ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ
Настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции с меченым радиоактивным изотопом соединением, представляющим собой антагонист GRPR, с высокой концентрацией и высокой химической и радиохимической стабильностью, что обеспечивает их применение в качестве коммерческого лекарственного средства для диагностических и/или терапевтических целей.
ПРЕДПОСЫЛКИ СОЗДАНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Бомбезин был впервые выделен из краснобрюхой жерлянки Bombina bombina, и было продемонстрировано, что он имитирует гастрин-высвобождающий пептид (GRP) и нейромедин B (NMB) млекопитающих [Scopinaro F. et al. Eur J. Nucl Med Mol Imaging 2003, 30 (10): 1378-1382].
Гастрин-высвобождающий пептид (GRP), фактор роста на основе бомбезиноподобного пептида, регулирует многочисленные функции желудочно-кишечного тракта и центральной нервной системы, в том числе высвобождение желудочно-кишечных гормонов, сокращение гладкомышечных клеток и пролиферацию эпителиальных клеток. Он представляет собой выраженный митоген для физиологических и неопластических тканей, и он может играть роль в нарушении регуляции роста и канцерогенезе.
Эффекты GRP главным образом опосредованы посредством связывания с его рецептором, рецептором GRP (GRPR), рецептором, связанным с G-белком, изначально выделенным из клеточной линии мелкоклеточного рака легкого. Активация пути GRP/GRPR была описана при нескольких видах рака, в том числе раке молочной железы, предстательной железы, матки, яичников, толстой кишки, поджелудочной железы, желудка, легкого (мелкоклеточного и немелкоклеточного), плоскоклеточном раке головы и шеи и различных опухолях головного мозга и нервной системы.
При раке молочной железы сверхэкспрессия GRPR может достигать очень высокой плотности в зависимости от типа опухоли (например, экспрессия 70-90% в образцах протокового рака молочной железы) [Van de Wiele C. et al. J Nucl Med 2001, 42 (11): 1722-1727].
GRPR значительно сверхэкспрессируется при раке предстательной железы, при этом исследования на клеточных линиях рака предстательной железы человека и моделях ксенотрансплантатов показали как высокую аффинность (уровень нМ), так и высокое поглощение опухолью (% ID/г), однако еще полностью не выяснена относительная экспрессия GRPR при развитии заболевания от ранней до поздней стадии [Waters, et al. 2003, Br J Cancer. Jun 2; 88 (11): 1808-1816].
У пациентов с колоректальным раком наличие GRP и экспрессию GRPR определяли посредством иммуногистохимического анализа в случайно выбранных образцах рака толстой кишки, в том числе LN и метастатических поражениях. Более 80% образцов аберрантно экспрессировали либо GRP, либо GRPR, и более 60% экспрессировали как GRP, так и GRPR, при этом экспрессию не наблюдали в прилегающем нормальном здоровом эпителии [Scopinaro F. et al. Cancer Biother Radiopharm 2002, 17 (3): 327-335].
GRP физиологически присутствует в нейроэндокринных клетках легких и играет роль в стимуляции развития и созревания легких. Однако, по-видимому, он также участвует в нарушении регуляции роста и канцерогенезе. Стимуляция GRP приводит к повышению высвобождения лигандов рецептора эпидермального фактора роста (EGFR) с последующей активацией EGFR и нисходящих сигнальных путей митоген-активируемой протеинкиназы. При использовании клеточных линий немелкоклеточного рака легкого (NSCLC) было подтверждено, что как EGF, так и GRP стимулируют пролиферацию NSCLC, а ингибирование либо EGFR, либо GRPR приводило к клеточной смерти [Shariati F. et al. Nucl Med Commun 2014, 35 (6): 620-625].
В радиационной медицине агонисты пептидных рецепторов уже давно являются предпочтительными лигандами для разработки и применения индикаторов. Обоснование применения конструкций на основе агонистов было связано с интернализацией комплекса рецептор-радиолиганд, обеспечивающей повышенное накопление радиоактивных элементов внутри клеток-мишеней. В случае меченных радионуклидами пептидов эффективный опосредованный рецепторами эндоцитоз в ответ на стимуляцию агонистами обеспечивает высокое поглощение радиоактивности in vivo тканями-мишенями, что является основным условием для оптимальной визуализации злокачественных новообразований. Однако произошел сдвиг парадигмы, когда селективные в отношении рецепторов пептидные антагонисты продемонстрировали предпочтительное биораспределение, в том числе значительно большее поглощение опухолью in vivo, по сравнению с высокоактивными агонистами. Еще одним преимуществом, демонстрируемым антагонистами GRPR, является более безопасное клиническое применение, не столько в отношении доз меток для текущей диагностической точки зрения, сколько с точки зрения более высоких доз для потенциальных терапевтических целей, поскольку применение антагонистов не предусматривает острых биологических побочных эффектов [Stoykow C. et al. Theranostics 2016, 6 (10): 1641-1650].
Недавно было обнаружено, что некоторые антагонисты GRPR, например NeoB, могут быть помечены различными радионуклидами и потенциально могут применяться для визуализации и для лечения видов рака, при которых экспрессируется GRPR, например без ограничения рака предстательной железы и рака молочной железы.
В доклинических моделях [68Ga]-NeoB и [177Lu]-NeoB продемонстрировали высокую аффинность в отношении GRPR, экспрессируемого в опухоли молочной железы, опухоли предстательной железы и желудочно-кишечной стромальной опухоли (GIST), а также низкую степень интернализации при связывании со специфическим рецептором. Способность меченного радиоактивным изотопом пептида нацеливаться на опухоль, экспрессирующую GRPR, была подтверждена в исследованиях визуализации и биораспределения in vivo в животных моделях [Dalm et al Journal of nuclear medicine 2017, Vol. 58 (2): 293-299].
Для этого применения в радиомедицине связывающийся с целевым клеточным рецептором фрагмент обычно соединен с хелатообразователем, который способен образовывать устойчивый комплекс с ионами металла радионуклида. Это радиофармацевтическое лекарственное средство затем доставляется к клетке-мишени, и распад радионуклида затем обеспечивает высвобождение электронов высокой энергии, позитронов или альфа-частиц, а также гамма-лучей в целевом сайте.
Одной технической проблемой, связанной с этими радиофармацевтическими лекарственными продуктами, является то, что распад радионуклида происходит постоянно, например, также при изготовлении и при хранении лекарственного продукта, и испускаемые излучения высокой энергии вызывают расщепление химических связей молекул, которые образуют часть лекарственного продукта. Это часто называют радиолизом или радиолитическим разложением. Радиолитическое разложение связывающегося с рецептором фрагмента лекарственного средства может приводить к снижению его эффективности работы в качестве диагностического и/или терапевтического средства.
Низкая стабильность этих радиофармацевтических лекарственных продуктов и отсутствие какого-либо их значительного периода хранения требовало, чтобы эти лекарственные средства до настоящего времени изготавливались в виде лекарственной формы со стандартной дозой для конкретного пациента в лабораториях в больницах и вводились сразу же пациенту, который должен был находиться в больнице, уже ожидая радиологического лечения.
Для снижения радиолиза радиофармацевтических лекарственных продуктов и, таким образом, повышения стабильности более или менее успешно были исследованы различные стратегии: лекарственный продукт можно хранить при низких температурах, или получать с высоким разбавлением, или можно добавлять стабилизаторы.
Однако добавление стабилизаторов может быть проблематичным, поскольку эти химические вещества могут иметь отрицательное влияние на комплексообразование радионуклида с хелатообразователем или они могут иметь ограниченную растворимость и осаждаться из раствора. Сообщалось об этаноле как о стабилизаторе, препятствующем радиолизу (WO 2008/009444). Хотя этанол может не иметь отрицательного влияния на комплексообразование или растворимость, большие количества этанола в растворе для инфузии могут быть проблематичными с точки зрения физиологии и могут иметь отрицательное влияние на переносимость лекарственного продукта.
Получение лекарственного продукта в высоком разбавлении имеет недостаток, заключающийся в том, что пациентам необходимо вводить большие объемы растворов для инфузии. Для удобства пациентов и по причинам переносимости лекарственного средства будет очень желательно обеспечивать радиофармацевтический лекарственный продукт в высокой концентрации. Однако данные очень концентрированные растворы особенно склонны к радиолизу. Таким образом, есть противоречивые позиции между, с одной стороны, избеганием радиолиза путем разбавления лекарственного продукта, а, с другой стороны, избеганием дискомфорта для пациента при лечении путем обеспечения концентрированного раствора лекарственного средства. В Mathur et al. Cancer Biotherapy and Radiopharmaceuticals, 2017, 32(7), 266-273 сообщалось о продукте с высокой концентрацией, и он заявлялся как готовый к применению. Однако эта композиция может иметь проблемы в отношении переносимости, поскольку она содержит большие количества этанола.
Таким образом, остается проблема создания готовой к применению радиофармацевтической композиции, которую можно получать на промышленном уровне и доставлять в виде достаточно стабильного и стерильного раствора с высокой концентрацией, который обеспечивает удобный для пациента небольшой объем раствора для инфузии и который имеет композицию с высокой физиологической переносимостью (например, композицию, которая не содержит этанола).
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Авторы настоящего изобретения обнаружили путь для разработки и получения высококонцентрированного раствора комплекса радионуклида, который химически и радиохимически является очень стабильным, даже если он хранится при температурах окружающей среды или кратковременно при повышенных значениях температуры, так что его можно получать в промышленном масштабе и поставлять в виде готового к применению радиофармацевтического продукта.
Настоящее изобретение представлено в различных аспектах, кратко изложенных далее.
1. Фармацевтическая композиция, содержащая:
(a) комплекс, образованный
(ai) радионуклидом и
(aii) фрагментом, связывающим антагонист пептида рецептора GRP, соединенным с хелатообразователем; и
(b) по меньшей мере два стабилизатора, препятствующих радиолитическому разложению; и
(c) необязательно поверхностно-активное вещество.
2. Фармацевтическая композиция согласно варианту осуществления 1, где указанный радионуклид выбран из 111In, 18F, 211At, 82Rb, 123I, 131I, 133mIn, 99mTc, 94mTc, 67Ga, 66Ga, 68Ga, 52Fe, 169Er, 72As, 97Ru, 203Pb, 212Pb, 62Cu, 64Cu, 67Cu, 186Re, 188Re, 86Y, 90Y, 51Cr, 52mMn, 157Gd, 177Lu, 161Tb, 69Yb, 175Yb, 105Rh, 166Dy, 166Ho, 153Sm, 149Pm, 151Pm, 172Tm, 121Sn, 117mSn, 213Bi, 212Bi, 142Pr, 143Pr, 198Au, 199Au, 89Zr, 225Ac, 43Sc, 44Sc и 47Sc, предпочтительно выбран из 111In, 177Lu, 225Ac и 68Ga, более предпочтительно представляет собой 177Lu.
3. Фармацевтическая композиция согласно варианту осуществления 1, где указанный радионуклид присутствует в концентрации, которая обеспечивает объемную радиоактивность, составляющую по меньшей мере 370 МБк/мл (в EOP) ± 37 МБк/мл (± 10%).
