Штамм Streptomyces sp. YVZ016 ВКМ Ас-2999D - продуцент веществ, способствующих защите сельскохозяйственных культур от заболеваний, вызываемых бактериями Clavibacter michiganensis Российский патент 2025 года по МПК C12N1/00 

Область техники

Изобретение относится к микробной биотехнологии, микробиологической промышленности и касается штамма микроорганизма рода Streptomyces sp. YVZ016 ВКМ Ас-2999D, продуцирующего активные вещества, способные подавлять рост фитопатогенной бактерии Clavibacter michiganensis и стимулировать прорастание семян. Изобретение может быть использовано для разработки композиций, чье практическое применение относится к сфере защиты растений.

Уровень техники

Бактериозы сельскохозяйственных растений, вызываемые грамположительными прокариотами рода Clavibacter наносят существенный урон производству продуктов питания и кормов во многих странах мира, приводя к серьезным экономическим потерям вплоть до угрозы продовольственной безопасности. Среди них наиболее печально известен возбудитель бактериального увядания и рака томатов Clavibacter michiganensis, который является типичным фитопатогеном, передающимся через семена, сохраняющийся в них длительное время и таким образом способный распространяться на большие расстояния при транспортировке [Nandi, M., Macdonald, J., Liu, P., Weselowski, B. and Yuan, Z.-C. (2018), Clavibacter michiganensis ssp. michiganensis: bacterial canker of tomato, molecular interactions and disease management. Molecular Plant Pathology, 19: 2036-2050. https://doi.org/10.1111/mpp.12678]. Бактериальный рак томатов рассматривается как карантинное заболевание во многих странах, и его возбудитель включен в список высокого риска (А2) Европейской и Средиземноморской организации по защите растений (European and Mediterranean Plant Protection Organization, EPPO). Хотя Россельхознадзор РФ в настоящий момент не указывает данный микроорганизм среди карантинных объектов на территории Евразийского экономического союза (по данным с сайта https://fsvps.gov.ru/files/perechen-karantinnyh-obektov/ - дата обращения 1.09.2024) сведения о распространении данного заболевания на территории Российской Федерации и сопредельных стран не раз отмечались в литературе [Лазарев А.М., Надточий И.Н, Попов Ф.А Ареал и зона вредоносности бактериального рака томата Clavibacter michiganensis subsp. michiganensis (Smith) Davis, et al // Вестник защиты растений. 2014. №1. https://cyberleninka.ru/article/n/areal-i-zona-vredonosnosti-bakterialnogo-raka-tomata-clavibacter-michiganensis-subsp-michiganensis-smith-davis-et-al]. Кроме того, было показано, что картофель может быть также подвержен бактериозу, вызываемому данным возбудителем, и может выступать как резерватор Clavibacter michiganensis, который был выявлен в семи регионах России: Центральном, Центрально-Черноземном, Нижневолжском, Средневолжском, Северо-Кавказском, Северо-Западном, Волго-Вятском [Корнев К.П. Разнообразие, распространение и методы диагностики бактерий родов Xanthomonas и Clavibacter, поражающих томат. Автореф. дис. канд.наук, Москва, 2013].

Эффективные и экологичные подходы к защите томатов, а также других растений, подверженных инвазии данного возбудителя, основаны на биологических стратегиях борьбы и заключаются в использовании природных штаммов микроорганизмов, способных не только подавлять рост фитопатогенов без вреда для растений, но и дополнительно стимулировать рост растений за счет выработки фитогормонов и/или улучшения минерального питания и биодоступности микроэлементов.

Актиномицеты, принадлежащие к роду Streptomyces, отличаются огромным потенциалом как агенты биологического контроля над различными грибковыми и бактериальными заболеваниями сельскохозяйственных культур. Являясь постоянными участниками микробных сообществ почвы и ризосферы, стрептомицеты способны к формированию ассоциативных и мутуалистических связей с растениями [Vurukonda SSKP, Giovanardi D, Stefani E. Plant Growth Promoting and Biocontrol Activity of Streptomyces spp. as Endophytes. Int J Mol Sci. 2018 Mar 22;19(4):952. doi: 10.3390/ijms19040952]. Они признанные рекордсмены среди других бактерий по числу продуцируемых вторичных метаболитов, среди которых первое место занимают антибиотики, гидролитических ферментов, фитогормонов, сигнальных метаболитов, хелаторов металлов и других соединений, которые могут действовать как агенты биоконтроля [Dias MP, Bastos MS, Xavier VB, Cassel E, Astarita LV, Santarém ER. Plant growth and resistance promoted by Streptomyces spp. in tomato. Plant Physiol Biochem. 2017 Sep;118:479-493. doi: 10.1016/j.plaphy.2017.07.017.].

