ТЕРАПЕВТИЧЕСКИЕ КОМБИНАЦИИ, СОДЕРЖАЩИЕ ИММУНОКОНЪЮГАТЫ АНТИ-CD123 Российский патент 2024 года по МПК A61K39/395 A61K31/635 A61K31/706 A61K47/68 A61K45/06 A61P35/00 

Область изобретения

[1] Область изобретения в целом относится к комбинациям иммуноконъюгата анти-CD123 с гипометилирующим агентом (ГМА) и/или антагонистом В-клеточного лейкоза/лимфомы-2 (BCL-2), а также к использованию комбинаций в лечении гематологических злокачественных опухолей.

Уровень техники

[2] Рак является одной из основных причин смерти в развитых странах мира: только в США рак диагностируется более чем у одного миллиона человек и от него умирают 500000 человек в год. По оценкам, более чем у каждого третьего человека в течение жизни развивается та или иная форма рака.

[3] CD123 является альфа-субъединицей рецептора интерлейкина-3 (IL-3Rα). Экспрессия CD123 на нормальных гемопоэтических стволовых клетках низкая (Testa et al., BiomarkR.es., 10;2(1):4.(2014), Jordan et al., Leukemia, 14(10): 1777-84 (2000)). Однако CD123 сверхэкспрессируется во многих гематологических злокачественных опухолях как миелоидного, так и лимфоидного происхождения, включая острый миелоидный лейкоз (ОМЛ), миелодиспластический синдром (МДС), В-клеточный острый лимфобластный лейкоз (В-ОЛЛ), хронический миелоидный лейкоз в бластном кризе/фазе (ХМЛ-БФ) и бластому плазмоцитоидных дендритных клеток (БПДК) (Testa 2014). Интерлейкин-3 вырабатывается активированными Т-лимфоцитами. IL-3 вместе с другими факторами роста стимулирует развитие и опосредует выживание широкого спектра гемопоэтических клеток в костном мозге (Testa 2014). Уровень CD123 в нормальных гемопоэтических стволовых клетках очень низок, но ранние обычные миелоидные предшественники экспрессируют более высокий уровень CD123 (Testa 2014, Jordan 2000). Средняя или высокая экспрессия CD123 в нормальных тканях ограничена редкими популяциями лейкоцитов, такими как плазмоцитоидные дендритные клетки и базофилы (Jordan 2000, Testa 2014).

[4] Острый миелоидный лейкоз является наиболее распространенной формой острого лейкоза среди взрослых и составляет наибольшее число смертей от лейкозов в США. В 2017 году, исходя из оценок, АМЛ будет диагностирован у 21 380 человек в год, а 10 590 пациентов умрут от этого заболевания (Siegel et al., СА Cancer J Clin. 2017; 67(l):7-30 (2017)). Средний возраст на момент постановки диагноза составляет 66 лет. По имеющимся данным, химиотерапия первой линии при ОМЛ вызывает полный ответ (CR) у 70%-80% пациентов в возрасте 60 лет и моложе и около у 50% пациентов старшего возраста. «Подходящие» пациенты оцениваются как способные переносить интенсивное лечение, они часто моложе (<60 лет) и обычно получают от одного до двух циклов индукции с «7+3», комбинацией цитарабина и антрациклина, обычно даунорубицина. После этого такие здоровые пациенты могут получать цитарабин в высоких дозах в течение одного или нескольких циклов и могут получить трансплантацию стволовых клеток. Стандартная индукционная и постиндукционная терапия приводит к средней продолжительности ремиссии около одного года и потенциальному излечению у 25%-35% пациентов. «Неподходящие» пациенты, часто пожилого возраста, обычно получают венетоклакс, азацитидин, гипометилирующий препарат.У большинства пациентов с ОМЛ в конечном итоге возникает рецидив, а спасительные схемы лечения ОМЛ дают плохие результаты при значительной токсичности. Таким образом, необходимы новые способы лечения с ограниченной токсичностью в этой популяции больных с рецидивами.

[5] Бластная опухоль из плазмоцитоидных дендритных клеток (БПДК) - это редкая, агрессивная гематологическая злокачественная опухоль, происходящая из предшественников миелоидных дендритных клеток, которая часто проявляется поражением кожи в дополнение к поражению лимфатических узлов, крови и костного мозга. Бласты БПДК характеризуются экспрессией CD4, CD56 и CD123 среди других маркеров, бласты БПДК экспрессируют высокие уровни CD123. К сожалению, не существует стандарта лечения БПДК, при этом в первой линии лечения используются схемы лечения как острого лимфобластного лейкоза (ОЛЛ), так и ОМЛ. Несмотря на показатели CR 47%-86% в первой линии заболевания, медиана общей выживаемости составляет около 12-16 месяцев. Большинство пациентов с БПДК в конечном итоге имеют рецидивы при отсутствии стандартных способов лечения.

[6] Острый лимфобластный лейкоз - это редкая, агрессивная гематологическая злокачественная опухоль, происходящая из лимфоидных предшественников, которая часто проявляется с поражением лимфатических узлов, крови и костного мозга. Бласты В-клеточного острого лимфобластного лейкоза и некоторые бласты Т-клеточного острого лимфобластного лейкоза экспрессируют CD123 на уровне, аналогичном бластам ОМЛ. Несмотря на высокие показатели первоначальной ремиссии, долгосрочная выживаемость составляет 35%-40% у пациентов моложе 60 лет и менее 10% у пожилых пациентов (Goldstone 2008). У пациентов с рецидивом ОЛЛ есть несколько вариантов химиотерапии, а также иммунотерапия с использованием одобренного Управлением по контролю за продуктами и лекарствами США анти-CD19 биспецифического блинатумомаба. Однако долгосрочная выживаемость этих пациентов остается низкой.

[7] Учитывая неспособность имеющихся в настоящее время терапевтических средств лечить многие гематологические злокачественные опухоли, существует необходимость в более эффективных вмешательствах.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[8] В настоящем документе представлены комбинации анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) с ингибитором BCL-2 и/или гипометилирующим агентом. Также в настоящем документе представлены способы лечения пациента с раком с использованием такой комбинации.

[9] В некоторых случаях способ лечения гематологической злокачественной опухоли у субъекта, включающий введение нуждающемуся в этом субъекту иммуноконъюгата, связывающегося с CD123, где иммуноконъюгат содержит антитело или его антиген-связывающий фрагмент, содержащее вариабельную область тяжелой цепи CDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5; вариабельную область тяжелой цепи CDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6; и вариабельную область тяжелой цепи CDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 7; и вариабельную область легкой цепи CDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 8; вариабельную область легкой цепи CDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 9; и вариабельную область легкой цепи CDR3, содержащую аминокислотную последовательность: SEQ ID NO: 10, и ингибитор BCL-2, гипометилирующий агент или их комбинацию. В некоторых случаях иммуноконъюгат вводят в комбинации с ингибитором BCL-2. В некоторых случаях иммуноконъюгат вводят в комбинации с гипометилирующим агентом. В некоторых случаях иммуноконъюгат вводят в комбинации с ингибитором BCL-2 и гипометилирующим агентом

[10] В некоторых случаях антитело или антиген-связывающий фрагмент содержит VH, включающий аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 1, и/или VL, включающий аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 2. В некоторых случаях антитело или антиген-связывающий фрагмент включает константную область тяжелой цепи и/или константную область легкой цепи. В некоторых случаях антитело или антиген-связывающий фрагмент содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 3, и/или легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 4.

[11] В некоторых случаях иммуноконъюгат включает цитотоксический агент. В некоторых случаях цитотоксический агент представляет собой ДНК-алкилирующий агент. В некоторых случаях ДНК-алкилирующий агент представляет собой индолинобензодиазепиновый (IGN) ДНК-алкилятор. В некоторых случаях иммуноконъюгат включает пептидный линкер. В некоторых случаях иммуноконъюгат представляет собой IMGN632. В некоторых случаях иммуноконъюгат вводят в фармацевтической композиции, содержащей иммуноконъюгата со следующей структурой.

где

G4723A содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 3, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 4.

[12] В некоторых случаях введение препарата является терапией первой линии. В некоторых случаях иммуноконъюгат вводят внутривенно.

[13] В некоторых случаях введение иммуноконъюгата с ингибитором BCL-2, гипометилирующим агентом или их комбинацией дает синергический эффект. В некоторых случаях введение иммуноконъюгата и ингибитора BCL-2 не вызывает большей токсичности, чем введение только иммуноконъюгата или только ингибитора BCL-2. В некоторых случаях введение иммуноконъюгата и ингибитора гипометилирующего агента не вызывает большей токсичности, чем введение только иммуноконъюгата или только гипометилирующего агента, в некоторых случаях введение иммуноконъюгата, ингибитора BCL-2 и гипометилирующего агента не вызывает большей токсичности, чем введение иммуноконъюгата, ингибитора BCL-2 и/или гипометилирующего агента.

[14] В некоторых случаях иммуноконъюгат вводят однократно в течение 21-дневного цикла. В некоторых случаях иммуноконъюгат вводят в дозе от около 0,015 мг/кг до около 0,09 мг/кг однократно в 21-дневном цикле. В некоторых случаях иммуноконъюгат вводят в дозе от около 0,015 мг/кг до около 0,135 мг/кг однократно в течение 21-дневного цикла. В некоторых случаях доза составляет около 0,015 мг/кг, около 0,045 мг/кг или около 0,09 мг/кг. В некоторых случаях доза составляет около 0,015 мг/кг, около 0,045 мг/кг или около 0,135 мг/кг. В некоторых случаях доза составляет около 0,045 мг/кг. В некоторых случаях доза составляет около 0,03 мг/кг.

[15] В некоторых случаях иммуноконъюгат вводят три раза в течение 21-дневного цикла. В некоторых случаях общее количество иммуноконъюгата, вводимого в течение 21 -дневного цикла, составляет около 0,045 мг/кг, около 0,09 мг/кг или около 0,18 мг/кт. В некоторых случаях общее количество иммуноконъюгата, вводимого в течение 21-дневного цикла составляет около 0,135 мг/кг. В некоторых случаях от около 0,015 мг/кг до около 0,06 мг/кг иммуноконъюгата вводят в каждый из трех моментов 21-дневного цикла. В некоторых случаях около 0,015 мг/кг, около 0,03 мг/кг или около 0,06 мг/кг иммуноконъюгата вводят в каждый из трех моментов 21-дневного цикла. В некоторых случаях около 0,045 мг/кг вводят в каждый из трех моментов 21-дневного цикла. В некоторых случаях первое введение иммуноконъюгата происходит на 7-й день 21-дневного цикла. В некоторых случаях второе введение иммуноконъюгата происходит на 10-й день 21-дневного цикла. В некоторых случаях третье введение иммуноконъюгата происходит на 14-й день 21-дневного цикла. В некоторых случаях первое, второе и третье введение осуществляется, соответственно, на 7, 10 и 14 день 21-дневного цикла.

[16] В некоторых случаях ингибитором BCL-2 является венетоклакс. В некоторых случаях ингибитор BCL-2 вводят в дозе 400 мг. В некоторых случаях ингибитором BCL-2 является венетоклакс. В некоторых случаях ингибитор BCL-2 вводят в дозе 200 мг.

[17] В некоторых случаях ингибитор BCL-2 вводят ежедневно в течение 21-дневного цикла. В некоторых случаях ингибитор BCL-2 назначается в дозе 100 мг в первый день 21-дневного цикла, в дозе 200 мг во второй день 21-дневного цикла и в дозе 400 мг на 3-21 день 21-дневного цикла. В некоторых случаях ингибитор BCL-2 вводят в дозе 100 мг в первый день 21-дневного цикла, в дозе 200 мг во второй день 21-дневного цикла и в дозе 400 мг в дни 3-7 или 3-14 21-дневного цикла. В некоторых случаях ингибитор BCL-2 вводят в дозе 100 мг в первый день 21-дневного цикла и в дозе 200 мг в дни 2-21, 2-14 или 2-7 21-дневного цикла. В некоторых случаях ингибитор BCL-2 вводят в дни 1-7 21-дневного цикла. В некоторых случаях ингибитор BCL-2 вводят в дни 1-8 21-дневного цикла. В некоторых случаях ингибитор BCL-2 вводят в дни 1-14 21-дневного цикла. В некоторых случаях ингибитор BCL-2 вводят в дни 1-18 21-дневного цикла. В некоторых случаях ингибитор BCL-2 вводят в дни 1-21 21-дневного цикла. В некоторых случаях ингибитор BCL-2 вводят перорально.

[18] В некоторых случаях введение иммуноконъюгата начинают через шесть дней после начала введения ингибитора BCL-2.

[19] В некоторых случаях иммуноконъюгат вводят однократно в течение 28-дневного цикла. В некоторых случаях иммуноконъюгат вводят в дозе от около 0,015 мг/кг до около 0,09 мг/кг однократно в 28-дневном цикле. В некоторых случаях иммуноконъюгат вводят в дозе от около 0,015 мг/кг до около 0,135 мг/кг однократно в течение 28-дневного цикла. В некоторых случаях доза составляет около 0,015 мг/кг, около 0,045 мг/кг или около 0,09 мг/кг. В некоторых случаях доза составляет около 0,015 мг/кг, около 0,045 мг/кг или около 0,135 мг/кг. В некоторых случаях доза составляет около 0,045 мг/кг. В некоторых случаях доза составляет около 0,03 мг/кг.

[20] В некоторых случаях иммуноконъюгат вводят три раза в течение 28-дневного цикла. В некоторых случаях общее количество иммуноконъюгата, вводимого в течение 28-дневного цикла, составляет около 0,045 мг/кг, около 0,09 мг/кг или около 0,18 мг/кг. В некоторых случаях общее количество иммуноконъюгата, вводимого в течение 28-дневного цикла составляет около 0,135 мг/кг. В некоторых случаях от около 0,015 мг/кг до около 0,06 мг/кг иммуноконъюгата вводят в каждый из трех моментов 28-дневного цикла. В некоторых случаях около 0,015 мг/кг, около 0,03 мг/кг или около 0,06 мг/кг иммуноконъюгата вводят в каждый из трех моментов 28-дневного цикла. В некоторых случаях около 0,135 мг/кг иммуноконъюгата вводят в каждый из трех моментов 28-дневного цикла. В некоторых случаях первое введение иммуноконъюгата происходит на 7-й день 28-дневного цикла. В некоторых случаях второе введение иммуноконъюгата происходит на 10-й день 28-дневного цикла. В некоторых случаях третье введение иммуноконъюгата происходит на 14-й день 28-дневного цикла. В некоторых случаях первое, второе и третье введение иммуноконъюгата осуществляется на 7, 10 и 14 день, соответственно, 28-дневного цикла.

[21] В некоторых случаях ингибитором BCL-2 является венетоклакс. В некоторых случаях ингибитор BCL-2 вводят в дозе 400 мг. В некоторых случаях ингибитор BCL-2 вводят в дозе 200 мг.

[22] В некоторых случаях ингибитор BCL-2 вводят ежедневно в течение 28-дневного цикла. В некоторых случаях ингибитор BCL-2 назначается в дозе 100 мг в первый день 28-дневного цикла, в дозе 200 мг во второй день 28-дневного цикла и в дозе 400 мг на 3-28 день 28-дневного цикла. В некоторых случаях ингибитор BCL-2 вводят в дозе 100 мг в первый день 28-дневного цикла, в дозе 200 мг во второй день 28-дневного цикла и в дозе 400 мг в дни 3-7 или 3-14 28-дневного цикла. В некоторых случаях ингибитор BCL-2 вводят в дозе 100 мг в первый день 28-дневного цикла и в дозе 200 мг в дни 2-28, 2-14 или 2-7 28-дневного цикла. В некоторых случаях ингибитор BCL-2 вводят в дни 1-7 28-дневного цикла. В некоторых случаях ингибитор BCL-2 вводят в дни 1-8 28-дневного цикла. В некоторых случаях ингибитор BCL-2 вводят в дни 1-14 28-дневного цикла. В некоторых случаях ингибитор BCL-2 вводят в дни 1-18 28-дневного цикла. В некоторых случаях ингибитор BCL-2 вводят в дни 1-21 28-дневного цикла. В некоторых случаях ингибитор BCL-2 вводят в дни 1-28 21-дневного цикла.

[23] В некоторых случаях ингибитор BCL-2 вводят пер орально. В некоторых случаях введение иммуноконъюгата начинают через шесть дней после начала введения ингибитора BCL-2.

[24] В некоторых случаях гипометилирующим агентом является азацитидин. В некоторых случаях азацитидин вводят однократно в течение 28-дневного цикла. В некоторых случаях азацитидин вводят однократно в день в дни 1-7 28-дневного цикла. В некоторых случаях азацитидин вводят однократно в день в дни 3-7 28-дневного цикла. В некоторых случаях азацитидин вводят однократно в день в дни 1-5 28-дневного цикла. В некоторых случаях азацитидин вводят в дозе около 75 мг/м². В некоторых случаях азацитидин вводят подкожно. В некоторых случаях азацитидин вводят внутривенно.

[25] В некоторых случаях гипометилирующий агент представляет собой децитабин. В некоторых случаях децитабин вводят внутривенно.

[26] В некоторых случаях гематологическая злокачественная опухоль присутствует у субъекта в виде минимальной остаточной болезни (MRD).

[27] В некоторых случаях способ лечения гематологической злокачественной опухоли, присутствующей в виде минимальной остаточной болезни у субъекта-человека, включающий введение субъекту анти-CD123 иммуноконъюгата, включающего анти-CD123 антитело или его антиген-связывающий фрагмент, связанный с цитотоксический агентом. В некоторых случаях иммуноконъюгат вводят в дозе от около 0,045 мг/кг до около 0,18 мг/кг. В некоторых случаях субъекту вводят около 0,045 мг/кг, около 0,09 мг/кг, около 0,135 мг/кг или около 0,18 мг/кг. В некоторых случаях субъекту вводят около 0,045 мг/кг. В некоторых случаях субъекту вводят около 0,03 мг/кг. В некоторых случаях иммуноконъюгат вводят внутривенно. В некоторых случаях гематологическая злокачественная опухоль является лейкозом. В некоторых случаях иммуноконъюгат вводят однократно в течение 21-дневного цикла.

[28] В некоторых случаях введение осуществляют в течение одного цикла. В некоторых случаях введение предназначено для более одного цикла. В каждом конкретном случае введение осуществляется в течение по меньшей мере 2 циклов, по меньшей мере 3 циклов, по меньшей мере 4 циклов, по меньшей мере 5 циклов, по меньшей мере 6 циклов, по меньшей мере 7 циклов, по меньшей мере 8 циклов, по меньшей мере 9 циклов или по меньшей мере 10 циклов. В некоторых случаях введение осуществляется в течение около 2-4 циклов, около 2-6 циклов, около 2-8 циклов, около 2-10 циклов или около 2-12 циклов.

[29] В некоторых случаях способ дополнительно включает введение сниженной дозы иммуноконъюгата после того, как у субъекта возникла токсичность, ограничивающая дозу, и она была снижена до исходного уровня или ≤2 степени.

[30] В некоторых случаях иммуноконъюгат далее вводят в качестве поддерживающей терапии.

[31] В некоторых случаях поддерживающая терапия включает в себя введение иммуноконъюгата однократно в 21-дневном цикле. В некоторых случаях поддерживающая терапия включает введение иммуноконъюгата в дозе от около 0,015 мг/кг до около 0,09 мг/кг однократно в 21-дневном цикле. В некоторых случаях поддерживающая терапия включает введение иммуноконъюгата в дозе от около 0,015 мг/кг до около 0,135 мг/кг однократно в 21-дневном цикле. В некоторых случаях поддерживающая терапия включает введение иммуноконъюгата в дозе 0,015 мг/кг однократно в 21-дневном цикле. В некоторых случаях поддерживающая терапия включает введение иммуноконъюгата в дозе около 0,045 мг/кг однократно в 21-дневном цикле. В некоторых случаях поддерживающая терапия включает введение иммуноконъюгата в дозе около 0,03 мг/кг однократно в 21-дневном цикле. В некоторых случаях поддерживающая терапия включает введение иммуноконъюгата в дозе 0,09 мг/кг однократно в 21-дневном цикле. В некоторых случаях поддерживающая терапия включает введение иммуноконъюгата в дозе около 0,135 мг/кг однократно в 21-дневном цикле В некоторых случаях поддерживающая терапия включает введение иммуноконъюгата три раза в 21-дневном цикле. В некоторых случаях во время поддерживающей терапии общее количество иммуноконъюгата, вводимого в течение 21-дневного цикла, составляет около 0,045 мг/кг, около 0,09 мг/кг или около 0,18 мг/кг.в некоторых случаях во время поддерживающей терапии общее количество иммуноконъюгата, вводимого в течение 21-дневного цикла, составляет около 0,135 мг/кг. некоторых случаях во время поддерживающей терапии вводят от 0,015 мг/кг до 0,06 мг/кг иммуноконъюгата в каждый из трех раз в течение 21-дневного цикла. В некоторых случаях во время поддерживающей терапии вводят около 0,015 мг/кг иммуноконъюгата в каждый из трех раз в течение 21-дневного цикла. В некоторых случаях во время поддерживающей терапии вводят около 0,03 мг/кг иммуноконъюгата в каждый из трех раз в течение 21-дневного цикла. В некоторых случаях во время поддерживающей терапии вводят около 0,045 мг/кг иммуноконъюгата в каждый из трех раз в течение 21-дневного цикла. В некоторых случаях во время поддерживающей терапии вводят около 0,06 мг/кг иммуноконъюгата в каждый из трех раз в течение 21-дневного цикла.

[32] В некоторых случаях гематологическая злокачественная опухоль является рецидивной гематологической злокачественной опухолью. В некоторых случаях гематологическая злокачественная опухоль является рефрактерной гематологической злокачественной опухолью. В некоторых случаях гематологическая злокачественная опухоль представляет собой острый миелоидный лейкоз (ОМЛ), миелодиспластический синдром (МДС), В-клеточный острый лимфобластный лейкоз (В-ОЛЛ), хронический миелоидный лейкоз в бластном кризе/фазе (ХМЛ-БФ) и бластому плазмоцитоидных дендритных клеток (БПДК). В некоторых случаях гематологическая злокачественная опухоль представляет собой ОМЛ. В некоторых случаях ОМЛ представляет собой рецидивный ОМЛ. В некоторых случаях ОМЛ представляет собой рефрактерный ОМЛ. В некоторых случаях гематологическая злокачественная опухоль представляет собой БПДК. В некоторых случаях БПДК представляет собой рецидивный БПДК. В некоторых случаях БПДК представляет собой рецидивный БПДК. В некоторых случаях гематологическая злокачественная опухоль представляет собой ОЛЛ. В некоторых случаях ОЛЛ представляет собой рецидивный ОЛЛ. В некоторых случаях ОМЛ представляет собой рефрактерный ОМЛ. В некоторых случаях гематологическая злокачественная опухоль представляет собой хронический миеломоноцитарный лейкозом (ХММЛ). В некоторых случаях ХММЛ представляет собой рецидивный ХММЛ. В некоторых случаях ХММЛ представляет собой рефрактерный ХММЛ. В некоторых случаях гематологическая злокачественная опухоль представляет собой миелофиброзом (МФ). В некоторых случаях МФ представляет собой рецидивный МФ. В некоторых случаях МФ представляет собой рефрактерный МФ. В некоторых случаях гематологическая злокачественная опухоль представляет собой миелодиспластический синдром (МДС). В некоторых случаях МДС представляет собой рецидивный МДС. В некоторых случаях МДС представляет собой рефрактерный МДС.

[33] В некоторых случаях гематологическая злокачественная опухоль представляет собой гематологическую злокачественную опухоль, экспрессирующую CD123. В некоторых случаях CD123 был обнаружен в образце, полученном из гематологической злокачественной опухоли до введения препарата. В некоторых случаях CD123 был обнаружен с помощью проточной цитометрии. В некоторых случаях способ дополнительно включает обнаружение CD123 в образце, полученном из гематологической злокачественной опухоли до введения препарата.

[34] В некоторых случаях по меньшей мере 80% клеток в гематологической злокачественной опухоли экспрессируют CD123. В некоторых случаях CD123 был обнаружен по меньшей мере в 80% клеток в образце, полученном из гематологической злокачественной опухоли до введения препарата. В некоторых случаях способ дополнительно включает обнаружение CD123 по меньшей мере в 80% клеток в образце, полученном из гематологической злокачественной опухоли до введения препарата.

[35] В некоторых случаях гематологическая злокачественная опухоль устойчива к IMGN632.

[36] В некоторых случаях гематологическая злокачественная опухоль экспрессирует множественную лекарственную резистентность 1 (МЛР1). В некоторых случаях гематологическая злокачественная опухоль экспрессирует Р-гликопротеин (Р-гп). В некоторых случаях у субъекта абсолютное количество нейтрофилов превышает 500/мкл.

[37] В некоторых случаях субъект получал по меньшей мере одну линию предшествующей терапии. В некоторых случаях субъект получал по меньшей мере две предшествующие линии терапии. В некоторых случаях субъект получал по меньшей мере три предшествующие линии терапии. В некоторых случаях рак ранее лечили венетоклаксом. В некоторых случаях рак ранее не лечили венетоклаксом. В некоторых случаях рак ранее лечили гипометилирующим агентом. В некоторых случаях рак ранее не лечили гипометилирующим агентом.

[38] В некоторых случаях субъекта ранее лечили кортикостероидом перед введением иммуноконъюгата. В некоторых случаях способ дополнительно включает предварительное лечение субъекта кортикостероидом перед введением иммуноконъюгата. В некоторых случаях кортикостероид представляет собой дифенгидрамин, ацетаминофен, парацетамол, дексаметазон или их комбинацию.

[39] В некоторых случаях иммуноконъюгат и ингибитор BCL-2, гипометилирующий агент или их комбинация вводятся в отдельных фармацевтических композициях.

[40] В некоторых случаях иммуноконъюгат и ингибитор BCL-2, гипометилирующий агент или их комбинация вводятся в отдельных фармацевтических композициях.

[41] В некоторых случаях субъект является человеком.

[42] В некоторых случаях способ лечения гематологической злокачественной опухоли у человека включает введение нуждающемуся в этом субъекту IMGN632 и венетоклакса в 21-дневном цикле, где IMGN632 вводят внутривенно на 7-й день цикла в дозе от около 0,015 мг/кг до около 0,09 мг/кг, (необязательно, при этом доза составляет около 0,015 мг/кг, около 0,045 мг/кг или около 0,09 мг/кг), и если венетоклакс вводят перорально в дозе 100 мг в первый день цикла, в дозе 200 мг во второй день цикла и в дозе 400 мг в дни 3-21 цикла.

[43] В некоторых случаях способ лечения гематологической злокачественной опухоли у человека включает введение нуждающемуся в этом субъекту IMGN632 и венетоклакса в 21-дневном цикле, где IMGN632 вводят внутривенно на 7-й день цикла в дозе от около 0,015 мг/кг - около 0,135 мг/кг, (необязательно, при этом доза составляет около 0,135 мг/кг), а венетоклакс вводят перорально в дозе 100 мг в первый день цикла, в дозе 200 мг во второй день цикла и в дозе 400 мг в дни 3-21 цикла.

[44] В некоторых случаях способ лечения гематологической злокачественной опухоли у человека включает введение нуждающемуся в этом субъекту IMGN632 и венетоклакса в 21-дневном цикле, где IMGN632 вводят внутривенно на 7-й день цикла в дозе от около 0,015 мг/кг - около 0,09 мг/кг (необязательно, при этом доза составляет около 0,015 мг/кг, около 0,045 мг/кг или около 0,09 мг/кг), и если венетоклакс вводят перорально в суточной дозе 400 мг.

[45] В некоторых случаях способ лечения гематологической злокачественной опухоли у человека включает введение нуждающемуся в этом субъекту IMGN632 и венетоклакса в 21-дневном цикле, где IMGN632 вводят внутривенно на 7-й день цикла в дозе от около 0,015 мг/кг до около 0,09 мг/кг, а венетоклакс вводят перорально в суточной дозе 400 мг. В некоторых случаях венетоклакс вводят в дни 1-7 21-дневного цикла. В некоторых случаях венетоклакс вводят в дни 1-8 21-дневного цикла. В некоторых случаях венетоклакс вводят в дни 1-14 21-дневного цикла. В некоторых случаях венетоклакс вводят в дни 1-18 21-дневного цикла. В некоторых случаях венетоклакс вводят в дни 1-21 21-дневного цикла. В некоторых случаях IMGN632 вводят в дозе около 0,045 мг/кг. В некоторых случаях IMGN632 вводят в дозе около 0,03 мг/кг. В некоторых случаях IMGN632 вводят в дозе около 0,015 мг/кг.

[46] В некоторых случаях способ лечения гематологической злокачественной опухоли у человека включает введение нуждающемуся в этом субъекту IMGN632 и венетоклакса в 21-дневном цикле, где IMGN632 вводят внутривенно на 7-й день цикла в дозе от около 0,015 мг/кг до около 0,135 мг/кг (необязательно, при этом доза составляет около 0,135 мг/кг), и при этом венетоклакс вводят перорально в суточной дозе 400 мг.

[47] В некоторых случаях способ лечения гематологической злокачественной опухоли у человека включает введение нуждающемуся в этом субъекту IMGN632 и венетоклакса в 21-дневном цикле, где IMGN632 вводят внутривенно в дни 7, 10 и 14 цикла в дозе от около 0,015 мг/кг - около 0,06 мг/кг, (необязательно, при этом доза составляет около 0,015 мг/кг, около 0,03 мг/кг или около 0,06 мг/кг), и при этом венетоклакс вводят перорально в дозе 100 мг в первый день цикла, в дозе 200 мг во второй день цикла и в дозе 400 мг в дни 3-21 цикла.

[48] В некоторых случаях способ лечения гематологической злокачественной опухоли у человека включает введение нуждающемуся в этом субъекту IMGN632 и венетоклакса в 21-дневном цикле, где IMGN632 вводят внутривенно в дни 7, 10 и 14 цикла в дозе от около 0,015 мг/кг - около 0,06 мг/кг, (необязательно, при этом доза составляет около 0,015 мг/кг, около 0,03 мг/кг или около 0,06 мг/кг), и при этом венетоклакс вводят перорально в суточной дозе 400 мг.

[49] В некоторых случаях способ лечения гематологической злокачественной опухоли у человека включает введение нуждающемуся в этом субъекту IMGN632 и азацитидина в 28-дневном цикле, где IMGN632 вводят внутривенно на 7-й день цикла в дозе от около 0,015 мг/кг - около 0,09 мг/кг, необязательно, при этом доза составляет около 0,015 мг/кг, около 0,045 мг/кг или около 0,09 мг/кг, и при этом азацитидин вводят подкожно или внутривенно в дозе 75 мг/м² в дни 1-7 цикла.

[50] В некоторых случаях способ лечения гематологической злокачественной опухоли у человека включает введение нуждающемуся в этом субъекту IMGN632 и азацитидина в 28-дневном цикле, где IMGN632 вводят внутривенно на 7-й день цикла в дозе от около 0,015 мг/кг - около 0,09 мг/кг, необязательно, при этом доза составляет около 0,015 мг/кг, около 0,03 мг/кг, около 0,045 мг/кг или около 0,09 мг/кг, и при этом азацитидин вводят подкожно или внутривенно в дозе 75 мг/м². В некоторых случаях азацитидин вводят в дни 1-7 цикла. В некоторых случаях азацитидин вводят в дни 1-5 цикла. В некоторых случаях IMGN632 вводят в дозе около 0,045 мг/кг. В некоторых случаях IMGN632 вводят в дозе около 0,03 мг/кг.

