Способ дифференциальной диагностики гиперплазии эндометрия и рака эндометрия Российский патент 2024 года по МПК G01N33/68 G01N33/574 A61B5/00 

Изобретение относится к области медицины, а именно к гинекологии.

Эндометрий представляет собой ткань стенки полости матки, чувствительной к гормонам и многим другими биологически активным веществам с многократно повторяющимися циклами физиологической дифференцировки и пролиферации ткани, не имеющей аналогов в организме. Структурная патология эндометрия представлена широким спектром вариантов.

Гиперплазия эндометрия (ГПЭ) занимает второе место после инфекционных процессов в ряду гинекологических заболеваний, достигая максимума частоты в переменопаузальном периоде (60-70%), при этом считается основным фактором риска злокачественного новообразования эндометрия - рака эндометрия (РЭ). (Чернуха Г.Е., Асатурова А.В., Иванов И.А., Думановская М.Р. Структура патологии эндометрия в различные возрастные периоды. Акушерство и гинекология. 2018; 8: 129-34.). Обобщенная частота ГПЭ составляет - 133 случая на 100000 женщин-лет (Reed SD, Newton KM, Clinton WL, et al. Incidence of endometrial hyperplasia. Am J Obstet Gynecol 2009; 200(6): 678.el-6. DOI: 10.1016/j.ajog.2009.02.032).

РЭ занимает 4-е место по частоте в структуре онкологической патологии у женщин, при этом пик заболеваемости приходится на возрастную группу 65 лет, около 9% случаев РЭ наблюдается в репродуктивном возрасте. За последние 18 лет абсолютное число впервые в жизни установленных диагнозов РЭ в стране увеличивается. По индексу прироста РЭ среди всех локализаций злокачественных процессов является лидером. Максимальное количество РЭ выявлено в 2019 году - 27151 случая, что на 62,5% больше, чем в 2004 г. (16707 случаев) (Рак эндометрия: динамика заболеваемости и распространенности за период 2004 -2021 гг. В России и Новокузнецке / М.А. Сабанцев, С.В. Шрамко, Н.М. Жилина (и др.) // Бюллетень медицинской науки. - 2023. - №1(29). - С. 16-23. - DOI 10.31684/25418475-2023-1-16. - EDN YUDVEL).

Риск раковой трансформации эндометрия почти всегда мультифакторный и, в первую очередь определяется морфофункциональными особенностями ГПЭ, а именно, наличием эпигенетических и генетических факторов, способных инактивировать опухольсупрессорные гены, усиливать пролиферацию, ангиогенез и подавлять апоптоз (Gallos ID, Devey J, Ganesan R, Gupta JK. Predictive ability of estrogen receptor (ER), progesterone receptor (PR), COX-2, Mlh1, and Bcl-2 expressions for regression and relapse of endometrial hyperplasia treated with LNG-IUS: a prospective cohort study. Gynecol Oncol 201; 130(1): 58-63. DOl: 10.1016/j.ygyno.2013.04.016). Известно, что этиопатогенетические звенья развития и ГПЭ и РЭ имеют множество общих точек пересечения (Jeong JY, Hwang SO, Lee В, Kim K, Kim YB, Park SH, Choi HY. Risk factors of progression to endometrial cancer in women with endometrial hyperplasia: A retrospective cohort study. PLoS One. 2020 Dec 1; 15(12): e0243064. doi: 10.1371/journal.pone.0243064. PMID: 33259545; PMCID: PMC7707482.).

Для практического здравоохранения в настоящее время остается актуальным вопрос лечения гиперпластических процессов эндометрия. Эффективность терапии обусловлена точностью результата дифференциальной диагностики и достоверностью использованных методов исследования патологических процессов полости матки, что следует рассматривать важными моментами канцеропревенции (Committee on Gynecologic Practice, Society of Gynecologic Oncology. The American College of Obstetricians and Gynecologists Committee Opinion no. 631. Endometrial intraepithelial neoplasia. Obstet. Gynecol. 2015; 125(5): 1272-8. https://dx.doi.org/10.1097/01.AOG.0000465189.50026.20.).

Современные диагностические методы, такие как компьютерная и магнитно-резонансная томография, не позволяют в полной мере дифференцировать варианты патологии эндометрия (Sbarra М, Lupinelli М, Brook OR, Venkatesan AM, Nougaret S. Imaging of Endometrial Cancer. Radiol Clin North Am. 2023 Jul; 61(4): 609-625. doi: 10.1016/j.rcl.2023.02.007. Epub 2023 Mar 27. PMID: 37169427.). В свою очередь, заключение гистологического исследования эндометрия в ряде случаев не является однозначным, а бывает и ложным. В одном из признанных в мире исследований совпадение заключений первоначального и пересмотренного экспертной группой патоморфологов совпали суммарно только в 34,9% случаях, что послужило поводом для коррекции международной классификации ГПЭ (Sherman ME, Ronnett ВМ, Ioffe OB, et al. Reproducibility of biopsy diagnoses of endometrial hyperplasia: evidence supporting a simplified classification. Int J Gynecol Pathol 200; 27(3): 318-25. DOI: 10.1097/PGP.0b013e3181659167). При использовании действующей унифицированной классификации ГПЭ (WHO Classification of Tumours of Female Reproductive Organs. 2014 г., 4-го пересмотра (Kurman RJ, Carcangiu ML, Herrington CS, Young RH. WHO Classification of Tumours of Eemale Reproductive Organs. Fourth Edition. 2014. Available at: http://apps.who.int/bookorders/anglais/detart1.jsp?codlan=1&codcol=70&codcch=4006. Accessed: 2 May 2014)) воспроизводимость патолого-анатомических диагнозов экспертов достигает 69-72% случаев (Ordi J, Bergeron С, Hardisson D, et al. Reproducibility of current classifications of endometrial endometrioid glandular proliferations: further evidence supporting a simplified classification. Histopathology 2014; 64(2): 284-92. DOI: 10.1111/his.12249). Согласно данным последнего метаанализа при гистологической верификации из 100 случаев РЭ в постменопаузе 22 случая не диагностируются, а при ГПЭ с атипией - 24 случая пропускаются. В других возрастных группах информативность методов биопсии тканей матки еще ниже (Sakna NA, Elgendi М, Salama МН, Zeinhom A, Labib S, Nabhan AF. Diagnostic accuracy of endometrial sampling tests for detecting endometrial cancer: a systematic review and meta-analysis. BMJ Open. 2023 Jun 23; 13(6): e072124. doi: 10.1136/bmjopen-2023-072124. PMID: 37355271; PMCID: PMC10314649.).

