СПОСОБЫ ЛЕЧЕНИЯ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ АНТИ-CD123 ИММУНОКОНЪЮГАТОВ Российский патент 2024 года по МПК A61K31/5513 A61K51/00 A61K39/395 A61K47/55 C07K16/28 A61P35/02 

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ

[0001] Данное изобретение относится в общем к применению анти-CD123 иммуноконъюгатов для лечения заболеваний, таких как рак. В данном документе предлагаются терапевтически эффективные схемы введения, которые минимизируют нежелательные побочные эффекты.

ИЗВЕСТНЫЙ УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

[0002] Рак является одной из основных причин смерти в развитых странах, только в США рак ежегодно диагностируется у более чем одного миллиона человек и регистрируется 500000 смертей. По общим оценкам, какая-либо форма рака развивается в течение жизни у более чем трети людей.

[0003] CD123 представляет собой альфа-субъединицу рецептора интерлейкина-3 (IL-3Rα). Экспрессия CD123 на нормальных гематопоэтических стволовых клетках является низкой (Testa et al., Biomark Res., 10;2(1):4.(2014), Jordan et al., Leukemia, 14(10): 1777-84 (2000)). Однако, CD123 сверхэкспрессируется при многочисленных гематологических злокачественных заболеваниях как миелоидного, так и лимфоидного происхождения, включая острый миелоидный лейкоз (ОМЛ), миелодиспластический синдром (МДС), B-клеточный острый лимфобластный лейкоз (B-ОЛЛ), хронический миелоидный лейкоз в бластном кризе/бластной фазе (БК-ХМЛ), и бластную плазмацитоидную дендритноклеточную неоплазму (БПДН) (Testa 2014). Интерлейкин-3 продуцируется активированными T-лимфоцитами. IL-3 вместе с другими факторами роста стимулирует развитие и медиирует выживание широкого спектра гематопоэтических клеток в костном мозге (Testa 2014). Уровни CD123 на нормальных гематопоэтических стволовых клетках очень низки, но ранние общие миелоидные клетки-предшественники экспрессируют более высокие уровни CD123 (Testa 2014, Jordan 2000). Экспрессия CD123 от средней до высокой на нормальных тканях ограничена редкими популяциями белых кровяных клеток, такими как плазмацитоидные дендритные клетки и базофилы (Jordan 2000, Testa 2014).

[0004] Острый миелоидный лейкоз является наиболее распространенной формой острого лейкоза у взрослых, на которую приходится наибольшее число смертей от лейкоза в США. По оценке, диагноз ОМЛ в 2017 г. будет установлен за год у 21380 человек, и 10590 пациентов умрет от этого заболевания (Siegel et al., CA Cancer J Clin. 2017; 67(l):7-30 (2017)). Медианный возраст постановки диагноза равен 66 годам. Химиотерапия первой линии при ОМЛ, как сообщается, индуцирует полный ответ (ПР) у 70%-80% пациентов в возрасте 60 лет или меньше, и у приблизительно 50% пациентов старшего возраста. Считается, что «подходящие» пациенты способны переносить интенсивное лечение, часто являются более молодыми (<60 лет), и обычно получают один-два цикла индукции "7 + 3”, комбинации цитарабина и антрациклина, типично даунорубицина. После этого, такие подходящие пациенты могут получать высокую дозу цитарабина в течение одного или нескольких циклов, и могут получать трансплантат стволовых клеток. Стандартная индукционная и постиндукционная терапии приводят к медианной продолжительности ремиссии приблизительно один год и потенциальное исцеление у 25%-35% пациентов. «Неподходящие» пациенты, часто старшего возраста, типично получают азацитидин, представляющий собой гипометилирующий агент. Большинство пациентов с ОМЛ со временем рецидивируют, и терапии спасения ОМЛ имеют неблагоприятные результаты со значительной токсичностью. Таким образом, необходимы новые методы лечения с ограниченной токсичностью в такой рецидивирующей популяции.

[0005] Бластная плазмацитоидная дендритноклеточная неоплазма представляет собой редкую агрессивную гематологическую злокачественную опухоль, образующуюся из миелоидных предшественников дендритных клеток, которая часто проявляется кожными поражениями в дополнение к вовлечению в патологический процесс лимфатических узлов, крови и костного мозга. Характеризущиеся экспрессией CD4, CD56 и CD123, в числе других маркеров, бласты БПДН экспрессируют высокие уровни CD123. К сожалению, стандарта лечения БПДН не существует, и при начальной терапии используются схемы лечения острого лимфобластного лейкоза (ОЛЛ) and ОМЛ. Несмотря на показатели ПР, составляющие 47-86% при начальном лечении заболевания, медианная общая выживаемость составляет приблизительно 12-16 месяцев. Большинство пациентов с БПДН со временем рецидивируют при отсутствии стандартных вариантов лечения.

[0006] Острый лимфобластный лейкоз представляет собой редкую агрессивную гематологическую злокачественную опухоль, образующуюся из лимфоидных клеток-предшественников, которая часто проявляется в вовлечении в патологический процесс лимфатических узлов, крови и костного мозга. B-клеточный острый лимфобластный лейкоз и некоторые бласты T-клеточного острого лимфобластного лейкоза экспрессируют CD123 на уровнях, схожих с бластами ОМЛ. Хотя начальные показатели ремиссии являются высокими, показатели долговременной выживаемости составляют 35%-40% у пациентов младше 60 лет, и менее 10% для пациентов старшего возраста (Goldstone 2008). Пациенты с рецидивирующим ОЛЛ имеют несколько вариантов химиотерапии, а также иммунотерапию с использованием разрешенного Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США анти-CD19 биспецифического антитела блинатумомаба. Однако, долговременная выживаемость для таких пациентов остается низкой.

[0007] С учетом непригодности доступных в настоящее время терапевтических средств для лечения многих гематологических злокачественных опухолей, существует потребность в более эффективных способах вмешательства.

КРАТКОЕ ИЗЛОЖЕНИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[0008] Данное изобретение предусматривает способ лечения гематологической злокачественной опухоли у человека, включающий введение указанному субъекту анти-CD123 иммуноконъюгата, содержащего анти-CD123 антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, связанные с цитотоксическим агентом, причем иммуноконъюгат вводят в дозе от примерно 0,045 мг/кг до менее чем 0,3 мг/кг. В некоторых вариантах реализации, субъекту вводят от примерно 0,045 мг/кг до примерно 0,09 мг/кг иммуноконъюгата. В некоторых вариантах реализации, субъекту вводят примерно 0,045 мг/кг иммуноконъюгата. В некоторых вариантах реализации, субъекту вводят примерно 0,09 мг/кг иммуноконъюгата. В некоторых вариантах реализации, субъекту вводят примерно 0,135 мг/кг иммуноконъюгата. В некоторых вариантах реализации, субъекту вводят примерно 0,18 мг/кг иммуноконъюгата. В некоторых вариантах реализации, иммуноконъюгат вводят субъекту один раз за 21-дневный цикл.

[0009] Данное изобретение также предусматривает способ лечения гематологической злокачественной опухоли у человека, включающий введение указанному субъекту анти-CD123 иммуноконъюгата, содержащего анти-CD123 антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, связанные с цитотоксическим агентом, причем от примерно 0,015 мг/кг до примерно 0,09 мг/кг иммуноконъюгата вводят три раза за 21-дневный цикл. В некоторых вариантах реализации, первое введение проводят в день 1 21-дневного цикла. В некоторых вариантах реализации, второе введение проводят в день 4 21-дневного цикла. В некоторых вариантах реализации, третье введение проводят в день 8 21-дневного цикла. В некоторых вариантах реализации, первое, второе и третье введения проводят в день 1, день 4 и день 8, соответственно, 21-дневного цикла. В некоторых вариантах реализации, примерно 0,015 мг/кг иммуноконъюгата вводят три раза за 21-дневный цикл. В некоторых вариантах реализации, примерно 0,045 мг/кг иммуноконъюгата вводят три раза за 21-дневный цикл. В некоторых вариантах реализации, примерно 0,06 мг/кг иммуноконъюгата вводят три раза за 21-дневный цикл. В некоторых вариантах реализации, примерно 0,09 мг/кг иммуноконъюгата вводят три раза за 21-дневный цикл.

[0010] В некоторых случаях, от примерно 0,015 мг/кг до примерно 0,06 мг/кг иммуноконъюгата вводят в каждый из трех моментов времени в 21-дневном цикле. В некоторых вариантах реализации, первое введение проводят в день 1 21-дневного цикла. В некоторых вариантах реализации, второе введение проводят в день 4 21-дневного цикла. В некоторых вариантах реализации, третье введение проводят в день 8 21-дневного цикла. В некоторых вариантах реализации, первое, второе и третье введения проводят в день 1, день 4 и день 8, соответственно, 21-дневного цикла. В некоторых вариантах реализации, примерно 0,015 мг/кг иммуноконъюгата вводят три раза за 21-дневный цикл. В некоторых вариантах реализации, примерно 0,03 мг/кг иммуноконъюгата вводят три раза за 21-дневный цикл. В некоторых вариантах реализации, примерно 0,06 мг/кг иммуноконъюгата вводят три раза за 21-дневный цикл.

[0011] Данное изобретение также предусматривает способ лечения гематологической злокачественной опухоли у человека, включающий введение указанному субъекту анти-CD123 иммуноконъюгата, содержащего анти-CD123 антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, связанные с цитотоксическим агентом, причем от примерно 0,015 мг/кг до примерно 0,135 мг/кг иммуноконъюгата вводят три раза за 21-дневный цикл. В некоторых вариантах реализации, первое введение проводят в день 1 21-дневного цикла. В некоторых вариантах реализации, второе введение проводят в день 4 21-дневного цикла.. В некоторых вариантах реализации, третье введение проводят в день 8 21-дневного цикла. В некоторых вариантах реализации, первое, второе и третье введения проводят в день 1, день 4 и день 8, соответственно, 21-дневного цикла. В некоторых вариантах реализации, примерно 0,135 мг/кг иммуноконъюгата вводят три раза за 21-дневный цикл.

[0012] Данное изобретение также предусматривает способ лечения гематологической злокачественной опухоли у человека, включающий введение указанному субъекту анти-CD123 иммуноконъюгата, содержащего анти-CD123 антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, связанные с цитотоксическим агентом, причем от примерно 0,015 мг/кг до примерно 0,09 мг/кг иммуноконъюгата вводят три раза за 21-дневный цикл. В некоторых вариантах реализации, первое введение проводят в день 1 21-дневного цикла. В некоторых вариантах реализации, второе введение проводят в день 8 21-дневного цикла. В некоторых вариантах реализации, примерно 0,015 мг/кг иммуноконъюгата вводят дважды за 21-дневный цикл. В некоторых вариантах реализации, примерно 0,045 мг/кг иммуноконъюгата вводят дважды за 21-дневный цикл. В некоторых вариантах реализации, примерно 0,09 мг/кг иммуноконъюгата вводят дважды за 21-дневный цикл.

[0013] Данное изобретение также предусматривает способ лечения гематологической злокачественной опухоли у человека, включающий введение указанному субъекту анти-CD123 иммуноконъюгата, содержащего анти-CD123 антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, связанные с цитотоксическим агентом, причем от примерно 0,015 мг/кг до примерно 0,135 мг/кг иммуноконъюгата вводят три раза за 21-дневный цикл. В некоторых вариантах реализации, первое введение проводят в день 1 21-дневного цикла. В некоторых вариантах реализации, второе введение проводят в день 8 21-дневного цикла. В некоторых вариантах реализации, примерно 0,135 мг/кг иммуноконъюгата вводят дважды за 21-дневный цикл.

[0014] В некоторых вариантах реализации, иммуноконъюгат вводят в течение одного цикла.

[0015] В некоторых вариантах реализации, иммуноконъюгат вводят в течение более чем одного цикла. В некоторых вариантах реализации, иммуноконъюгат вводят в течение по меньшей мере 2 циклов, по меньшей мере 3 циклов, по меньшей мере 4 циклов, по меньшей мере 5 циклов, по меньшей мере 6 циклов, по меньшей мере 7 циклов, по меньшей мере 8 циклов, по меньшей мере 9 циклов, или по меньшей мере 10 циклов. В некоторых вариантах реализации, иммуноконъюгат вводят в течение примерно 2-4 циклов, примерно 2-6 циклов, примерно 2-8 циклов, или примерно 2-10 циклов.

[0016] В некоторых вариантах реализации, гематологическая злокачественная опухоль представляет собой рецидивирующую гематологическую злокачественную опухоль. В некоторых вариантах реализации, рецидив представляет собой первый рецидив. В некоторых вариантах реализации, гематологическая злокачественная опухоль представляет собой рефрактерную гематологическую злокачественную опухоль. В некоторых вариантах реализации, гематологическая злокачественная опухоль представляет собой первичную рефрактерную гематологическую злокачественную опухоль. В некоторых вариантах реализации, гематологическая злокачественная опухоль представляет собой острый миелоидный лейкоз (ОМЛ), миелодиспластический синдром (МДС), B-клеточный острый лимфобластный лейкоз (B-ОЛЛ), хронический миелоидный лейкоз в бластном кризе/фазе (БК-ХМЛ), и бластную плазмацитоидную дендритноклеточную неоплазму (БПДН). В некоторых вариантах реализации, гематологическая злокачественная опухоль представляет собой ОМЛ. В некоторых вариантах реализации, ОМЛ представляет собой рецидивирующий ОМЛ. В некоторых вариантах реализации, ОМЛ представляет собой рефрактерный ОМЛ. В некоторых вариантах реализации, гематологическая злокачественная опухоль представляет собой БПДН. В некоторых вариантах реализации, БПДН представляет собой рецидивирующую БПДН. В некоторых вариантах реализации, БПДН представляет собой рефрактерную БПДН. В некоторых вариантах реализации, БПДН представляет собой БПДН первой линии. В некоторых вариантах реализации, гематологическая злокачественная опухоль представляет собой ОЛЛ. В некоторых вариантах реализации, ОЛЛ представляет собой рецидивирующий ОЛЛ. В некоторых вариантах реализации, ОЛЛ представляет собой рефрактерный ОЛЛ. В некоторых вариантах реализации, гематологическая злокачественная опухоль представляет собой хронический миеломоноцитарный лейкоз (ХММЛ). В некоторых вариантах реализации, ХММЛ представляет собой рецидивирующий ХММЛ. В некоторых вариантах реализации, ХММЛ представляет собой рефрактерный ХММЛ. В некоторых вариантах реализации, гематологическая злокачественная опухоль представляет собой миелофиброз (МФ). В некоторых вариантах реализации, МФ представляет собой рецидивирующий МФ. В некоторых вариантах реализации, МФ представляет собой рефрактерный МФ. В некоторых вариантах реализации, гематологическая злокачественная опухоль представляет собой МДС. В некоторых вариантах реализации, МДС представляет собой рецидивирующий МДС. В некоторых вариантах реализации, МДС представляет собой рефрактерный МДС.

[0017] В некоторых вариантах реализации, субъект представляет собой педиатрического пациента, например, педиатрического пациента с БПДН, ОЛЛ или ОМЛ).

[0018] В некоторых вариантах реализации, субъект имеет оценку функционального статуса по шкале Восточной кооперативной онкологической группы (ECOG) ≤1. В некоторых вариантах реализации, субъект имеет неблагоприятную оценку генетического риска по классификации Европейской сети по изучению лейкозов (ELN), например, мутацию ASXL1, RUNX1 и/или FLT3-ITD. В некоторых вариантах реализации, субъект ранее получал неудачное лечение SL-401 (таграксофусп). В некоторых вариантах реализации, гематологическая злокачественная опухоль является рефрактерной к CLAG-M (кладрибин + цитарабин + митоксантрон).

[0019] В некоторых вариантах реализации, гематологическая злокачественная опухоль представляет собой CD123-экспрессирующую гематологическую злокачественную опухоль. В некоторых вариантах реализации, CD123 был детектирован в образце, полученном из гематологической злокачественной опухоли до указанного введения. В некоторых вариантах реализации, CD123 детектируют с помощью проточной цитометрии.

[0020] В некоторых вариантах реализации, способы, раскрытые в данном документе, дополнительно включают детектирование CD123 в образце, полученном из гематологической злокачественной опухоли до указанного введения. В некоторых вариантах реализации, по меньшей мере 80% клеток в гематологической злокачественной опухоли экспрессируют CD123. В некоторых вариантах реализации, CD123 был детектирован в по меньшей мере 80% клеток в образце, полученном из гематологической злокачественной опухоли до указанного введения. В некоторых вариантах реализации, способы, раскрытые в данном документе, дополнительно включают детектирование CD123 в по меньшей мере 80% клеток в образце, полученном из гематологической злокачественной опухоли до указанного введения. В некоторых вариантах реализации, субъект имеет абсолютное количество нейтрофилов более 500/мкл.

[0021] В некоторых вариантах реализации, субъект получал по меньшей мере одну предшествующую линию терапии. В некоторых вариантах реализации, субъект получал по меньшей мере две предшествующих линии терапии. В некоторых вариантах реализации, субъект получал по меньшей мере три предшествующих линии терапии. В некоторых вариантах реализации, субъект получал не более трех предшествующих линий терапии. В некоторых вариантах реализации, субъект получал четыре предшествующих линии терапии. В некоторых вариантах реализации, субъект получал пять предшествующих линий терапии. В некоторых вариантах реализации, субъект получал не более пяти предшествующих линий терапии. В некоторых вариантах реализации, субъект ранее получал трансплантацию стволовых клеток.

[0022] В некоторых вариантах реализации, введение снижает количество бластов костного мозга у субъекта.

[0023] В некоторых вариантах реализации, субъект получал предварительное лечение кортикостероидом до введения иммуноконъюгата. В некоторых вариантах реализации, способы, раскрытые в данном документе, дополнительно включают предварительное лечение субъекта кортикостероидом до введения иммуноконъюгата. В некоторых вариантах реализации, кортикостероид представляет собой дифенгидрамин, ацетаминофен, парацетамол, дексаметазон, или их комбинацию.

[0024] В некоторых вариантах реализации, иммуноконъюгат вводят внутривенно.

[0025] В некоторых вариантах реализации, способ дополнительно включает введение пониженной дозы иммуноконъюгата после возникновения дозолимитирующей токсичности у субъекта, со снижением до базовой линии или ≤2 степени.

[0026] В некоторых вариантах реализации, анти-CD123 антитело или антигенсвязывающий фрагмент в иммуноконъюгате содержит: (a) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5; CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6; и CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 7; и (b) CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 8; CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 9; и CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из: SEQ ID NO: 10.

