СПОСОБЫ ЛЕЧЕНИЯ ИНФЕКЦИИ ВИЧ-1 Российский патент 2024 года по МПК A61K31/415 A61K31/513 A61K31/536 A61K31/675 A61P31/18 

ПРИОРИТЕТ

В настоящей заявке испрашивается приоритет предварительной заявки на патент Австралии No. 2019904453 (поданной 26 ноября 2019 года) и предварительной заявки на патент Австралии No. 2020902273 (поданной 3 июля 2020 года), содержание которых полностью включено в данное описание.

ОБЛАСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение относится к способам лечения инфекции ВИЧ-1. В частности, настоящее изобретение относится к лечению инфекции ВИЧ-1 путем введения N-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамида в комбинации с одним или более антиретровирусными агентами. Однако следует понимать, что изобретение не ограничивается этой конкретной областью применения.

ПРЕДШЕСТВУЮЩИЙ УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Любое обсуждение предшествующего уровня техники в описании никоим образом не должно рассматриваться как признание того, что такой предшествующий уровень техники широко известен или является частью общеизвестных знаний в данной области техники.

Современная антиретровирусная терапия (ART) представляет собой комбинацию 2-3 антиретровирусных препаратов, которая успешно снижала уровень РНК ВИЧ-1 в крови до неопределяемых уровней (менее 15 копий/мл) и снижала заболеваемость и смертность от инфекции ВИЧ-1 и СПИД. Антиретровирусная терапия состоит из комбинации антиретровирусных агентов с по меньшей мере двумя разными механизмами действия против репликации ВИЧ-1 из 6 широких классов: нуклеозидные ингибиторы обратной транскриптазы (NRTI), не нуклеозидные ингибиторы обратной транскриптазы (NNRTI), ингибиторы переноса цепей интегразы (INSTI), ингибиторы протеазы (PI), ингибиторы слияния и ингибиторы проникновения (Arts & Hazuda, Cold Spring Harb Perspect Med 2012, 2: a007161].

Несмотря на сильнодействующие ART, устранения инфекции ВИЧ-1 достичь не удается. На настоящий момент ART не вылечила человека с инфекцией ВИЧ-1 (Arts &Hazuda, Cold Spring Harb Perspect Med 2012, 2: a007161; Pitman et al., Lancet HIV 2018, 5(6): 2317-e328). Места-укрытия или резервуары являются убежищами для вируса в латентном состоянии и репликации вируса на низком уровне, и современная перспектива лечения ВИЧ-1 представляет собой пожизненную антиретровирусную терапию. Без устранения ВИЧ-1 существует вероятность персистентной репликации вируса в вирусных резервуарах, что может продолжать способствовать прогрессированию патогенного заболевания (Pierson at al., Annu Rev Immunol 2000, 18: 665-708; Honeycutt et al., J Clin Invest 2016, 126: 1353-66). Достижения антиретровирусной терапии на настоящий момент в основном сосредоточены на агентах, которые влияют на репликацию вирусного генома, а не на агентах, которые устраняют инфекцию ВИЧ-1.

Следовательно, существует потребность в агентах, которые способствуют устранению инфекции ВИЧ-1.

Задачей настоящего изобретения является преодоление или улучшение по меньшей мере одного из недостатков предшествующего уровня техники или предоставление полезной альтернативы.

КРАТКОЕ ИЗЛОЖЕНИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение относится к неожиданному обнаружению того, что введение BIT225 в комбинации с антиретровирусными агентами лечит инфекцию ВИЧ-1 и модулирует иммунную систему у субъекта. Такие действия могут способствовать устранению резервуаров инфекции ВИЧ-1, которые остаются несмотря на эффективное лечение ART. Кроме того, такие действия могут привести к ослаблению неблагоприятных последствий для здоровья, связанных с воспалением, которые сохраняются несмотря на эффективное лечение ART.

Химическая структура BIT225 показана ниже:

В одном воплощении настоящее изобретение относится к способу лечения инфекции ВИЧ-1 и регулирования функции иммунной системы путем снижения системного воспаления и усиления иммунной активации у субъекта, включающему введение субъекту комбинации, содержащей а) один или более антиретровирусных агентов и б) М-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамид или его фармацевтически приемлемую соль.

В одном воплощении в настоящем изобретении предложено применение а) одного или более антиретровирусных агентов и б) М-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарственного средства для лечения инфекции ВИЧ-1 и регулирования функции иммунной системы путем снижения системного воспаления и усиления иммунной активации у субъекта.

В одном воплощении в настоящем изобретении предложена комбинация, содержащая а) один или более антиретровирусных агентов и б) М-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамид или его фармацевтически приемлемую соль, для использования в лечении инфекции ВИЧ-1 и регулировании функции иммунной системы путем снижения системного воспаления и усиления иммунной активации у субъекта.

В одном воплощении настоящее изобретение относится к способу лечения инфекции ВИЧ-1 и изменения вызванного ВИЧ разрегулирования иммунной системы путем снижения системного воспаления и усиления иммунной активации у субъекта, включающему введение субъекту комбинации, содержащей а) один или более антиретровирусных агентов и б) М-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамид или его фармацевтически приемлемую соль.

В одном воплощении в настоящем изобретении предложено применение а) одного или более антиретровирусных агентов и б) М-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарственного средства для лечения инфекции ВИЧ-1 и изменения вызванного ВИЧ разрегулирования иммунной системы путем снижения системного воспаления и усиления иммунной активации у субъекта.

В одном воплощении в настоящем изобретении предложена комбинация, содержащая а) один или более антиретровирусных агентов и б) М-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамид или его фармацевтически приемлемуюсоль, для использования в лечении инфекции ВИЧ-1 и изменения вызванного ВИЧ разрегулирования иммунной системы путем снижения системного воспаления и усиления иммунной активации у субъекта.

В одном воплощении иммунная система представляет собой врожденную иммунную систему.

В одном воплощении системное воспаление представляет собой миелоидное и/или моноцитарное воспаление.

В одном воплощении настоящее изобретение относится к способу лечения инфекции ВИЧ-1 и модулирования иммунной системы у субъекта, включающему введение субъекту комбинации, содержащей а) один или более антиретровирусных агентов и б) М-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамид или его фармацевтически приемлемую соль.

В одном воплощении в настоящем изобретении предложено применение а) одного или более антиретровирусных агентов и б) М-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарственного средства для лечения инфекции ВИЧ-1 и модулирования иммунной системы у субъекта.

В одном воплощении в настоящем изобретении предложена комбинация, содержащая а) один или более антиретровирусных агентов и б) М-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамид или его фармацевтически приемлемую соль, для использования в лечении инфекции ВИЧ-1 и модулировании иммунной системы у субъекта.

В одном воплощении настоящее изобретение относится к способу лечения инфекции ВИЧ-1 и модулирования врожденной иммунной системы у субъекта, включающему введение субъекту комбинации, содержащей а) один или более антиретровирусных агентов и б) М-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамид или его фармацевтически приемлемую соль.

В одном воплощении в настоящем изобретении предложено применение а) одного или более антиретровирусных агентов и б) М-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарственного средства для лечения инфекции ВИЧ-1 и модулирования врожденной иммунной системы у субъекта.

В одном воплощении в настоящем изобретении предложена комбинация, содержащая а) один или более антиретровирусных агентов и б) N-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамид или его фармацевтически приемлемую соль, для использования в лечении инфекции ВИЧ-1 и модулирования врожденной иммунной системы у субъекта.

В одном воплощении настоящее изобретение относится к способу лечения инфекции ВИЧ-1 и активирования иммунной системы у субъекта, включающему введение субъекту комбинации, содержащей а) один или более антиретровирусных агентов и б) N-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамид или его фармацевтически приемлемую соль.

В одном воплощении в настоящем изобретении предложено применение а) одного или более антиретровирусных агентов и б) N-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарственного средства для лечения инфекции ВИЧ-1 и активирования иммунной системы у субъекта.

В одном воплощении в настоящем изобретении предложена комбинация, содержащая а) один или более антиретровирусных агентов и б) N-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамид или его фармацевтически приемлемую соль, для использования в лечении инфекции ВИЧ-1 и активировании иммунной системы у субъекта.

В одном воплощении настоящее изобретение относится к способу лечения инфекции ВИЧ-1 и активирования врожденной иммунной системы у субъекта, включающему введение субъекту комбинации, содержащей а) один или более антиретровирусных агентов и б) N-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамид или его фармацевтически приемлемую соль.

В одном воплощении в настоящем изобретении предложено применение а) одного или более антиретровирусных агентов и б) N-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарственного средства для лечения инфекции ВИЧ-1 и активирования врожденной иммунной системы у субъекта.

В одном воплощении в настоящем изобретении предложена комбинация, содержащая а) один или более антиретровирусных агентов и б) N-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамид или его фармацевтически приемлемуюсоль, для использования в лечении инфекции ВИЧ-1 и активировании врожденной иммунной системы у субъекта.

В одном воплощении настоящее изобретение относится к способу лечения инфекции ВИЧ-1 и стимулирования иммунной системы у субъекта, включающему введение субъекту комбинации, содержащей а) один или более антиретровирусных агентов и б) N-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамид или его фармацевтически приемлемую соль.

В одном воплощении в настоящем изобретении предложено применение а) одного или более антиретровирусных агентов и б) N-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарственного средства для лечения инфекции ВИЧ-1 и стимулирования иммунной системы у субъекта.

В одном воплощении в настоящем изобретении предложена комбинация, содержащая а) один или более антиретровирусных агентов и б) N-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамид или его фармацевтически приемлемую соль, для использования в лечении инфекции ВИЧ-1 и стимулировании иммунной системы у субъекта.

В одном воплощении настоящее изобретение относится к способу лечения инфекции ВИЧ-1 и стимулирования врожденной иммунной системы у субъекта, включающему введение субъекту комбинации, содержащей а) один или более антиретровирусных агентов и б) N-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамид или его фармацевтически приемлемую соль.

В одном воплощении в настоящем изобретении предложено применение а) одного или более антиретровирусных агентов и б) N-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарственного средства для лечения инфекции ВИЧ-1 и стимулирования врожденной иммунной системы у субъекта.

В одном воплощении в настоящем изобретении предложена комбинация, содержащая а) один или более антиретровирусных агентов и б) N-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамид или его фармацевтически приемлемую соль, для использования в лечении инфекции ВИЧ-1 и стимулировании врожденной иммунной системы у субъекта.

В одном воплощении настоящее изобретение относится к способу лечения инфекции ВИЧ-1 и выявлению ВИЧ-1-инфицированных клеток у субъекта, включающему введение субъекту комбинации, содержащей а) один или более антиретровирусных агентов и б) N-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамид или его фармацевтически приемлемую соль.

В одном воплощении в настоящем изобретении предложено применение а) одного или более антиретровирусных агентов и б) N-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарственного средства для лечения инфекции ВИЧ-1 и выявления ВИЧ-1-инфицированных клеток у субъекта.

В одном воплощении в настоящем изобретении предложена комбинация, содержащая а) один или более антиретровирусных агентов и б) N-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамид или его фармацевтически приемлемую соль, для использования в лечении инфекции ВИЧ-1 и выявлении ВИЧ-1-инфицированных клеток у субъекта.

В одном воплощении настоящее изобретение относится к способу лечения инфекции ВИЧ-1 и устранения резервуаров ВИЧ-1 у субъекта, включающему введение субъекту комбинации, содержащей а) один или более антиретровирусных агентов и б) N-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамид или его фармацевтически приемлемую соль.

В одном воплощении в настоящем изобретении предложено применение а) одного или более антиретровирусных агентов и б) N-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарственного средства для лечения инфекции ВИЧ-1 и устранения резервуаров ВИЧ-1 у субъекта.

В одном воплощении в настоящем изобретении предложена комбинация, содержащая а) один или более антиретровирусных агентов и б) N-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамид или его фармацевтически приемлемую соль, для использования в лечении инфекции ВИЧ-1 и устранении резервуаров ВИЧ-1 у субъекта.

