ЛЕЧЕНИЕ ЗАБОЛЕВАНИЯ ИЛИ НАРУШЕНИЯ СО СТОРОНЫ ПЕЧЕНИ, ПРЕДУСМАТРИВАЮЩЕЕ ПРИМЕНЕНИЕ АНТАГОНИСТОВ РЕЦЕПТОРОВ ACTRII Российский патент 2025 года по МПК A61K39/395 A61K39/00 A61K45/00 A61K45/06 A61P1/16 A61P3/04 C07K16/28 

Перечень последовательностей

Настоящая заявка содержит перечень последовательностей, который был подан в электронном виде в формате ASCII и настоящим включен посредством ссылки во всей своей полноте. Указанная копия в формате ASCII, созданная 14 июля 2020 года, называется PAT058683-WO-PCT_SL.txt, и ее размер составляет 10864 байта.

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ

[1] Настоящее изобретение относится к антагонистам рецептора активина II типа (ActRII), например, молекулам, способным противодействовать связыванию активинов, ростовых факторов дифференцировки (GDF), костных морфогенетических белков (BMP) и/или миостатина с рецептором ActRII человека, например, антагонистическому антителу к ActRIIA и/или ActRIIB, например, антителу к рецептору ActRII, например, бимагрумабу, для применения в способах предупреждения или лечения заболевания или нарушения со стороны печени. Настоящее изобретение также относится к способам предупреждения или лечения заболевания или нарушения со стороны печени путем введения субъекту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества антагониста рецептора ActRII.

[2] Настоящее изобретение также относится к фармацевтической комбинации, предусматривающей а) антагонист рецептора активина II типа (ActRII), например, молекулы, способные противодействовать связыванию активинов, ростовых факторов дифференцировки (GDF), костных морфогенетических белков (BMP) и/или миостатина с рецептором ActRII человека, например, антагонист ActRIIA и/или ActRIIB, например, антитело к рецептору ActRII, например, бимагрумаб, и b) по меньшей мере одно дополнительное терапевтическое средство, необязательно в присутствии фармацевтически приемлемого носителя, и к содержащим их фармацевтическим композициям. Кроме того, настоящее изобретение направлено на применение таких фармацевтических комбинаций для лечения или предупреждения заболеваний или нарушений со стороны печени, а также на композиции, способы, варианты применения и схемы, предусматривающие такие комбинации.

ПРЕДПОСЫЛКИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[3] Неалкогольная жировая болезнь печени (NAFLD) является одной из наиболее распространенных причин хронического заболевания печени в западном мире (Ratziu et al. J Hepatol. 2010 Aug; 53(2):372-84.). Основными стадиями NAFLD являются: 1 - простой жировой гепатоз (стеатоз печени), при котором избыточный жир накапливается в клетках печени посредством процесса стеатоза (т.е. аномальной задержки липидов внутри клетки); 2 - неалкогольный стеатогепатит (NASH), более серьезная форма NAFLD, при которой стеатоз печени переходит в прогрессирующее воспаление печени (гепатит), называемое стеатогепатитом; 3 - фиброз, при котором в печени наблюдается постоянное воспаление, приводящее в результате к образованию фиброзной рубцовой ткани вокруг клеток печени и кровеносных сосудов; и 4 - цирроз, при котором это повреждение является постоянным и может привести к печеночной недостаточности и раку печени (гепатоцеллюлярная карцинома; HCC). Трансплантация печени является единственным методом лечения прогрессирующего цирроза с печеночной недостаточностью, и трансплантацию все чаще проводят людям, страдающим NASH.

[4] Стеатоз, лобулярное воспаление и баллонная дистрофия клеток печени являются компонентами, все из которых необходимы для диагностирования NASH, а также обычно наблюдается наличие фиброза. Показатель активности NAFLD (NAS) был разработан как инструмент для измерения изменений при NAFLD во время терапевтических испытаний. Показатель в баллах рассчитывают как невзвешенную сумму баллов в отношении стеатоза (0-3), лобулярного воспаления (0-3) и баллонной дистрофии (0-2).

[5] Оценки распространенности NAFLD во всем мире варьируются от 6,3% до 33%, при этом медиана составляет 20% среди населения в целом. Предполагаемая распространенность NASH является более низкой, от 3 до 5% (Younossi et al., Hepatology, Vol. 64, No. 1, 2016). NASH представляет собой проблему мирового масштаба с растущей распространенностью за последние несколько десятилетий. NASH тесно связан с метаболическим синдромом и сахарным диабетом 2 типа.

[6] Кроме того, смертность от сердечно-сосудистых заболеваний является важной причиной смерти пациентов с NASH.

[7] Рецепторы активина 2 типа (ActRIIA и ActRIIB, в своей совокупности сокращенно обозначаемые как ActRII) модулируют сигналы лигандов, принадлежащих к надсемейству трансформирующих факторов роста бета (TGF-β), таких как миостатин, GDF-11 и активины. Миостатин, активин А и GDF-11 являются отрицательными регуляторами роста скелетных мышц, действуя посредством сигнального пути с участием рецептора ActRII с подавлением синтеза мышечного белка, а также дифференцировки и пролиферации миоцитов.

Бимагрумаб (международное непатентованное название (INN) 9711, также известный как BYM338 или MOR08159), рекомбинантное человеческое моноклональное антитело, конкурентно связывается с ActRII с большей аффинностью, чем его природные лиганды миостатин или активин. Бимагрумаб раскрыт в WO 2010/125003, который включен в данный документ посредством ссылки. Последовательности бимагрумаба, раскрытые в WO 2010/125003, перечислены в таблице 1. Бимагрумаб продемонстрировал значительное увеличение массы скелетных мышц у здоровых добровольцев, у пациентов со спорадическим миозитом с включенными тельцами (sIBM) и у пациентов с саркопенией. В предыдущих исследованиях однократная доза бимагрумаба вызывала увеличение объема мышц бедра, измеренное с помощью магнитно-резонансной томографии, на примерно 6% через 10 недель у здоровых худощавых взрослых людей по сравнению с плацебо и обеспечивала уменьшение жировой массы в сопоставимой степени (Roubenoff and Papanicolaou, New treatments for muscle wasting: an update on bimagrumab and other treatments. Abstract at ICFSR 2015). Однократная доза бимагрумаба оказала сильное влияние на состав тела с максимальным снижением жировой массы, составляющим ~ 8%, и увеличением безжировой массы, составляющим ~ 3% (DXA), у пациентов с избыточным весом/ожирением, находящихся в преддиабетическом состоянии (Garito et al, Diabetes Obes Metab. 2018 Jan; 20(1):94-102).

[8] В настоящее время не существует одобренных лекарственных средств для предупреждения или лечения NAFLD, в том числе NASH. Таким образом, лечение заболеваний или нарушений, связанных с печенью, в частности заболеваний печени, таких как NAFLD или NAFLD, представляет собой существенную неудовлетворенную медицинскую потребность.

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[9] Настоящее изобретение частично относится к обнаружению того, что непосредственное подавление связывания миостатина или активина с их рецепторами ActRII (предпочтительно ActRIIB и ActRIIA или только ActRIIA, либо ActRIIB) путем введения ActRII-связывающих антител обеспечивает значительное снижение содержания жира в печени.

[10] Соответственно, настоящее изобретение направлено на антагонисты рецептора активина II типа (ActRII), например, молекулы, способные противодействовать связыванию активинов, ростовых факторов дифференцировки (GDF), костных морфогенетических белков (BMP) и/или миостатина с рецептором ActRII человека, предпочтительно антагонист ActRIIA и/или ActRIIB, предпочтительно антагонистическое антитело к ActRIIA и/или ActRIIB, наиболее предпочтительно бимагрумаб, для применения в предупреждении или лечении заболевания или нарушения со стороны печени. Настоящее изобретение также направлено на способы предупреждения или лечения заболевания или нарушения со стороны печени путем введения субъекту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества антагонистов рецептора активина II типа (ActRII), например, молекул, способных противодействовать связыванию активинов, ростовых факторов дифференцировки (GDF), костных морфогенетических белков (BMP) и/или миостатина с рецептором ActRII, предпочтительно антагонистического антитела к ActRIIA и/или ActRIIB, наиболее предпочтительно бимагрумаба.

[11] Являясь эффективным ингибитором ActRII, бимагрумаб блокирует эффекты миостатина, активина А, GDF11 и, возможно, других лигандов, оказывающих свое действие посредством этих рецепторов (Lach-Trifilieff et al., Mol Cell Biol. 2014 Feb; 34(4):606-18).

[12] Таким образом, в настоящем изобретении представлен антагонист рецептора активина II типа, предпочтительно антагонист ActRIIA и/или ActRIIB, и более предпочтительно антитело к рецептору ActRII, наиболее предпочтительно бимагрумаб, для применения в снижении содержания жира в печени.

[13] Таким образом, в настоящем изобретении представлен антагонист рецептора активина II типа, предпочтительно антагонист ActRIIA и/или ActRIIB, и более предпочтительно антитело к рецептору ActRII, наиболее предпочтительно бимагрумаб, для применения в лечении или предупреждении заболевания или нарушения со стороны печени.

[14] В аналогичном аспекте в настоящем изобретении представлен антагонист рецептора активина II типа, предпочтительно антагонист ActRIIA и/или ActRIIB, и еще более предпочтительно антитело к рецептору ActRII, наиболее предпочтительно бимагрумаб, для применения в лечении или предупреждении заболевания или нарушения со стороны печени у пациента, в результате чего обеспечивается снижение содержания жира в печени.

[15] В аналогичном аспекте в настоящем изобретении представлен рецептор активина II типа, предпочтительно антагонист ActRIIA и/или ActRIIB, предпочтительно антитело к рецептору ActRII, наиболее предпочтительно бимагрумаб, для применения в лечении, предупреждении или уменьшении сопутствующих заболеваний, связанных с заболеванием или нарушением со стороны печени, в частности тех, которые связаны с увеличенной массой жира в печени.

[16] В настоящем изобретении дополнительно представлена конкретная схема введения дозы антагониста миостатиновых рецепторов, представляющего собой бимагрумаб, для применения по настоящему документу.

[17] Настоящее изобретение также относится к фармацевтическим комбинациям, предусматривающим а) антагонист рецептора активина II типа (ActRII), например, молекулы, способные противодействовать связыванию активинов, ростовых факторов дифференцировки (GDF), костных морфогенетических белков (BMP) и/или миостатина с рецептором ActRII человека, предпочтительно антагонист ActRIIA и/или ActRIIB, и более предпочтительно антитело к рецептору ActRII, наиболее предпочтительно бимагрумаб, и b) по меньшей мере одно дополнительное терапевтическое средство, необязательно в присутствии фармацевтически приемлемого носителя, для применения в лечении или предупреждении заболевания или нарушения со стороны печени, и к содержащим их фармацевтическим композициям.

[18] Дополнительные признаки и преимущества настоящего изобретения станут очевидными из следующего подробного описания настоящего изобретения.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ

Фигура 1A-D. Представлены вес тела (фигура 1A), безжировая масса (фигура 1B), общая жировая масса (фигура 1C) и %-ное содержание жира в печени (фигура 1D) у мышей, получавших нормальный рацион (ND) (группа № 3), а также мышей с индуцированным рационом NASH (HF/NASH), получавших обработку (+CDD866) (группа № 1) и не получавших обработку (+контроль (контр.) (группа № 2) с помощью CDD866 в течение 20 недель.

Фигура 2A-C. Представлено окрашивание срезов печени пикросириусом красным (PSR) в неделю 20 для мышей, получавших нормальный рацион (ND), а также мышей с индуцированным рационом NASH (HF/NASH), получавших (+CDD866) и не получавших (+контроль (контр.) обработку с помощью CDD866 (муринизированный BYM338). На панели A) представлена площадь, окрашенная PSR, в мм², на панели B) представлено репрезентативное изображение срезов печени, окрашенных PSR, на панели C) представлен гистопатологический показатель.

Фигура 2D-E. Представлен иммуногистологический анализ в отношении воспаления (IBA1) и фиброза (антитела к гладкомышечным клеткам (aSMA) для мышей, получавших нормальный рацион (ND), а также мышей с индуцированным рационом NASH, получавших или не получавших обработку с помощью CDD866. На панели D) представлена общая площадь окрашенной aSMA ткани и репрезентативное изображение срезов печени, окрашенных с помощью aSMA, на панели E) представлено общее количество IBA1-положительных короноподобных структур печени.

Фигура 2F. Микро- и макровезикулярный стеатоз, присутствующий на срезах печени, окрашенных гематоксилином и эозином (H&E). Представлены гистопатологический показатель и репрезентативное изображение с H&E-окрашиванием.

Фигура 3A-D. Представлены экспрессия генов и анализ сыворотки крови у мышей, получавших нормальный рацион (ND), а также мышей с индуцированным рационом NASH, получавших или не получавших обработку с помощью CDD866. На панели A) представлены уровни экспрессии генов в случае маркеров фиброза, на панели B) представлены уровни экспрессии генов в случае маркеров воспаления, на панели C) представлены уровни TIMP1 в сыворотке крови, на панели D) представлены уровни PIIINP в сыворотке крови.

Фигура 4. Представлены уровни аспартатаминотрансферазы (AST) и гамма-глутамилтрансферазы (GGT) у мышей, получавших нормальный рацион (ND), а также мышей с индуцированным рационом NASH, получавших или не получавших обработку с помощью CDD866.

Фигура 5A-E. Представлены вес тела (фигура 5A), безжировая масса (фигура 5B), общая жировая масса (фигура 5C), вес белой жировой ткани (WAT) (фигура 5D) и вес бурой жировой ткани (BAT) (фигура 5E) у контрольных мышей (группа № 3) и у мышей с CCl4-индуцированным фиброзом печени, получавших (+CDD866) (группа № 1) и не получавших (+среда-носитель) (группа № 2) обработку в течение 28 дней.

Фигура 6A-B. Представлено окрашивание срезов печени пикросириусом красным (PSR) в неделю 4 для контрольных мышей и для мышей с CCl4-индуцированным фиброзом печени, получавших (+CDD866) и не получавших (+среда-носитель) обработку. На панели A) представлена площадь, окрашенная PSR, в мм², на панели B) представлено репрезентативное изображение срезов печени, окрашенных PSR.

Фигура 6C-D. Представлен иммуногистологический анализ в отношении фиброза (антитела к гладкомышечным клеткам (aSMA) по состоянию на неделю 4 для контрольных мышей и для мышей с CCl4-индуцированным фиброзом печени, получавших (+CDD866) и не получавших (+среда-носитель) обработку. На панели C) представлена общая площадь ткани, окрашенная aSMA, на панели D) представлено репрезентативное изображение срезов печени, окрашенных aSMA.

Фигура 6E. Представлен анализ сыворотки крови в отношении уровней TIMP-1 и PIIINP у контрольных мышей и у мышей с CCl4-индуцированным фиброзом печени, получавших (+CDD866) и не получавших (+среда-носитель) обработку, по состоянию на неделю 4.

Фигура 7. Представлены уровни экспрессии генов в случае маркеров фиброза у контрольных мышей и у мышей с CCl4-индуцированным фиброзом печени, получавших (+CDD866) и не получавших (+среда-носитель) обработку, по состоянию на неделю 4.

Фигура 8. Представлены значения общей жировой массы тела, оцененной с помощью DXA у субъектов, получавших 10 мг/кг BYM338 или плацебо, от исходного уровня до завершения исследования (EOS) в неделю 56.

Фигура 9A-B. Представлены антропометрические характеристики субъектов, получавших 10 мг/кг BYM338 или плацебо, от исходного уровня до завершения исследования (EOS) в неделю 56. На панели A) представлен вес тела в кг, на панели B) представлен BMI (кг/м²).

Фигура 10. Представлены выраженные в % значения жировой фракции печени для субъектов, получавших 10 мг/кг BYM338 или плацебо, по состоянию на начало исследования, неделю 24 и неделю 48.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[19] Настоящее изобретение относится к способам лечения или предупреждения заболевания или нарушения со стороны печени путем введения субъекту, нуждающемуся в этом, эффективного количества антагонистов рецептора активина II типа (ActRII), например, молекул, способных противодействовать связыванию активинов, ростовых факторов дифференцировки (GDF), костных морфогенетических белков (BMP) и/или миостатина с рецептором ActRII, предпочтительно антагонистического антитела к ActRIIA и/или ActRIIB, наиболее предпочтительно бимагрумаба. Соответственно, в одном аспекте представлен способ предупреждения или лечения заболевания или нарушения со стороны печени, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, эффективного количества бимагрумаба. Также представлены антагонисты рецептора активина II типа (ActRII), например, молекулы, способные противодействовать связыванию активинов, ростовых факторов дифференцировки (GDF), костных морфогенетических белков (BMP) и/или миостатина с рецептором ActRII человека, предпочтительно антагонистическое антитело к ActRIIA и/или ActRIIB, наиболее предпочтительно бимагрумаб, для применения в предупреждении или лечении заболевания или нарушения со стороны печени. В одном варианте осуществления любого способа или варианта применения по настоящему изобретению указанные антагонисты рецептора активина II типа (ActRII), предусматриваемые ими, представляют собой ActRIIA-связывающее и/или ActRIIB-связывающее антитело. В некоторых вариантах осуществления любого и/или всех способов или вариантов применения, описанных в настоящем документе, ActRIIA-связывающее и/или ActRIIB-связывающее антитело представляет собой нейтрализующее антитело.

Определения

[20] Для того чтобы настоящее изобретение можно было легче понять, некоторым терминам сперва дано определение. Дополнительные определения приведены в подробном описании.

[21] Все патенты, опубликованные патентные заявки, публикации, ссылки и другие материалы, упомянутые в данном документе, включены в данный документ посредством ссылки в их полном объеме.

[22] Используемое в данном документе выражение «содержащий» охватывает также «включающий» и «состоящий из», например, композиция, «содержащая» X, может состоять исключительно из X или может включать что-либо дополнительное, например, X+Y.

[23] Используемые в данном документе формы единственного числа относятся к одному или нескольким (например, к по меньшей мере одному) грамматическим объектам формы.

[24] Термин «или» используется в данном документе для обозначения термина «и/или» и используется взаимозаменяемо с ним, если контекст явно не указывает на иное.

[25] Термин «приблизительно» по отношению к эталонному числовому значению и его грамматические эквиваленты, используемые в данном документе, могут включать само числовое значение и диапазон значений плюс или минус 10% от этого числового значения. Например, количество «приблизительно 10» включает 10 и любые количества от 9 до 11. Например, термин «приблизительно» по отношению к эталонному числовому значению может также включать диапазон значений плюс или минус 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2% или 1% от этого значения. В некоторых случаях числовое значение, раскрытое на протяжении документа, может быть «приблизительным» в отношении этого числового значения даже без конкретного упоминания термина «приблизительно».

[26] Используемый в данном документе термин «исходный уровень» относится к статусу субъекта или степени выраженности состояния, например, заболевания или одного или более параметров, связанных со статусом пациента, наблюдаемых до лечения, например, до введения соединения, например, до введения антагониста ActRII, необязательно в комбинации с по меньшей мере одним дополнительным терапевтическим средством, в соответствии с настоящим изобретением.

[27] Используемый в данном документе термин «введение» по отношению к соединению, например, антагонисту ActRII, необязательно в комбинации с по меньшей мере одним дополнительным терапевтическим средством, используется для обозначения доставки этого соединения посредством любого пути доставки.

[28] Используемое в данном документе слово «по сути» не исключает «полностью», например, композиция, которая «по сути не содержит» Y, может вообще не содержать Y. В случае необходимости слово «по сути» может быть исключено из определения по настоящему изобретению.

[29] Используемый в данном документе термин «фармацевтически приемлемый» означает нетоксичный материал, который по сути не влияет на эффективность биологической активности активного(-ых) ингредиента(-ов).

[30] Термины «ActRIIA» и «ActRIIB» относятся к рецепторам активина. Активины передают сигналы с помощью гетеродимерного комплекса рецепторных серинкиназ, которые предусматривают по меньшей мере два рецептора I типа (I и IB) и два рецептора II типа (IIA и IIB, также называемые ACVR2A и ACVR2B). Все эти рецепторы представляют собой трансмембранные белки, состоящие из связывающего лиганд внеклеточного домена с богатой цистеином областью, трансмембранного домена и цитоплазматического домена с предсказанной сериновой/треониновой специфичностью. Рецепторы I типа имеют важное значение для передачи сигналов, при этом рецепторы II типа необходимы для связывания лигандов и для экспрессии/рекрутирования рецепторов I типа. Рецепторы I и II типа образуют стабильный комплекс после связывания лиганда, что приводит к фосфорилированию рецепторов I типа рецепторами II типа. Рецептор II B активина (ActRIIB) представляет собой рецептор к миостатину. Рецептор II A активина (Act RIIA) представляет собой также рецептор к миостатину. Термин рецептор ActRIIB или Act IIB относится к ActRIIB человека (AAC64515.1, GI:3769443). В уровне техники известны поликлональные и моноклональные антитела исследовательского уровня к ActRIIB, как например те, которые изготовлены R&D Systems^®, штат Миннесота, США. Конечно антитела могут взаимодействовать с ActRIIB из других видов и могут применяться для лечения патологических состояний у этих видов.

[31] Под «молекулой, связывающей ActRII» подразумевается любая молекула, способная к связыванию с рецепторами ActRII человека, представляющими собой ActRIIA и/или ActRIIB, либо отдельно, либо ассоциировано с другими молекулами. Реакция связывания может быть показана с помощью стандартных способов (качественных анализов), в том числе, например, анализа связывания, конкурентного анализа или биологического анализа для определения степени подавления связывания рецептора ActRII с миостатином или любого вида анализов связывания в сравнении с тестом с отрицательным контролем, в котором используют антитело с неродственной специфичностью, но, в идеальном случае, относящееся к тому же изотипу, например антитело к CD25. Неограничивающие примеры молекул, связывающих рецептор ActRII, включают малые молекулы, такие как аптамеры или другие молекулы нуклеиновой кислоты, сконструированные и/или подвергнутые связыванию с рецептором, ловушки лиганда и антитела к рецептору ActRII, продуцируемые B-клетками или гибридомами, и химерные антитела, антитела с привитыми CDR или человеческие антитела или любой их фрагмент, например F(ab')2- и Fab-фрагменты, а также одноцепочечные или однодоменные антитела. Предпочтительно молекула, связывающая рецептор ActRII, противодействует (например, сокращает, подавляет, снижает, задерживает) связыванию природных лигандов с рецептором ActRII. В некоторых вариантах осуществления раскрытых способов, схем, наборов, процессов и вариантов применения применяют молекулу, связывающую рецептор ActRIIB.

