Способ моделирования асфиксической остановки кровообращения и постреанимационной болезни Российский патент 2024 года по МПК G09B23/28 A61B5/02 

Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано для исследования патогенеза постреанимационной болезни после асфиксической остановки кровообращения, а также для оценки безопасности и эффективности новых методов лечения постреанимационной болезни.

Уровень техники.

Использование крысы в качестве модельного организма имеет ряд преимуществ по сравнению с крупными лабораторными животными, в частности: дешевизна, возможность создания выборки большого размера, обширные данные по биологии данного вида, большой опыт выполнения экспериментальных процедур и применения различных лабораторных и инструментальных методов исследования. В данной модели можно точно учитывать время остановки кровообращения, что стандартизирует тяжесть ишемического повреждения органов.

В настоящее время известны экспериментальные модели асфиксической остановки кровообращения у крыс, которые воспроизводят механизмы остановки кровообращения у детей и пациентов с дыхательной недостаточностью [Yu S, Wu С, Zhu Y, Diao M, Hu W. Rat model of asphyxia-induced cardiac arrest and resuscitation. Front Neurosci. 2023 Jan 4;16:1087725. doi: 10.3389/fnins.2022.1087725]. В 1995 г. была опубликована экспериментальная модель асфиксической остановки кровообращения у крыс с комплексом реанимационных мероприятий, отразившая лечебные подходы в клинической реаниматологии того времени [Katz L, Ebmeyer U, Safar P, Radovsky A, Neumar R. Outcome model of asphyxial cardiac arrest in rats. J Cereb Blood Flow Metab. 1995 Nov;15(6):1032-9. doi: 10.1038/jcbfm.l995.129]. В данной модели асфиксическую остановку кровообращения у крыс, анестезированных галотаном, производят с помощью отключения аппарата искусственной вентиляции легких (ИВЛ) после введения препарата миорелаксирующего действия (векуроний). Возникающая остановка дыхания в течение 3-4 минут приводит к остановке сердечной деятельности по механизму электромеханической диссоциации. Моментом остановки кровообращения считают снижение артериального давления (АД) ниже 10 мм рт. ст.Через 8 мин после начала остановки дыхания (т.е. через 4-5 минут отостановки кровообращения) начинают реанимацию, включающую в себя возобновление ИВЛ с фракцией вдыхаемого кислорода 100%, компрессию грудной клетки с частотой 200/мин, введение андреналина 0,01 мкг/кг и раствора NaHCO₃ внутривенно. В ходе эксперимента проводят мониторинг ЭКГ и АД, показания которых являются маркерами начала остановки и восстановления спонтанного кровообращения при реанимации. ИВЛ продолжают на протяжении 60 мин после восстановления кровообращения, после чего животное переводят на самостоятельное дыхание и наблюдают еще в течение 60 мин. В зависимости от задач исследования оценку общего состояния и неврологического статуса животного проводят через 24 ч после реанимации или позже.

На основании приведенной выше экспериментальной модели позже были разработаны несколько ее модификаций. Например, в одной из них [Dave KR, Raval АР, Prado R, Katz LM, Sick TJ, Ginsberg MD, Busto R, Perez-Pinzon MA. Mild cardiopulmonary arrest promotes synaptic dysfunction in rat hippocampus. Brain Res. 2004;1024(l-2):89-96. doi: 10.1016/j.brainres.2004.07.050] авторы используют другой ингаляционный анестетик -изофлуран с закисью азота и меньшую длительность остановки кровообращения (6 мин от остановки дыхания). В другой, более поздней модификации [Hu Т, Wang J, Wang S, Li J, Chen B, Zuo F, Zhang L, Huang Y, Li Y. Effects of the duration of postresuscitation hyperoxic ventilation on neurological outcome and survival in an asphyxial cardiac arrest rat model. Sci Rep.2019;9(1):16500. doi: 10.1038/s41598-019-52477-y] для анестезии использован пентобарбитал, для миорелаксации - пипекуроний, критерием остановки кровообращения было снижение АД ниже 30 мм рт. ст., а при реанимации по показаниям применялась электрическая дефибрилляция. Кроме того, в постреанимационном периоде ИВЛ продлевалась до 6 ч.