В свою очередь гистероскопия значительно увеличивает информативность верификации РЭ, в меньшей степени - ГПЭ. Специфичность гистероскопии при РЭ достигает 100%, при ГПЭ - 95%, при этом чувствительность метода чрезвычайно низка и составляет 54% и 46% соответственно (Сабанцев М.А., Баженова Л.Г., Шрамко С.В. и др. Информативность стандартных методов диагностики пролифератывных заболеваний эндометрия. Российский вестник акушера-гинеколога. 2017; 17(1): 62-6. DOI: 10.17116/rosakush201717162-66. (Sabantsev М.А., Bazhenova L.G., Shramko S.V. et al. Informativnost' standartnykh metodov diagnostiki proliferativnykh zabolevanii endometriia. Rossiiskii vestnik akushera-ginekologa. 2017; 17 (1): 62-6. DOI: 10.17116/rosakush201717162-66 (In Russian))).

Для повышения информативности гистологической дифференцировки РЭ и ГПЭ в руководстве «Европейского общества гинекологической онкологии» (ESGO) рекомендуется иммуногистохимическая оценка экспрессии PTEN (ESGO - European Society of Gynaecological Oncology. Pocket Guidelines - Endometrial Cancer. https://esgo.org/media/2015/12/ Endometrial_broz_A6_b.pdf доступ актуален 13.01.2024). Известно, что именно мутации PTEN является ведущими в канцерогенезе эндометрия на ранней стадии (Cancer Genome Atlas Research Network; Kandoth C, Schultz N, Chemiack AD, Akbani R, Liu Y, Shen H, Robertson AG, Pashtan I, Shen R, Benz CC, Yau C, Laird PW, Ding L, Zhang W, Mills GB, Kucherlapati R, Mardis ER, Levine DA. Integrated genomic characterization of endometrial carcinoma. Nature. 2013 May 2; 497(7447): 67-73. doi: 10.1038/nature12113. Erratum in: Nature. 2013 Aug 8; 500(7461): 242. PMID: 23636398; PMCID: PMC3704730.). Позже метаанализы выявили низкую диагностическую значимость иммуногистохимии с определением PTEN в дифференциальной диагностике между ГПЭ без атипии и предраковым пролиферативным процессом эндометрия (Raffonc A, Travaglino A, Saccone G, Campanino MR, Mollo A, De Placido G, Insabato L, Zullo F. Loss of PTEN expression as diagnostic marker of endometrial precancer: A systematic review and meta-analysis. Acta Obstet Gynecol Scand. 2019 Mar; 98(3): 275-286. doi: 10.1111/aogs.13513. Epub 2019 Jan 6. PMID: 30511743.).

Известен способ диагностики гиперпластических процессов и рака эндометрия основанный на количественном морфоденситометрическом исследовании изменений интерфазного хроматина ядер железистых клеток эндометрия. При данном способе в качестве биологического материала берут отпечатки эндометрия, полученные при выскабливании слизистой матки, которые отмывают от эритроцитов раствором Хенкса, фиксируют смесью Никифорова, проводят рибонуклеазную обработку, окрашивают галлоцианин-хромовыми квасцами, микроденситометрируют интерфазный хроматин железистых клеток эндометрия. На основании полученных параметров рассчитывают показатель: DF=0,00013xCompIOD1 + 3,98725xCStdOD2 + 0,00001xIOD + 0,01213xPERIMETR - 13,4409, где CompIOD1 - интегральная плотность гетерохроматина, CStdOD2 - среднеквадратическое отклонение оптической плотности гетерохроматина, IOD - интегральная оптическая плотность хроматина ядра, PERIMETR - периметр ядра. При положительном значении показателя диагносцируется рак эндометрия, при отрицательном - доброкачественные процессы эндометрия. Используемые параметры (Патент №2127429 С1 Российская Федерация, МПК G01N 33/48. способ диагностики гиперпластических процессов и рака эндометрия: №95109375/14: заявл. 06.06.1995: опубл. 10.03.1999 / Э.М. Коган, Г.М. Савельева, М.М. Умаханова (и др.). - EDN YFFFQF) (https://elibrary.ru/item.asp?id=38123095). Основным недостатком метода является несоответствие перечня заявленных патологических процессов эндометрия в названии и в результате расчета показателя, а именно определяется только наличие или отсутствие злокачественного процесса эндометрия и никак не диагностируются варианты гиперпластических процессов. При этом процесс подготовки препаратов с окраской специфическими реактивами занимает в среднем 5 часов, чрезвычайно трудоемкий и сопряжен с рядом субъективно определяемых параметров, кроме того, не применим для исследования всего соскоба эндометрия. При приготовлении препарата-отпечатка некоторые участки эндометрия могут быть просто не включены в исследование и, соответственно, не диагностированы. К настоящему моменту актуальность метода исчерпана, так как предполагает классификацию патологии эндометрия ВОЗ 1980 года.