[51] В некоторых случаях способ лечения гематологической злокачественной опухоли у человека включает в себя введение нуждающемуся в этом субъекту IMGN632 и азацитидина в 28-дневном цикле, где IMGN632 вводят внутривенно на 7-й день цикла в дозе от около 0,015 мг/кг до около 0,135 мг/кг, необязательно, при этом доза составляет около 0,135 мг/кг, и при этом азацитидин вводят подкожно или внутривенно в дозе 75 мг/м² в дни 1-7 цикла.

[52] В некоторых случаях способ лечения гематологической злокачественной опухоли у человека включает введение нуждающемуся в этом субъекту IMGN632 и азацитидина в 28-дневном цикле, где IMGN632 вводят внутривенно в дни 7, 10 и 14 цикла в дозе от около 0,015 мг/кг - около 0,06 мг/кг, необязательно, при этом доза составляет около 0,015 мг/кг, около 0,03 мг/кг или около 0,06 мг/кг, и при этом азацитидин вводят подкожно или внутривенно в дозе 75 мг/м² в дни 1-7 цикла.

[53] В некоторых случаях способ лечения гематологической злокачественной опухоли у человека включает введение нуждающемуся в этом субъекту IMGN632 и азацитидина в 28-дневном цикле, где IMGN632 вводят внутривенно в дни 7, 10 и 14 цикла в дозе от около 0,015 мг/кг до около 0,06 мг/кг, а азацитидин вводят подкожно или внутривенно в дозе 75 мг/м². В некоторых случаях азацитидин вводят в дни 1-7 цикла. В некоторых случаях азацитидин вводят в дни 1-5 цикла. В некоторых случаях IMGN632 вводят в дозе около 0,045 мг/кг. В некоторых случаях IMGN632 вводят в дозе около 0,03 мг/кг.

[54] В некоторых случаях способ дополнительно включает введение венетоклакса. В некоторых случаях венетоклакс вводят в дни 1-7 28-дневного цикла. В некоторых случаях венетоклакс вводят в дни 1-8 28-дневного цикла. В некоторых случаях венетоклакс вводят в дни 1-14 28-дневного цикла. В некоторых случаях венетоклакс вводят в дни 1-18 28-дневного цикла. В некоторых случаях венетоклакс вводят в дни 1-21 28-дневного цикла. В некоторых случаях венетоклакс вводят в дни 1-28 28-дневного цикла.

[55] В некоторых случаях способ дополнительно включает пероральное введение венетоклакса в дозе 100 мг в первый день 28-дневного цикла, в дозе 200 мг во второй день 28-дневного цикла и в дозе 400 мг в 3-28 день дневного цикла. В некоторых случаях способ дополнительно включает введение венетоклакса в пероральной суточной дозе 400 мг.

[56] В некоторых случаях гематологическая злокачественная опухоль представляет собой ОМЛ. В некоторых случаях гематологическая злокачественная опухоль представляет собой БПДК. В некоторых случаях гематологическая злокачественная опухоль представляет собой ОЛЛ. В некоторых случаях гематологическая злокачественная опухоль представляет собой хронический миеломоноцитарный лейкоз (ХММЛ). В некоторых случаях гематологическая злокачественная опухоль представляет собой миелофиброз (МФ). В некоторых случаях гематологическая злокачественная опухоль представляет собой миелодиспластический синдром (МДС).

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ФИГУР

[57] На ФИГ. 1А показана химическая структура IMGN632. IMGN632 представляет собой композицию, включающую иммуноконъюгаты, содержащие антитело анти-CD123 G4723A, связанное с цитотоксической полезной нагрузкой DGN549-C, в бисульфите натрия. Большая часть иммуноконъюгата в композиции находится в сульфонированной версии, показанной на ФИГ. 1А.

[58] На ФИГ. 1В показана несульфонированная форма иммуноконъюгата, содержащего антитело анти-CD123 G4723A, связанное с цитотоксической полезной нагрузкой DGN549-C (моноиминная структура), которая также может присутствовать в композиции IMGN632.

[59] На ФИГ. 2А показана противоопухолевая активность широкого диапазона доз IMGN632 против трех клеточных линий ОМЛ (EOL-1, MV4-11, KG-1).

[60] На ФИГ. 2В показана противоопухолевая активность широкого диапазона доз венетоклакса против трех клеточных линий ОМЛ (EOL-1, MV4-11, KG-1).

[61] На ФИГ. 2С показана противоопухолевая активность более узкого диапазона доз IMGN632 против четырех клеточных линий ОМЛ (EOL-1, MV4-11, KG-1, Molm-13).

[62] На ФИГ. 2D показана противоопухолевая активность более узкого диапазона доз венетоклакса против четырех клеточных линий ОМЛ (EOL-1, MV4-11, KG-1, Molm-13)

[63] На ФИГ. 3А показана противоопухолевая активность IMGN632 и возрастающих доз венетоклакса (0,625 нМ, 1,25 нМ, 2,5 нМ, 5 нМ, 10 нМ, 20 нМ) против клеточной линии EOL-1.

[64] На ФИГ. 3 В показана противоопухолевая активность IMGN632 и возрастающих дозвенетоклакса (0,625 нМ, 1,25 нМ, 2,5 нМ, 5 нМ, 10 нМ, 20 нМ) в клеточной линии MV4-11.

[65] На ФИГ. 3С показана противоопухолевая активность IMGN632 и возрастающих доз венетоклакса (0,625 нМ, 1,25 нМ, 2,5 нМ, 5 нМ, 10 нМ, 20 нМ) в клеточной линии KG-1.

66] На ФИГ. 3D показана противоопухолевая активность IMGN632 и возрастающих доз венетоклакса (0,625 нМ, 1,25 нМ, 2,5 нМ, 5 нМ, 10 нМ, 20 нМ) в клеточной линии Molm-13.

[67] На ФИГ. 4А показаны данные по эффективности комбинации IMGN632 и венетоклакса в зависимости от дозы в клеточной линии EOL-1.

[68] На ФИГ. 4В показаны данные по эффективности комбинации IMGN632 и венетоклакса в зависимости от дозы в клеточной линии EOL-1.

[69] На ФИГ. 4С показаны данные по эффективности комбинации IMGN632 и венетоклакса в сравнении с ожидаемыми дозовыми эффектами в нормализованном масштабе в клеточной линии EOL-1.

[70] На ФИГ. 4D показаны данные по эффективности комбинации IMGN632 и венетоклакса в зависимости от дозы в клеточной линии MV4-11.

[71] На ФИГ. 4Е показаны данные по эффективности комбинации IMGN632 и венетоклакса в зависимости от дозы в клеточной линии MV4-11

[72] На ФИГ. 4F показаны данные по эффективности комбинации IMGN632 и венетоклакса в сравнении с ожидаемыми дозовыми эффектами в нормализованном масштабе в клеточной линии MV4-11.

[73] На ФИГ. 4G показаны данные по эффективности комбинации IMGN632 и венетоклакса в зависимости от дозы в клеточной линии KG-1.

[74] На ФИГ. 4Н показаны данные по эффективности комбинации IMGN632 и венетоклакса в зависимости от дозы в клеточной линии KG-1.

[75] На ФИГ. 4I показаны данные по эффективности комбинации IMGN632 и венетоклакса в сравнении с ожидаемыми дозовыми эффектами в нормализованном масштабе в клеточной линии KG-1.

[76] На ФИГ. 4J показаны данные по эффективности комбинации IMGN632 и венетоклакса в зависимости от дозы в клеточной линии Molm-13.

[77] На ФИГ. 4K показаны данные по эффективности комбинации IMGN632 и венетоклакса в зависимости от дозы в клеточной линии Molm-13.

[78] На ФИГ. 4L показаны данные по эффективности комбинации IMGN632 и венетоклакса всравнении с ожидаемыми дозовыми эффектами в нормализованном масштабе в клеточной линии Molm-13.

[79] На ФИГ. 5 показана эффективность in vivo одной дозы IMGN632 (1 мкг/кг или 0,5 мкг/кг), одного венетоклакса (QDx28; 100 мг/кг) и комбинации IMGN632 (1 мкг/кг или 0,5 мкг/кг) и венетоклакса (QDx28; 100 мг/кг) путем построения графика среднего объема опухоли (мм³) в зависимости от дней после инокуляции клеточной линии EOL-1.

[80] На ФИГ. 6 показана эффективность in vivo одной дозы IMGN632 (QWx3; 3 мкг/кг или 10 мкг/кг), одного венетоклакса (QDx28; 100 мг/кг) и комбинации IMGN632 (QWx3; 3 мкг/кг или 10 мкг/кг) и венетоклакса (QDx28; 100 мг/кг) путем построения графика среднего объема опухоли (мм³) в зависимости от дней после инокуляции клеточной линии KG-1.

[81] На ФИГ. 7 показана выживаемость мышей в зависимости от времени после инокуляции опухолевых клеток Molm-З. Мыши получали только IMGN632 (QWx3; 0,3 мкг/кг) в соответствии с тремя различными графиками дозирования, только азацитидин (QDx5; 3,5 мг/кг) или комбинацию IMGN632 (QWx3; 0,3 мкг/кг) и азацитидина (QDx5; 3,5 мг/кг).

[82] На ФИГ. 8 показана выживаемость мышей в зависимости от времени после инокуляции опухолевых клеток Molm-3. Мыши получали только IMGN632 (QWx3; 0,3 мкг/кг) в соответствии с тремя различными графиками дозирования, только децитабин (QDx5; 0,75 мг/кг) или комбинацию IMGN632 (QWx3; 0,3 мкг/кг) и только децитабин (QDx5; 0,75 мг/кг).

[83] На ФИГ. 9 показана эффективность in vivo одной дозы IMGN632 (1 мкг/кг), венетоклакса (QDx28; 100 мг/кг) и азацитидина (QDx5; 3 мг/кг) или комбинации IMGN632 (1 мкг/кг) с венетоклаксом (QDx28; 100 мг/кг) и азацитидином (QDx5; 3 мг/кг) путем построения графика среднего объема опухоли (мм³) в зависимости от дней после инокуляции клеточной линии EOL-1.

[84] На ФИГ. 10А и 10 В показана выживаемость мышей в зависимости от времени после инокуляции опухолевых клеток Molm-З. Мыши получали только IMGN632 (QWx3), венетоклакс (QDx28) и азацитидин (QDx5) или комбинацию IMGN632 (QWx3) с венетоклаксом (QDx28) и азацитидин (QDx5).

[85] На ФИГ. 11 показана выживаемость мышей в зависимости от времени после инокуляции опухолевых клеток MV4-11. Мыши получали только IMGN632 (QWx3), венетоклакс (QDx28) и азацитидин (QDx5) или комбинацию IMGN632 (QWx3) с венетоклаксом (QDx28) и азацитидин (QDx5).

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[86] Настоящее изобретение предоставляет комбинацию иммуноконъюгата анти-CD123 с гипометилирующим агентом (ГМА) и/или антагонистом В-клеточного лейкоза/лимфомы-2 (BCL-2), а также использование комбинаций в лечении гематологических злокачественных новообразований. Настоящее изобретение также предоставляет иммуноконъюгаты анти-CD123, (необязательно, в комбинации с ГМА и/или антагонистом BCL-2) для лечения гематологических злокачественных опухолей, представленных в виде минимальной остаточной болезни.

I. Определения

[87] Для облегчения понимания настоящего изобретения ниже приведены определения ряда терминов и выражений.

[88] Термины «IL-3Rα», «рецептор альфа интерлейкина-3» и «CD123», используемые здесь взаимозаменяемо, относятся к полипептидам CD123 млекопитающих, включая, но не ограничиваясь этим, нативные полипептиды CD123 и изоформы полипептидов CD123, если не указано иное. Эти термины охватывают «полноразмерные», необработанные полипептиды CD123, а также любую форму полипептида CD123, полученную в результате процессинга в клетке. Термин также охватывает встречающиеся в природе варианты CD123, например, кодируемые сплайс-вариантами и аллельными вариантами. Полипептиды CD123, описанные в настоящем документе, могут быть выделены из различных источников, например, из тканей человека или из другого источника, или получены рекомбинантным или синтетическим способом. Там, где указано особо, «CD123» может использоваться для обозначения нуклеиновой кислоты, которая кодирует полипептид CD123. Последовательности CD123 человека известны и включают, например, последовательности, связанные с номерами ссылок NCBINP 002174 & NM 002183 (последовательности белка и нуклеиновой кислоты для CD123 человека вариант 1), и NP 001254642 & NM 001267713 (последовательности белка и нуклеиновой кислоты для CD123 человека вариант 2). В настоящем документе термин «человеческий CD123» относится к CD123, включающему последовательность SEQ ID NO: 11 или SEQ ID NO: 12.

[89] Термин «антитело» означает молекулу иммуноглобулина, которая распознает и специфически связывается с мишенью, такой как белок, полипептид, пептид, углевод, полинуклеотид, липид или их комбинации, через по меньшей мере один сайт распознавания антигена в вариабельной области молекулы иммуноглобулина. Как используется в настоящем документе, термин «антитело» охватывает интактные поликлональные антитела, интактные моноклональные антитела, химерные антитела, гуманизированные антитела, человеческие антитела, белки слияния, включающие антитело, и любые другие модифицированные молекулы иммуноглобулина до тех пор, пока антитела проявляют желаемую биологическую активность. Антитело может быть представителем любого из пяти основных классов иммуноглобулинов: IgA, IgD, IgE, IgG и IgM, или их подклассов (изотипов) (например, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgAl и IgA2), основанных на идентичности их константных доменов тяжелой цепи, называемых, соответственно, альфа, дельта, эпсилон, гамма и мю. Различные классы иммуноглобулинов имеют различные и хорошо известные структуры субъединиц и трехмерные конфигурации. Антитела могут быть голыми или конъюгированными с другими молекулами, такими как токсины, радиоизотопы и т.д.

[90] Термин «анти-CD123 антитело» или «антитело, связывающееся с CD123» относится к антителу, которое способно связывать CD123 с достаточной аффинностью, так что антитело полезно в качестве диагностического и/или терапевтического агента, нацеленного на CD123 (например, антитело в IMGN632). Степень связывания анти-CD123 антитела с неродственным белком, не являющимся CD123, может составлять менее 10% от степени связывания антитела с CD123, измеренной, например, радиоиммуноанализом (РИА).

[91] Термин «фрагмент антитела» относится к части интактного антитела с достаточным положительным зарядом для связывания с катионообменной смолой. Термин «антиген-связывающий фрагмент» относится к части интактного антитела, которая связывается с антителом и имеет достаточный положительный заряд для связывания с катионообменной смолой. Антиген-связывающий фрагмент может содержать антиген-определяющие вариабельные области интактного антитела. Примеры фрагментов антител включают, но не ограничиваются ими, Fab, Fab', F(ab')2 и Fv фрагменты, линейные антитела и одноцепочечные антитела.

[92] Термин «модифицированное цистеином» антитело или его антиген-связывающий фрагмент содержит антитело или антиген-связывающий фрагмент с по меньшей мере одним цистеином ("Cys"), который обычно не присутствует в данном остатке легкой или тяжелой цепи антитела или антиген-связывающего фрагмента. Такие Cys, которые также могут быть названы «модифицированные Cys», могут быть созданы с помощью любой обычной молекулярно-биологической или рекомбинантной технологии (например, путем замены кодирующей последовательности для не-Cys остатка в целевом остатке на кодирующую последовательность для Cys). Например, если исходный остаток Ser имеет кодирующую последовательность 5'-UCU-3', кодирующая последовательность может быть мутирована (например, с помощью сайт-направленного мутагенеза) до 5'-UGU-3', которая кодирует Cys. В некоторых вариантах реализации изобретения антитело или его антиген-связывающий фрагмент, созданный на основе Cys, имеет созданный Cys в тяжелой цепи. В некоторых вариантах реализации изобретения модифицированный Cys находится в домене СНЗ тяжелой цепи или рядом с ним. В некоторых вариантах реализации изобретения, модифицированный Cys находится в остатке 442 тяжелой цепи (нумерация EU/OU; индекс EU, Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed., NTH publication No. 91-3242, 1991, все содержание которого включено в настоящий документ посредством ссылки). В определенных вариантах реализации изобретения Fc-область включает цистеин в одном или более из положений 239, 282, 289, 297, 312, 324, 330, 335, 337, 339, 356, 359, 361, 383, 384, 398, 400, 440, 422 и 442, как пронумеровано индексом EU. В некоторых вариантах реализации любой один или несколько из следующих остатков могут быть заменены цистеином: V205 (нумерация Kabat) легкой цепи; А118 (нумерация EU) тяжелой цепи; и S400 (нумерация EU) области Fc тяжелой цепи. В некоторых вариантах реализации вариабельный домен легкой цепи, например, scFv, имеет цистеин в положении 100 Kabat. В некоторых вариантах реализации вариабельный домен тяжелой цепи, например, scFv, имеет цистеин в положении 44 Kabat. Модифицированные цистеином антитела могут быть получены, как описано, например, в Патенте США№. 7,521,541, Патенте США№7,855,275, опубликованной Заявке на патент США №20110033378 и WO 2011/005481.

93] «Моноклональное» антитело или его антиген-связывающий фрагмент относится к гомогенной популяции антител или антиген-связывающих фрагментов, участвующих в высокоспецифическом распознавании и связывании одной антигенной детерминанты или эпитопа. В отличие от поликлональных антител, которые обычно включают различные антитела, направленные против разных антигенных детерминант.Термин «моноклональное» антитело или его антиген-связывающий фрагмент охватывает интактные и полноразмерные моноклональные антитела, а также фрагменты антител (такие как Fab, Fab', F(ab')2, Fv), одноцепочечные (scFv) мутанты, слитые белки, включающие часть антитела, и любые другие модифицированные молекулы иммуноглобулина, содержащие сайт распознавания антигена. Кроме того, «моноклональное» антитело или его антиген-связывающий фрагмент относится к таким антителам и их антиген-связывающим фрагментам, полученным любым способом, включая, но не ограничиваясь этим, гибридому, фаговую селекцию, рекомбинантную экспрессию и трансгенных животных.

[94] Термин «гуманизированное» антитело или его антиген-связывающий фрагмент относится к формам нечеловеческих (например, мышиных) антител или антиген-связывающих фрагментов, которые представляют собой специфические иммуноглобулиновые цепи, химерные иммуноглобулины или их фрагменты, содержащие минимальные нечеловеческие (например, мышиные) последовательности. Обычно гуманизированные антитела или их антиген-связывающие фрагменты представляют собой иммуноглобулины человека, в которых остатки комплементарной детерминирующей области (CDR) заменены остатками CDR нечеловеческого вида (например, мыши, крысы, кролика, хомяка), обладающими желаемой специфичностью, аффинностью и способностью («антитела с привитой CDR») (Jones etal., Nature 321:522-525 (1986); Riechmannetal., Nature 332:323-327 (1988); Verhoeyen et al., Science 239:1534-1536 (1988)). В некоторых случаях остатки каркасной области (FR) Fv иммуноглобулина человека заменяются на соответствующие остатки антитела или фрагмента нечеловеческого вида, обладающего желаемой специфичностью, аффинностью и способностью. Гуманизированное антитело или его антиген-связывающий фрагмент могут быть дополнительно модифицированы путем замены дополнительных остатков либо в каркасной области Fv и/или внутри замененных негуманизированных остатков для уточнения и оптимизации специфичности, аффинности и/или способности антитела или антиген-связывающего фрагмента. В целом, гуманизированное антитело или его антиген-связывающий фрагмент будет включать по существу все по меньшей мере один, а обычно два или три вариабельных домена, содержащих все или по существу все области CDR, соответствующие нечеловеческому иммуноглобулину, в то время как все или по существу все области FR соответствуют консенсусной последовательности человеческого иммуноглобулина. Гуманизированное антитело или его антиген-связывающий фрагмент может также включать по меньшей мере часть константной области или домена иммуноглобулина (Fc), как правило, человеческого иммуноглобулина. Примеры способов, используемых для создания гуманизированных антител, описаны в U.S. Pat. 5,225,539; Rogusb et al., Proc. Natl. Acad. Sci, USA, 91(3):969-973 (1994), и Rogusb et al., Protein Eng. 9(10):895-904 (1996). В некоторых вариантах реализации «гуманизированное антитело» представляет собой антитело с измененной поверхностью.

[95] «Вариабельная область» антитела относится к вариабельной области легкой цепи антитела или вариабельной области тяжелой цепи антитела, отдельно или в комбинации. Вариабельные области тяжелой и легкой цепей состоят из четырех каркасных областей (FR), соединенных тремя определяющими комплементарность областями (CDR), также известными как гипервариабельные области. CDR каждой цепи удерживаются FR в непосредственной близости друг от друга и вместе с CDR другой цепи участвуют в формировании антиген-связывающего сайта антител. Существует по меньшей мере два способа определения CDR: (1) подход, основанный на межвидовой изменчивости последовательностей (например, Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, (5th ed., 1991, National Institutes of Health, Bethesda Md.), "Kabat"); и (2) подход, основанный на кристаллографических исследованиях комплексов антиген-антитело (Al-lazikani et al, J. Molec. Biol. 273:927-948 (1997)). Кроме того, в данной области для определения CDR иногда используются комбинации этих двух подходов.

[96] Система нумерации Kabat обычно используется при ссылке на остаток в вариабельном домене (приблизительно остатки I-107 легкой цепи и остатки I-113 тяжелой цепи) (например, Kabat et al., Sequences of Immunological Interest. (5th Ed., 1991, National Institutes of Health, Bethesda, Md.) ("Kabat").

[97] Нумерация позиций аминокислот, как в Kabat, относится к системе нумерации, используемой для вариабельных доменов тяжелой цепи или вариабельных доменов легкой цепи при составлении данных антител в Kabat et al. (Sequences of Immunological Interest. (5th Ed., 1991, National Institutes of Health, Bethesda, Md.), "Kabat"). Используя эту систему нумерации, фактическая линейная аминокислотная последовательность может содержать меньше или больше аминокислот, соответствующих укорочению или вставке в FR или CDR вариабельного домена. Например, вариабельный домен тяжелой цепи может включать одну аминокислотную вставку (остаток 52а по Kabat) после остатка 52 Н2 и вставленные остатки (например, остатки 82а, 82b и 82 с и т.д. по Kabat) после остатка 82 FR тяжелой цепи. Нумерация остатков по Kabat может быть определена для данного антитела путем выравнивания по областям гомологии последовательности антитела со «стандартной» последовательностью с нумерацией по Kabat. Chothia вместо этого ссылается на расположение структурных петель (Chothia and Lesk, J. Mol. Biol. 196:901-917 (1987)). Конец петли Chothia CDR-H1 при нумерации по схеме Kabat варьирует между Н32 и Н34 в зависимости от длины петли (это происходит потому, что схема нумерации Kabat размещает вставки на Н35А и Н35 В; если нет ни 35А, ни 35 В, петля заканчивается на 32; если есть только 35А, петля заканчивается на 33; если есть и 35А, и 35 В, петля заканчивается на 34). Гипервариабельные области AbM представляют собой компромисс между CDR Kabat и структурными петлями Chothia и используются в программном обеспечении для моделирования антител AbM компании Oxford Molecular.

[98] Термин «человеческое» антитело или его антиген-связывающий фрагмент означает антитело или его антиген-связывающий фрагмент, произведенный человеком, или антитело или его антиген-связывающий фрагмент, имеющий аминокислотную последовательность, соответствующую антителу или его антиген-связывающему фрагменту, произведенному человеком, полученному с помощью любого известного в данной области техники способа. Данное определение человеческого антитела или его антиген-связывающего фрагмента включает интактные или полноразмерные антитела и их фрагменты.

[99] Термин «химерные» антитела или их антиген-связывающие фрагменты относится к антителам или их антиген-связывающим фрагментам, в которых аминокислотная последовательность происходит от двух или более видов. Как правило, вариабельная область легкой и тяжелой цепей соответствует вариабельной области антител или их антиген-связывающих фрагментов, полученных от одного вида млекопитающих (например, мыши, крысы, кролика и т.д.) с желаемой специфичностью, аффинностью и способностью, а константные области гомологичны последовательностям в антителах или их антиген-связывающих фрагментах, полученных от другого вида (обычно человека), чтобы не вызывать иммунный ответ у этого вида.

[100] Термины «эпитоп» или «антигенная детерминанта» используются здесь взаимозаменяемо и относятся к той части антигена, которая способна распознаваться и специфически связываться определенным антителом. Когда антиген представляет собой полипептид, эпитопы могут быть сформированы как из смежных аминокислот, так и из несмежных аминокислот, соединенных в результате третичного складывания белка. Эпитопы, образованные из смежных аминокислот, обычно сохраняются при денатурации белка, тогда как эпитопы, образованные путем третичного складывания, обычно теряются при денатурации белка. Эпитоп обычно включает по меньшей мере 3, а чаще всего по меньшей мере 5 или 8-10 аминокислот в уникальной пространственной конформации.

[101] «Аффинность связывания», как правило, означает силу совокупности нековалентных взаимодействий между одним участком связывания молекулы (например, антитела) и ее партнером по связыванию (например, антигеном). Если не указано иное, как используется в настоящем документе, «аффинность связывания» относится к внутренней аффинности связывания, которая отражает взаимодействие 1:1 между членами пары связывания (например, антитело и антиген). Сродство молекулы X к ее партнеру Y обычно может быть представлено константой диссоциации (Kd). Аффинность может быть измерена обычными способами, известными в данной области, включая способы, описанные в настоящем документе. Низкоаффинные антитела обычно медленно связывают антиген и легко диссоциируют, в то время как высокоаффинные антитела обычно быстрее связывают антиген и дольше остаются связанными. В данной области известны различные способы измерения аффинности связывания, любой из которых может быть использован для целей настоящего раскрытия. Конкретные иллюстративные варианты реализации описаны ниже.

[102] «Или лучше» при использовании в настоящем документе для обозначения сродства связывания относится к более сильному связыванию между молекулой и ее партнером по связыванию. «Или лучше» при использовании в данном документе относится к более прочному связыванию, представленному меньшим числовым значением Kd. Например, антитело, которое имеет сродство к антигену «0,6 нМ или больше», сродство антитела к антигену составляет<0,6 нМ, т.е. 0,59 нМ, 0,58 нМ, 0,57 нМ и т.д. или любое значение меньше 0,6 нМ.

[103] Под «специфически связывается» обычно подразумевается, что антитело связывается с эпитопом через свой антиген-связывающий домен, и что связывание подразумевает определенную комплементарность между антиген-связывающим доменом и эпитопом. Согласно этому определению, считается, что антитело «специфически связывается» с эпитопом, если оно связывается с этим эпитопом через свой антиген-связывающий домен более легко, чем если бы оно связывалось со случайным, не связанным с ним эпитопом. Термин «специфичность» используется в данном документе для обозначения относительного сродства, с которым определенное антитело связывается с определенным эпитопом. Например, можно считать, что антитело «А» обладает более высокой специфичностью для данного эпитопа, чем антитело «В», или можно сказать, что антитело «А» связывается с эпитопом «С» с более высокой специфичностью, чем с родственным эпитопом «D».

[104] Под «преимущественным связыванием» подразумевается, что антитело специфически связывается с эпитопом более охотно, чем оно связывалось бы с родственным, похожим, гомологичным или аналогичным эпитопом. Таким образом, антитело, которое «предпочтительно связывается» с определенным эпитопом, скорее всего, будет связываться с этим эпитопом, чем с родственным эпитопом, даже если такое антитело может перекрестно реагировать с родственным эпитопом.

[105] Термины «полипептид», «пептид» и «белок» используются здесь взаимозаменяемо и относятся к полимерам аминокислот любой длины. Полимер может быть линейным или разветвленным, он может включать модифицированные аминокислоты, и он может быть прерван неаминокислотами. Термины также охватывают аминокислотный полимер, который был модифицирован естественным образом или путем вмешательства; например, образование дисульфидной связи, гликозилирование, липидирование, ацетилирование, фосфорилирование или любые другие манипуляции или модификации, такие как конъюгация с маркирующим компонентом. Также в это определение включены, например, полипептиды, содержащие один или несколько аналогов аминокислоты (включая, например, ненатуральные аминокислоты и т.д.), а также другие модификации, известные в данной области. Следует понимать, что, поскольку полипептиды настоящего раскрытия основаны на антителах, в некоторых вариантах реализации полипептиды могут быть в виде одиночных цепей или связанных цепей.

[106] Используемый здесь термин «иммуноконъюгат» или «конъюгат» относится к соединению или его производному, которое связано с клеточно-связывающим агентом (т.е. анти-CD123 антителом или его фрагментом), и определяется общей формулой: С-А, где С = цитотоксический агент (например, такой как индолинобензодиазепиновый (IGN) ДНК-алкилятор (например, DGN549-C)) и А = антитело или его антиген-связывающий фрагмент, например, анти-CD123 антитело или его фрагмент. Иммуноконъюгат может, необязательно, содержать линкер и определяться общей формулой C-L-A, где С = цитотоксический агент, L = линкер, а А = антитело или его антиген-связывающий фрагмент, например, анти-CD123 антитело или фрагмент антитела. Иммуноконъюгаты также могут быть определены родовой формулой в обратном порядке: С-А или A-L-C. Иммуноконъюгаты также могут содержать несколько цитотоксических агентов (С) на одно антитело или его антиген-связывающий фрагмент (А) или несколько цитотоксических агентов (С) и линкеров (L) на одно антитело или его антиген-связывающий фрагмент (А).

[107] «Линкер» - это любое химическое соединение, которое способно связывать соединение, обычно лекарство (например, ДНК-алкилаторы IGN), с клеточно-связывающим агентом (например, анти-CD123 антителом или его фрагментом) стабильным, ковалентным образом. Линкеры могут быть восприимчивы к кислотно-индуцированному расщеплению, светоиндуцированному расщеплению, пептидазно-индуцированному расщеплению, эстеразно-индуцированному расщеплению и расщеплению дисульфидной связи или быть практически устойчивыми к ним в условиях, при которых соединение или антитело остается активным. Подходящие линкеры хорошо известны в данной области и включают, например, дисульфидные группы, тиоэфирные группы, кислотолабильные группы, фотолабильные группы, пептидазолабильные группы и эстеразолабильные группы. Линкеры также включают заряженные линкеры и их гидрофильные формы, как описано в настоящем документе и известно в данной области. В некоторых вариантах реализации, раскрытых в настоящем документе, линкер представляет собой пептидный линкер.

[108] Термин «IMGN632» относится к композиции иммуноконъюгата, показанной на ФИГ. 6А и 6 В. Композиция иммуноконъюгатов включает иммуноконъюгаты, содержащие в среднем от 1,5 до 2,1 цитотоксических агентов DGN549-C на антитело huCD123-6Gv4.7 («G4723A») в сульфонированном варианте (Фиг. 1А). Композиция иммуноконъюгата может также включать несульфонированный иммуноконъюгат (моноиминная структура, показанная на Фиг. 1 В).

[109] Термин «ингибитор BCL-2» относится к агенту, который способен подавлять активность В-клеточного лейкоза/лимфомы-2 («BCL-2»). Например, ингибитор BCL-2 может связываться с BCL-2 и уменьшать взаимодействие BCL-2 с про-апоптотическими белками (например, белками, содержащими только ВНЗ). Венетоклакс является примерным ингибитором BCL-2.

