ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ ДЛЯ СНИЖЕНИЯ СТЕПЕНИ ИЛИ ЛЕЧЕНИЯ ВЫПАДЕНИЯ ВОЛОС ПУТЕМ УМЕНЬШЕНИЯ ВОСПАЛЕНИЯ КЛЕТОК ДЕРМАЛЬНОГО СОСОЧКА ЧЕЛОВЕКА И ОКРУЖАЮЩИХ КЛЕТОК И ИНГИБИРОВАНИЯ ЭКСПРЕССИИ 5α-РЕДУКТАЗЫ Российский патент 2025 года по МПК A23L33/105 A61K8/49 A61K31/353 A61K36/48 A61P17/14 A61Q5/12 A61Q7/00 

Описание патента на изобретение RU2836332C1

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции для снижения степени или лечения выпадения волос, и более конкретно к фармацевтической композиции для снижения степени или лечения выпадения волос путем уменьшения воспаления клеток дермального сосочка человека и окружающих клеток и ингибирования экспрессии 5α-редуктазы.

Предшествующий уровень техники настоящего изобретения

Выпадение волос - это состояние, при котором волосы отсутствуют в тех местах, где они должны быть в норме, и обычно означает потерю терминальных волос (толстых и черных волос) на коже головы. В отличие от мягких, бесцветных и тонких волос, выпадение терминальных волос может вызвать косметические проблемы. У корейцев плотность волос ниже, чем у жителей Запада, и у них имеется около 100000 волос. Потеря от 50 до 80 волос в день считается нормальным явлением. Поэтому, если количество волос, выпадающих при пробуждении или мытье головы, превышает 100, то весьма вероятно, что причина этого связана с патологией.

Выпадение волос можно клинически разделить на два типа: рубцовое выпадение волос (рубцовая алопеция) и нерубцовое выпадение волос (нерубцовая алопеция). При рубцовой алопеции волосяные фолликулы разрушаются, поэтому волосы не регенерируются, тогда как при нерубцовой алопеции волосяные фолликулы сохраняются, поэтому волосы могут вырасти заново после исчезновения симптоматических участков. Рубцовая алопеция, при которой образуются рубцы, может включать выпадение волос, вызванное красной волчанкой, токсическим фолликулитом, волосяным красным плоским лишаем, выпадение волос, вызванное ожогами и травмами и т.п. Нерубцовая алопеция, при которой рубцы не образуются, может включать наследственное андрогенное выпадение волос (облысение), очаговую алопецию, опоясывающий лишай на голове вследствие грибковых инфекций, телогеновую алопецию, трихотилломанию, нарушения, связанные с образованием волос и т.п.

Наиболее частыми формами алопеции являются алопеция по мужскому типу (андрогенная), алопеция по женскому типу и очаговая алопеция, все из которых представляют собой нерубцовую алопецию, т.е. не оставляющую рубцов.

Причины выпадения волос различны.

В возникновении алопеции по мужскому типу важными факторами считаются генетические причины и андрогены, являющиеся мужскими гормонами. По оценкам, даже при алопеции по женскому типу, некоторые из них происходят по тому же пути, что и алопеция по мужскому типу, но при этом существуют различия в клиническом аспекте. Очаговая алопеция обычно считается аутоиммунным заболеванием, вызванным сильным стрессом. Телогеновая алопеция - это тип временного выпадения волос, вызванный тяжелым физическим и психологическим стрессом, включая эндокринные расстройства, дефицит питательных веществ, употребление наркотиков, роды, лихорадка и хирургическое вмешательство, при котором некоторые волосы не завершают период роста и переходят в телогеновое состояние и затем они выпадают.

При алопеции по мужскому типу волосы постепенно становятся тонкими, и выпадение волос прогрессирует, начиная с 20-30 лет у людей с семейным анамнезом облысения. Когда граница между лбом и волосами отодвигается назад, то лоб расширяется в М-образной форме с обеих сторон височной области, и выпадение волос постепенно распространяется на макушку головы.

Алопеция по женскому типу, по сравнению с алопецией по мужскому типу, характеризуется сохранением на лбу линии роста волос, более тонкими волосами в центральной части головы и меньшим количеством волос, а также сохранением линии роста волос на лбу. Степень выпадения волос слабая, поэтому потеря волос и их отсутствие на лбу являются редкими, в отличие от потери волос при алопеции по мужскому типу.

Очаговая алопеция характеризуется появлением проплешин разного размера монетообразной, круглой или овальной формы (волосы исчезают и проплешины выглядят как пятна). Она встречается преимущественно на голове, реже на бороде, бровях и ресницах. По мере увеличения симптоматической области могут образовываться большие проплешины. Если выпадают все волосы, это можно классифицировать как алопецию всей головы, а если выпадают волосы на всем теле, это можно классифицировать как алопецию всего тела. При телогеновой алопеции выпадение волос начинается через 2-4 месяца после появления причинного фактора, и при этом общее количество волос уменьшается. После устранения причинного фактора выпадение волос уменьшится, поскольку телогеновые волосы возвращаются в нормальное состояние в течение нескольких месяцев. Очаговая алопеция и облысение - это состояния, при котором волосы отсутствуют в тех местах, где они должны быть в норме, а также состояние, при котором имеет место общее выпадение терминальных волос (толстых и темных волос) на коже головы, и при этом они являются также наиболее распространенными типами алопеции, причем ни одно из них не вызывает формирования рубцов.

Для лечения алопеции по мужскому и женскому типу используют тоники или лосьоны, такие как миноксидил, пероральные препараты, такие как финастерид и дутастерид, а также осуществляют трансплантацию волос, а для лечения очаговой алопеции применяют стероидные препараты для местного применения, системные стероидные препараты, иммунотерапию и т.п.

Миноксидил используют в тех случаях, когда механизм патологии и механизм его действия четко определены, при этом обычно предполагается, что он улучшает кровообращение в коже головы и, таким образом, он помогает и способствует снабжению питательными веществами и кислородом клеток, составляющих корень волоса. Рост волос возобновляются через 4-6 месяцев после начала его использования, а после прекращения лечения эффект исчезает через 4-6 месяцев, и при этом проявляются такие побочные эффекты, как раздражение кожи головы, сухость кожи, шелушение, зуд и покраснение, аллергический контактный дерматит и фотоаллергический контактный дерматит.

Принцип, по которому финастерид используется для лечения алопеции по мужскому типу (андрогенной алопеции) и доброкачественной гиперплазии предстательной железы (ДГПЖ), заключается в снижении выработки гормона дигидротестостерона (ДГТ), вызывающего заболевание. Поскольку ДГТ сокращает волосяные фолликулы, вызывает алопецию по мужскому типу и способствует росту простаты, то снижение уровня ДГТ может лечить алопецию по мужскому типу и доброкачественную гиперплазию предстательной железы. ДГТ образуется из тестостерона под действием 5α-редуктазы, при этом финастерид снижает выработку ДГТ, ингибируя 5α-редуктазу. При алопеции по мужскому типу его можно применять только у взрослых мужчин, но не у женщин. Если беременная женщина подвергается воздействию финастерида, то у беременных женщин или у женщин, которые могут забеременеть, проявляются серьезные побочные эффекты, причем до такой степени, что им следует избегать контакта с любыми препаратами, содержащими этот ингредиент, поскольку он может вызвать аномалии при формировании наружных репродуктивных органах плода мужского пола. Кроме того, при введении этого препарата мужчинам он вызывает побочные эффекты, связанные с сексуальными проявлениями (снижение либидо, уменьшение объема эякуляции, снижение эректильной ригидности и т.п.), а также другие побочные эффекты, такие как депрессия.

Дутастерид проявляет более сильные фармакологические эффекты, чем финастерид, и он также используется для лечения доброкачественной гиперплазии предстательной железы и андрогенетической алопеции как препарат, ингибирующий выработку мужского гормона ДГТ. Дутастерид - препарат того же ряда, что и финастерид, и он применяется с той же целью, поскольку он обладает таким же фармакологическим действием. Разница в том, что дутастерид блокирует оба типа 5α-редуктазы, тип 1 и тип 2, а финастерид блокирует 5α-редуктазу только типа 2. Таким образом, как было доказано, дутастерид снижает концентрацию ДГТ в большей степени, чем финастерид. Следовательно, при алопеции по мужскому типу его можно применять только у взрослых мужчин и нельзя применять у женщин. При действии дутастерида на беременную женщину, у плода мужского пола могут возникнуть пороки развития, поэтому у беременной женщины или женщины детородного возраста наблюдаются серьезные побочные эффекты, причем до такой степени, что им следует избегать контакта с любыми препаратами, содержащим этот ингредиент.Кроме того, при введении мужчинам он также проявляет побочные эффекты, связанные с сексуальными проявлениями (снижение либидо, уменьшение объема эякуляции, снижение эректильной ригидности и т.п.), а также другие побочные эффекты, такие как депрессия.

ДГТ может одновременно вызывать доброкачественную гиперплазию предстательной железы и выпадение волос, способствуя делению клеток простаты и увеличению ткани простаты. Однако в настоящее время нет четких объяснений и доказательств того, почему при действии ДГТ на ткань, образующая волосяной фолликул, она атрофируется, и волосы становятся тонкими, что в конечном итоге приводит к их выпадению.

