СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ТЯЖЕСТИ ТЕЧЕНИЯ ГЕМОРРАГИЧЕСКОЙ ЛИХОРАДКИ С ПОЧЕЧНЫМ СИНДРОМОМ Российский патент 2025 года по МПК G01N33/68 G01N33/573 

Предлагаемое изобретение относится к медицине, а именно к лабораторным методам исследования в области биохимии, патологической физиологии, терапии, инфекционных болезней и может быть использовано для прогнозирования тяжести течения геморрагической лихорадки с почечным синдромом, в том числе осложненной острой почечной недостаточностью на ранней стадии заболеваемости.

Геморрагическая лихорадка с почечным синдромом (ГЛПС) в настоящее время остается актуальной проблемой не только из-за широкой распространенности в республике Башкортостан, но в связи с развитием ранних осложнений, влияющих на исход болезни. ГЛПС представляет собой острое вирусное инфекционное заболевание, которое имеет природно-очаговый характер. Его вызывает ортохантавирус, содержащий РНК, из семейства Hantaviridae и отряда Orthohantaviras [riem Т. et al., 2011; Jiang H., 2016; Lee S.A. et al., 2018; Гилязова И.Р. и др., 2023]. Ведущим синдромом является острая почечная недостаточность. Острое повреждение почек или острая почечная недостаточность (ОПН), обусловлена развитием интерстициального нефрита [Ткаченко Е.А., 2006] за счет системного поражения эндотелий клеток и нарушению барьерных функций сосудистой сети, с активацией иммунопатологических процессов. Клинически ОПН сопровождается развитием олиго- или анурией, протеинурией, гематурией и быстрым снижением скорости клубочковой фильтрации (СКФ). Это приводит к отекам, нарушениям электролитного и кислотно-щелочного баланса [Ускова Ю.Г., Павелкина В.Ф. и др., 2018].

Несмотря на прогресс в диагностике и лечении ГЛПС, по-прежнему недостаточно ранних и новых биомаркеров для оценки тяжести заболевания и прогноза данного недуга.

Известен способ прогнозирования развития острой почечной недостаточности при геморрагической лихорадке с почечным синдромом [авторское свидетельство SU 1704082 А1, 1992], который предлагает прогнозировать вероятность развития осложнений в ранние сроки. Суть метода после постановки диагноза проводят анализ крови и мочи, дополнительно в плазме крови определяют содержание олиго биополимер - связанных сиаловых кислот и при значении этого показателя 206 мг/л и более прогнозируют вероятность развития острой почечной недостаточности. Применение способа позволяет в ранние сроки (на 2-4 день заболевания) с точностью 91- 98% прогнозировать развитие острой почечной недостаточности и своевременно начать лечебные мероприятия. Несмотря на потенциальные преимущества метода определения содержания олигобиополимер-связанных сиаловых кислот в плазме крови для прогноза риска ОПН, у данного подхода есть несколько недостатков:

1. Уровень олигобиополимер-связанных сиаловых кислот может варьироваться у разных пациентов из-за индивидуальных особенностей организма, метаболизма или связанных заболеваний, например сахарный диабет, что затрудняет интерпретацию результатов. Это может привести к ложноположительным или ложноотрицательным результатам.

2. Если метод еще не стандартен, его применение в клинической практике может быть затруднено в силу ограниченного доступа к необходимому оборудованию и обученному персоналу. Не все медицинские учреждения могут иметь возможность проводить анализ на содержание олигобиополимер-связанных сиаловых кислот.

3. Прогнозирование ОПН на основе одного показателя может быть недостаточным. Нужно учитывать другие клинические факторы, анамнез и результаты других лабораторных тестов для более точной диагностики и прогноза. Необходим комплексный подход.

Известен способ ранней дифференциальной диагностики геморрагической лихорадки с почечным с почечным синдромом, включающий оценку лихорадочного, геморрагического, мочевого синдромов. Проводят ультразвуковую эластометрию почек и определяют жесткость их паренхимы. При значении жесткости паренхимы почек менее 16 кПа в сочетании с наличием лихорадочного, геморрагического, мочевого синдромов делают вывод о геморрагической лихорадке с почечным синдромом, а при значении жесткости 16 кПа и более, отсутствии лихорадочного, геморрагического, мочевого синдромов делают вывод об отсутствии геморрагической лихорадки с почечным синдромом [патент RU 2735810 С1, 2020]. Данный способ имеет несколько недостатков:

1. Показатель жесткости паренхимы почек может быть обусловлен другими заболеваниями, такими как диабетическая нефропатия, хроническая почечная недостаточность, что может создать разногласие в постановке клинического диагноза.

