tgtcacaggg gcctccccag gaggcctgcg ggagctgcag
961 cttcgaagcc tcacagagat cttgaaagga ggggtcttga tccagcggaa cccccagctc
1021 tgctaccagg acacgatttt gtggaaggac atcttccaca agaacaacca gctggctctc
1081 acactgatag acaccaaccg ctctcgggcc tgccacccct gttctccgat gtgtaagggc
1141 tcccgctgct ggggagagag ttctgaggat tgtcagagcc tgacgcgcac tgtctgtgcc
1201 ggtggctgtg cccgctgcaa ggggccactg cccactgact gctgccatga gcagtgtgct
1261 gccggctgca cgggccccaa gcactctgac tgcctggcct gcctccactt caaccacagt
1321 ggcatctgtg agctgcactg cccagccctg gtcacctaca acacagacac gtttgagtcc
1381 atgcccaatc ccgagggccg gtatacattc ggcgccagct gtgtgactgc ctgtccctac
1441 aactaccttt ctacggacgt gggatcctgc accctcgtct gccccctgca caaccaagag
1501 gtgacagcag aggatggaac acagcggtgt gagaagtgca gcaagccctg tgcccgagtg
1561 tgctatggtc tgggcatgga gcacttgcga gaggtgaggg cagttaccag tgccaatatc1621 caggagtttg ctggctgcaa gaagatcttt gggagcctgg catttctgcc ggagagcttt
1681 gatggggacc cagcctccaa cactgccccg ctccagccag agcagctcca agtgtttgag
1741 actctggaag agatcacagg ttacctatac atctcagcat ggccggacag cctgcctgac
1801 ctcagcgtct tccagaacct gcaagtaatc cggggacgaa ttctgcacaa tggcgcctac
1861 tcgctgaccc tgcaagggct gggcatcagc tggctggggc tgcgctcact gagggaactg
1921 ggcagtggac tggccctcat ccaccataac acccacctct gcttcgtgca cacggtgccc
1981 tgggaccagc tctttcggaa cccgcaccaa gctctgctcc acactgccaa ccggccagag
2041 gacgagtgtg tgggcgaggg cctggcctgc caccagctgt gcgcccgagg gcactgctgg
2101 ggtccagggc ccacccagtg tgtcaactgc agccagttcc ttcggggcca ggagtgcgtg
2161 gaggaatgcc gagtactgca ggggctcccc agggagtatg tgaatgccag gcactgtttg
2221 ccgtgccacc ctgagtgtca gccccagaat ggctcagtga cctgttttgg accggaggct
2281 gaccagtgtg tggcctgtgc ccactataag gaccctccct tctgcgtggc ccgctgcccc
2341 agcggtgtga aacctgacct ctcctacatg cccatctgga agtttccaga tgaggagggc
2401 gcatgccagc cttgccccat caactgcacc cactcctgtg tggacctgga tgacaagggc
2461 tgccccgccg agcagagagc cagccctctg acgtccatca tctctgcggt ggttggcatt
2521 ctgctggtcg tggtcttggg ggtggtcttt gggatcctca tcaagcgacg gcagcagaag
2581 atccggaagt acacgatgcg gagactgctg caggaaacgg agctggtgga gccgctgaca
2641 cctagcggag cgatgcccaa ccaggcgcag atgcggatcc tgaaagagac ggagctgagg
2701 aaggtgaagg tgcttggatc tggcgctttt ggcacagtct acaagggcat ctggatccct
2761 gatggggaga atgtgaaaat tccagtggcc atcaaagtgt tgagggaaaa cacatccccc
2821 aaagccaaca aagaaatctt agacgaagca tacgtgatgg ctggtgtggg ctccccatat
2881 gtctcccgcc ttctgggcat ctgcctgaca tccacggtgc agctggtgac acagcttatg
2941 ccctatggct gcctcttaga ccatgtccgg gaaaaccgcg gacgcctggg ctcccaggac
3001 ctgctgaact ggtgtatgca gattgccaag gggatgagct acctggagga tgtgcggctc
3061 gtacacaggg acttggccgc tcggaacgtg ctggtcaaga gtcccaacca tgtcaaaatt
3121 acagacttcg ggctggctcg gctgctggac attgacgaga cagagtacca tgcagatggg
3181 ggcaaggtgc ccatcaagtg gatggcgctg gagtccattc tccgccggcg gttcacccac
3241 cagagtgatg tgtggagtta tggtgtgact gtgtgggagc tgatgacttt tggggccaaa
3301 ccttacgatg ggatcccagc ccgggagatc cctgacctgc tggaaaaggg ggagcggctg
3361 ccccagcccc ccatctgcac cattgatgtc tacatgatca tggtcaaatg ttggatgatt
3421 gactctgaat gtcggccaag attccgggag ttggtgtctg aattctcccg catggccagg
3481 gacccccagc gctttgtggt catccagaat gaggacttgg gcccagccag tcccttggac
3541 agcaccttct accgctcact gctggaggac gatgacatgg gggacctggt ggatgctgag
3601 gagtatctgg taccccagca gggcttcttc tgtccagacc ctgccccggg cgctgggggc
3661 atggtccacc acaggcaccg cagctcatct accaggagtg gcggtgggga cctgacacta
3721 gggctggagc cctctgaaga ggaggccccc aggtctccac tggcaccctc cgaaggggct
3781 ggctccgatg tatttgatgg tgacctggga atgggggcag ccaaggggct gcaaagcctc
3841 cccacacatg accccagccc tctacagcgg tacagtgagg accccacagt acccctgccc
3901 tctgagactg atggctacgt tgcccccctg acctgcagcc cccagcctga atatgtgaac
3961 cagccagatg ttcggcccca gcccccttcg ccccgagagg gccctctgcc tgctgcccga
4021 cctgctggtg ccactctgga aaggcccaag actctctccc cagggaagaa tggggtcgtc
4081 aaagacgttt ttgcctttgg gggtgccgtg gagaaccccg agtacttgac accccaggga
4141 ggagctgccc ctcagcccca ccctcctcct gccttcagcc cagccttcga caacctctat
4201 tactgggacc aggacccacc agagcggggg gctccaccca gcaccttcaa agggacacct
4261 acggcagaga acccagagta cctgggtctg gacgtgccag tgtgaaccag aaggccaagt
4321 ccgcagaagc cctgatgtgt cctcagggag cagggaaggc ctgacttctg ctggcatcaa
4381 gaggtgggag ggccctccga ccacttccag gggaacctgc catgccagga acctgtccta
4441 aggaaccttc cttcctgctt gagttcccag atggctggaa ggggtccagc ctcgttggaa
4501 gaggaacagc actggggagt ctttgtggat tctgaggccc tgcccaatga gactctaggg
4561 tccagtggat gccacagccc agcttggccc tttccttcca gatcctgggt actgaaagcc
4621 ttagggaagc tggcctgaga ggggaagcgg ccctaaggga gtgtctaaga acaaaagcga
4681 cccattcaga gactgtccct gaaacctagt actgcccccc atgaggaagg aacagcaatg
4741 gtgtcagtat ccaggctttg tacagagtgc ttttctgttt agtttttact ttttttgttt
4801 tgttttttta aagatgaaat aaagacccag ggggagaatg ggtgttgtat ggggaggcaa
4861 gtgtgggggg tccttctcca cacccacttt gtccatttgc aaatatattt tggaaaacag
4921 ctaaaaaaaa aaaaaaaaaa SEQ ID NO: 4
Регистраицонный номер NM_001289936
MPRGSWKPQV CTGTDMKLRL PASPETHLDM LRHLYQGCQV VQGNLELTYL PTNASLSFLQ 60
DIQEVQGYVL IAHNQVRQVP LQRLRIVRGT QLFEDNYALA VLDNGDPLNN TTPVTGASPG 120
GLRELQLRSL TEILKGGVLI QRNPQLCYQD TILWKDIFHK NNQLALTLID TNRSRACHPC 180
SPMCKGSRCW GESSEDCQSL TRTVCAGGCA RCKGPLPTDC CHEQCAAGCT GPKHSDCLAC 240
LHFNHSGICE LHCPALVTYN TDTFESMPNP EGRYTFGASC VTACPYNYLS TDVGSCTLVC 300
PLHNQEVTAE DGTQRCEKCS KPCARVCYGL GMEHLREVRA VTSANIQEFA GCKKIFGSLA 360
FLPESFDGDP ASNTAPLQPE QLQVFETLEE ITGYLYISAW PDSLPDLSVF QNLQVIRGRI 420
LHNGAYSLTL QGLGISWLGL RSLRELGSGL ALIHHNTHLC FVHTVPWDQL FRNPHQALLH 480
TANRPEDECV GEGLACHQLC ARGHCWGPGP TQCVNCSQFL RGQECVEECR VLQGLPREYV 540
NARHCLPCHP ECQPQNGSVT CFGPEADQCV ACAHYKDPPF CVARCPSGVK PDLSYMPIWK 600
FPDEEGACQP CPINCTHSCV DLDDKGCPAE QRASPLTSII SAVVGILLVV VLGVVFGILI 660
KRRQQKIRKY TMRRLLQETE LVEPLTPSGA MPNQAQMRIL KETELRKVKV LGSGAFGTVY 720
KGIWIPDGEN VKIPVAIKVL RENTSPKANK EILDEAYVMA GVGSPYVSRL LGICLTSTVQ 780
LVTQLMPYGC LLDHVRENRG RLGSQDLLNW CMQIAKGMSY LEDVRLVHRD LAARNVLVKS 840
PNHVKITDFG LARLLDIDET EYHADGGKVP IKWMALESIL RRRFTHQSDV WSYGVTVWEL 900
MTFGAKPYDG IPAREIPDLL EKGERLPQPP ICTIDVYMIM VKCWMIDSEC RPRFRELVSE 960
FSRMARDPQR FVVIQNEDLG PASPLDSTFY RSLLEDDDMG DLVDAEEYLV PQQGFFCPDP 1020
APGAGGMVHH RHRSSSTRSG GGDLTLGLEP SEEEAPRSPL APSEGAGSDV FDGDLGMGAA 1080
KGLQSLPTHD PSPLQRYSED PTVPLPSETD GYVAPLTCSP QPEYVNQPDV RPQPPSPREG 1140
PLPAARPAGA TLERPKTLSP GKNGVVKDVF AFGGAVENPE YLTPQGGAAP QPHPPPAFSP 1200
AFDNLYYWDQ DPPERGAPPS TFKGTPTAEN PEYLGLDVPV 1240

[0201] Ген EGFR человека дикого типа приведен, например, в SEQ ID NO: 5. Белок EGFR человека дикого типа состоит из аминокислотной последовательности, приведенной, например, в SEQ ID NO: 6. Информацию о нуклеотидной последовательности гена EGFR человека дикого типа можно получать, например, из референсной последовательности NCBI: NM_005228 или т.п., и информацию об аминокислотной последовательности белка EGFR человека дикого типа можно получать, например, из референсной последовательности NCBI: NP_005219 или т.п.

[0202] В нескольких вариантах осуществления пиримидиновое соединение по изобретению или его соль демонстрирует ингибиторную активность против мутантного EGFR. В настоящем описании "мутантный EGFR" является EGFR, имеющим одну или более активирующих мутаций или мутаций приобретения резистентности, таких как инсерционные мутации, точечные мутации или делеционные мутации, в области экзон 18, области экзона 19, области экзона 20, области экзона 21 или т.п. EGFR человека дикого типа.

[0203] В настоящем описании "экзон 18" соответствует области положений 688-728 в аминокислотной последовательности белка EGFR человека дикого типа (например, белка, состоящего из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 6).

[0204] В настоящем изобретении термин "мутация в экзоне 18" относится к точечной мутации или делеционной мутации в области экзона 18, приводящей к мутации аминокислоты в белке EGFR человека дикого типа (например, белке, состоящем из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 6). Примеры точечной мутации в экзоне 18 включают точечную мутацию E709X или G719X в области экзона 18, приводящую к замене глутаминовой кислоты в положении 709 или глицина в положении 719 любой аминокислотой. Примеры E709X включают точечную мутацию E709K в области экзона 18, приводящую к замене глутаминовой кислоты в положении 709 лизином, и точечную мутацию E709A в области экзона 18, приводящую к замене глутаминовой кислоты в положении 709 аланином. Примеры G719X включают точечную мутацию G719A в области экзона 18, приводящую к замене глицина в положении 719 аланином, точечную мутацию G719S в области экзона 18, приводящую к замене глицина в положении 719 серином, и точечную мутацию G719C в области экзона 18, приводящую к замене глицина в положении 719 цистеином. Делеционная мутация в области экзона 18 включает не только мутацию в области экзона 18, приводящую к делеции некоторых аминокислот, но также мутации в них, приводящую к инсерции любой одной или более аминокислот в дополнение к делеции аминокислот. Примеры делеционной мутации в экзоне 18 включают мутацию в области экзона 18, приводящую к делеции глутаминовой кислоты в положении 709 и треонина в положении 710, а затем инсерции аспарагиновой кислоты (Del E709-T710insD).

[0205] В настоящем описании "экзон 19" соответствует области положений 729-761 в аминокислотной последовательности белка EGFR человека дикого типа (например, белка, состоящего из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 6).

[0206] В настоящем описании термин "мутация в экзоне 19" относится к мутации в области экзона 19, приводящей к делеции одной или более аминокислот в белке EGFR человека дикого типа (например, белке, состоящем из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 6). Делеционная мутация в области экзона 19 включает не только мутацию в области экзона 19, приводящую к делеции некоторых аминокислот, но также мутации в них, приводящей к инсерции любой одной или более аминокислот в дополнение к делеции аминокислот. Примеры делеционной мутации в экзоне 19 включают мутацию в области экзона 19, приводящую к делеции 5 аминокислот от глутаминовой кислоты в положении 746 до аланина в положении 750 (Del E746-A750 (или также обозначаемой как d746-750)), мутацию в области экзона 19, приводящую к делеции 7 аминокислот от лейцина в положении 747 до пролина в положении 753, а затем инсерции серина (Del L747-P753insS), мутацию в области экзона 19, приводящую к делеции 5 аминокислот от лейцина в положении 747 до треонина в положении 751 (Del L747-T751), и мутацию в области экзона 19, приводящую к делеции 4 аминокислот от лейцина в положении 747 до аланина в положении 750, а затем инсерции пролина (Del L747-A750insP). В одном из предпочтительных вариантов осуществления настоящего изобретения делеционная мутация в экзоне 19 является мутацией в области экзона 19, приводящей к делеции 5 аминокислот от глутаминовой кислоты в положении 746 до аланина в положении 750 (Del E746-A750).

[0207] В настоящем описании "экзон 20" соответствует области положений 762-823 в аминокислотной последовательности белка EGFR человека дикого типа (например, белка, состоящего из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 6).

[0208] В настоящем изобретении термин "мутация в экзоне 20" относится к точечной мутации, инсерционной мутации, делеционной мутации или т.п. в области экзона 20, приводящей к мутации аминокислоты в белке EGFR человека дикого типа (например, белке, состоящем из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 6). Примеры мутации в экзоне 20 включают A763insFQEA, A767insASV, S768dupSVD, V769insASV, D770insNPG, D770insSVD и D773insNPH (Nature medicine, 24, p638-646, 2018). В одном из предпочтительных вариантов осуществления настоящего изобретения мутация в экзоне 20 является одной или более инсерционными мутациями или точечными мутациями, выбранными из V769_D770insASV, D770_N771insNPG, D770_N771insSVD, H773_V774insNPH и T790M.

[0209] В настоящем описании "экзон 21" соответствует области положений 824-875 в аминокислотной последовательности белка EGFR человека дикого типа (например, белка, состоящего из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 6).

[0210] В настоящем изобретении термин "мутация в экзоне 21" относится к точечной мутации в области экзона 21, приводящей к мутации аминокислоты в белке EGFR человека дикого типа (например, белке, состоящем из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 6). Примеры точечной мутации в экзоне 21 включают точечные мутации в области экзона 21, приводящие к замене одной аминокислоты и, предпочтительно, включающие положение мутаций L858X или L861X в области экзона 21, приводящих к замене лейцина в положении 858 или лейцина в положении 861 любой аминокислотой. Примеры L858X включают точечную мутацию L858R в области экзона 21, приводящую к замене лейцина в положении 858 аргинином. Примеры L861X включают точечную мутацию L861Q в области экзона 21, приводящую к замене лейцина в положении 861 глутамином. В одном из предпочтительных вариантов осуществления настоящего изобретения точечная мутация в экзоне 21 является L858R.

[0211] В нескольких вариантах осуществления, что касается мутации в некоторой изоформе EGFR, даже если положение мутации отличается от положения аминокислоты, приведенного в SEQ ID NO: 6, из-за делеции или инсерции аминокислот, следует понимать, что мутация является той же, что и мутация в положении, соответствующем положению аминокислоты, приведенному в SEQ ID NO: 6. Таким образом, например, треонин в положении 790 в EGFR, приведенном в SEQ ID NO: 6, соответствует треонину в положении 745 в EGFR, состоящем из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 8. Например, термин "T790M" означает, что треонин в положении 790 в EGFR, приведенном в SEQ ID NO: 6, подвергнут мутации в метионин. Т.к. такая "T790M" находится в положении, соответствующем аминокислоте в положении 745 в EGFR, состоящем из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 8, "T745M" в EGFR, состоящем из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 8, соответствует "T790M" в EGFR, приведенном в SEQ ID NO: 6. Например, треонин в положении 790 в EGFR, приведенном в SEQ ID NO: 6, соответствует треонину в положении 523 в EGFR, состоящем из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 10. Например, термин "T790M" означает, что треонин в положении 790 в EGFR, приведенном в SEQ ID NO: 6, подвергнут мутации в метионин. Т.к. такая "T790M" находится в положении, соответствующем аминокислоте в положении 523 в EGFR, состоящем из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 10, "T523M" в EGFR, состоящем из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 10, соответствует "T790M" в EGFR, приведенном в SEQ ID NO: 6. Кроме того, положение аминокислоты в SEQ ID NO: 6, соответствующее некоторой аминокислоте в некоторой изоформе EGFR, можно подтверждать посредством множественного выравнивания BLAST.

[Таблица B]