Поэтому при создании настоящего изобретения сначала культивировали клетки дермального сосочка человека, которые способствуют росту и дифференцировке кератиноцитов и матриксных клеток, образующих волосы в волосяных фолликулах, а затем к ним добавляли тестостерон или ДГТ. Было обнаружено, что под влиянием этих андрогенных гормонов в клетках дермального сосочка человека увеличивается уровень IL-6, который, в частности, является провоспалительным цитокином, приблизительно в 2-4 раза. Более того, было обнаружено, что когда клетки дермального сосочка человека подвергаются в течение длительного периода времени воздействию не только ДГТ, но и тестостерона, то в клетах дермального сосочка человека вырабатывается и высвобождается большое количество IL-6, чем в случае воздействия только ДГТ. Первоначально считалось, что IL-6 представляет собой тип провоспалительного цитокина, который в основном продуцируется и секретируется макрофагами в крови или тканях в ответ на внешнюю инвазию, и он вызывает сильнейшую воспалительную реакцию. Однако при создании настоящего изобретения было установлено, что андрогенетическая алопеция, очаговая алопеция и алопеция по женскому типу также связана с воспалением под влиянием IL-6 или TNF-α, который является фактором, индуцирующим воспаление, который чрезмерно продуцируется и секретируется в кожные покровы клетками дермального сосочка, которые играют наиболее важную роль в формировании и роста волос в волосяном фолликуле, и эти патологии вызывают воспаление под влиянием макрофагов, присутствующих в крови или других окружающих тканях, тем самым постепенно истощая клетки, включая волосяные фолликулы, и в конечном итоге приводя к выпадению волос.

С этой целью в настоящем изобретении к клеткам дермального сосочка сначала добавляли ДГТ или тестостерон для поиска вещества, которое эффективно ингибирует выработку и секрецию IL-6 в условиях, в которых IL-6 вырабатывается и секретируется в максимально возможной степени.

Затем использовали линию клеток макрофагов, которая может продуцировать и секретировать наибольшее количество IL-6 в окружающих тканях, воздействующих на ткань волосяного фолликула, и к ней добавляли высокоактивное вызывающее воспаление вещество, такое как липополисахарид (ЛПС), чтобы создать условия для выработки и секретирования как можно большего количества IL-6 или TNF-α. После чего проводили поиск веществ, которые наиболее эффективно ингибируют выработку и секрецию этих воспалительных цитокинов. Кроме того, также искали вещества, которые эффективно ингибируют экспрессию воспалительного фермента ЦОГ-2 (циклооксигеназа типа 2), который обычно участвует в выработке веществ, непосредственно вызывающих воспаление, таких как простагландины и iNOS (индуцируемая синтаза оксида азота), которая участвует в выработке оксида азота, и впервые используется для индукции воспаления. В дополнение к этому также были проведены исследования и количественные оценки того, действительно ли это вещество эффективно ингибирует выработку оксида азота, который ослабляет кровеносные сосуды и способствует привлечению многих воспалительных клеток к месту воспаления.

Кроме того, известно, что большинство средств для лечения выпадения волос были разработаны с целью ингибирования активности 5α-редуктазы, которая катализирует превращение тестостерона в ДГТ, путем использования своего рода конкурентной функции ингибитора веществ, близкими по молекулярной структуре к тестостерону, такими как финастерид, тогда как в настоящем изобретении был осуществлен поиск веществ, которые ингибирует экспрессию 5α-редуктазы.

Кроме того, исходя из предположения, что воспалительные клетки, называемые тучными клетками, вызывают воспаление в волосяных фолликулах, включая кожу головы, наряду с вызывающими аллергию веществами, такими как гистамин и лейкотриен, выделяемыми под воздействием внешних факторов, что в конечном итоге приводит к выпадению волос, был проведен поиск веществ, которые могут снизить активность тучных клеток и эффективно ингибировать секрецию гистамина или эффективно ингибировать экспрессию 5-LO (липоксигеназа типа 5), типичного воспалительного фермента, участвующего в выработке лейкотриена, который является сильным аллергенным веществом.

Наконец, в связи с тем, что активный кислород, который в больших количествах вырабатывается при микробных инфекциях, стрессе и под воздействием других веществ из окружающей среды, вызывает хроническое воспаление, был проведен поиск веществ с превосходной антиоксидантной способностью, которые могут улавливать и поглощать активный кислород.

Используемые в настоящее время способы лечения выпадения волос в основном включают метод, при котором осуществляют непосредственное воздействие на кожу головы, например метод с использованием миноксидила, который обеспечивает снабжение волосяных фолликулов питательными веществами и кислородом за счет улучшения кровообращения, а также метод ингибирования 5α-редуктазы, такой как использование финастерида или дутастерида для предотвращения конверсии тестостерона в ДГТ, снижая тем самым концентрацию ДГТ в крови, а также метод с использованием стероидов, таких как триамцинолон, дезоксиметазон и бетаметазон, и метод светотерапии. Однако, поскольку все большее число пациентов страдают от снижения сексуальной функции или других побочных эффектов от препаратов, таких как пропеция, который содержит финастерид, и особенно учитывая то, что его применение очень затруднено при женской алопеции, то существует острая необходимость в разработке средств для лечения выпадения волос или функциональных продуктов, полученных из натуральных веществ, без проявления побочных эффектов или с очень небольшим количеством побочных эффектов. Кроме того, стероиды, такие как кортикостероиды, вызывают различные побочные эффекты в организме человека при использовании в течение длительного периода времени, и поэтому врачи рекомендуют их для использования только в виде краткосрочных курсов. Кроме того, применение миноксидила, в отношении которого считается, что он имеет относительно мало побочных эффектов по сравнению с другими препаратами для местного применения, сопровождается рядом осложнений, и ожидается, что эффект от применения миноксидила будет достигаться только после 4-6 месяцев его непрерывного использования. Поэтому, чтобы решить такие общие проблемы, авторы настоящего изобретения осуществили поиски природных веществ, которые не только фундаментально устраняют воспаление, возникающее в окружающих тканях, включая волосяные фолликулы, из-за постоянной стимуляции воздействия андрогенных гормонов, воздействия стресса, гормонов из окружающей среды, загрязняющих веществ, инфекционных заболеваний и т.п., но которые также обладают комплексными функциями, такими как ингибирование экспрессии 5α-редуктазы, которая катализирует выработку ДГТ, и эффективное улавливание и поглощение активного кислорода, не причиняя при этом никакого или очень незначительного вреда организму человека даже при длительном применении. Таким образом, существует острая необходимость поиска таких веществ для производства средств против выпадения волос, функционального питания, косметических продуктов и т.п.

Краткое раскрытие настоящего изобретения

Техническая проблема

Авторы настоящего изобретения провели интенсивные исследования с целью обнаружения встречающихся в природе соединений, которые могут предотвратить выпадение волос или способствовать росту или восстановлению волос без побочных эффектов. В результате исследования было выявлено около 30 типов веществ природного происхождения, и авторы настоящего изобретения установили, что композиция, содержащая в качестве активных ингредиентов генистеин и кемпферол, эффективно способствует росту и восстановлению волос, а также предотвращает их выпадение, и этот результат был положен в основу настоящего изобретения.

Таким образом, целью настоящего изобретения является создание фармацевтической композиции для снижения степени или лечения выпадения волос путем уменьшения воспаления (включая аллергию) клеток дермального сосочка человека и окружающих их клеток, и ингибирования экспрессии 5α-редуктазы, где фармацевтическая композиция содержит в качестве активных ингредиентов генистеин и кемпферол; и создание фармацевтического продукта (парафармацевтического препарата), косметической композиции или функциональной пищевой композиции для снижения степени или лечения выпадения волос.

Техническое решение

Согласно иллюстративному варианту осуществления настоящего изобретения предложена фармацевтическая композиция для снижения степени или лечения выпадения волос путем уменьшения воспаления клеток дермального сосочка человека и окружающих клеток, и ингибирования экспрессии 5α-редуктазы, причем фармацевтическая композиция содержит в качестве активных ингредиентов генистеин и кемпферол.

В соответствии с другим иллюстративным вариантом осуществления настоящего изобретения предложен фармацевтический продукт (парафармацевтический препарат) для снижения степени или лечения выпадения волос путем уменьшения воспаления клеток дермального сосочка человека и окружающих клеток, и ингибирования экспрессии 5α-редуктазы, причем продукт (парафармацевтический препарат) содержит в качестве активных ингредиентов генистеин и кемпферол.

В соответствии с еще одним иллюстративным вариантом осуществления настоящего изобретения предложена косметическая композиция для снижения степени или лечения выпадения волос путем уменьшения воспаления клеток дермального сосочка человека и окружающих клеток, и ингибирования экспрессии 5α-редуктазы, причем косметическая композиция содержит в качестве активных ингредиентов генистеин и кемпферол.

В соответствии с еще одним иллюстративным вариантом осуществления настоящего изобретения предложена функциональная пищевая композиция для снижения степени или лечения выпадения волос путем уменьшения воспаления клеток дермального сосочка человека и окружающих клеток, и ингибирования экспрессии 5α-редуктазы, причем композиция содержит в качестве активных ингредиентов генистеин и кемпферол.

Технический результат

Согласно настоящему изобретению предложена фармацевтическая композиция для снижения степени или лечения выпадения волос путем уменьшения воспаления клеток дермального сосочка человека и окружающих клеток, и ингибирования экспрессии 5α-редуктазы, причем фармацевтическая композиция содержит в качестве активных ингредиентов генистеин и кемпферол. В частности предложены фармацевтическая композиция для снижения степени или лечения выпадения волос; фармацевтический продукт (парафармацевтический препарат) для снижения степени или лечения выпадения волос; косметическая композиция для снижения степени или лечения выпадения волос; и функциональная пищевая композиция для снижения степени или лечения выпадения волос, все из которых не только содержат в качестве активного ингредиента натуральные соединения, имеющие незначительные побочные эффекты или вообще не имеющие побочных эффектов даже после длительного применения при хроническом заболевании, связанном с выпадением волос, но также все они обладают превосходным действием в отношении роста и восстановлении волос, проявляя при этом стабильную эффективность в отношении снижения степени или лечения выпадения волос.