[110] Термин «гипометилирующий агент» или «ГМА» относится к агентам, которые ингибируют метилирование ДНК. Например, ГМА может действовать путем ингибирования ДНК-метилтрансферазы. Азацитидин и децитабин являются примерными ГМА.

[111] Термины «рак» и «раковый» означают или описывают физиологическое состояние у млекопитающих, при котором популяция клеток характеризуется нерегулируемым ростом клеток. Примеры рака включают, но не ограничиваются ими, карциному, лимфому, бластому, саркому и лейкоз. «Опухоль» и «новообразование» означают одну или несколько клеток, возникших в результате чрезмерного роста или пролиферации клеток, как доброкачественных (нераковых), так и злокачественных (раковых), включая предраковые поражения. Рак, как раскрыто в настоящем документе, может быть гематологической злокачественной опухолью. Примеры гематологических злокачественных опухолей включают, например, острый миелоидный лейкоз (ОМЛ), хронический миелоидный лейкоз (ХМЛ), миелодиспластический синдром (МДС), острый лимфобластный лейкоз (ОЛЛ), такой как В-клеточный острый лимфобластный лейкоз (В-ОЛЛ), Т-клеточный острый лимфобластный лейкоз (Т-ОЛЛ), лейкоз смешанного происхождения ОЛЛ (МЛЛ-ОЛЛ), В-клеточный лейкоз-предшественник ОЛЛ (ВКП-ОЛЛ), Ph+ОЛД Ph-подобный ОЛЛ, хронический лимфоцитарный лейкоз (ХЛЛ), хронический миелоидный лейкоз в бластном кризе/фазе (ХМЛ-БФ) и бластому плазмоцитоидных дендритных клеток (БПДК). Дополнительные примеры «рака» включают В-клеточные лимфомы, включая НХЛ, В-клеточный лимфобластный лейкоз/лимфому-предшественницу и зрелые В-клеточные новообразования, такие как В-клеточный хронический лимфоцитарный лейкох (СГЬ)/малая лимфоцитарная лимфома (SLL), В-клеточный пролимфоцитарный лейкоз, лимфоплазмацитарная лимфома, мантийноклеточная лимфома (MCL), фолликулярная лимфома (FL), включая низкий класс, ФЛ промежуточного и высокого класса, кожная фолликулярная лимфома, лимфома фолликулярного центра, В-клеточная лимфома маргинальной зоны (тип MALT, узловой и селезеночный тип), волосатоклеточный лейкоз, диффузная большая В-клеточная лимфома, лимфома Беркитта, плазмацитома, плазмоклеточная миелома, посттрансплантационное лимфопролиферативное расстройство, макроглобулинемия Вальденстрема и анапластическая крупноклеточная лимфома (ALCL). Рак может быть раком, экспрессирующим CD123 («рак, экспрессирующий CD123»).

[112] Термины «раковая клетка», «опухолевая клетка» и их грамматические эквиваленты относятся к общей популяции клеток, полученных из опухоли или предракового поражения, включая как неопухолевые клетки, составляющие основную часть популяции опухолевых клеток, так и опухолевые стволовые клетки (раковые стволовые клетки). Как используется в настоящем документе, термин «опухолевая клетка» будет модифицирован термином «неопухолевая», когда речь идет исключительно об опухолевых клетках, не обладающих способностью к обновлению и дифференцировке, чтобы отличить эти опухолевые клетки от раковых стволовых клеток.

[113] «Рефрактерный» рак - это рак, который прогрессирует, даже если больному раком назначено противораковое лечение, например, химиотерапия. Рак может быть резистентным в начале лечения или стать резистентным во время лечения.

[114] «Первично-рефрактерный» рак - это рак, при котором не достигается полная ремиссия (CR) или полная ремиссия с неполным выздоровлением (CRi) после того, как пациент получил 2 цикла интенсивной химиотерапии.

[115] «Рецидивный рак» - это рак, при котором рак или признаки и симптомы рака возвращаются после периода улучшения.

[116] Используемый в настоящем документе термин «подходящий для лечения ОМЛ» относится к субъекту с ОМЛ, который подходит для интенсивной терапии. Показатели для определения субъекта, подходящего для лечения ОМЛ, включают, например, физическую работоспособность (определяемую, например, статус работоспособности Восточной кооперативной онкологической группы (ECOG PS), статус работоспособности Карнофски (KPS) и краткая батарея физической работоспособности (SPPB)), сопутствующие заболевания (определяемые индексом коморбидности Charlson (CCI) или индексом коморбидности, специфичным для трансплантации гемопоэтических клеток (HCT-CI)), когнитивные функции и прогностические модели (включая, но не ограничиваясь ими, цитогенетическую группу, возраст, количество лейкоцитов, ЛДГ, тип ОМЛ). В некоторых случаях субъектом, подходящим для лечения ОМЛ, является субъект в возрасте 60 лет или моложе 60 лет.

[117] Используемый в настоящем документе термин «не подходящий для лечения ОМЛ» относится к субъекту с ОМЛ, который не подходит для интенсивной терапии. Показатели для определения субъекта, не подходящего для лечения ОМЛ, включают, например, физическую работоспособность (определяемую, например, статус работоспособности Восточной кооперативной онкологической группы (ECOG PS), статус работоспособности Карнофски (KPS) и краткая батарея физической работоспособности (SPPB)), сопутствующие заболевания (определяемые индексом коморбидности Charlson (CCI) или индексом коморбидности, специфичным для трансплантации гемопоэтических клеток (HCT-CI)), когнитивные функции и прогностические модели (включая, но не ограничиваясь ими, цитогенетическую группу, возраст, количество лейкоцитов, ЛДГ, тип ОМЛ). В некоторых случаях субъектом, не подходящим для лечения ОМЛ, является субъект в возрасте старше 60 лет.

[118] Термин «повышенная экспрессия» или «сверхэкспрессия» CD123 в конкретной опухоли, ткани или образце клеток относится к CD123, который присутствует на более высоком уровне, чем тот, который присутствует в здоровой или не больной (нативной, дикого типа) ткани или клетках того же типа или происхождения.

[119] Такие термины, как «лечить» или «лечение» или «лечить» или «облегчать» или «облегчать» относятся к терапевтическим мерам, которые излечивают, замедляют, ослабляют симптомы и/или останавливают прогрессирование диагностированного патологического состояния или расстройства. Таким образом, к нуждающимся в лечении относятся те, у кого уже диагностировано или подозревается данное расстройство.

[120] Термин «терапевтически эффективное количество» относится к количеству антитела, иммуноконъюгата или другого препарата, эффективному для «лечения» заболевания или расстройства у субъекта или млекопитающего. В случае рака терапевтически эффективное количество препарата может уменьшить количество раковых клеток; уменьшить размер или бремя опухоли; ингибировать (т.е., замедлить в некоторой степени и в определенном варианте реализации остановить) проникновение раковых клеток в периферические органы; облегчить в некоторой степени один или более симптомов, связанных с раком; и/или привести к благоприятному ответу, такому как полная ремиссия (CR), полная ремиссия с неполным восстановлением (CRi); полная ремиссия с частичным гематологическим восстановлением (CRh); CR без минимальной остаточной болезни (CRMRD-); полная клиническая ремиссия (CRc); морфологическое состояние без лейкоза (MLFS); частичная ремиссия (PR); продолжительность ответа (DOR); и уменьшение прогрессирующего заболевания (PD).

[121] Термин «благоприятно реагировать» обычно означает вызывать благоприятное состояние у субъекта. В отношении лечения рака этот термин относится к обеспечению терапевтического эффекта на субъект. Положительный терапевтический эффект при раке может быть измерен несколькими способами (См., W.A. Weber, J. Nucl. Med. 50:1S-10S (2009)). Благоприятный ответ можно оценить, например, по полной ремиссии (CR), полной ремиссии с неполным восстановлением (CRi); CR без минимальной остаточной болезни (CRMRD-); полной клинической ремиссии (CRc); морфологическому состоянию без лейкоза; частичной ремиссии (PR); уменьшению прогрессирующей болезни (PD) или любой их комбинации.

[122] «Полный ответ» или «полная ремиссия» или «CR» означает исчезновение всех признаков опухоли или рака в ответ на лечение. Это не всегда означает, что рак излечен. Под «CRi» понимается морфологически полная ремиссия с неполным гематологическим (анализ крови) восстановлением. «CRMRD» означает полное выздоровление без измеримой остаточной болезни.

[123] «Минимальная остаточная болезнь», «MRD» или «MRD+» означает сохранение после терапии раковых (например, лейкемических) клеток на уровне ниже морфологического обнаружения. MRD можно оценить, например, с помощью центральной проточной цитометрии. Статус MRD+ является предиктором рецидива и ассоциируется со снижением выживаемости у пациентов с ОМЛ.

[124] «Частичный ответ» или «PR» означает уменьшение размера или объема одной или нескольких опухолей или поражений, или степени распространения рака в организме в ответ на лечение.

[125] «Прогрессирующее заболевание» означает появление еще одного нового поражения или опухоли и/или однозначное прогрессирование существующих нецелевых поражений. Прогрессирующее заболевание может также означать рост опухоли более чем на 20% с момента начала лечения, что связано с увеличением массы или распространением опухоли.

[126] Термины «линия лечения» или «линия терапии» относятся к терапевтическому режиму, который может включать, но не ограничивается хирургическим вмешательством, лучевой терапией, химиотерапией, дифференцирующей терапией, биотерапией, иммунной терапией, индукционной терапией, консолидирующей терапией, трансплантацией, поддерживающей терапией или введением одного или нескольких противораковых агентов (например, цитотоксического агента и/или антипролиферативного соединения).

[127] Термины «лечение первой линии», «терапия первой линии» и «терапия первой линии» означают предпочтительное и стандартное начальное лечение конкретного заболевания, например, индукционная терапия, консолидирующая терапия, трансплантация, поддерживающая терапия. Эти способы лечения отличаются от терапии «второго ряда», которую пробуют, когда терапия первого ряда не дает должного эффекта. Терапии «третьей линии» применяются в тех случаях, когда терапия первой линии и терапия второй линии не дают должного эффекта. «Лечения спасения» или «схема спасения» - это лечение, которое проводится, когда рак не реагирует на другие способы лечения.

[128] Например, комбинация иммуноконъюгата CD123 (например, IMGN632) с ингибитором BCL-2 и/или ГМА, представленная в настоящем документе, может применяться в качестве терапии первой линии, терапии второй линии или терапии третьей линии. Комбинация иммуноконъюгата CD123 (например, IMGN632) с ингибитором BCL-2 и/или ГМА, представленная в настоящем документе, может быть назначена в качестве линии терапии у пациентов, получивших по меньшей мере 1, по меньшей мере 2 или по меньшей мере 3 линии терапии (например, терапия первой линии и одна терапия спасения) до лечения комбинацией иммуноконъюгата CD123 (например, IMGN632) с ингибитором BCL-2 и/или ГМА, представленной в настоящем документе. В некоторых вариантах реализации комбинация иммуноконъюгата CD123 (например, IMGN632) с ингибитором BCL-2 и/или ГМА, представленная в настоящем документе, может применяться в качестве линии терапии у пациентов, получивших не более 1, не более 2, не более 3, не более 4, не более 5 или не более 6 линий терапии.

[129] Термин «поддерживающая терапия» относится к терапии, которая проводится для того, чтобы рак не возвращался после того, как он исчез после первоначальной терапии.

[130] Фраза «фармацевтически приемлемый» указывает на то, что вещество или композиция должны быть совместимы химически и/или токсикологически с другими ингредиентами, входящими в состав, и/или с млекопитающим, получающим лечение с их помощью.

[131] Термин «фармацевтическая композиция» относится к препарату, который находится в такой форме, чтобы биологическая активность активного ингредиента была эффективной, и который не содержит дополнительных компонентов, неприемлемо токсичных для субъекта, которому будет вводиться композиция. Состав может быть стерильным.

[132] Термин «субъект» относится к любому животному (например, млекопитающему), включая, но не ограничиваясь людьми, нечеловеческими приматами, грызунами и т.п., которое должно стать получателем определенного лечения. Как правило, термины «субъект» и «пациент» используются здесь взаимозаменяемо в отношении человека.

[133] Введение «в комбинации с» одним или несколькими другими терапевтическими агентами включает одновременное (параллельное) или последовательное введение в любом порядке.

[134] Комбинированная терапия может обеспечить «синергизм» и оказаться «синергической», т.е. эффект, достигаемый при совместном использовании активных ингредиентов, превышает сумму эффектов, возникающих при использовании соединений по отдельности. Синергетический эффект может быть достигнут, когда активные ингредиенты: (1) совместно формулируются и вводятся или доставляются одновременно в комбинированном препарате единичной дозировки; (2) доставляются последовательно, чередуясь или параллельно в виде отдельных препаратов; или (3) по какой-либо другой схеме. При чередовании терапии синергический эффект может быть достигнут при последовательном введении или доставке соединений, например, путем различных инъекций в отдельных шприцах.

[135] Термин «инструктирование» означает предоставление указаний по применению терапии, лекарств, лечения, режимов лечения и тому подобного любым способом, например, в письменной форме, например, в виде вкладышей в упаковку или других письменных рекламных материалов.

[136] «Эффективное количество» антитела, иммуноконъюгата или другого препарата, как раскрыто в настоящем документе, представляет собой количество, достаточное для выполнения конкретно указанной цели. «Эффективное количество» может быть определено эмпирически и обычным способом в зависимости от заявленной цели.

[137] Полипептид, антитело, полинуклеотид, вектор, клетка или композиция, которая является «изолированной» - это полипептид, антитело, полинуклеотид, вектор, клетка или композиция, которая находится в форме, не встречающейся в природе. Изолированные полипептиды, антитела, полинуклеотиды, векторы, клетки или композиции включают те, которые были очищены до такой степени, что они больше не находятся в форме, в которой они встречаются в природе. В некоторых вариантах реализации изобретения антитело, полинуклеотид, вектор, клетка или композиция, которые выделяются, являются по существу чистыми.

[138] Как используется в настоящем документе, «практически чистый» относится к материалу, который является по меньшей мере 50% чистым (т.е. свободным от загрязнений), по меньшей мере 90% чистым, по меньшей мере 95% чистым, по меньшей мере 98% чистым или по меньшей мере 99% чистым.

[139] Как используется в настоящем раскрытии и формуле изобретения, (англ.) формы единственного числа «а», «ап» и «the» включают формы множественного числа, если контекст явно не диктует иное.

[140] Следует понимать, что в тех случаях, когда варианты реализации изобретения описаны в настоящем документе с использованием формулировки «включающий», также предусмотрены аналогичные варианты реализации изобретения, описанные в терминах «состоящий из» и/или «состоящий по существу из».

[141] Термин «и/или», используемый в таких фразах, как «А и/или В», в данном документе предназначен для включения как «А и В», «А или В», «А» и «В». Аналогичным образом, термин «и/или», используемый в такой фразе, как «А, В, и/или С», предназначен для охвата каждого из следующих воплощений: А, В и С; А, В или С; А или С; А или В; В или С; А и С; А и В; В и С; А (только); В (только); и С (только).

II. Иммуноконъюгаты анти-CD123

[142] В настоящем документе описаны способы введения иммуноконъюгатов, специфически связывающих CD123 (например, IMGN632), в комбинации с другими агентами. Иммуноконъюгаты, которые специфически связываются с CD123, в настоящем документе называются «CD123-иммуноконъюгаты» или «анти-CD123 иммуноконъюгаты». Такие иммуноконъюгаты состоят из анти-CD123 антитела или его антиген-связывающего фрагмента и лекарственного средства (например, цитотоксического агента). Препарат (например, цитотоксический агент) может быть присоединен к анти-CD123 антителу или его антиген-связывающему фрагменту с помощью линкера.

[143] В некоторых вариантах реализации анти-CD123 антитела или их антиген-связывающие фрагменты представляют собой гуманизированные антитела или их антиген-связывающие фрагменты. В некоторых вариантах реализации гуманизированное антитело или фрагмент представляет собой антитело с измененной поверхностью или его антиген-связывающий фрагмент. В некоторых вариантах реализации антитела или их антиген-связывающие фрагменты представляют собой полностью гуманизированные антитела или их антиген-связывающие фрагменты.

[144] В одном варианте реализации иммуноконъюгат представлен следующей формулой:

где СBА представляет собой анти-CD123 антитело или антиген-связывающий фрагмент или полипептид, ковалентно связанный с СуС1 через остаток цистеина; и WC - 1 или 2.

[145] В приведенной выше формуле, Су^С1 представлен следующими формулами:

или

или фармацевтически приемлемую соль, где двойная линия между N и С представляет собой одинарную связь или двойную связь, при условии, что когда это двойная связь, X отсутствует и Y представляет собой -Н или (С₁-С4)алкил; и когда это одинарная связь, X представляет собой -Н или аминовое защитное соединение, Y представляет собой -ОН или -SO3M, и М представляет собой Н+ или катион;

[146] R₅ это -Н или (С₁-С₃)алкил;

[147] Р - аминокислотный остаток или пептид, содержащий от 2 до 20 аминокислотных остатков;

[148] R_a и R_b, для каждого случая, независимо -Н, (С₁-С₃)алкил или заряженная замещающая или ионизируемая группа Q;

[149] W' это -NR^e',

[150] R^e'(это -(CH₂-CH₂-O)_n-R^k;

[151] n - целое число от 2 до 6;

[152] R^k это -Н или -Me;

[153] R^x3 это (С₁-С₆)алкил; и,

[154] L_C представлен , s1 это сайт, ко валентно связанный с CBA, и s2 - сайт, ко валентно связанный с группой -С(=O)- на Су^С1; где:

[155] R₁₈ и R₂₀, для каждого случая, независимо -Н или (С₁-С₃)алкил;

[156] m'' - целое число от 1 до 10; и

[157] R^h это -Н или (C₁-С₃)алкил.

[158] В некоторых вариантах реализации R_a и R_b - оба Н; и R₅ это Н или Me.

[159] В некоторых вариантах реализации Р - пептид, содержащий от 2 до 5 аминокислотных остатков. Например, Р может быть избран из Gly-Gly-Gly, Ala-Val, Val-Ala, Val-Cit, Val-Lys, Phe-Lys, Lys-Lys, Ala-Lys, Phe-Cit, Leu-Cit, I1e-Cit, Trp, Cit, Phe-Ala, Phe-N⁹-тозил-Arg, Phe-N⁹-нитро-Arg, Phe-Phe-Lys, D-Phe-Phe-Lys, Gly-Phe-Lys, Leu-Ala-Leu, I1e-Ala-Leu, Val-Ala-Val, Ala-Leu-Ala-Leu, p-Ala-Leu-Ala-Leu, Gly-Phe-Leu-Gly, Val-Arg, Arg-Val, Arg-Arg, Val-D-Cit, Val-D-Lys, Val-D-Arg, D-Val-Cit, D-Val-Lys, D-Val-Arg, D-Val-D-Cit, D-Val-D-Lys, D-Val-D-Arg, D-Arg-D-Arg, Ala-Ala, Ala-D-Ala, D-Ala-Ala, D-Ala-D-Ala, Ala-Met и Met-Ala. В некоторых вариантах реализации Р представляет собой Gly-Gly-Gly, Ala-Val, Ala-Ala, Ala-D-Ala, D-Ala-Ala или D-Ala-D-Ala. В некоторых вариантах реализации Q представляет собой -SO₃M.

[160] В некоторых вариантах реализации R₁₉ и R₂₀ - оба Н; и m'' целое число от 1 до 6.

[161] В некоторых вариантах реализации -L_c- представлен следующей формулой:

[162] В некоторых вариантах реализации иммуноконъюгат представлен следующей формулой:

или

или фармацевтически приемлемой солью, где двойная линия между N и С представляет собой одинарную связь или двойную связь, при условии, что когда это двойная связь, X отсутствует и Y представляет собой -Н, и когда это одинарная связь, X представляет собой -Н и Y представляет собой -ОН или -SO3M.

[163] В качестве примера, анти-CD123 антитело или его антиген-связывающий фрагмент может входить в состав иммуноконъюгата, используемого в настоящих способах. Были описаны антитела против CD123 или их антиген-связывающие фрагменты (см., например, Патент США №10,077,313 В2, содержание которого включено в настоящий документ посредством ссылки во всей своей полноте). Анти-CD123 антитело или его антиген-связывающий фрагмент может представлять собой антитело huCD123-6Gv4.7 ("G4723A") (см. WO 2017/004025, WO 2017/004026 и PCT/US2018/052212, содержание каждого из которых включено в настоящий документ посредством ссылки во всей своей полноте) или может содержать последовательности антитела G4723A, например, как показано ниже в таблицах 1-3. Например, анти-CD123 антитело или его антиген-связывающий фрагмент для использования в методах, описанных в настоящем документе, может включать вариабельные CDR-1, CDR-2 и CDR-3 тяжелой цепи, включающие последовательности SEQ ID NO: 5, 6 и 7, соответственно, и/или вариабельные CDR-1, CDR-2 и CDR-3 легкой цепи, включающие последовательности SEQ ID NO: 8, 9 и 10, соответственно. Анти-CD123 антитело или его антиген-связывающий фрагмент для использования в способах, описанных в настоящем документе, может включать вариабельный домен тяжелой цепи, включающий последовательность, изложенную в SEQ ID NO: 1. Анти-CD123 антитело или его антиген-связывающий фрагмент для применения в способах, описанных в настоящем документе, может включать вариабельный домен легкой цепи, состоящий из последовательности, представленной в SEQ ID NO: 2. Анти-CD123 антитело или его антиген-связывающий фрагмент для применения в способах, описанных в настоящем документе, может включать вариабельный домен тяжелой цепи, состоящий из последовательности, изложенной в SEQ ID NO: 1, и вариабельный домен легкой цепи, состоящий из последовательности, изложенной в SEQ ID NO: 2. Анти-CD123 антитело или его антиген-связывающий фрагмент для применения в способах, описанных в настоящем документе, может включать тяжелую цепь, состоящую из последовательности, представленной в SEQ ID NO: 3. Анти-CD123 антитело или его антиген-связывающий фрагмент для применения в способах, описанных в настоящем документе, может включать легкую цепь, состоящую из последовательности, представленной в SEQ ID NO: 4. Анти-CD123 антитело или его антиген-связывающий фрагмент для применения в способах, описанных в настоящем документе, может включать тяжелую цепь, включающую последовательность, изложенную в SEQ ID NO: 3, и легкую цепь, включающую последовательность, изложенную в SEQ ID NO: 4.

[164] Анти-CD123 антитело или его антиген-связывающий фрагмент для использования в методах, представленных в настоящем документе, может связываться с эпитопом в пределах аминокислоте 205 по 346 человеческого CD123.

[165] Анти-CD123 антитело или его антиген-связывающий фрагмент для использования в методах, описанных в настоящем документе, могут быть получены рекомбинантным способом. Например, анти-CD123 антитело или его антиген-связывающий фрагмент для использования в методах, описанных в настоящем документе, может быть получено в линии клеток млекопитающих, например, в клетке СНО.

[166] Анти-CD123 антитело или его антиген-связывающий фрагмент для использования в способах, описанных в настоящем документе, может быть модифицированное цистеином антителом или фрагментом. Модифицированные цистеином антитела могут быть ковалентно конъюгированы с цитотоксическими агентами, представляющими интерес, для получения иммуноконъюгатов.

[167] Как используется в настоящем документе, выражение «связанный с клеточно-связывающим агентом» или «связанный с анти-CD123 антителом или фрагментом» относится к конъюгированной молекуле, включающей по меньшей мере один цитотоксический агент, связанный с клеточно-связывающим агентом, например, анти-CD123 антителом или фрагментом, посредством подходящей связывающей группы, или его предшественником. Линкеры включают, например, пептидные линкеры.

[168] Иммуноконъюгат может содержать несколько цитотоксических агентов, связанных с антителом или его антиген-связывающим фрагментом. Как предоставлено в настоящем документе, в некоторых случаях от 1 до 3 лекарственных молекул, например, цитотоксических агентов, связаны с анти-CD123 антителом или его антиген-связывающим фрагментом. В одном аспекте иммуноконъюгат включает 1, 2 или 3 цитотоксических агента на одно антитело или его антиген-связывающий фрагмент.

[169] Композиция, включающая иммуноконъюгаты, может содержать иммуноконъюгаты с различным количеством цитотоксических агентов, связанных с одним антителом или его антиген-связывающим фрагментом. Таким образом, композиция, включающая иммуноконъюгаты, может содержать среднее количество цитотоксических агентов, связанных на одно антитело или его антиген-связывающий фрагмент. В одном аспекте фармацевтическая композиция, включающая иммуноконъюгаты анти-CD123, содержит от около 1 до около 3 цитотоксических агентов на анти-CD123 антитело или антиген-связывающий фрагмент, от около 1,5 до около 2,5 цитотоксических агентов на анти-CD123 антитело или антиген-связывающий фрагмент, от около 1,5 до около 2,1 цитотоксических агентов на анти-CD123 антитело или антиген-связывающий фрагмент, от около 1,5 до около 2,0 цитотоксических агентов на анти-CD123 антитело или антиген-связывающий фрагмент.

[170] В некоторых случаях фармацевтическая композиция для применения в способах, описанных в настоящем документе, включает анти-CD123 иммуноконъюгаты, содержащие от около 1 до около 3 цитотоксических агентов на одно антитело или антиген-связывающий фрагмент, например, когда среднее количество цитотоксических агентов на одно антитело или антиген-связывающий фрагмент составляет от около 1 до около 3 (например, 1.0, 1.1, 1.2, 1.3, 1.4, 1.5, 1.6, 1.7, 1.8, 1.9, 2.0, 2.1, 2.2, 2.3, 2.4, 2.5, 2.6, 2.7, 2.8, 2.9, 3.0).

[171] В некоторых случаях фармацевтическая композиция для использования в способах, представленных в настоящем документе, включает иммуноконъюгаты анти-CD123 со средним содержанием около 1±0,2, около 1,1±0,2, около 1,2±0,2, около 1,3±0,2, около 1,4±0,2, около 1,5±0,2, около 1,6±0,2, около 1,7±0,2, около 1,8±0,2, около 1,9±0,2, около 2,0±0,2, около 2,1±0,2, 2,2±0,2, 2,3±0,2, 2,4±0,2, 2,5±0,2 или 2,6±0,2 молекул лекарственных средств (например, цитотоксических агентов), присоединенных на одно антитело или его антиген-связывающий фрагмент. В некоторых аспектах фармацевтическая композиция, представленная в настоящем документе, включает иммуноконъюгаты анти-CD123, содержащие в среднем от 1,5 до 2,1 молекул лекарственных средств (например, цитотоксических агентов) на одно антитело.

[172] Антитела или их антиген-связывающие фрагменты для использования в настоящем раскрытии могут быть связаны с цитотоксическими агентами, например, путем связывания с аминогруппой боковой цепи Lys, тиоловой группой боковой цепи Cys или окисленным N-концом Ser/Thr. Цитотоксические агенты включают, например, алкилирующие агенты ДНК, такие как индолинобензодиазепеновые (IGN) алкилаторы ДНК. В некоторых случаях цитотоксический агент представляет собой индолинобензодиазепиновый псевдодимер. В некоторых случаях анти-CD123 иммуноконъюгат для использования в настоящем раскрытии включает DGN549-C.

III. Ингибиторы BCL-2

[173] В настоящем документе описаны методы введения анти-CD123 иммуноконъюгатов, таких как EVIGN632, в комбинации с ингибиторами BCL-2. Сверхэкспрессия BCL-2 была продемонстрирована в клетках ХЛЛ и ОМЛ, где она опосредует выживание опухолевых клеток и ассоциируется с устойчивостью к химиотерапевтическим препаратам. Ингибиторы BCL-2 могут обратить этот эффект, например, способствуя апоптозу.

[174] К ингибиторам BCL-2 относятся, например, венетоклакс (Venclexta®), GX15-070 (GeminX), AT-101 (Ascenta) и ABT-263 (Navitoclax; Abbott).

[175] Венетоклакс (также известный как 4-(4-{[2-(4-хлорфенил)-4,4 диметилциклогекс-1-ен-1-ил]метил}пиперазин-1-ил)-N-({3-нитро-4-[(тетрагидро-2Н-пиран-4-илметил)амино]фенил}сульфонил)-2-(1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-5-илокси)бензамид)) является селективным ингибитором BCL-2. Считается, что венетоклакс помогает восстановить процесс апоптоза, связываясь непосредственно с белком BCL-2, вытесняя про-апоптотические белки, такие как ВГМ, вызывая пермеабилизацию внешней мембраны митохондрий и активацию каспаз. Венетоклакс является действующим веществом препарата Venclexta®, который выпускается в виде таблеток для перорального приема.

[176] В некоторых вариантах реализации ингибитор BCL-2 представляет собой небольшую молекулу. В некоторых случаях ингибитором BCL-2 является венетоклакс.

IV. Гипометилирующие агенты

[177] В настоящем документе описаны способы введения анти-CD123 иммуноконъюгатов, таких как IMGN632, в комбинации с гипометилирующими агентами.

[178] Азацитидин (также известный как «4-амино-1-бета-D-рибофуранозил-s-триазин-2(1H)-он" или «5-азацитин») является аналогом пиримидинового нуклеозида. Считается, что он вызывает антинеопластическую активность путем двух механизмов: ингибирования ДНК-метилтрансферазы в низких дозах, вызывая гипо метилирование ДНК, и прямой цитотоксичности в аномальных кроветворных клетках костного мозга через встраивание в ДНК и РНК в высоких дозах, что приводит к гибели клеток. Азацитин является активным ингредиентом препарата Vidaza®, который поставляется в стерильной форме для восстановления в виде суспензии для подкожного введения или восстановления в виде раствора с последующим разведением для внутривенного введения.

[179] Децитабин (также известный как 4-амино-1-(2-дезокси-β-D-эритро-пентофуранозил)-1,3,5-триазин2(1Н)-он) является аналогом нуклеозида 2'-дезоксицитидина. Считается, что он оказывает противоопухолевое действие после фосфорилирования и прямого включения в ДНК и ингибирования ДНК-метилтрансферазы, вызывая гипометилирование ДНК и клеточную дифференциацию или апоптоз. Децитабин является активным ингредиентом препарата Dacogen®, который поставляется в виде стерильного липофилизированного порошка для восстановления для внутривенного введения.

[180] Применение ГМА в комбинации с анти-CD123 иммуноконъюгатом (например, IMGN632) может уменьшить количество и/или частоту применения ГМА, необходимых для достижения той же эффективности, тем самым снижая токсичность терапии. Введение ГМА в комбинации с анти-CD123 иммуноконъюгатом (например, IMGN632) также может повысить эффективность терапии.

[181] В некоторых вариантах реализации ГМА представляет собой небольшую молекулу. В некоторых вариантах реализации ГМА представляет собой азацитидин. В некоторых вариантах реализации ГМА представляет собой децитабин.

V. Фармацевтические композиции и наборы

[182] Как предусмотрено в настоящем документе, анти-CD123 иммуноконъюгаты (например, IMGN632) могут использоваться в комбинации с ингибиторами BCL-2 (например, венетоклаксом) и/или гипометилирующими агентами (ГМА) (например, азацитидином или децитабином) для лечения рака.