Более современный «Способ ранней диагностики патологических состояний эндометрия» (Патент №2232397 С2 Российская Федерация, МПК G01N 33/68. Способ ранней диагностики патологических состояний эндометрия: №2002108400/15: заявл. 03.04.2002: опубл. 10.07.2004 / С.Я. Максимов, М.А. Володин; заявитель НИИ онкологии им. проф. Н.Н. Петрова. - EDN RVOGJH.) (https://elibrary.ru/item.asp?id=37940765) основан на определении содержания общей щелочной фосфатазы в аспиратах из полости матки в сочетании с результатами цитологического анализа. Аспират из полости матки промывают, центрифугируют, далее выполняют цитологическое и биохимическое исследование. При определении общей щелочной фосфатазы более 80 Е/л, термостабильной в любых количествах или гликогена в ранней эстрогеновой фазе в сочетании с результатами цитологического анализа, которые могут быть отрицательными, рекомендуют углубленное обследование пациенток, включающее диагностическое выскабливание с гистологическим исследованием. Данный способ позволяет определить только высокий риск рака эндометрия (90-92%), но не установить патологию эндометрия, а при наличии последнего требует повторного внутриматочного вмешательства, что противоречит принципам абластики.

Наиболее близким является «Способ дифференциальной диагностики гиперпластических заболеваний и рака эндометрия» (Патент №2054183 С1 Российская Федерация, МПК G01N 33/92. Способ дифференциальной диагностики гиперпластических заболеваний и рака эндометрия: №93032422/14: заявл. 07.07.1993: опубл. 10.02.1996 / М.М. Дамиров, Н.Н. Слюсаръ; заявитель Российская медицинская академия последипломного образования. - EDN VUWHSO) (https://elibrary.ru/item.asp?id=38030747). Дифференцировка основана на результате уровня фасфатидилинозитов липидной фракции цельной крови пациентки методом проточной горизонтальной хроматографии. Так при уровне от 6,0 до 6,5 нмоль фосфора фосфатидилинозитов на 1 мг белка диагностируют железистую гиперплазию эндометрия, при значении 4,2-5,0 нмоль фосфора на 1 мг белка -атипическую гиперплазию, а при значении 1,2-3,3 нмоль фосфора на 1 мг белка - рак эндометрия, точность метода составляет 94%. Данный метод не поясняет как интерпретировать промежуточные результаты диапазонов 3,4-4,1 и 5,1-5,9 нмоль фосфора на 1 мг белка. При этом методология определения результата сопряжена с очень высокой степенью риска ошибки, что объясняется многоступенчатостью аналитического процесса, не лишенного субъективности.

Назначением данного изобретения является дифференциация рака эндометрия, гиперплазии эндометрия и их отсутствие путем использования клинических характеристик и биомаркеров, просчитанных в числовом эквиваленте по мере увеличения их значимости.