Вариант 1 EGFR
Нуклеотидная последовательность (SEQ ID NO: 5)
ATGCGACCCTCCGGGACGGCCGGGGCAGCGCTCCTGGCGCTGCTGGCTGCGCTCTGCCCGGCGAGTCGGGCTCTGGAGGAAAAGAAAGTTTGCCAAGGCACGAGTAACAAGCTCACGCAGTTGGGCACTTTTGAAGATCATTTTCTCAGCCTCCAGAGGATGTTCAATAACTGTGAGGTGGTCCTTGGGAATTTGGAAATTACCTATGTGCAGAGGAATTATGATCTTTCCTTCTTAAAGACCATCCAGGAGGTGGCTGGTTATGTCCTCATTGCCCTCAACACAGTGGAGCGAATTCCTTTGGAAAACCTGCAGATCATCAGAGGAAATATGTACTACGAAAATTCCTATGCCTTAGCAGTCTTATCTAACTATGATGCAAATAAAACCGGACTGAAGGAGCTGCCCATGAGAAATTTACAGGAAATCCTGCATGGCGCCGTGCGGTTCAGCAACAACCCTGCCCTGTGCAACGTGGAGAGCATCCAGTGGCGGGACATAGTCAGCAGTGACTTTCTCAGCAACATGTCGATGGACTTCCAGAACCACCTGGGCAGCTGCCAAAAGTGTGATCCAAGCTGTCCCAATGGGAGCTGCTGGGGTGCAGGAGAGGAGAACTGCCAGAAACTGACCAAAATCATCTGTGCCCAGCAGTGCTCCGGGCGCTGCCGTGGCAAGTCCCCCAGTGACTGCTGCCACAACCAGTGTGCTGCAGGCTGCACAGGCCCCCGGGAGAGCGACTGCCTGGTCTGCCGCAAATTCCGAGACGAAGCCACGTGCAAGGACACCTGCCCCCCACTCATGCTCTACAACCCCACCACGTACCAGATGGATGTGAACCCCGAGGGCAAATACAGCTTTGGTGCCACCTGCGTGAAGAAGTGTCCCCGTAATTATGTGGTGACAGATCACGGCTCGTGCGTCCGAGCCTGTGGGGCCGACAGCTATGAGATGGAGGAAGACGGCGTCCGCAAGTGTAAGAAGTGCGAAGGGCCTTGCCGCAAAGTGTGTAACGGAATAGGTATTGGTGAATTTAAAGACTCACTCTCCATAAATGCTACGAATATTAAACACTTCAAAAACTGCACCTCCATCAGTGGCGATCTCCACATCCTGCCGGTGGCATTTAGGGGTGACTCCTTCACACATACTCCTCCTCTGGATCCACAGGAACTGGATATTCTGAAAACCGTAAAGGAAATCACAGGGTTTTTGCTGATTCAGGCTTGGCCTGAAAACAGGACGGACCTCCATGCCTTTGAGAACCTAGAAATCATACGCGGCAGGACCAAGCAACATGGTCAGTTTTCTCTTGCAGTCGTCAGCCTGAACATAACATCCTTGGGATTACGCTCCCTCAAGGAGATAAGTGATGGAGATGTGATAATTTCAGGAAACAAAAATTTGTGCTATGCAAATACAATAAACTGGAAAAAACTGTTTGGGACCTCCGGTCAGAAAACCAAAATTATAAGCAACAGAGGTGAAAACAGCTGCAAGGCCACAGGCCAGGTCTGCCATGCCTTGTGCTCCCCCGAGGGCTGCTGGGGCCCGGAGCCCAGGGACTGCGTCTCTTGCCGGAATGTCAGCCGAGGCAGGGAATGCGTGGACAAGTGCAACCTTCTGGAGGGTGAGCCAAGGGAGTTTGTGGAGAACTCTGAGTGCATACAGTGCCACCCAGAGTGCCTGCCTCAGGCCATGAACATCACCTGCACAGGACGGGGACCAGACAACTGTATCCAGTGTGCCCACTACATTGACGGCCCCCACTGCGTCAAGACCTGCCCGGCAGGAGTCATGGGAGAAAACAACACCCTGGTCTGGAAGTACGCAGACGCCGGCCATGTGTGCCACCTGTGCCATCCAAACTGCACCTACGGATGCACTGGGCCAGGTCTTGAAGGCTGTCCAACGAATGGGCCTAAGATCCCGTCCATCGCCACTGGGATGGTGGGGGCCCTCCTCTTGCTGCTGGTGGTGGCCCTGGGGATCGGCCTCTTCATGCGAAGGCGCCACATCGTTCGGAAGCGCACGCTGCGGAGGCTGCTGCAGGAGAGGGAGCTTGTGGAGCCTCTTACACCCAGTGGAGAAGCTCCCAACCAAGCTCTCTTGAGGATCTTGAAGGAAACTGAATTCAAAAAGATCAAAGTGCTGGGCTCCGGTGCGTTCGGCACGGTGTATAAGGGACTCTGGATCCCAGAAGGTGAGAAAGTTAAAATTCCCGTCGCTATCAAGGAATTAAGAGAAGCAACATCTCCGAAAGCCAACAAGGAAATCCTCGATGAAGCCTACGTGATGGCCAGCGTGGACAACCCCCACGTGTGCCGCCTGCTGGGCATCTGCCTCACCTCCACCGTGCAGCTCATCACGCAGCTCATGCCCTTCGGCTGCCTCCTGGACTATGTCCGGGAACACAAAGACAATATTGGCTCCCAGTACCTGCTCAACTGGTGTGTGCAGATCGCAAAGGGCATGAACTACTTGGAGGACCGTCGCTTGGTGCACCGCGACCTGGCAGCCAGGAACGTACTGGTGAAAACACCGCAGCATGTCAAGATCACAGATTTTGGGCTGGCCAAACTGCTGGGTGCGGAAGAGAAAGAATACCATGCAGAAGGAGGCAAAGTGCCTATCAAGTGGATGGCATTGGAATCAATTTTACACAGAATCTATACCCACCAGAGTGATGTCTGGAGCTACGGGGTGACTGTTTGGGAGTTGATGACCTTTGGATCCAAGCCATATGACGGAATCCCTGCCAGCGAGATCTCCTCCATCCTGGAGAAAGGAGAACGCCTCCCTCAGCCACCCATATGTACCATCGATGTCTACATGATCATGGTCAAGTGCTGGATGATAGACGCAGATAGTCGCCCAAAGTTCCGTGAGTTGATCATCGAATTCTCCAAAATGGCCCGAGACCCCCAGCGCTACCTTGTCATTCAGGGGGATGAAAGAATGCATTTGCCAAGTCCTACAGACTCCAACTTCTACCGTGCCCTGATGGATGAAGAAGACATGGACGACGTGGTGGATGCCGACGAGTACCTCATCCCACAGCAGGGCTTCTTCAGCAGCCCCTCCACGTCACGGACTCCCCTCCTGAGCTCTCTGAGTGCAACCAGCAACAATTCCACCGTGGCTTGCATTGATAGAAATGGGCTGCAAAGCTGTCCCATCAAGGAAGACAGCTTCTTGCAGCGATACAGCTCAGACCCCACAGGCGCCTTGACTGAGGACAGCATAGACGACACCTTCCTCCCAGTGCCTGAATACATAAACCAGTCCGTTCCCAAAAGGCCCGCTGGCTCTGTGCAGAATCCTGTCTATCACAATCAGCCTCTGAACCCCGCGCCCAGCAGAGACCCACACTACCAGGACCCCCACAGCACTGCAGTGGGCAACCCCGAGTATCTCAACACTGTCCAGCCCACCTGTGTCAACAGCACATTCGACAGCCCTGCCCACTGGGCCCAGAAAGGCAGCCACCAAATTAGCCTGGACAACCCTGACTACCAGCAGGACTTCTTTCCCAAGGAAGCCAAGCCAAATGGCATCTTTAAGGGCTCCACAGCTGAAAATGCAGAATACCTAAGGGTCGCGCCACAAAGCAGTGAATTTATTGGAGCATGA
Аминокислотная последовательность (SEQ ID NO: 6)
MRPSGTAGAALLALLAALCPASRALEEKKVCQGTSNKLTQLGTFEDHFLSLQRMFNNCEVVLGNLEITYVQRNYDLSFLKTIQEVAGYVLIALNTVERIPLENLQIIRGNMYYENSYALAVLSNYDANKTGLKELPMRNLQEILHGAVRFSNNPALCNVESIQWRDIVSSDFLSNMSMDFQNHLGSCQKCDPSCPNGSCWGAGEENCQKLTKIICAQQCSGRCRGKSPSDCCHNQCAAGCTGPRESDCLVCRKFRDEATCKDTCPPLMLYNPTTYQMDVNPEGKYSFGATCVKKCPRNYVVTDHGSCVRACGADSYEMEEDGVRKCKKCEGPCRKVCNGIGIGEFKDSLSINATNIKHFKNCTSISGDLHILPVAFRGDSFTHTPPLDPQELDILKTVKEITGFLLIQAWPENRTDLHAFENLEIIRGRTKQHGQFSLAVVSLNITSLGLRSLKEISDGDVIISGNKNLCYANTINWKKLFGTSGQKTKIISNRGENSCKATGQVCHALCSPEGCWGPEPRDCVSCRNVSRGRECVDKCNLLEGEPREFVENSECIQCHPECLPQAMNITCTGRGPDNCIQCAHYIDGPHCVKTCPAGVMGENNTLVWKYADAGHVCHLCHPNCTYGCTGPGLEGCPTNGPKIPSIATGMVGALLLLLVVALGIGLFMRRRHIVRKRTLRRLLQERELVEPLTPSGEAPNQALLRILKETEFKKIKVLGSGAFGTVYKGLWIPEGEKVKIPVAIKELREATSPKANKEILDEAYVMASVDNPHVCRLLGICLTSTVQLITQLMPFGCLLDYVREHKDNIGSQYLLNWCVQIAKGMNYLEDRRLVHRDLAARNVLVKTPQHVKITDFGLAKLLGAEEKEYHAEGGKVPIKWMALESILHRIYTHQSDVWSYGVTVWELMTFGSKPYDGIPASEISSILEKGERLPQPPICTIDVYMIMVKCWMIDADSRPKFRELIIEFSKMARDPQRYLVIQGDERMHLPSPTDSNFYRALMDEEDMDDVVDADEYLIPQQGFFSSPSTSRTPLLSSLSATSNNSTVACIDRNGLQSCPIKEDSFLQRYSSDPTGALTEDSIDDTFLPVPEYINQSVPKRPAGSVQNPVYHNQPLNPAPSRDPHYQDPHSTAVGNPEYLNTVQPTCVNSTFDSPAHWAQKGSHQISLDNPDYQQDFFPKEAKPNGIFKGSTAENAEYLRVAPQSSEFIGA Вариант 5 EGFR
Нуклеотидная последовательность (SEQ ID NO: 7)
ATGCGACCCTCCGGGACGGCCGGGGCAGCGCTCCTGGCGCTGCTGGCTGCGCTCTGCCCGGCGAGTCGGGCTCTGGAGGAAAAGAAAGTTTGCCAAGGCACGAGTAACAAGCTCACGCAGTTGGGCACTTTTGAAGATCATTTTCTCAGCCTCCAGAGGATGTTCAATAACTGTGAGGTGGTCCTTGGGAATTTGGAAATTACCTATGTGCAGAGGAATTATGATCTTTCCTTCTTAAAGACCATCCAGGAGGTGGCTGGTTATGTCCTCATTGCCCTCAACACAGTGGAGCGAATTCCTTTGGAAAACCTGCAGATCATCAGAGGAAATATGTACTACGAAAATTCCTATGCCTTAGCAGTCTTATCTAACTATGATGCAAATAAAACCGGACTGAAGGAGCTGCCCATGAGAAATTTACAGGGCCAAAAGTGTGATCCAAGCTGTCCCAATGGGAGCTGCTGGGGTGCAGGAGAGGAGAACTGCCAGAAACTGACCAAAATCATCTGTGCCCAGCAGTGCTCCGGGCGCTGCCGTGGCAAGTCCCCCAGTGACTGCTGCCACAACCAGTGTGCTGCAGGCTGCACAGGCCCCCGGGAGAGCGACTGCCTGGTCTGCCGCAAATTCCGAGACGAAGCCACGTGCAAGGACACCTGCCCCCCACTCATGCTCTACAACCCCACCACGTACCAGATGGATGTGAACCCCGAGGGCAAATACAGCTTTGGTGCCACCTGCGTGAAGAAGTGTCCCCGTAATTATGTGGTGACAGATCACGGCTCGTGCGTCCGAGCCTGTGGGGCCGACAGCTATGAGATGGAGGAAGACGGCGTCCGCAAGTGTAAGAAGTGCGAAGGGCCTTGCCGCAAAGTGTGTAACGGAATAGGTATTGGTGAATTTAAAGACTCACTCTCCATAAATGCTACGAATATTAAACACTTCAAAAACTGCACCTCCATCAGTGGCGATCTCCACATCCTGCCGGTGGCATTTAGGGGTGACTCCTTCACACATACTCCTCCTCTGGATCCACAGGAACTGGATATTCTGAAAACCGTAAAGGAAATCACAGGGTTTTTGCTGATTCAGGCTTGGCCTGAAAACAGGACGGACCTCCATGCCTTTGAGAACCTAGAAATCATACGCGGCAGGACCAAGCAACATGGTCAGTTTTCTCTTGCAGTCGTCAGCCTGAACATAACATCCTTGGGATTACGCTCCCTCAAGGAGATAAGTGATGGAGATGTGATAATTTCAGGAAACAAAAATTTGTGCTATGCAAATACAATAAACTGGAAAAAACTGTTTGGGACCTCCGGTCAGAAAACCAAAATTATAAGCAACAGAGGTGAAAACAGCTGCAAGGCCACAGGCCAGGTCTGCCATGCCTTGTGCTCCCCCGAGGGCTGCTGGGGCCCGGAGCCCAGGGACTGCGTCTCTTGCCGGAATGTCAGCCGAGGCAGGGAATGCGTGGACAAGTGCAACCTTCTGGAGGGTGAGCCAAGGGAGTTTGTGGAGAACTCTGAGTGCATACAGTGCCACCCAGAGTGCCTGCCTCAGGCCATGAACATCACCTGCACAGGACGGGGACCAGACAACTGTATCCAGTGTGCCCACTACATTGACGGCCCCCACTGCGTCAAGACCTGCCCGGCAGGAGTCATGGGAGAAAACAACACCCTGGTCTGGAAGTACGCAGACGCCGGCCATGTGTGCCACCTGTGCCATCCAAACTGCACCTACGGATGCACTGGGCCAGGTCTTGAAGGCTGTCCAACGAATGGGCCTAAGATCCCGTCCATCGCCACTGGGATGGTGGGGGCCCTCCTCTTGCTGCTGGTGGTGGCCCTGGGGATCGGCCTCTTCATGCGAAGGCGCCACATCGTTCGGAAGCGCACGCTGCGGAGGCTGCTGCAGGAGAGGGAGCTTGTGGAGCCTCTTACACCCAGTGGAGAAGCTCCCAACCAAGCTCTCTTGAGGATCTTGAAGGAAACTGAATTCAAAAAGATCAAAGTGCTGGGCTCCGGTGCGTTCGGCACGGTGTATAAGGGACTCTGGATCCCAGAAGGTGAGAAAGTTAAAATTCCCGTCGCTATCAAGGAATTAAGAGAAGCAACATCTCCGAAAGCCAACAAGGAAATCCTCGATGAAGCCTACGTGATGGCCAGCGTGGACAACCCCCACGTGTGCCGCCTGCTGGGCATCTGCCTCACCTCCACCGTGCAGCTCATCACGCAGCTCATGCCCTTCGGCTGCCTCCTGGACTATGTCCGGGAACACAAAGACAATATTGGCTCCCAGTACCTGCTCAACTGGTGTGTGCAGATCGCAAAGGGCATGAACTACTTGGAGGACCGTCGCTTGGTGCACCGCGACCTGGCAGCCAGGAACGTACTGGTGAAAACACCGCAGCATGTCAAGATCACAGATTTTGGGCTGGCCAAACTGCTGGGTGCGGAAGAGAAAGAATACCATGCAGAAGGAGGCAAAGTGCCTATCAAGTGGATGGCATTGGAATCAATTTTACACAGAATCTATACCCACCAGAGTGATGTCTGGAGCTACGGGGTGACTGTTTGGGAGTTGATGACCTTTGGATCCAAGCCATATGACGGAATCCCTGCCAGCGAGATCTCCTCCATCCTGGAGAAAGGAGAACGCCTCCCTCAGCCACCCATATGTACCATCGATGTCTACATGATCATGGTCAAGTGCTGGATGATAGACGCAGATAGTCGCCCAAAGTTCCGTGAGTTGATCATCGAATTCTCCAAAATGGCCCGAGACCCCCAGCGCTACCTTGTCATTCAGGGGGATGAAAGAATGCATTTGCCAAGTCCTACAGACTCCAACTTCTACCGTGCCCTGATGGATGAAGAAGACATGGACGACGTGGTGGATGCCGACGAGTACCTCATCCCACAGCAGGGCTTCTTCAGCAGCCCCTCCACGTCACGGACTCCCCTCCTGAGCTCTCTGAGTGCAACCAGCAACAATTCCACCGTGGCTTGCATTGATAGAAATGGGCTGCAAAGCTGTCCCATCAAGGAAGACAGCTTCTTGCAGCGATACAGCTCAGACCCCACAGGCGCCTTGACTGAGGACAGCATAGACGACACCTTCCTCCCAGTGCCTGGTGAGTGGCTTGTCTGGAAACAGTCCTGCTCCTCAACCTCCTCGACCCACTCAGCAGCAGCCAGTCTCCAGTGTCCAAGCCAGGTGCTCCCTCCAGCATCTCCAGAGGGGGAAACAGTGGCAGATTTGCAGACACAGTGA
Аминокислотная последовательность (SEQ ID NO: 8)
MRPSGTAGAALLALLAALCPASRALEEKKVCQGTSNKLTQLGTFEDHFLSLQRMFNNCEVVLGNLEITYVQRNYDLSFLKTIQEVAGYVLIALNTVERIPLENLQIIRGNMYYENSYALAVLSNYDANKTGLKELPMRNLQGQKCDPSCPNGSCWGAGEENCQKLTKIICAQQCSGRCRGKSPSDCCHNQCAAGCTGPRESDCLVCRKFRDEATCKDTCPPLMLYNPTTYQMDVNPEGKYSFGATCVKKCPRNYVVTDHGSCVRACGADSYEMEEDGVRKCKKCEGPCRKVCNGIGIGEFKDSLSINATNIKHFKNCTSISGDLHILPVAFRGDSFTHTPPLDPQELDILKTVKEITGFLLIQAWPENRTDLHAFENLEIIRGRTKQHGQFSLAVVSLNITSLGLRSLKEISDGDVIISGNKNLCYANTINWKKLFGTSGQKTKIISNRGENSCKATGQVCHALCSPEGCWGPEPRDCVSCRNVSRGRECVDKCNLLEGEPREFVENSECIQCHPECLPQAMNITCTGRGPDNCIQCAHYIDGPHCVKTCPAGVMGENNTLVWKYADAGHVCHLCHPNCTYGCTGPGLEGCPTNGPKIPSIATGMVGALLLLLVVALGIGLFMRRRHIVRKRTLRRLLQERELVEPLTPSGEAPNQALLRILKETEFKKIKVLGSGAFGTVYKGLWIPEGEKVKIPVAIKELREATSPKANKEILDEAYVMASVDNPHVCRLLGICLTSTVQLITQLMPFGCLLDYVREHKDNIGSQYLLNWCVQIAKGMNYLEDRRLVHRDLAARNVLVKTPQHVKITDFGLAKLLGAEEKEYHAEGGKVPIKWMALESILHRIYTHQSDVWSYGVTVWELMTFGSKPYDGIPASEISSILEKGERLPQPPICTIDVYMIMVKCWMIDADSRPKFRELIIEFSKMARDPQRYLVIQGDERMHLPSPTDSNFYRALMDEEDMDDVVDADEYLIPQQGFFSSPSTSRTPLLSSLSATSNNSTVACIDRNGLQSCPIKEDSFLQRYSSDPTGALTEDSIDDTFLPVPGEWLVWKQSCSSTSSTHSAAASLQCPSQVLPPASPEGETVADLQTQ EGFR vIII
Нуклеотидная последовательность (SEQ ID NO: 9)
ATGCGACCCTCCGGGACGGCCGGGGCAGCGCTCCTGGCGCTGCTGGCTGCGCTCTGCCCGGCGAGTCGGGCTCTGGAGGAAAAGAAAGGTAATTATGTGGTGACAGATCACGGCTCGTGCGTCCGAGCCTGTGGGGCCGACAGCTATGAGATGGAGGAAGACGGCGTCCGCAAGTGTAAGAAGTGCGAAGGGCCTTGCCGCAAAGTGTGTAACGGAATAGGTATTGGTGAATTTAAAGACTCACTCTCCATAAATGCTACGAATATTAAACACTTCAAAAACTGCACCTCCATCAGTGGCGATCTCCACATCCTGCCGGTGGCATTTAGGGGTGACTCCTTCACACATACTCCTCCTCTGGATCCACAGGAACTGGATATTCTGAAAACCGTAAAGGAAATCACAGGGTTTTTGCTGATTCAGGCTTGGCCTGAAAACAGGACGGACCTCCATGCCTTTGAGAACCTAGAAATCATACGCGGCAGGACCAAGCAACATGGTCAGTTTTCTCTTGCAGTCGTCAGCCTGAACATAACATCCTTGGGATTACGCTCCCTCAAGGAGATAAGTGATGGAGATGTGATAATTTCAGGAAACAAAAATTTGTGCTATGCAAATACAATAAACTGGAAAAAACTGTTTGGGACCTCCGGTCAGAAAACCAAAATTATAAGCAACAGAGGTGAAAACAGCTGCAAGGCCACAGGCCAGGTCTGCCATGCCTTGTGCTCCCCCGAGGGCTGCTGGGGCCCGGAGCCCAGGGACTGCGTCTCTTGCCGGAATGTCAGCCGAGGCAGGGAATGCGTGGACAAGTGCAACCTTCTGGAGGGTGAGCCAAGGGAGTTTGTGGAGAACTCTGAGTGCATACAGTGCCACCCAGAGTGCCTGCCTCAGGCCATGAACATCACCTGCACAGGACGGGGACCAGACAACTGTATCCAGTGTGCCCACTACATTGACGGCCCCCACTGCGTCAAGACCTGCCCGGCAGGAGTCATGGGAGAAAACAACACCCTGGTCTGGAAGTACGCAGACGCCGGCCATGTGTGCCACCTGTGCCATCCAAACTGCACCTACGGATGCACTGGGCCAGGTCTTGAAGGCTGTCCAACGAATGGGCCTAAGATCCCGTCCATCGCCACTGGGATGGTGGGGGCCCTCCTCTTGCTGCTGGTGGTGGCCCTGGGGATCGGCCTCTTCATGCGAAGGCGCCACATCGTTCGGAAGCGCACGCTGCGGAGGCTGCTGCAGGAGAGGGAGCTTGTGGAGCCTCTTACACCCAGTGGAGAAGCTCCCAACCAAGCTCTCTTGAGGATCTTGAAGGAAACTGAATTCAAAAAGATCAAAGTGCTGGGCTCCGGTGCGTTCGGCACGGTGTATAAGGGACTCTGGATCCCAGAAGGTGAGAAAGTTAAAATTCCCGTCGCTATCAAGGAATTAAGAGAAGCAACATCTCCGAAAGCCAACAAGGAAATCCTCGATGAAGCCTACGTGATGGCCAGCGTGGACAACCCCCACGTGTGCCGCCTGCTGGGCATCTGCCTCACCTCCACCGTGCAGCTCATCACGCAGCTCATGCCCTTCGGCTGCCTCCTGGACTATGTCCGGGAACACAAAGACAATATTGGCTCCCAGTACCTGCTCAACTGGTGTGTGCAGATCGCAAAGGGCATGAACTACTTGGAGGACCGTCGCTTGGTGCACCGCGACCTGGCAGCCAGGAACGTACTGGTGAAAACACCGCAGCATGTCAAGATCACAGATTTTGGGCTGGCCAAACTGCTGGGTGCGGAAGAGAAAGAATACCATGCAGAAGGAGGCAAAGTGCCTATCAAGTGGATGGCATTGGAATCAATTTTACACAGAATCTATACCCACCAGAGTGATGTCTGGAGCTACGGGGTGACTGTTTGGGAGTTGATGACCTTTGGATCCAAGCCATATGACGGAATCCCTGCCAGCGAGATCTCCTCCATCCTGGAGAAAGGAGAACGCCTCCCTCAGCCACCCATATGTACCATCGATGTCTACATGATCATGGTCAAGTGCTGGATGATAGACGCAGATAGTCGCCCAAAGTTCCGTGAGTTGATCATCGAATTCTCCAAAATGGCCCGAGACCCCCAGCGCTACCTTGTCATTCAGGGGGATGAAAGAATGCATTTGCCAAGTCCTACAGACTCCAACTTCTACCGTGCCCTGATGGATGAAGAAGACATGGACGACGTGGTGGATGCCGACGAGTACCTCATCCCACAGCAGGGCTTCTTCAGCAGCCCCTCCACGTCACGGACTCCCCTCCTGAGCTCTCTGAGTGCAACCAGCAACAATTCCACCGTGGCTTGCATTGATAGAAATGGGCTGCAAAGCTGTCCCATCAAGGAAGACAGCTTCTTGCAGCGATACAGCTCAGACCCCACAGGCGCCTTGACTGAGGACAGCATAGACGACACCTTCCTCCCAGTGCCTGAATACATAAACCAGTCCGTTCCCAAAAGGCCCGCTGGCTCTGTGCAGAATCCTGTCTATCACAATCAGCCTCTGAACCCCGCGCCCAGCAGAGACCCACACTACCAGGACCCCCACAGCACTGCAGTGGGCAACCCCGAGTATCTCAACACTGTCCAGCCCACCTGTGTCAACAGCACATTCGACAGCCCTGCCCACTGGGCCCAGAAAGGCAGCCACCAAATTAGCCTGGACAACCCTGACTACCAGCAGGACTTCTTTCCCAAGGAAGCCAAGCCAAATGGCATCTTTAAGGGCTCCACAGCTGAAAATGCAGAATACCTAAGGGTCGCGCCACAAAGCAGTGAATTTATTGGAGCATGA
Аминокислотная последовательность (SEQ ID NO: 10)
MRPSGTAGAALLALLAALCPASRALEEKKGNYVVTDHGSCVRACGADSYEMEEDGVRKCKKCEGPCRKVCNGIGIGEFKDSLSINATNIKHFKNCTSISGDLHILPVAFRGDSFTHTPPLDPQELDILKTVKEITGFLLIQAWPENRTDLHAFENLEIIRGRTKQHGQFSLAVVSLNITSLGLRSLKEISDGDVIISGNKNLCYANTINWKKLFGTSGQKTKIISNRGENSCKATGQVCHALCSPEGCWGPEPRDCVSCRNVSRGRECVDKCNLLEGEPREFVENSECIQCHPECLPQAMNITCTGRGPDNCIQCAHYIDGPHCVKTCPAGVMGENNTLVWKYADAGHVCHLCHPNCTYGCTGPGLEGCPTNGPKIPSIATGMVGALLLLLVVALGIGLFMRRRHIVRKRTLRRLLQERELVEPLTPSGEAPNQALLRILKETEFKKIKVLGSGAFGTVYKGLWIPEGEKVKIPVAIKELREATSPKANKEILDEAYVMASVDNPHVCRLLGICLTSTVQLITQLMPFGCLLDYVREHKDNIGSQYLLNWCVQIAKGMNYLEDRRLVHRDLAARNVLVKTPQHVKITDFGLAKLLGAEEKEYHAEGGKVPIKWMALESILHRIYTHQSDVWSYGVTVWELMTFGSKPYDGIPASEISSILEKGERLPQPPICTIDVYMIMVKCWMIDADSRPKFRELIIEFSKMARDPQRYLVIQGDERMHLPSPTDSNFYRALMDEEDMDDVVDADEYLIPQQGFFSSPSTSRTPLLSSLSATSNNSTVACIDRNGLQSCPIKEDSFLQRYSSDPTGALTEDSIDDTFLPVPEYINQSVPKRPAGSVQNPVYHNQPLNPAPSRDPHYQDPHSTAVGNPEYLNTVQPTCVNSTFDSPAHWAQKGSHQISLDNPDYQQDFFPKEAKPNGIFKGSTAENAEYLRVAPQSSEFIGA

[0212] В настоящем изобретении "HER2-положительная опухоль" является опухолью, в которой определен белок HER2 или ген HER2. Белок HER2 и ген HER2 также включают мутантный белок HER2 и мутантный ген HER2, имеющий точечную мутацию, инсерционную мутацию или делеционную мутацию и т.д.

[0213] Примеры способа детекции белка HER2 включают общепринятые способы детекции, такие как ELISA, Вестерн-блоттинг и иммуноокрашивание с использованием антитела, специфически связывающегося с белком HER2. Антитело, специфически связывающееся с белком HER2, может являться коммерчески доступным продуктом, или его можно получать общепринятым способом.

[0214] Примеры способа детекции гена HER2 включают общепринятые способы детекции, такие как нозерн-блоттинг, Саузерн-блоттинг, RT-ПЦР, ПЦР в реальном времени, цифровую ПЦР, ДНК-микрочипы, гибридизацию in situ и анализ последовательности.

[0215] В настоящем изобретении "EGFR-положительная опухоль" является опухолью, в которой определен белок EGFR или ген EGFR. Белок EGFR и ген EGFR также включают мутантный белок EGFR и мутантный ген EGFR, имеющий точечную мутацию, инсерционную мутацию или делеционную мутацию и т.д.

[0216] Примеры способа детекции белка EGFR включают общепринятые способы детекции, такие как ELISA, Вестерн-блоттинг и иммуноокрашивание с использованием антитела, специфически связывающегося с белком EGFR. Антитело, специфически связывающееся с белком EGFR, может являться коммерчески доступным продуктом, или его можно получать общепринятым способом.

[0217] Примеры способа детекции гена EGFR включают общепринятые способы детекции, такие как нозерн-блоттинг, Саузерн-блоттинг, RT-ПЦР, ПЦР в реальном времени, цифровую ПЦР, ДНК-микрочипы, гибридизацию in situ и анализ последовательности. Другой пример включает способ детекции с использованием набора для детекции мутаций EGFR cobas (Roche Diagnostics K.K.), являющийся коммерчески доступным набором для детекции мутаций EGFR.

[0218] В настоящем описании термин "эффективное количество", используемый в отношении пиримидинового соединения и другого противоопухолевого средства по настоящему изобретению, означает количество пиримидинового соединения и другого противоопухолевого средства по настоящему изобретению, вызывающее биологический или медицинский ответ у индивидуума, такой как, например, снижение или ингибирование активности фермента или белка; или улучшение симптомов, облегчение состояний и задержку, или замедление прогрессирования заболевания, или профилактику заболевания и т.д. (терапевтически эффективное количество).

В настоящем описании термин "индивидуум" включает млекопитающих и не-млекопитающих. Неограничивающие примеры млекопитающего могут включать человека, шимпанзе, обезьяну Старого света, обезьяну нового света, крупный рогатый скот, лошадь, овцу, козу, свинью, кролика, собаку, кошку, крысу, мышь, морскую свинку, ежа, кенгуру, крота, дикую свинью, медведя, тигра и льва. Неограничивающие примеры не-млекопитающих могут включать птиц, рыбу и пресмыкающихся. В одном из вариантов осуществления индивидуум является человеком и может являться человеком, у которого диагностирована потребность в лечении симптомов, состояний или заболевания, представленных в настоящем описании.

[0219] При использовании пиримидинового соединения по изобретению или его соли и другого противоопухолевого средства в качестве лекарственного средства фармацевтически приемлемый носитель смешивают с ним, при необходимости, и можно адаптировать различные типы лекарственных форм в зависимости от профилактической или терапевтической цели. Примеры лекарственной формы могут включать все из перорального средства, инъекционного препарата, суппозитория, мази и пластыря. Предпочтительно, адаптируют пероральное средство. Эти лекарственные формы можно получать общепринятыми способами получения, известными специалистам в этой области. Пиримидиновое соединение по изобретению или его соль и другое противоопухолевое средство можно вводить в одних и тех же лекарственных формах или разных лекарственных формах.

[0220] Схему введения пиримидинового соединения по изобретению или его соли и другого противоопухолевого средства, соответствующим образом, выбирают в диапазоне, в котором каждый активный ингредиент вызывает противоопухолевый эффект. Эти активные ингредиенты вводят одновременно или раздельно с интервалом. В случае раздельного введения, любое из них можно вводить первым.

[0221] Пиримидиновое соединение по изобретению или его соль и другое противоопухолевое средство можно получать во множестве отдельных лекарственных форм соответствующих активных ингредиентов или вместе в одной лекарственной форме с учетом лекарственной формы или схемы введения каждого активного ингредиента. Кроме того, соответствующие препараты можно получать и продавать совместно в одной упаковке, подходящей для комбинированного использования, или в отдельных упаковках.

В одном из вариантов осуществления пиримидиновое соединение по изобретению или его соль и другое противоопухолевое средство находятся в одном препарате. Такой препарат может являться, например, фармацевтической композицией, содержащей пиримидиновое соединение по изобретению или его соль, другое противоопухолевое средство и фармацевтически приемлемый носитель.

В одном из вариантов осуществления пиримидиновое соединение по изобретению или его соль и другое противоопухолевое средство находятся в отдельных препаратах. Такие препараты могут являться, например, комбинацией фармацевтической композиции, содержащей пиримидиновое соединение по изобретению или его соль и фармацевтически приемлемый носитель, и фармацевтической композиции, содержащей другое противоопухолевое средство и фармацевтически приемлемый носитель.

Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к набору, содержащему противоопухолевое средство или упомянутую выше фармацевтическую комбинацию и инструкцию, в которой указано, что пиримидиновое соединение или его соль и другое противоопухолевое средство вводят комбинированно.

[0222] В качестве фармацевтически приемлемых носителей используют различные типы органических или неорганических носитель, общеупотребительных в качестве материалов для препаратов. Если соединение по изобретению перерабатывают в твердый препарат, примеры фармацевтически приемлемого носителя, смешиваемого с соединением по настоящему изобретению, могут включать эксципиент, связывающее средство, дезинтегрирующее средство, смазочное средство, покрывающее средство и краситель. Если соединение по изобретению перерабатывают в жидкий препарат, примеры фармацевтически приемлемого носителя, смешиваемого с соединением по настоящему изобретению, могут включать растворитель, солюбилизатор, суспендирующее средство, регулятор тоничности, буфер и смягчающее средство. Кроме того, при необходимости, также можно использовать добавки для препарата, такие как антисептическое средство, антиоксидант, подсластитель и стабилизатор.

[0223] В случае получения твердого препарата для перорального введения к пиримидиновому соединению по изобретению добавляют эксципиент и, при необходимости, связывающее средство, дезинтегрирующее средство, смазочное средство, краситель, корригирующее вещество и т.д., а затем общепринятыми способами можно получать таблетку, таблетку, покрытую оболочкой, гранулу, порошок, капсулу и т.д.

В случае получения инъекционного препарата к пиримидиновому соединению по изобретению добавляют регулятор pH, буфер, стабилизатор, регулятор тоничности, местный анестетик и т.д., а затем можно получать подкожные, внутримышечные и внутривенные инъекционные препараты общепринятыми способами.

[0224] Количество пиримидинового соединения или его соли по настоящему изобретению, подлежащее примешиванию к каждой описанной выше стандартной лекарственной форме, зависит от симптомов у индивидуума, которому будут вводить соединение по изобретению, лекарственной формы и т.п., и, таким образом, количество соединения по изобретению не является постоянным. В основном, предпочтительно, используемую дозу устанавливают равной от 0,05 до 1000 мг на стандартную лекарственную форму в виде пиримидинового соединения в случае перорального средства, равной от 0,01 до 500 мг на стандартную лекарственную форму в виде пиримидинового соединения в случае инъекционного препарата, и равной от 1 до 1000 мг на стандартную лекарственную форму в виде пиримидинового соединения в случае суппозитория.

Количество другого противоопухолевого средства, подлежащее примешиванию к каждой описанной выше стандартной лекарственной форме, зависит от симптомов у индивидуума, которому будут вводить другое противоопухолевое средство, лекарственной формы и т.п., и таким образом, количество другого противоопухолевого средства не является постоянным. В основном, предпочтительно, используемую дозу устанавливают равной от 0,05 до 1000 мг на стандартную лекарственную форму в случае перорального средства, равной от 0,01 до 500 мг на стандартную лекарственную форму в случае инъекционного препарата, и равной от 1 до 1000 мг на стандартную лекарственную форму в случае суппозитория.

Суточная доза лекарственного средства, имеющего описанную выше лекарственную форму, отличается в зависимости от симптомов, массы тела, возраста, пола и т.п. индивидуума, и, таким образом, ее нельзя определить в общем случае. Пиримидиновое соединение по изобретению можно вводить взрослому (масса тела: 50 кг) в суточной дозе, как правило, от 0,05 до 5000 мг, и предпочтительно - от 0,1 до 1000 мг. Кроме того, количество другого противоопухолевого средства отличается в зависимости от симптомов, массы тела, возраста, пола и т.п. индивидуума, и таким образом, его нельзя определить в общем случае. Например, другое противоопухолевое средство можно вводить взрослому (масса тела: 50 кг) в суточной дозе, как правило, от 0,05 до 5000 мг, и предпочтительно - от 0,1 до 1000 мг.

[0225] В настоящем изобретении суточная доза пиримидинового соединения или его соли и другого противоопухолевого средства может являться дозой, определяемой с помощью клинических испытаний или т.п. и вызывающей максимальный терапевтический эффект в диапазоне, в которой ее можно безопасно использовать без развития серьезных побочных эффектов. Ее конкретные примеры включают дозы, одобренные, рекомендованные и/или советуемые государственными учреждениями или организациями, такими как Агентство по фармацевтике и медицинскому оборудованию Японии (PMDA), Управление по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США (FDA) и Европейское агентство лекарственных средств (EMA), и описанные во вкладышах в упаковку, формах опросников и/или руководствах по лечению. Предпочтительной является доза, одобренная любым из государственных учреждений PMDA, FDA и EMA.

[0226] Злокачественная опухоль, являющаяся мишенью по настоящему изобретению, конкретно не ограничена. Примеры опухоли могут включать опухоль головного мозга, рак головы и шеи, рак пищеварительной системы (рак пищевода, рак желудка, рак двенадцатиперстной кишки, рак печени, рак желчных протоков (рак желчного пузыря и/или желчных протоков и т.д.), рак поджелудочной железы, колоректальный рак (рак толстого кишечника, рак прямой кишки и т.д.) и т.д.), рак легких (немелкоклеточный рак легких, мелкоклеточный рак легких, мезотелиому и т.д.), рак молочной железы, рак половых органов (рак яичников, рак матки (рак шейки матки, рак эндометрия и т.д.) и т.д.), рак органов мочевыделительной системы (рак почки, рак мочевого пузыря, рак предстательной железы, опухоль яичка и т.д.), гемобластоз (лейкоз, злокачественную лимфому, множественную миелому и т.д.), опухоль костной ткани и/или мягких тканей и рак кожи. Среди них, предпочтительной является опухоль головного мозга, рак легких, рак молочной железы, рак желудка, колоректальный рак, рак мочевого пузыря, рак желчных протоков или рак матки, и более предпочтительной является опухоль головного мозга, рак легких, рак молочной железы, рак желудка, колоректальный рак, рак мочевого пузыря или рак желчных протоков.

[0227] В одном из вариантов осуществления опухоль, являющаяся мишенью по настоящему изобретению, является злокачественной опухолью, имеющей гиперэкспрессию HER2, амплификацию гена HER2 или мутацию HER2. Примеры злокачественной опухоли могут включать опухоль головного мозга, рак головы и шеи, рак пищеварительной системы (рак пищевода, рак желудка, рак двенадцатиперстной кишки, рак печени, рак желчных протоков (рак желчного пузыря и/или желчных протоков и т.д.), рак поджелудочной железы, колоректальный рак (рак толстого кишечника, рак прямой кишки и т.д.) и т.д.), рак легких (немелкоклеточный рак легких, мелкоклеточный рак легких, мезотелиому и т.д.), рак молочной железы, рак половых органов (рак яичников, рак матки (рак шейки матки, рак эндометрия и т.д.) и т.д.), рак органов мочевыделительной системы (рак почки, рак мочевого пузыря, рак предстательной железы, опухоль яичка и т.д.), гемобластоз (лейкоз, злокачественную лимфому, множественную миелому и т.д.), опухоль костной ткани и/или мягких тканей и рак кожи. Среди них, предпочтительной является опухоль головного мозга, рак легких, рак молочной железы, рак желудка, колоректальный рак, рак мочевого пузыря, рак желчных протоков или рак матки, и более предпочтительной является опухоль головного мозга, рак легких, рак молочной железы, рак желудка, рак мочевого пузыря или рак желчных протоков.

[0228] В одном из вариантов осуществления опухоль, являющаяся мишенью по настоящему изобретению, является HER2-положительной опухолью. Примеры опухоли могут включать опухоль головного мозга, рак головы и шеи, рак пищеварительной системы (рак пищевода, рак желудка, рак двенадцатиперстной кишки, рак печени, рак желчных протоков (рак желчного пузыря и/или желчных протоков и т.д.), рак поджелудочной железы, колоректальный рак (рак толстого кишечника, рак прямой кишки и т.д.),и т.д.), рак легких (немелкоклеточный рак легких, мелкоклеточный рак легких, мезотелиому и т.д.), рак молочной железы, рак половых органов (рак яичников, рак матки (рак шейки матки, рак эндометрия и т.д.) и т.д.), рак органов мочевыделительной системы (рак почки, рак мочевого пузыря, рак предстательной железы, опухоль яичка и т.д.), гемобластоз (лейкоз, злокачественную лимфому, множественную миелому и т.д.), опухоль костной ткани и/или мягких тканей и рак кожи. Среди них, предпочтительной является опухоль головного мозга, рак легких, рак молочной железы, рак желудка, колоректальный рак, рак мочевого пузыря, рак желчных протоков или рак матки, и более предпочтительной является опухоль головного мозга, рак легких, рак молочной железы, рак желудка, рак мочевого пузыря, или рак желчных протоков.

[0229] В одном из вариантов осуществления опухоль, являющаяся мишенью по настоящему изобретению, является злокачественной опухолью имеющей гиперэкспрессию HER2, амплификацию гена HER2 или мутацию HER2. Примеры злокачественной опухоли могут включать опухоль головного мозга, рак головы и шеи, рак пищеварительной системы (рак пищевода, рак желудка, рак двенадцатиперстной кишки, рак печени, рак желчных протоков (рак желчного пузыря и/или желчных протоков и т.д.), рак поджелудочной железы, колоректальный рак (рак толстого кишечника, рак прямой кишки и т.д.) и т.д.), рак легких (немелкоклеточный рак легких, мелкоклеточный рак легких, мезотелиому и т.д.), рак молочной железы, рак половых органов (рак яичников, рак матки (рак шейки матки, рак эндометрия и т.д.) и т.д.), рак органов мочевыделительной системы (рак почки, рак мочевого пузыря, рак предстательной железы, опухоль яичка и т.д.), гемобластоз (лейкоз, злокачественную лимфому, множественную миелому и т.д.), опухоль костной ткани и/или мягких тканей и рак кожи. Среди них, предпочтительной является опухоль головного мозга, рак головы и шеи, рак легких, рак молочной железы, рак желудка, колоректальный рак, рак мочевого пузыря, рак желчных протоков или рак матки, и более предпочтительной является опухоль головного мозга, рак легких, рак молочной железы или колоректальный рак.