2. Ультразвуковая эластометрия требует специального оборудования и высокой квалификации врача. Неправильное использование оборудования или ошибки в интерпретации результата могут привести к неверному диагнозу. Таким образом, создается зависимость от оборудования и квалификация врача.

3. Сложность интерпретации данных: порог жесткости паренхимы почек (16 кПа) может варьироваться в зависимости от многих факторов, таких как возраст пациента, наличие сопутствующих заболеваний и индивидуальные особенности. Это усложняет точное определение диагноза.

Наиболее близким аналогом изобретения является способ прогнозирования тяжелой геморрагической лихорадки с почечным синдромом на ранних стадиях заболевания [патент RU 2790962, 2023]. В сыворотке крови больного геморрагической лихорадкой с почечным синдромом определяют в первую неделю заболевания уровень активности мочевины и аланинаминотрансферазы (АЛТ), а также процентное содержание Т-клеток с фенотипами CD3+CD8+CD314+ и CD3+CD8+FoxP3+ среди лимфоцитов крови (CD45+). На основе этих показателей рассчитывается критерий прогноза тяжелого течения заболевания. Прогностический критерий тяжести течения ГЛПС (ПКТТ ГЛПС) по формуле: 2,015+0,072*[АЛТ]+0,516*[мочевина]+0,364*[CD3+CD8+CD314+]-0,381*[CD3+CD8+FoxP3+]. При значениях выше 19 прогнозируется развитие тяжелого течения геморрагической лихорадки с ОПН.

Недостатки прототипа:

1. Данный способ является весьма трудоемким и длительным по времени вследствие определения большого числа параметров.

2. При позднем обращении пациента с ГЛПС за медицинской помощью не позволяет прогнозировать тяжесть течения и исход заболевания. Задачей изобретения является разработка простого способа прогнозирования тяжести течения ГЛПС и высокого риска ОПН на основе лабораторного показателя Цистатина С.

Технический результат при использовании изобретения - снижение трудоемкости и повышение точности прогнозирования тяжести течения ГЛПС и высокого риска ОПН на ранних стадиях заболевания. Специфический диагностический маркер Цистатин С служит индикатором тубулярной дисфункции почек. Этот маркер играет важную роль, поскольку способен предсказать ранее развитие острой почечной недостаточности и значительно раньше, чем креатинин, указывает на нарушения реабсорбции в проксимальных канальцах. Концентрация Цистатина С в сыворотке крови увеличивается уже через 12-24 часа в случае развития ОПН, причем данный маркер не зависит от пола, возраста или физической активности. Одним из критериев ранней диагностики тяжести прогноза течения геморрагической лихорадки с почечным синдромом является анализ определения цистатина С в сыворотке крови у пациентов при данной нозологии. Цистатин С - это протеаза, вырабатываемая всеми клетками организма, отвечает за регуляцию уровня средних белков в крови. Он фильтруется в почках и почти полностью реабсорбируется и разрушается в проксимальных почечных канальцах. Уровень этого белка, в частности, повышение концентрации его в крови может сигнализировать о нарушении функциональной способности почек и снижении их фильтрационной способности. В практике врачей использование Цистатина С может свидетельствовать о более раннем выявлении нарушений функции почек, что, в свою очередь, позволит начать соответствующее лечение на более ранних стадиях и предотвратить осложнения и прогрессирование заболевания. В этой связи актуальным является разработка способов прогнозирования тяжести течения ГЛПС на ранних стадиях заболевания.

Предлагаемый способ прогнозирования тяжести течения ГЛПС на ранних сроках заболевания состоит в следующем. У больных проводят забор венозной крови в момент поступления или при подозрении на геморрагическую лихорадку (на догоспитальном этапе) с определением количественного содержания Цистатина С иммуноферментным анализом с помощью тест системы «Цистатин С - ИФА - БЕСТ» производства фирмы Вектор-Бест (Россия). Диапазон содержания концентрации Цистатина С у здоровых людей составляет от 0,60 до 1,15 мг/л. Цистатин С представляет собой протеин, который широко используется как биомаркер для оценки функции почек. Степень тяжести течения ГЛПС прогнозируют по уровню содержания Цистатина С в пределах диапазона:

1,76 - 1,93 мг/л - прогнозируют среднюю степень течения ГЛПС.

1,94 - 2,42 мг/л - прогнозируют тяжелую степень течения ГЛПС, но без ОПН.

2,43 мг/л и выше - тяжелую степень течения ГЛПС, осложненную ОПН.