[0027] В некоторых вариантах реализации, анти-CD123 антитело или антигенсвязывающий фрагмент в иммуноконъюгате содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 1, и/или вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 2. В некоторых вариантах реализации, анти-CD123 антитело или антигенсвязывающий фрагмент в иммуноконъюгате содержит константную область тяжелой цепи и/или константную область легкой цепи. В некоторых вариантах реализации, константная область тяжелой цепи содержит константную область тяжелой цепи иммуноглобулина IgG1 человека и/или константная область легкой цепи содержит константную область легкой цепи иммуноглобулина IgGκ человека. В некоторых вариантах реализации, анти-CD123 антитело или антигенсвязывающий фрагмент в иммуноконъюгате содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:3, и/или легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:4. В некоторых вариантах реализации, анти-CD123 антитело или антигенсвязывающий фрагмент в иммуноконъюгате представляет собой полноразмерное антитело. В некоторых вариантах реализации, анти-CD123 антитело или антигенсвязывающий фрагмент в иммуноконъюгате представляет собой антигенсвязывающий фрагмент. В некоторых вариантах реализации, цитотоксический агент в иммуноконъюгате представляет собой ДНК-алкилирующий агент. В некоторых вариантах реализации, ДНК-алкилирующий агент представляет собой индолинобензодиазепиновый (IGN) ДНК-алкилятор. В некоторых вариантах реализации, IGN ДНК-алкилятор представляет собой DGN549-C. В некоторых вариантах реализации, иммуноконъюгат содержит пептидный линкер. В некоторых вариантах реализации, иммуноконъюгат вводят в фармацевтической композиции, содержащей иммуноконъюгаты следующей структуры:

,

где

G4723A содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:3, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:4.

[0028] В одном случае (I1), способ лечения гематологической злокачественной опухоли у человека включает введение указанному субъекту анти-CD123 иммуноконъюгата, содержащего анти-CD123 антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, связанные с цитотоксическим агентом, причем иммуноконъюгат вводят в дозе от примерно 0,045 мг/кг до менее чем 0,3 мг/кг.

[0029] В одном из случаев (I2) I1, субъекту вводят примерно 0,045 мг/кг иммуноконъюгата. В одном из случаев (I3) I1, субъекту вводят примерно 0,09 мг/кг иммуноконъюгата. В одном из случаев (I4) I1, субъекту вводят примерно 0,135 мг/кг иммуноконъюгата. В одном из случаев (I5) I1, субъекту вводят примерно 0,18 мг/кг иммуноконъюгата.

[0030] В одном из случаев (I6) любого из I1-I5, иммуноконъюгат вводят субъекту один раз за 21-дневный цикл.

[0031] В одном случае (I7), способ лечения гематологической злокачественной опухоли у человека включает введение указанному субъекту анти-CD123 иммуноконъюгата, содержащего анти-CD123 антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, связанные с цитотоксическим агентом, причем от примерно 0,015 мг/кг до примерно 0,09 мг/кг иммуноконъюгата вводят три раза за 21-дневный цикл.

[0032] В одном из случаев (I8) I7, первое введение проводят в день 1 21-дневного цикла. В одном из случаев (I9) I7 или I8, второе введение проводят в день 4 21-дневного цикла. В одном из случаев (I10) любого из I7- I9, третье введение проводят в день 8 21-дневного цикла.

[0033] В одном из случаев (I11) любого из I7- I10, третье введение проводят в день 1, день 4 и день 8, соответственно, 21-дневного цикла.

[0034] В одном из случаев (I12) любого из I7-I11, примерно 0,015 мг/кг иммуноконъюгата вводят три раза за 21-дневный цикл. В одном из случаев (I13) любого из I7- I11, примерно 0,045 мг/кг иммуноконъюгата вводят три раза за 21-дневный цикл. В одном из случаев (I14) любого из I8-I11, примерно 0,09 мг/кг иммуноконъюгата вводят три раза за 21-дневный цикл.

[0035] В одном случае (I15), способ лечения гематологической злокачественной опухоли у человека включает введение указанному субъекту анти-CD123 иммуноконъюгата, содержащего анти-CD123 антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, связанные с цитотоксическим агентом, причем от примерно 0,015 мг/кг до примерно 0,09 мг/кг иммуноконъюгата вводят три раза за 21-дневный цикл.

[0036] В одном из случаев (I16) I15, первое введение проводят в день 1 21-дневного цикла. В одном из случаев (I17) I15 или I16, второе введение проводят в день 8 21-дневного цикла. В одном из случаев (I18) любого из I15-I17, примерно 0,015 мг/кг иммуноконъюгата вводят дважды за 21-дневный цикл. В одном из случаев (I19) любого из I15-I17, примерно 0,045 мг/кг иммуноконъюгата вводят дважды за 21-дневный цикл. В одном из случаев (I20) любого из I15-I17, примерно 0,09 мг/кг иммуноконъюгата вводят дважды за 21-дневный цикл.

[0037] В одном из случаев (I21) любого из I6-I20, иммуноконъюгат вводят в течение одного цикла. В одном из случаев (I22) любого из I6-I20, иммуноконъюгат вводят в течение более чем одного цикла. В одном из случаев (I23) любого из I6-I20, иммуноконъюгат вводят в течение по меньшей мере 2 циклов, по меньшей мере 3 циклов, по меньшей мере 4 циклов, по меньшей мере 5 циклов, по меньшей мере 6 циклов, по меньшей мере 7 циклов, по меньшей мере 8 циклов, по меньшей мере 9 циклов или по меньшей мере 10 циклов. В одном из случаев (I24) любого из I6-I20, иммуноконъюгат вводят в течение примерно 2-4 циклов, примерно 2-6 циклов, примерно 2-8 циклов или примерно 2-10 циклов.

[0038] В одном из случаев (I25) любого из I1-I24, гематологическая злокачественная опухоль представляет собой рецидивирующую гематологическую злокачественную опухоль. В одном из случаев (I26) любого из I1-I24, гематологическая злокачественная опухоль представляет собой острый миелоидный лейкоз (ОМЛ), миелодиспластический синдром (МДС), B-клеточный острый лимфобластный лейкоз (B-ОЛЛ), хронический миелоидный лейкоз в бластном кризе/фазе (БК-ХМЛ), или бластную плазмацитоидную дендритноклеточную неоплазму (БПДН).

[0039] В одном из случаев (I27) любого из I1-I24, гематологическая злокачественная опухоль представляет собой ОМЛ. В одном из случаев (I28) I27, ОМЛ представляет собой рецидивирующий ОМЛ. В одном из случаев (I29) I27 или I28, ОМЛ представляет собой рефрактерный ОМЛ.

[0040] В одном из случаев (I30) любого из I1-I24, гематологическая злокачественная опухоль представляет собой БПДН. В одном из случаев (I31) I30, БПДН представляет собой рецидивирующую БПДН. В одном из случаев (I32) I31 или I32, БПДН представляет собой рефрактерную БПДН.

[0041] В одном из случаев (I33) любого из I1-I24, гематологическая злокачественная опухоль представляет собой ОЛЛ. В одном из случаев (I34) I33, ОЛЛ представляет собой рецидивирующий ОЛЛ. В одном из случаев (I35) I33 или I34, ОЛЛ представляет собой рефрактерный ОЛЛ.

[0042] В одном из случаев (I36) любого из I1-I24, гематологическая злокачественная опухоль представляет собой хронический миеломоноцитарный лейкоз (ХММЛ). В одном из случаев (I37) I36, ХММЛ представляет собой рецидивирующий ХММЛ. В одном из случаев (I38) I36 или I37, ХММЛ представляет собой рефрактерный ХММЛ.

[0043] В одном из случаев (I39) любого из I1-I24, гематологическая злокачественная опухоль представляет собой миелофиброз (МФ). В одном из случаев (I40) I39, МФ представляет собой рецидивирующий МФ. В одном из случаев (I41) I39 или I40, МФ представляет собой рефрактерный МФ.

[0044] В одном из случаев (I42) любого из I1-I24, гематологическая злокачественная опухоль представляет собой миелодиспластический синдром (МДС). В одном из случаев (I43) I42, МДС представляет собой рецидивирующий МДС. В одном из случаев (I44) I42 или I43, МДС представляет собой рефрактерный МДС.

[0045] В одном из случаев (I45) любого из I1-I44, гематологическая злокачественная опухоль представляет собой CD123-экспрессирующую гематологическую злокачественную опухоль.

[0046] В одном из случаев (I46) любого из I1-I45, CD123 был детектирован в образце, полученном из гематологической злокачественной опухоли до указанного введения. В одном из случаев (I47) I46, CD123 детектируют с помощью проточной цитометрии.

[0047] В одном из случаев (I48) любого из I1-I47, способ дополнительно включает детектирование CD123 в образце, полученном из гематологической злокачественной опухоли до указанного введения.

[0048] В одном из случаев (I49) любого из I1-I48, по меньшей мере 80% клеток в гематологической злокачественной опухоли экспрессируют CD123.

[0049] В одном из случаев (I50) любого из I1-I49, CD123 был детектирован в по меньшей мере 80% клеток в образце, полученном из гематологической злокачественной опухоли до указанного введения.

[0050] В одном из случаев (I51) любого из I1-I50, способ дополнительно включает детектирование CD123 в по меньшей мере 80% клеток в образце, полученном из гематологической злокачественной опухоли до указанного введения.

[0051] В одном из случаев (I52) любого из I1-I51, субъект имеет абсолютное количество нейтрофилов более 500/мкл.

[0052] В одном из случаев (I53) любого из I1-I52, субъект получал по меньшей мере одну предшествующую линию терапии. В одном из случаев (I54) любого из I1-I52, субъект получал по меньшей мере две предшествующих линии терапии. В одном из случаев (I55) любого из I1-I52, субъект получал по меньшей мере три предшествующих линии терапии.

[0053] В одном из случаев (I56) любого из I1-I55, субъект получал предварительное лечение кортикостероидом до введения иммуноконъюгата. В одном из случаев (I57) любого из I1-I55, способ дополнительно включает предварительное лечение субъекта кортикостероидом до введения иммуноконъюгата. В одном из случаев (I58) I56 или I57, кортикостероид представляет собой дифенгидрамин, ацетаминофен, парацетамол, дексаметазон, или их комбинацию.

[0054] В одном из случаев (I59) любого из I1-I58, иммуноконъюгат вводят внутривенно.

[0055] В одном из случаев (I60) любого из I1-I59, способ дополнительно включает введение пониженной дозы иммуноконъюгата после возникновения у субъекта дозолимитирующей токсичности, со снижением до базовой линии или ≤2 степени.

[0056] В одном из случаев (I61) любого из I1-I60, анти-CD123 антитело или антигенсвязывающий фрагмент в иммуноконъюгате содержит: (a) CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5, CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6; и CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 7; и (b) CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 8; CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 9; и CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из: SEQ) ID NO. 10. В одном из случаев (I62) I61, анти-CD123 антитело или антигенсвязывающий фрагмент в иммуноконъюгате содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:1, и/или вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 2.

[0057] В одном из случаев (I63) любого из I1-I62, анти-CD123 антитело или антигенсвязывающий фрагмент в иммуноконъюгате содержит константную область тяжелой цепи и/или константную область легкой цепи. В одном из случаев (I64) I63, константная область тяжелой цепи содержит константную область тяжелой цепи иммуноглобулина IgG1 человека и/или константная область легкой цепи содержит константную область легкой цепи иммуноглобулина IgGκ человека.

[0058] В одном из случаев (I65) любого из I1-I62, анти-CD123 антитело или антигенсвязывающий фрагмент в иммуноконъюгате содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:3, и/или легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:4.

[0059] В одном из случаев (I66) любого из I1-I65, анти-CD123 антитело или антигенсвязывающий фрагмент в иммуноконъюгате представляет собой полноразмерное антитело. В одном из случаев (I67) любого из I1-I65, анти-CD123 антитело или антигенсвязывающий фрагмент в иммуноконъюгате представляет собой антигенсвязывающий фрагмент.

[0060] В одном из случаев (I68) любого из I1-I67, цитотоксический агент в иммуноконъюгате представляет собой ДНК-алкилирующий агент. В одном из случаев (I69) I68, ДНК-алкилирующий агент представляет собой индолинобензодиазепиновый (IGN) ДНК-алкилятор. В одном из случаев (I70) I69, указанный IGN ДНК-алкилятор представляет собой DGN549-C.

[0061] В одном из случаев (I71) любого из I1-I70, иммуноконъюгат содержит пептидный линкер.

[0062] В одном из случаев (I72) любого из I1-I71, иммуноконъюгат вводят в фармацевтической композиции, содержащей иммуноконъюгаты следующей структуры:

, где G4723A содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:3, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:4.

[0063] В одном из случаев (I73), способ лечения гематологической злокачественной опухоли у человека включает внутривенное введение субъекту фармацевтической композиции, содержащей иммуноконъюгаты следующей структуры:

, где G4723A содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:3, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:4, причем иммуноконъюгат вводят в дозе от примерно 0,045 мг/кг до менее чем 0,3 мг/кг один раз за 21-дневный цикл.

[0064] В одном из случаев (I74) I73, субъекту вводят примерно 0,045 мг/кг, примерно 0,09 мг/кг, примерно 0,135 мг/кг или примерно 0,18 мг/кг иммуноконъюгата. В одном из случаев (I75) I73 или I74, гематологическая злокачественная опухоль представляет собой острый миелоидный лейкоз (ОМЛ), миелодиспластический синдром (МДС), хронический миелоидный лейкоз в бластном кризе/фазе (БК-ХМЛ), бластную плазмацитоидную дендритноклеточную неоплазму (БПДН), хронический миеломоноцитарный лейкоз (ХММЛ), миелофиброз (МФ) или острый лимфобластный лейкоз (ОЛЛ), причем необязательно ОЛЛ представляет собой B-клеточный острый лимфобластный лейкоз (B-ОЛЛ).

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ

[0065] На Фиг. 1 изображена схема дизайна исследований IMGN632 (анти-CD123 иммуноконъюгат) в фазе эскалации дозы и в расширенных когортах максимально переносимой дозы (МПД) клинических исследований. Р/Р: рецидивирующий или рефрактерный; ОМЛ: острый миелоидный лейкоз; БПДН: бластная плазмацитоидная дендритноклеточная неоплазма; КИЦ: клинический исследовательский центр; RP2D: рекомендуемая доза фазы 2; ОЛЛ: острый лимфобластный лейкоз.

[0066] Фиг. 2 демонстрирует наилучшее процентное изменение бластов костного мозга у пациентов, получавших IMGN632, которые достигли прогрессирующего заболевания (ПЗ; столбики в клеточку), стабильного заболевания (СЗ; незакрашенные столбики) полной ремиссии (ПР), полной ремиссии с частичным выздоровлением (ПР/ЧВ; столбики с прямой диагональной штриховкой), частичной ремиссии (ЧР; столбики с обратной диагональной штриховкой), и минимального остаточного заболевания (МОЗ; серые столбики). Каждый столбик представляет наилучшее процентное изменение бластов костного мозга у индивидуального пациента, и цифра над столбиком или под ним обозначает номер когорты (см. Таблицы 5 и 6), к которой принадлежит указанный пациент.

[0067] Фиг. 3 демонстрирует процент CD123-положительных лейкозных клеток у пациентов, получавших IMGN632.

[0068] Фиг. 4 демонстрирует процент насыщения рецепторов CD123 у пациентов в Когортах 1-6.

[0069] Фиг. 5 демонстрирует концентрацию IMGN632 у пациентов в Когортах 1-6.

[0070] Фиг. 6A демонстрирует химическую структуру IMGN632. IMGN632 представляет собой композицию, содержащую иммуноконъюгаты, содержащие анти-CD123 антитело G4723A, связанное с цитотоксической полезной нагрузкой DGN549-C в бисульфите натрия. Большая часть иммуноконъюгата в композиции находится в сульфонированной форме, изображенной на Фиг. 6A.

[0071] Фиг. 6B изображает несульфонированную форму иммуноконъюгата, содержащую анти-CD123 антитело G4723A, связанное с цитотоксической полезной нагрузкой DGN549-C (моноиминовая структура), которая также может присутствовать в композиции IMGN632.

ДЕТАЛЬНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Определения

[0072] Термины «рак» и «раковый» относятся к или описывают физиологическому состоянию у млекопитающих, при котором популяция клеток характеризуется нерегулируемым клеточным ростом. Примеры рака включают, без ограничений, карциному, лимфому, бластому, саркому и лейкоз. «Опухоль» и «неоплазма» относятся к одной или нескольким клеткам, которые образуются в результате избыточного клеточного роста или пролиферации, будь то доброкачественной (нераковой) или злокачественной (раковой), включая предраковые поражения. Рак, как раскрыто в данном документе, может быть гематологической злокачественной опухолью. Примеры гематологических злокачественных опухолей включают, например, острый миелоидный лейкоз (ОМЛ), хронический миелоидный лейкоз (ХМЛ), миелодиспластический синдром (МДС), острый лимфобластный лейкоз (ОЛЛ), такой как B-клеточный острый лимфобластный лейкоз (B-ОЛЛ), T-клеточный острый лимфобластный лейкоз (T-ОЛЛ), недифференцированный лейкоз ОЛЛ (ОНЛ-ОЛЛ), B-клеточный ОЛЛ из клеток-предшественников (BCP-ОЛЛ), Ph+ ОЛЛ, Ph-подобный ОЛЛ, хронический лимфоцитарный лейкоз (ХЛЛ), хронический миелоидный лейкоз в бластном кризе/фазе (БК-ХМЛ) и бластную плазмацитоидную дендритноклеточную неоплазму (БПДН). Дополнительные примеры «рака» включают B-клеточные лимфомы, включая НХЛ, лимфобластный лейкоз/лимфому из B-клеток-предшественников и неоплазмы зрелых B-клеток, такие как B-клеточный хронический лимфоцитарный лейкоз (ХЛЛ)/мелкоклеточная лимфоцитарная лимфома (МЛЛ), B-клеточный пролимфоцитарный лейкоз, лимфоплазматическая лимфома, мантийноклеточная лимфома (МКЛ), фолликулярная лимфома (ФЛ), включая ФЛ низкой, промежуточной и высокой степени злокачественности, кожная лимфома из фолликулярного центра, B-клеточная лимфома маргинальной зоны (из лимфоидной ткани, ассоциированной со слизистой (MALT), узелкового и селезеночного типа), волосатоклеточный лейкоз, диффузная крупноклеточная B-клеточная лимфома, лимфома Беркитта, плазмацитома, плазмоклеточная миелома, посттрансплантационное лимфопролиферативное расстройство, макроглобулинемия Вальденстрема и анапластическая крупноклеточная лимфома (АККЛ). Рак может быть раком, который экспрессирует CD123 («CD123-экспрессирующий рак»).

[0073] Термины «раковая клетка», «опухолевая клетка» и грамматические эквиваленты относятся к общей популяции клеток, выдееленных из опухоли или предракового поражения, включая как неопухолеобразующие клетки, которые образуют основную массу популяции опухолевых клеток, так и опухолеобразующие стволовые клетки (раковые стволовые клетки). Используемый в данном документе термин «опухолевая клетка» будет модифицирован термином «неопухолеобразующая» при использовании по отношению только к опухолевым клеткам, не обладающим способностью к обновлению и дифференцировке, для отличия таких опухолевых клеток от раковых стволовых клеток.

