Применение производного транс-амантадина или его соли Российский патент 2025 года по МПК C07C211/52 C07C215/44 C07C249/02 C07C251/24 C07C209/52 C07C213/02 A61K31/137 A61P11/00 A61P11/10 A61P11/14 

Область техники

Настоящее изобретение относится к фармацевтической области, более конкретно к применению производного транс-амантадина или его фармацевтически приемлемой соли.

Уровень техники

Повреждение легких представляет собой повреждение паренхимы легких, вызванное различными повреждающими факторами, и может проявляться в виде разрыва легкого, ушиба легкого и поражения легкого ударной волной. Наиболее распространенным является ушиб легкого, частота случаев которого составляет от 30% до 75% травм грудной клетки от удара тупым предметом, а показатель смертности составляет от 14% до 40%. Травма легких, операция на легких, инфекция легких, эмболия сосудов легких и тому подобное также могут вызывать повреждение легких. Частота случаев повреждения легких продолжает расти во всем мире, при этом отсутствуют доступные лекарственные средства специфичного действия, и в основном применяют анальгетики и противоинфекционные лекарственные средства. Таким образом, существует насущная клиническая потребность в безопасных и эффективных лекарственных средствах для лечения повреждения легких, в частности в лекарственных средствах для лечения острого повреждения легких.

Кашель является одной из реакций биологической защиты от попадания мокроты и инородных веществ в дыхательные пути, однако если он является продолжительным и чрезмерным, это может приводить к снижению качества жизни (QOL). Кашель часто встречается в клинической практике, в частности, хронический кашель, продолжающийся более 8 недель, на долю которого приходится более 1/3 амбулаторных посещений пациентов с респираторными заболеваниями и который серьезно влияет на трудовую деятельность и повседневную жизнь пациентов. Важным механизмом является повышение чувствительности кашлевого рефлекса, вызванное нейрогенным воспалением дыхательных путей. Анкетные опросы в странах Европы и Америки показывают, что до 9-33% людей имеют кашель разной степени тяжести; в Японии частота случаев хронического кашля, согласно сообщениям, различна, однако составляет примерно от 2% до 10%; в 2006 году опрос 1087 студентов колледжа в Гуанчжоу, Китай, показал, что частота случаев кашля составляла 10,9%, 3,3% из которых составляла частота случаев хронического кашля. Имеются предположения, что частота случаев у населения в локальных сообществах будет выше. В настоящее время отсутствует одобренное лекарственное средство для лечения хронического кашля. Обычно применяемые противокашлевые средства включают кодеин, декстрометорфан и так далее, однако противокашлевые средства центрального действия часто вызывают побочные эффекты, такие как запор и сонливость. Таким образом, существует насущная клиническая потребность в безопасных и эффективных лекарственных средствах для лечения кашля, в частности, в лекарственных средствах для лечения хронического кашля.

Во многих странах амброксол одобрен для лечения острых и хронических заболеваний легких, связанных с не соответствующей норме секрецией мокроты и нарушением функции мокроты. По существу, основной функцией амброксола является отхаркивающее действие, а его терапевтическое действие в отношении повреждения легких, в частности острого повреждения легких, невелико. Кроме того, в Японии амброксол также одобрен для лечения кашля.

В патенте CN 201910671508.7 описаны дибромбензильные производные, стереоизомеры или соли, а также способ их получения и применение. Описанные дибромбензильные производные получают путем структурной модификации циклогексана в амброксоле. Раскрытые дибромбензильные производные обладают лучшей биодоступностью и лучшим отхаркивающим действием, чем амброксола гидрохлорид. В настоящее время отсутствуют соответствующие сообщения о применении производных транс-амантадина для предупреждения и лечения повреждения легких и кашля, в частности сообщения, относящиеся к острому повреждению легких и рефрактерному кашлю.

Краткое изложение сущности изобретения

Целью настоящего изобретения является обеспечение применения производного транс-амантадина, представленного Формулой I, или его фармацевтически приемлемой соли в изготовлении лекарственного средства для предупреждения и/или лечения респираторных заболеваний.

Технические решения, принятые в настоящем изобретении для достижения указанной выше цели, заключаются в следующем.

Применение производных транс-амантадина, имеющих структуру, представленную Формулой I, или их фармацевтически приемлемой соли согласно настоящему изобретению в изготовлении лекарственного средства для предупреждения и/или лечения респираторных заболеваний:

В некоторые воплощения настоящего изобретения включено применение в изготовлении лекарственного средства для предупреждения и/или лечения повреждения легких.

Также включено применение в изготовлении лекарственного средства для предупреждения и/или лечения острого повреждения легких.

Также включено применение в изготовлении лекарственного средства для предупреждения и/или лечения острого респираторного дистресс-синдрома, вызванного повреждением легких.

В некоторые воплощения настоящего изобретения включено применение в изготовлении лекарственного средства для предупреждения и/или лечения кашля.

Также включено применение в изготовлении лекарственного средства для предупреждения и/или лечения хронического кашля или рефрактерного кашля.

В некоторые воплощения настоящего изобретения включено применение в изготовлении лекарственного средства в качестве профилактического и/или терапевтического отхаркивающего средства.

В некоторых воплощениях настоящего изобретения фармацевтически приемлемая соль образована производным транс-адамантана и кислотой.

Указанная кислота представляет собой фармацевтически приемлемую неорганическую кислоту или органическую кислоту, где неорганическая кислота выбрана из хлористоводородной кислоты, сероводородной кислоты, бромоводородной кислоты, иодоводородной кислоты, серной кислоты, азотной кислоты, борной кислоты и фосфорной кислоты; и органическая кислота выбрана из муравьиной кислоты, уксусной кислоты, уксусного ангидрида, ацетоуксусной кислоты, трифторуксусной кислоты, пропионовой кислоты, пировиноградной кислоты, масляной кислоты, капроновой кислоты, гептановой кислоты, ундекановой кислоты, лауриновой кислоты, стеариновой кислоты, пальмитиновой кислоты, щавелевой кислоты, малоновой кислоты, янтарной кислоты, глутаровой кислоты, адипиновой кислоты, малеиновой кислоты, фумаровой кислоты, молочной кислоты, яблочной кислоты, лимонной кислоты, винной кислоты, метавинной кислоты, аскорбиновой кислоты, галловой кислоты, бензойной кислоты, салициловой кислоты, коричной кислоты, нафтойной кислоты, эмбоновой кислоты, никотиновой кислоты, оротовой кислоты, фитиновой кислоты, метилсульфата, додецилсульфата, метансульфоновой кислоты, трифторметансульфоновой кислоты, этилендисульфоновой кислоты, изетионовой кислоты, 1,5-нафталиндисульфоновой кислоты, 2-нафталиндисульфоновой кислоты, камфорсульфоновой кислоты, гидросульфоновой кислоты, глутаминовой кислоты, аспарагиновой кислоты, глюконовой кислоты и глюкуроновой кислоты; предпочтительно фармацевтически приемлемая кислота представляет собой хлороводородную кислоту, сероводородную кислоту, бромоводородную кислоту, серную кислоту, фосфорную кислоту, уксусную кислоту, молочную кислоту, яблочную кислоту, винную кислоту или фумаровую кислоту.

Предпочтительно фармацевтически приемлемые соли включают ацетат, гидросульфат, аскорбат, бензоат, бензолсульфонат, цитрат, фумарат, гидрохлорид, гидробромид, малеат, метансульфонат, нитрат, оксалат, фосфат, сукцинат или сульфат. Предпочтительно фармацевтически приемлемая соль выбрана из:

транс-4-[(2-амино-3,5-дибромбензил)амино]адамантан-1-ола гидрохлорида,

транс-4-[(2-амино-3,5-дибромбензил)амино]адамантан-1-ола гидросульфата или

транс-4-[(2-амино-3,5-дибромбензил)амино]адамантан-1-ола гидробромида.