Кратное описание фигур

На Фиг. 1 представлена фотография результатов электрофореза (вестерн-блоттинга), показывающая результаты измерения эффектов ингибирования галлатом эпигаллокатехина, генистеином и кемпферолом экспрессии iNOS и СОХ-2.

На Фиг. 2 представлен график, показывающий результаты измерения ингибирующего действия галлата эпигаллокатехина, генистеина и кемпферола на секрецию оксида азота (NO).

На Фиг. 3 представлен график, показывающий результаты измерения эффекта ингибирования галлатом эпигаллокатехина, генистеином и кемпферолом секреции IL-6, вызываемого тестостероном и ДГТ.

На Фиг. 4 представлена фотография результатов электрофореза (вестерн-блоттинга), показывающая результаты измерения эффектов ингибирования галлатом эпигаллокатехина, генистеином и кемпферолом экспрессии 5α-редуктазы типа II.

На Фиг. 5 представлена фотография результатов электрофореза (вестерн-блоттинга), показывающая результаты измерения эффектов ингибирования галлатом эпигаллокатехина, генистеином и кемпферолом экспрессии 5-LO.

На Фиг. 6 и 7 представлены диаграммы, показывающие результаты визуальной оценки скорости роста волос путем фотографирования цифровой камерой кожи спины всех мышей непосредственно перед началом перорального введения, а также на 7-й день, 12-й день, 17-й день, 22-й день и на 27 день после перорального введения (день 0) композиции для снижения степени выпадения волос (комплекс KGE: 40 мас. % кемпферола, 30 мас. % генистеина и 30 мас. % галлата эпигаллокатехина), использованной в качестве одного конкретного варианта осуществления настоящего изобретения.

На Фиг. 8 представлен график, показывающий результаты измерения длины отросших волос после завершения теста с пероральным введением мышам (день 27) композиции для снижения степени выпадения волос (комплекс KGE: 40 мас. % кемпферола, 30 мас. % генистеина и 30 мас. % галлата эпигаллокатехина), использованной в качестве одного конкретного варианта осуществления настоящего изобретения.

На Фиг. 9 представлен график, показывающий результаты измерения массы отросших волос после завершения теста с пероральным введением мышам (день 27) композиции для снижения степени выпадения волос (комплекс KGE: 40 мас. % кемпферола, 30 мас. % генистеина и 30 мас. % галлата эпигаллокатехина), использованной в качестве одного конкретного варианта осуществления настоящего изобретения.

На Фиг. 10 представлен график, показывающий результаты визуальной оценки для каждой группы при пероральном введении композиции.

На Фиг. 11 представлены упорядоченные по дате фотографии, сделанные камерой, показывающие фактический рост волос у мышей для каждой группы при пероральном введении композиции.

На Фиг. 12 представлен график, показывающий результаты измерения длины волос у мышей для каждой группы при пероральном введении композиции.

На Фиг. 13 представлен график, показывающий результаты измерения общей массы волос у мышей для каждой группы при пероральном введении композиции.

На Фиг. 14 представлена фотография, показывающая густоту волос у человека до и через 8 недель после перорального введения композиции для снижения степени выпадения волос (комплекс KGE: 40 мас. % кемпферола, 30 мас. % генистеина и 30 мас. % галлата эпигаллокатехина), использованной в качестве одного конкретного варианта осуществления настоящего изобретения.

На Фиг. 15 представлена фотография, показывающая толщину волос у человека до и через 8 недель после перорального введения композиции для снижения степени выпадения волос (комплекс KGE: 40 мас. % кемпферола, 30 мас. % генистеина и 30 мас. % галлата эпигаллокатехина), использованной в качестве одного конкретного варианта осуществления настоящего изобретения.

Подробное раскрытие настоящего изобретения

В типичных вариантах осуществления настоящего изобретения, описанных в настоящем документе, предложена фармацевтическая композиция для снижения степени или лечения выпадения волос, содержащая в качестве активных ингредиентов генистеин и кемпферол.

Также предложен фармацевтический продукт (парафармацевтический препарат) для снижения степени или лечения выпадения волос, содержащий в качестве активных ингредиентов генистеин и кемпферол.

Кроме того, предложена косметическая композиция для снижения степени или лечения выпадения волос, содержащая в качестве активных ингредиентов генистеин и кемпферол.

Кроме того, предложена функциональная пищевая композиция для снижения степени или лечения выпадения волос, содержащая в качестве активных ингредиентов генистеин и кемпферол.

Кроме того, предложена композиция, которая снижает степень воспаления волосяных фолликулов, окружающих тканей и клеток, за счет использования от 5 до 950 мг/день генистеина в качестве единственного активного ингредиента для снижения степени или лечения выпадения волос.

Варианты осуществления настоящего изобретения

Конкретные варианты осуществления настоящего изобретения будут подробно описаны ниже со ссылкой на прилагаемые фигуры.

Согласно одному варианту осуществления настоящего изобретения, фармацевтическая композиция для снижения степени или лечения выпадения волос содержит в качестве активных ингредиентов генистеин и кемпферол. Фармацевтическая композиция для снижения степени или лечения выпадения волос, согласно этому варианту осуществления настоящего изобретения, обеспечивает снижение степени или лечение выпадения волос путем уменьшения воспаления клеток дермального сосочка человека и окружающих клеток и ингибирования экспрессии 5α-редуктазы.

Генистеин представляет собой по классификации BCS (Биофармацевтическая система классификаци) изофлавон II класса, коммерчески доступный из ряда источников, включая LC Laboratories (Воберн, Массачусетс), и он представляет собой аналог эстрогена растительного происхождения, обладающий сильным антиоксид антным, противовоспалительным, противораковым действием и он способствует нормальной репликации клеток с гормональным и клеточно-регенеративным действием в качестве аналога эстрогена. В отношении его недавно были получены клинические результаты как о веществе, замедляющем фотостарение. Для генистеина были идентифицированы клеточные мишени, а также сигнальные пути, регулируемые генистеином, причем мишени и пути, которые связаны с раком, включают мишени и пути, важные для роста и деления клеток, апоптоза, ангиогенеза, опухолевой инвазии и метастазирования. Исследования также показали, что в дополнение к противоопухолевым эффектам, присущим самому генистеину, он усиливает или потенцирует противоопухолевые эффекты некоторых других клинически используемых химиотерапевтических средств как in vitro в линиях раковых клеток человека, так и in vivo на животных моделях рака. Генистеин, относящийся к одному из типов полифенолов, может быть выделен и экстрагирован, например, но не ограничивается этим, из люпина, конских бобов, соевых бобов, корня кудзу или плодов софоры японской (пагодовое дерево), и его также можно синтезировать. В настоящем изобретении генистеин используется в чистом виде или в форме фармацевтически приемлемой соли, представляющей собой, например, но не ограничивается этим, соли натрия, калия, магния, N-метил глюкамина (меглюмина), кальция, L-лизина, N-этилглюмина (эглюмина) генистеина и кристаллический диэтиламин-генистеин, а также другие фармацевтически приемлемые нетоксичные соли, включая кристаллогидраты генистеина, такие как моногидрат и дигидрат. Генистеин можно принимать в количестве от 1 до 950 мг/день.

Кемпферол является одним из типичных флавоноловых компонентов, который является одним из флавоноидов, и он широко распространен в цветах или листьях растений. Уже известно более 100 типов флавонолов, причем в наибольшем количестве существуют три типа флавонолов: кемпферол, кверцетин и мирицетин. В частности, кемпферол представляет собой вещество с превосходными физиологическими свойствами, такими как антиоксидантные и противовоспалительные свойства, и его различные эффекты были изучены и они нашли использование в различных областях. В настоящем изобретении кемпферол можно использовать как таковой или в форме фармацевтически приемлемой соли. Соль кемпферола, используемая в настоящем изобретении, особо не ограничена, при условии, что она представляет собой фармацевтически приемлемую нетоксичную соль. Например, кемпферол можно использовать в форме соли, такой как соли хлористоводородной кислоты, серной кислоты, азотной кислоты, фосфорной кислоты, фтористофодородной кислоты, бромистоводородной кислоты, муравьиной кислоты, уксусной кислоты, винной кислоты, молочной кислоты, лимонной кислоты, фумаровой кислоты, малеиновой кислоты, янтарной кислоты, метансульфоновой кислоты, бензолсульфоновой кислоты, толуолсульфоновой кислоты, нафталинсульфоновой кислоты или т.п. Кроме того, кемпферол можно получать путем экстрагирования и концентрирования из природных растений, таких как, но не ограничивается этим, каперсы, шафран, капуста, имбирь, китайская капуста и листья хурмы. Кемпферол можно принимать в количестве от 5 до 9500 мг/день.

Согласно одному иллюстративному варианту осуществления настоящего изобретения, фармацевтическая композиция для снижения степени или лечения выпадения волос может содержать генистеин в количестве от 5 до 95 мас. % и кемпферол в количестве от 5 до 95%, и предпочтительно она содержит генистеин в количестве от 20 до 60 мас. % и кемпферол в количестве от 40 до 80%.

Согласно настоящему изобретению, фармацевтическая композиция для снижения степени или лечения выпадения волос может дополнительно содержать галлат эпигаллокатехина (EGCG).

Галлат эпигаллокатехина (EGCG), также называемый как галлат-3-эпигаллокатехина, представляет собой тип полифенола, получаемый их экстракта листьев зеленого чая. Экстракт зеленого чая содержит от 3 до 4% кофеина по массе и от 0 до 18% полифенольных компонентов, известных как катехины, причем кофеин и катехин известны как основные компоненты зеленого чая. Катехиновый компонент состоит из катехина (С), эпикатехина (ЕС), галлата эпигаллокатехина (EGCG), эпигаллокатехина (EGC), галлата эпикатехина (ECG) и т.п. Среди них на EGCG приходится более половины всех катехинов. Сообщалось, что галлат эпигаллокатехина обладает сильной антиоксидантной активностью, и он также обладает противовирусной активностью в отношении вируса гриппа, подавляет рост рака простаты и оказывает терапевтическое действие при лейкемии. Кроме того, сообщалось, что он эффективен для замедления или предотвращения диабета, гиперлипидемии и атеросклероза, которые являются основными заболеваниями у взрослых людей.