[32] «Сигнальная активность» относится к биохимической причинно-следственной связи, обычно инициируемой белок-белковым взаимодействием, таким как связывание фактора роста с рецептором, что приводит к передаче сигнала от одной части клетки к другой части клетки. Обычно передача предусматривает специфичное фосфорилирование одного или более остатков тирозина, серина или треонина в одном или более белков в серии реакций, обуславливающих передачу сигнала. Предпоследние процессы обычно включают в себя ядерные события, приводящие к изменению экспрессии генов.

[33] Используемый в данном документе термин «пациент» используется взаимозаменяемо с термином «субъект» и относится к пациенту-человеку.

[34] Как используется в настоящем документе, субъект «нуждается» в лечении, если субъект является таковым, у которого имеется патологическое состояние, представляющее интерес (то есть заболевание или нарушение), и для которого будут обеспечены биологическая, медицинская польза или улучшение качества жизни в результате такого лечения.

[35] Термин «лечение или предупреждение» включает введение соединения, например, антагониста ActRII, предпочтительно бимагрумаба, необязательно в комбинации с по меньшей мере одним дополнительным терапевтическим средством, для предупреждения или задержки начала появления симптомов, осложнений или биохимических признаков заболевания (например, заболевания или нарушения со стороны печени), уменьшения выраженности симптомов или прекращения или подавления дальнейшего развития заболевания, состояния или нарушения. Лечение может быть профилактическим (для предупреждения или задержки возникновения заболевания или для предупреждения проявления его клинических или субклинических симптомов) или терапевтическим для подавления или уменьшения выраженности симптомов после проявления заболевания.

[36] Используемый в данном документе в связи с заболеванием или нарушением термин «предупреждать», «осуществление предупреждения» или «предупреждение» относится к профилактическому лечению субъекта, подверженного риску развития состояния (например, специфического заболевания или нарушения или его клинического симптома, как например заболевание или нарушение со стороны печени), приводящему к снижению вероятности того, что у субъекта разовьется состояние.

[37] Термины «лечить», «осуществление лечения» и «лечение» относятся как к терапевтическому лечению, так и к профилактическим или превентивным мерам, целью которых является уменьшение интенсивности проявлений заболевания или нарушения (т.е. замедление, прекращение или уменьшение развития заболевания или по меньшей мере одного из его клинических симптомов) путем уменьшения выраженности или уменьшения интенсивности проявлений по меньшей мере одного физического параметра, включая те, которые могут быть неразличимы пациентом. Термины «лечить», «осуществление лечения» и «лечение» также относятся к модулированию заболевания или нарушения либо физически (например, путем стабилизации явного симптома), либо физиологически (например, путем стабилизации физического параметра), либо с помощью и того и другого, и/или к предупреждению или задержке возникновения, или развития, или прогрессирования заболевания или нарушения.

[38] Например, «осуществление лечения NASH» или «осуществление лечения NAFLD» может относиться к уменьшению интенсивности проявлений, уменьшению выраженности или модулированию по меньшей мере одного из симптомов или патологических признаков, ассоциированных с NASH/NAFLD; например, гепатостеатоза, баллонной дистрофии клеток печени, воспаления и фиброза печени; например, может относиться к замедлению прогрессирования, уменьшению или устранению по меньшей мере одного из симптомов или патологических признаков, связанных с NASH/NAFLD, например, гепатостеатоза, баллонной дистрофии клеток печени, воспаления и фиброза печени. Это также может относиться к предупреждению или задержке развития цирроза печени или необходимости трансплантации печени, например замедлению прогрессирования, остановке или обращению прогрессирования заболевания и улучшению клинических исходов (т.е. предупреждение прогрессирования до цирроза и его осложнений, снижение потребности трансплантации печени и улучшение выживаемости).

[39] Используемый в данном документе термин NAFLD может охватывать различные стадии заболевания: гепатостеатоз или неалкогольную жировую дистрофию печени (NAFL), NASH, NASH с фиброзом и NASH с циррозом. NASH обычно характеризуется стеатозом печени, баллонной дистрофией клеток печени и лобулярным воспалением. NAFL характеризуется накоплением триацилглицерина (TAG) в печени. Стеатоз печени определяется как содержание TAG в печени, составляющее по меньшей мере 5% от веса печени, или 5% гепатоцитов, содержащих липидные вакуоли, при отсутствии вторичного сопутствующего фактора, такого как избыточное потребление алкоголя, вирусная инфекция или процедуры лечения лекарственными средствами.

[40] Также «осуществление лечения» NASH может относиться к замедлению, остановке или обращению прогрессирования заболевания и улучшению клинических исходов, т.е. предупреждению прогрессирования до цирроза, и регрессии стеатогепатита и отсутствию ухудшения течения фиброза печени по гистологической оценке сети клинических исследований NASH (CRN).

[41] Лечение NASH включает:

- «регрессию стеатогепатита», определяемую как отсутствие жировой болезни печени или изолированного или простого стеатоза без стеатогепатита и показатель NAS 0-1 в отношении воспаления, 0 в отношении баллонной дистрофии и любое значение в отношении стеатоза; осложнений цирроза, снижение потребности трансплантации печени и повышение выживаемости;

- или улучшение в отношении фиброза печени на одну стадию или более (гистологическая оценка NASH CRN) и отсутствие ухудшения течения стеатогепатита (например, определяемое как отсутствие увеличения баллонной дистрофии, воспаления или стеатоза при NAS);

- или как регрессию стеатогепатита, так и улучшение в отношении фиброза (как определено выше).

[42] «Осуществление лечения» или «лечение» NAFLD или NASH у человека включает одно или более из:

уменьшения риска развития NAFLD или NASH, т.е. предотвращения развития клинических симптомов NAFLD или NASH у субъекта, который может быть предрасположен к NAFLD или NASH.

подавления NAFLD или NASH, т.е. прекращения или уменьшения развития NAFLD или NASH или их клинических симптомов; и

облегчения NAFLD или NASH, т.е. обеспечения регрессии, обращения или уменьшения интенсивности проявлений NAFLD или NASH или уменьшения числа, частоты, продолжительности или тяжести их клинических симптомов.

[43] Используемый в данном документе термин «показатель NAS» относится к показателю активности NAFLD, широко используемой гистологической системе оценки и стадирования NAFLD (Kleiner et al., Hepatology. 2005 Jun; 41(6):1313-21).

[44] «Эффективное количество» относится к количеству, достаточному для достижения благоприятных или необходимых результатов. Например, терапевтическое количество представляет собой такое количество, при котором достигается требуемый терапевтический эффект. Данное количество может быть таким же, как и профилактически эффективное количество, которое представляет собой количество, необходимое для предупреждения начала проявления заболевания или симптомов заболевания, или отличным от него. Эффективное количество можно вводить посредством одного или более введений, применений или дозировок. «Терапевтически эффективное количество» терапевтического соединения (т.е. эффективная доза) зависит от выбранных терапевтических соединений. Композиции можно вводить от одного или более раз в день до одного или более раз в неделю, а также они предусматривают менее частое введение, например, как описано в настоящем документе. Специалист в данной области поймет, что на дозу и временные рамки, требуемые для эффективного лечения субъекта, могут влиять определенные факторы, в том числе без ограничения тяжесть заболевания или нарушения, предыдущие виды лечения, общее состояние здоровья и/или возраст субъекта и наличие других заболеваний. Более того, лечение субъекта терапевтически эффективным количеством терапевтических соединений, описанных в данном документе, может включать одну процедуру лечения или курс лечения.

[45] Используемый в данном документе термин «терапевтически эффективное количество» соединения по настоящему изобретению относится к количеству соединения по настоящему изобретению, которое будет вызывать биологический или медицинский ответ у субъекта, например, уменьшать интенсивность симптомов, уменьшать выраженность состояний, замедлять или задерживать прогрессирование заболевания или предупреждать возникновение заболевания. В одном неограничивающем варианте осуществления термин «терапевтически эффективное количество» относится к такому количеству соединения по настоящему изобретению, которое при введении субъекту является эффективным для по меньшей мере частичного уменьшения выраженности, подавления, предупреждения и/или уменьшения интенсивности проявлений состояния, связанного с заболеванием или нарушением со стороны печени.

[46] Как определено в данном документе, «комбинация» относится либо к фиксированной комбинации в одной стандартной лекарственной форме (например капсуле, таблетке, саше или флаконе), произвольной (т.е. нефиксированной) комбинации или к набору частей для комбинированного введения, где агонист ActRII, как например бимагрумаб, а также одно или более дополнительных терапевтических средств подлежат введению независимо в одно и то же время или по отдельности в пределах временных интервалов, особенно когда эти временные интервалы дают возможность партнерам по комбинации проявлять объединенный, например синергетический, эффект.

[47] Термины «совместное введение» или «комбинированное введение» или им подобные, используемые в данном документе, предусматривают охват введения дополнительного терапевтического средства одному нуждающемуся в этом субъекту (например, субъекту) и дополнительного терапевтического средства, и предполагают включение схем лечения, в которых агонист ActRII, как например бимагрумаб, и дополнительное терапевтическое средство необязательно вводят с помощью одного и того же пути введения и/или в одно и то же время. Каждый из компонентов комбинации по настоящему изобретению можно вводить одновременно или последовательно и в любом порядке. Совместное введение включает одновременное, последовательное, перекрывающееся, интервальное, непрерывное введение и любую их комбинацию.

[48] Термин «фармацевтическая комбинация», используемый в данном документе, означает фармацевтическую композицию, которую получают в результате объединения (например, смешивания) более чем одного активного ингредиента, и включает фиксированные и произвольные комбинации активных ингредиентов.

[49] Термин «фиксированная комбинация» означает, что активные ингредиенты вводят субъекту одновременно в форме единого целого или дозировано.

[50] Термин «произвольная комбинация (нефиксированная комбинация)» означает, что активные ингредиенты, определенные в данном документе, вводят субъекту в виде отдельных соединений либо одновременно, параллельно, либо последовательно без конкретных ограничений по времени и в любом порядке, при этом такое введение обеспечивает терапевтически эффективные уровни соединений в организме субъекта. В частности, ссылка на комбинацию, предусматривающую а) антагонисты рецептора активина II типа (ActRII), например, молекулы, способные противодействовать связыванию активинов, ростовых факторов дифференцировки (GDF), костных морфогенетических белков (BMP) и/или миостатина с рецептором ActRII человека, предпочтительно антагонистическое антитело к ActRIIA и/или ActRIIB, наиболее предпочтительно бимагрумаб, и b) по меньшей мере одно дополнительное терапевтическое средство, как используется в данном документе (например, в любом из вариантов осуществления или в любом из пунктов формулы изобретения, представленных в данном документе), относится к «нефиксированной комбинации», и ее можно вводить независимо в одно и то же время или по отдельности в пределах временных интервалов.

[51] Под «одновременным введением» подразумевается, что активные ингредиенты, определенные в данном документе, вводят в один и тот же день. Активные ингредиенты можно вводить в одно и то же время (для фиксированных или произвольных комбинаций) или по одному (для произвольных комбинаций).

[52] В соответствии с настоящим раскрытием «последовательное введение» может означать, что в течение периода двух или более дней непрерывного совместного введения только один из активных ингредиентов, определенных в данном документе, вводят в любой день.

[53] Под «перекрывающимся введением» подразумевается, что в течение периода двух или более дней непрерывного совместного введения есть по меньшей мере один день одновременного введения и по меньшей мере один день, когда вводят только один из активных ингредиентов, определенных в данном документе.

[54] Под «непрерывным введением» подразумевается период совместного введения без какого-либо пустого дня. Непрерывное введение может быть одновременным, последовательным или перекрывающимся, как описано выше.

[55] Термин «доза» относится к определенному количеству лекарственного средства, вводимого за один раз. Доза, например, будет указана на упаковке препарата или в инструкции по применению лекарственного препарата.

[56] Термин «ожирение» основывается на BMI как для молодых людей, так и для взрослых, однако определения напрямую не сопоставимы. Для взрослых на основании риска для здоровья существует установленное предельное значение, в то время как среди детей определение является статистическим и основано на сравнении с эталонной популяцией. BMI рассчитывали как вес в килограммах, деленный на рост в метрах, возведенный в квадрат, с округлением до одного десятичного знака. Ожирение у взрослых определяется как BMI, превышающий или равный 30 кг/м².

[57] Ожирение у молодых людей определяется как BMI, превышающий специфический для возраста и пола 95-й процентиль согласно диаграммам роста CDC за 2000 год или равный ему.

[58] Термин «состояние избыточного веса» основывается на BMI от ≥ 25 до < 30 кг/м².

[59] Состояние избыточного веса также может быть связано с по меньшей мере одним дополнительным фактором риска смертельных заболеваний (инсульт, MI, сердечная недостаточность, внезапная смерть), как например сахарный диабет, гипертензия, семейный анамнез раннего заболевания коронарных артерий и т.п.

[60] Поскольку у разных субъектов может иметься одинаковый BMI, но разный процент жировой и мышечной массы, BMI не всегда является соответствующим показателем для классификации избыточного веса и ожирения. Высокая процентная доля мышечной массы может привести к высокому BMI даже при небольшой процентной доле жира; в этом случае субъект может ошибочно считаться имеющим избыточный вес или страдающим ожирением на основании классификации согласно BMI. Помимо BMI используются и другие индексы, а именно окружность талии и индекс формы тела (ABSI); часто используется визуализация с помощью двухэнергетической рентгеновской абсорбциометрии (DXA или DEXA) и магнитно-резонансной томографии (MRI) для количественного определения процентной доли, приходящейся на мышцы, жир, а также распределения жировой ткани.

[61] Термин «состав тела» используется в данном документе для описания процентных долей, приходящихся на жир и мышцы в организме людей. Поскольку мышечная ткань занимает меньше места в нашем организме, чем жировая ткань, состав нашего тела, а также наш вес определяют стройность.

[62] «Безжировая масса тела» представляет собой составляющую состава тела, рассчитываемую путем вычитания жирового веса из общего веса тела, при этом общий вес тела равен сумме безжировой и жировой масс.

[63] Из уравнений следует:

LBM=BW - BF,

безжировая масса тела равна весу тела минус жировые отложения;

LBM+BF=BW,

безжировая масса тела плюс жировые отложения равняется весу тела.

Процентное значение для общей массы тела, которая является безжировой, обычно не указывается - обычно оно составляет 60-90%. Вместо этого рассчитывается процентная доля жировых отложений, которая является дополнением и обычно составляет 10-40%. Безжировая масса тела (LBM) была описана как показатель, превосходящий показатель, представленный общим весом тела, для назначения надлежащих уровней доз лекарственных препаратов и для оценки метаболических нарушений, поскольку жировые отложения менее значимы с точки зрения метаболизма.

[64] Термин «жировая масса» относится к той части человеческого тела, которая состоит исключительно из жира. Ее можно измерить посредством методик DXA, MRI или биоэлектрического импеданса.

[65] Термин «центральное ожирение» относится к следующему: ожирение определяется как состояние, характеризующееся аномальным или чрезмерным накоплением жира в жировой ткани. Количество избыточного жира в абсолютном выражении и его региональное распределение между различными жировыми депо играют важную роль в определении влияния ожирения на здоровье. Ожирение можно разделить на центральное/андроидное ожирение и периферическое/гиноидное ожирение, при этом андроидное ожирение более характерно для мужчин, а гиноидное ожирение более характерно для женщин.

[66] В литературе имеются существенные доказательства, указывающие на то, что не все виды ожирения связаны с неблагоприятным метаболическим профилем и увеличением сердечно-сосудистого риска. На самом деле, распределение жира в организме (т.е. относительное присутствие абдоминальной и периферической жировой массы) считалось лучшим индикатором метаболических и сердечно-сосудистых рисков, чем степень ожирения как таковая. У мужчин, склонных к накоплению жира в области туловища, увеличение BMI ассоциировано с повышением сердечно-сосудистого риска, в то время как у женщин увеличение BMI, в целом, является плохим индикатором/косвенным показателем сердечно-сосудистого риска.

[67] Жировую массу туловища можно подразделить на подкожный (SC) жир (в брюшной стенке) и висцеральную жировую ткань (во внутрибрюшной полости). Подкожный и висцеральный жир существенно различаются по своим анатомическим характеристикам, клеточному составу, эндокринной функции и клеточной регуляции. VAT по сравнению с SC характеризуется более высокими целлюлярностью, количеством сосудов, уровнями иннервации и инфильтрированности воспалительными и иммунными клетками, что приводит к более высокой метаболической активности и повышенному высвобождению провоспалительных цитокинов с прямыми и косвенными последствиями в отношении инсулинорезистентности, сахарного диабета 2 типа и риска сердечно-сосудистых заболеваний. Напротив, подкожная жировая масса, особенно жировые депо бедер и ягодиц, ассоциировалась с конститутивной секрецией адипонектина, оказывающего инсулин-сенсибилизирующие, противовоспалительные и антиатерогенные эффекты. Была установлена связь неспецифического воспаления с мышечным истощением, что, в свою очередь, может еще больше ухудшить чувствительность к инсулину и увеличить относительный риск развития сахарного диабета 2 типа.

[68] Таким образом, дисбаланс между центральными и периферическими жировыми депо (центральное ожирение) даже при отсутствии выраженного ожирения (т.е. BMI <30 кг/м²) может быть связан с выраженной инсулинорезистентностью, метаболическими изменениями и системным неспецифическим воспалением, что в совокупности приводит к ускорению атерогенеза.

[69] Термин «сахарный диабет II типа», обозначаемый как сахарный диабет 2 типа, ранее называемый «неинсулинозависимый сахарный диабет» или «сахарный диабет зрелого возраста», составляет 90-95% всех случаев сахарного диабета, охватывает индивидуумов, у которых имеется инсулинорезистентность и обычно относительный (а не абсолютный) дефицит инсулина. По меньшей мере в первое время, а часто и на протяжении всей продолжительности их жизни, такие индивидуумы могут не нуждаться в лечении инсулином для поддержания жизни. Существуют различные причины возникновения сахарного диабета 2 типа.

[70] «Чувствительность к инсулину» описывает, насколько организм чувствителен к эффектам, оказываемым инсулином. Человеку, в отношении которого можно сказать, что он характеризуется повышенной чувствительностью к инсулину, потребуется меньшее количество инсулина для снижения уровней глюкозы в крови, чем человеку, характеризующемуся низкой чувствительностью. Чувствительность к инсулину у разных лиц варьируется, и для определения чувствительности индивидуума к инсулину врачи могут выполнять тесты.

[71] «Инсулинорезистентность» определяется как состояние, характеризующееся толерантностью к инсулину, при котором гормон становится менее эффективным, вызывая снижение поглощения глюкозы в мышечной ткани, что приводит к нарушению окисления глюкозы и синтеза гликогена, а также недостаточное подавление продуцирования глюкозы в печени. При ожирении увеличение массы висцерального жира с повышением уровня свободных жирных кислот (FFA) в плазме крови, вызванное усилением липолитической активности, усугубляет инсулинорезистентность за счет нарушения действия инсулина; при этом данный механизм известен как липотоксичность.

[72] «Антидиабетическое лечение» при сахарном диабете 2 типа включает следующее:

Метформин. Как правило, метформин является первым лекарственным препаратом, назначаемым при сахарном диабете 2 типа. Он работает за счет повышения чувствительности тканей организма к инсулину, благодаря чему организм использует инсулин более эффективно. Метформин также снижает выработку глюкозы в печени. Метформин сам по себе может недостаточно снижать уровень сахара в крови.

Ингибиторы дипептидилпептидазы-4 (DPP-4). Эти лекарственные препараты также обеспечивают снижение уровней сахара в крови. Они не вызывают увеличения веса. Примерами таких лекарственных препаратов являются ситаглиптин, саксаглиптин, вилдаглиптин и линаглиптин.

Сульфонилмочевины. Данные лекарственные препараты способствуют секреции большего количества инсулина организмом. Примерами лекарственных препаратов этого класса являются глибурид, глипизид и глимепирид. Возможные побочные эффекты включают низкий уровень сахара в крови и увеличение веса.

Тиазолидиндионы. Как и метформин, эти лекарственные препараты делают ткани организма более чувствительными к инсулину. Этот класс лекарственных препаратов связан с увеличением веса и другими более серьезными побочными эффектами, такими как повышенный риск сердечной недостаточности и переломов. Ввиду наличия таких рисков эти лекарственные препараты, как правило, не являются средствами лечения первого выбора. Пиоглитазон является примером тиазолидиндионов.

Агонисты рецептора GLP-1 (GLP-1Ra). Данные лекарственные препараты замедляют пищеварение и способствуют снижению уровня сахара в крови. Их применение часто связано с некоторой потерей веса. Этот класс лекарственных препаратов не рекомендуется использовать самостоятельно. Примерами агонистов рецептора GLP-1 являются эксенатид, семаглутид и лираглутид.

Ингибиторы SGLT2. Они представляют собой новейшие лекарственные средства для лечения сахарного диабета, представленные на рынке. Они действуют путем предотвращения резорбции сахара в кровь почками. Вместо этого сахар выводится с мочой. Примерами являются канаглифлозин и дапаглифлозин.

Инсулинотерапия.Некоторые люди, страдающие сахарным диабетом 2 типа, также нуждаются в инсулинотерапии. В прошлом инсулинотерапия использовалась как крайняя мера, но сегодня ее часто назначают раньше ввиду ее преимуществ.

[73] Используемый в данном документе термин «антитело», как указано в данном документе, включает полные антитела и любой их антигенсвязывающий фрагмент или их отдельные цепи (т.е. «антигенсвязывающую часть» или «функциональный фрагмент»). Встречающееся в природе «антитело» представляет собой гликопротеин, содержащий по меньшей мере две тяжелые (H) цепи и две легкие (L) цепи, соединенные между собой посредством дисульфидных связей. Каждая тяжелая цепь состоит из вариабельной области тяжелой цепи (сокращенно обозначаемой в данном документе как V_H) и константной области тяжелой цепи. Константная область тяжелой цепи состоит из трех доменов: CH1, CH2 и CH3. Каждая легкая цепь состоит из вариабельной области легкой цепи (сокращенно обозначаемой в данном документе как V_L) и константной области легкой цепи. Константная область легкой цепи состоит из одного домена, обозначаемого как C_L. V_H- и V_L-области могут быть дополнительно подразделены на области гипервариабельности, называемые определяющими комплементарность областями (CDR), которые чередуются с более консервативными областями, называемыми каркасными областями (FR). Каждая V_H и V_L образована тремя CDR и четырьмя FR, расположенными от аминоконца к карбоксиконцу в следующем порядке: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4. Вариабельные участки тяжелой и легкой цепей содержат связывающий домен, который взаимодействует с антигеном. Константные области антител могут опосредовать связывание иммуноглобулина с тканями или факторами хозяина, в том числе с различными клетками иммунной системы (например, эффекторными клетками) и первым компонентом (C1q) классического пути активации системы комплемента.