Предпочтительно фармацевтически приемлемая соль представляет собой гидрохлорид, имеющий структуру, представленную Формулой V:

Способ получения производных транс-амантадина, имеющих структуру, представленную Формулой I, согласно настоящему изобретению включает реакцию, имеющую две стадии:

Стадия 1: применение соединения Формулы III, соединения Формулы IV или их соли в качестве исходного вещества, получение соединения Формулы II посредством реакции конденсации;

Стадия 2: восстановление соединения Формулы II с помощью восстановителя с получением производного транс-амантадина, представленного Формулой I.

Схема реакции является следующей:

В некоторых воплощениях настоящего изобретения дополнительно включена Стадия 3, на которой соединение Формулы I приводят во взаимодействие с кислотой с образованием соли для получения соли соединения Формулы I. Схема реакции является следующей:

В некоторых воплощениях настоящего изобретения восстановитель включает, но не ограничивается ими, боргидрид натрия или боргидрид калия.

В некоторых воплощениях настоящего изобретения соль соединения Формулы IV включает, но не ограничивается ими, гидрохлорид, сульфат и гидробромид.

Упомянутая выше Стадия 1 включает добавление в реактор реакционного растворителя, Соединения формулы III, Соединения формулы IV или его соли, поглотителя кислот и осушителя, а также нагревание и перемешивание реакционной смеси с получением соединения Формулы II.

Соединение Формулы III и соединение Формулы IV в качестве исходных веществ находятся в молярном отношении от 1:0,8 до 1:2,0, предпочтительно от 1:1 до 1:1,5.

Поглотитель кислот включает неорганическое основание и/или органическое основание; предпочтительно неорганическое основание включает, но не ограничивается ими, любой один или более из бикарбоната натрия, бикарбоната калия, карбоната натрия, карбоната калия, карбоната цезия, гидроксида натрия, гидроксида калия, гидроксида лития или гидрида натрия;

предпочтительно органическое основание включает, но не ограничивается ими, любой один или более из метоксида натрия, этоксида натрия, трет-бутоксида калия, триэтиламина, диэтиламина, диизопропиламина и N,N-диизопропилэтиламина.

Молярное отношение соединения формулы III и поглотителя кислот составляет от 1:1 до 1:5,0, предпочтительно от 1:1 до 1:1,5.

Реакционный растворитель включает, но не ограничивается ими, любой один или более из этанола, метанола, изопропанола, н-пропанола, этилацетата, изопропилацетата, N,N-диметилформамида, N,N-диметилацетамида, диметилсульфоксида, ацетонитрила и тетрагидрофурана.

Предпочтительно массо-объемное отношение Соединения формулы III (2-амино-3,5-дибромбензальдегид) и реакционного растворителя составляет от 1:3 до 1:20, предпочтительно от 1:12 до 1:16, при этом если единицей массы является кг, единицей объема является л.

Осушитель включает, но не ограничивается ими, любой один или более из сульфата магния, сульфата натрия, сульфата кальция, молекулярных сит и хлорида кальция; предпочтительно молярное отношение Соединения формулы III (2-амино-3,5-дибромбензолформальдегид) и осушителя составляет от 1:0,5 до 1:5, предпочтительно от 1:0,8 до 1:1,5.

Температура реакции на Стадии 1 составляет от 50°С до 120°С, предпочтительно от 70°С до 80°С.

Стадия 1 также включает стадию последующей обработки, которая включает фильтрование, концентрирование, кристаллизацию и сушку реакционного раствора с получением соединения Формулы II.

Если соединение Формулы II очищают путем перекристаллизации, растворитель для перекристаллизации включает, но не ограничивается ими, любой один или более из метанола, этанола, изопропилового спирта и н-пропанола; массо-объемное отношение соединения Формулы III и растворителя для перекристаллизации составляет: от 1:4 до 1:25, предпочтительно от 1:9 до 1:11; если единицей массы является кг, единицей объема является л.

В некоторых воплощениях настоящего изобретения реакционный растворитель на Стадии 2 включает, но не ограничивается ими, один или два из дихлорметана и метанола; массо-объемное отношение соединения Формулы II и реакционного растворителя составляет 1:3-50, предпочтительно 1:29, при этом если единицей массы является кг, единицей объема является л.

На Стадии 2 температура реакции составляет от 0°С до 10°С, и молярное отношение соединения Формулы II и восстановителя составляет от 1:1,1 до 1:2,5.

В некоторых воплощениях настоящего изобретения реакционный растворитель на Стадии 3 включает, но не ограничивается ими, любой один или более из этанола, ацетона и метанола; массо-объемное отношение соединения Формулы I и реакционного растворителя составляет 1:3-70, предпочтительно 1:12, или 1:14, или 1:29; при этом если единицей массы является кг, единицей объема является л.

В настоящем изобретении дополнительно предложена фармацевтическая композиция, содержащая производное транс-амантадина, представленное Формулой I, или его фармацевтически приемлемую соль и один или более фармацевтически приемлемых носителей.

Термин «фармацевтически приемлемый носитель» относится к разбавителю, адъюванту, эксципиенту или носителю, вводимым совместно с терапевтическим агентом и являющимся подходящими, в пределах разумного медицинского суждения, для контакта с тканями человека и/или других животных, не вызывающим чрезмерной токсичности, раздражения, аллергических реакций или других проблем или осложнений, в соответствии с разумным отношением польза/риск.

Настоящее изобретение имеет следующие полезные эффекты по сравнению с известным уровнем техники.

В настоящем изобретении предложены созданные творческим путем структурные модификации циклогексана в амброксоле с получением производного транс-амантадина, представленного Формулой I. В настоящем изобретении неожиданно обнаружено, что производное транс-амантадина и его гидрохлоридная соль согласно настоящему изобретению обладают большей эффективностью, чем амброксола гидрохлорид и рацемат (смесь изомеров) производного амантадина. В тесте острого повреждения легких у мышей и модели вызванного аммиаком кашля у мышей было показано, что указанное производное оказывает превосходное действие в лечении повреждения легких и кашля, которое со статистической значимостью лучше, чем действие амброксола гидрохлорида и рацемата производного амантадина гидрохлорида. Аммониевое производное транс-амантадина и его гидрохлоридная соль согласно настоящему изобретению могут значительно увеличивать количество мокроты, выделяемой крысами, по сравнению с таковым при применении амброксола гидрохлорида, а также могут значительно увеличивать выведение фенолового красного у мышей, при этом их действие лучше, чем действие амброксола гидрохлорида и рацемата производного амантадина гидрохлорида.