[0074] «Рефрактерный» рак представляет собой рак, прогрессирующий несмотря на проведение раковому пациенту противоопухолевого лечения, такого как химиотерапия. Примером рефрактерного рака является платина-рефрактерный.

[0075] «Рецидивирующим» является рак, при котором указанное раковое заболевание или признаки и симптомы рака возвращаются после периода улучшения.

[0076] «Полный ответ» или «полная ремиссия» или «ПР» указывает на исчезновение всех признаков опухоли или рака в отвеет на лечение. Это не всегда означает исцеление от рака. «ЧВ» относится к морфологически полным ремиссиям с неполным гематологическим (по анализу крови) выздоровлением. «ПВМОЗ-» относится к полному выздоровлению без измеряемых проявлений остаточного заболевания.

[0077] «ПКР» или «полная клиническая ремиссия» указывает на отсутствие признаков заболевания с некоторыми кожными изменениями, не указывающими на активное заболевание. «ПР с частичным гематологическим выздоровлением» или «ПРг» относится к гематологическому выздоровлению, которое определяется как отсутствие у пациента признаков лейкоза, но один или несколько показателей крови (например, тромбоциты и нейтрофилы) не возвращаются к нормальным уровням (например, абсолютное количество нейтрофилов (АКН) более 500/мкл и количество тромбоцитов более 50000/мкл).

[0078] «Частичный ответ» или «ЧР» относится к снижению размера или объема одной или нескольких опухолей или поражений, или распространения рака в организме, в ответ на лечение.

[0079] «Прогрессирующее заболевание» относится к появлению одного [или] нескольких новых поражений или опухолей и/или несомненному прогрессированию существующих нецелевых поражений. Прогрессирующее заболевание может также относятся к росту опухоли более 20% с момента начала лечения, в результате увеличения массы или распространения опухоли.

[0080] Термин «антитело» означает молекулу иммуноглобулина, которая распознает и специфически связывается с мишенью, такой как белок, полипептид, пептид, углевод, полинуклеотид, липид или комбинации вышеперечисленного, посредством по меньшей мере одного антигенраспознающего сайта в вариабельной области молекулы иммуноглобулина. Используемый в данном документе термин «антитело» охватывает интактные поликлональные антитела, интактные моноклональные антитела, химерные антитела, гуманизированные антитела, человеческие антитела, слитые белки, содержащие антитело, и любую другую модифицированную молекулу иммуноглобулина, при условии, что указанные антитела проявляют желаемую биологическую активность. Антитело может быть отнесено к любому из пяти основных классов иммуноглобулинов: IgA, IgD, IgE, IgG и IgM, или их подклассам (изотипам) (например, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1 и IgA2), на основании идентичности константных доменов их тяжелой цепи, обозначаемых альфа, дельта, эпсилон, гамма и мю, соответственно. Разные классы иммуноглобулинов имеют разные и хорошо известные структуры субъединиц и трехмерные конфигурации. Антитела могут быть «голыми» или конъюгированными с другими молекулами, такими как токсины, радиоизотопы и т.д.

[0081] Термин «фрагмент антитела» относится к части интактного антитела с достаточным положительным зарядом для связывания с катионообменной смолой. «Антигенсвязывающий фрагмент» относится к части интактного антитела, которая связывается с антигеном и имеет достаточный положительный заряд для связывания с катионообменной смолой. Антигенсвязывающий фрагмент может содержать антиген-детерминирующие вариабельные области интактного антитела. Примеры фрагментов антител включают, без ограничений, фрагменты Fab, Fab', F(ab')2 и Fv, линейные антитела и одноцепочечные антитела.

[0082] Термин «модифицированной цистеином» антитело или его антигенсвязывающий фрагмент включает антитело или его антигенсвязывающий фрагмент с по меньшей мере одним цистеином ("Cys"), который обычно не присутствует в данном остатке легкой цепи или тяжелой цепи антитела или его антигенсвязывающего фрагмента. Такие Cys, которые могут быть также названы «модифицированными Cys», могут быть модифицированы с использованием любых обычных методов молекулярной биологии или рекомбинантной технологии (например, путем замены кодирующей последовательности нецистеинового остатка в положении остатка-мишени на кодирующую последовательность Cys). Например, если исходный остаток представляет собой Ser с кодирующей последовательностью 5'-UCU-3', то кодирующая последовательность может быть мутирована (например, путем сайт-направленного мутагенеза) до 5'-UGU-3', которая кодирует Cys. В определенных вариантах реализации, Cys-модифицированное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент имеет модифицированный Cys в тяжелой цепи. В определенных вариантах реализации, модифицированный Cys находится в CH3-домене тяжелой цепи или вблизи него. В определенных вариантах реализации, модифицированный Cys находится в положении остатка 442 тяжелой цепи (нумерация EU/OU; EU-индекс, Kabat et al, Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed., NTH publication No. 91-3242, 1991, содержание которой в полном объеме включено в данный документ посредством ссылки). В определенных вариантах реализации, область Fc содержит цистеин в одном или нескольких из положений 239, 282, 289, 297, 312, 324, 330, 335, 337, 339, 356, 359, 361, 383, 384, 398, 400, 440, 422 и 442, в соответствии с нумерацией по EU-индексу. В определенных вариантах реализации, любой один или несколько из следующих остатков может быть аменен на цистеин: V205 (нумерация по Кабату) легкой цепи; A118 (нумерация EU) тяжелой цепи; и S400 (нумерация EU) Fc-области тяжелой цепи. В определенных вариантах реализации, вариабельный домен легкой цепи, например, scFv, имеет цистеин в положении 100 по Кабату (Kabat). В определенных вариантах реализации, вариабельный домен тяжелой цепи, например, scFv, имеет цистеин в положении 44 по Кабату. Модифицированные цистеином антитела могут быть получены, как описано, например, в патенте США № 7521541, патенте США № 7855275, опубликованной заявке США № 20110033378 и WO 2011/005481.

[0083] «Моноклональное» антитело или его антигенсвязывающий фрагмент относится к гомогенной популяции антитела или антигенсвязывающего фрагмента, участвующих в высокоспецифическом распознавании и связывании отдельной антигенной детерминанты или эпитопа. Этим они отличаются от поликлональных антител, которые типично включают разные антитела, направленные против разных антигенных детерминант. Термин “моноклональное" антитело или его антигенсвязывающий фрагмент охватывает как интактные, так и полноразмерные моноклональные антитела, а также фрагменты антител (такие как Fab, Fab', F(ab')2, Fv), одноцепочечные (scFv) мутанты, слитые белки, содержащие участок антитела и любую другую модифицированную молекулу иммуноглобулина, содержащую антигенраспознающий сайт. Кроме того, “моноклональное" антитело или его антигенсвязывающий фрагмент относится к антителам и их антигенсвязывающим фрагментам, полученным любыми способами, включая, без ограничений, гибридому, фаговую селекцию, рекомбинантную экспрессию и трансгенных животных.

[0084] Термин «гуманизированное» антитело или его антигенсвязывающий фрагмент относится к формам нечеловеческих (например, мышиных) антител или антигенсвязывающих фрагментов, которые представляют собой специфические иммуноглобулиновые цепи, химерные иммуноглобулины, или их фрагменты, содержащие минимальные нечеловеческие (например, мышиные) последовательности. Типично, гуманизированные антитела или их антигенсвязывающие фрагменты представляют собой иммуноглобулины человека, в которых остатки из участка, определяющего комплементарность (CDR), заменяют на остатки из CDR, принадлежащего виду, не являющемуся человеком (например, мыши, крысы, кролика, хомяка), которые имеют желаемую специфичность, аффинность и способность («CDR-прививка») (Jones et al., Nature 321:522-525 (1986); Riechmann et al., Nature 332:323-327 (1988); Verhoeyen et al., Science 239:1534-1536 (1988)). В некоторых случаях, остатки каркасного участка (FR) Fv иммуноглобулина человека заменяют на соответствующие остатки в антителе или фрагменте от не являющегося человеком вида, которые обрадают желаемой специфичностью, аффинностью и способностью. Гуманизированное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент может быть дополнительно модифицировано путем замещения дополнительных остатков в каркасном участке Fv и/или среди замещенных нечеловеческих остатков с целью улучшения и оптимизации специфичности, аффинности и/или сспособности антитела или его антигенсвязывающего фрагмента. В общем, гуманизированное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент будут содержать по существу все из по меньшей мере одного, и типично двух или трех, вариабельных доменов, содержащих все или по существу все CDR-участки, которые соответствуют нечеловеческому иммуноглобулину, в то время как все или по существу все FR-области относятся к консенсусной последовательности иммуноглобулина человека. Гуманизированное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент может также содержать по меньшей мере часть константной области или домена (Fc) иммуноглобулина, типично, иммуноглобулина человека. Примеры способов, используемых для получения гуманизированных антител, описаны в патенте США № 5225539; Roguska et al., Proc. Natl. Acad. Sci., USA, 91(3):969-973 (1994), и Roguska et al., Protein Eng. 9(10):895-904 (1996). В некоторых вариантах реализации, «гуманизированное антитело» представляет собой антитело с изменённой поверхностью.

[0085] «Вариабельная область» антитела относится к вариабельной области легкой цепи антитела или вариабельной области тяжелой цепи антитела, по отдельности или в комбинации. Вариабельные области тяжелой и легкой цепей состоят каждая из четырех каркасных участков (FR), соединенных тремя участками, определяющими комплементарность (CDR), также известными как гипервариабельные участки. CDR в каждой цепи удерживаются на небольшом расстоянии друг от друга с помощью FR и, вместе с CDR из другой цепи, участвуют в образовании антигенсвязывающего сайта антител. Существует по меньшей мере две методики определения CDR: (1) подход, основанный на межвидовой изменчивости последовательностей (т.е., Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest (5th ed., 1991, National Institutes of Health, Bethesda Md.), «Кабат»); и (2) подход, основанный на кристаллографических исследованиях комплексов антиген-антитело (Al-lazikani et al, J. Molec. Biol. 273:927-948 (1997)). Кроме того, для определения CDR в данной области техники иногда используются комбинации этих двух подходов.

[0086] Система нумерации по Кабату обычно используется при описании остатка в вариабельном домене (приблизительно остатки 1-107 легкой цепи и остатки 1-113 тяжелой цепи) (например, Kabat et al., Sequences of Immunological Interest (5th Ed., 1991, National Institutes of Health, Bethesda, Md.) («Кабат»).

[0087] Нумерация положения аминокислоты по Кабату относится к системе нумерации, используемой для вариабельных доменов тяжелой цепи или вариабельных доменов легкой цепи наборов антител в Kabat et al. (Sequences of Immunological Interest. (5th Ed., 1991, National Institutes of Health, Bethesda, Md.), «Кабат»). При использовании этой системы нумерации, фактическая линейная аминокислотная последовательность может содержать меньшее количество или дополнительные аминокислоты, соответствующие укорачиванию, или вставке в, FR или CDR вариабельного домена. Например, вариабельный домен тяжелой цепи может включать вставку отдельной аминокислоты (остаток 52a в соответствии с Кабат) после остатка 52 H2 и вставленные остатки (например, остатки 82a, 82b и 82c и т.д. в соответствии с Кабат) после остатка 82 FR тяжелой цепи. Нумерация остатков по Кабату может быть определена для данного антитела путем выравнивания гомологичных областей последовательности антитела со «стандартной» последовательностью, пронумерованной по Кабату. В отличие от этого, Чотиа (Chothia) указывает положение структурных петель (Chothia and Lesk, J. Mol. Biol. 196:901-917 (1987)). Конец петли CDR-H1 по Чотиа, при нумерации с использованием системы нумерации Кабата, расположен в области между H32 и H34 в зависимости от длины петли (это объясняется тем, что схема нумерации по Кабату помещает инсерции в положения H35A и H35B; и если ни 35A, ни 35B не присутствует, то петля заканчивается в положении 32; если присутствует только 35A, петля закансивается в положении 33; и если присутствуют оба 35A и 35B, то петля заканчивается в положении 34). Гипервариабельные области AbM представляют собой компромисс между CDR по Кабату и структурными петлями по Чотиа, и используются в прикладной программе моделирования антител AbM фирмы Oxford Molecular.

Петля Кабат AbM Чотиа L1 L24-L34 L24-L34 L24-L34 L2 L50-L56 L50-L56 L50-L56 L3 L89-L97 L89-L97 L89-L97 H1 H31-H35B H26-H35B H26-H32..34 (нумерация по Кабату) H1 H31-H35 H26-H35 H26-H32 (нумерация по Чотиа) H2 H50-H65 H50-H58 H52-H56 H3 H95-H102 H95-H102 H95-H102

[0088] Термин «человеческое» антитело или его антигенсвязывающий фрагмент означает антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, продуцируемые человеком, или антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, имеющие аминокислотную последовательность, соответствующую антителу или его антигенсвязывающему фрагменту, продуцируемому человеком, полученные с использованием любой методики, известной специалистам. Это определение человеческого антитела или его антигенсвязывающего фрагмента включает интактные или полноразмерные антитела и их фрагменты.

[0089] Термин «химерные» антитела или их антигенсвязывающие фрагменты относится к антителам или их антигенсвязывающим фрагментам, аминокислотная последовательность которых получена от двух или более видов. Типично, вариабельная область как легкой, так и тяжелой цепей соответствует вариабельной области антител или их антигенсвязывающих фрагментов, полученных от одного вида млекопитающих (например, мыши, крысы, кролика и т.д.) с желаемой специфичностью, аффинностью и способностью, в то время как константные области являются гомологичными последовательностям антител или их антигенсвязывающих фрагментов, полученным от другого [вида] (обычно, человека), во избежание возникновения иммунного ответа у этого вида.

[0090] Термины «эпитоп» или «антигенная детерминанта» используются в данном документе взаимозаменяемо и относятся к части антигена, способной распознаваться и специфически связываться определенным антителом. Когда антиген представляет собой полипептид, эпитопы могут быть сформированы как из непрерывной последовательности аминокислот, так и из несмежных аминокислот, сближающихся при третичной укладке белка. Эпитопы, образующиеся из непрерывной последовательности аминокислот, типично сохраняются при денатурации белка, тогда как эпитопы, образующиеся при третичной укладке, обычно теряются при денатурации белка. Эпитоп типично включает по меньшей мере 3, и чаще по меньшей мере 5 или 8-10 аминокислот в уникальной пространственной конформации.

[0091] «Аффинность связывания» в общем относится к силе обобщенных нековалентных взаимодействий между отдельным связывающим сайтом молекулы (например, антитела) и его партнером по связыванию (например, антигеном). Если не указано иное, при использовании в данном документе, «аффинность связывания» относится к характеристической аффинности связывания, которая отражает 1:1 взаимодействие между членами связывающейся пары (например, антителом и антигеном). Аффинность молекулы X к ее партнеру Y может быть в общем представлена константой диссоциации (Kd). Аффинность может быть измерена обычными способами, известными в данной области техники, включая описанные в данном документе. Низкоаффинные антитела обычно связывают антиген медленно и легко диссоциируют, в то время как высокоаффинные антитела обычно связывают антиген быстрее и дольше остаются связанными. Различные методы измерения аффинности связывания известны в данной области техники, и любые из них могут быть использованы в целях данного изобретения. Конкретные иллюстративные варианты реализации описаны ниже.

[0092] «Или лучше», при использовании по отношению к аффинности связывания, относится к более сильной свяи между молекулой и ее партнером по связыванию. «Или лучше», при использовании в данном документе, относится к более сильному связываниюю, представленному меньшим численным значением Kd. Например, [если] антитело имеет аффинность по отношению к антигену «0,6 нМ или лучше», [то] аффинность антитела к антигену составляет <0,6 нМ, т.е. 0,59 нМ, 0,58 нМ, 0,57 нМ и т.д., или любое значение менее 0,6 нМ.

[0093] «Специфически связывается», в общем означает, что антитело связывается с эпитопом через его антигенсвязывающий домен, и что указанное связывание предусматривает некоторую степень комплементарности между антигенсвязывающим доменом и эпитопом. В соответствии с данным определением, говорят, что антитело «специфически связывается» с эпитопом, когда оно связывается с данным эпитопом через свой антигенсвязывающий домен легче, чем оно связывалось бы со случайным неродственным эпитопом. Термин «специфичность» используется в данном документе для определения относительной аффинности, с которой определенное антитело связывается с определенным эпитопом. Например, может считаться, что антитело «A» имеет более высокую специфичность к данному эпитопу, чем антитело «B», или может считаться, что антитело «A» связывается с эпитопом «C» с более высокой специфичностью, чем с родственным эпитопом «D».

[0094] «Предпочтительно связывается» означает, что антитело специфически связывается с некоторым эпитопом легче, чем оно связывалось бы с родственным схожим, гомологичным или аналогичным эпитопом. Таким образом, антитело, которое «предпочтительно связывается» с данным эпитопом, будет с большей вероятностью связываться с этим эпитопом, чем с родственным эпитопом, даже если такое антитело может перекрестно реагировать с указанным родственным эпитопом.

[0095] Термины «полипептид», «пептид» и «белок» используются в данном документе взаимозаменяемо по отношению к полимерам аминокислот любой длины. Указанный полимер может быть линейным или разветвленным, он может содержать модифицированные аминокислоты, и он может содержать неаминокислотные звенья. Указанные термины также охватывают аминокислотный полимер, который был модифицирован природным способом или путем вмешательства; например, образованием дисульфидной связи, гликозилированием, липидированием, ацетилированием, фосфорилированием или любой другой манипуляцией или модификацией, такой как конъюгация с компонентом-меткой. Указанные определения также включают, например, полипептиды, содержащие один или несколько аналогов аминокислоты (включая, например, неприродные аминокислоты и т.д.), а также другие модификации, известные в данной области техники. Подразумевается, что, поскольку полипептиды по данному изобретению основаны на антителах, в определенных вариантах реализации полипептиды могут существовать в виде отдельных цепей или ассоциированных цепей.

[0096] Термин «иммуноконъюгат» или «конъюгат», при использовании в данном документе, относится к соединению или его производному, которое связано с агентом связывания клеток (т.е., анти-CD123 антителом или его фрагментом) и определяется общей формулой: C-A, где C = цитотоксин (например, такой как индолинобензодиазепиновый (IGN) ДНК-алкилятор (например, DGN549-C)), и A = антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, например, анти-CD123 антитело или фрагмент антитела. Иммуноконъюгат может необязательно содержать линкер и быть определен общей формулой C-L-A, где C = цитотоксин, L = линкер и A = антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, например, анти-CD123 антитело или фрагмент антитела. Иммуноконъюгаты могут также быть определены общей формулой, записанной в обратном порядке: C-A или A-L-C. Иммуноконъюгаты могут также содержать несколько цитотоксинов (C) на антитело или его антигенсвязывающий фрагмент (A), или несколько цитотоксинов (C) и линкеров (L) на антитело или его антигенсвязывающий фрагмент (A).

