Способ диагностики гипопластической /апластической/ анемии Советский патент 1984 года по МПК A61K39/00 

Изобретение относится к медицине, в частности к иммунологической диагностике заболевания системы кро ви, а именно гематологического забо левания гипопластической (апластиче кой) анемии. Известен способ диагностики гипо пластической (апластической) анегАии путем добавления сыворотки больных в культуру клеток костно о мозга здорового человека, после чего подсчитывают количество колонеобразующих клеток, при снижении которог диагностируют гипопластическую анемию г п. Одчако данный способ длителен (8-15 дней) и сложен в исполнении. Целью изобретения является повышение точности, ускорение и упрощение диагностики. Указанная цель достигается тем, что согласно способу диагностики гипопластической (апластической) анемии путем добавления сыворотки больного в культуру клеток человека, в качестве культуры клеток испо зуют эритроциты лиц, страдающих эритремией в стадии развернутых кли нических- проявлений одинаковой группы крови АВО, и резус с исследу мым больным. П р яме р, Сыворотку болЪнгого -в объеме трех капель соединяют в маленьких пробирках с одной каплей трижды отмытых эритроцитов от двух больных эритремией с группой крови 0(l)Rh+ и от двух больных с группой крови 0(1)Rh- . Содержимое пробирок перемешивают и инкубируют в те-чение 1 ч при 37°С. Затем эритроциты от1чы вают три раза изотаническим раствор NaCl путем центрофугирования при 1000 об/мин по 10 млн. Из осадка готовят 10%-ную взвесь эритроцитов в физиологическом растворе. Одну каплнз 10%-ной взвеси каждого образца эритроцитов переносят на белую фарфоровую пластину, добавляют к не одну каплю антиглобулиновой сыворотки и перемешивают. При слабом покачива нии Б- течение 10 мин производят уче результа гов. В сыворотках больных гипопластической анемией наблюдаетс агглютинация в каплях с эритроцитами больных эритремией. Агглютинация эритроцитов в преобладающем большин стве случаев появляется через, 3-5 м и бывает достаточно выраженной. Сыв ротки больных гипопластической анемией не должны реагировать с эритроци тами здоровых лиц. Правильная трактовка результатов предлагаемого способа предусматривает обязательное выполнение контрольных исследований. Первое контрольное исследование направлено на исключение сывороток, содержащих изоиммунные антитела, которые могли возникнуть в результате гемотрансфузионной терапии. Это достигается путем испытания сывороток больных гипопластической (апластической) анемией с эритроцитами 0(1) и 0(1)Rh- по два образца каждой специфичности. Это контрольное исследование до:тжно быть отрицательным. Другое контрольное исследование направлено на исключение из числа больных эритремией лиц с положительной прямой пробой Кумбса. Для тест-панели (клетокмишеней) используются эритроциты только тех больных эритремией, у которых прямая проба Кумбаса является отрицательной. В качестве мишеней выбраны эритро циты группы 0(1), поскольку они не содержат групповых антигенов и поэтому являются совместимыми с сывороткой любой группы крови. Помимо эритроцитов группы крови 0(l) для исследований могут быть использованы эритроциты больных эритремией одинаковой или совместимой группы крови с больным гипопластической анемией. Так, например, сыворотку больного гипопластической анемией A(ll) мож- ° но исследовать с эритроцитами тестсистемы 0(1) и А(11) групп крови; сыворотку B(III)-с эритроцитами 0(1)и В( III) ;сыворотку АВ( IV) - с эритроцитами 0(1), А(11), B(III) и AB(IV). При нарушении классических законов групповой совместимости наступает реакцкя агглютинации, т.е. склеивание эритроцитов за счет наличия в сыворотке естественных гемагглютинирующих антител. Использование эритроцитов группы 0(1) позволяет исклю- . чить агглютинацию за счет группового несоответствия и выявлять антитела, встречающиеся у больны ; гипопластической анемией. Эритроциты больных эритремией содержат дифференцировочные антигены, характерные для определенной

СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ШПОПЛАСТИЧЕСКОЙ (АПЛАСТИЧЕСКОЙ) AHEbDffl путем добавления сыворотки больного в культуру клеток человека, отличающийся тем, что, с целью повышения точности, ускорения и упрощения способа, в качестве культуры клеток используют эритроциты лиц, страдающихi эритремией в стадии развернутых клинических проявлений одинаковой группы крови АВО, и резус с исследуемым больным.