Согласно настоящему изобретению, фармацевтическая композиция для снижения степени или лечения выпадения волос может содержать от 20 до 60 мас. % генистеина, от 40 до 80 мас. % кемпферола и галлат эпигаллокатехина в количестве до баланса, и при этом она предпочтительно может содержать от 25 до 45 мас. %. генистеина, от 35 до 55% кемпферола по массе и галлат эпигаллокатехина до баланса.

Согласно настоящему изобретению, фармацевтическая композиция для снижения степени или лечения выпадения волос может дополнительно содержать дрожжевой экстракт.

Дрожжевой экстракт представляет собой водный дрожжевой экстракт, при этом дрожжи не ограничиваются конкретным типом, и примеры дрожжей включают Saccharomyces cerevisiae, Saccharomyces ellipsoideus, Saccharomyces sate, Saccharomyces formosensis, Saccharomyces coreanus, Saccharomyces boulardii и т.п. Дрожжи Saccharomyces cerevisiae являются предпочтительными. Дрожжи содержат различные аминокислоты, такие как аргинин, глутаминовая кислота, изолейцин, лейцин и валин, и, таким образом, дрожжи имеют значительную положительную роль при восполнении дефицита белка в коже или волосах. Кроме того, известно, что дрожжи содержат различные витамины, такие как витамин В1 (тиамин), витамин В2 (рибофлавин), пантотеновая кислота, ниацин, биотин и т.п. Ожидается, что благодаря таким свойствам дрожжи будут оказывать различное положительное воздействие на здоровье человека. В настоящем изобретении используется водный дрожжевой экстракт и дрожжевой экстракт, который можно использовать, может включать дрожжевой экстракт, полученный, но не ограничиваясь этим, путем растворения дрожжей в воде, разделения растворенной части и нерастворенной части путем фильтрации, отделения растворенной части от нерастворенной части, отбора растворенной части, концентрирования и фильтрования ее. Также можно использовать дрожжевой экстракт или концентрат, полученный путем разрушения клеток дрожжей с использованием тепла или солей, или того и другого одновременно, с получением экстракта, осаждения его с помощью 50-70% этанола, повторного растворения осадка и удаления нерастворимой части. Согласно настоящему изобретению, дрожжевой экстракт может быть включен в состав композиции в количестве от 10 до 50 частей по массе из расчета на 100 частей по массе фармацевтической композиции для снижения степени или лечения выпадения волос.

Фармацевтическая композиция для снижения степени или лечения выпадения волос по изобретению, как описано выше, может снизить степень выпадения волос и/или лечить выпадение волос и способствовать росту и восстановлению волос путем уменьшения воспаления клеток дермального сосочка человека и окружающих клеток и ингибирования экспрессии 5α-редуктазы.

Согласно настоящему изобретению, фармацевтическая композиция для снижения степени или лечения выпадения волос может быть приготовлена в виде различных дозированных форм для перорального и парентерального применения, и эти формы можно приготовить с использованием разбавителей или эксципиентов, таких, как обычно используемые наполнители, разбавители, связующие, смачивающие агенты, дезинтегранты и поверхностно-активные вещества. Дозировка такой композиции варьируется в зависимости от массы, возраста, пола, состояния здоровья пациента, диеты, времени введения, способа введения, скорости выведения и тяжести заболевания, и суточная доза может составлять приблизительно от 0,0001 до 1 г/кг массы тела. В зависимости от количества композиции ее можно вводить от 1 до 6 раз в день. Композицию можно приготовить в виде композиции для перорального введения, содержащей композицию по изобретению в качестве активного ингредиента. То есть помимо вышеуказанной композиции, используемой в качестве активного ингредиента, она может включать один или несколько наполнителей, таких как микрокристаллическая целлюлоза, лактоза, сахара, крахмалы, модифицированные крахмалы, маннит, сорбит и другие полиолы, декстрин, декстран и мальтодекстрин, карбонат кальция, фосфат и/или гидрофосфат кальция и кальциевая соль серной кислоты; одно или несколько связующих, таких как лактоза, крахмал, модифицированный крахмал, декстрин, декстран и мальтодекстрин, микрокристаллическая целлюлоза, сахара, полиэтиленгликоль, гидроксипропилметилцеллюлоза, этилцеллюлоза, гидроксиэтилцеллюлоза, метилцеллюлоза, карбоксиметилцеллюлоза, карбоксиметилцеллюлоза натрия, желатин, аравийская камедь, трагакант, поливинилпирролидон, алюмосиликат магния и т.п.; один или несколько дезинтегрантов, таких как мостиковая карбоксиметилцеллюлоза натрия, мостиковый поливинилпирролидин, мостиковый карбоксиметилкрахмал, крахмал и микрокристаллическая целлюлоза, алюмосиликат магния, полиакрилат калия и т.п.; один или несколько различных глидантов, таких как стеарат магния, кальция и цинка, бегенат кальция, стеарилфумарат натрия, тальк, трисиликат магния, стеариновая кислота, пальмитиновая кислота, карнаубский воск, диоксид кремния и т.п.; один или несколько буферных агентов, таких как цитрат натрия, двухосновный фосфат натрия, карбонат кальция, гидрофосфат, фосфат, сульфат, карбонат магния, цитрат калия, сорбат калия, аскорбат натрия, бензоат натрия, гидрокарбонат натрия, гидрофосфат натрия и т.п.; или одно или несколько подщелачивающих веществ, таких как MgO, MgOH, NaOH, Са(ОН)2, трометамин, силикат алюминия-магния, лаурилсульфат и т.п. При необходимости дозированная форма может содержать поверхностно-активные вещества и другие полезные ингредиенты, обычно используемые для твердых фармацевтических дозированных форм, такие как красители, лаки, ароматизаторы и адсорбенты. В качестве поверхностно-активного вещества могут быть использованы следующие ионногенные поверхностно-активные вещества, такие как лаурилсульфат натрия, полоксамеры (полимеры полноксиэтилена и полиоксипропилена), которые отличаются друг от друга, природные или синтетические лецитины, сложный эфир сорбитана и жирной кислоты (например, Span®, доступный от Atlas Chemie), сложные эфиры жирных кислот полиоксиэтиленсорбитана (например, Tween®, доступный от Atlas Chemie), полиоксиэтилен-гидрированное касторовое масло (например, Cremophor®, доступный от BASF), неионогенные поверхностно-активные вещества, такие как полиоксиэтиленстеарат (например, Myrj®, доступный от Atlas Chemie) или катионные поверхностно-активные вещества, такие как цетилпиридинхлорид или смеси вышеуказанных поверхностно-активных веществ. Фармацевтическая дозированная форма по изобретению может быть приготовлена в виде твердой фармацевтической дозированной формы, такой как порошок, гранула, таблетка или капсула, или в виде жидкой фармацевтической дозированной формы, предпочтительно включенную в капсулу. Твердая фармацевтическая дозированная форма по изобретению может быть приготовлена следующим образом.

Активные ингредиенты, наполнители, связующие, подщелачивающие или буферные вещества, дезинтегранты и, необязательно, поверхностно-активные вещества и смеси других ингредиентов, полезных в твердых фармацевтических дозированных формах, гомогенизируют с использованием подходящего смесителя. Смесь прессуют с использованием подходящей прессовой машины или получают гранулы на формовочной машине и спрессованный материал или гранулы измельчают и/или просеивают. К полученному продукту добавляют наполнители, дезинтегранты, буферные вещества, глиданты, лубриканты и другие ингредиенты, полезные для таблеток или капсул, и повторно гомогенизируют. Полученную смесь прессуют в таблетки или ей заполняют мягкие или твердые капсулы.

Активные ингредиенты, эксципиенты, связующие, подщелачивающие или буферные вещества, дезинтегранты и, необязательно, поверхностно-активные вещества и смеси других ингредиентов, используемые в твердых фармацевтических дозированных формах, гомогенизируют с использованием подходящего смесителя. К полученному гомогенату добавляют глиданты и лубриканты и повторно гомогенизируют. Полученную смесь прессуют в таблетки или ей заполняют мягкие или твердые капсулы.

Активные ингредиенты, эксципиенты, связующие, подщелачивающие или буферные вещества, дезинтегранты и, необязательно, поверхностно-активные вещества и смеси других ингредиентов, используемые в твердых фармацевтических дозированных формах, гомогенизируют с использованием подходящего смесителя и гранулируют с соответствующим растворителем, таким как вода, этанол, метанол, изопропиловый спирт, н-бутиловый спирт, ацетон, диэтиловый эфир, этилацетат, изопропилацетат, метилацетат, этилацетат, изопропилацетат, метилацетат, дихлорметан, хлороформ, со смесью растворителей, таких как этанол и ацетон, метанол и ацетон, дихлорметан и метанол, или со смесью этих растворителей. Полученные гранулы сушат в подходящих сушилках, таких как стандартные тарельчатые сушилки, сушилки с псевдоожиженным слоем, вакуумные сушилки и сушилки с электромагнитными волнами. К высушенным гранулам добавляют вспомогательные вещества, такие как дезинтегранты, подщелачивающие или буферные вещества, глиданты и лубриканты, а также, необязательно, другие ингредиенты, полезные в твердых фармацевтических дозированных формах. Полученную смесь можно повторно гомогенизировать и спрессовать в таблетки или заполнять ей мягкие или твердые капсулы. Таблетки могут быть необязательно или дополнительно покрыты пленочной оболочкой.