В одном воплощении настоящее изобретение относится к способу лечения инфекции ВИЧ-1 у субъекта, включающему введение субъекту комбинации, содержащей а) один или более антиретровирусных агентов и б) N-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамид или его фармацевтически приемлемую соль.

В одном воплощении в настоящем изобретении предложено применение а) одного или более антиретровирусных агентов и б) N-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарственного средства для лечения инфекции ВИЧ-1 у субъекта.

В одном воплощении в настоящем изобретении предложена комбинация, содержащая а) один или более антиретровирусных агентов и б) N-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамид или его фармацевтически приемлемую соль, для использования в лечении инфекции ВИЧ-1 у субъекта.

В одном воплощении введение комбинации или лекарственного средства регулирует функцию иммунной системы путем снижения системного воспаления и усиления иммунной активации.

В одном воплощении введение комбинации или лекарственного средства изменяет вызванное ВИЧ разрегулирование иммунной системы путем снижения системного воспаления и усиления иммунной активации.

В одном воплощении иммунная система представляет собой врожденную иммунную систему.

В одном воплощении системное воспаление представляет собой миелоидное и/или моноцитарное воспаление.

В одном воплощении введение комбинации или лекарственного средства модулирует иммунную систему субъекта.

В одном воплощении введение комбинации или лекарственного средства модулирует врожденную иммунную систему субъекта.

В одном воплощении введение комбинации или лекарственного средства стимулирует иммунную систему субъекту.

В одном воплощении введение комбинации или лекарственного средства стимулирует врожденную иммунную систему субъекта.

В одном воплощении введение комбинации или лекарственного средства активирует иммунную систему субъекту.

В одном воплощении введение комбинации или лекарственного средства активирует врожденную иммунную систему субъекта.

В одном воплощении введение комбинации или лекарственного средства выявляет ВИЧ-1-инфицированные клетки у субъекта.

В одном воплощении введение комбинации или лекарственного средства увеличивает количество CD4⁺ Т-клеток по сравнению с введением одного или более антиретровирусных агентов в отдельности.

В одном воплощении введение комбинации или лекарственного средства обращает связанные с ВИЧ-1 дефекты в передаче сигналов CD4⁺ Т-клеток.

В одном воплощении введение комбинации или лекарственного средства обращает связанные с ВИЧ-1 дефекты в передаче сигналов CD4⁺ Т-клеток по сравнению с введением одного или более антиретровирусных агентов в отдельности.

В одном воплощении введение комбинации или лекарственного средства увеличивает количество CD8⁺ Т-клеток по сравнению с введением одного или более антиретровирусных агентов в отдельности.

В одном воплощении введение комбинации или лекарственного средства обращает связанные с ВИЧ-1 дефекты в передаче сигналов CD8⁺ Т-клеток.

В одном воплощении введение комбинации или лекарственного средства обращает связанные с ВИЧ-1 дефекты в передаче сигналов CD8⁺ Т-клеток по сравнению с введением одного или более антиретровирусных агентов в отдельности.

В одном воплощении введение комбинации или лекарственного средства обращает понижающую регуляцию Vpu на клеточные рецепторы.

В одном воплощении введение комбинации или лекарственного средства увеличивает количество NK-клеток по сравнению с введением одного или более антиретровирусных агентов в отдельности.

В одном воплощении введение комбинации или лекарственного средства обращает связанные с ВИЧ-1 дефекты в передаче сигналов NK.

В одном воплощении введение комбинации или лекарственного средства обращает связанные с ВИЧ-1 дефекты в передаче сигналов NK по сравнению с введением одного или более антиретровирусных агентов в отдельности.

В одном воплощении введение комбинации или лекарственного средства обращает понижающую регуляцию Vpu на NK-клетки.

В одном воплощении введение комбинации или лекарственного средства обращает понижающую регуляцию Vpu на NK-клетки по сравнению с введением одного или более антиретровирусных агентов в отдельности.

В одном воплощении введение комбинации или лекарственного средства увеличивает ключевые рецепторы клеточной поверхности для эффективной передачи сигналов NK и дегрануляции.

В одном воплощении введение комбинации или лекарственного средства увеличивает ключевые рецепторы клеточной поверхности, требуемые для эффективной передачи сигналов NK и дегрануляции, по сравнению с введением одного или более антиретровирусных агентов в отдельности.

В одном воплощении введение комбинации или лекарственного средства снижает уровень sCD163 в плазме по сравнению с введением одного или более антиретровирусных агентов в отдельности.

В одном воплощении введение комбинации или лекарственного средства снижает активацию моноцитов и/или макрофагов по сравнению с введением одного или более антиретровирусных агентов в отдельности.

В одном воплощении введение комбинации или лекарственного средства увеличивает уровень IL-21 в плазме по сравнению с введением одного или более антиретровирусных агентов в отдельности.

В одном воплощении введение комбинации или лекарственного средства увеличивает количество клеток Т-хелперов 17 (клетки Th17) по сравнению с введением одного или более антиретровирусных агентов в отдельности.

В одном воплощении введение комбинации или лекарственного средства восстанавливает функцию клеток Th17 по сравнению с введением одного или более антиретровирусных агентов в отдельности.

В одном воплощении введение комбинации или лекарственного средства увеличивает количество фолликулярных хелперных CD4 Т-клеток (клетки Tfh) по сравнению с введением одного или более антиретровирусных агентов в отдельности.

В одном воплощении введение комбинации или лекарственного средства модулирует специфичные к ВИЧ-1 ответы антител.

В одном воплощении введение комбинации или лекарственного средства снижает отрицательную регуляцию экспрессии CD28 на CD4⁺ Т-клетках, инфицированных ВИЧ-1, по сравнению с введением одного или более антиретровирусных агентов в отдельности.

В одном воплощении введение комбинации или лекарственного средства снижает отрицательную регуляцию экспрессии CCR7 на CD4⁺ Т-клетках, инфицированных ВИЧ-1, по сравнению с введением одного или более антиретровирусных агентов в отдельности.

В одном воплощении введение комбинации или лекарственного средства снижает отрицательную регуляцию экспрессии CD80 на макрофагах моноцитарного происхождения, инфицированных ВИЧ-1, по сравнению с введением одного или более антиретровирусных агентов в отдельности.

В одном воплощении введение комбинации или лекарственного средства снижает отрицательную регуляцию экспрессии CD86 на макрофагах моноцитарного происхождения, инфицированных ВИЧ-1, по сравнению с введением одного или более антиретровирусных агентов в отдельности.

В одном воплощении введение комбинации или лекарственного средства усиливает костимулирующие сигналы, необходимые для активации Т-клеток и хоминга, по сравнению с введением одного или более антиретровирусных агентов в отдельности.

В одном воплощении введение комбинации или лекарственного средства усиливает иммунный надзор за ВИЧ-1 по сравнению с введением одного или более антиретровирусных агентов в отдельности.

В одном воплощении введение комбинации или лекарственного средства усиливает иммунный надзор за ВИЧ-1 по сравнению с введением одного или более антиретровирусных агентов в отдельности.

В одном воплощении один или более антиретровирусных агентов включают ненуклеозидный ингибитор обратной транскриптазы (NNRTI).

В одном воплощении один или более антиретровирусных агентов включают нуклеозидный ингибитор обратной транскриптазы (NRTI).

В одном воплощении один или более антиретровирусных агентов включают два

NRTI.

В одном воплощении один или более антиретровирусных агентов включают NNRTI и NRTI.

В одном воплощении один или более антиретровирусных агентов включают NNRTI и два NRTI.

В одном воплощении NNRTI представляет собой эфавиренз.

В одном воплощении NRTI представляет собой эмтрицитабин.

В одном воплощении NRTI представляет собой тенофовира дизопроксила фумарат (тенофовир DF).

В одном воплощении один или более антиретровирусных агентов включают эфавиренз, эмтрицитабин и тенофовир DF (т.е. эфавиренз/эмтрицитабин/тенофовир DF).

В одном воплощении один или более антиретровирусных агентов состоят из эфавиренза, эмтрицитабина и тенофовира DF (эфавиренза/эмтрицитабина/тенофовира DF).

В одном воплощении эфавиренз вводят субъекту в дозировке 600 мг.

В одном воплощении эмтрицитабин вводят субъекту в дозировке 200 мг.

В одном воплощении тенофовир DF вводят субъекту в дозировке 300 мг.

В одном воплощении настоящее изобретение относится к способу регулирования иммунной функции путем снижения системного воспаления и усиления иммунной активации у субъекта, инфицированного ВИЧ-1, включающему введение субъекту N-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли.

В одном воплощении в настоящем изобретении предложено применение N-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарственного средства для регулирования иммунной функции путем снижения системного воспаления и усиления иммунной активации у субъекта, инфицированного ВИЧ-1.

В одном воплощении в настоящем изобретении предложен N-карбамимидоил-3-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамид или его фармацевтически приемлемая соль для использования в регулировании иммунной функции путем снижения системного воспаления и усиления иммунной активации у субъекта, инфицированного ВИЧ-1.

В одном воплощении настоящее изобретение относится к способу изменения вызванного ВИЧ разрегулирования иммунной системы путем снижения системного воспаления и усиления иммунной активации у субъекта, инфицированного ВИЧ-1, включающему введение субъекту М-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли.

В одном воплощении в настоящем изобретении предложено применение N-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарственного средства для изменения вызванного ВИЧ разрегулирования иммунной системы путем снижениясистемного воспаления и усиления иммунной активации у субъекта, инфицированного ВИЧ-1.

В одном воплощении в настоящем изобретении предложен N-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамид или его фармацевтически приемлемая соль для использования в изменении вызванного ВИЧ разрегулирования иммунной системы путем снижения системного воспаления и усиления иммунной активации у субъекта, инфицированного ВИЧ-1. В одном воплощении иммунная система представляет собой врожденную иммунную систему.

В одном воплощении системное воспаление представляет собой миелоидное и/или моноцитарное воспаление.

В одном воплощении настоящее изобретение относится к способу модулирования иммунной системы у субъекта, инфицированного ВИЧ-1, включающему введение субъекту К-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли.

В одном воплощении в настоящем изобретении предложено применение N-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарственного средства для модулирования иммунной системы у субъекта, инфицированного ВИЧ-1.

В одном воплощении в настоящем изобретении предложен N-карбамимидоил-3-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамид или его фармацевтически приемлемая соль для использования в модулировании иммунной системы у субъекта, инфицированного ВИЧ-1.

В одном воплощении настоящее изобретение относится к способу модулирования врожденной иммунной системы у субъекта, инфицированного ВИЧ-1, включающему введение субъекту М-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли.

В одном воплощении в настоящем изобретении предложено применение N-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарственного средства для модулирования врожденной иммунной системы у субъекта, инфицированного ВИЧ-1.

В одном воплощении в настоящем изобретении предложен N-карбамимидоил-3-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамид или его фармацевтически приемлемаясоль для использования в модулировании врожденной иммунной системы у субъекта, инфицированного ВИЧ-1.

В одном воплощении настоящее изобретение относится к способу активации иммунной системы у субъекта, инфицированного ВИЧ-1, включающему введение субъекту N-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли.

В одном воплощении в настоящем изобретении предложено применение N-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарственного средства для активации иммунной системы у субъекта, инфицированного ВИЧ-1.

В одном воплощении в настоящем изобретении предложен М-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамид или его фармацевтически приемлемая соль для использования в активации иммунной системы у субъекта, инфицированного ВИЧ-1.

В одном воплощении настоящее изобретение относится к способу активации врожденной иммунной системы у субъекта, инфицированного ВИЧ-1, включающему введение субъекту N-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли.

В одном воплощении в настоящем изобретении предложено применение N-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарственного средства для активации врожденной иммунной системы у субъекта, инфицированного ВИЧ-1.

