Область, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение относится к композициям аналогов амилина и их применению, например, в лечении ожирения и метаболических расстройств, таких как диабет. В частности, настоящее изобретение относится к стабильным водным жидким композициям аналогов амилина.
Предпосылки создания изобретения
Амилин является одним из семейства пептидных гормонов, которое включает амилин, кальцитонин, кальцитонин-ген-родственный пептид, адреномедуллин и интермедин (интермедин также известен как AFP-6), и связан с различными метаболическими заболеваниями и расстройствами. Человеческий амилин был впервые выделен, очищен и охарактеризован как основной компонент амилоидных отложений в островках поджелудочной железы у пациентов с диабетом 2 типа.
Природный человеческий амилин представляет собой состоящий из 37 аминокислот пептид, имеющий формулу
H-KC()NTATC()ATQRLANFLVHSSNNFGAILSSTNVGSNTY-NH2 ,
где H- на N-конце означает атом водорода, соответствующий присутствию свободной аминогруппы на N-концевом аминокислотном остатке [т.е. лизиновом (K) остатке в положении номер 1 в последовательности, показанной выше]; где -NH2 на C-конце указывает на то, что C-концевая карбоксильная группа находится в амидной форме; и где скобки “()”, связанные с двумя цистеиновыми (C, Cys) остатками в положениях 2 и 7 последовательности, указывают на присутствие внутримолекулярного дисульфидного мостика между указанными двумя Cys остатками.
Амилин может быть полезным для лечения метаболических расстройств, таких как диабет и/или ожирение. Считается, что амилин регулирует опорожнение желудка и подавляет секрецию глюкагона и потребление пищи, тем самым регулируя скорость высвобождения глюкозы в кровоток. Амилин, по-видимому, дополняет действие инсулина. По сравнению со здоровыми взрослыми у пациентов с диабетом 1 типа отсутствует циркулирующий в крови амилин, а у пациентов с диабетом 2 типа наблюдаются пониженные концентрации амилина после приема пищи. В испытаниях на людях было показано, что аналог амилина, известный как прамлинтид, описанный в WO 93/10146 и имеющий последовательность Lys-Cys-Asn-Thr-Ala-Thr-Cys-Ala-Thr-Gln-Arg-Leu-Ala-Asn-Phe-Leu-Val-His-Ser-Ser-Asn-Asn-Phe-Gly-Pro-Ile-Leu-Pro-Pro-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Asn-Thr-Tyr, который также обладает дисульфидным мостиком между Cys остатками в положениях 2 и 7, снижает массу тела или снижает прибавку массы тела.
Альтернативный аналог амилина, включающий N-метилированные остатки и имеющий пониженную склонность к фибриллообразованию, обозначенный как IAPP-GI, был описан Yan et al. (PNAS, 103(7), 2046-2051, 2006; Angew. Chem. Int. Ed. 2013, 52, 10378-10383; WO2006/042745). Однако IAPP-GI, по-видимому, имеет более низкую активность, чем нативный амилин.
В WO 2018/046719 описаны аналоги амилина, имеющие, среди прочего, лактамный мостик вместо дисульфидного мостика, N-метилированные остатки и делецию, соответствующую остаткам Asn21 и Asn22 нативного человеческого амилина. Такие аналоги имеют значительно меньшую тенденцию к фибриллообразованию, чем нативный амилин, но при этом обладают более высокой эффективностью по сравнению с аналогами, описанными Yan et al. (см. выше). Обычно они пригодны для получения композиций при физиологическом pH или близком к нему. Однако существует потребность в разработке улучшенных композиций этих аналогов, особенно в обеспечении стабильных композиций, которые могут долго храниться без чрезмерной фибриллизации или деградации активной мономерной формы пептида.
Сущность изобретения
В широком смысле изобретение основано на исследованиях, описанных в примерах, которые привели к удивительным открытиям, касающимся водных композиций аналога амилина, которые особенно подходят для длительного хранения. В частности, было обнаружено, что низкая концентрация буфера и определенный диапазон pH неожиданно оказались важными для оптимальной стабильности.
Изобретение обеспечивает стабильную водную жидкую фармацевтическую композицию, включающую аналог амилина, который представляет собой
[19CD]-isoGlu-RD()GTATK()ATERLA-Aad-FLQRSSF-Gly(Me)-A-Ile(Me)-LSSTEVGSNT-Hyp-NH2
или его фармацевтически приемлемую соль и/или производное;
при этом композиция включает:
(a) аналог амилина в концентрации от около 0,4 мг/мл до около 25 мг/мл; и
(b) буфер в концентрации от около 0,5 мМ до около 25 мМ;
где композиция имеет pH от около 5,8 до около 6,9.
Аналог амилина присутствует в концентрации от около 0,4 мг/мл до около 25 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления аналог амилина присутствует в концентрации по меньшей мере около 0,4 мг/мл, по меньшей мере около 0,5 мг/мл, по меньшей мере около 0,6 мг/мл, по меньшей мере около 1,2 мг/мл или по меньшей мере около 2,5 мг/мл.
Аналог амилина может присутствовать в концентрации до около 25 мг/мл, до около 20 мг/мл, до около 15 мг/мл или до около 10 мг/мл.
Аналог амилина может присутствовать в концентрации от около 3 мг/мл до около 12 мг/мл, например от около 3 мг/мл до около 7 мг/мл или от около 8 мг/мл до около 12 мг/мл, например около 5 мг/мл или около 10 мг/мл.
Можно использовать любой подходящий буфер, включая фосфатный буфер, гистидиновый буфер, TRIS буфер, ацетатный буфер, аргининовый буфер, цитратный буфер, бикарбонатный буфер, диэтаноламиновый буфер, лизиновый буфер, TAPS буфер, сукцинатный буфер, малатный буфер и α-кетоглутаратный буфер. Особенно предпочтительные буферы включают фосфатный буфер, гистидиновый буфер, цитратный буфер и TRIS буфер, особенно фосфатный буфер и гистидиновый буфер.
К удивлению, было обнаружено, что стабильность повышалась при относительно низких концентрациях буфера. Таким образом, буфер присутствует в концентрации от около 0,5 мМ до около 25 мМ.
Буфер может присутствовать в концентрации от около 0,5 мМ до около 20 мМ, например от около 0,5 мМ до около 15 мМ, например от около 1 мМ до около 15 мМ, например от около 1 мМ до около 12 мМ. Например, он может присутствовать в концентрации от около 3 мМ до около 7 мМ или от около 8 мМ до около 12 мМ, например около 5 мМ или около 10 мМ, особенно (но не исключительно) когда буфер является фосфатным, гистидиновым или цитратным.
Что касается TRIS буфера, предпочтительно, чтобы он присутствовал в концентрации от около 15 мМ до около 25 мМ, например от около 17 мМ до около 23 мМ, например около 20 мМ, поскольку буферная способность TRIS ниже, чем у других буферов, таких как (например) фосфатный и гистидиновый, в соответствующем диапазоне pH.
Также было обнаружено, что для стабильности важное значение имеет pH композиции. Соединения, описанные в WO 2018/046719, считались стабильными при физиологическом pH (например, около pH 7,4), но, к удивлению, было обнаружено, что химическая стабильность повышалась при более низких значениях pH, а физическая стабильность сохранялась. Таким образом, композиция имеет pH от около 5,8 до около 6,9 и, например, может иметь pH от около 6,2 до около 6,8, например от около 6,4 до около 6,6, например около 6,5.
Стабильная водная жидкая композиция может включать модификатор тоничности. Модификатор тоничности может быть ионным или неионным. Подходящие ионные модификаторы тоничности включают соли щелочных металлов (например, галогениды) и соли щелочно-земельных металлов (например, галогениды), такие как NaCl, NaBr, NaI, KCl, KBr, KI, LiCl, CaCl2 и Na2SO4. Неионные модификаторы тоничности включают маннит (например, D-маннит), пропиленгликоль, сахарозу, глицерин, сорбит и трегалозу.
В некоторых вариантах осуществления предпочтительными в качестве модификаторов тоничности могут быть маннит (например, D-маннит), пропиленгликоль и NaCl, особенно маннит и пропиленгликоль.
Водная жидкая композиция обычно является стабильной в течение по меньшей мере 6 месяцев, например по меньшей мере 12 месяцев, по меньшей мере 18 месяцев или по меньшей мере 24 месяцев, при 2-8°C (например, при 5°C). Предпочтительно она стабильна в течение по меньшей мере 18 месяцев, например по меньшей мере 24 месяцев, при 2-8°C (например, при 5°C).
Например, композиция может демонстрировать по существу отсутствие каких-либо изменений, указывающих на пониженную физическую стабильность (например, на что указывает мутность раствора или агрегация, фибриллизация или желатинизация аналога амилина) после ее хранения при 2-8°C (например, при 5°C) в течение по меньшей мере 6 месяцев, по меньшей мере 12 месяцев, по меньшей мере 18 месяцев или по меньшей мере 24 месяцев. Предпочтительно композиция демонстрирует по существу отсутствие таких изменений после ее хранения при 2-8°C (например, при 5°C) в течение по меньшей мере 18 месяцев, например по меньшей мере 24 месяцев. Должно быть понятно, что условия ускоренного старения также можно использовать в качестве косвенного показателя для оценки физической стабильности в течение более длительного периода времени, как более подробно описано ниже.
Дополнительно, или альтернативно, по меньшей мере 80%, более предпочтительно по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 96%, по меньшей мере 97%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99% аналога амилина остается в интактной мономерной форме в композиции после ее хранения при 2-8°C (например, при 5°C) в течение по меньшей мере 6 месяцев, по меньшей мере 12 месяцев, по меньшей мере 18 месяцев или по меньшей мере 24 месяцев. Предпочтительно по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 96%, по меньшей мере 97%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99% аналога амилина остается в интактной мономерной форме после хранения при 2-8°C (например, при 5°C) в течение по меньшей мере 6 месяцев, по меньшей мере 12 месяцев, по меньшей мере 18 месяцев или по меньшей мере 24 месяцев. Более предпочтительно по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 96%, по меньшей мере 97%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99% аналога амилина остается в интактной мономерной форме в композиции после ее хранения при 2-8°C (например, при 5°C) в течение по меньшей мере 18 месяцев, например, по меньшей мере 24 месяцев.
Композиция может также включать консервант, особенно когда она обеспечивается в формате для многократного использования. Альтернативно, и особенно когда она обеспечивается формате для однократного использования, композиция может не содержать никакого или по существу никакого консерванта.