[183] В некоторых вариантах реализации иммуноконъюгат анти-CD123 (например, IMGN632) и ингибитор BCL-2 (например, венетоклакс) содержатся в одной фармацевтической композиции. В некоторых вариантах реализации иммуноконъюгат анти-CD123 (например, IMGN632) и ингибитор BCL-2 (например, венетоклакс) содержатся в одной фармацевтической композиции. В других вариантах реализации набор включает иммуноконъюгат анти-CD123 (например, IMGN632) и инструкции по применению иммуноконъюгата анти-CD123 (например, IMGN632) и ингибитора BCL-2 (например, венетоклакса). В других вариантах реализации набор включает ингибитор BCL-2 (например, венетоклакс) и инструкции по применению ингибитора BCL-2 и иммуноконъюгата анти-CD123 (например, IMGN632).

[184] В некоторых вариантах реализации иммуноконъюгат анти-CD123 (например, IMGN632) и ГМА (например, азацитидин или децитабин) содержатся в одной фармацевтической композиции. В некоторых вариантах реализации иммуноконъюгат анти-CD123 (например, IMGN632) и ГМА (например, азацитидин или децитабин) содержатся в двух разных фармацевтических композициях внутри одного набора В других вариантах реализации набор включает иммуноконъюгат анти-CD123 (например, IMGN632) и инструкции по введению иммуноконъюгата анти-CD123 (например, IMGN632) и ГМА (например, азацитидина или децитабина). В других вариантах реализации набор включает ГМА (например, азацитидин или децитабин) и инструкции по применению ГМА (например, азацитидина или децитабина) и иммуноконъюгата анти-CD123 (например, IMGN632).

[185] В некоторых вариантах реализации иммуноконъюгат анти-CD123 (например, IMGN632), ингибитор BCL-2 (например, венетоклакс) и ГМА (например, азацитидин или децитабин) содержатся в одной фармацевтической композиции. В некоторых вариантах реализации иммуноконъюгат анти-CD123 (например, IMGN632), ингибитор BCL-2 (например, венетоклакс) и ГМА (например, азацитидин или децитабин) содержатся в двух или трех отдельных фармацевтических композициях внутри одного набора.

[186] В других вариантах реализации набор включает иммуноконъюгат анти-CD123 (например, IMGN632) и инструкции по введению иммуноконъюгата анти-CD123 (например, IMGN632) с ингибитором BCL-2 (например, венетоклаксом) и ГМА (например, азацитидином или децитабином). В других вариантах реализации набор включает ингибитор BCL-2 (например, венетоклакс) и инструкции по применению ингибитора BCL-2 и иммуноконъюгата анти-CD123 (например, IMGN632) и ГМА (например, азацитидином или децитабином). В других вариантах реализации набор включает ГМА (например, азацитидин или децитабин) и инструкции по применению ГМА (например, азацитидина или децитабина) с ингибитором BCL-2 (например, венетоклаксом) и иммуноконъюгатом анти-CD123 (например, IMGN632).

[187] В других вариантах реализации набор включает иммуноконъюгат анти-CD123 (например, IMGN632), ингибитор BCL-2 (например, венетоклакс) и инструкции по введению иммуноконъюгата анти-CD123 (например, IMGN632) с ингибитором BCL-2 (например, венетоклаксом) и ГМА (например, азацитидином или децитабином). В других вариантах реализации набор включает иммуноконъюгат анти-CD123 (например, IMGN632), ГМА (например, азацитидин или децитабин) и инструкции по введению иммуноконъюгата анти-CD123 (например, IMGN632) и ГМА (например, азацитидина или децитабина) с ингибитором BCL-2 (например, венетоклаксом). В других вариантах реализации набор включает ингибитор BCL-2 (например, венетоклакс), ГМА (например, азацитидин или децитабин), и инструкции по введению ингибитора против BCL-2 (например, венетоклакса), ГМА (например, азацитидина или децитабина) с анти-CD123 иммуноконъюгатом (например, IMGN632).

[188] В некоторых вариантах реализации изобретения фармацевтические композиции, представленные в настоящем документе, включают анти-CD123 иммуноконъюгат (например, IMGN632), ингибитор BCL-2 (например, венетоклакс) и/или ГМА (например, азацитидин или децитабин) и фармацевтически приемлемый носитель. Эти фармацевтические композиции находят применение в ингибировании роста опухоли и лечении рака у субъектов (например, пациентов-людей).

[189] Фармацевтические композиции для использования согласно настоящему документу могут содержать анти-CD123 иммуноконъюгат (например, IMGN632), ингибитор BCL-2 (например, венетоклакс) и/или ГМА (например, азацитидин или децитабин) с желаемой степенью чистоты в физиологически приемлемом носителе, эксципиенте или стабилизаторе (Remington's Pharmaceutical Sciences (1990) Mack Publishing Co., Easton, PA). Приемлемые носители, вспомогательные вещества или стабилизаторы нетоксичны для реципиентов в используемых дозах и концентрациях. (См., например, Gennaro, Remington: The Science and Practice of Pharmacy with Facts and Comparisons: Drugfacts Plus, 20th ed. (2003); Ansel et al., Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems, 7th ed., Lippencott Williams and Wilkins (2004); Kibbe et al., Handbook of Pharmaceutical Excipients, 3rd ed., Pharmaceutical Press (2000)). Композиции, используемые для введения in vivo, могут быть стерильными. Это легко осуществляется путем фильтрации, например, через стерильные фильтрационные мембраны.

[190] В некоторых вариантах реализации фармацевтическая композиция, включающая анти-CD123 иммуноконъюгат (например, IMGN632) и/или ГМА (например, азацитидин или децитабин), разработана для парентерального (например, внутривенного) введения.

[191] В некоторых вариантах реализации фармацевтическая композиция, включающая ингибитор BCL-2 (например, венетоклакс), предназначена для перорального приема, например, в виде таблетки.

VI. Способы применения

[192] Как предусмотрено в настоящем документе, анти-CD123 иммуноконъюгаты (например, IMGN632) могут использоваться в комбинации с ингибиторами BCL-2 и/или гипометилирующими агентами (ГМА) для лечения гематологических раковых заболеваний.

VI (A). Выбор ракового заболевания

[193] Раковые заболевания, которые можно лечить с помощью способов, описанных в настоящем документе, включают гематологические раковые заболевания. В некоторых вариантах реализации гематологическая злокачественная опухоль имеет миелоидное происхождение. В некоторых вариантах реализации гематологическая злокачественная опухоль имеет лимфоидное происхождение. В некоторых вариантах реализации гематологическая злокачественная опухоль имеет как миелоидное, так и лимфоидное происхождение. В некоторых вариантах реализации гематологическая злокачественная опухоль является В-клеточной злокачественной опухолью. В некоторых вариантах реализации гематологическая злокачественная опухоль представляет собой гематологическую злокачественную опухоль, экспрессирующую CD123.

[194] В некоторых вариантах реализации гематологическая злокачественная опухоль выбрана из группы острого миелоидного лейкоза (ОМЛ), миелодиспластического синдрома (МДС), острого лимфобластного лейкоза (ОЛЛ), В-клеточного острого лимфобластного лейкоза (В-ОЛЛ), Т-клеточного острого лимфобластного лейкоза (Т-ОЛЛ), хронического миелоидного лейкоза в бластном кризе/фазе (ХМЛ-БФ) и бластных плазмоцитоидных дендритных клеток (БПДК). В некоторых вариантах реализации гематологическая злокачественная опухоль является хроническим миеломоноцитарным лейкозом (ХММЛ). В некоторых вариантах реализации гематологическая злокачественная опухоль является миелофиброзом (МФ).

[195] В некоторых случаях вариантах реализации гематологическая злокачественная опухоль является рецидивной гематологической злокачественной опухолью. В некоторых вариантах реализации гематологическая злокачественная опухоль является рефрактерной гематологической злокачественной опухолью.

[196] В некоторых вариантах реализации гематологическая злокачественная опухоль является ОМЛ. В некоторых вариантах реализации ОМЛ представляет собой рецидивный ОМЛ. В некоторых вариантах реализации ОМЛ представляет собой рефрактерный ОМЛ. В некоторых вариантах реализации ОМЛ не является вторичным ОМЛ. В некоторых вариантах реализации ОМЛ представляет собой подходящий для лечения ОМЛ. В некоторых вариантах реализации ОМЛ представляет не подходящий для лечения ОМЛ.

[197] В некоторых вариантах реализации гематологическая злокачественная опухоль представляет собой БПДК. В некоторых вариантах реализации БПОДК представляет собой рецидивную БПДК. В некоторых вариантах реализации БПДК представляет собой рефрактерную БПДК.

[198] В некоторых вариантах реализации гематологическая злокачественная опухоль представляет собой ОЛЛ. В некоторых вариантах реализации ОЛЛ представляет собой рецидивный ОЛЛ. В некоторых вариантах реализации ОЛЛ представляет собой рефрактерный ОЛЛ.

[199] В некоторых вариантах реализации гематологическая злокачественная опухоль представляет собой МДС. В некоторых вариантах реализации МДС представляет собой МДС высокого риска.

[200] В некоторых вариантах реализации гематологическая злокачественная опухоль является хроническим миеломоноцитарным лейкозом (ХММЛ).

[201] В некоторых вариантах реализации гематологическая злокачественная опухоль является миелофиброзом (МФ).

[202] В некоторых вариантах реализации гематологическая злокачественная опухоль резистентна к химиотерапии.

[203] В некоторых вариантах реализации гематологическая злокачественная опухоль чувствительна к химиотерапии.

[204] В некоторых вариантах реализации гематологическая злокачественная опухоль экспрессирует множественную лекарственную резистентность 1 (МЛР1). В некоторых вариантах реализации гематологическая злокачественная опухоль экспрессирует Р-гликопротеин (Р-гп), связанный с множественной лекарственной резистентностью (МЛР). В некоторых вариантах реализации гематологическая злокачественная опухоль сверхэкспрессирует МЛР1 и Р-гп.

[205] В некоторых вариантах реализации гематологическая злокачественная опухоль или субъект с гематологической злокачественной опухолью имеет мутацию FLT3-ITD. В некоторых вариантах реализации гематологическая злокачественная опухоль или субъект с гематологической злокачественной опухолью не имеет мутацию FLT3-ITD.

[206] В некоторых вариантах реализации гематологическая злокачественная опухоль присутствует у субъекта в виде минимальной остаточной болезни (MRD). В некоторых вариантах реализации пациент МЛР+ имеет подходящий для лечения ОМЛ. В некоторых вариантах реализации пациент МЛР+ имеет не подходящий для лечения ОМЛ. Способы, представленные в настоящем документе, могут преобразовать пациентов МЛР+ в пациентов МЛР-. Способы, представленные в настоящем документе, также могут увеличить время безрецидивной выживаемости (например, медиану безрецидивной выживаемости) у пациентов МЛР+.

[207] В некоторых вариантах реализации по меньшей мере около 80% клеток гематологической злокачественной опухоли являются CD123+ (например, как определено локальной проточной цитометрией или иммуногистохимией).

[208] В некоторых вариантах реализации до введения было определено, что по меньшей мере около 80% клеток гематологической злокачественной опухоли являются CD123-положительными (например, как определено локальной проточной цитометрией или иммуногистохимией).

[209] В некоторых случаях рак ранее не лечили.

[210] В некоторых случаях человек получил по меньшей мере одну предшествующую схему лечения рака. В некоторых случаях человек получил одну предшествующую схему лечения рака. В некоторых случаях человек получил две предшествующие схемы лечения рака. В некоторых случаях человек получил две предшествующие схемы лечения рака. В некоторых случаях человек получил не более шести предшествующих схем лечения рака. В некоторых случаях человек получил по меньшей мере одну предшествующую схему лечения рака, однако не более шести предшествующих схем лечения рака.

[211] В одном случае рак ранее лечили ингибитором BCL-2. В одном случае рак ранее не лечили ингибитором BCL-2 (т.е. пациент является «интактным в отношении ингибитора BCL-2»).

[212] В одном случае рак ранее лечили венетоклаксом. В одном случае рак ранее не лечили венетоклексом (т.е. пациент является «интактным в отношении венетоклакса»).

[213] В одном случае рак ранее лечили гипометилирующим агентом. В одном случае рак ранее не лечили гипометилирующим агентом (т.е. пациент является «интактным в отношении гипометилирующего агента»).

[214] В одном случае рак ранее лечили азацитидином. В одном случае рак ранее не лечили азацитидином (т.е. пациент является «интактным в отношении азацитидина»).

[215] В одном случае рак ранее лечили децитабином. В одном случае рак ранее не лечили децитабином (т.е. пациент является «интактным в отношении децитабина»).

VI(B). Дозирование

[216] Как предусмотрено в настоящем документе, анти-CD123 иммуноконъюгат (например, IMGN632) может вводиться в определенной дозе и/или в определенные временные интервалы. Введение анти-CD123 иммуноконъюгатов (например, IMGN632) может быть, например, внутривенным.

[217] В некоторых вариантах реализации иммуноконъюгат анти-CD123 (например, IMGN632) вводят однократно в трехнедельном (21-дневном) цикле. В некоторых вариантах реализации иммуноконъюгат анти-CD123 (например, IMGN632) вводят три раза в трехнедельном цикле, например, где первое введение происходит в первый день (например, день 1), где второе введение происходит через три дня после первого введения (например, день 4), и где третье введение происходит через четыре дня после второго введения (например, день 7) 21-дневного цикла. В качестве примера, когда первое введение иммуноконъюгата (например, IMGN632) приходится на 7-й день 21-дневного цикла (например, когда иммуноконъюгат вводят в комбинации с ингибитором BCL-2 (например, венетоклаксом)), иммуноконъюгат (например, IMGN632) может быть введен на 7-й, 10-й и 14-й день 21-дневного цикла.

[218] В некоторых вариантах реализации иммуноконъюгат анти-CD123 (например, IMGN632) вводят однократно в четырехнедельном (28-дневном) цикле. В некоторых вариантах реализации иммуноконъюгат анти-CD123 (например, IMGN632) вводят три раза в четырехнедельном цикле, например, где первое введение происходит в первый день (например, день 1), где второе введение происходит через три дня после первого введения (например, день 4), и где третье введение происходит через четыре дня после второго введения (например, день 7) 28-дневного цикла. В качестве примера, когда первое введение иммуноконъюгата (например, IMGN632) приходится на 7-й день 28-дневного цикла (например, когда иммуноконъюгат вводят в комбинации с ГМА (например, азацитидином) или с ингибитором BCL-2 (например, венетоклаксом) и НМА (например, азацитидином)), иммуноконъюгат (например, IMGN632) может быть введен на 7-й, 10-й и 14-й день 28-дневного цикла.

[219] В некоторых вариантах реализации терапевтически эффективным является один цикл лечения. В некоторых вариантах реализации терапевтически эффективными являются два цикла лечения. В некоторых вариантах реализации терапевтически эффективными являются от одного до четырех циклов лечения. В некоторых вариантах реализации - от двух до двенадцати циклов лечения.

[220] В некоторых вариантах реализации пациенты могут проходить лечение в течение одного цикла (например, 21-дневного цикла или 28-дневного цикла), например, при введении иммуноконъюгата однократно на цикл или три раза на цикл. В некоторых вариантах реализации пациенты могут проходить лечение в течение по меньшей мере двух циклов (например, 21-дневных циклов или 28-дневных циклов), например, при введении иммуноконъюгата однократно на цикл или три раза на цикл. В некоторых вариантах реализации пациенты могут проходить лечение в течение по меньшей мере трех циклов (например, 21-дневных циклов или 28-дневных циклов), например, при введении иммуноконъюгата однократно на цикл или три раза на цикл. В некоторых вариантах реализации пациенты могут проходить лечение в течение по меньшей мере четырех циклов (например, 21-дневных циклов или 28-дневных циклов), например, при введении иммуноконъюгата однократно на цикл или три раза на цикл. В некоторых вариантах реализации пациенты могут проходить лечение в течение по меньшей мере пяти циклов (например, 21-дневных циклов или 28-дневных циклов), например, при введении иммуноконъюгата однократно на цикл или три раза на цикл. В некоторых вариантах реализации пациенты могут проходить лечение в течение по меньшей мере шести циклов (например, 21-дневных циклов или 28-дневных циклов), например, при введении иммуноконъюгата однократно на цикл или три раза на цикл. В некоторых вариантах реализации пациенты могут проходить лечение в течение по меньшей мере семи циклов (например, 21-дневных циклов или 28-дневных циклов), например, при введении иммуноконъюгата однократно на цикл или три раза на цикл. В некоторых вариантах реализации пациенты могут проходить лечение в течение по меньшей мере восьми циклов (например, 21-дневных циклов или 28-дневных циклов), например, при введении иммуноконъюгата однократно на цикл или три раза на цикл. В некоторых вариантах реализации пациенты могут проходить лечение в течение по меньшей мере девяти циклов (например, 21-дневных циклов или 28-дневных циклов), например, при введении иммуноконъюгата однократно на цикл или три раза на цикл. В некоторых вариантах реализации пациенты могут проходить лечение в течение по меньшей мере десяти циклов (например, 21-дневных циклов или 28-дневных циклов), например, при введении иммуноконъюгата однократно на цикл или три раза на цикл. В некоторых вариантах реализации пациенты могут проходить лечение в течение по меньшей мере одиннадцати циклов (например, 21-дневных циклов или 28-дневных циклов), например, при введении иммуноконъюгата однократно на цикл или три раза на цикл. В некоторых вариантах реализации пациенты могут проходить лечение в течение по меньшей мере двенадцати циклов (например, 21-дневных циклов или 28-дневных циклов), например, при введении иммуноконъюгата однократно на цикл или три раза на цикл.

[221] В некоторых вариантах реализации пациенты могут проходить лечение в течение по меньшей мере от одного до десяти циклов (например, 21-дневных циклов или 28-дневных циклов), например, при введении иммуноконъюгата однократно на цикл или три раза на цикл. В некоторых вариантах реализации пациенты могут проходить лечение в течение по меньшей мере от двух до десяти циклов (например, 21-дневных циклов или 28-дневных циклов), например, при введении иммуноконъюгата однократно на цикл или три раза на цикл. В некоторых вариантах реализации пациенты могут проходить лечение в течение по меньшей мере от трех до десяти циклов (например, 21-дневных циклов или 28-дневных циклов), например, при введении иммуноконъюгата однократно на цикл или три раза на цикл. В некоторых вариантах реализации пациенты могут проходить лечение в течение по меньшей мере от четырех до десяти циклов (например, 21-дневных циклов или 28-дневных циклов), например, при введении иммуноконъюгата однократно на цикл или три раза на цикл. В некоторых вариантах реализации пациенты могут проходить лечение в течение по меньшей мере от пяти до десяти циклов (например, 21-дневных циклов или 28-дневных циклов), например, при введении иммуноконъюгата однократно на цикл или три раза на цикл.

[222] В некоторых вариантах реализации пациенты могут проходить лечение в течение по меньшей мере от одного до двенадцати циклов (например, 21-дневных циклов или 28-дневных циклов), например, при введении иммуноконъюгата однократно на цикл или три раза на цикл. В некоторых вариантах реализации пациенты могут проходить лечение в течение по меньшей мере от двух до двенадцати циклов (например, 21-дневных циклов или 28-дневных циклов), например, при введении иммуноконъюгата однократно на цикл или три раза на цикл. В некоторых вариантах реализации пациенты могут проходить лечение в течение по меньшей мере от трех до двенадцати циклов (например, 21-дневных циклов или 28-дневных циклов), например, при введении иммуноконъюгата однократно на цикл или три раза на цикл. В некоторых вариантах реализации пациенты могут проходить лечение в течение по меньшей мере от четырех до двенадцати циклов (например, 21-дневных циклов или 28-дневных циклов), например, при введении иммуноконъюгата однократно на цикл или три раза на цикл. В некоторых вариантах реализации пациенты могут проходить лечение в течение по меньшей мере от пяти до двенадцати циклов (например, 21-дневных циклов или 28-дневных циклов), например, при введении иммуноконъюгата однократно на цикл или три раза на цикл.

[223] В некоторых вариантах реализации от около 0,015 мг/кг до около 0,09 мг/кг иммуноконъюгата анти-CD123 (например, IMGN632) вводят однократно в трехнедельном (21-дневном) цикле. В некоторых вариантах реализации от около 0,015 мг/кг до около 0,09 мг/кг иммуноконъюгата анти-CD123 (например, DV1GN632) вводят однократно в четырехнедельном (28-дневном) цикле. В некоторых вариантах реализации от около 0,015 мг/кг до около 0,135 мг/кг иммуноконъюгата анти-CD123 (например, IMGN632) вводят однократно в трехнедельном (21-дневном) цикле. В некоторых вариантах реализации от около 0,015 мг/кг до около 0,135 мг/кг иммуноконъюгата анти-CD123 (например, IMGN632) вводят однократно в четырехнедельном (28-дневном) цикле.

[224] В некоторых вариантах реализации от около 0,015 мг/кг до около 0,045 мг/кг иммуноконъюгата анти-CD123 (например, IMGN632) вводят однократно в четырехнедельном (21-дневном) цикле. В некоторых вариантах реализации около 0,03 мг/кг иммуноконъюгата анти-CD123 (например, IMGN632) вводят однократно в трехнедельном (21-дневном) цикле. В некоторых вариантах реализации от около 0,015 мг/кг до около 0,045 мг/кг иммуноконъюгата анти-CD123 (например, DV1GN632) вводят однократно в четырехнедельном (28-дневном) цикле. В некоторых вариантах реализации около 0,03 мг/кг иммуноконъюгата анти-CD123 (например, IMGN632) вводят однократно в четырехнедельном (28-дневном) цикле.

[225] В некоторых вариантах реализации от около 0,045 мг/кг до около 0,09 мг/кг иммуноконъюгата анти-CD123 (например, IMGN632) вводят однократно в трехнедельном (21-дневном) цикле. В некоторых вариантах реализации от около 0,045 мг/кг до около 0,09 мг/кг иммуноконъюгата анти-CD123 (например, DV1GN632) вводят однократно в четырехнедельном (28-дневном) цикле.

[226] В некоторых вариантах реализации от около 0,045 мг/кг до около 0,135 мг/кг иммуноконъюгата анти-CD123 (например, IMGN632) вводят однократно в трехнедельном (21-дневном) цикле. В некоторых вариантах реализации от около 0,045 мг/кг до около 0,135 мг/кг иммуноконъюгата анти-CD123 (например, DV1GN632) вводят однократно в четырехнедельном (28-дневном) цикле

[227] В некоторых вариантах реализации около 0,015 мг/кг иммуноконъюгата анти-CD123 (например, IMGN632) вводят однократно в трехнедельном (21-дневном) или четырехнедельном (28-дневном) цикле. В некоторых вариантах реализации около 0,03 мг/кг иммуноконъюгата анти-CD123 (например, IMGN632) вводят однократно в трехнедельном (21-дневном) или четырехнедельном (28-дневном) цикле.. В некоторых вариантах реализации около 0,045 мг/кг иммуноконъюгата анти-CD123 (например, IMGN632) вводят однократно в трехнедельном (21-дневном) или четырехнедельном (28-дневном) цикле. В некоторых вариантах реализации около 0,09 мг/кг иммуноконъюгата анти-CD123 (например, IMGN632) вводят однократно в трехнедельном (21-дневном) или четырехнедельном (28-дневном) цикле. В некоторых вариантах реализации около 0,135 мг/кг иммуноконъюгата анти-CD123 (например, IMGN632) вводят однократно в трехнедельном (21-дневном) или четырехнедельном (28-дневном) цикле..

[228] В некоторых вариантах реализации общая доза от 0,045 мг/кг до около 0,18 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят в течение трехнедельного цикла или четырехнедельного цикла, при этом общая доза делится на три отдельных введения (например, в дни 1, 4 и 8 или в дни 7, 10 и 14 цикла). Таким образом, в некоторых вариантах реализации от около 0,015 мг/кг до около 0,09 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят три раза в течение трехнедельного цикла или четырехнедельного цикла, например, в дни 1, 4 и 8 или в дни 7, 10 и 14 цикла. В некоторых вариантах реализации от около 0,015 мг/кг до около 0,135 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят три раза в течение трехнедельного цикла или четырехнедельного цикла, например, в дни 1, 4 и 8 или в дни 7, 10 и 14 цикла. В некоторых вариантах реализации от около 0,015 мг/кг до около 0,06 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят три раза в течение трехнедельного цикла или четырехнедельного цикла, например, в дни 1, 4 и 8 или в дни 7, 10 и 14 цикла. В некоторых вариантах реализации от около 0,015 мг/кг до около 0,03 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят три раза в течение трехнедельного цикла или четырехнедельного цикла, например, в дни 1, 4 и 8 или в дни 7, 10 и 14 цикла. В некоторых вариантах реализации от около 0,03 мг/кг до около 0,06 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят три раза в течение трехнедельного цикла или четырехнедельного цикла, например, в дни 1, 4 и 8 или в дни 7, 10 и 14 цикла.

[229] В некоторых вариантах реализации около 0,015 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят три раза в течение трехнедельного цикла или четырехнедельного цикла, например, в дни 1, 4 и 8 или в дни 7, 10 и 14 цикла. В некоторых вариантах реализации около 0,03 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят три раза в течение трехнедельного цикла или четырехнедельного цикла, например, в дни 1, 4 и 8 или в дни 7, 10 и 14 цикла. В некоторых вариантах реализации около 0,06 мг/кг иммуноконъюгата анти-CD123 (например, IMGN632) вводят три раза в течение трехнедельного или четырехнедельного цикла, например, в дни 1, 4 и 8 или 7, 10 и 14 цикла. В некоторых вариантах реализации около 0,09 мг/кг иммуноконъюгата анти-CD123 (например, IMGN632) вводят три раза в течение трехнедельного цикла или четырехнедельного цикла, например, в дни 1, 4 и 8 или в дни 7, 10 и 14 цикла. В некоторых вариантах реализации около 0,135 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят три раза в течение трехнедельного цикла или четырехнедельного цикла, например, в дни 1, 4 и 8 или в дни 7, 10 и 14 цикла.

[230] Как предусмотрено в настоящем документе, ингибитор BCL-2 может вводиться в определенной дозе и/или в определенные временные интервалы. Введение ингибитора BCL-2 (например, венетоклакса) может быть, например, пероральным (например, в форме таблеток).

[231] В некоторых вариантах реализации ингибитор BCL-2 (например, венетоклакс) вводят в суточной дозе 400 мг. В некоторых вариантах реализации ингибитор BCL-2 (например, венетоклакс) вводят в суточной дозе 200 мг.

[232] В некоторых вариантах реализации ингибитор BCL-2 (например, венетоклакс) вводят в течение 21-дневного цикла. Ингибитор BCL-2 (например, венетоклакс) может вводиться, например, в дни 1-7, 1-8, 1-14, 1-18 или в дни 1-21 21-дневного цикла. В некоторых вариантах реализации ингибитор BCL-2 (например, венетоклакс) вводят в течение 28-дневного цикла. Ингибитор BCL-2 (например, венетоклакс) может вводиться, например, в дни 1-7, 1-8, 1-14, 1-18, дни 1-21 или в дни 1-28 28-дневного цикла.

[233] В некоторых вариантах реализации, например, в первом цикле, ингибитор BCL-2 (например, венетоклакс) вводят перорально (ПО) в дозе 100 мг в первый день, 200 мг во второй день и 400 мг во все последующие дни цикла, например, дни 3-21 21-дневного цикла или дни 3-28 28-дневного цикла.

[234] В некоторых вариантах реализации, например, в первом цикле, ингибитор BCL-2 (например, венетоклакс) вводят перорально (ПО) в дозе 100 мг в первый день, 200 мг во второй день и 400 мг в дни 3-18 21-дневного цикла или 28-дневного цикла. В некоторых вариантах реализации, например, в первом цикле, ингибитор BCL-2 (например, венетоклакс) вводят перорально (ПО) в дозе 100 мг в первый день, 200 мг во второй день и 400 мг в дни 3-14 21-дневного цикла или 28-дневного цикла. В некоторых вариантах реализации, например, в первом цикле, ингибитор BCL-2 (например, венетоклакс) вводят перорально (ПО) в дозе 100 мг в первый день, 200 мг во второй день и 400 мг в дни 3-8 21-дневного цикла или 28-дневного цикла. В некоторых вариантах реализации, например, в первом цикле, ингибитор BCL-2 (например, венетоклакс) вводят перорально (ПО) в дозе 100 мг в первый день, 200 мг во второй день и 400 мг в дни 3-7 21-дневного цикла или 28-дневного цикла.

[235] В некоторых вариантах реализации, например, в первом цикле, ингибитор BCL-2 (например, венетоклакс) вводят перорально (ПО) в дозе 100 мг в первый день и 200 мг во все последующие дни цикла, например, дни 2-21 21-дневного цикла или дни 2-28 28-дневного цикла. В некоторых вариантах реализации, например, в первом цикле, ингибитор BCL-2 (например, венетоклакс) вводят перорально (ПО) в дозе 100 мг в первый день и 200 мг в дни 2-18 21-дневного цикла или 28-дневного цикла. В некоторых вариантах реализации, например, в первом цикле, ингибитор BCL-2 (например, венетоклакс) вводят перорально (ПО) в дозе 100 мг в первый день и 200 мг в дни 2-14 21-дневного цикла или 28-дневного цикла. В некоторых вариантах реализации, например, в первом цикле, ингибитор BCL-2 (например, венетоклакс) вводят перорально (ПО) в дозе 100 мг в первый день и 200 мг в дни 2-8 21-дневного цикла или 28-дневного цикла. В некоторых вариантах реализации, например, в первом цикле, ингибитор BCL-2 (например, венетоклакс) вводят перорально (ПО) в дозе 100 мг в первый день и 200 мг в дни 2-7 21-дневного цикла или 28-дневного цикла.

[236] В некоторых вариантах реализации изобретения введение анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) начинается на 7-й день после седьмой дозы ингибитора BCL-2 (например, венетоклакса).

[237] Цикл (например, 21-дневный цикл или 28-дневный цикл) введения анти-CD123 иммуноконъюгата и ингибитора BCL-2 (например, венетоклакса) может быть повторен, например, в течение 2-12 циклов.

[238] В некоторых вариантах реализации ингибитор BCL-2 (например, венетоклакс) вводят ежедневно. В некоторых вариантах реализации ингибитор BCL-2 (например, венетоклакс) вводят перорально. В некоторых вариантах реализации ингибитор BCL-2 (например, венетоклакс) вводят перорально ежедневно.

[239] В некоторых вариантах реализации 400 мг ингибитора BCL-2 (например, венетоклакса) вводят ежедневно. В некоторых вариантах реализации 400 мг ингибитора BCL-2 (например, венетоклакса) вводят перорально. В некоторых вариантах реализации 400 мг ингибитора BCL-2 (например, венетоклакса) вводят перорально ежедневно.

[240] После введения иммуноконъюгата анти-CD123 и ингибитора BCL-2 (например, венетоклакса), иммуноконъюгат анти-CD123 (например, IMGN632) может быть назначен в качестве поддерживающей терапии.

[241] Как предусмотрено в настоящем документе, ГМА может вводиться в определенной дозе и/или в определенные временные интервалы. Введение ГМА (например, азацитидина или децитабина) может быть, например, подкожным или внутривенным.