В одном воплощении в настоящем изобретении предложен N-карбамимидоил-3-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамид или его фармацевтически приемлемая соль для использования в активации врожденной иммунной системы у субъекта, инфицированного ВИЧ-1.

В одном воплощении настоящее изобретение относится к способу стимулирования иммунной системы у субъекта, инфицированного ВИЧ-1, включающему введение субъекту N-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли.

В одном воплощении в настоящем изобретении предложено применение N-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамида или егофармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарственного средства для стимулирования иммунной системы у субъекта, инфицированного ВИЧ-1.

В одном воплощении в настоящем изобретении предложен N-карбамимидоил-3-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамид или его фармацевтически приемлемая соль для использования в стимулировании иммунной системы у субъекта, инфицированного ВИЧ-1.

В одном воплощении настоящее изобретение относится к способу стимулирования врожденной иммунной системы у субъекта, инфицированного ВИЧ-1, включающему введение субъекту N-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли.

В одном воплощении в настоящем изобретении предложено применение N-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарственного средства для стимулирования врожденной иммунной системы у субъекта, инфицированного ВИЧ-1.

В одном воплощении в настоящем изобретении предложен N-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамид или его фармацевтически приемлемая соль для использования в стимулировании врожденной иммунной системы у субъекта, инфицированного ВИЧ-1.

В одном воплощении в настоящем изобретении предложен способ снижения отрицательной регуляции экспрессии CD28 на CD4⁺ Т-клетках, инфицированных ВИЧ-1 у субъекта, включающий введение М-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли субъекту.

В одном воплощении в настоящем изобретении предложен способ снижения отрицательной регуляции экспрессии CD28 на CD4⁺ Т-клетках, инфицированных ВИЧ-1, включающий введение N-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли в Т-клетки.

В одном воплощении в настоящем изобретении предложено применение N-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли для снижения отрицательной регуляции экспрессии CD28 на CD4⁺ Т-клетках, инфицированных ВИЧ-1.

В одном воплощении в настоящем изобретении предложен N-карбамимидоил-3-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамид или его фармацевтически приемлемаясоль для использования в снижении отрицательной регуляции экспрессии CD28 на CD4⁺ Т-клетках, инфицированных ВИЧ-1.

В одном воплощении эффект N-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли на экспрессию CD28 на CD4⁺ Т-клетках, инфицированных ВИЧ-1, является зависимым от экспрессии Vpu на Т-клетках.

В одном воплощении в настоящем изобретении предложен способ снижения отрицательной регуляции экспрессии CCR7 на CD4⁺ Т-клетках, инфицированных ВИЧ-1, у субъекта, включающий введение N-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли субъекту.

В одном воплощении в настоящем изобретении предложен способ снижения отрицательной регуляции экспрессии CCR7 на CD4⁺ Т-клетках, инфицированных ВИЧ-1, включающий введение N-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли в Т-клетки.

В одном воплощении в настоящем изобретении предложено применение N-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли для снижения отрицательной регуляции экспрессии CCR7 на CD4⁺ Т-клетках, инфицированных ВИЧ-1.

В одном воплощении в настоящем изобретении предложен N-карбамимидоил-3-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамид или его фармацевтически приемлемая соль для использования в снижении отрицательной регуляции экспрессии CCR7 на CD4+Т-клетках, инфицированных ВИЧ-1.

В одном воплощении эффект N-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли на экспрессию CCR7 на CD4⁺ Т-клетках, инфицированных ВИЧ-1, является зависимым от экспрессии Vpu на Т-клетках.

В одном воплощении в настоящем изобретении предложен способ снижения отрицательной регуляции экспрессии CD80 на макрофагах моноцитарного происхождения, инфицированных ВИЧ-1, у субъекта, включающий введение N-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли субъекту.

В одном воплощении в настоящем изобретении предложен способ снижения отрицательной регуляции экспрессии CD80 на макрофагах моноцитарногопроисхождения, инфицированных ВИЧ-1, включающий введение N-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли в макрофаги моноцитарного происхождения.

В одном воплощении в настоящем изобретении предложено применение N-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли для снижения отрицательной регуляции экспрессии CD80 на макрофагах моноцитарного происхождения, инфицированных ВИЧ-1.

В одном воплощении в настоящем изобретении предложен N-карбамимидоил-3-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамид или его фармацевтически приемлемая соль для использования в снижении отрицательной регуляции экспрессии CD80 на макрофагах моноцитарного происхождения, инфицированных ВИЧ-1.

В одном воплощении эффект N-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли на экспрессию CD80 на макрофагах моноцитарного происхождения, инфицированных ВИЧ-1, является зависимым от экспрессии Vpu на макрофагах моноцитарного происхождения.

В одном воплощении в настоящем изобретении предложен способ снижения отрицательной регуляции экспрессии CD86 на макрофагах моноцитарного происхождения, инфицированных ВИЧ-1, у субъекта, включающий введение N-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли субъекту.

В одном воплощении в настоящем изобретении предложен способ снижения отрицательной регуляции экспрессии CD86 на макрофагах моноцитарного происхождения, инфицированных ВИЧ-1, включающий введение N-карбамимидоил-3-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли в макрофаги моноцитарного происхождения.

В одном воплощении в настоящем изобретении предложено применение N-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли для снижения отрицательной регуляции экспрессии CD86 на макрофагах моноцитарного происхождения, инфицированных ВИЧ-1.

В одном воплощении в настоящем изобретении предложен N-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамид или его фармацевтически приемлемая соль для использования в снижении отрицательной регуляции экспрессии CD86 на макрофагах моноцитарного происхождения, инфицированных ВИЧ-1.

В одном воплощении эффект N-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли на экспрессию CD86 на макрофагах моноцитарного происхождения, инфицированных ВИЧ-1, является независимым от экспрессии Vpu на макрофагах моноцитарного происхождения.

В одном воплощении в настоящем изобретении предложен способ усиления костимулирующих сигналов, необходимых для активации Т-клеток и хоминга, у субъекта, инфицированного ВИЧ-1, включающий введение М-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли субъекту.

В одном воплощении в настоящем изобретении предложено применение N-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли для усиления костимулирующих сигналов, необходимых для активации Т-клеток и хоминга у субъекта, инфицированного ВИЧ-1.

В одном воплощении в настоящем изобретении предложен N-карбамимидоил-3-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамид или его фармацевтически приемлемая соль для использования в усилении костимулирующих сигналов, необходимых для активации Т-клеток и хоминга у субъекта, инфицированного ВИЧ-1.

В одном воплощении в настоящем изобретении предложен способ усиления иммунного надзора за ВИЧ-1 у субъекта, включающий введение N-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли субъекту.

В одном воплощении в настоящем изобретении предложено применение N-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли для усиления иммунного надзора за ВИЧ-1.

В одном воплощении в настоящем изобретении предложен N-карбамимидоил-3-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамид или его фармацевтически приемлемая соль для использования в усилении иммунного надзора за ВИЧ-1.

В одном воплощении настоящее изобретение относится к способу выявления ВИЧ-1-инфицированных клеток у субъекта, включающий введение субъекту N-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли.

В одном воплощении в настоящем изобретении предложено применение N-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамида или егофармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарственного средства для выявления ВИЧ-1-инфицированных клеток у субъекта.

В одном воплощении в настоящем изобретении предложен N-карбамимидоил-3-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамид или его фармацевтически приемлемая соль для использования в выявлении ВИЧ-1-инфицированных клеток у субъекта.

В одном воплощении настоящее изобретение относится к способу устранения резервуаров ВИЧ-1 у субъекта, включающий введение субъекту N-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли.

В одном воплощении в настоящем изобретении предложено применение N-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарственного средства для устранения резервуаров ВИЧ-1 у субъекта.

В одном воплощении в настоящем изобретении предложен N-карбамимидоил-3-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамид или его фармацевтически приемлемая соль для использования в устранении резервуаров ВИЧ-1 у субъекта.

В одном воплощении N-карбамимидоил-5-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-2-нафтамид или его фармацевтически приемлемую соль вводят субъекту путем, выбранным из перорального, назального, внутривенного, внутрибрюшинного, ингаляционного и местного.

В одном воплощении N-карбамимидоил-5-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-2-нафтамид или его фармацевтически приемлемую соль вводят субъекту перорально.

В одном воплощении N-карбамимидоил-5-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-2-нафтамид или его фармацевтически приемлемую соль вводят субъекту ежесуточно.

В одном воплощении N-карбамимидоил-5-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-2-нафтамид или его фармацевтически приемлемую соль вводят субъекту дважды в сутки.

В одном воплощении N-карбамимидоил-5-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-2-нафтамид или его фармацевтически приемлемую соль вводят субъекту в дозировке от примерно 100 мг до примерно 600 мг.

В одном воплощении N-карбамимидоил-5-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-2-нафтамид или его фармацевтически приемлемую соль вводят субъекту перорально и в дозировке примерно 600 мг.

В одном воплощении N-карбамимидоил-5-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-2-нафтамид или его фармацевтически приемлемую соль вводят субъекту перорально и в дозировке примерно 200 мг.

В одном воплощении N-карбамимидоил-5-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-2-нафтамид или его фармацевтически приемлемую соль вводят субъекту перорально и в дозировке примерно 100 мг.

В одном воплощении N-карбамимидоил-5-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-2-нафтамид или его фармацевтически приемлемую соль вводят субъекту перорально и ежесуточно.

В одном воплощении N-карбамимидоил-5-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-2-нафтамид или его фармацевтически приемлемую соль вводят субъекту перорально и дважды в сутки.

В одном воплощении N-карбамимидоил-5-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-2-нафтамид или его фармацевтически приемлемую соль вводят перорально, один раз в сутки в дозировке примерно 200 мг.

В одном воплощении N-карбамимидоил-5-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-2-нафтамид или его фармацевтически приемлемую соль вводят перорально, дважды в сутки в дозировке примерно 200 мг.

В одном воплощении N-карбамимидоил-5-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-2-нафтамид или его фармацевтически приемлемую соль вводят перорально, один раз в сутки в дозировке примерно 100 мг.

В одном воплощении N-карбамимидоил-5-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-2-нафтамид или его фармацевтически приемлемую соль вводят перорально, дважды в сутки в дозировке примерно 100 мг.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ

Фиг. 1 - Групповое среднее изменение по сравнению с исходным уровнем активированных CD4⁺ Т-клеток (CD4⁺/HLA-DR⁺/CD38⁺) в течение 12-недельного периода лечения 200 мг BIT225 QD (кружки) или плацебо (квадраты) и ART. Отмечалась статистически значимая (Р<0,01, линейная модель) устойчивая задержка снижения количества CD4⁺активированных Т-клеток в период лечения BIT225 по сравнению с плацебо.

Фиг. 2 - Групповое среднее изменение количества активированных CD8⁺клеток (CD8⁺/HLA-DR⁺/CD38⁺) по сравнению с исходным уровнем в течение 12 недель лечения200 мг BIT225 QD (кружки) или лечения плацебо (квадраты) с ART. Линейная модель изменения по сравнению с исходным уровнем в зависимости от суток и группы лечения показала, что после контролирования суток лечения в группе BIT225 наблюдалось меньшее снижение числа активированных CD8⁺ Т-клеток в течение периода лечения BIT225: оцененная средняя разница 85 клеток/ мл (±29, SEM), что было статистически значимым (Р<0,01).

Фиг. 3 - Среднее групповое изменение числа NK-клеток (CD8⁺/HLA-DR⁺/CD38⁺) по сравнению с исходным уровнем в течение 12 недель лечения 200 мг BIT225 QD (кружки) или лечения плацебо (квадраты) с ART. Линейная модель изменения от исходного уровня в зависимости от суток и группы лечения показала, что после контролирования суток лечения в группе BIT225 наблюдалось меньшее снижение количества NK-клеток в течение периода лечения BIT225: оцененная средняя разница 71 клетка/мл (±23, SEM), что было статистически значимым (Р<0,01).