Краткое описание чертежей

На Фиг. 1 представлен спектр ¹H-NMR (DMSO-d6) соединения Формулы II, транс-4-[(2-амино-3,5-дибромфенилен)амино]адамантан-1-ола;

на Фиг. 2 представлен спектр ¹³C-NMR (DMSO-d6) соединения Формулы II, транс-4-[(2-амино-3,5-дибромфенилен)амино]адамантан-1-ола;

на Фиг. 3 представлен масс-спектр соединения Формулы II, транс-4-[(2-амино-3,5-дибромфенилен)амино]адамантан-1-ола;

на Фиг. 4 представлен спектр ¹H-NMR (DMSO-d6) соединения Формулы I, транс-4-[(2-амино-3,5-дибромбензил)амино]адамантан-1-ола;

на Фиг. 5 представлен MS-спектр соединения Формулы I, транс-4-[(2-амино-3,5-дибромбензил)амино]адамантан-1-ола;

на Фиг. 6 представлен спектр HPLC соединения Формулы V, транс-4-[(2-амино-3,5-дибромбензил)амино]адамантан-1-ола гидрохлорида;

на Фиг. 7 представлен спектр ¹H-NMR (DMSO-d6) соединения Формулы V, транс-4-[(2-амино-3,5-дибромбензил)амино]адамантан-1-ола гидрохлорида;

на Фиг. 8 представлен спектр ¹³C-NMR (DMSO-d6) соединения Формулы V, транс-4-[(2-амино-3,5-дибромбензил)амино]адамантан-1-ола гидрохлорида;

на Фиг. 9 представлен спектр поглощения в инфракрасной области соединения Формулы V, транс-4-[(2-амино-3,5-дибромбензил)амино]адамантан-1-ола гидрохлорида;

На Фиг. 10 представлен спектр дифракции на монокристалле соединения Формулы V, транс-4-[(2-амино-3,5-дибромбензил)амино]адамантан-1-ола гидрохлорида.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ПРЕДПОЧТИТЕЛЬНЫХ ВОПЛОЩЕНИЙ

В целях лучшего понимания цели, технических решений и преимуществ воплощений настоящего изобретения технические решения в воплощениях настоящего изобретения будут определенно и в полной мере описаны ниже. Если в примерах не указаны конкретные условия, следует обеспечивать обычные условия или условия, рекомендованные производителем. Все применяемые реагенты или приборы, производитель которых не указан, являются обычными коммерчески доступными продуктами.

В следующих примерах конкретная структура соединения была подтверждена методами масс-спектрометрии (MS) и ядерного магнитного резонанса (^lH NMR и ¹³С NMR). При этом сдвиг ядерного магнитного резонанса (^lH NMR и ¹³С NMR) (5) выражен в миллионных долях (ppm); спектры ядерного магнитного резонанса (¹Н NMR) регистрировали на ядерно-магнитном спектрометре Bruker AVANCE-400. Все исходное сырье, применяемое в примерах воплощений настоящего изобретения, является коммерчески доступными.

В примерах 1-17 описаны способы получения промежуточных соединений согласно настоящему изобретению.

Пример 1

В этом примере описан способ получения промежуточного соединения транс-4-[(2-амино-3,5-дибромфенилен)амино]адамантан-1-ола согласно настоящему изобретению, включающий, в частности, следующие стадии:

В реакционный сосуд добавляли 0,4 л абсолютного этанола, и к нему при перемешивании добавляли 27,9 г 2-амино-3,5-дибромбензальдегида (соединение Формулы III), 16,3 г транс-4-амино-1-гидроксиадамантана гидрохлорида (соединение Формулы IV), 15,9 г безводного карбоната натрия и 10,8 г безводного сульфата магния, нагревали до 75°С и проводили реакцию в течение 5 часов или более. Завершение реакции регистрировали с помощью тонкослойной хроматографии (TLC), и реакционный растворитель упаривали при нормальном давлении. Затем к остатку добавляли 0,3 л абсолютного этанола, полученную смесь нагревали и подвергали перекристаллизации. После фильтрования и сушки получали 19,9 г транс-4-[2-амино-3,5-дибромфенилен)амино]адамантан-1-ола в виде порошка светло-желтого цвета. Фактический выход составлял 58,0%, и чистота составляла 99,1%.

¹H-NMR (600 МГц, DMSO-d6): δppm 8,438 (d, J=1,8 Гц, 1H), 7,678 (s, 2H), 7,63-7,623 (t, J=2,5 Гц, 1H), 7,532 (t, J=2,2 Гц, 1H), 4,468 (s, 1H), 3,389-3,344 (d, J=3,3 Гц, 1H), 2,092 (q, J=3,3 Гц, 1H), 2,059-2,038 (dd, J=12,8, 3,2 Гц, 2H), 1,846 (m, 2H), 1,771-1,752 (d, J=11,8 Гц, 2H), 1,700-1,679 (dd, J=13,0, 3,0 Гц, 4H), 1,409-1,388 (d, J=12,3 Гц, 2H), что согласуется со структурной формулой.

¹³C-NMR (150 МГц, DMSO-d6): δppm 161,04, 145,52, 135,37, 135,32, 119,89, 109,47, 105,15, 73,48, 65,99, 46,03, 44,70, 37,31, 31,11, 30,31, что согласуется со структурной формулой.

Теоретическое значение М для MS молекулярной формулы C₁₇H₂₀Br₂N₂O составляет 428,17. Пик молекулярного иона в масс-спектре m/z 429,33 представляет собой пик [М+Н]⁺; пик молекулярного иона в масс-спектре m/z 427,31 представляет собой пик [М-Н]^-, что согласуется со структурной формулой.

Пример 2

В этом примере описан способ получения промежуточного соединения транс-4-[(2-амино-3,5-дибромфенилен)амино]адамантан-1-ола согласно настоящему изобретению, включающий, в частности, следующие стадии.

В реакционный сосуд добавляли 0,4 л абсолютного этанола, и к нему при перемешивании добавляли 27,9 г 2-амино-3,5-дибромбензальдегида (соединение Формулы III), 20,4 г транс-4-амино-1-гидроксиадамантана гидрохлорида (соединение Формулы IV), 15,9 г безводного карбоната натрия и 10,8 г безводного сульфата магния, нагревали до 75°С и проводили реакцию в течение 5 часов или более. Завершение реакции регистрировали с помощью TLC, и реакционный растворитель упаривали при нормальном давлении. Затем к остатку добавляли 0,25 л абсолютного этанола, полученную смесь нагревали и подвергали перекристаллизации. После фильтрования и сушки получали 32,9 г транс-4-[2-амино-3,5-дибромфенилен)амино]адамантан-1-ола в виде порошка светло-желтого цвета. Фактический выход составлял 76,8%, и чистота составляла 98,9%.

Пример 3

В этом примере описан способ получения промежуточного соединения транс-4-[(2-амино-3,5-дибромфенилен)амино]адамантан-1-ола согласно настоящему изобретению, включающий, в частности, следующие стадии.

В реакционный сосуд добавляли 0,4 л абсолютного этанола, и к нему при перемешивании добавляли 27,9 г 2-амино-3,5-дибромбензальдегида (соединение Формулы III), 30,5 г транс-4-амино-1-гидроксиадамантана гидрохлорида (соединение Формулы IV), 15,9 г безводного карбоната натрия и 10,8 г безводного сульфата магния, нагревали до 75°С и проводили реакцию в течение 5 часов или более. Завершение реакции регистрировали с помощью TLC, и реакционный растворитель упаривали при нормальном давлении. Затем к остатку добавляли 0,25 л абсолютного этанола, полученную смесь нагревали и подвергали перекристаллизации. После фильтрования и сушки получали 36,4 г транс-4-[2-амино-3,5-дибромфенилен)амино]адамантан-1-ола в виде порошка светло-желтого цвета. Фактический выход составлял 85,0%, и чистота составляла 98,6%.

