Способ диагностики бесплодия Советский патент 1984 года по МПК A61B10/00 

00

00 Изобретение относится к медицине и может быть использовано в клинической практике при диагностике и лечении инфекционного бесплодия в семье. Известен способ диагностики бесплодия у мужчин путем микроскопичес кого исследования эякулята. Способ лишь констатирует факт па тоспермии, но не устанавливает причину бесплодия. Наиболее близким является способ диагностики экскреторного бесплодия в супружеской паре (проба Шуварского), который основан на определеНИИ наличия и подвижности сперматозоидов в содержимом заднего свода влагалища и канала шейки матки, взя том через 2-3 ч после половой близости в период овуляции у женщины Однако недостатком пробы является то, что она не учитывает и не позволяет распознать инфекционное бесплодие, отдифференцировать его от других видов бесплодия. Цель изобретения - повышение точ ности диагностики инфекционного бесплодия. Указанная цель достигается тем, что согласно способу, включающему определение подвижности сперматозои дов в содержимом заднего свода влагалища и канала шейки матки женщины, дополнительно определяют цитото сическое действие секрета заднего свода влагалища и шейки матки женщины на сперматозоиды после двухчасового культивирования их в условиях термостата и комнатной температуры. Способ осуществляют следующим об разом. Сперму у обследуемых мужчин полу чают путем массажа или маструбации после полового воздержания в течение 4-5 дней, в период овуляции у жены (определяют путем измерения базельной температуры в течение трех месяцев), предварительно обрабатывают наружное отверстие мочеис, пускательного канала дезраствором (например раствор сулемы, хлорамина оставляют ее в стерильных условиях при комнатной температуре на 2040 мин, в течение которых сперма полностью разжимается. Затем сперму тщательно перемешивают, разливают в ряд стерильных пробирок из расчет 5-8x10 клеток (0,01 мл) на одну пробирку. В качестве контроля используют культуру сперматозоидов фертильного мужчины, которую готовят к исследованию аналогично культуре мужчины, обследуемого в бесплодном браке. В пробирке со сперматозоидами обследуемого и фертильного мужчины вносят по 0,01 мл содержимого заднего свода влагалища и шеечного секрета (по два параллельных ряда). Пробирки с содержимым оставляют на 30 мин для контакта. До истечении срока контакта в каждую пробирку вносят по 1,0 мл стандартной питательной среды, например среда Игла или 199, содержащей 1% фруктозы, и культивируют в течение 2 ч в условиях термостата, а затем при комнатной температуре 20-25 С в темной емкости в течение -24-48 ч. Просмотр пробирок производят через 6, 12, 24, 48 ч с обязательным приготовлением мазков и окраской по Граму и 5%-ным эозином, при этом учитывают наличие цитотоксического эффекта по увеличению количества патологически измененных и мертвых сперматозоидов, а также наличие спермагглютинации. При просмотре проб производят высев культур жидкости подопытных и контрольных проб на дифференциальнодиагностические среды для вьщеления чистой культуры микроорганизмов, их идентифицирования и определения лекарственной чувствительности,При наличии у женщины патогенных для сперматозоидов микроорганизмов, Л-форм микроорганизмов, микоплазм, хламидий, вирусов или грибов происходит помутнение питательной среды с культурой сперматозоидов, и при микроскопии мазков видна степень поражения сперматозоидов относительно контроля. Высев культруральной жидкости из пробирок на селективные среды позволяет вьщелить микробный возбудитель, идентифицировать культуру до вида, определить лекарственную чувствительность и назначить этиотропную терапию бесплодия. Пример. Супружеская пара В. состояли в бесплодном браке в течение 5 лет. При объективном осмотре и по данным анамнеза отклонений развития и состояния органов половой системы эндокринного характера не установлено. Муж и жена ранее лечились по поводу воспалительных проце сов в половых органах, которые субъективно себя ничем не проявляли При объективном исследовании мужа отмечены некоторые отклонения со стороны предстательной железы: очаговые уплотнения, чувствительные при пальпации. У жены избыточная секреция влагалищной слизи.