В соответствии с другим иллюстративным вариантом осуществления настоящего изобретения предлагается фармацевтический продукт (парафармацевтический препарат) для снижения степени или лечения выпадения волос путем уменьшения воспаления клеток дермального сосочка человека и окружающих клеток и ингибирования экспрессии 5α-редуктазы, при этом продукт (парафармацевтический препарат) содержит в качестве активных ингредиентов генистеин и кемпферол. Для фармацевтического продукта (парафармацевтического препарата) для снижения степени или лечения выпадения волос, согласно настоящему изобретению, указанную выше композицию для снижения степени или лечения выпадения волос можно использовать как таковую или в сочетании с другими обычными ингредиентами для фармацевтических продуктов (или для нелекарственных средств), которые можно использовать при необходимости в соответствии с обычными методами. Количество смешиваемых активных ингредиентов может быть соответствующим образом определено в соответствии с целью применения (профилактика, поддержание здорового состояния или терапевтическое лечение). Согласно настоящему изобретению, композиция фармацевтического продукта (парафармацевтического препарата) по изобретению может представлять собой дезинфицирующее средство для мытья, пену для душа, средство для ополаскивания, влажную салфетку, мыло для мытья, средство для мытья руками, увлажнитель, маску для волос, мазь или наполнитель фильтра душа.

В соответствии с еще одним иллюстративным вариантом осуществления настоящего изобретения предложена косметическая композиция для снижения степени или лечения выпадения волос путем уменьшения воспаления клеток дермального сосочка человека и окружающих клеток и ингибирования экспрессии 5α-редуктазы, где косметическая композиция содержит в качестве активных ингредиентов генистеин и кемпферол. При использовании косметической композиции для снижения степени или лечения выпадения волос, согласно настоящему изобретению, косметическая композиция может включать, помимо вышеуказанной композиции для снижения степени или лечения выпадения волос, ингредиенты, обычно используемые в косметических композициях. Например, она может включать традиционные адъюванты, такие как антиоксиданты, стабилизаторы, солюбилизаторы, витамины, пигменты и ароматизаторы, а также носители. Косметическая композиция по изобретению может быть приготовлена в любой дозированной форме, традиционно применяемой в данной области техники, и, например, она может быть приготовлена в виде растворов, суспензий, эмульсий, паст, гелей, кремов, лосьонов, порошков, шампуней, мыл, средств для мытья на основе поверхностно-активных веществ, масел, разовых дозированных косметических средств или тоников для ухода за кожей головы, препаратов на основе пудры, препаратов на эмульсионной основе, препаратов на восковой основе, спреев и т.п., но не ограничиваясь ими.

Когда дозированная форма по изобретения представляет собой пасту, крем или гель, то в качестве компонента-носителя можно использовать животное масло, растительное масло, воск, парафин, крахмал, трагакант, производные целлюлозы, полиэтиленгликоль, силикон, бентонит, диоксид кремния, тальк или оксид цинка.

Когда дозированная форма по изобретению представляет собой порошок или спрей, то в качестве компонента-носителя можно использовать порошок лактозы, талька, диоксида кремния, гидроксида алюминия, силиката кальция или полиамида, и особенно, когда она представляет собой спрей, она может дополнительно содержать пропелленты, такие как такие как хлорфторуглеводороды, пропан/бутан или диметиловый эфир.

Когда дозированная форма по изобретению представляет собой раствор или эмульсию, то в качестве компонента-носителя можно использовать растворитель, солюбилизирующий агент или эмульгатор, и их примеры включают воду, этанол, изопропанол, этилкарбонат, этилацетат, бензиловый спирт, бензилбензоат, пропиленгликоль, 1,3-бутиленгликольное масло, сложный эфир глицерина и алифатической кислоты, полиэтиленгликоль или сложные эфиры жирных кислот и сорбитана.

Когда дозированная форма настоящего изобретения представляет собой суспензию, то в качестве компонента-носителя можно использовать жидкие разбавители, такие как вода, этанол или пропиленгликоль, суспендирующие агенты, такие как этоксилированные изостеариловые спирты, сложные эфиры полиоксиэтиленсорбита и сложные эфиры полиоксиэтиленсорбитана, микрокристаллическая целлюлоза, метагидроксид алюминия, бентонит, агар или трагакант и т.п.

Когда дозированная форма настоящего изобретения представляет собой средство для мытья на основе поверхностно-активных веществ, то в качестве компонента-носителя можно использовать сульфат алифатического спирта, сульфат эфира алифатического спирта, моноэфир сульфоянтарной кислоты, изетионат, производные имидазолиния, метилтаураты, саркозинаты, сульфаты эфиров амидов жирных кислот, алкиламидобетаины, жирные спирты, жирные кислоты, глицериды жирных кислот, диэтаноламиды жирных кислот, растительные масла, производные ланолина или этоксилированные сложные эфиры глицерина и жирных кислот и т.п.

В соответствии с еще одним иллюстративным вариантом осуществления настоящего изобретения предложена функциональная пищевая композиция для снижения степени или лечения выпадения волос путем уменьшения воспаления клеток дермального сосочка человека и окружающих клеток и ингибирования экспрессии 5α-редуктазы, где функциональная пищевая композиция содержит в качестве активных ингредиентов генистеин и кемпферол.

Когда композиция по изобретению представлена в виде функциональной пищевой композиции или пищевой композиции, то в дополнение к композиции для снижения степени или лечения выпадения волос, которая описана выше, в ее состав включают функциональные пищевые продукты или ингредиенты, которые обычно добавляют во время производства пищевых композиций в качестве активных ингредиентов, и их примеры могут включать белки, углеводы, жиры, питательные вещества, приправы и флаворанты. Примеры вышеуказанных углеводов включают моносахариды, такие как глюкоза, фруктоза и т.п., дисахариды, такие как мальтоза, сахароза, олигосахариды и т.п., полисахариды, например, обычные сахара, такие как декстрины, циклодекстрины и т.п., и сахарные спирты, такие как ксилит, сорбит и эритрит. В качестве флаворантов могут быть использованы натуральные флаворанты (тауматин, экстракт стевии (например, ребаудиозид А, глицирризин и т.п.)) и синтетические флаворанты (сахарин, аспартам и т.п.). Когда функциональная пищевая композиция по изобретению представлена в виде напитка, то в дополнение к композиции для снижения степени или лечения выпадения волос, которая описана выше, в ее состав могут быть дополнительно включены лимонная кислота, жидкая фруктоза, сахар, глюкоза, уксусная кислота, яблочная кислота, фруктовый сок, экстракт эвкоммии, экстракт юйюбы или экстракт солодки.

Поскольку фармацевтический продукт (парафармацевтический препарат), косметическая композиция и функциональная пищевая композиция по изобретению имеют общие активные ингредиенты и способы применения с описанной выше фармацевтической композицией, то общие описания в отношении фармацевтической композиции опущены, чтобы избежать излишней сложности описания настоящего изобретения.

Предпочтительные примеры осуществления настоящего изобретения и сравнительные примеры будут описаны ниже.

Эти примеры предназначены для иллюстрации настоящего изобретения и не должны рассматриваться как ограничивающие объем настоящего изобретения.

Примеры

Пример 1: Противовоспалительный тест

1. Ингибирование экспрессии индуцибельной синтазы оксида азота (iNOS) и циклооксигеназы-2 (ЦОГ-2)

Мышиные макрофаги RAW 264.7 распределяли в 6-луночном планшете из расчета 6×105 клеток/лунка (количество клеток на одну лунку) и планшет культивировали в инкубаторе при 37°С в атмосфере 5% СО2 с использованием DMEM (модифицированной по Дульбекко среды Игла (Sigma-Aldrich, кат. № D7777)), в течение 24 часов, а затем добавляли образцы в соответствующих концентрациях.

Через тридцать минут после добавления образца добавляли липополисахарид (ЛПС, 100 нг/мл) и продолжали культивирование в течение 20 часов. После этого среду удаляли и промывали фосфатно-солевым буфером (PBS) для сбора клеток. Для экстракции белка добавляли буфер для лизиса, используемый в радиоиммунопреципитационном анализе (RIPA; 150 мМ хлорид натрия, 0,1% додецилсульфат натрия (ДСН), 50 мМ трис-хлористоводородная кислота (трис-HCl: рН 7,5), 2 мМ этилендиаминтетрауксусная кислота (ЭДТА), 0,5% дезоксихолат натрия, 1% Тритон Х-100) и проводили реакцию лизиса, а затем центрифугировали при 10000 об/мин и 4°С в течение 15 минут для получения надосадочной жидкости. Затем измеряли поглощение супернатанта при 595 нм для определения концентрации белка в каждом образце. Затем образец клеточного белка смешивали с додецилсульфатом натрия (ДСН) и красителем и подвергали электрофорезу в полиакриламидном геле с 12% ДСН. Выделенный белок переносили на мембрану из поливинилиденфторида (ПВДФ), блокировали 10% обезжиренным молоком при комнатной температуре в течение 1 часа, затем добавляли первичное антитело и вторичное антитело, а затем окрашивали с помощью раствора для усиленной хемилюминесценции (ECL) и измеряли экспрессию iNOS и ЦОГ-2.

Результаты показаны на Фиг. 1, и было подтверждено, что кемпферол ингибировал экспрессию iNOS до контрольных (CON) уровней в концентрации 25 мкг/мл, а генистеин преимущественно ингибировал экспрессию ЦОГ-2 в той же концентрации (25 мкг/мл).

