Применение 1-карбамотиоил-5-(2-карбамотиоилгидразинил)-3-(4-хлорфенил)-4,5-дигидро-1Н-пиразол-5-карбоновой кислоты в качестве средства, обладающего противомикробной активностью в отношении культуры S. Aureus Российский патент 2024 года по МПК A61K31/415 A61P31/04 C07D231/06 

Изобретение относится к области органической химии, а именно к применению индивидуальных соединений класса пиразолинкарбоновых кислот в качестве средств, обладающих противомикробной активностью, которые могут быть использованы в качестве исходных продуктов для синтеза новых гетероциклических систем и в фармакологии.

Аналог заявленного соединения – 1-карбамотиоил-5-(2-карбамо- тиоилгидразинил)-3-(4-бромфенил)-4,5-дигидро-1Н-пиразол-5-карбоновая кислота и способ его синтеза известны из уровня техники. Аналог заявленного соединения является продуктом взаимодействия 4-(4-бромфенил)-2,4- диоксобутановой кислоты 1 с тисемикарбазидом (Andreeva, A.A.; Dmitriev, M.V.; Maslivets, A.N. 3-(4-Bromophenyl)-1-carbamothioyl-5-(2- carbamothioylhydrazinyl)-4,5-dihydro-1H-pyrazole-5-carboxylic Acid. Molbank 2024, 2024, M1757. https://doi.org/10.3390/M1757), образующимся по следующей схеме:

Схема 1

Противомикробная активность 1-карбамотиоил-5-(2-карба- мотиоилгидразинил)-3-(4-бромфенил)-4,5-дигидро-1Н-пиразол-5-карбоновой кислоты не была исследована.

Задачей изобретения является изыскание новых соединений, обладающих противомикробной активностью, и расширение арсенала средств воздействия на живой организм.

Поставленная задача решается тем, что соединение аналог 1- карбамотиоил-5-(2-карбамотиоилгидразинил)-3-(4-бромфенил)-4,5-дигидро- 1Н-пиразол-5-карбоновой кислоты, а именно 1-карбамотиоил-5-(2- карбамотиоилгидразинил)-3-(4-хлорфенил)-4,5-дигидро-1Н-пиразол-5- карбоновая кислота проявляет высокую противомикробную активность в концентрации 1000 мкг/мл в отношении культуры S. aureus.

Синтезируют заявляемое соединение путем взаимодействия 4-(4- хлорфенил)-2,4-диоксобутановой кислоты 3 с тисемикарбазидом с последующим выделением целевого продукта 4 по следующей схеме:

Схема 2

Процесс ведут при температуре 78-79°С, а в качестве растворителя используют этанол.

Изобретение иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1. 1-Карбамотиоил-5-(2-карбамотиоилгидразинил)-3-(4-

хлорфенил)-4,5-дигидро-1Н-пиразол-5-карбоновая кислота (4).

Смесь 15.6 ммоль 4-(4-хлорфенил)-2,4-диоксобутановой кислоты и 31.2 ммоль тиосемикарбазида в 30 мл EtOH кипятили с обратным холодильником

2 ч, затем реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры. Образовавшийся осадок отфильтровывали и перекристаллизовывали из этанола с получением целевого соединения. Выход 85%, т.пл. 251-253°С. Соединение (4) C₁₂H₁₃ClN₆O₂S₂.

Найдено, %: C 38.70, H 3.54, N 22.52.

Вычислено, %: C 38.66, H 3.51, N 22.54

Соединение (4) – бесцветное высокоплавкое кристаллическое вещество, растворимое в ДМСО, ДМФА, ацетоне, этилацетате, ацетонитриле, спиртах, труднорастворимое в хлороформе, толуоле и ароматических углеводородах, нерастворимое в алканах и воде. Устойчиво при хранении в обычных условиях.

В ИК спектре соединения (4), записанном в виде пасты в вазелиновом масле, присутствуют полосы валентных колебаний групп NН₂, NН и ОН в виде нескольких полос в области 3370, 3336 и 3264 см^-1 и карбонила карбоксильной группы при 1733 см^-1.

В спектре ЯМР ¹Н соединения (4), записанном в растворе в ДМСО-d₆, кроме сигналов протонов ароматических колец присутствуют дублеты двух протонов метиленовой группы при 3.50 м.д. и при 3.66 м.д., синглет протона группы CNH при 6.33 м.д., уширенные синглеты двух протонов группы NHNHCSNH₂ при 7.60 м.д. и при 7.97 м.д., два дублета протонов ароматического кольца при 7.54 м.д. и при 7.87 м.д., дублет двух протонов группы NNCSNH₂ при 8.18 м.д., а также синглет протона группы NHCS при

8.38 м.д. и уширенный синглет протона карбоксильной группы при 13.47 м.д.

Пример 2. Фармакологическое исследование соединения (4) на наличие противомикробной активности.

Для исследований использовали общепринятый метод двукратных серийных разведений в жидкой питательной среде микрометодом [Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ - М.: И-во Медицина, 2005]. Готовили исходные разведения микроорганизмов в физиологическом растворе из суточной агаровой культуры по оптическому стандарту мутности (ОСМ) на 5 МЕ с использованием денситометра. После ряда разведений конечная концентрация клеток в опыте составляла 2,5×10⁵ клеток/мл.

Противомикробные свойства химического вещества изучали на 3-х коллекционных условно-патогенных штаммах микроорганизмов: Staphylococcus aureus (АТСС 25923), Escherichia coli (АТСС 25922), Candida albicans (РКПГY 1353/1277), полученных в ФГБУ «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Минздравсоцразвития России. Факт ингибирования (торможения роста) микробных клеток в разведениях препаратов отмечали после 20-ти часового термостатирования при 37°C. Окончательные результаты фиксировали через 7 суток после высева на скошенный агар РПА. Максимально испытанная концентрация соединений соответствовала 1000,0 мкг/мл. Противомикробную (ингибирующую, бактерицидную) активность оценивали по минимально действующей концентрации.

Анализ полученных данных показал:

• соединение 4 обладает ингибирующим действием в отношении культуры S. aureus в концентрации 1000,0 мкг/мл;

Предлагаемое вещество 1-карбамотиоил-5-(2-карбамотиоилгидразинил)- 3-(4-хлорфенил)-4,5-дигидро-1Н-пиразол-5-карбоновая кислота (4) обладает фармакологической активностью, а именно противомикробной активностью в отношении культуры S. aureus и может найти применение в фармакологии в качестве потенциального лекарственного средства.

Изобретение относится к области органической химии, а именно к применению 1-карбамотиоил-5-(2-карбамотиоилгидразинил)-3-(4-хлорфенил)-4,5-дигидро-1Н-пиразол-5-карбоновой кислоты формулы

в качестве средства, обладающего противомикробной активностью в отношении культуры S. aureus. Технический результат заключается в изыскании новых соединений, обладающих противомикробной активностью, и расширении арсенала средств воздействия на живой организм. 1 табл., 2 пр.

Применение 1-карбамотиоил-5-(2-карбамотиоилгидразинил)-3-(4-хлорфенил)-4,5-дигидро-1Н-пиразол-5-карбоновой кислоты формулы

в качестве средства, обладающего противомикробной активностью в отношении культуры S. aureus.