Путем трехмесячного измерения базальной температуры у жены установлен день овуляции - 14 день от начала менстр ального цикла (при 28-дневном цикле За 5 дней до овуляции у жены муж воздерживался от половой близости. После обработки кистей рук и полового члена 2%-ным раствором хлорами на муж получил эякулят в стерильную пробирку в стерильных условиях.. Параллельно у жены брали стерильной пипеткой емкостью 1,0 мп-содержимое заднего свода влагалища в стерильную пробирку, аналогично получали содержимое шеечного канала. Сперму мужа и фертильного донора оставляли до полного разжижения при комнатной температуре, периодически ее перемешивая. Разжижение у обследуемого наступило через 35 мин, у донора - через 20 мин. После этого эякулят стерильн.о разливали в два ряда опытных и контрольных проб по 0,01 мл (в каждом ряду по 4-5 пр бирок) . Затем добавляли в каждый из рядов по 0,01 МП содержимого заднего свода влагалища и шеечного канала (последний в случае малого количества разбавляют раствором Рин гера) и оставляют на 30 мин для кон такта. Через 30 мин в каждую пробир ку добавляли по 0,1 мл стандартной питательной среды Игла, содержащей 1% фруктозы, и инкубировали в термостате 2 ч. Через 2 ч пробирки перенести из термостата в емкость, не пропускающую освещение, и оставляли при 20-25 С. Просмотр пробирок начали через 6 ч. Предварительно перед культивированием определяли исходные показатели спермограммы у обследуемого и у донора. В первом случае концентрация сперматозоидов бьша равной 5,6x10 в 1 млгживых 50 подвижных 45, мертвых 5, патологически измененных 40%, спермагглютинация (+++); во втором случае концентрация сперматозоидов 7,4х 10 в 1 мл: живых 76, подвижных 72, мертвых 24, патологически измененных 16%, спермагглютинация г. После 6 ч инкубации отмечено слабое помутнение в опытных пробирках, в контрольных - без изменений. При просмотре мазков в опытных пробирках более выраженные изменения спермограммы в пробе с влагалищным содержимым: живых 12%, подвижных нет, мертвых 88%, патологически измененных 92%, спермагглютинация (++++), менее выраженные в пробе с содержимым шеечного-канала: живых 24, подвижных 3, патологически измененных 76%, спермагглютинация (++++), в контрольной пробе живых 40, подвижньк 36, мертвых 60, патологически измененньсх 44%. Произвели вьюев культур жидкости подопытных и контрольных проб на дифференциально-диагностические среды для вьщеления чистой культуры микроорганизмов, их идентифицирования и определения лекарственной чувствительноо ги и продолжили инкубацию. Из опытных пробирок вьщелили микробную ассоциацию: альфа-гемолитический стрептококк и эпидермальный стафилококк в концентрации соответственно 3 X 10 микробных тел в 1 мл и 1 X 10 микробных тел в культуре сперматозоидов с содержимым заднего свода влагалища и 1 х 10 микробных тел как стрептококка, так и стафилококка. Из контрольных пробирок вьщелили альфа-гемолитический стрептококк в концентрации 2 х 10 микробных тел в 1 мл в пробирке с секретом заднего свода влагалища и 1 х 10 микробных тел в пробирке с секретом ще.ечного канала. При определении лекарственной чувствительности стрептококк оказался высоко чувствительным к бенемицину, а стафилококк - к фузидину. При просмотре проб через 12 ч как в опыте, так и в контроле, все пробирки были мутными, а при изучении мазков сперматозоиды мертвыми (цитопатогенньм эффект). Следовательно, бесплодие в супружеской паре обусловлено инфекцией как со стороны жены - альфа-гемолитический стрептококк, так и со стороны мужа - эпидермальный стафилококк (в контрольной пробе выделен только стрептококк, следовательно, этот микроорганизм имеется

только в секретах поповых органов жены обследуемой пары).

Мужу назначено соответствуищее лечение с учетом чувствительности микрофлоры к фузидину, а жене - к бенемицину.

В тех случаях, когда данные опыной и контрольной проб совпадают, рекомендуется дополнительно производить высев из культуры сперматозоидов мужа без примеси секретов жены, что позволяет дифференцировать этиологический фактор бесплодия в супружеской паре.

Таким образом, предлагаемый способ позволяет достоверно диагностировать бесплодие в семье, обусловленное инфекционным агентом, изолировать последний в чистом виде, определить лекарственную его чувствительность и назначить этиотропную терапию, наиболее адекватную для мужа и жены.

СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ БЕСПЛОДИЯ, включающий определение подвижности сперматозоидов в содержимом заднего свода влагалища и канала , шейки матки женщины, отличающийся тем, что, с целью повьщ1ения точности диагностики инфекционного бесплодия, дополнительно определяют цитотоксическое действие секрета заднего свода влагалища и шейки матки на сперматозоиды после двухчасового культивирования их в условиях термостата и комнатной температуры.