Стабильную водную жидкую композицию по изобретению формулируют для парентерального введения, и, в частности, ее можно сформулировать для введения субъекту путем инъекции, например подкожной инъекции.
В соответствии с обычной фармацевтической практикой композиции по настоящему изобретению являются стерильными и/или не содержат (или по существу не содержат, например содержат не более чем около 100 ч/млн) восстановителя.
Индивидуальная доза композиции по изобретению может быть представлена в любом подходящем объеме. Например, индивидуальная доза может иметь объем 0,1-1,5 мл, например 0,3-1,5 мл, например от 0,3 мл до 1 мл. Примеры конкретных объемов индивидуальных доз включают 0,5 мл и 1 мл (например, 1,0 мл). Индивидуальные дозы могут быть упакованы отдельно для разового использования, например в отдельные флаконы, картриджи или шприцы, как описано более подробно ниже.
В качестве иллюстрации, некоторые конкретные композиции могут включать или состоять из следующих компонентов:
Аналог амилина в концентрации около 0,8 мг/мл, фосфатный буфер в концентрации около 5 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 1,2 мг/мл, фосфатный буфер в концентрации около 5 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 2,4 мг/мл, фосфатный буфер в концентрации около 5 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 4,8 мг/мл, фосфатный буфер в концентрации около 5 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 6,0 мг/мл, фосфатный буфер в концентрации около 5 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 9,0 мг/мл, фосфатный буфер в концентрации около 5 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 18 мг/мл, фосфатный буфер в концентрации около 5 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 0,8 мг/мл, фосфатный буфер в концентрации около 10 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 1,2 мг/мл, фосфатный буфер в концентрации около 10 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 2,4 мг/мл, фосфатный буфер в концентрации около 10 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 4,8 мг/мл, фосфатный буфер в концентрации около 10 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 6,0 мг/мл, фосфатный буфер в концентрации около 10 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 9,0 мг/мл, фосфатный буфер в концентрации около 10 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 18 мг/мл, фосфатный буфер в концентрации около 10 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5.
Аналог амилина в концентрации около 0,8 мг/мл, гистидиновый буфер в концентрации около 5 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 1,2 мг/мл, гистидиновый буфер в концентрации около 5 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 2,4 мг/мл, гистидиновый буфер в концентрации около 5 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 4,8 мг/мл, гистидиновый буфер в концентрации около 5 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 6,0 мг/мл, гистидиновый буфер в концентрации около 5 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 9,0 мг/мл, гистидиновый буфер в концентрации около 5 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 18 мг/мл, гистидиновый буфер в концентрации около 5 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 0,8 мг/мл, гистидиновый буфер в концентрации около 10 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 1,2 мг/мл, гистидиновый буфер в концентрации около 10 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 2,4 мг/мл, гистидиновый буфер в концентрации около 10 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 4,8 мг/мл, гистидиновый буфер в концентрации около 10 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 6,0 мг/мл, гистидиновый буфер в концентрации около 10 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 9,0 мг/мл, гистидиновый буфер в концентрации около 10 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 18 мг/мл, гистидиновый буфер в концентрации около 10 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5.
Аналог амилина в концентрации около 0,8 мг/мл, цитратный буфер в концентрации около 5 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 1,2 мг/мл, цитратный буфер в концентрации около 5 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 2,4 мг/мл, цитратный буфер в концентрации около 5 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 4,8 мг/мл, цитратный буфер в концентрации около 5 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 6,0 мг/мл, цитратный буфер в концентрации около 5 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 9,0 мг/мл, цитратный буфер в концентрации около 5 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 18 мг/мл, цитратный буфер в концентрации около 5 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 0,8 мг/мл, цитратный буфер в концентрации около 10 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 1,2 мг/мл, цитратный буфер в концентрации около 10 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 2,4 мг/мл, цитратный буфер в концентрации около 10 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 4,8 мг/мл, цитратный буфер в концентрации около 10 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 6,0 мг/мл, цитратный буфер в концентрации около 10 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 9,0 мг/мл, цитратный буфер в концентрации около 10 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 18 мг/мл, цитратный буфер в концентрации около 10 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5.
Эти композиции могут быть особенно подходящими для объема дозирования 0,5 мл, хотя должно быть понятно, что их можно использовать для других объемов дозирования. Альтернативно, концентрацию аналога амилина можно отрегулировать для другого объема дозирования.
Кроме того, некоторые конкретные композиции могут включать или состоять из следующих компонентов:
Аналог амилина в концентрации около 0,4 мг/мл, фосфатный буфер в концентрации около 5 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 0,6 мг/мл, фосфатный буфер в концентрации около 5 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 1,2 мг/мл, фосфатный буфер в концентрации около 5 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 2,4 мг/мл, фосфатный буфер в концентрации около 5 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 4,5 мг/мл, фосфатный буфер в концентрации около 5 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 9 мг/мл, фосфатный буфер в концентрации около 5 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 0,4 мг/мл, фосфатный буфер в концентрации около 10 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 0,6 мг/мл, фосфатный буфер в концентрации около 10 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 1,2 мг/мл, фосфатный буфер в концентрации около 10 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 2,4 мг/мл, фосфатный буфер в концентрации около 10 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 4,5 мг/мл, фосфатный буфер в концентрации около 10 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 9 мг/мл, фосфатный буфер в концентрации около 10 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5.
Аналог амилина в концентрации около 0,4 мг/мл, гистидиновый буфер в концентрации около 5 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 0,6 мг/мл, гистидиновый буфер в концентрации около 5 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 1,2 мг/мл, гистидиновый буфер в концентрации около 5 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 2,4 мг/мл, гистидиновый буфер в концентрации около 5 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 4,5 мг/мл, гистидиновый буфер в концентрации около 5 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 9 мг/мл, гистидиновый буфер в концентрации около 5 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 0,4 мг/мл, гистидиновый буфер в концентрации около 10 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 0,6 мг/мл, гистидиновый буфер в концентрации около 10 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 1,2 мг/мл, гистидиновый буфер в концентрации около 10 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 2,4 мг/мл, гистидиновый буфер в концентрации около 10 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 4,5 мг/мл, гистидиновый буфер в концентрации около 10 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 9 мг/мл, гистидиновый буфер в концентрации около 10 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5.
Аналог амилина в концентрации около 0,4 мг/мл, цитратный буфер в концентрации около 5 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 0,6 мг/мл, цитратный буфер в концентрации около 5 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 1,2 мг/мл, цитратный буфер в концентрации около 5 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 2,4 мг/мл, цитратный буфер в концентрации около 5 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 4,5 мг/мл, цитратный буфер в концентрации около 5 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 9 мг/мл, цитратный буфер в концентрации около 5 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 0,4 мг/мл, цитратный буфер в концентрации около 10 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 0,6 мг/мл, цитратный буфер в концентрации около 10 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 1,2 мг/мл, цитратный буфер в концентрации около 10 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 2,4 мг/мл, цитратный буфер в концентрации около 10 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 4,5 мг/мл, цитратный буфер в концентрации около 10 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5;
Аналог амилина в концентрации около 9 мг/мл, цитратный буфер в концентрации около 10 мМ и маннит в концентрации около 250-260 мМ; pH 6,5.
Эти композиции могут быть особенно подходящими для объема дозирования 1,0 мл, хотя должно быть понятно, что их можно использовать для других объемов дозирования. Альтернативно, концентрацию аналога амилина можно отрегулировать для другого объема дозирования.
В этих композициях, как и где-либо еще, аналог амилина может быть представлен в виде хлоридной соли, например, имеющей формулу
([19CD]-isoGlu-RD()GTATK()ATERLA-Aad-FLQRSSF-Gly(Me)-A-Ile(Me)-LSSTEVGSNT-Hyp-NH2), x(Cl) ,
где x имеет значение 1,0-2,0.
Изобретение также обеспечивает контейнер или средство доставки, содержащее стабильную водную жидкую композицию, описанную в настоящей заявке. В качестве примера, подходящие контейнеры и средства доставки включают герметичный флакон, предварительно заполненный шприц или картридж для инъекционного устройства, такого как шприц-ручка, автоинъектор с регулируемой дозой, одноразовый автоинъектор, носимый инъектор или инфузионный насос. Устройство доставки может быть одноразовым устройством, таким как предварительно заполненный шприц.
В другом аспекте настоящее изобретение обеспечивает изделие или набор, включающий контейнер, содержащий стабильную водную жидкую фармацевтическую композицию по изобретению.
Настоящее изобретение также обеспечивает стабильную водную жидкую композицию, описанную выше, для применения в способе медицинского лечения.
Композиции полезны, среди прочего, для уменьшения потребления пищи, способствования снижению массы тела и ингибирования или уменьшения прибавки массы тела. Как результат, их можно использовать для лечения множества состояний, заболеваний или расстройств у субъекта, включая, но не ограничиваясь этим, ожирение и различные связанные с ожирением состояния, заболевания или расстройства, такие как диабет (например, диабет 2 типа), гипертензия, дислипидемия, апноэ во сне и сердечно-сосудистые заболевания. Субъект может страдать ожирением, сопровождаемым по меньшей мере одним сопутствующим заболеванием, связанным с весом, таким как диабет (например, диабет 2 типа), гипертензия, дислипидемия, апноэ во сне и сердечно-сосудистое заболевание. Таким образом, должно быть понятно, что композиции можно вводить субъектам, страдающим состояниями, характеризующимися неадекватным контролем аппетита, или же перееданием, такими как компульсивное переедание и синдром Прадера-Вилли. Должно быть понятно, что композиции можно использовать для лечения комбинаций описанных состояний.
Таким образом, изобретение обеспечивает композицию по изобретению для применения в способе лечения, ингибирования или снижения прибавки массы тела, промотирования снижения массы тела и/или снижения избыточной массы тела. Лечение может достигаться, например, путем контроля аппетита, питания, приема пищи, потребления калорий и/или расхода энергии.
Изобретение также обеспечивает композицию по изобретению для применения в способе лечения ожирения, а также связанных с ним заболеваний, расстройств и состояний здоровья, включая, но не ограничиваясь этим, патологическое ожирение, ожирение перед хирургическим вмешательством, связанное с ожирением воспаление, связанное с ожирением заболевание желчного пузыря и индуцированные ожирением апноэ во сне и проблемы с дыханием, дегенерацию хряща, остеоартрит и осложнения репродуктивного здоровья, связанные с ожирением или избыточным весом, такие как бесплодие. Субъект может страдать ожирением, сопровождаемым по меньшей мере одним сопутствующим заболеванием, связанным с массой тела, таким как диабет (например, диабет 2 типа), гипертензия, дислипидемия, апноэ во сне и сердечно-сосудистые заболевания.