Приведенные выше экспериментальные модели асфиксической остановки кровообращения имеют ряд общих недостатков. Например, длительность асфиксии (от остановки дыхания до реанимации) используется в них как заданная протоколом исследования величина (от 6 до 10 мин), а длительность собственно остановки кровообращения при таком подходе варьирует в пределах 1-2 мин в зависимости от индивидуальных особенностей животного, что ограничивает воспроизводимость этой экспериментальной процедуры. Длительность остановки кровообращения напрямую влияет на успешность реанимационных мероприятий. Так при длительности остановки кровообращения 7 минут вероятность восстановления спонтанного кровообращения менее 50% [Yu S et al., 2023]. Для отсчета собственно остановки кровообращения исследователи используют определенное пороговое значение АД (в интервале от 10 до 30 мм рт. ст.) без учета состояния периферической перфузии тканей. Кроме того, заисключением исследования Hu Т и соавт.(2019) длительность ИВЛ и комплексной интенсивной терапии обычно ограничена 1-2 ч. На протяжении этого времени артериальная гипотензия корректируется болюсным введением раствора NaCl 0,9%, а повторное проведение реанимационных мероприятий не предусмотрено.

Наиболее близким методическим решением того же назначения к заявляемому способу по совокупности признаков является экспериментальная модель асфиксической остановки кровообращения с реанимацией, использованная Huang К и соавт.для оценки нейропротективных эффектов терапевтической гипотермии и глибенкламида [Huang К, Wang Z, Gu Y, Ни Y, Ji Z, Wang S, Lin Z, Li X, Xie Z, Pan S. Glibenclamide Is Comparable to Target Temperature Management in Improving Survival and Neurological Outcome After Asphyxial Cardiac Arrest in Rats. J Am Heart Assoc. 2016 Jul 13;5(7):e003465. doi: 10.1161/JAHA.116.003465]. Данная модель включает в себя общую анестезию, катетеризацию магистральных сосудов, интубацию трахеи, мониторинг ЭКГ, АД и центральной температуры тела, измерение газового состава артериальной крови, введение мышечного релаксанта для индукции асфиксии, использование значения среднего АД менее 20 мм рт. ст.как маркера остановки кровообращения, комплекс реанимационных мероприятий для восстановления спонтанного кровообращения (ИВЛ 100% кислородом, компрессии грудной клетки, внутривенное введение адреналина). Маркером восстановления спонтанного кровообращения в известном способе является стойкое увеличение АД выше 60 мм рт. ст., а недостижение этого эффекта в течение 5 минут реанимации считается показанием к прекращению реанимационных мероприятий (животное попадает в группу с летальным исходом).

Недостатками известного методического решения, принятого за прототип и других аналогов, являются:

- ингаляционную анестезию отключают за несколько минут до индукции асфиксии, что в ряде случаев является преимуществом (минимизация эффектов анестезии на патогенез ишемически-реперфузионных повреждений внутренних органов), однако не отражает патогенез остановки кровообращения в клинической анестезиологии, а также утяжеляет процедуру с точки зрения биоэтики (усугубляется страдание животного);

- для фиксации момента остановки и восстановления кровообращения используют только снижение АД до определенных значений без оценки перфузии органов и тканей, при этом длительность остановки кровообращения фиксируют на основании общей длительности асфиксии, а не остановки кровообращения как таковой, что снижает точность диагностики момента остановки и восстановления кровообращения и качество моделирования данного патологического процесса;

- комплекс мер интенсивной терапии в постреанимационном периоде ограничен (малая длительность ИВЛ, отсутствие повторных попыток реанимации, режим применения адреналина и инфузионных растворов отличается от современных реанимационных протоколов, сосудистые катетеры удаляют через 1-2 ч после реанимации).

