Способ биологического определения типов вируса ящура Советский патент 1957 года по МПК C12Q1/70 

Paii,i;oiia; bii;isi, пллиовая борьба с ящуром, основанная на 1нирокой профи;гактической вакцинации скота, немыслима без точного знания и учета типовой прнналлежьюстн вируса, являющегося виновником эинзоотической вспышкн заболевания в той или иной местности.

Лабораторное oiipe/ie.neiiHe типовой принадлежности низоотических HiTa.MM(jH jMipyca Я1нура должно поэтому рассматриваться как обязате.:1ьи)е звено в комн.тексе нропивоMHUpiibix меронрня111Й.

R дост; точ11ой мере изучены три наиболее распространенных тнна О, А и С вируса ящура.

Известные и исно.т зуем1ые во мно.гих странах мира способы диагностики типов вируса ящура-биолошческнй, на MopCKi-ix свинках, осуществ.чяемый путем перекрестного зараже1И1я их, и серологический, HJMI но.мощи реакцни связывания комилемеита--не получили и ирокого пр1:зиаиня н использования в ус.ювнях ветеринарной ирактики СССР, за исключением применения нх отдел иыми научно-иселедовател лкнми учреждениями. Первый из

этих еиосооов громоздок вь зывяет болыной расход морских свинок и O4eiHj д.-ителен (2---3 недели), а второй, KpOnic TOiO, требует участия в работе квалифицированных врачей--ссфо.логов I н)нмсиения в качестве антиген; афтозиого материа.ла (JT естественно бо.тьных ящуром животШиХ, но.лучение которого не всегда возможно.

В оинеываемом еиоеобе биолог.ического определення типов вируса яш.ур;: указ. недостатки устранены тем, что гнпериммуиизацию кролико:; производят ;1даитированиыми к MiiiniaM тииовыми штаммами вируса с нос,чеду1он;им введением полученных от кро.гиИСов сывороток мыи1;:м, которых заражают неизвеетным 11Н1ОМ вируса.

Видонзме.ченный способ имеет ту особенноеть, что сыворотки от переболевщнх нензвестньш тнпом вируса живо ) вводят белы.м мышам и заражают их известными типовыми стандартными и)таммами вируса, предварительио адаптироваиными к белым мьниам.

Для осущеетвления способа, основываясь на общеизвестных иммлнооиологических принципах, iieooxoлимо:

1.Получить от кроликов гипериммуиныс типоспецифическис сыворотки О, А и С.

2.Использовать вирусисйтрализующис и превентивные свойства этих сывороток для типизации штаммов вируса ящура. В качестве биологического индикатора для выявления типоспецифичности сыворотки могут с,- ужить белые мыши 8-10Д11евио1х) возраста, высоко восприимчивые к вирусу ящура.

СХЕМА ИММУНИЗАЦИИ КРОЛИКОВ

Для иммунизации подбираются взрослые кролики весом от 3-4 кг. Каждым типовым штаммом вируса ящура иммунизируется отдельная группа кроликов.

В качестве иммунизирующих антигенов прнме 1яются стандартные типовые щтаммы вируса ящура О, Аи С, предварительно адаптированные к организму белых мышей 8-10-дневного возраста. Фильтрат из органов и тканей больных мышей вводится кроликам интравенозно и в отдельных опытах подкожно (первая инъекция 10 мл, вторая 15 мл и третья 15 мл). Интервал между второй и третьей инъекцией-7 дней. Кролики обескровливаются через 10-12 дней после третьей иммунизации.

ИСПЫТАНИЕ ГИПЕРИММУННЫХ КРОЛИЧЬИХ СЫВОРОТОК НА ТИПОСПЕЦИФИЧНОСТЬ

Полученные сыворотки испытываются на типоспецифичность двумя способами; путем проверки их вируснейтрализующих и превентивных свойств.

А. Способ нейтрализации

Типовые сыворотки О, А и С смещиваются в: разных объемах с одноименными разноименными типовыми штаммами вируса ящура и выдерживаются для нейтрализации при температуре 25-30 1 час. Затем

иснытхчмыс c.viecH вводятся сооткетственно 9 группам мышей 8- -10диевного возраста подкожно в дозе 0,2 М.1. Одновременно трем группам мышей вводятся типовые вирусы ящура без сывороток-- контроль на актив11ост15 внруса.

Б. Испытание п р е в е н т и вн ы X свойств типовых сывороток

Каждая испытуемая сыворотка тина О, А и С вводится трем группам белых мышей 7-8-дневного возраста подкожно в дозе 0,2 мл. На следуюн ий день 9 групп мышей перекрестно заражаются типовыми Н1та.гмами вируса ящура. Вирус вводится подкожно в дозе 0,2 мл. В качестве контроля служат 3 дополнительные группы мыщей, зараженные типовым вирусом .ура, которым сыворотка не вводится.

В. Оценка типовой специфичности сыворотки

Сыворотки считаются типоспецифичными в том случае, когда они обладают способностью нейтрализовать инфекционность только одноименных типов вируса ящура и предохранять от заболевания подопытных мышей при последующем заражении только одноименным типовым вирусом ящура. Во всех остальных сочетаниях сывороток с разноименными типами вируса подопытные мыши в 100% случаев заболевают и погибают от ящура.

Г. Ретроспективный метод диагностики типов вируса ящура

Логическим видоизменением способа является ретроспективная диагностика типов вируса ящура, основанная на том, что сыворотки реконвалесцентов, полученные от животных па 10-30 день после их переболевания ящуром, обладают превентивными типоспецифическими свойствами. Типоспецифичность таких сывороток здается улавливать при помощи биологического метода пу