Изобретение также обеспечивает композицию по изобретению для применения в способе профилактики или лечения болезни Альцгеймера, диабета, диабета 1 типа, диабета 2 типа, преддиабета, синдрома инсулинорезистентности, нарушения толерантности к глюкозе (IGT), болезненных состояний, связанных с повышенным уровнем глюкозы в крови, метаболического заболевания, включая метаболический синдром, гипергликемии, артериальной гипертензии, атерогенной дислипидемии, стеатоза печени («жировой болезни печени»; в том числе неалкогольной жировой болезни печени (NAFLD), которая в свою очередь включает неалкогольный стеатогепатит (NASH)), почечной недостаточности, артериосклероза (например, атеросклероза), макрососудистого заболевания, микрососудистого заболевания, диабетического заболевания сердца (включая диабетическую кардиомиопатию и сердечную недостаточность как осложнение диабета), ишемической болезни сердца, заболевания периферических артерий или инсульта и их комбинаций.
Изобретение также обеспечивает композицию по изобретению для применения в способе снижения уровней циркулирующих в крови ЛПНП и/или повышения отношения ЛПВП/ЛПНП.
Эффекты композиций в отношении этих состояний могут быть полностью или частично опосредованными через эффект на массу тела или могут быть независимыми от этого.
Изобретение также обеспечивает применение композиции по изобретению для получения лекарственного средства для лечения, ингибирования или уменьшения прибавки массы тела, промотирования снижения массы тела и/или уменьшения избыточной массы тела.
Изобретение также обеспечивает применение композиции по изобретению для получения лекарственного средства для лечения ожирения, а также связанных с ним заболеваний, расстройств и состояний здоровья, включая, но не ограничиваясь этим, патологическое ожирение, ожирение перед хирургическим вмешательством, связанное с ожирением воспаление, связанное с ожирением заболевание желчного пузыря и индуцированные ожирением апноэ во сне и проблемы с дыханием, дегенерацию хряща, остеоартрит и осложнения репродуктивного здоровья, связанные с ожирением или избыточным весом, такие как бесплодие. Субъект может страдать ожирением, сопровождаемым по меньшей мере одним сопутствующим заболеванием, связанным с массой тела, таким как диабет (например, диабет 2 типа), гипертензия, дислипидемия, апноэ во сне и сердечно-сосудистое заболевание.
Изобретение также обеспечивает применение композиции по изобретению для получения лекарственного средства для профилактики или лечения болезни Альцгеймера, диабета, диабета 1 типа, диабета 2 типа, преддиабета, синдрома инсулинорезистентности, нарушения толерантности к глюкозе (IGT), болезненных состояний, связанных с повышенным уровнем глюкозы в крови, метаболического заболевания, включая метаболический синдром, гипергликемии, гипертензии, атерогенной дислипидемии, стеатоза печени («жировой болезни печени»; в том числе неалкогольной жировой болезни печени (NAFLD), которая в свою очередь включает неалкогольный стеатогепатит (NASH)), почечной недостаточности, артериосклероза (например, атеросклероза), макрососудистого заболевания, микрососудистого заболевания, диабетического заболевания сердца (включая диабетическую кардиомиопатию и сердечную недостаточность как осложнение диабета), ишемической болезни сердца, заболевания периферических артерий или инсульта и их комбинаций.
Изобретение также обеспечивает применение композиции по изобретению для получения лекарственного средства для снижения уровней циркулирующих в крови ЛПНП и/или повышение отношения ЛПВП/ЛПНП.
Изобретение также обеспечивает способ лечения, ингибирования или уменьшения прибавки массы тела, промотирования снижения массы тела и/или уменьшения избыточной массы тела у субъекта, включающий введение субъекту терапевтически эффективного количества композиции по изобретению.
Изобретение также обеспечивает способ лечения ожирения, а также связанных с ним заболеваний, расстройств и состояний здоровья у субъекта, включая, но не ограничиваясь этим, патологическое ожирение, ожирение перед хирургическим вмешательством, связанное с ожирением воспаление, связанное с ожирением заболевание желчного пузыря и индуцированные ожирением апноэ во сне и проблемы с дыханием, дегенерацию хряща, остеоартрит и осложнения репродуктивного здоровья, связанные с ожирением или избыточным весом, такие как бесплодие, включающий введение субъекту терапевтически эффективного количества композиции по изобретению. Субъект может страдать ожирением, сопровождаемым по меньшей мере одним сопутствующим заболеванием, связанным с массой тела, таким как диабет (например, диабет 2 типа), гипертензия, дислипидемия, апноэ во сне и сердечно-сосудистое заболевание.
Изобретение также обеспечивает способ профилактики или лечения болезни Альцгеймера, диабета, диабета 1 типа, диабета 2 типа, преддиабета, синдрома инсулинорезистентности, нарушения толерантности к глюкозе (IGT), болезненных состояний, связанных с повышенным уровнем глюкозы в крови, метаболического заболевания, включая метаболический синдром, гипергликемии, гипертензии, атерогенной дислипидемии, стеатоза печени («жировой болезни печени»; в том числе неалкогольной жировой болезни печени (NAFLD), которая в свою очередь включает неалкогольный стеатогепатит (NASH)), почечной недостаточности, артериосклероза (например, атеросклероза), макрососудистого заболевания, микрососудистого заболевания, диабетического заболевания сердца (включая диабетическую кардиомиопатию и сердечную недостаточность как осложнение диабета), ишемической болезни сердца, заболевания периферических артерий или инсульта и их комбинаций у субъекта, включающий введение субъекту терапевтически эффективного количества композиции по изобретению.
Изобретение также обеспечивает способ снижения уровней циркулирующих в крови ЛПНП и/или повышения отношения ЛПВП/ЛПНП у субъекта, включающий введение субъекту терапевтически эффективного количества композиции по изобретению.
Изобретение также обеспечивает применение композиции, описанной выше, в способе косметического (т.е. нетерапевтического) снижения массы тела.
Должно быть понятно, что ссылки на терапевтические применения композиции и способов, включающих введение композиции, в равной степени можно считать охватывающими применения и введение в косметических целях.
Изобретение также обеспечивает способ получения стабильной водной фармацевтической композиции, включающей аналог амилина, который представляет собой
[19CD]-isoGlu-RD()GTATK()ATERLA-Aad-FLQRSSF-Gly(Me)-A-Ile(Me)-LSSTEVGSNT-Hyp-NH2
или его фармацевтически приемлемую соль и/или производное;
при этом способ включает объединение
(a) аналога, соли или производного амилина при концентрации от около 0,4 мг/мл до около 25 мг/мл; и
(b) буфера при концентрации от около 0,5 мМ до около 25 мМ;
с получением стабильной водной жидкой композиции, где композиция имеет pH от около 5,8 до около 6,9.
Должно быть понятно, что способ может быть применим для любой из композиций по изобретению, описанному в настоящей заявке.
Таким образом, например, способ может также включать получение композиции аналога амилина и буфера с описанным модификатором тоничности.
Способ может включать стадию доведения pH до желаемого значения. Когда модификатор тоничности представляет собой хлоридную соль, например NaCl, может потребоваться доведение pH до желаемого значения перед добавлением модификатора тоничности к композиции. В частности, это может быть в случае, когда аналог амилина сам обеспечивается в форме хлоридной соли, поскольку присутствие хлорид-ионов выше определенного уровня может способствовать осаждению или фибриллизации аналога амилина при значениях pH около pI пептида (pI=4,36).
Также обеспечивается композиция, полученная описанным способом.
Если из контекста не следует иное, описания и определения характерных признаков, изложенных выше, не ограничиваются каким-либо конкретным аспектом или вариантом осуществления изобретения и равным образом относятся ко всем описанным аспектам и вариантам осуществления.
Во всех разделах описания настоящего изобретения термин “около” в отношении численного значения является необязательным и означает, например, +/-10%.
Подробное описание изобретения
В описании и формуле изобретения используются общепринятые однобуквенные и трехбуквенные обозначения природных аминокислот. Все аминокислоты находятся в L-конфигурации, если не указано иное.
Аналог амилина
Аналог амилина (Соединение 1; “CPD 1”), присутствующий в композициях по настоящему изобретению, описан в WO 2018/046719 и имеет формулу
[19CD]-isoGlu-RD()GTATK()ATERLA-Aad-FLQRSSF-Gly(Me)-A-Ile(Me)-LSSTEVGSNT-Hyp-NH2
Gly(Me): N-метилглицин [также известен как саркозин (Sar)]
Ile(Me): N-метилизолейцин
Aad: 2-аминоадипиновая кислота, например, (2S)-2-аминоадипиновая кислота [также (2S)-2-аминогександиовая кислота], также известна как гомоглутаминовая кислота
[19CD]-: 19-карбокси-нонадеканоил- .
Скобки “()”, показанные после символов для конкретных аминокислотных остатков, указывают остатки, боковые цепи которых задействованы во внутримолекулярном лактамовом мостике. Таким образом, соединение, являющееся аналогом амилина, присутствующее в композициях по изобретению, имеет внутримолекулярный лактамовый мостик, образованный между боковыми цепями остатков (аспарагиновой кислоты и лизина, соответственно), которые указаны в скобках.
Термин “isoGlu” используется для указания остатка глутаминовой кислоты, который вовлечен в связи через карбоксильную группу его боковой цепи и его альфа-аминогруппу. Он также может обозначаться как γ-Glu.
Таким образом, [19CD]-isoGlu- означает 19-карбокси-нонадеканоильную группу, ковалентно связанную с альфа-аминогруппой Glu линкера через амидную связь. Карбоксильная группа боковой цепи Glu линкера в свою очередь связана через амидную связь с альфа-аминогруппой основной цепи аргининового остатка на N-конце пептидной цепи аналога амилина.