4. Фармацевтическая композиция согласно варианту осуществления 1, где указанный хелатообразователь выбран из DOTA, DTPA, NTA, EDTA, DO3A, NOC и NOTA, предпочтительно представляет собой DOTA.
5. Фармацевтическая композиция согласно варианту осуществления 1, где указанный фрагмент, связывающий антагонист пептида рецептора GRP, соединенный с хелатообразователем, представляет собой NeoB формулы (I):
(I).
6. Фармацевтическая композиция согласно варианту осуществления 1, где указанные по меньшей мере два стабилизатора выбраны из гентизиновой кислоты (2,5-дигидроксибензойной кислоты) или ее солей, аскорбиновой кислоты (L-аскорбиновой кислоты, витамина С) или ее солей (например, аскорбата натрия), метионина, гистидина, мелатонина, этанола и Se-метионина, предпочтительно выбраны из гентизиновой кислоты или ее солей и аскорбиновой кислоты или ее солей.
7. Фармацевтическая композиция согласно варианту осуществления 6, где указанные по меньшей мере два стабилизатора представляют собой гентизиновую кислоту или ее соли и аскорбиновую кислоту или ее соли.
8. Фармацевтическая композиция согласно варианту осуществления 7, где соотношение гентизиновой кислоты и аскорбиновой кислоты составляет от 1:16 до 1:10, как правило, от 1:15 до 1:10, например, от 1:12 до 1:11.
9. Фармацевтическая композиция согласно варианту осуществления 7 или 8, где указанная гентизиновая кислота или ее соли присутствуют в концентрации по меньшей мере 1000 мкг/мл, например, от 1000 мкг/мл до 1500 мкг/мл.
10. Фармацевтическая композиция согласно вариантам осуществления 7-9, где указанная аскорбиновая кислота или ее соли присутствуют в концентрации по меньшей мере 10000 мкг/мл, предпочтительно по меньшей мере 12000 мкг/мл, предпочтительно по меньшей мере 15000 мкг/мл, например, от 12000 до 18000 мкг/мл.
11. Фармацевтическая композиция согласно вариантам осуществления 7-10, где указанная гентизиновая кислота или ее соли присутствуют в концентрации по меньшей мере 1000 мкг/мл, например, от 1000 мкг/мл до 1500 мкг/мл, а аскорбиновая кислота или ее соли присутствуют в концентрации 15000 мкг/мл, например, от 12000 до 18000 мкг/мл.
12. Фармацевтическая композиция согласно вариантам осуществления 1-11, где указанный фармацевтический состав характеризуется радиохимической чистотой выше 95% до 72 часов, предпочтительно выше 98% до 72 часов.
13. Фармацевтическая композиция согласно вариантам осуществления 1-12, где указанное поверхностно-активное вещество представляет собой неионогенное поверхностно-активное вещество.
14. Фармацевтическая композиция согласно варианту осуществления 13, где указанное неионогенное поверхностно-активное вещество выбрано из макрогол 15 гидроксистеарата, полоксамера, полисорбата 20, полисорбата 80 или поливинилпирролидона со средней молекулярной массой 10000.
15. Фармацевтическая композиция согласно варианту осуществления 14, где указанное неионогенное поверхностно-активное вещество представляет собой макрогол 15 гидроксистеарат.
16. Фармацевтическая композиция согласно вариантам осуществления 1-15, где указанное поверхностно-активное вещество присутствует в концентрации по меньшей мере 5 мкг/мл, предпочтительно по меньшей мере 25 мкг/мл и более предпочтительно по меньшей мере 50 мкг/мл.
17. Фармацевтическая композиция согласно варианту осуществления 16, где указанное поверхностно-активное вещество присутствует в концентрации от 5 мкг/мл до 5000 мкг/мл, предпочтительно от 25 мкг/мл до 2000 мкг/мл и более предпочтительно от 50 мкг/мл до 1000 мкг/мл.
18. Фармацевтическая композиция согласно варианту осуществления 17, где указанное поверхностно-активное вещество присутствует в концентрации 100 мкг/мл.
19. Фармацевтическая композиция, содержащая:
(a) комплекс, образованный
(ai) радионуклидом 177лютеций (Lu-177) и
(aii) NeoB формулы (I):
(I); и
(b) гентизиновую кислоту или ее соли и аскорбиновую кислоту или ее соли;
(c) необязательно макрогол 15 гидроксистеарат,
(d) необязательно по меньшей мере еще одно фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество.
20. Фармацевтическая композиция согласно варианту осуществления 19, где по меньшей мере еще одно фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество выбрано из буфера, и/или растворителя, и/или регулятора рН.
21. Фармацевтическая композиция согласно варианту осуществления 20, где буфер выбран из ацетатного буфера, цитратного буфера и фосфатного буфера, предпочтительно ацетатного буфера.
22. Фармацевтическая композиция согласно варианту осуществления 20 или 21, где растворитель представляет собой воду для инъекций.
23. Фармацевтическая композиция согласно варианту осуществления 20, 21 или 22, где регулятор pH представляет собой NaOH.
24. Фармацевтическая композиция, состоящая из:
(a) комплекса, образованного
(ai) радионуклидом 177лютеций (Lu-177) и
(aii) NeoB формулы (I):
(I); и
(b) гентизиновой кислоты или ее солей и аскорбиновой кислоты или ее солей;
(c) макрогол 15 гидроксистеарата;
(d) ацетатного буфера;
(e) воды для инъекций и
(f) NaOH,
(g) DTPA.
25. Фармацевтическая композиция согласно любому из предыдущих вариантов осуществления, где фармацевтическая композиция представляет собой водный раствор.
26. Фармацевтическая композиция согласно любому из предыдущих вариантов осуществления, где фармацевтическая композиция представляет собой раствор для инфузии.
27. Фармацевтическая композиция согласно любому из предыдущих вариантов осуществления для применения в лечении или предупреждении рака, как правило, GRPR-положительного рака.
28. Фармацевтическая композиция согласно любому из предыдущих вариантов осуществления, где указанный раствор получен в промышленном масштабе, в частности получен с размером партии по меньшей мере 0,5 Ки.
29. Фармацевтическая композиция согласно любому из предыдущих вариантов осуществления, которая предназначена для коммерческого применения.
30. Способ изготовления указанной фармацевтической композиции, определенной выше, включающий стадии способа:
(1) образование комплекса радионуклида и фрагмента, связывающего антагонист пептида рецептора GRP, соединенного с хелатообразователем посредством
(1.1) получения водного раствора, содержащего радионуклид и только один стабилизатор, который представляет собой гентизиновую кислоту или ее соли, препятствующий радиолитическому разложению;
(1.2) получения водного раствора, содержащего фрагмент, связывающий антагонист пептида рецептора GRP, соединенный с хелатообразователем и необязательно поверхностно-активным веществом; и
(1.3) смешивания растворов, полученных на стадиях (1.1) и (1.2), нагревания полученной смеси и необязательного фильтрования полученного раствора;
(2) разбавление раствора комплекса, полученного на стадии (1), посредством
(2.1) получения водного раствора для разбавления, необязательно содержащего только один стабилизатор, который представляет собой аскорбиновую кислоту, препятствующий радиолитическому разложению; и
(2.2.) смешивания раствора комплекса, полученного на стадии (1), с раствором для разбавления, полученным на стадии (2.1), с получением конечного раствора.
31. Способ согласно варианту осуществления 30, где раствор на стадии (1.1) содержит 177LuCl3 в качестве радионуклида и HCl.
32. Способ согласно любому из вариантов осуществления 30-31, где раствор, приготовленный на стадии (1.1), содержит только один стабилизатор, который представляет собой гентизиновую кислоту или ее соль в концентрации по меньшей мере 1000 мкг/мл, например, от 1000 мкг/мл до 1500 мкг/мл.
33. Способ согласно любому из вариантов осуществления 30-32, где раствор на стадии (1.1) дополнительно содержит буфер, предпочтительно ацетатный буфер.
34. Способ согласно любому из вариантов осуществления 30-33, где фрагмент, связывающий антагонист пептида рецептора GRP, соединенный с хелатообразователем в растворе на стадии (1.2), представляет собой NeoB формулы (I):
(I).
35. Способ согласно любому из вариантов осуществления 30-34, где раствор со стадии (1.2) дополнительно содержит поверхностно-активное вещество, которое представляет собой макрогол 15 гидроксистеарат.
36. Способ согласно любому из вариантов осуществления 30-35, где раствор, полученный на стадии (2.1), содержит только один стабилизатор, который представляет собой аскорбиновую кислоту или ее соли в концентрации по меньшей мере 10000 мкг/мл, предпочтительно по меньшей мере 12000 мкг/мл, предпочтительно по меньшей мере 15000 мкг/мл, например, от 12000 до 18000 мкг/мл.
37. Способ согласно любому из вариантов осуществления 30-36, где раствор на стадии (1.2) дополнительно содержит макрогол 15 гидроксистеарат в концентрации от 5 мкг/мл до 5000 мкг/мл, предпочтительно от 25 мкг/мл до 2000 мкг/мл, более предпочтительно от 50 мкг/мл до 1000 мкг/мл и еще более предпочтительно в концентрации 100 мкг/л.
38. Способ согласно любому из вариантов осуществления 30-37, где на стадии (1.3) полученную смесь нагревают до температуры от 70 до 99°С, предпочтительно от 90 до 98°С, в течение от 1 до 59 мин., предпочтительно от 2 до 15 мин.
39. Способ согласно любому из вариантов осуществления 30-38, где комплекс, полученный в конце стадии (1.3), дополнительно фильтруют через фильтр 0,20 мкм.
40. Способ согласно любому из вариантов осуществления 30-39, где раствор на стадии (2.1) дополнительно содержит секвестрирующее средство, которое представляет собой диэтилентриаминпентауксусную кислоту (DTPA) или ее соль.
41. Способ согласно любому из вариантов осуществления 30-40, где раствор на стадии (2.1) дополнительно содержит регулятор pH, который представляет собой NaOH.
42. Способ согласно любому из вариантов осуществления 30-41, где раствор со стадии (2.1) дополнительно содержит воду для инъекций.
43. Способ согласно любому из вариантов осуществления 30-42, дополнительно включающий стадии способа:
(3) стерильная фильтрация раствора, полученного на стадии (2):
(4) асептическое распределение отфильтрованного раствора, полученного на стадии (3), в контейнеры для стандартных доз, в которых указанный радионуклид присутствует в концентрации, которая обеспечивает объемную радиоактивность, составляющую по меньшей мере 370 МБк/мл (в EOP) ± 37 МБк/мл (± 10%).
44. Способ согласно любому из вариантов осуществления 30-43, где контейнеры для стандартных доз на стадии (4) представляют собой флаконы, укупоренные пробкой, помещенные в свинцовый контейнер.
45. Водный раствор фармацевтического средства, полученный посредством способа согласно любому из вариантов осуществления 30-44.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
ОПРЕДЕЛЕНИЯ
Далее определены термины, применяемые в данном документе, и приведены их значения.
Термин "приблизительно" или "прибл." в данном документе имеет такое значение, что следующее значение может изменяться на ± 20%, предпочтительно ± 10%, более предпочтительно ± 5%, еще более предпочтительно ± 2%, еще более предпочтительно ± 1%.