[74] Применяемый в данном документе термин «функциональный фрагмент» антитела относится к частям или фрагментам антитела, которые сохраняют способность специфически связываться с антигеном (например, частью ActRIIB). Было показано, что антигенсвязывающую функцию антитела могут осуществлять фрагменты полноразмерного антитела. Примеры связывающих фрагментов, охватываемых термином «функциональный фрагмент» антитела, включают Fab-фрагмент, моновалентный фрагмент, состоящий из доменов V_L, V_H, CL и CH1; F(ab)2-фрагмент, бивалентный фрагмент, содержащий два Fab-фрагмента, связанные дисульфидным мостиком в шарнирной области; Fd-фрагмент, состоящий из доменов V_H и CH1; Fv-фрагмент, состоящий из доменов V_L и V_H одного плеча антитела; dAb-фрагмент (Ward et al., 1989), который состоит из V_H-домена; и выделенную определяющую комплементарность область (CDR). Хотя два домена Fv-фрагмента V_L и V_H кодируются отдельными генами, они могут быть объединены с применением рекомбинантных способов с помощью синтетического линкера, который обеспечивает возможность их получения в виде единой белковой цепи, в которой области V_L и V_H объединяются в пару с образованием моновалентных молекул (известных как одноцепочечные Fv (scFv); см., например, Bird et al., 1988; и Huston et al., 1988). Также предусматривается, что такие одноцепочечные антитела охватываются термином «функциональные фрагменты» антитела. Эти фрагменты антител получают с помощью традиционных методик, известных специалистам в данной области, и фрагменты подвергают скринингу на пригодность таким же способом, что и интактные антитела.

[75] Используемые в данном документе термины «моноклональное антитело» или «композиция на основе моноклональных антител», как используется в данном документе, относятся к препарату из молекул антитела одного молекулярного состава. Композиция на основе моноклональных антител проявляет один тип специфичности и аффинности связывания в отношении конкретного эпитопа.

[76] Как используется в данном документе, термин «человеческое антитело», используемый в данном документе, включает антитела, имеющие вариабельные области, в которых как каркасные, так и CDR-области получены из последовательностей, происходящих из человека. Кроме того, если антитело содержит константную область, то константная область также получена из таких человеческих последовательностей, например человеческих последовательностей зародышевого типа, или мутантных вариантов человеческих последовательностей зародышевого типа, или антитела, содержащего консенсусные последовательности каркасных областей, полученные при анализе последовательностей человеческих каркасных областей, как описано в Knappik, et al. (2000). J Mol Biol 296, 57-86. «Человеческое антитело» необязательно должно продуцироваться человеком, человеческой тканью или человеческой клеткой. Человеческие антитела по настоящему изобретению могут содержать аминокислотные остатки, не кодируемые человеческими последовательностями (например, мутации, введенные посредством случайного или сайт-специфического мутагенеза in vitro или посредством соматической мутации in vivo). Однако используемый в данном документе термин «человеческое антитело» не предназначен для включения антител, в которых последовательности CDR, полученные из антитела зародышевого типа другого вида млекопитающих, такого как мышь, были привиты на человеческие каркасные последовательности.

[77] Термин «рекомбинантное человеческое антитело», используемый в данном документе, включает все человеческие антитела, которые получают, экспрессируют, создают или выделяют посредством рекомбинантных способов, такие как антитела, выделенные из животного (например, мыши), которое является трансгенным или трансхромосомным по генам иммуноглобулинов человека, или гибридома, полученная из него, антитела, выделенные из клетки-хозяина, трансформированной для экспрессии человеческого антитела, например из трансфектомы, антитела, выделенные из рекомбинантной комбинаторной библиотеки человеческих антител, и антитела, полученные, экспрессированные, созданные или выделенные с помощью любых других способов, которые включают сплайсинг всего гена иммуноглобулина человека или его части, последовательностей в другие последовательности ДНК. Такие рекомбинантные человеческие антитела содержат вариабельные области, в которых каркасные области и CDR-области получены из последовательностей человеческого иммуноглобулина зародышевого типа. Однако в некоторых вариантах осуществления такие рекомбинантные человеческие антитела могут быть подвергнуты мутагенезу in vitro (или, в случае применения животного, трансгенного по последовательностям Ig человека, соматическому мутагенезу in vivo) и, таким образом, аминокислотные последовательности V_H- и V_L-областей рекомбинантных антител представляют собой последовательности, которые, хотя и получены из последовательностей V_H и V_L человека зародышевого типа или родственны им, могут не существовать в естественных условиях в репертуаре антител человека зародышевого типа in vivo.

[78] Предполагается, что используемый в данном документе термин «антитело, которое связывается с полипептидом ActRIIB» относится к антителу, которое связывается с полипептидом ActRIIB человека с K_D, составляющей приблизительно 100 нМ или менее, приблизительно 10 нМ или менее или приблизительно 1 нМ или менее. Как используется в данном документе, предполагается, что термин «K_D», используемый в данном документе, относится к константе диссоциации, которая получена из соотношения K_d и K_a (т.е. K_d/K_a) и которая выражена в виде молярной концентрации (М). Значения K_D для антител можно определить с помощью способов, общеизвестных в данной области техники. Способ определения K_D антитела осуществляют с помощью поверхностного плазмонного резонанса или с помощью биосенсорной системы, такой как система Biacore®, или титрования при равновесии в растворе.

[79] Предполагается, что используемый в данном документе термин «антагонистическое антитело» относится к антителу, которое подавляет индуцированную сигнальную активность ActRIIB в присутствии миостатина или других лигандов ActRIIB, таких как активины или GDF-11, и/или к антителу, которое подавляет индуцированную сигнальную активность ActRIIA в присутствии миостатина или других лигандов ActRIIA, таких как активины или GDF-11. Примеры анализа для выявления этого включают подавление индуцированной миостатином передачи сигнала (например, с помощью анализа с применением зависимого от Smad репортерного гена), подавление индуцированного миостатином фосфорилирования Smad (P-Smad ELISA) и подавление индуцированного миостатином подавление дифференциации клеток скелетных мышц (например, с помощью анализа с применением креатинкиназы).

[80] В некоторых вариантах осуществления антитела, которые связываются с полипептидом ActRIIB, подавляют индуцированную миостатином передачу сигнала, измеренную с помощью анализа с применением зависимого от Smad репортерного гена, при IC₅₀, составляющей приблизительно 10 нМ или менее, приблизительно 1 нМ или менее или приблизительно 100 пМ или менее.

[81] Используемый термин «осуществление анализа» означает, что образец может быть подвергнут тестированию (либо прямо, либо косвенно) в отношении либо присутствия, либо уровня заданного маркера (например, hsCRP и/или гемоглобина). Будет понятно, что в случае, если уровень вещества указывает на вероятность, то уровень такого вещества можно применять в качестве основания для выбора способа лечения. Например, можно определить уровень hsCRP и/или гемоглобина у пациента путем осуществления анализа в отношении его присутствия с помощью количественных или сравнительных качественных способов (например, уровней по сравнению с уровнями в других образцах).

Антагонисты ActRII

[82] В различных раскрытых вариантах применения, способах, комбинациях и наборах используется антагонист ActRII, например, антагонист ActRIIA и/или ActRIIB, например, антитело к рецептору ActRII, например, антитело к рецептору ActRII, представляющее собой бимагрумаб. В некоторых вариантах осуществления антагонист ActRII представляет собой антагонист ActRIIA и/или ActRIIB, предпочтительно антитело к рецептору ActRII или его антигенсвязывающий фрагмент.

[83] В одном варианте осуществления антитело к рецептору ActRII или его антигенсвязывающий фрагмент содержат по меньшей мере один вариабельный домен тяжелой цепи (VH) иммуноглобулина, содержащий гипервариабельные области CDR1, CDR2 и CDR3, при этом указанная CDR1 характеризуется аминокислотной последовательностью под SEQ ID NO:1, указанная CDR2 характеризуется аминокислотной последовательностью под SEQ ID NO:2, и указанная CDR3 характеризуется аминокислотной последовательностью под SEQ ID NO:3. В одном варианте осуществления антитело к рецептору ActRII или его антигенсвязывающий фрагмент содержат по меньшей мере один вариабельный домен легкой цепи (VL') иммуноглобулина, содержащий гипервариабельные области CDR1', CDR2'и CDR3', при этом указанная CDR1' характеризуется аминокислотной последовательностью под SEQ ID NO:4, указанная CDR2' характеризуется аминокислотной последовательностью под SEQ ID NO:5, и указанная CDR3' характеризуется аминокислотной последовательностью под SEQ ID NO:6.

[84] В одном варианте осуществления антитело к рецептору ActRII или его антигенсвязывающий фрагмент содержат по меньшей мере один V_H-домен иммуноглобулина и по меньшей мере один V_L-домен иммуноглобулина, где a) V_H-домен иммуноглобулина содержит (например, в последовательном порядке) i) гипервариабельные области CDR1, CDR2 и CDR3, при этом указанная CDR1 характеризуется аминокислотной последовательностью под SEQ ID NO:1, указанная CDR2 характеризуется аминокислотной последовательностью под SEQ ID NO:2, и указанная CDR3 характеризуется аминокислотной последовательностью под SEQ ID NO:3; и b) V_L-домен иммуноглобулина содержит (например, в последовательном порядке) гипервариабельные области CDR1', CDR2' и CDR3', при этом указанная CDR1' характеризуется аминокислотной последовательностью под SEQ ID NO:4, указанная CDR2' характеризуется аминокислотной последовательностью под SEQ ID NO:5, и указанная CDR3' характеризуется аминокислотной последовательностью под SEQ ID NO:6.

[85] В одном варианте осуществления антитело к рецептору ActRII или его антигенсвязывающий фрагмент содержат a) вариабельный домен тяжелой цепи (VH) иммуноглобулина, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную под SEQ ID NO:10; b) вариабельный домен легкой цепи (VL) иммуноглобулина, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную под SEQ ID NO:9; c) VH-домен иммуноглобулина, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную под SEQ ID NO:10, и VL-домен иммуноглобулина, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную под SEQ ID NO:9; d) VH-домен иммуноглобулина, содержащий гипервариабельные области, приведенные под SEQ ID NO:1, SEQ ID NO:2 и SEQ ID NO:3; e) VL-домен иммуноглобулина, содержащий гипервариабельные области, приведенные под SEQ ID NO:4, SEQ ID NO:5 и SEQ ID NO:6; или f) VH-домен иммуноглобулина, содержащий гипервариабельные области, приведенные под SEQ ID NO:1, SEQ ID NO:2 и SEQ ID NO:3, и VL-домен иммуноглобулина, содержащий гипервариабельные области, приведенные под SEQ ID NO:4, SEQ ID NO:5 и SEQ ID NO:6.

[86] Для удобства поиска аминокислотные последовательности моноклонального антитела бимагрумаб представлены в таблице 1.

Таблица 1. Информация относительно последовательностей для бимагрумаба SEQ ID NO: Описание последовательности Подробная аминокислотная или нуклеотидная последовательности 1 CDR1 тяжелой цепи GYTFTSSYIN 2 CDR2 тяжелой цепи TINPVSGSTSYAQKFQG 3 CDR3 тяжелой цепи GGWFDY 4 CDR1' легкой цепи TGTSSDVGSYNYVN 5 CDR2' легкой цепи LMIYGVSKRPS 6 CDR3' легкой цепи GTFAGGSYYG 7 Легкая цепь (LC) QSALTQPASVSGSPGQSITISCTGTSSDVGSYNYVNWYQQHPGKAPKLMIYGVSKRPSGVSNRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCGTFAGGSYYGVFGGGTKLTVLGQPKAAPSVTLFPPSSEELQANKATLVCLISDFYPGAVTVAWKADSSPVKAGVETTTPSKQSNNKYAASSYLSLTPEQWKSHRSYSCQVTHEGSTVEKTVAPTECS 8 Тяжелая цепь (HC) QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTSSYINWVRQAPGQGLEWMGTINPVSGSTSYAQKFQGRVTMTRDTSISTAYMELSRLRSDDTAVYYCARGGWFDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK 9 Вариабельная область легкой цепи (VL) QSALTQPASVSGSPGQSITISCTGTSSDVGSYNYVNWYQQHPGKAPKLMIYGVSKRPSGVSNRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCGTFAGGSYYGVFGGGTKLTVL 10 Вариабельная область тяжелой цепи (VH) QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTSSYINWVRQAPGQGLEWMGTINPVSGSTSYAQKFQGRVTMTRDTSISTAYMELSRLRSDDTAVYYCARGGWFDYWGQGTLVTVSS

[87] В предпочтительных вариантах осуществления домены константной области также включают подходящие домены константной области человека, например, описанные в «Sequences of Proteins of Immunological Interest», Kabat E.A. et al, US Department of Health and Human Services, Public Health Service, National Institute of Health.

[88] В некоторых вариантах осуществления антитело к рецептору ActRII или его антигенсвязывающий фрагмент содержат легкую цепь под SEQ ID NO:7. В других вариантах осуществления антитело к рецептору ActRII или его антигенсвязывающий фрагмент содержат тяжелую цепь под SEQ ID NO:8. В других вариантах осуществления антитело к рецептору ActRII или его антигенсвязывающий фрагмент содержат легкую цепь под SEQ ID NO:7 и тяжелую цепь под SEQ ID NO:8. В некоторых вариантах осуществления антитело к рецептору ActRII или его антигенсвязывающий фрагмент содержат три CDR из SEQ ID NO:7. В других вариантах осуществления антитело к рецептору ActRII или его антигенсвязывающий фрагмент содержат три CDR из SEQ ID NO:8. В других вариантах осуществления антитело к рецептору ActRII или его антигенсвязывающий фрагмент содержат три CDR из SEQ ID NO:7 и три CDR из SEQ ID NO:8. CDR из SEQ ID NO:7 и SEQ ID NO:8 можно найти в таблице 1.

[89] В одном варианте осуществления антитело к рецептору ActRII или его антигенсвязывающий фрагмент (например, бимагрумаб) выбраны из антитела к рецептору ActRII человека, которое содержит по меньшей мере a) тяжелую цепь иммуноглобулина или ее фрагмент, которые содержат вариабельный домен, содержащий в последовательном порядке гипервариабельные области CDR1, CDR2 и CDR3 и константную часть или ее фрагмент из тяжелой цепи человека; при этом указанная CDR1 характеризуется аминокислотной последовательностью под SEQ ID NO:1, указанная CDR2 характеризуется аминокислотной последовательностью под SEQ ID NO:2, и указанная CDR3 характеризуется аминокислотной последовательностью под SEQ ID NO:3; и b) легкую цепь иммуноглобулина или ее фрагмент, которые содержат вариабельный домен, содержащий в последовательном порядке гипервариабельные области CDR1', CDR2' и CDR3' и константную часть или ее фрагмент из легкой цепи человека; при этом указанная CDR1' характеризуется аминокислотной последовательностью под SEQ ID NO:4, указанная CDR2' характеризуется аминокислотной последовательностью под SEQ ID NO:5, и указанная CDR3' характеризуется аминокислотной последовательностью под SEQ ID NO:6.

[90] В одном варианте осуществления антитело к рецептору ActRII или его антигенсвязывающий фрагмент выбраны из одноцепочечного антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, которые содержат антигенсвязывающий сайт, содержащий a) первый домен, содержащий в последовательном порядке гипервариабельные области CDR1, CDR2 и CDR3, при этом указанная CDR1 характеризуется аминокислотной последовательностью под SEQ ID NO:1, указанная CDR2 характеризуется аминокислотной последовательностью под SEQ ID NO:2, и указанная CDR3 характеризуется аминокислотной последовательностью под SEQ ID NO:3; и b) второй домен, содержащий в последовательном порядке гипервариабельные области CDR1', CDR2' и CDR3', при этом указанная CDR1' характеризуется аминокислотной последовательностью под SEQ ID NO:4, указанная CDR2' характеризуется аминокислотной последовательностью под SEQ ID NO:5, и указанная CDR3' характеризуется аминокислотной последовательностью под SEQ ID NO:6; и c) пептидный линкер, который связан либо с N-концевой крайней точкой первого домена и с C-концевой крайней точкой второго домена, либо с C-концевой крайней точкой первого домена и с N-концевой крайней точкой второго домена.

[91] В качестве альтернативы, антитело к рецептору ActRII или его антигенсвязывающий фрагмент, используемые в раскрытых способах, могут предусматривать производное антител к рецептору ActRII, приведенных в данном документе в виде последовательности (например, пегилированные варианты, варианты гликозилирования, варианты созревания аффинности и т.д.). В качестве альтернативы, домены V_H или V_L антитела к рецептору ActRII или его антигенсвязывающего фрагмента, используемых в раскрытых способах, могут предусматривать домены V_H или V_L, которые по сути идентичны доменам V_H или V_L, приведенным в данном документе (например, приведенным под SEQ ID NO:10 и 9). Антитело к рецептору ActRII человека, раскрытое в данном документе, может содержать тяжелую цепь, которая по сути идентична цепи, которая приведена под SEQ ID NO:8, и/или легкую цепь, которая по сути идентична цепи, которая приведена под SEQ ID NO:7. Антитело к рецептору ActRII человека, раскрытое в данном документе, может содержать тяжелую цепь, которая предусматривает SEQ ID NO:8, и легкую цепь, которая предусматривает SEQ ID NO:7. Антитело к рецептору ActRII человека, раскрытое в данном документе, может содержать а) одну тяжелую цепь, содержащую вариабельный домен, характеризующийся аминокислотной последовательностью, по сути идентичной последовательности, показанной под SEQ ID NO:10, и константную часть тяжелой цепи человека; и b) одну легкую цепь, содержащую вариабельный домен, характеризующийся аминокислотной последовательностью, по сути идентичной последовательности, показанной под SEQ ID NO:9, и константную часть легкой цепи человека.

[92] В качестве альтернативы, антитело к рецептору ActRII или его антигенсвязывающий фрагмент, используемые в раскрытых способах, могут представлять собой вариант аминокислотной последовательности эталонных антител к рецептору ActRII, изложенных в данном документе. Настоящее раскрытие также включает антитела к рецептору ActRII или их антигенсвязывающие фрагменты (например, бимагрумаб), в которых один или более аминокислотных остатков VH- или VL-домена бимагрумаба, как правило, только несколько (например, 1-10), изменены; например с помощью мутации, например сайт-направленного мутагенеза соответствующих последовательностей ДНК.

[93] В некоторых вариантах осуществления антитело к ActRII, например, бимагрумаб, связывается с эпитопом рецептора ActRII человека, содержащим WLDDFN (SEQ ID NO:11). В некоторых вариантах осуществления антитела к ActRII или их антигенсвязывающие фрагменты, например, бимагрумаб, связываются с эпитопом рецептора ActRII человека, содержащим GCWLDDFNC (SEQ ID NO:12). В некоторых вариантах осуществления антитело к ActRII, например, бимагрумаб, связывается с эпитопом рецептора ActRII человека, содержащим KGCWLDDFNCY (SEQ ID NO:13). В некоторых вариантах осуществления антитело к ActRII, например, бимагрумаб, связывается с эпитопом рецептора ActRII человека, содержащим EQDKR (SEQ ID NO:14). В некоторых вариантах осуществления антитело к ActRII, например, бимагрумаб, связывается с эпитопом рецептора ActRII человека, содержащим CEGEQDKRLHCYASW (SEQ ID NO:15). В некоторых вариантах осуществления антитело к ActRII, например, бимагрумаб, связывается с эпитопом рецептора ActRII человека, содержащим WLDDFN (SEQ ID NO:11), CEGEQDKRLHCYASW (SEQ ID NO:15) и GCWLDDFNC (SEQ ID NO:12). В некоторых вариантах осуществления антитело к ActRII, например, бимагрумаб, связывается с эпитопом рецептора ActRII человека, содержащим WLDDFN (SEQ ID NO:11) и CEGEQDKRLHCYASW (SEQ ID NO:15). В некоторых вариантах осуществления антитело к ActRII, например, бимагрумаб, связывается с эпитопом рецептора ActRII человека, содержащим WLDDFN (SEQ ID NO:11) и EQDKR (SEQ ID NO:14). В некоторых вариантах осуществления антитело к ActRII характеризуется K_D приблизительно 2-10 пМ по отношению к ActRIIB человека и KD приблизительно 100-600 пМ по отношению к ActRIIA человека (например, как определено с помощью анализа Biacore®).

[94] В особенно предпочтительном варианте осуществления любого из раскрытых вариантов применения, способов, комбинаций и наборов антагонист ActRII представляет собой бимагрумаб. Бимагрумаб был описан в WO 2010/125003, которая настоящим включена посредством ссылки во всей своей полноте.

[95] Бимагрумаб, являющийся фармацевтически активным соединением, используемым в соответствии с настоящим изобретением, представляет собой полностью человеческое моноклональное антитело (модифицированный IgG1, 234-235-Ala-Ala, λ2), разработанное для конкурентного связывания с рецептором активина II типа (ActRII) с большей аффинностью, чем его природные лиганды, в том числе миостатин и активин. Бимагрумаб характеризуется перекрестной реактивностью с ActRIIA и ActRIIB человека и мыши и является эффективным для клеток скелетных мышц человека, яванского макака, мыши и крысы. Бимагрумаб связывается с чрезвычайно высокой аффинностью (KD 1,7 ± 0,3 пМ) с ActRIIB человека и с относительно более низкой аффинностью с ActRIIA человека (KD 434 ± 25 пМ).

[96] Бимагрумаб содержит антигенсвязывающий сайт, содержащий по меньшей мере один вариабельный домен тяжелой цепи (V_H) иммуноглобулина, который в последовательном порядке содержит гипервариабельные области, представляющие собой CDR1 под SEQ ID NO: 1, CDR2 под SEQ ID NO: 2 и CDR3 под SEQ ID NO: 3. Применение антител, имеющих 1, 2 или 3 остатка, измененных по сравнению с любой из последовательностей CDR1, CDR2 и/или CDR3 тяжелой цепи, также охватывается объемом настоящего раскрытия.