[0097] «Линкер» представляет собой любой химический фрагмент, способный связывать соединение, обычно лекарственное средство (такое как IGN ДНК-алкиляторы), со связывающим клетку агентом (таким как анти-CD123 антитело или его фрагмент) стабильным ковалентным образом. Линкеры могут быть чувствительными или по существу стойкими к кислотному расщеплению, светоиндуцируемому расщеплению, индуцируемому пептидазой расщеплению, индуцируемому эстеразой расщеплению и расщеплению дисульфидной связи, в условиях, при которых указанное соединение или антитело остается активным. Пригодные линкеры хорошо известны в данной области техники и включают, например, дисульфидные группы, тиоэфирные группы, кислотно-лабильные группы, фотолабильные группы, пептидаза-лабильные группы и эстераза-лабильные группы. Линкеры также включают заряженные линкеры, и их гидрофильные формы, как описано в данном документе и известно в данной области техники. В некоторых вариантах реализации, раскрытых в данном документе, линкер представляет собой пептидный линкер.

[0098] Фраза «фармацевтически приемлемый» указывает, что вещество или композиция должны быть совместимыми химически и/или токсикологически, с другими ингредиентами, составляющими композицию, и/или млекопитающим, которого ими лечат.

[0099] Термин «фармацевтическая композиция» относится к препарату, находящемуся в форме, обеспечивающей эффективную биологическую активность активного ингредиента, и который не содержит дополнительных компонентов, являющихся неприемлемо токсичными для субъекта, которому указанная композиция будет введена. Композиция может быть стерильной.

[0100] «Эффективное количество» антитела, иммуноконъюгата или другого лекарственного средства, раскрытого в данном документе, представляет собой количество, достаточное для достижения конкретно заданной цели. «Эффективное количество» может быть определено эмпирически и в обычном порядке, по отношению к указанной цели.

[0101] Термин «пригодный ОМЛ» при использовании в данном документе, относится к субъекту с ОМЛ, подходящему для проведения интенсивной терапии. Показатели для определения субъекта с пригодным ОМЛ включают, например, физическую работоспособность (например, в соответствии с определением функционального статуса Восточной кооперативной онкологической группы (ECOG PS), функционального статуса по Камофски (Kamofsky) (KPS), и кратким набором тестов по оценке физической производительности (SPPB)), сопутствующие заболевания (определяемые по индексу коморбидности Чарлсон (Charlson) (CCI) или индексу коморбидности трансплантации стволовых гемопоэтических клеток (ТГСК)), когнитивную функцию и прогностические модели (включая, без ограничений, цитогенетическую группу, возраст, количество белых кровяных клеток, ЛДГ, тип ОМЛ). В некоторых случаях, субъект с пригодным ОМЛ представляет собой субъекта в возрасте 60 лет или в возрасте до 60 лет.

[0102] Термин "непригодный ОМЛ" при использовании в данном документе относится к субъекту, имеющему ОМЛ, неподходящему для проведению интенсивной терапии. Показатели для определения субъекта с непригодным ОМЛ включают, например, физическую работоспособность (например, в соответствии с определением функционального статуса Восточной кооперативной онкологической группы (ECOG PS), функционального статуса по Камофски (KPS), и кратким набором тестов по оценке физической производительности (SPPB)), сопутствующие заболевания (определяемые по индексу коморбидности Чарлсон (CCI) или индексу коморбидности трансплантации стволовых гемопоэтических клеток (ТГСК)), когнитивную функцию и прогностические модели (включая, без ограничений, цитогенетическую группу, возраст, количество белых кровяных клеток, ЛДГ, тип ОМЛ). В некоторых случаях, субъект с непригодным ОМЛ представляет собой субъекта в возрасте старше 60 лет.

[0103] Термин «терапевтически эффективное количество» относится к количеству антитела, иммуноконъюгата или другого лекарственного средства, эффективного для проведения «лечения» заболевания или расстройства у субъекта или млекопитающего. В случае рака, терапевтически эффективное количество лекарственного средства может уменьшать число раковых клеток; уменьшать размер опухоли или нагрузку; ингибировать (т.е., замедлять в некоторой степени и, в определенном варианте реализации, останавливать) инфильтрацию раковых клеток в периферические органы; облегчать в некоторой степени один или несколько симптомов, связанных с раком; и/или приводить к благоприятному ответу, такому как полная ремиссия (ПР), полная ремиссия с частичным выздоровлением (ЧВ); ПР без минимального остаточного заболевания (ПВМОЗ-); полная клиническая ремиссия (ПКР); состояние без морфологического лейкоза; частичная ремиссия (ЧР); и уменьшение прогрессирующего заболевания (ПЗ). См. приведенное в данном документе определение «лечения». В той степени, в которой лекарственное средство может предотвращать рост и/или уничтожать существующие раковые клетки, оно может быть цитостатическим и/или цитотоксическим. «Профилактически эффективное количество» относится к количеству, эффективному при дозировках и в течение периодов времени, необходимых для достижения желаемого профилактического результата. Типично, но не обязательно, поскольку профилактическая доза используется у субъектов до или на ранней стадии заболевания, профилактически эффективное количество будет меньше, чем терапевтически эффективное количество.

[0104] Термин «отвечать благоприятно» обычно относится к созданию благоприятного состояния у субъекта. По отношению к лечению рака, указанный термин относится к обеспечению терапевтического воздействия на субъекта. Положительные терапевтические эффекты при раковых заболеваниях могут быть измерены рядом способов (см., W.A. Weber, J. Nucl. Med. 50:1S-10S (2009)). Благоприятный ответ можно оценить, например, как полную ремиссию (ПР), полную ремиссию с частичным выздоровлением (ЧВ); ПР без минимального остаточного заболевания (ПВМОЗ-); полную клиническую ремиссию (ПКР); состояние без морфологического лейкоза; частичную ремиссию (ЧР); уменьшение прогрессирующего заболевания (ПЗ), или любую их комбинацию.

[0105] Термины «IL-3Rα», «рецептор интерлейкина-3 альфа» и «CD123», используемые в данном документе взаимозаменяемо, относятся к полипептидам CD123 млекопитающих, включая, без ограничений, нативные полипептиды CD123 и изоформы полипептидов CD123, если не указано иное. Термины охватывают «полноразмерные», непроцессорованные полипептиды CD123, а также любую форму полипептида CD123, образующуюся в результате процессирования в клетке. Термин также охватывает природные варианты CD123, например, кодируемые сплайс-вариантами и аллельными вариантами. Полипептиды CD123, описанные в данном документе, могут быть выделены из различных источников, таких как типы тканей человека, или из другого источнка, или получены методами рекомбинации или синтеза. В тех случаях, когда это указано конкретно, «CD123» может быть использован по отношению к нуклеиновой кислоте, кодирующей полипептид CD123. Последовательности CD123 человека известны и включают, например, последовательности, связанные с регистрационными номерами Национального центра биотехнологической информации (NCBI) NP_002174 и NM_002183 (последовательности белка и нуклеиновой кислоты CD123 человека, вариант 1), и NP_001254642 и NM_001267713 (последовательности белка и нуклеиновой кислоты CD123 человека, вариант 2). Используемый в данном документе термин «CD123 человека» относится к CD123, содержащему последовательность SEQ ID NO: 11 или SEQ ID NO: 12.

1 MVLLWLTLLL IALPCLLQTK EDPNPPITNL RMKAKAQQLT WDLNRNVTDI ECVKDADYSM

61 PAVNNSYCQF GAISLCEVTN YTVRVANPPF STWILFPENS GKPWAGAENL TCWIHDVDFL

121 SCSWAVGPGA PADVQYDLYL NVANRRQQYE CLHYKTDAQG TRIGCRFDDI SRLSSGSQSS

181 HILVRGRSAA FGIPCTDKFV VFSQIEILTP PNMTAKCNKT HSFMHWKMRS HFNRKFRYEL

241 QIQKRMQPVI TEQVRDRTSF QLLNPGTYTV QIRARERVYE FLSAWSTPQR FECDQEEGAN

301 TRAWRTSLLI ALGTLLALVC VFVICRRYLV MQRLFPRIPH MKDPIGDSFQ NDKLWWEAG

361 KAGLEECLVT EVQWQKT (SEQ ID NO: 11)

1 MVLLWLTLLL IALPCLLQTK EGGKPWAGAE NLTCWIHDVD FLSCSWAVGP GAPADVQYDL

61 YLNVANRRQQ YECLHYKTDA QGTRIGCRFD DISRLSSGSQ SSHILVRGRS AAFGIPCTDK

121 FVVFSQIEIL TPPNMTAKCN KTHSFMHWKM RSHFNRKFRY ELQIQKRMQP VITEQVRDRT

181 SFQLLNPGTY TVQIRARERV YEFLSAWSTP QRFECDQEEG ANTRAWRTSL LIALGTLLAL

241 VCVFVICRRY LVMQRLFPRI PHMKDPIGDS FQNDKLVVWE AGKAGLEECL VTEVQVVQKT

(SEQ ID NO:12)

[0106] Термин «анти-CD123 антитело» или «антитело, которое связывается с CD123», относится к антителу, способному связывать CD123 с достаточной аффинностью, так чтобы антитело было пригодныым для использования в качестве диагностического и/или терапевтического агента при нацеливании на CD123 (например, антитело в IMGN632). Степень связывания анти-CD123 антитела с неродственным белком, не относящимся к CD123, может составлять менее примерно 10% от связывания антитела с CD123, измеренного, например, методом радиоиммуноанализа (РИА).

[0107] Термин "IMGN632" относится к композиции иммуноконъюгата, изображенной на Фиг. 6A и 6B. Композиция иммуноконъюгата содержит иммуноконъюгаты, содержащие в среднем от 1,5 до 2,1 цитотоксических агентов DGN549-C на антитело huCD123-6Gv4.7 («G4723A») в сульфонированном варианте (Фиг. 6A). Композиция иммуноконъюгата может также содержать несульфонированный иммуноконъюгат (моноиминовая структура, изображенная на Фиг. 6B).

[0108] При использовании в данном описании и формуле изобретения, формы единственного числа включают формы множественного числа, если это не противоречит явным образом контексту.

[0109] Следует понимать, что в тех случаях, когда варианты реализации описаны в данном документе с использованием термина «содержащий», подразумеваются также аналогичные в других отношениях варианты реализации, описанные с использованием формулировок «состоящий из» и/или «состоящий по существу из».

[0110] Предусматривается, что термин «и/или» при использовании в такой фразе, как «A и/или B» в данном документе должен включать как «A и B», так и «A или B», «A» и «B». Аналогично, термин «и/или», при использовании в такой фразе, как «A, B и/или C» должен охватывать каждый из следующих вариантов реализации: A, B и C; A, B или C; A или C; A или B; B или C; A и C; A и B; B и C; A (только); B (только); и C (только).

Анти-CD123 иммуноконъюгаты

[0111] Способы, описанные в данном документе, обеспечивают способы введения иммуноконъюгатов, которые специфически связываются с CD123. Такие агенты называются в данном документе «CD123-иммуноконъюгаты» или «анти-CD123-иммуноконъюгаты». Такие иммуноконъюгаты содержат анти-CD123 антитело или его антигенсвязывающий фрагмент и лекарственное средство (например, цитотоксический агент). Лекарственное средство (например, цитотоксический агент) может быть присоединено к анти-CD123 антителу или его антигенсвязывающему фрагменту с помощью линкера.

[0112] В некоторых вариантах реализации, анти-CD123 антитела или их антигенсвязывающие фрагменты представляют собой гуманизированные антитела или их антигенсвязывающие фрагменты. В некоторых вариантах реализации, гуманизированное антитело или фрагмент представляет собой антитело с изменённой поверхностью или его антигенсвязывающий фрагмент. В других вариантах реализации, антитела или их антигенсвязывающие фрагменты представляют собой полностью человеческое антитело или его антигенсвязывающий фрагмент.

[0113] В одном варианте реализации, в данном документе предусматривается иммуноконъюгат, представленный следующей формулой:

где CBA представляет собой анти-CD123 антитело или антигенсвязывающий фрагмент или полипептид, ковалентно связанный с CyC1 через остаток цистеина; и WC равен 1 или 2.

[0114] В приведенной выше формуле, CyC1 представлен следующими формулами:

или

или их фармацевтически приемлемой солью, где двойная линия между N и C обозначает одиночную связь или двойную связь, при условии, что, когда она представляет собой двойную связь, X отсутствует и Y представляет собой -H или (C1-C4)-алкил; и когда она представляет собой одинарную связь, X обозначает -H или защитный фрагмент аминогруппы, Y представляет собой -OH или -SO3M, и M обозначает H+ или катион;

R5 представляет собой -H или (C1-C3)-алкил;

P представляет собой аминокислотный остаток или пептид, содержащий 2-20 аминокислотных остатков;

Ra и Rb, в каждом случае, независимо представляют собой -H, (C1-C3)-алкил, или заряженный заместитель или ионизируемую группу Q;

W' представляет собой -NRe',

Re' представляет собой -(CH2-CH2-O)n-Rk;

n обозначает целое число от 2 до 6;

Rk представляет собой -H или -Me;

Rx3 представляет собой (C1-C6)-алкил; и

Lc представляет собой , s1 обозначает сайт, ковалентно связанный с CBA, и s2 представляет собой сайт, ковалентно связанный с -C(=O)-группой CyC1; где:

R19 и R20, в каждом случае, независимо обозначают -H или (C1-C3)-алкил;

m” обозначает целое число от 1 до 10; и

Rh представляет собой -H или (C1-C3)-алкил.

[0115] В определенных вариантах реализации, Ra и Rb оба представляют собой H; и R5 представляет собой H или Me.

[0116] В определенных вариантах реализации, P представляет собой пептид, содержащий 2-5 аминокислотных остатков. Например, P может быть выбран из Gly-Gly-Gly, Ala-Val, Val-Ala, Val-Cit, Val-Lys, Phe-Lys, Lys-Lys, Ala-Lys, Phe-Cit, Leu-Cit, Ile-Cit, Trp, Cit, Phe-Ala, Phe-N9-тозил-Arg, Phe-N9-нитро-Arg, Phe-Phe-Lys, D-Phe-Phe-Lys, Gly-Phe-Lys, Leu-Ala-Leu, Ile-Ala-Leu, Val-Ala-Val, Ala-Leu-Ala-Leu, β-Ala-Leu-Ala-Leu, Gly-Phe-Leu-Gly, Val-Arg, Arg-Val, Arg-Arg, Val-D-Cit, Val-D-Lys, Val-D-Arg, D-Val-Cit, D-Val-Lys, D-Val-Arg, D-Val-D-Cit, D-Val-D-Lys, D-Val-D-Arg, D-Arg-D-Arg, Ala-Ala, Ala-D-Ala, D-Ala-Ala, D-Ala-D-Ala, Ala-Met и Met-Ala. В определенных вариантах реализации, P представляет собой Gly-Gly-Gly, Ala-Val, Ala-Ala, Ala-D-Ala, D-Ala-Ala или D-Ala-D-Ala. В определенных вариантах реализации, Q представляет собой -SO3M

[0117] В определенных вариантах реализации, R19 и R20 оба представляют собой H; и m” обозначает целое число от 1 до 6.

[0118] В определенных вариантах реализации, -LC- представлен следующей формулой:

[0119] В определенных вариантах реализации, иммуноконъюгат представлен следующими формулами:

или

или их фармацевтически приемлемыми солями, где двойная линия между N и C обозначает одинарную связь или двойную связь, при условии, что когда она обозначает двойную связь, X отсутствует и Y представляет собой -H, и когда она обозначает одинарную связь, X представляет собой -H, и Y представляет собой -OH или -SO3M.

[0120] В качестве примера, анти-CD123 антитело или его антигенсвязывающий фрагмент могут находиться в иммуноконъюгате, используемом в способах по данному изобретению. Анти-CD123 антитела или их антигенсвязывающие фрагменты были описаны (см., например, патент США № 10077313 B2, содержание которого включено в данный документ посредством ссылки в полном объеме). Анти-CD123 антитело или его антигенсвязывающий фрагмент может представлять собой антитело huCD123-6Gv4.7 («G4723A») (см. WO 2017/004025, WO 2017/004026 и PCT/US2018/052212, содержание каждого из которых включено в данный документ посредством ссылки в полном их объеме) или может содержать последовательности антитела G4723A, например, как указано ниже в Таблицах 1-3. Например, анти-CD123 антитело или его антигенсвязывающий фрагмент для использования в способах, предложенных в данном документе, могут содержать CDR-1, CDR-2 и CDR-3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащие последовательности SEQ ID NO: 5, 6 и 7, соответственно, и/или CDR-1, CDR-2 и CDR-3 вариабельной области легкой цепи, содержащие последовательности SEQ ID NO: 8, 9 и 10, соответственно. Анти-CD123 антитело или его антигенсвязывающий фрагмент для использования в способах, предложенных в данном документе могут содержать домен вариабельной области тяжелой цепи, содержащий последовательность, представленную в SEQ ID NO: 1. Анти-CD123 антитело или его антигенсвязывающий фрагмент для использования в способах, предложенных в данном документе, могут содержать домен вариабельной области легкой цепи, содержащий последовательность, представленную в SEQ ID NO:2. Анти-CD123 антитело или его антигенсвязывающий фрагмент для использования в способах, предложенных в данном документе, могут содержать домен вариабельной области тяжелой цепи, содержащий последовательность, представленную в SEQ ID NO: 1, и домен вариабельной области легкой цепи, содержащий последовательность, представленную в SEQ ID NO:2. Анти-CD123 антитело или его антигенсвязывающий фрагмент для использования в способах, предложенных в данном документе, могут содержать тяжелую цепь, содержащую последовательность, представленную в SEQ ID NO:3. Анти-CD123 антитело или его антигенсвязывающий фрагмент для использования в способах, предложенных в данном документе могут содержать легкую цепь, содержащую последовательность, представленную в SEQ ID NO:4. Анти-CD123 антитело или его антигенсвязывающий фрагмент для использования в способах, предложенных в данном документе, могут содержать тяжелую цепь, содержащую последовательность, представленную в SEQ ID NO:3, и легкую цепь, содержащую последовательность, представленную в SEQ ID NO:4.