[0230] В одном из вариантов осуществления опухоль, являющаяся мишенью по настоящему изобретению, является EGFR-положительной опухолью. Примеры опухоли могут включать опухоль головного мозга, рак головы и шеи, рак пищеварительной системы (рак пищевода, рак желудка, рак двенадцатиперстной кишки, рак печени, рак желчных протоков (рак желчного пузыря и/или желчных протоков и т.д.), рак поджелудочной железы, колоректальный рак (рак толстого кишечника, рак прямой кишки и т.д.) и т.д.), рак легких (немелкоклеточный рак легких, мелкоклеточный рак легких, мезотелиому и т.д.), рак молочной железы, рак половых органов (рак яичников, рак матки (рак шейки матки, рак эндометрия и т.д.) и т.д.), рак органов мочевыделительной системы (рак почки, рак мочевого пузыря, рак предстательной железы, опухоль яичка и т.д.), гемобластоз (лейкоз, злокачественную лимфому, множественную миелому и т.д.), опухоль костной ткани и/или мягких тканей и рак кожи. Среди них, предпочтительной является опухоль головного мозга, рак головы и шеи, рак легких, рак молочной железы, рак желудка, колоректальный рак, рак мочевого пузыря, рак желчных протоков или рак матки, и более предпочтительной является опухоль головного мозга, рак легких, рак молочной железы или колоректальный рак.

[0231] В одном из вариантов осуществления опухоль является опухолью головного мозга. Пиримидиновое соединение по изобретению можно использовать для лечения симптомов, связанных с головным мозгом, требующего прохождения через гематоэнцефалический барьер. Пиримидиновое соединение по одному из вариантов осуществления имеет благоприятную проникающую способность в отношении гематоэнцефалического барьера для его доставки в головной мозг, а именно, исключительные свойства проникновения в головной мозг. В качестве показателя свойств проникновения соединения в головной мозг используют концентрацию соединения в головном мозге или значение Kp (соотношение концентрации лекарственного средства головной мозг-к-плазме).

Опухоль головного мозга, подлежащая лечению по настоящему изобретению, относится к метастатической опухоли головного мозга и первичной опухоли головного мозга.

Неограничивающие примеры опухоли головного мозга могут включать метастатическую опухоль головного мозга (например, метастазирование в головной мозг рака легких, рака молочной железы, рака желудка, колоректального рака, рака мочевого пузыря, рака желчных протоков, рака матки и т.д. (предпочтительно, рака легких, рака молочной железы или рака желудка)), пилиоцитарную астроцитому, диффузную астроцитому, олигодендрому и/или олигодендроастроцитому, анапластическую астроцитому и/или анапластическую олигодендроглиому, анапластическую олигодендроастроцитому, глиобластому, эпендимому, анапластическую эпендимому, ганглиоглиому, центральную нейроцитому, медуллобластому, герминому, злокачественную лимфому центральной нервной системы, менингиому, неврилеммому, СТГ-секретирующую аденому гипофиза, пролактин-секретирующую аденому гипофиза, АКТГ-секретирующую аденому гипофиза, нефункциональную аденому гипофиза, краниофарингиому, хордому, гемангиобластому и эпидермоидную опухоль.

ПРИМЕРЫ

[0232] Далее в настоящем описании настоящее изобретение будет подробно описано в следующих примерах. Однако эти примеры не предназначены для ограничения объема настоящего изобретения.

В настоящем описании термин "комнатная температура", как правило, означает температуру, составляющую от приблизительно 10°C до приблизительно 35°C. Кроме того, в следующих примерах, касающихся соединений, символом "%" указан процент по массе, если не указано иначе.

Различные типы реагентов, используемых в примерах, являлись коммерчески доступными продуктами, если не указано иначе. Хроматографию на силикагеле осуществляли с использованием картриджа Biotage SNAP Cartridge Ultra, производимого Biotage Japan Ltd. Базовую хроматографию на силикагеле осуществляли с использованием картриджа Biotage SNAP Cartridge Isolute Flash-NH2, производимого Biotage Japan Ltd.

Препаративную тонкослойную хроматографию осуществляли с использованием Kieselgel TM60F254, кат. № 5744, производимого Merck, или силикагеля-NH2 60F254 Plate-Wako, производимого FUJIFILM Wako Pure Chemical Cooperation.

¹H-ЯМР измеряли с использованием тетраметилсилана в качестве референсного материала и AL400 (400 МГц), производимого JEOL, Mercury (400 МГц) производимого Varian, или Inova (400 МГц) производимого Varian. Кроме того, массовый спектр измеряли с использованием Micromass ZQ или SQD, производимого Waters, в режиме ионизации электрораспылением (ESI) или химической ионизации при атмосферном давлении (APCI). Микроволновую реакцию осуществляли с использованием Initiator, производимого Biotage Japan Ltd.

Сокращения обладают следующими значениями.

с: Синглет

д: Дублет

т: Триплет

к: Квартет

дд: Двойной дублет

дт: Двойной триплет

тд: Тройной дублет

тт: Тройной триплет

ддд: Двойной двойной дублет

ддт: Двойной двойной триплет

дтд: Двойной тройной дублет

тдд: Тройной двойной дублет

м: Мультиплет

ш.: Широкий

АТФ: Аденозин трифосфат

DMSO-d6: Дейтерированный диметилсульфоксид

CDCl₃: Дейтерированный хлороформ

ЭДТА: Этилендиаминтетрауксусная кислота

THF: Тетрагидрофуран

DMF: N, N-диметилформамид

DMSO: Диметилсульфоксид

NMP: N-метилпирролидон

HATU: Гексафторфосфат O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N, N,N',N'-тетраметилурония

HPMC: Гипромеллоза

PdCl₂(PPh₃)₂: Дихлорбис(трифенилфосфин)палладий(II)

po: Пероральное введение

iv: Внутривенное введение

T-mab: Трастузумаб

P-mab: Пертузумаб

[0233] Ссылочный пример 1

Ссылочный пример 1(1)

Трет-бутил-(2S,4R)-4-(4-амино-5-йод-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-7-ил)-2-метилпирролидин-1-карбоксилат

Трет-бутил-(2S,4S)-4-гидрокси-2-метилпирролидин-1-карбоксилат (19,0 г) и 4-хлор-5-йод-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин (13,1 г) растворяли в THF (190 мл), а затем полученный раствор охлаждали до 0°C. Затем в реакционный раствор добавляли трифенилфосфин (37,2 г) и диизопропилазодикарбоксилат (28,1 мл), а затем температуру смеси повышали до комнатной температуры с последующим перемешиванием в течение 1 часа. Затем реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении, а затем полученный остаток очищали посредством хроматографии на силикагеле (гексан:этилацетат) для получения соответствующей основы для реакции сочетания. Полученное соединение использовали в последующей реакции без дополнительной очистки.

Полученную основу для реакции сочетания, THF (114 мл) и водный аммиак (114 мл) добавляли в устойчивую к давлению пробирку, а затем полученную смесь перемешивали при 100°C в течение 14 часов. Затем реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, а затем наливали в воду (285 мл). Полученную таким образом смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 часов. Затем осажденное твердое вещество собирали посредством фильтрации, затем промывали водой, а затем сушили для получения интересующего продукта (34,5 г).

¹H-ЯМР (CDCl₃)δ: 8,27 (с, 1H), 7,15 (с, 1H), 5,55-5,73 (м, 2H), 5,12-5,25 (м, 1H), 3,86-4,18 (м, 2H), 3,43-3,57 (м, 1H), 2,59-2,69 (м, 1H), 1,92-2,03 (м,1H), 1,48 (с, 9H), 1,30-1,40 (м, 3H)

ESI-MS m/z 444 (MH⁺)

[0234] Ссылочный пример 1(2)

4-амино-7-((3R,5S)-1-(трет-бутоксикарбонил)-5-метилпирролидин-3-ил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоновая кислота

Соединение из ссылочного примера 1(1) (28,0 г), 10%-ный углерод-палладиевый катализатор (720 мг), NMP (84 мл), метанол (26 мл) и триэтиламин (17,6 мл) добавляли в устойчивую к давлению пробирку с последующим замещением монооксидом углерода и полученную смесь перемешивали при 100°C в течение 2 часов. Затем реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, а затем в нее добавляли водный раствор 2 M гидроксида натрия (79 мл), а затем полученную смесь перемешивали при 80°C в течение 2 часов. Затем реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, затем фильтровали через целит, а затем промывали метанолом. Затем метанол в фильтрате концентрировали при пониженном давлении. Дополнительно добавляли воду, а затем водный слой промывали трет-бутилметиловым простым эфиром. К водному слою добавляли водный раствор 1 M гидросульфата калия для коррекции pH до приблизительно 3. Осажденное твердое вещество собирали посредством фильтрации, затем промывали водой, а затем сушили для получения интересующего продукта (23,4 г).

¹H-ЯМР (400 МГц, DMSO-d6)δ: 8,14 (с, 1H), 8,08 (с, 1H), 5,16-4,93 (м, 1H), 4,07-3,79 (м, 2H), 3,61-3,45 (м, 1H), 2,53 (м, 1H), 2,33-2,02 (м, 1H), 1,42 (с, 9H), 1,29 (д, J=6,1 Гц, 3H)

ESI-MS m/z 362 (MH⁺)

[0235] Примеры

Пример 1(1)

Трет-бутил-4-амино-6-бром-7-((3R,5S)-1-(трет-бутоксикарбонил)-5-метилпирролидин-3-ил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксилат

В атмосфере азота соединение из ссылочного примера 1(2) (15,0 г) растворяли в хлороформе (150 мл), а затем к указанному выше полученному раствору добавляли 2-трет-бутил-1,3-диизопропилизомочевину (25 мл). Температуру полученной смеси повышали до 60°C, а затем смесь перемешивали в течение 2 часов. Затем в реакционную смесь дополнительно добавляли 2-трет-бутил-1,3-диизопропилизомочевину (25 мл), а затем полученную таким образом смесь перемешивали в течение 2 часов. Затем реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, а затем концентрировали при пониженном давлении. К полученному остатку добавляли трет-бутилметиловый простой эфир и осажденное твердое вещество собирали посредством фильтрации, а затем промывали трет-бутилметиловым простым эфиром. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, а затем к полученному остатку добавляли трет-бутилметиловый простой эфир. Осажденное твердое вещество собирали посредством фильтрации, а затем промывали трет-бутилметиловым простым эфиром. Полученный остаток очищали посредством хроматографии на силикагеле (гексан:этилацетат) для получения трет-бутиловой сложноэфирной формы. Полученное соединение использовали в последующей реакции галогенирования без дополнительной очистки.

Полученную трет-бутиловую сложноэфирную форму растворяли в хлороформе (140 мл), а затем к указанному выше полученному раствору добавляли N-бромсукцинимид (11,8 г). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 часов. Затем в реакционную смесь последовательно добавляли хлороформ и 10%-ный водный раствор бисульфита натрия, а затем полученную смесь экстрагировали хлороформом. Собранный органический слой промывали насыщенным физиологическим раствором, затем сушили над безводным сульфатом натрия, а затем концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали посредством хроматографии на силикагеле (гексан:этилацетат) для получения интересующего продукта (13,8 г).

¹H-ЯМР (CDCl3)δ: 8,02 (с, 1H), 5,74-5,13 (м, 2H), 4,07-3,64 (м, 2H), 2,43-2,29 (м, 1H), 2,07-1,97 (м, 1H), 1,63 (с, 9H), 1,48 (м, 12H)

ESI-MS m/z 496,498 (MH⁺)

[0236] Пример 1(2)

Трет-бутил-7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-6-бром-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксилат

Соединение из примера 1(1) (11,4 г) растворяли в THF (57 мл), а затем полученный раствор охлаждали до 0°C. Затем в смесь добавляли раствор 4 M хлороводорода в 1,4-диоксана (114 мл), а затем полученную таким образом смесь перемешивали при 0°C в течение 10 часов. Затем в реакционную смесь добавляли водный раствор 5 M гидроксида натрия (92 мл), ацетонитрил (57 мл), диизопропилэтиламин (20 мл) и акрилоилхлорид (2,0 мл), а затем полученную смесь перемешивали в течение 30 минут. Затем реакционную смесь экстрагировали этилацетатом и собранный органический слой промывали насыщенным физиологическим раствором, затем сушили над безводным сульфатом натрия, а затем концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали посредством хроматографии на силикагеле (гексан:ацетон) для получения интересующего продукта (7,72 г).

¹H-ЯМР (CDCl₃)δ: 8,26-8,16 (м, 1H), 6,62-6,30 (м, 2H), 5,81-5,64 (м, 1H), 5,33-5,14 (м, 1H), 4,81-3,75 (м, 3H), 3,07-2,86 (м, 1H), 2,67-2,33 (м, 1H), 1,69-1,61 (м, 9H), 1,60-1,51 (м, 3H)

ESI-MS m/z 450,452 (MH⁺)

[0237] Пример 1(3)

Трет-бутил-7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-6-(проп-1-ин-1-ил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксилат

К соединению из примера 1(2) (7,72 г) добавляли раствор 1,0 M пропина в DMF (85,7 мл), ацетонитрил (154 мл), триэтиламин (7,2 мл), PdCl₂(PPh₃)₂ (1,2 г) и йодид меди (I) (330 мг) с последующим замещением азотом. Затем смесь перемешивали при 70°C в течение 4 часов. Затем реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, и в смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Затем полученную смесь экстрагировали этилацетатом и собранный органический слой промывали водой, а затем насыщенным физиологическим раствором. Полученное сушили над безводным сульфатом натрия, а затем концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали посредством хроматографии на силикагеле (гексан:ацетон) для получения интересующего продукта (4,06 г).

¹H-ЯМР (CDCl₃)δ: 8,29-8,17 (м, 1H), 6,63-6,30 (м, 2H), 5,81-5,63 (м, 1H), 5,42-5,15 (м, 1H), 4,66-3,81 (м, 3H), 3,01-2,82 (м, 1H), 2,65-2,32 (м, 1H), 2,92-2,13 (м, 3H), 1,65-1,59 (м, 9H), 1,57-1,49 (м, 3H)

ESI-MS m/z 410 (MH⁺)

[0238] Пример 1(4)

7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-6-(проп-1-ин-1-ил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-карбоновая кислота

Соединение из примера 1(3) (1,52 г) растворяли в хлороформе (5 мл), а затем к указанному выше полученному раствору добавляли трифторуксусную кислоту (5 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов, а затем реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. К остатку добавляли хлороформ и полученную смесь снова концентрировали при пониженном давлении. Остаток сушили при пониженном давлении для получения интересующего продукта (1,25 г).

ESI-MS m/z 354 (MH⁺)

[0239] Пример 1(5)

7-(R)-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-N-((R)-1-(3,5-дифторфенил)этил)-6-(проп-1-ин-1-ил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамид

К раствору соединения из примера 1(4) (100 мг) в DMF (1,0 мл) добавляли (R)-1-(3,5-дифторфенил)этан-1-амин (89,0 мг), диизопропилэтиламин (0,25 мл) и HATU (215 мг), а затем полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Затем в реакционную смесь добавляли насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия, а затем полученную смесь экстрагировали этилацетатом. Собранный органический слой промывали насыщенным физиологическим раствором, затем сушили над безводным сульфатом натрия, а затем концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали посредством хроматографии на силикагеле (гексан:ацетон) для получения титульное соединение (60 мг).

¹H-ЯМР (DMSO-d6)δ: 8,51 (д, J=7,3 Гц, 1H), 8,16 (с, 1H), 7,25-7,07 (м, 3H), 6,74-6,47 (м, 1H), 6,25-6,08 (м, 1H), 5,78-5,58 (м, 1H), 5,41-5,21 (м, 1H), 5,21-5,06 (м, 1H), 4,45-4,29 (м, 1H), 4,24-3,91 (м, 2H), 2,78-2,58 (м, 1H), 2,52-2,41 (м, 1H), 2,23(с, 3H), 1,48 (д, J=7,1 Гц, 3H), 1,39 (д, J=6,1 Гц, 3H)

ESI-MS m/z 493 (MH+)

[0240] Пример 2

7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-N-((R)-1-фенилэтил)-6-(проп-1-ин-1-ил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамид

Титульное соединение получали аналогично описанному в примере 1, за исключением того, что использовали (R)-1-фенилэтан-1-амин вместо (R)-1-(3,5-дифторфенил)этан-1-амина в примере 1(5).

¹H-ЯМР (DMSO-d6)δ: 8,35 (д, J=7,8 Гц, 1H), 8,17-8,13 (м, 1H) 7,48-7,23 (м, 5H), 6,76-6,46 (м, 1H), 6,28-6,06 (м, 1H), 5,81-5,58 (м, 1H), 5,43-5,02 (м, 2H), 4,42-4,28 (м, 1H), 4,21-3,96 (м, 2H), 2,74-2,59 (м, 1H), 2,54-2,41 (м, 1H), 2,17 (с, 3H), 1,50 (д, J=6,8 Гц, 3H), 1,42-1,33 (м, 3H)

ESI-MS m/z 457 (MH⁺)

[0241] Пример 3

7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-N-(2-фенилпропан-2-ил)-6-(проп-1-ин-1-ил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамид

Титульное соединение получали аналогично описанному в примере 1, за исключением того, что использовали 2-фенилпропан-2-амин вместо (R)-1-(3,5-дифторфенил)этан-1-амина в примере 1(5).

¹H-ЯМР (DMSO-d6)δ: 8,26 (с, 1H), 8,16-8,08 (м, 1H), 7,44 (дд, J=8,8, 1,2 Гц, 2H), 7,38-7,28 (м, 2H), 7,21 (тт, J=7,3, 1,27 Гц, 1H), 6,76-6,50 (м, 1H), 6,25-6,10 (м, 1H), 5,79-5,62 (м, 1H), 5,45-5,19 (м, 1H), 4,45-4,30 (м, 1H), 4,26-4,01 (м, 2H), 2,79-2,42 (м, 2H), 2,29-2,22 (м, 3H), 1,71 (с, 6H), 1,43-1,36 (м, 3H)

ESI-MS m/z 471 (MH⁺)

[0242] Пример 4

7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-N-((R)-1-фенилпропил)-6-(проп-1-ин-1-ил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамид

Титульное соединение получали аналогично описанному в примере 1, за исключением того, что (R)-1-фенилпропан-1-амин использовали вместо (R)-1-(3,5-дифторфенил)этан-1-амина в примере 1(5).

¹H-ЯМР (DMSO-d6)δ: 8,35 (ш. д., J=8,0 Гц, 1H), 8,17-8,11 (м, 1H), 7,46-7,22 (м, 5H), 6,74-6,50 (м, 1H), 6,26-6,08 (м, 1H), 5,79-5,60 (м, 1H), 5,40-5,21 (м, 1H), 4,99-4,87 (м, 1H), 4,43-4,30 (м, 1H), 4,23-3,94 (м, 2H), 2,76-2,42 (м, 2H), 2,21 (с, 3H), 1,95-1,74 (м, 2H), 1,44-1,34 (м, 3H), 0,91 (т, J=7,3 Гц, 3H)

ESI-MS m/z 471 (MH⁺)

[0243] Пример 5

7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-N-(2-(2-фторфенил)пропан-2-ил)-6-(проп-1-ин-1-ил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамид

Титульное соединение получали аналогично описанному в примере 1, за исключением того, что 2-(2-фторфенил)пропан-2-амин использовали вместо (R)-1-(3,5-дифторфенил)этан-1-амина в примере 1(5).

¹H-ЯМР (CDCl3)δ: 8,28 (с, 1H), 8,11 (д, J=4,4 Гц, 1H), 8,02 (с, 1H), 7,47-7,42 (м, 1H), 7,29-7,23 (м, 1H), 7,15 (т, J=7,7 Гц, 1H), 7,02 (ддд, J=12,5, 8,1, 1,1 Гц, 1H), 6,58-6,35 (м, 2H), 5,79-5,70 (м, 1H), 5,30-5,19 (м, 1H), 4,53 (т, J=10,1 Гц, 0,7H), 4,38-4,25 (м, 1,6H), 3,92 (т, J=8,8 Гц, 0,7H), 2,91-2,78 (м, 1H) 2,70-2,60 (м, 0,3H), 2,54-2,43 (м, 0,7H), 2,28 (д, J=7,0 Гц, 3H), 1,88 (дт, J=10,0, 5,0 Гц, 6H), 1,53 (т, J=6,2 Гц, 3H)

ESI-MS m/z 489 (MH⁺)

[0244] Пример 6

7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-N-((R)-1-(3-хлорфенил)этил)-6-(проп-1-ин-1-ил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамид

Титульное соединение получали аналогично описанному в примере 1, за исключением того, что использовали гидрохлорид (R)-(+)-1-(3-хлорфенил)этиламина вместо (R)-1-(3,5-дифторфенил)этан-1-амина в примере 1(5).

¹H-ЯМР (CDCl3)δ: 8,22 (д, J=5,9 Гц, 1H), 7,75 (д, J=7,0 Гц, 1H), 7,38 (с, 1H), 7,35-7,27 (м, 3H), 6,58-6,33 (м, 2H), 5,78-5,66 (м, 1H), 5,29-5,19 (м, 2H), 4,56 (т, J=10,3 Гц, 0,7H), 4,39-4,20 (м, 1,6H), 3,89 (т, J=8,8 Гц, 0,7H), 2,94-2,82 (м, 1H), 2,66-2,58 (м, 0,3H), 2,46 (дт, J=14,5, 6,1 Гц, 0,7H), 2,18 (д, J=11,0 Гц, 3H), 1,60 (д, J=7,0 Гц, 3H), 1,55-1,51 (м, 3H)

ESI-MS m/z 491,493 (MH⁺)

[0245] Пример 7

7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-N-((R)-1-(2,4-дифторфенил)этил)-6-(проп-1-ин-1-ил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамид

Титульное соединение получали аналогично описанному в примере 1, за исключением того, что использовали (R)-(+)-1-(2,4-дифторфенил)этиламин гидрохлорид вместо (R)-1-(3,5-дифторфенил)этан-1-амина в примере 1(5).

¹H-ЯМР (CDCl₃)δ: 8,20 (д, J=5,9 Гц, 1H), 7,98(д, J=7,7 Гц, 1H), 7,37-7,31 (м, 1H), 6,90-6,81 (м, 2H), 6,58-6,35 (м, 2H) 5,78-5,65 (м, 1H), 5,44-5,37 (м, 1H), 5,30-5,19 (м, 1H), 4,56 (т, J=10,1 Гц, 0,7H), 4,38-4,23 (м, 1,6H), 3,88 (т, J=8,8 Гц, 0,7H), 2,94-2,83 (м, 1H), 2,66-2,57 (м, 0,3H), 2,51-2,42 (м, 0,7H), 2,27 (д, J=9,2 Гц, 3H), 1,61 (д, J=7,0 Гц, 3H), 1,56-1,51 (м, 3H)

ESI-MS m/z 493 (MH⁺)

[0246] Пример 8

7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-6-(проп-1-ин-1-ил)-N-((S)-2,2,2-трифтор-1-фенилэтил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамид

Титульное соединение получали аналогично описанному в примере 1, за исключением того, что использовали (S)-2,2,2-трифтор-1-фенилэтан-1-амин вместо (R)-1-(3,5-дифторфенил)этан-1-амина в примере 1(5).

¹H-ЯМР (CDCl₃)δ: 8,40 (д, J=8,8 Гц, 1H), 8,16 (с, 1H), 7,44 (с, 5H), 6,58-6,38 (м, 2H), 5,92-5,84 (м, 1H), 5,81-5,69 (м, 1H), 5,29-5,19 (м, 1H), 4,55 (т, J=10,3 Гц, 0,7H), 4,41-4,24 (м, 1,6H), 3,91 (т, J=8,6 Гц, 0,7H), 2,92-2,80 (м, 1H), 2,70-2,61 (м, 0,3H), 2,54-2,46 (м, 0,7H), 2,35 (д, J=8,4 Гц, 3H), 1,54 (т, J=7,3 Гц, 3H)

ESI-MS m/z 511 (MH⁺)

[0247] Пример 9

7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-6-(циклопропилэтинил)-N-(2-фенилпропан-2-ил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамид

Титульное соединение получали аналогично описанному в примере 1, за исключением того, что использовали циклопропилацетилен вместо раствора 1,0 M пропина в DMF в примере 1(3), и что использовали 2-фенилпропан-2-амин вместо (R)-1-(3,5-дифторфенил)этан-1-амина в примере 1(5).

¹H-ЯМР (CDCl₃)δ: 8,15 (с, 1H), 8,00 (с, 1H), 7,44 (д, J=7,7 Гц, 2H), 7,37 (т, J=7,7 Гц, 2H), 7,32-7,27 (м, 1H), 6,66-6,30 (м, 2H), 5,81-5,69 (м, 1H), 5,38-5,24 (м, 1H) 4,48 (т, J=9,9 Гц, 0,7H), 4,42-4,29 (м, 1,6H), 4,22(т, J=10,4 Гц, 0,7H), 2,77-2,68 (м, 1H), 2,67-2,60 (м, 0,3H), 2,59-2,52 (м, 0,7H), 1,83 (с, 6H), 1,60-1,52 (м, 4H), 1,08-1,01 (м, 2H), 0,92-0,88 (м, 2H)

ESI-MS m/z 497 (MH⁺)

[0248] Пример 10

7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-6-(циклопропилэтинил)-N-((R)-1-(2,3-дифторфенил)этил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамид

Титульное соединение получали аналогично описанному в примере 1, за исключением того, что циклопропилацетилен использовали вместо раствора 1,0 M пропина в DMF в примере 1(3), и что использовали (R)-(+)-1-(2,3-дифторфенил)этиламин вместо (R)-1-(3,5-дифторфенил)этан-1-амина в примере 1(5).

¹H-ЯМР (CDCl₃)δ: 8,17 (д, J=4,0 Гц, 1H), 8,04 (д, J=8,1 Гц, 1H), 7,15-7,05 (м, 3H), 6,58-6,36 (м, 2H), 5,80-5,68 (м, 1H) 5,49-5,42 (м, 1H), 5,34-5,24 (м, 1H), 4,52 (т, J=10,1 Гц, 0,7H), 4,37-4,23 (м, 1,6H), 3,92 (т, J=8,8 Гц, 0,7H), 2,86-2,76 (м, 1H) 2,69-2,63 (м, 0,3H), 2,52-2,46 (м, 0,7H), 1,73-1,63 (м, 4H) 1,55 (т, J=5,3 Гц, 3H), 1,14-1,07 (м, 2H), 1,01-0,92 (м, 2H)

ESI-MS m/z 519 (MH⁺)

[0249] Пример 11

Пример 11(1)

Трет-бутил-(2S,4R)-4-(4-амино-6-бром-5-(((R)-1-фенилэтил)карбамоил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-7-ил)-2-метилпирролидин-1-карбоксилат

Добавляли соединение из ссылочного примера 1(2) (1,00 г), (R)-(+)-1-фенилэтиламин (0,503 г), диизопропилэтиламин (1,79 г), и N, N-диметилформамид (10 мл), а затем добавляли HATU (1,58 г). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Затем в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия, а затем полученную смесь экстрагировали этилацетатом. Собранный органический слой промывали водой, а затем насыщенным физиологическим раствором. Полученное сушили над безводным сульфатом натрия, а затем концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали посредством хроматографии на силикагеле (гексан:ацетон) для получения амидной формы (1,53 г). Полученное соединение использовали в последующей реакции без дополнительной очистки.

К амидной форме (1,53 г) добавляли хлороформ (15 мл), а затем полученную смесь охлаждали до 0°C. Затем в реакционную смесь добавляли N-бромсукцинимид (0,88 г), а затем полученную смесь перемешивали при 0°C в течение 1 часа. Затем реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и полученный остаток очищали посредством хроматографии на силикагеле (гексан:этилацетат) для получения интересующего продукта (1,39 г).

¹H-ЯМР (CDCl₃)δ: 8,21 (с, 1H), 7,42-7,28 (м, 5H), 6,97 (д, J=7,3 Гц, 1H), 5,36-5,29 (м, 1H), 5,20-5,07 (м, 1H), 4,30 (т, J=10,3 Гц, 1H), 4,04-3,72 (м, 2H), 3,00-2,86 (м, 1H), 2,38 (дт, J=14,3, 6,0 Гц, 1H), 1,63 (д, J=7,0 Гц, 3H), 1,53-1,43 (м, 12H)

ESI-MS m/z 543,545 (MH⁺)

[0250] Пример 11(2)

7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-6-бром-N-((R)-1-фенилэтил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамид

К соединению из примера 11(1) (600 мг) добавляли хлороформ(3 мл), а затем полученную смесь охлаждали до 0°C. Затем в реакционную смесь добавляли трифторуксусную кислоту (4,44 г), а затем полученную таким образом смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Затем реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении, а затем к остатку добавляли ацетонитрил (5 мл). Полученную смесь снова концентрировали при пониженном давлении для получения аминовой формы. Полученное соединение использовали в последующей реакции без дополнительной очистки.

К полученной аминовой форме добавляли ацетонитрил (3 мл), а затем полученную смесь охлаждали до 0°C. Затем добавляли акрилоилхлорид (99,9 мг) и диизопропилэтиламин (713 мг), а затем полученную смесь перемешивали при 0°C в течение 1 часа. Затем реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и полученный остаток очищали посредством хроматографии на силикагеле (этилацетат:метанол) для получения интересующего продукта (281 мг).

¹H-ЯМР (CDCl₃)δ: 8,20 (д, J=7,3 Гц, 1H), 7,42-7,36 (м, 4H), 7,32-7,28 (м, 1H), 7,00-6,94 (м, 1H), 6,57-6,33 (м, 2H), 5,76-5,66 (м, 1H), 5,36-5,29 (м, 1H), 5,14-5,08 (м, 1H), 4,71 (т, J=9,9 Гц, 0,7H), 4,42-4,23 (м, 1,6H), 3,83 (т, J=8,6 Гц, 0,7H) 3,03-2,92 (м, 1H), 2,60-2,57 (м, 0,3H), 2,44-2,40 (м, 0,7H), 1,64 (д, J=6,6 Гц, 3H), 1,56 (дд, J=11,7, 6,2 Гц, 3H)

ESI-MS m/z 497,499 (MH⁺)

[0251] Пример 11(3)

7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-6-(циклопропилэтинил)-N-((R)-1-фенилэтил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамид

Добавляли соединение из примера 11(2) (65 мг), дихлорбис(трифенилфосфин)палладий (9,2 мг), йодид меди (I) (5,0 мг), циклопропилацетилен (13,0 мг), триэтиламин (39,7 мг) и N, N-диметилформамид (1,3 мл), а затем внутри реакционной системы проводили замещение азотом. Затем смесь перемешивали при 70°C в течение 2,5 часов. Затем в реакционную смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор хлорида аммония, а затем полученную смесь экстрагировали этилацетатом. Собранный органический слой промывали водой, а затем насыщенным физиологическим раствором. Полученное сушили над безводным сульфатом натрия, а затем концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали посредством хроматографии на силикагеле (хлороформ:метанол) для получения интересующего продукта (50 мг).