[242] В некоторых вариантах реализации азацитидин может быть введен в дозе 75 мг/м² подкожно (ПК) или внутривенно (ВВ). В некоторых вариантах реализации азацитидин может быть ежедневно введен в дозе 75 мг/м² подкожно (ПК) или внутривенно (ВВ) в течение 7 дней подряд. В некоторых вариантах реализации азацитидин может быть ежедневно введен в дозе 75 мг/м² подкожно (ПК) или внутривенно (ВВ) в течение 7 дней подряд в 28-дневном цикле. В некоторых вариантах реализации азацитидин может быть ежедневно введен в дозе 75 мг/м² подкожно (ПК) или внутривенно (ВВ) в течение 5 дней подряд. В некоторых вариантах реализации азацитидин может быть ежедневно введен в дозе 75 мг/м² подкожно (ПК) или внутривенно (ВВ) в течение 5 дней подряд в 28-дневном цикле-

[243] В некоторых вариантах реализации ГМА (например, зацитидин) вводят в дозе 75 мг/м². В некоторых вариантах реализации ГМА (например, азацитидин) вводят в дозе 100 мг/м².

[244] В некоторых вариантах реализации ГМА (например, азацитидин) вводят ежедневно 7 дней подряд каждые 4 недели В некоторых вариантах реализации ГМА (например, азацитидин) вводят ежедневно 5 дней подряд каждые 4 недели

[245] В некоторых вариантах реализации 75 мг/м²ГМА (например, азацитидин) вводят ежедневно 7 дней подряд каждые 4 недели В некоторых вариантах реализации 100 мг/м² ГМА (например, азацитидина) вводят ежедневно 7 дней подряд каждые 4 недели В некоторых вариантах реализации 75 мг/м² ГМА (например, азацитидина) вводят ежедневно 5 дней подряд каждые 4 недели В некоторых вариантах реализации 100 мг/м² ГМА (например, азацитидина) вводят ежедневно 5 дней подряд каждые 4 недели [246] В некоторых вариантах реализации 75 мг/м² ГМА (например, азацитидина) вводят подкожно или внутривенно ежедневно 7 дней подряд каждые 4 недели В некоторых вариантах реализации 100 мг/м² ГМА (например, азацитидина) вводят ежедневно 7 дней подряд каждые 4 недели В некоторых вариантах реализации 75 мг/м² ГМА (например, азацитидина) вводят подкожно или внутривенно ежедневно 5 дней подряд каждые 4 недели В некоторых вариантах реализации 100 мг/м² ГМА (например, азацитидина) вводят ежедневно 5 дней подряд каждые 4 недели

[247] После введения иммуноконъюгата анти-CD123 и ГМА (например, азацитидина), иммуноконъюгат анти-CD123 (например, IMGN632) может быть назначен в качестве поддерживающей терапии.

[248] В некоторых вариантах реализации ГМА (например, децитабин) вводят в дозе 15 мг/м². В некоторых вариантах реализации ГМА (например, децитабин) вводят в дозе 20 мг/м².

[249] В некоторых вариантах реализации изобретения ГМА (например, децитабин) вводят путем внутривенной инфузии в течение 3 часов, повторяют каждые 8 часов в течение 3 дней, и повторяют каждые шесть недель. В некоторых вариантах реализации изобретения ГМА (например, децитабин) вводят путем внутривенной инфузии в течение 1 часа 5 дней и повторяют каждые четыре недели.

[250] В некоторых вариантах реализации изобретения 15 мг/м² ГМА (например, децитабин) вводят путем внутривенной инфузии в течение 3 часов, повторяют каждые 8 часов в течение 3 дней и повторяют каждые шесть недель. В некоторых вариантах реализации 20 мг/м² ГМА (например, децитабин) вводят путем внутривенной инфузии в течение 1 часа 5 дней, и повторяют каждые четыре недели.

[251] После введения иммуноконъюгата анти-CD123 и ГМА (например, децитабина), иммуноконъюгат анти-CD123 (например, IMGN632) может быть назначен в качестве поддерживающей терапии.

[252] В некоторых вариантах реализации от 0,015 мг/кг до около 0,09 мг/кг (например, 0,015, 0,045 или 0,09 мг/кг) анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят однократно в три или четыре недели, и 400 мг ингибитора BCL-2 (например, венетоклакса) вводят ежедневно. В некоторых вариантах реализации 0,03 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят однократно каждые три или четыре недели, и 400 мг ингибитора BCL-2 (например, венетоклакса) вводят ежедневно. В некоторых вариантах реализации от 0,015 мг/кг до около 0,09 мг/кг (например, 0,015, 0,045 или 0,09 мг/кг) анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят внутривенно однократно каждые три или четыре недели, и 400 мг ингибитора BCL-2 (например, венетоклакса) вводят перорально ежедневно. В некоторых вариантах реализации 0,03 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят внутривенно однократно в три или четыре недели, и 400 мг ингибитора BCL-2 (например, венетоклакса) вводят перорально ежедневно. Ингибитор BCL-2 (например, венетоклакс) может вводиться ежедневно, например, в дни 1-7, 1-8, 1-14, 1-18 или в дни 1-21 21-дневного (трехнедельного) цикла. Ингибитор BCL-2 (например, венетоклакс) может вводиться ежедневно, например, в дни 1-7, 1-8, 1-14, 1-18, дни 1-21 или в дни 1-28 28-дневного (четырехнедельного) цикла.

[253] В некоторых вариантах реализации от 0,015 мг/кг до около 0,135 мг/кг (например, 0,135 мг/кг) анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят однократно в три или четыре недели, и 400 мг ингибитора BCL-2 (например, венетоклакса) вводят ежедневно. В некоторых вариантах реализации 0,03 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят однократно каждые три или четыре недели, и 400 мг ингибитора BCL-2 (например, венетоклакса) вводят ежедневно. В некоторых вариантах реализации от 0,015 мг/кг до около 0,135 мг/кг (например, 0,135 мг/кг) анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят внутривенно однократно каждые три или четыре недели, и 400 мг ингибитора BCL-2 (например, венетоклакса) вводят перорально ежедневно. В некоторых вариантах реализации 0,03 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят внутривенно однократно в три или четыре недели, и 400 мг ингибитора BCL-2 (например, венетоклакса) вводят перорально ежедневно. В некоторых вариантах реализации 0,03 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят внутривенно однократно в три или четыре недели, и 400 мг ингибитора BCL-2 (например, венетоклакса) вводят перорально ежедневно. Ингибитор BCL-2 (например, венетоклакс) может вводиться ежедневно, например, в дни 1-7, I-8, 1-14, 1-18 или в дни 1-21 21-дневного (трехнедельного) цикла. Ингибитор BCL-2 (например, венетоклакс) может вводиться ежедневно, например, в дни 1-7, 1-8, 1-14, 1-18, дни 1-21 или в дни 1-28 28-дневного (четырехнедельного) цикла.

[254] В некоторых вариантах реализации общая доза от 0,045 мг/кг до около 0,18 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят в течение трехнедельного цикла, при этом общая доза делится на три отдельных введения (например, в дни 1, 4 и 8 или в дни 7, 10 и 14 цикла), и ингибитор BCL-2 вводят ежедневно Таким образом, в некоторых вариантах реализации от около 0,015 мг/кг до около 0,06 мг/кг (например, 0,015, 0,03 или 0,06 мг/кг) анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят три раза в 21-дневном цикле (например, в дни 7, 10 и 14 21-дневного цикла), и ингибитор BCL-2 (например, венетоклакс) вводят ежедневно. В некоторых вариантах реализации от около 0,015 мг/кг до около 0,06 мг/кг (например, 0,015, 0,03 или 0,06 мг/кг) анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят внутривенно однократно в 21-дневном цикле (например, в дни 7, 10 и 14 21-дневного цикла), и ингибитор BCL-2 (например, венетоклакса) вводят перорально ежедневно. Ингибитор BCL-2 (например, венетоклакс) может вводиться в дозе 100 мг, 200 мг и/или 400 мг. Ингибитор BCL-2 (например, венетоклакс) может вводиться в дозе 100 мг в первый день, 200 мг во второй день и 400 мг в дни 3-21 21-дневного цикла (например, первого 21-дневного цикла). Ингибитор BCL-2 (например, венетоклакс) может вводиться в дозе 100 мг в первый день и 200 мг в дни 2-21 21-дневного цикла (например, первого 21-дневного цикла). Ингибитор BCL-2 (например, венетоклакс) может вводиться в суточной пероральной дозе 400 мг во все дни (например, дни 1-21) 21-дневного цикла. Ингибитор BCL-2 (например, венетоклакс) может вводиться в суточной пероральной дозе 200 мг во все дни (например, дни 1-21) 21-дневного цикла.

[255] В некоторых вариантах реализации от 0,015 мг/кг до около 0,09 мг/кг (например, 0,015, 0. 045 или 0,09 мг/кг) анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят однократно каждые четыре недели, и 75 мг/м² или 100 мг/м² ГМА (например, азацитидина) вводят ежедневно в течение 7 дней каждые 4 недели. В некоторых вариантах реализации 0,03 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят однократно каждые четыре недели, и 75 мг/м² или 100 мг/м² ГМА (например, азацитидина) вводят ежедневно в течение 7 дней каждые 4 недели. В некоторых вариантах реализации от 0,015 мг/кг до около 0,09 мг/кг (например, 0,015, 0,045 или 0,09 мг/кг) анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят внутривенно однократно каждые четыре недели, и 75 мг/м² или 100 мг/м² ГМА (например, азацитидина) вводят подкожно или внутривенно ежедневно в течение 7 дней каждые 4 недели. В некоторых вариантах реализации 0,03 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят внутривенно однократно каждые четыре недели, и 75 мг/м² или 100 мг/м² ГМА (например, азацитидина) вводят подкожно или внутривенно ежедневно в течение 7 дней каждые 4 недели.

[256] В некоторых вариантах реализации от 0,015 мг/кг до около 0,09 мг/кг (например, 0,015, 0. 045 или 0,09 мг/кг) анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят однократно каждые четыре недели, и 75 мг/м² или 100 мг/м² ГМА (например, азацитидина) вводят ежедневно в течение 5 дней каждые 4 недели. В некоторых вариантах реализации 0,03 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят однократно каждые четыре недели, и 75 мг/м² или 100 мг/м² ГМА (например, азацитидина) вводят ежедневно в течение 5 дней каждые 4 недели. В некоторых вариантах реализации от 0,015 мг/кг до около 0,09 мг/кг (например, 0,015, 0,045 или 0,09 мг/кг) анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят внутривенно однократно каждые четыре недели, и 75 мг/м² или 100 мг/м² ГМА (например, азацитидина) вводят подкожно или внутривенно ежедневно в течение 5 дней каждые 4 недели. В некоторых вариантах реализации 0,03 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят внутривенно однократно каждые четыре недели, и 75 мг/м² или 100 мг/м² ГМА (например, азацитидина) вводят подкожно или внутривенно ежедневно в течение 5 дней каждые 4 недели.

[257] В некоторых вариантах реализации от 0,015 мг/кг до около 0,135 мг/кг (например, 0,135 мг/кг) анти-CD123 иммуноконъюгата (например, DV1GN632) вводят однократно каждые четыре недели, и 75 мг/м² или 100 мг/м² ГМА (например, азацитидина) вводят ежедневно в течение 7 дней каждые 4 недели. В некоторых вариантах реализации от 0,015 мг/кг до около 0,135 мг/кг (например, 0,135 мг/кг) анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят внутривенно однократно каждые четыре недели, и 75 мг/м² или 100 мг/м² ГМА (например, азацитидина) вводят подкожно или внутривенно ежедневно в течение 7 дней каждые 4 недели.

[258] В некоторых вариантах реализации от 0,015 мг/кг до около 0,135 мг/кг (например, 0,135 мг/кг) анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят однократно каждые четыре недели, и 75 мг/м² или 100 мг/м² ГМА (например, азацитидина) вводят ежедневно в течение 5 дней каждые 4 недели. В некоторых вариантах реализации от 0,015 мг/кг до около 0,135 мг/кг (например, 0,135 мг/кг) анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят внутривенно однократно каждые четыре недели, и 75 мг/м² или 100 мг/м² ГМА (например, азацитидина) вводят подкожно или внутривенно ежедневно в течение 5 дней каждые 4 недели.

[259] В некоторых вариантах реализации общая доза от 0,045 мг/кг до около 0,18 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят в течение четырехнедельного цикла, при этом общая доза делится на три отдельных введения (например, в дни 1, 4 и 8 или в дни 7, 10 и 14 цикла), и 75 мг/м² или 100 мг/м² ГМА (например, азацитидина) вводят ежедневно в течение 7 дней каждые 4 недели. В некоторых вариантах реализации от около 0,015 мг/кг до около 0,06 мг/кг (например, 0,015, 0,03 или 0,06 мг/кг) анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) три раза в 21-дневном цикле (например, в дни 7, 10 и 14 28-дневного цикла), и 75 мг/м² или 100 мг/м² ГМА (например, азацитидина) вводят ежедневно в течение 7 дней каждые 4 недели. В некоторых вариантах реализации от около 0,015 мг/кг до около 0,06 мг/кг (например, 0,015, 0,03 или 0,06 мг/кг) анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят внутривенно три раза в 28-дневном цикле (например, в дни 7, 10 и 14 28-дневного цикла), и 75 мг/м² 100 мг/м² ГМА (например, азацитидина) вводят подкожно или внутривенно ежедневно в течение 7 дней каждые 4 недели.

[260] В некоторых вариантах реализации от около 0,015 мг/кг до около 0,09 мг/кг (например, 0,015, 0,045 или 0,09 мг/кг) анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят однократно каждые три недели, и 15 мг/м² ГМА (например, децитабина) вводят в течение 3 часов, повторяют каждые 8 часов 3 дня, и повторяют каждые шесть недель. В некоторых вариантах реализации около 0,03 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят однократно каждые три недели, и 15 мг/м² ГМА (например, децитабина) вводят в течение 3 часов, повторяют каждые 8 часов 3 дня, и повторяют каждые шесть недель. В некоторых вариантах реализации от 0,015 мг/кг до около 0,09 мг/кг (например, 0,015, 0,045 или 0,09 мг/кг) анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят внутривенно однократно каждые три недели, и 15 мг/м² ГМА (например, децитабина) вводят путем внутривенной инфузии в течение 3 часов, повторяют каждые 8 часов 3 дня, и повторяют каждые шесть недель. В некоторых вариантах реализации около 0,03 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят внутривенно однократно каждые три недели, и 15 мг/м² ГМА (например, децитабина) вводят путем внутривенной инфузии в течение 3 часов, повторяют каждые 8 часов 3 дня, и повторяют каждые шесть недель.

[261] В некоторых вариантах реализации от около 0,015 мг/кг до около 0,135 мг/кг (например, 0,135 мг/кг) анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят однократно каждые три недели, и 15 мг/м² ГМА (например, децитабина) вводят в течение 3 часов, повторяют каждые 8 часов 3 дня, и повторяют каждые шесть недель. В некоторых вариантах реализации от 0,015 мг/кг до около 0,135 мг/кг (например, 0,135 мг/кг) анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят внутривенно однократно каждые три недели, и 15 мг/м² ГМА (например, децитабина) вводят путем внутривенной инфузии в течение 3 часов, повторяют каждые 8 часов 3 дня, и повторяют каждые шесть недель.

[262] В некоторых вариантах реализации общая доза от 0,045 мг/кг до около 0,18 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят в течение четырехнедельного цикла, при этом общая доза делится на три отдельных введения (например, в дни 1, 4 и 8 или в дни 7, 10 и 14 цикла), и 15 мг/м² ГМА (например, децитабина) вводят в течение 3 часов, повторяют каждые 8 часов 3 дня, и повторяют каждые шесть недель. В некоторых вариантах реализации от около 0,015 мг/кг до около 0,09 мг/кг (например, 0,015, 0,03 или 0,06 мг/кг) анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят внутривенно три раза в 21-дневном цикле (например, в дни 7, 10 и 14 21-дневного цикла), и 15 мг/м² ГМА (например, децитабина) вводят в течение 3 часов, повторяют каждые 8 часов 3 дня, и повторяют каждые шесть недель. В некоторых вариантах реализации от около 0,015 мг/кг до около 0,135 мг/кг (например, 0,135 мг/кг) анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят три раза в 21-дневном цикле (например, на 7, 10 и 14 дни 21-дневного цикла) и 15 мг/м² ГМА (например, децитабина) вводят в течение 3 часов, повторяют каждые 8 часов 3 дня, и повторяют каждые шесть недель. В некоторых вариантах реализации от около 0,015 мг/кг до около 0,06 мг/кг (например, 0,015, 0,045 или 0,09 мг/кг) анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят внутривенно три раза в 21-дневном цикле (например, на 7, 10 и 14 дни 21-дневного цикла) и 15 мг/м² ГМА (например, децитабина) вводят путем внутривенной инфузии в течение 3 часов, повторяют каждые 8 часов 3 дня, и повторяют каждые шесть недель.

[263] В некоторых вариантах реализации от около 0,015 мг/кг до около 0,09 мг/кг (например, 0,015, 0,045 или 0,09 мг/кг) анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят однократно каждые четыре недели, и 20 мг/м² ГМА (например, децитабина) вводят в течение 1 часа 5 дней, и повторяют каждые четыре недели. В некоторых вариантах реализации около 0,03 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, DV1GN632) вводят однократно каждые четыре недели, и 20 мг/м² ГМА (например, децитабина) вводят в течение 1 часа 5 дней, и повторяют каждые четыре недели. В некоторых вариантах реализации от около 0,015 мг/кг до около 0,09 мг/кг (например, 0,015, 0,045 или 0,09 мг/кг) анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят внутривенно однократно каждые четыре недели, и 20 мг/м² ГМА (например, децитабина) вводят путем внутривенной инфузии в течение 1 часа 5 дней, и повторяют каждые четыре недели. В некоторых вариантах реализации около 0,03 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят внутривенно однократно каждые четыре недели, и 20 мг/м² ГМА (например, децитабина) вводят путем внутривенной инфузии в течение 1 часа 5 дней, и повторяют каждые четыре недели.

[264] В некоторых вариантах реализации от около 0,015 мг/кг до около 0,135 мг/кг (например., 0,135 мг/кг) анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят однократно каждые четыре недели, и 20 мг/м² ГМА (например, децитабина) вводят в течение 1 часа 5 дней, и повторяют каждые четыре недели. В некоторых вариантах реализации от около 0,015 мг/кг до около 0,135 мг/кг (например 0,135 мг/кг) анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят внутривенно однократно каждые четыре недели, и 20 мг/м² ГМА (например, децитабина) вводят путем внутривенной инфузии в течение 1 часа 5 дней, и повторяют каждые четыре недели.

[265] В некоторых вариантах реализации общая доза от 0,045 мг/кг до около 0,18 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят в течение четырехнедельного цикла, при этом общая доза делится на три отдельных введения (например, в дни 1, 4 и 8 или в дни 7, 10 и 14 цикла), и 20 мг/м² ГМА (например, децитабина) вводят в течение 1 часа 5 дней и повторяют каждые четыре недели. В некоторых вариантах реализации от около 0,015 мг/кг до около 0,06 мг/кг (например, 0,015, 0,03 или 0,06 мг/кг) анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят три раза в 28-дневном цикле (например, в дни 7, 10 и 14 21-дневного цикла), и 20 мг/м² ГМА (например, децитабина) вводят в течение 1 часа 5 дней, и повторяют каждые четыре недели. В некоторых вариантах реализации от около 0,015 мг/кг до около 0,06 мг/кг (например, 0,015, 0,03 или 0,06 мг/кг) анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят внутривенно три раза в 28-дневном цикле (например, в дни 7, 10 и 14 21-дневного цикла), и 20 мг/м² ГМА (например, децитабина) вводят путем внутривенной инфузии в течение 1 часа 5 дней, и повторяют каждые четыре недели.

[266] В некоторых вариантах реализации от 0,015 мг/кг до около 0,09 мг/кг (например, 0,015, 0,045 или 0,09 мг/кг) анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят однократно каждые четыре недели, 100, 200 и/или 400 мг ингибитора BCL-2 (например, венетоклакса) вводят ежедневно (например, 100 мг в первый день, 200 мг во второй день и 400 мг в дни 3-28 в цикле 1 и 400 мг ежедневно в дни 1-28 в последующих циклах), и 75 мг/м² или 100 мг/м² ГМА (например, азацитидина) вводят ежедневно (например, в дни 1-7). В некоторых вариантах реализации 0,03 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят однократно каждые четыре недели, 100, 200 и/или 400 мг ингибитора BCL-2 (например, венетоклакса) вводят ежедневно (например, 100 мг в первый день, 200 мг во второй день и 400 мг в дни 3-28 в цикле 1 и 400 мг ежедневно в дни 1-28 в последующих циклах), и 75 мг/м² или 100 мг/м² ГМА (например, азацитидина) вводят ежедневно (например, в дни 1-7). В некоторых вариантах реализации от 0,015 мг/кг до около 0,09 мг/кг (например, 0,015,0,045 или 0,09 мг/кг) анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят внутривенно однократно каждые четыре недели, 100, 200 и/или 400 мг ингибитора BCL-2 (например, венетоклакса) вводят перорально ежедневно (например, 100 мг в первый день, 200 мг во второй день и 400 мг в дни 3-28 в цикле 1 и 400 мг ежедневно в дни 1-28 в последующих циклах), и 75 мг/м² или 100 мг/м² ГМА (например, азацитидина) вводят подкожно или внутривенно ежедневно в течение 7 дней (например, в дни 1-7). В некоторых вариантах реализации 0,03 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят внутривенно однократно каждые четыре недели, 100, 200 и/или 400 мг ингибитора BCL-2 (например, венетоклакса) вводят перорально ежедневно (например, 100 мг в первый день, 200 мг во второй день и 400 мг в дни 3-28 в цикле 1 и 400 мг ежедневно в дни 1-28 в последующих циклах), и 75 мг/м² или 100 мг/м² ГМА (например, азацитидина) вводят подкожно или внутривенно ежедневно в течение 7 дней (например, в дни 1-7).

[267] В некоторых вариантах реализации от 0,015 мг/кг до около 0,09 мг/кг (например, 0,015, 0,03, 0,045 или 0,09 мг/кг) анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят однократно каждые четыре недели, 100, 200 и/или 400 мг ингибитора BCL-2 (например, венетоклакса) вводят ежедневно (например, 100 мг в первый день, 200 мг во второй день и 400 мг в дни 3-7, 3-8, 3-14, 3-18 или 3-21, или 3-28 в цикле 1 и 400 мг в дни 1-7, 1-8, 1-14, 1-18, 1-21 или 1-28 в последующих циклах), и 75 мг/м² или 100 мг/м² ГМА (например, азацитидина) вводят ежедневно (например, в дни 1-5 или 1-7). В некоторых вариантах реализации от 0,015 мг/кг до около 0,09 мг/кг (например, 0,015, 0,03, 0,045 или 0,09 мг/кг) анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят внутривенно однократно каждые четыре недели, 100, 200 и/или 400 мг ингибитора BCL-2 (например, венетоклакса) вводят перорально ежедневно (например, 100 мг в первый день, 200 мг во второй день и 400 мг в дни 3-7, 3-8, 3-14, 3-18 или 3-21, или 3-28 в цикле 1 и 400 мг в дни 1-7, 1-8, 1-14, 1-18, 1-21 или 1-28 в последующих циклах), и 75 мг/м² или 100 мг/м² ГМА (например, азацитидина) вводят подкожно или внутривенно ежедневно в течение 7 дней (например, в дни 1- 5 или I-7).

[268] В некоторых вариантах реализации от 0,015 мг/кг до около 0,135 мг/кг (например, 0,135 мг/кг) анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят однократно каждые четыре недели, 100, 200 и/или 400 мг ингибитора BCL-2 (например, венетоклакса) вводят ежедневно (например, 100 мг в первый день, 200 мг во второй день и 400 мг в дни 3-28 в цикле 1 и 400 мг ежедневно в дни 1-28 в последующих циклах), и 75 мг/м² или 100 мг/м² ГМА (например, азацитидина) вводят ежедневно (например, в дни 1-7). В некоторых вариантах реализации от 0,015 мг/кг до около 0,135 мг/кг (например, 0,135 мг/кг) анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят внутривенно однократно каждые четыре недели, 100, 200 и/или 400 мг ингибитора BCL-2 (например, венетоклакса) вводят перорально ежедневно (например, 100 мг в первый день, 200 мг во второй день и 400 мг в дни 3-28 в цикле 1 и 400 мг ежедневно в дни 1-28 в последующих циклах), и 75 мг/м² или 100 мг/м² ГМА (например, азацитидина) вводят подкожно или внутривенно ежедневно в течение 7 дней (например, в дни 1-7).

[269] В некоторых вариантах реализации общая доза от 0,045 мг/кг до около 0,18 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят в течение четырехнедельного цикла, где общая доза разделена на три отдельные введения (например, в дни 1, 4 и 8 или дни 7, 10 и 14 цикла); 100, 200 и/или 400 мг ингибитора BCL-2 (например, венетоклакса) вводят ежедневно (например, 100 мг в первый день, 200 мг во второй день и 400 мг в дни 3-28 в цикле 1 и 400 мг ежедневно в дни 1-28 в последующих циклах), и 75 мг/м² или 100 мг/м² ГМА (например, азацитидина) вводят ежедневно в течение 7 дней (например, в дни 1-7). В некоторых вариантах реализации от около 0,015 мг/кг до около 0,06 мг/кг (например, 0,015, 0,03 или 0,06 мг/кг) анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят три раза в 28-дневном цикле (например, в дни 7, 10 и 14 28-дневного цикла), 100, 200 и/или 400 мг ингибитора BCL-2 (например, венетоклакса) вводят ежедневно (например, 100 мг в первый день, 200 мг во второй день и 400 мг в дни 3-28 в цикле 1 и 400 мг ежедневно в дни 1-28 в последующих циклах), и 75 мг/м² или 100 мг/м² ГМА (например, азацитидина) вводят ежедневно в течение 7 дней (например, в дни 1-7). В некоторых вариантах реализации от около 0,015 мг/кг до около 0,06 мг/кг (например, 0,015, 0,03 или 0,06 мг/кг) анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят внутривенно три раза в 28-дневном цикле (например, в дни 7, 10 и 14 28-дневного цикла), 100, 200 и/или 400 мг ингибитора BCL-2 (например, венетоклакса) вводят перорально ежедневно (например, 100 мг в первый день, 200 мг во второй день и 400 мг в дни 3-28 в цикле 1 и 400 мг ежедневно в дни 1-28 в последующих циклах), и 75 мг/м² или 100 мг/м² ГМА (например, азацитидина) вводят подкожно или внутривенно ежедневно в течение 7 дней (например, в дни 1-7).

[270] После введения иммуноконъюгата анти-CD123, ингибитора BCL-2 и ГМА (например, азацитидина или децитабина), иммуноконъюгат анти-CD123 (например, IMGN632) может быть назначен в качестве поддерживающей терапии.

[271] В одном случае иммуноконъюгат, связывающийся с CD123 (например, IMGN632), и ингибитор BCL-2 вводятся одновременно. В одном случае анти-CD123 иммуноконъюгат (например, IMGN632) и ингибитор BCL-2 вводятся в отдельных фармацевтических композициях. В одном случае анти-CD123 иммуноконъюгат (например, IMGN632) и ингибитор BCL-2 вводятся одновременно. В одном случае ингибитор BCL-2 вводят в течение определенного периода времени, после чего вводят (одновременно или последовательно) ингибитор BCL-2 и анти-CD123 иммуноконъюгат (например, IMGN632). В таких случаях ГМА может, необязательно, быть назначен одновременно (в той же фармацевтической композиции или отдельной фармацевтической композиции) или последовательно с анти-CD123 иммуноконъюгатом (например, IMGN632) или ингибитором BCL-2.

[272] В одном случае иммуноконъюгат, связывающийся с CD123 (например, IMGN632), и ГМА вводятся одновременно. В одном случае анти-CD123 иммуноконъюгат (например, IMGN632) и ГМА вводятся в одной и той же фармацевтической композиции. В одном случае анти-CD123 иммуноконъюгат (например, IMGN632) и ГМА вводятся в отдельных фармацевтических композициях. В одном случае анти-CD123 иммуноконъюгат (например, IMGN632) и ГМА вводятся последовательно. В одном случае ГМА вводят в течение определенного периода времени, после чего вводят (одновременно или последовательно) ГМА и анти-CD123 иммуноконъюгат (например, IMGN632). В таких случаях ингибитор BCL-2 может, необязательно, вводиться одновременно или последовательно с анти-CD123 иммуноконъюгатом (например, IMGN632) или ГМА.

VI(C). Оценка и мониторинг

[273] В некоторых вариантах реализации комбинация иммуноконъюгата анти-CD123 (например, IMGN632) и ингибитора BCL-2 и/или ГМА полезна для подавления роста опухоли. В некоторых вариантах реализации комбинация иммуноконъюгата анти-CD123 (например, IMGN632) и ингибитора BCL-2 и/или ГМА полезна для уменьшения объема опухоли. В некоторых вариантах реализации комбинация иммуноконъюгата анти-CD123 (например, IMGN632) и ингибитора BCL-2 и/или ГМА полезна для повышения выживаемости.

[274] Например, в некоторых вариантах реализации лечение комбинацией иммуноконъюгата анти-CD123 (например, IMGN632) и ингибитора BCL-2 и/или ГМА приводит к значению %Т/С, которое составляет менее около 50%, менее около 45%, менее около 40%, менее около 35%, менее около 30%, менее около 25%, менее около 20%, менее около 15%, менее около 10% или менее около 5%.

[275] В некоторых вариантах реализации комбинация иммуноконъюгата анти-CD123 (например, IMGN632) и ингибитора BCL-2 и/или ГМА может подавлять рост опухоли на модели подкожного ксенографта EOL-1. В некоторых вариантах реализации комбинация иммуноконъюгата анти-CD123 (например, IMGN632) и ингибитора BCL-2 и/или ГМА может подавлять рост опухоли на модели подкожного ксенографта KG-1.

[276] В некоторых вариантах реализации комбинация иммуноконъюгата анти-CD123 (например, IMGN632) и ингибитора BCL-2 и/или ГМА может повышать выживаемость на модели диссеминированного ксенографта MOLM-1. В некоторых вариантах реализации комбинация иммуноконъюгата анти-CD123 (например, IMGN632) и ингибитора BCL-2 и/или ГМА может повышать выживаемость на модели диссеминированного ксенографта MV4-11.

[277] В некоторых вариантах реализации комбинация иммуноконъюгата анти-CD123 (например, IMGN632) и ингибитора BCL-2 и/или ГМА может давать синергический эффект.

[278] В некоторых вариантах реализации изобретения введение комбинации иммуноконъюгата анти-CD123 (например, IMGN632) и ингибитора BCL-2 и/или ГМА не вызывает большей токсичности, чем введение ингибитора BCL-2 и/или ГМА. В некоторых вариантах реализации комбинация иммуноконъюгата анти-CD123 (например, IMGN632) и ингибитора BCL-2 и/или ГМА не вызывает большей токсичности, чем введение иммуноконъюгата анти-CD123. В некоторых вариантах реализации изобретения введение комбинации иммуноконъюгата анти-CD123 (например, IMGN632) и ингибитора BCL-2 и/или ГМА не вызывает большей токсичности, чем введение иммуноконъюгата анти-CD123 или ингибитора BCL-2 и/или ГМА.

