Штамм @ @ 907/2062,обладающий активностью в отношении @ -вибрионов 05 серовара,не относящихся к 01 группе Советский патент 1985 года по МПК C12N7/00 

Изобретение относится к медицинской микробиологии и касается штамма бактериофага, обладакяцего активностью в отношении Nag-вибрионов 05 серовара.

Известен штамм Phagum cholericum 78 УН серотипа, активный в отношении Nag-вибрионов 044 серовара.

Известен Phagum Nag 91 для идентификации энтеропатогенных Nag -вибрионов 0-22 серотипа.

Однако известный штамм не позволяет идентифицировать NaR вибpиoны 05 серовара.

Целью изобретения является создание штамма Phagtm Nag, обладающего активностью в отношении Nag-вибрионов 05 серовара, не относящихся к 01 группе.

Эта цель достигается созданием штамма Phagum Nag 907/2062.

Штамм Phagura Nag 907/2062 получен в результате селекции мутантов фага 907 на га.зоне штамма 2062 Nag-вибриона 05 серовара.

Штамм хранится в коллекции бактериофагов Тбилисского. НИИ вакцин и сывороток под номером Ф-114 и характеризуется следующими признаками .

Величина негативных колоний на газоне НАГ-вибриона 2062, .выращенного на агаре Мартена, равна 1,47 + + 0,07 мм в диаметре. Край колоний неровный, дно прозрачное, по периферии - зона неполног лизиса.

Фаг относится к У морфологической группе. Его корпускулы имеют головку гексогональной формы величиной 625 А и сло.жный отросток с сокра1цающимся чехлом размером 110 х 104 А

Бульон Мартена. При посевной дозе 1-10 микробных клеток V.Nag 2062 на 1 мл среды и множественности инфекции фагом 7 : 1 в течение 2ч 15 мин инкубирования при 37 с накапливается до п-10° его частиц на 1 мл среды.

Одиночный цикл развития фага характеризуется минимальным латентным периодом, равным 40-45 мин, и средним урожаем 200 фаговых частиц на одну инфицированную клетку.

Серологические свойства.

Относится к 1 серотипу умеренных Nag-фагов 05 серовара. С известными 10 серотипами холерных фагов и

Nag-фагами 91, 93 серологического родства не имеет. Спектр действия. В концентрации ПЮ® лизирует

86% штаммов Nag-вибрионов 05 ,серовара и не лизирует вибрионы ;р;ругих 05 сероваров.

Микроорганизмы близкородственных видов, родов и семейств: Albensis,

ProteuSj Aeromonas, Plesiomonas, Comamonas, Ps endionlonas, Parachemolyticus, Enterobacteriaceae резистентны к действию фага Ф-114 : (907/2062)(см.таблицу).

Штамм фага Ф-114 (907/2062) активно репродуцируется на клетках

Nag-вибриона 2062 в бульоне Мартена, рН 7,6, При посевной дозе .1 -10 микробных клеток на 1 мл срёды и множественности инфекции 7 : 1 в течение 2 ч 15 мин инкубирования при фаг накапливается до П 10 частиц на 1 мл среды.

Для получения диагностического

препарата фага Ф-114 (907/2062) используют агар и бульон Мартена, -рН 7,6- Культуру штамма-продуцента 2062 18-ти часового роста при 37С на агаре Мартена засевают в бульон

Мартена. Через 3 ч при бульонную культуру добавляют к питательной среде (бульон Мартена ) из расчета 1:10 микробньк клеток на 1 мл среды, туда же одновременно вносят

фаг Ф-114 (907/2062) из расчета (Множественности инфекции 7:1. Через 2ч 15 мин культивирования фаголизат фильтруют через бактериальные .фильтры марки Ф-3,Ф-5. Фильтрат разливают по ампулам и контролируют на специфическую и общую стерильность и активность.

Готовый препарат используют для диагностики следующим методом.

Готовят газон исследуемого штамма в слое мягкого агара по Грациа, т.е. добавляют 0,2 мл бульонной культуры исследуемого штамма к 5 мл 0,7%

расплавленного агара(45С), перемешивают и выливают на агаровую пластинку в чашке Петря. После застывания второго слоя на его поверхность капают фаг Ф-114 (907/2062).

Чашку помещают в термостат при . Учет результатов проводят через 4-8 ч. При обнаружении на месте i нанесения фага литического пятна

3110929494

исследуемый штамм относят к вибрио- Применение штамма фага ндм 05 серовара.( 907/2062 в лабораторной практике

Широкое внедрение диагностичеС - исключит:, необходимость 1юстановки кого метода, основанного на исполь серологических реакций которые в насзовании штамма фага Ф-114 (907/2062| s тоящее время являются единственным позволит улучшить диагностику вибрио способом идентификации Nag вибpиoнoв . нов.О11ределеинь1х сероваров.

Диапазон спещ1ф {ческо1;р действия фаГа ф 1141907/2062)

Штамм Phagum Nag 9р7/20б2; Ф-114 ( коллекция фагов Тбилисского НИИ вакцин и сывороток), обладающий активностью в отношении Nag -вибрионов 05 серовара, не относящихся к 01 группе. i

Вибрион Nag с 02 по 04 .

23 серовара