¹H-ЯМР (CDCl₃)δ: 8,22 (д, J=5,1 Гц, 1H), 7,82 (д, J=7,3 Гц, 1H), 7,43-7,35 (м, 4H), 7,30 (т, J=6,8 Гц, 1H), 6,58-6,34 (м, 2H), 5,77-5,66 (м, 1H), 5,35-5,20 (м, 2H), 4,54 (т, J=10,1 Гц, 0,7H), 4,35-4,25 (м, 1,6H), 3,88 (т, J=8,8 Гц, 0,7H), 2,90-2,78 (м, 1H), 2,65-2,56 (м, 0,3H), 2,49-2,40 (м, 0,7H), 1,63 (д, J=7,0 Гц, 3H), 1,56-1,45 (м, 4H), 1,03-0,91 (м, 2H), 0,84-0,69 (м, 2H)

ESI-MS m/z 483 (MH⁺)

[0252] Пример 12

7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-6-(3,3-диметилбут-1-ин-1-ил)-N-((R)-1-фенилэтил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамид

Титульное соединение получали аналогично описанному в примере 11, за исключением того, что использовали 3,3-диметил-1-бутин вместо циклопропилацетилена в примере 11(3).

¹H-ЯМР (CDCl₃)δ: 8,22 (д, J=5,9 Гц, 1H), 7,75 (д, J=7,7 Гц, 1H), 7,38 (дт, J=15,5, 7,1 Гц, 4H), 7,31-7,25 (м, 1H), 6,57-6,34 (м, 2H), 5,77-5,65 (м, 1H), 5,44-5,35 (м, 1H), 5,33-5,15 (м, 1H), 4,63 (т, J=10,1 Гц, 0,7H), 4,40-4,20 (м, 1,6H), 3,89 (т, J=8,8 Гц, 0,7H), 2,90-2,76 (м, 1H), 2,65-2,55 (м, 0,3H), 2,49-2,40 (м, 0,7H), 1,85 (с, 1H), 1,64 (д, J=7,0 Гц, 3H), 1,55 (д, J=5,9 Гц, 3H), 1,26 (с, 9H)

ESI-MS m/z 499 (MH⁺)

[0253] Пример 13

7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-6-(3-метокси-3-метилбут-1-ин-1-ил)-N-((R)-1-фенилэтил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамид

Титульное соединение получали аналогично описанному в примере 11, за исключением того, что использовали 3-метокси-3-метил-1-бутин вместо циклопропилацетилена в примере 11(3).

¹H-ЯМР (CDCl₃)δ: 8,17 (с, 1H), 7,61 (д, J=7,7 Гц, 1H), 7,43-7,35 (м, 4H), 7,30 (д, J=7,0 Гц, 1H), 6,57-6,33 (м, 2H), 5,81-5,68 (м, 1H), 5,43-5,33 (м, 1H), 5,29-5,12 (м, 1H), 4,59 (т, J=10,1 Гц, 0,7H), 4,38-4,22 (м, 1,6H), 3,92 (т, J=8,6 Гц, 0,7H), 3,30 (с, 3H), 2,86-2,72 (м, 1H), 2,70-2,60 (м, 1,3H), 2,52-2,44 (м, 0,7H), 1,64 (д, J=7,0 Гц, 3H), 1,55 (т, J=5,5 Гц, 3H), 1,46 (д, J=2,2 Гц, 6H)

ESI-MS m/z 515 (MH⁺)

[0254] Пример 14

7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-6-(бут-1-ин-1-ил)-N-((R)-1-фенилэтил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамид

Титульное соединение получали аналогично описанному в примере 11, за исключением того, что использовали 1-триметилсилил-1-бутин и фторид тетра-n-бутиламмония вместо циклопропилацетилена в примере 11(3).

¹H-ЯМР (CDCl₃)δ: 8,26-8,25 (м, 1H), 7,79(д, J=7,3 Гц, 1H), 7,42-7,36 (м, 4H), 7,32-7,30 (м, 1H), 6,57-6,37 (м, 2H), 5,76-5,66 (м, 1H), 5,33-5,20 (м, 2H), 4,57 (т, J=10,3 Гц, 0,7H), 4,36-4,22 (м, 1,6H), 3,88(т, J=8,8 Гц, 0,7H), 2,92-2,81 (м, 1H) 2,65-2,57 (м, 0,3H), 2,48-2,38 (м, 2,7H), 1,63 (д, J=7,0 Гц, 3H), 1,54-1,51 (м, 3H), 1,17-1,12 (м, 3H)

ESI-MS m/z 471 (MH⁺)

[0255] Пример 15

7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-N-(2-(2-фторфенил)пропан-2-ил)-6-(3-метилбут-1-ин-1-ил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамид

Титульное соединение получали аналогично описанному в примере 11, за исключением того, что использовали 2-(2-фторфенил)пропан-2-амин вместо of (R)-(+)-1-фенилэтиламин в примере 11(1), и что использовали 3-метил-1-бутин вместо циклопропилацетилена в примере 11(3).

¹H-ЯМР (CDCl₃)δ: 7,92 (с, 1H), 7,44 (т, J=7,9 Гц, 1H), 7,30-7,23 (м, 1H), 7,14 (т, J=7,5 Гц, 1H), 7,02 (дд, J=12,6, 8,2 Гц, 1H), 6,58-6,35 (м, 2H), 5,80-5,69 (м, 1H), 5,33-5,16 (м, 1H) 4,58 (т, J=9,9 Гц, 0,7H), 4,38-4,23 (м, 1,6H), 3,91 (т, J=8,4 Гц, 0,7H), 3,03-2,93 (м, 1H), 2,89-2,75 (м, 1H), 2,69-2,60 (м, 0,3H), 2,53-2,43 (м, 0,7H), 1,88(с, 6H), 1,55 (д, J=5,1 Гц, 3H), 1,36 (д, J=6,6 Гц, 6H)

ESI-MS m/z 517 (MH+)

[0256] Пример 16

Пример 16(1)

Трет-бутил-(2R,4S)-4-(бензилокси)-2-((тозилокси)метил)пирролидин-1-карбоксилат

Трет-бутил-(2R,4S)-4-(бензилокси)-2-(гидроксиметил)пирролидин-1-карбоксилат (2,0 г) растворяли в метиленхлориде (20 мл), а затем полученный раствор охлаждали до 0°C. Затем в реакционный раствор добавляли 1,4-диазабицикло[2.2.2]октан (2,2 г) и тозилат хлорид (1,9 г), а затем температуру смеси повышали до комнатной температуры. Смесь перемешивали в течение 4 часов. Затем в реакционную смесь добавляли насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия, а затем полученную смесь экстрагировали этилацетатом. Собранный органический слой промывали насыщенным физиологическим раствором, затем сушили над безводным сульфатом натрия, а затем концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали посредством хроматографии на силикагеле (гексан:этилацетат) для получения интересующего продукта (4,32 г).

¹H-ЯМР (CDCl₃)δ: 7,78 (д, J=8,1 Гц, 2H), 7,42-7,29 (м, 7H), 4,57-4,41 (м, 2H), 4,39-3,96 (м, 4H), 3,61-3,20 (м, 2H), 2,46 (с, 3H), 2,27-2,02 (м, 2H), 1,48-1,31 (м, 9H)

ESI-MS m/z 462 (MH⁺)

[0257] Пример 16(2)

Трет-бутил-(2S,4S)-4-(бензилокси)-2-этилпирролидин-1-карбоксилат

В атмосфере азота йодид меди (2,04 г) суспендировали в диэтиловом простом эфире (12 мл), а затем полученную суспензию охлаждали до 0°C. Затем добавляли раствор 1,04 M метиллития в диэтиловом простом эфире (0,36 мл), а затем полученную смесь перемешивали при 0°C в течение 30 минут. Затем в реакционную смесь добавляли раствор соединения из примера 16(1) (1,98 г) в метиленхлориде (4,0 мл), а затем температуру полученной смеси повышали до комнатной температуры. Смесь перемешивали в течение 1 часа. Затем реакционную смесь охлаждали до 0°C, а затем в реакционную смесь добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония. Полученную таким образом смесь экстрагировали этилацетатом. Собранный органический слой промывали насыщенным физиологическим раствором, затем сушили над безводным сульфатом натрия, а затем концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали посредством хроматографии на силикагеле (гексан:этилацетат) для получения интересующего продукта (707 мг).

¹H-ЯМР (CDCl₃)δ: 7,42-7,25 (м, 5H), 4,66-4,40 (м, 2H), 4,17-4,03 (м, 1H), 4,00-3,26 (м, 3H), 2,24-2,09 (м, 1H), 1,96-1,71 (м, 2H), 1,48 (с, 9H), 1,45-1,31 (м, 1H), 0,86 (т, J=7,4 Гц, 3H)

ESI-MS m/z 306 (MH⁺)

[0258] Пример 16(3)

Трет-бутил-(2S,4S)-2-этил-4-гидроксипирролидин-1-карбоксилат

Соединение из примера 16(2) (1,06 г) и 10%-ный катализатор гидроксида палладия на углероде (160 мг) суспендировали в этаноле (11 мл) и THF (11 мл) с последующим замещением водородом, а затем полученное перемешивали при комнатной температуре в течение 20 часов. Затем реакционную смесь фильтровали через целит, а затем промывали этанолом, а затем фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали посредством хроматографии на силикагеле (гексан:этилацетат) для получения интересующего продукта (709 мг).

¹H-ЯМР (CDCl₃)δ: 4,46-4,36 (м, 1H), 4,02-3,81 (м, 1H), 3,71-3,35 (м, 2H), 2,15-1,99 (м, 1H), 1,95-1,72 (м, 2H), 1,49 (с, 9H), 1,46-1,35 (м, 1H), 0,86 (т, J=7,5 Гц, 3H)

ESI-MS m/z 216 (MH⁺)

[0259] Пример 16(4)

Трет-бутил-(2S,4R)-4-(4-хлор-5-йод-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-7-ил)-2-этилпирролидин-1-карбоксилат

Соединение из примера 16(3) (709 мг) и 4-хлор-5-йод-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин (1,11 г) растворяли в THF (7,1 мл), а затем полученный раствор охлаждали до 0°C. Затем добавляли трифенилфосфин (1,3 г) и диизопропилазодикарбоксилат (1,00 мл), а затем температуру полученной смеси повышали до комнатной температуры с последующим перемешиванием смеси в течение 1 часа. Затем реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и полученный остаток затем очищали посредством хроматографии на силикагеле (гексан:этилацетат) для получения соответствующей основы для реакции сочетания. Полученное соединение использовали в последующей реакции без дополнительной очистки. В устойчивую к давлению пробирку добавляли полученную основу для реакции сочетания, THF (5,4 мл) и водный аммиак (5,4 мл), а затем полученную смесь перемешивали при 100°C в течение 14 часов. Затем реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, а затем наливали в воду (12,8 мл), а затем смешанный раствор экстрагировали этилацетатом. Собранный органический слой промывали насыщенным физиологическим раствором, затем сушили над безводным сульфатом натрия, а затем концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали посредством хроматографии на силикагеле (гексан:ацетон) для получения интересующего продукта (797 мг).

¹H-ЯМР (CDCl₃)δ: 8,29 (с, 1H), 7,14 (с, 1H), 5,67 (ш. с., 2H), 5,32-5,09 (м, 1H), 4,24-4,08 (м, 1H), 3,95-3,79 (м, 1H), 3,46 (дд, J=9,3, 11,0 Гц, 1H), 2,70-2,55 (м, 1H), 2,06-1,95 (м, 1H), 1,59-1,51 (м, 2H), 1,49 (с, 9H), 0,91(т, J=7,5 Гц, 3H)

ESI-MS m/z 458 (MH⁺)

[0260] Пример 16(5)

Трет-бутил-(2S,4R)-4-(4-амино-6-бром-5-(((R)-1-фенилэтил)карбамоил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-7-ил)-2-этилпирролидин-1-карбоксилат

Соединение из примера 16(4) (797 мг), дихлорбис(трифенилфосфин)палладий (25 мг) и (R)-(+)-1-фенилэтиламин (0,55 мл) суспендировали в DMF (8,0 мл) с последующим замещением монооксидом углерода, а затем полученное перемешивали при 80°C в течение 2 часов. Затем реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, затем добавляли в нее воду, а затем полученную смесь экстрагировали этилацетатом. Собранный органический слой промывали насыщенным физиологическим раствором, затем сушили над безводным сульфатом натрия, а затем концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали посредством хроматографии на силикагеле (гексан:ацетон) для получения соответствующей амидной формы. Полученное соединение использовали в последующей реакции без дополнительной очистки. Полученную амидную форму растворяли в ацетонитриле (8,2 мл), а затем полученный раствор охлаждали до -10°C. Затем в раствор медленно по каплям добавляли раствор N-бромсукцинимида (457 мг) в ацетонитриле (8,2 мл), а затем реакционную смесь перемешивали в течение 30 минут. Затем в реакционную смесь добавляли водный раствор сульфита натрия и водный раствор гидрокарбоната натрия, а затем полученную смесь экстрагировали этилацетатом. Собранный органический слой промывали насыщенным физиологическим раствором, затем сушили над безводным сульфатом натрия, а затем концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали посредством хроматографии на силикагеле (гексан:ацетон) для получения интересующего продукта (650 мг).

¹H-ЯМР (CDCl₃)δ: 8,23 (с, 1H), 7,49-7,29 (м, 5H), 6,98 (д, J=7,4 Гц, 1H), 5,41-5,28 (м, 1H), 5,24-5,04 (м, 1H), 4,38-4,22 (м, 1H), 4,07-3,68 (м, 1H), 3,19-2,83 (м, 1H), 2,43-2,29 (м, 1H), 2,25-1,67 (м, 3H), 1,66 (д, J=6,9 Гц, 3H), 1,51 (с, 9H), 0,98 (т, J=7,4 Гц, 3H)

ESI-MS m/z 557,559 (MH⁺)

[0261] Пример 16(6)

7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-этилпирролидин-3-ил)-4-амино-6-бром-N-((R)-1-фенилэтил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамид

К соединению из примера 16(5) (650 мг) добавляли ацетонитрил (9,7 мл), а затем полученную смесь охлаждали до 0°C. Затем добавляли йодид натрия (1,05 г) и триметилсилилхлорид (0,89 мл), а затем полученную смесь перемешивали при 0°C в течение 1 часа. Затем в реакционную смесь последовательно добавляли этанол (9,7 мл), изопропилэтиламин (2,0 мл) и ангидрид акриловой кислоты (0,16 мл), а затем полученную смесь перемешивали при 0°C в течение 30 минут. Затем в реакционную смесь добавляли водный аммиак и воду, а затем полученную смесь экстрагировали этилацетатом. Собранный органический слой промывали насыщенным физиологическим раствором, затем сушили над безводным сульфатом натрия, а затем концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали посредством хроматографии на силикагеле (гексан:ацетон) для получения интересующего продукта (256 мг).

¹H-ЯМР (CDCl₃)δ: 8,27-8,16 (м, 1H), 7,47-7,29 (м, 5H), 6,98 (д, J=7,3 Гц, 1H), 6,61-6,29 (м, 2H), 5,84-5,63 (м, 1H), 5,43-5,26 (м, 1H), 5,22-5,01 (м, 1H), 4,80-3,82 (м, 3H), 3,23-2,92 (м, 1H), 2,58-2,30 (м, 1H), 2,22-1,79 (м, 2H), 1,66 (д, J=7,0 Гц, 3H), 1,07-0,96 (м, 3H)

ESI-MS m/z 511,513 (MH⁺)

[0262] Пример 16(7)

7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-этилпирролидин-3-ил)-4-амино-N-((R)-1-фенилэтил)-6-(проп-1-ин-1-ил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамид

К соединению из примера 16(6) (120 мг) добавляли раствор 1,0 M пропина в DMF (0,70 мл), ацетонитрил (1,2 мл), триэтиламин (0,10 мл), PdCl₂(PPh₃)₂ (8,2 мг) и йодид меди (I) (0,4 мг) с последующим замещением азотом, а затем смесь перемешивали при 60°C в течение 2 часов. Затем реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и в смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор хлорида аммония. Полученную таким образом смесь экстрагировали этилацетатом и собранный органический слой промывали водой, а затем насыщенным физиологическим раствором. Полученное сушили над безводным сульфатом натрия, а затем концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали посредством хроматографии на силикагеле (этилацетат:метанол) для получения интересующего продукта (102 мг).

¹H-ЯМР (CDCl₃)δ: 8,26 (с, 1H), 7,79 (ш.д., J=7,0 Гц, 1H), 7,46-7,30 (м, 5H), 6,58-6,31 (м, 2H), 5,80-5,65 (м, 1H), 5,33-5,15 (м, 2H), 4,59-3,85 (м, 3H), 3,03-2,33 (м, 2H), 2,25-1,70 (м, 5H), 1,65 (д, J=6,8 Гц, 6H), 1,09-0,91 (м, 3H)

ESI-MS m/z 471 (MH⁺)

[0263] Пример 17

7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-этилпирролидин-3-ил)-4-амино-6-(циклопропилэтинил)-N-((R)-1-фенилэтил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамид

Титульное соединение получали аналогично описанному в примере 16, за исключением того, что использовали циклопропилацетилен вместо раствора 1,0 M пропина в DMF в примере 16(7).

¹H-ЯМР (CDCl₃)δ: 8,31-8,16 (м, 1H), 7,84 (д, J=7,4 Гц, 1H), 7,46-7,30 (м, 5H), 6,64-6,32 (м, 2H), 5,82-5,67 (м, 1H), 5,39-5,17 (м, 2H), 4,67-3,81 (м, 3H), 3,02-2,80 (м, 1H), 2,62-1,71 (м, 3H), 1,65 (д, J=6,9 Гц, 3H), 1,58-1,47 (м, 1H), 1,06-0,92 (м, 5H), 0,85-0,70 (м, 2H)

ESI-MS m/z 497 (MH⁺)

[0264] Пример 18

7-((3R,5R)-1-акрилоил-5-(метоксиметил)пирролидин-3-ил)-4-амино-6-(циклопропилэтинил)-N-((R)-1-фенилэтил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамид

Титульное соединение получали аналогично описанному в примере 16, за исключением того, что использовали трет-бутил-(2R,4S)-4-гидрокси-2-(метоксиметил)пирролидин-1-карбоксилат вместо соединения из примера 16(3) в примере 16(4), и что использовали циклопропилацетилен вместо раствора 1,0 M пропина в DMF в примере 16(7).

¹H-ЯМР (CDCl₃)δ: 8,29-8,22 (м, 1H), 7,86-7,80 (м, 1H), 7,36-7,44 (м, 4H), 7,34-7,28 (м, 1H), 6,48-6,37 (м, 2H), 5,78-5,69 (м, 1H), 5,29-5,15 (м, 2H), 4,55-4,30 (м, 2H), 3,96-3,65 (м, 3H), 3,42 (с, 3H), 3,18-3,06 (м, 0,3H), 2,90-2,80 (м, 0,3H), 2,64-2,58 (м, 0,3H), 2,47-2,35 (м, 0,7H), 1,64 (д, 3H, J=6,9 Гц), 1,58-1,47 (м, 1H), 1,04-0,94 (м, 2H), 0,87-0,69 (м, 2H)

ESI-MS m/z 513 (MH⁺)

[0265] Пример 19

7-((3R,5R)-1-акрилоил-5-(этоксиметил)пирролидин-3-ил)-4-амино-6-(циклопропилэтинил)-N-((R)-1-фенилэтил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамид

Титульное соединение получали аналогично описанному в примере 16, за исключением того, что использовали трет-бутил-(2R,4S)-2-(этоксиметил)-4-гидроксипирролидин-1-карбоксамид вместо соединения из примера 16(3) в примере 16(4), и что использовали циклопропилацетилен вместо раствора 1,0 M пропина в DMF в примере 16(7).

¹H-ЯМР (CDCl₃)δ: 8,28-8,18 (м, 1H), 7,84 (ш.д., J=7,0 Гц, 1H), 7,47-7,29 (м, 5H), 6,82-6,35 (м, 2H), 5,79-5,68 (м, 1H), 5,40-5,14 (м, 2H), 4,63-3,53 (м, 7H), 3,20-2,79 (м, 1H), 2,69-2,40 (м, 1H), 1,67-1,63 (м, 3H), 1,59-1,47 (м, 1H), 1,22 (т, J=7,0 Гц, 3H), 1,05-0,92 (м, 2H), 0,87-0,72 (м, 2H)

ESI-MS m/z 527 (MH⁺)

[0266] Сравнительный пример 1

4-амино-N-(4-(метоксиметил)фенил)-7-(1-метилциклопропил)-6-(проп-1-ин-1-ил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамид

Титульное соединение получали способом, описанным в примере 95 международной публикации № WO 2017/146116.

ESI-MS m/z 390 (MH⁺)

[0267] Сравнительный пример 2

1-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-N-(4-(2-(диметиламино)-2-оксоэтил)-2,3-диметилфенил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-3-карбоксамид

Титульное соединение получали способом, описанным в примере 79 международной публикации № WO 2017/038838.

ESI-MS m/z 505 (MH⁺)

[0268] Сравнительный пример 3

7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-N-(циклогексилметил)-6-(проп-1-ин-1-ил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамид

Титульное соединение получали аналогично описанному в примере 1, за исключением того, что использовали циклогексилметанамин вместо (R)-1-(3,5-дифторфенил)этан-1-амина в примере 1(5).

¹H-ЯМР (DMSO-d6)δ: 8,68-8,31 (м, 1H), 8,20-8,10 (м, 1H), 8,09-7,97 (м, 1H), 7,59-7,20 (м, 1H), 6,74-6,49 (м, 1H), 6,25-6,09 (м, 1H), 5,78-5,60 (м, 1H), 5,40-5,20 (м, 1H), 4,44-4,29 (м, 1H), 4,23-3,92 (м, 2H), 3,25-3,12 (м, 2H), 2,76-2,40 (м, 2H), 2,25 (с, 3H), 1,81-1,45 (м, 5H), 1,43-1,34 (м, 3H), 1,30-0,90 (м, 6H)

ESI-MS m/z 449 (MH⁺)

[0269] Сравнительный пример 4

7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-N-(2-метилбензил)-6-(проп-1-ин-1-ил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамид

Титульное соединение получали аналогично описанному в примере 1, за исключением того, что использовали o-толилметанамин вместо (R)-1-(3,5-дифторфенил)этан-1-амина в примере 1(5).

¹H-ЯМР (DMSO-d6)δ: 8,37-8,27 (м, 1H), 8,19-8,09 (м, 1H), 7,39-7,30 (м, 1H), 7,26-7,11 (м, 4H), 6,68-6,48 (м, 1H), 6,24-6,07 (м, 1H), 5,80-5,60 (м, 1H), 5,36-5,17 (м, 1H) 4,52 (д, J=5,7 Гц, 2H), 4,42-4,28 (м, 1H), 4,22-3,92 (м, 2H), 2,73-2,42 (м, 2H), 2,33 (с, 3H), 2,02 (с, 3H), 1,43-1,32 (м, 3H)

ESI-MS m/z 457 (MH+)

[0270] Сравнительный пример 5

7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-N-метил-N-((R)-1-фенилэтил)-6-(проп-1-ин-1-ил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамид

Титульное соединение получали аналогично описанному в примере 1, за исключением того, что использовали (R)-N-метил-1-фенилэтан-1-амин вместо (R)-1-(3,5-дифторфенил)этан-1-амина в примере 1(5).

¹H-ЯМР (CDCl₃)δ: 8,23 (д, J=5,9 Гц, 1H), 7,50-7,28 (м, 4H) 7,09-6,88 (м, 1H), 6,57-6,34 (м, 2H), 5,79-5,64 (м, 1H), 5,22 (т, J=9,3 Гц, 1H), 4,48 (т, J=9,7 Гц, 0,6H), 4,39-4,20 (м, 1,9H), 3,90 (т, J=8,6 Гц, 0,5H), 2,85 (с, 4H), 2,66-2,63 (м, 0,4H), 2,51-2,44 (м, 0,6H), 2,07 (с, 2H), 1,66 (д, J=4,8 Гц, 3H), 1,52 (д, J=5,9 Гц, 3H)

ESI-MS m/z 471 (MH+)

[0271] Сравнительный пример 6(1)

Трет-бутил-(2S,4R)-4-(4-амино-5-(((R)-1-фенилэтил)карбамоил)-6-(проп-1-ин-1-ил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-7-ил)-2-метилпирролидин-1-карбоксилат

К соединению из примера 11(1) (230 мг) добавляли раствор 1,0 M пропина в DMF(2,1 мл), ацетонитрил (4,6 мл), триэтиламин (0,29 мл), PdCl₂(PPh₃)₂ (5,9 мг) и йодид меди (I) (1,6 мг) с последующим замещением азотом, а затем полученную смесь перемешивали при 70°C в течение 1 часа. Затем реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, а затем в смесь добавляли этилацетат и насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Полученную таким образом смесь экстрагировали этилацетатом, и собранный органический слой промывали водой, а затем насыщенным физиологическим раствором. Полученное сушили над безводным сульфатом натрия, а затем концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали посредством хроматографии на силикагеле (гексан:этилацетат) для получения интересующего продукта (193 мг).

¹H-ЯМР (CDCl₃)δ: 8,23 (с, 1H), 7,79 (д, J=6,8 Гц, 1H), 7,46-7,27 (м, 5H), 5,40-5,17 (м, 2H), 4,28-3,64 (м, 3H), 2,85-2,68 (м, 1H), 2,46-2,36 (м, 1H), 2,15-1,97 (м, 3H), 1,62 (д, J=6,8 Гц, 3H), 1,56-1,32 (м, 12H)

ESI-MS m/z 503 (MH⁺)

[0272] Сравнительный пример 6(2)

4-амино-7-((3R,5S)-5-метилпирролидин-3-ил)-N-((R)-1-фенилэтил)-6-(проп-1-ин-1-ил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамид гидрохлорид

К соединению из сравнительного примера 6(1) (530 мг) добавляли раствор 4 M соляной кислоты в 1,4-диоксане (5 мл), а затем полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Затем реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении для получения интересующего продукта (420 мг).

ESI-MS m/z 403 (MH⁺)

[0273] Сравнительный пример 6(3)

4-амино-7-((3R,5S)-1-((E)-бут-2-еноил)-5-метилпирролидин-3-ил)-N-((R)-1-фенилэтил)-6-(проп-1-ин-1-ил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамид

К соединению из сравнительного примера 6(2) (18 мг) добавляли ацетонитрил (0,5 мл), а затем полученную смесь охлаждали до 0°C. Затем в реакционную смесь добавляли акрилоилхлорид (0,004 мл) и диизопропилэтиламин (0,036 мл), а затем полученную таким образом смесь перемешивали при 0°C в течение 1 часа. Затем реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении, а затем подвергали препаративной обращенно-фазовой ВЭЖХ (вода: ацетонитрил (0,1% муравьиной кислоты)) для получения интересующего продукта (8,7 мг).

¹H-ЯМР (CDCl₃)δ: 8,31 (с, 1H), 8,14 (д, J=6,2 Гц, 1H), 7,77 (д, J=7,0 Гц, 1H), 7,39-7,36 (м, 4H), 7,33-7,31 (м, 1H), 7,03-6,90 (м, 1H), 6,06 (дд, J=14,3 Гц, 1H), 5,28-5,17 (м, 2H), 4,48 (т, J=10,1 Гц, 1H), 4,35-4,20 (м, 2H), 3,88 (т, 8,8 Гц, 1H), 2,84-2,76 (м, 1H), 2,64-2,40 (м, 1H), 2,05 (д, J=10,6 Гц, 3H), 1,92 (д, J=6,6 Гц, 1H), 1,85 (д, J=7,0 Гц, 2H), 1,62 (д, J=7,0 Гц, 3H), 1,55 (дд, J=9,0, 5,7 Гц, 3H)

ESI-MS m/z 471 (MH⁺)

[0274] Соединения, синтезированные в описанных выше примерах и сравнительных примерах, приведены ниже.

[Таблица 1]

№ примера Структурная формула № примера Структурная формула 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19

[0275] [Таблица 2]

№ сравнит. примера Структурная формула № сравнит. примера Структурная формула 1 2 3 4 5 6

[0276] Тестовый пример 1. Измерение ингибиторного эффекта (in vitro) в отношении активности фосфорилирования HER2

Для определения условий для способа измерения in vitro ингибиторной активности соединения против активности фосфорилирования HER2, учитывая сообщение, касающееся киназной реакции HER2 с использованием в качестве субстрата пептида, имеющего ту же последовательность (5-FAM-EEPLYWSFPAKKK-CONH₂), что и Пептид 22 ProfilerPro от PerkinElmer (Xie H et al., PLoS One.2011; 6(7): e21487), использовали Пептид 22 ProfilerPro в качестве субстрата. Очищенный рекомбинантный человек белок HER2, используемый в этом тесте, приобретали в Carna Biosciences, Inc. При измерении ингибиторной активности пиримидинового соединения сначала соединение по изобретению постепенно разводили диметилсульфоксидом (DMSO). Затем белок HER2, пептид-субстрат (конечная концентрация: 1 мкМ), хлорид марганца (конечная концентрация: 10 мМ), АТФ (конечная концентрация: 5 мкМ) и раствор пиримидинового соединения по изобретению в DMSO (конечная концентрация DMSO: 5%) добавляли в буфер для киназной реакции (13,5 мМ Трис (pH 7,5), 2 мМ дитиотреитол и 0,009% Tween 20), а затем полученную смесь инкубировали при 25°C в течение 30 минут, таким образом, что осуществляли киназную реакцию. В реакционный раствор добавляли ЭДТА до конечной концентрации 30 мМ для прекращения реакции. В конечном итоге, используя LabChip (зарегистрированная торговая марка) EZ Reader II (PerkinElmer), разделяли и определяли нефосфорилированный пептид-субстрат (S) и фосфорилированный пептид (P) с помощью микроканального капиллярного электрофореза. Из высоты пиков S и P получали степень реакции фосфорилирования и концентрацию соединения, способную ингибировать реакцию фосфорилирования на 50%, определяли как значение IC₅₀ (нМ). Результаты приведены в таблице 3.

[0277] Тестовый пример 2. Измерение ингибиторного действия (in vitro) против активности фосфорилирования мутантного HER2 с инсерцией в экзоне 20 (HER2ex20insYVMA)

Для определения условий для способа измерения in vitro ингибиторной активности соединения против активности фосфорилирования мутантного HER2 с инсерцией в экзоне 20, как в случае HER2, в качестве субстрата использовали Пептид 22ProfilerPro. Очищенный рекомбинантный мутантный белок HER2 человека с инсерцией в экзоне 20 (A775_G776insYVMA) приобретали в SignalChem. При измерении ингибиторной активности соединения сначала пиримидиновое соединение по изобретению постепенно разводили диметилсульфоксидом (DMSO). Затем, мутантный белок HER2 с инсерцией в экзоне 20 и раствор пиримидинового соединения по изобретению в DMSO (конечная концентрация DMSO: 5%) добавляли в буфер для киназной реакции (13,5 мМ Трис (pH 7,5), 2 мМ дитиотреитол и 0,009% Tween 20), а затем полученную смесь предварительно инкубировали при 25°C в течение 30 минут. Затем в реакционную смесь добавляли пептид-субстрат (конечная концентрация: 1 мкМ), хлорид марганца (конечная концентрация: 25 мМ), хлорид магния (конечная концентрация: 20 мМ) и АТФ (конечная концентрация: 200 мкМ), и полученную таким образом смесь затем инкубировали при 25°C в течение 220 минут, таким образом, что осуществляли киназную реакцию. В реакционный раствор добавляли ЭДТА до конечной концентрации 30 мМ для прекращения реакции. В конечном итоге, используя LabChip (зарегистрированная торговая марка) EZ Reader II (PerkinElmer), разделяли и определяли нефосфорилированный пептид-субстрат (S) и фосфорилированный пептид (P) с помощью микроканального капиллярного электрофореза. Из высоты пиков S и P получали степень реакции фосфорилирования и концентрацию соединения, способную ингибировать реакцию фосфорилирования на 50%, определяли как значение IC₅₀ (нМ). Результаты приведены в таблице 3.