Пример 4

В этом примере описан способ получения промежуточного соединения транс-4-[(2-амино-3,5-дибромфенилен)амино]адамантан-1-ола согласно настоящему изобретению, включающий, в частности, следующие стадии:

В реакционный сосуд добавляли 0,4 л абсолютного этанола, и к нему при перемешивании добавляли 27,9 г 2-амино-3,5-дибромбензальдегида (соединение Формулы III), 40,7 г транс-4-амино-1-гидроксиадамантана гидрохлорида (соединение Формулы IV), 15,9 г безводного карбоната натрия и 10,8 г безводного сульфата магния, нагревали до 75°С и проводили реакцию в течение 5 часов или более. Завершение реакции регистрировали с помощью TLC, и реакционный растворитель упаривали при нормальном давлении. Затем к остатку добавляли 0,25 л абсолютного этанола, полученную смесь нагревали и подвергали перекристаллизации. После фильтрования и сушки получали 34,7 г транс-4-[2-амино-3,5-дибромфенилен)амино]адамантан-1-ола в виде порошка светло-желтого цвета. Фактический выход составлял 81,0%, и чистота составляла 99,7%.

Пример 5

В этом примере описан способ получения промежуточного соединения транс-4-[(2-амино-3,5-дибромфенилен)амино]адамантан-1-ола согласно настоящему изобретению, включающий, в частности, следующие стадии.

В реакционный сосуд добавляли 0,4 л абсолютного этанола, и к нему при перемешивании добавляли 27,9 г 2-амино-3,5-дибромбензальдегида (соединение Формулы III), 22,4 г транс-4-амино-1-гидроксиадамантана гидрохлорида (соединение Формулы IV), 15,9 г безводного карбоната натрия и 10,8 г безводного сульфата магния, нагревали до 75°С и проводили реакцию в течение 5 часов или более. Завершение реакции регистрировали с помощью TLC, и реакционный растворитель упаривали при нормальном давлении. Затем к остатку добавляли 0,25 л абсолютного этанола, полученную смесь нагревали и подвергали перекристаллизации. После фильтрования и сушки получали 39,6 г транс-4-[2-амино-3,5-дибромфенилен)амино]адамантан-1-ола в виде порошка светло-желтого цвета. Фактический выход составлял 92,5%, и чистота составляла 99,6%.

Пример 6

В этом примере описан способ получения промежуточного соединения транс-4-[(2-амино-3,5-дибромфенилен)амино]адамантан-1-ола согласно настоящему изобретению, включающий, в частности, следующие стадии.

В реакционный сосуд добавляли 0,4 л абсолютного этанола, и к нему при перемешивании добавляли 27,9 г 2-амино-3,5-дибромбензальдегида (соединение Формулы III), 22,4 г транс-4-амино-1-гидроксиадамантана гидрохлорида (соединение Формулы IV), 20,7 г безводного карбоната калия и 10,8 г безводного сульфата магния, нагревали до 75°С и проводили реакцию в течение 5 часов или более. Завершение реакции регистрировали с помощью TLC, и реакционный растворитель упаривали при нормальном давлении. Затем к остатку добавляли 0,25 л абсолютного этанола, полученную смесь нагревали и подвергали перекристаллизации. После фильтрования и сушки получали 31,2 г транс-4-[2-амино-3,5-дибромфенилен)амино]адамантан-1-ола в виде порошка светло-желтого цвета. Фактический выход составлял 72,9%, и чистота составляла 98,1%.

Пример 7

В этом примере описан способ получения промежуточного соединения транс-4-[(2-амино-3,5-дибромфенилен)амино]адамантан-1-ола согласно настоящему изобретению, включающий, в частности, следующие стадии.

В реакционный сосуд добавляли 0,4 л смешанного растворителя из абсолютного этанола и тетрагидрофурана (1:1), и к нему при перемешивании добавляли 27,9 г 2-амино-3,5-дибромбензальдегида (соединение Формулы III), 24,4 г транс-4-амино-1-гидроксиадамантана гидрохлорида (соединение Формулы IV), 15,9 г безводного карбоната натрия и 10,8 г безводного сульфата магния, нагревали до 75°С и проводили реакцию в течение 5 часов или более. Завершение реакции регистрировали с помощью TLC, и реакционный растворитель упаривали при нормальном давлении. Затем к остатку добавляли 0,25 л абсолютного этанола, полученную смесь нагревали и подвергали перекристаллизации. После фильтрования и сушки получали 30,1 г транс-4-[2-амино-3,5-дибромфенилен)амино]адамантан-1-ола в виде порошка светло-желтого цвета. Фактический выход составлял 70,3%, и чистота составляла 98,5%.

Пример 8

В этом примере описан способ получения промежуточного соединения транс-4-[(2-амино-3,5-дибромфенилен)амино]адамантан-1-ола согласно настоящему изобретению, включающий, в частности, следующие стадии.

В реакционный сосуд добавляли 0,4 л тетрагидрофурана, и к нему при перемешивании добавляли 27,9 г 2-амино-3,5-дибромбензальдегида (соединение Формулы III), 24,4 г транс-4-амино-1-гидроксиадамантана гидрохлорида (соединение Формулы IV), 15,9 г безводного карбоната натрия и 10,8 г безводного сульфата магния, нагревали до 75°С и проводили реакцию в течение 5 часов или более. Завершение реакции регистрировали с помощью TLC, и реакционный растворитель упаривали при нормальном давлении. Затем к остатку добавляли 0,3 л абсолютного этанола, полученную смесь нагревали и подвергали перекристаллизации. После фильтрования и сушки получали 27,8 г транс-4-[2-амино-3,5-дибромфенилен)амино]адамантан-1-ола в виде порошка светло-желтого цвета. Фактический выход составлял 64,9%, и чистота составляла 99,5%.

Пример 9

В этом примере описан способ получения промежуточного соединения транс-4-[(2-амино-3,5-дибромфенилен)амино]адамантан-1-ола согласно настоящему изобретению, включающий, в частности, следующие стадии.

В реакционный сосуд добавляли 0,4 л абсолютного этанола, и к нему при перемешивании добавляли 27,9 г 2-амино-3,5-дибромбензальдегида (соединение Формулы III), 22,4 г транс-4-амино-1-гидроксиадамантана гидрохлорида (соединение Формулы IV), 10,5 г безводного карбоната натрия и 7,1 г безводного сульфата натрия, нагревали до 50°С и проводили реакцию в течение 5 часов или более. Завершение реакции регистрировали с помощью TLC, и реакционный растворитель упаривали при нормальном давлении. Затем к остатку добавляли 0,25 л абсолютного метанола, полученную смесь нагревали и подвергали перекристаллизации. После фильтрования и сушки получали 30,5 г транс-4-[2-амино-3,5-дибромфенилен)амино]адамантан-1-ола в виде порошка светло-желтого цвета. Фактический выход составлял 71,2%, и чистота составляла 99,4%.

Пример 10

В этом примере описан способ получения промежуточного соединения транс-4-[(2-амино-3,5-дибромфенилен)амино]адамантан-1-ола согласно настоящему изобретению, включающий, в частности, следующие стадии.

В реакционный сосуд добавляли 0,15 л DMF (диметилформамид), и к нему при перемешивании добавляли 27,9 г 2-амино-3,5-дибромбензальдегида (соединение Формулы III), 24,4 г транс-4-амино-1-гидроксиадамантана гидрохлорида (соединение Формулы IV), 4,0 г гидроксида натрия и 9,6 г безводного сульфата магния, нагревали до 90°С и проводили реакцию в течение 5 часов или более. Завершение реакции регистрировали с помощью TLC, и реакционный растворитель упаривали при нормальном давлении. Затем к остатку добавляли 0,3 л абсолютного метанола, полученную смесь нагревали и подвергали перекристаллизации. После фильтрования и сушки получали 27,9 г транс-4-[2-амино-3,5-дибромфенилен)амино]адамантан-1-ола в виде порошка светло-желтого цвета. Фактический выход составлял 65,2%, и чистота составляла 98,5%.