Формула ниже иллюстрирует эту конфигурацию, включая боковую цепь и кислород карбонила N-концевого аргининового остатка
Должно быть понятно, что аналог амилина (активное вещество) также может быть представлен в форме соли или другого производного. Соли обычно представляют собой «фармацевтически приемлемые» соли, которые в контексте изобретения относятся к соли, которая не вредна для пациента или субъекта, подлежащего лечению. Такие соли обычно представляют собой кислотно-аддитивные соли или оснóвные соли. Кислотно-аддитивные соли включают соли неорганических кислот и соли органических кислот. Неограничивающие примеры подходящих кислотно-аддитивных солей включают гидрохлоридные соли, фосфатные соли, формиатные соли, ацетатные соли, трифторацетатные соли и цитратные соли. Примеры оснóвных солей включают соли, в которых катион выбран из ионов щелочных металлов, таких как натрий и калий, ионов щелочноземельных металлов, таких как кальций, а также замещенных аммоний-ионов, например типа NR(R’)3+, где R и R’ независимо обозначают необязательно замещенный C1-6алкил, необязательно замещенный C2-6алкенил, необязательно замещенный арил или необязательно замещенный гетероарил. Другие примеры фармацевтически приемлемых солей описаны в Remington’s Pharmaceutical Sciences, 17th edition. Ed. Alfonso R. Gennaro (Ed.), Mack Publishing Company, Easton, PA, U.S.A., 1985 и более поздних изданиях, а также в Encyclopaedia of Pharmaceutical Technology.
В частности, соль может представлять собой хлоридную соль. В некоторых вариантах осуществления аналог амилина может иметь формулу
([19CD]-isoGlu-RD()GTATK()ATERLA-Aad-FLQRSSF-Gly(Me)-A-Ile(Me)-LSSTEVGSNT-Hyp-NH2), x(Cl) ,
где x имеет значение 1,0-2,0.
Другие производные аналогов амилина включают координационные комплексы с ионами металлов, такими как Mn2+ и Zn2+, сложные эфиры, такие как гидролизуемые in vivo сложные эфиры, свободные кислоты или основания, гидраты, пролекарства или липиды. Сложные эфиры могут быть образованы между гидроксильными группами или группами карбоновой кислоты, присутствующими в соединении, и соответствующим карбоновокислотным или спиртовым партнером по реакции, с использованием методов, хорошо известных в данной области техники. Производные, которые в виде пролекарств могут быть преобразованы in vivo или in vitro в одно из исходных соединений. Обычно по меньшей мере одна из биологических активностей соединения будет снижена в пролекарственной форме соединения и может быть активирована путем преобразования пролекарства с высвобождением соединения или его метаболита. Примеры пролекарств включают использование защитных групп, которые могут быть удалены in situ с высвобождением активного соединения или которые служат для ингибирования клиренса лекарственного средства in vivo.
Аналог амилина является агонистом рецептора амилина и обладает агонистической активностью в отношении рецепторов hAMYR1, hAMYR2 и hAMYR3 (рецепторы амилина человека 1, 2 и 3), как описано в WO 2018/046719. Связывание с подходящим рецептором индуцирует внутриклеточную передачу сигналов, например, продукцию циклического АМФ. In vivo, аналог амилина обладает биологической активностью, такой как (помимо прочего) снижение потребления пищи, способствование снижению массы тела и/или ингибирование или уменьшение прибавки массы тела. Его можно использовать для различных терапевтических применений, как описано в других разделах данного описания и в WO 2018/046719.
Водная жидкая композиция
Предпочтительно композиции по настоящему изобретению по существу не содержат органический растворитель. В особенно предпочтительных вариантах осуществления вода является единственным растворителем, используемым для получения водной жидкой композиции.
Композиции по изобретению представляют собой водные жидкие композиции, т.е. композиции, включающие воду, в форме водного раствора. В контексте изобретения термин "водная композиция", как правило, относится к композиции, включающей по меньшей мере 50% по массе (50% масс/масс) воды в качестве растворителя, более предпочтительно по меньшей мере 75% масс/масс воды, более предпочтительно по меньшей мере 80% масс/масс воды, более предпочтительно по меньшей мере 85% масс/масс воды, более предпочтительно по меньшей мере 90% масс/масс воды, наиболее предпочтительно по меньшей мере 95% масс/масс воды. В некоторых вариантах осуществления водные композиции по настоящему изобретению по существу не содержат органических растворителей, таких как апротонные полярные растворители, например диметилсульфоксид (DMSO). В этом смысле “по существу” означает, что водные композиции включают менее чем 5% по объему органического растворителя, более предпочтительно менее чем 2% по объему (об/об) органического растворителя и еще более предпочтительно менее чем 1% по объему (об/об) органического растворителя. В предпочтительных вариантах осуществления не присутствует никакой органический растворитель. Таким образом, вода обычно является единственным растворителем, используемым для получения водных жидких композиций.
Компоненты и количества жидких композиций по настоящему изобретению выбирают так, чтобы обеспечить композицию с pH от около 5,8 до около 6,9, например с pH от около 6,2 до около 6,8, например от около 6,4 до около 6,6, например около 6,5. Во избежание разночтений pH измеряют при 25°C.
Композиция по настоящему изобретению может также включать консервант, особенно когда она обеспечивается в формате для многократного использования. Альтернативно, и особенно когда она обеспечивается в формате для однократного использования, композиция может не содержать никакого или по существу никакого консерванта. Когда консервант присутствует, он может использоваться в количестве, эффективном для уничтожения множества бактериальных типов, как требуется для разрешения регуляторного органа. Подходящие консерванты включают мета-крезол, фенол, метилпарабен, этилпарабен, пропилпарабен, бутилпарабен, хлорбутанол, бензиловый спирт, нитрат фенилртути, тимеросал, сорбиновую кислоту, сорбат калия, бензойную кислоту, хлоркрезол и бензалконий хлорид. Консервант должен присутствовать в количестве, эффективном для уничтожения множества бактериальных типов, как требуется для разрешения регуляторного органа.
Композиции по изобретению являются подходящими для парентерального введения, обычно путем инъекции. Таким образом, введение можно осуществлять, например, путем подкожной, внутримышечной, интраперитонеальной или внутривенной инъекции, хотя подкожное введение может быть предпочтительным.
Композиции по изобретению могут обеспечиваться в контейнере или средстве доставки. В некоторых вариантах осуществления контейнер или средство доставки предназначены для одноразового использования. В других вариантах осуществления контейнер или средство доставки предназначены для многоразового использования.
Примеры включают герметичный флакон, предварительно заполненный шприц, инъекционное устройство, такое как шприц-ручка, автоинъектор с регулируемой дозой, одноразовый автоинъектор, носимый инъектор или инфузионный насос.
Стабильность
"Стабильная" композиция представляет собой такую, в которой содержащийся в ней пептид по существу сохраняет свою физическую стабильность и/или химическую стабильность и/или биологическую активность при хранении. Предпочтительно композиция при хранении по существу сохраняет свою физическую и химическую стабильность, а также свою биологическую активность. Период хранения, как правило, выбирают на основании расчетного срока годности композиции. В данной области известны различные аналитические методы для определения стабильности белков, и они рассматриваются, например, в Peptide and Protein Drug Delivery, 247-301, Vincent Lee Ed., Marcel Dekker, Inc., New York, N.Y., Pubs. (1991), и Jones, A. Adv. Drug Delivery Rev. 10: 29-90 (1993). Химическую и физическую стабильность аналога амилина в каждой отдельной композиции можно определить в соответствии с анализами, описанными в Примерах ниже.
Водная жидкая композиция типично стабильна в течение по меньшей мере 6 месяцев, например по меньшей мере 12 месяцев, по меньшей мере 18 месяцев или по меньшей мере 24 месяцев, при 2-8°C (например, при 5°C). Предпочтительно она стабильна в течение по меньшей мере 18 месяцев, например по меньшей мере 24 месяцев, при 2-8°C (например, при 5°C).
Также возможно испытание на стабильность в условиях ускоренного старения или в экстремальных условиях, в которых обычно используют повышенную температуру хранения для оценки стабильности за уменьшенные периоды времени. Например, хранение при 2°C (иногда указывается как “условия ускоренного старения при 25°C” или просто “условия ускоренного старения”) можно использовать для оценки стабильности за более короткий период времени, например 1, 2, 3 или 4 недели, 1 месяц, 2 месяца, 3 месяца или 6 месяцев.
Термин "физическая стабильность" в контексте настоящей заявки относится к оценке тенденции аналога амилина к образованию растворимых или нерастворимых агрегатов, например фибрилл.
Физическую стабильность (например, мутность раствора или агрегацию, фибриллизацию или желатинизацию аналога амилина) можно оценить качественно и/или количественно различными способами, например путем визуального осмотра, с использованием эксклюзионной хроматографии, метода рассеяния УФ-света, динамического светорассеяния (DLS), кругового дихроизма, путем измерения мутности или с использованием спектроскопического зонда (например, тиофлавина Т), который указывает на конформационный статус пептида. Зонд предпочтительно представляет собой небольшую молекулу, которая предпочтительно связывается с ненативным конформером пептида. Тиофлавин Т (ThT) представляет собой флуоресцентный краситель, широко используемый для обнаружения амилоидных фибрилл. В присутствии фибрилл и, возможно, также других пептидных конфигураций Тиофлавин Т инициирует новый максимум возбуждения при длине волны около 450 нм и усиленную эмиссию при длине волны около 482 нм при связывании с фибриллизированной формой пептида. Несвязанный тиофлавин Т является по существу нефлуоресцентным при рассматриваемых длинах волн.
В некоторых вариантах осуществления композиция демонстрирует по существу отсутствие каких-либо изменений, указывающих на пониженную физическую стабильность (например, на которую указывает мутность раствора или агрегация, фибриллизация или желатинизация аналога амилина) после хранения при 2-8°C (например, при 5°C) в течение по меньшей мере 6 месяцев, по меньшей мере 12 месяцев, по меньшей мере 18 месяцев или по меньшей мере 24 месяцев. Предпочтительно, композиция демонстрирует по существу отсутствие таких изменений после хранения при 2-8°C (например, при 5°C) в течение по меньшей мере 18 месяцев, например по меньшей мере 24 месяцев.
Дополнительно или альтернативно, композиция может демонстрировать по существу отсутствие таких изменений после хранения в условиях ускоренного старения (25°C) в течение периода времени 1, 2, 3 или 4 недели, 1 месяц, 2 месяца, 3 месяца или 6 месяцев.