2. Ингибирующее действие на продукцию оксида азота в макрофагах

Клетки RAW 264.7, которые представляют собой клеточную линию мышиных макрофагов, распределяли в 24-луночном планшете из расчета 2×105 клеток/лунка и культивировали в инкубаторе в течение 24 часов при 37°С в атмосфере 5% СО2. В планшет добавляли галлат эпигаллокатехина (EGCG), генистеин и кемпферол (образцы, растворенные в ДМСО) в соответствующих концентрациях. В это время конечную концентрацию ДМСО доводили до 0,1%. Через 30 минут добавляли ЛПС (липополисахарид), который является веществом, вызывающим процесс воспаления, в концентрации 1 мкг/мл. После этого планшет культивировали в инкубаторе при 37°С в атмосфере 5% СО2 в течение 24 часов.

Для количественного определения оксида азота к 50 мкл среды культуры клеток добавляли 50 мкл реактива Грисса А (5% фосфорной кислоты, 1% сульфаниламида), а затем смесь оставляли в темном месте на 5 минут. Далее добавляли 50 мкл реагента Грисса В (0,1% дигидрохлорид N-(1-нафтил)этилендиамина) и оставляли реагировать в темном месте в течение 5 минут. Поглощение этого реагента измеряли при 540 нм и сравнивали со стандартной кривой для расчета конечной концентрации монооксида азота. Стандартную кривую получали путем реакции, описанной выше, с использованием нитрита натрия вместо среды для культуры клеток и последующего измерения оптической плотности. Результаты показаны на Фиг. 2, где кемпферол в концентрации 20 мкл /мл ингибировал почти до контрольного уровня, EGCG был следующим по величине ингибирующего действия, а генистеин слегка снижал ингибирование.

3. Ингибирование секреции интерлейкина-6 (IL-6) и секреции фактора некроза опухоли-α (TNF-α) в макрофагах

Мышиные макрофаги RAW 264.7 распределяли в 24-луночный планшет из расчета 2×105 клеток/лунка и культивировали в инкубаторе в течение 24 часов при 37°С в атмосфере 5% CO2 с использованием среды DMEM, а затем добавляли образцы в соответствующих концентрациях. Через тридцать минут после добавления образца добавляли ЛПС (100 нг/мл) и культивировали при 37°С в течение 20 часов для сбора культуральной среды. Секретируемый IL-6 и TNF-α количественно определяли соответственно с использованием набора ELISA для мышиного IL-6 (hwitrogen, Thermo Scientific) и набора ELISA для мышиного TNF-α (Invitrogen, Thermo Scientific).

Результаты показаны в Таблице 1 ниже, и подтверждено, что в макрофагах кемпферол эффективно ингибировал как IL-6, так и TNF-α, демонстрируя самый высокий ингибирующий эффект среди галлата эпигаллокатехина (EGCG), генистеина и кемпферола.

Результаты показаны на Фиг. 3. Было подтверждено, что генистеин в концентрации 5 мкг/мл и кемпферол в концентрации 10 мкг/мл практически полностью ингибировали высвобождение IL-6 под действием ДГТ или ТСТ.

Пример 2: Ингибирование экспрессии 5α-редуктазы типа II в клетках дермального сосочка человека (HFDPC)

Клетки дермального сосочка человека (HFDPC) распределяли в 6-луночный планшет в концентрации 3×105 клеток/лунка и культивировали в среде DMEM в течение 24 часов, а затем среду заменяли на среду DMEM, не содержащую FBS, и подвергали истощению в течение 24 часов, а затем добавляли образцы в соответствующих концентрациях (10, 20 мкг/мл). Через 30 минут в планшет добавляли тестостерон (10 мкМ) и культивировали в течение 72 часов. Затем среду удаляли и собирали клетки промыванием PBS для последующей экстракции белков. Для экстракции белка добавляли буфер для лизиса, используемый в радиоиммунопреципитационном анализе (RIPA; 150 мМ хлорид натрия, 0,1% додецилсульфат натрия (ДСН), 50 мМ трис-хлористоводородная кислота (трис-HCl: рН 7,5), 2 мМ этилендиаминтетрауксусная кислота (ЭДТА), 0,5% дезоксихолат натрия, 1% Тритон Х-100) и проводили реакцию лизиса, а затем центрифугировали при 10000 об/мин и 4°С в течение 15 минут для сбора супернатанта. Затем измеряли поглощение при 595 нм, чтобы определить концентрацию белка в каждом образце. Эти образцы клеточного белка смешивали с додецилсульфатом натрия (ДСН) и красителем и подвергали электрофорезу в полиакриламидном геле с 12% ДСН. Выделенный белок переносили на мембрану из поливинилиденфторида (ПВДФ), блокировали при комнатной температуре в течение 1 часа 10% обезжиренным молоком, последовательно добавляли первичное антитело, связывающееся с 5α-редуктазой типа II, и вторичное антитело, связывающееся с первичным антителом, а затем окрашивали раствором для усиленной хемилюминесценции (ECL) и измеряли экспрессию 5α-редуктазы типа II.

Результаты показаны на Фиг. 4, и подтверждено, что генистеин, кемпферол и галлат эпигаллокатехина (EGCG) эффективно ингибируют экспрессию 5α-редуктазы типа II именно в этом порядке.

Пример 3: Противоаллергический эффект

1. Ингибирование экспрессии 5-липоксигеназы (5-LO)

Клетки базофильного лейкоза белых крыс (RBL-2H3) распределяли в 6-луночный планшет из расчета 3×105 клеток/лунка и культивировали в инкубаторе при 37°С в атмосфере 5% CO2 с использованием среды DMEM в течение 24 часов. Образцы добавляли в соответствующих концентрациях, культивировали в течение 24 часов, а затем добавляли соединение 48/80 (1 мг/мл), которое представляет собой вещество, вызывающее аллергическую реакцию, и культивировали в течение 1 часа. После этого среду удаляли и промывали PBS для сбора клеток, а затем экстрагировали белки. Для экстракции белка добавляли буфер для лизиса, используемый в радиоиммунопреципитационном анализе (RIPA; 150 мМ хлорид натрия, 0,1% додецилсульфат натрия (ДСН), 50 мМ трис-хлористоводородная кислота (трис-HCl: рН 7,5), 2 мМ этилендиаминтетрауксусная кислота (ЭДТА), 0,5% дезоксихолат натрия, 1% Тритон Х-100) и проводили реакцию лизиса, а затем центрифугировали при 10000 об/мин и 4°С в течение 15 минут для сбора супернатанта. Затем измеряли поглощение при длине волны 595 нм для определения концентрации белка в каждом образце. Затем образец клеточного белка смешивали с додецилсульфатом натрия (ДСН) и красителем и подвергали электрофорезу в полиакриламидном геле с 12% ДСН. Выделенный белок переносили на мембрану из поливинилиденфторида (ПВДФ), блокировали 10% обезжиренным молоком при комнатной температуре в течение 1 часа, затем добавляли первичное антитело, которое распознает и связывается с 5-липоксигеназой, и вторичное антитело, которое распознает и связывается с первичным антителом, а затем окрашивали раствором для усиленной хемилюминесценции (ECL) и измеряли экспрессию 5-LO.

Результаты показаны на Фиг. 5, и подтверждено, что кемпферол эффективно ингибирует экспрессию 5-LO при самой низкой концентрации.

2. Ингибирование высвобождения гистамина

Клетки базофильного лейкоза белых крыс (RBL-2H3) распределяли в 24-луночный планшет из расчета 1×105 клеток/лунка и культивировали в течение 24 часов. Образцы добавляли в соответствующих концентрациях. Через 1 час добавляли соединение 48/80 (1 мг/мл), которое вызывает аллергическую реакцию, и культивировали в течение 20 минут. Планшет с лунками оставляли в холодильнике при 4°С в течение 10 минут, затем среду собирали и определяли количество гистамина, высвободившегося в среду, с использованием набора для ELISA для гистамина (Neogen). Результаты показаны в Таблице 2, приведенной ниже.

Как показано в Таблице 2, подтверждено, что кемпферол ингибировал высвобождение гистамина более чем на 50% при низкой концентрации, составляющей 0,2 мкг/мл.

Пример 4: Измерение антиоксидантной активности

1. Способность улавливать и поглощать радикалы DPPH

100 мкл образца и такое же количество раствора DPPH (2,2-дифенил-1-пикрилгидразил, 300 мкМ) смешивали в лунках 96-луночного планшета и проводили реакцию в темном месте в течение 30 минут, а затем измеряли поглощение при 520 нм. Такое же количество этанола вводили в реакцию вместо образца и холостое значение рассчитывали в соответствии со следующим уравнением.

Способность улавливать радикалы DPPH (%)=[1-(А×В) / С] × 100,

где А представляет собой оптическую плотность группы с добавкой в образец (DPPH + образец); В представляет собой оптическую плотность группы с добавкой этанола (образец + этанол) вместо DPPH; С представляет собой оптическую плотность группы с добавкой этанола (DPPH + этанол) вместо образца.

Концентрации образцов при улавливании и поглощении 50% радикалов DPPH со значением IC50 (50% улавливающая концентрация) для галлата эпигаллокатехина (EGCG), генистеина и кемпферола показана в Таблице 3, приведенной ниже. Как показано в Таблице 3, подтверждено, что значение IC50 для галлата эпигаллокатехина (EGCG) составило 3,40 мкг/мл, что показывает самую сильную способность к улавливанию и поглощению радикалов DPPH.