[97] Бимагрумаб также содержит антигенсвязывающий сайт, содержащий по меньшей мере один вариабельный домен легкой цепи (V_L) иммуноглобулина, который в последовательном порядке содержит гипервариабельные области, представляющие собой CDR1' под SEQ ID NO: 4, CDR2' под SEQ ID NO: 5 и CDR3' под SEQ ID NO: 6, или эквивалентные им CDR.

[98] Применение антител, имеющих 1, 2 или 3 остатка, измененных по сравнению с любой из последовательностей CDR1', CDR2' и/или CDR3' легкой цепи, также охватывается объемом настоящего раскрытия.

[99] В соответствии с настоящим раскрытием также предусматривается применение антител, характеризующихся 95% идентичности аминокислотной последовательности с легкой цепью и/или тяжелой цепью бимагрумаба.

[100] Перечень последовательностей для бимагрумаба представлен в настоящем документе.

[101] Другие предпочтительные антагонисты ActRII для применения в соответствии с раскрытыми вариантами применения, способами, комбинациями и наборами, изложены в патенте США №7893213, WO 2017147182, WO 2016069234, WO 2006012627, WO 9956768, WO 2002010214, WO 2006012627, которые включены в данный документ посредством ссылки во всей полноте.

Варианты применения и способы

[102] Настоящее изобретение частично вытекает из результатов анализа данных, полученных в ходе клинического испытания с идентификатором ClinicalTrials.gov: NCT03005288 и раскрытых в WO 2018/116201 (содержание которого настоящим включено посредством ссылки во всей своей полноте), представляющего собой рандомизированное, предусматривающее заслепление субъектов и исследователей, плацебо-контролируемое исследование для оценки безопасности, фармакокинетики и эффективности внутривенно вводимого бимагрумаба у пациентов с избыточным весом и ожирением, у которых имеется сахарный диабет 2 типа. В исследование на момент скрининга было включено 75 пациентов с сахарным диабетом 2 типа, уровнем HbA1c от 6,5% до 10% и индексом массы тела от 28 до 40 кг/м². Бимагрумаб вводили каждые четыре недели в дозе 10 мг/кг с максимальной дозой 1200 мг внутривенно, вводимых за 12 доз, и осуществляли сравнение результатов с плацебо.

[103] Авторы настоящего изобретения обнаружили, что лечение с помощью антитела к ActRII, например, бимагрумаба, обеспечивает значительное уменьшение жировой фракции печени. Соответственно, антагонисты рецептора активина II типа (ActRII), например, молекулы, способные противодействовать связыванию активинов, ростовых факторов дифференцировки (GDF), костных морфогенетических белков (BMP) и/или миостатина с рецептором ActRII человека, предпочтительно антагонистическое антитело к ActRIIA и/или ActRIIB, наиболее предпочтительно бимагрумаб, можно применять в соответствии с настоящим изобретением для предупреждения или лечения заболевания или нарушения со стороны печени, в частности заболевания или нарушения со стороны печени, связанных с повышенным содержанием жира в печени, например, связанных со стеатозом печени.

[104] В данном документе описаны различные (пронумерованные) варианты осуществления настоящего изобретения. Следует понимать, что признаки, описанные в каждом варианте осуществления, можно объединять с другими описанными признаками с получением дополнительных вариантов осуществления настоящего изобретения.

Варианты осуществления (a)

1a. Антагонист рецептора активина II типа (ActRII) для применения в лечении заболевания или нарушения со стороны печени у субъекта, нуждающегося в этом.

2a. Антагонист рецептора активина II типа (ActRII) для применения в предупреждении заболевания или нарушения со стороны печени у субъекта, нуждающегося в этом.

3a. Антагонист рецептора активина II типа (ActRII) для применения в лечении, стабилизации или уменьшении тяжести или прогрессирования неалкогольной жировой болезни печени (NAFLD), например NASH у субъекта, нуждающегося в этом, предусматривающего введение антагониста рецептора активина II типа (ActRII) в терапевтически эффективном количестве.

4a. Антагонист рецептора активина II типа (ActRII) для применения в замедлении, прекращении или уменьшении развития хронического заболевания или нарушения со стороны печени, например NAFLD, неалкогольного стеатогепатита (NASH) или фиброза печени у субъекта, нуждающегося в этом, предусматривающего введение антагониста рецептора активина II типа (ActRII) в терапевтически эффективном количестве.

5a. Антагонист ActRIIA/ActRIIB для применения по любому из вариантов осуществления 1a-4a, где у указанного субъекта имеется по меньшей мере одно состояние, выбранное из стеатоза печени, лобулярного воспаления и баллонной дистрофии клеток печени.

6a. Антагонист ActRIIA/ActRIIB для применения по любому из вариантов осуществления 1a-5a, где у указанного субъекта имеется стеатоз печени.

7a. Антагонист ActRIIA/ActRIIB для применения по любому из вариантов осуществления 1a-6a, где указанное заболевание или нарушение со стороны печени выбрано из неалкогольной жировой болезни печени (NAFLD) и неалкогольного стеатогепатита (NASH).

8a. Антагонист ActRIIA/ActRIIB для применения по любому из вариантов осуществления 1a-7a, где указанное заболевание или нарушение со стороны печени представляет собой стеатогепатит.

9a. Антагонист ActRIIA/ActRIIB для применения по любому из вариантов осуществления 1a-8a, где указанное заболевание или нарушение со стороны печени представляет собой фиброз печени.

10a.Антагонист ActRIIA/ActRIIB для применения по любому из вариантов осуществления 1a-9a, где указанное заболевание или нарушение со стороны печени представляет собой неалкогольную жировую болезнь печени (NAFLD).

11a. Антагонист ActRII для применения по любому из вариантов осуществления 1a-10a, где указанное заболевание или нарушение со стороны печени представляет собой неалкогольный стеатогепатит (NASH).

12a. Антагонист ActRII для применения по любому из вариантов осуществления 1a-11a, где указанное заболевание или нарушение со стороны печени представляет собой неалкогольный стеатогепатит (NASH), и где степень тяжести NASH является легкой или умеренной с уровнем фиброза F2-F3.

13a. Антагонист ActRIIA/ActRIIB для применения по любому из вариантов осуществления 1a-12а, где введение терапевтически эффективного количества антагониста ActRIIA/ActRIIB указанному субъекту обеспечивает уменьшение жировой фракции печени у указанного субъекта по сравнению с жировой фракцией печени у указанного субъекта, имеющейся до введения терапевтически эффективного количества антагониста ActRIIA/ActRIIB.

14a. Антагонист ActRIIA/ActRIIB для применения по любому из вариантов осуществления 1a-13a, где введение терапевтически эффективного количества антагониста ActRIIA/ActRIIB указанному субъекту обеспечивает уменьшение степени стеатогепатита по сравнению со степенью стеатогепатита, имеющейся до введения антагониста ActRII.

15a. Антагонист рецептора активина II типа (ActRII) для применения по любому из вариантов осуществления 1a-14a, где введение терапевтически эффективного количества указанного антагониста ActRIIA/ActRIIB обеспечивает устранение стеатогепатита.

16a. Антагонист рецептора активина II типа (ActRII) для применения по любому из вариантов осуществления 1a-15a, где введение терапевтически эффективного количества указанного антагониста ActRIIA/ActRIIB обеспечивает улучшение в отношении фиброза печени.

17a. Антагонист рецептора активина II типа (ActRII) для применения по любому из вариантов осуществления 1a-16a, где введение терапевтически эффективного количества указанного антагониста ActRIIA/ActRIIB обеспечивает устранение стеатогепатита и улучшение в отношении фиброза печени.

18a. Антагонист ActRIIA/ActRIIB для применения по любому из вариантов осуществления 1a-17a, где введение терапевтически эффективного количества указанного антагониста ActRIIA/ActRIIB обеспечивает уменьшение выраженности или уменьшение прогрессирования NASH.

19a. Антагонист ActRIIA/ActRIIB для применения по любому из вариантов осуществления 1a-18a, где введение терапевтически эффективного количества указанного антагониста ActRIIA/ActRIIB обеспечивает улучшение в отношении фиброза печени на по меньшей мере одну стадию по сравнению со стадией фиброза печени, имеющейся до введения указанного антагониста ActRIIA/ActRIIB.

20a. Антагонист ActRIIA/ActRIIB для применения по любому из вариантов осуществления 1a-19a, где введение терапевтически эффективного количества указанного антагониста ActRIIA/ActRIIB останавливает прогрессирование фиброза печени до стадии F3 или F4.

21a. Антагонист ActRIIA/ActRIIB для применения по любому из вариантов осуществления 1a-20a, где введение терапевтически эффективного количества указанного антагониста ActRIIA/ActRIIB обеспечивает снижение показателя активности NAFLD (NAS) на по меньшей мере 1 балл, на по меньшей мере 2 балла или на по меньшей мере 3 балла.

22a. Антагонист ActRIIA/ActRIIB для применения по любому из вариантов осуществления 1a-21a, где введение терапевтически эффективного количества указанного антагониста ActRIIA/ActRIIB обеспечивает снижение по меньшей мере одного из гепатостеатоза, воспаления печени и баллонной дистрофии клеток печени на по меньшей мере 1 балл по шкале NAS.

23a. Антагонист ActRIIA/ActRIIB для применения по любому из вариантов осуществления 1a-22a, где введение терапевтически эффективного количества указанного антагониста ActRIIA/ActRIIB обеспечивает снижение по меньшей мере двух из стеатоза, воспаления печени и баллонной дистрофии клеток печени, например гепатостеатоза и воспаления печени, или гепатостеатоза и баллонной дистрофии клеток печени, или баллонной дистрофии клеток печени и воспаления печени, на по меньшей мере один балл по шкале NAS.

24a. Антагонист ActRIIA/ActRIIB для применения по любому из вариантов осуществления 1a-23a, где указанный субъект является субъектом с сахарным диабетом, субъектом с ожирением или субъектом с метаболическим синдромом или другим метаболическим нарушением.

25a. Антагонист ActRIIA/ActRIIB для применения по любому из вариантов осуществления 1a-24a, где у указанного субъекта имеется сахарный диабет 2 типа.

26a. Антагонист ActRIIA/ActRIIB для применения по любому из вариантов осуществления 1a-25a, где указанный субъект параллельно получает средство стандартного лечения сахарного диабета 2 типа.

27a. Антагонист ActRIIA/ActRIIB для применения по варианту осуществления 26а, где средство стандартного лечения выбрано из метформина, ингибитора DPP4, метформина/ингибитора DPP4, сульфонилмочевин, тиазолидиндионов, агонистов рецептора GLP-1, ингибиторов SGLT2, средства инсулинотерапии.

28a. Антагонист ActRIIA/ActRIIB для применения по любому из вариантов осуществления 1a-27a, где указанный субъект характеризуется уровнем HbA1c от 6,5% до 10%.

29a. Антагонист ActRIIA/ActRIIB для применения по любому из вариантов осуществления 1a-28a, где указанный субъект страдает ожирением или избыточным весом или имеет нормальный BMI.

30a. Антагонист рецептора активина II типа (ActRII) для применения по любому из вариантов осуществления 1a-29a, где антагонист рецептора активина II типа (ActRII) представляет собой антагонист ActRIIA и/или ActRIIB.

31a. Антагонист рецептора активина II типа (ActRII) для применения по любому из вариантов осуществления 1a-30a, где антагонист рецептора активина II типа (ActRII) представляет собой антагонист ActRIIA и ActRIIB.

32a. Антагонист ActRIIA/ActRIIB для применения по любому из вариантов осуществления 1a-31a, где антагонист ActRIIA/ActRIIB представляет собой антитело к ActRII или его функциональный фрагмент.

32a. Антитело к ActRIIA/ActRIIB по варианту осуществления 31a, где указанное антитело или его функциональный фрагмент характеризуются Kd, составляющей менее чем 1 нМ для ActRIIA и менее чем 20 пМ для ActRIIB.

33a. ActRIIA/ActRIIB-связывающее антитело или его функциональный фрагмент по варианту осуществления 32a, где указанное ActRIIA/ActRIIB-связывающее антитело выбрано из группы, включающей:

а) антитело, содержащее три CDR под SEQ ID NO:1, SEQ ID NO:2, SEQ ID NO:3;

b) антитело, содержащее три CDR под SEQ ID NO:4, SEQ ID NO:5, SEQ ID NO:6;

с) антитело, содержащее три CDR под SEQ ID NO:1, SEQ ID NO:2, SEQ ID NO:3 и три CDR под SEQ ID NO:4, SEQ ID NO:5, SEQ ID NO:6;

d) ActRIIA/ActRIIB-связывающее антитело, содержащее домен HC, предусматривающий SEQ ID NO:8;

e) ActRIIA/ActRIIB-связывающее антитело, содержащее домен LC, предусматривающий SEQ ID NO:7;

f) ActRIIA/ActRIIB-связывающее антитело, содержащее домен HC, предусматривающий SEQ ID NO:8, и домен LC, предусматривающий SEQ ID NO:7,

g) ActRIIA/ActRIIB-связывающее антитело, содержащее VL-домен, предусматривающий SEQ ID NO:9,

h) ActRIIA/ActRIIB-связывающее антитело, содержащее VH-домен, предусматривающий SEQ ID NO:10,

i) ActRIIA/ActRIIB-связывающее антитело, содержащее VL-домен, предусматривающий SEQ ID NO:9, и VH-домен, предусматривающий SEQ ID NO:10,

j) антитело, способное связываться с каждым из следующих эпитопов в ActRIIB:

(i) WLDDFN (SEQ ID NO:11) и

(ii) CEGEQDKRLHCYASW (SEQ ID NO:15),

k) антитело, способное связываться с каждым из следующих эпитопов в ActRIIB:

(i) WLDDFN (SEQ ID NO:11),

(ii) CEGEQDKRLHCYASW (SEQ ID NO:15) и

(iii) GCWLDDFNC (SEQ ID NO:12),

j) антитело, которое:

(i) способно связываться с эпитопом, состоящим из WLDDFN (SEQ ID NO:11), и

(ii) способно связываться с эпитопом, состоящим из CEGEQDKRLHCYASW (SEQ ID NO:15).

34a. ActRIIA/ActRIIB-связывающее антитело или его функциональный фрагмент по варианту осуществления 33a, где 3 CDR из SEQ ID NO:10 изложены под SEQ ID NO: 1, 2 и 3, и где 3 CDR из SEQ ID NO:9 изложены под SEQ ID NO:4, 5 и 6.

35a. ActRIIA/ActRIIB-связывающее антитело или его функциональный фрагмент по любому из вариантов осуществления 33a или 34а, где 3 CDR из SEQ ID NO:8 изложены под SEQ ID NO: 1, 2 и 3, и где 3 CDR из SEQ ID NO:7 изложены под SEQ ID NO:4, 5 и 6.

36а. Антагонист ActRIIA/ActRIIB для применения по любому из вариантов осуществления 1a-35a, где антагонист ActRIIA/ActRIIB представляет собой бимагрумаб.

37a. Антагонист ActRIIA/ActRIIB для применения по любому из вариантов осуществления 1a-36a, предусматривающего введение бимагрумаба в количестве от приблизительно 3 мг/кг до приблизительно 10 мг/кг.

38a. Антагонист ActRIIA/ActRIIB для применения по любому из вариантов осуществления 1a-37a, предусматривающего введение бимагрумаба в количестве приблизительно 3 мг/кг.

39a. Антагонист ActRIIA/ActRIIB для применения по любому из вариантов осуществления 1a-38a, предусматривающего введение бимагрумаба в количестве приблизительно 4 мг/кг.

40a. Антагонист ActRIIA/ActRIIB для применения по любому из вариантов осуществления 1a-39a, предусматривающего введение бимагрумаба в количестве приблизительно 5 мг/кг.

41a. Антагонист ActRIIA/ActRIIB для применения по любому из вариантов осуществления 1a-40a, предусматривающего введение бимагрумаба в количестве приблизительно 6 мг/кг.

42a. Антагонист ActRIIA/ActRIIB для применения по любому из вариантов осуществления 1a-41a, предусматривающего введение бимагрумаба в количестве приблизительно 7 мг/кг.

43a. Антагонист ActRIIA/ActRIIB для применения по любому из вариантов осуществления 1a-42a, предусматривающего введение бимагрумаба в количестве приблизительно 8 мг/кг.

44a. Антагонист ActRIIA/ActRIIB для применения по любому из вариантов осуществления 1a-43a, предусматривающего введение бимагрумаба в количестве приблизительно 9 мг/кг.

45a. Антагонист ActRIIA/ActRIIB для применения по любому из вариантов осуществления 1a-44a, предусматривающего введение бимагрумаба в количестве приблизительно 10 мг/кг.

46a. Антагонист ActRIIA/ActRIIB для применения по любому из вариантов осуществления 1a-45a, где бимагрумаб вводится каждые 4 недели.

47a. Антагонист ActRIIA/ActRIIB для применения по любому из вариантов осуществления 1a-46a, где бимагрумаб вводится каждые 4 недели в течение по меньшей мере 3 месяцев, по меньшей мере 6 месяцев, по меньшей мере 9 месяцев или по меньшей мере 12 месяцев.

48a. Антагонист ActRIIA/ActRIIB для применения по любому из вариантов осуществления 1a-47a, предусматривающего введение по меньшей мере одного дополнительного терапевтического средства.

49a. Антагонист ActRIIA/ActRIIB для применения по варианту осуществления 48а, предусматривающего введение антагониста ActRIIA/ActRIIB в комбинации с по меньшей мере одним дополнительным терапевтическим средством для лечения или предупреждения заболевания печени.

50a. Антагонист ActRIIA/ActRIIB для применения по варианту осуществления 49а, где по меньшей мере одно дополнительное терапевтическое средство представляет собой агонист FXR (например, тропифексор, нидуфексор, обетихолевая кислота (6α-этилхенодезоксихолевая кислота), цилофексор (GS-9674, Px-102), TERN-101 (LY2562175), EYP001 (PXL007), EDP-305, AKN-083 (Allergan), INT-787 (Intercept), INT-767 (Intercept), AGN-242256 (Allergan), MET409 (Metacrine), ингибитор стероил-КоА-десатуразы-1 (SCD-1) (например, арахидиламидохолановая кислота (Aramchol™)), агонист THR-β (например, MGL-3196 (ресметиром), VK-2809, MGL-3745 (Madrigal)), ингибитор галектина-2 (например, GR-MD-02/белапектин), агонист PPAR (например, сароглитазар, селаделпар, элафибранор, ланифибранор, лобеглитазон, IVA337 (Inventiva), CER-002 (Cerenis), агонист GLP-1 (например, эксенатид, лираглутид, семаглутид, NC-101 (Naia Metabolic), G-49 (Astrazeneca), ZP2929 (BI/Zealand), PB-718 (Peg Bio), агонист FGF (например, пегбельфермин (ARX618), BMS-986171, NGM-282, NGM-313, YH25724, тирзепатид, ингибиторы пируватсинтазы (например, нитазоксанид), ингибитор регулирующей апоптотические сигналы киназы 1 (ASK1) (например, селонсертиб (GS-4997), GS-444217), ингибитор ацетил-КоА-карбоксилазы (ACC) (например, фирсокостат (GS-0976), PF-05221304, гемкабен (Gemphire)), агонист FXR (M480 (Metacrine), NTX-023-1 (Ardelyx), INV-33 (Innovimmune)), ингибитор CCR (например, AD-114 (AdAlta), бертилимумаб (Immune), CM-101 (ChemomAb), CCX-872 (ChemoCentryx), ценикривирок), тиазолидиндион (например, MSDC-0602K, пиоглитазон), ингибитор натрий-глюкозного котранспортера 2 и 1 типов (SGLT1/2) (например, ремоглифлозин, лусеоглифлозин, дапаглифлозин), ингибитор DPP-4 (ситаглиптин, саксаглиптин, вилдаглиптин, линаглиптин, эвоглиптин, гемиглиптин, анаглиптин, тенелиглиптин, алоглиптин, трелаглиптин, омариглиптин, госоглиптин, дутоглиптин) или любую их комбинацию.

Варианты осуществления (b)

1b. Способ лечения заболевания или нарушения со стороны печени у субъекта, нуждающегося в этом, включающий введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества антагониста рецептора активина II типа (ActRII).

2b. Способ предупреждения заболевания или нарушения со стороны печени у субъекта, нуждающегося в этом, включающий введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества антагониста рецептора активина II типа (ActRII).

3b. Способ лечения, стабилизации или уменьшения тяжести или прогрессирования неалкогольной жировой болезни печени (NAFLD), например NASH, у субъекта, нуждающегося в этом, включающий введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества антагониста рецептора активина II типа (ActRII).

4b. Способ замедления, прекращения или уменьшения развития хронического заболевания или нарушения со стороны печени, например NAFLD, неалкогольного стеатогепатита (NASH) или фиброза печени, у субъекта, нуждающегося в этом, включающий введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества антагониста рецептора активина II типа (ActRII).

5b. Способ по любому из вариантов осуществления 1b-4b, где у указанного субъекта имеется по меньшей мере одно состояние, выбранное из стеатоза печени, лобулярного воспаления и баллонной дистрофии клеток печени.

6b. Способ по любому из вариантов осуществления 1b-5b, где у указанного субъекта имеется стеатоз печени.

7b. Способ по любому из вариантов осуществления 1b-6b, где указанное заболевание или нарушение со стороны печени выбрано из неалкогольной жировой болезни печени (NAFLD) и неалкогольного стеатогепатита (NASH).

8b. Способ по любому из вариантов осуществления 1b-7b, где указанное заболевание или нарушение со стороны печени представляет собой стеатогепатит.

9b. Способ по любому из вариантов осуществления 1b-8b, где указанное заболевание или нарушение со стороны печени представляет собой фиброз печени.

10b. Способ по любому из вариантов осуществления 1b-9b, где указанное заболевание или нарушение со стороны печени представляет собой неалкогольную жировую болезнь печени (NAFLD).

11b. Способ по любому из вариантов осуществления 1b-10b, где указанное заболевание или нарушение со стороны печени представляет собой неалкогольный стеатогепатит (NASH).

12b. Способ по любому из вариантов осуществления 1b-11b, где указанное заболевание или нарушение со стороны печени представляет собой неалкогольный стеатогепатит (NASH), и где степень тяжести NASH является легкой или умеренной с уровнем фиброза F2-F3.

13b. Способ по любому из вариантов осуществления 1b-12b, где введение терапевтически эффективного количества антагониста ActRIIA/ActRIIB указанному субъекту обеспечивает уменьшение жировой фракции печени у указанного субъекта по сравнению с жировой фракцией печени у указанного субъекта, имеющейся до введения терапевтически эффективного количества антагониста ActRIIA/ActRIIB.