Открытый в 1955 году аминогликозидный антибиотик стрептомицин, продуцируемый Streptomyces griseus subsp. griseus, наравне с использованием в медицине практически с тех пор применяется и в растениеводстве для борьбы с бактериальными заболеваниями растений, такими как бактериальный ожог (Erwinia amylovora), мягкая гниль (Pectobacterium spp.), пятнистость листьев (Xanthomonas campestris pv. vesicatoria) и корончатый галл (Agrobacterium tumefaciens) и другими [Le, K.D.; Yu, N.H.; Park, A.R.; Park, D.-J.; Kim, C.-J.; Kim, J.-C. Streptomyces sp. AN090126 as a Biocontrol Agent against Bacterial and Fungal Plant Diseases. Microorganisms 2022, 10, 791. https://doi.org/10.3390/microorganisms10040791]. Однако, его широкое и повсеместное использование уже привело к появлению устойчивых штаммов фитопатогенных бактерий, включая E. amylovora, Pectobacterium carotovorum, Xanthomonas spp. и Pseudomonas spp., и затруднило борьбу с ними. Поэтому в настоящее время биопрепараты на основе стрептомицина запрещены к продаже и использованию в ряде стран [Verhaegen M., Bergot T., Liebana E., Stancanelli G., Streissl F., Mingeot-Leclercq M.-P., Mahillon J., Bragard C. Front. Microbiol., 2023, Sec. Antimicrobials, Resistance and Chemotherapy. Vol. 14. https://doi.org/10.3389/fmicb.2023.1221478https://doi.org/10.3389/fmicb.2023.1221478].

В настоящее время в Российской Федерации для защиты культурных растений от бактериозов зарегистрирован и производится микробиологический препарат, на основе метаболитов Streptomyces griseus или Streptomyces lavendulae, известный под названием «Фитолавин»® (рег. номер 831-02-3795-1), действующим веществом которого является комплекс стрептотрициновых соединений (обобщенно названный фитобактериомицином), активный, в частности, против возбудителя рака томатов [RU2324351C1].

В 2014 году российский производитель средств защиты растений ООО «Фармбиомедсервис» зарегистрировал препарат «Фитоплазмин», ВРК (водорастворимый концентрат), где в качестве действующего вещества выступает тилозиновый макролидный комплекс, полученный с помощью почвенного актиномицета Streptomyces fradiae ВНИИСХМ-53. Препарат обладает системным действием против ряда заболеваний, в том числе против возбудителя бактериального рака Сlavibacter michiganensis, путем опрыскивания или полива под корень жидкостью, содержащей до 23,5% макролидного комплекса [RU2445775C2].

Однако, свободное применение антибиотиков широкого спектра действия в больших количествах может оказывать неблагоприятное влияние и на нецелевые организмы, нарушая естественное равновесие в экосистемах, а самое главное, приводить к росту резистентных микроорганизмов, в том числе патогенных для человека. Кроме того, стрептотрицины обладают токсическим действием для эукариотических организмов, что было не раз показано в опытах на животных [Morgan CE, Kang YS, Green AB, Smith KP, Dowgiallo MG, Miller BC, Chiaraviglio L, Truelson KA, Zulauf KE, Rodriguez S, Kang AD, Manetsch R, Yu EW, Kirby JE. Streptothricin F is a bactericidal antibiotic effective against highly drug-resistant gram-negative bacteria that interacts with the 30S subunit of the 70S ribosome. PLoS Biol. 2023 May 16;21(5):e3002091. doi: 10.1371/journal.pbio.3002091], а тилозин вызывает выраженное фитотоксическое действие, в частности на прорастание пшеницы озимой [Космачева А.Г. Фитотоксичность антибиотиков и их влияние на микробоценоз почвы. Автореф...канд. наук, Владимир, 2022].

Поскольку семена являются основным путем проникновения инфекции, вызываемой бактериями Clavibacter michiganensis, разработка эффективных методов средств для предобработки семян должна, с одной стороны, существенно снизить риск поражения растений за счет элиминации возбудителя, и, с другой стороны, способствовать стимуляции роста растения за счет продукции биоактивных молекул.