Фиг. 4 - Динамика среднего изменения растворимого CD 163 (sCD163) нг/мл по сравнению с исходным уровнем в течение 12 недель лечения ART плюс 200 мг BIT225 QD (кружки) или плацебо (ромбы). Двухфакторный ANOVA для BIT225 против плацебо, с контролированием суток лечения, был выполнен с использованием статистического программного обеспечения R путем подгонки линейной модели: β0+β1.day+β1.I_Rx., где I_Rx принимает значения 0 (для лечения BIT225) или 1 (для плацебо). Оценка: β1=208±99 (SE) нг/мл указывает на статистически большее общее снижение sCD163 для группы, получавшей лечение BIT225 (Р=0,036). Разница между плацебо и контролем на сутки 7 статистически значима по Т-критерию Уэлча (Р=0,045).

Фиг. 5 - Динамика продуцирования IL-21 в плазме (нг/мл) в течение 12 недель лечения 200 мг BIT225 QD (треугольники) или плацебо (кружки) и ART. Анализ ANOVA показал, что разница между группами BIT225 и плацебо в течение первых 3 недель была статистически значимой (Р=0,02).

Фиг. 6 - Экспрессия CD28 в плазматической мембране на CD4+Т-клетках, обработанных 3 мкМ BIT225, через 72 часа после инфицирования HIV-1NL4-3 или мутантами, дефицитными по Vpu, Nef или по обоим Vpu и Nef. *** означает Р<0,001; n/s означает Р>0,05.

Фиг. 7 - Экспрессия CD80 в плазматической мембране на MDM, обработанных 3 мкМ BIT225, через 72 часа после инфицирования HIV-1NL4-3 или мутантами, дефицитными по Vpu, Nef или по обоим Vpu и Nef. ** означает Р<0,01.

Фиг.8 - Экспрессия CD86 в плазматической мембране на MDM, обработанных 3 мкМ ВГТ225, через 72 часа после инфицирования HIV-1NL4-3 или мутантами, дефицитными по Vpu, Nef или по обоим Vpu и Nef. *** означает Р<0,001.

Фиг. 9 - Экспрессия CCR7 в плазматической мембране на CD4⁺ Т-клетках, обработанных 3 мкМ BIT225, через 72 часа после инфицирования HIV-1NL4-3 или мутантами, дефицитными по Vpu, Nef или обоим Vpu и Nef. ** означает Р<0,01; * обозначает Р<0,05; n/s означает Р>0,05.

ОПРЕДЕЛЕНИЯ

В описании и формуле настоящего изобретения использована следующая терминология в соответствии с определениями, изложенными ниже. Также следует понимать, что используемая здесь терминология предназначена только для целей описания конкретных воплощений изобретения и не предназначена для ограничения. Если не указано иное, все технические и научные термины, используемые здесь, имеют то же значение, которое обычно понимается специалистом в области техники, к которой относится данное изобретение.

В контексте изобретения термин «субъект» включает любого человека или животного, отличного от человека. Термин «животное, отличное от человека» включает всех позвоночных, например млекопитающих и немлекопитающих, таких как нечеловекообразные приматы, лошади, коровы, собаки и т.д.

В контексте настоящего изобретения слова «содержать», «содержащий» и т.п.должны толковаться в их включающем, а не в исключающем смысле, то есть в смысле «включая, но не ограничиваясь».

Термины «предпочтительный» и «предпочтительно» относятся к воплощениям изобретения, которые могут предоставлять определенные преимущества при определенных обстоятельствах. Однако другие воплощения также могут быть предпочтительными при тех же или других обстоятельствах. Кроме того, перечисление одного или нескольких предпочтительных воплощений не означает, что другие воплощения не являются полезными, и не предназначено для исключения других воплощений из объема изобретения.

За исключением рабочих примеров или где указано иное, все числа, выражающие количества ингредиентов или условия реакции, используемые здесь, следует понимать как варьируемые во всех случаях термином «примерно».

Указание числового диапазона с использованием конечных точек включает все числа, входящие в этот диапазон (например, от 1 до 5 включает 1, 1,5, 2, 2,75, 3, 3,80, 4, 5 и т.д.).

Используемый здесь термин «введение комбинации» означает введение двух или более агентов субъекту, представляющему интерес, как часть одной терапевтической схемы. Введение может быть либо одновременным, либо последовательным, т.е. введение одного агента с последующим введением второго (и/или третьего и т.д.) в более позднее время, при условии что вводимые агенты сосуществуют в субъекте, которого лечат, или по меньшей мере один агент будет иметь возможность воздействовать на те же ткани-мишени других агентов, в то время как указанные ткани-мишени все еще находятся под влиянием указанных других агентов. В определенном воплощении вводимые агенты могут быть включены в одну фармацевтическую композицию и введены вместе. В определенном воплощении агенты вводят одновременно, в том числе отдельными путями. В определенном воплощении один или более агентов вводят непрерывно, в то время как другие агенты вводят только с заранее определенными интервалами (такими как одна большая доза или два раза в неделю в меньших дозах и т.д.).

Настоящее изобретение включает в своем объеме фармацевтически приемлемые соли. Агенты по настоящему изобретению могут в некоторых случаях образовывать соли, которые также входят в объем настоящего изобретения. Термин «соль(и)», используемый здесь, означает кислые и/или основные соли, образованные с неорганическими и/или органическими кислотами и основаниями. Цвиттер-ионы (внутренние соли) включены в термин «соль(и)», как он использован здесь (и могут быть образованы, например, когда заместители R содержат кислотную группировку, такую как карбоксильная группа). Также в данное описание включены соли четвертичного аммония, такие как соли алкиламмония. Фармацевтически приемлемые (т.е. нетоксичные, физиологически приемлемые) соли являются предпочтительными, хотя могут быть использованы и другие соли, например, на стадиях выделения или очистки, которые можно использовать во время получения. Соли агентов могут быть образованы, например, путем взаимодействия соединения с количеством кислоты или основания, таким как эквивалентное количество, в среде, такой как среда, в которой соль осаждается, или в водной среде с последующей лиофилизацией.

Примеры солей присоединения кислоты включают ацетаты (например, образованные с уксусной кислотой или тригалогенуксусной кислотой, например трифторуксусной кислотой), адипаты, альгинаты, аскорбаты, аспартаты, бензоаты, бензолсульфонаты, бисульфаты, бораты, бутираты, цитраты, камфораты, камфорсульфонаты, циклопентанпропионаты, диглюконаты, додецилсульфаты, этансульфонаты, фумараты, глюкогептаноаты, глицерофосфаты, гемисульфаты, гептаноаты, гексаноаты, гидрохлориды, гидробромиды, гидройодиды, 2-гидроксиэтансульфонаты, лактаты, малеаты, метансульфонаты, 2-нафталинсульфонаты, никотинаты, нитраты, оксалаты, пектинаты, персульфаты, 3-фенилпропионаты, фосфаты, пикраты, пивалаты, пропионаты, салицилаты, сукцинаты, сульфаты (например, образованные с серной кислотой), сульфонаты (такие, как упомянутые здесь), тартраты, тиоцианаты, толуолсульфонаты, ундеканоаты и т.п.

Примеры основных солей (образованных, например, когда заместитель содержит кислотную группировку, такую как карбоксильная группа) включают соли аммония, соли щелочных металлов, такие как соли натрия, лития и калия, соли щелочноземельных металлов, такие как соли кальция и магния, соли с органическими основаниями (например органическими аминами), такими как бензатины, дициклогексиламины, гидрабамины, N-метил-D-глюкамины, N-метил-D-глюкамиды, трет-бутиламины, и соли с аминокислотами, такими как аргинин, лизин и тому подобное. Основные азотсодержащие группы могут быть кватернизованы такими агентами, как низшие алкилгалогениды (например, метил-, этил-, пропил- и бутилхлориды, -бромиды и -йодиды), диалкилсульфаты (например, диметил-, диэтил-, дибутил- и диамилсульфаты), длинноцепочечные галогениды (например, децил-, лаурил-, миристил- и стеарилхлориды, -бромиды и -йодиды), ар алкилгалогениды (например, бензил- и фенетилбромиды) и другие.

Сольваты агентов по изобретению также предусмотрены здесь.

Используемый здесь термин «лечить» или «лечение» включает обращение, уменьшение или купирование симптомов, клинических признаков и лежащей в основе патологии состояния с целью улучшения или стабилизации состояния субъекта. Как используют здесь и как хорошо понимают в данной области техники, «лечение» представляет собой подход для получения полезных или желаемых результатов, включая клинические результаты. Благоприятные или желаемые клинические результаты могут включать, помимо прочего, облегчение или улучшение одного или более симптомов илисостояний, уменьшение распространенности заболевания, стабилизацию (т.е. не ухудшение) состояния заболевания, предотвращение распространения заболевания, отсрочку или замедление прогрессирования заболевания, улучшение или облегчение болезненного состояния и ремиссию (частичную или полную), определяемую или неопределяемую. «Лечение» также может означать увеличение выживаемости по сравнению с ожидаемой выживаемостью, если лечение не проводится.

В настоящем изобретении дополнительно предложены фармацевтические композиции, содержащие агенты по настоящему изобретению в качестве активных ингредиентов вместе с фармацевтически приемлемыми добавками/ эксципиентами/адъювантами/носителями.

Агенты по настоящему изобретению могут быть использованы в фармацевтической композиции, например, в сочетании с фармацевтически приемлемым носителем, для введения пациенту. Такая композиция может также содержать разбавители, наполнители, соли, буферы, стабилизаторы, солюбилизаторы и другие вещества, хорошо известные в данной области техники. Термин «фармацевтически приемлемый» означает нетоксичное вещество, которое не влияет на эффективность биологической активности активного(ых) ингредиента(ов). Характеристики носителя будут зависеть от пути введения. Такие дополнительные факторы и/или агенты могут быть включены в фармацевтическую композицию для получения синергетического эффекта с агентами по изобретению или для сведения к минимуму нежелательных явлений, вызываемых соединением по изобретению.

Фармацевтические композиции по изобретению могут быть в форме липосом или мицелл, в которых агенты по настоящему изобретению объединены, помимо других фармацевтически приемлемых носителей, с амфипатическими агентами, такими как липиды, которые существуют в агрегированной форме в виде мицелл, нерастворимых монослоев, жидких кристаллов или пластинчатых слоев в водном растворе. Подходящие липиды для липосомальной композиции включают, без ограничения, моноглицериды, диглицериды, сульфатиды, лизолецитин, фосфолипиды, сапонины, желчные кислоты и т.п.Приготовление таких липосомальных композиций находится в пределах компетенции специалиста в данной области техники, как описано, например, в патентах США No. №4235871, 4501728, 4837028 и 4737323, все из которых включены в данное описание посредством ссылки.

Композиция может быть введена различными путями, в том числе перорально, назально, трансбуккально, сублингвально, внутривенно, через слизистую оболочку, парентерально, путем ингаляции, спрея, чрескожно, подкожно, внутриоболочечно, местно или ректально, и может быть приготовлена в соответствии со способами, известными в данной области техники.

Термин «субъект с инфекцией ВИЧ-1», «субъект, инфицированный ВИЧ-1», «пациент с инфекцией ВИЧ-1» или «пациент, инфицированный ВИЧ-1», используемый здесь, означает любого субъекта, имеющего инфекцию ВИЧ-1, и включает ранее не получавших лечение субъектов или пациентов и ранее получавших лечение пациентов, имеющих инфекцию ВИЧ-1.

Термин «ранее не получавший лечение субъект» или «ранее не получавший лечение пациент», используемый здесь, означает субъектов или пациентов, имеющих ВИЧ-1, которые никогда не лечились какими-либо антиретровирусными агентами или каким-либо интерфероном.

Используемый здесь термин «получавшие лечение» субъекты или пациенты означает тех субъектов или пациентов, имеющих ВИЧ-1, которые начали какую-либо форму терапии против ВИЧ-1.