Это снижает трансляционный потенциал результатов доклинического исследования в клиническую анестезиологию-реаниматологию.

Заявляемое изобретение направлено на решение задачи усовершенствования известных экспериментальных моделей асфиксической остановки кровообращения у крыс повышающих сходство модели с внутригоспитальной остановкой кровообращения и реанимацией в клинической анестезиологии-реаниматологии.

Использование заявляемого способа позволяет достичь нескольких технических результатов:

- уточнение момента остановки и восстановления спонтанного кровообращения у крыс в условиях комбинированной общей анестезии, следствием чего является снижение вариабельности тяжести постреанимационной болезни у лабораторных животных;

- повышение схожести экспериментальной модели постреанимационной болезни с особенностями течения постреанимационного периода у пациентов хирургического профиля во время общей анестезии и хирургического вмешательства.

Указанные технические результаты достигаются за счет того, что заявляемый способ моделирования асфиксической остановки кровообращения, также как известные методические решения, включает общую анестезию, катетеризацию магистральных сосудов, интубацию трахеи, мониторинг ЭКГ, АД и центральной температуры тела, измерение газового состава артериальной крови, введение мышечного релаксанта для индукции асфиксии, использование значения среднего АД менее 20 мм рт. ст.как маркера остановки кровообращения, комплекс реанимационных мероприятий для восстановления спонтанного кровообращения: ИВЛ 100% кислородом, компрессии грудной клетки, внутривенное введение адреналина.

Заявляемый способ моделирования асфиксической остановки кровообращения содержит ряд важных модификаций, а именно:

- общую анестезию осуществляют путем внутрибрюшинного введения комбинации анестетиков (антагонист NMDA-рецепторов, бензодиазепин, агонист альфа-2-адренорецепторов) и поддерживают до окончания комплекса мер интенсивной терапии в постреанимационном периоде (аналог анестезии и седации в клинической анестезиологии-реаниматологии);

- для фиксации момента остановки кровообращения и восстановления спонтанного кровообращения после реанимации применяют метод лазерной допплеровской флоуметрии (ЛДФ), с помощью которого оценивают перфузию кожи конечности лабораторного животного параллельно с мониторингом ЭКГ и АД;

- длительность остановки кровообращения фиксируют не от момента прекращения дыхания, а от момента электромеханической диссоциации сердца, критерием которой является: 1) снижение среднего АД ниже 20 мм рт. ст.на протяжении не менее 10 с; 2) экстремальная брадикардия (менее 100/мин для крыс); 3) перфузия кожи на уровне «биологического нуля» ЛДФ (минимальные значения ЛДФ-сигнала);

- компрессии грудной клетки во время реанимации прерывают раз в 1 мин для оценки сердечного ритма, измерения АД и перфузии кожи на предмет восстановления спонтанного кровообращения; компрессий грудной клетки не прерывают до завершения очередного минутного цикла реанимации, даже если среднее АД повысилось выше 50 мм рт. ст.(соответствие современным клиническим рекомендациям);

- комплекс мер интенсивной терапии в раннем постреанимационном периоде (не менее 2 ч) помимо мониторинга, ИВЛ и поддержания целевой температуры тела, включает в себя продленную внутривенную инфузию сбалансированного электролитного раствора в дозе 10 мл/кг/ч, повторное введение адреналина при стойком снижении среднего АД ниже 40 мм рт. ст., новые попытки реанимации при повторных эпизодах остановки кровообращения, повторное введение анестетика (тилетамин/золазепам) при признаках просыпания животного, внутривенное введение раствора NaHCO₃ 5% только при дефиците оснований (BE) ниже или равном -10 ммоль/л.