Использование для этого природных штаммов стрептомицетов, приспособленных к обитанию в почвах, не являющихся патогенами растений, синтезирующими фитогормоны и способствующих доступности элементов питания растений -- может решить задачу по борьбе и предотвращению бактериозов сельскохозяйственных растений без нарушения экологического равновесия.

Таким образом, техническая проблема, решаемая посредством заявляемого изобретения, заключается в необходимости преодоления недостатков, присущих аналогам за счет создания актинобактериального штамма, способного синтезировать набор вторичных метаболитов, обладающих способностью подавлять рост возбудителя бактериоза Clavibacter michiganensis и стимулировать всхожесть и прорастание семян сельскохозяйственных растений.

Раскрытие изобретения

Техническим результатом заявляемого изобретение является изыскание актинобактериального штамма, который способен синтезировать набор вторичных метаболитов, обладающих способностью селективно подавлять рост возбудителя бактериоза Clavibacter michiganensis, не оказывать фитотоксическое действие на семена однодольных и двудольных сельскохозяйственных растений и стимулировать всхожесть и прорастание семян, в частности, проявляя статистически значимую стимуляцию в отношении семян томатов-черри, пшеницы мягкой и овса посевного.

Технический результат достигается штаммом Streptomyces sp. YVZ016 ВКМ Ас-2999D - продуцентом метаболитов, обладающих фитозащитным действием против инфекций, вызываемых бактерией Clavibacter michiganensis, а также обладающим фитостимулирующим действием.

Фитостимулирующее действие метаболитов оказывается на семена сельскохозяйственных культур, в частности, на семена томатов-черри, пшеницы мягкой и овса посевного.

Краткое описание чертежей

Изобретение поясняется следующим иллюстративным материалом.

На фиг. 1 представлен рост и образование растворимых пигментов на 12е сутки культивирования при 28°C штаммом Streptomyces sp. YVZ016 ВКМ Ас-2999D на твердых питательных средах: 1 - овсяном агаре (ISP3), 2 - Органической среде 79, 3 - минеральном агаре 1 (Гаузе и др., 1983), 4 - глюкозо-аспарагиновом агаре.

На фиг. 2 представлена электронная микрофотография мицелия и спор штамма Streptomyces sp. YVZ016 ВКМ Ас-2999D, сделанная на 14-е сутки роста культуры на овсяном агаре (ISP3) при 28°С (JEOL, JSM-6380LA).

На фиг. 3 показано антагонистическое действие, оказываемое на рост бактерии Clavibacter michiganensis образцами культуральных жидкостей штамма Streptomyces sp. YVZ016 (1, 2) при объеме внесения 100 мкл в лунку и экстрактами из биомассы, извлечёнными 100% ацетоном, при внесении 10 мкл в лунку (3, 4, 5). Условия культивирования: 24 часа при 37°С на агаризованной среде LB. Литерой «N» отмечена область, куда был внесен 1 мкг норфлоксацина.

На фиг. 4 представлены семена томата черри сорт «Урожайный» спустя 5 суток инкубации в условиях контакта со стерильной водой (а) и кондиционированной культуральной жидкостью штамма YVZ016 (б), а также семена свеклы столовой, увлажненные водой (в) и метаболитами штамма YVZ016 (г).

Осуществление изобретения

Полифазная характеристика изолята

Штамм Streptomyces sp. YVZ016 был выделен при поверхностном посеве на органический агар 79 с добавлением нистатина и налидиксовой кислоты, как описано ранее [Zakalyukina Y.V., Osterman I.A., Wolf J., Neumann-Schaal M., Nouioui I., Biryukov M.V. Amycolatopsis camponoti sp. nov., new tetracenomycin-producing actinomycete isolated from carpenter ant Camponotus vagus // Antonie van Leeuwenhoek. 2022. Vol.115. P.533-544. https://doi.org/10.1007/s10482-022-01716-w], из гомогенизата рабочих особей черных садовых муравьев Lasius niger. Муравьи были отобраны в сентябре 2021 года в Москве (район Крылатское, 55.770253° N, 37.412092° E) на газоне со злаково-разнотравной растительностью.

Штамм депонирован во Всероссийской Коллекции Микроорганизмов ФГБУ «ФИЦ «Пущинский Научный Центр Биологических Исследований Российской Академии Наук» (Россия, 142290, Московская обл., Пущино, пр. Науки, 5, ИБФМ) под регистрационным номером ВКМ Ас-2999D.

Родовую принадлежность штамма YVZ016 к роду Streptomyces установили на основе интегральной оценки молекулярно-генетических, культурально-морфологических и физиологических признаков, то есть так называемого полифазного подхода.