VI(D). Дополнительные виды терапии

[279] В некоторых вариантах реализации пациенты, получающие анти-CD123 иммуноконъюгат в комбинации с ингибитором BCL-2 (например, венетоклаксом) и/или гипометилирующим агентом (ГМА) (например, азацитидином или децитабином), как раскрыто в настоящем документе, получали предварительное лечение кортикостероидом. Соответственно, в некоторых вариантах реализации представленные здесь способы включают введение кортикостероида пациенту до введения пациенту иммуноконъюгата анти-CD123. В некоторых случаях кортикостероид может быть выбран из группы, состоящей из преднизона, преднизолона, метилпреднизолона, бекламетазона, бетаметазона, дексаметазона, флудрокортизона, гидрокортизона и триамцинолона. В некоторых случаях кортикостероид вводят внутривенно. В некоторых случаях стероид вводят перорально.

[280] Например, в некоторых вариантах реализации пациенты, получающие анти-CD123 иммуноконъюгат в комбинации с ингибитором BCL-2 (например, венетоклаксом) и/или гипометилирующим агентом (ГМА) (например, азацитидином или децитабином), как раскрыто в настоящем документе, получали предварительное лечение дифенгидрамином. В некоторых вариантах реализации пациенты, получающие анти-CD123 иммуноконъюгат в комбинации с ингибитором BCL-2 (например, венетоклаксом) и/или гипометилирующим агентом (ГМА) (например, азацитидином или децитабином), как раскрыто в настоящем документе, получали предварительное лечение 25-50 мг дифенгидрамина. В некоторых вариантах реализации дифенгидрамин вводят внутривенно В некоторых вариантах реализации дифенгидрамин вводят перорально Соответственно, в некоторых вариантах реализации представленные здесь способы включают введение дифенгидрамина пациенту до введения пациенту иммуноконъюгата анти-CD123.

[281] В некоторых вариантах реализации пациенты, получающие анти-CD123 иммуноконъюгат в комбинации с ингибитором BCL-2 (например, венетоклаксом) и/или гипометилирующим агентом (ГМА) (например, азацитидином или децитабином), как раскрыто в настоящем документе, получали предварительное лечение ацетаминофеном. В некоторых вариантах реализации пациенты, получающие анти-CD123 иммуноконъюгат в комбинации с ингибитором BCL-2 (например, венетоклаксом) и/или гипометилирующим агентом (ГМА) (например, азацитидином или децитабином), как раскрыто в настоящем документе, получали предварительное лечение 325-650 мг ацетаминофена. В некоторых вариантах реализации ацетаминофен вводят внутривенно В некоторых вариантах реализации ацетаминофен вводят перорально Соответственно, в некоторых вариантах реализации представленные здесь способы включают введение ацетаминофена пациенту до введения пациенту иммуноконъюгата анти-CD123.

[282] В некоторых вариантах реализации пациенты, получающие анти-CD123 иммуноконъюгат в комбинации с ингибитором BCL-2 (например, венетоклаксом) и/или гипометилирующим агентом (ГМА) (например, азацитидином или децитабином), как раскрыто в настоящем документе, получали предварительное лечение парацетамолом. В некоторых вариантах реализации пациенты, получающие анти-CD123 иммуноконъюгат в комбинации с ингибитором BCL-2 (например, венетоклаксом) и/или гипометилирующим агентом (ГМА) (например, азацитидином или децитабином), как раскрыто в настоящем документе, получали предварительное лечение 325-650 мг парацетамола. В некоторых вариантах реализации парацетамол вводят внутривенно В некоторых вариантах реализации парацетамол вводят перорально Соответственно, в некоторых вариантах реализации представленные здесь способы включают введение парацетамола пациенту до введения пациенту иммуноконъюгата анти-CD123.

[283] В некоторых вариантах реализации пациенты, получающие анти-CD123 иммуноконъюгат в комбинации с ингибитором BCL-2 (например, венетоклаксом) и/или гипометилирующим агентом (ГМА) (например, азацитидином или децитабином), как раскрыто в настоящем документе, получали предварительное лечение дексаметазоном. В некоторых вариантах реализации пациенты, получающие анти-CD123 иммуноконъюгат в комбинации с ингибитором BCL-2 (например, венетоклаксом) и/или гипометилирующим агентом (ГМА) (например, азацитидином или децитабином), как раскрыто в настоящем документе, получали предварительное лечение 8 мг дексаметазона. В некоторых вариантах реализации дексаметазон вводят внутривенно В некоторых вариантах реализации дексаметазон вводят перорально Соответственно, в некоторых вариантах реализации представленные здесь способы включают введение дексаметазона пациенту до введения пациенту иммуноконъюгата анти-CD123.

[284] Варианты реализации настоящего раскрытия могут быть дополнительно определены со ссылкой на следующие неограничивающие примеры. Специалистам в данной области будет очевидно, что многие модификации, как материалов, так и способов, могут быть осуществлены без отступления от объема настоящего раскрытия.

Примеры

[285] Подразумевается, что примеры и варианты реализации, описанные здесь, приведены только для иллюстративных целей, и что различные модификации или изменения в свете этих примеров будут предложены специалистам в данной области и включены в дух и сферу действия настоящей заявки.

Пример 1

Исследования in vitro комбинации IMGN632 и венетоклакса в клеточных линиях ОМЛ

[286] Активность одного только IMGN632, одного только венетоклакса, а также IMGN632 и венетоклакса в комбинации были исследованы в анализах цитотоксичности in vitro на четырех различных линиях клеток острого миелоидного лейкоза (ОМЛ): EOL-1, KG-1, Molm-13 и MV4-11.

[287] Клеточные линии EOL-1, KG-1, Molm-13 и MV4-11 были получены на малом количестве пассажей (менее 10 пассажей), и культуры клеток поддерживались в соответствии с рекомендациями их поставщиков. Клетки собирали из клеточной культуры в фазе роста log, подсчитывали с помощью автоматического гемоцитометра и равномерно распределяли по лункам 96-луночных планшетов так, чтобы в каждой лунке содержалось пять тысяч живых клеток на лунку. Каждая лунка содержала блокирующее Fc-рецепторы моноклональные антитела chKTI, не нацеленные на млекопитающих так, чтобы конечный объем лунки (200 мкл) содержал chKTI в концентрации 100 нМ. Затем были приготовлены диапазоны доз только IMGN632, только венетоклакса и IMGN632 + венетоклакс (наряду с соответствующим контролем ДМСО, в случае венетоклакса) в среде, соответствующей анализируемой клеточной линии.

[288] Разведения были приготовлены, а затем добавлены к клеткам в 96-луночных планшетах в тот же день, когда клетки были посеяны. Добавление клеток и препаратов производилось таким образом, чтобы конечный объем лунки всегда составлял 200 мкл. Каждое условие обработки готовилось в трех повторах для каждого анализа. Обработанные 96-луночные планшеты оставляли в темных 37°С инкубаторах при 90% влажности и 10% СО₂ на 4 дня (EOL-1, Molm-13; MV4-11) или 5 дней (KG-1). На 4-й или 5-й день в каждую лунку добавляли по 20 мкл WST-8, и 96-луночный планшет помещали в инкубатор на время от 2 (EOL-1; Molm-13) до 7 (MV4-11; KG-1) часов для проявления. После проявления планшеты считывались в спектрофотометре, при этом показания снимались по поглощению при 650 нм. Каждый анализ для определения дозы проводился однократно. Каждый анализ с комбинацией повторяли три (EOL-1; Molm-13; MV4-11) или четыре (KG-1) раза.

[289] На основе собранных данных были проведены двух-этапные расчеты. Средние значения поглощения в контроле - только в среде - вычитались из каждого состояния с клетками в нем, а скорректированные по фону значения поглощения индексировались к средним значениям поглощения, скорректированным по фону, их контрольных аналогов, не подвергавшихся обработке. Эти рассчитанные значения были представлены в GraphPad Prism как средние значения и стандартные отклонения технических реплик в биорепликах. Те же окончательные расчетные значения, введенные в GraphPad, были далее обработаны для оценки синергии с помощью CalcuSyn. Средняя «доля выживших» из каждого условия вычиталась из 1 для получения средней «доли пораженных» (Fa) из каждого условия. Эти значения Fa в сочетании с дозами препаратов были введены в CalcuSyn (NB: только значения «х», для которых 0<х<1, были пригодны для использования). Эти входные значения использовались для расчета как индексов комбинации (ИКС), измеряющих наблюдаемый эффект препарата по сравнению с ожидаемым, так и нормализованных значений фракционного аффекта, используемых в изоболограммах комбинированного лечения.

[290] Результаты анализов цитотоксичности in vitro только IMGN632 и венетоклакса представлены на Фиг. 2A-2D. Широкие диапазоны доз IMGN632 (Фиг. 2А) и венетоклакса (Фиг. 2В) были протестированы на активность против трех клеточных линий ОМЛ (EOL-1, MV4-11, KG-1). Дозы вблизи точек перегиба этих кривых чувствительности были выбраны для использования в комбинированных анализах IMGN632 и венетоклакса. Более узкие диапазоны доз IMGN632 (Фиг. 2С) и венетоклакса (Фиг. 2D) были использованы в качестве контролей отдельных агентов для комбинированных исследований, и эти дозы представляют собой динамический диапазон активности препаратов. На Фиг. 3A-3D представлены результаты оценки комбинаций IMGN632 и венетоклакса на четырех клеточных линиях ОМЛ: EOL-1 (Фиг. 3А), MV4-11 (Фиг. 3В), KG-1 (Фиг. 3С) и Molm-13 (Фиг. 3D). В каждой из четырех исследованных клеточных линий ОМЛ комбинация IMGN632 и венетоклакса убивает больше клеток, чем только IMGN632, в зависимости от дозы. На Фиг. 4A-4L показаны результаты эффективности комбинации IMGN632 и венетоклакса, сравнивая наблюдаемые результаты комбинации на Фиг. 3A-3D с ожидаемыми результатами комбинации на основе результатов лечения одним агентом на Фиг. 2С и 2D. Значения индекса комбинации и нормализованные значения относительного эффекта были получены для каждой пары доз IMGN632 и венетоклакса. Результаты были представлены в виде графиков: эффективность комбинации в зависимости от дозы препарата (Фиг. 4А, 4D, 4G и 4J), эффективность комбинации в зависимости от эффекта лечения (Фиг. 4В, 4Е, 4Н и 4K) и эффективность комбинации относительно ожидаемого эффекта дозы, в нормализованных шкалах (Фиг. 4С, 4F, 41 и 4L). В каждой строке представлены результаты, полученные на одной клеточной линии: EOL-1 (Фиг. 4А-4С), MV4-11 (Фиг. 4D-4F), KG-1 (Фиг. 4G-4I) или Molm-13 (Фиг. 4J-4L).

[291] Результаты анализов цитотоксичности in vitro клеточных линий ОМЛ, обработанных IMGN632 и венетоклаксом, указывают на аддитивно-синергический цитотоксический эффект комбинации.

Пример 2

Материалы и способы, использованные для моделей подкожных и диссеминиуованных ксенотрансплантатов

[292] Для всех моделей подкожных ксенотрансплантатов мышей взвешивали дважды в неделю и следили за клиническими признаками на протяжении всего исследования. Животных подвергали эвтаназии, когда наступал паралич задних лап, масса тела снижалась на >20% от массы тела до лечения, происходило изъязвление опухоли или появлялись любые признаки дистресса.

[293] Объемы опухолей в подкожных моделях ксенотрансплантатов измерялись один-два раза в неделю в трех измерениях с помощью штангенциркуля. Объем опухоли выражали в мм³ с использованием формулы V=Длина × Ширина × Высота × 1/2 (Tomayko and Reynolds, Cancer Chemother. Pharmacol. 24: 148-54 (1989)). Активность оценивали как описано в Bissery et al., Cancer Res. 51: 4845-52(1991).

[294] Ингибирование роста опухоли (значение Т/С) оценивалось в моделях подкожных ксенотрансплантатов по следующей формуле: Т/С (%) = (Медиана объема опухоли в лечении / Медиана объема опухоли в контроле) × 100%. Объем опухоли определялся одновременно в группах лечения (Т) и контроля с использованием носителя (С), когда объем опухоли контроля с использованием носителя достигал заранее определенного размера (Bissery et al., Cancer Res. 51: 4845-52 (1991). Определялся ежедневный медианный объем опухоли в каждой группе, получавшей лечение, включая мышей без опухолей (0 мм³). Согласно стандартам Национального института рака (NCI), Т/С≤42% является минимальным уровнем противоопухолевой активности. Т/С<10% считается высоким уровнем противоопухолевой активности.

[295] Для всех моделей диссеминированных ксенотрансплантатов мышей взвешивали дважды в неделю и следили за клиническими признаками на протяжении всего исследования. Измеряемой конечной точкой была выживаемость. Животных подвергали эвтаназии, когда наступал паралич задних лап, масса тела снижалась на >20% от массы тела до лечения, появлялась видимая опухоль или любые видимые признаки дистресса. Когда наблюдались, регистрировались спонтанные смерти.

[296] Задержка роста опухоли в моделях диссеминиро ванных ксенотрансплантатов рассчитывалась как Т-С, где Т - медианное время выживания (в днях) группы, получавшей лечение, а С - медианное время выживания (в днях) контрольной группы, получавшей носитель. Процентное увеличение продолжительности жизни (%ILS) для диссеминированных моделей рассчитывалось по следующей формуле: %ILS = (Т-С) / С × 100%. Противоопухолевая активность оценивалась в соответствии со стандартами NCI для диссеминированных моделей: ILS<25% - неактивный, TLS≥25% - минимально активный, ILS>40% - активный и ILS≥50% - высокоактивный.

Пример 3

Эффективность in vivo комбинации IMGN632 (однократная доза) и венетоклакса (QDx28) в модели подкожной терапии EOL-1

[297] Для проверки эффективности IMGN632, венетоклакса или комбинации этих двух агентов на способность уменьшать опухолевую нагрузку in vivo использовалась модель подкожной опухоли, как описано в протоколе ниже.

[298] Самкам бестимусных голых мышей подкожно в правую переднюю лапку инокулировали по 1×10⁷ клеток EOL-1 (клеточная линия ОМЛ человека) в 100 мкл 50% Matrigel: 50% бессывороточной среды (ВВ). На 9-й день, то есть за 24 часа до введения конъюгата группам, получавшим лечение конъюгатом (отдельно или в комбинации с венетоклаксом), всем мышам в этих группах лечения внутрибрюшинно вводили 150 мг/кг нецелевого антитела chKTI для блокирования Fc-рецепторов на клетках EOL-1 ОМЛ, предотвращая неспецифическое поглощение конъюгата. На 9-й день после инокуляции EOL-1 мышей рандомизировали в группы исследования в зависимости от объема опухоли.

[299] На 10-й день после инокуляции EOL-1 мыши получили однократную внутривенную инъекцию в боковую хвостовую вену либо транспортного средства, либо 1 мкг/кг (по DGN549; 0,080 мг/кг по huCD123Ab) IMGN632, либо 0,5 мкг/кг (по DGN549; 0,040 мг/кг по huCD123Ab) IMGN632. Введение венетоклакса также было начато на 10 день, и мыши, получавшие венетоклакс, получали однократную пероралыгую дозу венетоклакса 100 мг/кг в каждый день с 10 по 37 день, включительно, после имплантации клеток, в общей сложности 28 последовательных ежедневных введений. В группах, получавших комбинацию, мышам вводили и IMGN632, и венетоклакс, как описано выше.

[300] Результаты представлены в таблице 4 (ниже) и на Фиг. 5.

[301] Однократная доза 1 мкг/кг или 0,5 мкг/кг IMGN632 приводила к значению Т/С 10,7% (активная) или 45,0% (неактивная), соответственно, и приводила к 2/6 или 0/6 долгосрочным полным регрессиям (выжившие без опухоли, TFS), соответственно, в конце исследования (85 день).

[302] Схема венетоклакса 100 мг/кг, однократно в день (QD) в течение 28 дней (х28), была неактивной, что привело к Т/С 69,1% и 1/6 TFS на 85 день.

[303] Комбинация однократной дозы 1 мкг/кг IMGN632 и режима QDx28 венетоклакса была высокоактивной и привела к Т/С 0% и 4/6 TFS на 85 день, что на 2 TFS больше, чем было получено при лечении одним агентом IMGN632, демонстрируя дополнительную пользу от комбинированного лечения. Комбинация одной дозы 0,5 мкг/кг IMGN632 и режима QDx28 венетоклакса была активной, что привело к Т/С 21,1% и 1/6 TFS на 85 день, что является более низким значением %Т/С, чем при использовании только 0,5 мкг/кг IMGN632 (45%) или только венетоклакса (69,1%), что указывает на то, что комбинация была способна замедлить рост опухоли больше, чем любая из соответствующих монотерапий.

Пример 4

Эффективность in vivo комбинации IMGN632 (QWx3) и венетоклакса (ежедневно в течение 28 дней) на модели подкожной опухоли KG-1

[304] Для проверки эффективности IMGN632, венетоклакса или комбинации этих двух агентов на способность уменьшать опухолевую нагрузку in vivo использовалась модель подкожной опухоли, как описано в протоколе ниже.

[305] Самкам мышей С. В17 SCID подкожно в правую переднюю лапку инокулировали по 1х10⁷ клеток KG-1 (относительно резистентная к IMGN632 клеточная линия ОМЛ человека) в 100 мкл 50% Matrigel: 50% бессывороточной среды (ВВ). На 17, 24, 31-й день, то есть за 24 часа до введения конъюгата группам, получавшим лечение конъюгатом (отдельно или в комбинации с венетоклаксом), всем мышам в этих группах лечения внутрибрюшинно вводили 150 мг/кг нецелевого антитела chKTI для блокирования Fc-рецепторов на клетках KG-1 ОМЛ, предотвращая неспецифическое поглощение конъюгата. На 17-й день после инокуляции KG-1 мышей рандомизировали в группы исследования в зависимости от объема опухоли.

[306] На 18, 25, 32-й день после инокуляции KG-1 мыши получили однократную внутривенную инъекцию в боковую хвостовую вену либо носителя, 3 мкг/кг (DGN549; 0,24 мг/кг антител huCD123) IMGN632, либо 10 мкг/кг (DGN549; 0,80 мг/кг антител huCD123) IMGN632. Введение венетоклакса также было начато на 18 день, и мыши, получавшие венетоклакс, получали однократную пероральную дозу венетоклакса 100 мг/кг в каждый из 28 последовательных дней (дни 18-45). В группах, получавших комбинацию, мышам вводили и IMGN632, и венетоклакс, как описано выше.

[307] Результаты представлены в таблице 5 (ниже) и на Фиг. 6.

[308] Схема QWx3 с 3 мкг/кг IMGN632 была неактивной в этом исследовании, что привело к значению Т/С 78% и 0/6 долгосрочных полных регрессий (выживших без опухоли, TFS) в конце исследования (56 день). Подобным образом, схема QWx3 с 10 мкг/кг IMGN632 была неактивной в этом исследовании, что привело к значению Т/С 73% и 0/6 TFS. Схема венетоклакса 100 мг/кг, однократно в день (QD) в течение 28 дней (х28), была неактивной, что привело к Т/С 82% и 0/6 TFS.

[309] Комбинация 3 мкг/кг IMGN632, QWx3 и схемы венетоклакса QDx28 также оказалась неактивной, что привело к Т/С 76% и 0/6 TFS. Однако комбинация 10 мкг/кг IMGN632, QWx3 и схемы венетоклакса QDx28 также оказалась неактивной, что привело к Т/С 40% и 0/6 TFS. Эти результаты показывают, что комбинированное лечение может быть эффективным даже в тех случаях, когда один из препаратов не действует.

[310] В заключение, комбинация IMGN632 и венетоклакса продемонстрировала синергическую цитотоксичность in vitro и более значительное ингибирование роста опухоли и продление выживаемости in vivo.

Пример 5

Эффективность in vivo комбинации IMGN632 (QWx3) и венетоклакса (QDx5) на модели диссеминированной опухоли Molm-13

[311] Для проверки эффективности IMGN632, венетоклакса или комбинации этих двух агентов на способность уменьшать опухолевую нагрузку in угуоиспользовалась модель диссеминированной опухоли, как описано в протоколе ниже.

[312] Самки мышей NOD SCID были предварительно обработаны 150 мг/кг циклофосфамида для частичного уничтожения костного мозга с целью улучшения приживления клеток Molm-13. Циклофосфамид (Sigma, С0768, Lot # MKBX1822V) был растворен в 0,9%NaCl и вводился внутрибрюшинно мышам на 2-й день до инокуляции клеток Molm-13 на 0-й день.

[313] После лечения циклофосфамидом, как описано выше, мышам вводили внутривенно в боковую хвостовую вену 2×10⁵ клеток Molm-13 (клеточная линия ОМЛ человека) в 100 мкл бессывороточной среды в день 0 исследования. На 6-й день после инокуляции Molm-13 мышей рандомизировали в группы исследования в зависимости от веса тела. За 24 часа до введения конъюгата группам, получавшим лечение конъюгатом (отдельно или в комбинации с венетоклаксом), всем мышам в этих группах лечения внутрибрюшинно вводили 150 мг/кг нецелевого антитела chKTI для блокирования Fc-рецепторов на клетках Molm-13 ОМЛ, предотвращая неспецифическое поглощение конъюгата.

[314] Мыши получали IMGN632 в дозе 0,3 мкг/кг по DGN549 (0,024 мг/кг по huCD123 АЪ) однократно в неделю (QW) в течение трех доз (х3) в соответствии с тремя различными графиками дозирования IMGN632, либо отдельно, либо в комбинации с азацитидином. Эти три различных графика дозирования IMGN632 были следующими: i) дни 7, 14 и 21 (обозначаемые как «день 7» для IMGN632); ii) дни 11, 18 и 25 (обозначаемые как «день 11» для IMGN632); и iii) дни 14, 21 и 28 (обозначаемые как «день 14» для IMGN632), где отмеченный день начала лечения IMGN632 был постепенно отодвинут от дня 0 (день инокуляции Molm-13) на графике исследования.

[315] Азацитидин вводился однократно в день (QD) в дозе 3,5 мг/кг в течение 5 последовательных дней (х5; дни 7, 8, 9, 10 и 11; график «День 7») либо отдельно, либо в комбинации с IMGN632.

[316] Мышей лечили комбинированной схемой IMGN632 (QWx3) и 3,5 мг/кг азацитидина (QDx5) в соответствии с одним из трех различных графиков дозирования комбинации двух препаратов: i) график 7-го дня для IMGN632 и 7-го дня для азацитидина (группа F), ii) график 11-го дня для IMGN632 и 7-го дня для азацитидина (группа G), и iii) график 14-го дня для IMGN632 и 7-го дня для азацитидина (группа Н).

[317] Результаты представлены в таблице 6 (ниже) и на Фиг. 7.

[318] Один азацитидин (группа В), вводимый в дозе 3,5 мг/кг, QDx5, по графику на 7-й день, был минимально активен в данном исследовании, что привело к задержке роста опухоли (значение Т-С) на 6 дней и 30% ILS (увеличение продолжительности жизни) по сравнению с лечением носителем. Три различных графика лечения одним агентом IMGN632 были либо высокоактивными («День 7» или «День 11»), либо минимально активными («День 14») в данном исследовании, что привело к следующим значениям Т-С и %ILS: i) график IMGN632 на 7 день (группа С) обеспечил Т-С >101 дня и >505% ILS (высокоактивный); ii) график IMGN632 на 11 день (группа D) обеспечил Т-С 9,5 дней и 47,5% ILS (высокоактивный); и iii) на 14-й день приема IMGN632 (группа Е) Т-С составил 6,5 дней и 32,5% ILS (минимально активный).

[319] Три различные схемы комбинированной терапии азацитидин плюс IMGN632, описанные выше, привели к следующей противоопухолевой активности: i) значение Т-С 23,5 дня и 117,5% TLS (высокоактивная) для комбинации IMGN632 день 7 плюс азацитидин (группа F); ii) значение Т-С 60,5 дней и 302,5% ILS (высокоактивный) для комбинации схемы 11-го дня IMGN632 плюс азацитидин (группа G); и iii) значение Т-С 37 дней и 185% ILS (высокоактивный) для комбинации схемы 14-го дня IMGN632 плюс азацитидин (группа Н). При сравнении всех трех комбинированных схем, самой высокой по % ILS оказалась группа G (302,5% ILS), где лечение IMGN632 начиналось в последний день дозирования азацитидина (11 день).

[320] Примечательно, что хотя все три протестированные схемы введения комбинированных препаратов IMGN632 плюс азацитидин привели к созданию высокоактивных комбинаций, только схемы Группы G (302,5% ILS) и Группы Н (185% ILS), в которых начало лечения IMGN632 было отложено по сравнению с началом лечения азацитидином, дали %ILS больше, чем соответствующие схемы с одним агентом IMGN632 (Группа D, «День 11»: 47,5% ILS, и группа Е, «День 14»: 32,5% ILS, соответственно). В отличие от этого, график применения комбинированного препарата в группе F (в котором использовался один и тот же начальный день для IMGN632 и азацитидина, день 7) привел к 117,5% ILS, что, несмотря на высокую активность, было заметно ниже, чем в соответствующей группе с одним агентом IMGN632 (группа С, «день 7»), которая дала >505% ILS.

Пример 6

Эффективность in vivo комбинации IMGN632 (QWx3) и децитабина (QDx5) на модели диссеминированной опухоли Molm-13

[321] Для проверки эффективности IMGN632, децитабина или комбинации этих двух агентов на способность уменьшать опухолевую нагрузку in угуоиспользовалась модель диссеминированной опухоли, как описано в протоколе ниже.

[322] Самки мышей NOD SCID были предварительно обработаны 150 мг/кг циклофосфамида для частичного уничтожения костного мозга с целью улучшения приживления клеток Molm-13. Циклофосфамид (Sigma, С0768, Lot # MKBX1822V) был растворен в 0,9%NaCl и вводился внутрибрюшинно мышам на 2-й день до инокуляции клеток Molm-13 на 0-й день.

[323] После лечения циклофосфамидом, как описано выше, мышам вводили внутривенно в боковую хвостовую вену 2×10⁵ клеток Molm-13 (клеточная линия ОМЛ человека) в 100 мкл бессывороточной среды в день 0 исследования. На 5-й день после инокуляции Molm-13 мышей рандомизировали в группы исследования в зависимости от веса тела. За 24 часа до введения конъюгата группам, получавшим лечение конъюгатом (отдельно или в комбинации с децитабином), всем мышам в этих группах лечения внутрибрюшинно вводили 150 мг/кг нецелевого антитела chKTI для блокирования Fc-рецепторов на клетках Molm-13 ОМЛ, предотвращая неспецифическое поглощение конъюгата.

[324] Мыши получали IMGN632 в дозе 0,3 мкг/кг по DGN549 (0,024 мг/кг по huCD123 Ab) однократно в неделю (QW) в течение трех доз (х3) в соответствии с тремя различными графиками дозирования IMGN632, либо отдельно, либо в комбинации с децитабином. Эти три различных графика дозирования IMGN632 были следующими: i) дни 7, 14 и 21 (обозначаемые как «день 7» для IMGN632); ii) дни 11, 18 и 25 (обозначаемые как «день 11» для IMGN632); и iii) дни 14, 21 и 28 (обозначаемые как «день 14» для IMGN632), где отмеченный день начала лечения IMGN632 был постепенно отодвинут от дня 0 (день инокуляции Molm-13) на графике исследования.

[325] Децитабин вводился однократно в день (QD) в дозе 0,75 мг/кг в течение 5 последовательных дней (х5; дни 7, 8, 9, 10 и 11; график «День 7») либо отдельно, либо в комбинации с IMGN632.

[326] Мышей лечили комбинированной схемой IMGN632 (QWx3) и 0,75 мг/кг децитабина (QDx5) в соответствии с одним из трех различных графиков дозирования комбинации двух препаратов: i) график 7-го дня для IMGN632 и 7-го дня для децитабина (группа F), ii) график 11-го дня для IMGN632 и 7-го дня для децитабина (группа G), и iii) график 14-го дня для IMGN632 и 7-го дня для децитабина (группа Н).

[327] Результаты представлены в таблице 7 (ниже) и на Фиг. 8.

[328] Один децитабин (группа В), вводимый в дозе 0,75 мг/кг, QDx5, по графику на 7-й день, был минимально активен в данном исследовании, что привело к задержке роста опухоли (значение Т-С) на 6 дней и 28,6% TLS (увеличение продолжительности жизни) по сравнению с лечением носителем. Три различных графика лечения одним IMGN632 были либо высокоактивными («День 7» или «День 11»), либо минимально активными («День 14») в данном исследовании, что привело к следующим значениям Т-С и %ILS: i) график IMGN632 на 7 день (группа С) обеспечил Т-С >49,5 дня и >235,7% ILS (высокоактивный); ii) график IMGN632 на 11 день (группа D) обеспечил Т-С 20 дней и 95,2% TLS (высокоактивный); и iii) на 14-й день приема IMGN632 (группа Е) Т-С составил 0 дней и 0% ILS (минимально активный).

[329] Три различные схемы комбинированной терапии децитабин плюс IMGN632, описанные выше, привели к следующей противоопухолевой активности: i) значение Т-С 34 дня и 161,9% ILS (высокоактивная) для комбинации IMGN632 день 7 плюс децитабин (группа F); ii) значение Т-С 38,5 дней и 183,3% ILS (высокоактивный) для комбинации схемы 11-го дня IMGN632 плюс децитабин (группа G); и iii) значение Т-С 22 дней и 104,8% ILS (высокоактивный) для комбинации схемы 14-го дня IMGN632 плюс децитабин (группа Н). При сравнении всех трех комбинированных схем, самой высокой по % ILS оказалась группа G (183,3% TLS), где лечение IMGN632 начиналось в последний день дозирования децитабина (11 день).

[330] Примечательно, что хотя все три протестированные схемы введения комбинированных препаратов IMGN632 плюс децитабин привели к созданию высокоактивных комбинаций, только схемы Группы G (183,3% ILS) и Группы Н (104,8% ILS), в которых начало лечения IMGN632 было отложено по сравнению с началом лечения децитабином, дали %ILS больше, чем соответствующие схемы с одним агентом IMGN632 (Группа D, «День 11»: 95,2% TLS, и группа Е, «День 14»: 0% TLS, соответственно). В отличие от этого, график применения комбинированного препарата в группе F (в котором использовался один и тот же начальный день для IMGN632 и децитабина, день 7) привел к 161,9% ILS, что, несмотря на высокую активность, было заметно ниже, чем в соответствующей группе с одним агентом IMGN632 (группа С, «день 7»), которая дала 235,7% ILS.

Пример 7

Эффективность in vivo комбинации IMGN632 (однократная доза) и азацитидина (Qdx5) и венетоклакса (ОРх28) на модели подкожной опухоли EOL-1

[331] Для проверки эффективности IMGN632, комбинации азацитидина и венетоклакса или комбинации этих трех агентов на способность уменьшать опухолевую нагрузку in у/уоиспользовалась модель подкожной опухоли, как описано в протоколе ниже.

[332] Самкам бестимусных голых мышей подкожно в правую переднюю лапку инокулировали по 1×10⁷ клеток EOL-1 (клеточная линия ОМЛ человека) в 100 мкл 50% Matrigel: 50% бессывороточной среды (ВВ). На 12-й день, то есть за 24 часа до введения конъюгата группам, получавшим лечение конъюгатом (отдельно или в комбинации с азацитидином плюс венетоклакс), всем мышам в этих группах лечения внутрибрюшинно вводили 150 мг/кг нецелевого антитела chKTI для блокирования Fc-рецепторов на клетках EOL-1 ОМЛ, предотвращая неспецифическое поглощение конъюгата. На 12-й день после инокуляции EOL-1 мышей рандомизировали в группы исследования в зависимости от объема опухоли.

