Способ определения количества микроорганизмов в исследуемой пробе Советский патент 1984 года по МПК C12Q1/04 

Изобретение относится к технике определения количества микроорганизмов и может найти применение для оперативной оценки санитарного состояния продуктов сельскохозяйственного производства и пищевой промышленности. Известен способ определения количества микроорганизмов в исследуемой пробе путем посева анализируемых проб в питательную среду, последующего длительного термостатирования (1-3 сут ) посевов и подсчета числа выросших колоний микроорганизмов Cl Недостатком известного способа являются значительные затраты времени на получение данных о количествен ном содержании микроорганизмов в исследуемых пробах. Наиболее близким к предлагаемому является способ определения количества микроорганизмов в исследуемой пробе, согласно которому производят посев исследуемой пройл в питательную среду, культивирование микроорга низмов в течение 24 ч и одновременное регистрирование окислительновосстановительного потенциала питательной среды для получения информативного параметра, косвенно отражающего количество мик1 оорганизмов в исследуемой пробе 2} . Недостатком данного способа является длительность проведения анализа обусловленная тем, что для получения характеристических значений величины окислительно-восстановительного потенциала требуется длительное культи RCONH CWs О пеници/глин При этом погруженный в смыв анализируемой пробы электродный датчик для измерения окислительно-восстановительного потенциала (ОВП) непосредственно в процессе гидропизующего воздействия фермента на исследуемую пробу регистрирует Электрический сигнал, функционально отражающий количественное содержание субстрата, т.е. количество микроорганизмов в исследуемой пробе. Параллельный контроль количества микроорганизмов в исследуемых пробах производится методом посева проб в питательную среду с целью культивирования микроорганизмов и последующе-, го подсчета выросших копаний. 65 Кол ган про кол ют neHvuttM-uHOfta. вирование микроорганизмов в питательной среде. Цель изобретения - повышение скорости определения количества микроорганизмов в исследуемой пробе. Цель достигается тем, что согласно способу определения количества микроорганизмов в исследуемой пробе путем измерения окислительно-восстановительного потенциала пробы на исследуемую пробу дополнительно воздействуют гидролизующим ферментом. Это позволяет за счет присущих ферментативным реакциям высокой селективности и быстротечности сократить затраты времени на получение информативного параметра, характеризующего количество микроорганизмов в исследуемой пробе. П р и м е р. Производится определения количества микроорганизмов (плесневых грибов -Penicilliura islandicum) в фуражном зерне. На смыв с поверхности анализируемых проб воздействуют гидролизующим ферментом - пециллиназой и одновременно регистрируют величину окислительно-восстановительного потенциала путем погружения в смыв анализируемых проб электродного датчика, электрически связанного со входом регистрирующего прибора - рН-милливольтметра. Гидролизующий фермент (пенициллиназа ) гидролизует находящийся в смыве анализируемой пробы характеристический продукт, продуцируемый грибной микрофлорой, по следующей схеме: «сош Величина ОВП, ичество 1.«крооризмов в 1 г мВ бы, тыс. Затраты времени на определение ичества микроорганизмов составля24 г, а величина ОВП - 30 мин.

31100311

Таким образом, предложенный спо- пробах и одновременно, ввиду присусоб позволяет значительно сократить1Чей ферментам субстратной специфичзатраты времени на определение копи-ности, повысить информативность аначества микроорганизмов в исследуемыхлиза.

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КОЛИЧЕСТВА МИКРООРГАНИЗМОВ В ИССЛЕДУЕМОЙ ПРОБЕ путем измерения окислительновосстановительного потенциала пробы, отличающийся тем, что, с целью повышения скорости определе.ния, дополнительно воздействуют на исследуемую пробу гидролиэующим ферментом.