Если не определено иное, "%" в данном документе имеет значение весового процента (вес. %), также называемого процент в пересчете веса на вес (вес./вес. %).
"Общая концентрация": сумма одного или нескольких значений отдельных концентраций.
"Водный раствор": раствор одного или нескольких растворенных веществ в воде.
"Комплекс, образованный
(ai) радионуклидом и
(aii) органическим фрагментом, связывающимся с клеточным рецептором, соединенным с хелатообразователем":
ион металла-радионуклида образует нековалентную связь с функциональными группами хелатообразователя, например, аминами или карбоновыми кислотами. Хелатообразователь содержит по меньшей мере две такие комплексообразующие функциональные группы, способные образовывать хелатный комплекс.
"Буфер для pH от 4 до 6,0": может представлять собой ацетатный буфер, цитратный буфер (например, цитрат+HCl или лимонная кислота+гидрофосфат динатрия) или фосфатный буфер (например, дигидрофосфат натрия+гидрофосфат динатрия), предпочтительно указанный буфер представляет собой ацетатный буфер, предпочтительно указанный ацетатный буфер состоит из уксусной кислоты и ацетата натрия.
"Секвестрирующее средство", хелатообразователь, подходящий для образования комплексов с ионами металлов-радионуклидов, предпочтительно DTPA: диэтилентриаминпентауксусная кислота.
"Регулятор pH" представляет собой химическое вещество, которое добавляют к раствору для регуляции значения pH раствора и, таким образом, для достижения требуемых характеристик. Контроль рН можно осуществлять посредством добавления в состав регулятора рН. Примеры регуляторов pH включают обычно используемые кислоты и основания, буферы и смеси кислот и оснований. Например, основания, которые можно применять, включают NaOH, KOH, Ca(OH)2, бикарбонат натрия, карбонат калия и карбонат натрия. Примеры кислот, которые можно применять, включают хлористоводородную кислоту, уксусную кислоту, лимонную кислоту, муравьиную кислоту, фумаровую кислоту и сульфаминовую кислоту. Предпочтительно регулятор pH представляет собой основание, более предпочтительно NaOH. Диапазон рН жидкости может представлять собой любой подходящий диапазон, например, от приблизительно 2 до приблизительно 14.
"Для коммерческого применения": лекарственный продукт, например, водный раствор фармацевтического средства, может получить (предпочтительно получил) регистрационное свидетельство от органов здравоохранения, например, Управления по контролю за продуктами и лекарствами США или Европейского агентства по лекарственным средствам, путем соответствия всем требованиям к качеству и стабильности лекарственного средства, как того требуют данные органы здравоохранения, может быть изготовлен (предпочтительно изготовлен) в или на месте производства фармацевтических средств в промышленном масштабе, с последующей процедурой тестирования контроля качества, и может быть поставлен (предпочтительно поставляется) удаленно расположенным конечным пользователям, например, больницам или пациентам.
Хелатообразователь в контексте настоящего изобретения может представлять собой
DOTA: 1,4,7,10-тетраазациклододекан-1,4,7,10-тетрауксусная кислота,
DTPA: диэтилентриаминпентауксусная кислота,
NTA: нитрилотриуксусная кислота,
EDTA: этилендиаминтетрауксусная кислота,
DO3A: 1,4,7,10-тетраазациклододекан-1,4,7-триуксусная кислота,
NOTA: 1,4,7-триазациклононан-1,4,7-триуксусная кислота,
Тризоксетан,
Тетраксетан
или их смеси, предпочтительно представляет собой DOTA.
"Фрагмент, связывающийся с клеточным рецептором": химическая молекула, которая связывается с помощью по меньшей мере части своей молекулы с молекулой рецептора на поверхности клетки. Фрагмент, связывающийся с клеточным рецептором, для которого настоящее изобретение является особенно подходящим, представляет собой связывающийся с рецептором соматостатина пептид, предпочтительно указанный связывающийся с рецептором соматостатина пептид выбран из октреотида, октреотата, ланреотида, вапреотида, пасиреотида, илатреотида, пентетреотида, депреотида, сатореотида, велдореотида, предпочтительно выбран из октреотида и октреотата.
"Соединенный": органический фрагмент, связывающийся с клеточным рецептором либо непосредственно соединен с хелатообразователем, или соединен посредством линкерной молекулы, предпочтительно он непосредственно соединен. Соединяющая(соединяющие) связь(связи) является(являются) либо ковалентной(ковалентными), либо нековалентной(нековалентными) связью(связями) между связывающимся с клеточным рецептором органическим фрагментом (и линкером) и хелатообразователем, предпочтительно связь(связи) является(являются) ковалентной(ковалентными).
"Стабилизатор, препятствующий радиолитическому разложению": стабилизирующее средство, которое защищает органические молекулы от радиолитического разложения, например, когда гамма-лучи, испускаемые радионуклидом, расщепляют связь между атомами органических молекул и образуются радикалы, эти радикалы затем поглощаются стабилизатором, что предотвращает прохождение радикалами каких-либо других химических реакций, что может приводить к появлению нежелательных, потенциально неэффективных или даже токсичных молекул. Таким образом, данные стабилизаторы также называются "акцепторами свободных радикалов" или коротко "акцепторами радикалов". Другими альтернативными терминами для этих стабилизаторов являются "усилители устойчивости к облучению", "радиолитичеcкие стабилизаторы" или просто "гасители".
"Радиохимическая чистота": представляет собой процент указанного радионуклида, который присутствует в указанной химической или биологической форме. Радиохроматографические методы, такие как метод HPLC или метод мгновенной тонкослойной хроматографии (iTLC), являются наиболее распространенными методами определения радиохимической чистоты в радиационной фармации.
Используемые в данном документе термины “эффективное количество” или “терапевтически эффективное количество” соединения относятся к количеству соединения, которое будет вызывать биологический или медицинский ответ у субъекта, например, облегчать симптомы, уменьшать выраженность состояний, замедлять или задерживать прогрессирование заболевания или предупреждать возникновение заболевания.
Используемые в данном документе термины “замещенный” или “необязательно замещенный” относятся к группе, которая необязательно замещена одним или несколькими заместителями, выбранными из: галогена, -OR’, -NR’R”, -SR’, -SiR’R”R’”, -OC(O)R’, -C(O)R’, -CO2R’, -C(O)NR’R”, -OC(O)NR’R”, -NR”C(O)R’, -NR’-C(O)NR”R’”, -NR”C(O)OR’, -NR-C(NR’R”R’”)=NR”“, -NR-C(NR’R”)=NR’” -S(O)R’, -S(O)2R’, -S(O)2NR’R”, -NRSO2R’, -CN, -NO2, -R’, -N3, -CH(Ph)2, фтор(C1-C4)алкоксо и фтор(C1-C4)алкил, в количестве от нуля до общего числа открытых валентностей в ароматической кольцевой системе; и где R’, R”, R’” и R”“ могут быть независимо выбраны из водорода, алкила, гетероалкила, циклоалкила, гетероциклоалкила, арила и гетероарила. Если соединение по настоящему изобретению содержит более чем одну группу R, например, каждая из групп R выбрана независимо, как и каждая из групп R’, R”, R’” и R”“, если присутствует более чем одна из этих групп.
Используемые в данном документе термины "алкил", сами по себе или как часть другого заместителя, относятся к линейной или разветвленной алкильной функциональной группе, содержащей 1-12 атомов углерода. Подходящие алкильные группы включают метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, втор-бутил и трет-бутил, пентил и его изомеры (например, н-пентил, изопентил), а также гексил и его изомеры (например, н-гексил, изогексил).
Используемые в данном документе термины "гетероарил" относятся к полиненасыщенной ароматической кольцевой системе, содержащей одно кольцо или несколько ароматических колец, конденсированных друг с другом или соединенных ковалентно, содержащих 5-10 атомов, при этом по меньшей мере одно кольцо является ароматическим, и по меньшей мере один атом в кольце является гетероатомом, выбранным из N, O и S. Гетероатомы азота и серы необязательно могут быть окислены, а гетероатомы азота необязательно могут быть кватернизованы. Такие кольца могут быть слиты с арильным, циклоалкильным или гетероциклильным кольцом. Неограничивающие примеры такого гетероарила, включают фуранил, тиофенил, пирролил, пиразолил, имидазолил, оксазолил, изоксазолил, тиазолил, изотиазолил, триазолил, оксадиазолил, тиадиазолил, тетразолил, оксатриазолил, тиатриазолил, пиридинил, пиримидил, пиразинил, пиридазинил, оксазинил, диоксинил, тиазинил, триазинил, индолил, изоиндолил, бензофуранил, изобензофуранил, бензотиофенил, изобензотиофенил, индазолил, бензимидазолил, бензоксазолил, пуринил, бензотиадиазолил, хинолинил, изохинолинил, циннолинил, хиназолинил и хиноксалинил.
Используемый в данном документе термин "арил" относится к полиненасыщенной ароматической гидрокарбильной группе, содержащей одно кольцо или несколько конденсированных друг с другом ароматических колец, содержащих 6-10 атомов в кольце, при этом по меньшей мере одно кольцо является ароматическим. Ароматическое кольцо необязательно может включать одно или два дополнительных кольца (циклоалкил, гетероциклил или гетероарил, как определено в данном документе), конденсированных с ним. Подходящие арильные группы включают фенил, нафтил и фенильное кольцо, слитое с гетероциклилом, как например бензопиранил, бензодиоксолил, бензодиоксанил и т. п.
Используемый в данном документе термин "галоген" относится к группе, представленной фтором (-F), хлором (-Cl), бромом (-Br) или йодом (-I).
Используемые в данном документе термины "необязательно замещенная алифатическая цепь" относится к необязательно замещенной алифатической цепи, содержащей от 4 до 36 атомов углерода, предпочтительно от 12 до 24 атомов углерода.
В данном документе далее настоящее изобретение описано более подробно и проиллюстрировано на примерах.
Используемый в данном документе термин "соотношение гентизиновой кислоты и аскорбиновой кислоты" представляет собой соотношение значений концентрации свободной кислоты (мкг/мл:мкг/мл), т. е. соотношение значений концентрации в отношении GA и AA как к свободным кислотам, где концентрация противоионов, таких как натрий (Na), в расчет не принимается.
В целом настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, в частности радиофармацевтической композиции. Фармацевтическая композиция предназначена для внутривенного (IV) использования/применения/введения. Раствор является стабильным, концентрированным и готовым к применению.
Радиофармацевтическая композиция согласно настоящему изобретению содержит:
(a) комплекс, образованный
(ai) радионуклидом и
(aii) фрагментом, связывающим антагонист пептида рецептора GRP, соединенным с хелатообразователем; и
(b) по меньшей мере два стабилизатора, препятствующих радиолитическому разложению; и
(c) необязательно поверхностно-активное вещество.