Термин "химическая стабильность" в контексте настоящей заявки относится к стабильности пептида в отношении ковалентных/хиральных химических изменений в структуре пептида, которые приводят к образованию продуктов химической деградации и/или ковалентных олигомеров с потенциально более низкой биологической активностью по сравнению с исходной интактной структурой мономерного пептида. Полагают, что первичный продукт разложения аналога амилина, присутствующего в композициях по изобретению, является результатом дезамидирования боковой цепи аспарагина и/или С-концевой амидной группы с образованием свободных групп карбоновой кислоты. Ковалентно связанные олигомеры также могут образовываться в субоптимальных композициях.
Химическую стабильность композиции можно оценить путем измерения количества оставшегося интактного мономерного пептида, конкретных продуктов химического разложения или ковалентных олигомеров в различные моменты времени после воздействия различных условий окружающей среды. Количество каждого отдельного продукта разложения может быть определено путем разделения продуктов разложения для создания «профиля разложения». Однако количество оставшегося интактного мономерного пептида может быть предпочтительным индикатором химической стабильности. Разделение обычно осуществляют на основе размера и/или заряда молекул с использованием различных хроматографических методов, таких как эксклюзионная хроматография (SEC) или хроматография с обращенной фазой (ОФ), обычно с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ), например SEC-ВЭЖХ (эксклюзионная хроматография-ВЭЖХ) и/или ОФ-ВЭЖХ (обращенно-фазовая ВЭЖХ)).
В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере 80%, более предпочтительно по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 96%, по меньшей мере 97%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99% аналога амилина остается в интактной мономерной форме в композиции после ее хранения при 2-8°C (например, при 5°C) в течение по меньшей мере 6 месяцев, по меньшей мере 12 месяцев, по меньшей мере 18 месяцев или по меньшей мере 24 месяцев. Предпочтительно по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 96%, по меньшей мере 97%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99% аналога амилина остается в интактной мономерной форме в композиции после ее хранения при 2-8°C (например, при 5°C) в течение по меньшей мере 6 месяцев, по меньшей мере 12 месяцев, по меньшей мере 18 месяцев или по меньшей мере 24 месяцев. Более предпочтительно по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 96%, по меньшей мере 97%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99% аналога амилина остается в интактной мономерной форме в композиции после ее хранения при 2-8°C (например, при 5°C) в течение по меньшей мере 18 месяцев, например по меньшей мере 24 месяцев.
Буфер
Термин "буфер" в контексте настоящей означает фармацевтически приемлемый агент, который стабилизирует pH фармацевтической композиции. Подходящие буферы хорошо известны в данной области техники и описаны в литературе.
Можно использовать любой подходящий буфер, включая фосфатный буфер, гистидиновый буфер, TRIS (трис(гидроксиметил)аминометан) буфер, ацетатный буфер, аргининовый буфер, цитратный буфер, бикарбонатный буфер, диэтаноламиновый буфер, лизиновый буфер и TAPS ([трис(гидроксиметил)метиламино]пропансульфоновая кислота) буфер. Особенно предпочтительные буферы включают фосфатный буфер, гистидиновый буфер, цитратный буфер и TRIS буфер, особенно фосфатный буфер, гистидиновый буфер и цитратный буфер.
Неожиданно было обнаружено, что стабильность повышается при относительно низких концентрациях буфера. Таким образом, буфер присутствует в концентрации при около 0,5 мМ - около 25 мМ.
Буфер может присутствовать при концентрации от около 0,5 мМ до около 20 мМ, например от около 0,5 мМ до около 15 мМ, например от около 1 мМ до около 15 мМ, например от около 1 мМ до около 12 мМ. Например, он может присутствовать при концентрации от около 3 мМ до около 7 мМ или от около 8 мМ до около 12 мМ, например около 5 мМ или около 10 мМ.
Что касается TRIS буфера, предпочтительно, чтобы он присутствовал при концентрации от около 15 мМ до около 25 мМ, например от около 17 мМ до около 23 мМ, например около 20 мМ, поскольку буферная способность TRIS ниже, чем у других буферов, таких как, например, фосфатный, гистидиновый и цитратный.
Композиция может содержать более одного буфера, например, два буфера или даже больше. В таких случаях указанная концентрация может представлять собой сумму концентраций отдельных буферов. Например, можно считать, что композиция, содержащая 2,5 мМ фосфатного буфера и 2,5 мМ гистидинового буфера, содержит в целом 5 мМ буфера.
Модификатор тоничности
Термин "модификатор тоничности" в контексте настоящей означает фармацевтически приемлемые средства, регулирующие тоничность, которые используют для регулирования тоничности композиции. Термины "модификатор тоничности" и "регулятор тоничности” можно использовать взаимозаменяемо. Композиции по настоящему изобретению предпочтительно являются изотоническими, т.е. они имеют осмотическое давление, которое является по существу таким же, как у сывортки крови человека, например, около 300+/-80 мОсм, например 300+/-60 мОсм, определенное при помощи осмометра.
Модификатор тоничности может быть ионным или неионным. Подходящие ионные модификаторы тоничности включают соли щелочных металлов (например, галогениды) и соли щелочно-земельных металлов (например, галогениды), такие как NaCl, NaBr, NaI, KCl, KBr, KI, LiCl, CaCl2 и Na2SO4. Неионные модификаторы тоничности включают маннит (например, D-маннит), пропиленгликоль, сахарозу, глицерин, сорбит, трегалозу и декстрозу.
Когда модификатор тоничности представляет собой хлоридную соль, такую как NaCl, возможно будет желательно добавлять модификатор тоничности к композиции только при доведении pH до желаемого значения. Особенно это касается случая, когда аналог амилина сам обеспечивается в форме хлоридной соли, поскольку присутствие хлорид-ионов выше определенного уровня может способствовать осаждению или фибриллизации аналога амилина при значениях pH около pI пептида (pI=4,36).
В некоторых вариантах осуществления маннит (например, D-маннит), пропиленгликоль и NaCl могут быть предпочтительными в качестве модификаторов тоничности, особенно маннит (например, D-маннит) и пропиленгликоль.
Должно быть понятно, что концентрация модификатора тоничности будет зависеть от концентрации других компонентов композиции, особенно когда композиция должна быть изотонической. Специалист в данной области способен установить подходящую концентрацию для каждого отдельно взятого агента в контексте конкретной композиции.
Например, может быть целесообразным использование маннита при концентрации 200-300 мМ, например 230-260 мМ; может быть целесообразным использование пропиленгликоля при концентрации 200-250 мМ, например 224 мМ; может быть целесообразным использование NaCl при концентрации 100-150 мМ, например 118-137 мМ.
Терапевтические применения
Композиции по изобретению полезны, среди прочего, для уменьшения потребления пищи, способствования снижению массы тела и ингибирования или уменьшения прибавки массы тела. Поэтому они могут обеспечить привлекательный вариант лечения, среди прочего, ожирения и метаболических заболеваний, вызванных, характеризующихся или связанных с избыточной массой тела.
Таким образом, композиции можно использовать в способе лечения, ингибирования или снижения прибавки массы тела, промотирования снижения массы тела, уменьшения потребления пищи и/или снижения избыточной массы тела. Лечение может достигаться, например, путем контроля аппетита, питания, приема пищи, потребления калорий и/или расхода энергии.
Композиции можно использовать в способе лечения ожирения, а также связанных с ним заболеваний, расстройств и состояний здоровья, включая, но не ограничиваясь этим, патологическое ожирение, ожирение перед хирургическим вмешательством, связанное с ожирением воспаление, связанное с ожирением заболевание желчного пузыря и индуцированные ожирением апноэ во сне и проблемы с дыханием, дегенерацию хряща, остеоартрит и осложнения репродуктивного здоровья, связанные с ожирением или избыточным весом, такие как бесплодие.
Композиции также можно использовать в способе профилактики или лечения болезни Альцгеймера, диабета, диабета 1 типа, диабета 2 типа, преддиабета, синдрома инсулинорезистентности, нарушения толерантности к глюкозе (IGT), болезненных состояний, связанных с повышенным уровнем глюкозы в крови, метаболического заболевания, включая метаболический синдром, гипергликемии, артериальной гипертензии, атерогенной дислипидемии, стеатоза печени («жировой болезни печени»; в том числе неалкогольной жировой болезни печени (NAFLD), которая в свою очередь включает неалкогольный стеатогепатит (NASH)), почечной недостаточности, артериосклероза (например, атеросклероза), макрососудистого заболевания, микрососудистого заболевания, диабетического заболевания сердца (включая диабетическую кардиомиопатию и сердечную недостаточность как осложнение диабета), ишемической болезни сердца, заболевания периферических артерий или инсульта.
Композиции также могут быть полезны для снижения уровней циркулирующих в крови ЛПНП и/или повышения отношения ЛПВП/ЛПНП.
Эти эффекты могут быть полностью или частично опосредованными через эффект на массу тела или могут быть независимыми от этого.
Метаболический синдром характеризуется группой метаболических факторов риска у одного человека. К ним относятся абдоминальное ожирение (избыточная жировая ткань вокруг внутренних органов брюшной полости), атерогенная дислипидемия (нарушения содержания жира в крови, включая высокий уровень триглицеридов, низкий уровень холестерина ЛПВП и/или высокий уровень холестерина ЛПНП, которые способствуют накоплению бляшек в стенках артерий), повышенное кровяное давление (гипертония), инсулинорезистентность и нарушение толерантности к глюкозе, протромботическое состояние (например, высокий уровень фибриногена или ингибитора-1 активатора плазминогена в крови) и провоспалительное состояние (например, повышенный уровень С-реактивного белка в крови).
Лица с метаболическим синдромом подвергаются повышенному риску развития ишемической болезни сердца и других заболеваний, связанных с другими проявлениями артериосклероза (например, инсульт и заболевания периферических сосудов). Доминирующим фактором риска этого синдрома, как оказалось, является абдоминальное ожирение.
Термин «лечение» (а также «лечащий» и другие его грамматические варианты), как он используется в контексте изобретения, относится к подходу для получения полезных или желаемых клинических результатов. Для целей настоящего изобретения полезные или желаемые клинические результаты включают, но не ограничиваются этим, облегчение симптомов, уменьшение степени заболевания, стабилизацию (т.е. не ухудшение) состояния заболевания, задержку или замедление прогрессирования заболевания, облегчение или временное облегчение болезненного состояния, а также ремиссию (частичную или полную), независимо от того, являются они определемыми или неопределяемыми. «Лечение» может также относиться к увеличению выживаемости по сравнению с ожидаемой выживаемостью в отсутствие лечения. «Лечение» представляет собой вмешательство, осуществляемое с целью предотвращения развития или изменения патологии расстройства. Соответственно, «лечение» относится как к терапевтическому лечению, так и к профилактическим или превентивным мерам. При использовании в контексте профилактических или превентивных мер фармацевтическая композиция не обязательно должна полностью предотвращать развитие заболевания или расстройства. К нуждающимся в лечении относятся те, кто уже страдает этим расстройством, а также те, у кого развитие расстройства необходимо предотвратить. «Лечение» также означает ингибирование или уменьшение усиления патологии или симптомов (например, увеличения массы тела или гипогликемии) по сравнению с отсутствием лечения и не обязательно подразумевает полное устранение соответствующего состояния.