[333] На 13-й день после инокуляции EOL-1 мыши получили однократную внутривенную инъекцию в боковую хвостовую вену либо носителя, либо 1 мкг/кг (DGN549; 0,080 мг/кг антител huCD123Ab) IMGN632. Введение венетоклакса также было начато на 13 день, и мыши, получавшие венетоклакс, получали однократную пероральную дозу венетоклакса 100 мг/кг в каждый день с 13 по 40 день, включительно, после имплантации клеток, в общей сложности 28 последовательных (х28) ежедневных (QD) введений. Введение азацитидина также было начато на 13 день, и мыши, получавшие азацитидин, получали однократную внутрибрюшинную дозу азацитидина 3 мг/кг ежедневно (QD) в каждый из 5 последовательных дней (х5). В группах, получавших комбинацию, мышам вводили IMGN632 и венетоклекс плюс азацитидин цитидин, как описано выше.

[334] Результаты представлены в таблице 8 и на Фиг. 9.

[335] Однократная доза одного агента 1 мкг/кг IMGN632 приводила к значению Т/С 64% (неактивный) и к 2/6 долгосрочным полным регрессиям (выжившие без опухоли, TFS) в конце исследования (77 день). Схема азацитидина 3 мг/кг, однократно в день (QD) в течение 5 дней (х5), была неактивной, что привело к Т/С 96% и 0/6 TFS на 77 день. Комбинация двух препаратов - азацитидина (QDx5) и венетоклакса (QDx28) оказалась неактивной, обеспечив 46% Т/С и 1/6 TFS на 77 день.

[336] Комбинация трех препаратов - IMGN632, азацитидина и венетоклакса была высокоактивной, обеспечив 0% Т/С и 5/6 TFS. Комбинация трех препаратов обеспечила % Т/С (0%), который был меньше, чем при использовании одного препарата IMGN632 (64%) или комбинации двух препаратов азацитидин плюс венетоклакс (46%), что указывает на то, что комбинация трех препаратов была более эффективной в замедлении роста опухоли, чем только IMGN632 или комбинация двух препаратов азацитидин плюс венетоклакс.

[337] Комбинация двух препаратов - IMGN632 и азацитидина также была высокоактивной, обеспечив 0% Т/С и 4/6 TFS в конце исследования. Комбинация двух препаратов IMGN632 и азацитидина обеспечила % Т/С (0%), который был меньше, чем при использовании одного препарата IMGN632 (64%) или одного препарата азацитидина (96%), что указывает на то, что комбинация двух препаратов была более эффективной в замедлении роста опухоли, чем соответствующее лечение одним препаратом.

Пример 8

Эффективность in vivo комбинации IMGN632 (Qwx3), азацитидина (Qdx5) и венетоклакса (ODx28) на модели диссеминированной опухоли Molm-13

[338] Для проверки эффективности IMGN632, венетоклакса, комбинации азацитидина плюс венетоклакс, комбинации IMGN632 плюс венетоклакс или тройной комбинации IMGN632, азацитидина и венетоклакса на способность уменьшать опухолевую нагрузку in у/уоиспользовалась модель диссеминированной опухоли, как описано в протоколе ниже.

[339] Самки мышей NOD SCID были предварительно обработаны 150 мг/кг циклофосфамида для частичного уничтожения костного мозга с целью улучшения приживления клеток Molm-13. Циклофосфамид (Sigma, С0768, Lot # MKBX1822V) был растворен в 0,9%NaCl и вводился внутрибрюшинно мышам на 2-й день до инокуляции клеток Molm-13 на 0-й день.

[340] После лечения циклофосфамидом, как описано выше, мышам вводили внутривенно в боковую хвостовую вену 2×10⁵ клеток Molm-13 (клеточная линия ОМЛ человека) в 100 мкл бессывороточной среды в день 0 исследования. За 24 часа до введения конъюгата группам, получавшим лечение конъюгатом (отдельно или в комбинации с венетоклаксом), всем мышам в этих группах лечения внутрибрюшинно вводили 150 мг/кг нецелевого антитела chKTI для блокирования Fc-рецепторов на клетках Molm-13 ОМД предотвращая неспецифическое поглощение конъюгата.

[341] На 11, 18, 25-й день после инокуляции Molm-13 мыши получили однократную внутривенную инъекцию в боковую хвостовую вену либо носителя, либо 0,3 мкг/кг (DGN549; 0,024 мг/кг антител huCD123Ab) IMGN632. Введение венетоклакса также было начато на 7 день, и мыши, получавшие венетоклакс, получали однократную пероральную дозу венетоклакса 100 мг/кг в каждый день с 7 по 34 день, включительно, в общей сложности 28 последовательных (х28) ежедневных (QD) введений. Введение азацитидина также было начато на 7 день, и мыши, получавшие азацитидин, получали однократную внутрибрюшинную дозу азацитидина 3,5 мг/кг ежедневно (QD) в каждый из 5 последовательных дней (х5). В группе комбинации азацитидина и венетоклакса или в группе тройной комбинации всех трех агентов мышам вводили IMGN632, венетоклакс и азацитидин, как описано выше.

[342] Результаты до 80 дней после инокуляции опухолевых клеток представлены в таблице 9А (ниже) и на Фиг. 10А.

[343] Лечение одним агентом IMGN632 (группа В) привело к задержке роста опухоли (значение Т-С) на >5 9,5 дней и увеличению продолжительности жизни (%ILS) на >277% по сравнению с лечением носителем. Лечение одним агентом венетоклаксом (группа Е) привело к тому, что Т-С составил 11,5 дней, a ILS - 53,5% (высокоактивный). Комбинация двух препаратов

- азацитидина и венетоклакса (группа С) привела к тому, что Т-С составляло 14,5 дней, a ILS

- 67,4% (высокоактивный). Комбинация двух препаратов IMGN632 и венетоклакса (группа F) привела к Т-С >59,5 и ILS >277% (высокоактивный), то есть значения Т-С и %ILS больше, чем при использовании только венетоклакса, что указывает на то, что добавление IMGN632 к венетоклаксу дает дополнительные преимущества по сравнению с лечением одним агентом - венетоклаксом. Комбинация из трех препаратов - IMGN632 с азацитидином и венетоклаксом (группа D) привела к Т-С >59,5 дней и >277% ILS (высокоактивный), что превышает показатели Т-С и %ILS, полученные при использовании комбинации двух препаратов азацитидина и венетоклакса, что указывает на то, что добавление IMGN632 к комбинации двух препаратов азацитидина и венетоклакса дает дополнительные преимущества по сравнению с лечением только азацитидином и венетоклаксом.

[344] Результаты до 109 дней после инокуляции опухолевых клеток представлены в таблице 9 В(ниже) и на Фиг. 10 В. Лечение одним IMGN632 (группа В) привело к задержке роста опухоли (значение Т-С) на >87,5 дней и увеличению продолжительности жизни (%TLS) на >407% по сравнению с лечением носителем. Лечение одним агентом венетоклаксом (группа Е) привело к тому, что Т-С составил 11,5 дней, a TLS - 53,5% (высокоактивный). Комбинация двух препаратов - азацитидина и венетоклакса (группа С) привела к тому, что Т-С составляло 14,5 дней, a ILS - 67,4% (высокоактивный). Комбинация двух препаратов -IMGN632 и венетоклакса (группа F) привела к Т-С >87,5 и >407%ILS (высокоактивный), то есть значения Т-С и %ILS больше, чем при использовании только венетоклакса, что указывает на то, что добавление IMGN632 к венетоклаксу дает дополнительные преимущества по сравнению с лечением одним агентом - венетоклаксом. Комбинация из трех препаратов - IMGN632 с азацитидином и венетоклаксом (группа D) привела к Т-С >87,5 дней и >407% ILS (высокоактивный), что превышает показатели Т-С и %ILS, полученные при использовании комбинации двух препаратов азацитидина и венетоклакса, что указывает на то, что добавление IMGN632 к комбинации двух препаратов - азацитидина и венетоклакса - дает дополнительные преимущества по сравнению с лечением только азацитидином и венетоклаксом.

Пример 9

Эффективность in vivo комбинации IMGN632 (Qwx3), азацитидина (Qdx5) и венетоклакса (QDx28) на модели диссеминированной опухоли MV4-11

[345] Для проверки эффективности IMGN632, комбинации азацитидина и венетоклакса или комбинации этих трех агентов на способность уменьшать опухолевую нагрузку in у/уоиспользовалась модель диссеминированной опухоли, как описано в протоколе ниже.

[346] Самки мышей NOD SCID были предварительно обработаны 150 мг/кг циклофосфамида для частичного уничтожения костного мозга с целью улучшения приживления клеток MV4-11. Циклофосфамид (Sigma, С0768, Lot # MKBX1822V) был растворен в 0,9%NaCl и вводился внутрибрюшинно мышам на 3-й и 2-й день до инокуляции клеток MV4-11 на 0-й день.

[347] После лечения циклофосфамидом, как описано выше, мышам вводили внутривенно в боковую хвостовую вену 3×10⁶ клеток MV4-11 (клеточная линия ОМЛ человека) в 100 мкл бессывороточной среды в день 0 исследования. На 3-й день после инокуляции MV4-11 мышей рандомизировали в группы исследования в зависимости от веса тела. За 24 часа до введения конъюгата группам, получавшим лечение конъюгатом (отдельно или в комбинации с азацитидином и венетоклаксом), всем мышам внутрибрюшинно вводили 150 мг/кг нецелевого антитела chKTI для блокирования Fc-рецепторов на клетках MV4-11 ОМЛ, предотвращая неспецифическое поглощение конъюгата.

[348] На 25, 32, 39-й день после инокуляции MV4-11 мыши получили однократную внутривенную инъекцию в боковую хвостовую вену либо носителя, либо 1 мкг/кг (DGN549; 0,080 мг/кг антител huCD123Ab) IMGN632. Введение венетоклакса также было начато на 21 день, и мыши, получавшие венетоклакс, получали однократную пероральную дозу венетоклакса 100 мг/кг в каждый день с 21 по 48 день, включительно, в общей сложности 28 последовательных (х28) ежедневных (QD) введений. Введение азацитидина также было начато на 21 день, и мыши, получавшие азацитидин, получали однократную внутрибрюшинную дозу 4,5 мг/кг или 3 мг/кг азацитидина ежедневно (QD) в каждый из 5 последовательных дней (х5). В группе комбинации азацитидин плюс венетоклакс или в группе тройной комбинации всех трех агентов мышам вводили IMGN632, венетоклакс и азацитидин, как описано выше.

[349] Результаты представлены в таблице 10 и на Фиг. 11.

[350] Лечение одним агентом IMGN632 (группа В) привело к задержке роста опухоли (значение Т-С) на >81 дней и увеличению продолжительности жизни (%ILS) на >180% по сравнению с лечением носителем. Лечение комбинацией двух препаратов - азацитидином (4,5 мг/кг) и венетоклаксом (группа С) привело к тому, что Т-С составил 28 дней, a ILS - 62,2% (высокоактивный). Комбинация из трех препаратов - IMGN632 с азацитидином (4,5 мг/кг) и венетоклаксом (группа D) привела к Т-С в 64 дня и >142,2% ILS (высокоактивный), что превышает показатели Т-С и %ILS, полученные при использовании комбинации двух препаратов азацитидина (4,5 мг/кг) и венетоклакса, что указывает на то, что добавление IMGN632 к комбинации двух препаратов азацитидина и венетоклакса дает дополнительные преимущества по сравнению с лечением только азацитидином и венетоклаксом.

[351] Комбинация двух препаратов - азацитидина (3 мг/кг) и венетоклакса (группа Е) привело к тому, что Т-С составил 20 дней, a TLS - 44,4% (активный). Комбинация из трех препаратов - IMGN632 с азацитидином (3 мг/кг) и венетоклаксом (группа D) привела к Т-С в 76 дней и >168,9% ILS (высокоактивный), что превышает показатели Т-С и %ILS, полученные при использовании комбинации двух препаратов азацитидина (3 мг/кг) и венетоклакса, что указывает на то, что добавление IMGN632 к комбинации двух препаратов азацитидина и венетоклакса дает дополнительные преимущества по сравнению с лечением только азацитидином и венетоклаксом.

Пример 10

Введение комбинаций IMGN632 людям

[352] Неподходящие для лечения пациенты первой линии и пациенты с рецидивом/рефрактерной БПОДК и рецидивом/рефрактерным ОЛЛ получают лечение в рекомендуемой дозе фазы 2 (RP2D) монотерапии IMGN632 в виде 0,045 мг/кг однократно в 21-дневном цикле (Q3W). На основании проведенных экспериментов были выбраны следующие три режима дозирования для применения у людей: Режим A: IMGN632+азацитидин:

[353] Цикл для IMGN632 и азацитидина составляет 28 дней. В этом 28-дневном цикле азацитидин вводят в дозе 75 мг/м² подкожно (ПК) или внутривенно (ВВ) ежедневно в дни с 1 по 7. В качестве альтернативы, азацитидин можно вводить в дозе 75 мг/м² подкожно (ПК) или внутривенно (ВВ) ежедневно в дни с 1 по 5. Введение IMGN632 начинается на 7-й день после последней дозы азацитидина. DV1GN632 вводят в общей дозе 0,015 мг/кг, 0,045 мг/кг, 0,09 мг/кг или 0,18 мг/кг за 28-дневный цикл. Например, IMGN632 вводят в дозе 0,015 мг/кг, 0,045 мг/кг или 0,09 мг/кг однократно (т.е. на 7-й день) в каждом 28-дневном цикле. IMGN632 вводят в дозе 0,03 мг/кг однократно (например, на 7-й день) в каждом 28-дневном цикле. Альтернативно, IMGN632 вводят в дозе 0,015 мг/кг, 0,03 мг/кг или 0,06 мг/кг три раза (например,на 7-й день, 10 и 14) в каждом 28-дневном цикле.

[354] Если после цикла 1 у пациентов наблюдается токсичность, связанная с азацитидином (например, цитопения), дозировка азацитидина может быть сокращена до 5 дней путем отказа от лечения в дни 1 и 2 и введения азацитидина в дни с 3 по 7 в последующих циклах.

[355] Всего может быть проведено 2-12 циклов. Затем IMGN632 можно вводить в качестве поддерживающей терапии однократно в три недели (например, в первый день 21-дневного цикла в дозе 0,015 мг/кг, 0,045 мг/кг или 0,09 мг/кг) или три раза в три недели (например, в дни 1, 4 и 8 21-дневного цикла в дозе 0,015 мг/кг, 0,03 мг/кг или 0,06 мг/кг).

Режим В: IMGN632 + венетоклакс

[356] Цикл для DV1GN632 и венетоклакса составляет 21 дней. В первом цикле венетоклакс назначается перорально (ПО) в дозе 100 мг в первый день, 200 мг во второй день и 400 мг во все последующие дни (дни 3-21); в последующих циклах венетоклакс назначается в максимальной дозе (например, 400 мг) во все дни). Введение IMGN632 начинается на 7-й день после седьмой дозы венетоклакса. IMGN632 вводят в общей дозе 0,015 мг/кг, 0,045 мг/кг, 0,09 мг/кг или 0,18 мг/кг за 21-дневный цикл. Например, IMGN632 вводят в дозе 0,015 мг/кг, 0,045 мг/кг или 0,09 мг/кг однократно (т.е. на 7-й день) в каждом 21-дневном цикле. IMGN632 вводят в дозе 0,03 мг/кг однократно (например, на 7-й день) в каждом 28-дневном цикле. Альтернативно, IMGN632 вводят в дозе 0,015 мг/кг, 0,03 мг/кг или 0,06 мг/кг три раза (например,на 7-й день, 10 и 14) в каждом 21-дневном цикле.

[357] Согласно этикетке венетоклакса FDA, следует избегать применения сильных ингибиторов цитохрома Р450 (CYP)3A, например, вориконазола и позаконазола. Если пациенты принимают умеренный ингибитор CYP3A (например, креземба), дозы венетоклакса ограничиваются 200 мг.

[358] Если после первого цикла у пациентов наблюдается токсичность, связанная с венетоклаксом (например, цитопения), дозировка венетоклакса может быть снижена до дней с 1 по 14 (или с 1 по 7). Дозирование венетоклакса также может быть сокращено до дней с 1 по 8.

[359] Всего может быть проведено 2-12 циклов. Затем IMGN632 можно вводить в качестве поддерживающей терапии однократно в три недели (например, в первый день 21-дневного цикла в дозе 0,015 мг/кг, 0,045 мг/кг или 0,09 мг/кг) или три раза в три недели (например, в дни 1, 4 и 8 21-дневного цикла в дозе 0,015 мг/кг, 0,03 мг/кг или 0,06 мг/кг).

Режим С: IMGN632 + азацитидин + венетоклакс

[360] Цикл для IMGN632, азацитидина и венетоклакса составляет 28 дней. В этом 28-дневном цикле азацитидин вводят в дозе 75 мг/м² подкожно (ПК) или внутривенно (ВВ) ежедневно в дни с 1 по 7. В качестве альтернативы, азацитидин можно вводить в дозе 75 мг/м² подкожно (ПК) или внутривенно (ВВ) ежедневно в дни с 1 по 5.

[361] В первом цикле венетоклакс вводят перорально (ПО) в дозе 100 мг в первый день, 200 мг во второй день и 400 мг во все последующие дни (дни 3-28); в последующих циклах венетоклакс вводят в максимальной дозе (например, 400 мг во все дни). В качестве альтернативы венетоклакс можно вводить в дозе 100 мг в первый день, 200 мг во второй день и 400 мг в последующие дни 3-8, 3-14 или дни 3-21 28-дневного цикла; а в последующих циклах - перорально (ПО) в максимальной дозе (например, 400 мг) в дни 1-8, I-14, I-18 или I-21 28-дневного цикла.

[362] Введение IMGN632 начинается на 7-й день, например, после седьмой дозы венетоклакса. IMGN632 вводят в общей дозе 0,015 мг/кг, 0,045 мг/кг, 0,09 мг/кг или 0,18 мг/кг за 28-дневный цикл. Например, IMGN632 вводят в дозе 0,015 мг/кг, 0,045 мг/кг или 0,09 мг/кг однократно (т.е. на 7-й день) в каждом 28-дневном цикле. IMGN632 вводят в дозе 0,03 мг/кг однократно (например, на 7-й день) в каждом 28-дневном цикле. Альтернативно, IMGN632 вводят в дозе 0,015 мг/кг, 0,03 мг/кг или 0,06 мг/кг три раза (например, на 7-й день, 10 и 14) в каждом 28-дневном цикле.

[363] Всего может быть проведено 2-12 циклов. Затем IMGN632 можно вводить в качестве поддерживающей терапии однократно в три недели (например, в первый день 21-дневного цикла в дозе 0,015 мг/кг, 0,045 мг/кг или 0,09 мг/кг) или три раза в каждые три недели (например, в дни 1, 4 и 8 21-дневного цикла в дозе 0,015 мг/кг, 0,03 мг/кг или 0,06 мг/кг). IMGN632 также может быть назначен в качестве поддерживающей терапии однократно в три недели (например, в первый день 21-дневного цикла в дозе 0,03 мг/кг).

Пример 11

Введение IMGN632 пациентами с минимальной остаточной болезнью

[364] Исследование IMGN632 было разработано для оценки эффекта внутривенного введения IMGN632 у взрослых пациентов с лейкозом с минимальной остаточной болезнью (MRD). Пациенты включали как подходящих, так и неподходящих для лечения пациентов. Пациенты с MRD имеют меньшую лейкемическую нагрузку, чем другие пациенты, и поэтому у них может быть меньше CD123. Таким образом, у этих пациентов соотношение IMGN632 к CD123 может быть выше, чем у других пациентов, поэтому низкие дозы (например, 15-45 мкг/кг) могут быть эффективными.

[365] Пациенты, включенные в исследование, должны находиться в полной ремиссии (CR/CRi) и быть MRD+ после интенсивной индукционной/консолидирующей терапии, при отсутствии подходящей стандартной терапии. Для оценки статуса MRD используется центральное тестирование на основе проточной цитометрии.

[366] Пациенты могут получать режим премедикации перед каждой инфузией IMGN632. Премедикация включает (i) 25-50 мг дифенгидрамина (внутривенно или per os [ПО]); (ii) 325-650 мг ацетаминофена или парацетамола (ВВ или ПО) и/или (iii) 8 мг дексаметазона (ПО или ВВ). Если отдельным пациентам требовалось более интенсивное или альтернативное лечение для предотвращения инфузионных реакций (например, другой кортикостероид, другая доза любого препарата), схема может быть изменена в соответствии со стандартной практикой лечебного учреждения.

[367] IMGN632 вводят однократно в три недели (21 день) в дозе 0,015 мг/кг, 0,045 мг/кг, 0,09 мг/кг, 0,135 мг/кг или 0,18 мг/кг.

[368] Лечение состоит из двух циклов (т.е. в общей сложности шесть недель), при этом вторые дозы вводятся пациентам по меньшей мере через 21 день после первых доз. Дополнительные циклы, например, до 10 или более, могут быть назначены пациентам, получающим пользу от этой схемы.

[369] Антилейкемическая активность демонстрируется путем измерения коэффициента перехода MRD+ в MRD-. Также оценивается безрецидивная выживаемость (RFS) и выживаемость без событий (EFS) с тем, чтобы продемонстрировать противоопухолевую активность.

Здесь приведены примерные случаи.

[370] В одном приведенном здесь случае (II) способ лечения гематологической злокачественной опухоли у субъекта, включающий введение указанному нуждающемуся в этом субъекту иммуноконъюгата, связывающегося с CD123, где иммуноконъюгат содержит антитело или его антиген-связывающий фрагмент, содержащее вариабельную область тяжелой цепи CDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5; вариабельную область тяжелой цепи CDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6; и вариабельную область тяжелой цепи CDR3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 7; и вариабельную область легкой цепи CDR1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: S; вариабельную область легкой цепи CDR2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 9; и вариабельную область легкойцепи CDR3, содержащую аминокислотную последовательность: SEQ ID NO: 10, и ингибитор BCL-2, гипометилирующий агенили их комбинацию.

[371] В одном случае (I2) из I1 иммуноконъюгат вводят в комбинации с ингибитором BCL-2. В одном случае (13) из I1 иммуноконъюгат вводят в комбинации с гипометилирующим агентом. В одном случае (14) из I1 иммуноконъюгат вводят в комбинации с ингибитором BCL-2 и гипометилирующим агентом.

[372] В одном случае (I5) любого из I1-14 антитело или антиген-связьшающий фрагмент содержит VH, включающий аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 1, и/или VL, включающий аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 2. В одном случает (16) из 15 антитело или антиген-связывающий фрагмент включает константную область тяжелой цепи и/или константную область легкой цепи.

[373] В одном случае (I7) любого из I1-14 антитело или антиген-связьшающий фрагмент содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 3, и/или легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, представленную в SEQ IDNO: 4.

[374] В одном случае (IS) любого из I1-17 иммуноконъюгат содержит цитотоксический агент, необязательно, при этом цитотоксический агент представляет собой ДНК-алкилирующий агент. В одном случае (I9) любого из IS ДНК-алкилирующий агент представляет собой индолинобензодиазепиновый (IGN) ДНК-апкилятор.

[375] В одном случае (I10) любого из I1-19 и ммуноконъюгат включает пептидный линкер.

[376] В одном случае (I11) любого из I1-I10 иммуноконъюгат представляет собой IMGN632.

[377] В одном случае (I12) любого из I1-l0 иммуноконъюгат вводят в фармацевтической композиции, содержащей иммуноконъюгаты со следующей структурой:

при этом

G4723A содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 3, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 4.

[378] В одном случае (I13) любого из I1-I12 введение представляет собой терапию первой линии.

[379] В одном случае (I14) любого из I1-I13 иммуноконъюгат вводят внутривенно.

[380] В одном случае (I5) любого из I1-I14,введение иммуноконъюгата с ингибитором BCL-2, гипометилирующим агентом или их комбинацией дает синергический эффект.

[381] В одном случае (I16) любого из I1, I2 и I4-I15 введение иммуноконъюгата и ингибитора BCL-2 не вызывает большей токсичности, чем введение только иммуноконъюгата или только ингибитора BCL-2. В одном случает (I17) любого из I1 и I3-I15 введение иммуноконъюгата и гипометилирующего агента не вызывает большей токсичности, чем введение только иммуноконъюгата или только гипометилирующего агента. В одном случае (I18) любого из I1 и I4-I15 введение иммуноконъюгата, ингибитора BCL-2 и гипометилирующего агента не вызывает большей токсичности, чем введение иммуноконъюгата, ингибитора BCL-2 и/или гипометилирующего агента.

[382] В одном случае (I19) любого из I1, I2 и I5-I18 иммуноконъюгат вводят однократно в 21-дневном цикле. В одном случае (I20) из I19 иммуноконъюгат вводят в дозе от около 0,015 мг/кг до около 0,09 мг/кг однократно в 21-дневном цикле, необязательно, при этом доза составляет около 0,015 мг/кг, около 0,045 мг/кг или около 0,09 мг/кг.

[383] В одном случае (I21) любого из и I1-I18 иммуноконъюгат вводят три раза в 21-дневном цикле. В одном случае (I22) из I21 общее количество иммуноконъюгата, вводимого в течение 21-дневного цикла, составляет около 0,045 мг/кг, около 0,09 мг/кг или около 0,18 мг/кг. В одном случае (I23) из 122, от около 0,015 мг/кг до около 0,06 мг/кг иммуноконъюгата вводят в каждый из трех моментов 21-дневного цикла, необязательно, при этом около 0,015 мг/кг, около 0,03 мг/кг или около 0,06 мг/кг иммуноконъюгата вводят в каждый из трех моментов 21-дневного цикла. В одном случае (I24) любого из I21-I23 первое введение иммуноконъюгата происходит на 7-й день 21-дневного цикла. В одном случает (I25) любого из I21-I24 второе введение иммуноконъюгата происходит на 10-й день 21-дневного цикла. В одном случае (I26) любого из I21-I25 третье введение иммуноконъюгата происходит на 14-й день 21-дневного цикла. В одном случае (I27) любого из I21-I26 первое, второе и третье введение осуществляется на 7, 10 и 14 день, соответственно, 21-дневного цикла.

[384] В одном случае (I28) любого из Il, I2 и I4-I27 ингибитор BCL-2 представляет собой венетоклакс.

[385] В одном случае (I29) любого из I1, I2 и I4-i28 ингибитор BCL-2 вводят в дозе 400 мг. В одном случае (I30) любого из I1, I2 и I4-I28 ингибитор BCL-2 вводят в дозе 200 мг.

[386] В одном случае (I31) любого из I1, I2 и I4-I30 ингибитор BCL-2 вводят ежедневно в 21-дневном цикле. В одном случае (I32) любого из I1, I2 и I4-I28 ингибитор BCL-2 вводят в дозе 100 мг в первый день 21-дневного цикла, в дозе 200 мг во второй день 21-дневного цикла и в дозе 400 мг на 3-21 день 21-дневного цикла. В одном случае (I33) любого из I1, I2 и I4-I28 ингибитор BCL-2 вводят в дозе 100 мг в первый день 21-дневного цикла, в дозе 200 мг во второй день 21-дневного цикла и в дозе 400 мг в дни 3-7 или 3-14 21-дневного цикла. В одном случае (I34) любого из II, 12 и 14-128 ингибитор BCL-2 вводят в дозе 100 мг в первый день 21-дневного цикла и в дозе 200 мг в дни 2-21, 2-14 или 2-7 21-дневного цикла.

[387] В одном случае (I35) любого из II, I2 и I4-I34 ингибитор BCL-2 вводят перорально.

[388] В одном случае (I36) любого из I1, I2 и I4-I35 введение иммуноконъюгата начинают через шесть дней после начала введения ингибитора BCL-2.

[389] В одном случае (I37) любого из I1 и I3-I18 иммуноконъюгат вводят однократно в 28-дневном цикле. В одном случае (I38) из I37 иммуноконъюгат вводят в дозе от около 0,015 мг/кг до около 0,09 мг/кг однократно в 28-дневном цикле, необязательно, при этом доза составляет около 0,015 мг/кг, около 0,045 мг/кг или около 0,09 мг/кг.

[390] В одном случае (I39) любого из и I1-I18 иммуноконъюгат вводят три раза в 28-дневном цикле. В одном случае (I40) из I39 общее количество иммуноконъюгата, вводимого в течение 28-дневного цикла, составляет около 0,045 мг/кг, около 0,09 мг/кг или около 0,18 мг/кг. В одном случае (I41) из 140, от около 0,015 мг/кг до около 0,06 мг/кг иммуноконъюгата вводят в каждый из трех моментов 28-дневного цикла, необязательно, при этом около 0,015 мг/кг, около 0,03 мг/кг или около 0,06 мг/кг иммуноконъюгата вводят в каждый из трех моментов 28-дневного цикла. В одном случае (I42) любого из I39-I41 первое введение иммуноконъюгата происходит на 7-й день 28-дневного цикла. В одном случает (I43) любого из I39-I42 второе введение иммуноконъюгата происходит на 10-й день 28-дневного цикла. В одном случае (I44) любого из I39-I43 третье введение иммуноконъюгата происходит на 14-й день 28-дневного цикла. В одном случае (I45) любого из I39-I44 первое, второе и третье введение осуществляется на 7, 10 и 14 день, соответственно, 28-дневного цикла.

[391] В одном случае (I46) любого из I37-I45 ингибитор BCL-2 представляет собой венетоклакс. В одном случае (I47) любого из I37-I46 ингибитор BCL-2 вводят в дозе 400 мг. В одном случае (I48) любого из I37-I46 ингибитор BCL-2 вводят в дозе 200 мг. В одном случае (I49) любого из I37-I48 ингибитор BCL-2 вводят ежедневно в 28-дневном цикле. В одном случае (I50) любого из I37-I46 ингибитор BCL-2 вводят в дозе 100 мг в первый день 28-дневного цикла, в дозе 200 мг во второй день 28-дневного цикла и в дозе 400 мг на 3-28 день 28-дневного цикла. В одном случае (I51) любого из и I37-I46 ингибитор BCL-2 вводят в дозе 100 мг в первый день 28-дневного цикла, в дозе 200 мг во второй день 28-дневного цикла и в дозе 400 мг в дни 3-7 или 3-14 28-дневного цикла. В одном случае (I52) любого из и I37-I46 ингибитор BCL-2 вводят в дозе 100 мг в первый день 28-дневного цикла и в дозе 200 мг в дни 2-28, 2-14 или 2-7 28-дневного цикла. В одном случае (I53) любого из и I37-I52 ингибитор BCL-2 вводят перорально. В одном случае (I54) любого из и I37-I53 введение иммуноконъюгата начинают через шесть дней после начала введения ингибитора BCL-2.

[392] В одном случае (I55) любого из I1, I3-I18 и I37-I54 гипометилирующий агент представляет собой азацитидин. В одном случае (I56) из I55 азацитидин вводят в течение 28-дневного цикла. В одном случае (I57) из I55 или I56 азацитидин вводят однократно в день в дни 1-7 28-дневного цикла. В одном случае (I58) из I55 или I56 азацитидин вводят однократно в день в дни 3-7 28-дневного цикла. В одном случае (I59) любого из 156-158 азацитидин вводят в дозе около 75 мг/м². В одном случае (I60) любого из 156-159 азацитидин вводят подкожно или внутривенно.