Способность ABTS улавливать и поглощать радикалы

ABTS (2,2-азинобис-(3-этилбензотиазолин-6-сульфонат) (7 мМ в дистиллированной воде) и персульфат калия (2,45 мМ в дистиллированной воде) смешивали в равных количествах и оставляли в темном месте на 12 часов или более, для образования катиона ABTS. Смешанный раствор ABTS разбавляли дистиллированной водой так, чтобы значение поглощения при 734 нм составляло 0,700±0,050, а затем использовали в качестве реакционного раствора. Для измерения использовали 20 мкл образца и 180 мкл реакционного раствора ABTS, приготовленного, как указано выше, смешивали в 96-луночном планшете, давали прореагировать в темном месте в течение 10 минут, а затем измеряли поглощение при 734 нм. Способность ABTS улавливать радикалы рассчитывали согласно следующему уравнению.

Способность ABTS улавливать радикалы (%)=[1-(А×В) / С] × 100

где А представляет собой оптическую плотность группы с добавкой в образец (ABTS + образец); В - оптическая плотность группы с добавкой дистиллированной воды (образец + дистиллированная вода) вместо ABTS; С - оптическая плотность группы с добавленным этанолом (ABTS + этанол) вместо образца.

Концентрации проб при удалении 50% радикалов ABTS с помощью IC50 Значение (50% улавливающей концентрации) галлата эпигаллокатехина (EGCG), генистеина и кемпферола показано в Таблице 4 ниже. Как показано в Таблице 4, подтверждено, что значение IC50 для галлата эпигаллокатехина (EGCG) составляло 1,65 мкг/мл, что демонстрировало самую сильную способность ABTS к улавливанию радикалов.

Пример 5: Тест на животных по снижению выпадения волос

Смешивали 40 мас. % кемпферола, 30 мас. % генистеина и 30 мас. % галлата эпигаллокатехина для приготовления композиции для снижения степени выпадения волос (комплекс KGE) по изобретению.

Шестинедельных самок мышей C57BL/6 получали от Samtako BioKorea Co., Ltd., Южная Корея, и их акклиматизировали в течение 7 дней. Затем группу животных разделяли на 5 мышей в каждой группе и проводили тест по выпадению волос на животных. В помещении для животных была установлена температура 22±2°С, относительная влажность 50±10% со световым циклом 12 часов, и позволяли свободно принимать корм и питьевую воду. Волосяной покров на спине мыши сначала удаляли с помощью машинки для стрижки волос, а затем на эту область наносили крем для удаления волос (крем Niclean, доступный от Ildong Pharmaceutical Co., Ltd., Южная Корея) и оставляли на 30 секунд. Через двадцать четыре часа после эпиляции каждой мыши ежедневно подкожно вводили кукурузное масло или пропионат тестостерона (1 мг/мл в кукурузном масле) в количестве 0,1 мл. Композицию для снижения степени выпадения волос (комплекс KGE) по изобретению смешивали и растворяли в стерилизованном физиологическом растворе и каждой мыши с помощью зонда перорально вводили каждый день 0,1 мл раствора. Инъекционные и пероральные дозы для каждой группы мышей показаны в Таблице 5, приведенной ниже. Непосредственно перед началом перорального введения (день 0), а также на 7-й, 12-й, 17-й, 22-й и 27-й день после перорального введения кожу на спине всех мышей фотографировали цифровой камерой, чтобы визуально оценить скорость роста волос. Результаты показаны на Фиг. 6 (таблица оценок характера роста волос и баллы визуальной оценки роста волос для каждой группы) и на Фиг. 7 (характеристика роста волос для каждой группы мышей). После завершения теста (день 27) отросшие волосы в центральной части и четырех краевых частях собирали пинцетом, а их длину измеряли с помощью препаровального микроскопа и микрометра. Результаты показаны на Фиг. 8 (длина волос). Оставшиеся на спине волосы удаляли машинкой для стрижки, а затем измеряли массу и сравнивали общую массу отросших волос. Результаты показаны на Фиг. 9 (масса волос).

Пример 6: Тест на животных по снижению вторичного выпадения волос

На этот раз для исследования синергетического эффекта кемпферола и генистеина использовали в общей сложности 6 групп животных. Каждая группа состояла из 6 мышей. Все 6-недельные самки мышей C57BL/6 были получены от Samtako BioKorea Co., Ltd., и их акклиматизировали в течение 7 дней. Условия в помещении для животных были такими же, как и предыдущие: температура 22±2°С, относительная влажность 50±10%, световой цикл 12 часов, при свободном доступе к корму и питьевой воде. Волосяной покров на спине мыши сначала удаляли с помощью машинки для стрижки волос, а затем на эту область наносили крем для удаления волос (крем Niclean, доступный от Ildong Pharmaceutical Co., Ltd., Южная Корея) и оставляли на 30 секунд. Волосы полностью удаляли путем протирания влажной салфеткой. Через двадцать четыре часа после эпиляции пропионат тестостерона растворяли в кукурузном масле до концентрации в 0,1 мл составляющей 5 мг/мл. Каждой мыши подкожно вводили кукурузное масло (Группа 1, норма), а другим мышам подкожно вводили раствор в количестве 0,1 мл (Группа 2 - Группа 6). Группа 1 представляла собой нормальную контрольную группу, в которой мышам вводили только 0,1 мл кукурузного масла и перорально с помощью зонда вводили 0,1 мл физиологического раствора. Мышам в Группе 2 подкожно вводили пропионат тестостерона (TP), а также перорально вводили 0,1 мл физиологического раствора. Всем мышам Групп 3-6 ежедневно подкожно вводили по 0,1 мл раствора 5 мг/мл пропионата тестостерона (TP) в кукурузном масле. Группа 3 представляла собой группу, в которой мышам каждый день вводили финастерид (F) в дозе 1 мг/кг массы тела с использованием зонда, Группа 4 представляла собой группу, в которой мышам вводили только кемпферол (K), растворенный в физиологическом растворе, в дозе 100 мг/кг массы тела, Группа 5 представляла собой группу, в которой мышам вводили только генистеин (G), растворенный в физиологическом растворе, в дозе 100 мг/кг массы тела, а Группа 6 представляла собой группу, в которой мышам вводили смесь кемпферола и генистеина (KG) в массовом соотношении 1:1 в дозе 100 мг/кг массы тела. Каждый образец или смесь образцов хорошо смешивали с 0,1 мл стерилизованного физиологического раствора во время введения. Это обобщено в Таблице 6 ниже.

Непосредственно перед началом перорального введения (день 0), а также на 11-й, 16-й, 21-й, 28-й и 35-й день после начала перорального введения спины всех мышей во время теста фотографировали цифровой камерой. Скорость роста и густота волос оценивались для каждой группы на основе показателей оценки характера роста волос, как показано на Фиг. 6. Результаты представлены на Фиг. 10 и Фиг. 11, где показано упорядоченное по дате фактическое состояние роста волос на мыши, сфотографированное камерой. После окончательного наблюдения с фоторегистрацией результатов, на 35-й день от начала перорального приема, пинцетом собирали волосы из центральной части и четырех краев участка, где вновь выросли волосы, и длину волос измеряли с помощью препаровального микроскопа и микрометра (Фиг. 12), а оставшиеся волосы подстригали машинкой для стрижки волос и измеряли общую массу вновь отросших волос (Фиг. 13). Для группы, которой перорально вводили смесь кемпферола и генистеина (TP + KG) в массовом соотношении 1:1, зарегистрированы более превосходные результаты в отношении роста волос, чем для группы, где перорально вводили только кемпферол (TP + K) или только генистеин (TP + G).

Все эти группы показали аналогичные или лучшие результаты в отношении роста волос, чем группа, получавшая перорально финастерид (TP + F), которая служила группой положительного контроля.

Пример 7. Упрощенное клиническое исследование по снижению выпадения волос

Смешивали 40 мас. % кемпферола, 30 мас. % генистеина и 30 мас. % галлата эпигаллокатехина с получением композиции для снижения степени выпадения волос по изобретению (комплекс KGE).

Упрощенное клиническое исследование проводили на добровольцах (6 женщин, 9 мужчин) в возрасте от 34 до 67 лет, которые жаловались на симптомы выпадения волос.

Расфасовывали в капсулы 80 мг композиции для снижения степени выпадения волос (комплекс KGE), а затем их давали субъектам для приема по 1 капсуле два раза в день (утром и вечером) в течение 8 недель. После подтверждения состояния здоровья кожи головы субъекта перед началом теста эффект снижения выпадения волос оценивали каждые 4 недели и 8 недель путем визуального осмотра и диагностики состояния волосяного покрова. Количество волос (волос/см2) и толщину волос (мм) измеряли и оценивали с помощью устройства для оценки состояния волос и кожи (AramHuvis Co., Ltd., Южная Корея) следующими методами:

1) Оценка густоты волос

Количество волос на единицу площади (1 см2) определяли путем подсчета количества волос на соответствующей площади (0,25 см2) с помощью устройства для оценки состояния волос и кожи и для дальнейших расчетов использовали величину, полученную умножением на 4.

2) Толщина волос

Толщину 10 волос измеряли с помощью устройства для оценки состояния волос и кожи и толщину волос (мм) выражали как среднее значение.

Кроме того, чтобы выяснить, почувствовали ли сами субъекты улучшение в отношении выпадения волос, проводили анкетный опрос с ответами на вопросы, показанные в Таблице 7. Результаты анкетирования также показаны в Таблице 7, приведенной ниже.

Как показано в Таблице 7, в результате анкетирования 2 субъекта выбрали оценку «существенное улучшение» (+3 балла) в отношении показателя [волосы на макушке стали обильными], а 9 субъектов выбрали оценку «улучшение» (+2 балла), в результате чего общая оценка составила 25 баллов. В отношении показателя [количество выпадающих волос уменьшилось] 3 субъекта выбрали оценку «существенное улучшение» (+3 балла), 5 субъектов выбрали оценку «улучшение» (+2 балла) и 5 субъектов выбрали оценку «небольшое улучшение» (+1 балл), в результате чего общая оценка составила 24 балла. Таким образом подтверждено, что большинство субъектов, участвовавших в исследовании, ощутили эффект снижения симптомов и степени выпадения волос.