Преимущества заявляемого способа:

1. Определение уровня Цистатина С может быть использовано для мониторинга динамики состояния пациентов с ГЛПС, что позволяет своевременно корректировать терапевтические вмешательства.

2. Иммуноферментный метод определения Цистатина С достаточно стандартизирован, что позволяет применять его в клинической практике и исследовательских центрах, а также в условиях экстренной медицинской помощи.

3. Цистатин С может повысить чувствительность диагностики по сравнению с традиционными маркерами, такими как креатинин. Он может выявлять изменения в функции почек на более ранних стадиях, что позволяет начать лечение до развития выраженной почечной недостаточности.

4. В отличие от уровня креатинина, уровень Цистатина С менее зависим от мышечной массы и других факторов, что делает его более точным маркером функции почек у различных групп пациентов, включая тех, у кого могут быть ограничения по размеру мышечной массы.

5. Уровень Цистатина С может служить индикатором прогноза заболевания и исходов лечения, что позволит врачам более эффективно планировать дальнейшие действия и оценивать риски.

Определение Цистатина С иммуноферментным методом имеет значительные перспективы для диагностики и мониторинга острого почечного повреждения при геморрагической лихорадке с почечным синдромом. Это может улучшить качество медицинской помощи, повысить ее эффективность и уменьшить риск серьезных осложнений, связанных с почечной недостаточностью. Предлагаемая прогностическая оценка является дополнительным перспективным способом раннего выявления тяжелых осложнений ГЛПС в виде ОПН.

Предлагаемым способом были проведены сравнительные исследования крови 336 больных с ГЛПС, проходивших лечение в стационаре на базе Республиканской клинической инфекционной больницы (г. Уфа, Республика Башкортостан). Группу больных с легкой степенью тяжести составили 56 пациентов, со средней степенью тяжести ГЛПС составили 186 больных, с тяжелой степенью - 94 человек, в том числе с клиникой ОПН - 38 человек. Все пациенты, больные ГЛПС, инфицированы PUUV. Контрольную группу - группу сравнения составили 80 здоровых человек. Образцы венозной крови пациентов собирались при поступлении в день госпитализации. Никто из больных ГЛПС до сбора крови не получал противовирусное лечение. Всем пациентам проводилось определение величин рутинных лабораторных показателей (клинический и биохимический анализ крови и мочи), при тяжелых формах течения заболевания - УЗИ почек. Диагноз устанавливался на основании клинико-лабораторных данных в соответствии с клиническими рекомендациями (2016 г. ). Для статистической обработки данных использовался пакет программ SPSS версии 21. Референсные значения варьируют в диапазоне 0,60 до 1,15 мг/л.

Предлагаемый способ прогнозирования тяжести течения ГЛПС с развитием ОПН на основании показателя Цистатина С является дополнительным перспективным способом оценки степени тяжести течения ГЛПС на ранних сроках.

Сущность изобретения поясняется следующими клиническими примерами.

Пример 1.

Больная, 34 лет, поступила в Республиканскую клиническую больницу №4 г. Уфы с диагнозом: ГЛПС на 1-й день болезни в состоянии легкой степени с явлениями интоксикации, болевым синдромом в поясничной области, умеренной лихорадкой. При поступлении в стационар проведен забор крови. В общем анализе крови: лейкоцитоз до 7,5×10⁹/л; в биохимическом анализе крови: креатинин 130 мкмоль/л, мочевина 4,5 ммоль/л. Показатель цистатина С составил 1,75 мг/л в момент поступления на стационарное лечение. В анализе мочи: изостенурия, протеинурия до 0,02%, лейкоциты единичные, эритроциты 1-2 в поле зрения.

Заключение: легкая степень течения ГЛПС, верифицированная методом изучения показателя цистатина С в венозной крови. Клинический диагноз подтвержден методом нарастания титра антител в парных сыворотках больного.

Стационарное наблюдение больной в последующие периоды развития заболевания полностью подтвердило, что заболевание имело легкое течение и не сопровождалось развитием каких-либо осложнений. На 10-й день заболевания пациентка была выписана в удовлетворительном состоянии для диспансерного наблюдения.

Пример 2.

Больная, 29 лет, поступила в Республиканскую клиническую больницу №4 г. Уфы с диагнозом ГЛПС на 1-й день болезни в состоянии средней тяжести с явлениями интоксикации, болевым синдромом в поясничной области, лихорадка. При поступлении больного в стационар проводили забор крови. В общем анализе крови: лейкоцитоз - до 9,8×10 ⁹/л; в биохимическом анализе крови: креатинин - 176 мкмоль/л, мочевина - 5.7 ммоль/л. Показатель Цистатина С составил 1,76 мг/л, в момент поступления на стационарное лечение. В анализе мочи: изостенурия, протеинурия - до 0,033%, лейкоциты - единичные, эритроциты - 2-4-6 в поле зрения.