Пример 11

В этом примере описан способ получения промежуточного соединения транс-4-[(2-амино-3,5-дибромфенилен)амино]адамантан-1-ола согласно настоящему изобретению, включающий, в частности, следующие стадии.

В реакционный сосуд добавляли 0,45 л абсолютного этанола, и к нему при перемешивании добавляли 27,9 г 2-амино-3,5-дибромбензальдегида (соединение Формулы III), 24,4 г транс-4-амино-1-гидроксиадамантана гидрохлорида (соединение Формулы IV), 5,6 г гидроксида калия и 10,8 г безводного сульфата магния, нагревали до 70°С и проводили реакцию в течение 5 часов или более. Завершение реакции регистрировали с помощью TLC, и реакционный растворитель упаривали при нормальном давлении. Затем к остатку добавляли 0,3 л абсолютного этанола, полученную смесь нагревали и подвергали перекристаллизации. После фильтрования и сушки получали 33,0 г транс-4-[2-амино-3,5-дибромфенилен)амино]адамантан-1-ола в виде порошка светло-желтого цвета. Фактический выход составлял 77,1%, и чистота составляла 97,5%.

Пример 12

В этом примере описан способ получения промежуточного соединения транс-4-[(2-амино-3,5-дибромфенилен)амино]адамантан-1-ола согласно настоящему изобретению, включающий, в частности, следующие стадии.

В реакционный сосуд добавляли 0,35 л абсолютного этанола, и к нему при перемешивании добавляли 27,9 г 2-амино-3,5-дибромбензальдегида (соединение Формулы III), 24,4 г транс-4-амино-1-гидроксиадамантана гидрохлорида (соединение Формулы IV), 15,9 г безводного карбоната натрия и 18,1 г безводного сульфата магния, и проводили реакцию с обратным холодильником в течение 5 часов или более. Завершение реакции регистрировали с помощью TLC, и реакционный растворитель упаривали при нормальном давлении. Затем к остатку добавляли 0,1 л абсолютного метанола, полученную смесь нагревали и подвергали перекристаллизации. После фильтрования и сушки получали 36,8 г транс-4-[2-амино-3,5-дибромфенилен)амино]адамантан-1-ола в виде порошка светло-желтого цвета. Фактический выход составлял 85,9%, и чистота составляла 92,2%.

Пример 13

В этом примере описан способ получения промежуточного соединения транс-4-[(2-амино-3,5-дибромфенилен)амино]адамантан-1-ола согласно настоящему изобретению, включающий, в частности, следующие стадии.

В реакционный сосуд добавляли 0,55 л изопропанола, и к нему при перемешивании добавляли 27,9 г 2-амино-3,5-дибромбензальдегида (соединение Формулы III), 24,4 г транс-4-амино-1-гидроксиадамантана гидрохлорида (соединение Формулы IV), 48,8 г безводного карбоната цезия и 24,0 г безводного сульфата магния, нагревали до 75°С и проводили реакцию в течение 5 часов или более. Завершение реакции регистрировали с помощью TLC, и реакционный растворитель упаривали при нормальном давлении. Затем к остатку добавляли 0,4 л изопропанола, полученную смесь нагревали и подвергали перекристаллизации. После фильтрования и сушки получали 35,0 г транс-4-[2-амино-3,5-дибромфенилен)амино]адамантан-1-ола в виде порошка светло-желтого цвета. Фактический выход составлял 81,7%, и чистота составляла 98,8%.

Пример 14

В этом примере описан способ получения промежуточного соединения транс-4-[(2-амино-3,5-дибромфенилен)амино]адамантан-1-ола согласно настоящему изобретению, включающий, в частности, следующие стадии.

В реакционный сосуд добавляли 0,1 л диметилсульфоксида (DMSO), и к нему при перемешивании добавляли 27,9 г 2-амино-3,5-дибромбензальдегида (соединение Формулы III), 24,4 г транс-4-амино-1-гидроксиадамантана гидрохлорида (соединение Формулы IV), 12,6 г безводного бикарбоната натрия и 5,6 г хлорида кальция, нагревали до 120°С и проводили реакцию в течение 5 часов или более. Завершение реакции регистрировали с помощью TLC, и реакционный растворитель упаривали при нормальном давлении. Затем к остатку добавляли 0,4 л безводного этанола, полученную смесь нагревали и подвергали перекристаллизации. После фильтрования и сушки получали 32,1 г транс-4-[2-амино-3,5-дибромфенилен)амино]адамантан-1-ола в виде порошка светло-желтого цвета. Фактический выход составлял 75,0%, и чистота составляла 98,7%.

Пример 15

В этом примере описан способ получения промежуточного соединения транс-4-[(2-амино-3,5-дибромфенилен)амино]адамантан-1-ола согласно настоящему изобретению, включающий, в частности, следующие стадии.

В реакционный сосуд добавляли 0,2 л безводного этанола, и к нему при перемешивании добавляли 27,9 г 2-амино-3,5-дибромбензальдегида (соединение Формулы III), 24,4 г транс-4-амино-1-гидроксиадамантана гидрохлорида (соединение Формулы IV), 82 мл N,N-диизопропилэтиламина и 10,8 г безводного сульфата кальция, нагревали до 75°С и проводили реакцию в течение 5 часов или более. Завершение реакции регистрировали с помощью TLC, и реакционный растворитель упаривали при нормальном давлении. Затем к остатку добавляли 0,7 л н-пропанола, полученную смесь нагревали и подвергали перекристаллизации. После фильтрования и сушки получали 26,1 г транс-4-[2-амино-3,5-дибромфенилен)амино]адамантан-1-ола в виде порошка светло-желтого цвета. Фактический выход составлял 61,0%, и чистота составляла 99,1%.

Пример 16

В этом примере описан способ получения промежуточного соединения транс-4-[(2-амино-3,5-дибромфенилен)амино]адамантан-1-ола согласно настоящему изобретению, включающий, в частности, следующие стадии.

В котел добавляли 15 л безводного этанола, и к нему при перемешивании добавляли 995,8 г 2-амино-3,5-дибромбензальдегида (соединение Формулы III), 800,0 г транс-4-амино-1-гидроксиадамантана гидрохлорида (соединение Формулы IV), 567,6 г безводного карбоната натрия и 400,0 г безводного сульфата магния, нагревали и поддерживали температуру 75±5°С и проводили реакцию в течение 10 часов или более. Завершение реакции регистрировали с помощью TLC, и реакционный растворитель упаривали при нормальном давлении. Затем к остатку добавляли 2 л безводного этанола, полученную смесь нагревали и подвергали перекристаллизации. После фильтрования и сушки получали 1381,9 г транс-4-[2-амино-3,5-дибромфенилен)амино]адамантан-1-ола в виде порошка светло-желтого цвета. Фактический выход составлял 90,0%, и чистота составляла 99,6%.

В примерах 17-20 описаны способы получения транс-4-[(2-амино-3,5-дибромбензил)амино]адамантан-1-ола и его соли.

Пример 17

В этом примере описано получение соединения Формулы I, транс-4-[(2-амино-3,5-дибромбегоил)амино]адамантан-1-ола, и схема реакции является следующей:

Способ получения, в частности, заключается в следующем.