Таблица 1. Вариабельные области тяжелой и легкой цепей huCD123-6Gv4.7

Название Последовательность Вариабельная область тяжелой цепи huCD123-6Gv7 Вариабельная область легкой цепи huCD123-6Gv4
(SEQ ID NO:2)

Таблица 2. Полноразмерные тяжелая и легкая цепи huCD123-6Gv4.7-C442

Название Последовательность Полноразмерная тяжелая цепь huCD123-6Gv7-C442
Полноразмерная легкая цепь huCD123-6Gv4

Таблица 3. Определяющие комплементарность участки вариабельных областей тяжелой и легкой цепей huCD123-6Gv4.7

Название Последовательность CDR1 вариабельной области тяжелой цепи huCD123-6Gv7 SSIMH (SEQ ID NO:5) CDR2 вариабельной области тяжелой цепи huCD123-6Gv7 YIKPYNDGTKYNEKFKG (SEQ ID NO:6) CDR3 вариабельной области тяжелой цепи huCD123-6Gv7 EGGNDYYDTMDY (SEQ ID NO: 7) CDR1 вариабельной области легкой цепи huCD123-6Gv4 RASQDINSYLS (SEQ ID NO: 8) CDR2 вариабельной области легкой цепи huCD123-6Gv4 RVNRLVD (SEQ ID NO:9) CDR3 вариабельной области легкой цепи huCD123-6Gv4 LQYDAFPYT (SEQ ID NO: 10)

[0121] Анти-CD123 антитело или его антигенсвязывающий фрагмент для использования в способах, предложенных в данном документе, может связываться с эпитопом в границах аминокислот 205-346 CD123 человека.

[0122] Анти-CD123 антитело или его антигенсвязывающий фрагмент для использования в способах, предложенных в данном документе, может быть получено рекомбинантными методами. Например, анти-CD123 антитело или его антигенсвязывающий фрагмент для использования в способах, предложенных в данном документе, может продуцироваться в линии клеток млекопитающего, например, в клетках яичника китайского хомячка (CHO).

[0123] Анти-CD123 антитело или его антигенсвязывающий фрагмент для использования в способах, предложенных в данном документе может быть цистеин-модифицированным антителом или фрагментом. Цистеин-модифицированные антитела могут быть ковалентно конъюгированы с цитотоксическими агентами, представляющими интерес, для получения иммуноконъюгатов.

[0124] При использовании в данном документе, выражение «связанный с агентом связывания с клетками» или «связанный с анти-CD123 антителом или фрагментом» относится к молекуле конъюгата, содержащей по меньшей мере один цитотоксический агент, связанный с агентом связывания с клетками, например, анти-CD123 антителом или фрагментом, посредством пригодной связывающей группы или ее прекурсора. Линкеры включают, например, пептидные линкеры.

[0125] Иммуноконъюгат может содержать несколько цитотоксических агентов, связанных с антителом или его антигенсвязывающим фрагментом. Как предусматривается в данном документе, в определенных случаях, от ппримерно 1 до примерно 3 молекул лекарственного средства, например, цитотоксических агентов, связаны с анти-CD123 антителом или его антигенсвязывающим фрагментом. В одном аспекте, иммуноконъюгат содержит 1, 2 или 3 цитотоксических агента на антитело или его антигенсвязывающий фрагмент.

[0126] Композиция, содержащая иммуноконъюгаты, может содержать иммуноконъюгаты с различным количеством связанных цитотоксических агентов на антитело или его антигенсвязывающий фрагмент. Таким образом, композиции, содержащие иммуноконъюгаты, могут содержать среднее число связанных цитотоксических агентов на антитело или его антигенсвязывающий фрагмент. В одном аспекте, фармацевтическая композиция, содержащая анти-CD123 иммуноконъюгаты, содержит от примерно 1 до примерно 3 цитотоксических агентов на анти-CD123 антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, от примерно 1,5 до примерно 2,5 цитотоксических агентов на анти-CD123 антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, от примерно 1,5 до примерно 2,1 цитотоксических агентов на анти-CD123 антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, или от примерно 1,5 до примерно 2,0 цитотоксических агентов на анти-CD123 антитело или его антигенсвязывающий фрагмент.

[0127] В некоторых случаях, фармацевтическая композиция для использования в способах, предложенных в данном документе, содержит анти-CD123 иммуноконъюгаты, содержащие от примерно 1 до примерно 3 цитотоксических агентов на антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, например, в которых среднее число цитотоксических агентов на антитело или его антигенсвязывающий фрагмент составляет от примерно 1 до примерно 3 (например, 1,0, 1,1, 1,2, 1,3, 1,4, 1,5, 1,6, 1,7, 1,8, 1,9, 2,0, 2,1, 2,2, 2,3, 2,4, 2,5, 2,6, 2,7, 2,8, 2,9, 3,0).

[0128] В некоторых случаях, фармацевтическая композиция для использования в способах, предложенных в данном документе, содержит анти-CD123 иммуноконъюгаты, содержащие в среднем примерно 1 ± 0,2, примерно 1,1 ± 0,2, примерно 1,2 ± 0,2, примерно 1,3 ± 0,2, примерно 1,4 ± 0,2, примерно 1,5 ± 0,2, примерно 1,6 ± 0,2, примерно 1,7 ± 0,2, примерно 1,8 ± 0,2, примерно 1,9 ± 0,2, примерно 2,0 ± 0,2, примерно 2,1 ± 0,2, 2,2 ± 0,2, 2,3 ± 0,2, 2,4 ± 0,2, 2,5 ± 0,2, или 2,6 ± 0,2 присоединенных молекул лекарственного средства (например, цитотоксических агентов) на антитело или его антигенсвязывающий фрагмент. В определенных аспектах, фармацевтическая композиция, предусматриваемая в данном документе, содержит анти-CD123 иммуноконъюгаты, содержащие в среднем от примерно 1,5 до 2,1 молекул лекарственного средства (например, цитотоксических агентов) на антитело.

[0129] Антитела или их антигенсвязывающие фрагменты для использования в данном изобретении могут быть связаны с цитотоксическими агентами, например, посредством связи с аминогруппой боковой цепи Lys, тиольной группой боковой цепи Cys, или окисленным N-концом Ser/Thr. Цитотоксичные аагенты включают, например, ДНК-алкилирующие агенты такие как индолинобензодиазепиновые (IGN) ДНК-алкиляторы. В некоторых случаях, анти-CD123 иммуноконъюгат для использования в данном изобретении содержит DGN549-C.

Области применения и способы

[0130] Анти-CD123-иммуноконъюгаты являются полезными, например, при лечении гематологических злокачественных опухолей. Соответственно, данное изобретение относится к схеме введения доз анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) пациенту для лечения гематологической злокачественной опухоли. Лечение может приводить к снижению количества бластов костного мозга.

[0131] В определенных вариантах реализации, анти-CD123 иммуноконъюгат (например, IMGN632) вводят один раз за трехнедельный (21-дневный) цикл. В определенных вариантах реализации, анти-CD123 иммуноконъюгат (например, IMGN632) вводят три раза за трехнедельный цикл, например, в День 1, День 4 и День 8 21-дневного цикла.

[0132] В определенных вариантах реализации, один цикл лечения является терапевтически эффективным. В определенных вариантах реализации, два цикла лечения являются терапевтически эффективными. В определенных вариантах реализации, от одного до четырех циклов лечения являются терапевтически эффективными.

[0133] В некоторых вариантах реализации, пациенты могут проходить один трехнедельный (21-дневный) цикл лечения, например, при котором иммуноконъюгат вводят один раз за трехнедельный цикл или три раза за трехнедельный цикл. В некоторых вариантах реализации, пациенты могут проходить по меньшей мере два трехнедельных (21-дневных) цикла лечения, например, при которых иммуноконъюгат вводят один раз за трехнедельный цикл или три раза за трехнедельный цикл. В некоторых вариантах реализации, пациенты могут проходить по меньшей мере три трехнедельных (21-дневных) цикла лечения, например, при которых иммуноконъюгат вводят один раз за трехнедельный цикл или три раза за трехнедельный цикл. В некоторых вариантах реализации, пациенты могут проходить по меньшей мере четыре трехнедельных (21-дневных) цикла лечения, например, при которых иммуноконъюгат вводят один раз за трехнедельный цикл или три раза за трехнедельный цикл. В некоторых вариантах реализации, пациенты могут проходить по меньшей мере пять трехнедельных (21-дневных) циклов лечения, например, при которых иммуноконъюгат вводят один раз за трехнедельный цикл или три раза за трехнедельный цикл. В некоторых вариантах реализации, пациенты могут проходить по меньшей мере шесть трехнедельных (21-дневных) циклов лечения, например, при которых иммуноконъюгат вводят один раз за трехнедельный цикл или три раза за трехнедельный цикл. В некоторых вариантах реализации, пациенты могут проходить по меньшей мере семь трехнедельных (21-дневных) циклов лечения, например, при которых иммуноконъюгат вводят один раз за трехнедельный цикл или три раза за трехнедельный цикл. В некоторых вариантах реализации, пациенты могут проходить по меньшей мере восемь трехнедельных (21-дневных) циклов лечения, например, при которых иммуноконъюгат вводят один раз за трехнедельный цикл или три раза за трехнедельный цикл. В некоторых вариантах реализации, пациенты могут проходить по меньшей мере девять трехнедельных (21-дневных) циклов лечения, например, при которых иммуноконъюгат вводят один раз за трехнедельный цикл или три раза за трехнедельный цикл. В некоторых вариантах реализации, пациенты могут проходить по меньшей мере десять трехнедельных (21-дневных) циклов лечения, например, при которых иммуноконъюгат вводят один раз за трехнедельный цикл или три раза за трехнедельный цикл.

[0134] В некоторых вариантах реализации, пациенты могут проходить от одного до десяти трехнедельных (21-дневных) циклов лечения, например, при которых иммуноконъюгат вводят один раз за трехнедельный цикл или три раза за трехнедельный цикл. В некоторых вариантах реализации, пациенты могут проходить от двух до десяти трехнедельных (21-дневных) циклов лечения, например, при которых иммуноконъюгат вводят один раз за трехнедельный цикл или три раза за трехнедельный цикл. В некоторых вариантах реализации, пациенты могут проходить от трех до десяти трехнедельных (21-дневных) циклов лечения, например, при которых иммуноконъюгат вводят один раз за трехнедельный цикл или три раза за трехнедельный цикл. В некоторых вариантах реализации, пациенты могут проходить от четырех до десяти трехнедельных (21-дневных) циклов лечения, например, при которых иммуноконъюгат вводят один раз за трехнедельный цикл или три раза за трехнедельный цикл. В некоторых вариантах реализации, пациенты могут проходить от пяти до десяти трехнедельных (21-дневных) циклов лечения, например, при которых иммуноконъюгат вводят один раз за трехнедельный цикл или три раза за трехнедельный цикл.

[0135] В определенных вариантах реализации, от примерно 0,015 мг/кг до примерно 1,0 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят один раз за трехнедельный (21-дневный) цикл.

[0136] В определенных вариантах реализации, от примерно 0,015 мг/кг до примерно 0,18 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят один раз за трехнедельный (21-дневный) цикл.

[0137] В определенных вариантах реализации, от 0,045 мг/кг до 0,18 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят один раз за трехнедельный (21-дневный) цикл.

[0138] В определенных вариантах реализации, от примерно 0,045 мг/кг до 0,3 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят один раз за трехнедельный (21-дневный) цикл. В определенных вариантах реализации, от примерно 0,045 мг/кг до менее чем 0,3 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят один раз за трехнедельный (21-дневный) цикл. В определенных вариантах реализации, от по меньшей мере 0,045 мг/кг до менее чем 0,3 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят один раз за трехнедельный (21-дневный) цикл. В определенных вариантах реализации, от 0,045 мг/кг до 0,25 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят один раз за трехнедельный (21-дневный) цикл. В определенных вариантах реализации, от 0,045 мг/кг до 0,2 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят один раз за трехнедельный (21-дневный) цикл. В определенных вариантах реализации, от 0,045 мг/кг до 0,09 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят один раз за трехнедельный (21-дневный) цикл.

[0139] В определенных вариантах реализации, от примерно 0,18 мг/кг до 0,3 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят один раз за трехнедельный (21-дневный) цикл. В определенных вариантах реализации, от примерно 0,18 мг/кг до менее чем 0,3 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят один раз за трехнедельный (21-дневный) цикл. В определенных вариантах реализации, от по меньшей мере 0,18 мг/кг до менее чем 0,3 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят один раз за трехнедельный (21-дневный) цикл. В определенных вариантах реализации, от 0,18 мг/кг до 0,25 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят один раз за трехнедельный (21-дневный) цикл. В определенных вариантах реализации, от 0,18 мг/кг до 0,2 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят один раз за трехнедельный (21-дневный) цикл.

[0140] В определенных вариантах реализации, примерно 0,015 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят один раз за трехнедельный (21-дневный) цикл. В определенных вариантах реализации, примерно 0,045 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят один раз за трехнедельный (21-дневный) цикл. В определенных вариантах реализации, примерно 0,09 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят один раз за трехнедельный (21-дневный) цикл. В определенных вариантах реализации, примерно 0,135 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят один раз за трехнедельный (21-дневный) цикл. В определенных вариантах реализации, примерно 0,18 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят один раз за трехнедельный (21-дневный) цикл. В определенных вариантах реализации, примерно 0,3 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят один раз за трехнедельный (21-дневный) цикл. В определенных вариантах реализации, примерно 0,45 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят один раз за трехнедельный (21-дневный) цикл. В определенных вариантах реализации, примерно 0,67 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят один раз за трехнедельный (21-дневный) цикл. В определенных вариантах реализации, примерно 1,0 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят один раз за трехнедельный (21-дневный) цикл.

[0141] В определенных вариантах реализации, примерно 0,19 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят один раз за трехнедельный (21-дневный) цикл. В определенных вариантах реализации, примерно 0,2 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят один раз за трехнедельный (21-дневный) цикл. В определенных вариантах реализации, примерно 0,21 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят один раз за трехнедельный (21-дневный) цикл. В определенных вариантах реализации, примерно 0,22 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят один раз за трехнедельный (21-дневный) цикл. В определенных вариантах реализации, примерно 0,23 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят один раз за трехнедельный (21-дневный) цикл. В определенных вариантах реализации, примерно 0,24 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят один раз за трехнедельный (21-дневный) цикл. В определенных вариантах реализации, примерно 0,25 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят один раз за трехнедельный (21-дневный) цикл. В определенных вариантах реализации, примерно 0,26 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят один раз за трехнедельный (21-дневный) цикл. В определенных вариантах реализации, примерно 0,27 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят один раз за трехнедельный (21-дневный) цикл. В определенных вариантах реализации, примерно 0,28 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят один раз за трехнедельный (21-дневный) цикл. В определенных вариантах реализации, примерно 0,29 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят один раз за трехнедельный (21-дневный) цикл.

[0142] В определенных вариантах реализации, от примерно 0,015 мг/кг до примерно 0,09 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят три раза за трехнедельный цикл, например, в День 1, День 4 и День 8 21-дневного цикла. В определенных вариантах реализации, от примерно 0,015 мг/кг до примерно 0,045 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят три раза за трехнедельный цикл, например, в День 1, День 4 и День 8 21-дневного цикла. В определенных вариантах реализации, от примерно 0,015 мг/кг до примерно 0,06 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят три раза за трехнедельный цикл, например, в День 1, День 4 и День 8 21-дневного цикла. В определенных вариантах реализации, от примерно 0,045 мг/кг до примерно 0,09 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят три раза за трехнедельный цикл, например, в День 1, День 4 и День 8 21-дневного цикла.

[0143] В определенных вариантах реализации, примерно 0,015 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят три раза за трехнедельный цикл, например, в День 1, День 4 и День 8 21-дневного цикла. В определенных вариантах реализации, примерно 0,03 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят три раза за трехнедельный цикл, например, в День 1, День 4 и День 8 21-дневного цикла. В определенных вариантах реализации, примерно 0,045 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят три раза за трехнедельный цикл, например, в День 1, День 4 и День 8 21-дневного цикла. В определенных вариантах реализации, примерно 0,06 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят три раза за трехнедельный цикл, например, в День 1, День 4 и День 8 21-дневного цикла. В определенных вариантах реализации, примерно 0,09 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят три раза за трехнедельный цикл, например, в День 1, День 4 и День 8 21-дневного цикла.

[0144] В определенных вариантах реализации, от примерно 0,015 мг/кг до примерно 0,135 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят три раза за трехнедельный цикл, например, в День 1, День 4 и День 8 21-дневного цикла. В определенных вариантах реализации, от примерно 0,045 мг/кг до примерно 0,135 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят три раза за трехнедельный цикл, например, в День 1, День 4 и День 8 21-дневного цикла. В определенных вариантах реализации, примерно 0,135 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят три раза за трехнедельный цикл, например, в День 1, День 4 и День 8 21-дневного цикла.

[0145] В определенных вариантах реализации, от примерно 0,015 мг/кг до примерно 0,09 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят два раза за трехнедельный цикл, например, в День 1 и День 8 21-дневного цикла. В определенных вариантах реализации, от примерно 0,015 мг/кг до примерно 0,045 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят два раза за трехнедельный цикл, например, в День 1 и День 8 21-дневного цикла. В определенных вариантах реализации, от примерно 0,045 мг/кг до примерно 0,09 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят два раза за трехнедельный цикл, например, в День 1 и День 8 21-дневного цикла.

[0146] В определенных вариантах реализации, примерно 0,015 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят два раза за трехнедельный цикл, например, в День 1 и День 8 21-дневного цикла. В определенных вариантах реализации, примерно 0,045 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят два раза за трехнедельный цикл, например, в День 1 и День 8 21-дневного цикла. В определенных вариантах реализации, примерно 0,09 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят два раза за трехнедельный цикл, например, в День 1 и День 8 21-дневного цикла.

[0147] В определенных вариантах реализации, от примерно 0,015 мг/кг до примерно 0,135 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят два раза за трехнедельный цикл, например, в День 1 и День 8 21-дневного цикла. В определенных вариантах реализации, от примерно 0,045 мг/кг до примерно 0,135 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят два раза за трехнедельный цикл, например, в День 1 и День 8 21-дневного цикла. В определенных вариантах реализации, примерно 0,135 мг/кг анти-CD123 иммуноконъюгата (например, IMGN632) вводят два раза за трехнедельный цикл, например, в День 1 и День 8 21-дневного цикла.

[0148] Режимы введения, предусматриваемые в данном документе, могут быть использованы для лечения гематологической злокачественной опухоли у человека, например, способом, включающим введение субъекту терапевтически эффективного количества CD123-связывающего агента (например, субъекту, нуждающемуся в лечении). В некоторых вариантах реализации, гематологическая злокачественная опухоль имеет миелоидное происхождение. В некоторых вариантах реализации, гематологическая злокачественная опухоль имеет лимфоидное происхождение. В некоторых вариантах реализации, гематологическая злокачественная опухоль имеет как миелоидное, так и лимфоидное происхождение. В определенных вариантах реализации, гематологическая злокачественная опухоль представляет собой B-клеточную злокачественную опухоль. В определенных вариантах реализации, гематологическая злокачественная опухоль представляет собой CD123-экспрессирующую гематологическую злокачественную опухоль. В определенных вариантах реализации, гематологическую злокачественную опухоль выбирают из группы, состоящей из острого миелоидного лейкоза (ОМЛ), миелодиспластического синдрома (МДС), острого лимфобластного лейкоза (ОЛЛ), B-клеточного острого лимфобластного лейкоза (B-ОЛЛ), T-клеточного острого лимфобластного лейкоза (T ОЛЛ), хронического миелоидного лейкоза в бластном кризе/фазе (БК-ХМЛ) и бластной плазмацитоидной дендритноклеточной неоплазмы (БПДН).