Назначение достигается способом дифференциации пролиферативного процесса в эндометрии, включающим сбор анамнеза, забор крови 5 мл из локтевой вены. Определяют следующие маркеры: возраст, наличие влагалищного кровотечения неуточненного в течение года, сывороточные уровни АБГ-IgG (мкг/мл), VEGF (МЕ/мл), TNF-α (пг/мл), затем устанавливают скрининговый балл (СБ) для каждого фактора, а именно: в системе возраст, при маркере возраст до 20 лет, устанавливают СБ равным (0), при маркере возраст 20-25 лет, устанавливают СБ равным (+5), при маркере возраст 26-30 лет, устанавливают СБ равным (+10), при маркере возраст 31-35 лет, устанавливают СБ равным (+15), при маркере возраст 36-40 лет, устанавливают СБ равным (+20), при маркере возраст 41-45 лет, устанавливают СБ равным (+25), при маркере возраст 46-50 лет, устанавливают СБ равным (+30), при маркере возраст 51-55 лет, устанавливают СБ равным (+35), при маркере возраст 56-60 лет, устанавливают СБ равным (+40), при маркере возраст 61-65 лет, устанавливают СБ равным (+45), при маркере возраст 66-70 лет, устанавливают СБ равным (+50), при маркере возраст 71-75 лет, устанавливают СБ равным (+55), при маркере возраст 76 лет и старше, устанавливают СБ равным (+60); в системе наличие влагалищного кровотечения неуточненного, при маркере есть влагалищное кровотечение неуточненное, устанавливают СБ равным (+40), при маркере нет влагалищного кровотечения неуточненного, устанавливают СБ равным 0; в системе иммунологические предикторы АБГ-IgG, при маркере АБГ-IgG до 1 мкг/мл, устанавливают СБ (0), при маркере иммунологические предикторы АБГ-IgG от 1,0 до 1,5 мкг/мл, устанавливают СБ (+13), при маркере иммунологические предикторы АБГ-IgG от 1,6 до 2,0 мкг/мл, устанавливают СБ (+26), при маркере иммунологические предикторы АБГ-IgG от 2,1 до 2,5 мкг/мл, устанавливают СБ (+39), при маркере иммунологические предикторы АБГ-IgG от 2,6 до 3,0 мкг/мл, устанавливают СБ (+52), при маркере иммунологические предикторы АБГ-IgG от 3,1 до 3,5 мкг/мл, устанавливают СБ (+65), при маркере иммунологические предикторы АБГ-IgG от 3,6 до 4,0 мкг/мл, устанавливают СБ (+78), при маркере иммунологические предикторы АБГ-IgG 4,1 мкг/мл и более, устанавливают СБ (+91); при маркере иммунологические предикторы VEGF до 100 МЕ/мл, устанавливают СБ (+10), при маркере иммунологические предикторы VEGF от 100 МЕ/мл до 200 МЕ/мл, устанавливают СБ (+20), при маркере иммунологические предикторы VEGF от 200 МЕ/мл до 300 МЕ/мл, устанавливают СБ (+30), при маркере иммунологические предикторы VEGF от 300 МЕ/мл до 400 МЕ/мл, устанавливают СБ (+40), при маркере иммунологические предикторы VEGF от 400 МЕ/мл до 500 МЕ/мл, устанавливают СБ (+50), при маркере иммунологические предикторы VEGF от 500 МЕ/мл до 600 МЕ/мл, устанавливают СБ (+60), при маркере иммунологические предикторы VEGF от 600 МЕ/мл до 700 МЕ/мл, устанавливают СБ (+70), при маркере иммунологические предикторы VEGF от 700 МЕ/мл до 900 МЕ/мл, устанавливают СБ (+80), при маркере иммунологические предикторы VEGF 900 МЕ/мл и более, устанавливают СБ (+90); при маркере иммунологические предикторы TNF-α до 1,0 пг/мл, устанавливают СБ (+7), при маркере иммунологические предикторы TNF-α от 1,1 пг/мл до 2,0 пг/мл устанавливают СБ (+13), при маркере иммунологические предикторы TNF-α от 2,1 пг/мл до 3,0 пг/мл устанавливают СБ (+20), при маркере иммунологические предикторы TNF-α от 3,1 пг/мл до 4,0 пг/мл устанавливают СБ (+27), при маркере иммунологические предикторы TNF-α от 4,1 пг/мл до 5,0 пг/мл устанавливают СБ (+34), при маркере иммунологические предикторы TNF-α от 5,1 пг/мл до 6,0 пг/мл устанавливают СБ (+40), при маркере иммунологические предикторы TNF-α от 6,1 пг/мл до 7,0 пг/мл устанавливают СБ (+47), при маркере иммунологические предикторы TNF-α от 7,1 пг/мл до 8,0 пг/мл устанавливают СБ (+54), при маркере иммунологические предикторы TNF-α 8,1 пг/мл и более устанавливают СБ (+61). Далее по полученным значениям показателей если сумма баллов менее 140 - диагностируют отсутствие рака и гиперплазии эндометрия, если сумма баллов от 141 до 230 - диагностируют гиперплазию эндометрия, если сумма баллов выше 231 - диагностируют рак эндометрия.

Используются следующие показатели: возраст пациентки на момент исследования, наличие влагалищного кровотечения неуточненного в течение года, концентрация циркулирующих иммунных комплексов ассоциированного с беременностью α2-гликопротеина (АБГ-IgG), сосудисто-эндотелиальный фактор роста (VEGF), фактор некроза опухоли-α (TNF-α). Затем результату каждого фактора определяется соответствующий балл по разработанной диагностической шкале (таблица 1). Если сумма баллов по всем рассматриваемым показателям для конкретной женщины менее 140 - рака и гиперплазии эндометрия нет, если сумма баллов от 141 до 230 - высокая вероятность гиперплазии эндометрия, при сумме баллов выше 231 - высокая вероятность рака эндометрия.

Новизна способа:

1. Определены значимые факторы риска развития гиперплазии и рака эндометрия: возраст пациентки на момент исследования, наличие влагалищного кровотечения неуточненного в течение года, концентрация АБГ-IgG, VEGF, TNF-α.

2. Построена регрессионная модель диагностики гиперплазии эндометрия, рака эндометрия или их отсутствие с использованием статистически значимых клинических и иммунологических маркеров ЭЭ и ГПЭ.

3. Разработана диагностическая шкала в виде таблицы для практического применения модели диагностики рака эндометрия и гиперплазии эндометрия или их отсутствия.

Совокупность признаков изобретения позволяет получить новый технический результат, заключающийся в возможности повышения эффективности дифференциальной диагностики гиперплазии эндометрия, рака эндометрия или их отсутствия у пациентки, а также выбрать оптимальную тактику ведения и лечения.

В основу изобретения были положены результаты обследования 357 пациенток с различным статусами эндометрия: 62 случая (17,4%) РЭ, 60 (16,8%) - полипом эндометрия, 214 (59,9%) - ГПЭ, 21 (5,9%) - без структурной патологии эндометрия. Обследование помимо клинико-анамнестических данных и аппаратного, регламентированных в «Порядках оказания специализированной помощи» (Приказ Министерства здравоохранения РФ от 20 октября 2020 г. N 1130н "Об утверждении Порядка оказания медицинской помощи по профилю "акушерство и гинекология"), включало определение в сыворотке крови содержания α2-макроглобулина, ассоциированного с беременностью α2-гликопротеина и его иммунного комплекса АБГ-IgG, лактоферрина, VEGF, антитрипсина, интерферона гамма, провоспалительных цитокинов - интерлейкина-6, TNF-α, интерлейкина-8.