Заключение: средняя степень тяжести течения ГЛПС, верифицированная методом изучения показателя Цистатина С в венозной крови. Клинический диагноз подтвержден методом нарастания титра антител в парных сыворотках больного.

Стационарное наблюдение больного в последующие периоды развития заболевания полностью подтвердило, что заболевание имело среднетяжелое течение и не сопровождалось развитием каких-либо осложнений. На 17-й день заболевания пациент был выписан в удовлетворительном состоянии для диспансерного наблюдения.

Пример 3.

Больной, 43 год, поступил в Республиканскую клиническую больницу №4 г. Уфы с диагнозом ГЛПС на 2-й день лихорадки в состоянии средней тяжести. При поступлении наблюдались: лихорадка, интоксикация, болевой синдром в поясничной области, выраженный астеновегетативный синдром, снижения зрения. При поступлении в общем анализе крови: лейкоцитоз до 10,4×10⁹/л, креатинин - 229 мкмоль/л, мочевина - 14,4 ммоль/л. В анализе мочи: протеинурия до 0,62%, эритроциты - до 8-10 в поле зрения, лейкоциты большом количестве, наличие зернистые и гиалиновые цилиндры, клетки Дунаевского. Показатель Цистатина С в цельной крови - 1,93 мг/л, в момент поступления на стационарное лечение. Заключение: Геморрагическая лихорадка с почечным синдромом, средней степени тяжести, верифицированная методом изучения показателя Цистатина С. Диагноз подтвержден методом нарастания титра антител в парных сыворотках. На 7 сутки заболевания отмечается снижение суточного диуреза до 1005 мл. На 10 день болезни на фоне терапии диурез начал увеличиваться и с улучшением состояния больного. Анализы нормализовались, но в моче остались следы белка, гипостенурия. Стационарное наблюдение больного в последующие периоды развития заболевания полностью подтвердило, что заболевание имело среднетяжелое течение и не сопровождалось развитием каких-либо осложнений. На 20-й день заболевания пациент был выписан в удовлетворительном состоянии для диспансерного наблюдения.

Пример 4.

Больной, 39 лет, поступил в больницу с диагнозом ГЛПС на 4-й день болезни, когда состояние ухудшилось. Появилась лихорадка до 39 градусов, диарея, жалобы на боль в животе и поясничной области. В общем анализе крови при поступлении в стационар - гемоглобин 100 г/л, тромбоцитопения, повышение уровня креатинина до 320 мкмоль/л. Показатель Цистатина в цельной крови больного составил 1,94 мг/л, в момент поступления на стационарное лечение. В общем анализе мочи -белок 1,0%, эритроциты и наличие цилиндров.

Заключение: Геморрагическая лихорадка с почечным синдромом тяжелой степени, верифицированная методом изучения показателя Цистатина С. Диагноз был подтвержден клинически и методом нарастания титра антител в парных сыворотках. Лечение без гемодиализа. На 25-й день заболевания пациент был выписан в удовлетворительном состоянии для диспансерного наблюдения.

Пример 5.

Больной, 42 года, на 1-й день лихорадки, был госпитализирован с подозрением на геморрагическую лихорадку с почечным синдромом. Обратился в больницу с жалобами на головную боль, лихорадку, гиперемию глаз, сильную боль в мышцах и суставах, боли в пояснице. На 5 день с момента поступления у больного отмечается снижение диуреза до 900 мл в сутки при высоком содержании креатинина в крови - 486 мкмоль/л (олигоурический период). При поступлении общий анализ мочи показал высокое содержание белка - 1,8%. Анализ крови выявил умеренный лейкоцитоз и снижение числа тромбоцитов. Показатель Цистатина С в цельной крови составил 2,42 мг/л в момент поступления пациента в стационар.

Заключение: Геморрагическая лихорадка с почечным синдромом тяжелой степени без ОПН, верифицированная методом изучения Цистатина С. Диагноз подтвержден методом нарастания титра антител в парных сыворотках. Лечение без гемодиализа. На 30-й день заболевания пациент был выписан в удовлетворительном состоянии для диспансерного наблюдения.

Пример 6.