Стадия 1: Получение транс-4-[(2-амино-3,5-дибромфенилен)-амино]-адамантан-1-ола (соединение Формулы II)

В реакционный сосуд добавляли 20,4 г транс-4-амино-1-гидроксиадамантана гидрохлорида (0,1 моль), 55,6 г 2-амино-3,5-дибромбензальдегида (0,36 моль) и 500 мл абсолютного этанола (EtOH), затем добавляли 10 г молекулярного сита и кипятили с обратным холодильником в течение 10 часов. Завершение реакции регистрировали с помощью TLC, и реакционный растворитель упаривали при нормальном давлении. К остатку добавляли 250 мл абсолютного этанола, нагревали и подвергали перекристаллизации, охлаждали и фильтровали с получением 36,4 г транс-4-[2-амино-3,5-дибромфенилен]амино]адамантан-1-ола. Выход составлял 85%, и чистота составляла 98,5%.

Стадия 2: Получение транс-4-[(2-амино-3,5-дибромбензил)амино]-адамантан-1-ола (соединение Формулы I)

В реакционный сосуд добавляли 34,3 г (0,08 моль) промежуточного соединения Формулы II, 500 мл метиленхлорида и 500 мл безводного метанола, растворяли при перемешивании, и затем добавляли 3,71 г (0,098 моль) боргидрида натрия. После завершения добавления проводили реакцию при поддержании температуры 5°С в течение 10 часов или более. Завершение реакции регистрировали с помощью TLC. После завершения реакции растворитель удаляли концентрированием при пониженном давлении, к остатку добавляли 100 мл питьевой воды и 300 мл метиленхлорида, растворяли при перемешивании, и затем отделяли, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и сушили с помощью роторного испарителя с получением 31,36 г соединения формулы I с выходом 91% и чистотой 98,9%.

¹H NMR (400 МГц, DMSO-d₆): δ 7,47 (d, J=2,00, 1Н), 7,24 (d, J=2,40, 1Н), 5,76-5,72 (m, 2H), 4,32 (s, 1H), 3,64 (m, 2H), 2,52-2,50 (m, 1H), 2Д9 (m, 1H), 1,89-1,96 (m, 5H), 1,58 (m,6H), 1,23- 1,26 (m,2H).

MS m/z (ES): 431,18 [M+H]⁺, 429,02 [M-H]^-.

Пример 18

В этом примере описано получение транс-4-[(2-амино-3,5-дибромбензил)амино]адамантан-1-ола гидрохлорида (соединение Формулы V). Схема реакции является следующей:

Способ получения, в частности, заключается в следующем. В реакционный сосуд добавляли 21,50 г (0,05 моля) соединения Формулы I, полученного в соответствии со способом, описанным в примере 17, и 300 мл абсолютного этанола и нагревали до 75°С до растворения твердого вещества. К субстрату по каплям добавляли 40 мл 15% раствора хлороводорода (в этаноле). После завершения добавления в течение 0,5 ч нагревание прекращали и оставляли охлаждаться естественным образом для осаждения кристаллов в течение примерно 3 часов. После фильтрования получали 19,8 г транс-4-[(2-амино-3,5-дибромбензил)амино]адамантан-1-ола гидрохлорида (соединение Формулы V).

Чистота по данным HPLC составляла 99,89%, и выход составлял 85%.

¹Н NMR. (400 МГц, DMSO-d₆): δ 9,15 (s, 2Н), 7,70 (d, J=2,24, 1H), 7,58 (d, J=2,25, 1H), 5,79 (s, 2H), 4,61 (s, 1H), 4,16 (m, 2H), 3,35 (s, 1H), 2,39 (m, 2H), 2,12-2,15 (m, 2H), 2,0 (m, 1H), 1,60-1,64 (m, 6H), 1,31-1,34 (m, 2H).

¹³C NMR (400 МГц, DMSO-d₆): δ 28,64, 28,64, 28,64, 28,80, 30,43, 30,43, 43,87, 44,91, 44,96, 61,71, 65,33, 106,33, 109,72, 119,01, 134,25, 134,46, 144,14.

Элементный анализ, фактические значения: 43,73% (С), 4,87% (Н), 6,14% (N); теоретические значения: 43,76% (С), 4,97% (Н), 6,0% (N).

Кроме того, в настоящей заявке представлен спектр поглощения в инфракрасной области соединения Формулы V для подтверждения его структуры (представлен на Фиг. 9). Кроме того, в настоящей заявке соединение Формулы V согласно настоящему изобретению дополнительно подвергали выращиванию монокристаллов и проводили эксперимент по рефракции монокристаллов (результаты представлены на Фиг. 10), который дополнительно подтверждает, что 4-[(2-амино-3,5-дибромбензил)амино]адамантан-1-ол согласно настоящему изобретению имеет транс-структуру, а также было установлено, что транс-4-[(2-амино-3,5-дибромбензил)амино]адамантан-1-ол согласно настоящему изобретению и HCl при образовании ими соли находятся в отношении 1:1.

Пример 19

В этом примере описано получение транс-4-[(2-амино-3,5-дибромбензил)амино]адамантан-1-ола гидросульфата. Способ получения, в частности, заключается в следующем.

В реакционный сосуд добавляли 4,3 г (0,01 моля) соединения Формулы I, полученного в соответствии со способом, описанным в примере 17, и 50 мл ацетона, охлаждали до примерно 10°С и по каплям при перемешивании добавляли раствор концентрированной серной кислоты в ацетоне (2 мл концентрированной серной кислоты, растворенной в 10 мл ацетона). Температуру поддерживали на уровне 10°С, продолжая перемешивание в течение 2 часов, и затем проводили фильтрование с получением 4,6 г транс-4-[(2-амино-3,5-дибромбензил)амино]адамантан-1-ола гидросульфата.

Чистота по данным HPLC составляла 99,89%, и выход составлял 87%.

¹Н NMR. (400 МГц, DMSO-d₆): δ 9,10 (s, 2Н), 7,69 (d, J=2,24, 1Н), 7,57 (d, J=2,25, 1H), 5,78 (s, 2H), 4,61 (s, 1H), 4,16 (m, 2H), 3,35 (s, 1H), 2,39 (m, 2H), 2,12-2,15 (m, 2H), 2,0 (m, 1H), 1,60-1,64 (m, 6H), 1,31-1,34 (m, 2H).

Элементный анализ, фактические значения: 38,79% (С), 4,35% (Н), 5,37% (N); теоретические значения: 38,73% (С), 4,40% (Н), 5,31% (N).

Пример 20

В этом примере описано получение транс-4-[(2-амино-3,5-дибромбензил)амино]адамантан-1-ола гидробромида. Способ получения, в частности, заключается в следующем.

В реакционный сосуд добавляли 4,3 г (0,01 моля) соединения Формулы I, полученного в соответствии со способом, описанным в примере 17, и 300 мл абсолютного этанола и нагревали до 75°С до растворения твердого вещества. К субстрату по каплям добавляли 4 мл 40% раствора бромоводорода. После завершения добавления в течение 0,5 ч нагревание прекращали и оставляли охлаждаться естественным образом для осаждения кристаллов в течение примерно 3 часов. После фильтрования получали 4,4 г транс-4-[(2-амино-3,5-дибромбензил)- амино]адамантан-1-ола гидрбромида.

Чистота по данным HPLC составляла 99,89%, и выход составлял 86%.

¹Н NMR (400 МГц, DMSO-d₆): δ 9,12 (s, 2Н), 7,70 (d, J=2,24, 1Н), 7,58 (d, J=2,25, 1H), 5,79 (s, 2H), 4,61 (s, 1H), 4,16 (m, 2H), 3,35 (s, 1H), 2,39 (m, 2H), 2,12-2,15 (m, 2H), 2,0 (m, 1H), 1,60-1,64 (m, 6H), 1,31-1,33 (m, 2H).

Элементный анализ, фактические значения: 39,99% (С), 4,43% (Н), 5,57% (N); теоретические значения: 39,95% (С), 4,54% (Н), 5,48% (N).