[0149] В определенных вариантах реализации, гематологическая злокачественная опухоль представляет собой рецидивирующую гематологическую злокачественную опухоль. В определенных вариантах реализации, рецидив представляет собой первый рецидив. В определенных вариантах реализации, гематологическая злокачественная опухоль представляет собой рефрактерную гематологическую злокачественную опухоль. В определенных вариантах реализации, гематологическая злокачественная опухоль представляет собой первичную рефрактерную гематологическую злокачественную опухоль.

[0150] В определенных вариантах реализации, гематологическая злокачественная опухоль представляет собой ОМЛ. В определенных вариантах реализации, ОМЛ представляет собой рецидивирующий ОМЛ. В определенных вариантах реализации, ОМЛ представляет собой рефрактерный ОМЛ. В определенных вариантах реализации, ОМЛ не является вторичным ОМЛ. В определенных вариантах реализации, субъект с ОМЛ является педиатрическим пациентом.

[0151] В определенных вариантах реализации, гематологическая злокачественная опухоль представляет собой БПДН. В определенных вариантах реализации, БПДН представляет собой рецидивирующую БПДН. В определенных вариантах реализации, БПДН представляет собой рефрактерную БПДН. В определенных вариантах реализации, БПДН представляет собой БПДН первой линии. Пациенты с БПДН первой линии (1L) определяются как (i) непригодные для интенсивной химиотерапии и/или (ii) непригодные для других одобренных нацеленных на CD123 терапий, например, SL-401. В определенных вариантах реализации, субъект с БПДН является педиатрическим пациентом.

[0152] В определенных вариантах реализации, гематологическая злокачественная опухоль представляет собой ОЛЛ. В определенных вариантах реализации, ОЛЛ представляет собой рецидивирующий ОЛЛ. В определенных вариантах реализации, ОЛЛ представляет собой рефрактерный ОЛЛ. В определенных вариантах реализации, субъект с ОЛЛ является педиатрическим пациентом.

[0153] В определенных вариантах реализации, гематологическая злокачественная опухоль представляет собой МДС. В определенных вариантах реализации, МДС представляет собой МДС высокого риска.

[0154] В определенных вариантах реализации, гематологическая злокачественная опухоль представляет собой хронический миеломоноцитарный лейкоз (ХММЛ).

[0155] В определенных вариантах реализации, гематологическая злокачественная опухоль представляет собой миелофиброз (МФ).

[0156] В некоторых вариантах реализации, субъект является педиатрическим пациентом. Педиатрический пациент имеет возраст менее 18 лет. В некоторых вариантах реализации, педиатрический пациент имеет возраст по меньшей мере 2 года и менее 18 лет.

[0157] В некоторых вариантах реализации, субъект имеет оценку функционального статуса по шкале Восточной кооперативной онкологической группы (ECOG) ≤1.

[0158] В некоторых вариантах реализации, субъект имеет неблагоприятную оценку генетического риска по классификации Европейской сети по изучению лейкозов (ELN), например, мутацию ASXL1, RUNX1 и/или FLT3-ITD. В некоторых вариантах реализации, субъект ранее получал неудачное лечение SL-401. В некоторых вариантах реализации, гематологическая злокачественная опухоль является рефрактерной к CLAG-M.

[0159] В определенных вариантах реализации, гематологическая злокачественная опухоль является устойчивой к химиотерапии.

[0160] В определенных вариантах реализации, гематологическая злокачественная опухоль является чувствительной к химиотерапии.

[0161] В некоторых вариантах реализации, по меньшей мере примерно 80% клеток гематологической злокачественной опухоли являются CD123+.

[0162] В некоторых вариантах реализации, было определено до введения, что по меньшей мере 80% клеток гематологической злокачественной опухоли являются CD123+.

[0163] В некоторых случаях, субъект получал по меньшей мере одну предшествующую схему лечения рака. В некоторых случаях, субъект получал одну предшествующую схему лечения рака. В некоторых случаях, субъект получал две предшествующие схемы лечения рака. В некоторых случаях, субъект получал две предшествующие схемы лечения рака. В некоторых случаях, субъект получал не более шести предшествующих схем лечения рака. В некоторых случаях, субъект получал по меньшей мере одно предшествующее лечение, но не более шести предшествующих схем лечения рака. В некоторых случаях, субъект получал не более трех предшествующих схем лечения рака. В некоторых случаях, субъект получал по меньшей мере одно предшествующее лечение, но не более трех предшествующих схем лечения рака. В некоторых вариантах реализации, субъект ранее получал трансплантацию стволовых клеток.

[0164] Как предусматривается в данном документе, анти-CD123 иммуноконъюгаты могут быть введены в фармацевтической композиции. В некоторых случаях, фармацевтическая композиция содержит анти-CD123 иммуноконъюгаты (например, IMGN632) и фармацевтически приемлемый носитель. Соответственно, в данном документе предусматриваются способы введения фармацевтических композиций, содержащих анти-CD123 иммуноконъюгаты (например, IMGN632), имеющие желаемую степень чистоты, в физиологически приемлемом носителе, эксципиенте или стабилизаторе (Remington's Pharmaceutical Sciences (1990) Mack Publishing Co., Easton, PA). Приемлемые носители, эксципиенты или стабилизаторы являются нетоксичными для реципиентов в используемых дозировках и концентрациях (см., например, Gennaro, Remington: The Science and Practice of Pharmacy with Facts and Comparisons: Drugfacts Plus, 20th ed. (2003); Ansel et al., Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems, 7th ed., Lippencott Williams and Wilkins (2004); Kibbe et al., Handbook of Pharmaceutical Excipients, 3rd ed., Pharmaceutical Press (2000)). Указанные композиции, предназначенные для использования путем in vivo введения, могут быть стерильными. Это может быть легко обеспечено путем фильтрации через, например, мембраны для стерильной фильтрации.

[0165] В некоторых вариантах реализации, пациенты, получающие анти-CD123 иммуноконъюгат, как раскрыто в данном документе, получают предварительное лечение кортикостероидом. Соответственно, в некоторых вариантах реализации, способы, предусматриваемые в данном документе, включают введение пациенту кортикостероида перед введением пациенту анти-CD123 иммуноконъюгата. В некоторых случаях, кортикостероид может быть выбран из группы, состоящей из преднизона, преднизолона, метилпреднизолона, бекламетазона, бетаметазона, дексаметазона, флудрокортизона, гидрокортизона и триамцинолона. В некоторых случаях кортикостероид вводят внутривенно. В некоторых случаях, стероид вводят перорально.

[0166] Например, в некоторых вариантах реализации, пациенты, получающие анти-CD123 иммуноконъюгат, как раскрыто в данном документе, получают предварительное лечение дифенгидрамином. В некоторых вариантах реализации, пациенты, получающие анти-CD123 иммуноконъюгат, как раскрыто в данном документе, получают предварительное лечение 25-50 мг дифенгидрамина. В некоторых вариантах реализации, дифенгидрамин вводят внутривенно. В некоторых вариантах реализации, дифенгидрамин вводят перорально. Соответственно, в некоторых вариантах реализации, способы, предусматриваемые в данном документе, включают введение пациенту дифенгидрамина перед введением пациенту анти-CD123 иммуноконъюгата.

[0167] В некоторых вариантах реализации, пациенты, получающие анти-CD123 иммуноконъюгат, как раскрыто в данном документе, получают предварительное лечение ацетаминофеном. В некоторых вариантах реализации, пациенты, получающие анти-CD123 иммуноконъюгат, как раскрыто в данном документе, получают предварительное лечение 325-650 мг ацетаминофена. В некоторых вариантах реализации, ацетаминофен вводят внутривенно. В некоторых вариантах реализации, ацетаминофен вводят перорально. Соответственно, в некоторых вариантах реализации, способы, предусматриваемые в данном документе, включают введение пациенту ацетаминофена перед введением пациенту анти-CD123 иммуноконъюгата.

[0168] В некоторых вариантах реализации, пациенты, получающие анти-CD123 иммуноконъюгат, как раскрыто в данном документе, получают предварительное лечение парацетамолом. В некоторых вариантах реализации, пациенты, получающие анти-CD123 иммуноконъюгат, как раскрыто в данном документе, получают предварительное лечение 325-650 мг парацетамола. В некоторых вариантах реализации, парацетамол вводят внутривенно. В некоторых вариантах реализации, парацетамол вводят перорально. Соответственно, в некоторых вариантах реализации, способы, предусматриваемые в данном документе, включают введение пациенту парацетамола перед введением пациенту анти-CD123 иммуноконъюгата.

[0169] В некоторых вариантах реализации, пациенты, получающие анти-CD123 иммуноконъюгат, как раскрыто в данном документе, получают предварительное лечение дексаметазоном. В некоторых вариантах реализации, пациенты, получающие анти-CD123 иммуноконъюгат, как раскрыто в данном документе, получают предварительное лечение 8 мг дексаметазона. В некоторых вариантах реализации, дексаметазон вводят внутривенно. В некоторых вариантах реализации, дексаметазон вводят перорально. Соответственно, в некоторых вариантах реализации, способы, предусматриваемые в данном документе, включают введение пациенту дексаметазон перед введением пациенту анти-CD123 иммуноконъюгата.

ПРИМЕРЫ

[0170] Подразумевается, что примеры и варианты реализации, описанные в данном документе, предназначены только для иллюстративных целей, и что различные их модификации или изменения, которые могут быть предложены квалифицированными специалистами в данной области техники, должны быть включены в дух и объем данной заявки.

Пример 1:

Дизайн клинического исследования фазы 1

[0171] Многоцентровое открытое исследование IMGN632 фазы 1 было разработано для оценки эффектов внутривенного введения IMGN632 взрослым пациентам с рекуррентным или рецидивирующим CD123+ ОМЛ и другими CD123+ гематологическими злокачественными опухолями. Схема исследований фазы 1 представлена на Фиг. 1. Дизайн исследования включал фазу эскалации дозы для определения максимально переносимой дозы (МПД), и затем расширенные когорты получали лечение при МПД. Как описано более подробно ниже, фаза эскалации дозы включала две схемы введения. По Схеме A, IMGN632 вводили внутривенно через каждые три недели (раз в 3 недели, Q3W) в День 1 каждого 21-дневного цикла. По Схеме B, IMGN632 вводят внутривенно два или три раза через каждые три недели, т.е. в Дни 1 и 8 каждого 21-дневного цикла или в Дни 1, 4 и 7 каждого 21-дневного цикла.

Субъекты

[0172] Пациентов с рекуррентным или рецидивирующим CD123+ ОМЛ или БПДН по когортам идентифицируют на основании следующих критериев включения и исключения.

Критерии включения:

• Пациенты при эскалации дозы и во всех расширенных когортах, за исключением первого рецидива ОМЛ, могли получать до трех предшествующих линий терапии. Пациенты с рецидивирующим ОМЛ (только для применения ранее установленной максимальной переносимой дозы в расширенной популяции) получали до двух предшествующих линий терапии.

• Эскалация дозы - Рецидивирующий или рефрактерный ОМЛ (за исключением острого промиелоцитарного лейкоза) или БПДН, на основании классификации Всемирной организации здравоохранения. Все пациенты, зачисленные в эти исследования, имели CD123+ заболевание.

• Когорта расширенного применения дозы №1 - Пациенты с рецидивом CD123+ БПДН. Пациенты с предшествующими Cd123-нацеливающими агентами допускаются, при условии, что бласты сохраняют детектируемую экспрессию CD123.

• Когорта расширенного применения дозы №2 - Пациенты с первым рецидивом CD123+ ОМЛ.

• Когорта расширенного применения дозы №3 - Пациенты с рецидивом CD123+ ОЛЛ.

• Когорта расширенного применения дозы №4 - Пациенты с рецидивом CD123+ «других» гематологических злокачественных опухолей, не включенные в вышеуказанные когорты (например, МДС высокого риска/очень высокого риска, миелопролиферативные новообразования (MPN), ХММЛ, ХМЛ с бластным кризом). Могут быть рассмотрены другие CD123+ злокачественные опухоли.

Критерии исключения:

• Исключаются пациенты с доступными терапиями стандартного лечения.

• Исключаются пациенты с ОМЛ с активным заболеванием центральной нервной системы (ЦНС).

• Исключаются пациенты с историей веноокклюзионной болезни печени.

• Пациенты с историей синдрома повышенной проницаемости капилляров 3-4 степени или экстракардиального отека не включались в исследования, например, связанные с SL-401 или другой этиологией исключаются.

• Исключаются пациенты с инфарктом миокарда в течение шести месяцев, предшествующих набору участников, или с сердечной недостаточностью класса III или IV Нью-Йоркской кардиологической ассоциации, неконтролируемой стенокардией, тяжелыми неконтролируемыми желудочковыми аритмиями, или электрокардиографически подтверждаемой острой ишемией или активными аномалиями проводящей системы в период, предшествующий включению в исследование.

• Исключаются пациенты, получавшие любую противораковую терапию, включая химиотерапию, иммунотерапию, радиотерапию, гормональными, биологическими или любыми исследовательскими агентами на протяжении 14 дней или пяти периодов полувыведения, в зависимости от того, что из них больше (за исключением гидроксимочевины), предшествующих введению лекарственного средства данного исследования.

Лечение

[0173] Пациенты получали схему премедикации перед каждой инфузией IMGN632. Премедикация включает (i) 25-50 мг дифенгидрамина (внутривенно (в/в) или перорально [п/о]); (ii) 325-650 мг ацетаминофена или парацетамола (в/в или п/о) и/или (iii) 8 мг дексаметазона (п/о или в/в). Если индивидуальным пациентам требовалось более интенсивное или альтернативное лечение для предотвращения инфузионных реакций (например, другой кортикостероид, другая доза любого агента), то схема могла быть модифицирована в соответствии со стандартной установленной практикой.

[0174] Планируемое лечение состояло из двух циклов (т.е., в общей сложности шесть недель), причем вторые дозы вводились пациентам через по меньшей мере 21 день после их первых доз. Дополнительные циклы, например, до 10 или больше в общей сложности, могут вводиться пациентам, получающим полезный эффект от такой схемы.

[0175] В целях данного исследования, период проведения наблюдений безопасности продолжался с того момента, когда пациент давал информированное согласие на участие в исследовании, до последнего визита к врачу в рамках наблюдений безопасности. Пациенты, которые выходили из исследований по причинам, отличным от прогрессирования заболевания (ПЗ), проходили процедуры оценки заболевания (аспираты костного мозга или анализы крови [клинический анализ крови с подсчётом форменных элементов]) через каждые 12 недель (± три недели) до документального подтверждения ПЗ, начала проведения последующей противораковой терапии, или на протяжении одного года с момента последней оценки их опухоли, в зависимости от того, что наступит раньше. После документального подтверждения ПЗ или начала проведения новой противораковой терапии, с пациентом связываются каждые 12 недель (± три недели) с целью последующего проведения противораковой терапии, а также для определения выживаемости до одного года после первой дозы исследуемого препарата (IMGN632) для последнего пациента.

Фармакокинетические анализы

[0176] Образцы крови брали в предварительно определенные моменты времени для оценки фармакокинетики (ФК) IMGN632, общего содержания антитела и свободной полезной нагрузки. Также оценивали метаболиты IMGN632.

Оценки безопасности

[0177] Безопасность оценивают по зарегистрированным/вызванным нежелательным явлениям (НЯ), результатам лабораторных исследований, включая гематологию и биохимический анализ крови, основным жизненным показателям, физикальному обследованию и электрокардиограмме/эхокардиограмме, по показаниям. Оценка НЯ, возникших на фоне лечения (НЯФЛ), включала серьезные НЯ (СНЯ), НЯ, приводящие к прекращению приема исследуемого лекарственного средства, и НЯ, связанные с исследуемым лекарственным средством. Все НЯ, возникающие с момента информированного согласия до 30 дней после последнего введения исследуемого лекарственного средства, регистрировались, независимо от серьезности, тяжести или связи с исследуемым лекарственным средством.

[0178] Пациенты, у которых развивалась дозолимитирующая токсичность (ДЛТ), могли продолжать лечение при пониженном уровне дозы (как минимум, снижение по меньшей мере одной дозы), если НЯФЛ возвращались к исходному уровню или снижались до ≤2 степени. Определения ДЛТ приведены в Таблице 4 ниже.

Таблица 4: Дозолимитирующие токсичности (ДЛТ) и нежелательные явления (НЯ)

ТОКСИЧНОСТЬ КРИТЕРИИ Гематология Невозможность восстановления абсолютного количества нейтрофилов (АКН) ≥0,5×109/л и/или количества тромбоцитов ≥25×109/л, когда в остальном показатели костного мозга указывают на ремиссию к дню 42 после первого дня IMGN632.
Аплазия (т.е., клеточность костного мозга <5%), которая не восстанавливается в течение 42 дней после первого дня IMGN632.
Отсутствие восстановления количественных показателей при продемонстрированной активности костного мозга не считается ДЛТ. Желудочно-кишечные Рвота или тошнота ≥3 степени по Общей терминологии критериев нежелательных явлений (CTCAE) несмотря на использование оптимальных противорвотных средств.
Диарея ≥3 степени по CTCAE несмотря на использование оптимальных противодиарейных средств Почечные Креатин сыворотки ≥3,0 × верхний предел нормы [ВПН] (за исключением отдельных повышений - см. ниже) Печеночные Билирубин, аланинаминотрансфераза (АЛТ) или аспартатаминотрансфераза (АСТ) ≥5 × ВПН (за исключением отдельных повышений - см. ниже)
Для любой дозолимитирующей печеночной токсичности необходимо проводить оценку для определения лежащей в основе этиологии и исключения вызванного лекарственными средствами повреждения печени (закон Хая). Нежелательные явления, НЕ являющиеся ДЛТ Усталость, астения, анорексия, лихорадка или запор 3 степени
Тошнота, рвота или диарея 3 степени, не требующие энтерального кормления через зонд, полностью парентерального питания (ППП) или госпитализации
Инфекция 3 или 4 степени, кровотечение или другие ожидаемые прямые осложнения цитопений вследствие активного лейкоза
Фебрильная нейтропения 3 или 4 степени
Инфузионная реакция 3 степени, включая синдром высвобождения цитокинов (СВЦ), в случае успешного ведения, и которая разрешается в течение 72 часов
Синдром лизиса опухоли (СЛО) 3 или 4 степени, при успешном клиническом ведении, и разрешающийся в течение 7 дней без ишемического поражения органов Другие нежелательные явления Негематологические токсичности ≥3 степени по CTCAE рассматриваются как ДЛТ, ЗА ИСКЛЮЧЕНИЕМ отдельных повышений до 3 степени лабораторных биохимических показателей без ассоциированных клинических симптомов, которые разрешаются до ≤1 степени или исходных значений за ≤7 дней. Они включают электролитные аномалии, которые реагируют на медицинское вмешательство.