14b. Способ по любому из вариантов осуществления 1b-13b, где введение терапевтически эффективного количества антагониста ActRIIA/ActRIIB указанному субъекту обеспечивает уменьшение степени стеатогепатита по сравнению со степенью стеатогепатита, имеющейся до введения антагониста ActRII.

15b. Способ по любому из вариантов осуществления 1b-14b, где введение терапевтически эффективного количества указанного антагониста ActRIIA/ActRIIB обеспечивает устранение стеатогепатита.

16b. Способ по любому из вариантов осуществления 1b-15b, где введение терапевтически эффективного количества указанного антагониста ActRIIA/ActRIIB обеспечивает улучшение в отношении фиброза печени.

17b. Способ по любому из вариантов осуществления 1b-16b, где введение терапевтически эффективного количества указанного антагониста ActRIIA/ActRIIB обеспечивает устранение стеатогепатита и улучшение в отношении фиброза печени.

18b. Способ по любому из вариантов осуществления 1b-17b, где введение терапевтически эффективного количества указанного антагониста ActRIIA/ActRIIB обеспечивает уменьшение выраженности или уменьшение прогрессирования NASH.

19b. Способ по любому из вариантов осуществления 1b-18b, где введение терапевтически эффективного количества указанного антагониста ActRIIA/ActRIIB обеспечивает улучшение в отношении фиброза печени на по меньшей мере одну стадию по сравнению со стадией фиброза печени, имеющейся до введения указанного антагониста ActRIIA/ActRIIB.

20b. Способ по любому из вариантов осуществления 1b-19b, где введение терапевтически эффективного количества указанного антагониста ActRIIA/ActRIIB останавливает прогрессирование фиброза печени до стадии F3 или F4.

21b. Способ по любому из вариантов осуществления 1b-20b, где введение терапевтически эффективного количества указанного антагониста ActRIIA/ActRIIB обеспечивает снижение показателя активности NAFLD (NAS) на по меньшей мере 1 балл, на по меньшей мере 2 балла или на по меньшей мере 3 балла.

22b. Способ по любому из вариантов осуществления 1b-21b, где введение терапевтически эффективного количества указанного антагониста ActRIIA/ActRIIB обеспечивает снижение по меньшей мере одного из гепатостеатоза, воспаления печени и баллонной дистрофии клеток печени на по меньшей мере 1 балл по шкале NAS.

23b. Способ по любому из вариантов осуществления 1b-22b, где введение терапевтически эффективного количества указанного антагониста ActRIIA/ActRIIB обеспечивает снижение по меньшей мере двух из стеатоза, воспаления печени и баллонной дистрофии клеток печени, например гепатостеатоза и воспаления печени, или гепатостеатоза и баллонной дистрофии клеток печени, или баллонной дистрофии клеток печени и воспаления печени, на по меньшей мере 1 балл по шкале NAS.

24b. Способ по любому из вариантов осуществления 1b-23b, где указанный субъект является субъектом с сахарным диабетом, субъектом с ожирением или субъектом с метаболическим синдромом или другим метаболическим нарушением.

25b. Способ по любому из вариантов осуществления 1b-24b, где у указанного субъекта имеется сахарный диабет 2 типа.

26b. Способ по любому из вариантов осуществления 1b-25b, где указанный субъект параллельно получает средство стандартного лечения сахарного диабета 2 типа.

27b. Способ по варианту осуществления 26b, где средство стандартного лечения выбрано из метформина, ингибитора DPP4, метформина/ингибитора DPP4, сульфонилмочевин, тиазолидиндионов, агонистов рецептора GLP-1, ингибиторов SGLT2, средства инсулинотерапии.

28b. Способ по любому из вариантов осуществления 1b-27b, где указанный субъект характеризуется уровнем HbA1c от 6,5% до 10%.

29b. Способ по любому из вариантов осуществления 1b-28b, где указанный субъект страдает ожирением или избыточным весом или имеет нормальный BMI.

30b. Способ по любому из вариантов осуществления 1b-29b, где антагонист рецептора активина II типа (ActRII) представляет собой антагонист ActRIIA и/или ActRIIB.

31b. Способ по любому из вариантов осуществления 1b-30a, где антагонист рецептора активина II типа (ActRII) представляет собой антагонист ActRIIA и ActRIIB.

32b. Способ по любому из вариантов осуществления 1b-31b, где антагонист ActRIIA/ActRIIB представляет собой антитело к ActRII или его функциональный фрагмент.

32b. Способ по варианту осуществления 31b, где указанное антитело или его функциональный фрагмент характеризуются Kd, составляющей менее чем 1 нМ для ActRIIA и менее чем 20 пМ для ActRIIB.

33b. Способ по варианту осуществления 32b, где указанное ActRIIA/ActRIIB-связывающее антитело выбрано из группы, включающей:

а) антитело, содержащее три CDR под SEQ ID NO:1, SEQ ID NO:2, SEQ ID NO:3;

b) антитело, содержащее три CDR под SEQ ID NO:4, SEQ ID NO:5, SEQ ID NO:6;

с) антитело, содержащее три CDR под SEQ ID NO:1, SEQ ID NO:2, SEQ ID NO:3 и три CDR под SEQ ID NO:4, SEQ ID NO:5, SEQ ID NO:6;

d) ActRIIA/ActRIIB-связывающее антитело, содержащее домен HC, предусматривающий SEQ ID NO:8;

e) ActRIIA/ActRIIB-связывающее антитело, содержащее домен LC, предусматривающий SEQ ID NO:7;

f) ActRIIA/ActRIIB-связывающее антитело, содержащее домен HC, предусматривающий SEQ ID NO:8, и домен LC, предусматривающий SEQ ID NO:7,

g) ActRIIA/ActRIIB-связывающее антитело, содержащее VL-домен, предусматривающий SEQ ID NO:9,

h) ActRIIA/ActRIIB-связывающее антитело, содержащее VH-домен, предусматривающий SEQ ID NO:10,

i) ActRIIA/ActRIIB-связывающее антитело, содержащее VL-домен, предусматривающий SEQ ID NO:9, и VH-домен, предусматривающий SEQ ID NO:10,

j) антитело, способное связываться с каждым из следующих эпитопов в ActRIIB:

(i) WLDDFN (SEQ ID NO:11) и

(ii) CEGEQDKRLHCYASW (SEQ ID NO:15),

k) антитело, способное связываться с каждым из следующих эпитопов в ActRIIB:

(i) WLDDFN (SEQ ID NO:11),

(ii) CEGEQDKRLHCYASW (SEQ ID NO:15) и

(iii) GCWLDDFNC (SEQ ID NO:12),

j) антитело, которое:

(i) способно связываться с эпитопом, состоящим из WLDDFN (SEQ ID NO:11), и

(ii) способно связываться с эпитопом, состоящим из CEGEQDKRLHCYASW (SEQ ID NO:15).

34b. ActRIIA/ActRIIB-связывающее антитело или его функциональный фрагмент по варианту осуществления 33a, где 3 CDR из SEQ ID NO:10 изложены под SEQ ID NO: 1, 2 и 3, и где 3 CDR из SEQ ID NO:9 изложены под SEQ ID NO:4, 5 и 6.

35b. Способ по любому из вариантов осуществления 33b или 34b, где 3 CDR из SEQ ID NO:8 изложены под SEQ ID NO: 1, 2 и 3, и где 3 CDR из SEQ ID NO:7 изложены под SEQ ID NO:4, 5 и 6.

36b.Способ по любому из вариантов осуществления 1b-35b, где антагонист ActRIIA/ActRIIB представляет собой бимагрумаб.

37b. Способ по любому из вариантов осуществления 1b-36b, включающий введение бимагрумаба в количестве от приблизительно 3 мг/кг до приблизительно 10 мг/кг.

38b. Способ по любому из вариантов осуществления 1b-37b, включающий введение бимагрумаба в количестве приблизительно 3 мг/кг.

39b. Способ по любому из вариантов осуществления 1b-38b, включающий введение бимагрумаба в количестве приблизительно 4 мг/кг.

40b. Способ по любому из вариантов осуществления 1b-39b, включающий введение бимагрумаба в количестве приблизительно 5 мг/кг.

41b. Способ по любому из вариантов осуществления 1b-40b, включающий введение бимагрумаба в количестве приблизительно 6 мг/кг.

42b. Способ по любому из вариантов осуществления 1b-41b, включающий введение бимагрумаба в количестве приблизительно 7 мг/кг.

43b. Способ по любому из вариантов осуществления 1b-42b, включающий введение бимагрумаба в количестве приблизительно 8 мг/кг.

44b. Способ по любому из вариантов осуществления 1b-43b, включающий введение бимагрумаба в количестве приблизительно 9 мг/кг.

45b. Способ по любому из вариантов осуществления 1b-44b, включающий введение бимагрумаба в количестве приблизительно 10 мг/кг.

46b. Способ по любому из вариантов осуществления 1b-45b, где бимагрумаб вводят каждые 4 недели.

47b. Способ по любому из вариантов осуществления 1b-46b, где бимагрумаб вводят каждые 4 недели в течение по меньшей мере 3 месяцев, по меньшей мере 6 месяцев, по меньшей мере 9 месяцев или по меньшей мере 12 месяцев.

48b. Способ по любому из вариантов осуществления 1b-47b, включающий введение по меньшей мере одного дополнительного терапевтического средства.

49b. Способ по варианту осуществления 48b, включающий введение антагониста ActRIIA/ActRIIB в комбинации с по меньшей мере одним дополнительным терапевтическим средством для лечения или предупреждения заболевания печени.

50b. Способ по варианту осуществления 49b, где по меньшей мере одно дополнительное терапевтическое средство представляет собой агонист FXR (например, тропифексор, нидуфексор, обетихолевая кислота (6α-этилхенодезоксихолевая кислота), цилофексор (GS-9674, Px-102), TERN-101 (LY2562175), EYP001 (PXL007), EDP-305, AKN-083 (Allergan), INT-787 (Intercept), INT-767 (Intercept), AGN-242256 (Allergan), MET409 (Metacrine), ингибитор стероил-КоА-десатуразы-1 (SCD-1) (например, арахидиламидохолановая кислота (Aramchol™)), агонист THR-β (например, MGL-3196 (ресметиром), VK-2809, MGL-3745 (Madrigal)), ингибитор галектина-2 (например, GR-MD-02/белапектин), агонист PPAR (например, сароглитазар, селаделпар, элафибранор, ланифибранор, лобеглитазон, IVA337 (Inventiva), CER-002 (Cerenis), агонист GLP-1 (например, эксенатид, лираглутид, семаглутид, NC-101 (Naia Metabolic), G-49 (Astrazeneca), ZP2929 (BI/Zealand), PB-718 (Peg Bio), агонист FGF (например, пегбельфермин (ARX618), BMS-986171, NGM-282, NGM-313, YH25724, тирзепатид, ингибиторы пируватсинтазы (например, нитазоксанид), ингибитор регулирующей апоптотические сигналы киназы 1 (ASK1) (например, селонсертиб (GS-4997), GS-444217), ингибитор ацетил-КоА-карбоксилазы (ACC) (например, фирсокостат (GS-0976), PF-05221304, гемкабен (Gemphire)), агонист FXR (M480 (Metacrine), NTX-023-1 (Ardelyx), INV-33 (Innovimmune)), ингибитор CCR (например, AD-114 (AdAlta), бертилимумаб (Immune), CM-101 (ChemomAb), CCX-872 (ChemoCentryx), ценикривирок), тиазолидиндион (например, MSDC-0602K, пиоглитазон), ингибитор натрий-глюкозного котранспортера 2 и 1 типов (SGLT1/2) (например, ремоглифлозин, лусеоглифлозин, дапаглифлозин), ингибитор DPP-4 (ситаглиптин, саксаглиптин, вилдаглиптин, линаглиптин, эвоглиптин, гемиглиптин, анаглиптин, тенелиглиптин, алоглиптин, трелаглиптин, омариглиптин, госоглиптин, дутоглиптин) или любую их комбинацию.

Варианты осуществления (c)

1c. Фармацевтическая композиция, содержащая антагонист ActRIIA/ActRIIB, предпочтительно бимагрумаб, и по меньшей мере одно фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество, для применения в лечении или предупреждении заболевания или нарушения со стороны печени у субъекта, нуждающегося в этом, предусматривающем введение терапевтически эффективного количества антагониста ActRIIA/ActRIIB, предпочтительно бимагрумаба.

2c. Фармацевтическая композиция, содержащая антагонист ActRIIA/ActRIIB, предпочтительно бимагрумаб, для применения по любому из вариантов осуществления 1a-50a и по меньшей мере одно фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество.

Варианты осуществления (d)

1d. Применение антагониста ActRIIA/ActRIIB, как определено в любом из вариантов осуществления 1a-50a, для изготовления лекарственного препарата для лечения заболевания или нарушения со стороны печени.

2d. Применение антагониста ActRIIA/ActRIIB, как определено в любом из вариантов осуществления 1a-50a, для изготовления лекарственного препарата для предупреждения заболевания или нарушения со стороны печени.

3d. Применение бимагрумаба в изготовлении лекарственного препарата для лечения или предупреждения заболевания или нарушения со стороны печени.

4d. Применение бимагрумаба по варианту осуществления 3d, где указанное заболевание или нарушение со стороны печени представляет собой неалкогольную жировую болезнь печени (NAFLD), неалкогольный стеатогепатит (NASH) или фиброз печени.

5d. Применение бимагрумаба по варианту осуществления 4d, где заболевание или нарушение со стороны печени представляет собой NASH.

Варианты осуществления (e)

1e. Применение фармацевтической композиции, содержащей антагонист ActRIIA/ActRIIB по любому из вариантов осуществления 1a-50a и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый носитель, для изготовления лекарственного препарата для лечения или предупреждения заболевания или нарушения со стороны печени.

[105] Антагонист ActRIIA/ActRIIB, например, бимагрумаб, способ, фармацевтическая композиция или применение по любому из перечисленных выше вариантов осуществления, где NAFLD характеризуется показателем активности NAFLD (NAS), превышающим или равным 1, превышающим или равным 2, превышающим или равным 3 или превышающим или равным 4.

[106] Антагонист ActRIIA/ActRIIB, способ, фармацевтическая композиция или применение по любому из перечисленных выше вариантов осуществления, где NASH подтвержден на основании биопсии печени (также называемый NASH, подтвержденным биопсией), и степень тяжести NASH является легкой или умеренной с уровнем фиброза F2-F3.

[107] Антагонист ActRIIA/ActRIIB, способ, фармацевтическая композиция или применение по любому из перечисленных выше вариантов осуществления, где наличие NASH было продемонстрировано посредством:

i) гистологического подтверждения NASH на основании биопсии печени, полученной за 2 года или меньше до начала лечения агонистом ActRIIA/ActRIIB по любому из перечисленных выше вариантов осуществления, с диагнозом, соответствующим NASH, уровнем фиброза F1, F2, F3 или F4, отсутствием диагностированных альтернативных хронических заболеваний печени или

ii) фенотипического диагноза NASH, или

iii) неинвазивных, специфических в отношении заболевания биомаркеров.

[108] Антагонист ActRIIA/ActRIIB, например, бимагрумаб, способ, фармацевтическая композиция или применение по любому из перечисленных выше вариантов осуществления, где заболевание печени связано с несбалансированным метаболизмом липидов в печени и/или повышенным уровнем жировых отложений.

[109] В любом из вышеописанных вариантов осуществления уровни содержания жира в печени оценивают посредством магнитно-резонансной томографии (MRI), более конкретно, посредством определения протонной плотности фракции жира посредством магнитно-резонансной томографии (MRI-PDFF).

[110] В любом из вариантов осуществления, описанных в настоящем документе, введение терапевтически приемлемого количества антагониста ActRIIA/ActRIIB, например, бимагрумаба, приводит к уменьшению жировой фракции печени у пациента. Например, в любом из вышеописанных вариантов осуществления лечение с помощью антагониста ActRII, предпочтительно антагониста ActRIIA и/или ActRIIB, и более предпочтительно антитела к рецептору ActRII, наиболее предпочтительно бимагрумаба, приводит к уменьшению жировой фракции печени у пациента по сравнению с жировой фракцией печени, имеющейся у пациента до лечения, при этом необязательно жировую фракцию печени оценивают посредством определения протонной плотности жировой фракции посредством магнитно-резонансной томографии (MRI-PDFF).

[111] В любом из вышеописанных вариантов осуществления лечение с помощью антагониста ActRII, предпочтительно антагониста ActRIIA и/или ActRIIB, и более предпочтительно антитела к рецептору ActRII, наиболее предпочтительно бимагрумаба, приводит к уменьшению жировой фракции печени у пациента, составляющему 40% или больше (например, 41%, 42%, 43%, 44%, 45%, 46%, 47%, 48%, 49% 50%, 51%, 52%, 53%, 54%, 55%, 56%, 57%, 58% , 59%, 60%, 65%, 70%, 75% или больше), по сравнению с жировой фракцией печени, имеющейся у пациента до лечения, при этом необязательно жировую фракцию печени оценивают посредством MRI-PDFF. В любом из вышеописанных вариантов осуществления жировая фракция печени пациента уменьшается на по меньшей мере 2 (например, по меньшей мере 3, по меньшей мере 4, по меньшей мере 5, по меньшей мере 6, по меньшей мере 7, по меньшей мере 8, по меньшей мере 9, по меньшей мере 10, по меньшей мере 11 или по меньшей мере 12) %-ных пункта после введения пациенту антагониста ActRII, предпочтительно антагониста ActRIIA и/или ActRIIB, и более предпочтительно антитела к рецептору ActRII, наиболее предпочтительно бимагрумаба, по сравнению с жировой фракцией печени, имеющейся у пациента перед лечением, при этом необязательно жировую фракцию печени оценивают посредством MRI-PDFF.

[112] В некоторых аспектах антагонист ActRIIA/ActRIIB, как определено в настоящем документе, предназначен для лечения заболевания или нарушения со стороны печени, например, хронического заболевания или нарушения со стороны печени, например, заболевания или нарушения, выбранного из группы, включающей холестаз, внутрипеченочный холестаз, холестаз, вызванный эстрогенами, холестаз, вызванный лекарственными средствами, холестаз беременных, холестаз, ассоциированный с парентеральным питанием, первичный билиарный холангит (PBC), первичный склерозирующий холангит (PSC), прогрессирующий семейный холестаз (PFIC), неалкогольную жировую болезнь печени (NAFLD), неалкогольный стеатогепатит (NASH), стеатогепатит, повреждение желчных протоков, вызванное лекарственными средствами, камни в желчном пузыре, цирроз печени, алкогольный цирроз, заболевание печени, ассоциированное с муковисцидозом (CFLD), непроходимость желчных протоков, желчнокаменную болезнь, фиброз печени, дислипидемию, портальную гипертензию, метаболический синдром, гиперхолестеринемию, прогрессирующий фиброз печени, вызванный любым из перечисленных выше заболеваний и/или инфекционным гепатитом, например, заболеванием или нарушением со стороны печени является NAFLD, NASH, фиброз печени, гепатостеатит или стеатоз печени.

[113] В еще одном аспекте фармацевтическая композиция представлена в виде стандартной лекарственной формы, содержащей бимагрумаб в количестве от приблизительно 100 до приблизительно 200 мг/мл, предпочтительно бимагрумаб в количестве приблизительно 100, приблизительно 105, приблизительно 110, приблизительно 115, приблизительно 120, приблизительно 125, приблизительно 130, приблизительно 135, приблизительно 140, приблизительно 145, приблизительно 150, приблизительно 155, приблизительно 160, приблизительно 165, приблизительно 170, приблизительно 175, приблизительно 180, приблизительно 185, приблизительно 190, приблизительно 195, приблизительно 200 мг/мл бимагрумаба. Такие композиции в виде стандартных лекарственных форм могут быть представлены в подходящей форме для внутривенного введения. Такие композиции в виде стандартных лекарственных форм могут быть представлены в подходящей форме для подкожного введения. Также такие композиции в виде стандартной лекарственной формы предназначены для применения в лечении хронического заболевания печени, например неалкогольной жировой болезни печени (NAFLD), неалкогольного стеатогепатита (NASH), повреждения желчных протоков, вызванного лекарственными средствами, желчекаменной болезни, цирроза печени, алкогольного цирроза, муковисцидоза, непроходимости желчных протоков, холелитиаза, фиброза печени, например, для применения в лечении неалкогольного стеатогепатита (NASH), например, для применения в лечении фенотипического неалкогольного стеатогепатита (NASH).

[114] В еще одном аспекте антагонист ActRIIA/ActRIIB, как определено в данном документе, предназначен для предупреждения или задержки прогрессирования хронического заболевания или нарушения со стороны печени до их более поздней стадии или более серьезного состояния, например, для предупреждения или задержки прогрессирования хронического заболевания или нарушения со стороны печени, выбранных из группы, состоящей из NAFLD, NASH и фиброза печени.

Субъекты

[115] В соответствии с настоящим раскрытием субъекты, получающие антагонист ActRIIA/ActRIIB, как описано в настоящем документе, могут страдать или подвергаться риску заболевания или нарушения печени, например, как определено выше.

[116] В некоторых вариантах осуществления субъект с заболеванием или нарушением печени страдает ожирением, избыточным весом тела или имеет нормальный BMI. В одном варианте осуществления субъект с заболеванием или нарушением печени имеет индекс массы тела (BMI) 25 кг/м² или больше. В другом варианте осуществления субъект с заболеванием или нарушением печени имеет BMI 26 кг/м² или больше. В другом варианте осуществления субъект с заболеванием или нарушением печени имеет BMI 27 кг/м² или больше. В другом варианте осуществления субъект с заболеванием или нарушением печени имеет BMI 28 кг/м² или больше. В другом варианте осуществления субъект с заболеванием или нарушением печени имеет BMI 29 кг/м² или больше. В одном варианте осуществления субъект с заболеванием или нарушением печени страдает ожирением. В другом варианте осуществления субъект с заболеванием или нарушением печени имеет BMI 30 кг/м² или больше. В одном варианте осуществления субъект с заболеванием или нарушением печени имеет избыточный вес. В другом варианте осуществления субъект с заболеванием или нарушением печени имеет BMI ≥ 25 и < 30 кг/м². В одном варианте осуществления субъект с заболеванием или нарушением печени имеет нормальный BMI. В другом варианте осуществления субъект с заболеванием или нарушением печени имеет BMI менее 25 кг/м².