[0278] [Таблица 3]

№ примера Ингибиторная активность против HER2
Значение IC₅₀ (нМ) Ингибиторная активность против HER2ex20insYVMA
Значение IC₅₀ (нМ) 1 2,7 0,34 2 2,5 <0,30 3 5,8 <0,30 4 3,9 0,37 5 7,7 0,38 6 2,8 <0,30 7 4,9 0,39 8 10 <0,30 9 5,6 0,32 10 2,2 <0,30 11 3,2 <0,30 12 3,4 0,39 13 5,2 0,44 14 2,2 <0,30 15 4,6 0,42 16 3,3 0,44 17 2,9 0,54 18 2,3 <0,30 19 4,4 1,1 Сравнит. пример 1 >10000 >10000 Сравнит. пример 2 19 4,4 Сравнит. пример 3 630 380 Сравнит. пример 4 54 11 Сравнит. пример 5 130 14 Сравнит. пример 6 390 >10000

[0279] Учитывая описанные выше результаты, обнаружено, что пиримидиновое соединение по изобретению обладает исключительной ингибиторной активностью против фосфорилирования HER2 и фосфорилирования мутантного HER2 с инсерцией в экзоне 20.

[0280] Тестовый пример 3. Измерение активности ингибирования роста в отношении HER2-экспрессирующей линии клеток

Клетки SK-BR-3 в качестве HER2-гиперэкспрессирующей линии клеток рака молочной железы человека суспендировали в среде МакКоя 5A (производимый Life Technologies), дополненной 10%-ной эмбриональной телячьей сывороткой. Суспензию клеток высевали в каждую лунку 384-луночного плоскодонного микропланшета, а затем культивировали в культуральном сосуде, содержащем 5%-ный газообразный диоксид углерода, при 37°C в течение 1 дня. Затем соединение по изобретению растворяли в DMSO и пиримидиновое соединение разводили в 500 раз до конечной концентрации в DMSO. Раствор соединения в DMSO разводили раствором DMSO или средой, используемой в суспензии клеток, а затем полученный раствор добавляли в каждую лунку культурального планшета так, чтобы конечная концентрация DMSO составляла 0,2%. Полученную смесь дополнительно культивировали в культуральном сосуде, содержащем 5%-ный газообразный диоксид углерода, при 37°C в течение 3 дней. После завершения культивирования в течение 3 дней в присутствии соединения клетки подсчитывали с использованием CellTiter-Glo 2.0 (производимый Promega), а затем вычисляли процент ингибирования роста по следующему уравнению. Концентрация соединения, при которой рост клеток можно ингибировать на 50%, определяли как IC₅₀ (нМ).

Процент ингибирования роста (%)=(C-T)/(C)×100

T: Интенсивность излучения из лунки, в которую добавляли тестируемое соединение

C: Интенсивность излучения из лунки, в которую не добавляли тестируемое соединение

Результаты приведены в следующей таблице 4.

[0281] Тестовый пример 4 Измерение активности ингибирования роста против линии клеток, экспрессирующей мутантный HER2 с инсерцией в экзоне 20

Активность ингибирования роста против мутантного HER2 с инсерцией в экзоне 20 измеряли с использованием клеток Ba/F3, являвшихся линией клеток-предшественников B-лимфоцитов мыши, в которую встраивали ген мутантного HER2 человека с инсерцией в экзоне 20. Клетки Ba/F3 поддерживали в среде RPMI-1640 (Thermo Fisher Scientific), дополненной 10%-ной эмбриональной телячьей сывороткой (FBS), 100 ед./мл пенициллина, 100 мкг/мл стрептомицина (Thermo Fisher Scientific) и 1 нг/мл мышь интерлейкина-3 (mIL-3) (CST). Затем вектор pCDNA3.1-hyg(+), в который встраивали ген мутантного HER2 человека с инсерцией в экзоне 20 (A775_G776insYVMA (HER2ex20insYVMA)), участок внутреннего связывания рибосомы (IRES) и ген Kusabira Orange, встраивали в клетки Ba/F3 способом электропорации с использованием набора V Amaxa (зарегистрированная торговая марка) CELL Line Nucleofector (зарегистрированная торговая марка). Клетки Ba/F3, экспрессирующие мутантный HER2 с инсерцией в экзоне 20 (Ba/F3-HER2insYVMA), которые подвергали селекции с помощью гигромицина B (Nacalai Tesque), демонстрировали mIL-3-независимый рост.

При оценке ингибиторной активности в отношении роста клеток клетки Ba/F3-HER2insYVMA суспендировали в среде RPMI-1640, дополненной 10% FBS, 100 ед./мл пенициллина и 100 мкг/мл стрептомицина. Суспензию клеток высевали в каждую лунку 96-луночного плоскодонного микропланшета, а затем культивировали в культуральном сосуде, содержащем 5%-ный газообразный диоксид углерода, при 37°C в течение 1 дня. Пиримидиновое соединение по изобретению растворяли в DMSO, а затем разводили в DMSO или среде, используемой в суспензии клеток. Затем полученный раствор добавляли в каждую лунку культурального планшета так, чтобы конечная концентрация DMSO составляла 0,2%. Полученную смесь дополнительно культивировали в культуральном сосуде, содержащем 5%-ный газообразный диоксид углерода, при 37°C в течение 3 дней. После завершения культивирования в течение 3 дней в присутствии соединения клетки подсчитывали с использованием CellTiter-Glo 2.0 (производимый Promega), а затем вычисляли процент ингибирования роста по следующему уравнению. концентрацию соединения, при которой рост клеток можно ингибировать на 50%, определяли как IC₅₀ (нМ).

Процент ингибирования роста (%)=(C-T)/(C)×100

T: Интенсивность излучения из лунки, в которую добавляли тестируемое соединение

C: Интенсивность излучения из лунки, в которую не добавляли тестируемое соединение

Результаты приведены в следующей таблице 4.

[0282] [Таблица 4]

№ примера Ингибиторная активность в отношении роста клеток SK-BR-3
Значение IC₅₀ (нМ) Ингибиторная активность в отношении роста клеток HER2ex20insYVMA
Значение IC₅₀ (нМ) 1 9,3 17 2 2,8 12 3 4,5 25 4 5,6 20 5 4,0 14 6 10 28 7 12 40 8 14 26 9 4,2 24 10 13 29 11 6,6 29 12 17 43 13 14 23 14 8,1 27 15 7,0 40 16 1,4 9,7 17 4,0 20 18 3,4 14 19 17 50 Сравнит. пример 1 >10000 >10000 Сравнит. пример 2 25 1900 Сравнит. пример 3 4300 3400 Сравнит. пример 4 340 900 Сравнит. пример 5 400 1300 Сравнит. пример 6 3000 4100

[0283] Учитывая описанные выше результаты, обнаружено, что группа пиримидиновых соединений по настоящему изобретению обладает исключительной ингибиторной активностью в отношении роста клеток даже против HER2-экспрессирующей линии клеток (SK-BR-3), а также против линии клеток, экспрессирующей мутантный HER2 с инсерцией в экзоне 20 (Ba/F3-HER2insYVMA).

[0284] Тестовый пример 5. Измерение активности ингибирования роста HER2-экспрессирующей линии клеток (NCI-N87)

Клетки NCI-N87 в качестве HER2-гиперэкспрессирующей линии клеток рака желудка человека (American Type Culture Collection, кат. № ATCC (зарегистрированная торговая марка) CRL-5822) суспендировали в среде RPMI1640 (FUJIFILM Wako Pure Chemical Cooperation), дополненной 10%-ной эмбриональной телячьей сывороткой. Затем суспензию клеток высевали в каждую лунку 96-луночного плоскодонного микропланшета, а затем культивировали в культуральном сосуде, содержащем 5%-ный газообразный диоксид углерода, при 37°C в течение 1 дня. Затем соединение по изобретению растворяли в DMSO и соединение разводили в 1000 раз до конечной концентрации в DMSO. Раствор соединения в DMSO разводили средой, используемой в суспензии клеток, а затем полученный раствор добавляли в каждую лунку культурального планшета так, чтобы конечная концентрация DMSO составляла 0,1%. В случа контрольной лунки, DMSO разводили средой, используемой в суспензии клеток, а затем полученный раствор добавляли в каждую лунку культурального планшета так, чтобы конечная концентрация DMSO составляла 0,1%. После добавления раствора лекарственного средства полученную смесь дополнительно культивировали в культуральном сосуде, содержащем 5%-ный газообразный диоксид углерода, при 37°C в течение 3 дней. После завершения культивирования в течение 3 дней в присутствии соединения клетки подсчитывали с использованием CellTiter-Glo 2.0 (производимый Promega) по инструкциям Promega. Процент ингибирования роста вычисляли по следующему уравнению. Концентрацию соединения, при которой рост клеток можно ингибировать на 50%, определяли как IC₅₀ (нМ).

Процент ингибирования роста (%)=(C-T)/(C)×100

T: Интенсивность излучения из лунки, в которую добавляли тестируемое соединение

C: Интенсивность излучения из лунки, в которую не добавляли тестируемое соединение

Результаты приведены в следующей таблице 5.

[0285] [Таблица 5]

№ примера Ингибиторная активность в отношении роста клеток NCI-N87
Значение IC₅₀ (нМ) 1 10,7 2 3,0 3 4,7 4 5,6 5 7,0 6 8,5 7 11,1 8 9,7 9 6,2 10 10,5 11 9,9 12 15,0 13 11,7 14 9,1 15 11,6 16 0,9 17 2,2 18 2,6 19 7,9

[0286] Учитывая описанные выше результаты, обнаружено, что пиримидиновое соединение по изобретению обладает исключительной ингибиторной активностью в отношении роста клеток даже против HER2-гиперэкспрессирующей линии клеток (NCI-N87).

[0287] Тестовый пример 6. Измерение эффекта ингибирования активности фосфорилирования (in vitro) в отношении EGFR дикого типа и мутантного EGFR

Измерение ингибиторной активности in vitro соединения против EGFR дикого типа и мутантного EGFR передавали на аутсорсинг в Carna Biosciences, Inc. (Kinase Profiling Book, https://www.carnabio.com/japanese/product/search.cgi?mode=profiling).

[0288] В частности, сначала пиримидиновое соединение по изобретению постепенно разводили диметилсульфоксидом (DMSO). Затем белок EGFR, пептид-субстрат (Srctide, конечная концентрация: 1 мкМ), хлорид магния (конечная концентрация: 5 мМ), хлорид марганца (конечная концентрация: 1 мМ), АТФ (конечная концентрация: приблизительно Km каждого EGFR) и раствор пиримидинового соединения по изобретению в DMSO (конечная концентрация DMSO: 1%) добавляли в буфер для киназной реакции (20 мМ HEPES (pH 7,5), 1 мМ дитиотреитол и 0,01% Triton X-100), а затем полученную смесь инкубировали при комнатной температуре в течение 1 часа, таким образом, что осуществляли киназную реакции. В реакционный раствор добавляли терминирующий буфер для прекращения киназной реакции. В конечном итоге, используя LabChip(TM) EZ Reader II (PerkinElmer), разделяли нефосфорилированный пептид-субстрат (S) и фосфорилированный пептид (P) и определяли с помощью микроканального капиллярного электрофореза. Из высот пиков S и P получали степень реакции фосфорилирования, и концентрацию соединения, способную ингибировать реакцию фосфорилирования на 50%, определяли как значение IC₅₀ (нМ). Результаты приведены в следующей таблице.

В качестве пиримидинового соединения по изобретению использовали соединение из примера 11 (пример соединения 11).

[0289] [Таблица 6]

Киназы IC₅₀ (нмоль/л) Пример соединения 11 EGFR 0,47 EGFR [d746-750] 0,25 EGFR [d746-750/T790M] 6,8 EGFR [L858R] 0,36 EGFR [T790M/L858R] 6,6 EGFR [D770_N771insNPG] 0,55

[0290] Учитывая описанные выше результаты, обнаружено, что пиримидиновое соединение по изобретению обладает исключительной ингибиторной активностью против EGFR дикого типа и мутантного EGFR.

[0291] Тестовый пример 7. Измерение активности ингибирования роста против EGFR-гиперэкспрессирующей линии клеток и линии клеток, экспрессирующей мутантный EGFR с инсерцией в экзоне 20

Активность ингибирования роста против EGFR-гиперэкспрессирующей линии клеток и линии клеток, экспрессирующей мутантный EGFR с инсерцией в экзоне 20, оценивали с использованием клеток MDA-MB-468 (ATCC) в качестве EGFR-гиперэкспрессирующей линии клеток рака молочной железы человека; клеток NCI-H1975 (ATCC) в качестве мутантных по L858R и T790M EGFR-положительных клеток рака легких человека; и клетки MCF10A_EGFR, клетки MCF10A_EGFR/V769_D770insASV, клетки MCF10A_EGFR/D770_N771insSVD и клетки MCF10A_EGFR/H773_V774insNPH (Fukushima Medical University), где клетки получали посредством встраивания гена EGFR (WT, мутантного D769_N770insASV, мутантного D770_N771insSVD, мутантного H773_V774insNPH) в клетки MCF10A в качестве нормальных клеток молочной железы человека.

[0292] Клетки MDA-MB-468 суспендировали в среде Лейбовица L-15, содержащей 10%-ную инактивированную эмбриональную телячью сыворотку. Клетки NCI-H1975 суспендировали в среде RPMI-1640, содержащей 10%-ную инактивированную эмбриональную телячью сыворотку. Клетки MCF10A_EGFR, клетки MCF10A_EGFR/V769_D770insASV, клетки MCF10A_EGFR/D770_N771insSVD или клетки MCF10A_EGFR/H773_V774insNPH суспендировали в среде DMEM/Хэма F-12 (содержащей L-глутамин, феноловый красный, HEPES и пируват натрия), содержащей 10 мкг/мл инсулина, 500 нг/мл гидрокортизона, 5 мкмоль/л форсколина и 5%-ную инактивированную лошадиную сыворотку в своих конечных концентрациях. Каждую суспензию клеток высевали в каждую лунку 96-луночного плоскодонного планшета так, чтобы количество клеток на лунку составляло 500, а затем культивировали в культуральном сосуде без газообразного диоксида углерода для клеток MDA-MB-468 и в культуральном сосуде, содержащем 5%-ный газообразный диоксид углерода, для других клеток при 37°C в течение 1 дня. Пиримидиновое соединение по изобретению подготавливали в концентрации 1 мМ в DMSO, а затем разводили 1/200 средой для получения раствора 5 мкМ. Затем раствор пиримидинового соединения по изобретению в DMSO разводили средой, используемой в суспензии клеток, а затем полученный раствор добавляли в каждую лунку так, чтобы конечная наибольшая концентрация тестируемого соединения составляла 1000 нМ. Полученную смесь дополнительно культивировали в культуральном сосуде без газообразного диоксида углерода для клеток MDA-MB-468 и в культуральном сосуде, содержащем 5%-ный газообразный диоксид углерода, для других клеток при 37°C в течение 3 дней.

[0293] Клетки в начале культивирования (день 0) и после культивирования (день 3) подсчитывали с использованием реагента CellTiter-Glo® 2.0 (Promega Corp.) по инструкциям производителя. Процент ингибирования роста вычисляли по приведенному ниже уравнению для определения 50%-ной ингибирующей концентрации (GI₅₀ (нМ)) тестируемого соединения. Результаты приведены в таблице 7. В качестве пиримидинового соединения по изобретению использовали соединения из примеров 2, 11 и 12 (примеры соединений 2, 11 и 12).

[0294] 1) В случае T_{день 3}≥C_{день 0}

Процент роста (%)=(T_{день 3}-C_{день 0})/(C_{день 3}-C_{день 0})×100

T: Интенсивность излучения из лунки, в которую добавляли тестируемое соединение

C: Интенсивность излучения из лунки, в которую не добавляли тестируемое соединение

день 0: День, в который добавляли тестируемое соединение

день 3: День оценки

[0295] 2) В случае T_{день 3}<C_{день 0}

Процент роста (%)=(T_{день 3}-C_{день 0})/(C_{день 0})×100

T: Интенсивность излучения из лунки, в которую добавляли тестируемое соединение

C: Интенсивность излучения из лунки, в которую не добавляли тестируемое соединение

день 0: День, в который добавляли тестируемое соединение

день 3: День оценки

[0296] [Таблица 7]

Ингибиторная активность в отношении роста клеток, значение GI₅₀ (нМ) MDA-MB-468 NCI-H1975 Клетка MCF10A_EGFR (EGFR-WT) Клетка MCF10A_EGFR/V769_D770insASV Клетка MCF10A_EGFR/D770_N771insSVD Клетка MCF10A_EGFR/H773_V774insNPH Пример соединения 2 81 77 55 6,7 8,2 16 Пример соединения 11 99 87 81 7,3 10 18 Пример соединения 12 221 153 206 24 27 50

[0297] Учитывая описанные выше результаты, обнаружено, что группа пиримидиновых соединений по настоящему изобретению также обладает исключительной ингибиторной активностью в отношении роста клеток против гиперэкспрессирующей EGFR дикого типа линии клеток MDA-MB-468, клеток MCF10A_EGFR, экспрессирующих встроенный ген EGFR дикого типа, мутантных по L858R и T790M EGFR-положительных клеток NCI-H1975 и линий клеток, экспрессирующих мутантный EGFR с инсерцией в экзоне 20 (клеток MCF10A_EGFR/V769_D770insASV, клеток MCF10A_EGFR/D770_N771insSVD и клеток MCF10A_EGFR/H773_V774insNPH).

[0298] Тестовый пример 8. Измерение активности ингибирования роста против линии клеток, экспрессирующей мутантный EGFR с инсерцией в экзоне 20

Активность ингибирования роста против мутантного EGFR с инсерцией в экзоне 20 оценивали с использованием клеток H1975-EGFRinsSVD, полученных посредством генетической модификации клеток NCI-H1975 для экспрессии мутантного EGFR D770_N771insSVD и нокаута эндогенного EGFR (T790M/L858R), и клеток LXF 2478 (Charles River Laboratories, Inc.) из полученной из пациента, положительной по V769_D770insASV мутантному EGFR опухоли рака легких человека.

[0299] Клетки H1975-EGFRinsSVD получали посредством встраивания вектора PB-CMV-MCS-EF1-RFP+Puro, кодирующего D770_N771insSVD (insSVD), вместе с вектором, экспрессирующим транспозазу Super PiggyBac, в клетки NCI-H1975 посредством электропорации с использованием набора R Amaxa® Cell Line Nucleofector®, а затем селекции клеток с использованием пуромицина (Sigma-Aldrich Co. LLC.), а затем встраивания в него сайт-специфических нуклеаз TALEN XTN® (Transposagen Bio) посредством электропорации с использованием набора R Amaxa® Cell Line Nucleofector® и селекции посредством секвенирования клеток, в которых эндогенный EGFR (T790M/L858R) подвергнут нокауту.

[0300] При оценке ингибиторного эффекта в отношении роста клеток клетки каждой линии суспендировали в среде RPMI-1640. Суспензию клеток высевали в каждую лунку 96-луночного плоскодонного планшета так, чтобы количество клеток на лунку составляло 3000, а затем культивировали в культуральном сосуде, содержащем 5%-ный газообразный диоксид углерода, при 37°C в течение 1 дня. Пиримидиновое соединение по изобретению, полученное в примерах 1- 15 (примеры соединений 1-15), или соединения, полученные в сравнительных примерах 1 и 2 (соединения из сравнительных примеров 1-2), растворяли в концентрации 1 мМ в DMSO, а затем добавляли в каждую лунку с использованием цифрового диспенсера Tecan D300e (Tecan Trading AG) так, чтобы конечная наибольшая концентрация тестируемого соединения составляла 1000 нМ, и общее соотношение составляло 3. Клетки культивировали в культуральном сосуде, содержащем 5%-ный газообразный диоксид углерода, при 37°C в течение 3 дней. Клетки в начале культивирования (день 0) и после культивирования (день 3) подсчитывали с использованием реагента CellTiter-Glo® 2.0 (Promega Corp.) по инструкциям производителя. Процент ингибирования роста вычисляли по приведенному ниже уравнению для определения 50%-ной ингибирующей концентрации (GI₅₀ (нМ)) тестируемого соединения. Результаты приведены в таблице 8.

[0301] 1) В случае T_{день 3}≥C_{день 0}

Процент роста (%)=(T_{день 3}-C_{день 0})/(C_{день 3}-C_{день 0})×100

T: Интенсивность излучения из лунки, в которую добавляли тестируемое соединение

C: Интенсивность излучения из лунки, в которую не добавляли тестируемое соединение

день 0: День, в который добавляли тестируемое соединение

день 3: День оценки

[0302] 2) В случае T_{день 3}<C_{день 0}

Процент роста (%)=(T_{день 3}-C_{день 0})/(C_{день 0})×100

T: Интенсивность излучения из лунки, в которую добавляли тестируемое соединение

C: Интенсивность излучения из лунки, в которую не добавляли тестируемое соединение

день 0: День, в который добавляли тестируемое соединение

день 3: День оценки

[0303] [Таблица 8]

Ингибиторная активность в отношении роста клеток, значение GI₅₀ (нМ) Клетка H1975-EGFRinsSVD Клетка LXF 2478 Пример соединения 1 44 29 Пример соединения 2 9,5 11 Пример соединения 3 77 24 Пример соединения 4 13 15 Пример соединения 5 33 24 Пример соединения 6 29 29 Пример соединения 7 33 33 Пример соединения 8 25 26 Пример соединения 9 65 34 Пример соединения 10 39 40 Пример соединения 11 17 19 Пример соединения 12 52 48 Пример соединения 13 48 46 Пример соединения 14 30 27 Пример соединения 15 101 58 Сравнительный пример 1 >1000 >1000 Сравнительный пример 2 >1000 >1000

[0304] Учитывая описанные выше результаты, обнаружено, что группа пиримидиновых соединений по настоящему изобретению также обладает исключительной ингибиторной активностью в отношении роста клеток против линий клеток, экспрессирующих мутантный EGFR с инсерцией в экзоне 20 (H1975-EGFRinsSVD и LXF 2478).

[0305] Тестовый пример 9. Оценка пероральной всасываемости

Пиримидиновое соединение по изобретению суспендировали или растворяли в 0,5% водном растворе HPMC и 0,1 Н соляной кислоте и полученную суспензию или раствор вводили перорально мышам BALB/cA (CLEA Japan, Inc.) в дозе 50 мг/кг/сутки. Через 0,5, 1, 2, 4 и 6 часов после завершения перорального введения собирали кровь из лицевой вены для получения плазмы с течением времени. Концентрацию соединения в полученной плазме измеряли посредством LC-MS/MS и оценивали пероральную всасываемость соединения по изобретению.

Результаты приведены в следующей таблице 9.

[0306] [Таблица 9]

№ примера AUC 0-6 ч. (мкМ∙ч.) № примера AUC 0-6 ч. (мкМ∙ч.) 1 50 2 15 3 24 4 12 5 20 6 17 7 15 8 15 9 51 10 50 11 31 12 36 13 18 14 27 15 34 16 15 17 21 18 15 19 6,1 Сравнит. пример 2 1,5

[0307] Учитывая описанные выше результаты, обнаружено, что пиримидиновое соединение по изобретению содержалось в плазме в достаточной концентрации, таким образом, что пиримидиновое соединение по изобретению демонстрировало благоприятную пероральную всасываемость. В отличие от него, соединение из сравнительного примера 2 имело пероральную всасываемость в более чем 4 раза ниже, чем у соединения по изобретению.

[0308] Тестовый пример 10. Оценка свойств проникновения в головной мозг

Пиримидиновое соединение по изобретению суспендировали или растворяли в 0,5% водном растворе HPMC и 0,1 Н соляной кислоте и полученную суспензию или раствор вводили перорально мышам BALB/cA (CLEA Japan, Inc.) в дозе 50 мг/кг/сутки. Через 0,5 часов после завершения перорального введения собирали кровь из лицевой вены, а затем удаляли целый мозг для получения образцов плазмы и головного мозга. В полученный образец головного мозга добавляли воду в 3-кратном объеме образца головного мозга, а затем полученное гомогенизировали с использованием ультразвукового гомогенизатора для получения гомогената головного мозга. Концентрацию соединения в полученной плазме и гомогенате головного мозга измеряли посредством LC-MS/MS и оценивали свойства проникновения в головной мозг соединения по изобретению по концентрации соединения в головном мозге/плазме.

Результаты приведены в следующей таблице 10.

[0309] [Таблица 10]

№ примера Концентрация соединения в плазме (мкМ) Концентрация соединения в головном мозге (мкМ) Значение Kp (концентрация соединения в головном мозге/плазме) 1 9,1 1,4 0,15 2 6,6 1,8 0,27 3 11 1,4 0,13 4 8,3 2,8 0,34 5 15 2,2 0,15 6 7,5 1,3 0,17 7 7,9 1,1 0,14 8 9,9 3,3 0,33 9 13 2,4 0,18 10 13 2,4 0,18 11 12 2,7 0,23 12 11 3,2 0,29 13 13 2,8 0,22 14 9,9 2,1 0,21 15 8,1 1,2 0,15 16 12 4,4 0,35 17 17 6,5 0,39 18 7,7 1,6 0,22 19 4,9 0,7 0,14 Сравнит. пример 2 1,6 0,008 0,005

[0310] Учитывая описанные выше результаты, обнаружено, что пиримидиновое соединение по изобретению имело высокую концентрацию соединения в головном мозге/плазме (значение Kp) и, таким образом, демонстрировало благоприятные свойства проникновения в головной мозг. С другой стороны, концентрация соединения из сравнительного примера 2 в головном мозге была в более чем 80 раз ниже, чем у соединения по изобретению.

[0311] Тестовый пример 11. Тест для подтверждения противоопухолевого эффекта (in vivo) на моделях прямой трансплантации в головной мозг, в которых напрямую трансплантировали линию клеток, экспрессирующую HER2 с встроенным геном люциферазы (NCI-N87-luc)

Для подтверждения противоопухолевых эффектов тестируемого соединения на моделях прямой трансплантации в головной мозг использовали NCI-N87-Luc, получаемые посредством встраивания гена люциферазы в NCI-N87, являвшиеся линией клеток рака желудка человека, приобретенной в American Type Culture Collection. NCI-N87-Luc добавляли в содержащую 10%-ную эмбриональную телячью сыворотку (FBS) среду RPMI-1640 (дополненную 4,5 г/л глюкозы, 10 мМ HEPES и 1 мМ пирувата натрия) (FUJIFILM Wako Pure Chemical Corporation), а затем эту линию клеток культивировали в инкубаторе при 5% CO₂ и 37°C.

Клетки NCI-N87-Luc ресуспендировали в PBS в концентрации 6,25×10⁷ клеток/мл.

Используя ушной фиксатор для мышей, бестимусную мышь возрастом от 6 до 7 недель (BALB/cAJcl-nu/nu, CLEA Japan, Inc.) фиксировали в стереотаксическом аппарате для головного мозга и кожу над верхней частью мозга дезинфицировали пропитанной спиртом ватой, а затем иссекали хирургическим ножом.

Для получения отверстия в черепе использовали микросверло, а затем, используя иглу, манипулятор и шприцевой насос, 4 мкл суспензии клеток трансплантировали в головной мозг со скоростью 0,8 мкл/мин.

В качестве референса количества материала опухоли головного мозга через приблизительно 3 недели после трансплантации измеряли общий поток (фотонов/сек) во всех выживших случаях с использованием IVIS (PerkinElmer, Inc., модель: Lumina II). Учитывая полученные результаты, 6 животные приписывали в каждую группу, используя программу для группирования MiSTAT (версии 2.00).

Тестируемое соединение вводили мышам перорально раз в сутки, ежедневно, в течение 21 дня со следующего дня после группирования (дни 1-21).

Для оценки наличия или отсутствия эффектов, использовали значение (Log10), полученное посредством логарифмического преобразования общего потока в день оценки. Тестируемое соединение вводили мышам в дозе 25 мг/кг/сутки в примере 2 и примере 11, в то время как его вводили в дозе 50 мг/кг/сутки в примере 12.

Строили график с использованием значения, полученного посредством логарифмического преобразования (Log10) среднего общего потока каждой группы в качестве вертикальной оси, и количества дней (день) после трансплантации в качестве горизонтальной оси. Наблюдали преобразование общего потока с течением времени в период введения лекарственного средства.

В качестве тестируемых соединений использовали соединения из примера 2, примера 11 и примера 12 и в качестве контроля использовали 0,1 Н HCl и 0,5% водный раствор HPMC.

[0312] Результаты показаны на следующих фигурах 1-6. Значение, полученное посредством логарифмического преобразования (Log10) общего потока в день 22 в каждой группе анализировали с помощью критерия Даннета или t-критерия Стьюдента. В результате было показано, что указанное выше значение в группе тестируемого соединения статистически значимо ниже значения в контрольной группе (уровень значимости (двухсторонний): 5%) (фигура 1: использовали соединение из примера 2, P=0,0077; фигура 2: использовали соединение из примера 11, P=0,0007; и фигура 3: использовали соединение из примера 12, P=0,0012). Для измерения массы тела использовали электронные весы для животных. Процент изменения массы тела (BWCn) вычисляли из массы тела в n-ый день (BWn) по следующему уравнению:

BWCn (%)=[(масса тела в n-ый день)-(масса тела в день группирования)]/[(масса тела в день группирования)]×100.

Учитывая результаты этого теста, обнаружено, что пиримидиновое соединение по изобретению обладает исключительными противоопухолевыми эффектами против HER2-гиперэкспрессирующей линии клеток (NCI-N87-luc), трансплантированной бестимусным мышам. Кроме того, не наблюдали снижения массы тела на 20% или более у всех мышей, которым вводили соединение из примера 2 или примера 11. Таким образом, обнаружено, что не было серьезных побочных эффектов (фигуры 4-6).

[0313] Тестовый пример 12. Тест для подтверждения противоопухолевого эффекта (in vivo) на моделях подкожной трансплантации, в которых трансплантировали линию клеток H1975-EGFRinsSVD

Линию клеток H1975-EGFRinsSVD культивировали в среде RPMI-1640 (содержащей 4,5 г/л глюкозы, 10 мМ HEPES и 1 мМ пирувата натрия) (FUJIFILM Wako Pure Chemical Corporation), содержащей 10%-ную инактивированную эмбриональную телячью сыворотку (FBS), в инкубаторе при 5% CO₂ и 37°C.

[0314] Клетки H1975-EGFRinsSVD ресуспендировали в концентрации 8×10⁷ клеток/мл в PBS. Суспензию клеток подкожно трансплантировали в количестве 8×10⁶ клеток/0,1 мл в правую часть грудной клетки каждой 6-недельной бестимусной мыши (BALB/cAJcl-nu/nu, CLEA Japan, Inc.) с использованием шприца для туберкулина 1 мл и инъекционной иглы 25G.