Содержание α2-макроглобулина, ассоциированного с беременностью α2-гликопротеина и антитрипсина в биожидкостях оценивали методом количественного ракетного иммуноэлектрофореза (Аксельсен Н., Крелль Й., Веке Б. Руководство по количественному иммуноэлектрофорезу. - М.: Мир, 1977). Уровни ИЛ-6, ИЛ-8, VEGF, TNF-α и лактоферрина исследовали методом твердофазного иммуноферментного анализа (ИФА) при помощи коммерческих тест-систем (ЗАО Вектор-Бест, Россия). Концентрации АБГ-IgG определяли при помощи авторской модификации ИФА метода (Зорина В.Н., Зорина P.M., Левченко В.Г. и др. Концентрация комплексов макроглобулин - IgG, как возможный критерий для прогнозирования гестоза и оценки степени его тяжести // Клин. лаб. диагн. - 2001. -№8. - С.48-49.).

Статистические методы

Описательная статистика переменных представлена медианой и первым-третьим квартилем. Сравнение двух групп по количественному признаку проводилось с помощью критерия Манна-Уитни, по категориальному - критерием Хи-Квадрат. Сравнение трех групп по количественному признаку проводилось с помощью критерия Краскела-Уоллиса (парные сравнения проводились критерием Двасса - Стила - Кричлоу - Флигнера), по категориальному - критерием Хи-Квадрат (парные сравнения проводились точным критерием Фишера).

Отбор признаков в модель осуществлялся с помощью алгоритма Boruta (Kursa). Построение модели проводилось с помощью порядковой логистической регрессии, приведены коэффициенты регрессионного уравнения, их 95% доверительный интервал, статистическая значимость, отношения шансов с указанием 95% доверительного интервала. Предпосылки применения метода проверялись с помощью теста Бранта.

Для оценки предсказательной способности модели рассчитывался тест отношения правдоподобия (I-R) и коэффициент детерминации Найджелкерка. Валидация модели проводилась как на тренировочном, так и на тестовом множестве, рассчитывались: точность, чувствительность, специфичность, прогностическая ценность положительного и отрицательного результата, отношение правдоподобия положительного и отрицательного результата. Также проводился ROC-анализ с расчетом показателя AUC. На обучающем множестве указанные параметры приведены с указанием 95% доверительного интервала.

Построение диагностической шкалы на основе разработанной модели проводилось с помощью пакета Rms (Harrell). Все расчеты выполнялись в статистической среде R (v. 4.3.2, лицензия GNU GPL2).

Подготовка данных и отбор признаков

В качестве основы диагностической шкалы выступает модель вероятности развития гиперплазии эндометрии и рака. Для обучения и валидации модели вся выборка была разделена на обучающую (N=149) и тестовую выборку (N=48).

На первом этапе требовалось предварительно отобрать показатели, на основе которых будет строиться прогноз. В данной работе в качестве такого метода применялся алгоритм Boruta. Данный алгоритм основан на многократном построении деревьев решений с итерационным отбором комбинаций входных переменных. Для включения в модель были отобраны следующие показатели: возраст женщины, концентрация АБГ-IgG, VEGF, TNF-α, наличие влагалищного кровотечения (метроррагия) неуточненного в течение года - таблица 2.

Для построения модели применялась порядковая логистическая регрессия. Коэффициенты модели (b), их 95% доверительный интервал (95%ДИ) и статистическая значимость (р), а также отношения шансов и их 95% доверительный интервал приведены в таблице 3. Оценки сдвига для указанной зависимой переменной приведены в таблице 4.

Полученная регрессионная модель является статистически значимой (LR=186,9, р<0,001), коэффициент детерминации Найджелкерка составил 81,0%. Площадь под ROC-кривыми (AUC составила 0,96(0,93-0,99) для группы без гиперплазии эндометрия и рака, 0,88(0,82-0,94) для гиперплазии эндометрия, 0,97(0,95-1,00) для рака эндометрия - Фиг. 1.

Показатели качества разработанной модели, рассчитанные на обучающем и тестовом множестве приведены в таблице 5.

На Фиг. 1-5 представлено:

Фиг. 1 - ROC-кривые для разработанной модели прогноза вероятности а) отсутствия гиперплазии и рака эндометрия, б) гиперплазии эндометрия, в) рака эндометрия

Фиг.2 - Возраст женщин в группах исследования (представлены индивидуальные значения, Med (Q1; Q3), min, max)

Фиг. 3 - Уровень АБГ-IgG в зависимости от наличия/отсутствия гиперплазии эндометрия и рака эндометрия (представлены индивидуальные значения, Med(Q1; Q3), min, max)

Фиг. 4 - Уровень VEGF в зависимости от наличия/отсутствия гиперплазии эндометрия и рака эндометрия (представлены индивидуальные значения, Med (Q1; Q3), min, max)

Фиг. 5 - Уровень TNF-α в зависимости от наличия/отсутствия гиперплазии эндометрия и рака эндометрия (представлены индивидуальные значения, Med(Q1; Q3), min, max)

Для применения разработанной модели на практике была разработана диагностическая шкала, представленная в виде таблицы (таблица 1). При сумме баллов менее 140 - рак и гиперплазия эндометрия отсутствуют, 141-230 - высокая вероятность гиперплазии эндометрия, выше 231 - высокая вероятность рака эндометрия.

У женщины измеряются следующие параметры: возраст, VEGF, АБГ-IgG, TNF-α и уточняется наличие влагалищного кровотечения (метроррагия) неуточненного в течение года. По разработанной диагностической шкале находится сумма баллов по всем рассматриваемым показателям (см. клинические примеры 1-3). Если сумма баллов для конкретной женщины менее 140 - рака и гиперплазии эндометрия нет, если сумма баллов от 141 до 230 - высокая вероятность гиперплазии эндометрия, при сумме баллов выше 231 - высокая вероятность рака эндометрия.

Способ осуществляется следующим образом.

