Питательная среда для выращивания возбудителя туляремин Советский патент 1984 года по МПК C12Q1/04 C12N1/20 

Изобретение относится к медицинской микробиологии и касается производства питательных сред для культивирования возбудителя туляремии. . Известна питательная среда для выращивания возбудителя туляремии, -содержащая мясной настой Хоттингера Г(аС1, желток в физиологическом растворе 13 .

Известна также питательная среда для выращивания возбудителя туляремии, содержащая питательную основу, цистеин, глюкозу, стимулятор роста, соль соляной кислоты, агар-агар и дистиллированную воду С2 .

Однако известные среды не обеспечивают высокого выхода биомассы.

Цель изобретения - повышение выхода б иома с сы.

Поставленная цель достигается тем, что питательная среда для выращивания возбудителя туляремии, содержащая питательную основу, цистеин, глюкозу, стимулятор роста, соль соляной кислоты, агар-агар, и дистиллированную воду, дополнительно содержит серно-кислый магний, сернокислое железо, лимонно-кислый натрий и фосфорно-кислый калий двузамещенный, в качестве питательной основы - сердечно-мозговой настой, панкреатический гидролизат казеина, кислотный гидролизат казеина, в каtfecTBe стимулятора роста - дрожжевой экстракт, а в качестве соли соляной кислоты - хлористый калий при следующем Количественном соотношении компонентов, г/л: Сердечно-мозговой настой8;0-12,0

Панкреатический гидролизат казеина 8,0-12,0 Кислотный гидролизат казеина , 8,0-12,0 . Дрожжевой экстракт 8,0-12,0 Серно-кислый

магний0,045-0,055

Серно-кислое железо 0,08-0,12 Цистеин0,4-0,8

Лимонно-кислый

натрий1,0-1,4

Хлористый калий 1,8-2,1 Фосфорно-кислый калий двузамещенный 3,8-4,1 Глюкоза 14,0-16,0 Агар-агар12,0-15,0

Дистиллированная водаДо 1 Л

Пример. Питательную среду готовят следующим образом.

Для приготовления среды берут, г корсаковский агар-агар 12; сердечномозговой настой 8; дролсжевой экстракт 8; панкреатический гидролизат казеина 8; кислотный гидролизат казеина 8 и растворяют в 900 мл Дистиллированной воды. Стерилиз йт .

-средув автоклаве при 110°С 20 мин. В остуженную до 45-50 с среду добавляют стерильнорастворимые в 100 мл дистиллированной воды соли, г: 0,045; FeSOx 0,08; цистеин 0,4; NajCbHsO-, 1,0; KCg 1,8; К2НРО4 3,8 и глюкозу 14,0. Предварительно раст0 вор солей стерилизуют на водяной бане при 100°С 1,5 мин. Устанавливают реакцию 7,1-7,25.

Пример2. В 300 мл дистилли рованной воды растворяют агар-агар, 5 г: 14,0; сердечно-мозговой настой ,10,0; дрожжевой экстракт 10,0, панкреатический гидролизат казеина 10,0; кислотный гидролизат казеина 10,0-. Добавляют 100 мл приготовленных ана0 логично примеру 1- солей, г :

N§-504 0,05; FeSO4 0,1; цистеин О, б; (, 1,2; КСе.2,0; К2НРО4.4,0, глюкоза 15,0. Устанавливают реак-цию ,25 . .

5 ПримерЗ. Среду готовят аналогично примеру 1, в следующих соотношениях, г: агар-агар 15 ,0; сердечно-мозговой настой 12,0; дрожжевой экстракт 12,0; панкреатический

г| гидролизат казеина 12,0 и кислотный гидролизат казеина 12,0. Соли берут в следующих количественных соотношениях, г:

0,055; FeSO4 0,12; цистеин 0,8; Na 1,4; КСЕ 2,1;

4,1 и глюкоза 16,0.

П р и м е р 4. При посеве одного и того же материала на предлагаемую и известную питательные среды выход биомассы с 1 мл предлагаемой среды

0 в 1,5-8 раз превышает выход биомассы с известной -(табл. 1).

При посеве туляремийного микроба на предлагаемую среду и известную среду Анциферова Cll выход биомассы

5 с 1 мл новой среды превосходит выход с известной примерно в 8-10 раз (табл. 2).

После посева туляремийных клеток образуются колонии диаметром 1,50 2,0 мм, что свидетельствует о высокой скорости деления микробных клеток.

Использование предлагаемой питательной среды повышает выход биомассы туляремийного микроба. Кроме того, прозрачность среды позволяет проводить поколонийный анализ популяции. Отсутствие в составе среды крови дает возможность использовать ее для исследования биохимических свойств возбудителя туляремии.

Таблица1

ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ .ШРАЩИВАНИЯ ВОЗБУДИТЕЛЯ ТУЛЯРЕМИИ, содержащая питательную основу, цистеин, глюкозу, стимулятор роста, сЪль соляной кислоты, агар-агар и дистиллированную воду, отличающаяся тем, что, с целью повышения выхода биомассы, она дополнительно содержит серно-кислый магний, серно-кислое железо, лимонно-кислый натрий и фосфорно-кислый калий двузамещенный, в качестве питательной основы она содержит сердечно-мозговой настой, панкреатический гидролизат казеина, кислотнь1й гидролизат казеина, в качестве стимулятора роста - дрожжевой экстракт, а в качестве соли соляной кислоты - хлористый калий при следующем количественном соотношении компонентов, г/л: Сердечно-мозговой 8,0-12,0 настой Панкреатический гидролизат казеина 8,0-12,0 Кислотный гидрализат 8,0-12,0 казеина О 8,0-12,0 Дрожжевой экстракт 9 0,045-0,055 Серно-кислый магний (Л 0,08-0,12 Серно-кислое железо 0,4-0,8 Цистеин X . Лимонно-кислый нат1,0-1,4 рий 1,8-2,1 Хлористый калий Фосфорно-кислый ка3,8-4,1 лий двузамещенный 14,0-16,0 Глюкоза 12,0-15,0 Агар-агар 00 Дистиллированная водаДо 1 л го 00 сг

Выход биомассы туляремийного микройа с 1 мл среды, млрд

7,5 8,7 7,5

Таблица2

75,0 74,0 63,9