Противоопухолевая активность

[0179] Проводят оценки ответа для определения дифференциальных показателей и биомаркеров на аспиратах костного мозга, взятых в День 21 ± 7 дней Цикла 1. Последующие аспираты костного мозга берут приблизительно каждые 1-2 цикла, по клиническим показаниям, и при контрольном посещении врача через 30 дней. Собирают данные в случае, когда взятие аспиратов костного мозга осуществляется чаще. Повторные пробы костного мозга не требуются, если отсутствие ответа (ПР без минимального остаточного заболевания [ПВМОЗ-], ПР, ПР с частичным выздоровлением [ЧВ], клиническая ПР [только ПКР; БПДН], или частичная ремиссия/ответ [ЧР]) или ПЗ будет однозначно диагностировано на основании анализов периферической крови, или если исследователь считает анализ костного мозга неинформативным в какой-либо момент времени.

Пример 2:

Схема A - Введение IMGN632 один раз за 21-дневный цикл

[0180] Начальная доза IMGN632 в Схеме A составляет 0,015 мг/кг. Дозы от 0,015 мг/кг до 1,0 мг/кг были определены, как описано в Таблице 5.

Таблица 5: Планируемые когорты эскалации дозы Схемы А

Когорты эскалации дозы IMGN632 (мг/кг/дозу) Кратность увеличения дозы по сравнению с предшествующим уровнем дозы 1 0,015 - 2 0,045 3 3 0,09 2 4 0,18 2 5 0,3 1,67 6 0,45 1,5 7 0,67 1,5 8 1,0 1,5

Результаты

Критерии ответа на ОМЛ и другие гемовые злокачественные опухоли, за исключением БПДН:

[0181] Для пациентов с ОМЛ и другими гемовыми злокачественными опухолями, за исключением БПДН, субъектов оценивали как имеющих (i) полную ремиссию (ПР) без минимального остаточного заболевания (ПВМОЗ-); (ii) полную ремиссию, (iii) полную ремиссию с частичным выздоровлением (ЧВ); (iv) состояние без морфологического лейкоза; (v) частичную ремиссию (ЧР); (vi) рецидив после полного ответа; (vii) стабильное заболевание (СЗ); или (viii) прогрессирующее заболевание (ПЗ). Пациентов также оценивали как имеющих ПРг.

[0182] Полная ремиссия (ПР) для ОМЛ и других гемовых злокачественных опухолей, за исключением БПДН, требует все из следующих показателей: морфологическая ПР <5% бластов; абсолютное количество нейтрофилов >1000/мкл; тромбоциты ≥100000/мкл; пациент не зависит от трансфузий; отсутствие данных об остаточном активном экстрамедуллярном заболевании; и МОЗ+ или неизвестно.

[0183] ПР без минимального остаточного заболевания (ПВМОЗ-) для ОМЛ и других гемовых злокачественных опухолей, за исключением БПДН, включает все критерии для ПР с негативностью к генетическому маркеру при определении методом ОТ-кПЦР, или ПР с негативностью методом многопараметрической проточной цитометрии (МПЦ).

[0184] Полная ремиссия с частичным выздоровлением (ЧВ) для ОМЛ и других гемовых злокачественных опухолей, за исключением БПДН, удовлетворяет требованиям для ПР, за исключением АКН <1000/мкл или тромбоцитам <100000/мкл.

[0185] Состояние без морфологического лейкоза для ОМЛ и других гемовых злокачественных опухолей, за исключением БПДН, включает костный мозг с <5% бластов в аспирате со спикулами; отсутствие бластов с палочками Ауэра или персистенция экстрамедуллярного заболевания; и костный мозг должен быть не просто «апластичным»; по меньшей мере 200 клеток должно быть пересчитано или клеточность должна составлять по меньшей мере 10%.

[0186] Частичная ремиссия (ЧР) для ОМЛ и других гемовых злокачественных опухолей, за исключением БПДН, включает снижение на по меньшей мере 50% процента бластов до 5-25% в аспирате костного мозга и нормализацию числа форменных элементов крови, как указано выше.

[0187] Рецидив после полного ответа для ОМЛ и других гемовых злокачественных опухолей, за исключением БПДН, определяется как повторное появление лейкозных бластов в периферической крови или обнаружение более чем 5% бластов в костном мозге, не объяснимых другими причинами (например, регенерацией костного мозга после закрепляющего лечения (или экстрамедуллярный рецидив).

[0188] Стабильное заболевание (СЗ) для ОМЛ и других гемовых злокачественных опухолей, за исключением БПДН, определяется как отсутствие ПВМОЗ-, ПР, ЧВ, ЧР, состояния без морфологического лейкоза (MLFS); и несоответствие критериям ПЗ.

[0189] Прогрессирующее заболевание (ПЗ) для ОМЛ и других гемовых злокачественных опухолей, за исключением БПДН, включает наличие данных об увеличении процента бластов в костном мозге и/или увеличении общего количества бластов в крови:

• Усиление или персистентное заболевание костного мозга без по меньшей мере 100% улучшения (т.е., удвоения) АКН до абсолютного уровня (>0,5 × 109/л [500/мкл], и/или количества тромбоцитов до >50 × 109/л [50000/мкл] без трансфузии):

(А) >50% увеличения бластов костного мозга по сравнению с исходным значением (в случаях с исходным количеством бластов <30% требуется увеличение минимум на 15 процентных пунктов ); или

(В) стойкое процентное содержание бластов костного мозга >70% на протяжении по меньшей мере 3 месяцев

• >50% увеличения периферических бластов (лейкоциты × % бластов) до >25×109/л (>25000/мкл) (в отсутствие дифференцировочного синдрома); или

• Новое экстрамедуллярное заболевание.

Критерии ответа для БПДН:

[0190] Для пациентов с БПДН, субъектов оценивали как имеющих ПР; ЧВ; полную клиническую ремиссию (ПКР); ЧР; СЗ; и ПЗ. Пациентов также оценивали как имеющих ПРг.

[0191] Полная ремиссия (ПР) включает нормализацию периферической крови и костного мозга; отсутствие активного заболевания по данным визуализации методами позитрон-эмиссионной томографии/компьютерной томографии; нормальный размер печени и селезенки без активных узелков и отсутствие вовлечения кожи, документально подтвержденное путем обследования и биопсии ранее пораженных участков.

[0192] ЧВ удовлетворяет требованиям к ПР, за исключением АКН <1000/мкл или тромбоцитов <100000/мкл. ПКР удовлетворяет требованиям к ПР, за исключением микроскопического остаточного заболевания кожи.

[0193] ЧР включает снижение бластов костного мозга на более чем 50% (если бласты составляли >10% при зачислении в исследования); снижение более чем на 50% суммы произведений диаметров (СПД) до шести наибольших доминирующих по массе узлов (если они присутствуют в момент зачисления в исследование); отсутствие увеличения в размере других лимфатических узлов; снижение более чем на 50% СПД узелков селезенки или печени (если они присутствуют в момент зачисления в исследование); отсутствие увеличения в размере печени или селезенки; и уменьшение более чем на 50% поражений кожи (если они присутствуют в момент зачисления в исследование).

[0194] СЗ включает недостижение по меньшей мере ЧР у пациентов без вовлечения костного мозга и без признаков прогрессирования заболевания на коже, в лимфатических узлах, печени или селезенке. Наконец, ПЗ включает любые новые лимфатические узлы или новые поражения кожи; ИЛИ увеличение от низшего уровня на >50% СПД любого отдельного ранее вовлеченного лимфатического узла или суммарной оценочной массы лимфатических узлов; ИЛИ увеличение от низшего уровня на >50% СПД узлов печени или селезенки или увеличение на >50% размера печени или селезенки.

Результаты Схемы A

[0195] Пациенты в Когортах 1-6 получали лечение IMGN632 по Схеме A. В качестве критерия эффективности, измеряли у каждого пациента снижение бластов костного мозга. Как изображено на Фиг. 2, пять из 25 оцениваемых пациентов имели формализованные ответы (ПР или ЧВ) и два пациента имели неформализованные ответы (снижение >30%). У некоторых пациентов, ответы наблюдались после только 1 или 2 циклов. У некоторых пациентов, ответы улучшались (например, от ЧВ до ПР) между 2 и 4 циклами лечения.

[0196] Безопасность для пациентов оценивали у пациентов, получавших IMGN632 по Схеме A в Когортах 1-6. У некоторых пациентов были идентифицированы связанные с инфузией реакции. В частности, примерно 50% пациентов продемонстрировали связанные с инфузией реакции 1-2 степени, которые изменялись при премедикации стероидом. В некоторых случаях, у пациентов развивались предполагаемые непредвиденные серьезные нежелательные реакции (SUSAR), включая, в некоторых случаях, например, тахикардию/гипертензию, лихорадку/головную боль. У некоторых пациентов были идентифицированы неежелательные явления 3 степени, включая фебрильную нейтропению, инфекцию легкого и повышенный уровень АЛТ/АСТ. Дозолимитирующие токсичности наблюдались в Когортах 5 и 6. В Когорте 5 также наблюдались миелосупрессия и связанные с инфекцией токсичности у 4 из 5 пациентов, и наблюдалась 1 продолжительная нейтропения (>42 дней). Четыре смерти, произошедшие вскоре после периода ДЛТ, были вызваны связанными с инфекцией осложнениями. В Когорте 6 наблюдались печеночная токсичность (ВОБ) и нейтропения. У двух пациентов в Когорте 5, имевших более 5% бластов до лечения, произошло очищение костного мозга (было достигнуто МОЗ <0,1%), но оба имели пониженное содержание клеток (<5%) и умерли, не достигнув выздоровления. Эти данные подтверждают активность IMGN632, но в контексте избыточной токсичности.

[0197] Сводные результаты, полученные для использования Схемы A в Когортах 1-6, представлены в Таблице 6.

Таблица 6: Обзор результатов Схемы A.

Когорта 1 Когорта 2 Когорта 3 Когорта 4 Когорта 5 Когорта 6 Доза 0,015 мг/кг
(Q3W) 0,045 мг/кг
(Q3W) 0,09 мг/кг
(Q3W) 0,18 мг/кг
(Q3W) 0,3 мг/кг
(Q3W) 0,45 мг/кг
(Q3W) Число пациентов 3 12 8 7 5 2 Результаты ЧВ ПР, ЧВ, ЧР ЧВ ПР ДЛТ: продолжительная нейтропения; 4 смерти, связанные с инфекцией ДЛТ: веноокклюзионная болезнь (ВОБ)

[0198] В дополнительных исследованиях были измерены уровни CD123. Как изображено на Фиг. 3, большинство пациентов имели высокую однородность по CD123 (т.е., по меньшей мере 80% лейкозных клеток у большинства пациентов были CD123+). Кроме того, было измерено среднее насыщение рецепторов CD123. Как изображено на Фиг. 4, полное насыщение наблюдалось для Когорт 3 и выше, но оставалось преходящим у большинства пациентов.

[0199] Были также измерены фармакокинетические (ФК) параметры IMGN632. Как изображено на Фиг. 5, измерения конъюгата антитело-лекарственное средство (ADC) в плазме после разовой внутривенной инфузии в дозах от 0,015 мг/кг до 0,45 мг/кг показывают, что наблюдались (i) устойчивая экспозиция на протяжении 48 часов после инфузии в дозах >0,18 мг/кг; (ii) непрерывное увеличение максимальных концентраций и экспозиции с увеличением дозы; и (iii) согласованные ФК параметры в каждой дозовой когорте и после многократных циклов доз.

[0200] На основании этих результатов, исследования в расширенных когортах проводили с пациентами, получающими дозы 0,045 мг/кг IMGN632 раз в 3 недели (Q3W), 0,09 мг/кг IMGN632 Q3W и 0,18 мг/кг IMGN632 Q3W. Пациенты с АКН <500/мкл получали 0,09 мг/кг IMGN632 Q3W, и пациенты с АКН >500/мкл получали 0,18 мг/кг IMGN632 Q3W.

Пример 3:

Схема B - Многократное введение IMGN632 за 21-дневный цикл

[0201] В Схеме B, IMGN632 вводят равными долями на протяжении трех дней 21-дневного цикла (т.е., в каждый из дней 1, 4 и 8 вводят 1/3 суммарной дозы). Вводили следующие дозы.

Таблица 7: Планируемые когорты эскалации дозы Схемы B

Когорты эскалации дозы Доза IMGN632 на прием Дни введения Суммарная доза за 21-дневный цикл B1 0,015 мг/кг Дни 1, 4 и 8 0,045 мг/кг B2 0,045 мг/кг Дни 1, 4 и 8 0,135 мг/кг B3 0,09 мг/кг Дни 1, 4 и 8 0.27 мг/кг

[0202] Введение дозы в День 4 может быть отменено в День 4, если ФК профиль его не требует. Таким образом, например, 0,015 мг/кг может быть введено в Дни 1 и 8, при суммарной дозе 0,03 мг/кг за 21-дневный цикл. Кроме того, 0,045 мг/кг может быть введено в Дни 1 и 8, при суммарной дозе 0,09 мг/кг за 21-дневный цикл. Кроме того, 0,09 мг/кг может быть введено в Дни 1 и 8, при суммарной дозе 0,18 мг/кг за 21-дневный цикл.

Пример 4:

Терапевтическая эффективность IMGN632

[0203] 74 пациента (67 ОМЛ, 7 БПДН) получали IMGN632 в девяти когортах с эскалацией дозы по двум схемам, с эскалацией дозы 0,015-0,45 мг/кг по схеме A (n=61) и 0,015-0,06 мг/кг в дни 1, 4 и 8 по схеме B (n=13). Медианный возраст пациентов составлял 69 лет (диапазон значений 33-83). Сорок семь процентов имели вторичный ОМЛ и 70% классифицируемых пациентов с ОМЛ относились к группе неблагоприятного риска Европейской организации по изучению и лечению лейкозов (ELN) (32/46). Двадцать шесть процентов были первично рефрактерными к терапии первой линии. Тридцать два процента были зачислены в исследование при первом рецидиве и сорок один процент имели другое рецидивирующе-рефрактерное заболевание. Шестьдесят восемь процентов пациентов получали предшествующую интенсивную терапию, включая трансплантацию стволовых клеток у 19%.

[0204] В оцениваемой популяции ОМЛ (n=66), 37 (55%) продемонстрировали снижение бластов костного мозга и 13 (20%) достигли объективного ответа (3 ПР, 8 ЧВ, 2 состояния без морфологического лейкоза (MLFS)) в широком диапазоне доз (от 0,045 до 0,3 мг/кг). Примечательно, что большинство респондентов (77%) имели неудачные предшествующие интенсивные терапии (включая троих с предшествующей трансплантацией), 62% имели неблагоприятный риск по классификации Европейской организации по изучению и лечению лейкозов (ELN) (включая комплексный кариотип, мутации ASXL1, RUNX1 и FLT3-ITD) и 23% были первично рефрактерными.

[0205] Из семи рецидивирующих/рефрактерных (р/р) пациентов с БПДН, три (43%) достигли объективных ответов (ПР, ЧВ, ЧР), двое других имели стабильное заболевание, и двое - клиническое течение. Пациент с ПР ранее имел частичный ответ на SL-401, отвечал на комбинацию циклофосфамида, гидроксидауномицина, онковина и преднизона (CHOP), получил трансплантацию и был рефрактерным к децитабину с венетоклаксом; на IMGN632 у этого пациента произошло очищение костного мозга (с 28% до 0%) после одной дозы и очищение кожи (биопсия отрицательная) и КТ-поражений после 2 доз. Пациент с ЧВ был рефрактерным к SL-401, CLAG-M и CLAG и достиг очищения костного мозга (от 37% до 0%), кожи и КТ-поражений после одной дозы 0,045 мг/кг IMGN632. Пациент с ЧР имел ранее частичный ответ на SL-401; на IMGN632 этот пациент продемонстрировал полное очищение бластов костного мозга (от 87% до 0%) и значительное улучшение кожных и КТ поражений после одной дозы IMGN632.

* * *

[0206] Объем данного описания не должен ограничиваться конкретными вариантами реализации, описанными в данном документе. Фактически, различные модификации данного изобретения в дополнение к описанным будут понятны квалифицированным специалистам в данной области техники из предшествующего описания и сопровождающих фигур. Такие модификации должны рассматриваться как входящие в объем приложенной формулы изобретения.

[0207] Все источники (например, публикации или патенты или патентные заявки), упоминаемые в данном документе, включены в данный документе посредством ссылок в полном объеме и во всех отношениях в такой же степени, как если бы для каждого отдельного источника (например, публикации или патента или патентной заявки) было конкретно и индивидуально указано на его включение посредством ссылки в полном объеме во всех отношениях.

[0208] Другие варианты реализации входят в объем приведенной ниже формулы изобретения.

--->

ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ

<110> ImmunoGen, Inc.