Примеры
Следующие примеры представлены для иллюстрации предпочтительных аспектов изобретения и не предназначены для ограничения объема изобретения.
СПОСОБЫ
Получение композиций Соединения 1 (CPD 1) (СПОСОБ I)
Соединение 1 (описанное в WO 2018/046719) получали в виде хлоридной соли.
За исключением случаев, указанных ниже, композиции CPD 1 получали путем растворения CPD 1 пептида в щелочной воде MilliQ (MQW) (pH доводили с использованием NaOH) с получением прозрачного исходного раствора лекарственного вещества (DS) при приблизительно pH 7 при концентрации, соответствующей целевой концентрации конечного продукта. Соответствующие эксципиенты растворяли в MQW при соответствующем pH для получения раствора эксципиентов. Эти два раствора смешивали и осуществляли измерение и, в случае необходимости, доведение pH с использованием разбавленного NaOH/HCl, по потребности, для достижения желаемого pH. В завершение добавляли соответствующее количество MQW для достижения концентрации конечного продукта. Композицию подвергали стерилизующему фильтрованию через 0,22 мкм фильтр и загружали в подходящие контейнеры.
Методы для определения химической стабильности (АНАЛИЗ II)
Следующие методы использовали для оценки химической стабильности CPD 1.
Определение чистоты (%) методом ОФ-ВЭЖХ (АНАЛИЗ IIa)
Для анализа использовали систему ВЭЖХ Dionex Ultimate 3000, при скорости потока 0,3 мл/мин. Компоненты подвижной фазы включали 20 мМ фосфатного буфера, pH 7,0, с градиентным элюированием в ацетонитриле (ACN). Для детекции использовали длину волны 220 нм. Вводимая проба включала 4 мкг пептида. Колонка, используемая для анализа ВЭЖХ, представляла собой Waters Acquity UPLC BEH C18, 150 × 2,1 мм, размер частиц 1,7 мкм. Время анализа составляло 35-37 минут в зависимости от времени восстановления.
Результаты, показанные в примерах, определены методом ОФ-ВЭЖХ после инкубации в стрессовых условиях. Химическая стабильность CPD 1 (пептид) выражена как относительная чистота пика пептида (т.е. главного пика пептида), определенная методом ВЭЖХ в данной временной точке и нормализованная к абсолютной чистоте пика пептида (т.е. главного пика пептида) в день ноль (день 0 (D0)), которая установлена как 100% чистота, и, таким образом, химическая стабильность выражена в % CPD 1.
Чистота является мерой оставшегося интактного соединения в стрессовых растворах после инкубации относительно чистоты, измеренной в день 0 (D0, нулевой день), и выражена как нормализованная чистота CPD 1 в %.
Определение образования ковалентных олигомеров методом эксклюзионной хроматографии (SEC) (АНАЛИЗ IIb)
Для анализа использовали систему ВЭЖХ Dionex Ultimate 3000 при скорости потока 0,5 мл/мин (изократическое элюирование). Компоненты подвижной фазы включали 0,1% трифторуксусной кислоты (TFA) в 45% ацетонитрила (ACN) и 55% MQW. Для детекции использовали длину волны 215 нм (+280 нм). Вводимая проба включала 4 мкг пептида. Колонка, используемая для анализа ВЭЖХ, представляла собой Tosoh BioScience, TSKgel SuperSW2000, 30 см × 4,6 мм, размер частиц 4 мкм. Время анализа составляло 25 минут.
Результаты, показанные в примерах, определены методом ВЭЖХ после инкубации в стрессовых условиях. Уровень ковалентного олигомера рассчитан как площадь пика ковалентного олигомера относительно интактного мономерного главного пика CPD 1, выраженный в виде % олигомеров.
Методы оценки физической стабильности (АНАЛИЗ III)
Следующие методы использовали для оценки физической стабильности CPD 1 в композициях.
Визуальная оценка раствора (АНАЛИЗ IIIa)
Образец поставляется в прозрачном контейнере, позволяющем опытными техническими специалистами визуально оценивать композицию. Визуальная оценка осуществлялась вручную и была задокументирована опытными техническими специалистами, которые классифицировали образец как «прозрачный», «мутный», «гель» или «частицы» в зависимости от его внешнего вида.
УФ-поглощение при 325 нм (АНАЛИЗ IIIb)
Мутность измеряли с использованием анализа УФ-поглощения. 100 мкл каждого образца загружали в прозрачный УФ-совместимый 96-луночный планшет от Corning. Образцы измеряли в считывающем устройстве SpectraMax 190 Elisa при длине волны 325 нм.
Динамическое светорассеяние (DLS) (АНАЛИЗ IIIc)
Распределение пептидных частиц по размерам определяли с использованием анализа динамического светорассеяния. Стандартный эксперимент DLS осуществляли в 96-луночном планшете Nunc с объемом образца 165 мкл и измерения осуществляли в считывающем устройстве DynaPro Plate Reader II. Обычно используемыми параметрами были температура при 25°C, время сбора данных 2 сек, 50 измерений на образец, детекция: гидродинамический радиус Rh, отсечение корреляционной функции [мксек]: 0,5-1×105 и отсечение пикового радиуса [нм]: 0,5-1000.
Оценка физической стабильности с использованием ThT-стресс теста (АНАЛИЗ IIId)
Агрегацию в виде образования фибрилл определяли с использованием амилоид-специфического красителя Тиофлавина T (ThT), который часто используют для демонстрации присутствия фибрилл в растворе (см., например, Groenning, M., J. Chem. Biol. 3(1) (2010), pp. 1-18; Groenning et al., J. Struct. Biol. 158 (2007) pp. 358-369; и Levine, H., III, Protein Sci. 2 (1993) pp. 404-410).
Получали исходный раствор 1 мМ ThT и 12 мкл смешивали с 288 мкл композиции CPD 1. Образцы загружали в 96-луночный черный флуоресцентный планшет (с прозрачным дном) в двух экземплярах по 2×150 мкл. Данные собирали с использованием устройства для считывания флуоресцентных планшетов Synergy™ H4 Hybrid Multi-Mode от Biotek через фиксированные 10-мин интервалы, каждому из которых предшествовало 300-сек автоматическое перемешивание (встряхивание), в течение периода до 60 часов при 40°C. Физическую стабильность, выраженную как время задержки образования фибрилл (в часах), определяли как пересечение между двумя линейными регрессиями, представляющими начальную стабильную фазу и фазу роста.
Оценка физической стабильности с использованием одноточечного ThT-теста (АНАЛИЗ IIIe)
Агрегацию в виде образования фибрилл определяли с использованием амилоид-специфического красителя Тиофлавина T (ThT), который часто используют для демонстрации присутствия фибрилл в растворе (см., например, Groenning, M., J. Chem. Biol. 3(1) (2010), pp. 1-18; Groenning et al., J. Struct. Biol. 158 (2007) pp. 358-369; и Levine, H., III, Protein Sci. 2 (1993) pp. 404-410).
170 мкл образца композиции CPD 1 загружали в черный 96-луночный планшет с оптическим дном от Nunc. Добавляли еще 7 мкл 1 мМ ThT и осторожно перемешивали пипеткой вверх и вниз, чтобы обеспечить гомогенную дисперсию ThT. 96-луночный планшет помещали в устройство для считывания флуоресцентных планшетов Synergy™ H4 Hybrid Multi-Mode от Biotek или в устройство для считывания флуоресцентных планшетов Synergy™ MX от Biotek. Длина волны возбуждения 450 нм (ширина полосы 9 нм) с длиной волны эмиссии 485 нм (ширина полосы 9 нм) и длина волны возбуждения 295 нм (ширина полосы 9 нм) с длиной волны эмиссии 355 нм (ширина полосы 9 нм) и длиной волны эмиссии 330 нм (ширина полосы 9 нм).
Пример 1: Химическая и физическая стабильность композиций по данным ускоренных испытаний при 25°C в диапазоне pH 6,1-7,8
Композиции, описанные в Таблице 1, были получены как описано в СПОСОБЕ I, за исключением случаев, указанных в таблице:
мл)
5 мМ
230 мМ
5 мМ
230 мМ
20 мМ
118 мМ
5 мМ
125 мМ
154 мМ
Полученные композиции загружали в 1-мл стеклянные флаконы Типа 1 и анализировали после хранения при защите от света при 25°C в течение указанных периодов времени.
M: Месяц
Хотя нет очевидного эффекта pH на физическую стабильность, чистота повышается по мере понижения pH, см. Таблицу 2.
Пример 2: Эффект pH композиции на физическую стабильность.
Получали композиции лекарственного средства на основе CPD 1, как описано в СПОСОБЕ I, при pH 5,8, 6,0, 6,3, 6,8 и 7,0, содержащие 1 мг/мл CPD 1, 20 мМ TRIS (буфер) и 118 мМ NaCl (регулятор тоничности).
Физическую стабильность оценивали по образованию фибрилл с использованием ThT-стресс теста, осуществляемого в течение 60 часов при 40°C. Исходный размер пептидных частиц (z-среднее) также определяли методом DLS.
Таблица 3 показывает, что в диапазоне pH 5,8-7,0 CPD 1 является стабильным в отношении фибриллообразования и агрегации, влияющих на размер пептидных частиц.
Пример 3: Химическая и физическая стабильность по данным ускоренных испытаний при 25°C для композиций с концентрациями буфера от 2 мМ до 20 мМ
Композиции, описанные в Таблице 4, были получены как описано в СПОСОБЕ I. Полученные композиции загружали в 1-мл стеклянные флаконы Типа 1 и анализировали после хранения при защите от света при 25°C в течение указаных периодов времени.