Используемый здесь термин «антиретровирусный агент» означает любой агент, который используют для лечения инфекционного заболевания, вызванного вирусом. Подходящие противовирусные средства для использования в лечении ВИЧ-1 включают, без ограничения, ингибиторы обратной транскриптазы, такие как нуклеозидные ингибиторы обратной транскриптазы и ненуклеозидные ингибиторы обратной транскриптазы, ингибиторы протеазы и ингибиторы слияния.

Используемые здесь термины «нуклеозидный ингибитор обратной транскриптазы» и «NRTI» означают нуклеозиды и нуклеотиды и их аналоги, которые ингибируют активность обратной транскриптазы ВИЧ-1, фермента, который катализирует превращение вирусной геномной РНК ВИЧ-1 в провирусную ДНК ВИЧ-1.

Используемые здесь термины «ненуклеозидный ингибитор обратной транскриптазы» и «NNRTI» означают ненуклеозиды, которые ингибируют активность обратной транскриптазы ВИЧ-1.

Используемые здесь термины «ингибитор протеазы» и «Р1» означают ингибиторы протеазы ВИЧ-1, фермента, необходимого для протеолитического расщепления предшественников вирусных полипротеинов на отдельные функциональные белки, обнаруживаемые в инфекционном ВИЧ-1. Ингибиторы протеазы ВИЧ-1 включают соединения, имеющие пептидомиметическую структуру, высокую молекулярную массу (7600 дальтон) и существенный пептидный характер, а также непептидные ингибиторы протеазы.

Термин «ингибитор слияния», используемый здесь, означает агенты, которые блокируют проникновение вируса ВИЧ-1 в клетки человека.

Термин «регулирование функции иммунной системы» означает изменение реакции иммунной системы организма на инфекцию ВИЧ-1.

Термин «снижение системного воспаления» означает уменьшение вызванного ВИЧ-1 воспаления в организме до желаемого уровня.

Термин «усиление иммунной активации» означает улучшение способности иммунной системы организма отвечать на инфекцию ВИЧ-1.

Термин «вызванное ВИЧ разрегулирование иммунной системы» означает неблагоприятные изменения, вызываемые в иммунной системе вирусом ВИЧ-1 для предотвращения формирования соответствующего ответа иммунной системы.

Термин «выявление ВИЧ-1-инфицированных клеток», используемый здесь, означает обнаружение клеток, инфицированных ВИЧ-1, для того чтобы они могли быть подвергнуты воздействию иммунной системы.

Термины «модулирование», «модуляция» или «модулировать», используемые здесь, означают изменение до желаемого уровня.

Термины «активирование», «активация» или «активировать», используемые здесь, означают индукцию соответствующего ответа.

Термины «стимулирование», «стимуляция» или «стимулировать», используемые здесь, означают усиление активации или повышение активности до желаемого уровня.

ПРЕДПОЧТИТЕЛЬНЫЕ ВОПЛОЩЕНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Хотя изобретение описано со ссылкой на некоторые воплощения, подробно описанные здесь, другие воплощения могут обеспечить такие же или подобные результаты. Варианты и модификации изобретения будут очевидны специалистам в данной области техники, и изобретение предназначено охватывать все такие модификации и эквиваленты.

В настоящем изобретении используют комбинацию BIT225 с антиретровирусными агентами в лечении инфекции ВИЧ-1 у субъекта.

Настоящее изобретение далее описано с использованием следующих неограничивающих примеров.

ПРИМЕР 1 ПОЛУЧЕНИЕ BIT225

Смесь 5-бром-2-нафталинкарбоновой кислоты (2,12 г, 8,44 ммоль), 1-метил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиразола (1,84 г, 8,86 ммоль) и тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (502 мг, 0,435 ммоль) в круглодонной колбе на 250 мл вакуумировали и продували азотом (в трех циклах). К этой смеси через шприц добавляли ацетонитрил (40 мл) и 2М водный раствор карбоната натрия (10 мл) и смесь кипятили с обратным холодильником в атмосфере азота в течение 22 часов. Реакционную смесь оставляли охлаждаться, затем добавляли 1М водный раствор соляной кислоты (30 мл) и затем экстрагировали этилацетатом (3×50 мл). Объединенные органические слои сушили (MgSO₄), фильтровали и концентрировали в вакууме с получением неочищенного продукта (2,98 г после сушки на воздухе). Это неочищенное вещество растворяли в горячем этаноле (150 мл) и фильтровали в горячем состоянии для удаления желтой примеси (120 мг). Фильтрат концентрировали в вакууме и остаток перекристаллизовывали из дихлорметана (30 мл) с получением 5-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-2-нафталинкарбоновой кислоты в виде белого твердого вещества (724 мг, 34%). Вторую порцию 5-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-2-нафталинкарбоновой кислоты (527 мг, 25%) получили из концентрированных маточных растворов путем перекристаллизации из дихлорметана (20 мл).

Оксалилхлорид (1,1 мл, 13 ммоль) добавляли к раствору 5-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-2-нафталинкарбоновой кислоты (1,19 г, 4,71 ммоль) в безводном дихлорметане (200 мл (который добавляли порциями во время реакции до растворения)), содержащем диметилформамид (2 капли), в атмосфере азота и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4,25 часа. Затем реакционную смесь нагревали в течение 1 часа при 40°С, а затем концентрировали при пониженном давлении. Полученный неочищенный хлорангидрид суспендировали в безводном тетрагидрофуране (50 мл) и эту смесь добавляли по каплям к раствору гидрохлорида гуанидина (2,09 г, 21,9 ммоль) в 2М водном растворе гидроксида натрия (15 мл, 30 ммоль), затем реакционную смесь перемешивали в течение 30 минут. Органическую фазу отделяли и водную фазу экстрагировали хлороформом (3×30 мл), а затем этилацетатом (3×30 мл). Объединенные органические экстракты промывали последовательно 1М водным раствором гидроксида натрия (60 мл) и водой (40 мл), затем сушили (Na₂SO₄) и концентрировали в вакууме сполучением стеклообразного твердого вещества (1,45 г после сушки в высоком вакууме). Это твердое вещество растворяли в дихлорметане, который затем медленно испарялся с получением BIT225 в виде желтого твердого вещества (1,15 г, 83%).

ПРИМЕР 2 СОВМЕСТНОЕ ВВЕДЕНИЕ BIT225 И ART У ПАЦИЕНТОВ С ИНФЕКЦИЕЙ ВИЧ-1

У пациентов с ВИЧ-1, ранее не получавших лечения, было проведено многоцентровое рандомизированное, плацебо-контролируемое, двойное слепое исследование, Фаза 2, с использованием BIT225 в комбинации с ART (Атрипла -эфавиренз/эмтрицитабин/тенофовир DF). Пациенты были рандомизированы на две группы в соотношении 2:1, где одна группа получала BIT225 (100 мг QD 6 пациентов; плацебо 3 пациента) и одна группа получала BIT225 (200 мг QD 18 пациентов; плацебо 9 пациентов), всего в исследовании приняли участие 36 пациентов. Группа 100 мг BIT225 была сначала включена для подробных фармакокинетических анализов из-за ограничений количества крови, которое можно было взять в моменты времени, совпадающие с анализами снижения вирусной нагрузки, которые были ограничены группой 200 мг. Все субъекты получали стандартную дозу ART в дополнение к 12-недельному курсу лечения BIT225 или плацебо. По завершении исследования пациенты продолжали получать ART в соответствии со стандартными протоколами лечения. В исследование были включены ВИЧ-1-инфицированные мужчины и женщины в возрасте от 18 до 65 лет включительно, ранее не получавшие ART. Индивидуумы имели РНК ВИЧ-1 в количестве более 5000 копий/мл и число CD4⁺ Т-клеток более 100 клеток/мм³.

Данное исследование было зарегистрировано в Австралийско-Новозеландском реестре клинических испытаний (ANZCTR)), UTN:U1111-1191-2194.

Данное исследование было одобрено Институциональным наблюдательным советом медицинского факультета Университета Чулалонгкорн, Бангкок и Комитетом по этике исследований медицинского факультета Чиангмайского университета, Чиангмай, Таиланд. Иссследование проводили в двух центрах Таиланда: Исследовательском сотрудничестве по ВИЧ-инфекции, Нидерландах, Австралии и Таиланде (HIV-NAT), Бангкок, и в больнице Махараджа Накорна в Чиангмае, Чиангмай, Таиланд. Исследование проводили в соответствии с Руководством Е6 Международного совета по гармонизации надлежащей клинической практики (ЮН GCP) и Хельсинкской декларацией (1964 г. с поправками 2008 г.). Все участники дали письменное информированное согласие до начала исследования. Информация о пациенте анонимна.

Было включено две группы лечения. Первая группа получала капсулу 100 мг BIT225 или плацебо QD с ART в течение 12 недель. Группа 2 получала две капсулы по 100 мг BIT225 (200 мг BIT225) или плацебо QD с ART. ART представляла собой 1 комбинированную таблетку Атрипла с фиксированной дозой.

Задача исследования состояла в том, чтобы оценить дополнительное влияние BIT225 на ART при лечении ВИЧ-1-инфицированных субъектов. Одна из задач заключалась в определении эффективности 12-недельного лечения BIT225 у ВИЧ-инфицированных субъектов, получающих ART, путем измерения снижения вирусной нагрузки в плазме и моделирования распада ВИЧ-1. Еще одна задача заключалась в определении безопасности и переносимости BIT225 QD, вводимого в течение 12 недель, у ВИЧ-1-инфицированных субъектов, получающих ART. Другие задачи исследования заключались в том, чтобы определить, влияет ли 12-недельное лечение BIT225 в дополнение к ART на уровни растворимого CD163 (sCD1263), основного биомаркера иммунной активации моноцитов и макрофагов, и оценить фармакокинетику (РК) BIT225 QD, вводимого в течение 12 недель в комбинации с ART, у субъектов, инфицированных ВИЧ-1.

Безопасность экспериментального лечения оценивали путем мониторинга нежелательных явлений, основных показателей жизнедеятельности, параметров ЭКГ, клинических лабораторных тестов (гематология, клиническая химия, свертываемость и анализ мочи) и физикальных обследований.

Образцы крови собирали в группе BIT225 100 мг для фармакокинетического анализа BIT225 и ART вплоть до 24 и 96 часов после введения дозы в Сутки 1 и Неделю 12, соответственно. Образцы крови брали через равные промежутки времени в течение всего периода лечения у субъектов во всех группах для контроля за соблюдением режима лечения. Образцы плазмы анализировали валидированными методами ЖХ/МС/МС, специфичными для определения BIT225 и ART.

Вирусную нагрузку ВИЧ-1 в плазме определяли в режиме реального времени с использованием одобренной в настоящее время версии Roche СОВ AS TaqMan HIV-1 (Roche Diagnostics).

Анализы на клеточные популяции (Т-клетки и NK-клетки) проводили в режиме реального времени методом проточной цитометрии (CD4⁺, CD8⁺, CD38⁺ и HLA-DR⁺ для Т-клеток, и CD16⁺, CD45⁺ и CD56⁺ для NK-клеток). Анализы ELISA проводили для цитокинов, родственных sCD163 и Тh17. Маркеры активации иммунитета измеряли спомощью проточной цитометрии в режиме реального времени наряду с подсчетом CD4⁺, CD8⁺ и CD14⁺ в лаборатории HIV-NAT, Бангкок, Таиланд.

Маркер активации макрофагов и моноцитов sCD163 измеряли в плазме с помощью Macro163TM ELISA (IQ Products, Гронинген, Нидерланды).

Клетки Th17 регулируют другие иммунные клетки, особенно нейтрофилы и макрофаги, секретируя различные цитокины в ответ на патогены. Образцы плазмы анализировали для определения уровня цитокинов, родственных Th17 (IL-21, IFN-γ, IL-1β, IL-6, IL 10, IL-17A, IL-17E/IL-25, IL-17F, IL -22 и TNF-α) в течение 12-недельного периода лечения с использованием электрохемилюминесцентного MSD U-Plex Biomarker Group Th17 (Human Combo 2) Human Multiplex Assay (MesoScaleDiscovery, MD, USA).