<120> СПОСОБЫ ЛЕЧЕНИЯ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ АНТИ-CD123 ИММУНОКОНЪЮГАТОВ

<130> 2921.104PC04/EKS/CLD

<150> US 62/881,137

<151> 2019-07-31

<150> US 62/860,565

<151> 2019-06-12

<150> US 62/752,832

<151> 2018-10-30

<160> 12

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1

<211> 121

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Вариабельная область тяжелой цепи huCD123-6Gv7

<400> 1

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ile Phe Thr Ser Ser

20 25 30

Ile Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Tyr Ile Lys Pro Tyr Asn Asp Gly Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Arg Ala Thr Leu Thr Ser Asp Arg Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Glu Gly Gly Asn Asp Tyr Tyr Asp Thr Met Asp Tyr Trp Gly

100 105 110

Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 2

<211> 108

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Вариабельная область легкой цепи huCD123-6Gv4

<400> 2

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Asn Ser Tyr

20 25 30

Leu Ser Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Thr Leu Ile

35 40 45

Tyr Arg Val Asn Arg Leu Val Asp Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Asn Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln Tyr Asp Ala Phe Pro Tyr

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg

100 105

<210> 3

<211> 450

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Полноразмерная тяжелая цепь huCD123-6Gv7-C442

<400> 3

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ile Phe Thr Ser Ser

20 25 30

Ile Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Tyr Ile Lys Pro Tyr Asn Asp Gly Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Arg Ala Thr Leu Thr Ser Asp Arg Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Glu Gly Gly Asn Asp Tyr Tyr Asp Thr Met Asp Tyr Trp Gly

100 105 110

Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser

115 120 125

Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala

130 135 140

Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val

145 150 155 160

Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala

165 170 175

Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val

180 185 190

Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His

195 200 205

Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys

210 215 220

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly

225 230 235 240

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met

245 250 255

Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His

260 265 270

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val

275 280 285

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr

290 295 300

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly

305 310 315 320

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile

325 330 335

Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val

340 345 350

Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser

355 360 365

Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu

370 375 380

Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro

385 390 395 400

Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val

405 410 415

Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met

420 425 430

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Cys Leu Ser

435 440 445

Pro Gly

450

<210> 4

<211> 214

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Полноразмерная легкая цепь huCD123-6Gv4

<400> 4

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Asn Ser Tyr

20 25 30

Leu Ser Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Thr Leu Ile

35 40 45

Tyr Arg Val Asn Arg Leu Val Asp Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Asn Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln Tyr Asp Ala Phe Pro Tyr

85 90 95

Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala

100 105 110

Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly

115 120 125

Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala

130 135 140

Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln

145 150 155 160

Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser

165 170 175

Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr

180 185 190

Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser

195 200 205

Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210

<210> 5

<211> 5

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 вариабельной области тяжелой цепи huCD123-6Gv7

<400> 5

Ser Ser Ile Met His

1 5

<210> 6

<211> 17

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 вариабельной области тяжелой цепи huCD123-6Gv7

<400> 6

Tyr Ile Lys Pro Tyr Asn Asp Gly Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 7

<211> 12

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 вариабельной области тяжелой цепи huCD123-6Gv7

<400> 7

Glu Gly Gly Asn Asp Tyr Tyr Asp Thr Met Asp Tyr

1 5 10

<210> 8

<211> 11

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR1 вариабельной области легкой цепи huCD123-6Gv4

<400> 8

Arg Ala Ser Gln Asp Ile Asn Ser Tyr Leu Ser

1 5 10

<210> 9

<211> 7

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR2 вариабельной области легкой цепи huCD123-6Gv4

<400> 9

Arg Val Asn Arg Leu Val Asp

1 5

<210> 10

<211> 9

<212> PRT

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> CDR3 вариабельной области легкой цепи huCD123-6Gv4

<400> 10

Leu Gln Tyr Asp Ala Phe Pro Tyr Thr

1 5

<210> 11

<211> 378

<212> PRT

<213> Homo sapiens

<400> 11

Met Val Leu Leu Trp Leu Thr Leu Leu Leu Ile Ala Leu Pro Cys Leu

1 5 10 15

Leu Gln Thr Lys Glu Asp Pro Asn Pro Pro Ile Thr Asn Leu Arg Met

20 25 30

Lys Ala Lys Ala Gln Gln Leu Thr Trp Asp Leu Asn Arg Asn Val Thr

35 40 45

Asp Ile Glu Cys Val Lys Asp Ala Asp Tyr Ser Met Pro Ala Val Asn

50 55 60

Asn Ser Tyr Cys Gln Phe Gly Ala Ile Ser Leu Cys Glu Val Thr Asn

65 70 75 80

Tyr Thr Val Arg Val Ala Asn Pro Pro Phe Ser Thr Trp Ile Leu Phe

85 90 95

Pro Glu Asn Ser Gly Lys Pro Trp Ala Gly Ala Glu Asn Leu Thr Cys

100 105 110

Trp Ile His Asp Val Asp Phe Leu Ser Cys Ser Trp Ala Val Gly Pro

115 120 125

Gly Ala Pro Ala Asp Val Gln Tyr Asp Leu Tyr Leu Asn Val Ala Asn

130 135 140

Arg Arg Gln Gln Tyr Glu Cys Leu His Tyr Lys Thr Asp Ala Gln Gly

145 150 155 160

Thr Arg Ile Gly Cys Arg Phe Asp Asp Ile Ser Arg Leu Ser Ser Gly

165 170 175

Ser Gln Ser Ser His Ile Leu Val Arg Gly Arg Ser Ala Ala Phe Gly

180 185 190

Ile Pro Cys Thr Asp Lys Phe Val Val Phe Ser Gln Ile Glu Ile Leu

195 200 205

Thr Pro Pro Asn Met Thr Ala Lys Cys Asn Lys Thr His Ser Phe Met

210 215 220

His Trp Lys Met Arg Ser His Phe Asn Arg Lys Phe Arg Tyr Glu Leu

225 230 235 240

Gln Ile Gln Lys Arg Met Gln Pro Val Ile Thr Glu Gln Val Arg Asp

245 250 255

Arg Thr Ser Phe Gln Leu Leu Asn Pro Gly Thr Tyr Thr Val Gln Ile

260 265 270

Arg Ala Arg Glu Arg Val Tyr Glu Phe Leu Ser Ala Trp Ser Thr Pro

275 280 285

Gln Arg Phe Glu Cys Asp Gln Glu Glu Gly Ala Asn Thr Arg Ala Trp

290 295 300

Arg Thr Ser Leu Leu Ile Ala Leu Gly Thr Leu Leu Ala Leu Val Cys

305 310 315 320

Val Phe Val Ile Cys Arg Arg Tyr Leu Val Met Gln Arg Leu Phe Pro

325 330 335

Arg Ile Pro His Met Lys Asp Pro Ile Gly Asp Ser Phe Gln Asn Asp

340 345 350

Lys Leu Val Val Trp Glu Ala Gly Lys Ala Gly Leu Glu Glu Cys Leu

355 360 365

Val Thr Glu Val Gln Val Val Gln Lys Thr

370 375

<210> 12

<211> 300

<212> PRT

<213> Homo sapiens

<400> 12

Met Val Leu Leu Trp Leu Thr Leu Leu Leu Ile Ala Leu Pro Cys Leu

1 5 10 15

Leu Gln Thr Lys Glu Gly Gly Lys Pro Trp Ala Gly Ala Glu Asn Leu

20 25 30

Thr Cys Trp Ile His Asp Val Asp Phe Leu Ser Cys Ser Trp Ala Val

35 40 45

Gly Pro Gly Ala Pro Ala Asp Val Gln Tyr Asp Leu Tyr Leu Asn Val

50 55 60

Ala Asn Arg Arg Gln Gln Tyr Glu Cys Leu His Tyr Lys Thr Asp Ala

65 70 75 80

Gln Gly Thr Arg Ile Gly Cys Arg Phe Asp Asp Ile Ser Arg Leu Ser

85 90 95

Ser Gly Ser Gln Ser Ser His Ile Leu Val Arg Gly Arg Ser Ala Ala

100 105 110

Phe Gly Ile Pro Cys Thr Asp Lys Phe Val Val Phe Ser Gln Ile Glu

115 120 125

Ile Leu Thr Pro Pro Asn Met Thr Ala Lys Cys Asn Lys Thr His Ser

130 135 140

Phe Met His Trp Lys Met Arg Ser His Phe Asn Arg Lys Phe Arg Tyr

145 150 155 160

Glu Leu Gln Ile Gln Lys Arg Met Gln Pro Val Ile Thr Glu Gln Val

165 170 175

Arg Asp Arg Thr Ser Phe Gln Leu Leu Asn Pro Gly Thr Tyr Thr Val

180 185 190

Gln Ile Arg Ala Arg Glu Arg Val Tyr Glu Phe Leu Ser Ala Trp Ser

195 200 205

Thr Pro Gln Arg Phe Glu Cys Asp Gln Glu Glu Gly Ala Asn Thr Arg

210 215 220

Ala Trp Arg Thr Ser Leu Leu Ile Ala Leu Gly Thr Leu Leu Ala Leu

225 230 235 240

Val Cys Val Phe Val Ile Cys Arg Arg Tyr Leu Val Met Gln Arg Leu

245 250 255

Phe Pro Arg Ile Pro His Met Lys Asp Pro Ile Gly Asp Ser Phe Gln

260 265 270

Asn Asp Lys Leu Val Val Trp Glu Ala Gly Lys Ala Gly Leu Glu Glu

275 280 285

Cys Leu Val Thr Glu Val Gln Val Val Gln Lys Thr

290 295 300

<---

Группа изобретений относится к области медицины, а именно к способу лечения гематологической злокачественной опухоли у человека. Способ лечения гематологической злокачественной опухоли у человека, включающий введение субъекту анти-CD123 иммуноконъюгата, содержащего анти-CD123 антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, связанные с индолинобензодиазепиновым (IGN) ДНК-алкилятором, причем иммуноконъюгат вводят в дозе от 0,045 мг/кг до менее чем 0,3 мг/кг, и при этом указанное анти-CD123 антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит: a. CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5; CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6; и CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 7; и b. CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 8; CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 9; и CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10. Способ лечения гематологической злокачественной опухоли у человека, включающий введение субъекту анти-CD123 иммуноконъюгата, содержащего анти-CD123 антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, связанные с индолинобензодиазепиновым (IGN) ДНК-алкилятором, причем от 0,015 мг/кг до 0,09 мг/кг иммуноконъюгата вводят три раза за 21-дневный цикл, и при этом указанное анти-CD123 антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит вышеуказанные вариабельные области тяжелой цепи, имеющие вышеуказанную аминокислотную последовательность. Способ лечения гематологической злокачественной опухоли у человека, включающий введение субъекту анти-CD123 иммуноконъюгата, содержащего анти-CD123 антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, связанные с индолинобензодиазепиновым (IGN) ДНК-алкилятором, причем от 0,015 мг/кг до 0,09 мг/кг иммуноконъюгата вводят дважды за 21-дневный цикл, и при этом указанное анти-CD123 антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит также вышеуказанные вариабельные области тяжелой цепи, имеющие вышеуказанную аминокислотную последовательность. Использование группы изобретений обеспечивает применение терапевтически эффективных схем введения, которые минимизируют нежелательные побочные эффекты, при лечении гематологической злокачественной опухоли у человека. 3 н. и 50 з.п. ф-лы, 7 ил., 7 табл., 4 пр.

1. Способ лечения гематологической злокачественной опухоли у человека, включающий введение субъекту анти-CD123 иммуноконъюгата, содержащего анти-CD123 антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, связанные с индолинобензодиазепиновым (IGN) ДНК-алкилятором, причем иммуноконъюгат вводят в дозе от 0,045 мг/кг до менее чем 0,3 мг/кг, и при этом указанное анти-CD123 антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит:

a. CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5; CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6; и CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 7; и

b. CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 8; CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 9; и CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10.

2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что субъекту вводят от 0,045 мг/кг до 0,09 мг/кг иммуноконъюгата.

3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что субъекту вводят 0,045 мг/кг иммуноконъюгата.

4. Способ по п. 1, отличающийся тем, что субъекту вводят 0,09 мг/кг иммуноконъюгата.

5. Способ по любому из пп. 1-4, отличающийся тем, что иммуноконъюгат вводят субъекту один раз за 21-дневный цикл.

6. Способ лечения гематологической злокачественной опухоли у человека, включающий введение субъекту анти-CD123 иммуноконъюгата, содержащего анти-CD123 антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, связанные с индолинобензодиазепиновым (IGN) ДНК-алкилятором, причем от 0,015 мг/кг до 0,09 мг/кг иммуноконъюгата вводят три раза за 21-дневный цикл, и при этом указанное анти-CD123 антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит:

a. CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5; CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6; и CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 7; и

b. CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 8; CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 9; и CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10.

7. Способ лечения гематологической злокачественной опухоли у человека, включающий введение субъекту анти-CD123 иммуноконъюгата, содержащего анти-CD123 антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, связанные с индолинобензодиазепиновым (IGN) ДНК-алкилятором, причем от 0,015 мг/кг до 0,09 мг/кг иммуноконъюгата вводят дважды за 21-дневный цикл, и при этом указанное анти-CD123 антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит:

a. CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5; CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6; и CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 7; и

b. CDR1 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 8; CDR2 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 9; и CDR3 вариабельной области легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10.

8. Способ по любому из пп. 5-7, отличающийся тем, что иммуноконъюгат вводят в течение более чем одного цикла.

9. Способ по любому из пп. 5-7, отличающийся тем, что иммуноконъюгат вводят в течение по меньшей мере 2 циклов, по меньшей мере 3 циклов, по меньшей мере 4 циклов, по меньшей мере 5 циклов, по меньшей мере 6 циклов, по меньшей мере 7 циклов, по меньшей мере 8 циклов, по меньшей мере 9 циклов или по меньшей мере 10 циклов.

10. Способ по любому из пп. 5-7, отличающийся тем, что иммуноконъюгат вводят в течение 2-4 циклов, 2-6 циклов, 2-8 циклов или 2-10 циклов.

11. Способ по любому из пп. 1-10, отличающийся тем, что гематологическая злокачественная опухоль представляет собой рецидивирующую гематологическую злокачественную опухоль.

12. Способ по любому из пп. 1-10, отличающийся тем, что гематологическая злокачественная опухоль представляет собой острый миелоидный лейкоз (ОМЛ), миелодиспластический синдром (МДС), B-клеточный острый лимфобластный лейкоз (B-ОЛЛ), хронический миелоидный лейкоз в бластном кризе/фазе (БК-ХМЛ) или бластную плазмацитоидную дендритноклеточную неоплазму (БПДН).

13. Способ по любому из пп. 1-10, отличающийся тем, что гематологическая злокачественная опухоль представляет собой ОМЛ.

14. Способ по п. 13, отличающийся тем, что ОМЛ представляет собой рецидивирующий ОМЛ, и/или рефрактерный ОМЛ, или непригодный ОМЛ.

15. Способ по любому из пп. 1-10, отличающийся тем, что гематологическая злокачественная опухоль представляет собой БПДН.

16. Способ по п. 15, отличающийся тем, что БПДН представляет собой рецидивирующую БПДН и/или рефрактерную БПДН.

17. Способ по п. 15, отличающийся тем, что БПДН представляет собой БПДН первой линии.

18. Способ по п. 17, отличающийся тем, что субъект является непригодным для интенсивной химиотерапии.

19. Способ по п. 17 или 18, отличающийся тем, что субъект непригоден для терапии SL-401.

20. Способ по любому из пп. 1-10, отличающийся тем, что гематологическая злокачественная опухоль представляет собой ОЛЛ.

21. Способ по п. 20, отличающийся тем, что ОЛЛ представляет собой рецидивирующий ОЛЛ и/или рефрактерный ОЛЛ.

22. Способ по любому из пп. 1-10, отличающийся тем, что гематологическая злокачественная опухоль представляет собой хронический миеломоноцитарный лейкоз (ХММЛ).

23. Способ по п. 22, отличающийся тем, что ХММЛ представляет собой рецидивирующий ХММЛ и/или рефрактерный ХММЛ.

24. Способ по любому из пп. 1-10, отличающийся тем, что гематологическая злокачественная опухоль представляет собой миелофиброз (МФ).

25. Способ по п. 24, отличающийся тем, что МФ представляет собой рецидивирующий МФ и/или рефрактерный МФ.

26. Способ по любому из пп. 1-10, отличающийся тем, что гематологическая злокачественная опухоль представляет собой миелодиспластический синдром (МДС).

27. Способ по п. 26, отличающийся тем, что МДС представляет собой рецидивирующий МДС и/или рефрактерный МДС.

28. Способ по любому из пп. 1-27, отличающийся тем, что субъект является педиатрическим пациентом.

29. Способ по любому из пп. 1-28, отличающийся тем, что гематологическая злокачественная опухоль представляет собой экспрессирующую CD123 гематологическую злокачественную опухоль.

30. Способ по любому из пп. 1-29, отличающийся тем, что CD123 был детектирован в образце, полученном из гематологической злокачественной опухоли до указанного введения.

31. Способ по п. 30, отличающийся тем, что CD123 детектируют с помощью проточной цитометрии.

32. Способ по любому из пп. 1-31, дополнительно включающий детектирование CD123 в образце, полученном из гематологической злокачественной опухоли до указанного введения.

33. Способ по любому из пп. 1-32, отличающийся тем, что по меньшей мере 80% клеток в гематологической злокачественной опухоли экспрессируют CD123.

34. Способ по любому из пп. 1-33, отличающийся тем, что CD123 был детектирован в по меньшей мере 80% клеток в образце, полученном из гематологической злокачественной опухоли до указанного введения.

35. Способ по любому из пп. 1-34, дополнительно включающий детектирование CD123 в по меньшей мере 80% клеток в образце, полученном из гематологической злокачественной опухоли до указанного введения.

36. Способ по любому из пп. 1-35, отличающийся тем, что субъект имеет абсолютное количество нейтрофилов более 500 нейтрофилов/мкл.

37. Способ по любому из пп. 1-16 и 18-36, отличающийся тем, что субъект получал по меньшей мере одну предшествующую линию терапии.

38. Способ по любому из пп. 1-16 и 18-37, отличающийся тем, что субъект получал по меньшей мере две предшествующих линии терапии.

39. Способ по любому из пп. 1-16 и 18-38, отличающийся тем, что субъект получал по меньшей мере три предшествующих линии терапии, по меньшей мере четыре предшествующих линии терапии или по меньшей мере пять предшествующих линий терапии.

40. Способ по любому из пп. 1-39, отличающийся тем, что субъект получал предварительное лечение кортикостероидом до введения иммуноконъюгата.

41. Способ по любому из пп. 1-39, дополнительно включающий предварительное лечение субъекта кортикостероидом до введения иммуноконъюгата.

42. Способ по п. 40 или 41, отличающийся тем, что кортикостероид представляет собой преднизон, преднизолон, метилпреднизолон, беклометазон, бетаметазон, дексаметазон, флудрокортизон, гидрокортизон, триамцинолон или их комбинацию.

43. Способ по любому из пп. 1-42, отличающийся тем, что иммуноконъюгат вводят внутривенно.

44. Способ по любому из пп. 1-43, дополнительно включающий введение пониженной дозы иммуноконъюгата после возникновения у субъекта дозолимитирующей токсичности и ее снижения до исходного значения или ≤2 степени.

45. Способ по любому из пп. 1-44, отличающийся тем, что анти-CD123 антитело или антигенсвязывающий фрагмент в иммуноконъюгате содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:1, и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 2.

46. Способ по любому из пп. 1-45, отличающийся тем, что анти-CD123 антитело или антигенсвязывающий фрагмент в иммуноконъюгате содержит константную область тяжелой цепи и константную область легкой цепи.

47. Способ по п. 46, отличающийся тем, что константная область тяжелой цепи содержит константную область тяжелой цепи иммуноглобулина IgG₁ человека и/или тем, что константная область легкой цепи содержит константную область легкой цепи иммуноглобулина IgGκ человека.

48. Способ по любому из пп. 1-45, отличающийся тем, что анти-CD123 антитело или антигенсвязывающий фрагмент в иммуноконъюгате содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:3, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:4.

49. Способ по любому из пп. 1-48, отличающийся тем, что анти-CD123 антитело или антигенсвязывающий фрагмент в иммуноконъюгате представляет собой полноразмерное антитело.

50. Способ по любому из пп. 1-47, отличающийся тем, что анти-CD123 антитело или антигенсвязывающий фрагмент в иммуноконъюгате представляет собой антигенсвязывающий фрагмент.

51. Способ по любому из пп. 1-50, отличающийся тем, что указанный IGN ДНК-алкилятор представляет собой DGN549-C.

52. Способ по любому из пп. 1-51, отличающийся тем, что иммуноконъюгат содержит пептидный линкер.

53. Способ по любому из пп. 1-52, отличающийся тем, что иммуноконъюгат вводят в фармацевтической композиции, содержащей иммуноконъюгаты следующей структуры:

,

где G4723A содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:3, и легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:4.