[0315] Когда объемы опухолей у бестимусных мышей, имеющих трансплантат опухоли, достигали порядка от 100 до 200 мм³, мышей приписывали к группам, каждая из которых включала 6 животных, посредством случайной стратификации так, чтобы средний объем опухоли был равным среди групп.

[0316] Используемое тестируемое соединение представляло собой соединения из примеров 2, 11 и 12, и в качестве контроля использовали 0,5% водный раствор HPMC. Соединения из примеров 2, 11 и 12 вводили перорально в дозах 25 мг/кг/сутки, 25 мг/кг/сутки и 50 мг/кг/сутки, соответственно.

[0317] Каждое тестируемое соединение или контроль вводили перорально каждый день в течение 14 дней (дни 1-14) со дня после группирования.

[0318] Для сравнения преобразования роста опухоли с течением времени посредством введения каждого тестируемого соединения измеряли объем опухоли (также обозначаемый как "TV" ниже) с частотой дважды в неделю с течением времени. Для измерения массы тела использовали электронные весы для животных. Процент изменения массы тела также обозначен ниже как "BWC". Процент изменения массы тела в n-ый день (BWCn) вычисляли из массы тела в n-ый день (BWn) по приведенному ниже уравнению. Преобразование средних значений TV и BWC индивидуумов показано на фигурах 7 и 8.

[0319] BWCn (%)=((масса тела в n-ый день)-(масса тела в день группирования)]/[(масса тела в день группирования)×100

[0320] Если среднее значение TV в группе, которой вводили соединение, в день конечной оценки (день 15) было ниже, чем в контрольных группах, и демонстрировало статистически значимое различие (критерий Даннета для множественных сравнений), это соединение считали эффективным (P<0,001), и оно указано символом "*" на чертеже. Результаты показаны на фигуре 7.

[0321] В результате проведения анализа с помощью критерия Даннета для множественных сравнений было показано, что объем опухоли являлся статистически значимо низким (P<0,001) для всех пиримидиновых соединений по настоящему изобретению по сравнению с контрольной группой. Учитывая результаты этого теста, обнаружено, что соединения из примеров 2, 11 и 12 обладают исключительными противоопухолевыми эффектами против линии клеток, экспрессирующей мутантный EGFR с инсерцией в экзоне 20 (H1975-EGFRinsSVD), трансплантированной в головной моз бестимусных мышей. Кроме того, не наблюдали снижения массы тела на 20% или более у всех мышей, которым вводили каждое соединение.

[0322] Тестовый пример 13. Тест для подтверждения противоопухолевого эффекта (in vivo) на моделях прямой трансплантации в головной мозг, в которых напрямую трансплантировали линию клеток, экспрессирующую мутантный EGFR с инсерцией в экзоне 20 с встроенным геном люциферазы (H1975-EGFRinsSVD-Luc)

Противоопухолевые эффекты и эффекты увеличения продолжительности жизни пиримидиновых соединений по настоящему изобретению на моделях прямой трансплантации в головной мозг оценивали с использованием линии H1975-EGFRinsSVD-Luc, полученной посредством встраивания люциферазы в линию клеток H1975-EGFRinsSVD, в которую встроен мутантный EGFR человека.

[0323] Используемые клетки H1975-EGFRinsSVD-Luc получали посредством встраивания вектора pJTI® FAST DEST, кодирующего люциферазу, вместе с экспрессирующим интегразу PhiC31 вектором pJTI® в клетки NCI-H1975-EGFRinsSVD посредством электропорации с использованием набора R Amaxa® Cell Line Nucleofector® с последующей селекцией с использованием гигромицина B (Nacalai Tesque, Inc.).

[0324] Линию клеток H1975-EGFRinsSVD-Luc культивировали в среде RPMI-1640 (содержащей 4,5 г/л глюкозы, 10 мМ HEPES и 1 мМ пирувата натрия) (FUJIFILM Wako Pure Chemical Corporation), содержащей 10%-ную инактивированную эмбриональную телячью сыворотку (FBS), в инкубаторе при 5% CO₂ и 37°C.

[0325] Клетки H1975-EGFRinsSVD-Luc ресуспендировали в концентрации 12,5×10⁷ клеток/мл в PBS.

Используя ушной фиксатор для мышей, бестимусную мышь возрастом от 6 до 7 недель (BALB/cAJcl-nu/nu, CLEA Japan, Inc.) фиксировали в стереотаксическом аппарате для головного мозга, и кожу на макушке головы.

[0326] Для получения отверстия в черепе использовали микросверло, а затем, используя иглу, манипулятор и шприцевой насос, 2 мкл суспензии клеток трансплантировали в головной мозг со скоростью 0,8 мкл/мин.

[0327] В качестве референса количества материала опухоли головного мозга через 26 дней после трансплантации измеряли общий поток (фотонов/сек) во всех выживших случаях с использованием IVIS (PerkinElmer, Inc., модель: Lumina II). Учитывая полученные результаты, 10 животных приписывали в каждую группу посредством случайной стратификации так, чтобы средний общий поток был равным среди групп.

[0328] Используемое тестируемое соединение являлось соединением из примера 11, и в качестве контроля использовали 0,5% водный раствор HPMC. Соединение из примера 11 вводили в дозе 12,5 мг/кг/сутки или 25 мг/кг/сутки.

[0329] Пиримидиновое соединение по изобретению или контроль вводили перорально раз в сутки, каждый день в течение 38 дней (дни 27-64) со следующего дня после группирования.

[0330] Для оценки наличия или отсутствия противоопухолевых эффектов использовали значение (Log10), полученное посредством логарифмического преобразования общего потока в день оценки противоопухолевого эффекта (день 47) после 3-недельного введения лекарственного средства со следующего дня (день 27) после группирования.

[0331] Строили график с использованием значения, полученного с помощью среднего общего потока каждой группы в качестве вертикальной оси и количества дней (день) после трансплантации в качестве горизонтальной оси. Наблюдали преобразование общего потока с течением времени в период введения лекарственного средства.

Для оценки наличия или отсутствия эффектов увеличения продолжительности жизни количество дней выживания в конечный день оценки эффекта увеличения продолжительности жизни от момента после трансплантации клеток (дни 0-65) в группе тестируемого соединения по сравнению с контрольной группой анализировали с помощью логарифмического рангового критерия.

[0332] Результаты показаны на фигурах 9 и 10 ниже. Значение, полученное посредством логарифмического преобразования (Log10) общего потока в день 47 в каждой группе, анализировали с помощью критерия Даннета для множественных сравнений. В результате было показано, что указанное выше значение в группе тестируемого соединения было статистически значимо ниже значения в контрольной группе (уровень значимости (двухсторонний): 5%) (P<0,001). Учитывая результаты этого теста, обнаружено, что пиримидиновое соединение по изобретению имеет противоопухолевые эффекты против линии клеток, экспрессирующей мутантный EGFR с инсерцией в экзоне 20 (H1975-EGFRinsSVD-Luc), трансплантированной в головной мозг бестимусной мыши.

Кроме того, количество дней выживания в конечный день оценки эффекта увеличения продолжительности жизни от момента после трансплантации клеток (дни 0-65) в группе тестируемого соединения по сравнению с контрольной группой анализировали с помощью логарифмического рангового критерия. В результате наблюдали статистически значимые эффекты увеличения продолжительности жизни по сравнению с контрольной группой (P<0,05).

[0333] Тестовый пример 14. Противоопухолевый эффект (in vitro), вызванный комбинированным использованием пиримидинового соединения и другого противоопухолевого средства

[0334] Дистрибьютор каждого реагента, дистрибьютор линии опухолевых клеток, используемая среда и количество высеянных клеток приведены в следующих таблицах.

[0335] [Таблица 11]

Реагент Дистрибьютор Эмбриональная телячья сыворотка (FBS) GIBCO или SIGMA-ALDRICH Co. LCC Среда МакКоя 5A Thermo Fisher Scientific, Inc. Модифицированная Дульбекко среда Игла (DMEM) FUJIFILM Wako Pure Chemical Corporation Среда RPMI-1640 FUJIFILM Wako Pure Chemical Corporation AZD8055 Cayman Chemical Company Эверолимус Cayman Chemical Company Дактолисиб Cayman Chemical Company Бупарлисиб Cayman Chemical Company Тазелисиб Selleck Chemicals Палбоциклиб Cayman Chemical Company Фулвестрант MedChemExpress MK-2206 Sun-shine Chemical 5-фторурацил FUJIFILM Wako Pure Chemical Corporation Паклитаксел FUJIFILM Wako Pure Chemical Corporation Цисплатин SIGMA-ALDRICH Co. LCC Трифлуридин (трифтортимидин) Yuki Gosei Kogyo Co., Ltd. Гемцитабин FUJIFILM Wako Pure Chemical Corporation SN-38 (активный метаболит иринотекана) Tokyo Chemical Industry Co., Ltd.

[0336][Таблица 12]

Линия опухолевых клеток (происхождение) Дистрибьютор линии клеток Среда Количество высеянных клеток на лунку BT-474 (рак молочной железы человека) ATCC Модифицированная Дульбекко среда Игла, содержащая 10% FBS 250 SK-BR-3 (рак молочной железы человека) Sumitomo Dainippon Pharma Co., Ltd. (ранее известная как Dainippon Pharmaceutical Co., Ltd.) Среда МакКоя 5A, содержащая 10% FBS 125 HCC827 (рак легких человека) ATCC Среда RPMI-1640, содержащая 10%FBS 250

[0337] Полученные из HER2-положительного рака молочной железы человека клетки SK-BR-3 [Sumitomo Dainippon Pharma Co., Ltd. (ранее известная как Dainippon Pharmaceutical Co., Ltd.)] суспендировали в среде МакКоя 5A, содержащей 10%-ную инактивированную эмбриональную телячью сыворотку. Аналогично, полученные из HER2-положительного рака молочной железы человека клетки BT-474 [American Type Culture Collection (ATCC)] суспендировали в модифицированной Дульбекко среде Игла, содержащей 10%-ную инактивированную эмбриональную телячью сыворотку. Положительные по мутации в экзоне 19 (del E746-A750), полученные из рака легких человека клетки HCC827 (ATCC) суспендировали в среде RPMI-1640, содержащей 10%-ную инактивированную эмбриональную телячью сыворотку. Каждую суспензия клеток высевали в количестве 25 мкл/лунку в 384-луночный плоскодонный культуральный планшет. Планшет с высеянными клетками инкубировали в культуральном сосуде, содержащем 5%-ный газообразный диоксид углерода, при 37°C.

[0338] На следующий день после посева к клеткам добавляли растворы лекарственного соединения из примера 11 и другого противоопухолевого средства, смешанные в комбинациях в различных концентрациях.

[0339] На следующий день после посева пиримидиновое соединение по изобретению и другое противоопухолевое средство растворяли в DMSO, а затем добавляли до конечных максимальных концентраций и общих соотношений, приведенных в таблице 13. В частности, 8 концентраций (включая 0 нМ) соединения из примера 11 в качестве пиримидинового соединения по изобретению и 10 концентраций (включая 0 нМ) другого противоопухолевого средства определяли как всего 80 из всех возможных комбинаций, добавляли с использованием цифрового диспенсера Tecan D300e (Tecan Trading AG) и планшет инкубировали в культуральном сосуде, содержащем 5%-ный газообразный диоксид углерода, при 37°C в течение 3 дней.

[0340] Через три дня добавляли реагент CellTiter-Glo^TM 2.0 (Promega Corporation) в количестве 25 мкл/лунку и измеряли хемилюминесценцию с использованием спектрофотометра для чтения планшетов (многоканального спектрофотометра для чтения планшетов EnSpire®, PerkinElmer Japan Co., Ltd.).

[0341] [Таблица 13]

Другое противоопухолевое средство Линия опухолевых клеток Другое противоопухолевое средство Пример 11 Максимальная концентрация (нМ) Общее соотношение Максимальная концентрация (нМ) Общее соотношение Гемцитабин BT-474 30000 3 100 3 SK-BR-3 30000 3 100 3 HCC827 30000 3 100 3 Паклитаксел BT-474 1000 3 100 3 SK-BR-3 1000 3 100 3 HCC827 100 3 100 3 5-фторурацил BT-474 1000000 3 100 3 SK-BR-3 1000000 3 100 3 Трифлуридин BT-474 1000000 3 100 3 SK-BR-3 1000000 3 100 3 HCC827 1000000 3 100 3 Бупарлисиб BT-474 30000 3 100 3 SK-BR-3 30000 3 100 3 HCC827 30000 3 100 3 Тазелисиб BT-474 100 3 100 3 SK-BR-3 100 3 100 3 HCC827 100 3 100 3 Дактолисиб BT-474 300 3 100 3 SK-BR-3 300 3 100 3 Эверолимус BT-474 30000 3 100 3 SK-BR-3 30000 3 100 3 HCC827 30000 3 100 3 AZD8055 BT-474 1000 3 100 3 SK-BR-3 1000 3 100 3 HCC827 1000 3 100 3 MK-2206 BT-474 10000 3 100 3 SK-BR-3 10000 3 100 3 HCC827 10000 3 100 3 Палбоциклиб BT-474 20000 3 100 3 SK-BR-3 20000 3 100 3 HCC827 20000 3 100 3 Фулвестрант BT-474 100000 3 100 3 SK-BR-3 100000 3 100 3 HCC827 100000 3 100 3 Цисплатин HCC827 10000 3 100 3 SN-38 HCC827 100 3 100 3

[0342] Потенцирование эффекта посредством комбинированного использования лекарственных средств оценивали способом Чоу-Талалая (Adv. Enzyme Regul. 22: 27-55, 1984).

[0343] Из полученных данных вычисляли среднее для 4 лунок каждой комбинации и вычисляли коэффициент выживаемости клеток, нормализованный относительно контроля, дополненного средой, содержащей носитель. Коэффициент выживаемости клеток вычитали из 1 для вычисления значения Fa (доли клеток, подвергшихся эффекту). Вычисляли показатель аддитивности (CI), используя уравнение медианного эффекта в отношении экспериментальных данных.

[0344] Считают, что комбинации концентраций лекарственных средств для вычисления CI попадают в диапазон концентраций, в котором эффект одного из лекарственных средств слишком силен, если значение Fa близко к 1, и попадает в диапазон концентраций, в котором эффект любого из лекарственных средств слишком слаб, если значение Fa близко к 0. Такие комбинации не подходят для обсуждения синергического эффекта. Таким образом, выделяли комбинации, достигавшие 0,2≤Fa≤0,8 из значений Fa, вычисленных с использованием комбинаций соответствующих концентраций соединения из примера 11 и другого противоопухолевого средства.

Комбинаторный эффект оценивали, как показано в следующей таблице (Pharmacol Rev., 58 (3), 621-81, 2006).

[0345] [Таблица 14]

Диапазон CI (верхний предел) Описание 0,1 Очень сильный синергический эффект 0,3 Сильный синергический эффект 0,7 Синергический эффект 0,85 Умеренный синергический эффект 0,9 Небольшой синергический эффект 1,0 Почти аддитивный эффект 1,2 Небольшой антагонистический эффект 1,45 Умеренный антагонистический эффект 3,3 Антагонистический эффект 10 Сильный антагонистический эффект >10 Очень сильный антагонистический эффект

Результаты приведены в таблицах ниже.

В таблицах "соотношение комбинированного использования" представляет собой молярное соотношение другого противоопухолевого средства и соединения из примера 11, определенного как 1.

[0346] Комбинированное использование соединения из примера 11 и гемцитабина

[0347] [Таблица 15]

Линия клеток: BT-474 Соотношение комбинированного использования Гемцитабин (нМ) Пример 11 (нМ) Fa CI 8100 30000 3,70 0,331 0,890 2700 30000 11,1 0,497 0,844 900 3333 3,70 0,279 0,726 900 10000 11,1 0,476 0,784 300 3333 11,1 0,454 0,821 100 1111 11,1 0,444 0,843 1,2 13,7 11,1 0,446 0,828 0,412 4,57 11,1 0,468 0,740 0,137 4,57 33,3 0,671 0,796

[0348] [Таблица 16]

Линия клеток: SK-BR-3 Соотношение комбинированного использования Гемцитабин (нМ) Пример 11 (нМ) Fa CI 218700 30000 0,137 0,546 0,514 72900 10000 0,137 0,485 0,633 24300 3333 0,137 0,542 0,065 24300 10000 0,412 0,478 0,740 8100 1111 0,137 0,463 0,117 8100 3333 0,412 0,488 0,208 8100 30000 3,70 0,529 0,824 2700 370 0,137 0,473 0,035 2700 1111 0,412 0,438 0,211 2700 3333 1,23 0,456 0,444 2700 10000 3,70 0,513 0,459 2700 30000 11,1 0,555 0,674 900 123 0,137 0,440 0,027 900 370 0,412 0,503 0,029 900 1111 1,23 0,411 0,421 900 3333 3,70 0,431 0,865 900 10000 11,1 0,596 0,248 900 30000 33,3 0,695 0,294 300 41,2 0,137 0,386 0,032 300 123 0,412 0,475 0,026 300 370 1,23 0,442 0,117 300 1111 3,70 0,471 0,242 300 3333 11,1 0,515 0,438 300 10000 33,3 0,641 0,434 100 13,7 0,137 0,366 0,023 100 41,2 0,412 0,367 0,068 100 123 1,235 0,458 0,068 100 370 3,704 0,484 0,159 100 1111 11,1 0,532 0,320 100 3333 33,3 0,612 0,524 100 10000 100 0,796 0,338 33,3 13,7 0,412 0,314 0,091 33,3 41,2 1,23 0,455 0,060 33,3 123 3,70 0,505 0,122 33,3 370 11,1 0,522 0,326 33,3 1111 33,3 0,666 0,345 33,3 3333 100 0,772 0,426 11,1 13,7 1,23 0,327 0,165 11,1 41,2 3,70 0,445 0,182 11,1 123 11,1 0,479 0,429 11,1 370 33,3 0,650 0,388 11,1 1111 100,0 0,795 0,341 3,70 4,57 1,23 0,232 0,422 3,70 13,7 3,70 0,294 0,592 3,70 41,2 11,11 0,498 0,372 3,70 123 33,33 0,653 0,381 3,70 370 100,00 0,745 0,545 1,23 4,57 3,70 0,245 0,886 1,23 13,7 11,11 0,427 0,598 1,23 41,2 33,33 0,595 0,574 1,23 123 100,00 0,757 0,490 0,412 4,57 11,11 0,377 0,849 0,412 13,7 33,33 0,604 0,539 0,412 41,2 100,00 0,749 0,527 0,137 4,57 33,33 0,564 0,712 0,137 13,7 100,00 0,738 0,582 0,0457 4,57 100,00 0,748 0,532

[0349] [Таблица 17]

Линия клеток: HCC827 Соотношение комбинированного использования Гемцитабин (нМ) Пример 11 (нМ) Fa CI 24300 3333 0,137 0,519 0,018 8100 1111 0,137 0,474 0,030 2700 370 0,137 0,379 0,313 2700 1111 0,412 0,468 0,047 2700 3333 1,23 0,420 0,618 2700 10000 3,70 0,522 0,150 900 123 0,137 0,377 0,117 900 370 0,412 0,371 0,441 900 1111 1,23 0,471 0,075 900 3333 3,70 0,529 0,119 900 10000 11,1 0,551 0,310 900 30000 33,3 0,680 0,459 300 123 0,412 0,353 0,323 300 370 1,23 0,456 0,068 300 1111 3,70 0,536 0,109 300 3333 11,1 0,527 0,345 300 10000 33,3 0,673 0,478 100 123 1,23 0,336 0,676 100 370 3,70 0,526 0,113 100 1111 11,1 0,684 0,150 100 3333 33,3 0,719 0,368 33,3 123 3,70 0,387 0,297 33,3 370 11,1 0,598 0,236 33,3 1111 33,3 0,738 0,326 11,1 123 11,1 0,368 0,891 11,1 370 33,3 0,700 0,409 11,1 1111 100 0,783 0,723 3,70 123 33,3 0,695 0,422 3,70 370 100 0,760 0,849

[0350] Комбинированное использование соединения из примера 11 и паклитаксела

[0351] [Таблица 18]

Линия клеток: BT-474 Соотношение комбинированного использования Паклитаксел (нМ) Пример 11 (нМ) Fa CI 810 111 0,137 0,692 0,619 270 37,0 0,137 0,702 0,186 270 111 0,412 0,695 0,605 90 12,3 0,137 0,580 0,235 90 37,0 0,412 0,738 0,132 90 111 1,23 0,711 0,542 30 12,3 0,412 0,637 0,150 30 37,0 1,23 0,703 0,235 30 111 3,70 0,685 0,845 10 12,3 1,23 0,652 0,176 10 37,0 3,70 0,713 0,316 3,33 4,12 1,23 0,419 0,563 3,33 12,3 3,70 0,694 0,238 1,11 4,12 3,70 0,599 0,331 1,11 12,3 11,1 0,780 0,344 0,370 1,37 3,70 0,449 0,604 0,370 4,12 11,1 0,752 0,392 0,123 0,152 1,23 0,240 0,574 0,123 0,457 3,70 0,469 0,495 0,123 1,37 11,1 0,662 0,616 0,0412 0,152 3,70 0,458 0,502 0,0412 0,457 11,1 0,669 0,587 0,0137 0,152 11,1 0,678 0,561

[0352] [Таблица 19]

Линия клеток: SK-BR-3 Соотношение комбинированного использования Паклитаксел (нМ) Пример 11 (нМ) Fa CI 30,0 4,12 0,137 0,452 0,671 10,0 4,12 0,412 0,497 0,525 10,0 12,3 1,23 0,778 0,208 10,0 37,0 3,70 0,769 0,677 3,33 4,12 1,23 0,442 0,847 3,33 12,3 3,70 0,761 0,312 1,11 4,12 3,70 0,526 0,713 1,11 12,3 11,1 0,787 0,427 0,370 4,12 11,1 0,681 0,605 0,123 1,37 11,1 0,567 0,888 0,041 0,457 11,1 0,630 0,619 0,0137 0,152 11,1 0,619 0,635 0,0137 0,457 33,3 0,791 0,776

[0353] [Таблица 20]

Линия клеток: HCC827 Соотношение комбинированного использования Паклитаксел (нМ) Пример 11 (нМ) Fa CI 27 11,1 0,412 0,785 0,620 9 11,1 1,23 0,787 0,614 3 0,412 0,137 0,288 0,675 3 11,1 3,70 0,779 0,664 0,333 0,0457 0,137 0,242 0,118 0,333 3,70 11,1 0,707 0,420 0,0370 1,23 33,3 0,699 0,231 0,0123 0,41 33,3 0,681 0,159 0,0123 1,23 100 0,792 0,183 0,00412 0,137 33,3 0,581 0,261 0,00412 0,412 100 0,743 0,224 0,00137 0,0152 11,1 0,277 0,737 0,00137 0,0457 33,3 0,502 0,413 0,00137 0,137 100 0,748 0,192 0,000457 0,0152 33,3 0,486 0,450 0,000457 0,0457 100 0,675 0,345 0,000152 0,0152 100 0,702 0,274

[0354] Комбинированное использование соединения из примера 11 и 5-фторурацила (5-FU)

[0355] [Таблица 21]

Линия клеток: BT-474 Соотношение комбинированного использования 5-FU (нМ) Пример 11 (нМ) Fa CI 7290000 1000000 0,137 0,650 0,602 2430000 333333 0,137 0,497 0,760 2430000 1000000 0,412 0,626 0,756 810000 111111 0,137 0,373 0,744 810000 1000000 1,23 0,635 0,725 270000 37037 0,137 0,259 0,771 270000 333333 1,23 0,501 0,800 270000 1000000 3,70 0,651 0,703 90000 333333 3,70 0,510 0,874 90000 1000000 11,1 0,727 0,505 30000 111111 3,70 0,428 0,733 30000 333333 11,1 0,629 0,600 30000 1000000 33,3 0,794 0,585 10000 37037 3,70 0,350 0,693 10000 111111 11,1 0,574 0,584 10000 333333 33,3 0,730 0,750 3333 37037 11,1 0,525 0,625 3333 111111 33,3 0,699 0,816 1111 12346 11,1 0,544 0,533 1111 37037 33,3 0,681 0,862 370 1372 3,70 0,254 0,664 370 4115 11,1 0,501 0,625 370 12346 33,3 0,671 0,891 123 1372 11,1 0,508 0,601 123 4115 33,3 0,676 0,868 41,2 457 11,1 0,498 0,625 13,7 152 11,1 0,480 0,674 13,7 457 33,3 0,676 0,866

[0356] [Таблица 22]

Линия клеток: SK-BR-3 Соотношение комбинированного использования 5-FU (нМ) Пример 11 (нМ) Fa CI 810000 111111 0,137 0,502 0,772 270000 37037 0,137 0,390 0,571 90000 12346 0,137 0,242 0,662 90000 37037 0,412 0,352 0,801 30000 12346 0,412 0,311 0,438 30000 37037 1,23 0,412 0,612 10000 37037 3,70 0,417 0,856 3333 4115 1,23 0,250 0,740 1111 1372 1,23 0,236 0,704 1111 37037 33,3 0,627 0,842 1111 111111 100 0,764 0,754 370 12346 33,3 0,642 0,685 370 37037 100 0,775 0,610 123 4115 33,3 0,641 0,667 123 12346 100 0,757 0,714 41,2 1372 33,3 0,617 0,796 41,2 4115 100 0,750 0,752 13,7 457 33,3 0,608 0,854 13,7 1372 100 0,759 0,684

[0357] Комбинированное использование соединения из примера 11 и трифлуридина (FTD)

[0358] [Таблица 23]

Линия клеток: BT-474 Соотношение комбинированного использования FTD (нМ) Пример 11 (нМ) Fa CI 7290000 1000000 0,137 0,363 0,107 2430000 1000000 0,412 0,384 0,113 810000 1000000 1,23 0,398 0,176 270000 1000000 3,70 0,477 0,256 90000 333333 3,70 0,275 0,777 90000 1000000 11,1 0,642 0,302 30000 333333 11,1 0,530 0,534 30000 1000000 33,3 0,760 0,440 10000 111111 11,1 0,432 0,870 10000 333333 33,3 0,707 0,617 370 12346 33,3 0,661 0,805 13,7 152 11,1 0,425 0,898 13,7 457 33,3 0,642 0,893

[0359] [Таблица 24]

Линия клеток: SK-BR-3 Соотношение комбинированного использования FTD (нМ) Пример 11 (нМ) Fa CI 2430000 333333 0,137 0,510 0,712 810000 111111 0,137 0,456 0,332 810000 333333 0,412 0,555 0,545 270000 37037 0,137 0,225 0,581 270000 111111 0,412 0,440 0,378 270000 333333 1,23 0,504 0,767 90000 111111 1,23 0,364 0,679 90000 333333 3,70 0,540 0,664 30000 37037 1,23 0,269 0,602 30000 111111 3,70 0,381 0,775 30000 333333 11,1 0,553 0,747 30000 1000000 33,3 0,703 0,785 10000 111111 11,1 0,459 0,736 10000 333333 33,3 0,660 0,530 3333 37037 11,1 0,405 0,781 3333 111111 33,3 0,639 0,411 3333 333333 100 0,796 0,296 1111 37037 33,3 0,624 0,383 1111 111111 100 0,769 0,313 370 12346 33,3 0,526 0,765 370 37037 100 0,739 0,387 123 4115 33,3 0,573 0,523 123 12346 100 0,726 0,427 41,2 1372 33,3 0,539 0,673 41,2 4115 100 0,701 0,537 13,7 457 33,3 0,533 0,707 13,7 1372 100 0,715 0,470 4,57 152 33,3 0,592 0,444 4,57 457 100 0,688 0,599 1,52 152 100 0,702 0,527

[0360] [Таблица 25]

Линия клеток: HCC827 Соотношение комбинированного использования FTD (нМ) Пример 11 (нМ) Fa CI 7290000 1000000 0,137 0,478 0,789 2430000 333333 0,137 0,306 0,610 2430000 1000000 0,412 0,466 0,845 810000 1000000 1,23 0,469 0,864 30000 111111 3,70 0,233 0,717 30000 1000000 33,3 0,703 0,747 10000 37037 3,70 0,231 0,520 3333 37037 11,1 0,335 0,805 1111 12346 11,1 0,323 0,809 1111 37037 33,3 0,578 0,844 123 4115 33,3 0,569 0,859

[0361] Комбинированное использование соединения из примера 11 и бупарлисиба (BKM120)

[0362] [Таблица 26]

Линия клеток: BT-474 Соотношение комбинированного использования BKM120 (нМ) Пример 11 (нМ) Fa CI 24300 3333 0,137 0,712 0,478 24300 10000 0,412 0,789 0,861 8100 1111 0,137 0,498 0,497 8100 3333 0,412 0,741 0,409 2700 1111 0,412 0,538 0,428 2700 3333 1,23 0,760 0,387 900 370 0,412 0,238 0,760 900 1111 1,23 0,601 0,361 300 370 1,23 0,334 0,557 300 1111 3,70 0,718 0,287 100 123 1,23 0,226 0,530 100 370 3,70 0,537 0,400 33,3 123 3,70 0,428 0,464 33,3 370 11,1 0,749 0,398 11,1 41,2 3,70 0,420 0,424 11,1 123 11,1 0,696 0,465 3,70 13,7 3,70 0,426 0,398 3,70 41,2 11,1 0,697 0,451 1,23 4,57 3,70 0,380 0,463 1,23 13,7 11,1 0,666 0,505 0,412 4,57 11,1 0,687 0,464

[0363] [Таблица 27]

Линия клеток: SK-BR-3 Соотношение комбинированного использования BKM120 (нМ) Пример 11 (нМ) Fa CI 8100 1111 0,137 0,744 0,318 2700 370 0,137 0,473 0,389 2700 1111 0,412 0,737 0,341 900 370 0,412 0,368 0,671 900 1111 1,23 0,753 0,337 300 370 1,23 0,505 0,449 300 1111 3,70 0,770 0,380 100 370 3,70 0,580 0,506 33,3 41,2 1,23 0,271 0,454 33,3 123 3,70 0,358 0,897 33,3 370 11,1 0,790 0,373 11,1 41,2 3,70 0,437 0,539 11,1 123 11,1 0,720 0,472 3,70 13,7 3,70 0,396 0,602 3,70 41,2 11,1 0,629 0,685 1,23 4,57 3,70 0,317 0,838 1,23 13,7 11,1 0,627 0,676 0,412 4,57 11,1 0,637 0,642 0,412 13,7 33,3 0,799 0,837 0,137 4,57 33,3 0,798 0,838

[0364] [Таблица 28]