[393] В одном случае (I61) любого из I1 и I3-I54 гипометилирующий агент представляет собой децитабин. В одном случае (I62) из I61 децитабин вводят внутривенно.

[394] В одном случае (I63) любого из I1-I62 гематологическая злокачественная опухоль присутствует у субъекта в виде минимальной остаточной болезни (MRD).

[395] В одном случае (I64) способ лечения гематологической злокачественной опухоли, присутствующей в виде минимальной остаточной болезни у субъекта-человека, включающий введение субъекту анти-CD123 иммуноконъюгата, включающего анти-CD123 антитело или его антиген-связывающий фрагмент, связанный с цитотоксический агентом. В одном случае (I65) из 164 иммуноконъюгат вводят в дозе от около 0,045 мг/кг до около 0,18 мг/кг. В одном случае (I66) из I64 или I65 субъекту вводят около 0,045 мг/кг, около 0,09 мг/кг, около 0,135 мг/кг или около 0,18 мг/кг. В одном случае (I67) любого из I64-I66 иммуноконъюгат вводят внутривенно. В одном случае (I68) любого из и I64-I67 гематологическая злокачественная опухоль представляет собой лейкоз. В одном случае (I69) любого из и I64-I68 иммуноконъюгат вводят субъекту однократно в 21-дневном цикле.

[396] В одном случае (I70) любого из I20-I63 или I69 введение осуществляют в течение одного цикла. В одном случае (I71) любого из I20-I63 или I69 введение предназначено для более чем одного цикла. В одном случае (I72) любого из I20-I63 или I69 введение осуществляется в течение по меньшей мере 2 циклов, по меньшей мере 3 циклов, по меньшей мере 4 циклов, по меньшей мере 5 циклов, по меньшей мере 6 циклов, по меньшей мере 7 циклов, по меньшей мере 8 циклов, по меньшей мере 9 циклов или по меньшей мере 10 циклов. В одном случае (I73) любого из I20-I63 или I69 введение осуществляется в течение около 2-4 циклов, около 2-6 циклов, около 2-8 циклов, около 2-10 циклов или около 2-12 циклов.

[397] В одном случае (I74) любого из I1-I73 способ дополнительно включает введение сниженной дозы иммуноконъюгата после того, как у субъекта возникла токсичность, ограничивающая дозу, и она была снижена до исходного уровня или <2 степени.

[398] В одном случае (I75) любого из I1-I73 иммуноконъюгат далее вводят в качестве поддерживающей терапии. В одном случае (I76) из I75 поддерживающая терапия включает в себя введение иммуноконъюгата однократно в 21-дневном цикле. В одном случае (I77) из I76 иммуноконъюгат вводят в дозе от около 0,015 мг/кг до около 0,09 мг/кг однократно в 21-дневном цикле, в качества варианта, при этом доза составляет около 0,015 мг/кг, около 0,045 мг/кг или около 0,09 мг/кг. В одном случае (I78) из I75 поддерживающая терапия включает в себя введение иммуноконъюгата три раза в 21-дневном цикле. В одном случае (I79) из I78 во время поддерживающей терапии общее количество иммуноконъюгата, вводимого в течение 21-дневного цикла, составляет около 0,045 мг/кг, около 0,09 мг/кг или около 0,18 мг/кг. В одном случае (I80) из I79, от около 0,015 мг/кг до около 0,06 мг/кг иммуноконъюгата вводят в каждый из трех моментов 21-дневного цикла, необязательно, при этом около 0,015 мг/кг, около 0,03 мг/кг или около 0,06 мг/кг иммуноконъюгата вводят в каждый из трех моментов 21-дневного цикла. В одном случае (I81) любого из I78-I80 во время поддерживающей терапии первое, второе и третье введение осуществляется на 1, 4 и 8 день, соответственно, 21-дневного цикла.

[399] В одном случае (I82) любого из I1-I12, I14-I62 и I69-I81 гематологическая злокачественная опухоль является рецидивной гематологической злокачественной опухолью.

[400] В одном случае (I83) любого из I1-I82 гематологическая злокачественная опухоль представляет собой острый миелоидный лейкоз (ОМЛ), миелодиспластический синдром (МДС), В-клеточный острый лимфобластный лейкоз (В-ОЛЛ), хронический миелоидный лейкоз в бластном кризе/фазе (ХМЛ-БФ) и бластому плазмоцитоидных дендритных клеток (БПДК).

[401] В одном случае (I84) любого из и I1-I82 гематологическая злокачественная опухоль представляет собой ОМЛ. В одном случае (I85) из I84 ОМЛ представляет собой рецидивный ОМЛ. В одном случае (I86) из I84 или I85 ОМЛ представляет собой рецидивный ОМЛ.

[402] В одном случае (I87) любого из и 11-182 гематологическая злокачественная опухоль представляет собой БПДК. В одном случае (I88) из 188 БПДК представляет собой рецидивную БПДК. В одном случае (I89) из 187 или 188 БПДК представляет собой рефрактерный БПДК.

[403] В одном случае (I90) любого из и I1-I82 гематологическая злокачественная опухоль представляет собой ОЛЛ. В одном случае (I91) из I90 ОЛЛ представляет собой рецидивный ОЛЛ. В одном случае (I92) из I90 или I91 ОЛЛ представляет собой рефрактерный ОЛЛ.

[404] В одном случае (I93) любого из и I1-I82 гематологическая злокачественная опухоль представляет собой хронический миеломоноцитарный лейкоз (ХММЛ). В одном случае (I94) из I93 ХМЛЛ представляет собой рецидивный ХММЛ. В одном случае (I95) из I93 или I94 ХММЛ представляет собой рефрактерный ХММЛ.

[405] В одном случае (I96) любого из I1-I82 гематологическая злокачественная опухоль представляет собой миелофиброз (МФ). В одном случае (I97) из I96 МФ представляет собой рецидивный МФ. В одном случае (I98) из 196 или I97 МФ представляет собой рефрактерный МФ.

[406] В одном случае (I99) любого из I1-I82 гематологическая злокачественная опухоль представляет собой миелодиспластический синдром (МДС). В одном случае (I100) из I99 МДС представляет собой рецидивный МДС. В одном случае (I101) из 199 или I100 МДС представляет собой рефрактерный МДС.

[407] В одном случае (I102) любого из I1-I101 гематологическая злокачественная опухоль представляет гематологическую злокачественную опухоль, экспрессирующую CD123.

[408] В одном случае (I103) любого из I1-I102 CD123 был обнаружен в образце, полученном из гематологической злокачественной опухоли до введения препарата. В одном случае (I104) из I103 CD123 был обнаружен с помощью проточной цитометрии.

[409] В одном случае (I105) любого из I1-I105 способ дополнительно включает обнаружение CD123 в образце, полученном из гематологической злокачественной опухоли до введения препарата.

[410] В одном случае (I106) любого из I1-I105 по меньшей мере 80% клеток в гематологической злокачественной опухоли экспрессируют CD123. В одном случае (I107) любого из I1-I106 CD123 был обнаружен в по меньшей мере 80% клеток в образце, полученном из гематологической злокачественной опухоли до введения препарата.

[411] В одном случае (I108) любого из I1-I107 способ дополнительно включает обнаружение CD123 в по меньшей мере 80% клеток в образце, полученном из гематологической злокачественной опухоли до введения препарата.

[412] В одном случае (I109) любого из I1-I63 и I69-I108 гематологическая злокачественная опухоль является резистентной к IMGN632.

[413] В одном случае (I110) любого из и I1-I109 гематологическая злокачественная опухоль экспрессирует множественную лекарственную резистентность 1 (МЛР1). В одном случае (I111) любого из и I1-I110 гематологическая злокачественная опухоль экспрессирует Р-гликопротеин (Р-гп). В одном случае (I112) любого из I1-I111 у субъекта абсолютное количество нейтрофилов превышает 500/мкл.

[414] В одном случае (I113) любого из I1-I12 и I14-I112 субъект получил по меньшей мере одну предварительную линию терапии. В одном случае (I114) любого из I1-I12 и I14-I112 субъект получил по меньшей мере две предварительные линии терапии. В одном случае (I115) любого из I1-I12 и I14-I112 субъект получил по меньшей мере три предварительные линии терапии.

[415] В одном случае (I116) любого из I1-I12 и I14-I115 рак ранее лечили венетоклаксом. В одном случае (II17) любого из I1-I115 рак ранее не лечили венетоклаксом.

[416] В одном случае (I118) любого из I1-I12 и I14-I117 рак ранее лечили гипометилирующим агентом. В одном случае (I119) любого из I1-I117 рак ранее не лечили гипометилирующим агентом.

[417] В одном случае (I120) любого из I1-I119 субъекта ранее лечили кортикостероидом перед введением иммуноконъюгата. В одном случае (I121) любого из I1-I119 способ дополнительно включает предварительное лечение субъекта кортикостероидом перед введением иммуноконъюгата. В одном случае (I122) из I120 или I121 кортикостероид представляет собой дифенгидрамин, ацетаминофен, парацетамол, дексаметазон или их комбинацию.

[418] В одном случае (I123) любого из I1-I63 и I69-I122 иммуноконъюгат и ингибитор BCL-2, гипометилирующий агент или их комбинация вводятся в отдельных фармацевтических композициях.

[419] В одном случае (I124) любого из I1-I123 субъект представляет собой человека.

[420] В одном случае (I125), способ лечения гематологической злокачественной опухоли у человека включает введение указанному нуждающемуся в этом субъекту IMGN632 и венетоклакса в 21-дневном цикле, где IMGN632 вводят внутривенно на 7-й день цикла в дозе от около 0,015 мг/кг до около 0,09 мг/кг, необязательно, при этом доза составляет около 0,015 мг/кг, около 0,045 мг/кг или около 0,09 мг/кг, и если венетоклакс вводят перорально в дозе 100 мг в первый день цикла, в дозе 200 мг во второй день цикла и в дозе 400 мг в дни 3-21 цикла.

[421] В одном случае (I126) способ лечения гематологической злокачественной опухоли у человека включает введение указанному нуждающемуся в этом субъекту IMGN632 и венетоклакса в 21-дневном цикле, где IMGN632 вводят внутривенно на 7-й день цикла в дозе от около 0,015 мг/кг - около 0,09 мг/кг, необязательно, при этом доза составляет около 0,015 мг/кг, около 0,045 мг/кг или около 0,09 мг/кг, и если венетоклакс вводят перорально в суточной дозе 400 мг.

[422] В одном случае (I127) способ лечения гематологической злокачественной опухоли у человека включает введение указанному нуждающемуся в этом субъекту IMGN632 и венетоклакса в 21-дневном цикле, где IMGN632 вводят внутривенно в дни 7, 10 и 14 цикла в дозе от около 0,015 мг/кг - около 0,06 мг/кг, необязательно, при этом доза составляет около 0,015 мг/кг, около 0,03 мг/кг или около 0,06 мг/кг, а венетоклакс вводят перорально в дозе 100 мг в первый день цикла, в дозе 200 мг во второй день цикла и в дозе 400 мг в дни 3-21 цикла.

[423] В одном случае (I128) способ лечения гематологической злокачественной опухоли у человека включает введение указанному нуждающемуся в этом субъекту IMGN632 и венетоклакса в 21-дневном цикле, где IMGN632 вводят внутривенно в дни 7, 10 и 14 цикла в дозе от около 0,015 мг/кг - около 0,06 мг/кг (как вариант, доза составляет около 0,015 мг/кг, около 0,03 мг/кг или около 0,06 мг/кг), а венетоклакс вводят перорально в суточной дозе 400 мг.

[424] В одном случае (I129) способ лечения гематологической злокачественной опухоли у человека включает введение указанному нуждающемуся в этом субъекту IMGN632 и азацитидина в 28-дневном цикле, где IMGN632 вводят внутривенно на 7-й день цикла в дозе от около 0,015 мг/кг - около 0,09 мг/кг, необязательно, при этом доза составляет около 0,015 мг/кг, около 0,045 мг/кг или около 0,09 мг/кг, и если азацитидин вводят подкожно или внутривенно в дозе 75 мг/м² в дни 1-7 цикла.

[425] В одном случае (I130) способ лечения гематологической злокачественной опухоли у человека включает введение указанному нуждающемуся в этом субъекту IMGN632 и азацитидина в 28-дневном цикле, в котором от около 0,015 мг/кг до около 0,06 мг/кг IMGN632 вводят внутривенно в каждый из дней 7, 10 и 14 цикла в дозе, по выбору, где около 0,015 мг/кг, около 0,03 мг/кг или около 0,06 мг/кг вводят в каждый из дней, и где азацитидин вводят подкожно или внутривенно в дозе 75 мг/м² в дни 1-7 цикла.

[426] В одном случае (I131) из I129 или I130 способ дополнительно включает введение венетоклакса перорально в дозе 100 мг в первый день цикла, в дозе 200 мг во второй день цикла и в дозе 400 мг в дни 3-28 цикла

[427] В одном случае (I132) из I129 или I130 способ дополнительно включает введение венетоклакса в пероральной суточной дозе 400 мг.

[428] В одном случае (I133) любого из I125-I132 гематологическая злокачественная опухоль представляет собой ОМЛ. В одном случае (I134) любого из I125-I132 гематологическая злокачественная опухоль представляет собой БПДК. В одном случае (I135) любого из I125-I132 гематологическая злокачественная опухоль представляет собой хронический миеломоноцитарный лейкоз (ХММЛ). В одном случае (I136) любого из I125-I132 гематологическая злокачественная опухоль представляет собой миелофиброз (МФ). В одном случае (I137) любого из I125-I132 гематологическая злокачественная опухоль представляет собой миелодиспластический синдром (МДС).

[429] Следует понимать, что для толкования формулы изобретения предназначен раздел «Подробное описание», а не разделы «Сущность изобретения» и «Реферат». В разделах «Сущность изобретения» и «Реферат» изложены один или несколько, но не все примерные варианты реализации настоящего изобретения, как предполагается изобретателем(ями), и, таким образом, они не предназначены для ограничения настоящего изобретения и прилагаемой формулы изобретения каким-либо образом.

[430] Настоящее изобретение было описано выше с помощью функциональных строительных блоков, иллюстрирующих реализацию заданных функций и взаимосвязей между ними. Границы этих функциональных строительных блоков определены здесь произвольно для удобства описания. Альтернативные границы могут быть определены до тех пор, пока указанные функции и взаимосвязи между ними выполняются надлежащим образом.

[431] Вышеприведенное описание конкретных вариантов реализации настолько полно раскрывает общий характер изобретения, что другие могут, применяя знания в рамках уровня техники, легко модифицировать и/или адаптировать для различных применений такие конкретные варианты реализации без излишних экспериментов, не отступая от общей концепции настоящего изобретения. Поэтому такие адаптации и модификации должны быть в пределах значения и диапазона эквивалентов раскрытых вариантов реализации, основанных на преподавании и руководстве, представленных в настоящем документе. Следует понимать, что приведенная здесь фразеология или терминология предназначена для целей описания, а не для ограничения, так что терминология или фразеология настоящей спецификации должна интерпретироваться квалифицированным специалистом в свете учения и руководства.

[432] Широта и объем настоящего изобретения не должны ограничиваться ни одним из описанных выше примерных вариантов реализации, а должны определяться только в соответствии со следующей формулой изобретения и ее эквивалентами.

--->

ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ

<110> IMMUNOGEN, INC.

<120> ТЕРАПЕВТИЧЕСКИЕ КОМБИНАЦИИ, СОДЕРЖАЩИЕ АНТИ-CD123 ИММУНОКОНЪЮГАТЫ

<130> 2921.106PC03/EKS/CLD

<150> US 62/839,974

<151> 29.04.2019

<150> US 62/860,598

<151> 12.06.2019

<160> 12

<170> Версия патентования 3.5

<210> 1

<211> 121

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Вариабельная область тяжелой цепи huCD123-6Gv7

<400> 1

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ile Phe Thr Ser Ser

20 25 30

Ile Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Tyr Ile Lys Pro Tyr Asn Asp Gly Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Arg Ala Thr Leu Thr Ser Asp Arg Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Glu Gly Gly Asn Asp Tyr Tyr Asp Thr Met Asp Tyr Trp Gly

100 105 110

Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 2

<211> 108

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Вариабельная область легкой цепи huCD123-6Gv4

<400> 2

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Asn Ser Tyr

20 25 30

Leu Ser Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Thr Leu Ile

35 40 45

Tyr Arg Val Asn Arg Leu Val Asp Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Asn Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln Tyr Asp Ala Phe Pro Tyr

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg

100 105

<210> 3

<211> 450

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Полноразмерная тяжелая цепь huCD123-6Gv7-C442

<400> 3

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ile Phe Thr Ser Ser

20 25 30

Ile Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Tyr Ile Lys Pro Tyr Asn Asp Gly Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Arg Ala Thr Leu Thr Ser Asp Arg Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Glu Gly Gly Asn Asp Tyr Tyr Asp Thr Met Asp Tyr Trp Gly

100 105 110

Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser

115 120 125

Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala

130 135 140

Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val

145 150 155 160

Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala

165 170 175

Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val

180 185 190

Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His

195 200 205

Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys

210 215 220

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly

225 230 235 240

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

245 250 255

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His

260 265 270

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val

275 280 285

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr

290 295 300

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly

305 310 315 320

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile

325 330 335

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

340 345 350

Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser

355 360 365

Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

370 375 380

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro

385 390 395 400

Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val

405 410 415

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

420 425 430

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Cys Leu Ser

435 440 445

Pro Gly

450

<210> 4

<211> 214

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Полноразмерная легкая цепь 6Gv7-6Gv4

<400> 4

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Asn Ser Tyr

20 25 30

Leu Ser Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Thr Leu Ile

35 40 45

Tyr Arg Val Asn Arg Leu Val Asp Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Asn Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln Tyr Asp Ala Phe Pro Tyr

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala

100 105 110

Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly

115 120 125

Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala

130 135 140

Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln

145 150 155 160

Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser

165 170 175

Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr

180 185 190

Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser

195 200 205

Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210

<210> 5

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 вариабельной области тяжелой цепи huCD123-6Gv7

<400> 5

Ser Ser Ile Met His

1 5

<210> 6

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 вариабельной области тяжелой цепи huCD123-6Gv7

<400> 6

Tyr Ile Lys Pro Tyr Asn Asp Gly Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 7

<211> 12

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 вариабельной области тяжелой цепи huCD123-6Gv7

<400> 7

Glu Gly Gly Asn Asp Tyr Tyr Asp Thr Met Asp Tyr

1 5 10

<210> 8

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 вариабельной области легкой цепи huCD123-6Gv4

<400> 8

Arg Ala Ser Gln Asp Ile Asn Ser Tyr Leu Ser

1 5 10

<210> 9

<211> 7

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 вариабельной области легкой цепи huCD123-6Gv4

<400> 9

Arg Val Asn Arg Leu Val Asp

1 5

<210> 10

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 вариабельной области легкой цепи huCD123-6Gv4

<400> 10

Leu Gln Tyr Asp Ala Phe Pro Tyr Thr

1 5

<210> 11

<211> 378

<212> БЕЛОК

<213> Homo sapiens

<400> 11

Met Val Leu Leu Trp Leu Thr Leu Leu Leu Ile Ala Leu Pro Cys Leu

1 5 10 15

Leu Gln Thr Lys Glu Asp Pro Asn Pro Pro Ile Thr Asn Leu Arg Met

20 25 30

Lys Ala Lys Ala Gln Gln Leu Thr Trp Asp Leu Asn Arg Asn Val Thr

35 40 45

Asp Ile Glu Cys Val Lys Asp Ala Asp Tyr Ser Met Pro Ala Val Asn

50 55 60

Asn Ser Tyr Cys Gln Phe Gly Ala Ile Ser Leu Cys Glu Val Thr Asn

65 70 75 80

Tyr Thr Val Arg Val Ala Asn Pro Pro Phe Ser Thr Trp Ile Leu Phe

85 90 95

Pro Glu Asn Ser Gly Lys Pro Trp Ala Gly Ala Glu Asn Leu Thr Cys

100 105 110

Trp Ile His Asp Val Asp Phe Leu Ser Cys Ser Trp Ala Val Gly Pro

115 120 125

Gly Ala Pro Ala Asp Val Gln Tyr Asp Leu Tyr Leu Asn Val Ala Asn

130 135 140

Arg Arg Gln Gln Tyr Glu Cys Leu His Tyr Lys Thr Asp Ala Gln Gly

145 150 155 160

Thr Arg Ile Gly Cys Arg Phe Asp Asp Ile Ser Arg Leu Ser Ser Gly

165 170 175

Ser Gln Ser Ser His Ile Leu Val Arg Gly Arg Ser Ala Ala Phe Gly

180 185 190

Ile Pro Cys Thr Asp Lys Phe Val Val Phe Ser Gln Ile Glu Ile Leu

195 200 205

Thr Pro Pro Asn Met Thr Ala Lys Cys Asn Lys Thr His Ser Phe Met

210 215 220

His Trp Lys Met Arg Ser His Phe Asn Arg Lys Phe Arg Tyr Glu Leu

225 230 235 240

Gln Ile Gln Lys Arg Met Gln Pro Val Ile Thr Glu Gln Val Arg Asp

245 250 255

Arg Thr Ser Phe Gln Leu Leu Asn Pro Gly Thr Tyr Thr Val Gln Ile

260 265 270

Arg Ala Arg Glu Arg Val Tyr Glu Phe Leu Ser Ala Trp Ser Thr Pro

275 280 285

Gln Arg Phe Glu Cys Asp Gln Glu Glu Gly Ala Asn Thr Arg Ala Trp

290 295 300

Arg Thr Ser Leu Leu Ile Ala Leu Gly Thr Leu Leu Ala Leu Val Cys

305 310 315 320

Val Phe Val Ile Cys Arg Arg Tyr Leu Val Met Gln Arg Leu Phe Pro

325 330 335

Arg Ile Pro His Met Lys Asp Pro Ile Gly Asp Ser Phe Gln Asn Asp

340 345 350

Lys Leu Val Val Trp Glu Ala Gly Lys Ala Gly Leu Glu Glu Cys Leu

355 360 365

Val Thr Glu Val Gln Val Val Gln Lys Thr

370 375

<210> 12

<211> 300

<212> БЕЛОК

<213> Homo sapiens

<400> 12

Met Val Leu Leu Trp Leu Thr Leu Leu Leu Ile Ala Leu Pro Cys Leu

1 5 10 15

Leu Gln Thr Lys Glu Gly Gly Lys Pro Trp Ala Gly Ala Glu Asn Leu

20 25 30

Thr Cys Trp Ile His Asp Val Asp Phe Leu Ser Cys Ser Trp Ala Val

35 40 45

Gly Pro Gly Ala Pro Ala Asp Val Gln Tyr Asp Leu Tyr Leu Asn Val

50 55 60

Ala Asn Arg Arg Gln Gln Tyr Glu Cys Leu His Tyr Lys Thr Asp Ala

65 70 75 80

Gln Gly Thr Arg Ile Gly Cys Arg Phe Asp Asp Ile Ser Arg Leu Ser

85 90 95

Ser Gly Ser Gln Ser Ser His Ile Leu Val Arg Gly Arg Ser Ala Ala

100 105 110

Phe Gly Ile Pro Cys Thr Asp Lys Phe Val Val Phe Ser Gln Ile Glu

115 120 125

Ile Leu Thr Pro Pro Asn Met Thr Ala Lys Cys Asn Lys Thr His Ser

130 135 140

Phe Met His Trp Lys Met Arg Ser His Phe Asn Arg Lys Phe Arg Tyr

145 150 155 160

Glu Leu Gln Ile Gln Lys Arg Met Gln Pro Val Ile Thr Glu Gln Val

165 170 175

Arg Asp Arg Thr Ser Phe Gln Leu Leu Asn Pro Gly Thr Tyr Thr Val

180 185 190

Gln Ile Arg Ala Arg Glu Arg Val Tyr Glu Phe Leu Ser Ala Trp Ser

195 200 205

Thr Pro Gln Arg Phe Glu Cys Asp Gln Glu Glu Gly Ala Asn Thr Arg

210 215 220

Ala Trp Arg Thr Ser Leu Leu Ile Ala Leu Gly Thr Leu Leu Ala Leu

225 230 235 240

Val Cys Val Phe Val Ile Cys Arg Arg Tyr Leu Val Met Gln Arg Leu

245 250 255

Phe Pro Arg Ile Pro His Met Lys Asp Pro Ile Gly Asp Ser Phe Gln

260 265 270

Asn Asp Lys Leu Val Val Trp Glu Ala Gly Lys Ala Gly Leu Glu Glu

275 280 285

Cys Leu Val Thr Glu Val Gln Val Val Gln Lys Thr

290 295 300

<---

Группа изобретений относится к области биотехнологии. Предложены способы лечения острого миелоидного лейкоза (ОМЛ) у субъекта. Указанному субъекту вводят иммуноконъюгат, связывающийся с CD123, в комбинации с венетоклаксом и/или азацитидином. Иммуноконъюгат содержит антитело или его антиген-связывающий фрагмент, связанный с ДНК-алкилирующим агентом. При этом антитело или антиген-связывающий фрагмент содержит CDR1, CDR2 и CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащие SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6 и SEQ ID NO: 7; и CDR1, CDR2 и CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащие SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 9 и SEQ ID NO: 10. Изобретения обеспечивают эффективное лечение ОМЛ, и значительное ингибирование роста опухоли, и продление выживаемости. 2 н. и 30 з.п. ф-лы, 11 ил., 11 пр.

1. Способ лечения острого миелоидного лейкоза (ОМЛ) у субъекта, включающий введение указанному нуждающемуся в этом субъекту иммуноконъюгата, связывающегося с CD123, в комбинации с венетоклаксом и азацитидином, в котором указанный иммуноконъюгат содержит антитело или его антиген-связывающий фрагмент, связанный с ДНК-алкилирующим агентом, и при этом указанное антитело или антиген-связывающий фрагмент содержит CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5; CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6; и CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 7; и CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 8; CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 9; и CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10.

2. Способ лечения острого миелоидного лейкоза (ОМЛ) у субъекта, включающий введение указанному нуждающемуся в этом субъекту иммуноконъюгата, связывающегося с CD123, в комбинации с венетоклаксом или азацитидином, в котором иммуноконъюгат содержит антитело или его антиген-связывающий фрагмент, связанный с ДНК-алкилирующим агентом, и при этом указанное антитело или антиген-связывающий фрагмент содержит CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5; CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6; и CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 7; и CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 8; CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 9; и CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10.

3. Способ по п. 1 или 2, отличающийся тем, что антитело или антиген-связывающий фрагмент содержит VH, содержащую аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 1, и VL, содержащую аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 2.

4. Способ по п. 1 или 2, отличающийся тем, что антитело или антиген-связывающий фрагмент содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 3, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 4.

5. Способ по любому из пп. 1-4, отличающийся тем, что ДНК-алкилирующий агент представляет собой индолинобензодиазепиновый (IGN) ДНК-алкилятор.

6. Способ по любому из пп. 1-5, отличающийся тем, что иммуноконъюгат представляет собой IMGN632 и его вводят в фармацевтической композиции.

7. Способ по любому из пп. 1-6, отличающийся тем, что введение представляет собой терапию первой линии.

8. Способ по любому из пп. 1-7, отличающийся тем, что иммуноконъюгат вводят однократно в 28-дневном цикле.

9. Способ по п. 8, отличающийся тем, что иммуноконъюгат вводят в дозе от 0,015 мг/кг до 0,09 мг/кг однократно в 28-дневном цикле.

10. Способ по п. 9, отличающийся тем, что доза составляет 0,015 мг/кг, 0,045 мг/кг или 0,09 мг/кг.

11. Способ по п. 8, отличающийся тем, что иммуноконъюгат вводят в дозе 0,045 мг/кг однократно в 28-дневном цикле.

12. Способ по любому из пп. 1-11, отличающийся тем, что венетоклакс вводят в дозе 200 или 400 мг.

13. Способ п. 12, отличающийся тем, что венетоклакс вводят ежедневно в дни 1-14 цикла.

14. Способ по любому из пп. 1-13, отличающийся тем, что азацитидин вводят в 28-дневном цикле.

15. Способ по п. 14, отличающийся тем, что азацитидин вводят однократно ежедневно в дни 1-7 указанного 28-дневного цикла.

16. Способ по п. 14 или 15, отличающийся тем, что азацитидин вводят в дозе 75 мг/м².

17. Способ по любому из пп. 1-16, отличающийся тем, что ОМЛ присутствует у субъекта в виде минимальной остаточной болезни (MRD).

18. Способ по любому из пп. 1-17, отличающийся тем, что иммуноконъюгат вводят в качестве поддерживающей терапии.

19. Способ по любому из пп. 1-18, отличающийся тем, что CD123 был обнаружен в по меньшей мере 80% клеток образца, полученного из указанного ОМЛ до введения.

20. Способ по любому из пп. 1-19, отличающийся тем, что CD123 был обнаружен с помощью проточной цитометрии.

21. Способ по любому из пп. 1-20, отличающийся тем, что ОМЛ резистентен к IMGN632.

22. Способ по любому из пп. 1-21, отличающийся тем, что ОМЛ экспрессирует Р-гликопротеин (P-гп).

23. Способ по любому из пп. 1-22, отличающийся тем, что у субъекта абсолютное количество нейтрофилов превышает 500 нейтрофилов/мкл.

24. Способ по любому из пп. 1-6 и 8-23, отличающийся тем, что субъект получал по меньшей мере одну линию предшествующей терапии.

25. Способ по любому из пп. 1-6 и 8-23, отличающийся тем, что субъект получал по меньшей мере две линии предшествующей терапии.

26. Способ по любому из пп. 1-6 и 8-23, отличающийся тем, что субъект получал по меньшей мере три линии предшествующей терапии.

27. Способ по любому из пп. 1-26, отличающийся тем, что субъекта предварительно лечили кортикостероидом перед введением иммуноконъюгата.

28. Способ по п. 27, отличающийся тем, что кортикостероид представляет собой преднизон, преднизолон, метилпреднизолон, бекламетазон, бетаметазон, дексаметазон, флудрокортизон, гидрокортизон или триамцинолон.

29. Способ по любому из пп. 1-28, отличающийся тем, что иммуноконъюгат, венетоклакс, азацитидин и/или их комбинации вводят в отдельных фармацевтических композициях.

30. Способ по любому из пп. 1-29, отличающийся тем, что субъект представляет собой человека.

31. Способ по п. 1 или 2, отличающийся тем, что иммуноконъюгат вводят в фармацевтической композиции, содержащей иммуноконъюгаты со следующей структурой:

, при этом G4723A содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 3, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 4, где указанный иммуноконъюгат, указанный венетоклакс и/или указанный азацитидин вводят в 28-дневном цикле, причем иммуноконъюгат вводят внутривенно в день 7 цикла в дозе 0,045 мг/кг, при этом венетоклакс вводят перорально в дни 1-14 цикла, и при этом азацитидин вводят подкожно или внутривенно в дни 1-7 цикла.

32. Способ по п. 1 или 2, отличающийся тем, что иммуноконъюгат вводят в фармацевтической композиции, содержащей иммуноконъюгаты со следующей структурой:

, при этом G4723A содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 3, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 4, где указанный иммуноконъюгат, указанный венетоклакс и/или указанный азацитидин вводят в 28-дневном цикле, причем иммуноконъюгат вводят внутривенно в день 7 цикла в дозе 0,045 мг/кг, при этом венетоклакс вводят перорально в дни 1-14 цикла, и при этом азацитидин вводят подкожно или внутривенно в дозе 75 мг/м² в дни 1-7 цикла.