У женщин с неуточненным маточным кровотечением и/или подозрением на структурную патологию полости матки по данным УЗИ органов малого таза при сборе анамнеза устанавливают наличие прогностических маркеров - возраста, наличие влагалищного кровотечения (метроррагия) неуточненного в течение последнего года и выполняют забор 5 мл крови из локтевой вены в пробирку и выполняют исследование концентраций VEGF, TNF-α методом твердофазного ИФА и АБГ-IgG при помощи модификации ИФА.

По диагностической шкале (таблица 1) вычисляют сумму баллов по всем рассматриваемым показателям, устанавливая скрининговый балл (СБ) для каждого фактора, а именно: в системе возраст, при маркере возраст до 20 лет, устанавливают СБ равным (0), при маркере возраст 20-25 лет, устанавливают СБ равным (+5), при маркере возраст 26-30 лет, устанавливают СБ равным (+10), при маркере возраст 31-35 лет, устанавливают СБ равным (+15), при маркере возраст 36-40 лет, устанавливают СБ равным (+20), при маркере возраст 41-45 лет, устанавливают СБ равным (+25), при маркере возраст 46-50 лет, устанавливают СБ равным (+30), при маркере возраст 51-55 лет, устанавливают СБ равным (+35), при маркере возраст 56-60 лет, устанавливают СБ равным (+40), при маркере возраст 61-65 лет, устанавливают СБ равным (+45), при маркере возраст 66-70 лет, устанавливают СБ равным (+50), при маркере возраст 71-75 лет, устанавливают СБ равным (+55), при маркере возраст 76 лет и старше, устанавливают СБ равным (+60), в системе наличие влагалищного кровотечения неуточненного, при маркере есть влагалищное кровотечение неуточненное, устанавливают СБ равным (+40), при маркере нет влагалищного кровотечения неуточненного, устанавливают СБ равным 0, в системе иммунологические предикторы АБГ-IgG, при маркере АБГ-IgG до 1 мкг/мл, устанавливают СБ (0), при маркере иммунологические предикторы АБГ-IgG от 1,0 до 1,5 мкг/мл, устанавливают СБ (+13), при маркере иммунологические предикторы АБГ-IgG от 1,6 до 2,0 мкг/мл, устанавливают СБ (+26), при маркере иммунологические предикторы АБГ-IgG от 2,1 до 2,5 мкг/мл, устанавливают СБ (+39), при маркере иммунологические предикторы АБГ-IgG от 2,6 до 3,0 мкг/мл, устанавливают СБ (+52), при маркере иммунологические предикторы АБГ-IgG от 3,1 до 3,5 мкг/мл, устанавливают СБ (+65), при маркере иммунологические предикторы АБГ-IgG от 3,6 до 4,0 мкг/мл, устанавливают СБ (+78), при маркере иммунологические предикторы АБГ-IgG 4,1 мкг/мл и более, устанавливают СБ (+91), при маркере иммунологические предикторы VEGF до 100 МЕ/мл, устанавливают СБ (+10), при маркере иммунологические предикторы VEGF от 100 МЕ/мл до 200 МЕ/мл, устанавливают СБ (+20), при маркере иммунологические предикторы VEGF от 200 МЕ/мл до 300 МЕ/мл, устанавливают СБ (+30), при маркере иммунологические предикторы VEGF от 300 МЕ/мл до 400 МЕ/мл, устанавливают СБ (+40), при маркере иммунологические предикторы VEGF от 400 МЕ/мл до 500 МЕ/мл, устанавливают СБ (+50), при маркере иммунологические предикторы VEGF от 500 МЕ/мл до 600 МЕ/мл, устанавливают СБ (+60), при маркере иммунологические предикторы VEGF от 600 МЕ/мл до 700 МЕ/мл, устанавливают СБ (+70), при маркере иммунологические предикторы VEGF от 700 МЕ/мл до 900 МЕ/мл, устанавливают СБ (+80), при маркере иммунологические предикторы VEGF 900 МЕ/мл и более, устанавливают СБ (+90), при маркере иммунологические предикторы TNF-α до 1,0 пг/мл, устанавливают СБ (+7), при маркере иммунологические предикторы TNF-α от 1,1 пг/мл до 2,0 пг/мл устанавливают СБ (+13), при маркере иммунологические предикторы TNF-α от 2,1 пг/мл до 3,0 пг/мл устанавливают СБ (+20), при маркере иммунологические предикторы TNF-α от 3,1 пг/мл до 4,0 пг/мл устанавливают СБ (+27), при маркере иммунологические предикторы TNF-α от 4,1 пг/мл до 5,0 пг/мл устанавливают СБ (+34), при маркере иммунологические предикторы TNF-α от 5,1 пг/мл до 6,0 пг/мл устанавливают СБ (+40), при маркере иммунологические предикторы TNF-α от 6,1 пг/мл до 7,0 пг/мл устанавливают СБ (+47), при маркере иммунологические предикторы TNF-α от 7,1 пг/мл до 8,0 пг/мл устанавливают СБ (+54), при маркере иммунологические предикторы TNF-α 8,1 пг/мл и более устанавливают СБ (+61). Если по полученным значениям показателей сумма баллов для конкретной женщины менее 140 - диагностируют отсутствие рака и гиперплазии эндометрия, если по полученным значениям показателей сумма баллов от 141 до 230 диагностируют гиперплазию эндометрия, при сумме баллов по полученным значениям показателей выше 231 - диагностируют рак эндометрия.

Клинические примеры.