Линия клеток: HCC827 Соотношение комбинированного использования BKM120 (нМ) Пример 11 (нМ) Fa CI 2700 30000 11,1 0,769 0,081 300 10000 33,3 0,751 0,077 100 13,7 0,137 0,538 0,089 100 1111 11,1 0,672 0,125 100 3333 33,3 0,748 0,046 33,3 13,7 0,412 0,471 0,663 33,3 1111 33,3 0,775 0,021 11,1 41,2 3,70 0,536 0,307 11,1 123 11,1 0,643 0,058 11,1 370 33,3 0,768 0,021 3,70 4,57 1,23 0,489 0,140 3,70 41,2 11,1 0,637 0,043 3,70 123 33,3 0,768 0,021 1,23 4,57 3,70 0,544 0,049 1,23 13,7 11,1 0,604 0,053 1,23 41,2 33,3 0,734 0,032 0,412 4,57 11,1 0,621 0,038 0,412 13,7 33,3 0,754 0,025 0,137 4,57 33,3 0,730 0,033 0,0457 4,57 100 0,791 0,045

[0365] Комбинированное использование соединения из примера 11 и тазелисиба (GDC-0032)

[0366] [Таблица 29]

Линия клеток: BT-474 Соотношение комбинированного использования GDC-0032 (нМ) Пример 11 (нМ) Fa CI 81 11,1 0,137 0,239 0,875 81 33,3 0,412 0,444 0,893 27 11,1 0,412 0,257 0,821 27 33,3 1,23 0,485 0,776 9 11,1 1,23 0,361 0,530 9 33,3 3,70 0,550 0,659 3 11,1 3,70 0,415 0,566 3 33,3 11,1 0,650 0,579 1 3,70 3,70 0,233 0,864 1 11,1 11,1 0,573 0,513 1 33,3 33,3 0,774 0,555 0,333 3,70 11,1 0,484 0,599 0,333 11,1 33,3 0,713 0,633 0,111 1,23 11,1 0,452 0,624 0,111 3,70 33,3 0,662 0,747 0,0370 0,412 11,1 0,435 0,649 0,0370 1,23 33,3 0,643 0,793 0,0123 0,137 11,1 0,390 0,779 0,0123 0,412 33,3 0,625 0,852 0,00412 0,0457 11,1 0,409 0,714 0,00412 0,137 33,3 0,643 0,780 0,00137 0,0152 11,1 0,392 0,769 0,000457 0,0152 33,3 0,618 0,872

[0367] [Таблица 30]

Линия клеток: SK-BR-3 Соотношение комбинированного использования GDC-0032 (нМ) Пример 11 (нМ) Fa CI 729 100 0,137 0,505 0,239 243 33,3 0,137 0,408 0,230 243 100 0,412 0,559 0,140 81 11,1 0,137 0,277 0,373 81 33,3 0,412 0,358 0,420 81 100 1,23 0,531 0,210 27 11,1 0,412 0,376 0,135 27 33,3 1,23 0,519 0,101 27 100 3,70 0,566 0,195 9 3,70 0,412 0,291 0,155 9 11,1 1,23 0,317 0,349 9 33,33 3,70 0,460 0,277 9 100 11,1 0,680 0,130 3 11,1 3,70 0,396 0,318 3 33,3 11,1 0,574 0,245 3 100 33,3 0,759 0,159 1 11,1 11,1 0,501 0,370 1 33,3 33,3 0,664 0,340 1 100 100 0,800 0,304 0,333 3,70 11,1 0,440 0,535 0,333 11,1 33,3 0,560 0,699 0,333 33,3 100 0,752 0,481 0,111 1,23 11,1 0,392 0,729 0,111 3,70 33,3 0,632 0,415 0,111 11,1 100 0,746 0,501 0,0370 1,23 33,3 0,604 0,505 0,0370 3,70 100 0,688 0,813 0,0123 0,137 11,1 0,383 0,770 0,0123 0,412 33,3 0,652 0,357 0,0123 1,23 100 0,691 0,792 0,00412 0,137 33,3 0,555 0,709 0,00412 0,412 100 0,708 0,695 0,00137 0,046 33,3 0,578 0,607 0,00137 0,137 100 0,735 0,550 0,000457 0,0152 33,3 0,545 0,759 0,000457 0,0457 100 0,717 0,641 0,000152 0,0152 100 0,699 0,746

[0368] [Таблица 31]

Линия клеток: HCC827 Соотношение комбинированного использования GDC-0032 (нМ) Пример 11 (нМ) Fa CI 243 33,3 0,137 0,448 0,733 81 11,1 0,137 0,281 0,867 27 3,70 0,137 0,294 0,265 27 11,1 0,412 0,328 0,607 27 33,3 1,235 0,456 0,726 9 100 11,1 0,719 0,404 3 11,1 3,70 0,414 0,451 1 11,1 11,1 0,383 0,871 1 33,3 33,3 0,678 0,533 0,333 3,70 11,1 0,445 0,453 0,333 11,1 33,3 0,606 0,631 0,111 1,23 11,1 0,314 0,748 0,111 3,70 33,3 0,545 0,761 0,111 11,1 100 0,761 0,774 0,0370 3,70 100 0,739 0,866 0,0123 0,412 33,3 0,528 0,778 0,00412 0,0457 11,1 0,262 0,894 0,000457 0,0152 33,3 0,593 0,582

[0369] Комбинированное использование соединения из примера 11 и дактолисиба (BEZ235)

[0370] [Таблица 32]

Линия клеток: BT-474 Соотношение комбинированного использования BEZ235 (нМ) Пример 11 (нМ) Fa CI 729 100 0,137 0,531 0,821 243 33,3 0,137 0,441 0,599 243 100 0,412 0,543 0,749 81 33,3 0,412 0,434 0,652 81 100 1,23 0,530 0,869 27 33,3 1,23 0,484 0,466 27 100 3,70 0,559 0,766 9 33,3 3,70 0,482 0,589 9 100 11,1 0,607 0,728 9 300 33,3 0,776 0,627 3 33,3 11,1 0,552 0,617 3 100 33,3 0,748 0,577 1 11,1 11,1 0,522 0,543 1 33,3 33,3 0,699 0,671 0,333 3,7 11,1 0,426 0,739 0,333 11,1 33,3 0,654 0,789 0,111 1,23 11,1 0,386 0,824 0,111 3,70 33,3 0,641 0,817 0,0370 0,412 11,1 0,393 0,774 0,0370 1,23 33,3 0,633 0,839 0,0123 0,137 11,1 0,374 0,836 0,0123 0,412 33,3 0,635 0,828 0,00412 0,0457 11,1 0,403 0,734 0,00412 0,137 33,3 0,632 0,839 0,00137 0,0457 33,3 0,626 0,860

[0371] [Таблица 33]

Линия клеток: SK-BR-3 Соотношение комбинированного использования BEZ235 (нМ) Пример 11 (нМ) Fa CI 729 100 0,137 0,727 0,786 243 33,3 0,137 0,646 0,443 243 100 0,412 0,725 0,801 81 11,1 0,137 0,462 0,427 81 33,3 0,412 0,653 0,428 81 100 1,235 0,785 0,511 27 3,70 0,137 0,205 0,780 27 33,3 1,23 0,641 0,473 27 100 3,70 0,777 0,557 9 3,70 0,412 0,216 0,756 9 11,1 1,23 0,352 0,883 9 33,3 3,70 0,644 0,497 9 100 11,1 0,790 0,540 3 3,70 1,23 0,289 0,528 3 11,1 3,70 0,391 0,838 3 33,3 11,1 0,675 0,493 1 11,1 11,1 0,569 0,461 1 33,3 33,3 0,753 0,433 0,333 3,70 11,1 0,487 0,486 0,333 11,1 33,3 0,620 0,688 0,111 3,70 33,3 0,634 0,528 0,111 11,1 100 0,739 0,802 0,037 0,412 11,1 0,341 0,873 0,0370 1,23 33,3 0,578 0,683 0,0123 0,412 33,3 0,623 0,512 0,00412 0,412 100 0,710 0,889 0,000457 0,0457 100 0,708 0,895

[0372] Комбинированное использование соединения из примера 11 и эверолимуса (RAD001)

[0373] [Таблица 34]

Линия клеток: BT-474 Соотношение комбинированного использования RAD001 (нМ) Пример 11 (нМ) Fa CI 2700 10000 3,70 0,658 0,289 900 123 0,137 0,422 0,768 900 3333 3,70 0,584 0,534 300 41,2 0,137 0,410 0,378 300 123 0,412 0,438 0,550 300 1111 3,70 0,586 0,366 300 3333 11,1 0,768 0,321 100 13,7 0,137 0,404 0,166 100 41,2 0,412 0,428 0,280 100 123 1,23 0,444 0,597 100 370 3,70 0,533 0,484 100 1111 11,1 0,736 0,394 33,3 4,57 0,137 0,402 0,074 33,3 13,7 0,412 0,419 0,163 33,3 41,2 1,23 0,447 0,314 33,3 123 3,70 0,544 0,381 33,3 370 11,1 0,717 0,440 11,1 4,57 0,412 0,439 0,083 11,1 13,7 1,23 0,460 0,206 11,1 41,2 3,70 0,520 0,414 11,1 123 11,1 0,723 0,424 3,70 4,57 1,23 0,460 0,186 3,70 13,7 3,70 0,534 0,376 3,70 41,2 11,1 0,705 0,470 1,23 4,57 3,70 0,545 0,355 1,23 13,7 11,1 0,718 0,436 0,412 4,57 11,1 0,709 0,461 0,412 13,7 33,3 0,796 0,795

[0374] [Таблица 35]

Линия клеток: SK-BR-3 Соотношение комбинированного использования RAD001 (нМ) Пример 11 (нМ) Fa CI 72900 10000 0,137 0,669 0,444 24300 30000 1,23 0,795 0,039 2700 370 0,137 0,546 0,655 2700 3333 1,23 0,623 0,689 2700 10000 3,70 0,730 0,173 900 123 0,137 0,500 0,815 900 3333 3,70 0,644 0,501 300 41,2 0,137 0,533 0,117 300 123 0,412 0,550 0,224 300 370 1,23 0,579 0,330 300 1111 3,70 0,665 0,219 300 3333 11,1 0,798 0,235 100 13,7 0,137 0,462 0,276 100 41,2 0,412 0,512 0,228 100 123 1,23 0,554 0,261 100 370 3,70 0,596 0,377 100 1111 11,1 0,798 0,235 33,3 4,57 0,137 0,484 0,060 33,3 13,7 0,412 0,516 0,092 33,3 41,2 1,23 0,527 0,224 33,3 123 3,70 0,579 0,323 33,3 370 11,1 0,778 0,266 11,1 4,57 0,412 0,509 0,059 11,1 13,7 1,23 0,476 0,303 11,1 41,2 3,70 0,619 0,210 3,70 4,57 1,23 0,529 0,113 3,70 13,7 3,70 0,604 0,220 3,70 41,2 11,1 0,745 0,323 1,23 4,57 3,70 0,588 0,234 1,23 13,7 11,1 0,764 0,290 0,412 4,57 11,1 0,771 0,278

[0375] [Таблица 36]

Линия клеток: HCC827 Соотношение комбинированного использования RAD001 (нМ) Пример 11 (нМ) Fa CI 24300 3333 0,137 0,217 0,619 2700 370 0,137 0,258 0,049 900 30000 33,3 0,636 0,196 300 1111 3,70 0,303 0,232 300 3333 11,1 0,329 0,554 300 10000 33,3 0,599 0,194 300 30000 100 0,771 0,126 100 370 3,70 0,270 0,252 100 3333 33,3 0,607 0,159 100 10000 100 0,686 0,253 33,3 123 3,70 0,245 0,290 33,3 370 11,1 0,395 0,242 33,3 1111 33,3 0,522 0,284 33,3 3333 100 0,720 0,180 11,1 123 11,1 0,418 0,198 11,1 370 33,3 0,588 0,172 11,1 1111 100 0,669 0,274 3,70 4,57 1,23 0,200 0,147 3,70 41,2 11,1 0,238 0,888 3,70 123 33,3 0,528 0,265 3,70 370 100 0,691 0,227 1,23 13,7 11,1 0,292 0,533 1,23 41,2 33,3 0,532 0,257 1,23 123 100 0,693 0,223 0,412 4,57 11,1 0,282 0,584 0,412 13,7 33,3 0,532 0,258 0,412 41,2 100 0,710 0,193 0,137 4,57 33,3 0,479 0,378 0,137 13,7 100 0,693 0,223 0,0457 4,57 100 0,706 0,199

[0376] Комбинированное использование соединения из примера 11 и AZD8055

[0377] [Таблица 37]

Линия клеток: BT-474 Соотношение комбинированного использования AZD8055 (нМ) Пример 11 (нМ) Fa CI 2430 333 0,137 0,599 0,678 810 111 0,137 0,480 0,515 810 333 0,412 0,569 0,844 270 37,0 0,137 0,345 0,454 270 111 0,412 0,502 0,456 270 333 1,23 0,584 0,786 90 37,0 0,412 0,269 0,858 90 111 1,23 0,503 0,484 90 333 3,70 0,578 0,889 30 37,0 1,23 0,399 0,368 30 111 3,70 0,477 0,678 30 333 11,1 0,624 0,843 10 37,0 3,70 0,365 0,616 10 111 11,1 0,599 0,529 10 333 33,3 0,744 0,728 3,33 12,3 3,70 0,251 0,694 3,33 37,0 11,1 0,514 0,549 3,33 111 33,3 0,718 0,666 1,11 12,3 11,1 0,435 0,624 1,11 37,0 33,3 0,674 0,733 0,370 4,12 11,1 0,378 0,708 0,370 12,3 33,3 0,625 0,854 0,123 1,37 11,1 0,332 0,818 0,123 4,12 33,3 0,632 0,817 0,0412 0,457 11,1 0,365 0,710 0,0412 1,37 33,3 0,610 0,884 0,0137 0,152 11,1 0,429 0,558 0,0137 0,457 33,3 0,624 0,836 0,00457 0,152 33,3 0,614 0,868

[0378] [Таблица 38]

Линия клеток: SK-BR-3 Соотношение комбинированного использования AZD8055 (нМ) Пример 11 (нМ) Fa CI 810 111 0,137 0,746 0,529 270 37,0 0,137 0,603 0,379 270 111 0,412 0,765 0,469 90 12,3 0,137 0,332 0,466 90 37,0 0,412 0,564 0,457 90 111 1,23 0,772 0,448 30 12,3 0,412 0,351 0,431 30 37,0 1,23 0,626 0,341 30 111 3,70 0,752 0,512 10 12,3 1,23 0,440 0,286 10 37,0 3,70 0,636 0,328 3,33 4,12 1,23 0,381 0,148 3,33 12,3 3,70 0,438 0,319 3,33 37,0 11,1 0,690 0,253 1,11 0,457 0,412 0,224 0,090 1,11 4,12 3,70 0,217 0,875 1,11 12,3 11,1 0,531 0,233 1,11 37,0 33,3 0,793 0,137 0,370 0,152 0,412 0,211 0,082 0,370 4,12 11,1 0,358 0,443 0,370 12,35 33,3 0,653 0,145 0,123 1,37 11,1 0,286 0,769 0,123 4,12 33,3 0,608 0,117 0,041 0,457 11,1 0,276 0,817 0,0412 1,37 33,3 0,500 0,245 0,0412 4,12 100 0,746 0,067 0,0137 0,152 11,1 0,268 0,883 0,0137 0,457 33,3 0,485 0,265 0,0137 1,37 100 0,728 0,066 0,00457 0,152 33,3 0,500 0,225 0,00457 0,457 100 0,736 0,056 0,00152 0,152 100 0,720 0,066

[0379] [Таблица 39]

Линия клеток: HCC827 Соотношение комбинированного использования AZD8055 (нМ) Пример 11 (нМ) Fa CI 2430 333 0,137 0,794 0,815 810 111 0,137 0,684 0,637 270 37,0 0,137 0,512 0,621 270 111 0,412 0,660 0,749 90 12,3 0,137 0,392 0,434 90 37,0 0,412 0,477 0,776 90 111 1,23 0,741 0,432 30 12,3 0,412 0,313 0,764 30 37,0 1,23 0,540 0,564 30 111 3,70 0,792 0,297 10 12,3 1,23 0,331 0,794 10 37,0 3,70 0,659 0,309 3,33 12,3 3,70 0,456 0,510 3,33 37,0 11,1 0,760 0,204 1,11 4,12 3,70 0,380 0,518 1,11 12,3 11,1 0,593 0,409 0,370 1,37 3,70 0,358 0,483 0,370 4,12 11,1 0,506 0,564 0,370 12,3 33,3 0,773 0,259 0,123 0,457 3,70 0,368 0,417 0,123 1,37 11,1 0,550 0,390 0,123 4,12 33,3 0,735 0,323 0,123 12,3 100 0,796 0,570 0,0412 0,152 3,70 0,380 0,373 0,0412 0,457 11,1 0,448 0,720 0,0412 1,37 33,3 0,675 0,491 0,0137 0,152 11,1 0,466 0,635 0,0137 0,457 33,3 0,642 0,614 0,00457 0,152 33,3 0,637 0,633

[0380] Комбинированное использование соединения из примера 11 и MK-2206

[0381] [Таблица 40]

Линия клеток: BT-474 Соотношение комбинированного использования MK-2206 (нМ) Пример 11 (нМ) Fa CI 8100 1111 0,137 0,509 0,551 2700 370 0,137 0,443 0,346 2700 1111 0,412 0,489 0,679 900 123 0,137 0,321 0,395 900 370 0,412 0,389 0,597 900 1111 1,23 0,529 0,494 900 10000 11,1 0,739 0,590 300 123 0,412 0,290 0,588 300 370 1,23 0,430 0,449 300 1111 3,70 0,550 0,483 300 3333 11,1 0,684 0,459 100 123 1,23 0,301 0,608 100 370 3,70 0,473 0,419 100 1111 11,1 0,630 0,391 100 3333 33,3 0,776 0,372 33,3 41,2 1,23 0,228 0,596 33,3 123 3,70 0,411 0,375 33,3 370 11,1 0,592 0,352 33,3 1111 33,3 0,752 0,368 11,1 41,2 3,70 0,281 0,651 11,1 123 11,1 0,567 0,341 11,1 370 33,3 0,723 0,412 3,70 41,2 11,1 0,496 0,459 3,70 123 33,3 0,699 0,462 1,23 13,7 11,1 0,476 0,489 1,23 41,2 33,3 0,701 0,449 1,23 123 100 0,793 0,730 0,412 4,57 11,1 0,460 0,523 0,412 13,7 33,3 0,674 0,521 0,137 1,52 11,1 0,453 0,539 0,137 4,57 33,3 0,663 0,555 0,137 13,7 100 0,792 0,734 0,0457 1,52 33,3 0,641 0,623 0,0457 4,57 100 0,775 0,833 0,0152 1,52 100 0,770 0,861

[0382] [Таблица 41]

Линия клеток: SK-BR-3 Соотношение комбинированного использования MK-2206 (нМ) Пример 11 (нМ) Fa CI 24300 3333 0,137 0,591 0,880 8100 1111 0,137 0,550 0,524 8100 3333 0,412 0,601 0,767 2700 370 0,137 0,522 0,261 2700 1111 0,412 0,577 0,362 900 123 0,137 0,380 0,656 900 370 0,412 0,459 0,639 900 1111 1,23 0,626 0,193 900 10000 11,1 0,697 0,632 300 370 1,23 0,507 0,355 300 1111 3,70 0,596 0,337 300 3333 11,1 0,663 0,437 300 10000 33,3 0,720 0,662 100 123 1,23 0,393 0,598 100 370 3,70 0,562 0,225 100 1111 11,1 0,732 0,128 100 3333 33,3 0,730 0,392 100 10000 100 0,782 0,743 33,3 123 3,70 0,462 0,327 33,3 370 11,1 0,676 0,159 33,3 1111 33,3 0,744 0,295 33,3 3333 100 0,786 0,650 11,1 41,2 3,70 0,365 0,473 11,1 123 11,1 0,543 0,321 11,1 370 33,3 0,740 0,286 3,70 41,2 11,1 0,510 0,334 3,70 123 33,3 0,717 0,322 1,23 13,7 11,1 0,374 0,654 1,23 41,2 33,3 0,635 0,499 1,23 123 100 0,763 0,719 0,412 13,7 33,3 0,627 0,516 0,412 41,2 100 0,736 0,853 0,137 4,57 33,3 0,555 0,728 0,0457 1,52 33,3 0,544 0,765

[0383] [Таблица 42]

Линия клеток: HCC827 Соотношение комбинированного использования MK-2206 (нМ) Пример 11 (нМ) Fa CI 8100 1111 0,137 0,299 0,710 8100 3333 0,412 0,389 0,847 2700 1111 0,412 0,311 0,639 900 123 0,137 0,265 0,131 900 3333 3,70 0,446 0,549 900 10000 11,1 0,593 0,420 300 370 1,23 0,298 0,334 300 1111 3,70 0,420 0,292 300 3333 11,1 0,561 0,236 100 370 3,70 0,338 0,346 100 1111 11,1 0,529 0,168 100 3333 33,3 0,769 0,040 33,3 370 11,1 0,573 0,078 33,3 1111 33,3 0,739 0,041 33,3 3333 100 0,782 0,072 11,1 123 11,1 0,507 0,124 11,1 370 33,3 0,700 0,055 11,1 1111 100 0,790 0,055 3,70 41,2 11,1 0,377 0,400 3,70 123 33,3 0,718 0,043 1,23 41,2 33,3 0,634 0,103 1,23 123 100 0,790 0,051 0,412 13,7 33,3 0,510 0,334 0,412 41,2 100 0,744 0,092 0,137 4,57 33,3 0,519 0,304 0,137 13,7 100 0,702 0,149 0,0457 1,52 33,3 0,427 0,717 0,0457 4,57 100 0,690 0,171 0,0152 1,52 100 0,611 0,381

[0384] Комбинированное использование соединения из примера 11 и палбоциклиба

[0385] [Таблица 43]

Линия клеток: BT-474 Соотношение комбинированного использования Палбоциклиб (нМ) Пример 11 (нМ) Fa CI 145800 20000 0,137 0,298 0,016 48600 20000 0,412 0,231 0,076 16200 20000 1,235 0,283 0,158 5400 20000 3,704 0,272 0,510 1800 20000 11,1 0,433 0,568 600 20000 33,3 0,664 0,458 200 6667 33,3 0,593 0,698 66,7 2222 33,3 0,563 0,827 66,7 6667 100 0,785 0,589 22,2 741 33,3 0,602 0,664 22,2 2222 100 0,752 0,759 7,41 247 33,3 0,611 0,631 2,47 82,3 33,3 0,588 0,719 2,47 247 100 0,776 0,634 0,823 27,4 33,3 0,608 0,642 0,823 82,3 100 0,777 0,627 0,274 3,05 11,1 0,363 0,852 0,274 9,14 33,3 0,582 0,744 0,274 27,4 100 0,756 0,740 0,0914 3,05 33,3 0,618 0,605 0,0914 9,14 100 0,753 0,753 0,0305 3,05 100 0,783 0,599

[0386] [Таблица 44]

Линия клеток: SK-BR-3 Соотношение комбинированного использования Палбоциклиб (нМ) Пример 11 (нМ) Fa CI 145800 20000 0,137 0,685 0,039 48600 20000 0,412 0,679 0,046 16200 20000 1,23 0,693 0,048 5400 20000 3,70 0,710 0,065 1800 20000 11,1 0,759 0,101 600 20000 33,3 0,790 0,227 66,7 6667 100 0,742 0,888 7,41 247 33,3 0,523 0,841 2,47 27,4 11,1 0,310 0,741 2,47 82,3 33,3 0,510 0,885 0,274 9,14 33,3 0,510 0,886 0,0914 3,05 33,3 0,558 0,718

[0387] [Таблица 45]

Линия клеток: HCC827 Соотношение комбинированного использования Палбоциклиб (нМ) Пример 11 (нМ) Fa CI 16200 2222 0,137 0,214 0,820 600 741 1,23 0,217 0,393 200 247 1,23 0,243 0,187 66,7 82,3 1,23 0,239 0,139 66,7 741 11,1 0,382 0,604 22,2 247 11,1 0,433 0,411 22,2 741 33,3 0,615 0,550 7,41 82,3 11,1 0,470 0,328 7,41 247 33,3 0,673 0,388 7,41 741 100 0,732 0,850 2,47 27,4 11,1 0,341 0,584 2,47 82,3 33,3 0,516 0,787 0,823 9,14 11,1 0,259 0,899 0,274 3,05 11,1 0,350 0,557 0,274 9,14 33,3 0,516 0,778 0,0914 3,05 33,3 0,490 0,872

[0388] Комбинированное использование соединения из примера 11 и Фулвестранта

[0389] [Таблица 46]

Линия клеток: BT-474 Соотношение комбинированного использования Фулвестрант (нМ) Пример 11 (нМ) Fa CI 729000 100000 0,137 0,283 0,654 243000 33333 0,137 0,206 0,773 81000 11111 0,137 0,205 0,281 81000 33333 0,412 0,231 0,549 81000 100000 1,23 0,293 0,699 27000 11111 0,412 0,227 0,241 27000 33333 1,23 0,232 0,677 27000 100000 3,70 0,326 0,741 9000 11111 1,23 0,268 0,261 9000 33333 3,70 0,317 0,540 9000 100000 11,1 0,496 0,618 3000 3704 1,23 0,227 0,273 3000 11111 3,70 0,273 0,587 3000 33333 11,1 0,540 0,491 3000 100000 33,3 0,690 0,765 1000 3704 3,70 0,275 0,527 1000 11111 11,1 0,531 0,503 1000 33333 33,3 0,761 0,531 333 3704 11,1 0,555 0,456 333 11111 33,3 0,787 0,459 111 1235 11,1 0,453 0,686 111 3704 33,3 0,769 0,508 37,0 412 11,1 0,458 0,673 37,0 1235 33,3 0,734 0,614 12,3 137 11,1 0,447 0,703 12,3 412 33,3 0,707 0,702 4,12 45,7 11,1 0,430 0,754 4,12 137 33,3 0,710 0,693 1,37 15,2 11,1 0,460 0,667 1,37 45,7 33,3 0,674 0,820 0,457 15,2 33,3 0,708 0,700

[0390] [Таблица 47]

Линия клеток: SK-BR-3 Соотношение комбинированного использования Фулвестрант (нМ) Пример 11 (нМ) Fa CI 729000 100000 0,137 0,283 0,706 243000 33333 0,137 0,242 0,451 81000 33333 0,412 0,273 0,314 81000 100000 1,23 0,295 0,705 27000 11111 0,412 0,357 0,056 27000 100000 3,70 0,402 0,344 9000 11111 1,23 0,350 0,118 9000 33333 3,70 0,335 0,400 9000 100000 11,1 0,470 0,474 3000 11111 3,70 0,254 0,596 3000 33333 11,1 0,489 0,385 3000 100000 33,3 0,616 0,571 1000 11111 11,1 0,467 0,421 1000 33333 33,3 0,646 0,476 333 1235 3,70 0,210 0,689 333 3704 11,1 0,482 0,385 333 11111 33,3 0,690 0,364 333 33333 100 0,753 0,720 111 412 3,7 0,241 0,529 111 1235 11,1 0,406 0,574 111 3704 33,3 0,637 0,498 111 11111 100 0,746 0,756 37,0 412 11,1 0,342 0,823 37,0 1235 33,3 0,615 0,563 37,0 3704 100 0,753 0,723 12,3 137 11,1 0,343 0,817 12,3 412 33,3 0,604 0,599 12,3 1235 100 0,746 0,756 4,12 137 33,3 0,594 0,631 4,12 412 100 0,726 0,868 1,37 15,2 11,1 0,329 0,886 1,37 45,7 33,3 0,565 0,740 1,37 137 100 0,738 0,802 0,457 15,2 33,3 0,605 0,596 0,457 45,7 100 0,732 0,833 0,152 15,2 100 0,748 0,746

[0391] [Таблица 48]

Линия клеток: HCC827 Соотношение комбинированного использования Фулвестрант (нМ) Пример 11 (нМ) Fa CI 243000 33333 0,137 0,248 0,754 81000 11111 0,137 0,301 0,128 27000 11111 0,412 0,299 0,162 9000 11111 1,23 0,245 0,475 9000 33333 3,7 0,460 0,181 9000 100000 11 0,474 0,484 3000 11111 3,70 0,398 0,236 3000 33333 11,1 0,420 0,600 3000 100000 33,3 0,693 0,252 1000 3704 3,70 0,240 0,774 1000 11111 11,1 0,386 0,696 1000 33333 33,3 0,682 0,269 1000 100000 100 0,797 0,299 333 3704 11,1 0,392 0,648 333 11111 33,3 0,635 0,376 333 33333 100 0,725 0,573 111 412 3,70 0,227 0,778 111 1235 11,1 0,354 0,835 111 3704 33,3 0,600 0,480 111 11111 100 0,736 0,520 37,0 412 11,1 0,394 0,627 37,0 1235 33,3 0,522 0,806 37,0 3704 100 0,715 0,616 12,3 412 33,3 0,627 0,396 12,3 1235 100 0,675 0,842 4,12 45,7 11,1 0,362 0,784 4,12 137 33,3 0,553 0,653 4,12 412 100 0,677 0,828 1,37 45,7 33,3 0,600 0,476 0,457 15,2 33,3 0,588 0,519 0,152 15,2 100 0,678 0,824

[0392] Комбинированное использование соединения из примера 11 и цисплатина (CDDP)

[0393] [Таблица 49]

Линия клеток: HCC827 Соотношение комбинированного использования CDDP (нМ) Пример 11 (нМ) Fa CI 24300 3333 0,137 0,744 0,685 8100 1111 0,137 0,576 0,775 8100 3333 0,412 0,726 0,793 2700 1111 0,412 0,589 0,714 900 370 0,412 0,393 0,865 900 1111 1,23 0,626 0,560 900 3333 3,70 0,750 0,662 300 1111 3,70 0,659 0,459 300 3333 11,1 0,785 0,496 100 370 3,70 0,466 0,593 100 1111 11,1 0,673 0,448 33,3 1111 33,3 0,762 0,270 11,1 370 33,3 0,623 0,407 3,70 41,2 11,1 0,346 0,597 3,70 123 33,3 0,616 0,296 3,70 370 100 0,763 0,288 1,23 13,7 11,1 0,368 0,436 1,23 41,2 33,3 0,589 0,302 1,23 123 100 0,767 0,236 0,412 13,7 33,3 0,534 0,409 0,412 41,2 100 0,746 0,267 0,137 4,57 33,3 0,523 0,430 0,137 13,7 100 0,716 0,335 0,0457 1,52 33,3 0,497 0,507 0,0457 4,57 100 0,696 0,388 0,0152 1,52 100 0,672 0,465

[0394] Комбинированное использование соединения из примера 11 и SN-38

[0395] [Таблица 50]

Линия клеток: HCC827 Соотношение комбинированного использования SN-38 (нМ) Пример 11 (нМ) Fa CI 81 11,1 0,137 0,562 0,441 27 3,70 0,137 0,302 0,401 27 11,1 0,412 0,501 0,556 9 3,70 0,412 0,299 0,422 9 11,1 1,23 0,496 0,582 3 3,70 1,23 0,369 0,344 3 11,1 3,70 0,517 0,579 1 3,70 3,70 0,275 0,680 1 11,1 11,1 0,588 0,528 0,333 3,70 11,1 0,401 0,606 0,333 11,1 33,3 0,686 0,496 0,111 3,70 33,3 0,546 0,641 0,0370 1,23 33,3 0,491 0,704 0,0370 3,70 100 0,748 0,530 0,0123 0,412 33,3 0,497 0,644 0,0123 1,23 100 0,664 0,809 0,00412 0,137 33,3 0,550 0,482 0,00412 0,412 100 0,674 0,743 0,00137 0,137 100 0,665 0,773 0,000457 0,0152 33,3 0,455 0,773 0,000457 0,0457 100 0,663 0,782 0,000152 0,0152 100 0,651 0,834

[0396] Учитывая эти результаты, показано, что комбинированное использование соединения из примера 11, являющегося пиримидиновым соединением по изобретению, с антиметаболитом гемцитабином, 5-фторурацилос или трифлуридином, лекарственным средством на основе платины цисплатином, лекарственным средством на основе алкалоида паклитакселом, ингибитором топоизомераз SN-38, ингибитором эстрогеновых рецепторов фулвестрантом, ингибитором пути передачи сигнала PI3K/AKT/mTOR AZD8055, эверолимусом, дактолисибом, бупарлисибом, тазелисибом или MK-2206 или ингибитором CDK4/6 палбоциклибом синергически потенцирует противоопухолевый эффект.