Сравнительный анализ нуклеотидных последовательностей генов 16S рРНК штамма YVZ016 (1344 п. н.) и типовых штаммов актиномицетов, депонированных в базу GenBank (https://www.ncbi.nlm.nih.gov/genbank), показал наибольшее сходство (99,63%) с коллекционным штаммом Streptomyces umbrinus JCM 4521^T.

Культуральные признаки штамма Streptomyces sp. YVZ016 описаны на спектре традиционно используемых твердых питательных сред ISP2-ISP7, рекомендованных для фенотипического описания в рамках Международного проекта по изучению стрептомицетов International Streptomyces Project [Shirling EB & Gottlieb D. Methods for Characterization of Streptomyces Species. Int J System Bacteriol. 1966;16(3):313-340. doi: 10.1099/00207713-16-3-313]. Пигментация колоний на плотных средах: воздушный мицелий палевый с оттенками; субстратный мицелий желтовато-бурый (Фиг. 1); при росте на среде с цитратом железа (ISP6) YVZ016 образует меланоидный (черный) пигмент.

Морфологические характеристики исследованы на 12-е сутки роста на овсяном агаре ISP3 (Фиг. 2): штамм YVZ016 образует разветвленный субстратный мицелий, на воздушном мицелии (0,5-0,6 мкм) формируются прямые цепочки спор. Споры имеют цилиндрическую форму (0,5-0,61,0-1,3 мкм) и гладкую поверхность.

Штамм растет в аэробных условиях, в диапазоне температур от +15 до +40°С, с оптимумом роста при 28±2°С.

Растет в диапазоне рН 6,0-9,0, оптимальная величина рН всех используемых сред составляет 7,0-7,5.

Используемые источники углерода: арабиноза, глюкоза, галактоза, рибоза, инозитол, трегалоза, сахароза, манниол, мальтоза, манноза, раффиноза, фруктоза, целлобиоза;

не использует - лактозу, ксилозу, салицилат, сорбитол.

В качестве источника азота использует нитратные, аммонийные соединения, гидролизаты белков, аминокислоты.

Штамм Streptomyces sp. YVZ016 не патогенен.

Хранение и поддержание жизнеспособности штамма

Штамм можно хранить при температуре от +4 до +24°С и поддерживать путем пересева раз в 2-3 недели на овсяный агар ISP3.

Длительное хранение штамма при температуре от -20 до -80°С может быть обеспечено путем приготовления суспензии из созревших спор и мицелия, смешивания ее со стерильным глицеролом до 25% об/об и разлив по специальным емкостям для хранения при низких температурах.

Пример. Штамм Streptomyces sp. YVZ016 ВКМ Ас-2999D культивируют в пробирках со скошенным овсяным агаром (ISP3): овсяная мука - 20 г, агар - 20 г, воды 1 литр, рН среды перед посевом должен составлять 7,0-7,2. Спустя 12-14 суток культивирования при 28±2°С в пробирку добавляют 1-2 мл стерильной воды (допускается использовать физиологический раствор, фосфатно-солевой буфер с рН 7,0-7,4 с добавлением детергента твин 80 в концентрации 0,01%) и смывают споры путем встряхивания на настольном шейкере в течении 3 минут. Полученную суспензию отбирают и смешивают с равным объемом стерильного раствора 50% глицерина. Криопробирки со суспензией спор и мицелия хранят при -20°С не более 2х лет и не более 5х лет при -70°С.

Выделение и культивирование Streptomyces sp. YVZ016 ВКМ Ас-2999D.

Для исследования отбирали взрослых особей муравьев Lasius niger, усыпляли эфиром и каждую особь отдельно поверхностно стерилизовали (сначала промывкой в стерильной воде в течение минуты, затем погружением в 90% этиловый спирт на 30 секунд, и последующими двукратными промывками в стерильной воде), и затем перетирали вручную с помощью стеклянного гомогенизатора тканей и 500 мкл стерильной воды в течение трех минут. Полученные суспензии муравьев обрабатывали на шейкере «Multi Reax» (Heidolph, Германия) 10 минут при 2000 об./мин и затем 10-кратно разводили стерильной водопроводной водой. Посев производили на питательную среду следующего состава (г/л): глюкоза - 10; пептон микробиологический - 10; дрожжевой экстракт - 2; гидролизат казеина - 2; NaCl - 6; агар - 20. Для ограничения роста грибов и грамотрицательных бактерий в среды перед разливом добавляли нистатин (100 мкг/мл) и налидиксовую кислоту (10 мкг/мл) соответственно. Засеянные чашки Петри инкубировали при 28°С в течение двух недель.