мл)
20 мМ
230 мМ
(ОФ-ВЭЖХ)
(SEC)
оценка
изменений
изменений
изменений
изменений
5 мМ
230 мМ
(ОФ-ВЭЖХ)
(SEC)
оценка
изменений
изменений
изменений
изменений
20 мМ
230 мМ
(ОФ-ВЭЖХ)
(SEC)
оценка
изменений
изменений
изменений
изменений
5 мМ
230 мМ
(ОФ-ВЭЖХ)
(SEC)
оценка
изменений
изменений
изменений
изменений
20 мМ
120 мМ
(ОФ-ВЭЖХ)
(SEC)
оценка
изменений
изменений
5 мМ
137 мМ
(ОФ-ВЭЖХ)
(SEC)
оценка
изменений
изменений
изменений
изменений
5 мМ
125 мМ
(ОФ-ВЭЖХ)
(SEC)
оценка
изменений
изменений
изменений
изменений
2 мМ
125 мМ
(ОФ-ВЭЖХ)
(SEC)
оценка
изменений
изменений
изменений
изменений
2 Никаких признаков агрегации;
M: Месяц
Как проиллюстрировано на примере композиций 1-4, чистота является более высокой при концентрациях гистидинового и фосфатного буфера 5 мМ, чем при концентрациях 20 мМ. Что касается внешнего вида, физической стабильности и ковалентных олигомеров, не наблюдалось никакого эффекта или только ограниченный эффект для концентраций гистидинового и фосфатного буфера 5 мМ vs 20 мМ.
Как проиллюстрировано на примере композиций 7-8, благоприятные эффекты снижения концентрации буфера до 5 мМ фосфата сохраняются при 2 мМ фосфата.
Пример 4: Физическая стабильность по данным ускоренных испытаний в диапазоне pH 6,1-6,9
Композиции #1-3 лекарственного средства на основе CPD 1 из Таблицы 1 (Пример 1) загружали в 1-мл стеклянные флаконы Типа 1 и подвергали физическому воздействию в виде устойчивого вращения со скоростью примерно 15 об/мин (оборотов в минуту) на мультиротаторе в стандартной лаборатории с дневным освещением через окно (без защиты от света) и при комнатной температуре в течение указанных периодов времени. Стабильность была определена, как показано в таблице.
мл)
5 мМ
230 мМ
RFU
RFU
RFU
RFU
5 мМ
230 мМ
RFU
RFU
RFU
RFU
20 мМ
118 мМ
RFU
RFUU
RFU
Композиции с pH в диапазоне 6,1-6,9 физически стабильны при вращении в течение 4 недель при комнатной температуре.
Пример 5: Химическая стабильность или растворимость композиций с концентрациями CPD 1 от 0,4 мг/мл до 50 мг/мл
Композицию с 4 мг/мл CPD 1, содержащую 20 мМ TRIS и 118 мМ NaCl, получали как описано в СПОСОБЕ I. Композицию разбавляли плацебо-буфером до достижения концентрации 0,4 мг/мл и анализировали после 24 часов хранения при 25°C.
20 мМ
118 мМ
Не было никакого снижения чистоты после хранения при низкой концентрации 0,4 мг/мл, см. Таблицу 7.
Для испытания на растворимость CPD 1 растворяли в щелочной MQW (pH доводили с использованием NaOH) при перемешивании.
CPD 1 можно растворить с получением прозрачного раствора при концентрациях до 50 мг/мл в MQW, см. Таблицу 8.
Пример 6: Химическая стабильность по данным ускоренных испытаний при 40°C композиций с концентрациями буфера 0,5-40 мМ при pH 6
Композиции в Таблицах A1-A3 получали в соответствии со СПОСОБОМ I и загружали в 1,5-мл пробирки Эппендорфа LowBind. Композиции не включали никаких регуляторов тоничности.
После 4 недель хранения при 40°C оценивали стабильность в соответствии с АНАЛИЗОМ II с модификацией, заключающейся в том, что результаты, касающиеся образования ковалентнных олигомеров (SEC) (АНАЛИЗ IIb), указывались как разница в общем количестве олигомеров между исходным значением и на момент времени 4 недели.
Чистота (ОФ-ВЭЖХ)
ND: Нет данных
Ковалентные олигомеры (SEC)
ND: Нет данных
мл)
(ОФ-ВЭЖХ)
При pH 6 снижение чистоты уменьшалось, когда уменьшалась концентрация буфера (Таблица 9). Концентрация буфера не имела никакого значимого эффекта на образование ковалентных олигомеров (Таблица 10).
Общая концентрация буфера, по-видимому, является наиболее значимым фактором. Переключение с одного буфера при 5 мМ на смесь двух буферов при концентрации 2,5 мМ каждого, как оказалось, не имеет никакого значимого эффекта. (Ср. Таблицу 11 с Таблицей 9 и 10, композиции 29-32).
Пример 7: Химическая и физическая стабильность по данным ускоренных испытаний при 25°C для композиций с различными концентрациями Соединения 1
Композиции, показанные в Таблице 12, получали в соответствии с СПОСОБОМ I и загружали в 1-мл силиконизированные стеклянные картриджи Типа 1, снабженные бромбутиловыми плунжерами. Стабильность оценивали в соответствии с АНАЛИЗОМ II и АНАЛИЗАМИ IIIa, IIIb и IIIc после хранения при 25°C в течение указанного периода времени.
(мг/
мл)
5 мМ
(ОФ-ВЭЖХ)
5 мМ
(ОФ-ВЭЖХ)
5 мМ
(ОФ-ВЭЖХ)
5мМ
(ОФ-ВЭЖХ)
Изменение концентрации CPD 1 в испытываемом диапазоне 1-10 мг/мл не имело никакого эффекта на химическую и физическую стабильность.
Пример 8: Химическая стабильность по данным ускоренных испытаний при 25°C для композиций, содержащих разные регуляторы тоничности
Композиции, показанные в Таблице 13, получали в соответствии с СПОСОБОМ I и загружали в 1-мл стеклянные флаконы Типа 1. Стабильность оценивали в соответствии с АНАЛИЗОМ II после хранения при 25°C в течение указанного периода времени.
мл)
5 мМ
(ОФ-ВЭЖХ)
(SEC)
5 мМ
230 мМ
(ОФ-ВЭЖХ)
(SEC)
5 мМ
118 мМ
(ОФ-ВЭЖХ)
(SEC)
5 мМ
5 мМ
(ОФ-ВЭЖХ)
(SEC)
ND: Нет данных
Снижение чистоты, по-видимому, меньше для композиций с маннитом и пропиленгликолем в качестве регуляторов тоничности, чем для композиций с глицерином и NaCl в качестве регуляторов тоничности. Образование ковалентных олигомеров, по-видимому, выше с глицерином в качестве регулятора тоничности, чем с другими регуляторами тоничности.
В следующих пунктах (п.) представлены некоторые варианты осуществления изобретения.
1. Стабильная водная жидкая фармацевтическая композиция, включающая аналог амилина, который представляет собой:
[19CD]-isoGlu-RD()GTATK()ATERLA-Aad-FLQRSSF-Gly(Me)-A-Ile(Me)-LSSTEVGSNT-Hyp-NH2
или его фармацевтически приемлемую соль и/или производное;
при этом композиция включает:
(a) аналог амилина в концентрации от около 0,4 мг/мл до около 25 мг/мл; и
(b) буфер в концентрации от около 0,5 мМ до около 25 мМ;
где композиция имеет pH от около 5,8 до около 6,9.
2. Стабильная водная жидкая композиция в соответствии с п. 1, где аналог амилина присутствует в концентрации по меньшей мере около 0,4 мг/мл, по меньшей мере около 0,5 мг/мл, по меньшей мере около 0,6 мг/мл, по меньшей мере около 1,2 мг/мл или по меньшей мере около 2,5 мг/мл.
3. Стабильная водная жидкая композиция в соответствии с любым из предшествующих пунктов, где аналог амилина присутствует в концентрации до около 25 мг/мл, до около 20 мг/мл, до около 15 мг/мл или до около 10 мг/мл.
4. Стабильная водная жидкая композиция в соответствии с любым из предшествующих пунктов, где аналог амилина присутствует в концентрации от около 3 мг/мл до около 12 мг/мл, например от около 3 мг/мл до около 7 мг/мл или от около 8 мг/мл до около 12 мг/мл, например около 5 мг/мл или около 10 мг/мл.
5. Стабильная водная жидкая композиция в соответствии с любым из предшествующих пунктов, где буфер присутствует в концентрации от около 0,5 мМ до около 20 мМ, например от около 0,5 мМ до около 15 мМ, например от около 1 мМ до около 15 мМ, например от около 1 мМ до около 12 мМ.
6. Стабильная водная жидкая композиция в соответствии с любым из предшествующих пунктов, где буфер присутствует в концентрации от около 3 мМ до около 7 мМ или от около 8 мМ до около 12 мМ, например около 5 мМ или около 10 мМ.
7. Стабильная водная жидкая композиция в соответствии с любым из предшествующих пунктов, где буфер является фосфатным, гистидиновым или цитратным.
8. Стабильная водная жидкая композиция в соответствии с любым из пунктов 1-6, где буфер представляет собой TRIS буфер и где буфер присутствует в концентрации от около 15 мМ до около 25 мМ, например от около 17 мМ до около 23 мМ, например около 20 мМ
9. Стабильная водная жидкая композиция в соответствии с любым из предшествующих пунктов, где pH имеет значение от около 6,2 до около 6,8, например от около 6,4 до около 6,6, например около 6,5.
10. Стабильная водная жидкая композиция в соответствии с любым из предшествующих пунктов, дополнительно включающая модификатор тоничности.
11. Стабильная водная жидкая композиция в соответствии с любым из предшествующих пунктов, где композиция является стабильной при 2-8°C в течение по меньшей мере 6 месяцев, по меньшей мере 12 месяцев, по меньшей мере 18 месяцев или по меньшей мере 24 месяцев.
12. Стабильная водная жидкая композиция в соответствии с любым из предшествующих пунктов, где композиция демонстрирует по существу отсутствие мутности или агрегации, фибриллизации или желатинизации аналога амилина после хранения при 2-8°C в течение по меньшей мере 6 месяцев, по меньшей мере 12 месяцев, по меньшей мере 18 месяцев или по меньшей мере 24 месяцев.
13. Стабильная водная жидкая композиция в соответствии с любым из предшествующих пунктов, где по меньшей мере 80%, более предпочтительно по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 96%, по меньшей мере 97%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99% аналога амилина остается в интактной мономерной форме в композиции после ее хранения при 2-8°C в течение по меньшей мере 6 месяцев, по меньшей мере 12 месяцев, по меньшей мере 18 месяцев или по меньшей мере 24 месяцев.