[117] В одном варианте осуществления субъект с заболеванием или нарушением печени имеет гипертензию, и/или гипертриглицеридемию, и/или низкий уровень липопротеинов высокой плотности (HDL).

[118] В одном варианте осуществления субъект с заболеванием или нарушением печени имеет сахарный диабет 2 типа и BMI ≥ 30 кг/м² и по меньшей мере одно из гипертонии, гипертриглицеридемии и низкого уровня HDL.

Комбинированная терапия

[119] При практическом применении некоторых способов лечения или путей применения по настоящему раскрытию терапевтически эффективное количество антагониста ActRII, например, антагониста ActRIIA и/или ActRIIB (например, антитела к рецептору ActRII или его антигенсвязывающего фрагмента, например, бимагрумаба) вводят пациенту, например, млекопитающему (например, человеку). Хотя понятно, что раскрытые способы предусмотрены для лечения пациентов с заболеванием или нарушением печени с применением антагониста ActRII (например, бимагрумаба), это не исключает того, что, если пациент в конечном итоге будет получать лечение с помощью антагониста ActRII, то такая терапия с помощью антагониста ActRII обязательно должна являться монотерапией. Действительно, если пациент выбран для лечения с помощью антагониста ActRII, то антагонист ActRII (например, бимагрумаб) можно вводить в соответствии со способами или путями применения согласно настоящему раскрытию либо отдельно, либо в комбинации с другими средствами и видами терапии для лечения заболевания или нарушения печени у пациентов, например, в комбинации с по меньшей мере одним дополнительным терапевтическим средством. При совместном введении с одним или более дополнительными терапевтическими средствами, антагонист ActRII (например, бимагрумаб) можно вводить либо одновременно с другим средством, либо отдельно, либо последовательно. При последовательном введении лечащий врач примет решение относительно соответствующей последовательности введения антагониста ActRII (например, бимагрумаба) в комбинации с другими средствами и соответствующих дозировок для совместной доставки. Соответственно, в одном из аспектов настоящего изобретения также представлена фармацевтическая комбинация, содержащая (а) антагонист ActRII, предпочтительно антагонист ActRIIA и/или ActRIIB, и более предпочтительно антитело к рецептору ActRII, наиболее предпочтительно бимагрумаб, и (b) по меньшей мере одно дополнительное терапевтическое средство.

[120] При лечении или предупреждении заболевания или нарушения печени у субъекта, нуждающегося в этом, можно успешно комбинировать различные виды терапии с раскрытым антагонистом ActRII (например, бимагрумабом). По меньшей мере одно дополнительное терапевтическое средство может представлять собой агонист FXR, ингибитор стероил-КоА-десатуразы-1 (SCD-1) (например, арахидиламидохолановая кислота (AramcholTM)), агонист THR-β (например, MGL-3196 (ресметиром), VK-2809, MGL-3745 (Madrigal)), ингибитор галектина-2 (например, GR-MD-02/белапектин), агонист PPAR (например, сароглитазар, селаделпар, элафибранор, ланифибранор, лобеглитазон, IVA337 (Inventiva), CER-002 (Cerenis), агонист GLP-1 (например, эксенатид, лираглутид, семаглутид, NC-101 (Naia Metabolic), G-49 (Astrazeneca), ZP2929 (BI/Zealand), PB-718 (Peg Bio), агонист FGF (например, пегбельфермин (ARX618), BMS-986171, NGM-282, NGM-313, YH25724, тирзепатид, ингибиторы пируватсинтазы (например, нитазоксанид), ингибитор регулирующей апоптотические сигналы киназы 1 (ASK1) (например, селонсертиб (GS-4997), GS-444217), ингибитор ацетил-КоА-карбоксилазы (ACC) (например, фирсокостат (GS-0976), PF-05221304, гемкабен (Gemphire)), агонист FXR (M480 (Metacrine), NTX-023-1 (Ardelyx), INV-33 (Innovimmune)), ингибитор CCR (например, AD-114 (AdAlta), бертилимумаб (Immune), CM-101 (ChemomAb), CCX-872 (ChemoCentryx), ценикривирок), тиазолидиндион (например, MSDC-0602K, пиоглитазон), ингибитор натрий-глюкозного котранспортера-2 и 1 (SGLT1/2) (например, ремоглифлозин, лусеоглифлозин, дапаглифлозин), ингибитор DPP-4 (ситаглиптин, саксаглиптин, вилдаглиптин, линаглиптин, эвоглиптин, гемиглиптин, анаглиптин, тенелиглиптин, алоглиптин, трелаглиптин, омариглиптин, госоглиптин, дутоглиптин) или любую их комбинацию.

[121] Используемый в данном документе термин «агонист FXR»/«агонисты FXR» относится к любому средству, которое способно связывать и активировать фарнезоидный X-рецептор (FXR), который может называться рецептором желчных кислот (BAR) или рецептором NR1H4 (подсемейство ядерных рецепторов 1, группа Н, представитель 4). Агонист FXR может действовать как агонист или частичный агонист FXR. Средство может представлять собой, например, малую молекулу, антитело или белок, предпочтительно малую молекулу. Активность агониста FXR можно измерить несколькими различными способами, например, в анализе in vitro с использованием бесклеточного анализа резонансного переноса энергии флуоресценции (FRET), как описано в Pellicciari, et al. Journal of Medicinal Chemistry, 2002, vol. 15, No. 45:3569-72.

[122] Агонист FXR, используемый в данном документе, относится, например, к соединениям, раскрытым в: WO 2016/096116, WO 2016/127924, WO 2017/218337, WO 2018/024224, WO 2018/075207, WO 2018/133730, WO 2018/190643, WO 2018/214959, WO 2016/096115, WO 2017/118294, WO 2017/218397, WO 2018/059314, WO 2018/085148, WO 2019/007418, CN 109053751, CN 104513213, WO 2017/128896, WO 2017/189652, WO2017/189663, WO 2017/189651, WO 2017/201150, WO 2017/201152, WO 2017/201155, WO2018/067704, WO 2018/081285, WO 2018/039384, WO 2015/138986, WO 2017/078928, WO2016/081918, WO 2016/103037, WO 2017/143134.

[123] Агонист FXR предпочтительно выбран из следующего: тропифексор, нидуфексор, обетихолевая кислота (6α-этилхенодезоксихолевая кислота), цилофексор (GS-9674, Px-102),

Фармацевтические композиции

[124] Антагонист ActRII, например, антагонист ActRIIA и/или ActRIIB, например, антитело к рецептору ActRII или его антигенсвязывающий фрагмент, например, бимагрумаб, можно использовать в качестве фармацевтической композиции, если их объединять с фармацевтически приемлемым носителем. В дополнение к антагонисту ActRII такая композиция может содержать носители, различные разбавители, наполнители, соли, буферы, стабилизаторы, солюбилизаторы и другие материалы, известные из уровня техники. Характеристики носителя будут зависеть от пути введения. Фармацевтические композиции для применения в раскрытых способах также могут содержать по меньшей одно или несколько дополнительных терапевтических средств для лечения конкретного целевого нарушения. Например, фармацевтическая композиция может также включать антидиабетические средства или средства, способствующие снижению веса, или средства, применимые для лечения метаболических нарушений, или средства, которые можно использовать для лечения или предупреждения заболевания или нарушения печени. Такие дополнительные факторы и/или средства можно включать в фармацевтическую композицию для получения синергетического эффекта со связывающими молекулами ActRII или для сведения к минимуму побочных эффектов, вызываемых антагонистами ActRII, например, антагонистом ActRIIA и/или ActRIIB (например, антителом к рецептору ActRII или его антигенсвязывающим фрагментом, например, бимагрумабом). В предпочтительных вариантах осуществления фармацевтические композиции для применения в раскрытых способах включают бимагрумаб при 150 мг/мл.

[125] Фармацевтические композиции, раскрытые в данном документе, могут быть изготовлены обычным способом. В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция предусмотрена в лиофилизированной форме. Для немедленного введения ее растворяют в подходящем водном носителе, например, в стерильной воде для инъекций или в стерильном забуференном физиологическом растворе. Если считается желательным получить раствор большего объема для введения с помощью инфузии, а не в виде болюсной инъекции, то может быть преимущественным включение человеческого сывороточного альбумина или собственной гепаринизированной крови пациента в физиологический раствор во время составления. Наличие избытка такого физиологически инертного белка предотвращает потерю антител вследствие адсорбции на стенках контейнера и системы трубок, используемых с инфузионным раствором. Если используется альбумин, то подходящая концентрация составляет от 0,5 до 4,5% по весу физиологического раствора.

[126] В некоторых вариантах осуществления раскрытых способов и путей применения антагонист ActRII, например, антитело к ActRII, например, бимагрумаб, составляют в виде лиофилизата. В случае если вводят терапевтически эффективное количество антагониста ActRII, например, антагониста ActRIIA и/или ActRIIB (например, антитела к рецептору ActRII или его антигенсвязывающего фрагмента, например, бимагрумаба), антагонист ActRII будет представлен в виде апирогенного, парентерально приемлемого раствора. Фармацевтическая композиция для внутривенного или подкожного введения в дополнение к антагонисту ActRII может содержать изотоническую среду-носитель, такую как хлорид натрия, раствор Рингера, декстрозу, декстрозу и хлорид натрия, лактированный раствор Рингера или другую среду-носитель, как известно из уровня техники. Фармацевтическую композицию по настоящему раскрытию можно составить так, чтобы она была совместима с предполагаемым путем введения (например, композиции для перорального применения обычно включают инертный разбавитель или пищевой носитель). Другие неограничивающие примеры путей введения включают парентеральное (например, внутривенное), внутрикожное, подкожное, пероральное (например, ингаляционное), трансдермальное (местное), трансмукозальное и ректальное введение. Фармацевтические композиции, совместимые с каждым предполагаемым путем, хорошо известны в данной области техники.

Схема дозирования и способы введения

[127] Схемы введения доз корректируют для обеспечения оптимального требуемого ответа (например, терапевтического ответа). Например, можно вводить одну болюсную дозу, можно вводить несколько разделенных доз в течение некоторого времени, или дозу можно пропорционально снижать или увеличивать в соответствии с потребностями терапевтической ситуации. Особенно преимущественным является составление композиций для парентерального применения в стандартной лекарственной форме для удобства введения и однородности дозирования. Стандартная лекарственная форма, применяемая в данном документе, относится к физически дискретным единицам, подходящим в качестве единичных доз для субъектов, подлежащих лечению; при этом каждая единица содержит предварительно определенное количество активного соединения, рассчитанное для получения требуемого терапевтического эффекта, в сочетании с необходимым фармацевтическим носителем. Параметры стандартных лекарственных форм по настоящему изобретению продиктованы и непосредственно зависят от уникальных характеристик активного соединения и конкретного терапевтического эффекта, который должен быть достигнут, и ограничений, свойственных в данной области техники в отношении составления такого активного соединения для лечения чувствительности у индивидуумов.

[128] В зависимости от используемого соединения, целевого заболевания или нарушения и стадии такого заболевания или нарушения, схема дозирования, т.е. дозы и/или частоты введения фармацевтической композиции, содержащей антагонист ActRII, например, антагонист ActRIIA и/или ActRIIB, (например, антитело к рецептору ActRII или его антигенсвязывающий фрагмент, например бимагрумаб), могут варьироваться. В зависимости от используемого соединения, целевого заболевания или нарушения и стадии такого заболевания или нарушения, схема дозирования, т.е. дозы и/или частоты введения фармацевтической комбинации, содержащей а) антагонист ActRII, например, антагонист ActRIIA и/или ActRIIB, (например, антитело к рецептору ActRII или его антигенсвязывающий фрагмент, например бимагрумаб) и b) по меньшей мере одно дополнительное терапевтическое средство, могут варьироваться.

[129] Для введения композиции, содержащей антитело, в способах лечения заболевания печени или нарушения печени или для применения при лечении или предупреждении заболевания печени или нарушения печени доза антитела составляет в диапазоне от приблизительно 0,0001 до приблизительно 100 мг/кг, а чаще от приблизительно 0,01 до приблизительно 30 мг/кг веса тела субъекта. Например, дозы составляют приблизительно 3 мг/кг веса тела, приблизительно 5 мг/кг веса тела или приблизительно 10 мг/кг веса тела в диапазоне от приблизительно 3 до приблизительно 10 мг/кг, например, приблизительно 3, приблизительно 4, приблизительно 5, приблизительно 6, приблизительно 7, приблизительно 8, приблизительно 9, приблизительно 10 мг/кг веса тела. Дозы повторяют по мере необходимости и они могут находиться в диапазоне от приблизительно одного раза в неделю до приблизительно одного раза каждые 10 недель, например один раз в 4 недели или один раз в 8 недель.

Наборы

[130] Настоящее раскрытие также охватывает наборы для применения в способах лечения или предупреждения заболевания или нарушения печени, которые могут содержать антагонист ActRII, например, антагонист ActRIIA и/или ActRIIB (например, антитело к рецептору ActRII или его антигенсвязывающий фрагмент, например, бимагрумаб), например, в жидкой или лиофилизированной форме, или фармацевтическую композицию, содержащую такой антагонист ActRII, например, бимагрумаб. Дополнительно такие наборы могут содержать приспособления для введения антагониста ActRII (например, шприц и флакон, предварительно заполненный шприц, предварительно заполненный шприц-ручку) и инструкции по применению. Такие наборы могут содержать дополнительные терапевтические средства (описанные выше), например, для доставки в комбинации с инкапсулированным антагонистом ActRII, например бимагрумабом.

[131] Фразу «приспособления для введения» используют для определения любого доступного инструмента для системного введения лекарственного средства пациенту, включая без ограничения предварительно заполненный шприц, флакон и шприц, шприц-ручку, автоинжектор, капельницу и мешок для внутривенного введения, насос и т.д. С помощью таких предметов пациент может вводить лекарственное средство самостоятельно (т.е. вводить лекарственное средство сам себе) или лекарственное средство может вводить врач.

[132] Каждый компонент набора обычно помещен в отдельный контейнер, и все различные контейнеры находятся в одной упаковке вместе с инструкциями по применению.

[133] Следует понимать, что каждый вариант осуществления может быть объединен с одним или более другими вариантами осуществления в той степени, в которой такая комбинация согласуется с описанием вариантов осуществления. Кроме того, следует понимать, что представленные выше варианты осуществления предусматриваются как включающие все варианты осуществления, в том числе такие варианты осуществления как результат комбинаций вариантов осуществления.

[134] Другие признаки, цели и преимущества настоящего раскрытия будут очевидны из описания и графических материалов, а также из формулы изобретения.

ПРИМЕРЫ

[135] В следующих примерах проиллюстрировано настоящее раскрытие, описанное выше, однако они никоим образом не предназначены для ограничения объема настоящего раскрытия. Другие варианты настоящего раскрытия будут полностью очевидны специалисту средней квалификации в данной области техники и охвачены прилагаемой формулой изобретения.

Примеры 1 и 2. Доклиническое исследование

[136] У пациентов с NAFLD наблюдали высокую экспрессию активина А, а у пациентов с NASH высокие уровни активина А были в значительной степени связаны со степенью фиброза печени (Yndestad et al., Am J Gastroenterol. 2009 Sep;104(9):2196-205). Для изучения фиброза печени доступно несколько мышиных моделей, в том числе модель NASH с ожирением, вызванным рационом с высоким содержанием жиров, долгосрочная (20 недель) модель заболевания, имеющая отношение к лечению NASH, которую можно использовать для изучения влияния лечения на NASH с фиброзом в схеме терапевтического лечения, а также модель CCl₄-индуцированного фиброза печени, краткосрочная (4 недели) химически индуцированная модель, которая может быть применена для изучения влияния лечения на фиброз в схеме лечения для предупреждения заболевания.

Пример 1. DAX19 in vivo 1 - модель NASH с ожирением, вызванным рационом HF/NASH

[137] Взрослых самцов мышей C57BL/6J содержали с неограниченным доступом к воде и пище ad libitum. Мышей кормили рационом HF/NASH (40 ккал% жиров, 2% холестерина, 40 ккал% углеводов, Research Diets, D09100301 или SSniff Special Diets, с добавлением раствора фруктозы-сахарозы (42 г/л, 55% фруктозы и 45% сахарозы по весу) в питьевую воду). Животных того же возраста содержали на обычном питании (Normal Diet, ND, Kliba Nafag, 3892) и поили водопроводной водой. Мыши получали рацион HF/NASH в течение 20 недель. На 8-й неделе кормления HF/NASH животных, получающих HF/NASH, рандомизировали на обработанные и необработанные группы в соответствии с весом тела, общей безжировой и жировой массой и содержанием жира в печени, измеренным с помощью MRI. Исследование включало три группы мышей. Группа 1: нормальный рацион/вода (n=7); группа 2: HF/NASH+контрольное антитело (SB-18-SN99, 30 мг/кг) подкожно, каждые 7 дней (n=9) и группа 3: HF/NASH+CDD866 30 мг/кг, подкожно, q7d (n=9). CDD866 представляет собой химерную муринизированную версию BYM338 (бимагрумаб), в которой человеческий Fc-участок антитела замещен мышиным Fc. Вес тела измеряли еженедельно, а жировую и безжировую массы измеряли через 0, 4, 7, 14 и 20 недель кормления c помощью HF/NASH с использованием анализатора состава тела мыши с помощью ядерного магнитного резонанса (ЯМР), а жир печени оценивали через 8, 12, 16 и 20 недель кормления с помощью HF/NASH с использованием магнитно-резонансной томографии (MRI).

[138] Как показано на фигуре 1, при обработке с помощью CDD866 наблюдалось увеличение веса тела (фигура 1A) и безжировой массы (фигура 1B). Общая жировая масса уменьшалась на 14-й неделе кормления с помощью HF/NASH (фигура 1C). % жира в печени уменьшался во все измеренные моменты времени, включая снижение на 20% и 24% на 12-й и 20-й неделе кормления с помощью HF/NASH соответственно (фигура 1D).

[139] Окрашивание срезов печени PicroSirius Red на 20-й неделе показало, что обработка с помощью CDD866 обеспечивала значительное снижение выраженности фиброза печени на 30% по сравнению с контрольной обработкой (фигура 2А и 2В). Гистопатологическая полуколичественная оценка срезов печени, окрашенных PicroSirius-red, не выявляла статистически значимых изменений, хотя в образцах печени, обработанных CDD866, наблюдалась тенденция к уменьшению выраженности фиброза (фигура 2C).

[140] Обработка с помощью CDD866 также приводила к уменьшению окрашивания, положительного в отношении маркера миофибробластов a-SMA, в печени (-30% по сравнению с контрольной группой) (фигура 2D), а количество IBA1-положительных короноподобных структур печени значительно уменьшались в образцах печени, обработанных с помощью CDD866 (фигура 2E).

[141] Гистопатологическая полуколичественная оценка срезов печени, окрашенных гематоксилин-эозином, выявила значительное уменьшение выраженности микро- и макровезикулярного стеатоза печени при обработке с помощью CDD866 (фигура 2F).

[142] Это наблюдение было дополнительно подтверждено снижением экспрессии генов маркеров фиброза печени (фигура 3А) и маркеров воспаления печени F4/80 и TNFα (фигура 3В). Также наблюдали снижение количества TIMP1 в сыворотке крови (фигура 3C) и PIIINP (фигура 3D) после 6 недель обработки (-36%/-19% по сравнению с контролем), которое оставалось стабильным с течением времени (-38%/-24%, конец исследования).

[143] В анализе крови наблюдали снижение уровней AST (-27%) и GGT (-62%) в сыворотке крови на 20-й неделе кормления с помощью HF/NASH (фигура 4).

Пример 2. DAX19 in vivo 2 - модель CCl₄-индуцированного фиброза печени

[144] Самцов C57BL/6J в возрасте восьми недель содержали в среде с контролируемой температурой и влажностью, с циклом 12 часов света - 12 часов темноты и свободным доступом к стандартному питанию для грызунов (Kliba-Nafag, Кайзераугст, Швейцария) и водопроводной воде. Чтобы вызвать фиброз, мышей подвергали введению CCl4 в течение 4 недель 3 раза в неделю внутрибрюшинно (i.p.). Животных рандомизировали на три группы мышей. группа 1) контроль: оливковое масло, i.p., 5 мл/кг 3 раза/неделю (n=12), группа 2) CCl4, i.p., 5 мл/кг, 15% CCl4, 3 раза/неделю+контрольное антитело s.c., q7d (n=12) и группа 3) CCl4, i.p., 5 мл/кг, 15% CCl4, 3 раза/неделю+CDD866 30 мг/кг, s.c., q7d (n=10). Вес тела измеряли три раза в неделю, а жировую и безжировую массы измеряли через 0, 2 и 4 недели с использованием анализатора состава тела мыши с помощью ядерного магнитного резонанса (ЯМР) (Minispec LF50; Bruker Optics, Германия).

[145] Как показано на фигуре 5, при обработке с помощью CDD866 наблюдалось увеличение веса тела (фигура 5A) и безжировой массы (фигура 5B). Также наблюдалось снижение общей жировой массы на 14-й и 28-й день (фигура 5С). Это уменьшение общей жировой массы сопровождалось уменьшением эпидидимальной белой жировой ткани (WAT) (фигура 5D) и увеличением бурой жировой ткани (BAT) на 28-й день (фигура 5E).

[146] Окрашивание срезов печени PicroSirius Red на 4-й неделе показало, что обработка с помощью CDD866 обеспечивала значительное снижение выраженности фиброза печени на 11% по сравнению с контрольной обработкой (ND) (фигуры 6А и 6В). Также наблюдали значительное снижение количества антител к гладкомышечным клеткам (aSMA) в печени у мышей, получавших CDD866 (-16% по сравнению с Veh) (фигура 6C и 6D). У животных, обработанных CDD866, наблюдали значительное увеличение количества биомаркеров фиброза, TIMP-1 и PIIINP, в сыворотке крови (фигура 6E).

[147] Эти наблюдения были дополнительно подтверждены уровнями экспрессии генов: на 4 неделе наблюдали снижение примерно на 30-40% для Col1a1, Col3a1 и Mmp-2, в то время как для Timp-1 наблюдали увеличение (фигура 7).

Вывод

[148] С применением антагониста ActRII CDD866 (муринизированный BYM338) на двух различных моделях, можно показать, что при введении антагониста ActRII выраженность фиброза печени значительно снижается.