Уровень РНК ВИЧ-1 в плазме снижался аналогичным образом после начала лечения ART и 200 мг BIT225 QD или плацебо QD. Профили снижения в группах BIT225 и плацебо были сходными в течение 12 недель исследуемого лечения (данные не показаны) и аналогичны снижению, зарегистрированному только для ART. Анализ РНК ВИЧ-1 в плазме не различает, из какого типа клеток был высвобожден вирус/вирусная РНК и является ли вирус инфекционным. Следовательно, количественный вклад репликации ВИЧ-1 в этих клетках в обнаруживаемую вирусную нагрузку в плазме не может быть измерен стандартными методами. Продолжаются исследования для оценки влияния на репликацию и продукцию инфекционного ВИЧ-1 в различных клеточных популяциях.

Выявлены множественные профили иммунных клеток, не характерные для ART, которые указывают на то, что лечение 200 мг BIT225 QD имело уникальный противовирусный и иммуномодулирующий эффект по сравнению с ART и плацебо QD. Полагают, что эти различия связаны с влиянием BIT225 на репликацию вируса в миелоидных клетках и лимфоцитах, которые, по-видимому, временно изменили распознавание и функцию врожденного иммунитета в течение 12 недель терапии (Фиг. 1 и Фиг. 2). Данные об иммунных клетках, представленные для группы плацебо, типичны для данных, представленных для различных схем ART, включая Атрипла. На Фиг. 1 количество активированных CD4⁺ Т-клеток в группе плацебо снижается в те же сроки и в той же величине, что и вирусная нагрузка в плазме в группе плацебо. Этот профиль распада активированных CD4⁺ Т-клеток, как полагают, связан со снижением праймирования активированных CD4⁺ Т-клеток из-за ART-индуцированного паденияпродукции вириона ВИЧ-1 и связанным с этим снижением презентации вирусных антигенов или инфицированных вирусом клеток иммунной системе. Напротив, количество активированных клеток CD4⁺ в группе 100 (данные не показаны) и 200 мг BIT225 оставалось повышенным до примерно 50 суток, а затем снизилось. Этот эффект может быть связан с изменением экспрессии или деградацией клеточных/вирусных факторов, которые участвуют в маскировке зараженных вирусом клеток от иммунной системы хозяина с помощью Vpu-опосредованных механизмов.

Данные на Фиг. 2 показывают немедленное быстрое снижение CD8⁺ Т-клеток после начала ART в группе плацебо. Снижение также наблюдается в группе BIT225, но его начало задерживается на 4-7 суток. В течение 12-недельного периода лечения в группе BIT225 было больше активированных CD8⁺ Т-клеток, чем в группе плацебо, в среднем на 85 клеток/мл (±29; SEM; Р<0,01). Эти оценки группового различия были получены с помощью двухфакторной линейной модели (факторы: день измерения и группа).

Данные на Фиг. 3 показывают, что количество NK-клеток быстро увеличивалось и достигало пика в течение 24-48 часов после начала лечения BIT225 и ART, в отличие от немедленного снижения в группе ART плюс плацебо. В течение 12-недельного периода лечения количество NK-клеток значительно увеличилось в группе BIT225 по сравнению с плацебо (71±23 клеток/мл; Р<0,01; двухфакторная линейная модель). Общее снижение числа NK-клеток отражает CD8⁺ Т-клетки, и pVL снижается. Важно то, что количество NK-клеток остается выше во время лечения BIT225, означая что связанные с ВИЧ-1 дефекты в передаче сигналов NK могут быть по меньшей мере частично устранены лечением BIT225.

Выработка sCD163 в течение 12 недель лечения была значительно снижена в группе BIT225 по сравнению с группой, получавшей только ART (Фиг. 4).

Чтобы определить, влияет ли лечение BIT225 на уровни или функцию клеток Th17, в течение 12-недельного периода лечения исследовали несколько цитокинов, связанных с иммунной функцией Th17.

С помощью ANOVA было показано статистически значимое увеличение уровней IL-21 в группе BIT225 в течение первых 3 недель лечения (Фиг. 5). Уровни IL-21 снизились после первых трех недель до уровней, аналогичных группе плацебо и уровням до лечения. IL-21 может продуцироваться фолликулярными хелперными CD4 Т-клетками (Tfh), Th17 и NK-клетками, и этот анализ не позволяет определить продукцию IL-21 каждой из этих популяций иммунных клеток.

В группе BIT225 среднее значение IFN-γ, активатора макрофагов и индуктора экспрессии МНС класса 2, имело временный всплеск на Сутки 14, прежде чем вернуться к аналогичным уровням, обнаруженным до лечения. Этот ответ был выявлен у 16 из 18 субъектов в группе BIT225 (данные не показаны). Незначительные колебания уровней IFN-γ в группе плацебо наблюдались у 7 из 9 субъектов, принимавших плацебо, в течение 12-недельного периода лечения (данные не показаны).

Наиболее часто наблюдаемым ответом на уровень IL-6 в плазме был временный всплеск в первые 3 недели лечения у 8 из 18 субъектов, принимавших BIT225, по сравнению с 1 из 9 субъектов, принимавших плацебо. Ответ IL-6 был снижен через 3 недели в группе BIT225, но оставался выше, чем у плацебо, когда данные были рассчитаны в виде изменения от исходного уровня (Log₁₀) (данные не показаны).

IL-10 представляет собой противовоспалительный цитокин, который модулирует иммунный ответ. Его продуцируют макрофаги, дендритные клетки, В-клетки, CD4⁺ и CD8⁺ Т-клетки. При инфекции он угнетает активность Th1-клеток, NK-клеток и макрофагов. Несмотря на то, что наблюдалась групповая тенденция к пиковому повышению IL-10 в первые 3 недели с последующим быстрым и устойчивым снижением в группе BIT225 по сравнению с группой плацебо, уровни не были статистически значимыми в течение 12-недельного периода лечения (данные не показаны).

Не было выявлено различий между группами в отношении продукции IL-17F, которая увеличивалась со временем в обеих группах до уровня, примерно вдвое превышающего уровень до лечения (данные не показаны).

Не было выявлено статистических различий между группами BIT225 и плацебо в отношении TNF-α, воспалительного цитокина, продуцируемого макрофагами и моноцитами, или в отношении продукции IL-1B, который влияет на дифференцировку Th1-клеток (данные не показаны).

Не было выявлено сообщаемых результатов в отношении продукции IL-17A, IL-17F/IL-25, так как большинство точек данных были ниже LLQ для анализа.

BIT225 хорошо переносился в группах 100 и 200 мг. Все субъекты (36/36) испытали по меньшей мере одно нежелательное явление (АЕ), большинство из которых были легкой степени тяжести и разрешились в течение периода лечения. Наиболее часто встречающиеся АЕ были сходными у субъектов, получавших BIT225 и плацебо, ивключали головокружение, тошноту, головную боль, лихорадку и рвоту. Два субъекта в группе BIT225 100 мг досрочно прекратили исследование из-за АЕ. На Сутки 7 у одного субъекта наблюдалась легкая синусовая тахикардия, которая, возможно, была связана с Атрипла и/или BIT225. Второй субъект прекратил исследование на Сутки 17 после сообщения о легком удлинении интервала QTcB (QTcB>480 мс), которое исследователь не считал связанным с BIT225 или Атрипла. О головокружении 3 степени сообщалось у 1 субъекта, получавшего 200 мг BIT225, на Сутки 4, что, по мнению исследователя, определенно связано с Атрипла и не связано с BIT225. Лечение препаратом Атрипла было прекращено, а схема ART для этого субъекта была изменена. Еще два субъекта прекратили прием препарата Атрипла в первые несколько недель лечения из-за непереносимости (головокружение) эфавиренза; один в группе 200 мг BIT225 и один в группе плацебо. Эти субъекты также были переведены на новый режим ART и завершили лечение и последующий период исследования. Серьезных АЕ (SAE) или летальных исходов не было.

Данные интенсивного отбора проб для изучения фармакокинетики показали, что BIT225 и Атрипла достигали экспозиции в плазме в пределах ожидаемых временных рамок и диапазонов концентраций. BIT225 существенно не влиял на фармакокинетические характеристики Атрипла (результаты не показаны).

Это исследование является первым отчетом по безопасности и эффективности BIT225, ингибитора Vpu, в комбинации с ART у ранее не получавших лечения субъектов с хронической инфекцией ВИЧ-1. BIT225 считался безопасным, хорошо переносимым и не оказывал существенного влияния на фармакокинетические характеристики ART. Данное исследование показывает, что добавление BIT225 к ART вызывало значительные изменения в иммунном ответе хозяина на ВИЧ-1 на фоне резкого снижения вирусной нагрузки. Иммунологические эффекты сохранялись в течение нескольких недель, несмотря на снижение вирусной нагрузки в плазме на несколько логарифмических единиц в течение нескольких суток после начала ART.

Данное исследование показало, что начало ART привело к быстрому снижению числа активированных CD4⁺ Т-клеток по профилю, сходному со снижением вирусной нагрузки. Неожиданным является то, что добавление BIT225 к ART имело другое влияние на профиль снижения количества активированных CD4 Т-клеток, при этом группа BIT225 имела значительную задержку на примерно 50 суток в снижении активированных CD4⁺ Т-клеток. Эта значительная задержка в снижении активностиактивированных CD4⁺ Т-клеток указывает на то, что иммунная система хозяина стимулировалась механизмом, ранее не идентифицированным при какой-либо другой комбинации ART.

Комбинация BIT225 и ART в данном исследовании привела к статистически значимому снижению маркера активации макрофагов sCD163 в течение 12 недель терапии до нормальных уровней. CD 163 представляет собой мембранный белок, который экспрессируется на периферических моноцитах и макрофагах, которые играют центральную роль в ответе хозяина на инфекцию и повреждение тканей и важны для патогенеза заболевания. Растворимый CD 163 образуется при отщеплении рецептора CD 163 от моноцитов и макрофагов, когда активируется иммунная система. Этот маркер сильно коррелирует с макрофагально-опосредованным патогенезом и считается лучшим предиктором, чем маркеры активации Т-клеток, заболеваемости и смертности от всех причин у пациентов с ВИЧ-1, получающих ART, у которых активация иммунитета и воспаление известны, несмотря на вирусный контроль ART (Burdo et al., J Infect Dis 2011, 204: 1227-36; Burdo et al., J Infect Dis 2011, 204: 154-63; Burdo et al., AIDS 2013,27: 1387-95; Knudsen et al., J Infect Dis 2016, 214: 1198-204). ВИЧ-1-инфицированные индивидуумы обычно имеют более высокие уровни sCD163, чем ВИЧ-отрицательные индивидуумы того же возраста (Martin et al., PLoS One 2013, 8: e55279). Было показано, что ART снижает уровни sCD163, но не до уровня ВИЧ-отрицательных людей того же возраста (Burdo et al., J Infect Dis 2011, 204: 154-63). Повышенные уровни sCD163 у ВИЧ-1-инфицированных людей связаны с физическим укорочением теломер в макрофагах (Srinivasa et al., J Acquir Immune Defic Syndr 2014, 67: 414-8), что подтверждает гипотезу о том, что иммунное старение необратимо и раннее вмешательство ART полезно. Повышенные уровни sCD163 были связаны с неблагоприятными клиническими исходами неинфекционных сопутствующих заболеваний, включая сердечно-сосудистые заболевания, заболевания печени, сахарный диабет II типа и снижение когнитивных функций у индивидуумов с ВИЧ-1 (Paiardini & Muller-Trutwin, Immunol Rev 2013, 254: 78-101). Механизм снижения уровня sCD163, связанного с BIT225, до уровней ниже, чем только при ART, может быть связан со снижением репликации ВИЧ-1 в клетках миелоидной линии прямо или косвенно путем реверсии врожденной иммуносупрессии, связанной с Vpu. Результаты по sCD163 подтверждают, что терапия BIT225 потенциально может привести к улучшению состояния здоровья людей, получающих ART в течение длительного времени.