Больной, 33 лет, с подозрением на диагноз ГЛПС на 2-й день болезни поступил в больницу. При поступлении находился в тяжелом состоянии с явлениями интоксикации, лихорадки, болевым синдромом в поясничной области, боли в животе, петехеальная сыпь на теле, тошнота, рвота, выраженная слабость. Олигурия развилась на 5 день болезни, количество мочи до 740 мл в сутки. Анурия с 6-го дня болезни. Объем мочи составлял до 420 мл в сутки. Анурия длилась до 12 дня болезни. При поступлении в общем анализе крови: умеренный лейкоцитоз, в биохимическом анализе крови: креатинин - 461 мкмоль/л, мочевина - 19,0 ммоль/л, ионы калия -7,0 моль/л, снижение протромбинового индекса. В общем анализе мочи -гипостенурия, протеинурия до 2,8%, лейкоциты - единичные, микрогематурия, гиалиновые цилиндры, клетки Дунаевского. Показатель Цистатина С в крови составил 2,43 мг/л, в момент поступления на стационарное лечение.

Заключение: Геморрагическая лихорадка с почечным синдромом тяжелой степени с ОПН, верифицированная методом изучения показателя Цистатина С. Диагноз подтвержден методом нарастания титра антител в парных сыворотках. После одного сеанса гемодиализа состояние больного улучшилось и на 34-й день от начала заболевания пациент был выписан на амбулаторное лечение в удовлетворительном состоянии.

Пример 7.

Пациентка, 29 лет, с подозрением на диагноз ГЛПС, поступила в больницу на 3-й день болезни. При поступлении пациентка находилась в тяжелом состоянии с выраженной интоксикацией, высокой лихорадкой, жаловалась на интенсивные боли в поясничной области и животе. У пациентки наблюдалась петехиальная сыпь на коже, сильная тошнота, неоднократная рвота, выраженная слабость. На 5-й день болезни развилась олигурия, объем мочи в сутки составил 680 мл. Анурия наступила на 7-й день болезни, с объемом мочи до 400 мл в сутки, и длилась до 14-го дня болезни. В общем анализе крови при поступлении наблюдался выраженный лейкоцитоз. В биохимическом анализе крови выявлено значительное повышение уровня креатинина до 488 мкмоль/л, уровень мочевины 21,5 ммоль/л, ионы калия достигли 7,3 ммоль/л, наблюдалось значительное снижение протромбинового индекса. В общем анализе мочи выявлены гипостенурия, протеинурия до 3,1%, наличие единичных лейкоцитов, микрогематурия, гиалиновые цилиндры и клетки Дунаевского. Показатель Цистатина С в крови составил 2,65 мг/л в момент поступления на стационарное лечение.

Заключение: Геморрагическая лихорадка с почечным синдромом тяжелой степени с острой почечной недостаточностью, верифицированная методом определения уровня Цистатина С. Диагноз подтвердили путем исследования нарастания титра антител в парных сыворотках крови. После двух сеансов гемодиализа состояние пациентки заметно улучшилось, и на 36-й день от начала заболевания она была выписана на амбулаторное лечение в удовлетворительном состоянии.

Изобретение относится к медицине, а именно к клинической лабораторной диагностике, биохимии, патологической физиологии, терапии и инфектологии, и может быть использовано для прогнозирования тяжести течения геморрагической лихорадки с почечным синдромом (ГЛПС). Проводят определение количественного содержания биохимического показателя в крови пациента, в качестве которого определяют Цистатин С. При значении его количественного содержания 1,76-1,93 мг/л прогнозируют среднюю степень течения ГЛПС, 1,94-2,42 мг/л - тяжелую степень течения ГЛПС, 2,43 мг/л и выше - тяжелую степень течения ГЛПС, осложненную острой почечной недостаточностью. Способ обеспечивает возможность снижения трудоемкости и повышения точности прогнозирования тяжести течения ГЛПС и высокого риска острой почечной недостаточности на ранних стадиях заболевания, за счет определения содержания в крови специфического диагностического маркера - Цистатина С, служащего индикатором тубулярной дисфункции почек, и способного предсказать ранее развитие острой почечной недостаточности. 1 табл., 7 пр.

Способ прогнозирования тяжести течения геморрагической лихорадки с почечным синдромом (ГЛПС), включающий определение количественного содержания биохимического показателя в крови пациента, отличающийся тем, что в качестве показателя определяют Цистатин С, и при значении его количественного содержания 1,76-1,93 мг/л прогнозируют среднюю степень течения ГЛПС, 1,94-2,42 мг/л - тяжелую степень течения ГЛПС, 2,43 мг/л и выше - тяжелую степень течения ГЛПС, осложненную острой почечной недостаточностью.