Питательная среда для определения синтеза факторов колонизации у энтеробактерий Советский патент 1984 года по МПК C12Q1/04 

Изобретение относится к медицинской микробиологии, в частности при изучении острых кишечных заболеваний у лнадей. Известна питательная среда для определения синтеза факторов колонизации у бактерий кишечной группы, со держащая мясопептонный агар 1J . Известна также питательная среда для определения синтеза факторов колонизации у. энтеробактерий, содержащая питательную основу - казаминовые кислоты, дрожжевой экстракт, серно-кислый магний, хлористый марга нец, агар-агар и дистиллированную во ДУ 2. Однако известные среды не обеспе1чивают высокой частоты выявления - син теза фактора колонизации (5-6 и 1011% соответственно). Кроме того, на второй среде не всегда имеет место рост ауксотрофов. Целью изобретения является повьгае ние частоты выявления синтеза фактора колонизации. Поставленная цель достигается тем что питательная среда для определения синтеза факторов колонизации у знтеробактерий, содержащая питательную основу, дрожжевой экстракт, сёрно-кислый магний, хлористый марганец, агар-агар и дистиллированную воду, дополнительно содержит глицерин, в качестве питательной основы она содержит ферментативньй гидролизат казеина и кислотный гидролизат эритроцитов ;При следующем количестве ном соотношении компонентов, мас.%: Ферментативный ,25 гидролизат казеина Кислотый гидролизат 0,9-1,1 эритроцитов 0,1-0,17 Дрожжевой экстракт 0,04-0,05 Серно-кисльй магний 0,0003-0,00 Хлористый марганец 0,15-0,25 Глицерин 1,5-2,0 Агар-агар Дис тиллированн ая Остальное Питательную среду готовят следующим образом. В дистиллированной воде растворяют эритроцитарный кислотный гидролиэат, экстракт дрожжей, ферментативный гидролизат казеина, агар-агар (при подогревании). Смесь фильтруют. Устанавливают рН 7,2-7,4 и автоклавируют. После автоклавирования готовая смесь может приметшться непосредственно или же храниться до 1 мес. Отдельно стерилизуют химически чистый глицерин, серно-кнслый магний и хлористый марганец. При употреблении основы ее растапливают, добавляют химически чистый глицерин, серно-кислый магний, хлористый марганец и готовую среду разливают в стерильные чашки Петри. Пример 1. Для определения способности синтеза антигенов адгезии было приготовлено три состава среды. Составы среды с соответствующим содержанием компонентов приведены в табл. 1. При помощи указанных трех сред в реакции гемагглютинации с эритроцитами человека И -и группы крови, крупного рогатого скота, цыплят и морской свинки при добавлении 0,5-1% раствора® -маннозы быпа определена способность к синтезу факторов колонизации у 166 культур Escherichia coll. Результаты испытания приведены в табл. (процент указывает на число штаммов, давших положительную маннозорезистентную реакцию гемагглютинации) . 1 Пример 2. 166 культур E.coli были проверены в реакции гемагглютинации с вьш1еуказанными эритроцитами с добавлением D-маннозы при росте на мясопептонном агаре (МПА), CFA-агаре Эванса и среде СФК (по изобретению) . Результаты сравнительного определения синтеза факторов колонизации в трех средах представлены в табл. 3(процент указьшает на число штаммов, давших положительную маннозорезистентную реакцию гемагглютинации), Как видно из приведенных данных в таблице 3 применение среды СФК втрое превьш1ает частоту выявления факторов адгезивности по сравнению с мясопептонным агаром и вдвое - по сравнению с результатами, полученными при испытании CFA-arapa. Использование изобретения позволит намного полнее и эффективнее выявлять синтез антигенов адгезии у кишечных бактерий, ввиду лучшего синтеза антигенов колонизации и расширения диапазона ист 1туемых культур.

Компоненты

Эритроцитарный кислотый

гидролизат

Экстракт дрожжей

Ферментативный гидролизат казеина Глицерин MnClj Агар-агар. Вода дистиллированная Эритроциты . Человека Крупного рогатого скота Цыплят Морской свинки Эритроциты Человека Крупного рогатого ск Цьтлят Морской свинки

Содержание в составе, %

zziiini

1J

0,17

0,25 0,150,20,25 0,040,040,05 0,0003 0,0004 0,0005 1,51,52,0 Остальное Остальное Остальное Таблица 2 Содержание в составе, % 1 j 1LlL. 22,824,723,6 23,524,1.23,8 23,924,723,6 17,718,1.17,9 Табли.ца 3 Содержание в среде, % МПА I СРА-агар СФК 6,02 13,25 24,7 9,64 14,46 24,1 4,81 11,44 24,7 7,23 tO,24 18,1

ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СИНТЕЗА ФАКТОРОВ КОЛОНИЗАЦИЙ У ЭНТЕРОБАКТЕРИЙ, содержащая питетельную основу, дрожжевой экстракт, серно-кислый магний, хлористый марганец, arap-arap и дистиллированную воду, отличающаяся тем, что, с целью повьшения частоты-выявления синтеза фактора колонизации, она дополнительно содержит глицерин, в качестве питательной основы она содержит ферментативный,гидролизат казеина и кислотный гидролизат эритроцитов при следующем количественном соотношении компонентов, мас.%: Фрементативный гидролизат казеина 0,15-0,25 Кислотный гидролизат эритроцитов 0,9-1,1 § Дрожжевой экстракт 0,1-0,17 Серно-кислый магний 0,04-0,05 Хлористый марганец 0,0003-0,0005 Глицерин0,15-0,25 Arap-arap1,5-2,0 Дистиллированная водаОстальное СЛ ел