Выросшие колонии мицелиальных прокариот выделяли в отдельные изоляты, среди которых проводился скрининг на антагонистическую активность в отношении фитопатогенной бактерии Clavibacter michiganensis CMM1204 методом диффузии в агар. Штаммы, угнетавшие рост тест-организма исследовали на фитотоксичность в отношении семян однодольных (овес посевной, пшеница мягкая) и двудольных растений (томат черри, морковь посевная, свекла столовая).

Таким образом, был выявлен штамм YVZ016, который наряду с подавлением роста бактерии Clavibacter michiganensis вызывал статистически достоверную стимуляцию прорастания семян ряда сельскохозяйственных культур, в том числе: томатов черри (выражавшуюся в увеличении длины побега), семян пшеницы мягкой и овса посевного (увеличение длины корней), свеклы столовой (возрастание энергии прорастания семян).

Получение ферментационной жидкости, обладающей антибактериальной и фитостимулирующей активностью с использованием нового штамма-продуцента

Пример 1.

Культивирование штамма-продуцента. Клетки Streptomyces sp. YVZ016 ВКМ Ас-2999D выращивают в 50 мл жидкой питательной среды следующего состава (г/л): глюкоза - 10, пептон - 10, дрожжевой экстракт - 2, гидролизат казеина - 2, NaCl - 6,0, вода - остальное (рН после автоклавирования при 0,5 атм составляет 7,0). Культивирование производится в 250 мл конических колбах, которые засевают свежей суспензией споры-мицелий (в концентрации не менее 10⁶ кл/мл) и инкубируют при 28°С и перемешивании на орбитальном шейкере в течение 2-3 суток. Полученную культуральную жидкость с клетками продуцента используют как посевной материал, засевая им (объем внесения 2-5%) конические колбы общим объемом 750 мл, содержащие 100-150 мл жидкой овсяной среды следующего состава: овсяная мука - 20 г, вода - остальное (рН перед автоклавированием должен составлять 7,0-7,2, при необходимости довести с помощью 1М NaOH). Засеянные колбы культивируют на шейкере при 28°С до в течение 6 суток.

По окончании срока ферментации культуральную жидкость с клетками микроорганизмов сливают из колб и центрифугируют 20 минут при скорости 4500 об/мин, чтобы отделить кондиционированную культуральную жидкость от клеточной биомассы.

Пример 2.

Определение антагонистической активности в отношении возбудителя бактериального рака Clavibacter michiganensis.

Антибактериальную активность кондиционированной культуральной жидкости штамма Streptomyces sp. YVZ016 оценивали методом диффузии в агар. На агар R2A (состав: дрожжевой экстракт 0,50 г, пептон микробиологический 0,5 г, казаминовые кислоты 0,5 г, глюкоза 0,5 г, крахмал 0,5 г, пируват натрия 0,3 г, K₂HPO₄ 0,3 г, MgSO₄ х7 H₂O 0,05 г, агар 15,0 г, дистиллированной воды до 1 л), разлитый слоем в 4 мм по чашкам Петри, наносили свежеприготовленную суспензию 3х суточной культуры Clavibacter michiganensis, соответствующую плотности 0,5 по стандарту МакФарланда, с помощью стерильного тампона штриховыми движениями в трех направлениях, поворачивая чашку Петри на 60°. В агаре вырезали лунки и вносили по 100 мкл культуральной жидкости Streptomyces sp. YVZ016. Чашки инкубировали при 28°С 48 часов и затем измеряли диаметр зон задержки роста с помощью циркуля-измерителя и линейки с делениями 1 мм, ориентируясь на зону полного подавления видимого роста (Фиг. 3).

Пример 3.

Оценка влияния метаболитов штамма Streptomyces sp. YVZ016 на прорастание семян однодольных и двудольных растений

Оценку воздействия композиции метаболитов, вырабатываемых штаммом YVZ016, на семена сельскохозяйственных культур проводили результатам определения лабораторной энергии прорастания семян согласно ГОСТ 12038-84 (Семена сельскохозяйственных культур. Методы определения всхожести. Москва, Стандартинформ, 2011) и фитотестирования по величине корней и/или побегов (Методические рекомендации МР 2.1.7.2297-07. Обоснование класса опасности отходов производства и потребления по фитотоксичности), (Терехова В.А., Воронина Л.П., Кирюшина А.П., Морачевская Е.В., Кыдралиева К.А. Стандартный алгоритм измерений фитоэффектов: учебное пособие. М., 2021 г. 58 с. ).