- по завершении обозначенного выше периода интенсивной терапии (не ранее, чем через 2 часа после реанимации) туннелированные под кожу сосудистые катетеры не удаляют, а консервируют гепаринизированным раствором NaCl 0,9%. Сосудистые катетеры могут быть использованы в дальнейшем для регистрации физиологических параметров лабораторного животного и введения лекарственных препаратов.

Таким образом, использование ЛДФ для диагностики остановки кровообращения и восстановления спонтанного кровообращения после реанимации, а также в качестве комплексного критерия остановки кровообращения в заявляемой модели асфиксической остановки кровообращения повышает воспроизводимость экспериментальных процедур и условий моделирования патологического процесса. Продленные комбинированная анестезия и комплекс мер интенсивной терапии, максимально приближенный к современной клинической практике, повышают трансляционный потенциал(экстраполяцию) результатов доклинических исследований на мелких лабораторных животных в клиническую медицину. Краткое описание чертежей.

На Фиг. 1 представлена общая схема эксперимента, отражающая применяемые в ходе эксперимента методы и регистрируемые физиологические параметры. Обозначения:

1 - Артериальный катетер,

2 - Венозный катетер,

3 - Интубационная трубка,

4 - Аппарат ИВЛ для мелких лабораторных животных,

5 - Подогреваемая платформа монитора физиологических параметров мелких лабораторных животных,

6 - Прибор для прямого измерения АД,

7 - Оптический зонд прибора ЛДФ,

8 - Прибор ЛДФ,

9 - Шприц для отбора проб артериальной крови для оценки газового состава и кислотно-основного состояния,

10 - Графическое изображение регистрируемых физиологических параметров (ЭКГ, АД, температуры тела, ЛДФ),

11 - Инфузомат для продленной внутривенной инфузии в постреанимационном периоде.

На Фиг. 2 представлены примеры записей физиологических сигналов анестезированного животного до индукции асфиксии, в том числе:

12 - График ЭКГ в реальном времени,

13 - График АД в реальном времени,

14 - График ЛДФ в реальном времени.

На Фиг. 3 представлена динамика показателей ЭКГ, АД и ЛДФ от момента индукции асфиксии до завершения реанимационных мероприятий, в том числе:

12а, 13 а, 14а - показатели ЭКГ, АД и ЛДФ в момент индукции асфиксии, 126, 136, 146 - показатели ЭКГ, АД и ЛДФ в момент фиксации остановки кровообращения,

12в, 13в, 14в - показатели ЭКГ, АД и ЛДФ в момент проведения реанимационных мероприятий,

12 г, 13 г, 14 г - показатели ЭКГ, АД и ЛДФ в момент восстановления спонтанного кровообращения.

Осуществление изобретения.

Авторами была проведена серия экспериментов с использованием заявляемой модели. Эксперименты проведены на половозрелых крысах-самцах линии Wistar весом 250-350 г. Животные были разделены на группы: ложнооперированные (ЛО; n=12) и группа остановки кровообращения (ОК; n=18). В группе ЛО проведен весь перечень описанных ниже манипуляций и исследований, за исключением непосредственного моделирования остановки кровообращения, что необходимо для объективной оценки разницы исследуемых физиологических параметров между группой животных без ОК и группой животных, переживших ОК. Использована комбинированная анестезия: тилетамин/золазепам («Золетил 100», Virbac,) 20 мг/кг+ксилазин («Ксиланит», ООО «НИТА-ФАРМ», Россия) 5 мг/кг внутрибрюшинно с дополнительным введением Золетила 10 мг/кг при признаках просыпания животного.

С целью инвазивного измерения АД, отбора проб артериальной крови для исследования газового состава, введения фармпрепаратов при проведении реанимационных мероприятий, проведения инфузионной терапии в постреанимационном периоде производят катетеризацию магистральных сосудов шеи (сонная артерия, яремная вена) полиэтиленовыми катетерами РЕ-50 (OD 0,95 мм, ID 0,58 мм, SciCat, Россия). Проходимость катетеров поддерживают введением 0,2 мл раствора нефракционированного Гепарина 5 МЕ/мл.