Пример 3. Клиническое исследование

План исследования

[149] BYM338X2211 представляло собой не подтверждающее, рандомизированное, слепое для исследователя и субъект, плацебо-контролируемое исследование с параллельными группами, в котором изучали 48-недельный период лечения посредством внутривенного введения бимагрумаба пациентам с избыточным весом/ожирением и сахарным диабетом 2 типа. Исследование было зарегистрировано под идентификатором ClinicalTrials.gov NCT03005288. Было включено и рандомизировано 75 пациентов. У пациентов, давших согласие на необязательное MRI, оценивали содержание жира в печени, висцерального и подкожного жира.

Ключевые критерии включения

Мужчины и женщины, в возрасте от 18 до 75 лет (включительно), в стабильном состоянии здоровья по данным анамнеза, физикального осмотра, основных показателей жизнедеятельности, электрокардиограммы и лабораторных тестов при скрининге.

Сахарный диабет 2 типа (T2D) с уровнем HbA1c от 6,5% до 10% (включительно) при скрининге, на фоне приема метформина и/или ингибиторного средства DPP4 или без фоновой терапии в отношении T2D со стабильным лечением в течение примерно 3 месяцев до рандомизации.

Индекс массы тела (BMI) от 28 до 40 кг/м² (включительно) при скрининге.

Вес тела от 65 до 140 кг (включительно) на момент скрининга и стабильный вес тела (±5 кг) по анамнезу (отчет пациента) и стабильная физическая активность в течение 3 месяцев до скрининга.

При скрининге основные жизненные показатели должны быть следующими: температура тела при измерении в полости рта 35,0-37,5°С, систолическое кровяное давление 90-150 мм рт.ст., диастолическое кровяное давление 50-90 мм рт.ст., частота пульса 50-100 уд./мин.

Ключевые критерии исключения

Беременные или кормящие грудью (лактирующие) женщины, при этом беременность определяется как состояние женщины после зачатия и длящееся до прекращения гестационного периода, подтвержденное положительным лабораторным тестом на hCG.

Женщины, способные к деторождению, определяемые как все женщины, физиологически способные забеременеть, если они не используют высокоэффективные способы контрацепции во время введения доз и в течение 6 месяцев после прекращения приема исследуемого лекарственного средства.

Сахарный диабет, отличный от 2 типа, например сахарный диабет 1 типа, хирургически индуцированный сахарный диабет; «лабильный» сахарный диабет 2 типа по мнению исследователя, эпизоды тяжелой гипогликемии в анамнезе в течение года, предшествующего скринингу, или неосведомленность о гипогликемии.

Аномальные результаты функциональных проб печени, такие как уровни AST, ALT, щелочной фосфатазы или сывороточного билирубина, или аномальные уровни липазы и/или амилазы.

Клинически значимые случаи аритмии, нестабильная стенокардия, инфаркт миокарда или инсульт, обходное аортокоронарное шунтирование или чрескожное коронарное вмешательство (например, ангиопластика или установка стента) в анамнезе в течение 6 месяцев после скрининга или 1 года для стентов с лекарственным покрытием.

Применение любых лекарственных препаратов против ожирения, пищевых добавок или отпускаемых без рецепта продуктов для снижения веса в течение 3 месяцев до скрининга. Применение лекарственных препаратов, которые, как известно, вызывают увеличение веса, например некоторые противосудорожные и психотропные препараты (например, клозапин), в течение 3 месяцев до скрининга.

Скрининг (дни от -21 до -8)

[150] Для определения соответствия критериям участия в исследовании участники осуществляли скрининговый визит в исследовательском центре. Субъектам, которые по итогам скрининга соответствовали требованиям для включения, назначали процедуры оценки исходного уровня.

[151] Мероприятия по изменению образа жизни включали рекомендации в отношении рациона питания для снижения веса с ежедневным дефицитом калорий в 500 ккал, с рационом, соответствующим рекомендациям Американской диабетической ассоциации (ADA) для оптимального гликемического контроля, и потреблением белка по меньшей мере 1,2 г/кг/день для поддержки мышечного анаболизма и компенсации дефицита калорий. Пациентов консультировали по вопросам физической активности, и им рекомендовали следовать установленным рекомендациям (Американская диабетическая ассоциация, Starter Walking Plan, взято из I Hate to Exercise, 2^е издание, Charlotte Hayes). Эти вмешательства начинали во время скрининга после подтверждения соответствия критериям участия в исследовании. Испытания средств против ожирения должны продемонстрировать преимущества лечения в отношении веса/состава на фоне терапии первой линии с изменениями образа жизни. Ежедневный дефицит калорий в 500 ккал является стандартным подходом, и ожидается, что он вызовет потерю веса в течение периода лечения. Программа ходьбы Американской диабетической ассоциации (ADA) разработана с учетом типа популяции в этом исследовании и представляет собой мягкий, простой в реализации подход к физической активности. Известно, что физические упражнения усиливают действие бимагрумаба на мышечную функцию, поддерживая эффективность лечения бимагрумабом в отношении состава и веса тела.

Исходный уровень (дни от -7 до -1)

[152] Перед введением дозы (день 1) пациенты, соответствующие критериям включения в исследование после скрининга, возвращались в клинику для прохождения оценок исходного уровня.

[153] Сканирования на исходном уровне проводили до введения дозы активного лекарственного средства или плацебо в день 1 и они включали определение содержания жира в печени, абдоминального подкожного жира и абдоминального висцерального жира с помощью магнитно-резонансной томографии (MRI), а также определение состава тела с помощью двухэнергетической рентгеновской абсорбциометрии (DXA). Дополнительная оценка пациента на исходном уровне включала антропометрические измерения (рост, вес тела, окружность талии, окружность бедер, соотношение талии и бедер и индекс массы тела (BMI) (вес тела (кг)/[рост (м)]²). Другие измерения на исходном уровне включали определение уровня глюкозы и инсулина натощак и определение уровня HbA1c.

Рандомизация и дозирование (день 1)

[154] Пациентов, соответствующих критериям включения в исследование, на основании скрининга и оценок на исходном уровне рандомизировали в соотношении 1:1 для получения либо бимагрумаба, либо плацебо. Рандомизацию стратифицировали в соответствии с исходным BMI на 2 группы:

BMI от 28 кг/м² до 33 кг/м² (включительно) и

BMI от 33 кг/м² до 40 кг/м² (включительно).

[155] Пациентов распределяли в одну из следующих 2 групп лечения в соотношении 1:1

BYM338 (бимагрумаб) 10 мг/кг до максимум 1200 мг ежемесячно (12 доз)

Плацебо ежемесячно (12 доз)

[156] Введение бимагрумаба или плацебо осуществляли посредством внутривенной инфузии в течение 30 минут с последующим периодом наблюдения, который включал отбор образцов для оценки безопасности и переносимости, а также PK.

Период лечения (дни 1-336)

[157] Пациенты продолжали получать фоновое стандартное лечение, чтобы избежать ухудшения гликемического контроля в соответствии с критериями соответствия включению (см. основные критерии соответствия включению выше) на протяжении всего исследования, что позволило оценить дополнительное преимущество лечения бимагрумабом по гликемическим параметрам. Лечение T2D ограничивается специфическими видами терапии для однородности исследуемой популяции и обеспечения возможности интерпретации данных. Пероральная терапия диабета метформином и/или ингибитором DPP4 способствовала отбору пациентов, находящихся на ранних стадиях заболевания и, следовательно, не имеющих значительных сопутствующих заболеваний. Более того, эти лекарственные препараты с меньшей вероятностью влияли на вес тела и, таким образом, с меньшей вероятностью искажали результаты исследования. Если во время исследования наблюдалось улучшение гликемического контроля, разрешалось сокращение антидиабетического лечения для предупреждения гипогликемии.

[158] Введение бимагрумаба или плацебо осуществляли посредством внутривенной инфузии в течение 30 минут с последующим периодом наблюдения один раз каждые 4 недели, всего двенадцать доз. Бимагрумаб дозировали в зависимости от веса тела на уровне 10 мг/кг с предельной дозой 1200 мг для веса тела, равного и превышающего 120 кг. Плацебо предоставляли D5W, в виде 5% раствора декстрозы.

[159] Пациенты получали регулярный мониторинг и рекомендации по рациону и физической активности в рамках их ежемесячных визитов в исследовательский центр на протяжении всего исследования.

[160] Пациентов приглашали вернуться в исследовательский центр для дозирования примерно каждые 4 недели в течение периода лечения. Во время таких визитов у пациентов оценивали безопасность, переносимость, PK и эффективность.

[161] Период лечения заканчивался через 4 недели после последнего введения (на 308-й день/44-ю неделю).

Последующее наблюдение (дни 364-392)

[162] После завершения периода лечения пациенты переходили в период последующего наблюдения в течение 8 недель с регулярным мониторингом безопасности и эффективности (на 52-й неделе) до визита окончания исследования (EOS), который проводили на 56 неделе, через 12 недель после последнего введения исследуемого лекарственного средства.

Обоснование дозы

[163] Было показано, что у здоровых добровольцев (HV) и пациентов с sIBM доза бимагрумаба 10 мг/кг обеспечивает уровни воздействия (т.е. выше 10 мкг/мл), при которых наблюдается и сохраняется анаболический эффект в течение интервалов дозирования в 4 недели [CBYM338X2102 (N=6 субъектов), CBYM338X2104 (N=47 субъектов)], до шести доз [CBYM338X2109 (N=35 субъектов)] и до одного года [CBYM338B2203 (N=54 пациенты с sIBM)]. Пороговое значение минимального целевого воздействия для бимагрумаба составляет примерно 10 мкг/мл, концентрация, ниже которой наблюдается нелинейный клиренс, что свидетельствует о потере полного насыщения рецепторов и опосредованного мишенью распределения лекарственного средства. В клинических исследованиях, проведенных на сегодняшний день, концентрации бимагрумаба примерно на уровне 10 мкг/мл или выше в течение по меньшей мере 4 недель у HV и более одного года у пациентов с sIBM были безопасными, хорошо переносимыми и продемонстрировали обеспечение увеличения объема мышц бедра. 26-недельные токсикологические исследования на яванских макаках показали, что хроническое воздействие при NOAEL (300 мг/кг/неделю) примерно в 300 и 55 раз выше для AUC и Cmax соответственно по сравнению с воздействием на человека при дозе 10 мг/кг в равновесном состоянии.

[164] Дозировка в этом исследовании была основана на весе тела для пациентов с весом тела до 120 кг и была ограничена 1200 мг для пациентов с весом тела от 120 до 140 кг. Было доказано, что дозирование, основанное на весе тела, снижает вариабельность воздействия у субъектов/пациентов и применялось по мере необходимости. Ограниченную дозу выбирали при весе тела > 120 кг ввиду неопределенности влияния большого веса тела и состава тела (% жировой массы по сравнению с % безжировой массы) на фармакокинетику, экспозицию и профиль безопасности бимагрумаба. На сегодняшний день фармакокинетические данные ограничены у субъектов с ожирением, а максимальный вес тела у субъектов, получавших дозу, составлял 116 кг, в исследованиях, проведенных в отношении бимагрумаба у пациентов с избыточным весом с ожирением и резистентностью к инсулину (N=10), а также у здоровых субъектов с ожирением (N=6). Максимальное количество бимагрумаба, вводимое на сегодняшний день, составляет 3500 мг (в дозе 30 мг/кг) при i.v. и в виде разовой дозы для максимального веса тела 116 кг. Эта доза не показала чрезмерного воздействия и не вызвала опасений по поводу безопасности. Для таких субъектов выбирали ограниченную дозу во избежание чрезмерного воздействия и поддержания уровней бимагрумаба в пределах пороговых значений для безопасных анаболических эффектов в течение 4-недельных интервалов дозирования. В частности, выбранное количество 1200 мг соответствует дозе, основанной на весе тела, в диапазоне от 10 до 8,6 мг/кг для веса тела в диапазоне 120-140 кг, что, по прогнозам, приведет к уровням воздействия в пределах безопасного и эффективного диапазона для бимагрумаба, и с минимальным риском чрезмерного воздействия.

Обоснование продолжительности лечения

[165] Продолжительность лечения 48 недель была выбрана с учетом временного профиля, а также максимального эффекта бимагрумаба на жировую массу тела. В то время как при наборе безжировой массы при приеме бимагрумаба обычно наблюдается эффект насыщения, потеря жировой массы, по-видимому, не стабилизируется в течение периода от 24 недель и даже до 64 недель.

Обоснование продолжительности периода последующего наблюдения

[166] Продленный период последующего наблюдения в 8 недель выбирали для мониторинга стойкости эффекта лечения бимагрумабом в отношении жировой массы тела, безжировой массы и гликемического контроля после лечения. Визит EOS, проводимый через 12 недель после последнего введения, охватывает период вымывания воздействия бимагрумаба, связанного с анаболическим эффектом (примерно 8 недель).

Оценка контроля уровня глюкозы

[167] Уровни глюкозы натощак и инсулина измеряли в разные моменты времени.

HbA1c

[168] HbA1c отражает средние концентрации глюкозы за последние 3 месяца и, следовательно, обеспечивает применимый показатель гликемического контроля бимагрумаба за этот период времени. Это стандартная конечная точка, используемая для оценки гликемической эффективности любого антидиабетического лекарственного препарата. HbA1c является ключевым гликемическим параметром, который коррелирует со снижением риска диабетических осложнений.

HOMA2-IR

[169] Пациентам проводили оценку инсулина и глюкозы натощак при скрининге для оценки степени резистентности к инсулину с использованием гомеостатической модели оценки резистентности к инсулину (HOMA2-IR) и обратной модели HOMA2-IR.

QUICKI

[170] QUICKI оценивается, поскольку он является более предпочтительной оценкой резистентности к инсулину, чем HOMA2-IR, у пациентов с сахарным диабетом и повышенным уровнем глюкозы натощак, например > 170 мг/дл (Yokoyama et al (2004) J. Clin. Endocrinol. Metab. p. 1481). QUICKI представляет собой полученное значение индекса чувствительности к инсулину с использованием уровней глюкозы и инсулина натощак и предоставляет дополнительную и дополняющую информацию по сравнению с информацией, полученной с помощью HOMA2-IR (Hrebícek et al. (2002) J. Clin. Endocrinol. Metab., p. 144-7).

Визуализация

Сканирование с помощью DXA

[171] Двухэнергетическая рентгеновская абсорбциометрия (DXA) используется для оценки изменений в составе тела, включая общую жировую и безжировую массу тела (FBM и LBM), а также аппендикулярный скелетный жир и мышечную массу (aFBM и aLBM). Приборы DXA используют источник рентгеновского излучения, который генерирует и разделяет два вида энергии для измерения минеральной массы костей и мягких тканей, по которым оценивается жировая и свободная от жира масса (или безжировая масса тела). Исследование является быстрым (~5-6 мин), точным (0,5-1%) и неинвазивным. Сканеры DXA обладают точностью, необходимой для обнаружения изменений мышечной массы всего на 5%.

Сканирование с помощью MRI

[172] Магнитно-резонансная томография (MRI) используется для оценки изменения процентного содержания жира в печени (% фракции жира или %FF), объемов висцеральной и подкожной жировой ткани в области живота, а также площади поперечного сечения паравертебральных мышц, и связанного содержания жира (как содержания межмышечной жировой ткани-IMAT, так и содержания FF в мышцах). Все изображения получали в аксиальной плоскости с использованием последовательностей импульсов визуализации, оптимизированных для разделения воды и жира и адаптированных к возможностям системы MRI.

Анализ первичных переменных

[173] Основная цель исследования заключалась в оценке влияния бимагрумаба на общую жировую массу тела. Первичной переменной эффективности было изменение жировой массы по сравнению с исходным уровнем на 48-й неделе.

[174] План исследования позволил оценить эффективность на основании следующих двойных критериев: 1) статистическая значимость (превосходный эффект лечения, 1-сторонний уровень 10%) в отношении жировой массы; и 2) клиническое значение изменения жировой массы (оценочный средний эффект лечения 5% или более). Было показано, что потеря веса на 5% приводит к клинической пользе в популяции с избыточным весом/ожирением и T2D (Franz et al. (2015) J. Acad. Nutr. Diet., p. 1447-1463). Рандомизацию стратифицировали по категориям BMI (≥28 кг/м² и ≤33 кг/м², от >33 кг/м² до ≤40 кг/м²) для достижения примерного баланса распределения BMI между двумя группами лечения. Предельное значение 33 кг/м² представляет собой ожидаемый средний BMI в этой популяции.

[175] Использовали модель продольных смешанных эффектов с изменением по сравнению с исходным уровнем жировой массы в килограммах в качестве зависимой переменной, группой лечения, временем и взаимодействием время*лечение в качестве фиксированных эффектов. Жировая масса на исходном уровне и значения BMI на исходном уровне были включены в модель как ковариаты. Время моделировали как категориальную переменную, и использовали неструктурированную внутрисубъектную ковариацию. В модель были включены данные, собранные из обеих групп рандомизации (категория BMI при рандомизации). С помощью этой модели оценивали изменение по сравнению с исходным уровнем (абсолютное значение и %) жировой массы в кг на 48-й неделе. В качестве вспомогательного анализа доля пациентов, достигших потери по меньшей мере 5% жира на 24-й и 48-й неделе, была представлена с помощью групп лечения.

Анализ вторичных переменных

[176] Вторичной переменной эффективности является изменение уровня HbA1c на 24-й и 48-й неделе. Другие параметры контроля уровня глюкозы и чувствительности к инсулину (глюкоза и инсулин натощак, HOMA2-IR, QUICKI, индекс Мацуда) и антропометрические измерения тела (вес тела, BMI, окружность талии, соотношение талии и бедер и безжировая масса тела (LBM), измеренные с помощью DXA) являются другими вторичными переменными эффективности. Жировая масса тела, измеренная с помощью DXA на 24-й неделе, также являлась вторичной переменной эффективности.

[177] Вторичную переменную HbA1c анализировали аналогично жировой массе для оценки статистической значимости (превосходный эффект лечения, 1-сторонний уровень 10%) терапии бимагрумабом на HbA1c и клинической значимости этого эффекта (средний эффект лечения 0,5%). Модель использовали для описания HbA1c во времени, и изменение HbA1c во все моменты времени (включая 48-ю неделю) оценивали по этой модели. В анализе учитывали наблюдения, пересмотренные после изменения фонового антидиабетического лекарственного препарата или дозы. Ожидалось, что такой анализ будет объективным, поскольку корректировки для фонового лекарственного препарата/дозы основывались на наблюдаемых данных (HbA1c, FPG), в результате чего пересмотренные данные после изменения лекарственного препарата, вероятно, отсутствовали случайным образом (MAR). В качестве вспомогательного анализа метаболических изменений можно собрать сводные данные об увеличении (и уменьшении) в отношении фонового антидиабетического лекарственного препарата. Изменение в отношении фонового антидиабетического лекарственного препарата определялось как изменение суточной дозы и/или добавление второго средства.

Результаты

[178] Испытуемая популяция. Включенные в это исследование субъекты были в основном европеоидами (76%) или представителями негроидной расы/афроамериканцами (20%). Все субъекты имели избыточный вес или ожирение (среднее значение ± стандартное отклонение BMI 32,9 ± 3,4 кг/м², диапазон: 28-40), при этом общее количество женщин (47%) и мужчин (53%) было приблизительно равным. У всех субъектов имелся сахарный диабет 2 типа; средний уровень HbA_1c составлял 7,99% (±1,025) и 7,66% (±0,950) в группе бимагрумаба и плацебо соответственно. В общей сложности было включено 78 субъектов, 37 в группе бимагрумаба, из которых 14 мужчин (38%) и 23 женщины (62%), и 38 в группе плацебо, из которых 26 мужчин (68%) и 12 женщин (32%). Основные лабораторные показатели на исходном уровне между группами лечения были сопоставимы. Средний вес тела был на 6,76 кг ниже в группе бимагрумаба по сравнению с плацебо. Это различие объясняется тем, что в группе бимагрумаба процент пациентов женского пола был выше, чем в группе плацебо.

[179] Изменения состава тела. Значительный терапевтический эффект бимагрумаба наблюдали в отношении состава тела на 24-й и 48-й неделе по данным двухэнергетической рентгеновской абсорбциометрии (DXA). Значительное снижение общей жировой массы наблюдали в группе бимагрумаба по сравнению с плацебо в момент времени как на 24-й неделе, так и на 48-й неделе: -15,0% (-5,2 кг) у субъектов, принимавших бимагрумаб, по сравнению с плацебо на 24-й неделе и -20,5% (7,3 кг) у субъектов, принимавших бимагрумаб, по сравнению с плацебо на 48-й неделе (все р<0,001, фигура 8). Этот эффект наблюдался уже на 8-й неделе (первое сканирование после введения дозы) и сохранялся до конца исследования на 56-й неделе. Значительное снижение веса тела также наблюдали на 48-й неделе в группе бимагрумаба по сравнению с плацебо: -6,5% (5,9 кг) в группе BYM338 по сравнению с -0,8% (0,8 кг) в группе плацебо, р<0,001 (фигура 9А), что приводит к снижению BMI на -6,7% (2,2 кг/м²) в группе BYM338 по сравнению с -0,8% (0,3 кг/м²) в группе плацебо, р<0,001 (фигура 9В). Эти эффекты сохранялись до конца исследования на 56-й неделе.

[180] Чувствительность к инсулину и HbA_1c. Терапевтический эффект бимагрумаба в отношении HbA1c показал снижение на 0,76% [80% CI -1,05; 0,48] по сравнению с увеличением на 0,04% [80% CI -0,23;0,31] в группе плацебо на 48-й неделе (p=0,005). Чувствительность к инсулину измеряли как по инсулину натощак, так и по глюкозе, а также по тесту на толерантность к пище. Терапевтический эффект бимагрумаба на чувствительность к инсулину показал значительное улучшение по данным QUICKI (бимагрумаб +0,01; плацебо, без изменений, р=0,033) на 36-й неделе. Наблюдалась тенденция к улучшению чувствительности к инсулину, измеренная как по индексу Мацуды (бимагрумаб +3,15, плацебо +1,78, р=0,099) на 48-й неделе, так и по HOMA2-IR (бимагрумаб -0,09; плацебо +0,57, р=0,081).