После упрощенного клинического испытания, проведенного в течение 8 недель, провели объективную оценку изменения количества волос и толщины волос, и полученные результаты показаны в Таблице 8 и на Фиг. 14 и 15.

В результате показано, что количество волос у субъектов, участвовавших в исследовании, увеличилось в среднем на 21,0%, а толщина волос увеличилась в среднем на 29,5%. Кроме того, показано, что среднее количество волос увеличилось на 10% и более у 12 из 15 субъектов, за исключением 3 субъектов, и толщина волос у 14 субъектов увеличилась на 10% и более.

Хотя настоящее изобретение подробно раскрыто только в отношении описанных выше вариантов осуществления, специалистам в данной области техники понятно и очевидно, что в описанные варианты осуществления изобретения могут быть внесены различные вариации и модификации в пределах объема технических идей настоящего изобретения, и безусловно разумеется, что такие вариации и модификации входят в объем прилагаемой формулы изобретения.

Похожие патенты RU2836332C1

название год авторы номер документа
ЭКСТРАКТ ЛЕСПЕДЕЦЫ ГОЛОВЧАТОЙ ДЛЯ ПРИМЕНЕНИЯ В ОБЛАСТИ УХОДА ЗА ВОЛОСАМИ 2019
  • Лети, Матьё
  • Дон-Марьён, Сильви
  • Левек, Маргерит
RU2799324C2
Композиция для предупреждения выпадения волос или стимуляции роста волос 2019
  • Ким Сок Сун
  • Пак Бун Сэн
  • Ким Иль Ги
RU2794988C1
ПЕРОРАЛЬНЫЕ КОМПОЗИЦИИ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ РАССТРОЙСТВ ВОЛОСИСТОЙ ЧАСТИ КОЖИ ГОЛОВЫ 2001
  • Ди Пьерро Франческо
RU2274470C2
ЛЕЧЕБНОЕ СРЕДСТВО ПРОТИВ АЛОПЕЦИИ 1998
  • Кодзима Коити
  • Хамада Такаказу
  • Йосиока Сирох
RU2193887C2
КОМПОЗИЦИЯ ДЛЯ ПРЕДОТВРАЩЕНИЯ ИЛИ ЛЕЧЕНИЯ ВЫПАДЕНИЯ ВОЛОС, СОДЕРЖАЩАЯ БЕЛОК ХЕМОКИНОВОГО ЛИГАНДА 1, СОДЕРЖАЩЕГО С-Х-С МОТИВ (CXCLI) 2016
  • Сон Сун Ук
  • Сун Чон Хёк
RU2711298C2
ПЕПТИДНАЯ КОМПОЗИЦИЯ ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ ИЛИ ЛЕЧЕНИЯ БОЛЕЗНИ АЛЬЦГЕЙМЕРА 2021
  • Пак, Мин
  • Цой, Ван Су
  • Ли, Сон-Хён
  • Чон, Ин Тук
  • Ким, Юнг Чу
  • Ли, Сон Чон
  • Ким, Сон Мин
  • Ли, Ми Сок
  • Пак, Хи Чо
  • Цой, Сон Пё
  • Мун, Минхо
  • Шин, Су Чон
  • Ким, Сучин
  • Пак, Хо
  • Пак, Чи-Ён
  • Ли, Кун Хо
RU2816119C1
КОМПОЗИЦИЯ ДЛЯ ПРОФИЛАКТИЧЕСКОГО ИЛИ ТЕРАПЕВТИЧЕСКОГО ЛЕЧЕНИЯ СОСТОЯНИЙ, СВЯЗАННЫХ С ИЗМЕНЕНИЕМ КОЛИЧЕСТВА ВОЛОС 2018
  • Темнов Андрей Александрович
RU2716159C2
ТЕРАПЕВТИЧЕСКОЕ ПРИМЕНЕНИЕ ЗЕАКСАНТИНА, ОБЛАДАЮЩЕГО СПЕЦИФИЧЕСКОЙ АНТИАПОПТОЗНОЙ АКТИВНОСТЬЮ ДЛЯ КАСПАЗЫ-3, И КОМПОЗИЦИИ, ЕГО СОДЕРЖАЩИЕ 2009
  • Джулиани Джаммария
  • Бенедузи Анна
  • Барони Серджио
RU2504366C2
ПРИМЕНЕНИЕ 2,3-ДИГИДРОКСИПРОПИЛДОДЕКАНОАТА ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ СЕБОРЕИ 2010
  • Дешелетт Коринн
  • Редуль Даниэль
RU2568833C2
ОБЛАДАЮЩИЙ ПИТАТЕЛЬНЫМИ СВОЙСТВАМИ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЙ СОСТАВ НА ОСНОВЕ ПОЛИФЕНОЛОВ И ЕГО ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ПРИ ЛЕЧЕНИИ РАКА 2003
  • Рат Маттиас
  • Нетке Шриранг
  • Недзвецки Александра
RU2301666C2

Иллюстрации к изобретению RU 2 836 332 C1

Реферат патента 2025 года ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ ДЛЯ СНИЖЕНИЯ СТЕПЕНИ ИЛИ ЛЕЧЕНИЯ ВЫПАДЕНИЯ ВОЛОС ПУТЕМ УМЕНЬШЕНИЯ ВОСПАЛЕНИЯ КЛЕТОК ДЕРМАЛЬНОГО СОСОЧКА ЧЕЛОВЕКА И ОКРУЖАЮЩИХ КЛЕТОК И ИНГИБИРОВАНИЯ ЭКСПРЕССИИ 5α-РЕДУКТАЗЫ

Группа изобретений относится к химии, фармацевтике и косметической промышленности, в частности к фармацевтической композиции для снижения степени или лечения выпадения волос, содержащей в качестве активных ингредиентов генистеин и кемпферол в массовом соотношении 1:1. Также предложены фармацевтический продукт, косметическая композиция и функциональная пищевая композиция, содержащие указанную фармацевтическую композицию. Группа изобретений обеспечивает создание состава, обладающего улучшенной эффективностью в отношении роста и восстановления волос, который можно безопасно применять, в том числе длительное время, поскольку в качестве активных ингредиентов содержатся натуральные соединения, не имеющие побочных эффектов. 4 н. и 7 з.п. ф-лы, 15 ил., 8 табл., 7 пр.

Формула изобретения RU 2 836 332 C1

1. Фармацевтическая композиция для снижения степени или лечения выпадения волос, содержащая в качестве активных ингредиентов генистеин и кемпферол в массовом соотношении 1:1.

2. Фармацевтическая композиция для снижения степени или лечения выпадения волос по п. 1, дополнительно содержащая галлат эпигаллокатехина (EGCG).

3. Фармацевтическая композиция для снижения степени или лечения выпадения волос по п. 1, где генистеин и кемпферол экстрагируют и концентрируют из природного материала или они являются синтезированными.

4. Фармацевтическая композиция для снижения степени или лечения выпадения волос по п. 3, где генистеин экстрагируют и концентрируют из люпина, конских бобов, соевых бобов, корня кудзу или плодов софоры японской (пагодового дерева).

5. Фармацевтическая композиция для снижения степени или лечения выпадения волос по п. 1, дополнительно содержащая дрожжевой экстракт.

6. Фармацевтическая композиция для снижения степени или лечения выпадения волос по п. 5, где дрожжевой экстракт содержится в количестве от 10 до 50 частей по массе из расчета на 100 частей по массе фармацевтической композиции для снижения степени или лечения выпадения волос.

7. Фармацевтический продукт для снижения степени или лечения выпадения волос, содержащий фармацевтическую композицию для снижения степени или лечения выпадения волос по любому из пп. 1-6.

8. Фармацевтический продукт для снижения степени или лечения выпадения волос по п. 7, где фармацевтический продукт для снижения степени или лечения выпадения волос представляет собой дезинфицирующее средство для мытья, пену для душа, мыло для мытья, средство для мытья руками, гель, маску для волос, шампунь, тоник для ухода за кожей головы, разовое дозированное косметическое средство или тоник для ухода за кожей головы, суспензию, эмульсию, пасту, мазь, масло или наполнитель для фильтров душа.

9. Косметическая композиция для снижения степени или лечения выпадения волос, содержащая фармацевтическую композицию для снижения степени или лечения выпадения волос по любому из пп. 1-6.

10. Косметическая композиция для снижения степени или лечения выпадения волос по п. 9, где косметическая композиция для снижения степени или лечения выпадения волос находится в виде растворов, суспензий, эмульсий, паст, гелей, кремов, лосьонов, порошков, шампуней, тоников для ухода за кожей головы, разовых дозированных косметических средств для ухода за кожей головы, мыл, средств для мытья на основе поверхностно-активных веществ, масел, препаратов на основе пудры, препаратов на эмульсионной основе, препаратов на восковой основе и спреев.

11. Функциональная пищевая композиция для снижения степени или лечения выпадения волос, содержащая фармацевтическую композицию для снижения степени или лечения выпадения волос по любому из пп. 1-6.

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2025 года RU2836332C1

Приспособление для распределения перемещаемых изделий по ширине транспортерной ленты 1932
  • Бутрин И.Н.
  • Морозов А.И.
SU35667A1
US 6696484 B2, 24.02.2004
RU 2011113691 A, 20.10.2012
US 6017893 A, 25.01.2000
KR 1020170074786 A, 30.06.2017
KR 101208736 B1, 06.12.2012.

RU 2 836 332 C1

Авторы

Ли, Сон Сок

Чон, Чон Мун

Ли, Минь Чи

Син, Чин А

Ли, Хва

Даты

2025-03-13Публикация

2022-03-22Подача