Для обеспечения адекватной вентиляции в подготовительном периоде и при проведении реанимационных мероприятий производят интубацию трахеи животного с использованием метода прямой ларингоскопии под визуальным контролем венозным катетером 16G. После обеспечения нейромышечной блокады с помощью внутривенного введения рокурония бромида 1,4 мг/кг массы тела проводят аппаратную ИВЛ в режиме CMV/VC, дыхательный объем (Vt) рассчитывают по номограмме, представленной в руководстве по эксплуатации аппарата ИВЛ, фракция кислорода (FiO₂) 21%, частота дыхания (f) 60/мин., соотношение вдох/выдох (I:Е) 1:2.

Крысу фиксируют в положении на спине на подогреваемой платформе монитора MouseMonitor S (INDUS Instruments, США) (Фиг. 1). Температуру ядра тела измеряют посредством установки ректального термометра, целевые значения - 36,0-37,0°С.Артериальный катетер с помощью тройника и инфузионной линии соединяют с трансдьюсером Deltran DPT-100 (Utah Medical Products, США), аналоговый сигнал давления с трансдьюсера и прибора BP-100 передают на прибор PowerLab 16/35 (ADInstruments, Австралия). Аналоговый сигнал ЭКГ трех стандартных отведений с поверхностных электродов платформы MouseMonitor S (INDUS Instruments, США) передают на прибор PowerLabl6/35 (ADInstruments, Австралия). С целью регистрации локального кожного кровотока на подошвенную поверхность задней конечности животного устанавливают оптический зонд прибора ЛАЗМА МЦ-3 (ООО НПП «ЛАЗМА», Россия). Длительность регистрации ЛДФ - 5 минут с оценкой средней величины перфузии (М, пф.ед.) С целью измерения газового состава и кислотно-основного состояния крови (КОС) производят отбор 0,2 мл артериальной крови в предварительно гепаринизированный 1,0 мл шприц. Анализ газов и КОС артериальной крови (рН, рСО₂, рО₂, BE, НСО₃, SaO₂, лактат) проводят с помощью картриджей с реактивами CG4+ для анализатора iSTAT 1 (Abbott Point of Care Inc., США).

После регистрации показателей в исходном состоянии (Фиг. 2) животному повторно вводят миорелаксант (рокурония бромид 1,4 мг/кг), после чего в группе ОК отсоединяют дыхательный контур аппарата ИВЛ. Продолжают мониторинг ЭКГ, АД и ЛДФ с целью фиксации момента остановки кровообращения. При снижении среднего АД (АДср) ниже 20 мм рт. ст.в сочетании с экстремальной брадикардией и снижением кожной перфузии до уровня «биологического нуля» ЛДФ (3-4 пф.ед.) фиксируют отсутствие эффективной перфузии тканей, и, соответственно, начало ОК. Реанимационные мероприятия начинают через 2 минуты после фиксации ОК. Возобновляют аппаратную ИВЛ с параметрами: FiO₂ 100%, f 80/мин, I:Е 1:2, Vt по номограмме для крыс. Проводят компрессию грудной клетки в переднезаднем направлении в положении крысы лежа на спине с частотой 200 в минуту. Внутривенно вводят адреналин 0,005 мг/кг. После проведения минутного цикла, компрессию грудной клетки прекращают, производят оценку сердечного ритма, АД и кожной перфузии. В случае сохраняющейся ОК продолжают реанимационные мероприятия с оценкой ритма каждую минуту. Повторное введение адреналина 0,005 мг/кг производят каждые 5 минут реанимационных мероприятий. Одновременно продолжают мониторинг ЭКГ, АД и ЛДФ. При неэффективности проводимых реанимационных мероприятий в течение 10 минут реанимационные мероприятия прекращают. При восстановлении спонтанного кровообращения (увеличение АД ср выше 50 мм рт. ст., увеличение перфузии кожи выше «биологического нуля» ЛДФ) продолжают ИВЛ 100% О2, мониторинг АД, ЭКГ, ЛДФ, инфузию раствора NaCl 0,9% со скоростью 10 мл/кг/ч. Через 5 минут после оживления проводят оценку газового состава и КОС артериальной крови, по результатам которой выполняют коррекцию параметров ИВЛ. В случае тяжелого метаболического ацидоза (рН<7,2, BE<-10 ммоль/л) проводят инфузию раствора NaHCO₃ 4% в дозе 1 ммоль/кг. Через 2 часа постреанимационного периода (после завершения измерений) проводят тест на наличие спонтанного дыхания: дыхательный контур отсоединяют от эндотрахеальной трубки и в течение 2 минут регистрируют попытки спонтанных вдохов.