Согласно рекомендациям, изложенным в Международном стандарте ISO11269-2 мы использовали для тестирования по несколько видов семян однодольных и двудольных аграрно значимых растений, при этом сделав выбор в пользу культр, возделываемых на большинстве сельскохозяйственных земель на территории Российской Федерации. Исследования проводились на коммерчески доступных семенах овощных (томатов черри, моркови посевной, свеклы столовой) и злаковых культур (овса посевного, пшеницы мягкой).

Для обработки семян использовали предварительно отцентрифугированную и отфильтрованную культуральную жидкость штамма YVZ016, полученную способом, описанном в примере 1, с подтвержденной антибактериальной активностью в отношении возбудителя рака томатов. В качестве контроля использовали стерильную дистиллированную воду. Предварительно была проведена оценка всхожести используемых семян, которая по результатам определения превысила пороговый уровень 95%, необходимый для отбора качественного материала для фитотестирования.

Для тестирования отбирали внешне здоровые семена одного размера в количестве 100 штук, промывали трижды дистиллированной водой, обсушивали на фильтровальной бумаге в потоке стерильного воздуха под ламинаром.

В стерильные чашки Петри (диаметром 90 мм), подписанные согласно используемой культуре и испытуемой жидкости, раскладывали по три слоя стерильных бумажных фильтров, увлажняли 5-ю мл фильтрата или дистиллированной воды и раскладывали по 25 семян в каждую. Чашки Петри с семенами инкубировали при постоянной температуре (22°С) для овса, пшеницы и при переменной температуре (20-30°С) для томатов, моркови и свеклы в условиях темноты в течении периода, рекомендованного для оценки энергии прорастания для каждой культуры ГОСТом 12038-84: 3 суток для пшеницы, 4 суток для овса и 5 суток для томатов, моркови и свеклы. По истечении указанных сроков оценивали количество проросших семян, для проростков зерновых культур отдельно измеряли длину наибольшего корня и побега с помощью линейки с миллиметровыми делениями, для овощных культур измеряли общую длину проростка.

Энергию прорастания выражали как долю проросших семян к общему числу семян, вычисляли среднюю длину корня/побега с оценкой доверительного интервала и проводили однофакторный дисперсионный анализ с целью установления значимых отличий средних значений опытного и контрольного вариантов.

Было выявлено, что культуральная жидкость штамма Streptomyces sp. YVZ016, обладающая актибактериальной активностью, не оказывает фитотоксического действия на семена используемых растений, а напротив оказывает стимулирующее действие на прорастание семян в лабораторных условиях. Статистически значимый эффект обработки семян культуральной жидкостью штамма Streptomyces sp. YVZ016 был выявлен для семян томатов черри сорта «Урожайный», выражавшийся в увеличении длины проростков, для свеклы столовой было отмечено значительное повышение энергии прорастания, а также было зафиксировано стимулирующее действие на длину корней пшеницы мягкой и овса посевного по сравнению с контролем (Фиг. 4).

Значения энергии прорастания и морфометрических показателей проростков семян сельскохозяйственных культур при обработке дистиллированной водой (контроль) культуральной жидкостью штамма Streptomyces sp. YVZ016 представлены в таблице 1. Длины проростков или их частей приведены с указанием половины доверительного интервала, рассчитанного согласно распределению Стьюдента. Достоверно различающиеся средние значения контрольного и опытного вариантов по результатам однофакторного дисперсионного анализа отмечены знаками (*, ** и ***).

Изобретение относится к области биотехнологии и касается штамма микроорганизма Streptomyces sp. YVZ016 – продуцента метаболитов, обладающих ингибиторной активностью в отношении возбудителя бактериозов Clavibacterium michiganensis и стимулирующих прорастание семян томатов и других сельскохозяйственных культур. Штамм депонирован во Всероссийскую Коллекцию Микроорганизмов ФГБУ «ФИЦ «Пущинский Научный Центр Биологических Исследований Российской Академии Наук» под регистрационным номером ВКМ Ас-2999D. 4 ил., 1 табл., 3 пр.

Штамм Streptomyces sp. YVZ016 ВКМ Ас-2999D – продуцент веществ, оказывающих стимулирующее действие на прорастание семян сельскохозяйственных культур.