Меченный радиоактивным изотопом антагонист GRPR
Указанный комплекс характеризуется следующей формулой:
MC- S - P,
где
М представляет собой радионуклид, подходящий для радиационной медицины,
C представляет собой хелатор, который связывает M,
S представляет собой необязательный спейсер, ковалентно связанный между C и N-концом P;
P представляет собой антагонист пептида рецептора GRP, предпочтительно общей формулы:
Xaa1-Xaa2-Xaa3-Xaa4-Xaa5-Xaa6-Xaa7-Z;
Xaa1 отсутствует или выбран из группы, состоящей из аминокислотных остатков Asn, Thr, Phe, 3-(2-тиенил)аланина (Thi), 4-хлорфенилаланина (Cpa), α-нафтилаланина (α-Nal), β-нафтилаланина (β-Nal), 1,2,3,4-тетрагидроноргарман-3-карбоновой кислоты (Tpi), Tyr, 3-йодтирозина (o-I-Tyr), Trp и пентафторфенилаланина (5-F-Phe) (все в виде L- или D-изомеров);
Xaa2 представляет собой Gln, Asn или His;
Xaa3 представляет собой Trp или 1,2,3,4-тетрагидроноргарман-3-карбоновую кислоту (Tpi);
Xaa4 представляет собой Ala, Ser или Val;
Xaa5 представляет собой Val, Ser или Thr;
Xaa6 представляет собой Gly, саркозин (Sar), D-Ala или β-Ala;
Xaa7 представляет собой His или (3-метил)гистидин (3-Me)His;
Z выбран из -NHOH, -NHNH2, -NH-алкила, -N(алкил)2 и -O-алкила,
или Z представляет собой
где X представляет собой NH (амид) или O (сложный эфир), и R1 и R2 являются одинаковыми или разными и выбраны из протона, необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного алкилового эфира, арила, арилового эфира или алкил-, галогена, гидроксила, гидроксиалкила, амина, амино, амидо или амид-замещенных арильной или гетероарильной группы.
В соответствии с вариантом осуществления Z выбран из одной из следующих формул, где X представляет собой NH или O:
В соответствии с вариантом осуществления P представляет собой DPhe-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Z;
где Z определен выше.
В соответствии с вариантом осуществления P представляет собой DPhe-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Z;
Z выбран из Leu-ψ(CH2N)-Pro-NH2 и NH-CH(CH2-CH(CH3)2)2
или Z представляет собой
где X представляет собой NH (амид), и R2 представляет собой (CH2-CH(CH3)2, и R1 представляет собой то же самое, что и R2 или отличается от (CH2N)-Pro-NH2.
В соответствии с вариантом осуществления хелатор C получают посредством привития одного хелатирующего средства, выбранного из следующего списка:
Согласно одному варианту осуществления M представляет собой радионуклид, пригодный для радиационной медицины, выбранный из 111In, 18F, 211At, 82Rb, 123I, 131I, 133mIn, 99mTc, 94mTc, 67Ga, 66Ga, 68Ga, 52Fe, 169Er, 72As, 97Ru, 203Pb, 212Pb, 62Cu, 64Cu, 67Cu, 186Re, 188Re, 86Y, 90Y, 51Cr, 52mMn, 157Gd, 177Lu, 161Tb, 69Yb, 175Yb, 105Rh, 166Dy, 166Ho, 153Sm, 149Pm, 151Pm, 172Tm, 121Sn, 117mSn, 213Bi, 212Bi, 142Pr, 143Pr, 198Au, 199Au, 89Zr, 225Ac, 43Sc, 44Sc и 47Sc. Предпочтительно M выбран из 111In, 177Lu, 225Ac и 68Ga.
Согласно варианту осуществления хелатор С выбран из группы, состоящей из DOTA, DTPA, NTA, EDTA, DO3A, NOC и NOTA, предпочтительно представляет собой DOTA.
В соответствии с вариантом осуществления S выбран из группы, состоящей из:
а) арилсодержащих остатков формул:
где PABA представляет собой п-аминобензойную кислоту, PABZA представляет собой п-аминобензиламин, PDA представляет собой фенилендиамин и PAMBZA представляет собой (аминометил)бензиламин;
b) дикарбоновых кислот, ω-аминокарбоновых кислот, ω-диаминокарбоновых кислот или диаминов формул:
где DIG представляет собой дигликолевую кислоту, а IDA представляет собой иминодиуксусную кислоту;
c) спейсеров PEG с различными значениями длины цепи, в частности спейсеров PEG, выбранных из
d) α- и β-аминокислот, отдельно или в виде гомологичных цепей с различной длиной цепи или гетерологичных цепей с различной длиной цепи, в частности:
GRP(1-18), GRP(14-18), GRP(13-18), BBN(1-5) или [ Tyr4 ] BB ( 1 -5); или
e) комбинаций a, b, c и d.
Согласно варианту осуществления антагонист GRPR выбран из группы, состоящей из соединений следующих формул:
где МС и Р определены, как указано выше.
Согласно варианту осуществления P представляет собой DPhe-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-NH-CH(CH2-CH(CH3)2)2.
Согласно варианту осуществления указанный комплекс представляет собой NeoB1 формулы (I):
(I),
(DOTA-(п-аминобензиламин-дигликолевая-кислота)-[D-Phe-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-NH-CH[CH2-CH(CH3)2]2;
Согласно варианту осуществления указанный комплекс представляет собой меченный радиоактивными изотопами M-NeoB1 формулы (II):
(II),
(М-DOTA-(п-аминобензиламин-дигликолевая-кислота)-[D-Phe-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-NH-CH[CH2-CH(CH3)2]2;
где М представляет собой радионуклид, предпочтительно М выбран из 177Lu, 68Ga и 111In.
В соответствии с вариантом осуществления меченный радиоактивным изотопом антагонист GRPR представляет собой меченный радиоактивным изотопом NeoB2 формулы (III):
(III).
(M-N4 (п-аминобензиламин-дигликолевая-кислота)-[D-Phe-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-NH-CH[CH2-CH(CH3)2]2;
где М представляет собой радионуклид.
В одном варианте осуществления M представляет собой радионуклид, который может быть выбран из 111In, 133mIn, 99mTc, 94mTc, 67Ga, 66Ga, 68Ga, 52Fe, 169Er, 72As, 97Ru, 203Pb, 212Pb, 62Cu, 64Cu, 67Cu, 186Re, 188Re, 86Y, 90Y, 51Cr, 52mMn, 157Gd, 177Lu, 161Tb, 69Yb, 175Yb, 105Rh, 166Dy, 166Ho, 153Sm, 149Pm, 151Pm, 172Tm, 121Sn, 117mSn, 213Bi, 212Bi, 142Pr, 143Pr, 198Au, 199Au, 89Zr, 225Ac и 47Sc. Предпочтительно M выбран из 111In, 177Lu, 225Ac и 68Ga.
Согласно варианту осуществления М представляет собой 177Lu. В этом случае радиоизотопный антагонист GRPR может быть использован для радионуклидной терапии. Согласно другому варианту осуществления М представляет собой 68Ga. В этом случае для PET можно использовать меченный радиоактивными изотопами антагонист GRPR. Согласно другому варианту осуществления М представляет собой 111In. В этом случае для SPECT можно использовать меченный радиоактивными изотопами антагонист GRPR.
В соответствии с другим конкретным вариантом осуществления антагонист GRPR представляет собой ProBOMB1 следующей формулы (IV):
(IV),
(DOTA-pABzA-DIG-D-Phe-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-ψ(CH2N)-Pro-NH2)
Синтез соединений формулы (I), (II), (III) и (IV)
Соединения формул (I), (II), (III) и (IV) могут быть синтезированы с помощью способов, раскрытых в ссылке “Positron Emission Tomography Imaging of the Gastrin-Releasing Peptide Receptor with a Novel Bombesin Analogue” ACS Omega 2019, 4, 1470−1478.
Фармацевтическая композиция
Меченный радиоактивными изотопами антагонист GRPR имеет тенденцию разлагаться с течением времени, при этом его завершение характеризуется значением радиохимической чистоты ниже спецификаций в конце целевого срока хранения (72 часа), что представляет собой проблему для составления фармацевтической композиции. Стабильность раствора обеспечивается посредством применения стабилизаторов, препятствующих радиолитическому разложению.
Как используется в данном документе, "стабилизатор, препятствующий радиолитическому разложению" относится к стабилизирующему средству, которое защищает органические молекулы от радиолитического разложения, например, когда гамма-лучи, испускаемые радионуклидом, расщепляют связь между атомами органических молекул и образуются радикалы, эти радикалы затем поглощаются стабилизатором, что предотвращает прохождение радикалами каких-либо других химических реакций, что может приводить к появлению нежелательных, потенциально неэффективных или даже токсичных молекул. Таким образом, данные стабилизаторы также называются "акцепторами свободных радикалов" или коротко "акцепторами радикалов". Другими альтернативными терминами для этих стабилизаторов являются "усилители устойчивости к облучению", "радиолитичеcкие стабилизаторы" или просто "гасители".
В целом стабилизаторы, применяемые согласно настоящему изобретению, можно выбрать из гентизиновой кислоты (2,5-дигидроксибензойной кислоты) или ее солей, аскорбиновой кислоты (L-аскорбиновой кислоты, витамина C) или ее солей (например, аскорбата натрия), метионина, гистидина, мелатонина, этанола и Se-метионина. Предпочтительные стабилизаторы выбраны из гентизиновой кислоты или ее солей и аскорбиновой кислоты или ее солей.
Этанол считается менее предпочтительным стабилизатором из-за проблем с переносимостью, связанных с его присутствием в высоких концентрациях. В идеале следует избегать присутствия этанола в растворах по настоящему изобретению (другими словами: не содержит этанола), по меньшей мере количество этанола в растворах по настоящему изобретению должно быть ограничено, например, менее 5%, предпочтительно менее 2%, более предпочтительно менее 1% в конечном растворе, который предназначен для инъекции/инфузии. Еще более предпочтительно раствор не содержит этанола.
В первом аспекте настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей меченный радиоактивными изотопами антагонист GRPR, описанный в данном документе, и по меньшей мере два стабилизатора, препятствующих радиолитическому разложению.
В одном варианте осуществления указанные по меньшей мере два стабилизатора могут быть выбраны из гентизиновой кислоты (2,5-дигидроксибензойной кислоты) или ее солей, аскорбиновой кислоты (L-аскорбиновой кислоты, витамина С) или ее солей (например, аскорбата натрия), метионина, гистидина, мелатонина, этанола и Se-метионина, предпочтительно выбраны из гентизиновой кислоты или ее солей и аскорбиновой кислоты или ее солей. Указанные по меньшей мере два стабилизатора могут представлять собой гентизиновую кислоту или ее соли и аскорбиновую кислоту или ее соли.
В частности, авторы настоящего изобретения неожиданно обнаружили, что добавление как аскорбиновой кислоты, так и гентизиновой кислоты в определенных количествах в фармацевтическую композицию на основе меченного радиоактивными изотопами соединения, представляющего собой антагонист GRPR, обеспечивает радиохимическую чистоту указанной композиции на уровне выше 95% через 72 часа после синтеза.
В одном варианте осуществления соотношение гентизиновой кислоты и аскорбиновой кислоты составляет от 1:16 до 1:10, как правило, от 1:15 до 1:10, например, от 1:12 до 1:11.
В одном варианте осуществления указанная гентизиновая кислота или ее соли могут присутствовать в концентрации по меньшей мере 1000 мкг/мл, например, от 1000 мкг/мл до 1500 мкг/мл.