Сравнительный пример 1

Получение 4-[(2-амино-3,5-дибромбензил)амино]адамантан-1-ола гидрохлорида (рацемического)

4-[(2-Амино-3,5-дибромбензил)амино] адамантан-1-ола гидрохлорид (рацемический) синтезировали в соответствии со способом получения, описанным в примере 13 патента CN 201910671508.7.

Для подтверждения характеристик действия и применения соединений согласно настоящему изобретению эффективность каждого из соединений, полученных в приведенных выше примерах, демонстрируется с помощью следующих экспериментальных примеров воплощения настоящего изобретения.

Экспериментальный пример 1

В этом экспериментальном примере описаны тесты острого повреждения легких у мышей для соединения Формулы I и соединения Формулы V.

Использовали мышей КМ массой 18-22 г, все 66 из которых были самцами, случайным образом распределяя их в контрольную группу нормы, контрольную группу модели, группу соединения Формулы I (40 мг/кг в пересчете на свободное основание), группу соединения Формулы V (40 мг/кг в пересчете на свободное основание), группу сравнительного примера (40 мг/кг в пересчете на свободное основание) и группу амброксола гидрохлорида (40 мг/кг в пересчете на свободное основание), по 11 животных в каждой группе, и каждой группе проводили внутривенное введение (вещества растворяли в изотоническом солевом растворе путем регулирования рН или непосредственно растворяли в изотоническом солевом растворе) один раз в день 4 раза, в то время как контрольной группе модели и контрольной группе нормы вводили эквивалентное количество изотонического солевого раствора. Через 30 минут после последнего введения всем мышам, за исключением контрольной группы нормы, внутривенно вводили 300 мг/кг олеиновой кислоты (приготовленной в желаемой концентрации в стерильном солевом растворе, содержащем 0,1% эмбриональной телячьей сыворотки, непосредственно перед применением), а контрольной группе, получающей носитель, вводили эквивалентный объем солевого раствора, содержащего 0,1% BSA (бычий сывороточный альбумин). Мышей умерщвляли через 4 часа после последнего введения, и правые доли легких извлекали и фиксировали в 10%-ном растворе формальдегида. После дегидратации, заключения в парафин, приготовления срезов и окрашивания с помощью НЕ их исследовали под микроскопом на предмет патологических изменений легочной ткани. Критерии гистологической классификации приведены в Таблице 1, и результаты представлены в Таблице 2. В данном случае лекарственным средством, применяемым для группы сравнительного примера, являлся 4-[(2-амино-3,5-дибромбензил)амино]адамантан-1-ола гидрохлорид (рацемический), полученный согласно сравнительному примеру 1.

Указанные выше показатели умножают на различные весовые коэффициенты в зависимости от значимости патологии (утолщение альвеолярной стенки × 1, инфильтрация воспалительными клетками × 1, некроз легочной ткани × 3) и затем суммируют с получением обобщенной оценки патологии легких.

Примечание: По сравнению с контрольной группой модели: *Р<0,05, **Р<0,01; по сравнению с группой амброксола гидрохлорида:

Из приведенной выше Таблицы 2 следует, что: по сравнению с контрольной группой модели соединение Формулы I, соединение Формулы V и соединение сравнительного примера обладают явно выраженным защитным действием против вызванного олеиновой кислотой острого повреждения легких у мышей (Р<0,05 или Р<0,01). Обобщенные оценки патологии в группе соединения Формулы I и в группе соединения Формулы V были значительно снижены по сравнению с группой амброксола гидрохлорида со статистически значимым различием (Р<0,05), что указывает на то, что соединение Формулы I и соединение Формулы V оказывают значительно лучшее защитное действие на легкие, чем амброксола гидрохлорид, при этом их действие также лучше, чем действие соединения сравнительного примера.

Прежде всего, соединение Формулы I и соединение Формулы V оказывают защитное действие против вызванного олеиновой кислотой острого повреждения легких у мышей, и их действие лучше, чем действие амброксола гидрохлорида и соединения сравнительного примера.

Экспериментальный пример 2

В этом экспериментальном примере описано исследование действия соединения Формулы I и соединения Формулы V на вызванный водным раствором аммиака кашлевой рефлекс у мышей.

Использовали 50 мышей КМ массой 18-22 г обоего пола, которых случайным образом распределяли в 5 групп: контрольную группу модели, группу соединения Формулы 1(15 мг/кг в пересчете на свободное основание), группу соединения Формулы V (15 мг/кг в пересчете на свободное основание), группу сравнительного примера (15 мг/кг в пересчете на свободное основание) и группу амброксола гидрохлорида (15 мг/кг в пересчете на свободное основание), по 10 животных в каждой группе; и проводили внутривенное введение (вещества растворяли в изотоническом солевом растворе путем регулирования рН или непосредственно растворяли в изотоническом солевом растворе). Через 30 минут после введения мышей помещали в перевернутый лабораторный стакан объемом 500 мл с ватным тампоном внутри. Отсчет времени начинали после добавления на ватный тампон концентрированного раствора аммиака в количестве 0,2 мл/мышь. Наблюдали и регистрировали количество эпизодов кашля у каждого животного в течение 3 минут. Результаты анализировали с применением t'-критерия, и результаты представлены в Таблице 3. В данном случае лекарственным средством, применяемым для группы сравнительного примера, являлся 4-[(2-амино-3,5-дибромбензил)амино]адамантан-1-ола гидрохлорид (рацемический), полученный согласно сравнительному примеру 1.

Примечание: По сравнению с контрольной группой модели: *Р<0,05, **Р<0,01; по сравнению с группой амброксола гидрохлорида:

Из Таблицы 3 следует, что: по сравнению с контрольной группой модели соединение Формулы I, соединение Формулы V, соединение в сравнительном примере и амброксола гидрохлорид могут значительно снижать количество эпизодов кашля (Р<0,05 или Р<0,01). Соединение Формулы I и соединение Формулы V снижают количество эпизодов кашля по сравнению с группой амброксола гидрохлорида со статистически значимым различием (Р<0,01); а также соединение Формулы I и соединение Формулы V снижают количество эпизодов кашля по сравнению с группой сравнительного примера со статистически значимым различием (Р<0,05), что указывает на то, что противокашлевое действие соединения Формулы I и соединения Формулы V значительно лучше, чем противокашлевое действие амброксола гидрохлорида и соединения в сравнительном примере.

Экспериментальный пример 3

В этом экспериментальном примере описан тест выделения мокроты, собранной с помощью капиллярной трубки, для соединения Формулы I и соединения Формулы V.

Использовали крыс SD массой 180-220 г обоего пола, которых случайным образом распределяли в группы, по 10 крыс в каждую группу, а именно контрольную группу носителя, группу соединения Формулы I (15 мг/кг в пересчете на свободное основание), группу соединения Формулы V (15 мг/кг в пересчете на свободное основание), группу сравнительного примера (15 мг/кг в пересчете на свободное основание) и амброксола гидрохлорида (15 мг/кг в пересчете на свободное основание). Крыс не кормили и ограничивали в потреблении воды в течение 12 часов перед определением количества выделяемой мокроты, и вводили соответствующие лекарственные средства через хвостовую вену (растворенные в изотоническом солевом растворе путем регулирования рН или непосредственно растворенные в изотоническом солевом растворе). Через 30 минут после введения крыс подвергали действию наркоза путем внутрибрюшинного инъекционного введения 1 г/кг раствора уретана в солевом растворе, фиксировали в положении лежа на спине и отделяли трахею после разреза кожи шеи. С помощью иглы шприца прокалывали небольшое отверстие между двумя хрящевыми кольцами на нижнем крае щитовидного хряща и вставляли в трахею капиллярную трубку (с внутренним диаметром 0,8 мм и длиной 10 см) в направлении к центру. Мокроту собирали при регулировании угла между капиллярной трубкой и трахеей, и сумму длин пути жидкости в капиллярной трубке (мм) использовали для оценки отхаркивающего действия. Регистрировали количество мокроты, выделяемой крысами в течение 90 минут. Количество выделяемой мокроты в каждой группе статистически проанализировали, и результаты представлены в Таблице 4. В данном случае лекарственным средством, применяемым для группы сравнительного примера, являлся 4-[(2-амино-3,5-дибромбензил)амино]адамантан-1-ола гидрохлорид (рацемический), полученный согласно сравнительному примеру 1.