[0397] Тестовый пример 15. Комбинация (in vivo) пиримидинового соединения и трастузумаба

Опухолевые клетки, полученные из рака желудка человека 4-1ST, получали в виде фрагмента опухоли из Центрального института экспериментальных животных Японии. Опухоль удаляли через приблизительно 1 месяц после подкожной трансплантации и пассажа 6-недельному самцу бестимусной мыши (BALB/cAJcl-nu/nu, CLEA Japan, Inc.) и получали фрагмент размером приблизительно 2 мм². Иглу для трансплантации наполняли одним фрагментом и вводили подкожно в область последнего правого ребра каждой бестимусной мыши для проникновения в правый бок. Опухоль выталкивали, нажав на внутренний шприц, и, таким образом, осуществляли трансплантацию. Для измерения размера опухоли использовали электронный калипер. Опухоль каждого животного измеряли, размещая большую ось и малую ось между измеряющими поверхностями электронного калипера (дни 0, 5, 8, 12 и 15). С помощью этой большой и малой осей вычисляли объем опухоли (TV). Процент относительного изменения объема опухоли (T/C) вычисляли из вычисленного объема опухоли. TV и T/C вычисляли по следующим уравнениям:

Объем опухоли (TV) (мм³)=(большая ось, мм)×(малая ось, мм)×(малая ось, мм)/2

Процент относительного изменения объема опухоли (T/C) (%)=(средний TV в группе введения)/(средний TV в контрольной группе)×100

Для измерения массы тела использовали электронные весы для животных. Процент изменения массы тела в n-ый день (BWCn) относительно массы тела в 0-ый день (BW0) и массы тела в n-ый день (BWn) вычисляли по следующему уравнению:

Процент изменения массы тела BWCn (%)=(BWn-BW0)/BW0×100

Бестимусных мышей, имеющих TV от 50 до 300 мм³, выбирали и приписывали к группам, каждая из которых включала 6 животных способом равных количеств [MiSTAT (версии 2.1)] так, чтобы средние значения TV являлись средними среди групп. Трастузумаб (Герцептин, Roche) вводили в хвостовую вену раз в сутки в 1-ый и 8-ой дни (дни 1 и 8). Соединение из примера 11 вводили перорально раз в сутки, каждый день в течение 14 дней (дни 1-14). Каждую дозу устанавливали как дозу, указанную в таблицах ниже. Неподвергнутую воздействию группу использовали в качестве контроля.

Наличие или отсутствие комбинаторного эффекта и токсичность оценивали с помощью размеров опухолей и масс тела в день группирования (день 0) и день оценки (день 15). В период введения массу тела измеряли каждый день для вычисления количества раствора дозы.

Результаты приведены в таблицах ниже и на фигуре 11.

[0398] [Таблица 51]

Группа Доза (мг/кг/сутки) Лечение Количество мышей Количество случаев гибели TV (мм³, среднее ± SE) Контроль (без лечения) - - 6 0 2041,3±94,7 Пример 11 6,25 Дни 1-14, po 6 0 448,7±79,0 Пример 11 12,5 Дни 1-14, po 6 0 62,0±6,9 Трастузумаб 20 Дни 1, 8, iv 6 0 1621,4±273,5 Трастузумаб 40 Дни 1, 8, iv 6 0 1518,8±204,2 Пример 11+Трастузумаб 6,25+20 Дни 1-14, po+Дни 1, 8, iv 6 0 149,5±62,6 Пример 11+Трастузумаб 12,5+20 Дни 1-14, po+Дни 1, 8, iv 6 0 7,4±3,5 Пример 11+Трастузумаб 6,25+40 Дни 1-14, po+Дни 1, 8, iv 6 0 39,6±8,6 Пример 11+Трастузумаб 12,5+40 Дни 1-14, po+Дни 1, 8, iv 6 0 17,3±3,6 Группа Критерий Даннета при сравнении с контролем t-критерий Аспина-Уэлча при сравнении с примером 11, Tmab T/C (%) BWC (%, среднее ± SE) Контроль (без лечения) - - 100,0 8,43±1,38 Пример 11 *** - 22,0 3,69±0,75 Пример 11 *** - 3,0 3,79±1,07 Трастузумаб ns - 79,4 10,82±0,90 Трастузумаб * - 74,4 9,22±1,00 Пример 11+Трастузумаб *** *, ** 7,3 6,43±1,11 Пример 11+Трастузумаб *** ***, ** 0,4 3,03±1,09 Пример 11+Трастузумаб *** **, *** 1,9 5,76±0,50 Пример 11+Трастузумаб *** ***, *** 0,8 4,81±0,99

Сокращения: Tmab, трастузумаб; po, перорально; iv, внутривенно; SE, стандартная ошибка; ns, незначимо; *, p<0,05; **p<0,01; ***p<0,001

[0399] В результате анализа TV в 15-ый день (день 15) каждой группы с помощью критерия Даннета (критерия Даннета при сравнении с контролем) было показано, что группы отдельного введения трастузумаба (за исключением группы введения 20 мг/кг/сутки) или примера 11 и группы комбинированного введения трастузумаба/примера 11 (пример 11+трастузумаб) имели значимо более низкий TV, чем контрольные группы. В результате дополнительного анализа с помощью t-критерия Аспина-Уэлча было показано, что группы комбинированного введения трастузумаба/примера 11 (пример 11+трастузумаб) имели значимо более низкий TV, чем группы отдельного введения трастузумаба или примера 11. Средний процент изменения массы тела (BWC) в группах комбинированного введения в день оценки не подвергался усилению под действием токсичности по сравнению с группами отдельного введения трастузумаба или примера 11.

[0400] Тестовый пример 16. Комбинация (in vivo) пиримидинового соединение, трастузумаба и пертузумаба

Опухолевые клетки, полученные из рака желудка человека 4-1ST, получали в виде фрагмента опухоли из Центрального института экспериментальных животных Японии. Опухоль удаляли через приблизительно 1 месяц после подкожной трансплантации и пассажа 6-недельному самцу бестимусной мыши (BALB/cAJcl-nu/nu, CLEA Japan, Inc.) и получали фрагмент размером приблизительно 2 мм². Иглу для трансплантации наполняли одним фрагментом и вводили подкожно в область последнего правого ребра каждой бестимусной мыши для проникновения в правый бок. Опухоль выталкивали, нажав на внутренний шприц, и, таким образом, осуществляли трансплантацию. Для измерения размера опухоли использовали электронный калипер. Опухоль каждого животного измеряли, размещаяя большую ось и малую ось между измеряющими поверхностями электронного калипера (дни 0, 5, 8, 12 и 15). С помощью этой большой и малой осей вычисляли объем опухоли (TV). Процент относительного изменения объема опухоли (T/C) вычисляли из вычисленного объема опухоли. TV и T/C вычисляли по следующим уравнениям:

Объем опухоли (TV) (мм³)=(большая ось, мм)×(малая ось, мм)×(малая ось, мм)/2

Процент относительного изменения объема опухоли (T/C) (%)=(средний TV в группе введения)/(средний TV в контрольной группе)×100

Для измерения массы тела использовали электронные весы для животных. Процент изменения массы тела в n-ый день (BWCn) относительно массы тела в 0-ый день (BW0) и массы тела в n-ый день (BWn) вычисляли по следующему уравнению:

Процент изменения массы тела BWCn (%)=(BWn-BW0)/BW0×100

Бестимусных мышей, имеющих TV от 100 до 300 мм³, выбирали и приписывали к группам, каждая из которых включала 6 животных способом равных количеств [MiSTAT (версии 2.0)] так, чтобы средние значения TV являлись средними среди групп. Трастузумаб (T-mab, Герцептин, Roche) и пертузумаб (P-mab, Perjeta, Roche) вводили в хвостовую вену раз в сутки в 1-ый день (день 1). Соединение из примера 11 вводили перорально раз в сутки, каждый день в течение 14 дней (дни 1-14). Каждую дозу устанавливали как дозу, указанную в таблицах ниже. Неподвергнутую воздействию группа использовали в качестве контроля.

Наличие или отсутствие комбинаторного эффекта и токсичность оценивали с помощью размеров опухолей и масс тела в день группирования (день 0) и день оценки (день 15). В период введения массу тела измеряли каждый день для вычисления количества раствора дозы.

Если обнаруживали отдельный TV=0, частоту полных ответов (далее в настоящем описании CR) также устанавливали как показатель оценки. Для оценки CR использовали клинический CR (cCR) на основе TV=0 и патологический CR (pCR) на основе патологического теста. Значимость отличий частоты CR в группах тройного комбинированного введения трастузумаба/пертузумаба/примера 11 (пример 11+T-mab/P-mab) от соответствующих групп отдельного введения примера 11 и группы комбинированного введения трастузумаба/пертузумаба в одинаковых дозах анализировали с помощью точного критерия Фишера.

Частота CR=(количество индивидуумов с CR в группе, в которой обнаружены CR)/(общее количество индивидуумов в группа, в которой обнаружены CR)×100

Результаты приведены в таблицах ниже и на фигуре 12.

[0401] [Таблица 52]

Группа Доза (мг/кг/сутки) Лечение Количество мышей Количество случаев гибели TV (мм³, среднее ± SE) Критерий Даннета при сравнении с контролем t-критерий Аспина-Уэлча при сравнении с примером 11/T-mab/P-mab Контроль - - 6 0 1712,1±175,9 - - Пример 11 6,25 Дни 1-14, po 6 0 295,9±67,3 *** - Пример 11 12,5 Дни 1-14, po 6 0 31,9±10,7 *** - T-mab/P-mab 10/20 День 1, iv/День 1, iv 6 0 52,8±13,0 *** - Пример 11+T-mab/P-mab 6,25+10/20 Дни 1-14, po+День 1, iv/День 1, iv 6 0 0,0±0,0 *** **, ** Пример 11+T-mab/P-mab 12,5+10/20 Дни 1-14, po+День 1, iv/День 1, iv 6 0 0,0±0,0 *** *, ** Группа T/C (%) cCR (%) (количество животных с cCR) Точный критерий Фишера при сравнении с примером 11/T-mab/P-mab pCR (%) (количество животных с pCR) Точный критерий Фишера при сравнении с примером 11/T-mab/P-mab BWC (%, среднее ± SE) Контроль 100,0 - - - - 9,71±2,18 Пример 11 17,3 0 (0) - 0 (0) - 5,93±0,25 Пример 11 1,9 33 (2) - 33 (2) - 4,77±1,14 T-mab/P-mab 3,1 17 (1) - 17 (1) - 8,70±1,50 Пример 11+T-mab/P-mab 0,0 100 (6) **, * 33 (2) ns, ns 6,68±2,11 Пример 11+T-mab/P-mab 0,0 100 (6) ns, * 100 (6) ns, * 5,20±0,85

Сокращения: T-mab, трастузумаб; P-mab, пертузумаб; po, перорально; iv, внутривенно; SE, стандартная ошибка; cCR, клинический CR; pCR, патологический CR; ns, незначимо; *, p<0,05; **p<0,01; ***p<0,001

[0402] В результате анализа TV в 15-ый день (день 15) каждой группы с помощью критерия Даннета (критерия Даннета при сравнении с контролем), было показано, что группы отдельного введения примера 11, группа двойного комбинированного введения трастузумаба/пертузумаба (T-mab/P-mab) и группы тройного комбинированного введения трастузумаба/пертузумаба/примера 11 (примера 11+T-mab/P-mab) имели значимо более низкий TV, чем контрольные группы. В результате дополнительного анализа с помощью t-критерия Аспина-Уэлча было показано, что группы тройного комбинированного введения трастузумаба/пертузумаба/примера 11 имели значимо более низкий TV, чем группы отдельного введения примера 11 и группа двойного комбинированного введения трастузумаба/пертузумаба. Средний процент изменения массы тела (BWC) в группах тройного комбинированного введения трастузумаба/пертузумаба/примера 11 введения в день оценки не подвергался усилению под действием токсичности по сравнению с группами отдельного введения примера 11 и группой двойного комбинированного введения трастузумаба/пертузумаба.

[0403] Тестовый пример 17. Комбинация (in vivo) пиримидинового соединения и трастузумаба эмтанзина

Эксперимент проводили аналогично тестовому примеру 15, за исключением того, что использовали трастузумаб эмтанзина (Kadcyla, Roche) вместо трастузумаба и вводили его в хвостовую вену раз в сутки в 1-ый день (день 1)Каждую дозу устанавливали как дозу, указанную в таблицах ниже. Неподвергнутую воздействию группу использовали в качестве контроля.

Результаты приведены в таблицах ниже и на фигуре 13.

[0404] [Таблица 53]

Группа Доза (мг/кг/сутки) Лечение Количество мышей Количество случаев гибели TV (мм³, среднее ± SE) Контроль (без лечения) - - 6 0 1609,5±138,9 Пример 11 6,25 Дни 1-14, po 6 0 233,6±42,6 Трастузумаб эмтанзин 1,88 Дни 1, iv 6 0 1183,2±229,0 Пример 11+Трастузумаб эмтанзин 6,25+1,88 Дни 1-14, po+Дни 1, iv 6 0 115,9±11,2 Лекарственное средство Значение p (критерий Даннета) при сравнении с контролем Значение p (t-критерий Аспина-Уэлча) при сравнении с монотерапией примером 11 Значение p (t-критерий Аспина-Уэлча) при сравнении с монотерапией трастузумабом эмтанзином T/C (%) BWC (%, среднее ± SE) Контроль (без лечения) - - - 100,0 10,4±2,2 Пример 11 *** - - 14,5 4,0±0,7 Трастузумаб эмтанзин * - - 73,5 8,2±1,1 Пример 11+Трастузумаб эмтанзин *** * ** 7,2 7,4±1,1

Сокращения: po, перорально; iv, внутривенно; SE, стандартная ошибка; *, p<0,05; **p<0,01; ***p<0,001

[0405] В результате анализа TV в 15-ый день (день 15) каждой группы с помощью критерия Даннета (критерия Даннета при сравнении с контролем), было показано, что группа отдельного введения трастузумаба эмтанзина или примера 11 и группа комбинированного введения трастузумаба эмтанзина/примера 11 (трастузумаб эмтанзин+пример 11) имели значимо более низкий TV, чем контрольные группы. В результате o дополнительного анализа с помощью t-критерия Аспина-Уэлча было показано, что группа комбинированного введения трастузумаба эмтанзина/примера 11 имела значимо более низкий TV, чем группа отдельного введения трастузумаба эмтанзина или примера 11. Средний процент изменения массы тела (BWC) в группе комбинированное введение в день оценки не подвергался усилению под действием токсичности по сравнению с группой отдельного введения трастузумаба эмтанзина или примера 11.

[0406] Тестовый пример 18. Комбинация (in vivo) пиримидинового соединения и капецитабина

Линию клеток рака желудка человека NCI-N87 получали из American Type Culture Collection (ATCC). Линию клеток культивировали в среде RPMI-1640 (содержащий 4,5 г/л глюкозы, 10 мМ HEPES и 1 мМ пирувата натрия) (FUJIFILM Wako Pure Chemical Corporation), содержащей 10%-ную эмбриональную телячью сыворотку (FBS) в инкубаторе при 5% CO₂ и 37°C.

Клетки NCI-N87 ресуспендировали в концентрации 8×10⁷ клеток/мл в PBS. Суспензию клеток подкожно трансплантировали в количестве 8×10⁶ клеток/0,1 мл в правую часть грудной клетки каждой 6-недельной бестимусной мыши (BALB/cAJcl-nu/nu, CLEA Japan, Inc.) с использованием шприца для туберкулина 1 мл и инъекционной иглы 25G.

Для измерения размера опухоли использовали электронный калипер. Измеряли большую и малую ось опухоли и вычисляли TV и T/C по указанным выше уравнениям.

Для измерения массы тела использовали электронные весы для животных. Процент изменения массы тела в n-ый день (BWCn) относительно массы тела в 0-ой день (BW0) и массы тела в n-ый день (BWn) вычисляли по указанному выше уравнению.

Бестимусных мышей, имеющих TV от 100 до 300 мм³, выбирали и приписывали к группам, каждая из которых включала 6 животных способом равных количеств [MiSTAT (версии 2.0)] так, чтобы средние значения TV являлись средними среди групп. Капецитабин (Tokyo Chemical Industry Co., Ltd.) и соединение из примера 11 вводили перорально раз в сутки, каждый день в течение 14 дней (дни 1-14). Каждую дозу устанавливали как дозу, указанную в таблицах ниже. В качестве контроля использовали водный раствор, содержащий 0,1 Н HCl и 0,5% HPMC.

Наличие или отсутствие комбинаторного эффекта и токсичность оценивали с помощью размеров опухолей и масс тела в день группирования (день 0) и день оценки (день 15). В период введения массу тела измеряли каждый день для вычисления количества раствора дозы.

Результаты приведены в следующих таблицах и на фигурах 14 и 15.

[0407] [Таблица 54]

Группа Доза (мг/кг/
сутки) Схема (день) Путь Количество мышей Количество случаев гибели Объем опухоли (мм³) день 15 среднее ± SE Контроль - 1-14 p.o. 6 0 581,47±44,61 Пример 11 6,25 1-14 p.o. 6 0 272,43±22,22 Капецитабин 359 1-14 p.o. 6 0 250,52±18,71 Капецитабин 809 1-14 p.o. 6 2 224,76±27,37 Пример 11+Капецитабин 6,25+359 1-14 p.o. 6 0 121,93+13,68 Пример 11+Капецитабин 6,25+809 1-14 p.o. 6 0 101,34±6,74 Группа Значение p T/C (%) BWC (%, среднее ± SE) Критерий Даннета при сравнении с контролем t-критерий Аспина-Уэлча при сравнении с примером 11
6,25 мг/кг/сутки при сравнении с капецитабином
359 мг/кг/сутки при сравнении с капецитабином
809 мг/кг/сутки Контроль - - - - 100 6,7±1,8 Пример 11 *** - ns ns 47 6,3±0,9 Капецитабин *** ns - ns 43 5,7±1,3 Капецитабин *** ns ns - 39 3,5±4,5 Пример 11+Капецитабин *** *** *** * 21 3,6±1,3 Пример 11+Капецитабин *** *** *** * 17 -5,4±4,9

*, p<0,05; **p<0,01; ***p<0,001; ns, незначимо (p>0,05)

[0408] В результате анализа TV в 15-ый день (день 15) каждой группы с помощью критерия Даннета (критерия Даннета при сравнении с контролем), было показано, что группы отдельного введения капецитабина или примера 11 и группы комбинированного введения примера 11/капецитабина (пример 11+капецитабин) имели значимо более низкий TV, чем контрольные группы. Также было показано, что группы комбинированного введения примера 11/капецитабина имели значимо более низкий TV, чем группы отдельного введения капецитабина или примера 11. Средний процент изменения массы тела (BWC) в группах комбинированного введения в день оценки не подвергался усилению под действием токсичности по сравнению с группами отдельного введения капецитабина или примера 11.

[0409] Следует отметить, что все документы и публикации, процитированные в настоящем описании, включены в настоящее описание в качестве ссылки в полном объеме, независимо от цели. Кроме того, настоящее описание включает содержимое описанной формулы изобретения, описания и чертежей японской патентной заявки № 2020-121733 (поданной 15 июля 2020 года), на основании которой испрашивается приоритет.

Выше описано несколько вариантов осуществления настоящего изобретения. Однако эти варианты осуществления представлены исключительно в иллюстративных целях и, таким образом, не предназначены для ограничения объема настоящего изобретения. Эти новые варианты осуществления можно осуществлять в различных других формах, и различные можно осуществлять сокращения, замены и изменения, если они не отклоняются от сущности изобретения. Эти варианты осуществления и их модификации включены в объем или сущность изобретения, а также включены в настоящее изобретение в соответствии с формулой изобретения и объемом ее эквивалентов.

Группа изобретений относится к химии и фармацевтике, а именно: к фармацевтической комбинации для лечения злокачественной опухоли, которая содержит пиримидиновое соединение, представляющее собой 7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-6-(циклопропилэтинил)-N-((R)-1-фенилэтил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамид или его фармацевтически приемлемую соль, и другое противоопухолевое средство, выбранное из по меньшей мере одного из антиметаболитов, лекарственных средств для молекулярного таргетинга, лекарственных средств на основе платины и лекарственных средств на основе алкалоидов; к набору, включающему предложенную комбинацию и инструкцию по ее введению; к вариантам способа лечения злокачественной опухоли; к вариантам применения указанного пиримидинового соединения. Группа изобретений обеспечивает противоопухолевый эффект в отношении злокачественных опухолей. 6 н. и 9 з.п. ф-лы, 15 ил., 56 табл., 58 пр.

1. Фармацевтическая комбинация для лечения злокачественной опухоли, содержащая пиримидиновое соединение, где указанное пиримидиновое соединение представляет собой 7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-6-(циклопропилэтинил)-N-((R)-1-фенилэтил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамид или его фармацевтически приемлемую соль, и другое противоопухолевое средство, которое представляет собой по меньшей мере одно средство, выбранное из антиметаболитов, лекарственных средств для молекулярного таргетинга, лекарственных средств на основе платины и лекарственных средств на основе алкалоидов.

2. Фармацевтическая комбинация по п. 1, где другое противоопухолевое средство является по меньшей мере одним средством, выбранным из 5-фторурацила (5-FU), трифлуридина, гемцитабина, капецитабина, трастузумаба, трастузумаба эмтанзина, AZD8055, эверолимуса, дактолисиба, бупарлисиба, тазелисиба, палбоциклиба, фулвестранта, цисплатина и паклитаксела.

3. Фармацевтическая комбинация по п. 1, где другое противоопухолевое средство выбрано из трастузумаба с пертузумабом.

4. Фармацевтическая комбинация по любому из пп. 1-3, где пиримидиновое соединение или его фармацевтически приемлемую соль и другое противоопухолевое средство вводят одновременно, последовательно или с интервалом.

5. Набор для лечения злокачественной опухоли, содержащий фармацевтическую комбинацию по любому из пп. 1-4 и инструкцию, в которой указано, что пиримидиновое соединение или его фармацевтически приемлемую соль и другое противоопухолевое средство вводят комбинированно.

6. Способ лечения злокачественной опухоли, включающий введение нуждающемуся в этом пациенту эффективного количества фармацевтической комбинации по любому из пп. 1-4.

7. Способ лечения злокачественной опухоли посредством комбинированного использования с другим противоопухолевым средством, включающий введение нуждающемуся в этом пациенту эффективного количества пиримидинового соединения, где указанное пиримидиновое соединение представляет собой 7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-6-(циклопропилэтинил)-N-((R)-1-фенилэтил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамид, или его фармацевтически приемлемой соли, при этом другое противоопухолевое средство представляет собой по меньшей мере одно средство, выбранное из антиметаболитов, лекарственных средств для молекулярного таргетинга, лекарственных средств на основе платины и лекарственных средств на основе алкалоидов.

8. Способ по п. 7, где другое противоопухолевое средство является по меньшей мере одним средством, выбранным из 5-фторурацила (5-FU), трифлуридина, гемцитабина, капецитабина, трастузумаба, трастузумаба эмтанзина, AZD8055, эверолимуса, дактолисиба, бупарлисиба, тазелисиба, палбоциклиба, фулвестранта, цисплатина и паклитаксела.

9. Способ по п. 7, где другое противоопухолевое средство выбрано из трастузумаба с пертузумабом.

10. Применение пиримидинового соединения или его фармацевтически приемлемой соли в способе лечения злокачественной опухоли посредством комбинированного использования с другим противоопухолевым средством, где указанное пиримидиновое соединение представляет собой 7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-6-(циклопропилэтинил)-N-((R)-1-фенилэтил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамид, и другое противоопухолевое средство представляет собой по меньшей мере одно средство, выбранное из антиметаболитов, лекарственных средств для молекулярного таргетинга, лекарственных средств на основе платины и лекарственных средств на основе алкалоидов.

11. Применение по п. 10, где другое противоопухолевое средство является по меньшей мере одним средством, выбранным из 5-фторурацила (5-FU), трифлуридина, гемцитабина, капецитабина, трастузумаба, трастузумаба эмтанзина, AZD8055, эверолимуса, дактолисиба, бупарлисиба, тазелисиба, палбоциклиба, фулвестранта, цисплатина и паклитаксела.

12. Применение по п. 10, где другое противоопухолевое средство выбрано из трастузумаба с пертузумабом.

13. Применение пиримидинового соединения или его фармацевтически приемлемой соли для лечения злокачественной опухоли посредством комбинированного использования с другим противоопухолевым средством, где указанное пиримидиновое соединение представляет собой 7-((3R,5S)-1-акрилоил-5-метилпирролидин-3-ил)-4-амино-6-(циклопропилэтинил)-N-((R)-1-фенилэтил)-7H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-карбоксамид, и другое противоопухолевое средство представляет собой по меньшей мере одно средство, выбранное из антиметаболитов, лекарственных средств для молекулярного таргетинга, лекарственных средств на основе платины и лекарственных средств на основе алкалоидов.

14. Применение по п. 13, где другое противоопухолевое средство является по меньшей мере одним средством, выбранным из 5-фторурацила (5-FU), трифлуридина, гемцитабина, капецитабина, трастузумаба, трастузумаба эмтанзина, AZD8055, эверолимуса, дактолисиба, бупарлисиба, тазелисиба, палбоциклиба, фулвестранта, цисплатина и паклитаксела.

15. Применение по п. 13, где другое противоопухолевое средство выбрано из трастузумаба с пертузумабом.

название	год	авторы	номер документа
ИНГИБИТОР EGFR	2021	Огути Кей	RU2817044C1
ПИРИМИДИНОВОЕ СОЕДИНЕНИЕ ИЛИ ЕГО СОЛЬ	2020	Накамура Масаюки Асаи Такахиро Игути Сатору Огути Кей	RU2787992C1
СРЕДСТВО, УСИЛИВАЮЩЕЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВОЕ ДЕЙСТВИЕ С ПРИМЕНЕНИЕМ СОЕДИНЕНИЯ ПИРАЗОЛО[3,4-d]ПИРИМИДИНА	2018	Ирие, Хироки Огути, Кей Фудзиока, Яйои	RU2799006C2
ПРЕПАРАТ И КОМПОЗИЦИЯ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ ОПУХОЛЕЙ	2017	Миура, Акихиро Соотоме, Хироси	RU2777595C2
НОВОЕ ПИРИМИДИНОВОЕ ПРОИЗВОДНОЕ, ОБЛАДАЮЩЕЕ ЭФФЕКТОМ ИНГИБИРОВАНИЯ РОСТА РАКОВЫХ КЛЕТОК, И СОДЕРЖАЩАЯ ЕГО ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ	2018	Ким, Сунг-Еун Ли, Сунхо Раджешь, Ренгасами Канг, Дае Хо Риу, Хиунг Чул Ким, Дзае-Сун Ли, Сангриул Ким, Кионг Чеол Рхо, Дзин Киунг Ли, Дзае Чеол	RU2744168C1
Ингибиторы рецептора эпидермального фактора роста	2022	Якобсон Георгий Викторович Кадыров Шамиль Динарович Сметанин Илья Алексеевич Хайдаров Адель Равилевич Халабудин Дмитрий Алексеевич Сидорова Ксения Сергеевна Завьялов Кирилл Вадимович Полианчик Даниил Евгеньевич Морозов Дмитрий Валентинович	RU2821531C2
НОВОЕ ФОСФАТЭФИРНОЕ СОЕДИНЕНИЕ, ИМЕЮЩЕЕ ПИРРОЛОПИРИМИДИНОВЫЙ СКЕЛЕТ, ИЛИ ЕГО ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИ ПРИЕМЛЕМАЯ СОЛЬ	2020	Миякоси Хитоси Танака Нодзому Кобаякава Ю	RU2801306C2
ПРИМЕНЕНИЕ ИМИДАЗОХИНОЛИНОВ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ЗАБОЛЕВАНИЙ, ЗАВИСИМЫХ ОТ EGFR, ИЛИ ЗАБОЛЕВАНИЙ С ПРИОБРЕТЕННОЙ РЕЗИСТЕНТНОСТЬЮ К АГЕНТАМ, КОТОРЫЕ СВЯЗЫВАЮТСЯ С ЧЛЕНАМИ СЕМЕЙСТВА EGFR	2008	Гарсия-Эчеверрия Карлос Маира Совё-Мишель	RU2481838C2
УСИЛИТЕЛЬ ПРОТИВООПУХОЛЕВОГО ВОЗДЕЙСТВИЯ, СОДЕРЖАЩИЙ СОЕДИНЕНИЕ ПИРРОЛОПИРИМИДИНА	2016	Исида Кейдзи	RU2710380C1
ХИНОЛИЛПИРРОЛПИРИМИДИЛЬНОЕ КОНДЕНСИРОВАННОЕ СОЕДИНЕНИЕ ИЛИ ЕГО СОЛЬ	2013	Сагара Такеси Ито Сатору Оцуки Сатие Ноносита Кацумаса	RU2581039C1

WO 2017038838 A1, 09.03.2017
WO 2010065898 A2, 10.06.2010
WO 2007067781 A3, 14.06.2007
WO 2015022926 A1, 19.02.2015
WO 2013108809 A1, 25.07.2013
EA 201892368 A1, 31.05.2019.

КОМБИНАЦИЯ, СОДЕРЖАЩАЯ ПИРИМИДИНОВОЕ СОЕДИНЕНИЕ, ДЛЯ ПРИМЕНЕНИЯ В ЛЕЧЕНИИ ОПУХОЛЕЙ Российский патент 2024 года по МПК A61K9/00 A61K31/519 A61K45/06 A61P35/00 C07D487/04

Описание патента на изобретение RU2827100C1

Похожие патенты RU2827100C1

Иллюстрации к изобретению RU 2 827 100 C1

Реферат патента 2024 года КОМБИНАЦИЯ, СОДЕРЖАЩАЯ ПИРИМИДИНОВОЕ СОЕДИНЕНИЕ, ДЛЯ ПРИМЕНЕНИЯ В ЛЕЧЕНИИ ОПУХОЛЕЙ

Формула изобретения RU 2 827 100 C1

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2024 года RU2827100C1

RU 2 827 100 C1