[181] Распределение жира. Значительный эффект лечения с помощью бимагрумаба наблюдали в отношении распределения жира на 24-й и 48-й неделе (фигура 10). Значительное снижение фракции жира в печени (HFF) наблюдалось на 24-й неделе в группе бимагрумаба по сравнению с группой плацебо: -4,6 процентных пункта в течение 24 недель в группе бимагрумаба по сравнению с +0,23 процентных пункта в группе плацебо, p= 0,006. На 48-й неделе в группе бимагрумаба наблюдали значительное снижение HFF по сравнению с группой плацебо: 51,9% (-7 процентных пунктов) в течение 48 недель в группе бимагрумаба по сравнению с 18,3% (2,3 процентных пункта) в группе плацебо, р=0,01. Количество субъектов, которым сделали MRI на 48-й неделе, меньше, чем в предыдущие моменты времени, поскольку исходный протокол не включал MRI на 48-й неделе. MRI в этот момент времени была добавлена после завершения промежуточного анализа и после того, как некоторые субъекты уже завершили исследование и больше не соответствовали критериям включения для получения этой оценки.

[182] Значительное уменьшение абдоминального висцерального жира наблюдалось на 24-й неделе в группе бимагрумаба по сравнению с плацебо, уменьшение на 1,49 л в группе бимагрумаба по сравнению с 0,22 л в группе плацебо, р>0,001 и на 48-й неделе -34,5% (1,5 л) в группе BYM338 по сравнению с -0,2% (0,01 л) в группе плацебо, p=0,08.

Обсуждение

[183] В текущем исследовании потеря веса всего на 7% сопровождалась снижением жира в печени на 52% у субъектов, принимавших бимагрумаб, по сравнению с 18% у субъектов, принимавших плацебо (обе группы включали изменение рациона и физические упражнения). Такая потеря жира в печени является неожиданным открытием, основанным на предыдущих наблюдениях за пациентами, перенесшими бариатрическую хирургию (Phillips et al. (2007) Diabetes, Obesity and Metabolism, 10, 2008, 661-667) или вмешательства в отношении рациона питания (Lewis et al. (2006) Obesity Surgery, 16, 697-701), при которых потеря веса в среднем на 10% приводит к потере примерно 30% жира в печени. В дополнение к снижению количества жира в печени лечение с помощью бимагрумаба также обеспечивало снижение общей жировой массы тела (в первую очередь висцерального жира), окружности талии и уровня HbA1c, с одновременным увеличением безжировой массы тела. Эти результаты важны, поскольку как сахарный диабет 2 типа, так и резистентность к инсулину являются важными прогностическими факторами прогрессирования NAFLD/NASH до фиброза и цирроза; устранение жировой дистрофии печени снизит риск возникновения сахарного диабета 2 типа и метаболического синдрома (рассмотрено в Cernea et al. Expert Rev Clin Pharmacol 2017). Кроме того, увеличение безжировой массы в результате терапии бимагрумабом имеет важное значение, поскольку пациенты с NASH подвержены повышенному риску развития саркопении, то есть возрастной потери мышечной массы и функции (Koo et al. J Hepatology 2017; Petta et al. Ali Pharma Thera 2017; Carias et al. J Gastroenterol Hepatol 2016). Бимагрумаб воздействует на многие метаболические отклонения, как правило встречающиеся у людей с ожирением, T2D и NASH.

--->

ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ

<110> НОВАРТИС АГ

<120> ЛЕЧЕНИЕ ЗАБОЛЕВАНИЯ ИЛИ НАРУШЕНИЯ СО СТОРОНЫ ПЕЧЕНИ,

ПРЕДУСМАТРИВАЮЩЕЕ ПРИМЕНЕНИЕ АНТАГОНИСТОВ ACTRII

<130> PAT058683-WO-PCT

<140>

<141>

<150> 62/895,107

<151> 2019-09-03

<160> 15

<170> PatentIn версия 3.5

<210> 1

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Искусственная последовательность Описание

искусственной последовательности: синтетический пептид"

<400> 1

Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Ser Tyr Ile Asn

1 5 10

<210> 2

<211> 17

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Искусственная последовательность Описание

искусственной последовательности: синтетический пептид"

<400> 2

Thr Ile Asn Pro Val Ser Gly Ser Thr Ser Tyr Ala Gln Lys Phe Gln

1 5 10 15

Gly

<210> 3

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Искусственная последовательность Описание

искусственной последовательности: синтетический пептид"

<400> 3

Gly Gly Trp Phe Asp Tyr

1 5

<210> 4

<211> 14

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Искусственная последовательность Описание

искусственной последовательности: синтетический пептид"

<400> 4

Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Ser Tyr Asn Tyr Val Asn

1 5 10

<210> 5

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Искусственная последовательность Описание

искусственной последовательности: синтетический пептид"

<400> 5

Leu Met Ile Tyr Gly Val Ser Lys Arg Pro Ser

1 5 10

<210> 6

<211> 10

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Искусственная последовательность Описание

искусственной последовательности: синтетический пептид"

<400> 6

Gly Thr Phe Ala Gly Gly Ser Tyr Tyr Gly

1 5 10

<210> 7

<211> 217

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Искусственная последовательность Описание

искусственной последовательности: синтетический полипептид"

<400> 7

Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln

1 5 10 15

Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Ser Tyr

20 25 30

Asn Tyr Val Asn Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu

35 40 45

Met Ile Tyr Gly Val Ser Lys Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe

50 55 60

Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu

65 70 75 80

Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gly Thr Phe Ala Gly Gly

85 90 95

Ser Tyr Tyr Gly Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly

100 105 110

Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu

115 120 125

Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe

130 135 140

Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro Val

145 150 155 160

Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys

165 170 175

Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser

180 185 190

His Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu

195 200 205

Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser

210 215

<210> 8

<211> 445

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Искусственная последовательность Описание

искусственной последовательности: синтетический полипептид"

<400> 8

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Ser

20 25 30

Tyr Ile Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Thr Ile Asn Pro Val Ser Gly Ser Thr Ser Tyr Ala Gln Lys Phe

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Gly Gly Trp Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr

100 105 110

Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro

115 120 125

Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val

130 135 140

Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala

145 150 155 160

Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly

165 170 175

Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly

180 185 190

Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys

195 200 205

Val Asp Lys Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys

210 215 220

Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu

225 230 235 240

Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu

245 250 255

Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys

260 265 270

Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys

275 280 285

Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu

290 295 300

Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys

305 310 315 320

Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys

325 330 335

Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser

340 345 350

Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys

355 360 365

Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln

370 375 380

Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly

385 390 395 400

Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln

405 410 415

Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn

420 425 430

His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

435 440 445

<210> 9

<211> 111

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Искусственная последовательность Описание

искусственной последовательности: синтетический полипептид"

<400> 9

Gln Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln

1 5 10 15

Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Ser Tyr

20 25 30

Asn Tyr Val Asn Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu

35 40 45

Met Ile Tyr Gly Val Ser Lys Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe

50 55 60

Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu

65 70 75 80

Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gly Thr Phe Ala Gly Gly

85 90 95

Ser Tyr Tyr Gly Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu

100 105 110

<210> 10

<211> 115

<212> БЕЛОК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<221> источник

<223> /примечание="Искусственная последовательность Описание

искусственной последовательности: синтетический полипептид"

<400> 10

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Ser

20 25 30

Tyr Ile Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Thr Ile Asn Pro Val Ser Gly Ser Thr Ser Tyr Ala Gln Lys Phe

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Gly Gly Trp Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr

100 105 110

Val Ser Ser

115

<210> 11

<211> 6

<212> БЕЛОК

<213> Homo sapiens

<400> 11

Trp Leu Asp Asp Phe Asn

1 5

<210> 12

<211> 9

<212> БЕЛОК

<213> Homo sapiens

<400> 12

Gly Cys Trp Leu Asp Asp Phe Asn Cys

1 5

<210> 13

<211> 11

<212> БЕЛОК

<213> Homo sapiens

<400> 13

Lys Gly Cys Trp Leu Asp Asp Phe Asn Cys Tyr

1 5 10

<210> 14

<211> 5

<212> БЕЛОК

<213> Homo sapiens

<400> 14

Glu Gln Asp Lys Arg

1 5

<210> 15

<211> 15

<212> БЕЛОК

<213> Homo sapiens

<400> 15

Cys Glu Gly Glu Gln Asp Lys Arg Leu His Cys Tyr Ala Ser Trp

1 5 10 15

<---

Группа изобретений относится к биотехнологии. Раскрыто применение антитела к рецептору активина II типа (ActRII) или его антигенсвязывающего фрагмента для лечения заболевания или нарушения со стороны печени у субъекта, нуждающегося в этом, где заболевание или нарушение со стороны печени выбрано из неалкогольной жировой болезни печени (NAFLD), неалкогольного стеатогепатита (NASH) и фиброза печени, а также применение антитела к рецептору активина II типа (ActRII) или его антигенсвязывающего фрагмента для изготовления лекарственного препарата для лечения заболевания или нарушения со стороны печени у субъекта. Изобретение возможно использовать для лечения заболевания печени у субъекта, где заболевание выбрано из неалкогольной жировой болезни печени (NAFLD), неалкогольного стеатогепатита (NASH) и фиброза печени. 2 н. и 38 з.п. ф-лы, 1 табл., 10 ил., 3 пр.

1. Применение антитела к рецептору активина II типа (ActRII) или его антигенсвязывающего фрагмента для лечения заболевания или нарушения со стороны печени у субъекта, нуждающегося в этом, где заболевание или нарушение со стороны печени выбрано из неалкогольной жировой болезни печени (NAFLD), неалкогольного стеатогепатита (NASH) и фиброза печени, и где антитело к рецептору ActRII или его антигенсвязывающий фрагмент содержит вариабельный домен тяжелой цепи (VH) CDR1 с последовательностью SEQ ID NO: 1; VH CDR2 с последовательностью SEQ ID NO: 2; VH CDR3 с последовательностью SEQ ID NO: 3; вариабельный домен легкой цепи (VL) CDR1 с последовательностью SEQ ID NO: 4; VL CDR2 с последовательностью SEQ ID NO: 5; и VL CDR3 с последовательностью SEQ ID NO: 6.

2. Применение по п. 1, где у указанного субъекта имеется по меньшей мере одно состояние, выбранное из стеатоза печени, лобулярного воспаления и баллонной дистрофии клеток печени.

3. Применение по п. 1 или 2, где указанное лечение уменьшает жировую фракцию печени у указанного субъекта по сравнению с жировой фракцией печени у указанного субъекта, имеющейся до лечения.

4. Применение по любому из пп. 1-3, где указанное лечение снижает показатель активности NAFLD (NAS) на по меньшей мере 1 балл, на по меньшей мере 2 балла или на по меньшей мере 3 балла.

5. Применение по любому из пп. 1-4, где указанное лечение снижает по меньшей мере одно из гепатостеатоза, воспаления печени и баллонной дистрофии клеток печени на по меньшей мере 1 балл по шкале NAS.

6. Применение по любому из пп. 1-5, где указанный субъект является субъектом с сахарным диабетом, субъектом с ожирением или субъектом с метаболическим синдромом или другим метаболическим нарушением.

7. Применение по любому из пп. 1-6, где у указанного субъекта имеется сахарный диабет 2 типа.

8. Применение по любому из пп. 1-7, где указанный субъект параллельно получает средство стандартного лечения сахарного диабета 2 типа.

9. Применение по п. 8, где средство стандартного лечения выбрано из метформина, ингибитора DPP4, метформина/ингибитора DPP4, сульфонилмочевин, тиазолидиндионов, агонистов рецептора GLP-1, ингибиторов SGLT2, средства инсулинотерапии.

10. Применение по любому из пп. 1-9, где антитело к рецептору ActRII или его антигенсвязывающий фрагмент представляет собой антагонист ActRIIA и/или ActRIIB.

11. Применение по п. 10, где

a) антитело к рецептору ActRII содержит домен HC, содержащий SEQ ID NO:8 или последовательность с 95% идентичностью с ним;

b) антитело к рецептору ActRII, содержит домен LC, содержащий SEQ ID NO:7 или последовательность с 95% идентичностью с ним;

c) антитело к рецептору ActRII содержит домен HC, содержащий SEQ ID NO:8 или последовательность с 95% идентичностью с ним, и домен LC, содержащий SEQ ID NO:7 или последовательность с 95% идентичностью с ним;

d) антитело к рецептору ActRII содержит VL-домен, содержащий SEQ ID NO:9,

e) антитело к рецептору ActRII содержит VH-домен, содержащий SEQ ID NO:10, или

f) антитело к рецептору ActRII содержит VL-домен, содержащий SEQ ID NO:9, и VH-домен, содержащий SEQ ID NO:10.

12. Применение по любому из предыдущих пунктов, где антитело к рецептору ActRII или его антигенсвязывающий фрагмент представляет собой бимагрумаб.

13. Применение по п. 12, включающий введение от приблизительно 3 мг/кг до приблизительно 10 мг/кг бимагрумаба указанному субъекту.

14. Применение по п. 12, включающий введение приблизительно 10 мг/кг бимагрумаба указанному субъекту .

15. Применение по любому из пп. 12-14, где бимагрумаб вводят каждые 4 недели.

16. Применение по любому из пп. 12-14, где бимагрумаб вводят каждые 4 недели в течение по меньшей мере 3 месяцев, по меньшей мере 6 месяцев, по меньшей мере 9 месяцев или по меньшей мере 12 месяцев.

17. Применение по любому из пп. 1-16, включающий введение по меньшей мере одного дополнительного терапевтического средства.

18. Применение по п. 17, включающий введение антитела к ActRII или его антигенсвязывающего фрагмента в комбинации с по меньшей мере одним дополнительным терапевтическим средством для лечения или предупреждения заболевания печени.

19. Применение по п. 18, где по меньшей мере одно дополнительное терапевтическое средство представляет собой агонист FXR, ингибитор стероил-КоА-десатуразы-1, агонист THR-β, ингибитор галектина-2, агонист PPAR, агонист GLP-1, агонист FGF, ингибиторы пируватсинтазы, ингибитор регулирующей апоптотические сигналы киназы 1, ингибитор ацетил-КоА-карбоксилазы, агонист FXR, ингибитор CCR, тиазолидиндион, ингибитор натрий-глюкозного котранспортера 2 и 1 типов, ингибитор DPP-4 или любую их комбинацию.

20. Применение по п. 19, где агонист FXR выбран из тропифексора, нидуфексора, обетихолевой кислоты, цилофексора, TERN-101, EYP001, EDP-305, AKN-083, INT-787, INT-767, AGN-242256 и MET409; ингибитор стероил-КоА-десатуразы-1 представляет собой арахидиламидохолановую кислоту; агонист THR-β выбран из MGL-3196, VK-2809 и MGL-3745; ингибитор галектина-2 представляет собой GR-MD-02; агонист PPAR выбран из сароглитазара, селаделпара, элафибранора, ланифибранора, лобеглитазона, IVA337 и CER-002; агонист GLP-1 выбран из эксенатида, лираглутида, семаглутида, NC-101, G-49, ZP2929 и PB-718; агонист FGF выбран из пегбельфермина, BMS-986171, NGM-282, NGM-313, YH25724 и тирзепатида; ингибитор пируватсинтазы представляет собой нитазоксанид; ингибитор регулирующей апоптические сигналы киназы 1 выбран из селенсертиба и GS-444217; ингибитор ацетил-КоА-карбоксилазы выбран из фирсокостата, PF-05221304 и гемкабена; агонист FXR выбран из M480, NTX-023-1 и INV-33; ингибитор CCR выбран из AD-114, бертилимумаба, CM-101, CCX-872 и ценикривирока; тиазолидиндион выбран из MSDC-0602K и пиоглитазона; ингибитор натрий-глюкозного котранспортера-2 и 1 типов выбран из ремоглифлозина, лусеоглифлозина и дапаглифлозина; или ингибитор ДПП-4 выбран из ситаглиптина, саксаглиптина, вилдаглиптина, линаглиптина, эвоглиптина, гемиглиптина, анаглиптина, тенелиглиптина, алоглиптина, трелаглиптина, омариглиптина, госоглиптина и дутоглиптиона.

21. Применение антитела к рецептору активина II типа (ActRII) или его антигенсвязывающего фрагмента для изготовления лекарственного препарата для лечения заболевания или нарушения со стороны печени у субъекта, нуждающегося в этом, где заболевание или нарушение со стороны печени выбрано из неалкогольной жировой болезни печени (NAFLD), неалкогольного стеатогепатита (NASH) и фиброза печени, и где антитело к рецептору ActRII или его антигенсвязывающий фрагмент содержит вариабельный домен тяжелой цепи (VH) CDR1 с последовательностью SEQ ID NO: 1; VH CDR2 с последовательностью SEQ ID NO: 2; VH CDR3 с последовательностью SEQ ID NO: 3; вариабельный домен легкой цепи (VL) CDR1 с последовательностью SEQ ID NO: 4; VL CDR2 с последовательностью SEQ ID NO: 5; и VL CDR3 с последовательностью SEQ ID NO: 6.

22. Применение по п. 21, где у указанного субъекта имеется по меньшей мере одно состояние, выбранное из стеатоза печени, лобулярного воспаления и баллонной дистрофии клеток печени.

23. Применение по п. 21 или 22, где указанное лечение уменьшает жировую фракцию печени у указанного субъекта по сравнению с жировой фракцией печени у указанного субъекта, имеющейся до лечения.

24. Применение по любому из пп. 21-23, где указанное лечение снижает показатель активности NAFLD (NAS) на по меньшей мере 1 балл, на по меньшей мере 2 балла или на по меньшей мере 3 балла.

25. Применение по любому из пп. 21-24, где указанное лечение снижает по меньшей мере одно из гепатостеатоза, воспаления печени и баллонной дистрофии клеток печени на по меньшей мере 1 балл по шкале NAS.

26. Применение по любому из пп. 21-25, где указанный субъект является субъектом с сахарным диабетом, субъектом с ожирением или субъектом с метаболическим синдромом или другим метаболическим нарушением.

27. Применение по любому из пп. 21-26, где у указанного субъекта имеется сахарный диабет 2 типа.

28. Применение по любому из пп. 21-27, где указанный субъект параллельно получает средство стандартного лечения сахарного диабета 2 типа.

29. Применение по п. 28, где средство стандартного лечения выбрано из метформина, ингибитора DPP4, метформина/ингибитора DPP4, сульфонилмочевин, тиазолидиндионов, агонистов рецептора GLP-1, ингибиторов SGLT2, средства инсулинотерапии.

30. Применение по любому из пп. 21-29, где антитело к рецептору ActRII или его антигенсвязывающий фрагмент представляет собой антагонист ActRIIA и/или ActRIIB.

31. Применение по п. 30, где

a) антитело к рецептору ActRII содержит домен HC, содержащий SEQ ID NO:8 или последовательность с 95% идентичностью с ним;

b) антитело к рецептору ActRII, содержит домен LC, содержащий SEQ ID NO:7 или последовательность с 95% идентичностью с ним;

c) антитело к рецептору ActRII содержит домен HC, содержащий SEQ ID NO:8 или последовательность с 95% идентичностью с ним, и домен LC, содержащий SEQ ID NO:7 или последовательность с 95% идентичностью с ним;

d) антитело к рецептору ActRII содержит VL-домен, содержащий SEQ ID NO:9,

e) антитело к рецептору ActRII содержит VH-домен, содержащий SEQ ID NO:10, или

f) антитело к рецептору ActRII содержит VL-домен, содержащий SEQ ID NO:9, и VH-домен, содержащий SEQ ID NO:10.

32. Применение по любому из предыдущих пунктов, где антитело к рецептору ActRII или его антигенсвязывающий фрагмент представляет собой бимагрумаб.

33. Применение по п. 32, включающий введение от приблизительно 3 мг/кг до приблизительно 10 мг/кг бимагрумаба указанному субъекту .

34. Применение по п. 32, включающий введение приблизительно 10 мг/кг бимагрумаба указанному субъекту .

35. Применение по любому из пп. 32-34, где бимагрумаб вводят каждые 4 недели.

36. Применение по любому из пп. 32-34, где бимагрумаб вводят каждые 4 недели в течение по меньшей мере 3 месяцев, по меньшей мере 6 месяцев, по меньшей мере 9 месяцев или по меньшей мере 12 месяцев.

37. Применение по любому из пп. 21-36, включающий введение по меньшей мере одного дополнительного терапевтического средства.

38. Применение по п. 37, включающий введение антитела к ActRII или его антигенсвязывающего фрагмента в комбинации с по меньшей мере одним дополнительным терапевтическим средством для лечения или предупреждения заболевания печени.

39. Применение по п. 38, где по меньшей мере одно дополнительное терапевтическое средство представляет собой агонист FXR, ингибитор стероил-КоА-десатуразы-1, агонист THR-β, ингибитор галектина-2, агонист PPAR, агонист GLP-1, агонист FGF, ингибиторы пируватсинтазы, ингибитор регулирующей апоптотические сигналы киназы 1, ингибитор ацетил-КоА-карбоксилазы, агонист FXR, ингибитор CCR, тиазолидиндион, ингибитор натрий-глюкозного котранспортера 2 и 1 типов, ингибитор DPP-4 или любую их комбинацию.

40. Применение по п. 39, где агонист FXR выбран из тропифексора, нидуфексора, обетихолевой кислоты, цилофексора, TERN-101, EYP001, EDP-305, AKN-083, INT-787, INT-767, AGN-242256 и MET409; ингибитор стероил-КоА-десатуразы-1 представляет собой арахидиламидохолановую кислоту; агонист THR-β выбран из MGL-3196, VK-2809 и MGL-3745; ингибитор галектина-2 представляет собой GR-MD-02; агонист PPAR выбран из сароглитазара, селаделпара, элафибранора, ланифибранора, лобеглитазона, IVA337 и CER-002; агонист GLP-1 выбран из эксенатида, лираглутида, семаглутида, NC-101, G-49, ZP2929 и PB-718; агонист FGF выбран из пегбельфермина, BMS-986171, NGM-282, NGM-313, YH25724 и тирзепатида; ингибитор пируватсинтазы представляет собой нитазоксанид; ингибитор регулирующей апоптические сигналы киназы 1 выбран из селенсертиба и GS-444217; ингибитор ацетил-КоА-карбоксилазы выбран из фирсокостата, PF-05221304 и гемкабена; агонист FXR выбран из M480, NTX-023-1 и INV-33; ингибитор CCR выбран из AD-114, бертилимумаба, CM-101, CCX-872 и ценикривирока; тиазолидиндион выбран из MSDC-0602K и пиоглитазона; ингибитор натрий-глюкозного котранспортера-2 и 1 типов выбран из ремоглифлозина, лусеоглифлозина и дапаглифлозина; или ингибитор ДПП-4 выбран из ситаглиптина, саксаглиптина, вилдаглиптина, линаглиптина, эвоглиптина, гемиглиптина, анаглиптина, тенелиглиптина, алоглиптина, трелаглиптина, омариглиптина, госоглиптина и дутоглиптиона.