В ходе эксперимента оценивали частоту сердечных сокращений (ЧСС) по данным ЭКГ, среднее АД по данным кривой АД, средний показатель перфузии (М) (Фиг. 2), а также КОС и газовый состав артериальной крови. В ходе эксперимента при индукции асфиксической остановки кровообращения (Фиг. 3. 12-14 а) по мере нарастания системной гипоксии регистрировали постепенное закономерное снижение АД и М до момента фиксации неэффективной перфузии и регистрации на ЭКГ критической брадикардии (электромеханическая диссоциация) (Фиг. 3. 12-14 б). После 2 минут полной остановки кровообращения показатели АД и ЛДФ регистрировали в течение проведения реанимационных мероприятий (Фиг. 3. 12-14 в). Реанимационные мероприятия прекращали после восстановления АД, сердечного ритма, ассоциированного с восстановлением спонтанного кровообращения. Момент восстановления спонтанного кровообращения дополнительно фиксировали на основании роста показателя кожной перфузии (Фиг. 3. 12-14 г). Наблюдение за животным с проведением аппаратной ИВЛ, регистрацией показателей АД, ЧСС, ЛДФ, оценкой КОС и газового состава артериальной крови осуществляли в течение 2 часов постреанимационного периода.

В исходном состоянии группы не отличались между собой ни по одному из исследуемых параметров. Показатели АД не имели статистической разницы между группами как на 10-й минуте постреанимационного периода, так и через 2 часа от восстановления спонтанного кровообращения. Показатели ЧСС были статистически выше в группе ОК по сравнению с ЛО как на 10-й минуте (248,4 [241,3;261,8] vs 231,1 [206,6;257,8], соответственно), так и на 120-й минуте постреанимационного периода (247,4 [236,0;261,5] vs 230,1 [192,4;249,1], соответственно). Группы не отличались между собой по показателю М на всех этапах эксперимента.

В группе ОК летальность среди животных составила 3 из 18 (16,6%). На 10-й минуте постреанимационного периода у животных группы ОК по сравнению с группой ЛО наблюдалась выраженная гиперкапния (рСО₂ 51,3 [41,2;60,9] vs 37,85 [32,75;42,4], соответственно), гиперлактатемия (Lac 5,58 [4,65;6,9] vs,135 [1,52;5,42], соответственно), а также увеличение дефицита оснований (BE -9 [-11;-8] vs -0,5 [-2,75;1,75], соответственно) с развитием смешанного ацидоза (рН 7,20 [7,13;7,23] vs 7,42 [7,40;7,43], соответственно). Также отмечалась гипероксемия в группе ОК по сравнению с группой ЛО на фоне проведения аппаратной ИВЛ с 100% фракцией кислорода (рО₂ 120 [83;139] vs 78 [64,25;90,75], соответственно). Через 2 часа от восстановления спонтанного кровообращения показатели КОС и газового состава крови между группами не имелистатистической разницы, однако различались в группе ОК в временных точках сразу после остановки кровообращения и через два часа постреанимационного периода с разрешением метаболических нарушений и нормализацией газового состава артериальной крови: рН 7,20 [7,13;7,23] vs 7,472 [7,353;7,530], соответственно, pCO₂ 51,3 [41,2;60,9] vs 33,90 [30,30;52,90], соответственно, Lac 5,58 [4,65;6,9] vs 1,47 [1,16;2,57], соответственно, BE -9 [-11;-8] vs -2,0 [-4,0;3,0], соответственно. Этот факт свидетельствовал об эффективности разработанного комплекса мер интенсивной терапии в группе ОК. У всех выживших животных группы ОК через 2 часа после восстановления спонтанного кровообращения регистрировалось спонтанное дыхание после прекращения ИВЛ, однако сохранялось угнетение сознания до уровня комы (глубокой седации).