В одном варианте осуществления указанная аскорбиновая кислота или ее соли могут присутствовать в концентрации по меньшей мере 10000 мкг/мл, предпочтительно по меньшей мере 12000 мкг/мл, предпочтительно по меньшей мере 15000 мкг/мл, например, от 12000 до 18000 мкг/мл.
В варианте осуществления указанная гентизиновая кислота или ее соли присутствуют в концентрации по меньшей мере 1000 мкг/мл, например, от 1000 мкг/мл до 1500 мкг/мл, а аскорбиновая кислота или ее соли присутствуют в концентрации 15000 мкг/мл, например, от 12000 до 18000 мкг/мл.
В варианте осуществления радиофармацевтическая композиция содержит в качестве радиостабилизаторов как гентизиновую кислоту, так и аскорбиновую кислоту в соответствующих концентрациях 1312 мкг/мл и 15000 мкг/мл.
В одном варианте осуществления фармацевтическая композиция характеризуется радиохимической чистотой выше 95% до 72 часов, предпочтительно выше 98% до 72 часов.
Антагонист GRPR характеризуется тенденцией прикрепляться к стеклянным и пластмассовым поверхностям вследствие неспецифического связывания (NSB), что представляет собой проблему для составления фармацевтической композиции.
Во втором аспекте настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей меченый радиоактивными изотопами антагонист GRPR, описанный в данном документе, по меньшей мере два стабилизатора, препятствующих радиолитическому разложению и необязательно поверхностно-активное вещество.
Указанное поверхностно-активное вещество может включать соединение, содержащее (i) цепь полиэтиленгликоля и (ii) сложный эфир жирной кислоты. В варианте осуществления поверхностно-активное вещество также содержит свободный этиленгликоль.
В варианте осуществления поверхностно-активное вещество предусматривает соединение формулы (V)
(V),
где n составляет от 3 до 1000, предпочтительно от 5 до 500 и более предпочтительно от 10 до 50, и
R представляет собой цепь жирной кислоты, предпочтительно необязательно замещенную алифатическую цепь.
В одном варианте осуществления поверхностно-активное вещество предусматривает 15-гидроксистеарат полиэтиленгликоля и свободный этиленгликоль.
В варианте осуществления указанное поверхностно-активное вещество представляет собой неионогенное поверхностно-активное вещество. Предпочтительно указанное неионогенное поверхностно-активное вещество выбрано из макрогол 15 гидроксистеарата (Kolliphor HS 15), полоксамера (Kolliphor P188), полисорбата 20 (Tween 20), полисорбата 80 (Tween 80) или поливинилпирролидона со средней молекулярной массой 10000 (поливинилпирролидон K10). Предпочтительно указанное неионогенное поверхностно-активное вещество представляет собой макрогол 15 гидроксистеарат (Kolliphor HS 15).
Меченный радиоактивными изотопами антагонист GRPR может присутствовать в концентрации, обеспечивающей объемную радиоактивность, составляющую 370 МБк/мл (в EOP) ± 37 МБк/мл (± 10%).
Поверхностно-активное вещество может присутствовать в концентрации по меньшей мере 5 мкг/мл, предпочтительно по меньшей мере 25 мкг/мл и более предпочтительно по меньшей мере 50 мкг/мл. Поверхностно-активное вещество может присутствовать в концентрации от 5 мкг/мл до 5000 мкг/мл, предпочтительно от 25 мкг/мл до 2000 мкг/мл и более предпочтительно от 50 мкг/мл до 1000 мкг/мл. Поверхностно-активное вещество может присутствовать в концентрации 100 мкг/мл.
В третьем аспекте настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей меченный радиоактивными изотопами антагонист GRPR, описанный в данном документе, по меньшей мере два стабилизатора, препятствующих радиолитическому разложению, необязательно поверхностно-активное вещество и по меньшей мере еще одно фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество.
Фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество может представлять собой любое из обычно используемых и ограничено только физико-химическими соображениями, такими как растворимость и отсутствие реакционной способности с активным(и) соединением(ями).
В частности, одно или несколько вспомогательных веществ могут быть выбраны из буфера, и/или растворителя, и/или регулятора рН.
Буферы включают ацетатный буфер, цитратный буфер и фосфатный буфер. В варианте осуществления указанный буфер представляет собой ацетатный буфер.
В варианте осуществления указанные растворители представляют собой воду для инъекций.
В одном варианте осуществления указанный регулятор pH представляет собой NaOH.
В четвертом аспекте настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей комплекс, образованный радионуклидом 177 лютеций (Lu-177) и NeoB формулы (I):
(I),
(DOTA-(п-аминобензиламин-дигликолевая-кислота)-[D-Phe-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-NH-CH[CH2-CH(CH3)2]2;
а также гентизиновую кислоту или ее соли и аскорбиновую кислоту или ее соли, макрогол 15 гидроксистеарат, ацетатный буфер, воду для инъекций и NaOH.
Согласно варианту осуществления фармацевтическая композиция представляет собой водный раствор, например, состав для инъекций. Согласно определенному варианту осуществления фармацевтическая композиция представляет собой раствор для инфузий.
Требования к эффективным фармацевтическим носителям для инъекционных композиций хорошо известны специалистам в данной области (см., например, Pharmaceutics and Pharmacy Practice, J.B. Lippincott Company, Philadelphia, PA, Banker and Chalmers, eds., pages 238-250 (1982) и SHP Handbook on Injectable Drugs, Trissel, 15th ed., pages 622-630 (2009)).
Настоящее изобретение также относится к фармацевтической композиции, описанной выше, для применения в лечении или предупреждении рака, как правило, GRPR-положительного рака.
Используемый в данном документе термин "рак" относится к клеткам, характеризующимся способностью к автономному росту, т. е. аномальному состоянию или состоянию, характеризующемуся быстро пролиферирующим ростом клеток. Гиперпролиферативные и неопластические болезненные состояния заболевания могут быть классифицированы как патологические, т. е. характеризующие болезненное состояние или составляющие его, или могут быть классифицированы как непатологические, т. е. отклонение от нормы, но не ассоциированное с болезненным состоянием. Этот термин подразумевается как включающий все типы раковых образований или онкогенных процессов, метастатических тканей или злокачественно трансформированных клеток, тканей или органов независимо от гистопатологического типа или стадии инвазивности.
В конкретных вариантах осуществления рак выбран из рака предстательной железы, рака молочной железы, мелкоклеточного рака легкого, карциномы толстой кишки, желудочно-кишечных стромальных опухолей, гастриномы, почечно-клеточного рака, гастроэнтеропанкреатических нейроэндокринных опухолей, плоскоклеточных опухолей пищевода, нейробластом, плоскоклеточных карцином головы и шеи, а также опухоли яичников, эндометрия и поджелудочной железы, демонстрирующие сосудистую сеть, связанную с неоплазией, которая представляет собой GRPR. В одном варианте осуществления рак представляет собой рак предстательной железы или рак молочной железы.
В другом аспекте настоящего изобретения фармацевтическую композицию получают в промышленном масштабе, в частности, получают с размером партии по меньшей мере 0,5 Ки.
В другом аспекте настоящего изобретения фармацевтическая композиция предназначена для коммерческого применения.
В дополнительном аспекте настоящее изобретение также относится к фармацевтической композиции, содержащей меченный радиоактивными изотопами антагонист GRPR, как правило, 177Lu-NeoB, для применения в лечении или предупреждении рака у субъекта, нуждающегося в этом, при этом указанная фармацевтическая композиция составлена с радиостабилизаторами, описанными в любом из предыдущих вариантов осуществления, и вводится указанному субъекту в терапевтически эффективном количестве, составляющем от 2000 до 10000 МБк, как правило, с радиохимической чистотой (RCP), составляющей выше 95% во время введения.
В определенных аспектах субъект представляет собой млекопитающее, например без ограничения грызуна, представителя семейства псовых, представителя семейства кошачьих или примата. В предпочтительных аспектах субъект представляет собой человека.
В конкретных вариантах осуществления терапевтически эффективное количество композиции вводят указанному субъекту от 2 до 8 раз за курс лечения.
Например, пациент-человек может получать лечение с использованием указанной фармацевтической композиции, содержащей меченый радиоактивными изотопами антагонист GRPR, в частности, 177Lu-NeoB, который вводят внутривенно за 2-8 циклов от 2000 до 10000 МБк каждый, как правило, с радиохимической чистотой (RCP), составляющей выше 95% в момент введения.
Согласно настоящему изобретению предусмотрены следующие варианты осуществления:
1. Фармацевтическая композиция, содержащая:
(a) комплекс, образованный
(ai) радионуклидом и
(aii) фрагментом, связывающим антагонист пептида рецептора GRP, соединенным с хелатообразователем; и
(b) по меньшей мере два стабилизатора, препятствующих радиолитическому разложению; и
(c) необязательно поверхностно-активное вещество.
2. Фармацевтическая композиция согласно варианту осуществления 1, где указанный радионуклид выбран из 111In, 18F, 211At, 82Rb, 123I, 131I, 133mIn, 99mTc, 94mTc, 67Ga, 66Ga, 68Ga, 52Fe, 169Er, 72As, 97Ru, 203Pb, 212Pb, 62Cu, 64Cu, 67Cu, 186Re, 188Re, 86Y, 90Y, 51Cr, 52mMn, 157Gd, 177Lu, 161Tb, 69Yb, 175Yb, 105Rh, 166Dy, 166Ho, 153Sm, 149Pm, 151Pm, 172Tm, 121Sn, 117mSn, 213Bi, 212Bi, 142Pr, 143Pr, 198Au, 199Au, 89Zr, 225Ac, 43Sc, 44Sc и 47Sc. Предпочтительно M выбран из 111In, 177Lu, 225Ac и 68Ga, более предпочтительно представляет собой 177Lu.
3. Фармацевтическая композиция согласно варианту осуществления 1, где указанный радионуклид присутствует в концентрации, которая обеспечивает объемную радиоактивность, составляющую по меньшей мере 370 МБк/мл (в EOP) ± 37 МБк/мл (± 10%).
4. Фармацевтическая композиция согласно варианту осуществления 1, где указанный хелатообразователь выбран из DOTA, DTPA, NTA, EDTA, DO3A, NOC и NOTA, предпочтительно представляет собой DOTA.
5. Фармацевтическая композиция согласно варианту осуществления 1, где указанный фрагмент, связывающий антагонист пептида рецептора GRP, соединенный с хелатообразователем, представляет собой NeoB формулы (I):
(I).
6. Фармацевтическая композиция согласно варианту осуществления 1, где указанные по меньшей мере два стабилизатора выбраны из гентизиновой кислоты (2,5-дигидроксибензойной кислоты) или ее солей, аскорбиновой кислоты (L-аскорбиновой кислоты, витамина С) или ее солей (например, аскорбата натрия), метионина, гистидина, мелатонина, этанола и Se-метионина, предпочтительно выбраны из гентизиновой кислоты или ее солей и аскорбиновой кислоты или ее солей.
7. Фармацевтическая композиция согласно варианту осуществления 6, где указанные по меньшей мере два стабилизатора представляют собой гентизиновую кислоту или ее соли и аскорбиновую кислоту или ее соли.