Таблица 4. Результаты исследования действия на количество собранной с помощью капиллярной трубки выделяемой мокроты у крыс

Примечание: По сравнению с контрольной группой: *Р<0,05; по сравнению с контрольной группой,

Из Таблицы 4 следует, что: по сравнению с контрольной группой без действующего вещества все исследуемые вещества могут значительно увеличивать количество выделяемой мокроты у крыс со статистически значимым различием (Р<0,05); по сравнению с группой амброксола гидрохлорида как соединение Формулы I, так и соединение Формулы V, а также соединение из сравнительного примера могут значительно увеличивать количество выделяемой мокроты у крыс (Р<0,05), что значительно лучше, чем при применении амброксола гидрохлорида; соединение Формулы I и соединение Формулы V также могут значительно увеличивать количество выделяемой мокроты у крыс по сравнению с соединением из сравнительного примера со статистически значимым различием (Р<0,05).

Таким образом, соединение Формулы I и соединение Формулы V могут значительно увеличивать количество выделяющейся мокроты у крыс, и их действие лучше, чем действие амброксола гидрохлорида и соединения из сравнительного примера. Экспериментальный пример 4

В этом экспериментальном примере описан тест выделения фенолового красного с мокротой у мышей для соединения Формулы I и соединения Формулы V.

Методика проведения эксперимента: Использовали 60 мышей обоего пола, которых случайным образом распределяли в контрольную группу (изотонический солевой раствор), группу соединения Формулы I (30 мг/кг в пересчете на свободное основание), группу соединения Формулы V (30 мг/кг в пересчете на свободное основание), группу сравнительного примера (30 мг/кг в пересчете на свободное основание) и амброксола гидрохлорида (30 мг/кг в пересчете на свободное основание), по 12 мышей в каждой группе; соответствующие лекарственные средства вводили через хвостовую вену (растворенные в изотоническом солевом растворе путем регулирования рН или непосредственно растворенные в изотоническом солевом растворе) 2 раза подряд. Через 15 минут после последнего введения мышам подкожно вводили 5%-ный раствор фенолового красного в изотоническом солевом растворе (0,5 г/кг). Через 30 минут мышей умерщвляли и иссекали участок трахеи от уровня ниже щитовидного хряща до места бифуркации трахеи. Указанный участок помещали в пробирку, содержащую 1 мл изотонического солевого раствора, встряхивали и вымачивали в течение 30 минут, и затем центрифугировали в течение 10 минут (3000 об./мин). Супернатант переносили в другую пробирку, добавляли 0,1 мл 1 М раствора NaOH и равномерно встряхивали для колориметрического измерения при длине волны 546 нм. Проводили статистическое сравнение действия лекарственных средств в каждой группе на трахеальную секрецию фенолового красного у мышей, и полученные результаты эксперимента представлены в Таблице 5 ниже. В данном случае лекарственным средством, применяемым для группы сравнительного примера, являлся 4-[(2-амино-3,5-дибромбензил)амино]адамантан-1-ола гидрохлорид (рацемический), полученный согласно сравнительному примеру 1.

Примечание: По сравнению с контрольной группой: *Р<0,05; По сравнению с контрольной группой,

Из приведенной выше Таблицы 5 следует, что: по сравнению с контрольной группой (изотонический солевой раствор) все исследуемые вещества могут значительно увеличивать секрецию фенолового красного у мышей со статистически значимым различием (Р<0,05); по сравнению с группой амброксола гидрохлорида как соединение Формулы I, так и соединение Формулы V, а также соединение из сравнительного примера могут значительно увеличивать выведение фенолового красного (Р<0,05), которое значительно лучше, чем при применении амброксола гидрохлорида; соединение Формулы I, соединение Формулы V также могут увеличивать выведение фенолового красного значительно лучше по сравнению с группой сравнительного примера со статистически значимым различием (Р<0,05).

Таким образом, соединение Формулы I и соединение Формулы V могут значительно увеличивать выведение фенолового красного, и их действие лучше, чем действие амброксола гидрохлорида и соединения из сравнительного примера.

Таким образом, согласно изложенному выше, соединение Формулы I и соединение Формулы V оказывают противокашлевое действие в модели вызванного аммиаком кашля у мышей, при этом их действие лучше, чем действие амброксола гидрохлорида и соединения из сравнительного примера; соединение Формулы I и соединение Формулы V могут значительно увеличивать выведение фенолового красного у мышей, при этом их действие лучше, чем действие амброксола гидрохлорида и соединения в сравнительном примере.

Описанные выше примеры представляют собой лишь предпочтительные воплощения настоящего изобретения и не должны рассматриваться как ограничение объема охраны настоящего изобретения. Любые изменения или модификации, не имеющие существенного значения, внесенные в рамках основной идеи и сущности настоящего изобретения, решают те же технические задачи, что и настоящее изобретение, и должны быть включены в объем охраны настоящего изобретения.

Настоящее изобретение относится к применению производного транс-амантадина, имеющего структуру, представленную Формулой I, или его фармацевтически приемлемой соли в изготовлении лекарственного средства для предупреждения и/или лечения кашля: . Настоящее изобретение обеспечивает значительно большую эффективность противокашлевого действия соединения Формулы I и соединения Формулы V чем противокашлевое действие амброксола гидрохлорида и рацемата производного амантадина. 5 з.п. ф-лы, 10 ил., 5 табл., 24 пр.

1. Применение производного транс-амантадина, имеющего структуру, представленную Формулой I, или его фармацевтически приемлемой соли в изготовлении лекарственного средства для предупреждения и/или лечения кашля:

.

2. Применение по п. 1, отличающееся тем, что оно включает применение в изготовлении лекарственного средства для предупреждения и/или лечения хронического кашля или рефрактерного кашля.

3. Применение по п. 1 или 2, отличающееся тем, что фармацевтически приемлемая соль образована производным транс-адамантана и кислотой.

4. Применение по п. 1, где фармацевтически приемлемая соль включает ацетат, гидросульфат, аскорбат, бензоат, бензолсульфонат, цитрат, фумарат, гидрохлорид, гидробромид, малеат, метансульфонат, нитрат, оксалат, фосфат, сукцинат или сульфат.

5. Применение по п. 4, отличающееся тем, что фармацевтически приемлемая соль выбрана из:

транс-4-[(2-амино-3,5-дибромбензил)амино]адамантан-1-ола гидрохлорида,

транс-4-[(2-амино-3,5-дибромбензил)амино]адамантан-1-ола гидросульфата и

транс-4-[(2-амино-3,5-дибромбензил)амино]адамантан-1-ола гидробромида.

6. Применение по п. 4, отличающееся тем, что фармацевтически приемлемая соль представляет собой гидрохлорид, имеющий структуру, представленную Формулой V:

.