Таким образом, комбинированная оценка показателей ЭКГ, АД и М позволили точно визуализировать и зафиксировать этапы ОК, проведения реанимационных мероприятий и восстановления спонтанного кровообращения, а разработанный комплекс мер интенсивной терапии приблизил течение постреанимационного периода в эксперименте к аналогичному периоду в клинической практике. При проведении данной серии экспериментов было показано, что применение продленной неингаляционной комбинированной анестезии, фиксация момента ОК и восстановления спонтанного кровообращения с применением ЛДФ, проведение комплекса мер интенсивной терапии в постреанимационном периоде не менее 2 часов улучшили качество моделирования асфиксической остановки кровообращения за счет уменьшения вариабельности физиологических параметров лабораторных животных, повышения воспроизводимости модели и ее схожести с особенностями течения постреанимационной болезни у людей в клинических условиях.

Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано для исследования патогенеза постреанимационной болезни после асфиксической остановки кровообращения, а также для оценки безопасности и эффективности новых методов лечения постреанимационной болезни. Выполняют общую анестезию путем внутрибрюшинного введения комбинации анестетиков, которую поддерживают до окончания комплекса мер интенсивной терапии в постреанимационном периоде. Для фиксации остановки кровообращения, а также для диагностики восстановления спонтанного кровообращения после реанимации путем мониторинга ЭКГ и АД дополнительно оценивают перфузию кожи конечности лабораторного животного с помощью лазерной допплеровской флоуметрии (ЛДФ). Длительность остановки кровообращения фиксируют от момента электромеханической диссоциации сердца, действие комбинированной общей анестезии продолжают во время индукции асфиксии, остановки кровообращения и в раннем постреанимационном периоде. Способ позволяет уточнить момент остановки и восстановления спонтанного кровообращения у крыс в условиях комбинированной общей анестезии, следствием чего является снижение вариабельности тяжести постреанимационной болезни у лабораторных животных; повысить воспроизводимость модели и ее схожесть с особенностями течения постреанимационной болезни у людей в клинических условиях. 3 ил., 1 пр.

Способ моделирования асфиксической остановки кровообращения и постреанимационной болезни, включающий индукцию асфиксии путем введения мышечного релаксанта, катетеризацию магистральных сосудов, интубацию трахеи, общую анестезию, мониторинг остановки кровообращения путем ЭКГ, измерения АД, центральной температуры тела, газового состава артериальной крови, отличающийся тем, что общую анестезию осуществляют путем внутрибрюшинного введения комбинации анестетиков и поддерживают до окончания комплекса мер интенсивной терапии в постреанимационном периоде, для фиксации остановки кровообращения, а также для диагностики восстановления спонтанного кровообращения после реанимации путем мониторинга ЭКГ и АД дополнительно оценивают перфузию кожи конечности лабораторного животного с помощью лазерной допплеровской флоуметрии (ЛДФ), длительность остановки кровообращения фиксируют от момента электромеханической диссоциации сердца, критериями которой являются: снижение среднего АД ниже 20 мм рт. ст. на протяжении не менее 10 с, экстремальная брадикардия, перфузия кожи на уровне минимальных значений ЛДФ-сигнала, действие комбинированной общей анестезии продолжают во время индукции асфиксии, остановки кровообращения и в раннем постреанимационном периоде.