8. Фармацевтическая композиция согласно варианту осуществления 7, где соотношение гентизиновой кислоты и аскорбиновой кислоты составляет от 1:16 до 1:10, как правило, от 1:15 до 1:10, например, от 1:12 до 1:11.
9. Фармацевтическая композиция согласно варианту осуществления 7 или 8, где указанная гентизиновая кислота или ее соли присутствуют в концентрации по меньшей мере 1000 мкг/мл, например, от 1000 мкг/мл до 1500 мкг/мл.
10. Фармацевтическая композиция согласно вариантам осуществления 7-9, где указанная аскорбиновая кислота или ее соли присутствуют в концентрации по меньшей мере 10000 мкг/мл, предпочтительно по меньшей мере 12000 мкг/мл, предпочтительно по меньшей мере 15000 мкг/мл, например, от 12000 до 18000 мкг/мл.
11. Фармацевтическая композиция согласно вариантам осуществления 7-10, где указанная гентизиновая кислота или ее соли присутствуют в концентрации по меньшей мере 1000 мкг/мл, например, от 1000 мкг/мл до 1500 мкг/мл, а аскорбиновая кислота или ее соли присутствуют в концентрации 15000 мкг/мл, например, от 12000 до 18000 мкг/мл.
12. Фармацевтическая композиция согласно вариантам осуществления 1-11, где указанный фармацевтический состав характеризуется радиохимической чистотой выше 95% до 72 часов, предпочтительно выше 98% до 72 часов.
13. Фармацевтическая композиция согласно вариантам осуществления 1-12, где указанное поверхностно-активное вещество представляет собой неионогенное поверхностно-активное вещество.
14. Фармацевтическая композиция согласно варианту осуществления 13, где указанное неионогенное поверхностно-активное вещество выбрано из макрогол 15 гидроксистеарата, полоксамера, полисорбата 20, полисорбата 80 или поливинилпирролидона со средней молекулярной массой 10000.
15. Фармацевтическая композиция согласно варианту осуществления 14, где указанное неионогенное поверхностно-активное вещество представляет собой макрогол 15 гидроксистеарат.
16. Фармацевтическая композиция согласно вариантам осуществления 1-15, где указанное поверхностно-активное вещество присутствует в концентрации по меньшей мере 5 мкг/мл, предпочтительно по меньшей мере 25 мкг/мл и более предпочтительно по меньшей мере 50 мкг/мл.
17. Фармацевтическая композиция согласно варианту осуществления 16, где указанное поверхностно-активное вещество присутствует в концентрации от 5 мкг/мл до 5000 мкг/мл, предпочтительно от 25 мкг/мл до 2000 мкг/мл и более предпочтительно от 50 мкг/мл до 1000 мкг/мл.
18. Фармацевтическая композиция согласно варианту осуществления 17, где указанное поверхностно-активное вещество присутствует в концентрации 100 мкг/мл.
19. Фармацевтическая композиция, содержащая:
(b) комплекс, образованный
(ai) радионуклидом 177лютеций (Lu-177) и
(aii) NeoB формулы (I):
(I); и
(b) гентизиновую кислоту или ее соли и аскорбиновую кислоту или ее соли;
(c) необязательно макрогол 15 гидроксистеарат,
(d) необязательно по меньшей мере еще одно фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество.
20. Фармацевтическая композиция согласно варианту осуществления 19, где по меньшей мере еще одно фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество выбрано из буфера, и/или растворителя, и/или регулятора рН.
21. Фармацевтическая композиция согласно варианту осуществления 20, где буфер выбран из ацетатного буфера, цитратного буфера и фосфатного буфера, предпочтительно ацетатного буфера.
22. Фармацевтическая композиция согласно варианту осуществления 20 или 21, где растворитель представляет собой воду для инъекций.
23. Фармацевтическая композиция согласно варианту осуществления 20, 21 или 22, где регулятор pH представляет собой NaOH.
24. Фармацевтическая композиция, состоящая из:
(a) комплекса, образованного
(ai) радионуклидом 177лютеций (Lu-177) и
(aii) NeoB формулы (I):
(I); и
(b) гентизиновой кислоты или ее солей и аскорбиновой кислоты или ее солей;
(c) макрогол 15 гидроксистеарата,
(d) ацетатного буфера;
(e) воды для инъекций и
(f) NaOH,
(g) DTPA.
25. Фармацевтическая композиция согласно любому из предыдущих вариантов осуществления, где фармацевтическая композиция представляет собой водный раствор.
26. Фармацевтическая композиция согласно любому из предыдущих вариантов осуществления, где фармацевтическая композиция представляет собой раствор для инфузии.
27. Фармацевтическая композиция согласно любому из предыдущих вариантов осуществления для применения в лечении или предупреждении рака, как правило, GRPR-положительного рака.
28. Фармацевтическая композиция согласно любому из предыдущих вариантов осуществления, где указанный раствор получен в промышленном масштабе, в частности получен с размером партии по меньшей мере 0,5 Ки.
29. Фармацевтическая композиция согласно любому из предыдущих вариантов осуществления, которая предназначена для коммерческого применения.
30. Способ изготовления указанной фармацевтической композиции, определенной выше, включающий стадии способа:
(1) образование комплекса радионуклида и фрагмента, связывающего антагонист пептида рецептора GRP, соединенного с хелатообразователем посредством
(1.1) получения водного раствора, содержащего радионуклид и только один стабилизатор, который представляет собой гентизиновую кислоту или ее соли, препятствующий радиолитическому разложению;
(1.2) получения водного раствора, содержащего фрагмент, связывающий антагонист пептида рецептора GRP, соединенный с хелатообразователем и необязательно поверхностно-активным веществом; и
(1.3) смешивания растворов, полученных на стадиях (1.1) и (1.2), нагревания полученной смеси и необязательно фильтрования полученного комплекса;
(2) разбавление раствора комплекса, полученного на стадии (1), посредством
(2.1) получения водного раствора для разбавления, необязательно содержащего только один стабилизатор, который представляет собой аскорбиновую кислоту, препятствующий радиолитическому разложению; и
(2.2.) смешивания раствора комплекса, полученного на стадии (1), с раствором для разбавления, полученным на стадии (2.1), с получением конечного раствора.
31. Способ согласно варианту осуществления 30, где раствор на стадии (1.1) содержит 177LuCl3 в качестве радионуклида и HCl.
32. Способ согласно любому из вариантов осуществления 30-31, где раствор, приготовленный на стадии (1.1), содержит только один стабилизатор, который представляет собой гентизиновую кислоту или ее соль в концентрации по меньшей мере 1000 мкг/мл, например, от 1000 мкг/мл до 1500 мкг/мл.
33. Способ согласно любому из вариантов осуществления 30-32, где раствор на стадии (1.1) дополнительно содержит буфер, предпочтительно ацетатный буфер.
34. Способ согласно любому из вариантов осуществления 30-33, где фрагмент, связывающий антагонист пептида рецептора GRP, соединенный с хелатообразователем в растворе на стадии (1.2), представляет собой NeoB формулы (I):
(I).
35. Способ согласно любому из вариантов осуществления 30-34, где раствор на стадии (1.2) дополнительно содержит поверхностно-активное вещество, которое представляет собой макрогол 15 гидроксистеарат.
36. Способ согласно любому из вариантов осуществления 30-35, где раствор, полученный на стадии (2.1), содержит только один стабилизатор, который представляет собой аскорбиновую кислоту или ее соли в концентрации по меньшей мере 10000 мкг/мл, предпочтительно по меньшей мере 12000 мкг/мл, предпочтительно по меньшей мере 15000 мкг/мл, например, от 12000 до 18000 мкг/мл.
37. Способ согласно любому из вариантов осуществления 30-36, где раствор на стадии (1.2) дополнительно содержит макрогол 15 гидроксистеарат в концентрации от 5 мкг/мл до 5000 мкг/мл, предпочтительно от 25 мкг/мл до 2000 мкг/мл, более предпочтительно от 50 мкг/мл до 1000 мкг/мл и еще более предпочтительно в концентрации 100 мкг/л.
38. Способ согласно любому из вариантов осуществления 30-37, где на стадии (1.3) полученную смесь нагревают до температуры от 70 до 99°С, предпочтительно от 90 до 98°С, в течение от 1 до 59 мин., предпочтительно от 2 до 15 мин.
39. Способ согласно любому из вариантов осуществления 30-38, где комплекс, полученный в конце стадии (1.3), дополнительно фильтруют через фильтр 0,20 мкм.
40. Способ согласно любому из вариантов осуществления 30-39, где раствор на стадии (2.1) дополнительно содержит секвестрирующее средство, которое представляет собой диэтилентриаминпентауксусную кислоту (DTPA) или ее соль.
41. Способ согласно любому из вариантов осуществления 30-40, где раствор на стадии (2.1) дополнительно содержит регулятор pH, который представляет собой NaOH.
42. Способ согласно любому из вариантов осуществления 30-41, где раствор со стадии (2.1) дополнительно содержит воду для инъекций.
43. Способ согласно любому из вариантов осуществления 30-42, дополнительно включающий стадии способа:
(3) стерильная фильтрация раствора, полученного на стадии (2):
(4) асептическое распределение отфильтрованного раствора, полученного на стадии (3), в контейнеры для стандартных доз, в которых указанный радионуклид присутствует в концентрации, которая обеспечивает объемную радиоактивность, составляющую по меньшей мере 370 МБк/мл (в EOP) ± 37 МБк/мл (± 10%).
44. Способ согласно любому из вариантов осуществления 30-43, где контейнеры для стандартных доз на стадии (4) представляют собой флаконы, укупоренные пробкой, помещенные в свинцовый контейнер.
45. Водный раствор фармацевтического средства, полученный посредством способа согласно любому из вариантов осуществления 30-44.
ПРИМЕРЫ
Далее в данном документе настоящее изобретение описано более подробно и конкретно со ссылкой на примеры, которые, однако, не подразумеваются как ограничивающие настоящее изобретение.
Материалы:
177LuCl3 можно получать из коммерческих источников, например I.D.B. Holland BV. Все остальные компоненты лекарственного продукта коммерчески доступны от различных источников.
Способы получения фармацевтической композиции
Изготовление Lu-NeoB осуществляют автоматически с помощью синтезатора MiniAIO. Процедура синтеза была разработана следующим образом:
1. Перенос 177LuCl3 в реактор.
2. Перенос реакционного буфера в реактор. Реакционный буфер состоит из буфера на основе ацетата натрия и гентизиновой кислоты. Ацетатный буфер позволяет поддерживать рН мечения в пределах 4-5, при этом гентизиновая кислота способствует защите пептида от радиолиза на стадии мечения.
3. Добавление в реактор раствора NeoB, содержащего Kolliphor HS 15.
4. Нагревание при 95°С в течение 5 минут.
Добавление в конце мечения раствора для разведения с получением объемной активности, составляющей 10 мКи/мл. Раствор для разведения состоит из аскорбиновой кислоты (антиоксидант), DTPA (секвестрирующее средство), NaOH (регулятор рН) и воды для инъекций.