Данные исследования описывают новую парадигму, в которой мощная противовирусная активность ART усиливается за счет улучшения иммунных функций лечения BIT225. Наиболее устойчивым эффектом иммунных клеток в течение 12 недель лечения было статистически значимое отсроченное снижение количества активированных CD4⁺Т-клеток по сравнению с исходным уровнем в группе BIT225 по сравнению с плацебо и ART. Этот эффект сохранялся вплоть до 50 суток. Модификация профиля активированных CD4⁺Т-клеток может быть связана с резким изменением детекции и ответа хозяина на ВИЧ-1-инфицированные клетки и с восстановлением функции клеток, продуцирующих IL-21 (Тh17-клетки, Tfh-клетки и NK-клетки). В первые 3 недели лечения BIT225 наблюдалось статистически значимое повышение уровня IL-21 в плазме. IL-21 продуцируется клетками Th17, чтобы способствовать их дифференцировке и функционированию. Клетки Th17 являются важным подмножеством иммунных клеток, которые имеют решающее значение для патогенеза инфекции ВИЧ-1. Недавние исследования показали, что клетки Th17 преимущественно истощаются в течение первых шести месяцев инфекции ВИЧ-1 (K1att & Benchley, Curr Opin HIV AIDS 2010, 5(2): 135-40). Эти данные важны, поскольку они описывают усиленное восстановление типа клеток, преимущественно уничтоженных инфекцией ВИЧ-1. Избирательное разрушение клеток ТЫ7 в кишечнике при инфицировании ВИЧ-1 предотвращает гомеостаз эпителиального барьера кишечника и отвечает за транслокацию микробов в кровь (Klatt & Benchley, Curr Opin HIV AIDS 2010, 5(2): 135-40). Это создает среду постоянного иммунного проявления, распознавания и уничтожения патогенного материала и приводит к состоянию хронического воспаления. Высокие уровни провоспалительных цитокинов в течение продолжительных периодов времени приводят к преждевременному иммунному старению и повреждению многих органов. В то время как ART сама по себе приводит к восстановлению активированных CD4⁺Т-клеток, эта конкретная подгруппа клеток Th17 преимущественно не восстанавливается до нормального уровня (Planas et al., Curr Opin HIV AIDS 2019, 14: 85-92). Представленные здесь данные свидетельствуют о том, что BIT225 избирательно улучшает судьбу и активность этой линии клеток и что добавление BIT225 к ART потенциально может привести к устойчивой клинической пользе и остановке или реверсированию клинического снижения функции органов, связанной с иммунной активностью.

Общее повсеместное снижение количества активированных клеток CD8⁺ в обеих группах с ART (т.е. как при ВГТ225, так и при плацебо) типично для того, что обычно отмечается для ART, и, вероятно, отражает снижение количества продуктов ВИЧ-1, которые стимулируют иммунную систему. Напротив, наблюдаемая задержка снижения количества активированных CD8⁺ Т-клеток в группе BIT225+ART обычно не отмечается. Это может быть связано с лучшей презентацией антигена антигенпрезентирующими клетками (АРС) и передачей сигналов Т-клетками.

Быстрое увеличение количества NK-клеток, которое достигало пика в течение 24-48 часов после начала BIT225 и ART, контрастировало с немедленным снижением количества NK-клеток в группе ART и плацебо. Количество NK-клеток оставалось выше на протяжении 12 недель лечения BIT225, означая что связанные с ВИЧ-1 дефекты в передаче сигналов NK могут быть по меньшей мере частично устранены с помощью BIT225. Эти данные подтверждают гипотезу о том, что BIT225 обращает понижающую регуляцию Vpu в NK-клетках и увеличивает ключевые рецепторы клеточной поверхности для эффективной передачи сигналов NK и дегрануляции.

За начальным пиком в NK-клетках и активированных CD8⁺ Т-клетках, наблюдаемым в первую неделю лечения BIT225, следовало повышение уровня IL-21 в плазме, которое достигало пика на 3-й неделе. Этот ранний пик в NK- и CD8⁺ Т-клетках указывает на то, что был обнаружен новый или повышенный источник антигена и на него был ответ, несмотря на массивное снижение вирусного антигена в плазме, вызванное ART. Начальный пик уровней IL-21 в плазме подтверждает, что иммунная система хозяина управляла восстановлением, дифференцировкой и функцией клеток Th17, Tfh и/или NK-клеток. Этот эффект усиливался устойчивым отсроченным снижением количества активированных CD4⁺ Т-клеток. Эти активированные CD4⁺ Т-клетки способны распознавать и уничтожать ВИЧ-1-инфицированные клетки независимо от происхождения. Несмотря на то, что ведутся споры о составе клеток, вовлеченных в резервуар, он потенциально включает гемопоэтические стволовые клетки, миелоидные и Т-клеточные линии, которые ранее плохо проникали при одной только ART (Hong & Mellors, Curr Opin HIV AIDS 2015, 10: 43-8; Honeycutt et al., J Clin Invest 2016, 126: 1353-66). Небольшое временное повышение уровня IL-10 в первые несколько недель может свидетельствовать в пользу снижения исходной точки вируса, поскольку оно положительно связано с этим исходом (Katsikis et al., PLoS Pathog 2011, 7: e1002055).

Добавление BIT225 к ART привело к уникальной иммуномодуляции, о которой ранее не сообщалось ни при одном противовирусном агенте прямого действия. Это исследование предоставляет доказательства того, что BIT225 потенциально обладает множественными модулирующими эффектами на врожденную иммунную систему, которые могут быть полезными для улучшения последствий хронической иммунной активации, вызванной ВИЧ-1, и помочь в будущих стратегиях эрадикации. BIT225 может играть потенциальную роль в качестве компонента лечебной стратегии за счет активации иммунного ответа хозяина для элиминации ВИЧ-1-инфицированных клеток, которые не удаляются с помощью ART-терапии, таких как клетки в убежищах или резервуарах (которые являются убежищем для вирусной латентности и низкого уровня репликации вируса). Одним из возможных механизмов иммуномодулирующего эффекта BIT225 является индукция изменений в механизмах, опосредованных Vpu, которые участвуют в маскировке ВИЧ-1-инфицированных клеток от иммунной системы хозяина.

ПРИМЕР 3 АНАЛИЗЫ ИССЛЕДОВАНИЯ СПЕЦИФИЧНЫХ К BIT225 ИММУНОМОДУЛИРУЮЩИХ ЭФФЕКТОВ

Как показано в Примере 2, добавление BIT225 к ART приводило к повышенной активации Т-клеток в клиническом исследовании Фазы 2 по сравнению с применением только ART. В следующем исследовании in vitro изучали, существует ли Vpu-зависимый механизм, который приводит к лучшей активации и функционированию Т-клеток во время ART. Костимулирующим рецептором активации Т-клеток является CD28, и его аналогами являются CD80 и CD86 на макрофагах, дендритных клетках и В-клетках. Эксперименты были разработаны для определения роли экспрессии вспомогательных белков Vpu и Nef в активации Т-клеток, экспрессии CD28 и CCR7 на CD4⁺ Т-клетках и экспрессии CD80 и CD86 на макрофагах моноцитарного происхождения (MDM).

Способ получения штамма вируса описан Bobardt et al., PNAS, 2008;105(14):5525-5530. Вкратце, клетки 293T трансфицировали провирусной плазмидой (9 мкг) и плазмидой оболочки вируса везикулярного стоматита G (VSV-G) (1 мкг). На сутки 2 собирали псевдотипированные вирусы VSV-G (5 мкг р24) и использовали для острого заражения клеток Jurkat (2×106 клеток). Через два дня после инфицирования вирусы собирали и определяли содержание р24 с помощью ELISA (PerkinElmer). Вирусные инфекции проводили в трех повторностях с использованием 10 или 100 нг р24, полученного из трансфицированных клеток 293Т. Использовали следующиепровирусные конструкции: ВИЧ-1 дикого типа pNL4.3 CCR4(X4) tropic[WT], pNL4.3 ΔNef, pNL4.3 ΔVpu, pNL4.3 ΔNefΔVpu и HIV-1 pBaL-1 CCR5(R5) tropic[WT}.

Полученные из крови CD4+Т-лимфоциты и MDM выделяли как описано в Saphire et al., J Viro1 2001, 75:9187 9200. CD4+Т-клетки и моноциты были выделены из крови трех доноров, которые были CCR5-Delta32-отрицательными. Для получения первичных макрофагов человека моноциты очищали от РВМС человека методом отрицательной селекции (Dynal Biotech), активировали и культивировали при концентрации клеток 106/мл в среде DMEM, дополненной 10% FCS (HyClone), аминокислотами MEM, L-глютамином, витаминами MEM, пируватом натрия (Invitrogen), пенициллинном (100 ЕД/мл), стрептомицином (100 мг/мл) и 50 нг/мл рекомбинантного человеческого гранулоцитарно-макрофагального колониестимулирующего фактора (GM-CSF) (R&D Systems) и поддерживали при 37°С во влажной атмосфере с добавлением 5% CO₂. Для получения MDM клеткам давали прикрепиться к пластику и культивировали в течение 6 суток, чтобы обеспечить дифференцировку до заражения. Заражение проводили с использованием 10 или 100 нг р24 на 106 клеток.

Выделение CD4+ Т-клеток проводили как описано ранее Geijtenbeek et al., Cell, 2000,100:587 597. РВМС человека очищали из свежей крови путем связывания на Ficoll-Hypaque (30 мин, 800 г, 25°С; Amersham Biosciences). Первичные CD4⁺ Т-клетки человека очищали от РВМС путем положительной селекции с использованием анти-CD4 Dynabeads и последующего высвобождения с использованием Detachabead (Dynal Biotech). Клетки культивировали в среде RPMI 1640 (Invitrogen) с добавлением 10% FCS (HyClone), аминокислот MEM, L-глютамина, витаминов MEM, пирувата натрия (Invitrogen), пенициллина плюс стрептомицина (Cellgro) и затем активировали бактериальным суперантигеном стафилококковым энтеротоксином В (SEB; 100 нг/мл) и убитыми митомицином С РВМС от другого донора (соотношение PBMC:CD4+клеток 10:1). Через три дня после стимуляции клетки разделяли 1:2 в среде, содержащей IL-2 (программа по исследованиям СПИД и эталонным рагентам Национального института здоровья; NIH AIDS Research and Reference Reagent Program; конечная концентрация 200 единиц/мл). Затем культуры делили 1:2 каждые 2 дня в среде IL-2 и инфицировали ВИЧ через 7 суток после стимуляции. Заражение CD4+Т-клеток проводили 10 или 100 нг р24 на 106 клеток.

CD4+ Т-клетки и MDM, выделенные из крови трех доноров, были инфицированы VSVG-псевдотипом дикого типа, Vpu-, Nef- и Vpu-/Nef- HIV-1_NL4-3.

Клетки обрабатывали 3 мкМ BIT225 или DMSO в качестве контроля и экспрессию CD28, CCR7, CD80 и CD86 измеряли с помощью проточной цитометрии через 24, 48 и 72 часа.

Статистический анализ данных выполняли с использованием ANOVA. Данные были преобразованы в «кратное изменение» путем деления на значения Donor- и Time-matched из необработанного набора данных WT.NL4.3. Двусторонний ANOVA использовали для статистической оценки различий внутри вируса между обработанными BIT225 и необработанными средствами. Линейная модель {Fold-Change=β0+β1*Time+β2*I_BIT225) была адаптирована к набору данных (N=18) для каждого вируса, который включал измерения от трех доноров в трех временных точках (24 часа, 48 часов и 72 часа); обработан либо В1Т225, либо контрольным DMSO.