14. Стабильная водная жидкая композиция в соответствии с любым из предшествующих пунктов, где аналог амилина представлен в виде хлоридной соли.
15. Стабильная водная жидкая композиция в соответствии с любым из предшествующих пунктов, где вода является елинственным растворителем, используемым для получения водной жидкой композиции.
16. Стабильная водная жидкая композиция в соответствии с любым из предшествующих пунктов, где композиция сформулирована для введения субъекту путем инъекции.
17. Стабильная водная жидкая композиция в соответствии с п. 16, где инъекция представляет собой подкожную инъекцию.
18. Стабильная водная жидкая композиция в соответствии с любым из предшествующих пунктов, где композиция является стерильной.
19. Контейнер или средство доставки, включающие жидкую композицию в соответствии с любым из предшествующих пунктов.
20. Стабильная водная жидкая композиция в соответствии с любым из пунктов 1-18 для применения в способе медицинского лечения.
21. Стабильная водная жидкая композиция в соответствии с любым из пунктов 1-18 для применения в способе лечения, ингибирования или уменьшения прибавки массы тела, промотирования снижения массы тела и/или уменьшения избыточной массы тела.
22. Стабильная водная жидкая композиция в соответствии с любым из пунктов 1-18 для применения в способе лечения ожирения (например, патологического ожирения, ожирения перед хирургическим вмешательством), связанного с ожирением воспаления, связанного с ожирением заболевания желчного пузыря, индуцированного ожирением апноэ во сне, дегенерации хряща, остеоартрита или осложнений репродуктивного здоровья, связанных с ожирением или избыточным весом.
23. Стабильная водная жидкая композиция в соответствии с любым из пунктов 1-18 для применения в способе профилактики или лечения болезни Альцгеймера, диабета (например, диабета 1 типа, диабета 2 типа), преддиабета, синдрома инсулинорезистентности, нарушения толерантности к глюкозе (IGT), метаболического синдрома, гипергликемии, гипертензии, атерогенной дислипидемии, стеатоза печени («жировой болезни печени»; например, неалкогольной жировой болезни печени (NAFLD), неалкогольного стеатогепатита (NASH)), почечной недостаточности, артериосклероза (например, атеросклероза), макрососудистого заболевания, микрососудистого заболевания, диабетического заболевания сердца (например, диабетической кардиомиопатии), ишемической болезни сердца, заболевания периферических артерий или инсульта.
24. Стабильная водная жидкая композиция в соответствии с любым из пунктов 1-18 для применения в способе снижения уровней циркулирующих в крови ЛПНП и/или повышения отношения ЛПВП/ЛПНП.
25. Способ получения стабильной водной фармацевтической композиции, включающей аналог амилина, который представляет собой
[19CD]-isoGlu-RD()GTATK()ATERLA-Aad-FLQRSSF-Gly(Me)-A-Ile(Me)-LSSTEVGSNT-Hyp-NH2
или его фармацевтически приемлемую соль и/или производное;
при этом способ включает объединение
(a) аналога амилина при концентрации от около 0,4 мг/мл до около 25 мг/мл; и
(b) буфера при концентрации от около 0,5 мМ до около 25 мМ;
с получением стабильной водной жидкой композиции, где композиция имеет pH от около 5,8 до около 6,9.
26. Композиция, полученная способом в соответствии с пунктом 25, где композиция представляет собой стабильную водную жидкую композицию в соответствии с любым из пунктов 1-18.
| название | год | авторы | номер документа |
|---|---|---|---|
| ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ ПАРЕНТЕРАЛЬНАЯ КОМПОЗИЦИЯ ДВОЙНОГО АГОНИСТА GLP1/2 | 2020 |
|
RU2828220C2 |
| ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ ПАРЕНТЕРАЛЬНАЯ КОМПОЗИЦИЯ ДВОЙНОГО АГОНИСТА GLP1/2 | 2020 |
|
RU2815643C2 |
| СОСТАВЫ АНАЛОГОВ ГЛЮКАГОНОПОДОБНОГО ПЕПТИДА-2 (GLP-2) | 2019 |
|
RU2833459C2 |
| ЛЕКАРСТВЕННАЯ ФОРМА ДЛЯ КОМБИНАЦИИ hGH И rhIGF-1 | 2010 |
|
RU2558821C2 |
| ЖИДКИЕ СОСТАВЫ АНАЛОГОВ ГЛЮКАГОНА | 2021 |
|
RU2819934C1 |
| ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ КОМПОЗИЦИИ БЕЗ ЦИТРАТА, СОДЕРЖАЩИЕ АНАКИНРУ | 2012 |
|
RU2599848C2 |
| УСТОЙЧИВАЯ ЖИДКАЯ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ | 2018 |
|
RU2773747C2 |
| СТАБИЛЬНЫЕ ПРЕПАРАТЫ СВЯЗЫВАЮЩЕГО СРЕДСТВА НА ОСНОВЕ IgG4 | 2013 |
|
RU2644214C2 |
| ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ, СОДЕРЖАЩАЯ ПЛАЗМИНОГЕН, И ЕЕ ПРИМЕНЕНИЕ | 2015 |
|
RU2711989C2 |
| СТАБИЛЬНАЯ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ | 2017 |
|
RU2736830C2 |
Настоящее изобретение относится к области медицины и фармации, а именно к стабильным водным жидким композициям аналогов амилина. Водная жидкая фармацевтическая композиция, включающая аналог амилина, который представляет собой [19CD]-isoGlu-RD()GTATK()ATERLA-Aad-FLQRSSF-Gly(Me)-А-Ile(Me)-LSSTEVGSNT-Hyp-NH2 или его фармацевтически приемлемую соль; при этом композиция включает аналог амилина в концентрации от 0,4 мг/мл до 25 мг/мл и буфер в концентрации от 0,5 мМ до 25 мМ, где композиция имеет рН от 5,8 до 6,9. Заявленное изобретение повышает стабильность водных композиций аналога амилина при длительном хранении, при низкой концентрации буфера и определённом диапазоне рН. 14 з.п. ф-лы, 12 табл., 8 пр.
1. Водная жидкая фармацевтическая композиция, включающая аналог амилина, который представляет собой
[19CD]-isoGlu-RD()GTATK()ATERLA-Aad-FLQRSSF-Gly(Me)-А-Ile(Me)-LSSTEVGSNT-Hyp-NH2
или его фармацевтически приемлемую соль; при этом композиция включает:
(a) аналог амилина в концентрации от 0,4 мг/мл до 25 мг/мл; и
(b) буфер в концентрации от 0,5 мМ до 25 мМ;
где композиция имеет рН от 5,8 до 6,9.
2. Водная жидкая композиция по п. 1, где аналог амилина присутствует в концентрации по меньшей мере 0,4 мг/мл, по меньшей мере 0,5 мг/мл, по меньшей мере 0,6 мг/мл, по меньшей мере 1,2 мг/мл или по меньшей мере 2,5 мг/мл.
3. Водная жидкая композиция по любому из предшествующих пунктов, где аналог амилина присутствует в концентрации до 25 мг/мл, до 20 мг/мл, до 15 мг/мл или до 10 мг/мл.
4. Водная жидкая композиция по любому из предшествующих пунктов, где аналог амилина присутствует в концентрации от 3 мг/мл до 12 мг/мл, например от 3 мг/мл до 7 мг/мл или от 8 мг/мл до 12 мг/мл, например 5 мг/мл или 10 мг/мл.
5. Водная жидкая композиция по любому из предшествующих пунктов, где буфер присутствует в концентрации от 0,5 мМ до 20 мМ, например от 0,5 мМ до 15 мМ, например от 1 мМ до 15 мМ, например от 1 мМ до 12 мМ.
6. Водная жидкая композиция по любому из предшествующих пунктов, где буфер присутствует в концентрации от 3 мМ до 7 мМ или от 8 мМ до 12 мМ, например 5 мМ или 10 мМ.
7. Водная жидкая композиция по любому из предшествующих пунктов, где буфер является фосфатным, гистидиновым или цитратным.
8. Водная жидкая композиция по любому из пп. 1-6, где буфер представляет собой TRIS буфер и где буфер присутствует в концентрации от 15 мМ до 25 мМ, например от 17 мМ до 23 мМ, например 20 мМ.
9. Водная жидкая композиция по любому из предшествующих пунктов, где рН имеет значение от 6,2 до 6,8, например от 6,4 до 6,6, например 6,5.
10. Водная жидкая композиция по любому из предшествующих пунктов, дополнительно включающая модификатор тоничности.
11. Водная жидкая композиция по любому из предшествующих пунктов, где композиция является стабильной при 2-8°С в течение по меньшей мере 6 месяцев, по меньшей мере 12 месяцев, по меньшей мере 18 месяцев или по меньшей мере 24 месяцев.
12. Водная жидкая композиция по любому из предшествующих пунктов, где композиция демонстрирует по существу отсутствие мутности или агрегации, фибриллизации или желатинизации аналога амилина после хранения при 2-8°С в течение по меньшей мере 6 месяцев, по меньшей мере 12 месяцев, по меньшей мере 18 месяцев или по меньшей мере 24 месяцев.
13. Водная жидкая композиция по любому из предшествующих пунктов, где по меньшей мере 80%, более предпочтительно по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 96%, по меньшей мере 97%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99% аналога амилина остается в интактной мономерной форме в композиции после ее хранения при 2-8°С в течение по меньшей мере 6 месяцев, по меньшей мере 12 месяцев, по меньшей мере 18 месяцев или по меньшей мере 24 месяцев.
14. Водная жидкая композиция по любому из предшествующих пунктов, где аналог амилина представлен в виде хлоридной соли.
15. Водная жидкая композиция по любому из предшествующих пунктов, где композиция сформулирована для введения субъекту путем инъекции, например, где инъекция представляет собой подкожную инъекцию.
| WO 2018046719 A1, 15.03.2018 | |||
| DE 69740096 D1, 17.02.2011 | |||
| US 11129877 B2, 28.09.2021 | |||
| АНАЛОГ-АГОНИСТ АМИЛИНА, ЕГО ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИ ПРИЕМЛЕМЫЕ СОЛИ, КОМПОЗИЦИЯ, ПРОЯВЛЯЮЩАЯ СВОЙСТВА АГОНИСТА АМИЛИНА | 1992 |
|
RU2130463C1 |