Пример 1. Влияние состава на радиохимическую чистоту лекарственного продукта
Стабильность меченого 177Lu продукта в течение 72 часов при том же количестве антиоксиданта, что и в составе Lutathera. В частности, воспроизводят следующие условия:
o Гентизиновую кислоту 630 мкг/мл добавляют перед стадией мечения;
o Kolliphor HS 15: 1 мг добавляют перед стадией мечения;
o Соотношение пептид:Lu ≥ 1,5;
o Аскорбиновую кислоту 2795 мкг/мл добавляют в конце реакции на стадии составления;
o Конечная объемная активность составляет 10 мКи/мл;
o Конечное значение рН составляет 4-6;
o Реакционный буфер: буфер на основе уксусной кислоты/ацетатный буфер.
Тесты мечения радиоактивными изотопами проводят как вручную, так и автоматически с использованием синтезатора MiniAIO. Процедуру синтеза разрабатывали следующим образом:
1. Перенос 177LuCl3 в реактор.
2. Перенос реакционного буфера в реактор. Реакционный буфер состоит из буфера на основе ацетата натрия и гентизиновой кислоты. Ацетатный буфер позволяет поддерживать рН мечения в пределах 4-5, при этом гентизиновая кислота способствует защите пептида от радиолиза на стадии мечения.
3. Добавление в реактор раствора NeoB1, содержащего Kolliphor HS 15.
4. Нагревание при 95°С в течение 5 минут.
Добавление в конце мечения раствора для разведения с получением объемной активности, составляющей 10 мКи/мл. Раствор для разведения состоит из аскорбиновой кислоты (антиоксидант), DTPA (секвестрирующее средство), NaOH (регулятор рН) и воды для инъекций.
Таблица 1. Влияние состава на радиохимическую чистоту лекарственного продукта
(мКи)
*Результат не соответствует спецификации.
Как показывают результаты, представленные в таблице 1, продукт, составленный в тех же условиях, что и Lutathera, постепенно разлагался с течением времени, при этом его завершение характеризуется радиохимической чистотой ниже спецификаций в конце целевого срока хранения (72 часа).
Следовательно, разработку 177LuNeoB сосредотачивали на определении подходящего количества гентизиновой кислоты и аскорбиновой кислоты, способных обеспечивать требуемую защитную функцию без нарушения стадии мечения.
Пример 2. Идентификация подходящего состава для улучшения радиохимической чистоты лекарственного продукта
Антиоксиданты/акцепторы свободных радикалов, такие как аскорбиновая кислота и гентизиновая кислота, как правило, используют при приготовлении радиофармацевтических средств для защиты меченых молекул от радиолитического разложения.
Следовательно, для определения подходящего состава для улучшения радиохимической чистоты тестируют различные составы с повышением количества гентизиновой кислоты или аскорбиновой кислоты и поддержанием постоянными всех остальных условий, в том числе количества другого антиоксидантного средства.
Изменение уровня гентизиновой кислоты
Во-первых, исследуют влияние изменения уровня гентизиновой кислоты. Для этого тестируют повышение количества гентизиновой кислоты при сохранении постоянными всех остальных условий, в том числе количества аскорбиновой кислоты.
Как описано в таблице ниже, тестируют различные концентрации гентизиновой кислоты, при этом добавляют до 1000 мкг/мл в следующих условиях:
Гентизиновую кислоту добавляют перед стадией мечения;
Kolliphor HS 15: 1 мг добавляют перед мечением;
Аскорбиновую кислоту 2700 мкг/мл добавляют в конце мечения на стадии составления;
Конечная объемная активность составляет 10 мКи/мл;
Соотношение пептид:Lu ≥ 1,5;
Конечное значение рН составляет 4-6;
Реакционный буфер: буфер на основе уксусной кислоты/ацетатный буфер.
Таблица 2. Влияние гентизиновой кислоты на радиохимическую чистоту лекарственного продукта
(мКи)
*Результат не соответствует спецификации.
Результаты, представленные в таблице 2, демонстрируют, что при концентрации аскорбиновой кислоты 2700 мкг/мл и максимальной концентрации гентизиновой кислоты 1000 мкг/мл радиохимическая чистота не соответствует спецификациям в конце срока хранения.
Поэтому изменение уровня гентизиновой кислоты не оказывает влияния на радиохимическую чистоту.
Изменение уровня аскорбиновой кислоты
Затем исследуют влияние различных количеств аскорбиновой кислоты на стабильность готового продукта. Как описано в таблице ниже, тестируют различные концентрации аскорбиновой кислоты, при этом добавляют до 15000 мкг/мл в следующих условиях:
Гентизиновую кислоту 1000 мкг/мл добавляют перед стадией мечения;
Kolliphor HS 15: 1 мг добавляют перед мечением;
Аскорбиновую кислоту добавляют в конце мечения на стадии составления;
Конечная объемная активность составляет 10 мКи/мл;
Пептид: Соотношение Lu ≥ 1,5;
Конечное значение рН составляет 4-6;
Реакционный буфер: буфер на основе уксусной кислоты/ацетатный буфер.
Таблица 3. Влияние аскорбиновой кислоты на радиохимическую чистоту лекарственного продукта в конце синтеза и в конце срока хранения
(мКи)
*Результат не соответствует спецификациям.
Как демонстрируют результаты, показанные в таблице 3, радиохимическая чистота лекарственного продукта составляет выше 95% до 72 часов в случае состава, содержащего по меньшей мере 1000 мкг/мл гентизиновой кислоты и 10000 мкг/мл аскорбиновой кислоты. Тесты, проведенные при повышении концентрации аскорбиновой кислоты, показывают отчетливое улучшение стабильности продукта при концентрации 15000 мкг/мл (% RCP в конце срока хранения > 98%).
Оценка антиоксидантных свойств аскорбиновой кислоты путем удаления гентизиновой кислоты из жидкого состава
На основании результатов, показанных в таблице 3, минимальное количество аскорбиновой кислоты для этих тестов было установлено на уровне 15000 мкг/мл. Как описано в таблице 4, гентизиновая кислота не является частью состава; в качестве антиоксиданта присутствует только аскорбиновая кислота. Применяют следующие условия:
Kolliphor HS 15: 1 мг добавляют перед мечением;
Аскорбиновую кислоту 15000 мкг/мл добавляют в конце мечения на стадии составления;
Конечная объемная активность составляет 10 мКи/мл;
Соотношение пептид:Lu ≥ 1,5;
Конечное значение рН составляет 4-6;
Реакционный буфер: буфер на основе уксусной кислоты/ацетатный буфер.
Таблица 4. Влияние аскорбиновой кислоты на радиохимическую чистоту лекарственного продукта в конце синтеза и в конце срока хранения
(мКи)
*Результат не соответствует спецификации.
Как можно заметить, отсутствие гентизиновой кислоты делает радиохимическую чистоту лекарственного продукта ниже 95% через 72 часа. Таким образом, на основании этого экспериментального результата гентизиновая кислота и аскорбиновая кислота оказывают дополнительный положительный эффект на стабильность лекарственного продукта.
В заключение следует отметить, что наилучшие результаты с точки зрения радиохимической стабильности продукта получали в случае состава, содержащего как гентизиновую кислоту, так и аскорбиновую кислоту в концентрации соответственно 1000 мкг/мл и 15000 мкг/мл.
Пример 3. Тесты конечного состава при 200 мКи
Исследование, описанное ниже, разрабатывали с целью подтверждения уровня активности 200 мКи состава, идентифицированного в ходе предыдущих тестов разработки (примеры 1-3).
На основании результатов, описанных ранее, количество гентизиновой и аскорбиновой кислот устанавливают соответственно на уровне 1000 мкг/мл и 15000 мкг/мл. Синтез проводят в следующих условиях:
Гентизиновую кислоту 1000 мкг/мл добавляют в реактор с самого начала;
Kolliphor HS 15 добавляют в водный раствор пептида, конечная концентрация 100 мкг/мл;
Аскорбиновую кислоту 15000 мкг/мл добавляют в конце мечения на стадии составления;
Конечная объемная активность после составления составляет 10 мКи/мл;
Пептид: соотношение Lu ≥ 1,5;
Конечное значение рН составляет 4-6;
Реакционный буфер: буфер на основе уксусной кислоты/ацетатный буфер.
Мечение радиоактивными изотопами осуществляют автоматически с помощью синтезатора MiniAIO. Процедуру синтеза разрабатывали следующим образом:
1. Перенос 177LuCl3 в реактор.
2. Перенос реакционного буфера в реактор. Реакционный буфер состоит из буфера на основе ацетата натрия и гентизиновой кислоты. Ацетатный буфер позволяет поддерживать рН мечения в пределах 4-5, при этом гентизиновая кислота способствует защите пептида от радиолиза на стадии мечения.
3. Добавление в реактор раствора NeoB1, содержащего Kolliphor HS 15.
4. Нагревание при 95°С в течение 5 минут.
5. Добавление в конце мечения раствора для разведения с получением объемной активности, составляющей 10 мКи/мл. Раствор для разведения состоит из аскорбиновой кислоты (антиоксидант), DTPA (секвестрирующее средство), NaOH (регулятор рН) и солевого раствора.
Как демонстрируют результаты, показанные в таблице 7, при уровне гентизиновой кислоты 1000 мкг/мл и аскорбиновой кислоты 15000 мкг/мл радиохимическая чистота 177LuNeoB всегда составляет выше 95% до 72 часов для значений активности на уровне 200 мКи.
Таблица 5. Влияние выбранного состава на радиохимическую чистоту лекарственного продукта в конце синтеза и в конце срока хранения
(мКи)
Пример 4. Тесты конечного состава партии при 0,5 Ки
На основании результатов, полученных во время разработки продукта в научно-исследовательском лабораторном масштабе, для производства первой масштабной партии выбирали следующий состав:
Гентизиновая кислота 1000 мкг/мл;
Аскорбиновая кислота 15000 мкг/мл;
Kolliphor HS 15 100 мкг/мл;
Объемная активность 10 мКи/мл;
Конечное значение рН составляет 4,0-6,0;
Реакционный буфер: буфер на основе уксусной кислоты/ацетатный буфер.
Для перехода от состава, предназначенного для исследований и разработок, к лекарственному продукту фармацевтической степени чистоты получали масштабные партии с использованием реакционного буфера (код продукта F193) и буфера для состава (код продукта F191), произведенных Gipharma и используемых для получения Lutathera.
Стабильность готового продукта 177LuNeoB оценивали вплоть до 72 часов для трех разных объемов образцов (4 мл, 6 мл и 25 мл), хранившихся при 25 ± 2°C.
Для осуществления промышленного изготовления действующего вещества тесты по увеличению масштаба также направляли на оптимизацию производственного процесса, выполняемого посредством вспомогательного модуля автоматического синтеза.
Модуль синтеза используют для приготовления действующего вещества (маточного раствора), содержащего молекулу, меченную 177Lu.
Процесс автоматического синтеза разрабатывали для получения радиоактивного действующего вещества в виде стерильного водного концентрата маточного раствора. Стадии синтеза действующего вещества настраивали в модуле синтезатора MiniAIO (TRASIS), автономном модуле синтеза закрытой системы, который автоматизирован и дистанционно управляется программным обеспечением, соответствующим GMP, с мониторингом и записью параметров процесса.