Пример 1: Пациентка А. - 40 лет, в анамнезе жалобы на ациклические кровотечения, по данным УЗИ ОМТ достоверных критериев патологии эндометрия не выявлено. Результаты дополнительного исследования: VEGF - 87 МЕ/мл, АБГ-IgG - 2,8 мкг/мл, TNF-α - 4.5 пг/мл. По диагностической шкале (таблица 1) находим баллы, соответствующие показателям женщины: 40 лет - входит в диапазон 36-40 лет, что соответствует 20 баллам, наличие ациклических кровотечений - 40 баллов, уровень VEGF 87 МЕ/мл входит в диапазон «до 100» - 10 баллов, уровень АБГ-IgG 2,8 мкг/мл входит в диапазон «2,6-3,0» - 52 балла, уровень TNF-α 4.5 пг/мл в диапазоне «4,1 - 5» - 34 балла. Находим сумму баллов по всем факторам: 20 баллов (за возраст)+40 баллов (метроррагия)+10 баллов (за VEGF)+52 баллов (за АБГ-IgG)+34 балла (за TNF-α)=156 баллов. Полученная сумма баллов выше 140, но ниже 230, что соответствует высокой вероятности наличия у женщины гиперплазии эндометрия, что явилось показанием для гистероскопии, биопсии эндометрия. Результаты гистологического исследования подтверди наличие гиперплазии эндометрия и обоснованность оперативного вмешательства

Практическая польза и клиническая значимость при использовании модели в данном варианте заключается в том, что позволяет назначить адекватную гормональную терапию в день операции еще до получения результата гистологического исследования, что повышает на порядок эффективность и переносимость терапии.

Пример 2: Пациентка Б. - 60 лет, постменопауза (жалоб на кровомазание нет). По данным УЗИ полип эндометрия, выполнена гистероскопия, полипэктомия. Результат гистологического исследования свидетельствует о наличии полипа эндометрия, в соскобе кровь, слизь. При этом уровень VEGF - 648 МЕ/мл, АБГ-IgG - 4,2 мкг/мл, TNF-α - 7,1 пг/мл. По разработанной номограмме находим баллы, соответствующие каждому фактору риска, соответствие баллов каждому фактору находим по диагностической шкале (таблица 1). Возрасту 60 лет соответствует балл - 40, отсутствию кровомазания в менопаузе - 0 баллов, уровню VEGF 648 МЕ/ мл+70 баллов, уровню АБГ- IgG 4,2 мкг/мл+91 балл, TNF-α 7.1 пг/мл+54 балла. Находим сумму баллов по всем факторам: 40 баллов (за возраст)+0 баллов (за отсутствие метроррагии)+91 баллов (за VEGF)+80 баллов (за АБГ-IgG)+54 балла (за TNF-α)=255 баллов. Находим указанную сумму баллов на шкале «Сумма баллов», число 255 попадает в зону высокой вероятности РЭ (выше 231 баллов). Рекомендован дополнительно пересмотр стекол гистологического препарата в онкологическом диспансере. Заключение пересмотра - высокодифференцированная аденокарцинома эндометрия. Рекомендовано онкологом: контрольная биопсия эндометрия тканей матки.

В этом примере разноречивые результаты гистологического (отсутствие рака) и лабораторного методов (высокая вероятность РЭ) позволили обосновано склониться к повторной гистероскопии, прицельной биопсии и, таким образом, не пропустить РЭ.

Пример 3: Пациентка В. - 27 лет, обратилась к гинекологу по причине межменструального однократного кровотечения, в дополнение к стандартному обследованию выполнено иммунологическое исследование: АБГ-IgG - 1,2 мкг/мл, VEGF - 240 МЕ/мл, TNF-α - 1,4 пг/мл. По диагностической шкале (таблица) находим баллы, соответствующие показателям пациентки: 27 лет - входит в диапазон 26-30 лет, что соответствует 10 баллам, наличие маточного кровотечения - 40 баллов уровень VEGF 240 МЕ/мл входит в диапазон «200-300» - 30 баллов, уровень АБГ-IgG 1,2 мкг/мл входит в диапазон «1,0-1,5» - 13 баллов, уровень TNF-α 1,4 пг/мл в диапазоне «1,1-2» - 13 баллов. Находим сумму баллов по всем факторам: 10 баллов (за возраст)+40 баллов (метроррагия)+30 баллов (за VEGF)+13 баллов (за АБГ-IgG)+13 баллов (за TNF-α)=106 баллов. Полученная сумма баллов менее 140, что с высокой вероятностью исключает у женщины пролиферативного типа патологию эндометрия и обуславливает назначение консервативной кровеостанавливающей терапии, исключая показания для хирургического гемостаза.

Использование изобретения заключающееся в возможности повышения эффективности дифференциальной диагностики гиперплазии эндометрия, рака эндометрия или их отсутствия у пациентки, а также выборе оптимальной тактики ведения и лечения, исключая при этом необоснованные хирургические вмешательства и ложноотрицательные гистологические результаты.

Изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии, и может быть использовано для дифференциальной диагностики гиперплазии эндометрия и рака эндометрия. Проводят сбор анамнеза, забор крови. Определяют следующие факторы: возраст, наличие влагалищного кровотечения неуточненного в течение года, сывороточные уровни иммунного комплекса α2-гликопротеина с IgG (АБГ-IgG), мкг/мл, VEGF, МЕ/мл, TNF-α, пг/мл. Устанавливают скрининговый балл (СБ) для каждого фактора, а именно: при возрасте: до 20 лет – 0 СБ, 20-25 лет – 5 СБ, 26-30 лет – 10 СБ, 31-35 лет – 15 СБ, 36-40 лет – 20 СБ, 41-45 лет – 25 СБ, 46-50 лет – 30 СБ, 51-55 лет – 35 СБ, 56-60 лет – 40 СБ, 61-65 лет – 45 СБ, 66-70 лет – 50 СБ, 71-75 лет – 55 СБ, 76 лет и старше – 60 СБ; при наличии влагалищного кровотечения неуточненного: есть влагалищное кровотечение неуточненное – 40 СБ, нет влагалищного кровотечения неуточненного – 0 СБ; при АБГ-IgG: до 1 мкг/мл – 0 СБ, от 1,0 до 1,5 мкг/мл – 13 СБ, от 1,6 до 2,0 мкг/мл – 26 СБ, от 2,1 до 2,5 мкг/мл – 39 СБ, от 2,6 до 3,0 мкг/мл – 52 СБ, от 3,1 до 3,5 мкг/мл – 65 СБ, от 3,6 до 4,0 мкг/мл – 78 СБ, 4,1 мкг/мл и более – 91 СБ; при VEGF: до 100 МЕ/мл – 10 СБ, от 100 до 200 МЕ/мл – 20 СБ, от 200 до 300 МЕ/мл – 30 СБ, от 300 до 400 МЕ/мл – 40 СБ, от 400 до 500 МЕ/мл – 50 СБ, от 500 до 600 МЕ/мл – 60 СБ, от 600 до 700 МЕ/мл – 70 СБ, от 700 до 900 МЕ/мл – 80 СБ, 900 МЕ/мл и более – 90 СБ; при TNF-α: до 1,0 пг/мл – 7 СБ, от 1,1 до 2,0 пг/мл – 13 СБ, от 2,1 до 3,0 пг/мл – 20 СБ, от 3,1 до 4,0 пг/мл – 27 СБ, от 4,1 до 5,0 пг/мл – 34 СБ, от 5,1 до 6,0 пг/мл – 40 СБ, от 6,1 до 7,0 пг/мл – 47 СБ, от 7,1 до 8,0 пг/мл – 54 СБ, 8,1 пг/мл и более – 61 СБ. Полученные значения факторов суммируют. При сумме баллов менее 140 диагностируют отсутствие рака и гиперплазии эндометрия. При сумме баллов от 141 до 230 диагностируют гиперплазию эндометрия. При сумме баллов выше 231 диагностируют рак эндометрия. Способ обеспечивает возможность повышения эффективности дифференциальной диагностики гиперплазии эндометрия, рака эндометрия или их отсутствия у пациентки, а также выбора оптимальной тактики ведения и лечения, за счет использования клинических характеристик и биомаркеров, просчитанных в числовом эквиваленте по мере увеличения их значимости. 5 ил., 5 табл., 3 пр.

Способ дифференциальной диагностики гиперплазии эндометрия и рака эндометрия, включающий сбор анамнеза, забор крови, отличающийся тем, что определяют следующие факторы: возраст, наличие влагалищного кровотечения неуточненного в течение года, сывороточные уровни иммунного комплекса α2-гликопротеина с IgG (АБГ-IgG), мкг/мл, VEGF, МЕ/мл, TNF-α, пг/мл, затем устанавливают скрининговый балл (СБ) для каждого фактора, а именно:

при возрасте: до 20 лет – 0 СБ, 20-25 лет – 5 СБ, 26-30 лет – 10 СБ, 31-35 лет – 15 СБ, 36-40 лет – 20 СБ, 41-45 лет – 25 СБ, 46-50 лет – 30 СБ, 51-55 лет – 35 СБ, 56-60 лет – 40 СБ, 61-65 лет – 45 СБ, 66-70 лет – 50 СБ, 71-75 лет – 55 СБ, 76 лет и старше – 60 СБ;

при наличии влагалищного кровотечения неуточненного: есть влагалищное кровотечение неуточненное – 40 СБ, нет влагалищного кровотечения неуточненного – 0 СБ;

при АБГ-IgG: до 1 мкг/мл – 0 СБ, от 1,0 до 1,5 мкг/мл – 13 СБ, от 1,6 до 2,0 мкг/мл – 26 СБ, от 2,1 до 2,5 мкг/мл – 39 СБ, от 2,6 до 3,0 мкг/мл – 52 СБ, от 3,1 до 3,5 мкг/мл – 65 СБ, от 3,6 до 4,0 мкг/мл – 78 СБ, 4,1 мкг/мл и более – 91 СБ;

при VEGF: до 100 МЕ/мл – 10 СБ, от 100 до 200 МЕ/мл – 20 СБ, от 200 до 300 МЕ/мл – 30 СБ, от 300 до 400 МЕ/мл – 40 СБ, от 400 до 500 МЕ/мл – 50 СБ, от 500 до 600 МЕ/мл – 60 СБ, от 600 до 700 МЕ/мл – 70 СБ, от 700 до 900 МЕ/мл – 80 СБ, 900 МЕ/мл и более – 90 СБ;

при TNF-α: до 1,0 пг/мл – 7 СБ, от 1,1 до 2,0 пг/мл – 13 СБ, от 2,1 до 3,0 пг/мл – 20 СБ, от 3,1 до 4,0 пг/мл – 27 СБ, от 4,1 до 5,0 пг/мл – 34 СБ, от 5,1 до 6,0 пг/мл – 40 СБ, от 6,1 до 7,0 пг/мл – 47 СБ, от 7,1 до 8,0 пг/мл – 54 СБ, 8,1 пг/мл и более – 61 СБ;

далее полученные значения факторов суммируют;

при сумме баллов менее 140 диагностируют отсутствие рака и гиперплазии эндометрия, при сумме баллов от 141 до 230 диагностируют гиперплазию эндометрия, при сумме баллов выше 231 диагностируют рак эндометрия.