Экспрессия CD28 на CD4⁺ Т-клетках снижалась при инфицировании HIV-1_NL4-3 дикого типа (WT) в течение 72-часового эксперимента (Фиг. 6). Экспрессия CD28 отрицательно регулировалась экспрессией Vpu и Nef. Обработка В1Т225 клеток, инфицированных WT, приводила к частичному восстановлению экспрессии CD28, которое зависело только от экспрессии Vpu. Двойная делеция Vpu и Nef приводила к восстановлению экспрессии CD28 до уровней, сравнимых с неинфицированными клетками. В1Т225 снижает отрицательную регуляцию CD28, связанную с Vpu, в результате инфицирования ВИЧ-1. Обработка В1Т225 увеличивает экспрессию CD28 Vpu-зависимым образом.

Экспрессию CD80 и CD86 в плазматической мембране модулировали экспрессией Vpu и Nef. Инфицирование MDM VSVG-псевдотипированным HIV-1NL4-3 приводило к снижению экспрессии CD80 и CD86 на плазматической мембране в течение 72-часового эксперимента. В клетках, инфицированных вирусами pNL4.3 ΔNef и pNL4.3 ΔVpu, наблюдалась частичная экспрессия CD80 и CD86 на плазматической мембране. Инфекция pNL4.3 ΔNefΔVpu не снижала экспрессию ни одного из лигандов по сравнению с имитированной инфекцией (Фиг. 7 и 8). Обработка В1Т225 инфицированных вирусом WT или ΔNef клеток, экспрессирующих Vpu, приводила к частичному восстановлению экспрессии CD80 и CD86 на плазматической мембране. В1Т225 не оказывал заметного действия на двойной мутантный вирус ΔNefΔVpu HIV-1NL4-3, прежде всего потому что двойная делеция Vpu и Nef возвращает рецепторы на неинфицированные уровни.

Экспрессия CD86 на плазматической мембране на MDM снижалась при инфицировании WT HIV-1NL4-3 в течение 72-часового эксперимента. Экспрессия CD86 на плазматической мембране модулировалась экспрессией Vpu и Nef. Обработка BIT225 клеток, инфицированных WT, приводила к частичному восстановлению уровней экспрессии CD86 на плазматической мембране. Двойная делеция Vpu и Nef приводила к восстановлению экспрессии CD86 до уровней, сравнимых с неинфицированными клетками. В отличие от других рецепторов, ответ на лечение CD86 BIT225 был сходным у вирусов с одиночными делециями Vpu или Nef. Это интригующее наблюдение предполагает второй новый, независимый от Vpu, механизм действия, с помощью которого BIT225 противодействует Nef-зависимой деградации CD86.

На функцию/дифференцировку Т-клеток влияет окружающая среда и образование, которому клетка подвергается во время циркуляции через кровь и иммунные ткани/органы. Важным сигналом хоминга является экспрессия хемокинового рецептора CCR7. В этом исследовании было установлено, что экспрессия CCR7 на CD4⁺ Т-клетках снижается при инфицировании ВИЧ-1 (Фиг. 9). Экспрессия CCR7 отрицательно регулировалась экспрессией Vpu и Nef. Обработка В1Т225 клеток, инфицированных WT HIV- 1NL4-3, приводила к частичному восстановлению экспрессии CCR7, которое зависело только от экспрессии Vpu. Двойная делеция Vpu и Nef приводила к восстановлению экспрессии CCR7 до уровней, сравнимых с неинфицированными клетками. В1Т225 снижает отрицательную регуляцию CCR7 плазматической мембраны только в клетках, инфицированных вирусами, экспрессирующими Vpu (вирусы WT и ΔNef; Фиг. 2Б). Степень отрицательной регуляции CCR7 только экспрессией Nef (вирус ΔVpu) не зависит от В1Т225. Вместе эти данные подтверждают, что механизм восстановления CCR7 с помощью В1Т225 является зависимым от экспрессии Vpu. Эти данные свидетельствуют о том, что функция CD4⁺ Т-клеток может быть улучшена при добавлении В1Т225 к ART.

Эти данные свидетельствуют о том, что лечение В1Т225 может противодействовать Vpu-опосредованной отрицательной регуляции экспрессии CD28 и CCR7 на CD4+Т-клетках, инфицированных ВИЧ-1, а также CD80 и CD86 на MDM, инфицированных ВИЧ-1. Механизм действия В1Т225 требует присутствия Vpu для модуляции и восстановления CD28 и CCR7 на CD4⁺Т-клетках и CD80 на MDM. Однако, связанное с лечением В1Т225 усиление экспрессии CD86 на инфицированных MDM не зависит от Vpu.

В1Т225, по-видимому, усиливает ко стимулирующие сигналы, необходимые для активации Т-клеток и хоминга. Эти результаты указывают на новые свойства BIT225, которые подтверждают усиленный иммунный надзор хозяина за ВИЧ-1. Способность В1Т225 улучшать экспрессию CCR7 на плазматической мембране с помощью механизма Vpu означает, что потенциально большее количество Т-клеток будет рекрутироваться в соответствующие иммунологические сайты для образования антигена, что приведет к более мощной иммунологической функции по снижению или устранению вирусной инвазии. CCR7 и его лиганды CCL19 и CCL21 обеспечивают систему направления иммунных клеток для миграции в лимфатические узлы и способствуют как иммунитету, так и толерантности. Изменения вспомогательных белков ВИЧ-1 в функции TCR и ошибочные хоминг-сигналы потенциально могут быть причинами продолжающейся иммунной активации и воспаления, которые приводят к истощению фенотипов клеток CD4+ и CD8+ у инфицированных ВИЧ-1 людей, получающих длительную ART. Добавление В1Т225 к ART потенциально может воздействовать на множественные клеточные, хемокиновые и цитокиновые сигнальные пути, которые необходимы для надлежащего рекрутирования клеток для выявления и устранения инфицированных вирусом клеток. В Примере 2 повышенная активация CD4, наблюдаемая только в группе, получавшей В1Т225, сохранялась даже в условиях быстрого падения РНК ВИЧ. Настоящее исследование подтверждает, что В1Т225 способен обнаруживать инфицированные вирусом клетки, которые не были уничтожены супрессивной ART и не были легко идентифицированы иммунной системой хозяина. Соответственно, лечение В1Т225 может быть ценным дополнением к будущему антиретровирусному лечению, особенно для устранения ВИЧ-1.

Группа изобретений относится к фармацевтической промышленности, а именно к лечению инфекции ВИЧ-1 и увеличению количества активированных Т-клеток у субъекта. Способ лечения инфекции ВИЧ-1 и увеличения количества активированных Т-клеток у субъекта, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, комбинации, содержащей а) эфавиренз, эмтрицитабин и тенофовир DF и б) N-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамид или его фармацевтически приемлемую соль. Применение а) эфавиренза, эмтрицитабина и тенофовира DF и б) N-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарственного средства для лечения инфекции ВИЧ-1 и увеличения количества активированных Т-клеток у субъекта. Вышеописанный способ и применение обеспечивают эффективное лечение инфекции ВИЧ-1 и увеличение количества активированных Т-клеток у субъекта, функция CD4⁺ и CD8⁺ Т-клеток улучшена при добавлении В1Т225 к Atripla, содержащему эфавиренз, эмтрицитабин и тенофовир DF, а также снижается уровень sCD163 в плазме. 2 н. и 18 з.п. ф-лы, 9 ил., 3 пр.

1. Способ лечения инфекции ВИЧ-1 и увеличения количества активированных Т-клеток у субъекта, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, комбинации, содержащей а) эфавиренз, эмтрицитабин и тенофовир DF и б) N-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамид или его фармацевтически приемлемую соль.

2. Способ по п. 1, где введение комбинации увеличивает количество клеток-киллеров (NK-клеток) по сравнению с введением эфавиренза, эмтрицитабина и тенофовира DF в отдельности.

3. Способ по п. 1, где введение комбинации увеличивает уровень интерлейкина-21 (IL-21) в плазме по сравнению с введением эфавиренза, эмтрицитабина и тенофовира DF в отдельности.

4. Способ по п. 1, где введение комбинации увеличивает количество активированных CD4⁺ Т-клеток по сравнению с введением эфавиренза, эмтрицитабина и тенофовира DF в отдельности.

5. Способ по п. 1, где введение комбинации увеличивает количество активированных CD8⁺ Т-клеток по сравнению с введением эфавиренза, эмтрицитабина и тенофовира DF в отдельности.

6. Способ по п. 1, где введение комбинации снижает уровень sCD163 в плазме по сравнению с введением эфавиренза, эмтрицитабина и тенофовира DF в отдельности.

7. Способ по п. 1, где введение комбинации снижает отрицательную регуляцию экспрессии CD28 на CD4⁺ Т-клетках, инфицированных ВИЧ-1, по сравнению с введением эфавиренза, эмтрицитабина и тенофовира DF в отдельности.

8. Способ по п. 1, где введение комбинации снижает отрицательную регуляцию экспрессии CCR7 на CD4⁺ Т-клетках, инфицированных ВИЧ-1, по сравнению с введением эфавиренза, эмтрицитабина и тенофовира DF в отдельности.

9. Способ по п. 1, где введение комбинации снижает отрицательную регуляцию экспрессии CD80 на макрофагах моноцитарного происхождения, инфицированных ВИЧ-1, по сравнению с введением эфавиренза, эмтрицитабина и тенофовира DF в отдельности.

10. Способ по п. 1, где введение комбинации снижает отрицательную регуляцию экспрессии CD86 на макрофагах моноцитарного происхождения, инфицированных ВИЧ-1, по сравнению с введением эфавиренза, эмтрицитабина и тенофовира DF в отдельности.

11. Применение а) эфавиренза, эмтрицитабина и тенофовира DF и б) N-карбамимидоил-5-(1-метилпиразол-4-ил)нафталин-2-карбоксамида или его фармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарственного средства для лечения инфекции ВИЧ-1 и увеличения количества активированных Т-клеток у субъекта.

12. Применение по п. 11, где лекарственное средство увеличивает количество клеток-киллеров (NK-клеток) по сравнению с эфавирензом, эмтрицитабином и тенофовиром DF в отдельности.

13. Применение по п. 11, где лекарственное средство увеличивает уровень интерлейкина-21 (IL-21) в плазме по сравнению с эфавирензом, эмтрицитабином и тенофовиром DF в отдельности.

14. Применение по п. 11, где лекарственное средство увеличивает количество активированных CD4⁺ Т-клеток по сравнению с эфавирензом, эмтрицитабином и тенофовиром DF в отдельности.

15. Применение по п. 11, где лекарственное средство увеличивает количество активированных CD8⁺ Т-клеток по сравнению с эфавирензом, эмтрицитабином и тенофовиром DF в отдельности.

16. Применение по п. 11, где лекарственное средство снижает уровень sCD163 в плазме по сравнению с эфавирензом, эмтрицитабином и тенофовиром DF в отдельности.

17. Применение по п. 11, где лекарственное средство снижает отрицательную регуляцию экспрессии CD28 на CD4⁺ Т-клетках, инфицированных ВИЧ-1, по сравнению с эфавирензом, эмтрицитабином и тенофовиром DF в отдельности.

18. Применение по п. 11, где лекарственное средство снижает отрицательную регуляцию экспрессии CCR7 на CD4⁺ Т-клетках, инфицированных ВИЧ-1, по сравнению с эфавирензом, эмтрицитабином и тенофовиром DF в отдельности.

19. Применение по п. 11, где лекарственное средство снижает отрицательную регуляцию экспрессии CD80 на макрофагах моноцитарного происхождения, инфицированных ВИЧ-1, по сравнению с эфавирензом, эмтрицитабином и тенофовиром DF в отдельности.

20. Применение по п. 11, где лекарственное средство снижает отрицательную регуляцию экспрессии CD86 на макрофагах моноцитарного происхождения, инфицированных ВИЧ-1, по сравнению с эфавирензом, эмтрицитабином и тенофовиром DF в отдельности.