Модуль радиосинтеза Mini AIO широко используется в радиофармацевтической промышленности для изготовления радиофармацевтических средств для PET. Этот модуль включает одноразовый канал для жидкости, который предпочтительнее устройств с фиксированным каналом для жидкости, поскольку он обеспечивает стерильный и апирогенный канал для жидкости и исключает возможность перекрестной контаминации между партиями.
Модуль синтеза помещают в горячую камеру со свинцовым экраном, обеспечивающую подачу воздуха, отфильтрованного посредством HEPA класса С. Изолятор находится в чистом лабораторном помещении класса С.
В таблице 8 описаны целевые характеристики состава, выбранные для изготовления размера партии при 0,5 Ки.
Таблица 6. Характеристики целевого состава
Теоретическая активность 177LuCl3 составляет 0,5 Ки;
Удельная активность 177LuCl3 в начале синтеза составляет 9,7 Ки/мг;
количество нетто NeoB1 составляет 0,600 мг;
Молярное соотношение (NeoB1:Lu)=1,300;
Синтез с модулем MiniAIO (Trasis);
Время мечения: 5 мин.;
Температура мечения: 95°C.
В таблице 9 приведены некоторые релевантные результаты IPC, полученные во время изготовления размера партии 177LuNeoB1 при 0,5 Ки.
Таблица 7. Результаты IPC и выход синтеза
(мКи)
(мКи)
(%)
Для оценки эффектов окислительного расщепления в конце производства распределяли три объема образцов:
25 мл (ФЛАКОН-1);
4 мл (ФЛАКОН-2, ФЛАКОН-3, ФЛАКОН-4);
6 мл (ФЛАКОН-5);
В образец VIAL-4 добавляли дополнительное количество гентизиновой кислоты на стадии приготовления с получением конечной концентрации приблизительно 1,312 мг/мл и, в конечном счете, дополнительного снижения радиолитического разложения.
Образец VIAL-3 выдерживали при перемешивании в течение всего исследования стабильности.
Все образцы хранили при температуре 25 ± 2°C. Различные распределенные образцы приведены в таблице 10.
Таблица 8. Характеристики образцов и условия хранения
Образец при перемешивании в течение 72 ч
В таблице 11 обобщены результаты радиохимической чистоты, полученные для масштабируемой партии 177LuNeoB1 при 0,5 Ки. Как можно отметить, радиохимическая чистота продукта в момент 0 ч соответствует целевым спецификациям и составляет >97,00%.
Исследование стабильности, проведенное в отношении ФЛАКОНА-1 (образец 25 мл), указывает на очень перспективные результаты даже через 72 часа, при этом ФЛАКОН-2 (образец 4 мл) и ФЛАКОН-3 (образец 4 мл при перемешивании) указывают на радиохимическую чистоту ниже 95,00% в конце целевого срока хранения. Эти предварительные результаты, по-видимому, демонстрируют отрицательное влияние O2 на стабильность готового продукта.
Добавление дополнительного количества гентизиновой кислоты (образец ФЛАКОНА-4) приводит к повышению стабильности готового продукта, хотя целевой период хранения не был успешно соблюден.
В конечном итоге ФЛАКОН-5 (образец объемом 6 мл) демонстрирует улучшение с точки зрения результатов стабильности по сравнению со значениями объема образцов 4 мл, несмотря на то, что радиохимическая чистота через 72 часа не соответствует спецификациям.
Таблица 9. Результаты контроля качества
(%)
(%)
*Результат не соответствует спецификации.
Конечный целевой состав и подробная композиция
Конечное количество аскорбиновой кислоты и гентизиновой кислоты определяли на основе данных, собранных в ходе деятельности по разработке. В частности, гентизиновая кислота при 1312 ppm совместно с аскорбиновой кислотой при 15000 ppm продемонстрировали отличные антиоксидантные свойства, позволяющие обеспечивать целевой срок хранения.
На основании всех проведенных тестов по разработке для изготовления 177LuNeoB при уровне радиоактивности до 500 мКи выбирали следующий состав:
Таблица 10. Состав 177LuNeoB
| название | год | авторы | номер документа |
|---|---|---|---|
| СТАБИЛЬНЫЕ КОНЦЕНТРИРОВАННЫЕ РАСТВОРЫ КОМПЛЕКСОВ РАДИОНУКЛИДОВ | 2018 |
|
RU2789366C2 |
| МЕЧЕННЫЙ РАДИОАКТИВНЫМ ИЗОТОПОМ АНТАГОНИСТ GRPR ДЛЯ ПРИМЕНЕНИЯ В КАЧЕСТВЕ ЛЕЧЕБНО-ДИАГНОСТИЧЕСКОГО СРЕДСТВА | 2020 |
|
RU2839888C1 |
| СПОСОБЫ СИНТЕЗА РАДИОНУКЛИДНОГО КОМПЛЕКСА | 2019 |
|
RU2826739C2 |
| РАДИОФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ СРЕДСТВА, НАЦЕЛЕННЫЕ НА GRPR, И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ | 2019 |
|
RU2798978C2 |
| АНТАГОНИСТЫ GRPR ДЛЯ ОБНАРУЖЕНИЯ, ДИАГНОСТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ GRPR-ПОЗИТИВНОГО ОНКОЛОГИЧЕСКОГО ЗАБОЛЕВАНИЯ | 2013 |
|
RU2693465C2 |
| АНТАГОНИСТЫ GRPR ДЛЯ ОБНАРУЖЕНИЯ, ДИАГНОСТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ GRPR-ПОЗИТИВНОГО ОНКОЛОГИЧЕСКОГО ЗАБОЛЕВАНИЯ | 2013 |
|
RU2821944C2 |
| КОНЪЮГАТЫ АНТАГОНИСТА ПЕПТИДА АНАЛОГА БОМБЕЗИНА | 2009 |
|
RU2523531C2 |
| СТАБИЛИЗАЦИЯ РАДИОФАРМАЦЕВТИЧЕСКИХ КОМПОЗИЦИЙ | 2008 |
|
RU2474435C2 |
| НАБОР ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ РАДИОФАРМАЦЕВТИЧЕСКОГО ПРЕПАРАТА | 2015 |
|
RU2695365C2 |
| СОСТАВЫ ДЛЯ РАДИОТЕРАПИИ И ДИАГНОСТИЧЕСКОЙ ВИЗУАЛИЗАЦИИ | 2017 |
|
RU2788581C2 |
Группа изобретений относится к области фармацевтики, а именно радиофармацевтическим композициям, и может быть использована для лечения рака. Фармацевтическая композиция содержит: (a) комплекс, образованный радионуклидом 177Lu и NeoB формулы (I) 
и (b) по меньшей мере два стабилизатора, препятствующие радиолитическому разложению, где указанные стабилизаторы содержат гентизиновую кислоту и аскорбиновую кислоту в массовом соотношении от 1:16 до 1:10. При этом указанный радионуклид присутствует в концентрации, обеспечивающей объемную радиоактивность, составляющую по меньшей мере 370 МБк/мл (в конце обработки) ± 37 МБк/мл (± 10%). Раскрыты также варианты указанной композиции. Полученные композиции характеризуются высокой концентрацией комплекса радионуклида, который химически и радиохимически является очень стабильным. 3 н. и 6 з.п. ф-лы, 10 табл., 4 пр.
1. Фармацевтическая композиция, содержащая:
(a) комплекс, образованный
(ai) радионуклидом 177Lu и
(aii) NeoB формулы (I)
(I); и
(b) по меньшей мере два стабилизатора, препятствующие радиолитическому разложению, где указанные стабилизаторы содержат гентизиновую кислоту и аскорбиновую кислоту в массовом соотношении от 1:16 до 1:10; где указанный радионуклид присутствует в концентрации, обеспечивающей объемную радиоактивность, составляющую по меньшей мере 370 МБк/мл (в конце обработки) ± 37 МБк/мл (± 10%).
2. Фармацевтическая композиция по п. 1, где соотношение гентизиновой кислоты и аскорбиновой кислоты составляет от 1:15 до 1:10.
3. Фармацевтическая композиция по п. 1 или 2, где указанная гентизиновая кислота или ее соли присутствуют в концентрации по меньшей мере 1000 мкг/мл.
4. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 1-3, где указанная аскорбиновая кислота или ее соли присутствуют в концентрации по меньшей мере 10000 мкг/мл.
5. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 1-4, где указанная гентизиновая кислота или ее соли присутствуют в концентрации по меньшей мере 1000 мкг/мл и аскорбиновая кислота или ее соли присутствуют в концентрации по меньшей мере 10000 мкг/мл.
6. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 1-5, где указанная фармацевтическая композиция характеризуется радиохимической чистотой выше 95% до 72 часов.
7. Фармацевтическая композиция, содержащая:
(a) комплекс, образованный
(ai) радионуклидом 177лютеций (Lu-177) и
(aii) NeoB формулы (I):
(I); и
(b) гентизиновую кислоту или ее соли и аскорбиновую кислоту или ее соли, где гентизиновая кислота и аскорбиновая кислота присутствуют в массовом соотношении от 1:16 до 1:10; и
(c) макрогол 15 гидроксистеарат;
где указанный радионуклид присутствует в концентрации, обеспечивающей объемную радиоактивность, составляющую по меньшей мере 370 МБк/мл (в конце обработки) ± 37 МБк/мл (± 10%).
8. Фармацевтическая композиция по п. 7, дополнительно содержащая по меньшей мере еще одно фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество, выбранное из буфера, и/или растворителя, и/или регулятора рН.
9. Фармацевтическая композиция, состоящая из:
(a) комплекса, образованного
(ai) радионуклидом 177лютеций (Lu-177) и
(aii) NeoB формулы (I):
(I); и
(b) гентизиновой кислоты или ее солей и аскорбиновой кислоты или ее солей, где гентизиновая кислота и аскорбиновая кислота присутствуют в массовом соотношении от 1:16 до 1:10;
(c) макрогол 15 гидроксистеарата;
(d) ацетатного буфера;
(e) воды для инъекций;
(f) NaOH; и
(g) DTPA;
где указанный радионуклид присутствует в концентрации, обеспечивающей объемную радиоактивность, составляющую по меньшей мере 370 МБк/мл (в конце обработки) ± 37 МБк/мл (± 10%).
| Устройство для закрепления лыж на раме мотоциклов и велосипедов взамен переднего колеса | 1924 |
|
SU2015A1 |
| Способ обработки целлюлозных материалов, с целью тонкого измельчения или переведения в коллоидальный раствор | 1923 |
|
SU2005A1 |
| WO 2019032624 A1, 14.02.2019 | |||
| Станок для изготовления деревянных ниточных катушек из цилиндрических, снабженных осевым отверстием, заготовок | 1923 |
|
SU2008A1 |
| ARIJIT GHOSH et al | |||
| Stability Evaluation and Stabilization of a Gastrin-Releasing Peptide Receptor (GRPR) Targeting Imaging Pharmaceutical | |||
| Molecules | |||
| Станок для придания концам круглых радиаторных трубок шестигранного сечения | 1924 |
|
SU2019A1 |
| Печь-кухня, могущая работать, как самостоятельно, так и в комбинации с разного рода нагревательными приборами | 1921 |
|
SU10A1 |
| JOSEPH LAU et | |||
